CN101426782B

CN101426782B - 黑皮质素4型受体激动剂哌啶羰基吡咯烷

Info

Publication number: CN101426782B
Application number: CN2007800145719A
Authority: CN
Inventors: 马克·D·安德鲁斯; 艾伦·D·布朗; 马克·I·兰斯德尔; 尼古拉斯·W·萨默希尔
Original assignee: Pfizer Ltd
Current assignee: Pfizer Ltd
Priority date: 2006-02-23
Filing date: 2007-02-19
Publication date: 2012-10-31
Anticipated expiration: 2027-02-19
Also published as: ZA200806992B; JP5243274B2; JP2009527543A; CN101426782A

Abstract

本发明涉及一类通式(I)的黑皮质素MCR4激动剂。其中变量和取代基如本发明所定义，且尤其涉及选择性MCR4激动剂化合物，本发明涉及它们在药物中的用途，尤其在治疗性功能障碍和肥胖中的用途，本发明涉及在它们的合成中有用的中间体和含有它们的组合物。

Description

黑皮质素4型受体激动剂哌啶羰基吡咯烷

本发明涉及一些类型的化合物，和其药学可接受盐、溶剂合物和前药，它们是黑皮质素4(MC4)受体激动剂，特别涉及选择性MC4激动剂化合物，本发明涉及其在药物中的用途，涉及所述化合物的组合物，涉及制备它们的方法和涉及这些方法中使用的中间体。特别的，本发明涉及MCR4激动剂类哌啶羰基吡咯烷(piperidinoylpyrrolidines)化合物，所述化合物用于治疗性功能障碍、肥胖、糖尿病和其它疾病。[术语“MC4”、“MC4受体”“MCR4”、“MC4-R”等在本文可互换使用。]

黑皮质素是结合并激活黑皮质素受体家族的G-蛋白偶联受体(GPCR’s)的阿片黑皮质素前体(POMC)衍生的肽。黑皮质素调节许多生理过程，包括性功能和性行为、食物摄取和代谢。已克隆出5种黑皮质素受体，MCR1、MCR2、MCR3、MCR4、MCR5，且它们在多种组织中表达。MCR1特异地在黑色素细胞和黑色素瘤细胞中表达，MCR2是ACTH受体并在肾上腺组织中表达，MCR3主要在大脑和边缘***中表达，MCR4广泛表达于大脑和脊髓中，MCR5表达于大脑和许多外周组织中，包括皮肤、脂肪组织、骨骼肌和淋巴组织。MCR3可能参与控制性功能、食物摄取和产热。

MC4-R是G蛋白偶联的七次跨膜受体，主要表达于下丘脑、海马和丘脑中(Gantz等人1993J Biol Chem 268：15174-15179)。该受体参与体重的中枢调节：MC4-R被衍生自阿片黑皮质素前体的α-促黑色素细胞激素(MSH)激活，并且agouti基因相关蛋白(AGRP)可使该受体失活。α-MSH诱导体重下降，然而agouti蛋白的异位表达导致在agouti小鼠中的肥胖(Fan等人1993Nature 385：165-168；Lu et al.1994Nature 371：799-802)。MC4-R在体重调节中作用的其它证据来自基因敲除小鼠模型(Huszar等人1997 Cell 88：131-141)和人单倍不足突变(Vaisse等人1998Nat Genet 20：113-114；Yeo等人1998NatGenet 20：111-112；Hinney等人1999 J Clin Endocrinol Metab 84：1483-1486)。在MC4-R-敲除小鼠中，可观察到5周龄小鼠的体重增加。到15周，纯合突变雌性小鼠平均体重为野生型同窝小鼠的两倍，而纯合突变雄性小鼠比野生对照小鼠重～50％。MC4-R敲除杂合子小鼠表现出体重的增加介于野生型和纯合突变小鼠的体重增加之间，因此表明MC4-R去除对体重调节的基因剂量效应。纯合子突变的食物摄取与野生型亲属相比增加～50％(Huszar等人1997 Cell 88：131-141)。[来自Am.J.Hum.Genet.，65：1501-1507，1999]。已经表明MCR4的激活可诱导啮齿类中的******，MCR4的失活可导致肥胖(在Hadley，1999，Ann N Y Acad Sci.，885：1-21中综述，Wikberg等人2000，Pharmacol Res.，42(5)，393-420)。

在Drugs Of The Future，2004，29(10)：1065-1074中，Chaki和Nakazato指出作用于MC4受体的配体的潜在治疗应用。国际专利申请公开号WO2005/077935、WO02/068387和WO02/068388，以及国际专利申请PCT/IB2006/002151涉及特定的哌啶基羰基吡咯烷MC4激动剂，其可用于治疗性功能障碍、肥胖、糖尿病和其它疾病。对于本发明的MC4激动剂的治疗方面，上述公开在此处全部引用作为参考。

本发明的化合物用于治疗对MC4受体激活有反应的疾病、病症或病情，包括：

男性和女性性功能障碍，包括活动减退的***障碍、性唤起障碍、女性性高潮障碍和/或***痛障碍、男性***机能障碍；

肥胖(通过减少食欲、增加代谢速度、减少脂肪摄取或减少糖渴求)；和

糖尿病(通过增加葡萄糖耐受和/或减少胰岛素抵抗)。

本发明的化合物可用于治疗其它疾病、病症或病情，包括但不限制于高血压、高脂血症、骨关节炎、癌症、胆囊疾病、睡眠呼吸暂停、抑郁症、焦虑、强迫症、神经病、失眠/睡眠疾病、药物滥用、疼痛、发热、炎症、免疫调节、类风湿性关节炎、皮肤晒黑、痤疮和其它皮肤疾病、神经保护和认知记忆增强包括治疗阿尔茨海默病、治疗下泌尿道功能障碍(包括尿失禁-膀胱过度活动症、日间频率增加、夜尿症、尿急、尿失禁(有无意的漏尿病情)包括压迫性尿失禁、急迫性尿失禁和混合尿失禁、伴随尿失禁的膀胱过度活动症、遗尿、夜间遗尿症、持续性尿失禁、情境性尿失禁例如在***期间尿失禁、和伴随良性***增生(BPH)的下泌尿道症状(LUTS))、和上述涉及的专利申请中提及的其它适应症。

本发明的化合物特别适合于治疗女性性功能障碍、男性***功能障碍、肥胖、糖尿病和下泌尿道功能障碍病情。

本文所使用的术语“治疗”(＂treating＂、＂treat＂或＂treatment＂)包括预防和控制，即指定病情的预防和缓解治疗。

本发明的化合物MCR4激动剂的理想性质包括：理想的MCR4激动剂效力，如下文中详述；与MCR1、和/或MCR5、和/或MCR3相比，对MCR4激动作用的选择性，如下文中详述；理想的MC4R激动剂效力和与MCR1、和/或MCR5、和/或MCR3相比对MCR4的选择性；良好的生物药学性质，例如物理稳定性；溶解度；口服生物利用度；合适的代谢稳定性；从MC4受体替代AGRP的能力。

本发明提供了式(I)的化合物，及其药学可接受盐、溶剂合物(包括水合物)和前药，

其中

X和Y中的一个为N，且另一个为CH，

R为F、Cl、CN、CF₃或甲氧基，条件是当Y为N时，R不是F或Cl，

R¹为苯基、2-吡啶基、C₃-C₆环烷基或CH₂(C₃-C₆环烷基)，其中环部分任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自F、Cl、CN、甲基和甲氧基，

R²为H、F或Cl，条件是当Y为N时，R²不是F或Cl，

Het为含有1个或2个N原子的6-元环，其中该环为芳香环，或在环中含有2个双键和＝O取代基，该环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自F、Cl、OH、CN、甲基、乙基、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂和甲氧基，

或者，Het为含有1个或2个N原子的6-元环，该6-元环在相对于与吡咯烷环相连的3，4-位与含有一个或两个其它N原子的5-元芳香环稠合，该5-元环任选被OH取代。

合适的“Het”基团的非限制性实例如下所示：

优选地X为N且Y为CH。

优选地R为氯。

优选地R¹为任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自F、Cl、CN、甲基和甲氧基。

更优选地R¹为苯基、4-氯苯基或4-氟苯基。

在另一个实施方案中，R¹优选地为C₃-C₆环烷基，更优选地为环丙基或环己基。

优选地R²为H或F。

更优选地R²为H。

优选地Het为吡啶-2-基、吡啶-3-基、哒嗪-3-基、6-氧代-1，6-二氢哒嗪-3-基、6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基、2-氧代-1，2-二氢嘧啶-4-基、6-氧代-1，6-二氢嘧啶-4-基、2-氧代-1，2-二氢吡啶-4-基、咪唑并[1，2-b]哒嗪-6-基、[1，2，4]***并[4，3-b]哒嗪-6-基或6-氧代-1，6-二氢吡啶-2-基，其任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自F、Cl、OH、CN、甲基、乙基和甲氧基。

更优选地Het为吡啶-2-基、吡啶-3-基、哒嗪-3-基或6-氧代-1，6-二氢哒嗪-3-基，其任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自OH、CN、F、甲基和甲氧基。

更优选地Het为吡啶-2-基或哒嗪-3-基，每个在相对于与吡咯烷部分相连的键的对位被OH、CN或甲氧基取代。

最优选地Het为哒嗪-3-基，其在相对于与吡咯烷部分相连的键的对位被OH、CN或甲氧基取代。

优选的化合物、盐、溶剂合物和前药包括这样的化合物，其中：

R¹具有与下述具体化合物相关的值(value)。

R具有与下述具体化合物相关的值。

R²具有与下述具体化合物相关的值。

Het具有与下述具体化合物相关的值。

其它优选的化合物、盐、溶剂合物和前药包括这样的化合物，其中：

R、R¹、R²和Het具有与下述具体化合物相关的值。

优选地所述化合物选自：

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-羟基-3，5-二甲基-4-苯基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-羟基-3，5-二甲基-4-吡啶-2-基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-羟基-3，5-二甲基-4-苯基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-羟基-3，5-二甲基-4-苯基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(3，4-二氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-羟基-4-(4-甲氧基苯基)-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-环己基-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮；

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-1-(6-氯哒嗪-3-基)-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-基]羰基}-4-(4-氟苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇；

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-(6-甲氧基哒嗪-3-基)吡咯烷-3-基]羰基}-4-环丙基-3，5-二甲基哌啶-4-醇；

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-3-基]羰基}-4-(4-氟苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-3-氰基吡啶；

6-[(3S，4S)-3-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}-4-(5-氟吡啶-2-基)吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4S)-3-(5-氟吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-羟基-3，5-二甲基-4-苯基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4S)-3-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}-4-(5-氟吡啶-2-基)吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4S)-3-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}-4-(5-氟吡啶-2-基)吡咯烷-1-基]哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(5-氰基吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4R)-3-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}-4-(6-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4S)-3-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}-4-(5-甲氧基吡啶-2-基)吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-1-{[(3S，4R)-1-(5-氟吡啶-3-基)-4-(6-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-3-基]羰基}-3，5-二甲基哌啶-4-醇；

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-哒嗪-3-基吡咯烷-3-基]羰基}-4-(4-氟苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮；

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-[1，2，4]***并[4，3-b]哒嗪-6-基吡咯烷-3-基]羰基}-4-(4-氟苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇；

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-咪唑并[1，2-b]哒嗪-6-基吡咯烷-3-基]羰基}-4-(4-氟苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇；

4-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]嘧啶-2(1H)-酮；

4-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-1-甲基嘧啶-2(1H)-酮；

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-(6-甲氧基哒嗪-3-基)吡咯烷-3-基]羰基}-4-(4-氟苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶，1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(3，5-二氟吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4S)-3-(3，5-二氟吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(3，5-二氟吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(3，4-二氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈；

6-[(3S，4S)-3-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-1-基]哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(3，4-二氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3(2H)-酮；

及其药学可接受盐、溶剂合物(包括水合物)和前药。

更优选地所述化合物选自：

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶，1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3(2H)-酮；

及其药学可接受盐、溶剂合物(包括水合物)和前药。

最优选地所述化合物选自：

6-[(3S，4S)-3-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷，1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮；

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪，3(2H)-酮；

及其药学可接受盐、溶剂合物(包括水合物)和前药。

式(I)化合物的药学可接受盐包括其酸加成盐。适合的酸加成盐从酸形成，该酸形成无毒的盐。实例包括乙酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环己烷氨基磺酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、六氟磷酸盐、羟苯酰苯酸盐、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酸盐(naphthylate)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐(pamoate)、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐、糖二酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐和昔萘酸盐(xinofoate)。还可以形成酸的半盐(hemisalts)，例如半硫酸盐(hemisulphate)。对于合适的盐的综述，参见Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，和Useby Stahl and Wermuth(Wiley-VCH，2002)。

本发明的化合物、盐、溶剂合物和前药可以以互变异构体(tautomeric)、两性离子、多晶型、晶体、液晶(liquid crystalline)等形式存在。所有这些形式包括在本发明的范围中。表示互变异构体关系的实例(化合物以“Het”基团为例)如下所示，“酮”和“烯醇”互变异构体包括在对于式(I)化合物的“Het”的范围内：

本发明的的范围中还包括多成分复合物(除了盐和溶剂合物之外)，其中药物和至少一种其它成分以化学计量或非-化学计量存在。这类复合物包括包合物(clathrate)(含药物-宿主的复合物)和共结晶(co-crystals)。后者通常定义为通过非共价相互作用连接在一起的中性分子(neutral molecular)成分的晶态复合物，但是也可以为中性分子与盐的复合物。

本发明的的范围中还包括同位素标记的式(I)化合物，例如，其中掺入²H、³H、¹³C、¹⁵N、¹⁸O或其它同位素，这可以通过本文所述的合成方法的适合变化使用本领域已知的方法和试剂或其改变的方法制备。

如本文所示，式(I)的化合物的所谓的‘前药’在本发明的范围内。因此，当将式(I)化合物的一些衍生物(其本身可以几乎不具有或不具有药理学活性)给药到体内或身体上时，所述衍生物能够转变为具有所需活性的式(I)化合物，例如通过水解断裂。这些衍生物指‘前药’。对于前药的用途的进一步的信息参见Pro-drugs as Novel Delivery Systems，Vol.14，ACS SymposiumSeries(T Higuchi和W Stella)和Bioreversible Carriers in Drug Design，PergamonPress，1987(Ed.E B Roche，American Pharmaceutical Association)。

一些式(I)的化合物本身还可以作为其它式(I)化合物的前药。

制备/分离单个对映体的常规技术包括从适合光学纯的前体手性合成或使用例如手性高效液相色谱(HPLC)进行外消旋体(或盐或衍生物的外消旋体)的拆分。

或者，外消旋体(或外消旋前体)可以与适合的光学活性化合物反应，所述光学活性化合物，例如醇，或在式(I)的化合物含有酸性或碱性部分的情况下，与酸或碱如酒石酸或1-苯基乙基胺反应。所得非对映体混合物可以通过色谱和/或分步结晶分离，或通过技术人员已知的方法将两种非对映异构体转化为相应的一种或多种纯对映体。

本发明的手性化合物(和其手性前体)可以在富含对映体形式中使用色谱法(通常为HPLC)在不对称树脂上用含有0至50％体积的异丙醇(通常为2至20％)且可以含有0至5％体积的烷基胺的烃(通常为庚烷或己烷)组成的流动相获得。洗脱液的浓度提供了富含的混合物。流动相的绝对的组合物将取决于所选定的手性固定相(不对称树脂)。

包括在实施例和制备中的下述途径表示合成式(I)的化合物的方法。技术人员将理解本发明的化合物，及它们的中间体可以通过本文具体描述的方法以外的方法，例如通过本文所述方法的改变，例如本领域已知的方法制备。对于合成、官能团转化、保护基的使用等的适合的教导参见，例如：

“Comprehensive Organic Transformations”，RC Larock，VCH PublishersInc.(1989)；Advanced Organic Chemistry”by J.March，Wiley Interscience(1985)；“Designing Organic Synthesis”by S Warren，Wiley Interscience(1978)；“Organic Synthesis-The Disconnection Approach”，S Warren，WileyInetrscience(1982)；“Guidebook to Organic Synthesis”，RK Mackie和DMSmith，Longman(1982)；“Protective Groups in Organic Synthesis”，TW Greene和PGM Wuts，John Wiley and Sons，Inc.(1999)；和“Protecing Groups”，PJ，Kocienski，Georg Thieme Verlag(1994)；和所述标准方法的任何改进的版本。

在下述通常的合成方法中，除另有说明，取代基R、R¹、R²、X、Y和Het如上述参见对于式(I)的化合物的定义。

下述途径表示合成式(I)的化合物的方法。技术人员将理解也可以使用其它等价的方法。

方案1表示通过中间体(II)和(III)的肽偶联制备式(I)的化合物，如果需要，加入适合的碱和/或添加物(例如1-羟基苯并***水合物或4-二甲基氨基吡啶)。

方案1

或者使用的条件包括在室温下搅拌通式(II)的哌啶和通式(III)的酸与1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐(EDCI)、三乙胺或N-甲基吗啉，和1-羟基苯并***水合物(HOBt)一起在二甲基甲酰胺(DMF)、四氢呋喃(THF)、二氯甲烷(DCM)或乙酸乙酯(EtOAc)中的溶液。其它可选择的适合的方法为搅拌通式(II)的中间体化合物和通式(III)与O-苯并***-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HBTU)或1-丙基磷酸环状酸酐一起在CH₂Cl₂或EtOAc中的溶液。任何适合的惰性溶剂可以用于上述条件，其中惰性溶剂指不含有羧酸或伯胺或仲胺的溶剂。应该使用至少1当量的每种偶联试剂，且视需要可以使用过量的一种或两种偶联试剂。

根据另一个实施方案，本发明提供了新颖的通式(III)中间体化合物。

方案2说明了通过使用保护基的方法制备通式(I)化合物的另一种途径，所述化合物具有一系列的Het基团。

方案2

PG为适合的氮-保护基。

新颖的式(IV)、(V)和(VI)化合物是本发明的另一个实施方案。

在方案2中，使用上述方案1中所述标准的肽偶联方法偶联通式(II)胺中间体和通式(IV)的被保护的吡咯烷酸中间体以制备通式(V)的偶联的和保护的中间体，从通式(V)中使用标准的脱保护方案移除氮保护基以得到通式(VI)的化合物。可以使用任何合适的氮保护基(如“Protecting Groups inOrganic Synthesis”3^rd Edition T.W.Greene和P.G.Wuts，Wiley-Interscience，1999中所述)。常用的适合本文所用的氮保护基(PG)包括叔丁氧基羰基(t-Boc)，其通过用酸(如三氟乙酸或盐酸)在有机溶剂(如二氯甲烷或1，4-二噁烷)处理方便地除去；和苄基，其通过在适合的催化剂存在下氢化或通过用氯甲酸1-氯乙基酯处理而除去。

“Het”基团(其中“Het”为杂芳基)可以通过替换适合的离去基团而引入，例如从式“Het-L”的杂芳香前体中替换适合的离去基团，其中L为适合的离去基团。适合的离去基团包括卤素。在一些情况中，可能需要过渡金属催化剂(如钯、铜)，任选与膦配体(如1，1’-二萘-2，2’二基二联苯基膦)组合，以得到所需的偶联产物。

或者，具有具体的Het基团的通式(I)化合物可以转化为具有不同Het基团的其它通式(I)化合物。例如：

i)式(Ia)的化合物，如方案3中所述其中Het含有适合的离去基团L，如甲氧基或氯，如方案3中所述该式(Ia)化合物可以在酸性或碱性条件下通过水解转化为式(Ib)化合物。优选酸性条件，且尤其优选用乙酸在回流温度下处理式(Ia)化合物。或者，式(Ia)化合物(其中L为氯)可以与式Z-O^-的醇盐(其中Z为适合的氧保护基)反应，得到式(Ia)中间体，其中L为OZ。然后脱保护提供式(Ib)的化合物。例如，当Z＝苄基时，它可以在适合催化剂存在下通过氢化移除。

方案3

ii)如方案4中所述，式Ic化合物(其中Het如方案4中所述且R³为H)可以通过用碱和烷基化试剂处理在适合溶剂中转化为式Id化合物，其中R³为甲基或乙基。适合的碱包括氢化钠、二异丙基氨基锂(lithiumdiisopropylamide)和六甲基二硅基氨基钠(sodium hexamethyldisilazide)，适合的烷基化试剂包括甲基碘、甲苯磺酸甲酯、硫酸二甲酯和乙基碘，且适合的溶剂包括四氢呋喃、二甲基甲酰胺和N-甲基-2-吡咯烷酮。任选的添加剂，如锂盐，例如溴化锂，也可以存在于反应混合物中。

方案4

方案5说明了从不饱和的通式(VII)中间体制备通式(IV)吡咯烷酸中间体的途径。

方案5

PG为适合的氮保护基。PG²为适合的羧酸保护基。式(VIII)、(IX)、(X)、(XI)和(XII)化合物即可以是市售的也可以是与本文所述的文献和/或制备相关领域的技术人员已知的。

通式(VII)的化合物可以用适合的叶立德(如甲基(三苯基亚正膦基(triphenylphosphoranylidene))乙酸酯或膦酸酯(phosphonate)阴离子，如来自三甲基膦酰基乙酸酯(trimethylphosphonoacetate)的脱保护)通过Wittig或类似方法烯化通式(XI)醛中间体制备成主要为所需的反式异构体。

在文献中有许多用于制备通式(VII)的不饱和中间体的可选择的方法，包括使用标准方法保护前体肉桂酸衍生物(VIII)，或在钯催化剂和适合的碱(如三乙胺)存在下，芳香卤化物(IX)与合适的丙烯酸酯衍生物(X)(例如丙烯酸叔丁酯)的Heck反应。

所得通式(VII)E-烯烃中间体将通过与通式(XII)的叶立德前体反应经历[3+2]-偶氮甲碱叶立德环加成，得到几乎唯一为反式立体化学的吡咯烷。该反应需要惰性溶剂，如二氯甲烷或甲苯或四氢呋喃，和通过一种或多种下述条件的活化：(1)酸催化剂，如TFA；(2)脱硅烷化试剂，如氟化银；(3)加热。

从环化加成反应得到的通式(XIII)的化合物为外消旋体，且可进行拆分得到其组成对映体(constituent enantiomers)，所述拆分可以通过制备HPLC使用手性固定相实现。或者，通式(IV)的酸中间体可以通过标准方法拆分，例如通过与对映体纯的试剂反应形成非对映体衍生物，所得非对映异构体通过物理方法分离，然后离去得到酸(IV)。

通式(XIII)的中间体化合物可以通过保护基PG²的脱保护转化为通式(IV)的化合物。许多方法可以用于实现这种转化(参见Advanced OrganicChemistry：Reactions，Mechanisms，and Structure，Fourth Edition.March，Jerry，1992，pp378-383，Wiley，New York，N.Y.USA出版)。尤其是，对于碱不稳定的保护基，用碱金属氢氧化物水溶液(如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾)在合适的有机溶剂中处理通式(XIII)的化合物得到相应的通式(IV)化合物。优选地，可与水混溶的有机共溶剂(例如1，4-二噁烷或四氢呋喃)也可以在这类反应中使用。如果需要，可以加热反应以帮助水解。在酸性条件下，一些保护基更便于水解，例如叔丁基或二苯甲基酯(benzhydryl esters)。这些酯可以通过用在惰性有机溶剂(如二氯甲烷)中的无水酸如三氟乙酸或盐酸处理。

新颖的式(XIII)的化合物是本发明的另一实施方案。

方案6说明了另一种从通式(VII)的不饱和中间体制备通式(IV)的吡咯烷酸中间体的单个对映体的途径，该途径使用噁唑烷酮作为手性辅助物。式(VIII)的酸可以通过脱保护(VII)得到，然后转化为混合酸酐，然后与噁唑烷酮偶联(其中优选地R⁴为苯基、叔丁基或异丙基)得到式(XIV)的中间体。或者，式(VII)化合物(如当PG²＝OCOt-Bu时)与噁唑烷酮的锂盐，在适合的溶剂(如THF)中反应也可以得到式(XIV)的化合物。

式(XIV)的化合物将通过与通式(XII)化合物反应经历[3+2]-偶氮甲碱叶立德环化加成，得到非对映异构体(XV)和(XVI)，它们可以通过色谱法或结晶法分离，然后水解得到式(IV)的吡咯烷。或者，通式(XVI)的化合物可以转化为通式(XIII)的化合物，例如用在碳酸二甲酯中的甲醇钠处理(当PG²＝OMe时)。

方案6

PG选自合适的氮保护基。PG²选自合适的羧酸保护基，且对于化合物(VII)和(XIII)使用不同的基团。

新颖的式(XVI)化合物为本发明的另一实施方案。

方案7说明了从通式(XIII)的中间体制备通式(III)的吡咯烷酸中间体的途径。一旦使用任何适合的常规技术移除保护基PG时，可以通过方案2中所述的适合方法引入Het基团。然后如方案4所述移除酸保护基PG²，得到通式(III)的酸。

方案7

PG选自适合的氮保护基。PG²选自适合的羧酸保护基。

新颖的式(XVII)和(XVIII)化合物为本发明的另一实施方案。

如方案8中所述，通式(II)的哌啶中间体可以通过向含有合适氮保护基(PG)的通式(XIX)的酮中加成有机金属亲核试剂得到通式(XX)中间体而制备。加成的立体化学优选使得产物中的羟基对于两个甲基为顺式。向羰基体系的可控的加成(例如所述的这种)已经描述在文献中(如Journal of MedicinalChemistry(1964)，7(6)，pp726-8)。这些亲核加成通常在低温下在无水醚或其它非极性溶剂中进行，该加成使用格氏试剂、有机锂试剂或其它适合的有机金属试剂。这些有机金属试剂可以通过使用适合的卤化物前体(R¹-Br或R¹-I)和正丁基锂或叔丁基锂的卤素-金属交换制备。适合的保护基包括苄基，其通过氢化除去；或Boc，其通过用酸如TFA处理除去；或对甲氧基苄基(PMB)，其通过用DDQ、CAN或氯甲酸1-氯乙基酯处理除去，得到所需的通式(II)的哌啶中间体。对于一些保护基，且在一定条件下，所述保护基对于用有机金属试剂处理不稳定，且两个转化可以在一步中实现，例如当PG＝Boc时，在当式(XIX)中间体用有机金属试剂处理时，该保护基有时可以被离去。

方案8

PG选自适合的氮保护基。

技术人员将理解，除保护氮或酸基团外，如上所述，在很多情况下在合成式I化合物期间，需要保护其它基团，例如用适合的保护基保护羟基，然后移除保护基。任何特定基团的脱保护的方法将取决于保护基。对于保护/脱保护方法学的实例参见“Protective groups in Organic synthesis”，TW Greene和PGM Wutz。例如，其中羟基被保护为甲基醚，脱保护条件可以例如包括在48％的HBr水溶液中回流，或通过与在二氯甲烷中的三溴化硼搅拌。或者，其中羟基被保护为苄基醚，脱保护条件可以例如包括用钯催化剂在氢气氛中氢化。

所有上述反应和上述方法中所用的新颖起始物质的制备是常规的，且对于它们的进行或制备以及分离所需产物的方法的适合反应条件将对于涉及本文的文献方法和实施例和制备的领域中的技术人员是公知的。

式(I)化合物的药学可接受盐可以通过与式(I)化合物和视需要所需酸的溶液一起混合而快速制备。该盐可以从溶液中沉淀出来，且通过过滤收集，或可以通过蒸发溶剂回收。

式(I)化合物的药学可接受盐可以通过下述三种方法中的一种或多种制备：

(i)使式(I)的化合物与所需酸反应；

(ii)从式(I)的化合物的适合前体除去酸-或碱-不稳定的保护基，或通过使用所需酸使适合的环前体，例如内酯或内酰胺开环；或

(iii)通过与适合的酸反应或通过适合的离子交换柱将式(I)的化合物的一种盐转化为另一种。

所有三种反应通常在溶液中进行。所得盐可沉淀出来并通过过滤收集，或可以通过蒸发溶剂回收。在所得盐中的离子化程度可从完全地离子化至几乎不离子化而变化。

本发明式(I)的化合物作为MCR4激动剂用于治疗各种疾病状态。优选地，所述MCR4激动剂表现出对MC4受体的功能性效力(functional potency)，表示为EC₅₀，低于约1000nM，更优选地低于500nM，然而更优选地低于约100nM，以及更加优选地甚至低于约50nM，其中所述MCR4功能效力的EC₅₀测量可使用国际专利申请公开号WO2005/077935中的方法E进行。使用这种方法，根据本发明的化合物对MC4受体表现出功能性效力，表示为EC₅₀，低于约1000nM。

本文优选的化合物表现出如本文之前所定义的对MC4受体的功能性效力，并且对MCR4的选择性超过MCR1。优选地，所述MCR4激动剂对MCR4的选择性超过MCR1，其中所述MCR4受体激动剂对MCR4受体的功能性选择性是对MCR1受体的至少约10倍、至少约20倍、更优选地至少约30倍、甚至更优选地至少约100倍、特别更优选地至少约300倍、甚至更优选地至少约500倍，特别地至少约1000倍，其中所述相对选择性评价是基于使用本文描述的方法进行的对MCR1和MCR4的功能效力的测定。

优选地，所述MCR4激动剂对MCR4的选择性超过MCR3，其中所述MCR4受体激动剂对MCR4受体的功能性选择性是对MCR3受体的至少约10倍、优选地至少约30倍、更优选地至少约100倍、更优选地至至少约300倍，甚至更优选地至少约500倍，尤其至少约1000倍，其中所述相对选择性评价是基于使用本文描述的方法进行的对MCR3和MCR4的功能效力的测定。

本文的优选的化合物表现出如本文之前所定义的对MCR4受体的功能性效力，并且对MCR4的选择性超过MCR5。优选地，所述MCR4激动剂对MCR4的选择性超过MCR5，其中所述MCR4受体激动剂对MCR4受体的功能性选择性是对MCR5受体的至少约10倍、优选地至少约30倍、更优选地至少约100倍、更优选地至少约300倍、甚至更优选地至少约500倍，特别地至少约1000倍，其中所述相对选择性评价是基于使用本文描述的方法进行的对MCR5和MCR4的功能效力的测定。

优选地，所述MCR4激动剂对MCR4的选择性超过MCR1和MCR3，其中所述MCR4受体激动剂对MCR4受体的功能性选择性是对MCR1和MCR3受体的至少约10倍、优选地至少约30倍、更优选地至少约100倍、更优选地至少约300倍、甚至更优选地至少约1000倍。

本文优选的化合物表现出如本文之前所定义的对MCR4受体的功能性效力，并且对MCR4的选择性超过MCR1和MCR5。优选地，所述MCR4激动剂对MCR4的选择性超过MCR1和MCR5，其中所述MCR4受体激动剂对MCR4受体的功能性选择性是对MCR1和MCR5受体的至少约10倍、优选地至少约30倍、更优选地至少约100倍、更优选地至少约300倍、甚至更优选地至少约500倍，特别地至少约1000倍。

优选地，所述MCR4激动剂MCR4的选择性超过MCR3和MCR5，其中所述MCR4受体激动剂对MCR4受体的功能性选择性是对MCR3和MCR5受体的至少约10倍、优选地至少约30倍、更优选地至少约100倍、更优选地至少约300倍、最优选地至少约1000倍。

组合治疗

本发明的式(I)化合物或它们的盐、溶剂合物或前药可以用于对所关注的病症的治疗辅助有效的活性剂的组合的递送，所述病症如性功能障碍、下泌尿道病症、肥胖和/或糖尿病。而且，在一些情况中，本发明的式(I)的化合物或它们的盐、溶剂合物或前药可以用于与有助于缓解呕吐的有效活性剂组合递送。本发明的组合物中使用的一些适合的辅助有效活性剂包括：

1)调节促尿钠***因子，尤其是心房钠尿因子(也称为心房钠尿肽)的作用的化合物，B型和C型促尿钠***因子，如抑制剂或中性肽链内切酶且尤其是WO02/02513、WO02/03995、WO02/079143和EP-A-1258474中所述和所要求保护的化合物，且尤其是WO02/079143的实施例22的化合物(2S)-2{[1-{3-4(-氯苯基)丙基]氨基}羰基)-环戊基]甲基}-4-甲氧基丁酸；

2)抑制血管紧张素转化酶的化合物如依那普利，以及血管紧张素转化酶和中性肽链内切酶如奥马曲拉的组合抑制剂；

3)NO-合酶的底物，如L-精氨酸；

4)胆固醇降低剂，如他汀类(如阿托伐他汀/Lipitor^TM)和贝特类(fibrates)；

5)***受体调节剂和/或***激动剂和/或***拮抗剂，优选地雷洛昔芬或拉索昔芬((-)-顺-6-苯基-5-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-5，6，7，8-四氢萘-2-醇，及其药学可接受盐，其制剂如WO96/21656所述)；

6)PDE抑制剂，更优选为PDE2、3、4、5、7或8抑制剂，优选地为PDE2或PDE5抑制剂且最优选地PDE5抑制剂(参见下文)，所述抑制剂优选抗各个酶的IC50小于100nM(条件是仅局部给药或通过向***注射PDE3和4抑制剂用于治疗男性***功能障碍)；

7)血管活性肠蛋白(VIP)、VIP模拟物、VIP类似物，更优选地被一种或多种VIP受体亚型VPAC1、VPAC或PACAP(垂体腺苷酸环化酶激活肽)，一种或多种VIP受体激动剂或VIP类似物(如Ro-125-1553)或VIP片段，一种或多种α-肾上腺素受体拮抗剂与VIP组合(如Invicorp(血管活性肠肽和酚妥拉明制剂)，阿肽地尔(Aviptadil))介导；

8)5-羟色胺受体激动剂、拮抗剂或调节剂，更优选对于5HT1A(包括VML670[WO02/074288]和氟班色林[US2003/0104980])、5HT2A、5HT2C、5HT3和/或5HT6受体的激动剂、拮抗剂或调节剂，包括WO-09902159、WO-00002550和/或WO-00028993中所述的那些；

9)睾酮替代试剂(包括去氢雄甾二酮)、睾酮(如Tostrelle^TM，LibiGel^TM)、二氢睾酮或睾酮植入(implant)；

10)选择性雄激素受体调节剂，如LGD-2226；

11)***、***和甲羟孕酮或醋酸甲羟孕酮(MPA)(即，作为组合)，或***和甲基睾酮激素替代治疗剂(如HRT尤其是倍美力、Cenestin、Oestrofeminal、Equin、Estrace、诺坤复、Elleste Solo、Estring、Eastraderm TTS、Eastraderm Matrix、得美素、Premphase、Preempro、Prempak、Premique、爱斯替、Estratest HS、替勃龙)；

12)对于去甲肾上腺素、多巴胺和/或5-羟色胺的运输的调节剂，如丁氨苯丙酮、GW-320659；

13)对于缩宫素/加压素的受体激动剂或调节剂，优选地为选择性缩宫素激动剂或调节剂；

14)对于多巴胺受体的激动剂或调节剂，优选地为D3或D4选择性激动剂或调节剂，如阿扑***；和

15止吐药，例如5-HT₃拮抗剂或神经激肽-1(NK-1)拮抗剂。

适合的5-HT₃拮抗剂包括但不限于格拉司琼、昂丹司琼、托烷司琼、雷莫司琼、palonsetron、吲地司琼、多拉司琼、阿洛司琼和阿扎司琼。

合适的NK-1拮抗剂包括，但不限制于，阿瑞匹坦(Aprepitant)、casopitant、依洛匹坦(ezlopitant)、cilapitant、奈妥匹坦(netupitant)、vestipitant、沃氟匹坦(vofopitant)和2-(R)-(1-(R)-3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基-4-(5-(二甲基氨基)甲基-1，2，3-***-4-基)甲基-3-(S)-(4-氟苯基)吗啉。见例如国际专利申请公开号WO2006/049933。

特别对于本发明的化合物治疗下泌尿道功能障碍的用途，与其它试剂的组合可以包括但不限制于

●蕈毒碱乙酰胆碱受体拮抗剂，例如托特罗定；

●α-肾上腺素受体拮抗剂，特别是α1肾上腺素受体拮抗剂或α2肾上腺素受体拮抗剂；

●α肾上腺素受体激动剂或部分激动剂，特别是α1肾上腺素受体激动剂或部分激动剂，或α2肾上腺素受体激动剂或部分激动剂；

●5HT2C激动剂(见WO2004/096196)；

●5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRI)；

·去甲肾上腺素重摄取抑制剂(NRI)，例如瑞波西汀，外消旋或(S，S)-对映体形式；

●辣椒素受体(VR)拮抗剂，例如辣椒素；

●α2δ配体，例如加巴喷丁或普瑞巴林；

●β3-肾上腺素受体激动剂；

●5HT1a受体拮抗剂或5HT1a受体反向激动剂；

●***素类受体拮抗剂，例如EP1受体拮抗剂。

关于式(I)化合物在治疗肥胖和相关疾病中的用途，化合物还可与其他抗肥胖药组合使用。合适的抗肥胖药包括***素1(CB-1)受体拮抗剂(例如利莫那班)、载脂蛋白-B分泌/微粒体甘油三酯转运蛋白(apo-B/MTP)抑制剂(特别是肠(gut)选择性MTP抑制剂，例如edipatapide或dirlotapide)、11β-羟基甾体脱氢酶-1(1型11β-HSD)抑制剂、肽YY_3-36和其类似物、胆囊收缩素-A(CCK-A)激动剂、单胺重摄取抑制剂(例如***)、拟交感神经剂、β3肾上腺素受体激动剂、多巴胺受体激动剂(例如溴隐亭)、黑色素细胞-刺激激素受体类似物、5HT2c受体激动剂、黑色素浓集激素拮抗剂、瘦素(OB蛋白)、瘦素类似物、瘦素受体激动剂、促生长激素神经肽拮抗剂、脂肪酶抑制剂(例如四氢利普他丁，即奥利司他(orlistat))、厌食药(例如铃蟾肽激动剂)、神经肽-Y受体拮抗剂(特别是NPY-5受体拮抗剂)、拟甲状腺素药、脱氢表雄酮或其类似物、糖皮质激素受体激动剂或拮抗剂、阿立新(orexin)受体拮抗剂、类高血糖素肽-1受体激动剂、睫状节神经细胞营养因子(例如Axokine^TM，购自Regeneron Pharmaceuticals，Inc.，Tarrytown，NY和Procter &Gamble Company，Cincinnati，OH)、人野灰相关蛋白(AGRP)抑制剂、葛瑞林受体拮抗剂、组胺3受体拮抗剂或反相激动剂、神经调节肽U受体激动剂等。其他抗肥胖药包括下文的优选药物，对本领域技术人员是众所周知的或本文公开后显而易见的。本发明的化合物还可与天然产生的具有降低血浆胆固醇水平的化合物组合给药。这种天然产生的化合物通常称为营养制品，并且包括例如大蒜提取物、Hoodia植物提取物和烟酸。特别优选的抗肥胖药选自CB-1拮抗剂、肠(gut)选择MTP抑制剂、奥利司他、***、溴隐亭、麻黄碱、瘦素、肽YY_3-36和其类似物、和伪麻黄碱。优选的，用于治疗肥胖和相关病情的本发明的化合物和组合治疗与锻炼和科学的饮食相结合给药。优选CB-1拮抗剂包括美国专利5,624,941中描述的利莫那班(SR141716A，商品名Acomplia^TM，Sanofi-Synthelabo有售)；和美国专利5,747,524、6,432,984和6,518,264中描述的化合物；美国专利公开US2004/0092520、US2004/0157839、US2004/0214855和US2004/0214838；2004年10月22日提交的美国专利申请系列号10/971599；和PCT专利公开WO02/076949、WO03/075660、WO04/048317、WO04/013120和WO04/012671。优选的肠选择性MTP抑制剂包括美国专利6,720,351中描述的dirlotapide；美国专利5,521,186和5,929,075中描述的4-(4-(4-(4-((2-((4-甲基-4H-1，2，4-***-3-基硫基)甲基)-2-(4-氯苯基)-1，3-二氧戊烷(dioxolan)-4-基)甲氧基)苯基)哌嗪-1-基)苯基)-2-仲丁基-2H-1，2，4-***-3(4H)-酮(R103757)；和美国专利6,265,431中描述的英普他派(BAY13-9952)。其他代表性的在组合、药物组合物和本发明方法中使用的抗肥胖药可使用本领域普通技术人员已知的方法制备，例如；可按照美国专利4,929,629中描述的方法制备***；可按照美国专利3,752,814和3,752,888中描述的方法制备溴隐亭；可按照美国专利5,274,143、5,420,305、5,540,917和5,643,874中描述的方法制备奥利司他；可按照美国公开2002/0141985和WO03/027637中描述的方法制备PYY_3-36(包括类似物)。

本文的优选之一是本发明的化合物和一种或多种其他治疗药物的组合，所述其他治疗药物选自：PDE5抑制剂；NEP抑制剂；D3或D4选择性激动剂或调节剂；***受体调节剂和/或***激动剂和/或***拮抗剂；睾酮替代药、睾酮或睾酮植入(implant)；***、***和甲羟孕酮或醋酸甲羟孕酮(MPA)、或***和甲基睾酮激素替代治疗药物。

用于治疗MED的优选组合是本发明的化合物和一种或多种PDE5抑制剂和/或NEP抑制剂的组合。

用于治疗FSD的优选组合是本发明的化合物和PDE5抑制剂、和/或NEP抑制剂、和/或D3或D4选择性激动剂或调节剂、和/或***受体调节剂、***激动剂、***拮抗剂、和/或睾酮替代药物、睾酮、睾酮植入、和/或***、***和甲羟孕酮或醋酸甲羟孕酮(MPA)、***和甲基睾酮激素替代治疗药物的组合。

用于治疗MED或FSD的组合产物的特别优选的PDE5抑制剂是5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺酰基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非，尤其是作为柠檬酸盐)；

(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氢-2-甲基-6-(3，4-亚甲基二氧基苯基)-吡嗪并[2′，1′:6，1]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351或他达那非)；

2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺酰基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)；5-(5-乙酰基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮杂环丁烷基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；5-(5-乙酰基-2-丙氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-异丙基-3-氮杂环丁烷基(azetidinyl))-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；4-[(3-氯-4-甲氧基苄基)氨基]-2-[(2S)-2-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-N-(嘧啶-2-基甲基)嘧啶-5-甲酰胺(carboxamide)(TA-1790)；3-(1-甲基-7-氧代-3-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基)-N-[2-(1-甲基吡咯烷-2-基)乙基]-4-丙氧基苯磺酰胺(DA8159)和其药学可接受盐。

用于治疗MED或FSD的组合产物的特别优选的NEP抑制剂是WO02/079143中说明的化合物。

本文交叉引用可根据本发明使用的专利和专利申请中所包含的化合物，我们指权利要求(特别是权利要求1)中定义的治疗活性化合物和具体的实例(所有全部引用作为参考)。

如果给药活性药物的组合，那么它们可同时、单独或顺序地以相同或不同制剂给药。

生物学实验

黑皮质素受体激动剂活性；选择性

化合物对1型和3型黑皮质素受体(MC1和MC3)的激动效力(EC ₅₀ )的体外测定。

激动剂对黑皮质素(MC)受体的激活导致细胞内腺苷酸环化酶的激活，腺苷酸环化酶合成第二信使信号分子3′，5′-环单磷酸腺苷(cAMP)。测定用检测化合物处理重组MC1和MC3细胞株后cAMP水平的改变并且MC1和MC3效力评价(EC₅₀)计算如下：

使用标准分子生物学方法，用编码人MC1或MC3受体的全长cDNA分别稳定转染人胚胎肾(HEK)或中国仓鼠卵巢细胞株，建立稳定转染细胞株。检测化合物以4mM溶解在二甲基亚砜(DMSO)中。11点半对数单位增量稀释系列检测化合物，通常从50uM开始，检测化合物稀释在包含磷酸盐缓冲盐(PBS)、2.5％DMSO和0.05％普卢兰尼克(pluronic)F-127表面活性剂的缓冲液中。收集80％-90％融合的新鲜培养的细胞，并在Dulbecco′s改良的Eagle′s培养基(DMEM)中重悬。将细胞(对于MC3，10,000个细胞，对于MC1，20,000个细胞)加入在384孔测量板中的检测化合物稀释系列液中，并在37℃孵育1小时。之后使用β-半乳糖苷酶片段互补方法，使用购自英国GE Healthcare/Amersham Biosciences的Discoverx cAMP II试剂盒，测定每孔中相对的cAMP浓度。在MC1情况下，当重悬细胞用于实验时DMEM包含750μM的3-异丁基-1-甲黄嘌呤(IBMX)。每个实验孔的荧光读数转换为相对于最大效应的α黑色素细胞刺激激素浓度对应的对照孔的最大值的效应百分数。使用常规软件SIGHTS，将log₁₀抑制浓度对效应百分数进行S型曲线拟和，通过软件将S型剂量响应曲线从低到高的实验点之间的效应一半的检测化合物浓度确定为EC₅₀。每个实验包括α黑色素细胞刺激激素的EC₅₀确定，α黑色素细胞刺激激素作为标准品使用，以追踪实验的一致性，使在不同实验中获得的EC₅₀值之间公平比较。

分别通过US2005/0176772(28-30页)中的实验方法D和E确定MC5和MC4的EC₅₀活性。

在MC4受体的Nle4，D-Phe7-α-MSH抑制

Nle4，D-Phe7-α-MSH是黑色素细胞-刺激激素(MSH)的稳定类似物，是MC4受体(MC4R)的激动剂。使用与[¹²⁵I]Nle4，D-Phe7-α-MSH相比的结合竞争实验，可评价化合物抑制Nle4，D-Phe7-α-MSH结合至表达MC4R的细胞的膜的能力。

匀浆表达MC4R的细胞，并通过差速离心分离膜片段。CHO-CRE MC4R细胞膜与A型PVT-PEI-WGA SPA珠偶联2小时，1000RPM离心5分钟，混悬至300ug珠/ml(0.15ug膜，15ug珠/孔)。在总体积为每孔50μl缓冲液(25mM HEPES、1mM MgCl₂、2.5mM CaCl₂、1％普卢兰尼克F68、1片完全EDTA蛋白酶抑制剂片/50ml pH7)中，珠/膜混合物与0.06nM[¹²⁵I]Nle4，D-Phe7-α-MSH和11半对数浓度的竞争剂配体孵育，一式两份。通过加入100nM的SHU9119测定非特异性结合。通过加入珠/膜开始反应，并且孔板在室温孵育12小时(第一小时置于孔板振荡器上)，之后使用Wallac板计数器测定出现的放射活性的量。通过数据分析使用合适的软件确定Ki值。

优选的，本发明的化合物表现出在MC4受体的结合常数，用对Nle4，D-Phe7-α-MSH的Ki值表示，低于约1000nM，或更优选地低于500nM，但更优选地低于约100nM，并且更优选地低于约50nM，其中使用上述实验确定所述Ki值。

在MC3受体的Nle4，D-Phe7-α-MSH抑制

Nle4，D-Phe7-α-MSH是黑色素细胞-刺激激素(MSH)的稳定类似物，是MC3(MC3R)受体的激动剂。使用与[¹²⁵I]Nle4，D-Phe7-α-MSH相比的结合竞争实验，可评价化合物抑制Nle4，D-Phe7-α-MSH结合至表达MC3R细胞的膜的能力。

匀浆表达MC3R的细胞，并通过差速离心分离膜片段。CHO-CRE MC3R细胞膜与A型PVT-PEI-WGA SPA珠偶联2小时，1000RPM离心5分钟，混悬至终实验浓度800ug珠/ml(1.2ug膜，40ug珠/孔)。在总体积为每孔50μl缓冲液(25mM HEPES、1mM MgCl₂、2.5mM CaCl₂、1％Pluronic F68、1片完全EDTA蛋白酶抑制剂片/50ml pH7)中，珠/膜混合物与0.06nM[¹²⁵]Nle4，D-Phe7-α-MSH和11半对数浓度的竞争剂配体孵育，一式两份。通过加入100nM SHU9119确定非特异性结合。通过加入珠/膜开始反应，并且孔板在室温孵育12小时(第一个小时置于孔板振荡器上)，之后使用Wallac板计数器确定出现的放射活性的量。通过数据分析使用合适的软件确定Ki值。

高密度药物间相互作用(DDI)3μM鸡尾酒筛选

药物相互作用是物质影响另一种药物活性的情况，即效应增加或减少，或两种药物一起产生两种药物都不产生的新的效应。各种过程可导致药物相互作用，但相对常见的是一种药物通过抑制代谢另一种药物的细胞色素P450而影响另一种药物的药代动力学。由于这种现象的重要性，认为在药物发现过程早期新化学实体(NCEs)的DDI潜在性的测量是重要的。

在人肝微粒体(HLM)中的进行全自动方式的DDI鸡尾酒筛选，并且筛选的目的是为了提供新化学实体(NCE；在3μM检测)对4种重要的细胞色素P450酶1A2、2D6、2C9和3A4的DDI潜在性的单点测定。

对P450DDI的底物鸡尾酒方法使用人肝微粒体和亚型-特异性临床药物探针，并允许在单个孵育中对P4501A2、2D6、2C9和3A4活性抑制的同时测定。其以高通量进行并同时通过LC-MS/MS检测代谢物。使用标准化合物已充分检测和评价此方法。使用的探针底物见下表。

微粒体来源	收集的人肝微粒体，
		微粒体浓度	0.1mg/mL
P450浓度	0.03μM
		再生***	NADPH(1.3mM)
实验时间	8分钟

探针底物(探针标记的酶)	浓度
		他克林(1A2)	2μM
双氯芬酸(2C9)	5μM
		右美沙芬(2D6)	5μM
咪达***(3A4)	2μM

抑制剂	浓度
		NCE(检测化合物)	3μM
咪康唑(通用对照)	3μM

在3μM浓度的NCE(检测化合物/抑制剂)存在和不存在时，随时间测定每种底物的代谢物的出现。测定化合物的抑制能力，作为百分数值，并且使用下图说明。之后这些数据结合其他测定以评价NCEs的适合性，并有助于化合物的设计和进展。

％抑制	IC50
		>75％	<1μM
25-75％	1-10μM
		<25％	>10μM

AGRP抑制

Agouti相关蛋白(AGRP)是MC4受体高亲和力的内源性拮抗剂/反相激动剂(Lu等人，1994，Nature371：799-802；Ollman等人，1997，Science278：135-138)。通过禁食上调AGRP水平(Mizuno & Mobbs1999，Endocrinology.140：4551-4557)，因此测定抗肥胖药物通过作用于MC4受体而抑制AGRP结合的能力是十分重要的。现已确定AGRP的C末端片段包含MC4R结合决定子(Yang等人，1999，Mol Endocrinol13：148-155)，因此使用对比[¹²⁵I]AGRP(87-132)的竞争结合实验可评价化合物抑制AGRP与表达MC4R细胞的膜结合的能力。为此，匀浆表达MC4R的细胞，并通过差速离心分离膜片段。在总体积为每孔100μl缓冲液(25mM HEPES、1mM MgCl₂、2.5mMCaCl₂、0.5％BSA pH7.0)中，CHO-CRE MC4R细胞膜(12μg蛋白)与0.3nM[¹²⁵I]AGRP(87-132)和11半对数浓度的竞争剂配体孵育，一式两份。通过加入1μM的SHU9119确定非特异性结合。通过加膜开始反应，并且孔板在室温孵育2小时。使用真空收集器通过在GF/C滤纸(在1％PEI中预先浸泡)上快速过滤终止反应，随后用200μl冰冷的清洗缓冲液(含有500mM NaCl的结合缓冲液)清洗5次。滤纸浸在50μl的闪烁液中，通过液体闪烁计数确定出现的放射性的量。通过数据分析使用合适的软件确定Ki值。

优选的，本发明的化合物表现出在MC4受体的结合常数，用对AGRP的Ki值表示，Ki低于约1000nM，或更优选地低于500nM，然而更优选地低于约100nM，并且更优选地低于约50nM，其中使用上述实验确定所述Ki值。使用这种实验，根据本发明的化合物表现出在MC4受体的结合常数，用对AGRP的Ki值表示，Ki低于约1000nM。

食物摄入研究：为了评价MC4激动剂对24小时内雄性大鼠的食物摄入和体重的影响。

在研究开始前约两周，大鼠单笼饲养，并转换光照调节(9.30am-9.30pm)。在研究前24小时，大鼠适应技术实验仪器^*(Techincal ScientificEquipment)(TSE)笼。在研究日早晨，大鼠按体重随机分配到治疗组(n＝5/治疗)。在熄灯前，每只大鼠口服接受MC4激动剂或溶剂。给药后，大鼠立即放回TSE笼，并在研究的整个过程中(24小时)监测大鼠的食物摄入和水消耗。以光束中断形式监测运动行为。

在研究结束时，异氟烷麻醉下放血处死大鼠。通过心脏穿刺取血并用于药物浓度水平和生物标签的分析。

数据用均值±SEM表示，并且用ANOVA分析对照和治疗组之间的比较。p<0.05认为具有统计学显著性。

体外代谢率确定(人肝微粒体(HLM)；大鼠肝微粒体(RLM)实验)

许多药物被细胞色素P450单氧化酶***代谢。发现这种酶在肝中浓度高，并与肝细胞内质网结合。通过肝微粒体片段的制备可获得半纯化状态的酶***。确定化合物在这种***中的体外半衰期提供了有用的代谢稳定性的指示。

材料和试剂

所有试剂是ANALAR级。

1.200mM磷酸盐缓冲液(Sigma)-溶解于400ml MilliQ水的100ml1M磷酸盐缓冲液pH7.4。如果需要，用浓正磷酸调节pH至7.4，每月配制并在冰箱中保存(2-8℃)。

2.0.1M MgCl₂.6H₂O(BDH)-2.032g溶解在100ml MilliQ水中，并在冰箱中保存(2-8℃)。

3.0.02M NADP(Sigma)-15.3mg溶解在1000μl MilliQ水中-然后在冰箱中保存(2-8℃)备用。

4.0.1M D-L异柠檬酸(Sigma)-129mg溶解在5ml MilliQ水中-然后在冰箱中保存(2-8℃)备用。

5.异柠檬酸脱氢酶，IV型(Sigma)-在冰箱中保存(2-8℃)。

6.底物在可混溶的有机溶剂例如甲醇、乙醇或水中的储存液(约1mg/ml)，在冰箱中保存(2-8℃)。

7.50mM对硝基苯甲醚(PNA)(Aldrich)-7.65mg溶解在1ml甲醇中，并在冰箱中保存(2-8℃)备用。

8.50μM对硝基苯酚(PNP)(Sigma)-0.69mg溶解在100ml水中并在冰箱中保存(2-8℃)。

9.20％三氯乙酸(TCA)(BDH)-20g溶解在100ml MilliQ水中，在琥珀色玻璃器皿中制备，并在室温储存。

10.10M氢氧化钠(BDH)-40g溶解在100ml MilliQ水中(注意由于此反应放热，制备此溶液时应练习)，在“不易碎”(safebreak)玻璃器皿中制备，并在室温储存。

11.肝或Supermix微粒体，在-80℃储存，在使用前即刻溶解，保持在冰上并分配(dispense)。

12.MilliQ水。

13.设置恒温控制震荡水浴为约37℃孵育。

14.终止孵育的试剂(通常为有机溶剂、酸或碱)。

使用肝和Supermix微粒体的体外代谢率确定的方法学

下列方法用于1.5ml的总孵育体积。

1.在测试管中制备下列混合物：

试剂	储备液浓度	孵育浓度	加入体积(对于1.5ml孵育液)
				磷酸盐缓冲液pH7.4	200mM	50mM	375μl
MgCl₂	0.1M	5mM	75μl
				异柠檬酸	0.1M	5mM	75μl
异柠檬酸脱氢酶	在瓶上	1单位/ml^*	见下^*

^*对于每一批新的异柠檬酸脱氢酶，计算此体积

例如，蛋白质浓度＝18mg/ml

酶活性＝3.3单位/mg

因此，特异性活性＝3.3x18单位/ml＝59单位/ml

对于1.5ml的孵育液，需要

2.在室温融解微粒体，并加入足够量的微粒体，得到终浓度为0.5nmol细胞色素P450/ml孵育液，例如对于1.5ml孵育液，加入的微粒体体积为：

3.加入足够量的MilliQ水，得到总孵育液体积为1.425ml。

4.取出237.5μl的孵育混合物，并置于检测管中作为PNA阳性对照。加入2.5μl的PNA溶液，混合(whirlimix)，并将管置于恒温控制震荡水浴的支架中。

5.取出100μl作为无底物对照，并分配至检测管中。将检测管置于恒温控制震荡水浴的支架中。

6.向孵育液加入底物。底物起始浓度应为1μM。在剩余的1.162.5ml孵育液)中需要的底物体积的计算如下：

注意，加入的有机溶剂的体积应不超过孵育液总体积的0.1％。

7.取出100μl孵育混合物放入检测管，作为无辅因素对照(no cofactorcontrol)。混合(Whirlimix)并置于恒温控制震荡水浴的支架中。

8.在设置为37℃的恒温控制震荡水浴中预孵育含有孵育液混合物的管、阳性对照和无辅因素对照管5分钟。

9.加入NADP起始反应(向每1.162.5ml孵育液混合物加入75μl，向阳性对照管加入12.5μl，并向无底物管加入5μl)，并立即取第一个时间点。PNA阳性对照、无辅因素对照和无底物管按总孵育时间孵育。

10.从0至60分钟的9个不同取样点(通常0、3、5、10、15、20、30、45和60min)取出100μl等份并终止反应。可使用更长的孵育时间，但在120分钟后，微粒体变性。可通过加入有机溶剂、酸或碱终止反应。在孵育过程结束后，无辅因素和无底物对照用相似方法，即相同试剂，终止。

11.PNA阳性对照操作步骤：

在最终取样后，取出阳性对照，并向此管加入1ml20％TCA。也制备含有250μl的50μM PNP标准品的管，并加入1ml20％TCA。混合(Whirlimix)两管，并保持约5分钟，使蛋白沉淀。

两管在设置为3500rpm的仪器中离心约5分钟。取出1ml的上清，并置于干净的检测管中，去除残余部分。

向上清加入1ml10M的NaOH，混合(Whirlimix)，并保持混合约5分钟。空白分光光度计有蒸馏水，之后在400nm测量PNP标准品对比蒸馏水的吸光度。微粒体4-硝基苯甲醚O-脱甲基酶活性计算如下：

结果计算

孵育液的活性值必须与有效孵育液批次的平均值的85％相等或更大。如果不符合这个标准，那么必须重复孵育。

11.通过对底物特异的实验分析样品(包括无辅因素(no cofactor)和无底物对照)，以确定消除动力学。

数据分析

使用上述操作步骤获得的数据可根据底物的体外固有清除率(Clint)定量。假设底物浓度低于Km，代谢应当是一级消除动力学，得到底物随时间消除的log-线性曲线。

可通过绘制相对底物浓度(例如，药物/内参比例)测定对时间的自然对数(1n)曲线，和拟和此数据的最适线，确定底物体外半衰期。此线的斜率是底物消除的一级速率常数(k)，通过回归分析确定。此速率常数可根据下列等式转换为半衰期：

或者，速率常数可根据下列等式转换为固有清除率(Clint)：

Clint(μl/min/mg)＝(k/孵育液中蛋白质浓度(mg/ml))^*1000

优选的，本发明的化合物表现出清除，如上述实验确定，用清除率值表示该，值低于约200μL/min/mg，更优选地低于约100μL/min/mg，然而更优选地低于约50μL/min/mg，并且更优选地低于约20μL/min/mg。使用此实验，检测根据本发明的化合物的清除率低于200μL/min/mg。

给药方法

预期作为药物使用的本发明的化合物可以结晶或无定形产物给药。可通过例如沉淀、结晶、冷冻干燥、喷雾干燥或蒸发干燥的方法获得例如固体栓剂、粉末或膜剂。可使用微波或射频干燥实现此目的。

一种或多种本发明的化合物可单独，或组合，或与一种或多种其它药物(或如任何其组合物)的组合形式给药。通常，可以与一种或多种药学可接受的赋形剂(excipient)组合的制剂形式给药。本文所用术语“赋形剂”以描述除本发明化合物外的任何成分。赋形剂的选择范围大，取决于例如给药的特殊模式、辅料对溶解性和稳定性的影响，以及剂型的性质等因素。

适于本发明的化合物的递送的药物组合物和其制备方法对于本领域技术人员是显而易见的。这些组合物和其制备方法可见，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences，第19版(Mack出版公司，1995)。

因此本发明提供了药物组合物，所述药物组合物包括式(I)的化合物和药学可接受的稀释剂或载体。

可使用任何合适的给药途径，用于向哺乳动物，特别是人提供本发明化合物的有效剂量。例如，可使用口服(包括口腔和舌下给药)、直肠、局部、胃肠外、眼用、肺、鼻给药等。剂量形式包括片剂、锭剂、分散剂、混悬剂、溶液、胶囊、乳剂、软膏剂、气溶胶等。优选地，式(I)的化合物口服或鼻内给药。

使用的活性成分的有效剂量可根据使用的特殊化合物、给药模式、被治疗的哺乳动物的特性(例如，体重)、所治疗的病情和所治疗的病情的严重度而改变。这些剂量可容易地由本领域技术人员确定。

为了治疗性功能障碍，给予剂量范围从约0.001毫克(mg)至约1000mg的本发明的化合物，优选地，从约0.001mg至约500mg，更优选地从约0.001mg至约100mg，甚至更优选地，从约0.001mg至约50mg，并且特别地，从约0.002mg至约25mg每公斤体重，优选地以单剂量口服或鼻喷雾给药。例如，口服给药需要每日总剂量从约0.1mg至约1000mg，而静脉剂量仅需要从约0.001mg至约100mg。每日总剂量可单次或分份剂量给药，并且可遵医嘱，以超出本文给出的一般剂量范围给药。

当治疗肥胖结合糖尿病和/或高血糖，或仅肥胖时，通常当本发明的化合物给药的每日剂量从约0.0001mg至约1000mg时，优选地约0.001mg至约500mg时，更优选地约0.005mg至约100mg时，并且特别的约0.005mg至约50mg每公斤动物体重，优选地以单剂量或分份剂量一日2至6次，或持续释放剂型形式给药时，可获得令人满意的结果。在70kg成人情况下，每日总剂量通常从约0.7mg至约3500mg。可调节这种给药方案，从而提供最佳的治疗反应。

当治疗糖尿病和/或高血糖，和其它可使用式I化合物的疾病或病症时，当本发明的化合物给药的每日剂量从约0.001mg至约100mg每公斤动物体重时，优选地以单剂量或分份剂量一日2至6次，或持续释放剂型形式给药时，可获得令人满意的结果。在70kg成人情况下，每日总剂量通常从约0.07mg至约350mg。可调节这种给药方案，从而提供最佳的治疗反应。

这些剂量根据平均体重约65kg至70kg的人受试者。对于超出此范围的受试者，例如婴儿、老年人和肥胖人，医生可容易地确定他们的剂量。

本发明的化合物可口服给药。口服给药可包括吞咽，以便化合物进入胃肠道，和/或口腔、舌或舌下给药，从而使化合物之间从嘴进入血流。

适于口服给药的剂型包括固体、半-固体和液体***，例如片剂；包含多或纳米-颗粒的软或硬胶囊、液体或粉末；锭剂(包括填充液体的)；咀嚼剂；凝胶剂；快速分散剂量形式；膜；***凝胶；喷雾；和口腔/粘膜片。

液体剂型包括混悬剂、溶液、糖浆剂和酏剂。这些剂型可作为软或硬胶囊(例如，从明胶或羟基丙基甲基纤维素制备)的填充物使用，并且一般包括载体，例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素，或合适的油，和一种或多种乳化剂和/或助悬剂。液体剂型也可通过固体的重构制备，例如从囊剂。

本发明的化合物也可在快速溶解、快速崩解剂型中使用，例如Liang和Chen(2001)Expert Opinion in Therapeutic Patents，11(6)，981-986中所描述的剂型。

对于片剂剂型，根据剂量，药物可组成剂型的1wt％至80wt％，更常见从剂型的5wt％至60wt％。除了药物，片剂通常包含崩解剂。崩解剂的实例包括羟乙酸淀粉钠、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、微晶纤维素、低级烷基取代的羟基丙基纤维素、淀粉、预胶化淀粉和海藻酸钠。通常崩解剂为剂型1wt％至25wt％，优选地从剂型的5wt％至20wt％。

通常使用粘合剂以影响片剂剂型的粘合性质。合适的粘合剂包括微晶纤维素、明胶、糖、聚乙二醇、天然和合成胶、聚乙烯吡咯烷酮、预胶化淀粉、羟基丙基纤维素和羟基丙基甲基纤维素。片剂也可包括稀释剂，例如乳糖(单水合物、喷雾干燥水合物、无水形式等)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨醇、微晶纤维素、淀粉和二碱式磷酸钙二水合物。

片剂也可选地包括表面活性剂，例如硫酸月桂基酯钠和聚山梨酸酯80，和助流剂例如二氧化硅和滑石粉。当存在时，表面活性剂可为片剂的从0.2wt％至5wt％，并且助流剂可为片剂的从0.2wt％至1wt％。

片剂通常还包括润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂富马酸钠，以及硬脂酸镁和十二烷基硫酸钠的混合物。润滑剂通常为片剂的0.25wt％至10wt％，优选地从片剂的0.5wt％至3wt％。

其它可能的成分包括抗氧化剂、着色剂，调味剂，防腐剂和味道掩蔽剂。

示例的片剂包含高至约80％的药物，粘合剂从约10wt％至约90wt％，稀释剂从约0wt％至约85wt％，崩解剂从约2wt％至约10wt％，和润滑剂从约0.25wt％至约10wt％。

片剂混合物可以直接压片或通过卷片机(roller)压片以形成片剂。片剂混合物或混合物的一部分可以湿法、干法或熔融制粒，熔融凝结、或压片前挤出。最终制剂可以包含一个或多个层，且可以包衣或不包衣；甚至可以包于胶囊。

片剂的配制见于Pharmaceutical Dosage Forms：Tablets，Vol.1，H.Lieberman和L Lachman(Marcel Dekker，New York，1980)。

用于人或兽的可消耗口服膜通常为柔韧的水溶性或水膨胀性薄膜剂型，其可以迅速溶解或粘膜粘附，且所述膜通常包含式I化合物、成膜聚合物、粘合剂、溶剂、湿润剂、增塑剂、稳定剂或乳化剂、粘度-调节剂和溶剂。所述制剂的一些成分可以具有多种功能。

式I的化合物可以为水溶性的或水不溶性的。水溶性化合物通常包含1重量％至80重量％，更典型为20重量％至50重量％的溶质。溶解度较差的化合物可以占组合物更多的比例，通常高达溶质的88重量％。或者，式I化合物可以为多颗粒珠的形式。

成膜聚合物可选自天然多糖、蛋白质，或合成的水胶体，且通常比例范围为0.01至99重量％，更典型为30至80重量％。

其它可能的成分包括抗氧化剂、着色剂、矫味剂和气味改善剂、防腐剂、唾液刺激剂、冷却剂、共溶剂(包括油)、润滑剂、填充剂、抗起泡剂、表面活性剂和味道掩蔽剂。

根据本发明的膜通常通过蒸发干燥在去皮的支持物或纸上涂布的薄水性膜而成。这可以在干燥箱或管中进行，通常为组合的涂布器干燥器，或通过冻干或真空干燥。

用于口服给药的固体制剂可以配制为速释和/或缓释制剂。缓释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序性释放。

对于本发明目的的适合的缓释制剂如美国专利6,106,864中所述。适合的释放技术，如高能分散和渗透和包衣颗粒的详细描述见干Pharmaceutical Technology On-line，25(2)，1-14，Verma等人(2001)。对于实现控制释放的咀嚼胶的使用如WO00/35298所述。

本发明的化合物液可以直接给药到血液、肌肉或体内器官中。胃肠外给药的适合的方式包括静脉、动脉、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内、滑膜内和皮下给药。对于胃肠外给药适合的设备包括针(包括显微针)注射器、无针注射器和输注技术。

胃肠外制剂通常为水溶液，其可含有赋形剂，如盐，碳水化合物和缓冲剂(优选地，pH为3至9)，但是，对于一些应用，它们可以更适合地配制为无菌水溶液或干燥形式以与适合的溶媒(如无菌，无热原的水)结合使用。

无菌条件下的胃肠外制剂的制备(例如，通过冷冻干燥)可以使用本领域技术人员公知的标准药物技术快速实现。

在胃肠外溶液制剂中所用的式(I)的化合物的溶解度可以通过使用适合的制剂技术增加，如通过加入增加溶解度的试剂。

对于胃肠外给药的制剂可以配制为速释和/或缓释制剂。缓释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序性释放。因此，本发明的化合物可以配制为混悬剂或固体、半固体，或触变液体给药，作为提供缓释活性化合物的植入储库。这些制剂的实例包括药物-包衣支架(stents)和包括负载药物的聚(dl-乳酸-共羟乙酸)酸(PGLA)微球的半固体和混悬剂。

本发明的化合物可以局部给药、皮肤(内)给药、或经皮给药至皮肤或粘膜。这种目的的典型的制剂包括凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、乳剂、软膏剂、扑粉、敷料、泡沫、膜、皮肤贴片、薄片、植入物、海棉、纤维、绷带和微乳。也可以使用脂质体。通常的载体包括醇、水、矿物油、液体石蜡、白石蜡、甘油、聚乙二醇和丙二醇。可以加入渗透增强剂-参见，例如，J PharmSci，88(10)，955-958，Finnin和Morgan(1999年10月)。

局部给药的其它方式包括通过电穿孔、离子电渗、超声透入、超声促渗和显微针或无针(例如Powderject^TM，Bioject^TM等)注射。

局部给药的制剂可以配制为速释和/或缓释制剂。缓释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序性释放。

本发明的化合物也可以鼻给药或通过吸入给药，通常以来自干燥粉末吸入器的干燥粉末形式(单独，作为混合物，例如与乳糖的干燥混合物，或作为混合成分颗粒，例如与磷脂如磷脂酰胆碱混合)，或作为来自加压容器、泵、喷射器、喷雾器(优选地，使用电流体动力学以产生细粒雾的喷雾器)的喷雾剂，或使用或不使用适合推进剂的雾化器，所述推进剂如1，1，1，2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷，或作为鼻滴剂。对于鼻内使用，粉末可以包含生物粘附剂，例如，壳聚糖或环糊精。

加压容器、泵、喷射器、喷雾器或雾化器，包含本发明化合物的溶液或混悬液，其包含例如乙醇、含水乙醇、或适合的用于分散、溶解或延长活性试剂释放的其它试剂、作为溶剂的推进剂、和任选表面活性剂，如去水山梨糖醇三油酸酯、油酸或寡聚乳酸。

以干燥粉末或混悬剂制剂使用前，将药物产物微粉化形成适合通过吸入投递的大小(通常小于5微米)。这可以通过任何适合的粉碎方法实现，如螺旋喷射研磨、流化床喷射研磨、以形成纳米颗粒的超临界流体方法、高压匀浆、或喷雾干燥。

胶囊(例如，由明胶或羟基丙基甲基纤维素制得)，对于在吸入器或吹入器中使用的泡(blisters)和药筒可以配制为含有本发明化合物的粉末混合物，适合的粉末基质如乳糖或淀粉，和性能改性剂如l-亮氨酸、甘露醇、或硬脂酸镁。乳糖可以是无水的或一水合物形式，优选后者。其它适合的赋形剂包括右旋糖酐、葡萄糖、麦芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖和海藻糖。

在使用电流体动力学以产生细粒雾的喷雾器中使用的适合的溶液制剂可以在每次制动中含有1μg至20mg的本发明化合物，且每次制动的体积可以为1μl至100μl。一般的制剂可以包含式(I)的化合物、丙二醇、无菌水、乙醇和氯化钠。可以代替丙二醇使用的其它溶剂包括甘油和聚乙二醇。

适合的矫味剂，如薄荷脑和左薄荷脑，或甜味剂，如糖精或糖精钠，可以加至本发明用于吸入/鼻内给药的那些制剂中。

使用例如PGLA，吸入/鼻内给药的制剂可以配制为速释和/或缓释制剂。缓释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序性释放。

干燥粉末吸入剂和气溶胶的情况中，通过递送计量的量(metered amount)的阀门确定剂量单元(unit)。根据本发明的单元位通常设定为给药计量的剂量或含有0.001mg至10mg式(I)的化合物的“喷雾(puff)”。总的日剂量通常将在0.001mg至40mg范围，其可以单剂量给药，或更常见在一天中以分开的剂量给药。

本发明的化合物可以直肠或***给药，例如以栓剂、子宫套或灌肠剂形式。可可脂为传统的栓剂基质，但视需要可以使用多种其它基质。

直肠/***给药的制剂可以配制为速释和/或缓释制剂。缓释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序性释放。

本发明的化合物也可以直接向眼或耳给药，通常以在等张、可调pH的无菌盐水中的微粉化混悬剂或溶液的滴剂的形式。其它适合眼用和耳用给药的制剂包括软膏剂、凝胶剂、生物可降解的(如可吸收凝胶海棉，胶原)和不可生物降解的(如硅酮)植入物、薄片、透镜和颗粒或囊状体系，如类酯囊泡(niosomes)或脂质体。可以将聚合物，如交联聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明质酸、纤维素聚合物(例如羟基丙基甲基纤维素、羟基乙基纤维素或甲基纤维素)或杂多糖聚合物(例如，琼脂胶)与防腐剂，如苯扎氯铵一起掺入。这些制剂也可以通过离子电渗递送。

眼用/耳用给药的制剂可以配制为速释和/或缓释制剂。缓释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序性释放。

本发明的化合物可以与水溶性大分子实体(如环糊精)及其适合的衍生物或含聚乙二醇的聚合物组合，以提高它们在用于上述任何给药方式中的溶解度、溶出速度、味道掩蔽、生物利用度和/或稳定性。

发现药物-环糊精复合物，例如，通常用于大多数剂型和给药途径。可以使用包含和非包含的复合物。除了直接与药物复合外，环糊精也可以用作辅助添加剂，即作为载体、稀释剂或助溶剂。对于这些目的最常用的为α-、β-和γ-环糊精，它们的实例见于国际专利申请号WO91/11172、WO94/02518和WO98/55148.

由于例如，用于治疗特定疾病或病症的目的给药活性化合物的组合，因此本发明的范围内包括两种或更多药物组合物(至少一种含有根据本发明化合物)，它们可以方便的以适合共同给药所述组合物的试剂盒的形式组合。

因此，本发明的试剂盒包含两种或更多分别的药物组合物(至少一种含有根据本发明的式(I)化合物)，和分别用于保存所述组合物的工具，如容器、分开的瓶或分开的箔袋。这些试剂盒的实例为与用于包裹片剂、胶囊等所用的相似的泡罩包装(blister pack)。

本发明的试剂盒尤其适合给药不同的剂型(例如，口服和胃肠外)，以不同剂量间隔给药分开的(separate)组合物，或滴定彼此分开的组合物。为辅助顺应性，所述试剂盒通常包含给药指导，且可以提供所谓的记忆辅助。

本发明的其它方面列于权利要求书中。

生物学数据

实施例号	MC4EC50(nM)	MC4MSHKi(nM)	MC3EC50(nM)	MC3MSH Ki(nM)	MC4AgRPKi(nM)	HLM(μL/min/mg)	RLM(μL/min/mg)	在3μM的3A4代谢的％抑制
									1	<0.52	43.9	39	<7.0	<8.5	54
2	4.53	27	4.26	124	59	<12.0	31	64
									3	11.9	16.4		<7.0	<19.8	60
4			55.9		51	60	74	38
									5	137	203	552	<7.0	27	34
6	18.9		1460		456		<8.5	32
									7	40	1600	714	21	11	19
8	27.5		1090		643	>440	>510	94
									9	39.3	520	523	240	411	68
10	11.9	276	493	977	223	20.5	42	19

11	111				417	14
									12	91.6					>352	88.5
13	37.6		1020		106			6
									14	115		129			<9.0	<9.75
15	53.9		>33400
									16	34.3		323		251	<45.5	<8.5	83
17	1.59	112	54.9	332	20	>440	>510	35
									18	55.5		>8520		965	67	68	34
19	6.5	85.4	425	568	79	21	21	50
									20	16.4	251	1120	1020	253	31	51.5	35
21	2.81		283		66	144	58.5	25
									22	19.8		1050	5560	5960	179	96	54
23	4.75	65.7	185	264	79	<15.5	<8.5	35
									24	59.3		2510		>955	355	>510	87
25	12.4	10.9	189	<0.105	278	308	172	16
									26	22.5		4210		363	70	>510	61
27	4.54		390		100	51	31	64
									28	24.4		938	1670	516	33	51	77
29	7.54				40	105	36	59
									30	5.77		61.5		112	141	69.5	38
31	22.9		410		526	188	292	60
									32	8.78	150	76.6	456	160	8	<8.5	31
33	13.4		193		220	186	72	19
									34	39.2				375	<7.0	<8.5	50
35	62.2		878		386	100	92	46
									36	168				1020	<7.0	17	59
37			325		422	19.5	23	45
									38	102				336	<7.0	<8.5	58
39			2100		751	95	58	30
									40	69.8		580		430	<7.0	<8.5	64

41	655	>33300	3750	21	30	52
							42		>20300		888	25	25	59
43	49.3	1590	248	37		44
							44	284	>9630		2130			27
45	44.4	66.1	251	<7.0	<8.5	69
							46	15	50.8	551	134	<7.0	<8.5	74

与溶媒相比，3mg/kg和10mg/kg的实施例2的化合物对24小时的蓄积的食物摄取影响和对24小时的体重改变的作用表示在图1和2中。

本发明通过下述非限制性实施例进行说明，其中使用下述缩写和定义：

APCI 大气压化学离子化质谱

[α]_D 589nm处的比旋光

br 宽

过滤剂

δ 化学位移

d 二重峰

dd 两个二重峰

EI 电喷雾离子化

Ex 实施例

LRMS 低分辨质谱

m 多重峰

m/z 质谱峰

NMR 核磁共振

Prec 前体

Prep 制备

psi 磅每平方英寸

q 四重峰

s 单峰

t 三重峰

tlc 薄层色谱

为了合成方便，同时在许多实例中，化合物以它们的游离碱形式被初始分离，通常将它们转化为用于分析鉴定目的的相应盐酸盐。为了避免不确定因素，游离碱和HCl盐形式在本文中都提供了。

为了避免歧义，本文所用的化合物使用ACD Labs Name软件v7.11^TM命名。

实施例

实施例1

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-3-氰基吡啶(nicotinonitrile)

将2-氯-5-氰基吡啶(96mg，0.69mmol)加入到来自制备10的吡咯烷(200mg，0.46mmol)和N-乙基二异丙基胺(0.32mL，1.8mmol)在乙腈(10mL)中的溶液中，且混合物在70℃氮气下加热过夜。真空中移除溶剂，且残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用二氯甲烷，增加极性至含5％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱得到标题化合物(191mg，77％)，为白色固体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ0.4-0.6(6H，4x d)，0.78-0.82，1.60-1.68和1.97-2.05(2H，3x m)，2.73-2.80(1H，m)，3.00-3.20(1H，m)，3.68-4.37(8H，m)，6.62(1H，m)，7.01-7.08和7.37-7.48(5H，2x m)，7.74(1H，m)，7.80和7.95(1H，2x dd)，8.40(1H，m)，8.57和8.60(1H，2x d)；LRMS(EI⁺)534[MH⁺]；[α]_D ²⁵＝-47.0(c＝0.215，MeOH).

实施例2

6-[(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]哒嗪-3-腈

将3-氯-6-氰基哒嗪(根据US3,637,691制备)(20mg，0.14mmol)加入到来自制备10的吡咯烷(40mg，0.09mmol)和N-乙基二异丙基胺(0.06mL，0.37mmol)于乙腈(10mL)中的溶液中，然后混合物在70℃氮气下加热过夜。真空中移除溶剂，且残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用二氯甲烷，增加极性至含5％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱得到标题化合物(41mg，83％)，为白色固体。¹HNMR(CD₃OD，400MHz)δ0.4-0.6(6H，4x d)，0.78-0.85，1.60-1.69和1.97-2.10(2H，3x m)，2.72-2.80(1H，m)，3.00-3.23(1H，m)，3.68-4.38(8H，m)，6.99-7.08和7.38-7.50(6H，2x m)，7.70(1H，d)，7.80和7.94(1H，2x dd)，8.58和8.61(1H，2x d)；LRMS(EI⁺)535[MH⁺].

实施例3

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-1-(6-氯哒嗪-3-基)-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-基] 羰基}-4-(4-氟苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇

1，6-二氯哒嗪(173mg，1.2mmol)加入到来自制备10的吡咯烷(100mg，0.23mmol)和N-乙基二异丙基胺(0.16mL，0.93mmol)于乙腈(5mL)中的溶液中，然后混合物在70℃氮气下加热过夜。真空中移除溶剂，且残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用二氯甲烷，增加极性至含5％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱得到标题化合物(52mg，42％)为白色固体。¹HNMR(CD₃OD，400MHz)δ0.4-0.6(6H，4x d)，0.78-0.85，1.60-1.69和1.97-2.10(2H，3x m)，2.72-2.80(1H，m)，3.00-3.23(1H，m)，3.68-4.38(8H，m)，6.99-7.08和7.38-7.50(6H，2xm)，7.70(1H，d)，7.80和7.94(1H，2x dd)，8.58和8.61(1H，2x d)；LRMS(EI⁺)544[MH⁺].

实施例4

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-(6-甲氧基哒嗪-3-基)吡咯烷 -3-基]羰基}-4-(4-氟苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇

将叔丁醇钠(31mg，0.32mmol)、3-氯-6-甲氧基哒嗪(34mg，0.23mmol)、三(二亚苄基丙酮(dibenzylideneacetone))二钯(0)(8.5mg，0.009mmol)和2，2′-二(二苯基膦基)-1，1′-二萘(11.5mg，0.0185mmol)加入到来自制备10的吡咯烷(100mg，0.23mmol)于甲苯(10mL)中的溶液中，然后混合物在80℃氮气下加热过夜。真空中移除溶剂，且残余物溶于乙酸乙酯(25mL)中，用水洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发。通过色谱法(硅胶)纯化，用二氯甲烷，增加极性至含5％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱得到标题化合物(48mg，40％)，为黄色泡沫状。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ0.4-0.62(d+t+t，6H)，0.86(m，1H)，1.65(m，1H)，1.93-2.08(br，1H)，2.75(m，1H)，3.17(t，1H)，3.74(m，3H)，3.95(s，3H)，3.96-4.21(m，3H)，4.32(d，1H)，6.98-7.1(m，5H)，7.38-7.48(m，2H)，7.79+7.48(2x dd，1H)，8.56(d，1H)；LRMS(EI⁺)540[MH⁺].

实施例5

(3R，4R，5S)-4-(4-氯苯基)-1-{[(3S，4S)-1-(6-氯哒嗪-3-基)-4-(5-氟吡啶-2-基) 吡咯烷-3-基]羰基}-3，5-二甲基哌啶-4-醇

向(3R，4R，5S)-4-(4-氯苯基)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氟吡啶-2-基)吡咯烷-3-基]羰基}-3，5-二甲基哌啶-4-醇(通过与制备10的胺所用的相同的方法制备，从制备17的醛和(3R，4s，5S)-4-(4-氯苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇(根据国际专利申请公开号WO2005/077935)起始)(120mg，0.28mmol)于二甲基亚砜(2mL)中的溶液中，加入3，6-二氯哒嗪(98mg，0.56mmol)、三乙胺(0.12mL，0.84mmol)和氟化铯(13mg，0.084mmol)。混合物在110℃氮气下搅拌3小时。反应混合物用甲醇(5mL)稀释，然后上样于SCX柱，用甲醇洗脱以移除非碱性物质和二甲亚砜，然后用2M的NH₃于甲醇中的溶液洗脱碱性产物。真空中移除溶剂得到标题化合物(74mg，49％)，为无色胶状。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ0.44-0.60(6H，4x d)，0.95-1.02，1.64-1.73和1.94-2.09(2H，3x m)，2.69-2.79(1H，m)，2.99-3.06和3.16-3.22(1H，2x m)，3.74-3.79(3H，m)，4.01-4.24(4H，m)，4.32-4.36(1H，m)，7.02-7.07(1H，m)，7.29-7.70(7H，m)，8.45-8.49(1H，m)；LRMS(EI+)544[MH+].

实施例6

6-[(3S，4S)-3-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}-4-(5-氟吡啶-2-基)吡咯烷-1-基]哒嗪-3(2H)-酮

将来自实施例5的氯哒嗪(70mg，0.13mmol)的溶液溶解在脱气的乙酸中，并在氮气下搅拌回流过夜。真空中移除溶剂，然后残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用二氯甲烷/甲醇/氨水95/5/0.5洗脱。得到标题化合物，为米色固体(37mg，55％)。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ0.43-0.59(6H，4x d)，0.94-1.03，1.64-1.73和1.93-2.03(2H，3x m)，2.65-2.78(1H，m)，2.97-3.03和3.14-3.20(1H，2x m)，3.62-3.79(3H，m)，3.86-4.17(4H，m)，4.31-4.35(1H，m)，6.88-6.91(1H，m)，7.30-7.42(5H，m)，7.47-7.57(1H，m)，7.63-7.68(1H，m)，8.44-8.48(1H，m)；LRMS(EI+)526[MH+].

实施例7

6-[(3S，4S)-3-{[(3R，4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}-4-(5-氟吡啶-2-基)吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮

向来自实施例6的哒嗪酮(30mg，0.057mmol)于二甲基甲酰胺(2mL)的溶液中加入1M六甲基二硅基氨基钠(sodium hexamethydisllazide)的四氢呋喃(0.07mL，0.07mmol)的溶液和溴化锂(6mg，0.07mmol)。在室温下氮气下搅拌混合物30分钟，然后加入甲基碘(0.004mL，0.07mmol)，且混合物在氮气下于室温搅拌2小时。真空中移除溶剂，且残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用二氯甲烷/甲醇/氨水95/5/0.5洗脱。得到标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ0.44-0.59(6H，4x d)，0.94-1.03，1.64-1.73和1.95-2.04(2H，3x m)，2.68-2.78(1H，m)，2.95-3.01和3.14-3.21(1H，2x m)，3.62-3.81(6H，m)，3.87-4.17(4H，m)，4.31-4.35(1H，m)，6.87-6.90(1H，m)，7.25-7.34(4H，m)，7.38-7.42(1H，m)，7.48-7.58(1H，m)，7.64-7.69(1H，m)，8.44-8.48(1H，m)；LRMS(EI+)540[MH+].

实施例8

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-(5-氟吡啶-3-基)吡咯烷-3-基] 羰基}-3，5-二甲基-4-吡啶-2-基哌啶-4-醇

向(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-基]羰基}-3，5-二甲基-4-吡啶-2-基哌啶-4-醇(通过与制备10的胺所用的相同的方法制备，从(3R，4s，5S)-3，5-二甲基-4-吡啶-2-基哌啶-4-醇(根据国际专利申请公开号WO2005/077935)起始)(50mg，0.12mmol)的甲苯(5mL)的溶液中，加入3-溴，5-氟吡啶(25mg，0.14mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(tris(dibenzylidineacetone)dipalladium)(4.4mg，0.0048mmol)、BINAP(6mg，0.0096mmol)和叔丁醇钠(26mg，0.27mmol)。混合物在80℃氮气下搅拌过夜。真空中移除溶剂，且残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用二氯甲烷/甲醇/氨水99/1/0.1，增加极性至95/5/0.5洗脱。得到标题化合物(11mg，18％)，为黄色胶状。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ0.33-0.53(6H，4x d)，0.81-0.93，1.81-1.92和2.08-2.28(2H，3x m)，2.69-2.78(1H，m)，2.99-3.20(1H，m)，3.61-3.94(5H，m)，4.01-4.23(2H，m)，4.34-4.42(1H，m)，6.81-6.90(1H，m)，7.26-7.50(3H，m)，7.70-7.94(4H，m)，8.51-8.62(2H，m)；LRMS(EI+)510[MH+].

实施例9

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-哒嗪-3-基吡咯烷-3-基]羰基}-3，5-二甲基-4-吡啶-2-基哌啶-4-醇

向(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷，3-基]羰基}-3，5-二甲基-4-吡啶-2-基哌啶-4-醇(通过与制备10的胺所用的相同的方法制备，从(3R，4s，5S)-3，5-二甲基-4-吡啶-2-基哌啶-4-醇(根据国际专利申请公开号WO2005/077935)起始)(50mg，0.12mmol)的DMSO(2mL)的溶液中加入3-氯哒嗪(28mg，0.24mmol)、氟化铯(18mg，0.12mmol)和三乙胺(0.05mL，0.36mmol)。混合物在100℃氮气下搅拌过夜。反应混合物用10mL乙酸乙酯稀释，并用3x20mL的水洗涤。合并的水萃取液用10mL乙酸乙酯萃取，且合并的有机萃取液用10mL盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，然后然后真空中移除溶剂。残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用二氯甲烷/甲醇/氨水99/1/0.1，增加极性至95/5/0.5洗脱。得到标题化合物(16mg，27％)，为黄色胶状。¹HNMR(CD₃OD，400MHz)δ.0.20-0.37(6H，4x d)，0.91-1.13，1.67-1.76和1.94-2.09(2H，3x m)，2.54-2.62(1H，m)，2.87-2.93和2.99-3.05(1H，2x m)，3.61-3.74(3H，m)，3.86-4.08(4H，m)，4.20-4.26(1H，m)，6.83-6.88(1H，m)，7.11-7.44(4H，m)，7.63-7.78(2H，m)，8.30-8.46(3H，m)；LRMS(EI+)493[MH+].

实施例10

6-1(3S，4S)-3-(5-氯吡啶-2-基)-4-{[(3R，4R，5S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-4-羟基 -3，5-二甲基哌啶-1-基]羰基}吡咯烷-1-基]-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮

向来自制备15的羧酸(42mg，0.08mmol)的二氯甲烷(3mL)的溶液中加入N-乙基二异丙基胺(0.04mL，0.25mmol)、1-羟基苯并***(15mg，0.095mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺，然后混合物在氮气下搅拌30分钟。加入来自制备16的胺，且混合物在氮气下搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(20mL)稀释，然后用饱和NaHCO3(20mL)和盐水(20mL)洗涤。有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发得到黄色油状固体。通过柱色谱法(硅胶)纯化，用二氯甲烷和增加极性至95/5的二氯甲烷/甲醇洗脱，得到标题化合物，为黄色固体(31mg，67％)。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ0.36-0.6(m，6H)，1.18(br，1H)，1.89(br，1H)，2.16(br，1H)，2.71(m，1H)，3.13(m，1H)，3.6-4.2(s+m，9H)，4.33(d，1H)，6.89(d，1H)，7.2-7.5(m，3H)，7.78-7.92(m，2H)，8.56(d，2H)；LRMS(EI⁺)558[MH⁺].

实施例11-46

实施例11-46根据上述例如1-10的方法制备，从适合的吡啶醛¹和适合的4位取代的3，5-二甲基哌啶-4-醇²起始。

1.2-甲氧基吡啶-5-甲醛来自市售。其它醛如制备2、17、18和22中所述。

2.(3R，4s，5S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇如制备16中所述。其它所需的哌啶醇的合成如国际专利申请公开号WO2005/077935所述。

制备

制备1

5-氯-2-碘吡啶

将乙酰氯(11.05mL，0.155mol)加入到2-溴-5-氯吡啶(20.0g，0.103mol)于乙腈(120mL)中的溶液中，然后加入碘化钠(23.3g，0.155mol)，然后混合物在回流下加热(装配有干燥管)3小时。反应在冰浴中冷却，小心地用饱和碳酸钾水溶液碱化，然后用乙酸乙酯(2x100mL)萃取。合并的有机层用饱和亚硫酸钠水溶液(200mL)洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发。然后将残余物在置于相同反应和处理条件中，以保证完全反应，然后得到标题化合物(18.71g，75％)，为褐色固体。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ7.30(1H，dd)，7.65(1H，d)，8.35(1H，d)；LRMS(APCI⁺)240[MH⁺]。

制备2

5-氯吡啶-2-甲醛

将来自制备2的碘化物(18.71g，78.1mmol)溶解在四氢呋喃(100mL)中，且在氮气下冷却至-15℃。然后滴加异丙基氯化镁于四氢呋喃(2M，42.2mL，84.4mmol)中的溶液，确保温度保持低于0℃。将反应混合物冷却至-15℃，搅拌1小时，并滴加二甲基甲酰胺(9.0mL，116mmol)，保持温度低于0℃。将反应混合物温热至室温，并搅拌1小时，然后再冷却至0℃，然后通过滴加2M的HCl(100mL)小心地淬灭。加入完成后，在室温下搅拌混合物30分钟，然后通过加入饱和碳酸氢钠水溶液将pH调节至6-7。分离有机层，且水层用二氯甲烷(2x200mL)萃取。合并的有机层用水洗涤(200mL)，干燥(MgSO₄)，然后在旋转蒸发器中浓缩，保持温度小于30℃，得到粗产物(13.7g)，为褐色油状物，其没有进一步纯化就使用。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ7.35(1H，d)，7.95(1H，d)，8.73(1H，s)，10.02(1H，s)；LRMS(APCI⁺)142[MH⁺].

制备3

(2E)-3-(5-氯吡啶-2-基)丙烯酸叔丁酯

于-78℃氮气下，将正丁基锂(2.5M于己烷中，34mL，85mmol)滴加入二乙基膦酰基乙酸叔丁酯(tert-butyl diethylphosphonoacetate)(19.1mL，81mmol)于***(80mL)的溶液中，并继续搅拌30分钟。然后滴加来自制备2的粗制醛(来自制备1的78.1mmol的碘化物)于***(20mL)中的溶液，保持温度低于-65℃。当加入完成时，经2小时将混合物温热至室温，然后通过加入饱和氯化铵水溶液(200mL)小心淬灭。混合物用***(2x150mL)萃取，且合并的有机萃取液用盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发。残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用戊烷，增加极性至戊烷/乙酸乙酯8:2洗脱得到标题化合物(13.34g，74％经2步)，为油状物。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ1.51，(9H，s)，6.79(1H，d)，7.35(1H，d)，7.52，(1H，d)，7.66(1H，dd)，8.55(1H，d)；LRMS(APCI⁺)240[MH⁺].

制备4

(2E)-3-(5-氯吡啶-2-基)丙烯酸三氟乙酸盐

将三氟乙酸(10mL)于二氯甲烷(10mL)中的溶液滴加入用冰冷却的来自制备3的酯(2.09g，8.7mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中，然后所得混合物在室温下搅拌过夜。真空中移除溶剂，加入甲苯(10mL)并在真空中移除，然后加入二氯甲烷(10mL)并在真空中移除得到标题化合物(2.44g，94％)，为红色固体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ6.86(1H，d)，7.64(2H，m)，7.87(1H，dd)，8.59(1H，d)；LRMS(APCI⁺)184[MH⁺].

制备5

(4S)-4-苄基-3-[(2E)-3-(5-氯吡啶-2-基)丙-2-烯酰]-1，3-噁唑烷-2-酮

在氮气下将来自制备4的酸(2.44g，8.2mmol)的四氢呋喃(15mL)溶液冷却至-78℃。滴加三乙胺(2.85mL，20mmol)，然后滴加三甲基乙酰氯(1.11mL，9.0mmol)，控制加入的速度使得温度保持在低于-65℃。然后于-78℃将混合物搅拌2小时。在-78℃氮气下将ⁿBuLi(2.5M于己烷中，4.26mL，10.7mmol)滴加入(4S)-4-苄基-1，3-噁唑烷-2-酮(1.74g，9.8mmol)于四氢呋喃(15mL)中的溶液中，控制加入的速度使得温度保持在低于-65℃。在-78℃搅拌20分钟后，于-78℃通过插管将噁唑烷酮阴离子溶液加入至混合酸酐溶液中。于-78℃搅拌反应混合物20分钟，然后缓慢温热至室温过夜。反应通过加入饱和氯化铵水溶液(30mL)淬灭，然后真空浓缩以除去四氢呋喃。过滤固体沉淀，用***洗涤得到标题化合物(1.52g，54％)，为浅黄色固体。蒸发醚洗液至干，在***中浆化，然后过滤得到进一步的产物(0.42g，15％)。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ2.84(1H，t)，3.37(1H，d)，4.22(2H，m)，4.78(1H，m)，7.2-7.4(5H，m)，7.51(1H，d)，7.69(1H，d)，7.86(1H，d)，8.23(1H，d)，8.62(1H，s)；LRMS(APCI⁺)343[MH⁺].

制备6

(4S)-4-苄基-3-{[(3S，4S)-1-苄基-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-基]羰基}-1，3-噁唑烷-2-酮

将三氟乙酸(90μL，1.2mmol)加入到来自制备5的噁唑烷酮(1.93g，5.6mmol)的二氯甲烷(20mL)中的混悬液中，然后经10分钟滴加N-苄基-N-(甲氧基甲基)三甲基甲硅烷基胺(2.3mL，9.0mmol)。加入完成后反应在室温搅拌过夜。反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)处理，然后分离各层。水层用二氯甲烷(2x20mL)萃取，且合并的有机层被干燥(MgSO₄)并蒸发。残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用乙酸乙酯/戊烷2:8，增加极性至2:3洗脱得到不需要的(4S)-4-苄基-3-{[(3R，4R)-1-苄基-4-(5-氯吡啶，2-基)吡咯烷-3-基]羰基}-1，3-噁唑烷-2-酮(1.16g，44％)为第一洗脱成分，和需要的(4S)-4-苄基-3-{[(3S，4S)-1-苄基-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-基]羰基}-1，3-噁唑烷-2-酮(1.18g，45％)为第二洗脱成分。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ2.75(2H，m)，2.92(1H，m)，3.20(3H，m)，3.27(1H，br)，3.68(2H，br)，4.14(2H，m)，4.23(1H，m)，4.50(1H，m)，4.67(1H，m)，7.10-7.40(11H，m)，7.58(1H，dd)，8.50(1H，d)；LRMS(APCI⁺)476[MH⁺].

制备7

(3S，4S)-1-苄基-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-甲酸甲酯

将甲醇钠(664mg，12mmol)加入到来自制备6的噁唑烷酮(1.17g，2.5mmol)和碳酸二甲酯(1.03mL，12mmol)于二氯甲烷(15mL)中的溶液中，然后反应在室温下搅拌过夜。反应混合物在真空中浓缩，且将残余物在乙酸乙酯(50mL)和水(30mL)之间分配。水层通过加入2M的HCl(～6mL)中和，然后真空浓缩。残余物用乙腈(25mL)研磨，然后过滤。浓缩滤液得到(3S，4S)-1-苄基-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-羧酸(123mg，16％)，为黄色固体(对于分光数据参见制备8)。将乙酸乙酯层干燥(MgSO₄)并蒸发。残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用乙酸乙酯/戊烷2:8，增加极性至2:3洗脱得到标题化合物(371mg，45％)，为无色油状物。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ2.71(1H，t)，2.97(1H，t)，3.05(2H，m)，3.23(1H，m)，3.63(5H，m)，3.82(1H，q)，7.15-7.35(6H，m)，7.55(1H，d)，8.46(1H，s)；LRMS(APCI⁺)331[MH⁺].

制备8

(3S，4S)-1-苄基-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-羧酸二盐酸盐

将NaOH(135mg，3.3mmol)的水(5mL)溶液加入到来自制备7的酯(371mg，1.1mmol)的二噁烷(10mL)溶液中，然后在室温下搅拌混合物过夜。真空浓缩反应混合物，溶于水(10mL)中并用2M的HCl(～1.7mL)中和。然后混合物在真空中浓缩，用乙腈(20mL)研磨并过滤。滤液用2M的HCl醚溶液酸化，然后真空浓缩得到标题化合物(290mg，68％)，为固体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ3.40-4.20(6H，m)，4.53(2H，m)，7.40-7.60(6H，m)，7.81(1H，d)，8.60(1H，br)；LRMS(APCI⁺)317[MH⁺].

制备9

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-1-苄基-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-基]羰基}-4-(4-氟苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇

将1-羟基苯并***(230mg，1.7mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐(354mg，1.8mmol)加入到来自制备8的酸(522mg，1.5mmol)于二氯甲烷(10mL)和三乙胺(1.03mL，7.4mmol)中的溶液中，然后在室温下搅拌混合物30分钟，然后加入(3R，4s，5S)-4-(4-氟苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇盐酸盐(根据US2005/176772制备)(384mg，1.5mmol)。室温下搅拌混合物过夜，真空中移除溶剂，且残余物在乙酸乙酯(50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)之间分配。有机层用盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发。残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用二氯甲烷，增加极性至含5％甲醇的二氯甲烷洗脱得到标题化合物(546mg，71％)，为油状物。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ0.3-0.6(6H，4x d)，1.23(1H，m)，1.75-1.95(2H，m)，2.72(1H，t)，2.85(1H，m)，2.90-3.20(3H，m)，3.45-4.05(5H，m)，4.32(1H，d)，7.02(3H，m)，7.20-7.50(7H，m)，7.80，(1H，dd)，8.50(1H，d)；LRMS(APCI⁺)522[MH⁺].

制备10

(3R，4R，5S)-1-{[(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-基]羰基}-4-(4-氟苯基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇

将1-氯乙基氯甲酸酯(0.3mL，2.8mmol)加入到来自制备9的酰胺(370mg，0.7mmol)和N-乙基二异丙基胺(0.27mL，1.6mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中，然后将混合物回流加热3小时。冷却至室温后真空中移除溶剂，且将残余物在10％柠檬酸水溶液(30mL)和二氯甲烷(30mL)之间分配。有机层用水(30mL)洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发。将所得深色油状物溶于甲醇(10mL)中，并回流加热3小时。真空中移除溶剂，然后残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用含5％甲醇的二氯甲烷的溶液，增加极性至含10％甲醇的二氯甲烷的溶液洗脱得到标题化合物(305mg，100％)，为油状物。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ0.4-0.6(6H，4x d)，1.00-1.06，1.77-1.82和1.98-2.05(2H，3x m)，2.76-2.82(1H，m)，3.00-3.20(2H，m)，3.40-4.10(6H，m)，4.36(1H，m)7.00-7.50(5H，m)，7.85和7.95(1H，2x dd)，8.61和8.63(1H，2x d)；LRMS(APCI⁺)432[MH⁺].

制备11

(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-甲酸甲酯

将氯甲酸1-氯乙基酯(2.33mL，21.4mmol)加入到来自制备7的酯(1.77g，5.35mmol)和N-乙基二异丙基胺(2.1mL，12mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中，然后将混合物回流加热3小时。冷却至室温后，真空中移除溶剂，且将残余物溶于甲醇(10mL)中，并回流加热16小时。真空中移除溶剂，然后残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用二氯甲烷，增加极性至含10％甲醇的二氯甲烷的溶液洗脱得到所需产物和N-乙基二异丙基胺的混合物，为油状物。将该油状物溶于乙酸乙酯(30mL)中，并过滤所得沉淀。滤液在真空中浓缩，且将残余物溶于乙腈(25mL)中。过滤所得沉淀得到标题化合物(619mg，48％)，为白色固体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ3.46(m，1H)，3.61-3.77(m，7H)，3.74(s，3H)，3.98(m，1H)，7.42(d.1H)，7.82(dd，1H)，8.57(d，1H)；LRMS(APCI⁺)241[MH⁺].

制备12

(3S，4S)-1-(6-氯哒嗪-3-基)-4-(5-氯吡啶-2-基)吡咯烷-3-甲酸甲酯

向来自制备11的吡咯烷(350mg，1.50mmol)于二甲亚砜(10mL)中的溶液中加入3，6-二氯哒嗪(330mg，2.20mmol)、三乙胺(0.61mL，4.40mmol)和氟化铯(220mg，1.45mmol)。在80℃氮气下搅拌混合物过夜。将反应混合物溶于25mL乙酸乙酯中，并用20mL水洗涤。分离有机层，且水层再用25mL乙酸乙酯再萃取。合并的乙酸乙酯萃取液经MgSO₄干燥，过滤并蒸发得到淡橙色油状固体，其通过柱色谱法纯化，用二氯甲烷增加极性至95/5二氯甲烷/甲醇洗脱。得到标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ3.66(s，1H)，3.72(m，1H)，3.78(t，1H)，3.96-4.12(m，4H)，7.04(d，1H)，7.42(m，2H)，7.79(d，1H)，8.52(s，1H)；LRMS(El⁺)353[MH⁺].

制备13

(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-(6-氧代-1，6-二氢哒嗪-3-基)吡咯烷-3-甲酸甲酯

将来自制备12的氯哒嗪(803mg，2.27mmol)溶液溶解在脱氧乙酸中，并在氮气下回流加热44小时。真空中移除溶剂，并加入15mL甲醇。然后将HCl气体通入反应混合物中直到饱和，然后混合物在干燥管下搅拌过夜。真空中移除甲醇，然后将残余物分配到DCM和10％K₂CO₃之间。分离有机层，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发得到标题化合物，为淡褐色固体(577mg，76％)。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ3.58-3.76和3.83-3.97(6H，2x m)，3.65(3H，s)，6.89(1H，d)，7.31(1H，d)，7.39(1H，d)，7.79(1H，dd)，8.52(1H，d)；LRMS(EI⁺)335[MH⁺].

制备14

(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-(1-甲基-6-氧代-1，6-二氢哒嗪-3-基)吡咯烷 -3-甲酸甲酯

向来自制备13的哒嗪酮(557mg，1.66mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液中加入六甲基二硅氨基钠(hexamethydisilazide)(1M于四氢呋喃中，2.00mL，2.00mmol)和溴化锂(173mg，2.00mmol)。反应在氮气下搅拌10分钟，然后加入碘甲烷(0.083mL，1.30mmol)。反应在氮气下搅拌4小时，然后分配到乙酸乙酯(30mL)和水(30mL)之间。分离有机层，经MgSO4干燥，过滤并蒸发得到褐色油状物，其使用柱色谱法(硅胶)纯化，用100％二氯甲烷，增加极性至95/5二氯甲烷/甲醇洗脱。得到标题化合物，为黄色油状物(500mg，90％)。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ3.64(m，9H)，3.92(m，3H)，6.87(d，1H)，7.26(d，1H)，7.37(d，1H)，7.79(dd，1H)，8.51(s，1H)；LRMS(EI⁺)349[MH⁺].

制备15

(3S，4S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-(1-甲基-6-氧代-1，6-二氢哒嗪-3-基)吡咯烷 -3-羧酸

向来自制备14的酯14(500mg，1.43mmol)于二噁烷(10mL)中的溶液中加入氢氧化钠(172mg，4.30mmol)的5mL水溶液。反应在干燥管下搅拌过夜。真空中移除溶剂，残余物溶于水，用4当量2M的HCl中和，并蒸发。残余物与20mL乙腈搅拌，然后过滤得到浅黄色固体(512mg，含3当量NaCl-338mg产物+174mg NaCl)。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ3.6(m，2H)，3.64(s，3H)，3.7(t，1H)，3.9(m，3H)，6.88(d，1H)，7.27(d，1H)，7.41(d，1H)，7.79(dd，1H)，8.52(s，1H)；LRMS(EI⁺)335[MH⁺].

制备16

(3R，4s，5S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇

步骤A：(3R，4s，5S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-(4-甲氧基苄基)-3，5-二甲基哌啶 -4-醇

氮气下将2-溴-5-氯吡啶(6.0g，31.2mmol)于甲苯(90mL)中的溶液冷却至-78℃。经12分钟滴加正丁基锂(2.5M于己烷中)(15mL，37.5mmol)，且混合物于-78℃搅拌1小时。然后经10分钟滴加(3R，5S)-1-(4-甲氧基苄基)-3，5-二甲基哌啶-4-酮(根据国际专利申请公开号WO2005/077935制备)(6.93g，28.1mmol)于甲苯(15mL)中的溶液，且混合物于-78℃再搅拌3小时，然后温热至室温。混合物通过倒入饱和氯化铵(100mL)淬灭，然后搅拌5分钟，将混合物分配至水(50mL)和乙酸乙酯(300mL)之间。分离有机相，并再用乙酸乙酯(2x300mL)苹取水相。经硫酸镁干燥合并的有机萃取液，过滤然后蒸发至干得到粗制中间体。通过色谱法(硅胶)纯化，用2％甲醇于二氯甲烷中的溶液，增加极性至10％(10:1甲醇:880氨)于二氯甲烷中的溶液洗脱得到(3R，4s，5S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-1-(4-甲氧基苄基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇，为橙色油状物(8.48g，83％)。

步骤B：(3R，4s，5S)-4-(5-氯吡啶-2-基)-3，5-二甲基哌啶-4-醇

将来自步骤A的产物(6.56g，18.2mmol)溶解在无水二氯甲烷(100mL)中，加入三乙胺(2.02g，20.0mmol)，并在氮气下将溶液冷却至5℃。将氯甲酸1-氯乙酯(3.1g，21.9mmol)滴加至搅拌的溶液中，且加入完成后在室温下再将混合物搅拌2.5小时。然后混合物用10％碳酸钾水溶液(3x50mL)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发至干。回流下在甲醇(100mL)中将粗制油状物加热2.5小时，然后真空中移除溶剂。将残余物溶解在二氯甲烷(100mL)和甲醇(10mL)中，加入固体碳酸钾(10g)，并将不均匀的混合物搅拌30分钟。滤出固体碳酸钾，且蒸发滤液至干。然后，粗产物通过柱色谱法(硅胶)纯化，使用含10％甲醇的二氯甲烷溶液，增加极性至20％(10:1甲醇:880氨)的二氯甲烷溶液洗脱得到标题化合物(3.37g，77％)，为微黄色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ0.53(3H，s)，0.57(s，3H)，2.60-2.71(m，2H)，3.13(q，2H)，3.32(d，2H)，7.43(d，1H)，7.78(dd，1H)，8.50(1H，d)，9.58(br，1H)，9.84(br，1H)；LRMS(APCI+)241和243[MH⁺]

制备17

5-氟吡啶-2-甲醛

根据制备1和2的方法制备标题化合物，从2-溴-5-氟吡啶起始。得到含有四氢呋喃和***的粗产物，其没有进一步纯化就使用。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ7.57(1H，dt)，8.03(1H，dd)，8.62(1H，d)，10.04(1H，s)；LRMS(APCI⁺)126[MH⁺].

制备18

6-甲酰基-3-氰基吡啶

将6-甲基-3-氰基吡啶(10.0g，84.6mmol)和碘(20.0g，78.8mmol)于二甲亚砜(150mL)中的混合物于150℃氮气下加热20分钟(用漂白剂净化反应废气(reaction exhaust)以除去二甲硫醚)。冷却至室温后，小心加入饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)，且所得混合物用甲苯(3x100mL)萃取。合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发得到所需产物，为橙色油状物(5.65g，50％)，其没有进一步纯化就使用。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ8.06(1H，d)，8.17(1H，dd)，9.05(1H，d)，10.12(1H，s).

制备19

5-甲氧基-2-甲基吡啶

6-甲基吡啶-3-醇(50.0g，0.458mol)加入到粉末KOH(103g，1.83mol)于二甲亚砜(750mL)中的混悬液中，且将混合物在室温氮气下搅拌1.5小时。然后经1小时将甲基碘(30mL，68.3g，0.481mol)滴加至深褐色混合物中(放热)。在室温下搅拌1.5小时后，加入水(1.0L)，且混合物用乙酸乙酯(2x300mL)萃取。合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并于40℃在旋转蒸发器中蒸发。残余物通过柱色谱法(硅胶)纯化，用戊烷，增加极性至乙酸乙酯洗脱得到挥发性产物，为与乙酸乙酯的～1:1混合物(40g，～23.3g产物，41％)¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ2.45(3H，s)，3.79(3H，s)，7.02(1H，d)，7.08(1H，dd)，8.16(1H，d).

制备20

5-甲氧基-2-甲基吡啶1-氧化物

将间-氯过苯甲酸(51.3g，0.297mol)分份加入到制备19的化合物(40g的与乙酸乙酯的1:1混合物，23.3g，189mmol)于二氯甲烷(1500mL)中的溶液中，在室温下搅拌混合物2小时。然后将亚硫酸钠(45g)的水(250mL)溶液加入至反应中，且将混合物搅拌15分钟，这时对于氧化剂的存在进行淀粉/KI试纸表现为阴性检测结果。分离有机层，经MgSO₄干燥，并蒸发得到淡黄色固体(54g)，其为所需产物与间-氯苯甲酸(mCBA)的～1:1混合物。其没有进一步纯化就进行下面的步骤。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ3.84(3H，s)，6.97(1H，dd)，7.19(1H，d)，7.34(1H，t，mCBA)，7.48(1H，d，mCBA)，7.94(1H，d，mCBA)，8.04(1H，s，mCBA)，8.36(1H，d).

制备21

(5-甲氧基吡啶-2-基)甲醇

将三氟乙酸酐(28.2mL，203mmol)滴加入冰冷却的来自制备20的产物(～135mmol)于二氯甲烷(500mL)中的溶液中，将混合物温热至室温，并搅拌过夜。Tlc分析表明仍有大量起始物质，因此再滴加一份三氟乙酸酐(15mL，108mmol)，且再将混合物搅拌27小时。通过小心加入甲醇(250mL)淬灭反应，且搅拌30分钟，然后在真空中浓缩。然后小心加入2.5M氢氧化钠(100mL)，且混合物用二氯甲烷(4x100mL)萃取。干燥合并的有机萃取液(MgSO₄)，且蒸发得到所需产物(12g，64％)，该产物被回收的起始物料(～15mol％)污染。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ3.80(3H，s)，4.40(1H，br)，4.66(2H，s)，7.16(1H，dd)，7.20(1H，d)，8.17(1H，d).

制备22

5-甲氧基吡啶-2-甲醛(carbaldehyde)

将MnO₂(97.0g，360mmol)分份加入到来自制备21的醇(12g，86mmol)于二氯甲烷(500mL)中的溶液中，然后在室温下搅拌所得混悬液64小时。通过

过滤反应混合物，且真空中移除溶剂得到橙色油状的所需产物(8.6g，73％)，该产物被5-甲氧基-2-甲基吡啶1-氧化物(15mol％)污染。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ3.93(3H，s)，7.26(1H，dd)，7.91(1H，d)，8.37(1H，d)，9.94(1H，s).

Claims

1.式(I)的化合物或其药学可接受盐：

其中

X和Y中的一个为N，且另一个为CH，

R为F、Cl、CN、CF₃或甲氧基，条件是当Y为N时，R不是F或Cl，

R¹为苯基、2-吡啶基、C₃-C₆环烷基或CH₂(C₃-C₆环烷基)，其中所述环部分任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自F、Cl、CN、甲基和甲氧基，

R²为H、F或Cl，条件是当Y为N时，R²不是F或Cl，

Het为含有1个或2个N原子的6-元环，其中该环为芳香环，或在环中含有2个双键和＝O取代基，该环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自F、Cl、OH、CN、甲基、乙基、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂和甲氧基。

2.根据权利要求1的化合物或其药学可接受盐，其中X为N且Y为CH。

3.根据权利要求1的化合物或其药学可接受盐，其中R为氯。

4.根据权利要求1、2或3中任一项的化合物或其药学可接受盐，其中

R¹为任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自F、Cl、CN、甲基和甲氧基。

5.根据权利要求4的化合物或其药学可接受盐，其中R¹为苯基、4-氯苯基或4-氟苯基。

6.根据权利要求1、2或3中任一项的化合物或其药学可接受盐，其中

R¹为C₃-C₆环烷基。

7.根据权利要求6的化合物或其药学可接受盐，其中

R¹为环丙基或环己基。

8.根据权利要求1、2和3中任一项的化合物或其药学可接受盐，其中R²为H或F。

9.根据权利要求8的化合物或其药学可接受盐，其中R²为H。

10.根据权利要求1、2和3中任一项的化合物或其药学可接受盐，其中

Het为吡啶-2-基、吡啶-3-基、哒嗪-3-基、6-氧代-1，6-二氢哒嗪-3-基、6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基、2-氧代-1，2-二氢嘧啶-4-基、6-氧代-1，6-二氢嘧啶-4-基、2-氧代-1，2-二氢吡啶-4-基或6-氧代-1，6-二氢吡啶-2-基，其任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自F、Cl、OH、CN、甲基、乙基和甲氧基。

11.根据权利要求10的化合物或其药学可接受盐，其中Het为吡啶-2-基、吡啶-3-基、哒嗪-3-基或6-氧代-1，6-二氢哒嗪-3-基，其任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自OH、CN、F、甲基和甲氧基。

12.根据权利要求11的化合物或其药学可接受盐，其中Het为吡啶-2-基或哒嗪-3-基，各个在相对于与吡咯烷部分相连的键的对位被OH、CN或甲氧基取代。

13.根据权利要求12的化合物或其药学可接受盐，其中Het为哒嗪-3-基，其在相对于与吡咯烷部分相连的键的对位被OH、CN或甲氧基取代。

14.根据权利要求1的化合物，其选自：

或其药学可接受盐。

15.根据权利要求14的化合物，其选自：

或其药学可接受盐。

16.根据权利要求15的化合物，其选自：

或其药学可接受盐。

17.药物组合物，其含有权利要求1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16中任一项的化合物或其药学可接受盐以及药学可接受的载体或佐剂。

18.药物组合物，其含有权利要求1所述的化合物和稀释剂。

19.权利要求1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或16中任一项的化合物或其药学可接受盐或者权利要求17或18的药物组合物在制备用于治疗对MC4受体激活有反应的疾病、病症或病情的药物中的用途。

20.根据权利要求19的用途，其中所述疾病为性功能障碍、肥胖、糖尿病或下泌尿道功能障碍。