CN101454326A - 用于治疗变性和炎性疾病的***并吡嗪化合物 - Google Patents

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CN101454326A CNA2007800191562A CN200780019156A CN101454326A CN 101454326 A CN101454326 A CN 101454326A CN A2007800191562 A CNA2007800191562 A CN A2007800191562A CN 200780019156 A CN200780019156 A CN 200780019156A CN 101454326 A CN101454326 A CN 101454326A
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W·施密特
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G·巴尔
K·L·赫斯特
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Abstract

本发明公开了新的[1.2.4]***并[1，5－a]吡嗪化合物，其具有以下代表的结构式(式I)。该化合物可以制备成药物组合物，并且可以用于预防和治疗哺乳动物(包括人)的多种病症，以非限制性实例的方式包括关节炎、炎症和其它病症。

Description

用于治疗变性和炎性疾病的***并吡嗪化合物
发明领域
本发明涉及一类能够结合丝氨酸/苏氨酸激酶活性位点的***并吡嗪化合物，该激酶的表达涉及引起胞外基质(ECM)降解、关节变性和涉及此类降解和/或炎症的疾病的途径。
涉及胞外基质降解的疾病包括但不限于银屑病关节炎、幼年关节炎、早期关节炎、反应性关节炎、骨关节炎、强直性脊柱炎、骨质疏松、肌肉骨骼疾病(例如肌腱炎和牙周疾病)、癌症转移、气道疾病(COPD、哮喘)、肾和肝纤维化、心血管疾病(例如动脉粥样硬化和心力衰竭)和神经疾病(例如神经炎和多发性硬化)。涉及原发性关节变性的疾病包括但不限于银屑病关节炎、幼年关节炎、早期关节炎、反应性关节炎、骨关节炎和强直性脊柱炎。
类风湿性关节炎(RA)是慢性关节变性疾病，其特征在于关节结构的炎症和破坏。当疾病未被检出时，由于关节功能的丧失和甚至过早死亡而引起实质上的残疾和疼痛。因此，RA治疗的目标不是减慢疾病，而是获得缓解，以便阻止关节破坏。除了疾病结果的严重性，RA的高患病率(全球约0.8％的成人受影响)意味着高的社会经济影响。(对于RA的综述，参考了Smolen和Steiner(2003)；Lee和Weinblatt(2001)；Choy和Panayi(2001)；O’Dell(2004)和Firestein(2003))。
尽管广泛接受的是RA是自身免疫疾病，但是关于引起疾病“起始阶段”的准确机制没有一致意见。已知的是在易感宿主中起始触发剂介导事件的级联，这引起多种细胞类型(B细胞、T细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞、树突细胞和其它细胞)活化。随之而来的是在关节和关节周围的组织中观察到多种细胞因子的产量增加(例如TNF-α、IL-6、IL-1、IL-15、IL-18和其它细胞因子)。当疾病发展时，细胞活化和细胞因子生成级联变成自身延续。在此早期阶段，关节结构的破坏已经非常明显。30％的患者在诊断时具有骨侵蚀的X线照片证据并且两年后该比例上升至60％。
RA患者关节的组织学分析清楚地证明了涉及RA相关降解过程的机制。该分析显示对RA相关关节降解有响应的主要效应器是关节翳，其中滑液成纤维细胞(通过产生多种蛋白水解酶)是软骨和骨侵蚀的主要驱动。关节典型地包含两块邻近的骨，其连接在由滑液和关节囊包围的软骨层上。在晚期RA患者中，关节滑膜大小增加以形成关节翳，这是由于滑液成纤维细胞的增殖和单核细胞(例如T细胞、B细胞、单核细胞、巨噬细胞和嗜中性粒细胞)的浸润引起的。关节翳介导邻近软骨的降解，引起关节腔的狭窄，并且具有侵入邻近的骨和软骨的潜力。由于骨和软骨组织分别主要由胶原I型或II型组成，关节翳的破坏和侵入特征是由溶胶原蛋白酶(主要是基质金属蛋白酶(MMPs))的分泌介导的。位于软骨下面和邻近的骨的侵蚀也是RA过程的一部分，并且主要由骨和关节翳界面的破骨细胞的存在引起。破骨细胞是多核细胞，其粘附骨组织，形成闭合的区室，在其中破骨细胞分泌降解骨组织的蛋白酶(组织蛋白酶K，MMP9)。关节中的破骨细胞群由破骨细胞形成而异常增加，而破骨细胞是由SF和T细胞活化的NFκB配体的受体活化剂(RANKL)的分泌诱导的前体细胞形成的。
多种胶原类型在定义胞外基质(ECM)的稳定性中具有重要作用。例如胶原I型和胶原II型分别是骨和软骨的主要成分。胶原蛋白通常组成多基因结构，其被称为胶原原纤维。天然的胶原原纤维对蛋白酶剪切具有很强的抵抗力。已报道仅少数类型的ECM降解蛋白具有降解天然胶原的能力：MMP和组织蛋白酶。在组织蛋白酶中，组织蛋白酶K(其主要在破骨细胞中具有活性)最具特征。在MMP中已知MMP1、MMP2、MMP8、MMP13和MMP14具有溶胶原特性。滑液成纤维细胞(SF)表达的MMP1增加和关节炎疾病的进程之间的相关性已经明确并且是关节侵蚀过程的前兆(Cunnane等人，2001)。因此，在RA的上下文中，MMP1代表高度相关的胶原降解蛋白。在体外，用RA病理学相关的细胞因子(例如TNF-α和IL1β)治疗培养的SF将增加这些细胞表达的MMP1(Andreakos等人，2003)。因此，监控SF表达的MMP1在RA领域是相关读数，因为其指示SF对侵蚀表型的活化，所述的侵蚀表型在体内对软骨降解具有响应。对于RA的治疗，抑制SF表达的MMP1代表有价值的治疗方法。
ECM-降解蛋白质的活性还可以是多种不同于RA的疾病(例如其它涉及关节降解的疾病)的原因或与之相关。这些疾病包括但不限于银屑病关节炎、幼年关节炎、早期关节炎、反应性关节炎、骨关节炎和强直性脊柱炎。可以用本发明确定的化合物治疗并且应用涉及本文描述的MMP表达的靶标的其它疾病是骨质疏松、肌肉骨骼疾病(例如肌腱炎和牙周疾病(Gapski等人，2004))、癌症转移(Coussens等人，2002)、气道疾病(COPD、哮喘)(Suzuki等人，2004)、肺、肾纤维化(Schanstra等人，2002)、与慢性丙型肝炎相关的肝纤维化(Reiff等人，2005)、心血管疾病(例如动脉粥样硬化和心力衰竭(Creemers等人，2001))和神经疾病(例如神经炎和多发性硬化(Rosenberg等人，2002))。患有此类疾病的患者可以从稳定ECM(通过保护其免受降解)中受益。
471个氨基酸的丝氨酸/苏氨酸激酶(鉴定为促***原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶5(MAPKAPK5或PRAK))在广泛的一系列组织中表达。该蛋白包含N-末端的催化域以及C-末端的核定位信号(NLS)和核输出信号(NES)。内源性MAPKAPK5主要存在于细胞质中，但是细胞的应激或细胞因子活化介导其易位至核内(New等人，2003)。该事件取决于MAPKAPK5的磷酸化。Thr182是MAPKAPK5的调节磷酸化位点。尽管p38α激酶能够在过表达环境下磷酸化MAPKAPK5，但是关于内源性MAPKAPK5的试验不支持这种假设(Shi等人，2003)。已经生产出MAPKAPK5敲除小鼠，其是可生存的并且是可繁殖的。这些小鼠的表型完全不同于MAPKAPK2(其是由p38α调节的MAPKAPK5相关激酶)缺陷小鼠的表型(Shi等人，2003)。这表明每种蛋白质的功能是不同的并且没有一种激酶能补偿其它激酶的活性。一并而言，MAPKAPK5和MAPKAPK2代表不同的没有多余作用的靶标。最近，MAPK6(也称为ERK3)被鉴定为MAPKAPK5的生理学相关底物，其定义了新的信号转导途径(Seternes等人，2004)。
发明背景
NSAIDS(非甾体抗炎药)用于减轻与RA有关的疼痛并且改善患者的生活质量。但是这些药物将对RA相关的关节破坏没有作用。
发现糖皮质激素降低RA的进程(如X线照片检测的)并且以低剂量应用于治疗部分RA患者(30至60％)。但是严重的副作用与长期应用糖皮质激素有关(皮肤变薄、骨质疏松、白内障、高血压、高脂血症)。
合成的DMARD(减轻疾病的抗风湿药物)(例如甲氨蝶呤、来氟米特、柳氮磺吡啶)主要处理RA的免疫炎性组分。作为主要缺点，这些药物仅具有有限的功效(关节破坏仅被DMARD减缓而没有阻止，因此疾病进程长期持续)。功效的缺乏由这样一个事实表明的：平均仅30％的患者用甲氨蝶呤治疗24个月后获得ACR40分。这意味着根据美国风湿学院(AmericanCollege of Rheumatology)，仅30％的患者获得50％的症状改善(O’Dell等人，1996)。另外，DMARD作用的准确机制通常是不清楚的。
生物学DMARD(英夫利昔单抗、依那西普、阿达木单抗、利妥昔单抗、CTLA4-Ig)是灭活细胞因子(例如TNF-α)或细胞(例如T细胞或B细胞)(其在RA病理生理学中具有重要作用)的治疗性蛋白质(Kremer等人，2003；Edwards等人，2004)。尽管TNF-α阻断剂(英夫利昔单抗、依那西普、阿达木单抗)和甲氨蝶呤组合治疗是目前可应用的最有效的RA治疗，引人注目的是12个月治疗后该治疗仅在50-60％患者的疾病症状中获得50％的改善(ACR40)(St Clair等人，2004)。对于抗TNF-α药物存在一些有害的事件警告，这清楚地显示出与此类药物相关的副作用。对于TNF-α阻断剂已经描述了感染风险的增加(结核病)、血液学事件和脱髓鞘障碍(还参见Gomez-Reino等人，2003)。除了严重的副作用，TNF-α阻断剂还具有生物学类治疗的一般缺点，它们是不愉快的施用途径(伴随输液部位反应的频繁注射)和高的生产耗费。处于最近开发期的新药靶向T细胞共刺激分子和B细胞。这些药物的功效预期与TNF-α阻断剂类似。多种靶向治疗的事实具有相似但有限的功效，这表明对于RA存在多个致病因素。在对与RA相关的致病事件的理解方面的不足也是有指出的。
由于有限的功效，目前对于RA的治疗是不能令人满意的(对于30％的患者没有足够的治疗)。这就需要另外的策略来获得缓解。缓解是需要的，因为残留的疾病具有进行性关节损伤的风险，并且因此具有进行性残疾的风险。抑制RA疾病的免疫炎性组分(其代表目前RA治疗中所用的药物的主要靶标)不会引起关节降解的阻断(疾病的主要标志)。
US 2005/0009832描述了作为蛋白激酶(包括MAPKAPK5)调节剂的取代的咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基-胺。WO02/056888描述了作为能够调节某些细胞因子表达的TNF调节剂的MAPKAPK5抑制剂。这些在先技术文献没有公开在下文描述的一类化合物的范围内的任何化合物。
发明概述
本发明基于以下发现：引起MMP1的表达的途径中的MAPKAPK5功能以及MAPKAPK5活性抑制剂(例如本发明化合物)用于治疗涉及MMP活性异常高表达的疾病。
本发明化合物通常可以描述为5位被芳基和杂芳基取代并且8位被芳基氨基或杂芳基氨基取代的[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基-胺。
更特别的是，本发明涉及在哺乳动物细胞中具有基质金属蛋白酶抑制特性的式(I)化合物或其可药用盐、水合物、溶剂化物或前药：
Figure A200780019156D00341
其中
A和B独立地是CR2R”、NR”、氧或硫；
AA是CR2或N；
D是C＝O、CR2R”或NR”；
当k是0时，E是NH或CR”R6，并且当k是1时，E是NH或CR”R6a；
F是硫、氧或NH；
T是氧或NR；
U、V、W和X独立地是CR”R7或NR”；
Y是CR”或N；
Z是氢、氨基、羟基、低级烷氧基、氨基甲酰基、羧基、SO2Rz、SO2NRRz、-NR(CO)(CH2)d-Rz、-NRRz、-(CO)-ORz、-(CO)-NR(CH2)d-Rz或
Figure A200780019156D00351
R独立地是氢或低级烷基；
R”是H或与相邻的原子形成双键；
R1是H；R2；或低级烷基、低级环烷基和低级烷基-低级环烷基，任选被一个或多个R2取代；
R3是H或与邻近的R”形成双键；
R2是H、F、Cl、CN、COOR4、OR4、C(O)N(R4R5)、S(O)2N(R4R5)、低级烷基、O-低级烷基、NH-低级烷基、S-低级烷基、COO-低级烷基、OC(O)-低级烷基、C(O)N(R4)-低级烷基、S(O)2N(R4)-低级烷基、S(O)N(R4)-低级烷基、S(O)2-低级烷基、S(O)-低级烷基、N(R4)S(O)2-低级烷基和N(R4)S(O)-低级烷基，其中每个低级烷基任选被一个或多个F和Cl取代。
R4和R5独立地是H；F、Cl；或低级烷基、低级环烷基或低级烷基-低级环烷基，任选被一个或多个F和Cl取代；
R6是氢、氨基、羟基、氨基甲酰基、羧基、SO2R、NRR’、-(CO)-OR或-(CO)-NRR’；
R6a是R6、Cl、F、低级烷氧基、氰基、三氟甲氧基；或与邻近的一起是-(CHR”)n-NR-(CHR”)p-，并且形成与其键合的环稠合的5或6元杂环；
R7独立地是氢、卤素、低级烷基或低级烷氧基；
Rz是氢、低级烷基、低级烷酰基、苯基、1-低级烷基吡咯烷-3-基、吡唑-4-基、吡唑-2-基或低级烷基、低级烷酰基、苯基、1-低级烷基吡咯烷-3-基、吡唑-4-基、吡唑-2-基或吡啶-3-基，被一个或多个下列基团取代：羟基、氨基、一或二低级烷基氨基、乙酰氨基、低级烷酰基、低级烷基、4-羟基-苯基、3-氨基甲基苯基、低级烷基磺酰基、4-二低级烷基氨基苯基、吡啶-3-基、1H-吲哚-3-基、吗啉-4-基；
R和Rz一起可以是-(CHR)q-T-(CHR)r-并且与它们键合的氮形成5或6元杂环；
Rz和R7一起可以是-(CHR”)n-NR-(CHR”)p-，并且形成与其键合的环稠合的5或6元杂环；
b和d独立地是0或1；条件是b或d中至少一个是1；
k是0或1；
m是0或1；
n和p独立地是0、1或2；
q和r是1或2；
x是0或1；
条件是R7或Rz中至少一个不是氢；
本发明的另一方面是式III化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药以及其立体异构体、同位素变体和互变异构体：
Figure A200780019156D00361
其中
R1是H或者取代的或未取代的烷基；并且每个R8和R9独立地选自取代的或未取代的环烷基、取代的或未取代的杂环烷基、取代的或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8选自取代的或未取代的环戊基、环己基、取代的或未取代的苯基、取代的或未取代的吡啶基、取代或未取代的嘧啶和取代的或未取代的吡嗪、取代的或未取代的吡咯、取代的或未取代的吡唑以及取代的或未取代的咪唑。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R1是H、Me、Et、i-Pr或CF3。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R1是H。
本发明的另一方面涉及式IVa、IVb、IVc或IVd化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药以及其立体异构体、同位素变体和互变异构体：
Figure A200780019156D00371
并且其中L是键、-CO-、-O(CH2)m1-、-CON(H)(CH2)m1-或-NHCO-；下标m1选自1-4；环P是取代的或未取代的杂环烷基；下标n选自1-4；每个R8a独立地选自氢、取代的或未取代的烷基、烷氧基、氰基、氨基甲酰基、CHO和卤素；并且R9独立地选自取代的或未取代的芳基和杂芳基。
在一个实施方案中，关于式III-IVd化合物，R9是取代的或未取代的芳基。在另一个实施方案中，R9是取代的或未取代的苯基。
在一个实施方案中，关于式III-IVd化合物，R9是取代的或未取代的杂芳基。在另一个实施方案中，R9是取代的或未取代的吡啶基。
在一个实施方案中，关于式III-IVd化合物，R9选自取代的或未取代的苯基、吲哚基、异吲哚基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、噁唑基和噻唑基。
在进一步的方面，本发明提供了药物组合物，该药物组合物包含本发明的***并吡嗪化合物和药用载体、赋形剂或稀释剂。在本发明的这个方面，药物组合物可以包含一种或多种本文描述的化合物。另外，药物组合物和本文公开的治疗方法中应用的本发明化合物作为制备的和应用的都是可药用的。
本发明的另一方面涉及本发明化合物在治疗方法、药物组合物以及制备此类组合物中的用途，其用于治疗的疾病包括炎症、胶原降解以及特别是具有异常基质金属蛋白酶(MMP1)和/或促***原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶5(MAPKAPK5)活性特征的疾病，其中类风湿性关节炎(RA)是此类疾病的特别实例。本发明还涉及制备本发明化合物的方法。
通过考虑随后详细的描述(其参考以下说明性附图进行)，其它目标和优势对于本领域技术人员将变得显而易见。
附图概述
图1.该图显示健康关节和RA患者关节之间显著的组织学差异。
图2.该图显示由涉及类风湿性关节炎病理学的细胞因子触发的滑液成纤维细胞中MMP1的表达增加。
图3.该图显示通过已知的抗炎化合物剂量依赖抑制“基于TNF-α触发剂”诱导的由SF表达的MMPI。
图4.该胶显示通过用靶向MAPKAPK5的Ad-siRNA病毒感染细胞引起的SF中MAPKAPK5在蛋白质水平表达的降低。
图5.该图显示通过靶向MAPKAPK5的Ad-siRNA病毒引起的‘复合体触发剂(complex trigger)’诱导的由SF表达的MMP1水平的降低。
发明详述
定义
当描述化合物、包含此类化合物的药物组合物以及应用此类化合物和组合物的方法时，除非另外说明，否则下列术语具有以下含义。还应当理解的是上下文中定义的任何基团可以被多种取代基取代，并且各自的定义旨在包括在其范围内的取代基团。以非限制性实例的方式，此类取代基可以包括例如卤素(例如氟、氯、溴)、-CN、CF3、-OH、-OCF3、C2-C6链烯基、C3-C6炔基、C1-C6烷氧基、芳基和二-C1-C6烷基氨基。应当进一步理解的是术语“基团”和“基”当在本文应用时可以考虑互换。
“烷氧基”指的是烷基-O-。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、异-丙氧基、正-丁氧基和庚氧基。优选的烷氧基是低级烷氧基。
“烷基”指的是具有1至约20个碳原子的直链或支链脂肪族烃。优选的烷基具有1至约12个碳原子。更优选的是低级烷基。支链指的是一个或多个低级烷基(例如甲基、乙基或丙基)连接在线性烷基链上。
“烷基氨基”指的是烷基-NH-。优选的烷基氨基是(C1-C6)-烷基氨基。烷基氨基的实例包括甲基氨基和乙基氨基。
“氨基低级烷酰基”指的是NH2-R-CO-，其中R是低级亚烷基。优选的基团包括氨基乙酰基(ethanoyl)和氨基乙酰基(acetyl)。
“氨基甲酰基低级烷基”指的是基团NH2CO-低级烷基-。优选基团包括氨基甲酰基乙基和氨基甲酰基甲基。
“羧基低级烷基酯”指的是羧基(-COO-基团)的低级烷基酯。
“本发明化合物”和等同的表达指的是包括上文描述的式(I、II或III)化合物，该表达包括前药、可药用盐和溶剂化物(例如水合物)，其中上下文是这样许可的。类似地，参考中间体，不管其自身是否被要求，指的是包括它们的盐和溶剂化物，其中上下文是这样许可的。
“表达”指的是内源性表达。
“卤代”或“卤素”指的是氟、氯、溴或碘。
“氢”在上下文中指的是在化合物位存在的-H并且还包括其同位素(氘)的取代基。
“低级烷酰基氨基”指的是具有有机功能团R-CO-的氨基，其中R代表低级烷基。
“低级烷基”指的是在可以是直链或支链的线性烷基链上的1至约6个碳原子。
“低级烷氧基”在可以是直链或支链的线性烷基链上的1至约6个碳原子，并且其通过氧原子键合。
“低级烷基磺酰胺”指的是式-SO2NR＊R＊的磺酰胺的低级烷基酰胺，其中R＊是氢或低级烷基，并且至少一个R＊是低级烷基。
“预防”指的是用于预防疾病而采取的方法。
“溶剂化物”指的是用于本发明的化合物与一种或多种溶剂分子的物理联合。该物理联合包括氢键。在某些情况下，溶剂化物能够分离，例如当一个或多个溶剂分子被掺入晶状固体的晶格中时。“溶剂化物”包括溶液相和可分离溶剂化物。本发明化合物可以例如以晶形制备并且可以是溶剂化的或水合的。适合的溶剂化物包括可药用溶剂化物，例如水合物，并且进一步包括化学计量的溶剂化物和非化学计量的溶剂化物。常规的溶剂包括水、乙醇、乙酸等，因此，代表性的溶剂化物包括水合物、乙醇化物和甲醇化物。
“取代的”指的是分子中一个原子或原子基团被另外的原子或基团代替。
“磺酰胺”指的是包含化学基团-SO2NH2的化合物组。
“治疗有效量”指的是能够引起个体的生物学或医学响应(其是医学医生或其它临床医师探索的)的药物或药剂的量。“治疗有效量”可以取决于化合物、疾病及其严重程度以及所治疗的个体的年龄、体重等而不同。特别的是，关于治疗具有胞外基质降解特征的疾病病症，术语“有效的基质金属蛋白酶抑制量”旨在指的是引起个体的疾病侵袭组织中MMP1产生的生物学有意义的降低以便胞外基质降解有意义地降低的本发明化合物的量。具有基质金属蛋白酶抑制特性的化合物或“基质金属蛋白酶抑制化合物”指的是给细胞提供有效量的能引起此类细胞中MMP1产生的生物学有意义的降低的本发明化合物。
“芳基”指的是单价芳族烃基团，其是从母芳族环系的单个碳原子上除去一个氢原子而衍生的。典型的芳基包括但不限于衍生自以下的基团：醋蒽烯、苊、醋菲烯(acephenanthrylene)、蒽、薁、苯、、蒄、荧蒽、芴、并六苯、己芬、己搭烯(hexalene)、不对称-引达省(as-indacene)、对称-引达省(s-indacene)、1，2-二氢化茚、茚、萘、并八苯(octacene)、辛芬(octaphene)、辛搭烯(octalene)、卵苯、戊-2，4-二烯、并五苯、戊搭烯(pentalene)、戊芬、苝、非那烯(phenalene)、菲、苉、七曜烯(pleiadene)、芘、皮蒽、玉红省、苯并[9，10]菲、联三萘(trinaphthalene)等。特别的是，芳基包含6至14个碳原子。
“取代的芳基”包括本文“取代的”定义中描述的那些基团，并且特别指的是可以任选被一个或多个取代基、例如1至5个取代基、特别是1至3个取代基取代的芳基，所述的取代基选自酰基、酰基氨基、酰基氧基、链烯基、取代的链烯基、烷氧基、取代的烷氧基、烷氧基羰基、烷基、取代的烷基、炔基、取代的炔基、氨基、取代的氨基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳基氧基、叠氮基、羧基、氰基、环烷基、取代的环烷基、卤素、羟基、硝基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、硫代芳基氧基、巯基、烷基-S-(O)-、芳基-S-(O)-、烷基-S-(O)2-和芳基-S-(O)2-。
“二环芳基”指的是通过将母体二环芳族环系的单个碳原子上的一个氢原子除去而衍生的单价芳族烃基团。典型的二环芳基包括但不限于衍生自以下的基团：1，2-二氢化茚、茚、萘、四氢化萘等。特别的是，芳基包含8至11个碳原子。
“二环杂芳基”指的是通过将母体二环杂芳族环系的单个原子上的一个氢原子除去而衍生的单价二环杂芳族基团。典型的二环杂芳基包括但不限于衍生自以下的基团：苯并呋喃、苯并咪唑、苯并吲唑、苯并二噁烷、色烯、色烷、噌啉、酞嗪、吲哚、二氢吲哚、吲嗪、异苯并呋喃、异色烯、异吲哚、异二氢吲哚、异喹啉、苯并噻唑、苯并噁唑、1，5-二氮杂萘、苯并噁二唑、蝶啶、嘌呤、苯并吡喃、苯并吡嗪、吡啶并嘧啶、喹唑啉、喹啉、喹嗪、喹喔啉、苯并吗吩烷、四氢异喹啉、四氢喹啉等。优选的是，二环杂芳基是9-11元之间的二环杂芳基，特别优选5-10元杂芳基。特别的二环杂芳基衍生自苯并噻吩、苯并呋喃、苯并噻唑、吲哚、喹啉、异喹啉、苯并咪唑、苯并噁唑和苯并二噁烷。
“氨基甲酰基”指的是基团-C(O)N(R42)2，其中每个R42基团独立地是本文定义的氢、烷基、环烷基或芳基，其可以任选如本文定义的被取代。在特别的实施方案中，术语“氨基甲酰基”指的是-C(O)-NH2。
“环烷基”指的是具有3至约10个碳原子并且具有单环或多个稠环(包括稠合的和桥连的环系)的环烃基，其可以任选被1至3个烷基取代。此类环烷基以实例的方式包括单环结构例如环丙基、环丁基、环戊基、环辛基、1-甲基环丙基、2-甲基环戊基、2-甲基环辛基等，并且多环结构例如金刚烷基等。
“取代的环烷基”包括本文“取代的”定义中描述的那些基团，并且特别指的是具有1个或多个取代基、例如1至5个取代基并且特别是1至3个取代基的环烷基，所述的取代基选自酰基、酰基氨基、酰基氧基、烷氧基、取代的烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基氨基、氨基、取代的氨基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳基氧基、叠氮基、羧基、氰基、环烷基、取代的环烷基、卤素、羟基、酮基、硝基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、硫代芳基氧基、硫代酮基、巯基、烷基-S-(O)-、芳基-S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。
“取代的”指的是其中一个或多个氢原子各自独立地被相同或不同的取代基取代的基团。典型的取代基包括但不限于-X、-R46、-O-、＝O、-OR46、-SR46、-S-、＝S、-NR46R47、＝NR46、-CX3、-CF3、-CN、-OCN、-SCN、-NO、-NO2、＝N2、-N3、-S(O)2O-、-S(O)2OH、-S(O)2R46、-OS(O2)O-、-OS(O)2R46、-P(O)(O-)2、-P(O)(OR46)(O-)、-OP(O)(OR46)(OR47)、-C(O)R46、-C(S)R46、-C(O)OR46、-C(O)NR46R47、-C(O)O-、-C(S)OR46、-NR48C(O)NR46R47、-NR48C(S)NR46R47、-NR49C(NR48)NR46R47和-C(NR48)NR46R47，其中每个X独立地是卤素；每个R46、R47、R48和R49独立地是氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的烷基、芳基烷基、取代的烷基、环烷基、取代的烷基、环杂烷基、取代的环杂烷基、杂烷基、取代的杂烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂芳基烷基、取代的杂芳基烷基、-NR50R51、-C(O)R50或-S(O)2R50或者任选R50和R51与它们都连接的原子一起形成环杂烷基或取代的环杂烷基环；并且R50和R51独立地是氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的烷基、芳基烷基、取代的烷基、环烷基、取代的烷基、环杂烷基、取代的环杂烷基、杂烷基、取代的杂烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂芳基烷基或取代的杂芳基烷基。
代表性的取代的芳基的实例包括下列：
Figure A200780019156D00421
和
Figure A200780019156D00422
在这些式中，R52和R53之一可以是氢并且R52和R53中至少一个各自独立地选自烷基、链烯基、炔基、环杂烷基、烷酰基、烷氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、烷基氨基、芳基氨基、杂芳基氨基、NR54COR55、NR54SOR55、NR54SO2R57、COO烷基、COO芳基、CONR54R55、CONR54OR55、NR54R55、SO2NR54R55、S-烷基、S-烷基、SO烷基、SO2烷基、S芳基、SO芳基、SO2芳基；或者可以将R52和R53连接形成5至8个原子的环(饱和的或不饱和的)，任选包含一个或多个选自N、O或S的杂原子。R54、R55和R56独立地是氢、烷基、链烯基、炔基、全氟烷基、环烷基、环杂烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的或杂烷基等。
当用于描述化合物上存在的化合物或基团时，“杂”指的是化合物或基团中的一个或多个碳原子被氮、氧或硫杂原子取代。杂可以用于任何上述的烃基，例如烷基例如杂烷基，环烷基例如环杂烷基，芳基例如杂芳基，环烯基、环杂烯基等，其具有1至5个并且特别是1至3个杂原子。
“杂芳基”指的是从母体杂芳族环系的单个原子上除去一个氢原子而衍生的单价杂芳族基团。典型的杂芳基包括但不限于衍生自以下的基团：吖啶、砷杂茚、咔唑、β-咔啉、色烷、色烯、噌啉、呋喃、咪唑、吲唑、吲哚、二氢吲哚、吲嗪、异苯并呋喃、异色烯、异吲哚、异二氢吲哚、异喹啉、异噻唑、异噁烷、1，5-二氮杂萘、噁二唑、噁唑、
Figure A200780019156D0043165233QIETU
啶、菲啶、菲咯啉、吩嗪、酞嗪、蝶啶、嘌呤、吡喃、吡嗪、吡唑、哒嗪、吡啶、嘧啶、吡咯、吡咯嗪(pyrrolizine)、喹唑啉、喹啉、喹嗪、喹喔啉、四唑、噻二唑、噻唑、噻吩、***、呫吨等。优选的是，杂芳基是5-15元之间的杂芳基，特别优选5-10元杂芳基。特别的杂芳基衍生自噻吩、吡咯、苯并噻吩、苯并呋喃、吲哚、吡啶、喹啉、咪唑、噁唑和吡嗪。
代表性的杂芳基的实例包括下列：
Figure A200780019156D00431
其中每个Y选自羰基、N、NR58、O和S；并且R58独立地是氢、烷基、环烷基、环杂烷基、芳基、杂芳基、杂烷基等。
本文所用的术语“环杂烷基”指的是包含一个或多个独立地选自N、O和S的杂原子的稳定的杂环非芳族环和稠环。稠合的杂环系可以包括碳环并且仅需要包括一个杂环。杂环的实例包括但不限于哌嗪基、高哌嗪基、哌啶基和吗啉基，并且在以下说明性实例中显示：
Figure A200780019156D00441
其中每个X选自CR58 2、NR58、O和S；并且每个Y选自NR58、O和S；并且R58独立地是氢、烷基、环烷基、环杂烷基、芳基、杂芳基、杂烷基等。这些环杂烷基环可以任选被一个或多个选自下列的基团取代：酰基、酰基氨基、酰基氧基、烷氧基、取代的烷氧基、烷氧基羰基、烷氧基羰基氨基、氨基、取代的氨基、氨基羰基、氨基羰基氨基、氨基羰基氧基、芳基、芳基氧基、叠氮基、羧基、氰基、环烷基、取代的环烷基、卤素、羟基、酮基、硝基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、硫代芳基氧基、硫代酮基、巯基、烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、烷基-S(O)2-和芳基-S(O)2-。取代基包括羰基或硫代羰基，其例如提供内酰胺和脲衍生物。
代表性的环杂烯基的实例包括下列：
Figure A200780019156D00442
其中每个X选自CR58 2、NR58、O和S；并且每个Y选自羰基、N、NR58、O和S；并且R58独立地是氢、烷基、环烷基、环杂烷基、芳基、杂芳基、杂烷基等。
代表性的具有杂原子(包含取代)的芳基的实例包括下列：
和
Figure A200780019156D00452
其中每个X选自CR58 2、NR58、O和S；并且每个Y选自羰基、NR58、O和S；并且R58独立地是氢、烷基、环烷基、环杂烷基、芳基、杂芳基、杂烷基等。
在有机合成领域中的具有普通技术的人员公认：在稳定的、化学上可行的杂环(无论它是芳族的还是非芳族的)中的杂原子的最大数目是由环的大小、不饱和度和杂原子的原子价来决定的。通常，杂环可以具有一个至四个杂原子，只要杂芳族环是化学上可行的并且稳定的。
“可药用的”指的是由联邦或洲政府管理局批准的或美国药典或其它普遍认同的药典中列出的用于动物并且更特别的是用于人。
“可药用盐”指的是本发明化合物的无毒、无机和有机酸加成盐和碱加成盐，特别的是，它们是可药用的并且具有母体化合物预期的药理学活性。这些盐可以在本发明中所用的化合物的最后分离和纯化的过程中原位制备。此类盐包括：(1)酸加成盐，用无机酸形成，所述的无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或者用有机酸形式，所述的有机酸例如乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基二环并[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等；或者(2)当母体化合物中存在的酸性质子被金属离子取代时形成的盐，所述的金属离子例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子；或与有机碱的配位，所述的有机碱例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、N-甲基葡糖胺等。盐仅以实例的方式进一步包括钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、铵盐、四烷基铵盐等；并且当化合物包含碱性官能度时，无毒的有机或无机酸的盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、乙酸盐、马来酸盐、草酸盐等。术语“可药用阳离子”指的是无毒、可接受的酸性官能团的阳离子的相反离子。此类阳离子的实例是钠、钾、钙、镁、铵、四烷基铵阳离子等。
“可药用载体”指的是与本发明化合物一起施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或载体。
“预防”指的是降低获得疾病或障碍的风险(即引起至少一种疾病的临床症状没有在个体中发展，该个体可能暴露于或易感染疾病，但是还没有经历或表现出疾病的症状)。
“前药”指的是具有可裂解基团并且通过溶剂解或在生理条件下转化为本发明化合物(其在体内具有药物活性)的化合物，包括本发明化合物的衍生物。此类实例包括但不限于胆碱酯衍生物等、N-烷基吗啉酯等。
“个体”包括人。术语“人”、“患者”和“个体”在本文中可互换应用。
任何疾病或障碍的“治疗”在一个实施方案中指的是改善疾病或障碍(即阻止或降低疾病的发展或至少其一种临床症状)。在另一个实施方案中，“治疗”指的是改善至少一种身体参数，其可能不被个体辨别出。在另一个实施方案中，“治疗”指的是调节疾病或障碍，或是身体的(例如稳定可辨别的症状)、生理学的(例如稳定身体参数)或两者。在另一个实施方案中，“治疗”指的是延迟疾病或障碍的发作。
本发明化合物的其它衍生物在它们的酸和酸衍生形式中都具有活性，但是在酸敏感形式中在哺乳动物机体中通常提供了溶解度、组织相容性或缓释的优势(参见Bundgard，H.，Design of Prodrugs(前药的设计)，第7-9页，第21-24页，Elsevier，Amsterdam 1985)。前药包括本领域从业者众所周知的酸衍生物，例如，例如由母体酸与适合的醇反应制备的酯或者由母体酸化合物与取代的或未取代的胺反应制备的酰胺，或者酸酐或混合酸酐。衍生自本发明化合物上的酸性基团的简单的脂族或芳族酯、酰胺和酸酐是优选的前药。在某些情况下，希望制备双酯类型的前药，例如(酰基氧基)烷基酯或((烷氧基羰基)氧基)烷基酯。优选的是本发明化合物的C1至C8烷基、C2-C8链烯基、芳基、C7-C12取代的芳基和C7-C12芳基烷基酯。
本文所用的术语“同位素变体”指的是在组成此类化合物的一个或多个原子上包含非天然比例的同位素的化合物。例如，化合物的“同位素变体”可以包含一个或多个非放射性同位素，例如氘(2H或D)、碳-13(13C)、氮-15(15N)等。应当理解的是，在制备同位素取代的化合物中，以下原子(存在时)可以改变，以便例如任何氢可以是2H/D、任何碳可以是13C或者任何氮可以是15N，并且此类原子的存在和布局在本领域技术内确定。同样，本发明可以包括在下列情况下用放射性同位素制备同位素变体：例如产生的化合物可以用于药物和/或底物组织分布研究。放射性同位素氚(即3H)和碳-14(即14C)特别用于该目的，因为其易于引入并且易于检测。另外，化合物可以用正电子发射同位素(例如11C、18F、15O和13N)取代来制备，并且将用于正电子发射断层扫描(PET)研究用于检查底物受体占有。
本文提供的化合物的所有同位素变体，不管其是否具有放射性，都旨在包括在本发明范围内。
还应当理解的是，将具有相同分子式但是其原子的成键的性质或顺序或者其原子在空间的排列不同的化合物称为“异构体”。将其原子在空间的排列不同的异构体称为“立体异构体”。
将不是互相镜像的立体异构体称为“非对映异构体”，并且将互相不可重叠的镜像的那些立体异构体称为“对映异构体”。当化合物具有不对称中心、例如与四个不同基团键合时，成对对映异构体是可能的。对映异构体的特征在于其不对称中心的绝对构型，并且通过Cahn和Prelog的R-和S-顺位规则或通过分子旋转偏光平面的方法来描述，并且命名为右旋或左旋(即分别为(+)或(-)异构体)。手性化合物可以以其单一的对映异构体或其混合物存在。将包含等比例的对映异构体的混合物称为“外消旋混合物”。
“互变异构体”指的是具有特别化合物结构的互变形式并且在氢原子和电子置换中不同的化合物。因此，两种结构可以通过移动π电子和原子(通常是H)的移动而是平衡的。例如，烯醇和酮是互变异构体，因为通过用酸或碱处理，它们快速互变。互变异构的另一个实例是苯基硝基甲烷的酸-和硝基-形式，它们同样是通过用酸或碱处理而形式的。
互变异构形式是与达到感兴趣化合物的最佳化学反应性和生物学活性相关的。
本发明化合物可以具有一个或多个不对称中心；因此此类化合物可以制备成单一的(R)-或(S)-立体异构体或其混合物。除非另外说明，本说明书和权利要求中的特别化合物的描述或命名旨在包括单一的对映异构体和其混合物、外消旋体或其它。立体化学的确定和立体异构体的分离的方法是本领域众所周知的。
化合物
本发明基于以下发现：引起MMP1的表达的途径中的MAPKAPK5功能以及MAPKAPK5活性抑制剂(例如本发明化合物)用于治疗涉及MMP活性异常高表达的疾病。
本发明化合物通常可以被描述为5位被芳基和杂芳基取代并且8位被芳基氨基或杂芳基氨基取代的[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基-胺。
更特别的是，本发明涉及在哺乳动物细胞中具有基质金属蛋白酶抑制特性的式(I)化合物或其可药用盐、水合物、溶剂化物或前药：
Figure A200780019156D00481
其中：
A和B独立地是CR2R”、NR”、氧或硫；
AA是CR2或N；
D是C＝O、CR2R”或NR”；
当k是0时，E是NH或CR”R6，并且当k是1时，E是NH或CR”R6a；
F是硫、氧或NH；
T是氧或NR；
U、V、W和X独立地是CR”R7或NR”；
Y是CR”或N；
Z是氢、氨基、羟基、低级烷氧基、氨基甲酰基、羧基、SO2Rz、SO2NRRz、-NR(CO)(CH2)d-Rz、-NRRz、-(CO)-ORz、-(CO)-NR(CH2)d-Rz或
Figure A200780019156D00491
R独立地是氢或低级烷基；
R”是H或与相邻的原子形成双键；
R1是H；R2；或低级烷基、低级环烷基和低级烷基-低级环烷基，任选被一个或多个R2取代；
R3是H或与相邻的R”形成双键；
R2是H、F、Cl、CN、COOR4、OR4、C(O)N(R4R5)、S(O)2N(R4R5)、低级烷基、O-低级烷基、NH-低级烷基、S-低级烷基、COO-低级烷基、OC(O)-低级烷基、C(O)N(R4)-低级烷基、S(O)2N(R4)-低级烷基、S(O)N(R4)-低级烷基、S(O)2-低级烷基、S(O)-低级烷基、N(R4)S(O)2-低级烷基和N(R4)S(O)-低级烷基，其中每个低级烷基任选被一个或多个F和Cl取代。
R4和R5独立地是H；F、Cl；或低级烷基、低级环烷基或低级烷基-低级环烷基，任选被一个或多个F和Cl取代；
R6是氢、氨基、羟基、氨基甲酰基、羧基、SO2R、NRR’、-(CO)-OR或-(CO)-NRR’；
R6a是R6、Cl、F、低级烷氧基、氰基、三氟甲氧基；或与邻近的一起是-(CHR”)n-NR-(CHR”)p-，并且形成与其键合的环稠合的5或6元杂环；
R7独立地是氢、卤素、低级烷基或低级烷氧基；
Rz是氢、低级烷基、低级烷酰基、苯基、1-低级烷基吡咯烷-3-基、吡唑-4-基、吡唑-2-基或低级烷基、低级烷酰基、苯基、1-低级烷基吡咯烷-3-基、吡唑-4-基、吡唑-2-基或吡啶-3-基，被一个或多个下列基团取代：羟基、氨基、一或二低级烷基氨基、乙酰氨基、低级烷酰基、低级烷基、4-羟基-苯基、3-氨基甲基苯基、低级烷基磺酰基、4-二低级烷基氨基苯基、吡啶-3-基、1H-吲哚-3-基、吗啉-4-基；
R和Rz一起可以是-(CHR)q-T-(CHR)r-并且与它们键合的氮形成5或6元杂环；
Rz和R7一起可以是-(CHR”)n-NR-(CHR”)p-，并且形成与其键合的环稠合的5或6元杂环；
b和d独立地是0或1；条件是b或d中至少一个是1；
k是0或1；
m是0或1；
n和p独立地是0、1或2；
q和r是1或2；
x是0或1；
条件是R7或Rz中至少一个不是氢。
本发明的优选方面是式II化合物亚类或其可药用盐、水合物、溶剂化物或前药，
Figure A200780019156D00501
其中
A和B独立地是CR2R”、NR”、氧或硫；
AA是CR2或N；
D是C＝O、CR2R”或NR”；
当k是0时，E是NH或CR”R6，并且当k是1时，E是NH或CR”R6a；
F是硫、氧或NH；
T是氧或NR；
R”是H或与相邻的原子形成双键；
R独立地是氢或低级烷基；
R1是H；R2；或低级烷基、低级环烷基和低级烷基-低级环烷基，任选被一个或多个R2取代；
R2是H、F、CI、CN、COOR4、OR4、C(O)N(R4R5)、S(O)2N(R4R5)、低级烷基、O-低级烷基、NH-低级烷基、S-低级烷基、COO-低级烷基、OC(O)-低级烷基、C(O)N(R4)-低级烷基、S(O)2N(R4)-低级烷基、S(O)N(R4)-低级烷基、S(O)2-低级烷基、S(O)-低级烷基、N(R4)S(O)2-低级烷基和N(R4)S(O)-低级烷基，其中每个低级烷基任选被一个或多个F和Cl取代。
R4和R5独立地是H；F、Cl；或低级烷基、低级环烷基或低级烷基-低级环烷基，任选被一个或多个F和Cl取代；
R6是氢、氨基、羟基、氨基甲酰基、羧基、SO2R、NRR’、-(CO)-OR、或-(CO)-NRR’；
R6a是R6、Cl、F、低级烷氧基、氰基、三氟甲氧基；或与邻近的一起是-(CHR”)n-NR-(CHR”)p-，并且形成与其键合的环稠合的5或6元杂环；
R8是苯基，其独立地在邻位被Ra、在间位被Rb并且在对位被Rc取代；吡啶-3-基；在5位被Rc取代的吡啶-3-基；或环己基，其独立地在2位被Ra并且在4位被Rd取代；
Ra是氢、卤素、低级烷基、三氟甲基或低级烷氧基；
Rb是氢、三氟甲基、低级烷氧基、低级烷基磺酰胺、羧基、-NReRf、-(CO)-OR或-(CO)-NReRf；
Rc是氢、氨基、羟基、低级烷氧基、氨基甲酰基、羧基、SO2R、SO2NReRf、NReRf、-(CO)-OR或-(CO)-NReRf；或
Rb和Rc可以一起形成吲唑或在3位被R’取代的吲哚；
Rd是羟基、卤素、氨基、低级烷氧基或NReRf；
Re和Rf独立地是氢、1-低级烷基吡咯烷-3-基、1-R-吡唑-4-基、低级烷酰基、苯基或任选被一个或多个以下基团取代的低级烷基：4-羟基苯基、3-氨基甲基苯基、低级烷基磺酰基、4-二低级烷基氨基苯基、吡啶-3-基、1H-吲哚-3-基、吗啉-4-基、羟基、氨基、一或二低级烷基氨基或低级烷酰基；或者R’和R”一起是-(CHR)n-T-(CHR)n-并且与它们键合的氮形成五或六元杂环；
m是0、1或2；
n是1或2；
条件是Ra、Rb和Rc中至少一个不是氢。
本发明特别优选的实施方案涉及式III化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药以及其立体异构体、同位素变体和互变异构体：
Figure A200780019156D00521
其中R1是H或者取代的或未取代的烷基；并且每个R8和R9独立地选自取代的或未取代的环烷基、取代的或未取代的杂环烷基、取代的或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8选自取代的或未取代的环戊基、环己基、取代的或未取代的苯基、取代的或未取代的吡啶基、取代或未取代的嘧啶和取代的或未取代的吡嗪、取代的或未取代的吡咯、取代的或未取代的吡唑以及取代的或未取代的咪唑。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R1是H、Me、Et、i-Pr或CF3。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R1是H。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8选自取代的或未取代的环烷基。
在另一个实施方案中，关于式III化合物，R8选自取代的或未取代的环己基或环戊基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8选自取代的或未取代的杂环烷基。
在另一个实施方案中，关于式III化合物，R8选自取代的或未取代的哌啶基、吗啉基或吡咯烷基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8选自取代的或未取代的苯基、吡啶基或嘧啶。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8选自取代的苯基、取代的吡啶基和取代的嘧啶；并且取代基是-L-R8d；并且其中
L选自键、亚烷基、杂亚烷基、-O-、-N(R8e)-、-CO-、-CO2-、-SO-、-SO2-、-CON(R8e)-、-SO2N(R8e)-、-N(R8e)CO-、-N(R8e)SO2-、-N(R8e)CON(R8e)-、-N(R8e)SO2N(R8e)-；并且
R8d选自取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的环烷基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂环烷基、取代的或未取代的杂芳基、取代的或未取代的氨基、取代的或未取代的芳烷基、取代的或未取代的杂芳基烷基和取代的或未取代的氨基烷基；并且
R8e选自H、取代的或未取代的烷基和取代的或未取代的环烷基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8是
Figure A200780019156D00531
其中L和R8d如前段中描述的；下标n选自1-4；并且每个R8a独立地选自氢、取代的或未取代的烷基、烷氧基、氰基和卤素。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且下标n是1，R8a是Me、Et、Pr、异-Pr、Cl、F、CN、OMe或CF3。在另一个实施方案中，R8a在2-(-L的邻)位。在另一个实施方案中，R8a是2-Cl、2-F、2-Me或2-CF3。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且
L是键、-O-、-CO-、-CON(R8e)-或-N(R8e)CO-；
R8d选自取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的环烷基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂环烷基、取代的或未取代的杂芳基、取代的或未取代的芳烷基、取代的或未取代的杂芳基烷基和取代的或未取代的氨基烷基；并且
R8e选自H、取代的或未取代的烷基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且
L是键、-O-、-CO-、-CON(R8e)-或-N(R8e)CO-；并且
R8d选自H、烷基氨基乙基、二烷基氨基乙基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基和杂芳基烷基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且
L是键、-O-、-CO-、-CON(R8e)-或-N(R8e)CO-；并且
R8d选自甲基氨基乙基、乙基氨基乙基、二甲基氨基乙基、二乙基氨基乙基、取代的或未取代的吡咯烷基、苄基和吡啶基甲基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且
L是键、-CO-、SO2、-(CH2)m1-、-O(CH2)m1-、-NH(CH2)m1-、-CON(H)(CH2)m1-或-SO2NH(CH2)m1-；下标m1选自1-4；并且R8d是
并且其中环P是取代的或未取代的杂环烷基。在另一个实施方案中，L是键、-CO-、-O(CH2)m1-、-CON(H)(CH2)m1-或-NHCO-；
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述；L是键；并且环P是取代的或未取代的杂环烷基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述；L是键；并且环P是取代的或未取代的哌啶、取代的或未取代的哌嗪和取代的或未取代的哌啶、吗啉。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述；L是CO；并且环P是取代的或未取代的杂环烷基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述；L是CO；并且环P是取代的或未取代的哌啶、取代的或未取代的哌嗪和取代的或未取代的哌啶、吗啉。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述；L是-(CH2)m1-、-O(CH2)m1-或-NH(CH2)m1-；下标m1选自1-4；并且环P是取代的或未取代的杂环烷基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述；L是-(CH2)m1-、-O(CH2)m1-或-NH(CH2)m1-；下标m1是2或3；并且环P是取代的或未取代的哌啶、取代的或未取代的哌嗪和取代的或未取代的哌啶、吗啉。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述；L是-CON(H)(CH2)m1-或-NHCO(CH2)m1-；下标m1选自1-4；并且环P是取代的或未取代的杂环烷基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述；L是-CON(H)(CH2)m1-；下标m1是2或3；并且环P是取代的或未取代的哌啶、取代的或未取代的哌嗪和取代的或未取代的哌啶、吗啉。
在一个实施方案中，关于式III化合物，化合物是式IVa、IVb、IVc或IVd或其可药用盐、溶剂化物或前药以及其立体异构体、同位素变体和互变异构体：
Figure A200780019156D00551
并且其中L和环P如上述；下标n选自1-4；每个R8a独立地选自氢、取代的或未取代的烷基、烷氧基、氰基和卤素；并且R9独立地选自取代的或未取代的芳基和杂芳基。
在一个实施方案中，关于式IVa-IVd化合物，L是键。
在一个实施方案中，关于式IVa-IVd化合物，L是亚甲基、亚乙基、亚丙基和亚丁基。
在一个实施方案中，关于式IVa-IVd化合物，L是-CO-。
权利要求9的化合物，其中L是-CO-。
权利要求9的化合物，其中L是-NHCO-或-CONH-。
权利要求9的化合物，其中L是-CON(H)-CH2-CH2-或-N(H)-CO-CH2-CH2-。
权利要求9的化合物，其中L是-OCH2-CH2-或-NHCH2-CH2-。
在一个实施方案中，关于式IVa-IVd化合物，L是-SO2-。
在一个实施方案中，关于式IVa-IVd化合物，L是-CON(H)-CH2-CH2-或-SO2NH-CH2-CH2-。
在一个实施方案中，关于式IVa-IVd化合物，L是-OCH2-CH2-或-NHCH2-CH2-。
在优选的实施方案中，L是键。
在一个实施方案中，关于式IVa-IVd化合物，环P是取代的或未取代的哌啶、吗啉或哌嗪。
在一个实施方案中，关于式IVa-IVd化合物，L和环P如上述；下标n是4并且每个R8a是H。
在一个实施方案中，关于式IVa-IVd化合物，L和环P如上述；下标n是1并且R8a是Me、Et、Pr、异-Pr、Cl、F、CN、OMe或CF3。在另一个实施方案中，R8a在2-(-L的邻)位。在另一个实施方案中，R8a是2-Cl、2-F、2-Me或2-CF3。
在进一步实施方案中，关于式III化合物，R8是
Figure A200780019156D00561
并且其中环P是取代的或未取代的杂环烷基；下标n选自1-4并且每个R8a独立地选自氢、取代的或未取代的烷基、烷氧基、氰基和卤素。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且环P是取代的或未取代的哌啶、吗啉或哌嗪。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且下标n是4并且每个R8a是H。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且下标n是1并且R8a是Me、Et、Pr、异-Pr、Cl、F、CN、OMe或CF3。在另一个实施方案中，R8a在2-(N-环P的邻)位。在另一个实施方案中，R8a是2-Cl、2-F、2-Me或2-CF3。
在进一步的实施方案中，关于式III化合物，R8是
Figure A200780019156D00571
并且其中下标n选自1-4；每个R8a独立地选自氢、取代的或未取代的烷基、烷氧基、氰基和卤素；R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基；R8c是氢、取代的或未取代的烷基并且下标x选自1-8。
在进一步的实施方案中，关于式III化合物，R8是
并且其中下标n选自1-4；每个R8a独立地选自氢、取代的或未取代的烷基、烷氧基、氰基和卤素；R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基；R8c是氢或Me。
在进一步的实施方案中，关于式III化合物，R8是
Figure A200780019156D00581
并且其中下标n选自1-4；每个R8a独立地选自氢、取代的或未取代的烷基、烷氧基、氰基和卤素。
在进一步的实施方案中，关于式III化合物，R8是
Figure A200780019156D00582
并且其中下标n选自1-4；每个R8a独立地选自氢、取代的或未取代的烷基、烷氧基、氰基和卤素；并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且下标n是4并且每个R8a是H。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且下标n是1并且R8a是Me、Et、Pr、异-Pr、Cl、F、CN、OMe或CF3。在另一个实施方案中，R8a在2-(N-环P的邻)位。在另一个实施方案中，R8a是2-Cl、2-F、2-Me或2-CF3。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且R8b是H。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且R8b是取代的或未取代的烷基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且R8b是取代的或未取代的环烷基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且R8b是Me、Et、Pr、i-Pr、t-Bu、i-Bu、CH2CF3、CF3、CH2CONH2、环丙基或环丙基甲基。
在一个特别的实施方案中，关于式III化合物，R8如上述并且R8b是i-Pr。
在进一步的实施方案中，关于式IVa-IVd化合物，R8a独立地选自氢、取代的或未取代的烷基、烷氧基、氰基、氨基甲酰基、CHO和卤素。在一个实施方案中，R8a是H、Me、F或Cl。在优选的实施方案中，R8a是H。
在一个实施方案中，关于式IVa-IVd化合物，化合物是式Va、Vb、Vc、Vd、Ve或Vf：
Figure A200780019156D00591
并且其中R9如式III中描述的并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
在一个实施方案中，关于式Va-Vf化合物，R8b是H。
在一个实施方案中，关于式Va-Vf化合物，R8b是取代的或未取代的烷基。
在一个实施方案中，关于式Va-Vf化合物，R8b是取代的或未取代的环烷基。
在一个实施方案中，关于式Va-Vf化合物，R8b是Me、Et、Pr、i-Pr、t-Bu、i-Bu、CH2CF3、CF3、CH2CONH2、环丙基或环丙基甲基。
在一个实施方案中，关于式Va-Vf化合物，R8b是i-Pr。
在一个实施方案中，关于式III-Vf化合物，R9是取代的或未取代的芳基。在另一个实施方案中，R9是取代的或未取代的苯基。
在一个实施方案中，关于式III-Vf化合物，R9是取代的或未取代的杂芳基。在另一个实施方案中，R9是取代的或未取代的吡啶基。
在一个实施方案中，关于式III-Vf化合物，R9选自取代的或未取代的苯基、吲哚基、异吲哚基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、噁唑基和噻唑基。
在一个实施方案中，关于式III-Vf化合物，R9是
Figure A200780019156D00601
或
Figure A200780019156D00602
并且每个A1、A2和A3独立地选自S、O、N、NR9a和CR9a；每个R9a独立地是H或者取代的或未取代的烷基；并且R9b是CONH2、CONHMe或CN。
在进一步的实施方案中，关于式III-Vf化合物，R9是
Figure A200780019156D00603
或
Figure A200780019156D00604
在进一步的实施方案中，关于式III-Vf化合物，R9是
Figure A200780019156D00611
Figure A200780019156D00612
或
Figure A200780019156D00613
在进一步的实施方案中，关于式III-Vf化合物，R9是
Figure A200780019156D00614
并且其中下标m选自1-4并且每个R9d独立地是H、取代的或未取代的烷基或卤素。
在进一步的实施方案中，关于式III-Vf化合物，R9是
Figure A200780019156D00615
并且其中下标m选自1-4并且每个R9d独立地是H、取代的或未取代的烷基或卤素。
在进一步的实施方案中，关于式III-Vf化合物，R9是
Figure A200780019156D00616
或
Figure A200780019156D00617
并且其中下标m选自1-3并且每个R9d独立地是H、取代的或未取代的烷基或卤素。
在进一步的实施方案中，关于式III-Vf化合物，R9如上述；并且每个R9d是H。
在进一步的实施方案中，关于式III-Vf化合物，R9如上述；m是1或2并且每个R9d独立地是Me、Cl或F。
在一个实施方案中，关于式III化合物，化合物是式VIa、VIb、VIc、VId、VIe或VIf：
Figure A200780019156D00621
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
在进一步的实施方案中，关于式VIa-VIf化合物，R8b是H。
在进一步的实施方案中，关于式VIa-VIf化合物，R8b是环烷基。
在进一步的实施方案中，关于式VIa-VIf化合物，R8b是环丙基。
在进一步的实施方案中，关于式VIa-VIf化合物，R8b是取代的或未取代的烷基。
在进一步的实施方案中，关于式VIa-VIf化合物，R8b是Me、Et、Pr、i-Pr、t-Bu、i-Bu、CF3、CH2CF3、CH2CONH2或环丙基甲基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，化合物是式VIIa、VIIb、VIIc、VIId、VIIe或VIIf：
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
在进一步的实施方案中，关于式VIIa-VIId化合物，R8b是H。
在进一步的实施方案中，关于式VIIa-VIIf化合物，R8b是环烷基。
在进一步的实施方案中，关于式VIIa-VIIf化合物，R8b是环丙基。
在进一步的实施方案中，关于式VIIa-VIIf化合物，R8b是取代的或未取代的烷基。
在进一步的实施方案中，关于式VIIa-VIIf化合物，R8b是Me、Et、Pr、i-Pr、t-Bu、i-Bu、CF3、CH2CF3、CH2CONH2或环丙基甲基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，化合物是式VIIIa、VIIIb、VIIIc、VIIId、VIIIe或VIIIf：
Figure A200780019156D00641
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
在进一步的实施方案中，关于式VIIIa-VIIIf化合物，R8b是H。
在进一步的实施方案中，关于式VIIIa-VIIIf化合物，R8b是环烷基。
在进一步的实施方案中，关于式VIIIa-VIIIf化合物，R8b是环丙基。
在进一步的实施方案中，关于式VIIIa-VIIIf化合物，R8b是取代的或未取代的烷基。
在进一步的实施方案中，关于式VIIIa-VIIIf化合物，R8b是Me、Et、Pr、i-Pr、t-Bu、i-Bu、CF3、CH2CF3、CH2CONH2或环丙基甲基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，化合物是式IXa、IXb、IXc、IXd、IXe或IXf：
Figure A200780019156D00651
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
在进一步的实施方案中，关于式IXa-IXf化合物，R8b是H。
在进一步的实施方案中，关于式IXa-IXf化合物，R8b是环烷基。
在进一步的实施方案中，关于式IXa-IXf化合物，R8b是环丙基。
在进一步的实施方案中，关于式IXa-IXf化合物，R8b是取代的或未取代的烷基。
在进一步的实施方案中，关于式IXa-IXf化合物，R8b是Me、Et、Pr、i-Pr、t-Bu、i-Bu、CF3、CH2CF3、CH2CONH2或环丙基甲基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，化合物是式Xa、Xb、Xc、Xd、Xe或Xf：
Figure A200780019156D00661
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
在进一步的实施方案中，关于式Xa-Xf化合物，R8b是H。
在进一步的实施方案中，关于式Xa-Xf化合物，R8b是环烷基。
在进一步的实施方案中，关于式Xa-Xf化合物，R8b是环丙基。
在进一步的实施方案中，关于式Xa-Xf化合物，R8b是取代的或未取代的烷基。
在进一步的实施方案中，关于式Xa-Xf化合物，R8b是Me、Et、Pr、i-Pr、t-Bu、i-Bu、CF3、CH2CF3、CH2CONH2或环丙基甲基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，化合物是式XIa、XIb、XIc、XId、XIe或XIf：
Figure A200780019156D00671
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基；并且R9e是氢、Me或CN。
在一个实施方案中，关于式XIa-XIf化合物，R9e是H。
在一个实施方案中，关于式XIa-XIf化合物，R9e是Me。
在一个实施方案中，关于式XIa-XIf化合物，R9e是CN。
在进一步的实施方案中，关于式XIa-XIf化合物，R8b是H。
在进一步的实施方案中，关于式XIa-XIf化合物，R8b是环烷基。
在进一步的实施方案中，关于式XIa-XIf化合物，R8b是环丙基。
在进一步的实施方案中，关于式XIa-XIf化合物，R8b是取代的或未取代的烷基。
在进一步的实施方案中，关于式XIa-XIf化合物，R8b是Me、Et、Pr、i-Pr、t-Bu、i-Bu、CF3、CH2CF3、CH2CONH2或环丙基甲基。
在一个实施方案中，关于式III化合物，化合物是式XIIa、XIIb、XIIc或XIId：
Figure A200780019156D00681
在一个实施方案中，关于式III化合物，化合物是式XIIIa、XIIIb、XIIIc或XIIId：
Figure A200780019156D00682
在一个实施方案中，关于式III化合物，化合物是式XIVa、XIVb、XIVc或XIVd：
Figure A200780019156D00683
在一个实施方案中，关于式III化合物，化合物是式XVa、XVb或XVc：
Figure A200780019156D00691
并且L是键或-O-CH2-CH2-；环P是
Figure A200780019156D00692
或
Figure A200780019156D00693
并且R8b是H、Me、i-Pr、t-Bu、CH2CONH2、环丙基甲基或CH2CF3。
在一个特别的实施方案中，关于式XVa-XVc化合物，L是键。在另一个特别的实施方案中，L是-O-CH2-CH2-。
在一个特别的实施方案中，关于式XVa-XVc化合物，环P是
Figure A200780019156D00694
在更特别的实施方案中，关于式XVa-XVc化合物，环P是
Figure A200780019156D00695
在另一个实施方案中，关于式III化合物，化合物选自表1。
在另一个实施方案中，关于式III化合物，化合物选自表2。
在某些方面，本发明提供上式化合物的前药和衍生物。前药是本发明化合物的衍生物，其具有代谢可裂解基团并且通过溶剂解或在生理条件下转化为本发明化合物，其在体内是有药理学活性的。前药可以在施用于个体时是无活性的，但是在体内转化为本发明活性化合物。本文所用的“可药用前药”指的是用于本发明的化合物的前药，其在健康体检判断的范围内适合用于与合理利益/风险比例相称的异常毒性、刺激、过敏反应的患者组织中接触，并且对于本发明化合物的预期用途是有效的。术语“前药”指的是在体内转化以获得用于本发明的有效化合物或其可药用盐、水合物或溶剂化物的化合物。转化可以通过多种机制来发生，例如通过在血液中水解。含有代谢可裂解基团的化合物具有以下优势：与母体化合物相比，由于代谢可裂解基团的存在，作为提高溶解度和/或吸收速率的结果，其可表现出改善的生物利用度，因此此类化合物用作前药。彻底的讨论由下面文献提供：Design of Prodrugs(前药的设计)，H.Bundgaard编，Elsevier(1985)；Methods in Enzymology(酶学中的方法)；K.Widder等人编，Academic Press，42，309-396(1985)；A Textbook of Drug Design andDevelopment(药物设计和开发课本)，Krogsgaard-Larsen和H.Bandaged编，第5章；“Design and Applications of Prodrugs(前药的设计和应用)”113-191(1991)；Advanced Drug Delivery Reviews(高等药物释放综述)，H.Bundgard，8，1-38，(1992)；J.Pharm.Sci.，77，285(1988)；Chem.Pharm.Bull.，N.Nakeya等人，32，692(1984)；Pro-drugs as Novel DeliverySystems(作为新释放***的前药)，T.Higuchi和V.Stella，14 A.C.S.Symposium Series以及Bioreversible Carriers in Drug Design(药物设计中的生物可逆性载体)，E.B.Roche编，American Pharmaceutical Associationand Pergamon Press，1987，将其并入本文作为参考。此类实例包括但不限于胆碱酯衍生物等、N-烷基吗啉酯等。
本发明化合物的其它衍生物在它们的酸和酸衍生物形式中都具有活性，但是在酸敏感形式中在哺乳动物机体中通常提供了溶解度、组织相容性或缓释的优势(参见Bundgard，H.，Design of Prodrugs(前药的设计)，第7-9页，第21-24页，Elsevier，Amsterdam 1985)。前药包括本领域从业者众所周知的酸衍生物，例如，例如由母体酸与适合的醇反应制备的酯或者由母体酸化合物与取代的或未取代的胺反应制备的酰胺，或者酸酐或混合酸酐。衍生自本发明化合物上的酸性基团的简单的脂族或芳族酯、酰胺和酸酐是优选的前药。在某些情况下，希望制备双酯类型的前药，例如(酰基氧基)烷基酯或((烷氧基羰基)氧基)烷基酯。优选的是本发明化合物的C1至C8烷基、C2-C8链烯基、芳基、C7-C12取代的芳基和C7-C12芳基烷基酯。
药物组合物
当用作药物时，本发明化合物通常以药物组合物的形式施用。此类组合物可以以制药领域众所周知的方法制备并且包括至少一种活性化合物。
通常，本发明化合物以药用有效量施用。化合物实际施用的量通常将由医师根据有关情况来确定，所述的情况包括所治疗的病症、所选的施用途径、施用的实际化合物、单一患者的年龄、体重和响应、患者症状的严重程度等。
本发明药物组合物可以通过多种途径施用，所述的途径包括口服、直肠、透皮、皮下、静脉内、肌内和鼻内。取决于预期释放途径，本发明化合物优选配制为可注射或口服组合物或者软膏剂、洗剂或贴剂用于透皮施用。
用于口服施用的组合物可以采用散装(bulk)液体溶液剂或混悬剂或散装散剂的形式。但是更普遍的是组合物以单位剂型存在以便于精确给药。术语“单位剂型”指的是适合作为用于人个体和其它哺乳动物的单位剂量的物理上完全分离的单位，每个单位包含计算产生预期治疗作用的预定量的活性物质以及适合的药用赋形剂。典型的单位剂型包括液体组合物的预填充的、预测量的安瓿或注射器或者在固体组合物的情况中的丸剂、片剂、胶囊剂等。在此类组合物中，呋喃磺酸化合物通常是较小组分(约0.1至约50％重量或优选从约1至约40％重量)，剩余部分是多种介质或载体和有助于形成预期剂型的操作助剂。
适于口服施用的液体形式可以包括适合的含水或不含水的介质以及缓冲剂、混悬剂和分散剂、着色剂、矫味剂等。固体形式可以包括例如任何以下成分或类似性质的化合物：粘合剂，例如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂，例如淀粉或乳糖；崩解剂，例如海藻酸、Primogel或玉米淀粉；润滑剂，例如硬脂酸镁；助流剂，例如胶体二氧化硅；甜味剂，例如蔗糖或糖精；或矫味剂，例如薄荷、水杨酸甲酯或橙味调味剂。
可注射组合物通常是基于可注射无菌盐水或磷酸盐缓冲盐水或本领域已知的其它可注射载体。如上述，在此类组合物中的活性化合物通常是较小组分，通常为约0.05至10％重量，剩余部分是可注射载体等。
透皮组合物通常配制为局部软膏剂或乳膏剂，其通常包含量为约0.01至约20％重量、优选约0.1至约20％重量、优选约0.1至约10％重量并且更优选约0.5至约15％重量的活性成分。当配制为软膏剂时，活性成分通常与石蜡或水-可混溶的软膏基质组合。可选择的是，活性成分可以与例如水包油软膏基质配制为乳膏剂。此类透皮制剂是本领域众所周知的并且通常包括另外的成分以增强皮肤穿透的活性成分或制剂的稳定性。所有此类已知的透皮制剂和成分包括在本发明范围内。
本发明化合物还可以通过透皮装置施用。因此，透皮施用可以应用容器或多孔膜型或是固体基质种类的贴剂来完成。
用于口服可施用、可注射或局部可施用的上述组分仅是代表性。其它物质和处理技术等在Remington’s Pharmaceutical Sciences，第17版，1985，Mack Publishing Company，Easton，Pennsylvania的第八部分提出，将其并入本文作为参考。
本发明化合物还可以以缓释形式或从缓释药物释放***施用。代表性的缓释物质的描述可以在Remington’s Pharmaceutical Sciences中查找。
以下制剂实例说明代表性的本发明药物组合物。但是本发明不局限于以下药物组合物。
制剂1-片剂
将本发明化合物作为干燥粉末与干燥的明胶粘合剂以约1:2重量比混合。加入少量硬脂酸镁作为润滑剂。将混合物在压片机中制成240-270mg片剂(每片含80-90mg的活性酰胺化合物)。
制剂2-胶囊剂
将本发明化合物作为干燥粉末与淀粉稀释剂以约1:1重量比混合。将混合物填充到250mg胶囊中(每个胶囊含125mg的活性酰胺化合物)。
制剂3-液体
将本发明化合物(125mg)、蔗糖(1.75g)和黄原胶(4mg)混合，通过No.10目美国筛，然后与预先制备的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠(11:89，50mg)的水溶液混合。将苯甲酸钠(10mg)、矫味剂和着色剂用水稀释并且在搅拌下加入。然后加入足够的水以制成5mL的总体积。
制剂4-片剂
将本发明化合物作为干燥粉末与干燥的明胶粘合剂以约1:2重量比混合。加入少量硬脂酸镁作为润滑剂。将混合物在压片机中制成450-900mg片剂(150-300mg的活性酰胺化合物)。
制剂5-注射剂
将本发明化合物溶于或悬浮于缓冲的无菌盐水可注射含水介质中，使浓度约为5mg/mL。
制剂6-局部
将硬脂醇(250g)和白凡士林(250g)在约75℃下熔融，加入溶于水(约370g)的本发明化合物(50g)、对羟基苯甲酸甲酯(0.25g)、对羟基苯甲酸丙酯(0.15g)、十二烷基硫酸钠(10g)和丙二醇(120g)的混合物，将产生的混合物搅拌直至其凝固。
治疗方法
本发明化合物作为治疗剂用于治疗哺乳动物病症，该病症源于或可归因于MMP1和/或MAPKAPK5的异常活性。因此，本发明化合物和药物组合物作为药物用于预防和/或治疗哺乳动物(包括人)的炎性疾病。
在治疗方法方面，本发明提供了治疗易感或患有与胞外基质(ECM)降解有关的病症、特别是关节炎并且更特别的是类风湿性关节炎的哺乳动物的方法，该方法包括施用有效量的一种或多种本发明化合物或上述药物组合物。
在另一个治疗方法方面，本发明提供了治疗易感或患有与MMP1异常细胞表达有关的病症的哺乳动物的方法，该方法包括施用治疗有效量的本发明化合物或其药物组合物。
在另一个治疗方法方面，本发明提供了治疗或预防具有异常基质金属蛋白酶活性特征的病症的方法，该方法包括施用治疗有效的基质金属蛋白酶抑制量的一种或多种本发明化合物或其药物组合物。
在另一个治疗方法方面，本发明提供了治疗易感或患有疾病和障碍的哺乳动物的方法，所述的疾病和障碍由炎症介导或引起炎症，例如类风湿性关节炎和骨关节炎、心肌梗塞、多种自身免疫疾病和障碍、眼色素层炎和动脉粥样硬化；痒/瘙痒例如，例如银屑病；和肾障碍，该方法包括施用有效病症治疗或病症预防量的一种或多种上述药物组合物。
本发明还涉及本发明化合物在制备用于治疗或预防通过施用促***原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶5的抑制剂来预防、改善或消除的病症，或具有异常胶原酶活性的病症，或与ECM降解有关的病症或选自涉及炎症的疾病的病症，最优选用于治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。
作为本发明的进一步的方面，提供了特别在治疗或预防上述病症和疾病中用作药物的本发明化合物。本文还提供了本发明化合物在制备用于治疗或预防上述病症和疾病之一的药物中的用途。
本发明方法的优选方案包括给患有具有炎性特征的疾病病症的个体施用有效的基质金属蛋白酶抑制量的本发明化合物足够时间以降低患者胞外基质降解的异常水平，并且优选终止对所述的降解响应的自身延续性进程。该方法的特别实施方案包括给患有或易感发生类风湿性关节炎的个体患者施用有效的基质金属蛋白酶抑制量的本发明化合物足够时间以分别降低或预防所述患者关节中胶原和骨降解，并且优选终止对所述的降解响应的自身延续性进程。
注射剂量水平范围为约0.1mg/kg/小时至至少10mg/kg/小时，总时间约1至约120小时并且特别是24至96小时。约0.1mg/kg至约10mg/kg或更多的预装入大丸剂也可以施用以获得足够的稳态水平。对于40至80kg人类患者，最大总剂量不希望超过约2g/天。
对于预防和/或治疗长期病症，例如炎性和自身免疫病症，治疗方案通常延长历经数月或数年，并且因此对于患者的方便和耐受而言优选口服给药。对于口服给药，每天1至5个并且特别是2至4个并且典型地是3个口服剂量是代表性的方案。应用这些给药模式，每个剂量提供了约0.01至约20mg/kg的本发明化合物，优选剂量是每个提供了约0.1至约10mg/kg并且特别是约1至约5mg/kg。
透皮剂量通常被选择提供与应用注射剂量所获得的血中水平相比类似或更低的血中水平。
当用于预防炎性病症的发作时，本发明化合物以上述剂量水平施用于通常在医师告知和监控下存在发生病症风险的患者。存在发生特别病症风险的患者通常包括具有病症家族史的那些患者，或通过遗传试验或筛查被鉴定为特别易于发生病症的那些患者。
本发明化合物可以作为单独的活性剂施用或者它们可以与其它药物组合施用，所述的其它药物包括证明具有相同或类似治疗活性并且被确定对于此类组合施用是安全和有效的其它化合物。
常规合成方法
本发明的***并[1，5-a]吡啶基化合物可以由易于获得的原料应用下列常规方法和操作来制备。应当理解的是给出了典型的或优选的方法条件(即反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力等)；除非另外说明，也可以应用其它方法条件。最优的反应条件可以取决于所用的特别反应物或溶剂而不同，但是此类条件可以由本领域技术人员通过常规优化操作确定。
另外，对于本领域技术人员显而易见的是常规保护基是必需的以防止某些功能团参与不希望的反应。用于特别官能团的适合的保护基的选择以及适合用于保护和脱保护的条件是本领域众所周知的。例如，多种保护基以及它们的引入和除去在T.W.Greene和P.G.M.Wuts，ProtectingGroups in Organic Synthesis(有机合成中的保护基)，第二版，Wiley，NewYork，1991及其引用的文献中描述。
以下方法详细地呈现了制备代表性的上文列出的二环杂芳基。本发明化合物可以由已知的或可商购的原料和试剂通过有机合成领域中的技术人员来制备。
常规合成路线
Figure A200780019156D00761
通用
除非另外说明，所有试剂是商品级并且如收到的应用而无需进一步纯化。将可商购的无水溶剂用于在惰性气氛下进行的反应。除非另外说明，试剂级溶剂用于所有其它情况。柱色谱法是在硅胶60(35-70μm)上进行的。薄层色谱法是应用预涂层的硅胶F-254板(厚度0.25mm)进行的。1H NMR光谱是在Bruker DPX 400 NMR光谱仪(400MHz)上记录的。1H NMR光谱的化学位移(δ)是相对于四甲基硅烷(δ 0.00)或适当的残留溶剂峰，即CHCl3(δ 7.27)作为内标以百万分之(ppm)报道的。峰裂数以单峰(s)、双峰(d)、三重峰(t)、四重峰(q)、多重峰(m)和宽峰(br)给出。偶合常数(J)以Hz给出。电喷雾质谱是在Micromass平台LC/MS光谱仪上获得的。所有LCMS分析所用的柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7μm，2.1mm内径×50mm长(Part No.186002350))。制备HPLC：Waters XBridge Prep C185μm ODB 19mm内径×100mm长(Part No.186002978)。所有方法应用MeCN/H2O梯度。H2O包含0.1％TFA或0.1％NH3。
本发明化合物的代表性合成
化合物1：(4-吗啉-4-基苯基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]胺
步骤1：N’-(3，6-二溴-吡嗪-2-基)-N，N-二甲基甲脒
Figure A200780019156D00771
将悬浮于乙醇(150mL)中的3，6-二溴-吡嗪-2-基胺(15.37g，60.80mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(10.1mL，76.00mmol)的混合物回流2小时。将反应混合物真空蒸发，获得标题化合物(18.6g)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)3.20(s，3H)，3.21(s，3H)，7.93(s，1H)，8.48(s，1H)。LCMS：Rt 3.81分钟(99.1％)，m/z(APCI)307(M+H)+。
步骤2：N-(3，6-二溴-吡嗪-2-基)-N’-羟基甲脒
Figure A200780019156D00772
在N’-(3，6-二溴-吡嗪-2-基)-N，N-二甲基甲脒(18.6g，60.80mmol)的甲醇(200mL)溶液中一次性加入盐酸羟胺(5.91g，85.12mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。将溶剂蒸发并且将固体残留物用冷却(冰冷却的)水处理并且通过过滤收集。将沉淀用水和石油醚洗涤两次并且真空干燥，得到标题化合物(17.45g)，为白色固体。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)7.82(1H，br s)，8.21(1H，s)，8.34(1H，m)，11.17(1H，br s)。LCMS：Rt 3.17分钟(98.7％)，m/z(APCI)295(M+H)+。
步骤3：5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪
Figure A200780019156D00773
将N-(3，6-二溴-吡嗪-2-基)-N’-羟基甲脒(17.4mg，58.80mmol)用多磷酸(150g)在50℃下处理1小时，然后在70℃下处理1.75小时。在冷却至室温后，在反应混合物中加入水。将产生的悬浮液通过以小部分小心加入固体NaHCO3调至pH 8。将形成的沉淀通过过滤收集，用1N NaOH洗涤一次，用水洗涤三次并且真空干燥。将残留物在乙酸乙酯和1N NaOH之间分配，并且将有机相用1N NaOH再洗涤一次并且用盐水洗涤一次。将有机相经MgSO4干燥，过滤并且蒸发，得到标题化合物(10.15g)，为白色固体。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)8.43(s，1H)，8.92(s，1H)。LCMS：Rt 2.73分钟(94.2％)，m/z(APCI)277(M+H)+。
步骤4：(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基苯基)胺
将5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(123mg，443μmol)、4-(4-吗啉代)苯胺(118mg，0.664mmol)和N-乙基二异丙基胺(116mL，0.664mmol)的混合物在2-丙醇(3mL)中加热回流4.5小时。将反应混合物蒸发至干燥并且将残留物在二氯甲烷和柠檬酸(10％)之间分配。将有机相用水和盐水洗涤一次，经MgSO4干燥，过滤并且蒸发，得到标题化合物(156mg，94％)，为黄色固体。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)3.11(m，4H)，3.78(m，4H)，6.97(d，2H)，7.82(d，2H)，7.87(s，1H)，8.71(s，1H)，9.93(br s，1H)。LCMS：Rt 3.32分钟(96.8％)，m/z(APCI)375(M+H)+。
步骤5：(4-吗啉-4-基苯基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]胺
Figure A200780019156D00782
将(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基苯基)胺(220mg，0.586mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(dioxaborolan)-2-基)-1H-吡唑(171mg，0.879mmol)、Pd(PPh3)4(68mg，59μmol)和NaOtBu(225mg，2.34mmol)的4mL DMF/水(3:1)悬浮液在密封管中脱气5分钟。将反应混合物在密封试管中、在90℃下加热过夜。将溶剂蒸发后，将残留物通过过滤收集，用水(3×)和醚(2×)洗涤并且真空干燥。将粗产物通过柱色谱法(硅胶，96:4 DCM/MeOH)纯化，得到标题化合物(76mg，36％)，为黄色固体。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)3.11(4H，m)，3.79(4H，m)，6.98(2H，d)，7.90(2H，d)，8.17(1H，s)，8.35(1H，br s)，8.64(1H，br s)，8.75(1H，s)，9.73(1H，br s)。LCMS：Rt 2.68分钟(97.7％)，m/z(APCI)363(M+H)+。
化合物4：4-(8-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5a]吡嗪-5-基]吡啶-2(1H)-酮
步骤1：[5-(2-甲氧基-吡啶-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺
Figure A200780019156D00791
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在2:1 DMF/二噁烷(2.2mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺(80mg，0.206mmol)、2-甲氧基吡啶-4-硼酸(63mg，0.412mmol)、Pd(PPh3)4(0.052mmol)和1.5N Na2CO3(1.1mL，1.65mmol)制备。将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，应用96:4 DCM:NH3(7M在MeOH中)并且将包含预期产物的级分合并且蒸发，得到标题化合物(40mg，47％)。HPLC(254nm)：Rt 2.26分钟(65％)。
步骤2：4-(8-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5a]吡嗪-5-基]吡啶-2(1H)-酮
将[5-(2-甲氧基-吡啶-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺(40mg，0.096mmol)和盐酸吡啶(55mg，0.48mmol)的水(1mL)溶液在室温下搅拌1小时。将溶剂真空除去并且将残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用96:4 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱。将标题化合物分离(23mg，60％)。
将11mg(0.0273mmol)的游离碱化合物溶于最小量的MeOH/DCM中，(回流至溶解)并且加入在MeOH中的0.1M甲磺酸(0.273mL)。蒸发溶剂后将残留物用1:1乙酸乙酯-***和DCM-***的混合物研磨数次，过滤并且真空干燥，得到标题化合物，为甲磺酸盐(13mg，99％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.21(3H，s)，2.91(3H，s，MsOH)，3.00(2H，t)，3.18-3.26(2H，m)，3.58(2H，d)，3.90(2H，d)，6.83(1H，s)，7.07(2H，d)，7.25(1H，s)，7.53(1H，d)，7.93(2H，d)，8.14(1H，s)，8.76(1H，s)，9.69(1H，br s)，10.21(1H，s)，13.3(1H，br s)。LCMS：Rt 1.71分钟(97.5％)，m/z(APCI)403(M+H)+。
化合物6：4-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺
步骤1：(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺
Figure A200780019156D00811
将5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(2g，7.20mmol)、4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基胺(1.65g，8.64mmol)和N-乙基二异丙基胺(1.5mL，8.64mmol)的混合物在80℃下、在2-丙醇(50mL)中加热8小时。将反应混合物蒸发至干燥并且将残留物在二氯甲烷和水之间分配。将水相用二氯甲烷萃取两次。将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且蒸发，获得标题化合物(1.41g)，为灰色固体。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.27(3H，s)，2.54(4H，m)，3.14(4H，m)，6.97(2H，d)，7.80(2H，d)，7.87(1H，s)，8.72(1H，s)，9.92(1H，br s)。LCMS：Rt 2.07分钟(77.4％)，m/z(APCI)388(M+H)+。
步骤2：4-溴-噻吩-2-甲酰胺
将4-溴-噻吩-2-甲酸(2.0g，9.66mmol)、1-乙基-3-(3’-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(2.04g，10.63mmol)和1-羟基苯并***水合物(1.44g，10.63mmol)的DMF(20mL)溶液在室温下搅拌2小时。然后将反应混合物冷却至0℃并且加入NH3水溶液(1mL，17.3mmol)。将混合物在室温下再搅拌5小时，然后在反应混合物中加入水并且将产生的沉淀通过过滤收集并且用1M NaOH、H2O和石油醚洗涤。将标题化合物分离，为白色固体(1.56g，78％)。
步骤3：4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D00821
将4-溴-噻吩-2-甲酰胺(1.3g，6.34mmol)、双(频哪醇(pinacolato))二硼(3.22g，12.7mmol)、PdCl2dppf(0.26g，0.318mol)和KOAc(1.87g，19.10mmol)悬浮于二噁烷(20mL)中，鼓入氮气5分钟，然后在90℃下加热过夜。将溶剂真空除去并且将残留物在乙酸乙酯和水之间分配。将水层用乙酸乙酯萃取3次并且将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO4过滤并且蒸发。将标题产物从EtOAc-石油醚中结晶(2.135g，经LCMS检测纯度77％)。
步骤4：4-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D00822
将5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺(100mg，258mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-噻吩-2-甲酰胺(130mg，516mmol)和Pd(PPh3)4(74mg，64.5mmol)在Na2CO3水溶液(1.37mL，1.5M，2.06mmol)和DMF/二噁烷2/1(2.75mL)中的悬浮液在反应管中脱气5分钟。将试管密封并且将反应混合物在90℃下加热过夜。冷却至室温后将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将沉淀通过过滤收集并且用水(1×)和醚(2×)洗涤并且真空干燥。将粗产物通过柱色谱法纯化(硅胶，DCM/MeOH/NH3 96:4)，得到标题化合物(43mg)，为黄色固体。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.26(3H，s)，2.50(4H，m)，3.15(4H，m)，6.99(2H，d)，7.60(1H，br s)，7.88(2H，d)，8.10(2H，m)，8.48(1H，s)，8.66(1H，s)，8.79(1H，s)，9.97(1H，br s)。LCMS：Rt 1.99分钟(97.6％)，m/z(APCI)435(M+H)+。
化合物9：5-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺
步骤1：5-溴-噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D00831
将5-溴-噻吩-2-甲酸(4.51g，21.78mmol)、3-羟基苯并***水合物(3.24g，23.96mmol)、1-乙基-3-(3’-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(4.6g，23.9mmol)的DMF(70mL)溶液在室温下搅拌2小时。然后将反应混合物冷却至0℃并且加入35％NH3水溶液(2.2mL)。将混合物在室温下搅拌过夜。将溶剂真空除去并且将残留物溶于EtOAc中，用1N NaHCO3，和盐水洗涤。将有机层合并，经MgSO4干燥，过滤并且浓缩，得到标题化合物(3.78g，84％)。HPLC(254nm)：Rt 2.46分钟(96.5％)。
步骤2：5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D00832
将5-溴-噻吩-2-甲酰胺(0.5g，2.426mmol)、双(频哪醇)二硼(678mg，2.669mmol)、PdCl2dppf(59mg，0.072mmol)和KOAc(0.714g，7.28mmol)悬浮于二噁烷(5mL)中，鼓入氮气5分钟，然后在85℃下加热过夜。将溶剂真空除去并且将残留物在乙酸乙酯和水之间分配。将水层再用乙酸乙酯萃取并且将合并的有机相用盐水洗涤、经MgSO4过滤并且真空蒸发，得到标题化合物(417mg，68％)。
步骤3：5-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D00841
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3水溶液(1.37mL，2.06mmol)和二噁烷(2.75mL)中的5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺(100mg，0.258mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-噻吩-2-甲酰胺(130mg，0.516mmol)和Pd(PPh3)4(74mg，0.0645mmol)制备。蒸发溶剂后，将残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用96:6 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物(23mg，21％)。LCMS：Rt 1.94分钟(97.9％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.26(3H，s)，2.49(4H，m)，3.14(4H，m)，6.98(2H，d)，7.51(1H，br s)，7.85-7.89(2H，m)，8.03(2H，d)，8.10(1H，br s)，8.38(1H，s)，8.82(1H，s)，10.10(1H，s)。LCMS：Rt 1.94分钟，(97.9％)，m/z(APCI)435(M+H)+。
化合物12：5-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-N-(4-吗啉代苯基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺
Figure A200780019156D00842
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(水溶液)(2.84mL，4.26mmol)和二噁烷(8.5mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺(0.2g，0.53mmol)、5-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(222mg，1.06mmol)和Pd(PPh3)4(0.154mg，0.134mmol)制备。将反应混合物通过硅胶柱色谱法纯化，应用98:2和97:3 DCM:NH3(7M在MeOH中)，得到标题化合物(15mg，7.5％)。应用在MeOH(0.398mL)中的0.1M甲磺酸将其转化为甲磺酸盐，得到标题化合物(15mg)，为淡绿色固体。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.41(3H，s，MsOH)，2.46(3H，s)，3.20(4H，m)，3.71(4H，m)，7.11(2H，d)，7.74(1H，s)，7.97(2H，d)，8.15(1H，s)，8.69(1H，s)，9.88(1H，s)。LCMS：Rt 2.41分钟(98.3％)，m/z(APCI)377(M+H)+。
化合物15：4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D00851
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(水溶液)(2.84mL，4.26mmol)和二噁烷(10mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺(0.2g，0.53mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-噻吩-2-甲酰胺(0.27mg，1.06mmol)和Pd(PPh3)4(0.15mg，0.133mmol)制备。将反应混合物在水和乙酸乙酯之间分配。形成沉淀，通过过滤收集并且通过硅胶柱色谱法纯化，应用95:5 DCM:MeOH，得到标题化合物(84.1mg，37.4％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)3.13(4H，m)，3.79(4H，m)，7.01(2H，d)，7.60(1H，br s)，7.91(2H，d)，8.10(2H，s)，8.48(1H，s)，8.66(1H，s)，8.79(1H，s)，9.96(1H，s)。LCMS：Rt 2.61分钟(97.1％)，m/z(APCI)422(M+H)+。
化合物16：5-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺
步骤1：5-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑
Figure A200780019156D00861
该化合物可以应用化合物86步骤2中描述的方法，应用在二甲亚砜(30mL)中的4-溴-5-甲基-1H-吡唑(3g，18.6mmol)、双(频哪醇)二硼(8.52g，33.5mmol)、PdCl2dppf(913mg，1.118mmol)和KOAc(5.49mg，55.9mmol)制备。将反应混合物通过硅胶柱色谱法纯化，用7:3随后用1:1石油醚:乙酸乙酯洗脱，得到5-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(3.87g，100％)。
步骤2：5-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺
Figure A200780019156D00862
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在二噁烷(5.4mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺(132mg，0.340mmol)、5-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(141mg，0.68mmol)和Pd(PPh3)4(98mg，0.085mmol)和1.5N Na2CO3(1.81mL，2.72mmol)制备。将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用95:5 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，随后用***和石油醚研磨，得到标题化合物(9mg，7％)，为淡绿色固体。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.27(3H，s)，2.38-2.49(7H，m)，3.14(4H，m)，6.97(2H，d)，7.70(1H，s)，7.88(2H，d)，7.99和8.43(1H，br s)，8.68(1H，s)，9.71(1H，s)，12.92和12.98(1H，br s)。
应用0.1M甲磺酸(0.231mL)将其转化为甲磺酸盐，得到目标化合物(11mg)。LCMS：Rt 1.78分钟(86％)，m/z(APCI)390(M+H)+。
化合物17：N-(3-氟-4-吗啉代苯基)-5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺
步骤1：(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(3-氟-4-吗啉-4-基-苯基)-胺
Figure A200780019156D00871
该化合物可以应用化合物6步骤1中描述的方法，应用在2-丙醇(6mL)中的5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(0.5g，1.799mmol)、3-氟-4-吗啉-4-基-苯基胺(0.53g，2.70mmol)和DIPEA(0.470mL，2.70mmol)制备。将反应混合物在10％柠檬酸水溶液和DCM之间分配。将有机相分离并且用水和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且真空浓缩，得到标题化合物(697mg，98％)，将其应用于下一步而无需进一步纯化。LCMS：Rt 3.52分钟(98.2％)。
步骤2：N-(3-氟-4-吗啉代苯基)-5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺
Figure A200780019156D00881
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(1.36mL，2.03mmol)和二噁烷(4mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(3-氟-4-吗啉-4-基-苯基)-胺(100mg，0.254mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(99mg，0.51mmol)和Pd(PPh3)4(73mg，0.063mmol)制备。将粗物质通过硅胶柱色谱法纯化，用98:2 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱并且用***和石油醚研磨，得到目标化合物(43mg，44％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)3.01(4H，m)，3.79(4H，m)，7.08(1H，t)，7.79(1H，d)，8.06(1H，d)，8.26(1H，s)，8.38(1H，s)，8.67(1H，s)，8.79(1H，s)，10.03(1H，s)，13.3(1H，br s)。LCMS：Rt 2.83分钟(99％)，m/z(APCI)381(M+H)+。
化合物19：5-(5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-2-吗啉代苯甲酰胺
步骤1：5-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-2-吗啉-4-基-苯甲酰胺
该化合物可以应用化合物6步骤1中描述的方法，应用在2-丙醇(7mL)中的5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(250mg，0.90mmol)、5-氨基-2-吗啉-4-基-苯甲酰胺(299mg，1.35mmol)和N，N-二异丙基乙基胺(0.24mL，1.35mmol)制备。用iPrOH和Et2O研磨，得到标题化合物(273mg，73％)。
步骤2：5-(5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-2-吗啉代苯甲酰胺
Figure A200780019156D00891
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MK2CO3(水溶液)(1.93mL)和二噁烷(3.44mL)中的5-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-2-吗啉-4-基-苯甲酰胺(140mg，0.33mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(130mg，0.67mmol)和Pd(PPh3)4(96mg，0.083mmol)制备。将粗物质通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM随后用99:1、然后97:3、然后95:5 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物，为白色固体(40.5mg，30％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.96(4H，m)，3.79(4H，m)，7.28(2H，d)，7.45(1H，m)，7.54(1H，br s)，8.01-8.09(1H，dd)，8.25(1H，s)，8.50(1H，d)，8.69(1H，br s)，8.78(1H，s)，9.98(1H，s)，13.3(1H，br s)。LCMS：Rt 2.23分钟(96.9％)，m/z(APCI)406(M+H)+。
化合物21：4-(8-(4-(2-吗啉代乙氧基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D00892
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(1.44mL，2.16mmol)和二噁烷(4.3mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基]-胺(113mg，0.27mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-噻吩-2-甲酰胺(136mg，0.537mmol)和Pd(PPh3)4(78mg，0.067mmol)制备。将反应混合物通过硅胶柱色谱法纯化，用97:3 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物(65mg，52％)。LCMS：Rt 1.98分钟(98.9％)。应用在MeOH(1.1385mL)中的0.1M甲磺酸将其转化为甲磺酸盐，得到标题化合物(50mg，95％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.37(3H，s，MsOH)，3.21-3.64(6H，m)，3.76(2H，t)，4.05(2H，d)，4.40(2H，m)，7.09(2H，d)，7.61(1H，br s)，8.02(2H，d)，8.11(2H，s)，8.48(1H，s)，8.67(1H，s)，8.82(1H，s)，9.91(1H，br s)，10.09(1H，s)。LCMS：Rt 1.98分钟(97.7％)，m/z(APCI)466(M+H)+。
化合物22：5-(8-(4-(2-吗啉代乙氧基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D00901
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(1.5mL，2.24mmol)和二噁烷(4.5mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基]-胺(118mg，0.28mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-噻吩-2-甲酰胺(142mg，0.56mmol)和Pd(PPh3)4(81mg，0.07mmol)制备。将反应混合物经硅胶柱色谱法纯化，用97:3 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物(33mg，25％)。LCMS：Rt 2.66分钟(99％)。应用在MeOH(0.569mL)中的0.1M甲磺酸将其转化为甲磺酸盐，得到标题化合物(24mg，86％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.37(3H，s，MsOH)，3.25(2H，m)，3.50-3.64(4H，m)，3.76(2H，t)，4.05(2H，d)，4.40(2H，m)，7.09(2H，d)，7.51(1H，br s)，7.87(1H，d)，7.99-8.05(3H，m)，8.11(1H，br s)，8.37(1H，s)，8.84(1H，s)，9.92(1H，br s)，10.21(1H，s)。LCMS：Rt 1.95分钟(98.8％)，m/z(APCI)466(M+H)+。
化合物23：(4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(2H-吡唑-3-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺
步骤1：1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑
Figure A200780019156D00911
在催化剂量的TFA(0.1mL，1.3mmol)的存在下，将1H-吡唑(14.3g，0.21mol)溶于3，4-二氢-2H-吡喃(26.74g，0.32mol)中。将反应混合物在95℃下搅拌5小时，冷却，然后用NaH(0.2g，5mmol)猝灭。将溶剂除去，得到标题化合物，为棕色油状物(33.3g，99％)，将其应用于下一步而无需进一步纯化。
步骤2：1H-吡唑-2-硼酸
Figure A200780019156D00912
在1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑(7.6g，52mmol)在THF(50mL)的冷却溶液(-78℃)中滴加nBuLi(33mL，2.5M在己烷中，82.5mmol)和三异丙基硼烷(12.7mL，55mmol)，将温度维持在-70℃。将反应混合物在-70℃下搅拌1小时，然后历经4小时使其达到室温。用2M HCl猝灭反应后，将溶剂真空除去并且用1M NaOH将pH调至pH 6。形成沉淀，通过过滤收集并且用甲苯和石油醚洗涤。用乙酸乙酯研磨，得到目标化合物，为白色固体(2.7g，48％)，将其应用于下一步而无需进一步纯化。
步骤3：(4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(2H-吡唑-3-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺
Figure A200780019156D00921
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在DMF(2mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(吗啉-4-基)-苯基]-胺(100mg，0.267mmol)、1H-吡唑-2-硼酸(60mg，0.535mmol)、Pd(PPh3)4(93mg，0.08mmol)和Na2CO3(88mg，0.80mmol)制备。将反应混合物放入试管(stem-tube)中并且在100℃下搅拌18小时。冷却后，将混合物用NaHCO3溶液稀释并且用EtOAc(4×)萃取。将有机层用水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且蒸发，得到粗产物，其通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM、随后96:4DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱。用***研磨后将标题化合物分离(12.4mg，13％)。应用0.1M甲磺酸(0.342mL，0.0342mmol)将其转化为甲磺酸盐，得到目标化合物(10mg，81％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.34(3H，s，MsOH)，3.14(4H，m)，3.81(4H，m)，7.04(2H，d)，7.27(1H，m)，7.92(3H，m)，8.24(1H，s)，8.76(1H，s)，9.92(1H，s)。LCMS：Rt 2.45分钟(97.6％)，m/z(APCI)363(M+H)+。
化合物28：4-(8-(4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D00931
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(1.28mL，1.92mmol)和二噁烷(3.84mL)中的5-溴-N-(6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺(100mg，0.24mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-噻吩-2-甲酰胺(121mg，0.48mmol)和Pd(PPh3)4(69mg，0.059mmol)制备。将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM和97:3 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物(68mg，61％)，为淡绿色固体。应用在MeOH(1.47mL，0.147mmol)中的0.1M甲磺酸将其转化为甲磺酸盐，随后用DCM和***研磨，得到标题化合物(67mg，98.5％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)1.35(6H，d)，2.34(3H，s，MsOH)，3.00(2H，t)，3.22-3.25(2H，m)，3.56-3.61(3H，m)，3.89(2H，d)，7.09(2H，d)，7.60(1H，br s)，7.97(2H，d)，8.10(2H，s)，8.48(1H，s)，8.67(1H，s)，8.81(1H，s)，9.23(1H，br s)，10.03(1H，s)。LCMS：Rt2.13分钟(98.4％)，m/z(APCI)463(M+H)+。
化合物29：5-(8-(4-吗啉代苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-3-甲酰胺
步骤1：[5-(4-氨基甲酰基-呋喃-2-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸叔丁酯
Figure A200780019156D00941
该化合物可以应用化合物35步骤3中描述的方法，应用在DMF(1mL)中的(4-吗啉-4-基-苯基)-(5-三丁基锡烷基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-氨基甲酸叔丁酯(137mg，0.199mmol)、5-溴-呋喃-3-甲酰胺(76mg，0.4mmol)和Pd(PPh3)4(23mg，0.020mmol)制备。纯化反应混合物，用98:2DCM:MeOH和96:4 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物(33mg，33％)。
步骤2：5-(8-(4-吗啉代苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-3-甲酰胺
Figure A200780019156D00942
将[5-(4-氨基甲酰基-呋喃-2-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸叔丁酯(33mg，0.065mmol)在1:1 DCM:TFA(2mL)(2滴水)混合物中的溶液在室温下搅拌2小时。加入饱和的Na2CO3后，形成沉淀，通过过滤收集并且用水、***和石油醚洗涤。真空干燥后，将标题化合物分离(20mg，76％)。应用在MeOH(0.444mL)中的0.1M甲磺酸将其转化为甲磺酸盐，得到目标化合物(19mg，100％)。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.36(3H，s，MsOH)，3.22(4H，m)，3.82-3.89(4H，m)，7.13(2H，d)，7.36(1H，br s)，7.86(1H，s)，7.95(3H，m)，8.17(1H，s)，8.40(1H，s)，8.84(1H，s)，10.17(1H，s)。LCMS：Rt 2.60分钟(96.9％)，m/z(APCI)406(M+H)+。
化合物33：5-(8-(4-吗啉代苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮
Figure A200780019156D00951
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(14.3mL)和二噁烷(40mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺(1.0g，2.67mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(参见化合物79中的描述)(1.03g，4.01mmol)和Pd(PPh3)4(0.77g，0.67mmol)制备。通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM、随后96:4 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物(0.895g，79％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)3.12(4H，m)，3.79(4H，m)，4.51(2H，s)，7.01(2H，d)，7.84(1H，d)，7.92(2H，d)，8.01(1H，s)，8.09(1H，d)，8.23(1H，s)，8.72(1H，s)，8.73(1H，s)，10.02(1H，s)。LCMS：Rt 2.51分钟(97.8％)，m/z(APCI)428(M+H)+。
化合物34：4-(8-(4-吗啉代苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺
Figure A200780019156D00961
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(水溶液)(1.1mL，1.68mmol)和二噁烷(3mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺(78mg，0.16mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-呋喃-2-甲酰胺(100mg，0.34mmol)和Pd(PPh3)4(60mg，0.052mmol)制备。将反应混合物在水和乙酸乙酯之间分配，将标题化合物沉淀并且通过过滤收集。通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM和95:5 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物(42mg，65％)。应用0.1M甲磺酸(0.82mL)将其转化为甲磺酸盐，得到固体，将其用***研磨，得到标题化合物(30.5mg)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.19(3H，s，MsOH)，3.03-3.07(4H，m)，3.67(4H，m)，6.99(2H，br s)，7.43(1H，d)，7.74-7.82(4H，m)，8.06(1H，br s)，8.59(1H，br s)，8.64(1H，s)，9.91(1H，br s)。LCMS：Rt 2.64分钟(98.1％)，m/z(APCI)406(M+H)+。
化合物35：6-(8-(4-吗啉代苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮
步骤1：(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸叔丁酯
Figure A200780019156D00962
将(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(吗啉-4-基)-苯基]-胺(300mg，0.800mmol)、二甲基氨基吡啶(10mg，0.08mmol)和二碳酸二叔丁酯(523mg，2.4mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液在50℃下搅拌过夜。将反应混合物在DCM和水之间分配并且将有机层用1N NaOH和盐水洗涤。将有机层经MgSO4干燥，过滤并且真空浓缩，得到粗化合物，将其通过硅胶柱色谱法纯化。用98:2 DCM:MeOH洗脱，得到标题化合物(352mg，93％)。LCMS：Rt 3.45分钟(97.8％)。
步骤2：(4-吗啉-4-基-苯基)-(5-三丁基锡烷基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-氨基甲酸叔丁酯
Figure A200780019156D00971
在(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸叔丁酯(370mg，0.78mmol)的THF(12mL)冷却(-78℃)溶液中加入在THF(0.78mL，1.56mmol)中的2M异丙基氯化镁，并且搅拌5分钟后，加入三丁基氯化锡(0.42，1.56mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌15分钟并且在室温下再搅拌15分钟。除去溶剂后，将残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用5:1石油醚:乙酸乙酯、随后1:1石油醚:乙酸乙酯洗脱。将标题化合物分离(105mg，20％)。
步骤3：(4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(1-氧代-1，2，3，4-四氢-异喹啉-6-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-氨基甲酸叔丁酯
Figure A200780019156D00981
在脱气的(4-吗啉-4-基-苯基)-(5-三丁基锡烷基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.15mmol)和6-溴-3，4-二氢-2H-异喹啉-1-酮的DMF(1mL)溶液中加入四(三苯膦)钯(O)(17mg，0.015mmol)并且将反应混合物在90℃下搅拌过夜。真空除去溶剂后，将残留物通过硅胶柱色谱法纯化。用1:1石油醚:乙酸乙酯和乙酸乙酯洗脱，得到目标化合物，为黄色固体(30mg，37％)。
步骤4：6-(8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)-3，4-二氢-2H-异喹啉-1-酮
Figure A200780019156D00982
将(4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(1-氧代-1，2，3，4-四氢-异喹啉-6-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-氨基甲酸叔丁酯(30mg，0.055mmol)在TFA:DCM(1滴水)的1:1混合物中的溶液在室温下搅拌2小时。将溶剂真空除去并且将残留物在乙酸乙酯和饱和的NaHCO3(水溶液)之间分配。将水层用乙酸乙酯萃取(2×)。将有机层合并并且蒸发，得到残留物，将其通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯洗脱。将标题化合物分离(18mg，75％)并且应用在MeOH中的0.1M甲磺酸(0.317mL)将其转化为甲磺酸盐(16.6mg，97％)。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.36(3H，s MsOH)，3.04(2H，t)，3.21(4H，m)，3.47(2H，t)，3.83(4H，m)，7.11(2H，d)，7.95-8.02(6H，m)，8.05(1H，s)，8.74(1H，s)，10.09(1H，br s)。LCMS：Rt 2.81分钟(97.9％)，m/z(APCI)442(M+H)+。
化合物36：5-(8-(4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮
Figure A200780019156D00991
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(7.7mL)和二噁烷(23mL)中的5-溴-N-(6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺(0.6g，1.44mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(0.56g，2.16mmol)和Pd(PPh3)4(0.416g，0.36mmol)制备。通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM、随后98:2 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物(0.36g，53％)，应用在MeOH(0.77mL)中的1M甲磺酸将其转化为甲磺酸盐。用***和DCM研磨后，将标题化合物分离，为固体(0.410g)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)1.35(6H，d)，2.35(3H，s，MsOH)，3.04(2H，t)，3.20-3.27(2H，m)，3.56-3.63(3H，m)，3.89(2H，d)，4.52(2H，s)，7.09(2H，d)，7.85(1H，d)，7.95-8.01(3H，m)，8.10(1H，d)，8.24(1H，s)，8.72(1H，s)，8.74(1H，s)，9.27(1H，br s)，10.07(1H，s)。LCMS：Rt 2.93分钟(97.9％)，m/z(ES+)469(M+H)+。
化合物37：{5-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-2-吗啉代苯基}甲醇
步骤1：(2-吗啉-4-基-5-硝基-苯基)-甲醇
Figure A200780019156D01001
在2-吗啉-4-基-5-硝基-苯甲醛(0.8g，3.39mmol)的MeOH(5mL)的冷却(0℃)溶液中加入NaBH4(0.125g，3.39mmol)并且将反应混合物在室温下搅拌3小时。用水猝灭反应后，将溶剂真空除去并且将残留物溶于乙酸乙酯中并且用盐水洗涤。将有机层经MgSO4干燥，过滤并且浓缩，得到标题化合物(870mg)，将其应用于下一步而无需进一步纯化。
步骤2：(5-氨基-2-吗啉-4-基-苯基)-甲醇
Figure A200780019156D01002
在(2-吗啉-4-基-5-硝基-苯基)-甲醇(870mg)的乙醇(40mL)溶液中加入氢氧化钯(87mg)并且将混合物在Parr-装置中、在氢气压力(10巴)下搅拌4小时。将反应混合物经硅藻土521过滤，用乙醇洗涤并且真空浓缩，得到标题化合物(640mg，83％)。
步骤3：3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-4-吗啉-4-基-苯基胺
Figure A200780019156D01003
将(5-氨基-2-吗啉-4-基-苯基)-甲醇(640mg，3.07mmol)、叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物(509mg，3.38mmol)和咪唑(250mg，3.68mmol)的二甲基甲酰胺(20mL)溶液在室温下搅拌过夜。将溶剂真空除去并且将残留物在水和乙酸乙酯之间分配。将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且浓缩，得到粗产物。应用硅胶柱色谱法纯化，用DCM、随后95:5DCM:MeOH混合物洗脱，得到标题化合物，为淡红色固体(390mg，27％)。
步骤4：(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-4-吗啉-4-基-苯基]-胺
Figure A200780019156D01011
将5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(0.391g，1.41mmol)、3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-4-吗啉-4-基-苯基胺(0.5g，1.55mmol)和N-乙基二异丙基-胺(0.27mL，1.55mmol)的混合物在90℃下、在2-丙醇(10mL)中加热8小时。将反应混合物蒸发至干燥并且将残留物在二氯甲烷和水之间分配。将水相用二氯甲烷萃取两次。将有机层合并，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且真空浓缩，得到标题化合物(335mg，46％)。
步骤5：[5-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-2-吗啉-4-基-苯基]-甲醇
Figure A200780019156D01012
将在1M四丁基氟化铵溶液中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-4-吗啉-4-基-苯基]-胺(285mg，0.549mmol)的THF(0.63mL)溶液在室温下搅拌1小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用10％柠檬酸溶液和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且浓缩，得到标题化合物，为膏状固体(100mg，45％)。
步骤6：{5-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-2-吗啉代苯基}甲醇
Figure A200780019156D01021
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(1.12mL)和二噁烷(2.0mL)中的[5-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-2-吗啉-4-基-苯基]-甲醇(85mg，0.21mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(81mg，0.42mmol)和Pd(PPh3)4(60mg，0.052mmol)制备。将反应混合物通过硅胶柱色谱法纯化，用95:3 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，随后用反相制备HPLC纯化。得到标题化合物，为淡棕色固体(10mg，12％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.87(4H，m)，3.77(4H，m)，4.63(2H，d)，5.12(1H，t)，7.11(1H，d)，7.84(1H，d)，8.12(1H，s)，8.21(1H，s)，8.39(1H，s)，8.69(1H，s)，8.77(1H，s)，9.78(1H，s)，13.29(1H，br s)。LCMS：Rt 2.45分钟(96.3％)，m/z(APCI)393(M+H)+。
化合物41：(6-[吗啉-4-基]吡啶-3-基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]胺
Figure A200780019156D01022
该化合物可以应用化合物120中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)胺制备。LCMS：Rt＝0.80分钟(95％)，m/z(ESI)364(M+H)+。
化合物42：[6-(4-[环丙基甲基]哌嗪-1-基)吡啶-3-基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]胺
Figure A200780019156D01031
该化合物可以应用化合物120中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[6-(4-[环丙基甲基]哌嗪-1-基)吡啶-3-基]胺制备。LCMS：Rt＝0.80分钟(95％)，m/z(ESI)417(M+H)+。
化合物43：[6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]胺
该化合物可以应用化合物120中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基]胺制备。LCMS：Rt＝0.77分钟(95％)，m/z(ESI)405(M+H)+。
化合物44：[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-{6-[4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-基]吡啶-3-基}胺
Figure A200780019156D01041
该化合物可以应用化合物120中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-{6-[4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-基]-吡啶-3-基}胺制备。LCMS：Rt＝0.95分钟(95％)，m/z(ESI)445(M+H)+。
化合物46：{4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基]苯基}-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]胺
该化合物可以应用化合物120步骤4中描述的方法，应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-{4-[4-环丙基甲基)哌嗪-1-基]苯基}胺制备。LCMS：Rt＝1.02(95％)，m/z(ESI)＝444(M+H)+。
化合物47：4-[8-(6-[吗啉-4-基]吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01051
该化合物可以应用化合物167中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)胺制备。LCMS：Rt＝0.85分钟(95％)，m/z(ESI)423(M+H)+。
化合物48：(5-苯并[b]噻吩-3-基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基苯基)胺
Figure A200780019156D01052
该化合物可以应用化合物120中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基苯基)胺和4，4，5，5-四甲基-2-苯并[b]噻吩-3-基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷制备。LCMS：Rt 0.84分钟(95％)，m/z(ESI)402(M+H)+。
化合物50：(4-吗啉-4-基苯基)-(5-噻吩-3-基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)胺
Figure A200780019156D01061
该化合物可以应用化合物120中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基苯基)胺和4，4，5，5-四甲基-2-噻吩-3-基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷制备。LCMS：Rt 1.19分钟(95％)，m/z(ESI)379(M+H)+。
化合物51：[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基]-(5-噻吩-3-基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)胺
Figure A200780019156D01062
该化合物可以应用化合物50中描述的方法，在最后一步中应用(5-溴[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-苯基]胺制备。LCMS：rt＝1.11分钟(95％)，m/z(ESI)420(M+H)+。
化合物52：5-(5-乙基-1H-吡唑-4-基)-N-(4-吗啉代苯基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺
步骤1：3-乙基-1H-吡唑
Figure A200780019156D01063
在搅拌的1-三甲基硅烷基-戊-1-炔-3-酮(0.5g，3.25mmol)和肼硫酸盐(0.56g，4.33mmol)的乙醇(15mL)溶液中加入饱和的Na2CO3(0.52g，4.87mmol)并且将混合物在90℃下回流5小时。将反应混合物用水和盐水稀释并且用***萃取(3x)。将有机层合并，经MgSO4干燥，过滤并且浓缩，得到粗产物，通过硅胶柱色谱法纯化。用90:10石油醚:乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(0.1196g，36％)。
步骤2：4-溴-5-乙基-1H-吡唑
Figure A200780019156D01071
在搅拌的3-乙基-1H-吡唑(0.114g，1.186mmol)的乙酸(2mL)溶液中加入溴(0.061mL，1.186mmol)并且将混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用饱和的NaHCO3碱化，并且用乙酸乙酯萃取(3×)。将有机层合并，经MgSO4干燥，过滤并且浓缩，得到标题化合物(0.180g，87％)。将化合物应用于下一步而无需进一步纯化。
步骤3：4-溴-5-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑和4-溴-3-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑
Figure A200780019156D01072
在催化量的TFA(0.001mL，0.00103mmol)的存在下，将4-溴-5-乙基-1H-吡唑(0.179g，1.032mmol)溶于3，4-二氢-2H-吡喃(0.28mL，3.098mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌3小时，冷却，然后用NaH(1.5mg，0.0061mmol)猝灭。除去溶剂后，将残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用90:10石油醚-乙酸乙酯混合物洗脱。将含有预期化合物的级分收集并且真空浓缩，得到标题化合物(175mg，66％)。
步骤4：5-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑和3-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑
Figure A200780019156D01081
该化合物可以应用化合物86步骤2中描述的方法，应用在二甲亚砜(2mL)中的4-溴-5-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑和4-溴-3-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑(168mg，0.65mmol)、双(频哪醇)二硼(331mg，1.3mmol)、PdCl2dppf(53mg，65μmol)和KOAc(190mg，1.95mmol)制备。将反应混合物通过硅胶柱色谱法纯化，用90:10石油醚:乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(61.1mg，31％)。
步骤5：{5-[5-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基}-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺和{5-[3-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基}-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺
Figure A200780019156D01082
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(水溶液)(0.45mL，0.6mmol)和二噁烷(2.0mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺(0.032g，0.085mmol)、5-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-IH-吡唑和3-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.52mg，0.17mmol)和Pd(PPh3)4(0.025mg，0.021mmol)制备。将反应混合物通过硅胶柱色谱法纯化，用1:1石油醚:乙酸乙酯、随后用1:4石油醚:乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(45mg)。
步骤6：5-(5-乙基-1H-吡唑-4-基)-N-(4-吗啉代苯基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺
Figure A200780019156D01091
将{5-[5-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基}-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺和{5-[3-乙基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基}-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺(40mg，0.077mmol)和浓HCl(0.3mL)的甲醇(10mL)溶液在室温下搅拌5小时。除去溶剂后，将固体残留物在乙酸乙酯和饱和的NaHCO3之间分配。将未溶解的固体通过过滤收集，用水、***和石油醚洗涤并且干燥，得到标题化合物(5mg，17％)。应用0.1M甲磺酸(0.128mL)将其转化为甲磺酸盐，得到标题化合物(5.6mg，89％)，为固体。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)1.13(3H，m)，2.29(3H，s，MsOH)，2.74(2H，m)，3.29(4H，m)，3.77(4H，m)，7.06(2H，m)，7.62(1H，s)，7.89(2H，d)，8.00(1H，s)，8.61(1H，s)，9.83(1H，s)。LCMS：Rt 2.69分钟(98.4％)，m/z(APCI)391(M+H)+。
化合物53：6-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-1，1-二氧代-1，2-二氢-1λ6-苯并[d]异噻唑-3-酮
步骤1：1，1-二氧代-6-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，2-二氢-1λ6-苯并[d]异噻唑-3-酮
Figure A200780019156D01101
该化合物可以应用化合物86步骤2中描述的方法，应用在二噁烷(10mL)中的6-溴-1，1-二氧代-1，2-二氢-1λ6-苯并[d]异噻唑-3-酮(0.5，1.9mmol)、双(频哪醇)二硼(0.53g，2.1mmol)、PdCl2dppf(0.047g，0.058mmol)和KOAc(0.56g，5.7mmol)制备。将溶剂真空除去并且将残留物在DCM和水之间分配。将有机层用饱和的NaHCO3和2M HCl洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且蒸发，得到标题化合物(990mg，169％)，将其应用于下一步而无需进一步纯化。
步骤2：(4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(1，1，3-三氧代-2，3-二氢-1H-1λ6-苯并[d]异噻唑-6-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-氨基甲酸叔丁酯
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(2mL，3mmol)和二噁烷(6mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸叔丁酯(170mg，0.36mmol)、1，1-二氧代-6-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，2-二氢-1λ6-苯并[d]异噻唑-3-酮(374mg，0.72mmol)和Pd(PPh3)4(100mg，0.082mmol)制备。反应混合物通过硅胶柱色谱法纯化，用1:1石油醚:乙酸乙酯，得到仍然不纯的化合物。第二个硅胶柱色谱法，用10:1DCM:MeOH洗脱，得到标题化合物(91mg，44％)。
步骤3：6-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-1，1-二氧代-1，2-二氢-1λ6-苯并[d]异噻唑-3-酮
将在4M HCl(2.5mL)中的(4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(1，1，3-三氧代-2，3-二氢-1H-1λ6-苯并[d]异噻唑-6-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.173mmol)的二噁烷悬浮液在室温下搅拌2小时。将溶剂真空除去并且将残留物用DCM、***和石油醚研磨，得到标题化合物(84mg，100％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)3.25(4H，m)，3.85(4H，m)，7.20(2H，d)，7.88(2H，d)，8.16(1H，d)，8.24(1H，s)，8.58(1H，d)，8.82(2H，s)，8.96(1H，s)，10.31(1H，s)。LCMS：Rt 2.31分钟(95.7％)，m/z(APCI)478(M+H)+。
化合物54：4-{8-[6-(4-[环丙基甲基]哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01112
该化合物可以应用化合物120中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[6-(4-[环丙基甲基]哌嗪-1-基)吡啶-3-基]胺制备。LCMS：Rt＝0.85分钟(95％)，m/z(ESI)476(M+H)+。
化合物55：4-{8-[6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01121
该化合物可以应用化合物167中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基]胺制备。LCMS：Rt＝0.82分钟(95％)，m/z(ESI)464(M+H)+。
化合物56：4-(8-{6-[4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-基]-吡啶-3-基氨基}-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01122
该化合物可以应用化合物167中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-{6-[4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-基]-吡啶-3-基}胺制备。LCMS：Rt＝0.99分钟(95％)，m/z(ESI)504(M+H)+。
化合物57：4-(8-{4-[4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-基]-苯基氨基}-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01131
该化合物可以应用化合物58中描述的方法，应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-{4-[4-(2，2，2-三氟乙基)哌嗪-1-基]苯基}胺制备。LCMS：Rt＝1.07分钟(95％)，m/z(ESI)503(M+H)+。
化合物58：4-{8-[4-(4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01132
该化合物可以应用化合物46中描述的方法，应用2-(氨基羰基)噻吩-4-硼酸制备。LCMS：Rt＝0.93(95％)，m/z(ESI)475(M+H)+。
化合物59：[4-(4-环丙基哌嗪-1-基)苯基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]胺
Figure A200780019156D01141
该化合物可以应用化合物46中描述的方法，应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-环丙基哌嗪-1-基)-苯基]胺制备。LCMS：Rt＝0.84(95％)，m/z(ESI)402(M+H)+。
化合物60：[6-(4-环丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]胺
该化合物可以应用化合物120中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[6-(4-环丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基]胺制备。LCMS：Rt＝0.76分钟(95％)，m/z(ESI)403(M+H)+。
化合物61：4-[8-(4-吗啉-4-基苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]噻唑-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01151
该化合物可以应用化合物73中描述的方法，在步骤3中应用氨(7M在MeOH中)制备。LCMS：Rt＝1.00分钟(95％)，m/z(ESI)423(M+H)+。
化合物62：4-{8-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}噻唑-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01152
该化合物可以应用化合物61中描述的方法，在最后一步中应用(5-溴[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-苯基]胺制备。LCMS：rt＝0.96分钟(95％)，m/z(ESI)464(M+H)+。
化合物63：4-(8-{4-[1-(2，2，2-三氟乙基)哌啶-4-基]苯基氨基}-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)噻吩-2-甲酰胺
步骤1：1-三氟乙酰基-4-(4-硝基苯基)哌啶
将三乙胺(1.0mL，7.3mmol)和4-(4-硝基苯基)哌啶(1.0g，4.8mmol)在DCM(25mL)中、在0℃、N2下搅拌并且加入三氟乙酸酐(0.81mL，5.8mmol)。将混合物搅拌3天，将温度温至室温。然后将溶液用DCM(50mL)稀释并且用水(2×15mL)、NaHCO3(50％饱和水溶液，2×15mL)和盐水(15mL)洗涤。将溶剂经MgSO4干燥并且蒸发，得到预期化合物(1.46g，4.66mmol)。
步骤2：1-(2，2，2-三氟乙基)-4-(4-硝基苯基)哌啶
Figure A200780019156D01161
将1-三氟乙酰基-4-(4-硝基苯基)哌啶(1.42g，4.7mmol)的THF(15mL)溶液在装有冷凝器和恒压加料漏斗的25mL2-颈烧瓶中搅拌。将***用N2冲洗，加入NaBH4(210mg，5.6mmol)并且将烧瓶冷却至0℃。然后历经20分钟滴加碘(600mg，2.3mmol)的THF(5mL)溶液，之后将加样漏斗移去并且将混合物在回流下加热过夜。将产生的淡黄色悬浮液冷却至室温并且小心加入MeOH(1.5mL)，引起气体剧烈释放。蒸发溶剂，得到标题化合物，将其应用而无需进一步纯化。
步骤3：4-[1-(2，2，2-三氟乙基)哌啶-4-基]苯基胺
将甲酸铵(1.38g，22mmol)和10％Pd/C(230mg，0.2mmol)加入到1-(2，2，2-三氟乙基)-4-(4-硝基苯基)哌啶(1.26g，4.4mmol)的EtOH(10mL)和EtOAc(10mL)溶液中。将悬浮液在回流下加热24小时，4小时和8小时后进一步加入部分甲酸胺(2g)。将混合物通过硅藻土过滤并且蒸发，得到橙色固体。将其在DCM(40mL)和水(20mL)之间分配并且将各层分离。将水相用DCM(2×20mL)萃取并且将合并的有机层经MgSO4干燥并且减压蒸发，得到N-{4-[1-(2，2，2-三氟乙基)哌啶-4-基]苯基}甲酰胺，为淡橙色固体(980mg)。
将甲酰胺的MeOH(20mL)溶液在室温下搅拌并且加入HCl(浓的，1mL)。将深紫色溶液在回流下加热1小时，冷却并且将MeOH蒸发。将残留物用水(20mL)搅拌并且加入NaHCO3(饱和的水溶液)直到鼓泡停止。将混合物用DCM(20mL，2×10mL)萃取并且将合并的萃取物经MgSO4干燥并且减压蒸发，得到标题化合物，为橙色固体(870mg)。
应用类似于化合物89中所用的方法，将该物质用于制备4-(8-{4-[1-(2，2，2-三氟乙基)哌啶-4-基]苯基氨基}-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)噻吩-2-甲酰胺。
Figure A200780019156D01171
LCMS：Rt＝2.11分钟(100％)，m/z(ESI)502(M+H)+。
化合物65：5-(8-(4-(2-吗啉代乙氧基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮
步骤1：(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基]-胺
Figure A200780019156D01172
根据化合物6步骤1中描述的方法，将在2-丙醇(6mL)中的5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(0.5g，1.799mmol)、4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基胺(0.6g，4.5mmol)和N，N-二异丙基乙基胺(0.47mL，2.7mmol)在95℃下搅拌过夜。蒸发溶剂后，将残留物溶于DCM中并且用水(2×)和盐水洗涤。将有机层经MgSO4干燥，过滤并且真空浓缩，得到油状物，将其通过硅胶柱色谱法纯化。用97:3 DCM:MeOH混合物洗脱，得到标题化合物(650mg，86％)，为淡黄色固体。LCMS：Rt 2.06分钟(97.7％)。
步骤2：5-(8-(4-(2-吗啉代乙氧基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01181
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(1.02mL，1.53mmol)和二噁烷(3mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基]-胺(80mg，0.19mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(74mg，0.29mmol)和Pd(PPh3)4(55mg，0.047mmol)制备。将反应混合物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM和97:3 DCM:NH3(7M在MeOH中)混合物洗脱。应用***研磨后，将标题化合物分离，为固体(61.9mg，69％)。应用在MeOH中的1M甲磺酸(0.134mL)将物质转化为甲磺酸盐，得到标题化合物(57.1mg)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.40(3H，s，MsOH)，3.25-3.38(2H，m)，3.60-3.78(4H，m)，3.84(2H，t)，4.09(2H，d)，4.45(2H，m)，4.56(2H，s)，7.14(2H，d)，7.90(1H，d)，8.05-8.19(4H，m)，8.28(1H，s)，8.76(1H，br s)，8.79(1H，s)，10.00(1H，br s)，10.16(1H，s)。LCMS：Rt1.98分钟(99.1％)，m/z(APCI)472(M+H)+。
化合物67：N-(2-氟-4-吗啉代苯基)-5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺
步骤1：(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(2-氟-4-吗啉-4-基-苯基)-胺
Figure A200780019156D01191
该化合物可以应用化合物6步骤1中描述的方法，应用在2-丙醇(2mL)中的5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(0.105g，0.89mmol)、2-氟-4-吗啉-4-基-苯基胺(93mg，0.474mmol)、DIPEA(0.123mL，0.706mmol)和1，4-二氮杂二环并[2.2.2]辛烷(53mg，0.472mmol)制备。将反应混合物在DCM和10％柠檬酸水溶液之间分配，将有机层分离并且用10％柠檬酸溶液、水和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且真空浓缩。将标题化合物分离，为淡红色固体(77mg，42％)并且将其应用于下一步而无需进一步纯化。LCMS：Rt 3.48分钟(89％)。
步骤2：N-(2-氟-4-吗啉代苯基)-5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5NNa2CO3(1.09mL，1.62mmol)和二噁烷(3.25mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(2-氟-4-吗啉-4-基-苯基)-胺(80mg，0.203mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(79mg，0.406mmol)和Pd(PPh3)4(59mg，0.051mmol)制备。将反应混合物通过硅胶柱色谱法纯化，用97:3 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱。将含有产物的级分合并并且真空蒸发，得到固体，将其用***和石油醚研磨，得到标题化合物(29mg，38％)。LCMS：Rt 2.90分钟(96％)。
应用0.1M甲磺酸的MeOH(0.762mL，0.076mmol)溶液将其转化为甲磺酸盐，得到标题化合物(35mg)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)2.36(3H，s，MsOH)，3.19(4H，m)，3.79(4H，m)，6.84-6.94(2H，m)，7.54(1H，t)，8.08(1H，s)，8.48(2H，s)，8.76(1H，s)，9.31(1H，s)。LCMS：Rt 2.91分钟(95.4％)，m/z(APCI)381(M+H)+。
化合物70：(4-(8-(4-吗啉代苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)-1H-吡唑-5-基)甲醇
步骤1：4-溴-5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1H-吡唑
Figure A200780019156D01201
将(4-溴-2H-吡唑-3-基)-甲醇(0.64mg，3.63mmol)、叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物(0.82g，5.45mmol)和咪唑(0.42g，6.18mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液在室温下搅拌过夜。将反应混合物用50:50***:乙酸乙酯混合物稀释并且用水(3×)洗涤。将有机层经MgSO4干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用80:20石油醚:乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(1.035g，98％)。
步骤2：4-溴-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑和4-溴-5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑
Figure A200780019156D01211
在催化量的TFA(0.0026mL，0.035mmol)的存在下，将4-溴-5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1H-吡唑(1g，3.45mmol)溶于3，4-二氢-2H-吡喃(0.944mL，10.34mmol)中。将反应混合物在90℃下搅拌18小时，冷却，然后用NaH(4.69mg，0.206mmol)猝灭。除去溶剂后，将残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用95:5石油醚-乙酸乙酯、随后用90:10石油醚-乙酸乙酯混合物洗脱。将含有预期化合物的级分收集并且真空浓缩，得到4-溴-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑和4-溴-5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑(724mg，56％)。
步骤3：{5-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基}-(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸叔丁酯和{5-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基}-(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸叔丁酯
Figure A200780019156D01212
该化合物可以应用化合物35步骤3中描述的方法，应用在DMF(4mL)中的(4-吗啉-4-基-苯基)-(5-三丁基锡烷基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-氨基甲酸叔丁酯(210mg，0.30mmol)、4-溴-3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑和4-溴-5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-吡唑(170mg，0.45mmol)和四(三苯膦)钯(0)(35mg，0.030mmol)制备。将粗化合物通过硅胶柱色谱法纯化，用7:3然后用3:7 石油醚:乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(62.5mg)。
步骤4：(4-(8-(4-吗啉代苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)-1H-吡唑-5-基)甲醇
将{5-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1-(四氢-吡喃-3-基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基}-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺和{5-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-1-(四氢-吡喃-3-基)-1H-吡唑-4-基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基}-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺(53.6mg，0.077mmol)和浓HCl(0.27mL)的MeOH(5mL)溶液在室温下搅拌2小时。除去溶剂后，将残留物在乙酸乙酯和水之间分配。将水层用乙酸乙酯(3×)洗涤并且将合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并且浓缩。将残留物溶于在二噁烷中的4MHCI中，真空浓缩，然后在乙酸乙酯和饱和的NaHCO3之间分配。将有机层经MgSO4干燥，过滤并且真空浓缩，得到粗化合物，将其通过硅胶柱色谱法纯化。用EtOAc和95:5 DCM:MeOH混合物洗脱，将标题化合物分离(5.4mg，18％)。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)3.11(4H，m)，3.79(4H，m)，4.65(2H，d)，5.25和5.53(1H，br s)，6.99(2H，m)，7.84和8.51(1H，br s)，7.92(2H，d)，8.12(1H，d)，8.70(1H，s)，9.74(1H，s)，13.12和13.23(1H，br s)。LCMS：Rt 2.26分钟(96.2％)，m/z(APCI)393(M+H)+。
化合物73：4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻唑-2-甲基甲酰胺
步骤1：2，4-二溴噻唑
将噻唑烷酮(3.43g，29.32mmol)和POBr3(25g，87.96mmol，3当量)在氮气下作为固体混合。然后在搅拌下将反应混合物加热至110℃达3小时，引起深色浆液形成。然后将反应混合物冷却至室温并且非常小心地加入水/冰(200mL)混合物，将产生的灰色悬浮液用***(3×50mL)萃取，将有机层合并，通过硅胶填料过滤并且蒸发，得到标题化合物，为橙色油状物(4g，57％)，将其应用于下一步而无需进一步纯化。
步骤2：4-溴噻唑-2-甲酸乙酯
在0℃下，在二溴噻唑(1g，4.15mmol)的THF(15mL)溶液中滴加iPrMgCl的THF(2M，2.3mL，4.57mmol，1.10当量)溶液。将反应在0℃下搅拌0.25小时。在产生的橙色溶液中通过套管加入在THF(5mL)中的碳酸二乙酯(3mL)。将产生的绿色溶液在室温下进一步搅拌0.5小时，将反应通过加入饱和的NH4Cl猝灭。将标题化合物通过LC纯化，用6/4环己烷/DCM作为洗脱液，得到514.2mg(52％)标题化合物，为淡黄色粉末状固体。
步骤3：4-溴噻唑-2-甲基甲酰胺
将4-溴噻唑-2-甲酸乙酯(500mg，2.13mmol)溶于甲醇(1mL)中并且加入在甲醇(10mL)中的甲基胺。将混合物在室温下搅拌过夜。在减压下蒸发溶剂，得到标题化合物，为黄色固体。LCMS：Rt 0.92分钟(100％)m/z(ESI)219/221(M+H)+。
步骤4：4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻唑-2-甲基甲酰胺
Figure A200780019156D01241
以类似于化合物6步骤3中描述的方法，将4-溴噻唑-2-甲基甲酰胺转化为硼化物(boronate)。然后应用化合物120步骤4中描述的方法制备标题化合物。LCMS：Rt＝1.06分钟(95％)，m/z(ESI)437(M+H)+。
化合物79：5-(8-(6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮
步骤1：4-溴-2-溴甲基-苯甲酸甲酯
Figure A200780019156D01242
将4-溴-2-甲基-苯甲酸(4.6g，21.39mmol)溶于在MeOH中的2 M HCl中并且回流3小时。将溶剂蒸发，得到4-溴-2-甲基-苯甲酸甲酯(4.24g，86％)将该中间体(18.51mmol)溶于四氯化碳(100mL)中并且加入N-溴琥珀酰亚胺(NBS)(5.57g，24.06mmol)。然后加入AIBN(122mg，740μmol)并且将混合物用氮气吹扫5分钟。然后将反应混合物回流4小时。冷却至室温后，将反应混合物过滤并且将滤液蒸发。将残留物通过快速色谱法纯化(硅胶，2:1石油醚/乙酸乙酯)，得到标题化合物(3.42g，60％)。
步骤2：5-溴-2，3-二氢-异吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01251
将4-溴-2-溴甲基-苯甲酸甲酯(0.5g，16.2mmol)用甲醇氨(10mL，在MeOH中的7N NH3)在90℃下处理5分钟。冷却至室温后形成沉淀，通过过滤收集并且用少量甲醇洗涤，得到标题化合物，为无色固体(224mg，65％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)4.41(2H，s)，7.64(1H，d)，7.70(1H，d)，7.87(1H，s)，8.67(1H，br s)。LCMS：Rt 2.49分钟(99.6％)，m/z(APCI)212(M+H)+。
步骤3：5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01252
将5-溴-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(230mg，1.08mmol)、双(频哪醇)二硼(300mg，1.18mmol)、PdCl2dppf(25mg，31μmol)和KOAc(320mg，3.26mmol)悬浮于二噁烷(4mL)中，用氮气吹扫5分钟，然后在85℃下加热过夜。将溶剂真空除去并且将残留物在乙酸乙酯和水之间分配。将水层用乙酸乙酯(3×)萃取并且将合并的有机相用盐水洗涤一次，通过MgSO4过滤并且蒸发。将固体残留物用己烷研磨并且真空干燥，得到标题化合物(185mg，66％)，为灰色固体。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)1.37(12H，s)，4.45(2H，s)，6.38(1H，br s)，7.87(1H，d)，7.93(2H，m)。
步骤4：1-异丙基-4-(5-硝基-吡啶-2-基)-哌嗪
Figure A200780019156D01261
在2-氯-5-硝基吡啶(2.5g，15.7mmol)的THF(25mL)溶液中加入1-异丙基哌嗪(2.01g，15.7mmol)和K2CO3(3.25g，23.6mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌4小时，然后在70℃下搅拌过夜。将溶剂真空除去并且将产生的橙色固体用10:1石油醚-乙酸乙酯研磨。将分离的化合物(3.7g，94％)用于下一步而无需进一步纯化。
步骤5：6-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基-胺
Figure A200780019156D01262
将1-异丙基-4-(5-硝基-吡啶-2-基)-哌嗪(0.9g，3.6mmol)溶于MeOH(20mL)中并且加入二氯化锡(II)二水合物(4g，18mmol)。应用水浴将混合物冷却并且加入浓HCl(4mL)。将反应在室温下搅拌过夜。除去甲醇后，将产生的淡黄色溶液用浓NaOH(pH 11)碱化并且形成白色沉淀物。将固体通过过滤收集并且用***(5×)萃取。将有机层合并，经MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，得到橙色油状物，其放置后结晶，得到橙色固体(0.68g，86％)。
步骤6：5-溴-8-(6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺
该化合物可以应用化合物6步骤1中描述的方法，应用在2-丙醇(2mL)中的5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(0.188g，0.68mmol)、6-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基胺(0.180g，0.816mmol)和N-乙基二异丙基-胺(0.20mL，1.02mmol)制备。将粗物质通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM、随后用95:5 DCM:MeOH，得到标题化合物，为淡棕色固体(260mg，92％)。
步骤5：5-(8-(6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(0.64mL)和二噁烷(2mL)中的5-溴-N-(6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺(50mg，0.12mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(56mg，0.216mmol)和Pd(PPh3)4(35mg，0.03mmol)制备。将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用95:5 DCM:MeOH、随后用90:10 DCM:MeOH洗脱。用10:1正己烷:DCM混合物研磨后获得标题化合物(19mg，34％)。应用0.1M甲磺酸(0.35mL)将其转化为甲磺酸盐，得到标题化合物，为黄色固体(20mg，69％)。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)1.34(6H，d)，2.36(6H，s，2×MsOH)，3.16-3.21(5H，m)，3.57(2H，m)，4.45(2H，d)，4.52(2H，s)，7.11(1H，d)，7.86(1H，d)，8.01(1H，s)，8.10(1H，d)，8.24-8.29(2H，m)，8.72(1H，s)，8.76(1H，s)，8.82(1H，d)，9.39(1H，br s)，10.21(1H，s)。LCMS：Rt 1.92分钟(98.5％)，m/z(APCI)470(M+H)+。
化合物80：3-[8-(4-吗啉-4-基苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-苯并[b]噻吩-7-甲酰胺
步骤1：1-溴-2-(2-乙氧基乙烯基硫烷基)苯
Figure A200780019156D01281
在氮气下，在2-溴苯硫酚(10.50g，55.87mmol)的干燥的DMF(50mL)溶液中小心地加入碳酸钾(9.2mL，61.46mmol，1.10当量)。一旦鼓泡减少，在混合物中加入2-溴-1，1-二乙氧基乙烷(8.46g，61.46mmol，1.10当量)并且在室温下搅拌2小时。将产生的悬浮液倾倒入200mL的冰水中并且用***(3×50mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，溶剂除去后得到标题化合物，为粘稠的橙色油状物，将其应用而无需进一步纯化。
步骤2：7-溴苯并[b]噻吩
Figure A200780019156D01282
将1-溴-2-(2-乙氧基乙烯基硫烷基)苯溶于氯苯(50mL)中并且将溶液加热至70℃。然后小心地加入PPA(10.5mL)并且将两相混合物在150℃下加热过夜。将产生的深色浆液冷却并且将上层溶剂用移液管除去。在残留物中加入氯苯(15mL)并且加热至150℃达30分钟。将溶剂再次除去并且将残留物用少量二氯甲烷洗涤直到洗涤液澄清。将有机级分合并并且经硅藻土过滤，得到澄清黄色溶液。真空浓缩，随后进行LC，用环己烷作为洗脱液，产生标题化合物，为粘稠的无色油状物(1.21g，35％)。
步骤3：苯并[b]噻吩-7-甲酸乙酯
Figure A200780019156D01283
在氮气下，将7-溴苯并[b]噻吩(500mg，2.36mmol)溶于干燥的THF(5.0mL)中。加入镁屑(530mg，2.83mmol，1.20当量)并且将产生的混合物在回流下加热直到镁溶解出现。将产生的混浊黄色溶液冷却至室温并且加入碳酸二乙酯(2mL，过量)并且继续搅拌1小时，加入氯化铵(10％水溶液)。将产生的混合物在DCM和水之间分配并且将水层用DCM萃取。将有机级分合并，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并且吸附到二氧化硅上。通过LC纯化，用8/2环己烷/二氯甲烷作为洗脱液，得到标题化合物，为淡橙色油状物(346.2mg，71％)。
步骤4：苯并[b]噻吩-7-甲酸
Figure A200780019156D01291
在苯并[b]噻吩-7-甲酸乙酯(1.0g，48mmol)的甲醇(10mL)和水(10mL)溶液中加入氢氧化钠(5g，过量)。将溶液在室温下搅拌30分钟，所用的酯被消耗。将反应混合物通过加入6M HCl溶液调节至pH 1，并且用DCM萃取。将合并的有机层通过硅胶填料过滤，得到标题化合物，为黄色固体(505.2mg，59％)。
步骤5：苯并[b]噻吩-7-甲酰胺
将苯并[b]噻吩-7-甲酸(505mg，2.84mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液在室温下搅拌并且加入亚硫酰氯(669mg，5.68mmol，2.0当量)，随后加入DMF(0.06mL)，引起气体放出。将产生的溶液在室温下搅拌1小时。然后在混合物中小心地加入氨水(10mL)，引起剧烈的气体放出。然后将产生的混合物用水(50mL)稀释，并且通过加入饱和的NaHCO3(水溶液)将pH调节至中性。将水层用DCM萃取，并且将有机层合并并且经Na2SO4干燥。在减压下蒸发溶剂，得到标题化合物(纯度81％)，为黄色固体(500mg，98％)，将其应用而无需进一步纯化。
步骤6：3-溴苯并[b]噻吩-7-甲酰胺
Figure A200780019156D01301
将苯并[b]噻吩-7-甲酰胺(500mg，2.82mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液在室温下搅拌并且加入乙酸(5mL)，随后加入NBS(750mg，4.23mmol，1.5当量)。将反应在室温下搅拌1小时，LC-MS分析显示原料全部转化为预期化合物(79％)和二溴化物(21％)。将反应用水(50mL)稀释，用含水亚硫酸氢钾、随后用碳酸氢钠中和。然后将水层用二氯甲烷萃取并且将产生的有机层合并，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并且蒸发。将粗物质通过LC纯化，用DCM作为洗脱液，得到标题化合物，为白色固体(300mg，41％)。
步骤7：3-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并[b]噻吩-7-甲酰胺
Figure A200780019156D01302
将3-溴苯并[b]噻吩-7-甲酰胺(300mg，1.18mmol)的二噁烷(5mL)溶液在氮气下搅拌。加入Pd(dppf)Cl2(29mg，3mol％)、乙酸钾(230mg，2.35mmol，2.0当量)和双频哪醇二硼(450mg，1.77mmol，1.5当量)，并且将反应加热至80℃并且搅拌过夜。将产生的橙色悬浮液用DCM稀释，经硅藻土过滤并且真空浓缩，得到油状物，将其应用于下一步而无需进一步纯化。
步骤8：3-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-苯并[b]噻吩-7-甲酰胺
该化合物可以应用化合物120步骤4中描述的方法制备。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)3.19(4H，br s)，3.76(4H，br s)，5.70(1H，d)，7.12(2H，m)，7.43(1H，t)，7.63(1H，br s)，7.76-7.80(2H，m)，7.92(1H，d)，8.03(1H，d)，8.21(1H，s)，8.28(1H，s)，8.6(1H，s)，10.09(1H，s)。LCMS：Rt＝1.01分钟(95％)，m/z(ESI)472(M+H)+。
化合物81：3-{8-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}苯并[b]噻吩-7-甲酰胺
Figure A200780019156D01312
该化合物可以应用化合物80中描述的方法，在最后一步中应用(5-溴[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-苯基]胺制备。LCMS：rt＝0.94分钟(95％)，m/z(ESI)513(M+H)+。
化合物83：(4-{8-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}吡啶-2-基)甲醇
步骤1：4-溴-2-甲基吡啶-1-氧化物
Figure A200780019156D01321
将4-溴-2-甲基吡啶(5g，29mmol)的DCM(20mL)溶液冷却至0℃并且历经30分钟滴加m-CPBA(7.55g，43.87mmol，1.5当量)。然后移去冰浴并且将混合物在室温下搅拌3小时。将产生的溶液用碳酸氢钠(饱和的水溶液)稀释并且用DCM萃取。将有机层合并，用碳酸氢钠(饱和的水溶液)洗涤，经Na2SO4干燥并且真空浓缩，得到标题化合物，为淡橙色油状物，其无需进一步纯化。
步骤2：乙酸4-溴吡啶-2-基甲酯
Figure A200780019156D01322
在4-溴-2-甲基吡啶-1-氧化物(4.00g，21.40mmol)的DCM(20mL)溶液中加入乙酸酐(6mL)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后在回流下加热过夜。将溶剂真空除去并且将粗产物通过硅胶填料过滤，用DCM洗脱，得到标题化合物，为橙色油状物(815mg)。
步骤3：乙酸4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基甲酯
将乙酸4-溴吡啶-2-基甲酯(800mg，3.49mmol)的二噁烷(5mL)溶液在氮气下搅拌。加入Pd(dppf)Cl2(85mg，3mol％)、乙酸钾(1.03g，10.5mmol，3.0当量)和双频哪醇二硼(1.33g，5.24mmol，1.5当量)，并且将反应在80℃下加热过夜。将产生的橙色悬浮液用DCM稀释，经硅藻土过滤并且真空浓缩，得到油状物，将其应用于下一步而无需进一步纯化。
步骤4：乙酸4-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-吡啶-2-基甲酯
Figure A200780019156D01331
将(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)苯基]胺(300mg，0.723mmol)和Pd(dppf)Cl2(59mg，10mol％)的4/1二噁烷/水(5mL)悬浮液在室温下搅拌并且加入碳酸钾(200mg，1.45mmol，2.0当量)和乙酸4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基甲酯(300mg，1.08mmol，1.5当量)。将产生的混合物在85℃下加热过夜。将产生的溶液在二氯甲烷和水之间分配，并且将有机层浓缩到硅胶上并且通过柱色谱法纯化(98/2 DCM/MeOH)，得到标题化合物，为黄色固体。LCMS：Rt＝0.78分钟(100％)，m/z 445(M+H)+。
步骤5：(4-{8-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}吡啶-2-基)甲醇
Figure A200780019156D01341
将乙酸4-{8-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}吡啶-2-基甲酯在室温下、在10mL的1.5M碳酸钾的甲醇溶液中搅拌过夜。然后通过加入10％柠檬酸水溶液将pH调节至中性并且将混合物用DCM萃取。通过LC纯化，用在MeOH中的98/2 DCM/2M NH3作为洗脱液，得到标题化合物，为黄色粉末(40.3mg，12.5％历经两步)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)1.02(6H，m)，2.33(1H，m)，2.60(4H，br m)，3.10(4H，br m)，4.65(2H，d)，5.51(1H，t)，6.96(2H，d)，7.84-7.89(3H，m)，8.11(1H，s)，8.17(1H，m)，8.61(1H，d)，8.73(1H，m)，10.08(1H，s)。LCMS：Rt＝0.78分钟(100％)，m/z(ESI)445(M+H)+。
化合物84：[4-(1-异丙基哌啶-4-基)苯基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]胺
Figure A200780019156D01342
该化合物可以应用化合物92中描述的方法，在步骤4中应用吡唑-4-硼酸制备。LCMS：Rt 0.89分钟(100％)m/z(ESI)403(M+H)+。
化合物86：4-(8-(6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺
步骤1：4-溴-呋喃-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01351
在4，5-二溴-呋喃-2-甲酸(7.79g，28.85mmol)的NH4OH(100mL)溶液中分小部分加入锌粉(2.29g，34.62mmol)。将反应混合物在室温下搅拌7分钟，然后经硅藻土过滤并且用水和2 M HCI洗涤。应用浓HCl将滤液酸化至pH1并且用乙酸乙酯(3×)萃取。将有机相用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且真空浓缩，得到油状物(4.96g)，其放置后固化，得到白色固体，将其应用而无需进一步纯化。
将固体(4.93g，25.81mmol)溶于亚硫酰氯(44.2mL)中并且回流1小时。真空除去溶剂后将残留物溶于二氯甲烷(75mL)并且加入0.5 M NH3的二噁烷(52mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后加入33％氨水(5mL)，并且将反应再搅拌2小时。将溶剂真空除去并且将残留物溶于饱和的NaHCO3溶液中。将碱溶液用乙酸乙酯(3×)萃取，将合并的有机层经MgSO4干燥并且真空浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化，用(50:49:1)乙酸乙酯:石油醚:乙酸的混合物洗脱，得到标题化合物(1.2g，22％)。
步骤2：4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-呋喃-2-甲酰胺
将4-溴-呋喃-2-甲酰胺(1.2g，6.32mmol)、双(频哪醇)二硼(1.76g，6.94mmol)、PdCl2dppf(0.154g，189mol)和KOAc(1.85g，18.94mmol)悬浮于二噁烷(20mL)中，用氮气吹扫5分钟，然后在90℃下加热过夜。将溶剂真空除去并且将残留物在乙酸乙酯和水之间分配。将水层用乙酸乙酯萃取三次并且将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO4过滤并且蒸发。将固体残留物用己烷研磨并且真空干燥，得到标题化合物，为固体(0.984g，66％)。
步骤3：4-(8-(6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01361
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(0.8mL，1.15mmol)和二噁烷(2mL)中的5-溴-8-(6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺(60mg，0.144mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-呋喃-2-甲酰胺(59mg，0.26mmol)和Pd(PPh3)4(42mg，0.036mmol)制备。蒸发溶剂后，将粗物质通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM、随后用97.5:2.5和95:5 DCM:NH3(7M在MeOH中)。获得标题化合物，为黄色固体(30mg，47％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)1.05(6H，d)，2.54-2.59(4H，m)，2.70-2.74(1H，m)，3.47(4H，m)，6.90(1H，d)，7.60(1H，br s)，7.91(1H，s)，7.99(1H，br s)，8.12(1H，dd)，8.19(1H，s)，8.68(1H，s)，8.75(1H，s)，8.81(1H，s)，10.03(1H，s)。LCMS：Rt 2.64分钟(98.1％)，m/z(APCI)406(M+H)+。LCMS：Rt 2.74分钟(93％)，m/z(ES+)448(M+H)+。
化合物88：4-(8-(4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺
步骤1：1-异丙基-4-(4-硝基-苯基)-哌嗪
Figure A200780019156D01371
在4-氟硝基苯(5g，35.4mmol)的THF(50mL)溶液中加入1-异丙基哌嗪(4.54g，35.4mmol)和K2CO3(7.35g，53.2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将溶剂真空除去并且将残留物在EtOAc和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且浓缩。将粗化合物通过硅胶柱色谱法纯化，用99:1和98:2 DCM:NH3(7M在MeOH中)，得到标题化合物(8.2g，94％)。
步骤2：4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基胺
Figure A200780019156D01372
将1-异丙基-4-(4-硝基-苯基)-哌嗪(8.3g，33.2mmol)溶于MeOH(120mL)中并且加入二氯化锡(II)二水合物(37.4g，0.165mol)。将混合物用水浴冷却并且加入浓HCl(36mL)。将反应在室温下搅拌过夜。除去甲醇后，将产生的溶液用浓NaOH(pH 11)碱化。将水相用***萃取(3×)并且将有机层合并，经MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，得到标题化合物(6.4g，88％)。
步骤3：(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺
该化合物可以应用化合物6步骤1中描述的方法，应用在2-丙醇(30mL)的5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(2g，7.20mmol)、4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基胺(1.89g，8.62mmol)和N，N-二异丙基乙基胺(1.88mL，10.8mmol)在95℃下搅拌过夜制备。用***和石油醚研磨后将标题化合物分离，为灰色固体(2.59g，87％)。
步骤4：4-(8-(4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01382
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(水溶液)(1.143mL，1.71mmol)和二噁烷(4mL)中的5-溴-N-(6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-胺(80mg，0.21mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-呋喃-2-甲酰胺(101mg，0.42mmol)和Pd(PPh3)4(62mg，0.053mmol)制备。将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM和97:3 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱。用***研磨后将标题化合物分离(35.4mg，42％)。应用在MeOH(0.0793mL)中的1M甲磺酸将其转化为甲磺酸盐，获得标题化合物，为固体(35mg)。
H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)1.35(6H，d)，2.35(3H，s，MsOH)，3.01(2H，t)，3.22-3.35(2H，m)，3.58(3H，m)，3.88(2H，d)，7.09(2H，d)，7.61(1H，br s)，7.94(2H，m)，8.00(1H，br s)，8.22(1H，s)，8.76(1H，s)，8.82(1H，s)，9.27(1H，br s)，10.02(1H，s)。LCMS：Rt 2.02分钟(98.9％)，m/z(APCI)447(M+H)+。
化合物89：4-{8-[4-(1-异丙基哌啶-4-基)苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺
该化合物可以应用化合物92中描述的方法，在步骤4中应用2-(氨基羰基)噻吩-4-硼酸制备。LCMS：Rt 0.94分钟(100％)m/z(ESI)462(M+H)+。
化合物90：(4-{8-[6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}吡啶-2-基)甲醇
Figure A200780019156D01392
该化合物可以应用化合物83中描述的方法，在步骤4中应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[6-(4-异丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基]胺制备。LCMS：Rt＝0.71分钟(95％)，m/z(ESI)446(M+H)+。
化合物92：5-{8-[4-(1-异丙基哌啶-4-基)苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢异吲哚-1-酮
步骤1：1-异丙基-4-(4-硝基苯基)哌啶
Figure A200780019156D01401
将4-(4-硝基苯基)哌啶(250mg，1.21mmol)、K2CO3(170mg，1.21mmol)和2-碘丙烷(240μL，2.4mmol)在乙腈(3mL)中，在密封的试管中，在120℃下搅拌45分钟。将混合物冷却并且将溶剂在减压下除去。将残留物在DCM(20mL)和水(5mL)之间分配，将各层分离并且用水(5mL)和盐水(5mL)洗涤DCM，并且经MgSO4干燥。将溶剂蒸发，得到标题化合物(300mg)，将其应用而无需进一步纯化。
步骤2：4-(1-异丙基哌啶-4-基)苯基胺
Figure A200780019156D01402
将肼(35％重量在水中，0.67mL，7.2mmol)和10％Pd/C(38mg，0.03mmol)加入到1-异丙基-4-(4-硝基苯基)哌啶(180mg，0.72mmol)的EtOH(10mL)溶液中并且将混合物在回流下加热3小时。冷却后，将混合物通过硅藻土过滤并且将溶剂蒸发。将残留物重新溶于DCM(25mL)中，经MgSO4干燥并且将溶剂蒸发，得到预期化合物，为淡黄色固体(113mg，0.52mmol)，将其应用而无需进一步纯化。
步骤3：(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(1-异丙基哌啶-4-基)苯基]胺
Figure A200780019156D01411
将N，N-二异丙基乙基胺(200μL，1.2mmol)加入到4-(1-异丙基哌啶-4-基)苯基胺(220mg，1.0mmol)和5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(280mg，1.0mmol)在iPrOH(5mL)中的混合物中并且在回流下加热48小时。将混合物冷却并且将溶剂在减压下蒸发，得到橙-棕色固体。将其在DCM(50mL)和水(20mL)之间分配并且将各层分离。将有机相用柠檬酸(10％水溶液，3×25mL)洗涤。将合并的洗涤液用DCM(25mL)萃取，然后通过加入NaHCO3(固体)将其碱化。将混合物用DCM(3×25mL)萃取，将合并的萃取液经MgSO4干燥并且蒸发。将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用在DCM中的5％-10％MeOH洗脱，得到预期化合物，混有原料苯胺。将其从MeOH重结晶，得到纯标题化合物(110mg)。
以类似于化合物79步骤4中描述的方法，该物质可以用于制备5-{8-[4-(1-异丙基哌啶-4-基)苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢异吲哚-1-酮。
LCMS：Rt 0.91分钟(100％)m/z(ESI)468(M+H)+。
化合物100：1-(4-(5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)苯基)哌嗪-2-酮
步骤1：4-(4-氨基-苯基)-3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
将对-碘-苯胺(918mg，4.8mmol)、3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(960mg，4.2mmol)、(1R，2R)-环己烷-1，2-二胺(0.05mL，0.42mmol)、碘化铜(I)(14.9mg，0.0042mmol)和K2CO3(1.19g，2.04mmol)的二噁烷(4mL)悬浮液在反应管中用氮气吹扫5分钟。将试管密封并且将反应混合物在119℃下加热15小时。冷却至室温后，将反应混合物经硅胶柱过滤，用乙酸乙酯(40mL)洗涤。将滤液真空浓缩，得到标题化合物，为棕色液体(1.06g，87％)。LCMS：Rt 0.88分钟(91％)。
步骤2：1-[4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯基]-哌嗪-2-酮
Figure A200780019156D01422
该化合物可以应用化合物6步骤1中描述的方法，应用在2-丙醇(1mL)中的5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(0.283g，1.00mmol)、4-(4-氨基-苯基)-3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.300g，1.00mmol)和N-乙基二异丙基-胺(0.20mL，1.02mmol)制备。将粗物质通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM、随后用98:2 DCM:MeOH洗脱，得到4-[4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯基]-3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为白色固体(0.252g，51％)。
将4-[4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯基]-3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.252mg，0.6mmol)的2:1 DCM:TFA(4.8mL)溶液在室温下搅拌1小时。然后将混合物用DCM稀释并且用饱和的NaHCO3碱化。将水层用DCM(3×)萃取并且将有机层合并，经MgSO4干燥，过滤并且浓缩，得到标题化合物，为固体(180mg，78％)。
步骤3：1-(4-(5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)苯基)哌嗪-2-酮
Figure A200780019156D01431
该化合物可以应用化合物1步骤5中描述的方法，应用在2mL的3:1DMF/水中的1-[4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯基]-哌嗪-2-酮(70mg，0.18mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(64mg，0.33mmol)、Pd(PPh3)4(21mg，18μmol)和NaOtBu(70mg，0.72mmol)制备。将反应混合物在真空下浓缩并且将残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用梯度99:1至90:10 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱。将标题化合物分离，为淡绿色固体(13mg，19％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)3.05(2H，m)，3.42(2H，s)，3.62(2H，m)，7.32(2H，d)，8.07(2H，d)，8.26(1H，s)，8.39(1H，br s)，8.67(1H，br s)，8.81(1H，s)，10.05(1H，s)，13.32(1H，br s)。LCMS：Rt 6.98分钟(92.4％)，m/z(APCI)376(M+H)+。
化合物102：5-{8-[4-(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮
步骤1：1-叔丁基-4-(4-硝基-苯基)-哌嗪
Figure A200780019156D01432
在1-氟-4-硝基-苯(314mg，2.23mmol)和4-叔丁基-哌嗪(1g，3.34mmol)的二噁烷(15mL)溶液中加入K2CO3(1.65mg，11.9mmol)并且将反应在130℃下搅拌过夜。将溶剂真空蒸发并且将残留物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且浓缩，得到粗化合物。通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM、随后用99:1 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物(348mg，55.4％)。LCMS：Rt 3.87分钟(99％)。
步骤2：4-(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-苯基胺
Figure A200780019156D01441
将1-叔丁基-4-(4-硝基-苯基)-哌嗪(348mg，1.32mmol)溶于MeOH(10mL)中并且加入二氯化锡(II)二水合物(1.08g，4.79mmol)。应用水浴将混合物冷却并且加入浓HCI(3mL)。将反应在40℃下搅拌过夜。除去甲醇后，将产生的溶液用浓NaOH(pH 11)碱化。将水相用***(3×)萃取并且将有机层合并，经MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，得到标题化合物(308mg，99％)，将其应用于下一步而无需进一步纯化。LCMS：Rt 2.16分钟(87％)。
步骤3：(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺
Figure A200780019156D01442
该化合物可以应用化合物6步骤1中描述的方法，应用在2-丙醇(5mL)中的5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(0.308g，1.107mmol)、4-(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-苯基胺(0.310g，1.33mmol)和N-乙基二异丙基-胺(0.289mL，1.66mmol)制备。将反应混合物在DCM和1N NaOH之间分配，将有机层分离并且用水和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且真空浓缩。用***和石油醚研磨残留物，得到标题化合物(440mg，92％)，为膏状固体。LCMS：Rt 2.25分钟(96％)。
步骤4：5-{8-[4-(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01451
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(水溶液)(1.24mL)和二噁烷(3.7mL)中的(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺(100mg，0.232mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(90mg，0.32mmol)和Pd(PPh3)4(67mg，0.058mmol)制备。将反应混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配，将有机层分离，经MgSO4干燥，过滤并且真空蒸发。将残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用98:2 DCM:NH3(7M在MeOH中)、随后用95:5 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到固体，将其用***和石油醚研磨，得到标题化合物(71mg，63％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)1.43(9H，s)，2.36(3H，s，MsOH)，3.02(2H，m)，3.19-3.26(2H，m)，3.67(2H，d)，3.90(2H，d)，4.52(2H，s)，7.10(2H，d)，7.86(1H，d)，7.96-8.01(3H，m)，8.10(1H，d)，8.24(1H，s)，8.72(1H，s)，8.75(1H，s)，9.09(1H，br s)，10.09(1H，s)。LCMS：Rt 2.07分钟(99％)，m/z(APCI)483(M+H)+。
化合物105：5-{8-[4-(2-氧代-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮
步骤1：3-氧代-4-{4-[5-(1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure A200780019156D01461
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(水溶液)(1.3mL，1.92mmol)和二噁烷(2.5mL)中的4-[4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯基]-3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(115mg，0.24mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(92mg，0.35mmol)和Pd(PPh3)4(83mg，0.072mmol)制备。将反应混合物用盐水稀释，然后加入甲苯并且形成沉淀并且通过过滤收集。将产生的固体溶于DCM中并且经硅胶柱过滤，得到标题化合物，为黄色固体(60mg，47％)。
步骤2：5-{8-[4-(2-氧代-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01471
将3-氧代-4-{4-[5-(1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(59mg，0.1mmol)的3:1DCM:TFA(1.2mL)溶液在室温下搅拌1小时。将反应混合物用DCM稀释并且用饱和的NaHCO3碱化。将水层用DCM(3×)萃取并且将有机层合并，经MgSO4干燥，过滤并且真空浓缩，得到标题化合物，为黄色固体(38mg，86％)。1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)3.07(2H，m)，3.44(2H，s)，3.64(2H，m)，4.50(2H，s)，7.32(2H，d)，7.83(1H，d)，8.04-8.10(4H，m)，8.22(1H，s)，8.70(1H，br s)，8.74(1H，s)，10.25(1H，s)。LCMS：Rt 7.17分钟(93.7％)，m/z(APCI)441(M+H)+。
化合物108：7-氟-5-{8-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢异吲哚-1-酮
步骤1：4-溴-2，6-二氟苯甲酸甲酯
Figure A200780019156D01472
在4-溴-2，6-二氟-苯甲酸(5g，21mmol)的DCM(10mL)悬浮液中加入亚硫酰氯(15mL)和DMF(0.5mL)。将混合物在室温下搅拌2.5小时。然后将其冷却至0℃并且小心地加入MeOH(20mL)，引起剧烈的HCl放出。再搅拌0.5小时后，将澄清的溶液在DCM(50mL)和水(50mL)之间分配。将有机层用饱和的NaHCO3、盐水洗涤，经MgSO4干燥并且将溶剂真空除去，得到标题化合物，为淡黄色油状物，将其应用而无需进一步纯化。
步骤2：4-溴-2-氟-6-(硝基甲基)苯甲酸甲酯
Figure A200780019156D01481
在室温下，将硝基甲烷(10mL，169mmol，8当量)小心地加入到氢化钠(4.05g，169mmol，8当量)和MgSO4(40g)的DMSO(100mL)悬浮液中并且将产生的浆液搅拌0.25小时。在产生的黄色浆液中加入4-溴-2，6-二氟苯甲酸甲酯(5.3g，21mmol)并且将混合物在室温下搅拌3天，所有原料被消耗。加入水(200mL)和6 M HCl(50mL)，随后加入DCM(200mL)。加入更多的水(500mL)以产生澄清的两相体系。将水层用DCM(3×100mL)萃取，然后将DCM层合并，用饱和的NaHCO3和盐水洗涤并且经MgSO4干燥。蒸发溶剂，得到橙色固体，其含有64％的预期物质，将其应用而无需进一步纯化。LCMS：Rt＝1.27分钟(64％)。
步骤3：5-溴-7-氟-2，3-二氢-异吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01482
将上一步制备的粗4-溴-2-氟-6-(硝基甲基)苯甲酸甲酯溶于MeOH(100mL)中。在该澄清溶液中加入锌粉(3.35g，51.3mmol，3当量)，随后加入甲酸铵(3.23g，51.3mmol，3当量)，其引起放热反应。0.3小时后，加入在MeOH(50mL)中的7M NH3并且将混合物在室温下搅拌过夜。将产生的混合物经硅藻土过滤，并且将黄色滤液吸附到二氧化硅上并且通过LC粗略纯化，用94/6D CM/MeOH 7M NH3。除去溶剂，得到棕褐色固体，将其重新溶于DCM中，用10％NaOH洗涤，并且在减压下浓缩，得到白色固体，将其进一步用少量DCM研磨，得到标题化合物。LCMS：Rt 0.96分钟(100％)m/z 230/232(M+H)+。
步骤4：7-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢异吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01491
将5-溴-7-氟-2，3-二氢异吲哚-1-酮(531mg，2.31mmol)的二噁烷(5mL)溶液在氮气下搅拌。加入Pd(dppf)Cl2(94mg，5mol％)、乙酸钾(453mg，4.62mmol，2.0当量)和双频哪醇二硼(1.17g，4.62mmol，2当量)，并且将反应在80℃下加热3小时。将产生的橙色悬浮液用DCM稀释，经硅藻土过滤并且真空浓缩，得到油状物，将其重新溶于少量DCM中。缓慢加入***，得到标题化合物，为棕褐色固体。LCMS：Rt 1.18分钟(100％)m/z277/279(M+H)+。
步骤5：7-氟-5-{8-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢异吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01492
该化合物可以应用化合物91中描述的方法，应用上述硼化物制备。LCMS：Rt＝0.90分钟(95％)，m/z 487(M+H)+。
化合物112：5-(8-(4-(4-异丙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮
步骤1：1-[4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯基]-4-异丙基-哌嗪-2-酮
Figure A200780019156D01501
在1-[4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯基]-哌嗪-2-酮(实施例31，步骤2)(180mg，0.47mmol)的MeOH(4mL)溶液中加入乙酸(0.03mL，0.47mmol)、NaOAc(38mg，0.47mmol)和丙酮(0.2mL，1.18mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后加入NaCNBH3(60mg，0.94mmol)并且将混合物在40℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用浓HCl(pH1)酸化并且真空浓缩。将残留物在6N NaOH和DCM之间分配。将水层用DCM(3×)萃取并且将合并的有机层经MgSO4干燥并且真空浓缩，得到粗化合物，将其通过硅胶柱色谱法纯化。用DCM和98:2 DCM:MeOH洗脱，得到标题化合物，为黄色固体(45mg，25％)。
步骤2：5-(8-(4-(4-异丙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MNa2CO3(水溶液)(0.5mL，0.75mmol)二噁烷(1.2mL)中的1-[4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯基]-4-异丙基-哌嗪-2-酮(40mg，0.09mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(37mg，0.14mmol)和Pd(PPh3)4(31mg，0.027mmol)制备。将反应混合物用盐水稀释，然后加入甲苯并且形成沉淀并且通过过滤收集。将滤液用***、石油醚和MeOH洗涤，然后通过硅胶柱色谱法纯化。用99:1DCM:NH3(7M在MeOH中)、随后用98:2和95:5 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物，为黄色固体(24mg，55％)。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)1.08(6H，d)，2.73-2.87(3H，m)，3.27(2H，s)，3.62-3.68(2H，m)，4.52(2H，s)，7.36(2H，d)，7.84(1H，d)，8.07-8.10(4H，m)，8.25(1H，s)，8.70(1H，br s)，8.77(1H，s)，10.28(1H，s)。LCMS：Rt 1.94分钟(95.2％)，m/z(APCI)483(M+H)+。
化合物114：5-{8-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-3，3-二甲基-2，3-二氢异吲哚-1-酮
步骤1：5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-3，3-二甲基-2，3-二氢异吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01511
将氢化钠(130mg，60％分散于矿物油中，3.2mmol)和四正丁基碘化铵(243mg，0.68mmol)的THF(20mL)悬浮液在室温下搅拌并且加入5-溴-2，3-二氢异吲哚-1-酮(675mg，3.2mmol)的THF(20mL)和DMF(4mL)溶液。75分钟后加入4-甲氧基苄基溴(460μL，3.2mmol)并且继续搅拌4小时。然后加入氢化钠(635mg，60％分散于矿物油中，15.9mmol)并且继续搅拌30分钟，然后加入碘甲烷(1.19mL，19mmol)并且将混合物加热至70℃达30分钟。冷却后加入NH4Cl(饱和的水溶液)并且将混合物用乙酸乙酯(120mL)稀释。将各层分离，将有机相经MgSO4干燥并且将溶剂在减压下除去。将残留物通过硅胶色谱法纯化，用在石油醚中的5％至10％乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(640mg，1.78mmol)。
步骤2：5-溴-3，3-二甲基-2，3-二氢异吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01521
将5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-3，3-二甲基-2，3-二氢异吲哚-1-酮(640mg，1.78mmol)和硝酸铵高铈(2.91g，5.33mmol)的乙腈(11mL)和水(5mL)溶液在0℃下搅拌45分钟。将溶液用乙酸乙酯(100mL)稀释并且用盐水(40mL)洗涤。将有机溶剂经MgSO4干燥并且在减压下蒸发。将残留物通过硅胶色谱法纯化，用在石油醚中的10％至50％乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(367mg，1.53mmol)。
步骤3：5-{8-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-3，3-二甲基-2，3-二氢异吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01522
以类似于化合物6步骤3中的方法，将5-溴-3，3-二甲基-2，3-二氢异吲哚-1-酮转化为相应的硼化物。然后将其用于制备标题化合物，其是应用化合物120步骤4中描述的方法，由(5-溴[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-苯基]胺获得的。LCMS：Rt＝0.92(100％)，m/z＝497(M+H)+。
化合物118：4-(5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)苯甲酰胺
步骤1：4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯甲酸甲酯
Figure A200780019156D01531
该化合物可以应用化合物6步骤1中描述的方法，应用在2-丙醇(2.5mL)中的5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(250mg，0.90mmol)、4-氨基苯甲酸甲酯(163mg，1.08mmol)和N-乙基二异丙基-胺(0.19mL，1.08mmol)制备。用2-丙醇研磨后获得标题化合物，为棕色固体(148mg，47％)。
步骤2：4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯甲酸
Figure A200780019156D01532
将4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯甲酸甲酯(460mg，1.32mmol)悬浮于THF(11mL)中并且加入氢氧化锂一水合物(554mg，13.2mmol)的水(11mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌4小时，然后加入甲醇(11mL)并且将混合物在50℃下搅拌24小时。将混合物在水和DCM之间分配，将水相用2M HCl(pH 2)酸化并且形成黄色沉淀。将沉淀通过过滤收集，用水和***洗涤并且干燥，得到标题化合物(215mg，49％)。
步骤3：4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-N-吡啶-3-基甲基-苯甲酰胺
Figure A200780019156D01533
将4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-苯甲酸(0.230g，0.69mmol)、3-羟基苯并***(0.103g，0.76mmol)、1-乙基-3-(3’-二甲基氨基丙基)碳二亚胺水合物(0.146g，0.76mmol)的DMF(5mL)和3-吡啶甲基胺(0.077mL，0.76mmol)溶液在室温下搅拌21小时。将溶剂真空除去并且将残留物用***、乙酸乙酯和二氯甲烷研磨。获得淡黄色固体，用水洗涤并且干燥，得到标题化合物(241mg，82％)。
步骤4：4-(5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)苯甲酰胺
Figure A200780019156D01541
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MK2CO3(水溶液)(1.4mL)和二噁烷(2.5mL)中的4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-N-吡啶-3-基甲基-苯甲酰胺(100mg，0.24mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(93mg，0.48mmol)和Pd(PPh3)4(70mg，0.06mmol)制备。将粗物质通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM、随后用98:2、然后96:4、然后90:10 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物，为白色固体(19.6mg，20％)。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)4.52(2H，d)，7.40(1H，m)，7.78(1H，d)，7.93(2H，d)，8.18(2H，d)，8.32(1H，s)，8.48-8.62(4H，m)，8.82(1H，s)，9.01(1H，t)，10.21(1H，br s)，13.3(1H，br s)。LCMS：Rt 1.86分钟(93％)，m/z(ES+)412(M+H)+。
化合物119：4-(5-(2-氧代-1，2-二氢吡啶-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)苯甲酰胺
步骤1：4-[5-(2-甲氧基-吡啶-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-N-吡啶-3-基甲基-苯甲酰胺
Figure A200780019156D01551
该化合物可以应用化合物6步骤4中描述的方法，应用在1.5MK2CO3(水溶液)(1.6mL)和二噁烷(2.9mL)中的4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-N-吡啶-3-基甲基-苯甲酰胺(120mg，0.28m mol)、2-甲氧基吡啶-4-硼酸(87mg，0.57mmol)和Pd(PPh3)4(81mg，0.07mmol)制备。将粗物质通过硅胶柱色谱法纯化，用DCM、随后用99:1、然后97:3、然后95:5 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，得到标题化合物，为白色固体(92.6mg，73％)。
步骤2：4-(5-(2-氧代-1，2-二氢吡啶-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-N-(吡啶-3-基甲基)苯甲酰胺
将4-[5-(2-甲氧基-吡啶-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-N-吡啶-3-基甲基-苯甲酰胺(71.5mg，0.16mmol)和盐酸吡啶鎓(91mg，0.79mmol)在水(0.5mL)中的混合物在密封的试管中、在150℃下加热25分钟。然后将溶剂真空除去。将残留物进行硅胶色谱，用DCM、随后用98:2和90:10 DCM:NH3(7M在MeOH中)洗脱，将包含预期产物的级分合并并且蒸发。将标题化合物分离，为黄色固体(34.5mg，49％)。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ(ppm)4.52(2H，d)，6.82(1H，m)，7.22(1H，s)，7.38(1H，m)，7.51(1H，d)，7.78(2H，d)，8.18-8.23(3H，m)，8.51(1H，d)，8.62(1H，s)，8.82(1H，s)，9.01(1H，t)，10.58(1H，br s)，11.8(1H，br s)。LCMS：Rt 1.72分钟(97％)，m/z(ES+)439(M+H)+。
化合物120：2-甲氧基-N-(6-甲基吡啶-3-基)甲基-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺
步骤1：2-甲氧基-N-(6-甲基吡啶-3-基)甲基-4-硝基苯甲酰胺
将2-甲氧基-4-硝基苯甲酸(293mg，1.49mmol)溶于DMF(2mL)和4-甲基吗啉(220μL，3.0mmol)中并且加入TBTU(1.79g，1.7mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟并且加入C-(6-甲基吡啶-3-基)甲基胺(400mg，3.27mmol)。在室温下继续搅拌12小时。加入DCM(10mL)并且将有机相用Na2CO3(5％水溶液)、HCl(3％水溶液)和水洗涤，然后经Na2SO4干燥。蒸发溶剂后，将残留物用醚-己烷研磨，得到标题化合物，为白色固体。
步骤2：4-氨基-2-甲氧基-N-[(6-甲基吡啶-3-基)甲基]苯甲酰胺
将2-甲氧基-N-(6-甲基吡啶-3-基)甲基-4-硝基苯甲酰胺(448mg，1.49mmol)的EtOH和EtOAc(每种8mL)溶液搅拌并且加入甲酸铵(375mg，6mmol)和10％Pd/C(100mg)。将混合物在回流下加热20分钟，冷却，经硅藻土过滤，将固体用EtOH洗涤并且将合并的溶剂蒸发，得到标题化合物。
步骤3：4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-2-羟基-N-[(6-甲基-吡啶-3-基)甲基]苯甲酰胺
Figure A200780019156D01571
将5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(285mg，1.03mmol)和4-氨基-2-甲氧基-N-[(6-甲基吡啶-3-基)甲基]苯甲酰胺(280mg，1.03mmol)在iPrOH(5mL)中搅拌并且加入HBr(48％水溶液，380μL)。将混合物在回流下加热24小时。将冷却的悬浮液倾倒入NaHCO3(饱和的水溶液，25mL)和水(25mL)中并且用CHCl3(4×30mL)萃取。将萃取物经MgSO4干燥并且蒸发。将残留物通过柱色谱法纯化，用10％CH2Cl2/MeOH洗脱。将含有产物的级分蒸发并且将残留物用MeOH研磨，得到标题化合物，为棕色固体。
步骤4：2-甲氧基-N-(6-甲基吡啶-3-基)甲基-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺
Figure A200780019156D01572
将吡唑-4-硼酸(19mg，0.17mmol)、4-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-2-羟基-N-[(6-甲基-吡啶-3-基)甲基]苯甲酰胺(40mg，0.085mmol)、K2CO3(24mg，0.17mmol)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(4mg，0.005mmol)称重倒入可密封的试管中。将试管用氮气冲洗并且加入二噁烷-水(4:1，4mL)。将试管密封，在氮气流下放入超声浴中30秒，然后放入85℃的油浴中。将反应搅拌28小时，在2小时和18小时后加入另外部分的硼酸(10mg)和催化剂(2mg)。将粗混合物吸附到SiO2上并且通过柱色谱法纯化，用1％-10％MeOH/DCM洗脱。将获得的产物重新溶于MeOH/DCM(4:1，10mL)中并且加入0.1M MsOH/MeOH(2当量)，将溶剂蒸发并且将残留物溶于水中并且冻干，得到标题化合物，为二甲磺酸盐(38mg)。LCMS：Rt 0.92分钟(93.9％)m/z(ESI)455(M+H)+。
化合物122：N-苄基-2-甲氧基-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺
Figure A200780019156D01581
该化合物可以应用化合物120中描述的方法，在步骤1中应用苄基胺制备。LCMS：Rt 1.62分钟(100％)m/z(ESI)440(M+H)+。
化合物124：N-吡啶-2-基甲基3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]苯甲酰胺
该化合物可以应用化合物129中描述的方法，在步骤5中应用2-吡啶基甲基胺制备。LCMS：Rt＝0.84分钟(100％)，m/z(ESI)412(M+H)+。
化合物127：(4-异丙基哌嗪-1-基)-{3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]苯基}甲酮
Figure A200780019156D01591
该化合物可以应用化合物129中描述的方法，在步骤5中应用4-异丙基哌嗪制备。LCMS：Rt＝0.84分钟(100％)，m/z(ESI)432(M+H)+。
化合物129：N-乙基3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]苯甲酰胺
步骤1：3-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)苯甲酸乙酯
Figure A200780019156D01592
将5，8-二溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪(1.39g，5.00mmol)和3-氨基苯甲酸乙酯(0.93g，5.60mmol)在iPrOH(10mL)中搅拌并且加入HBr(48％水溶液，1.14mL，10mmol)。将混合物在85℃下加热4小时，然后冷却至室温并且用NaHCO3(饱和水溶液，25mL)猝灭。将产生的悬浮液冷却至0℃并且将白色固体通过抽滤收集并且用水(10mL)洗涤。将粗产物溶于EtOH中并且将溶剂蒸发，得到标题化合物，为类白色固体(1.79g，4.9mmol)，将其应用而无需进一步纯化。
步骤2：3-[(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-叔丁氧基羰基-氨基]苯甲酸乙酯
将3-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)苯甲酸乙酯(1.79g，4.93mmol)的DCM(20mL)溶液在N2下，在室温下搅拌并且加入BOC2O(1.34g，6.16mmol)和DMAP(0.30g，2.46mmol)。继续搅拌2小时，直到LCMS指示原料完全转化。将混合物过滤并且将滤液用稀柠檬酸(pH 6，5mL)和盐水(5mL)洗涤并且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂，得到标题化合物，为黄色油状物(1.87g，4.0mmol)，将其应用而无需进一步纯化。
步骤3：3-{叔丁氧基羰基-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺}苯甲酸乙酯
Figure A200780019156D01601
将氮气鼓入3-[(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-叔丁氧基羰基-氨基]苯甲酸乙酯(0.58g，1.25mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.49g，2.50mmol)、K2CO3(0.35g，2.50mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(102mg，0.125mmol)在二噁烷(37.5mL)和水(9.6mL)中的混合物中。将冷凝器安装到烧瓶上，将体系抽真空并且用N2(气体)吹扫，然后在115℃下加热25分钟。将加热浴移去并且加入CO2(固体)以冷却并且缓冲体系。将溶剂在减压下除去并且将残留物通过硅胶色谱法纯化，用在DCM中的10％至50％乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物，为橙色油状物(0.61g，>100％)，将其应用而无需进一步纯化。
步骤4：3-{叔丁氧基羰基-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-氨基}苯甲酸
Figure A200780019156D01611
将不纯的3-{叔丁氧基羰基-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-氨基}苯甲酸乙酯(0.61g，1.25mmol)溶于THF(2.5mL)中并且加入KOH(2M水溶液，2.5mL，5mmol)并且将混合物在60℃下加热过夜。将溶液冷却并且经硅藻土过滤，用水冲洗。将滤液倾倒入柠檬酸(2M水溶液，2.5mL)中并且在0℃下搅拌。将产生的固体通过抽滤收集，用水洗涤并且通过悬浮于EtOH中干燥并且在减压下蒸发，得到棕色胶状物(280mg)。
进一步的产物通过用DCM萃取滤液来获得，得到合并的总量352mg的标题化合物。将其应用而无需进一步纯化。
步骤5：N-乙基3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]苯甲酰胺
Figure A200780019156D01612
将3-{叔丁氧基羰基-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-氨基}苯甲酸(42mg，0.10mmol)、乙基胺(12M水溶液，42μL，0.50mmol)和三乙胺(28μL，0.20mmol)在DMF(0.30mL)中搅拌并且加入PyBOP(57mg，0.11mmol)。继续搅拌过夜。将反应混合物在EtOAc(7mL)和NaHCO3(饱和的水溶液，7mL)之间分配并且将各层分离。将合并的有机层用盐水(2×5mL)洗涤并且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂，得到油状物，将其溶于含有HCl(12M水溶液，0.15mL)的MeOH(0.3mL)中并且搅拌过夜。加入三乙胺(0.25mL)和EtOH(0.3mL)并且将溶剂在减压下除去。将残留物通过制备HPLC纯化，得到标题化合物，为白色固体(7mg)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ＝13.29ppm(s，0.8H)；10.01(s，0.9H)；8.77(s，1.0H)；8.65(s，1.0H)；8.52(s，1.1H)；8.41-8.37(m，2.1H)；8.25(s，1.0H)；8.08(d，1.0H)；7.47(d，1.0H)；7.41(t，1.1H)；7.04-7.03(m，0.5H)；3.32(s，29.2H(水))；1.14(t，3.5H)。LCMS：Rt＝0.95分钟(100％)，m/z(ESI)349(M+H)+。
化合物131：N-(4-羟基苄基)3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]苯甲酰胺
该化合物可以应用化合物129中描述的方法，在步骤5中应用4-羟基苄基胺制备。LCMS：Rt＝0.98分钟(100％)，m/z(ESI)427(M+H)+。
化合物134：N-苄基-N-甲基3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]苯甲酰胺
Figure A200780019156D01622
该化合物可以应用化合物129中描述的方法，在步骤5中应用N-甲基苄基胺制备。LCMS：Rt＝1.15分钟(100％)，m/z(ESI)425(M+H)+。
化合物167：4-[8-(6-苯基乙酰基氨基-吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺
步骤1：N-(5-硝基吡啶-2-基)-2-苯基乙酰胺
Figure A200780019156D01631
将2-氨基-5-硝基吡啶(4.17g，30mmol)的吡啶(30mL)溶液在室温下搅拌并且滴加苯基乙酰氯(4.64g，30mmol)的THF(30mL)溶液。将混合物搅拌24小时，然后倾倒入冰-水(250mL)中，得到棕色固体，将其应用而无需进一步纯化。
以类似于化合物120中描述的方法的步骤2和3，将该物质用于制备N-[5-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-吡啶-2-基]-2-苯基乙酰胺。
步骤4：4-[8-(6-苯基乙酰基氨基-吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺
Figure A200780019156D01632
该化合物可以应用化合物120步骤4中描述的方法，应用N-[5-(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基)-吡啶-2-基]-2-苯基乙酰胺和2-(氨基羰基)噻吩-4-硼酸制备。LCMS：Rt 1.06分钟(100％)m/z(ESI)471(M+H)+。
化合物169：2-(4-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]苯基}-哌啶-1-基)乙酰胺
Figure A200780019156D01633
该化合物可以应用化合物84中描述的方法，在步骤1中应用2-溴乙酰胺制备。LCMS：Rt＝0.81分钟(100％)，m/z(ESI)418(M+H)+。
化合物170：5-{8-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-三氟甲基苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢异吲哚-1-酮
Figure A200780019156D01641
该化合物可以应用化合物GB15中描述的方法，应用5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢异吲哚-1-酮制备。LCMS：Rt＝0.99分钟(95％)，m/z(ESI)537(M+H)+。
化合物171：[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-三氟甲基苯基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]胺
Figure A200780019156D01642
该化合物可以应用化合物46中描述的方法，应用(5-溴-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-三氟甲基苯基]胺制备。LCMS：Rt＝0.99(95％)，m/z(ESI)472(M+H)+。
通过以上方法制备的本发明化合物的其它实例在上文中描述。
纯化条件和表征
通常，合成后的所有化合物可以应用反相HPLC纯化，应用Gilson制备HPLC***(322泵，155紫外/可见检测器，215液体处理机)。Gilson215用作自动进样器和级分收集器。化合物还可以通过硅胶快速色谱法纯化。
化合物通过质谱法表征，应用配有电喷雾源的单相四极杆仪器。
生物试验说明化合物的有效性
实施例1：MAPKAP-K5分析
将MAPKAP-K5反应在闪板形式中进行，应用0.1或0.2μCi33P-ATP；0.6μM ATP；1mU MAPKAP-K5；3μM MAPKAP-K5肽底物，在室温下培养30分钟。
闪板试验：
将MAPKAP-K5激酶反应在384孔聚丙烯板(Matrix Technologies)中进行，然后转移到链霉亲和素包被的384孔闪板(Perkin-Elmer)中。
在含有2μL试验化合物或标准抑制剂的孔中，应用Hydra(RobbinsScientific)加入13μL酶混合物或稀释剂。
通过应用Multidrop(Thermo-Labsystems)加入10μL[2.5×]底物混合物来启动反应，在试验中得到下列物质终浓度为：
1mU MAPKAP-K5
3μM MAPKAP-K5肽底物
0.6μM ATP
0.004μCi[33P]-γ-ATP/μL
1×反应缓冲液
将板在室温下培养30分钟。
通过应用Micro-fill(Biotek)在每孔中加入25μL EDTA(50mM)来终止反应。
应用Zymark机器人***将反应转移到链霉亲和素包被的闪板中。将板在室温下培养60分钟。
应用Tecan洗板机将所有孔用100μL磷酸盐缓冲盐水洗涤3次。
放射性通过在Packard TopCount上闪烁计数闪板(空孔)来测定。
酶混合物：
酶
50mM Tris HCl(pH 7.5)
0.1mM EGTA
2mM DTT
1mg/mL BSA
反应缓冲液：
50mM Tris HCl(pH 7.5)
0.1mM EGTA
10mM乙酸镁
2mM DTT
根据上述合成方法已经制备或可以制备以下化合物。对于以下表1和表2，可以应用实施例1描述的MAPKAPK5分析方法来测定的每个化合物的活性表示如下：
++++    化合物显示的MAPKAPK5 IC50 1-100nM
+++     化合物显示的MAPKAPK5 IC50 101-500nM
++      化合物显示的MAPKAPK5 IC50 501-1000nM
+       化合物显示的MAPKAPK5 IC50>1000nM
表1：实例化合物的结构和活性
Figure A200780019156D01661
Figure A200780019156D01671
Figure A200780019156D01681
Figure A200780019156D01691
Figure A200780019156D01701
Figure A200780019156D01711
Figure A200780019156D01731
Figure A200780019156D01741
Figure A200780019156D01751
Figure A200780019156D01761
Figure A200780019156D01771
Figure A200780019156D01781
Figure A200780019156D01801
Figure A200780019156D01811
Figure A200780019156D01831
Figure A200780019156D01841
Figure A200780019156D01851
Figure A200780019156D01871
Figure A200780019156D01881
Figure A200780019156D01901
Figure A200780019156D01911
Figure A200780019156D01921
Figure A200780019156D01931
Figure A200780019156D01941
Figure A200780019156D01951
Figure A200780019156D01961
Figure A200780019156D01971
Figure A200780019156D01981
Figure A200780019156D01991
表2：实例苯甲酰胺化合物的结构和活性
Figure A200780019156D01992
Figure A200780019156D02001
Figure A200780019156D02011
Figure A200780019156D02021
Figure A200780019156D02031
Figure A200780019156D02051
Figure A200780019156D02061
Figure A200780019156D02081
Figure A200780019156D02091
实施例2.用于由活化的原发滑液成纤维细胞表达的MMP1调节剂的 鉴定的试验的开发
为了鉴定降低细胞的ECM降解活性的化合物，细胞的ECM降解活性可以诱导以使该活性适合检测并且获得更清楚的读数。在上下文的RA中，选择的细胞是哺乳动物滑液成纤维细胞并且可以用于诱导ECM降解活性的触发剂是关节炎领域中相关的细胞因子：例如TNF-α、IL1β、IL6、OSM、IL17和MIF1-α。该列表不是全部的，因为RA发病机制中潜在涉及过多的细胞因子(Smolen和Steiner，2003)。为了建立体外的、尽可能接近病理学的复杂性的试验方法，所用的触发剂应该是由关节炎领域中相关的产生细胞因子的细胞与触发剂接触而产生的因子的混合物，例如单核细胞、巨噬细胞、T细胞和B细胞。产生细胞因子的细胞通过产生因子的复合体和无偏的混合物而对接触响应。如果在关节翳中也发现所用的产生细胞因子的细胞，并且在类风湿性关节炎患者的滑膜液中发现用于产生该触发剂的细胞因子，那么最终产生的因子混合物将包含关节炎患者关节中存在的部分因子。
“MMP试验”的原理
基质金属蛋白酶(MMP)具有多种生理学作用，例如其它蛋白酶、生长因子的成熟和胞外基质成分的降解。MMP1是MMP家族的成员之一，其能够降解天然胶原(骨和软骨的主要成分)。由滑液成纤维细胞(SF)表达的MMP1增加用于诊断关节炎疾病的进程并且是关节中侵蚀进程的预兆(Cunnane等人，2001)。SF表达的MMP1可以通过用类风湿性关节炎相关的触发剂活化SF来增强，细胞因子例如TNF-α或IL1β(Andreakos等人，2003)。综上所述，测量由活化的SF产生的MMP1的水平是在上下文RA中具有高度相关的读数，因为该事件反映了SF对侵蚀表型(如在关节翳中所见的)的活化水平。如果降低候选药物靶标在活化的SF中的表达引起由这些细胞表达的MMP1的降低，那么药物靶标被证实涉及MMP1表达的调节并且因此被考虑与用于治疗RA的治疗策略的开发有关。
在以下实施例中，试验的开发(进一步称为‘MMP试验’)监测由滑液成纤维细胞(SF)对多种活化触发剂响应而产生的MMP1(实施例2.1)。然后，该试验的用途被描述为用于基因产物的确证，该基因产物被认为是开发RA治疗的药物靶标(实施例2.2)。靶标的确证是应用重组腺病毒来进行的，所述的腺病毒进一步被称为敲除病毒或Ad-siRNA，其介导shRNA在细胞中的表达，从而通过基于RNAi(RNA干扰)机制降低靶基因的表达水平(参见WO 03/020931)。然后，表3中描述了调节确证的药物靶标活性的化合物的鉴定。‘MMP试验’在试验调节鉴定的药物靶标的活性的化合物中的用途在下面进一步描述。
试验实施例
所用的对照病毒：
下面列出了在这些研究中应用的对照病毒。dE1/dE2A腺病毒是通过辅助质粒pWEAd5AflII-rITR.dE2A在PER.E2A包装细胞中的共转染而由这些连接质粒产生的，如WO99/64582中描述的。
阴性对照病毒：
Ad5-eGFP_KD：靶序列：GCTGACCCTGAAGTTCATC(SEQ IDNO：1)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。
Ad5-Luc_v13_KD：靶序列GGTTACCTAAGGGTGTGGC(SEQ IDNO：2)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。
Ad5-M6PR_v1_KD：靶序列CTCTGAGTGCAGTGAAATC(SEQ IDNO：3)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。
阳性对照病毒：
Ad5-MMP1_v10_KD：靶序列ACAAGAGCAAGATGTGGAC(SEQID NO：4)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。
用于靶标确证的病毒：
Ad5-MAPKAPK5_v13_KD：靶序列CGGCACTTTACAGAGAAGC(SEQ ID NO：5)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。
Ad5-MAPKAPK5_v12_KD：靶序列ATGATGTGTGCCACACACC(SEQ ID NO：6)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。
实施例2.1：MMP试验的开发
开发用于测量MMP1的384孔形式的ELISA。试验多种一抗和多种ELISA试验方法。开发以下试验方法并且确证测量384孔板中SF上清液的MMP1水平：将白色Lumitrac 600 384孔板(Greiner)用2μg/mL抗MMP1抗体MAB1346(Chemicon)包被。将抗体在缓冲液40(在1L milliQ水中的1.21g Tris碱(Sigma)、0.58g NaCl(Calbiochem)和5mL10％NaN3(Sigma)并且调节至pH 8.5)中稀释。在4℃下培养过夜后，将板用PBS(在10L milliQ中的80g NaCl、2g KCl(Sigma)、11.5gNa2HPO4·7H2O和2g KH2PO4；pH 7.4)洗涤并且用100μL/孔的酪蛋白缓冲液(在PBS中的2％酪蛋白(VWR International))封闭。第二天，将酪蛋白缓冲液从ELISA板中除去并且用50μL/孔的EC缓冲液(在1L milliQ中的4g酪蛋白、2.13g Na2HPO4(Sigma)、2g牛血清白蛋白(Sigma)、0.69g NaH2PO4·H2O(Sigma)、0.5g CHAPS(Roche)、23.3g NaCl、4mL 0.5MEDTA pH 8(Invitrogen)、5mL 10％NaN3并且调节至pH 7.0)代替。在融化的样品板中加入0.25mM DTT(Sigma)。除去EC缓冲液后，将20μL的样品转移到ELISA板中。在4℃下培养过夜后，将板用PBS洗涤两次并且用PBST(含0.05％Tween-20(Sigma)的PBS)洗涤一次并且与35μL/孔的生物素化的抗MMP1抗体溶液(R&D)一起培养。将该二抗以浓度5μg/mL在缓冲液C(在2L milliQ中的0.82g NaH2PO4·H2O、4.82g Na2HPO4、46.6gNaCl、20g牛血清白蛋白和4mL0.5M EDTA pH 8并且调节至pH 7.0)中稀释。在室温下培养2小时后，将板如上述洗涤并且与50μL/孔的链霉亲和素-HRP偶联物(Biosource)一起培养。将链霉亲和素-HRP偶联物以浓度0.25μg/mL在缓冲液C中稀释。45分钟后，将板如上述洗涤并且与50μL/孔的BM Chem ELISA底物(Roche)一起培养。在Luminoscan AscentLuminometer(Labsystems)上读数，积分时间是200毫秒或用Envision读数器(Perkin Elmer)。
图2中以白色棒显示了用RA领域中相关的细胞因子(TNF-α、IL1β和OSM)或它们的组合处理的SF表达的MMP1增加。对于该试验，将SF接种在96孔板中，3,000个细胞/孔。24小时后，将培养基换为添加1％FBS的M199培养基。培养基更换一天后，在培养基中加入细胞因子或它们的组合，所加的每种细胞因子的终浓度是25ng/mL。加入细胞因子72小时后，将上清液收集并且如以上给出的试验方法中描述的进行MMP1ELISA。与该试验平行，应用相同的试验方法，在M199培养基+1％FBS中用相同的细胞因子或细胞因子的组合处理的THP1细胞(在M199+1％FBS中2倍稀释)的上清液触发SF。图2中以灰色棒显示了对于这些样品的MMP1水平。用TNF-α处理的THP1细胞的上清液触发的SF表达的MMP1的诱导作用强于(>4.5倍诱导作用)单独用重组TNF-α触发的SF表达的MMP1的诱导作用(3倍诱导作用)，并且几乎等于5倍于3种纯化的细胞因子(TNF-α、IL1βb、OSM)的混合物获得的诱导作用。该结果表明TNF-α-诱导的THP1细胞的上清液除了包含TNF-α之外还包含另外的活化关于MMP1表达的SF的促炎因子。由于TNF-α在RA发病机制中的作用得到确证(TNF-α-阻断剂(例如英夫利昔单抗和依那西普)在治疗RA患者中显示出某些功效)并且THP-1细胞是RA患者关节中存在的单核细胞/巨噬细胞的代表，通过将THP-1细胞与TNF-α接触而制备的基于TNF-α的触发剂混合物将包含RA患者关节中存在的因子并且随后与RA相关。该基于TNF-α的复合体触发剂(进一步称为‘复合体触发剂’)将进一步用作“MMP试验”的主要成分。
应用***(有效的抗炎药，还能在啮齿类中大大降低胶原诱导的关节炎)显示“复合体触发剂”对SF活化的抑制(Yang等人，2004)(图3)。***显示了剂量依赖性地降低由复合体触发剂活化的SF产生的MMP1的量。将SF以密度3000个细胞/孔接种在96孔板中。接种24小时后，将增加浓度的***加入到细胞中。培养过夜后，将每孔的培养基更新为用TNF-α(在M199+0.5％FBS中50％稀释)处理的THP-1细胞的上清液并且如前一天那样加入相同浓度的***。处理48小时后，将上清液收集并且进行上述MMP1 ELISA。***的加入显著地降低了SF表达的MMP1，IC50值约1nM(参见图3)。这些数据显示由活化的SF表达的MMP1可以通过加入生理学相关的抑制剂来降低并且代表“MMP试验”的原理证明。
实施例2.2：MAPKAPK5调节SF“复合体触发剂”-诱导的MMP1表达
(A)Ad-siRNA病毒对敲除MAPKAPK5表达的功能
根据WO03/020931描述的方法来产生介导靶向MAPKAPK5和eGFP的siRNA表达的重组腺病毒。在重组腺病毒中应用的靶序列是：CGGCACTTTACAGAGAAGC(SEQ ID NO：5)和ATGATGTGTGCCACACACC(SEQ ID NO：6)。在重组腺病毒中所用的eGFP mRNA内的靶序列是：GCTGACCCTGAAGTTCATC(SEQ ID NO：1)。应用Sap1位点将这些序列克隆到连接质粒中。dE1/dE2A腺病毒是通过辅助质粒pWEAd5AflII-rITR.dE2A在PER.E2A包装细胞中的共转染由这些连接质粒产生的，如WO99/64582描述的。
靶向MAPKAPK5的腺病毒的功能性试验如下。将这些腺病毒按如下方法用于感染在培养皿中培养的原代人SF。第一天，按每个培养皿500,000个SF接种。一天后，用Ad5-MAPKAPK5-v13_KD(1.6E9VP/mL)或Ad5-eGFP-v5_KD(1.3E10 VP/mL)以MOI为4000(基于由Q-rt-PCR确定的病毒滴定度(每mL病毒颗粒数))感染细胞。第七天，根据标准方法应用胰蛋白酶EDTA溶液将细胞从培养皿中分离。然后通过加入添加10％FBS的DMEM生长培养基将胰蛋白酶灭活。然后通过离心步骤(1000rpm，5分钟)将细胞收集。将沉淀物在100μL的新制RIPA缓冲液(50mM TrispH7.5、150mM NaCl、1％脱氧胆酸盐、1％Triton X100、0.1％SDS)中裂解。然后将样品超声10秒。然后如供应商描述的应用BCA试剂盒(Pierce，Cat N°23227)，应用BSA作为标准测定样品的蛋白浓度。在30μg稀释在19.5μL RIPA缓冲液中的细胞裂解物中加入3.5μL还原剂(NuPage还原剂N°10，Invitrogen NP0004)和7.5μL样品缓冲液(NuPage LDS样品缓冲液，Invitrogen NP0007)。然后将30μL样品煮沸5分钟并且上样至10％聚丙烯酰胺凝胶(Invitrogen NP0301)。为了估计蛋白质敲除的水平，将5μg、7.5μg和3.75μg Ad5-eGFP-v5_KD感染细胞的裂解物也上样至凝胶。然后将凝胶在1×MOPS/SDS NuPage运行缓冲液(Invitrogen NP001)中以100V运行2小时。将10μL Seablue Plus预染标准(Invitrogen LC5925)用于估计凝胶上蛋白的大小。然后通过湿法印迹将胶上的蛋白质转移到PVDF膜(Invitrogen LC2002)上，其应用通过将100mL Nupage转移缓冲液20＊(NP0006-1)、400mL甲醇和1500mL Milli Q水混合制备的转移缓冲液。在转移前，将膜首先浸泡在甲醇和转移缓冲液中。转移在100V下进行90分钟。然后通过将膜浸泡在配制在PBST(添加0.1％Tween 20(Sigma，P1379)的PBS)中的封闭缓冲液(2％封闭粉末(Amersham，RPN 2109))中30分钟而封闭。封闭后，应用在封闭缓冲液中稀释250倍的抗MAPKAPK5的鼠单克隆抗体(BD Biosciences，Cat No612080)进行免疫检测。用该一抗培养过夜后，将膜用PBST洗涤3次并且用在封闭缓冲液中稀释50000倍的二抗((多克隆羊抗鼠Ig，HRP偶联的(DAKO P0447))培养1小时。然后将印迹在PBST中洗涤3次并且在Kodakimager上根据厂商说明书用ECLadvance(RPN2109，Amersham)进行检测。蛋白质印迹显示与用Ad5-eGFP-v5_KD阴性对照病毒感染的细胞相比，Ad5-MAPKAPK5-v13_KD感染的细胞中MAPKAPK5的表达水平更低。与稀释的Ad5-eGFP-v5_KD感染的样品比较用于估计表达降低2倍。通过‘剥离操作’(将膜在PBST中煮沸5分钟)除去MAPKAPK5抗体后，将等量上样的30μg样品通过β-肌动蛋白的免疫检测来说明。β-肌动蛋白的免疫检测是根据MAPKAPK5检测中描述的方法进行的，但是应用抗β-肌动蛋白的羊多克隆抗体(Santa Cruz，Cat NoSC-1615)(其以1000倍稀释作为一抗)和兔抗羊抗体(其以50000倍稀释作为二抗)。图4给出了该试验的结果。综上所述，该试验证明了为了降低原代人SF中MAPKAPK5表达水平而产生的Ad-siRNA的功能性。
(B)MAPKAPK5敲除Ad-siRNA降低SF-诱导的MMP1表达
Ad5-MAPKAPK5-v13_KD病毒在‘MMP试验’中的功效试验如下。第一天，将SF(传代9至10)以每孔3000个细胞的密度接种在具有完全滑液生长培养基(Cell Applications)的96孔板中。一天后，将细胞用递增量(3、6、9、12或15μL)的下列病毒感染：Ad5-eGFP-v5_KD、Ad5-MAPKAPK5-v12_KD、Ad5-MAPKAPK5-v13_KD、Ad5-MMP1-v10_KD。病毒载量是通过加入中性病毒Ad5-Luc-v13_KD来校正以使得细胞中最终病毒体积是每孔15μL。该校正保证所观察到的作用不是来自应用于细胞的病毒载量。然后在活化步骤之前将细胞培养5天。该步骤包括每孔中用添加25μL的‘复合体触发剂’的75μL M199培养基代替生长培养基。活化步骤48小时后，将上清液收集并且如实施例1中描述的进行MMP1 ELISA。试验结果在图5中显示。试验的质量通过靶向MMP1自身的Ad-siRNA病毒的功效来证实。该阳性对照病毒大大降低了SF表达的MMP1，而阴性对照病毒(为靶向荧光素酶的表达而设计)不影响MMP1表达水平。用于验证MAPKAPK5靶标的两种病毒(Ad5-MAPKAPK5-v12_KD和Ad5-MAPKAPK5-v13)也导致复合体触发剂诱导的原代人SF表达的MMP1显著降低。由该试验可以得出以下结论：MAPKAPK5代表有价值的药物靶标，其显示了调节SF中MMP1表达。类似的是，希望通过小分子化合物抑制MAPKAPK5酶活性降低‘MMP试验’中‘复合体细胞因子’诱导的MMP1表达。也希望通过小分子化合物抑制MAPKAPK5酶活性降低与RA有关的关节的降解。
(C)体外‘MMP试验’试验抑制MAPKAPK5的化合物
根据下面试验方法在‘MMP试验’中试验在生物化学试验中(即无细胞，应用纯化的酶)抑制MAPKAPK5活性的化合物。
将化合物原储备液(所有的在100％DMSO中，浓度为10mM)以10倍稀释在水中(蒸馏水，GIBCO，无DNA酶和RNA酶)以获得在10％DMSO中的1mM中间工作储备液。将该中间工作储备液进一步以3倍(或10倍)稀释在10％DMSO中以分别获得在10％DMSO中的333μM(或100μM)的中间工作储备液。然后将1mM和333μM(或100μM)中间工作储备液进一步以10倍稀释在1.1％DMSO中以获得在2％DMSO中的100μM和33.3μM(或10μM)浓度的10×工作储备液。然后将10×工作储备液以10倍稀释在添加1％FBS的M199培养基中以获得最终‘1×化合物制剂’，其包含10μM和3.33μM(或1μM)的化合物和0.2％DMSO。这些是在细胞上试验化合物的最终条件。与此平行，将10×工作储备液以10倍稀释在‘复合体触发剂’(即如实施例1中描述产生的TNF-α处理的THP1的上清液)中，将其以2倍稀释在添加1％FBS的M199中以产生‘在50％复合体触发剂中的1×化合物制剂’。
第1天，将RASF以3000个细胞/孔的密度接种在具有完全滑液生长培养基(Cell Applications)的96孔板(平底，组织培养基处理的，Greiner)中。第5天，将化合物按如下方法加入到培养的细胞中。将培养基从细胞中完全除去并且用75μL的‘1×化合物制剂’代替，所述的‘1×化合物制剂’包含在添加1％FBS和0.2％DMSO的M199培养基中浓度为10μM或3.33μM(或1μM)的化合物。培养2小时后(使化合物平衡并且进入细胞中)，将25μL的‘在50％复合体触发剂中的1×化合物制剂’加入到孔中，其在‘1×化合物制剂’上面，这些孔中包含相应浓度的相应化合物。在该方法中，将8被稀释的复合体触发剂最终应用到细胞中。然后培养48小时，然后将20μL的细胞上清液如上述进行MMP1 ELISA，获得原始数据(RLU：相对发光单位)。以下对照包括在试验中。最高的信号对照，其中细胞由复合体触发剂活化，但是仅加入0.2％DMSO介质(并且因此无化合物)。该对照说明可以在试验中获得的MMP1的最高水平。最小的信号对照也包括在这些试验中。其中细胞没有被触发。然后在第5天将细胞的培养基换为100μL添加1％FBS的M199培养基。该对照恢复到由RASF产生的基础MMP1水平。然后基于ELISA返回的RLU数据计算由化合物获得的MMP1表达的抑制百分数，应用以下公式：
[[(最高MMP1水平-最低MMP1水平)-(化合物X在浓度Y下的MMP1水平-最低MMP1水平)]/(最高MMP1水平-最低MMP1水平)]×100。
化合物的毒性评价如下。第1天，将SF以每孔3000个细胞的密度接种在具有100μL完全滑液生长培养基的白色、组织培养基处理的96孔板中。在本实施例中如上述进一步进行化合物处理、将化合物加入到细胞中以及活化细胞，用于测定MMPI水平。培养48小时后，将培养基从孔中除去，并且用50μL添加1％FBS的新制M199培养基代替。然后将50μL的底物(Promega Celltiter Glow细胞活力试剂盒)加入到孔中。培养10分钟后，测定发光信号。与最高对照孔相比发光信号降低超过50％被认为反映出显著的毒性。在‘MMP试验’中试验的化合物没有观察到毒性。
应当理解的是，多种因素(例如不同化合物的不同细胞渗透能力)可以引起体外生物化学和细胞MMP试验之间化合物活性的差异。
对于以下表3和表4，可以应用本文描述的试验方法确定的每个化合物的MMP1 EC50表示如下：
＊＊＊＊        化合物显示的MMP1 EC50 1-100nM
＊＊＊          化合物显示的MMP1 EC50 101-500nM
＊＊            化合物显示的MMP1 EC50 501-1000nM
＊              化合物显示的MMP1 EC50>1000nM
表3
 
化合物# MMP1 EC50(nM)
1 ＊
2 ＊
3 ＊＊＊
4 ＊
5 ＊＊＊
6 ＊＊＊
7 ＊
8 ＊＊
9 ＊＊
10 ＊＊
11 ＊＊＊
12 ＊＊
13 ＊＊＊
14 ＊
15 ＊＊＊
16 ＊
17 ＊
18 ＊＊
 
化合物# MMP1 EC50(nM)
19 ＊
20 ＊
21 ＊＊＊
22 ＊
23 ＊
24 ＊＊＊
25 ＊
26 ＊
27 ＊＊
28 ＊＊
29 ＊
30 ＊
31 ＊
32 ＊＊
33 ＊＊＊
34 ＊＊＊＊
35 ＊＊＊
36 ＊＊＊
37 ＊＊
38 ＊
39 ＊
40 ＊
41 ＊
42 ＊
43 ＊
44 ＊
 
化合物#     MMP1 EC50(nM)  
45           ＊                 
46           ＊                 
47           ＊＊                
48           ＊＊＊               
49           ＊                 
50           ＊＊＊               
51           ＊＊                
52           ＊                 
53           ＊＊                
54           ＊＊＊               
55           ＊＊＊               
56           ＊＊                
57           ＊＊＊               
58           ＊＊＊               
59           ＊                 
60           ＊                 
61           ＊＊                
62           ＊                 
63           ＊＊＊               
64           ＊                 
65           ＊＊＊               
66           ＊＊                
67           ＊                 
68           ＊                 
69           ＊                 
70           ＊                 
 
化合物# MMP1 EC50(nM)
71 ＊
72 ＊
73 ＊
74 ＊
75 ＊
76 ＊＊
77 ＊
78 ＊
79 ＊＊
80 ＊＊＊
81 ＊
82 ＊
83 ＊
84 ＊
85 ＊
86 ＊
87 ＊＊＊
88 ＊＊
89 ＊＊
90 ＊
91 ＊
92 ＊＊＊
93 ＊
94 ＊
95 ＊
96 ＊
97 ＊
 
化合物# MMP1 EC50(nM)
98 ＊
99 ＊
100 ＊
101 ＊
102 ＊
103 ＊＊
104 ＊
105 ＊
106
107
108 ＊
109 ＊
110 ＊
111 ＊
112 ＊
113 ＊＊＊
114 ＊
115 ＊
116 ＊
117 ＊＊＊
168 ＊
169 ＊
170 ＊
171 ＊
172 ＊
173 ＊
 
化合物# MMP1 EC50(nM)
174 ＊
175 ＊
176 ＊＊
177 ＊
178 ＊
179 ＊
180 ＊
181 ＊
182 ＊
183 ＊
184 ＊
185 ＊
表4
 
化合物# MMP1 EC50(nM)
118 ＊
119 ＊
120 ＊
121 ＊
122 ＊
123 ＊
124 ＊
125 ＊
126 ＊
127 ＊
128 ＊
129 ＊
130 ＊
131 ＊＊
 
化合物# MMP1 EC50(nM)
132 ＊
133 ＊
134 ＊＊
135
136 ＊
137 ＊
138 ＊
139 ＊
140 ＊
141 ＊
142 ＊
143 ＊
144
145 ＊
146 ＊
147 ＊
148 ＊
149 ＊
150 ＊
151 ＊
152 ＊
153 ＊
154 ＊
155 ＊
156 ＊
157 ＊
158 ＊
159 ＊
160 ＊
161 ＊
162 ＊
 
化合物# MMP1EC50(nM)
163 ＊
164 ＊
165 ＊
166 ＊
167 ＊
191 ＊
192 ＊＊＊
193 ＊
194 ＊＊
195 ＊
196 ＊
197 ＊
198 ＊
实施例3：用于评价化合物对人PBMC释放的细胞因子的作用的试验
人外周血单核细胞(PBMC)是由健康志愿者血制备的“血沉棕黄层”分离的，分离基本上根据
Figure A200780019156D0225091502QIETU
(1984)的方法。简而言之，将血沉棕黄层用1×PBS(Gibco)以1:1稀释并且将30mL小心地置于在50mL Falcon试管中的20mL LymphoprepTM(Lucron Bioproducts)上面。离心(35分钟，400g，18℃)后，将单核细胞从白色界间收集并且通过重悬浮和离心(10分钟，200g)用1×PBS洗涤三次。将分离的PBMC最后重悬浮在添加10％热灭活的FBS(Hyclone)的RPMI 1640(Cat.No.21875，Gibco)中。
对于本试验，将PBMC以2.5E6个细胞/mL以160μL接种在96孔板(Nunc)中。将逐级稀释的试验化合物首先制备在DMSO(Sigma)中，然后在含有1％热灭活的FBS的M199培养基(Gibco)中稀释50倍。将化合物在试验板中进一步1/10稀释以获得最终DMSO浓度为0.2％。将细胞与化合物在37℃、5％CO2下预培养1小时。然后，将细胞用LPS(大肠杆菌血清型026:B6，Cat.No.L2654，Sigma)(以体积20μL加入至终浓度为1μg/mL)刺激并且将细胞进一步培养24小时。将板离心并且将上清液收集并且在-80℃下贮存直到分析ELISA中的适当的稀释。
开发以下384孔化学发光ELISA试验方法以测量上清液中的TNFα水平：将白色Lumitrac 600 384孔板(Greiner)用(40μL/孔)抗TNFα捕获抗体(Cat.No.551220，BD Pharmingen)包被，该抗体在1×PBS(Gibco)中稀释至1μg/mL。在4℃下培养过夜后，将板用1×PBS(在10L milliQ中的80gNaCl、2g KCl(Sigma)、11.5g Na2HPO4·7H2O和2g KH2PO4；pH 7.4)洗涤并且用100μL/孔缓冲液B(包含1％BSA(Sigma)、5％蔗糖(Sigma)和0.05％NaN3(Sigma)的1×PBS)封闭。在室温下培养4小时后，将封闭缓冲液除去并且将板用PBST(含有0.05％Tween-20(Sigma)的1×PBS)洗涤一次。然后，将40μL样品转移到ELISA板中并且将板在4℃下培养。第二天，将板洗涤3次(用PBST洗涤两次并且用PBS洗涤一次)并且加入35μL/孔生物素化的抗TNFα抗体(Cat.No.554511，BD Pharmingen)，该抗体首先在缓冲液D(含有1％BSA的1×PBS)中稀释浓度为250ng/mL。在室温下培养2小时后，将板如上述洗涤并且加入35μL/孔的在缓冲液D中1/2000稀释的链霉亲和素-HRP偶联物(Cat.No.SNN2004，Biosource)。45分钟后，将板如上述洗涤并且与50μL/孔BM化学发光ELISA底物POD(Roche)一起培养5分钟。读数是在Luminoscan Ascent Luminometer(Labsystems)上进行的，积分时间为100毫秒，给出原始数据(RLU：相对发光单位)。以下对照包括在试验中，最高的信号对照，其中细胞由LPS活化，但是仅加入0.2％DMSO介质(并且因此无化合物)。该对照说明可以在试验中获得的TNFα的最高水平。最小的信号对照也包括在这些试验中。其中细胞没有被触发。该对照恢复到由PBMC产生的基础TNFα水平。然后基于ELISA返回的RLU数据计算由化合物获得的TNFα释放抑制百分数(PIN)，应用以下公式：100-[((化合物X在浓度Y下的TNFα水平-最低TNFα水平)/(最高TNFα水平-最低TNFα水平))×100]。其中化合物在8个浓度(1/3逐级稀释)下试验，EC50值可以由化合物在每个试验浓度下获得的PIN数据的平均值的曲线拟合来计算。
为了试验化合物对由LPS刺激的PBMC培养引起的IL1和IL6释放的影响，适当稀释的上清液可以应用上述相同的ELISA试验方法来测量。与IL1和IL6 ELISA(全部购自R&D Systems)配对的抗体可以应用如下：抗IL1捕获抗体(Cat.No.MAB601)以0.5μg/mL应用，生物素化的抗IL1检测抗体(Cat.No.BAF201)以50ng/mL应用；抗IL6捕获抗体(Cat.No.MAB206)以1μg/mL应用，生物素化的抗IL6检测抗体(Cat.No.BAF206)以50ng/mL应用。
对于以下表5，可以应用本文描述的试验方法确定的每个化合物的PBMC EC50表示如下：
####        化合物显示的PBMC EC50 1-100nM
###         化合物显示的PBMC EC50 101-500nM
##          化合物显示的PBMC EC50 501-1000nM
#           化合物显示的PBMC EC50>1000nM
表5
 
化合物# PBMC EC50(nM)
1 #
2 #
3 #
4 #
5 #
6 #
7 #
8 #
9 ###
10 #
11 #
12 #
13 #
14 #
15 ##
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化合物# PBMC EC50(nM)
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181 #
本发明还涉及治疗或预防炎性疾病的方法，该方法包括给需要的个体施用治疗有效的抑制剂，该抑制剂是促***原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶5抑剂量的式I化合物。
本方法发明的另一个方面涉及治疗或预防具有异常基质金属蛋白酶活性特征的病症的方法，该方法包括施用治疗有效量的抑制基质金属蛋白酶的式I化合物。
本方法发明的进一步的方面是治疗或预防选自涉及胞外基质降解的疾病的病症的方法，该方法包括施用治疗有效的基质金属蛋白酶抑制量的式I化合物。
本方法发明的进一步的方面是治疗或预防选自涉及MMP1异常细胞表达的疾病的病症的方法，该方法包括施用治疗有效的基质金属蛋白酶抑制量的式I化合物。
本方法发明的特别实施方案是治疗或预防类风湿性关节炎的方法，该方法包括给需要的个体施用治疗有效量的式I化合物。
本发明还涉及本发明化合物在制备用于治疗或预防通过施用促***原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶5抑制剂来预防、改善或消除的病症或者具有异常胶原酶活性特征的病症或者选自涉及炎症的疾病的病症，最优选用于治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。
给个体患者施用本发明化合物包括自我施用和通过另一个人施用。患者可能需要治疗存在的疾病或医学病症，或可能希望预防治疗以防止或降低由骨代谢紊乱引起的疾病和医学病症的风险。本发明化合物可以通过口服、透皮、经吸入、注射、鼻内、直肠或通过缓释制剂来传递至个体患者。
本方法的优选方案包括给患有具有炎性特征的疾病病症的个体施用有效的基质金属蛋白酶抑制量的本发明化合物足够时间以降低患者胞外基质降解的异常水平，并且优选终止对所述降解响应的自身延续性进程。该方法的特别实施方案包括给患有或易感发生类风湿性关节炎发展的个体患者施用有效的基质金属蛋白酶抑制量的本发明化合物足够时间以分别降低或预防所述患者关节中胶原和骨降解，并且优选终止对所述降解响应的自身延续性进程。
此类化合物的毒性和治疗功效可以通过标准的药物方法在细胞培养或试验动物中测定，例如对于测定LD50(50％群体的致死剂量)和ED50(50％群体的治疗有效剂量)。毒性和治疗效应之间的剂量比是治疗指数并且它可以表示为LD50/ED50。优选表现出高治疗指数的化合物。当可以应用显示出毒副作用的化合物时，应当谨慎设计释放***，该***将此类化合物靶向至受影响的组织位点以便将对未感染细胞的潜在损伤降到最小，从而降低副作用。
由细胞培养试验和动物研究获得的数据可以用于配制用于人的剂量范围。此类化合物的剂量优选位于循环浓度的范围内，其包括具有很小或无毒性的ED50。剂量可以在该范围内取决于所用的剂型和所应用的施用途径而不同。对于本发明方法中所用的任何化合物，治疗有效剂量最初可以由细胞培养试验估算。可以在动物模型中配制剂量以获得循环血浆浓度范围，其包括细胞培养中测定的IC50(即获得最大抑制症状一半的试验化合物的浓度)。此类信息可以用于更准确地测定人的有用剂量。血浆中的水平可以例如通过高效液相色谱法来测定。
施用于个体患者的本发明化合物的优选治疗有效量是约0.1mg/kg至约10mg/kg，每天施用一次至三次。例如，本方法的有效方案可以施用约5mg至约1000mg所述的本发明化合物，每天一次至三次。但是应当理解的是，对于任何特别的个体患者的特别剂量水平将取决于多种因素包括年龄、体重、一般健康、性别、饮食、施用次数、施用途径、***速率、药物组合和特别炎性病症的严重程度而不同。这些因素的考虑是在普通熟练临床医师的范围内，用于测定预防、消除或阻止病症进程所需的治疗有效或预防有效剂量的目的。
将本发明化合物可以参入适于施用的药物组合物中。此类组合物典型地包括至少一种本发明化合物和至少一种可药用载体。本文所用的语言“可药用载体”旨在包括与药物施用相容的固体载体，例如乳糖、硬脂酸镁、石膏粉、蔗糖、滑石粉、硬脂酸、明胶、琼脂、果胶、***胶等；以及液体，例如植物油、花生油和无菌水等，任何和所有溶剂、分散介质、包衣剂、抗菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收延长剂等。可药用载体的列表不解释为限制。此类介质和试剂作为药用活性物质的用途是本领域众所周知的。除了与活性化合物不相容的任何常规介质或试剂之外，其在组合物中的用途是要仔细考虑的。还可以将补充的活性化合物掺入到组合物中。
将本发明药物组合物配制为与其预期施用途径相容。施用途径的实例包括非肠道，例如静脉内、皮内、皮下、口服(例如吸入)、透皮(局部)、透粘膜和直肠施用。用于非肠道、皮内或皮下应用的溶液剂或混悬剂可以包括以下组分：无菌稀释剂，例如注射用水、生理盐水溶液、不挥发性油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶剂；抗菌剂，例如苄基醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂，例如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂，例如乙二胺四乙酸；缓冲剂，例如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐以及调节张力的试剂，例如氯化钠或右旋糖。pH可以用酸或碱来调节，例如盐酸或氢氧化钠。非肠道制剂可以密封于安瓿、一次性注射器或用玻璃或塑料制成的多剂量瓶中。
适用于注射的药物组合物包括无菌水溶液(水溶的)或分散剂以及用于临时制备无菌可注射溶液剂或分散剂的无菌粉末。对于静脉内施用，适合的载体包括生理盐水、抑菌水、Cremophor ELTM(BASF，Parsippany，NJ)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)。在所有情况中，组合物必须是无菌的并且在一定程度上应该是易于注射的液体。其在制备和储存的条件下必须是稳定的并且必须能防止微生物(例如细菌和真菌)的污染作用。载体可以是溶剂或分散介质，包括例如，水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)以及它们适合的混合物。适当的流动性可以例如通过应用包衣(例如卵磷脂)、在分散的情况下通过维持所需的颗粒大小以及通过应用表面活性剂来维持。防止微生物作用可以通过多种抗菌剂和抗真菌剂来实现，例如对羟基苯甲酸酯类、三氯叔丁醇、苯酚、抗坏血酸、硫柳汞等。在很多情况中，组合物中优选包括等渗剂，例如糖、多元醇(例如甘露醇、山梨醇)、氯化钠。延长吸收的可注射组合物可以通过在组合物中包含延长吸收的试剂，例如单硬脂酸铝和明胶来实现。
无菌可注射溶液剂可以通过将所需量的活性化合物(例如本发明实施方案的化合物)与上面列举的一种或成分的组合(如果需要)一起掺入到适合的溶剂中，随后通过过滤灭菌制备。通常，分散剂是通过将活性化合物掺入到包含基本分散介质和所需的其它上面列举的成分的无菌介质中制备的。在用无菌粉末制备无菌可注射溶液剂的情况中，优选的制备方法是真空干燥和冻干，其产生活性成分的粉末加上任何另外的预期成分(来自先前的无菌过滤溶液)。
口服组合物通常包括惰性稀释剂或可食用载体。它们可以密封于胶囊中或压制成片剂。对于口服治疗施用，活性化合物可以与赋形剂混合并且以片剂、含片或胶囊剂形式应用。口服组合物还可以应用用作漱口剂的液体载体来制备，其中将液体载体中的化合物口服应用并且swish并且吐出或吞下。
可药用的粘合剂和/或佐剂可以包括作为组合物的一部分。片剂、丸剂、胶囊、含片等可以包含任何下列成分或类似性质的化合物：粘合剂，例如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂，例如淀粉或乳糖；崩解剂，例如海藻酸、Primogel或玉米淀粉；润滑剂，例如硬脂酸镁或Sterotes；助流剂，例如胶体二氧化硅；甜味剂，例如蔗糖或糖精；或矫味剂，例如薄荷、水杨酸甲酯或橙类矫味剂。
对于吸入施用，化合物以气雾剂形式释放，其由包含适合的抛射剂(例如气体，例如二氧化碳)的压力容器或分配器或雾化器喷出。
全身施用还可以是透粘膜或透皮方式。对于透粘膜或透皮施用，制剂中应用适合穿透屏障的渗透剂。此类渗透剂通常是本领域已知的并且包括例如对于透粘膜施用的去垢剂、胆酸盐和夫西地酸衍生物。透粘膜施用可以通过应用鼻喷雾剂或栓剂来完成。对于透皮施用，将活性化合物配制成通常在本领域中已知的软膏剂、药膏、凝胶剂或乳膏剂。
化合物还可以以栓剂(例如与常规栓剂基质，例如可可脂和其它甘油酯一起)或滞留型灌肠剂的形式制备，用于直肠释放。
在一个实施方案中，将活性化合物与防止化合物从体内快速消除的载体一起制备，例如控释制剂，包括植入剂和微囊释放***。可以应用生物可降解的、生物相容的聚合物，例如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯类和聚乳酸。制备此类制剂的方法对于本领域技术人员是显而易见的。物质还可以例如从Alza Corporation和Nova Pharmaceuticals，Inc.商购获得。脂质体混悬剂(包括靶向具有针对病毒抗原的单克隆抗体的感染细胞的脂质体)还可以用作可药用载体。这些可以根据本领域技术人员已知的方法来制备。
特别有利的是，将口服或非肠道组合物配制成易于施用并且剂量均一的剂量单位形式。本文所用的剂量单位形式指的是物理上分离的单元，其适合作为单独剂量用于所治疗的个体；每个单位包含计算的预定量的活性化合物以产生预期的治疗作用以及所需的药用载体。本发明的剂量单位形式的说明书由活性化合物的独特特性和所获得的特别治疗作用以及在配制用于治疗个体的此类活性化合物中的固有限制描述并且直接取决于它们。
药物组合物可以与施用说明书一起包含在容器、包装或分配器中。
本发明实施方案的化合物可以以盐，优选以式I化合物的可药用盐提供。这些化合物的可药用盐的实例包括衍生自酸的那些盐，所述的有机酸例如乙酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸、草酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、苯甲酸、水杨酸、苯乙酸、扁桃酸、甲磺酸、苯磺酸和对-甲苯磺酸；无机酸，例如盐水和硫酸等，各自得到甲磺酸盐、苯甲磺酸盐、对-甲苯磺酸盐、盐酸盐和硫酸盐等，或者衍生自碱的那些盐，所述的碱例如有机和无机碱。用于形成本发明化合物的盐的适合的无机碱的实例包括铵、锂、钠、钙、钾、铝、铁、镁、锌等的氢氧化物、碳酸盐和碳酸氢盐。盐还可以用适合的有机碱形成。适于与本发明化合物形成可药用碱加成盐的此类碱包括无毒并且强度足以形成盐的有机碱。此类有机碱已经是本领域众所周知的并且可以包括氨基酸，例如精氨酸和赖氨酸，一、二或三羟基烷基胺(例如一、二和三乙醇胺)、胆碱、一、二和三烷基胺(例如甲胺、二甲胺和三甲胺)、胍；N-甲基葡糖胺；N-甲基哌嗪；吗啉；乙二胺；N-苄基苯乙胺；三(羟基甲基)氨基甲烷等。
本发明实施方案的化合物的盐可以以常规方式应用本领域已知的方法制备。所述的碱性化合物的酸加成盐可以通过将根据本发明的第一或第二方面的游离碱化合物溶于包含所需的酸的水或含水醇溶液或其它适合溶剂中制备。当本发明化合物包含酸性官能时，所述化合物的碱盐可以通过将所述化合物与适合的碱反应制备。酸或碱盐可以直接分离或可以通过浓缩溶液，例如通过蒸发来获得。本发明化合物还可以以溶剂化或水合形式存在。
本领域技术人员应当理解的是，以上描述本质上是示例性的和说明性的，并且旨在说明本发明和其优选的实施方案。通过常规试验，技术人员将意识到显而易见的修饰和变化而不脱离本发明的精神。因此，本发明旨在不是由以上描述定义，而是由下列权利要求和它们的同等物定义。
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由以上描述可知，本发明组合物和方法中的多种修饰和改变对于本领域技术人员完成。附属权利要求范围内的所有此类修饰旨在包括在其中。
应当理解的是，多种因素(例如不同化合物的不同细胞渗透能力)可以引起体外生物化学和细胞试验之间化合物活性的差异。
将在本说明书中引用的所有出版物(包括但不限于专利和专利申请)并入本文作为参考，犹如将每个单独的出版物特别地并且单独地说明并入本文作为参考等同于将全部并入本文作为参考。
本申请书中给出的本发明化合物的化学名是由MDL’s ISIS DrawAutonom软件工具产生的并且是未证实的。在不一致性的事件中，优选应用描述的结构。
<110>Galapagos N.V.
     Andrews，Martin J I
     Edwards，Paul
     Chambers，Mark S
     Schmidt，Wolfgang
     Clase，Juha A
     Bar，Gregory
     Hirst，Kim L
     Angus，MacLeod
<120>用于治疗变性和炎性疾病的***并吡嗪化合物
<130>GAL-033-WO-PCT
<150>US 60/803,552
<151>2006-05-31
<150>US 60/
<151>2007-05-25
<150>US 60/
<151>2007-05-25
<150>US 60/
<151>2007-05-25
<150>US 60/
<151>2007-05-29
<160>6
<170>PatentIn版本3.4
<210>1
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<212>DNA
<213>人工
<220>
<223>靶序列
<400>1
<210>2
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Figure A200780019156D02392
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<223>靶序列
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Figure A200780019156D02401
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<223>靶序列
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Figure A200780019156D02402
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<223>靶序列
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Figure A200780019156D02403
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<213>人工
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<223>靶序列
<400>6
Figure A200780019156D02404

Claims (65)

1.式III化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药以及其立体异构体、同位素变体和互变异构体：
Figure A200780019156C00021
其中
R1是H或者取代的或未取代的烷基；并且每个R8和R9独立地选自取代的或未取代的环烷基、取代的或未取代的杂环烷基、取代的或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基。
2.权利要求1的化合物，其中R8选自取代的或未取代的环戊基、环己基、取代的或未取代的苯基、取代的或未取代的吡啶基、取代的或未取代的嘧啶和取代的或未取代的吡嗪、取代的或未取代的吡咯、取代的或未取代的吡唑以及取代的或未取代的咪唑。
3.权利要求1的化合物，其中R8选自取代的苯基、取代的吡啶基和取代的嘧啶；并且取代基是
-L-R8d；并且其中
L选自键、亚烷基、杂亚烷基、-O-、-N(R8e)-、-CO-、-CO2-、-SO-、-SO2-、-CON(R8e)-、-SO2N(R8e)-、-N(R8e)CO-、-N(R8e)SO2-、-N(R8e)CON(R8e)-、-N(R8e)SO2N(R8e)-；并且
R8d选自取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的环烷基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂环烷基、取代的或未取代的杂芳基、取代的或未取代的氨基、取代的或未取代的芳烷基、取代的或未取代的杂芳基烷基和取代的或未取代的氨基烷基；并且
R8e选自H、取代的或未取代的烷基和取代的或未取代的环烷基。
4.权利要求1的化合物，其中R8是
Figure A200780019156C00031
其中L和R8d如权利要求3中描述的；下标n选自1-4；并且每个R8a独立地选自氢、取代的或未取代的烷基、烷氧基、氰基和卤素。
5.权利要求4的化合物，其中L是键、-O-、-CO-、-CON(R8e)-或-N(R8e)CO-；
R8d选自取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的环烷基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂环烷基、取代的或未取代的杂芳基、取代的或未取代的芳烷基、取代的或未取代的杂芳基烷基和取代的或未取代的氨基烷基；并且
R8e选自H、取代的或未取代的烷基。
6.权利要求4的化合物，其中L是键、-O-、-CO-、-CON(R8e)-或-N(R8e)CO-；并且
R8d选自H、烷基氨基乙基、二烷基氨基乙基、环烷基、杂环烷基、芳基烷基和杂芳基烷基。
7.权利要求4的化合物，其中L是键、-O-、-CO-、-CON(R8e)-或-N(R8e)CO-；并且
R8d选自H、甲基氨基乙基、乙基氨基乙基、二甲基氨基乙基、二乙基氨基乙基、取代的或未取代的吡咯烷基、苄基和吡啶基甲基。
8.权利要求4的化合物，其中L是键、-CO-、-O(CH2)m1-、-CON(H)(CH2)m1-或-NHCO-；下标m1选自1-4；并且R8d是
Figure A200780019156C00032
并且其中环P是取代的或未取代的杂环烷基。
9.式IVa、IVb、IVc或IVd化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药以及其立体异构体、同位素变体和互变异构体：
Figure A200780019156C00041
并且其中L和环P如权利要求8中描述的；下标n选自1-4；每个R8a独立地选自氢、取代的或未取代的烷基、烷氧基、氰基和卤素；并且R9独立地选自取代的或未取代的芳基和杂芳基。
10.权利要求9的化合物，其中L是键。
11.权利要求9的化合物，其中L是-CO-。
12.权利要求9的化合物，其中L是-NHCO-或-CONH-。
13.权利要求9的化合物，其中L是-CON(H)-CH2-CH2-或-N(H)-CO-CH2-CH2-。
14.权利要求9的化合物，其中L是-OCH2-CH2-或-NHCH2-CH2-。
15.权利要求9-14中任意一项的化合物，其中环P是取代的或未取代的哌啶、吗啉或哌嗪。
16.权利要求9的化合物，其中每个R8a是H。
17.权利要求9的化合物，其中下标n是1并且R8a是Me、Et、Pr、异-Pr、Cl、F、CN、OMe或CF3。
18.权利要求1的化合物，其中化合物是式Va、Vb、Vc、Vd、Ve或Vf：
Figure A200780019156C00051
其中R9如权利要求1中描述的并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
19.权利要求18的化合物，其中R8b是H。
20.权利要求18的化合物，其中R8b是取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
21.权利要求18的化合物，其中R8b是Me、Et、Pr、i-Pr、t-Bu、i-Bu、CH2CONH2、环丙基或环丙基甲基。
22.权利要求1的化合物，其中R9选自取代的或未取代的芳基。
23.权利要求1的化合物，其中R9选自取代的或未取代的苯基。
24.权利要求1的化合物，其中R9选自取代的或未取代的杂芳基。
25.权利要求1的化合物，其中R9选自取代的或未取代的苯基、吡啶基、吲哚基、异吲哚基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、噁唑基和噻唑基。
26.权利要求1-25中任意一项的化合物，其中R9是
Figure A200780019156C00061
或
Figure A200780019156C00062
并且每个A1、A2和A3独立地选自S、O、N、NR9a和CR9a；每个R9a独立地是H或者取代的或未取代的烷基；并且R9b是CONH2、CONHMe或CN。
27.权利要求1-25中任意一项的化合物，其中R9是
Figure A200780019156C00063
或
Figure A200780019156C00064
28.权利要求1-25中任意一项的化合物，其中R9是
Figure A200780019156C00065
Figure A200780019156C00066
或
29.权利要求1-25中任意一项的化合物，其中R9是
Figure A200780019156C00068
并且其中下标m选自1-4并且每个R9d独立地是H、取代的或未取代的烷基或卤素。
30.权利要求1-25中任意一项的化合物，其中R9是
Figure A200780019156C00071
并且其中下标m选自1-4并且每个R9d独立地是H、取代的或未取代的烷基或卤素。
31.权利要求1-25中任意一项的化合物，其中R9是
Figure A200780019156C00072
或
并且其中下标m选自1-3并且每个R9d独立地是H、取代的或未取代的烷基或卤素。
32.权利要求29-31中任意一项的化合物，其中每个R9d是H。
33.权利要求29-31中任意一项的化合物，其中m是1或2并且每个R9d是Me、Cl或F。
34.权利要求1的化合物，其中化合物是式VIa、VIb、VIc、VId、VIe或VIf：
Figure A200780019156C00081
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
35.权利要求1的化合物，其中化合物是式VIIa、VIIb、VIIc、VIId、VIIe或VIIf：
Figure A200780019156C00091
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
36.权利要求1的化合物，其中化合物是式VIIIa、VIIIb、VIIIc、VIIId、VIIIe或VIIIf：
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
37.权利要求1的化合物，其中化合物是IXa、IXb、IXc、IXd、IXe或IXf：
Figure A200780019156C00111
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
38.权利要求1的化合物，其中化合物是式Xa、Xb、Xc、Xd、Xe或Xf：
Figure A200780019156C00121
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基。
39.权利要求1的化合物，其中化合物是式XIa、XIb、XIc、XId、XIe或XIf：
Figure A200780019156C00131
并且R8b是氢、取代的或未取代的烷基或者取代的或未取代的环烷基；并且R9e是H、Me或CN。
40.权利要求34-39中任意一项的化合物，其中R8b是H。
41.权利要求34-39中任意一项的化合物，其中R8b是环烷基。
42.权利要求34-39中任意一项的化合物，其中R8b是环丙基。
43.权利要求34-39中任意一项的化合物，其中R8b是取代的或未取代的烷基。
44.权利要求34-39中任意一项的化合物，其中R8b是Me、Et、Pr、i-Pr、t-Bu、i-Bu、CF3、CH2CF3、CH2CONH2或环丙基甲基。
45.权利要求1的化合物，其中化合物是式XIIa、XIIb、XIIc或XIId：
46.权利要求1的化合物，其中化合物是式XIIIa、XIIIb、XIIIc或XIIId：
Figure A200780019156C00142
47.权利要求1的化合物，其中化合物是式XIVa、XIVb、XIVc或XIVd：
Figure A200780019156C00143
48.权利要求1的化合物，其中化合物是式XVa、XVb或XVc：
Figure A200780019156C00151
并且L是键、-CO-或-O-CH2-CH2-；环P是
Figure A200780019156C00152
并且R8b是H、Me、i-Pr、t-Bu、CH2CONH2、环丙基甲基或CH2CF3。
49.权利要求48的化合物，其中L是键并且环P是
Figure A200780019156C00153
50.权利要求1的化合物，其中化合物选自
(4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
4-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-苯甲酰胺；
4-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-1H-吡啶-2-酮；
4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-苯甲酰胺；
4-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
2-氟-4-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-苯甲酰胺；
3-氟-4-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-苯甲酰胺；
5-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
3-氟-4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-苯甲酰胺；
2-氟-4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-苯甲酰胺；
[5-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；
[5-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；
5-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺；
2，6-二氟-4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-苯甲酰胺；
4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺；
[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-[5-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
(3-氟-4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
(3-氯-4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
4-{8-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
5-{8-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
(4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(2H-吡唑-3-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
4-{8-[4-((2R，6S)-2，6-二甲基-吗啉-4-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
(4-吗啉-4-基-3-三氟甲基-苯基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
2，6-二氟-4-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-苯甲酰胺；
4-[8-(4-哌嗪-1-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
5-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-呋喃-3-甲酰胺；
5-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-3-甲酰胺；
[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-[4-((2S，5R)-2，4，5-三甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺；
4-{8-[4-((2S，5R)-2，4，5-三甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
5-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-呋喃-2-甲酰胺；
6-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-3，4-二氢-2H-异喹啉-1-酮；
5-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
{2-吗啉-4-基-5-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲醇；
[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
6-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-3，4-二氢-1H-喹啉-2-酮；
(4-哌嗪-1-基-苯基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
[6-(4-环丙基甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
[6-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-{6-[4-(2，2，2-三氟-乙基)-哌嗪-1-基]-吡啶-3-基}-胺；
[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-{4-[4-(2，2，2-三氟-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基}-胺；
[4-(4-环丙基甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
4-[8-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺；
(5-苯并[#b！]噻吩-3-基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；
(5-苯并[#b！]噻吩-3-基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺；
(4-吗啉-4-基-苯基)-(5-噻吩-3-基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-胺；
[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-(5-噻吩-3-基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-胺；
[5-(5-乙基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；
6-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-1，1-二氧代-1，2-二氢-1$l％6&-苯并[#d！]异噻唑-3-酮；
4-{8-[6-(4-环丙基甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[6-(4-异丙基-吡嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
4-(8-{6-[4-(2，2，2-三氟-乙基)-哌嗪-1-基]-吡啶-3-基氨基}-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)-噻吩-2-甲酰胺；
4-(8-{4-[4-(2，2，2-三氟-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基氨基}-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[4-(4-环丙基甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
[4-(4-环丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
[6-(4-环丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻唑-2-甲酰胺；
4-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻唑-2-甲酰胺；
4-(8-{4-[1-(2，2，2-三氟-乙基)-哌啶-4-基]-苯基氨基}-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)-噻吩-2-甲酰胺；
[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-{4-[1-(2，2，2-三氟-乙基)-哌啶-4-基]-苯基}-胺；
5-{8-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
(5-苯并噻唑-6-基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；
(2-氟-4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
(2-氯-4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
1-{5-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-基}-乙酮；
{4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2H-吡唑-3-基}-甲醇；
6-{4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-苯基}-4，5-二氢-2H-哒嗪-3-酮；
(5-苯并[1，2，5]噁二唑-5-基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；
4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻唑-2-甲基甲酰胺；
4-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻唑-2-甲基甲酰胺；
5-[8-(2-氟-4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
5-[8-(2-氯-4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
5-{8-[2-氯-4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
[5-(2-氨基-嘧啶-5-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；
5-{8-[6-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
3-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-苯并[#b！]噻吩-7-甲酰胺；
3-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-苯并[#b！]噻吩-7-甲酰胺；
{4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-吡啶-2-基}-甲醇；
(4-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-吡啶-2-基)-甲醇；
[4-(1-异丙基-哌啶-4-基)-苯基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
{5-[4-(2-氨基-噻唑-4-基)-苯基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基}-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；
4-{8-[6-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺；
5-[8-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
4-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺；
4-{8-[4-(1-异丙基-哌啶-4-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
(4-{8-[6-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-吡啶-2-基)-甲醇；
[5-(2-氟甲基-吡啶-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺；
5-{8-[4-(1-异丙基-哌啶-4-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
[5-(1H-吲唑-6-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；
4-[8-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-呋喃-2-甲酰胺；
4-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-5-甲基-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[6-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-5-甲基-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
4-{8-[6-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
5-[8-(2-吗啉-4-基-嘧啶-5-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
1-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-哌嗪-2-酮；
5-{8-[2-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-嘧啶-5-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
5-{8-[4-(4-#叔！-丁基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
[4-(4-#叔！-丁基-哌嗪-1-基)-苯基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
[5-(1H-吲唑-5-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；
5-{8-[4-(2-氧代-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
[5-(1H-吲唑-6-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-胺；
[6-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基]-(5-{(E)-1-[4-亚甲基-2，4-二氢-吡唑-(3E)-亚基甲基]-丙烯基}-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基)-胺；
7-氟-5-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
6-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
(3-甲基氨基甲基-4-吗啉-4-基-苯基)-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；
2-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-5，6-二氢-呋喃并[2，3-#c！]吡咯-4-酮；
5-{8-[4-(4-异丙基-2-氧代-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
2-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-4，5-二氢-噻吩并[2，3-#c！]吡咯-6-酮；
5-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-3，3-二甲基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
5-(8-环己基氨基-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
5-[8-(四氢-吡喃-4-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；和
5-[8-(4-氟-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮。
51.权利要求1的化合物，其中化合物选自：
4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-N-吡啶-3-基甲基-苯甲酰胺；
4-[5-(2-氧代-1，2-二氢-吡啶-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-N-吡啶-3-基甲基-苯甲酰胺；
2-甲氧基-N-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
4-(8-{3-甲氧基-4-[(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酰基]-苯基氨基}-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)-噻吩-2-甲酰胺；
N-苄基-2-甲氧基-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
N-苄基-3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-N-吡啶-2-基甲基-苯甲酰胺；
N，N-二乙基-3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[i，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
{3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-吡咯烷-1-基-甲酮；
(4-异丙基-哌嗪-1-基)-{3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲酮；
3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
N-乙基-3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
N-环己基甲基-3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
N-(4-羟基-苄基)-3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
4-[8-(4-苄基氨基甲酰基-3-甲氧基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺；
4-[8-(6-苯甲酰基氨基-吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺；
N-苄基-N-甲基-3-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
N-{5-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-吡啶-2-基}-苯甲酰胺；
1-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰基}-哌啶-4-甲基甲酰胺；
4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-N-(2-吡啶-4-基-乙基)-苯甲酰胺；
(4-乙基-哌嗪-1-基)-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲酮；
N-(1-乙基-吡咯烷-2-基甲基)-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
(2，5-二氢-吡咯-1-基)-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲酮；
[4-(2-乙氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲酮；
N-环丙基甲基-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
N-甲基-N-(1-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰基}-吡咯烷-3-基)-乙酰胺；
[4-(4-氟-苄基)-哌嗪-1-基]-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲酮；
(4-苯基-哌嗪-1-基)-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲酮；
((S)-2-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲酮；
N-((R)-1-苄基-吡咯烷-3-基)-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-(4-吡啶-2-基-哌嗪-1-基)-甲酮；
N-(1-甲氧基甲基-丙基)-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
[4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲酮；
N-[2-(4-羟基-苯基)-乙基]-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
(4-#仲！-丁基-哌嗪-1-基)-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲酮；
N-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
(苄基-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰基}-氨基)-乙酸乙酯；
N-异丙基-2-(4-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰基}-哌嗪-1-基)-乙酰胺；
N-(2-甲氧基-乙基)-N-甲基-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
N-乙基-N-(2-甲氧基-乙基)-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-N-(四氢-呋喃-2-基甲基)-苯甲酰胺；
(3，6-二氢-2H-吡啶-1-基)-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲酮；
N-(2-甲基硫烷基-乙基)-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
N-(2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲基)-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
N-(2-二异丙基氨基-乙基)-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
N-((S)-1-乙基-吡咯烷-2-基甲基)-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
N-异丁基-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；
[1，4’]二哌啶基-1’-基-{4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯基}-甲酮；
N-(2-羟基-乙基)-4-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基氨基]-苯甲酰胺；和
4-[8-(6-苯基乙酰基氨基-吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺。
52.权利要求1的化合物，其中化合物选自：
4-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
5-{8-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
[5-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-(4-吗啉-4-基-苯基)-胺；
4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[4-((2R，6S)-2，6-二甲基-吗啉-4-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
4-[8-(4-哌嗪-1-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[4-((2S，5R)-2，4，5-三甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
5-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
4-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-呋喃-2-甲酰胺；
5-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
4-[8-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[6-(4-环丙基甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[6-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
4-(8-{6-[4-(2，2，2-三氟-乙基)-哌嗪-1-基]-吡啶-3-基氨基}-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)-噻吩-2-甲酰胺；
4-(8-{4-[4-(2，2，2-三氟-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基氨基}-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基)-噻吩-2-甲酰胺；
4-{8-[4-(4-环丙基甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
5-{8-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
5-{8-[6-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
5-[8-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
4-{8-[4-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺；
4-{8-[4-(1-异丙基-哌啶-4-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-噻吩-2-甲酰胺；
5-{8-[4-(1-异丙基-哌啶-4-基)-苯基氨基]-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
5-[8-(2-吗啉-4-基-嘧啶-5-基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；
[4-(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-苯基]-[5-(1H-吡唑-4-基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-8-基]-胺；和
2-[8-(4-吗啉-4-基-苯基氨基)-[1，2，4]***并[1，5-a]吡嗪-5-基]-4，5-二氢-噻吩并[2，3-c]吡咯-6-酮。
53.药物组合物，该药物组合物包含可药用载体和药用有效量的权利要求1至52中任何一项的化合物。
54.权利要求53的药物组合物，其中载体是非肠道载体。
55.权利要求53的药物组合物，其中载体是口服载体。
56.权利要求53的药物组合物，其中载体是局部用载体。
57.权利要求1至52中任意一项的化合物在制备用于治疗或预防具有ECM降解特征的病症的药物中的用途。
58.权利要求1至52中任意一项的化合物在制备用于治疗或预防选自涉及炎症的疾病的病症的药物中的用途。
59.权利要求58化合物的用途，其中所述的疾病是类风湿性关节炎。
60.权利要求1至52中任意一项的化合物在制备用于治疗或预防通过施用促***原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶5抑制剂来预防、改善或消除的病症的药物中的用途。
61.治疗具有异常基质金属蛋白酶活性特征的病症的方法，该方法包括施用治疗有效量的权利要求1至52中任意一项的基质金属蛋白酶抑制化合物。
62.治疗选自涉及胞外基质降解的疾病的病症的方法，该方法包括施用治疗有效的基质金属蛋白酶抑制量的权利要求1至52中任意一项的化合物。
63.治疗选自涉及MMP1异常细胞表达的疾病的病症的方法，该方法包括施用治疗有效的基质金属蛋白酶抑制量的权利要求1至52中任意一项的化合物。
64.治疗或预防炎性疾病的方法，该方法包括给需要的个体施用治疗有效量的权利要求1至52中任意一项的化合物。
65.治疗或预防类风湿性关节炎的方法，该方法包括给需要的个体施用治疗有效量的权利要求1至52中任意一项的化合物。
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