CN101411778A - 一种中药有效部位组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有治疗恶性肿瘤、提高免疫功能、使用安全的中药有效部位组合物。该组合物中包含龙葵总生物碱、人参总皂苷、黄芪总皂苷。本发明还公开了该药物组合的制备方法。

Description

一种中药有效部位组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种治疗恶性肿瘤、提高免疫功能、使用安全的中药有效部位组合物，该组合物的特征是含有龙葵总生物碱、人参总皂苷和黄芪总皂苷，本发明还提供了该药物组合物的制备方法。

背景技术

现代社会癌症(恶性肿瘤)已成为威胁人类生命健康的主要问题之一，世界卫生组织(WHO)报告表明，根据目前癌症的发病趋势，2020年全世界癌症发病率将比现在增加50％，全球每年新增癌症患者人数将达到1500万人。医疗界迫切需求安全有效的癌症治疗药物。

本发明所述的龙葵总生物碱来源于单味药材——龙葵。龙葵为茄科茄属植物，有清热解毒、活血散瘀、利水消肿、止咳祛痰的功效。作为传统中药的龙葵近年来得到了国内外学者的广泛关注，进行了大量的研究，获得了较为客观的信息，尤其是在抗肿瘤方面，无论是单味药还是其复方制剂在基础和临床医学方面作了大量的工作。龙葵全草含苷类甾体生物碱、龙葵多糖、矿物质、维生素、色素、氨基酸等，龙葵浆果中的提取物中还含有酯、羧基化合物、甾醇、酚性化合物(其主要成分为黄色不饱和酯)，此外还含有皂苷。而对肿瘤治疗起关键作用的化学成分主要为龙葵总生物碱(包括澳洲茄碱、澳洲茄边碱等)，其次为多糖。

本发明所述的人参总皂苷，是从五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根中提取的总皂苷。人参是传统的名贵中药，具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能。现代药理研究表明，人参具有多种药理活性。医学和药理研究证明，人参总皂苷为人参的主要有效成分之一，它是人参根的主要生理活性物质，主要含有人参皂苷Rg1和人参皂苷Re等。

本发明所述的黄芪总皂苷，是从豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根中提取的总皂苷。黄芪具有补气固表，托毒排脓，利尿，生肌的功效；还具有增强免疫***，抵御疾病、增强体质，抗氧化延缓衰老，抗病毒，抗癌的作用。

经检索，未见有龙葵总生物碱、人参总皂苷和黄芪总皂苷进行组方制备的中药制剂。我们结合文献资料，运用现代科学方法，在制备工艺、质量标准、药效、毒理及稳定性等方面进行了研究，以龙葵总生物碱、人参总皂苷和黄芪总皂苷为原料制成药物制剂用于癌症治疗，具有明显抗癌作用的同时能够起到提高机体免疫功能，改善生存质量的作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗恶性肿瘤疗效显著、增强机体免疫功能的中药有效部位组合物及其制备方法。该药物组合以龙葵总生物碱、人参总皂苷和黄芪总皂苷为原料。

本发明是通过如下技术方案实现的：

①龙葵总生物碱的制备：

取龙葵全草与/或果实，加入50％～90％乙醇溶液提取2～3次，每次6～8倍量，回收乙醇，浓缩至相对密度1.25，浓缩液中加入2～4倍量的0.1mol/l酸性溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤1～3次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以0.1mol/l碱性溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量10％～40％乙醇液冲洗树脂柱/床至流出液近无色。弃去。再以50～90％乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，回收乙醇至无醇味，以0.5～1.5mol/l的碱性溶液调PH值至8～10，静置，冷藏，收集沉淀。自然晾干，即得龙葵总生物碱。

以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比例形成的混合相。

②人参总皂苷的制备：

将人参粉碎成粗粉，在12～24倍重量的沸水中煎煮2～3次，每次1～2小时。合并各次提取液，浓缩至50℃～90℃相对密度为1.00～1.20。浓缩液加入乙醇，使溶液中乙醇含量达到65％～75％，滤过。将滤液减压回收乙醇，并调节溶液的PH值至7～15放置，滤过，将滤液通过大孔吸附树脂柱，用10％～30％乙醇洗脱树脂柱，弃去洗脱液，用50％～90％浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过大孔阳离子交换树脂及大孔阴离子交换树脂，流出液减压回收乙醇，浓缩干燥，得干粉。将干粉用20％～～90％乙醇溶液溶解，配制成5％总皂苷溶液，加1％的药用活性炭，加热回流30min～2h，趁热过滤，再精滤，滤液减压回收乙醇，浓缩并干燥至干粉，得人参总皂苷。

③黄芪总皂苷的制备：

以中药材黄芪为原料，包括提取、脱糖、脱色、纯化等步骤。其特征是将黄芪粉碎，在常压提取装置中，用水热回流提取2次以上；合并部分提取液，过滤，清液加入大孔吸附树脂柱上，以10倍以上体积的去离子蒸馏水洗脱糖类部分，再以5倍以上体积的0.05％～0.5％的氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化钙水溶液进行洗脱，继以5倍以上体积的20％～50的乙醇洗脱进行脱色，再以70％～90％的乙醇洗脱黄芪皂甙，洗脱液浓缩到小体积，离心得到沉淀，即高纯度的黄芪甲苷；向母液中加入乙醇至乙醇浓度为70％～90％，离心，分得上清液，浓缩干燥后的沉淀，与黄芪甲苷混合后，得到黄芪总皂苷。

④将上述龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷以规定比例混合均匀，即得本发明所述中药有效部位组合物。

本发明所述的中药有效部位组合物特征在于，含龙葵总生物碱2～4重量份、人参总皂苷1～3重量份、黄芪总皂苷1～2重量份。其中优选比例为龙葵总生物碱3重量份、人参总皂苷2重量份、黄芪总皂苷1重量份。

按药剂学方法，可以将本发明的龙葵总生物碱、人参总皂苷、黄芪总皂苷组合物制备成多种临床药物剂型作为抗肿瘤药物，包括口服制剂或非肠道给药的剂型。所述口服制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、混悬剂、口服液体制剂等；所述非肠道给药剂型为注射液、输液剂、冻干注射剂等。

本发明的抗肿瘤药物组合制剂中的辅料是指常规的赋形剂，如：溶剂、助溶剂、崩解剂、矫味剂、粘合剂、着色剂、防腐剂等。

具体实施方式

实施例1 龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物的制备

(1)方法一：

①龙葵总生物碱的制备：

取龙葵全草与/或果实加入80％乙醇溶液提取3次，每次8倍量，回收乙醇，浓缩至相对密度1.25，浓缩液中加入3倍量的0.1mol/l盐酸溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤2次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以0.1mol/l氨水溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量20％乙醇液冲洗树脂柱/床至流出液近无色。弃去。再以70％乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，回收乙醇至无醇味，以1.0mol/l的氢氧化钠溶液调PH值至9，静置，冷藏，收集沉淀。自然晾干，即得龙葵总生物碱。

以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比例形成的混合相。

②人参总皂苷的制备：

将人参粉碎成粗粉，在15倍重量的沸水中煎煮2次，每次1.5小时。合并各次提取液，浓缩至80℃相对密度为1.10。浓缩液加入乙醇，使溶液中乙醇含量达到70％，滤过。将滤液减压回收乙醇，并调节溶液的PH值至10放置，滤过，将滤液通过大孔吸附树脂柱，用20％乙醇洗脱树脂柱，弃去洗脱液，用70％浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过大孔阳离子交换树脂及大孔阴离子交换树脂，流出液减压回收乙醇，浓缩干燥，得干粉。将干粉用70％乙醇溶液溶解，配制成5％总皂苷溶液，加1％的药用活性炭，加热回流1h，趁热过滤，再精滤，滤液减压回收乙醇，浓缩并干燥至干粉，得人参总皂苷。

③黄芪总皂苷的制备：

以中药材黄芪为原料，包括提取、脱糖、脱色、纯化等步骤。其特征是将黄芪粉碎，在常压提取装置中，用水热回流提取3次；合并部分提取液，过滤，清液加入大孔吸附树脂柱上，以15倍体积的去离子蒸馏水洗脱糖类部分，再以10倍体积的0.1％的氢氧化钠溶液进行洗脱，继以10倍体积的30％的乙醇洗脱进行脱色，再以70％的乙醇洗脱黄芪皂甙，洗脱液浓缩到小体积，离心得到沉淀，即高纯度的黄芪甲苷；向母液中加入乙醇至乙醇浓度为70％，离心，分得上清液，浓缩干燥后的沉淀，与黄芪甲苷混合后，得到黄芪总皂苷。

④将上述龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷以3：2：1的比例混合均匀，即得本发明所述中药有效部位组合物(1)。

(2)方法二：

①龙葵总生物碱的制备：

取龙葵全草与/或果实加入70％乙醇溶液提取3次，每次7倍量，回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，浓缩液中加入2.5倍量的0.1mol/l盐酸溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤3次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以0.1mol/l氢氧化钠溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量30％乙醇液冲洗树脂柱/床至流出液近无色。弃去。再以75％乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，回收乙醇至无醇味，以1.0mol/l的氢氧化钠溶液调PH值至9，静置，冷藏，收集沉淀。自然晾干，即得龙葵总生物碱。

以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比例形成的混合相。

②人参总皂苷的制备：

将人参粉碎成粗粉，在20倍重量的沸水中煎煮2次，每次2小时。合并各次提取液，浓缩至85℃相对密度为1.15。浓缩液加入乙醇，使溶液中乙醇含量达到75％，滤过。将滤液减压回收乙醇，并调节溶液的PH值至9放置，滤过，将滤液通过大孔吸附树脂柱，用15％乙醇洗脱树脂柱，弃去洗脱液，用60％浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过大孔阳离子交换树脂及大孔阴离子交换树脂，流出液减压回收乙醇，浓缩干燥，得干粉。将干粉用65％乙醇溶液溶解，配制成5％总皂苷溶液，加1％的药用活性炭，加热回流1.5h，趁热过滤，再精滤，滤液减压回收乙醇，浓缩并干燥至干粉，得人参总皂苷。

③黄芪总皂苷的制备：

以中药材黄芪为原料，包括提取、脱糖、脱色、纯化等步骤。其特征是将黄芪粉碎，在常压提取装置中，用水热回流提取2次；合并部分提取液，过滤，清液加入大孔吸附树脂柱上，以12倍体积的去离子蒸馏水洗脱糖类部分，再以6倍体积的0.2％的氢氧化钠溶液进行洗脱，继以8倍体积的40％的乙醇洗脱进行脱色，再以80％的乙醇洗脱黄芪皂甙，洗脱液浓缩到小体积，离心得到沉淀，即高纯度的黄芪甲苷；向母液中加入乙醇至乙醇浓度为80％，离心，分得上清液，浓缩干燥后的沉淀，与黄芪甲苷混合后，得到黄芪总皂苷。

④将上述龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷以2：1：1的比例混合均匀，即得本发明所述中药有效部位组合物(2)。

(3)方法三：

①龙葵总生物碱的制备：

取龙葵全草与/或果实加入75％乙醇溶液提取2次，每次8倍量，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，浓缩液中加入3倍量的0.15mol/l盐酸溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤3次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以0.1mol/l氨水溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量20％乙醇液冲洗树脂柱/床至流出液近无色。弃去。再以70％乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，回收乙醇至无醇味，以1.0mol/l的氢氧化镁溶液调PH值至10，静置，冷藏，收集沉淀。自然晾干，即得龙葵总生物碱。

以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比例形成的混合相。

②人参总皂苷的制备：

将人参粉碎成粗粉，在20倍重量的沸水中煎煮2次，每次2小时。合并各次提取液，浓缩至75℃相对密度为1.2。浓缩液加入乙醇，使溶液中乙醇含量达到80％，滤过。将滤液减压回收乙醇，并调节溶液的PH值至11放置，滤过，将滤液通过大孔吸附树脂柱，用25％乙醇洗脱树脂柱，弃去洗脱液，用60％浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过大孔阳离子交换树脂及大孔阴离子交换树脂，流出液减压回收乙醇，浓缩干燥，得干粉。将干粉用80％乙醇溶液溶解，配制成5％总皂苷溶液，加1％的药用活性炭，加热回流1h，趁热过滤，再精滤，滤液减压回收乙醇，浓缩并干燥至干粉，得人参总皂苷。

③黄芪总皂苷的制备：

以中药材黄芪为原料，包括提取、脱糖、脱色、纯化等步骤。其特征是将黄芪粉碎，在常压提取装置中，用水热回流提取4次；合并部分提取液，过滤，清液加入大孔吸附树脂柱上，以20倍体积的去离子蒸馏水洗脱糖类部分，再以12倍体积的0.1％的氢氧化钠溶液进行洗脱，继以15倍体积的25％的乙醇洗脱进行脱色，再以80％的乙醇洗脱黄芪皂甙，洗脱液浓缩到小体积，离心得到沉淀，即高纯度的黄芪甲苷；向母液中加入乙醇至乙醇浓度为75％，离心，分得上清液，浓缩干燥后的沉淀，与黄芪甲苷混合后，得到黄芪总皂苷。

④将上述龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷以4：2：1的比例混合均匀，即得本发明所述中药有效部位组合物(3)。

实施例2 注射剂的制备

(1)龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷的中药有效部位组合物的制备方法同实施例1。

(2)水针剂的制备：称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物10g，用注射用水溶解，调PH值至7，过滤，灭菌，检验，包装，得水针剂1000支。

(3)输液剂的制备：称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物10g，用适量注射用水溶解后，以0.1mol/l的盐酸调节PH值至6～7，搅拌30分钟，加入一定活性炭，继续搅拌半个小时，过滤，过0.22μm滤膜后，加入适量注射用水，搅拌灌装，即得输液剂。

(4)冻干粉针剂的制备：称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物10g，加1000ml注射用水，80℃～90℃保温搅拌，完全溶解后，加入100g的甘露醇，搅拌使溶解；调节pH值至6～7，无菌精滤，定量分装于管制玻璃瓶中，冷冻干燥，即得。

实施例3 固体制剂的制备

(1)龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷的中药有效部位组合物的制备方法同实施例1。

(2)片剂的制备：称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物10g，药用辅料淀粉、硬脂酸镁100g。混合均匀，粉碎，过筛，制粒，干燥，压片，检验，包装，得片剂10000片。

(3)胶囊剂的制备：称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物100g，药用淀粉1000g，混合均匀，装入2号胶囊，每粒含药物组合物100mg。

(4)散剂的制备：称取龙葵总生物碱、人参总皂苷与黄芪总皂苷组合物1000g，淀粉1000g，混合均匀，分装，使每袋含药物组合物100mg即得。

Claims (7)

1、一种具有治疗恶性肿瘤、提高机体免疫功能、使用安全的中药有效部位组合物，其特征在于是由下述重量份的组分组成的：

龙葵总生物碱2～4重量份

人参总皂苷1～3重量份

黄芪总皂苷1～2重量份。

2、根据权利要求1所述的中药有效部位组合物，其中各组分的重量份分别是：

龙葵总生物碱3重量份

人参总皂苷2重量份

黄芪总皂苷1重量份。

3、根据权利要求1所述的中药有效部位组合物，其中龙葵总生物碱的其制备方法如下：

取龙葵全草与/或果实，加入50％～90％乙醇溶液提取2～3次，每次6～8倍量，回收乙醇，浓缩至相对密度1.25，浓缩液中加入2～4倍量的0.1mol/l酸性溶液，充分搅拌，冷藏，过滤，滤渣用盐酸溶液洗涤1～3次，合并滤液和洗涤液，以弱极性或中等极性树脂吸附。树脂吸附后先用水冲洗树脂柱/床至流出液近中性；再以0.1mol/l碱性溶液冲洗树脂柱/床至流出液近无色，再以含醇量10％～40％乙醇液冲洗树脂柱/床至流出液近无色。弃去。再以50～90％乙醇进行洗脱，至洗脱液显无色，收集洗脱液，回收乙醇至无醇味，以0.5～1.5mol/l的碱性溶液调PH值至8～10，静置，冷藏，收集沉淀。自然晾干，即得龙葵总生物碱。

以上所述的碱性溶液选自氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、氢氧化镁和氨水溶液；所述的酸性溶液选自醋酸、盐酸、硫酸和柠檬酸溶液；所述的洗脱用有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、氯仿、苯的一项或者两项或者三项以任意比例形成的混合相。

4、根据权利要求1所述的中药有效部位组合物，其中人参总皂苷的制备方法如下：

将人参粉碎成粗粉，在12～24倍重量的沸水中煎煮2～3次，每次1～2小时。合并各次提取液，浓缩至50℃～90℃相对密度为1.00～1.20。浓缩液加入乙醇，使溶液中乙醇含量达到65％～75％，滤过。将滤液减压回收乙醇，并调节溶液的PH值至7～15放置，滤过，将滤液通过大孔吸附树脂柱，用10％～30％乙醇洗脱树脂柱，弃去洗脱液，用50％～90％浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过大孔阳离子交换树脂及大孔阴离子交换树脂，流出液减压回收乙醇，浓缩干燥，得干粉。将干粉用20％～90％乙醇溶液溶解，配制成5％总皂苷溶液，加1％的药用活性炭，加热回流30min～2h，趁热过滤，再精滤，滤液减压回收乙醇，浓缩并干燥至干粉，得人参总皂苷。

5、根据权利要求1所述的中药有效部位组合物，其特征在黄芪总皂苷的制备方法如下：

以中药材黄芪为原料，包括提取、脱糖、脱色、纯化等步骤。其特征是将黄芪粉碎，在常压提取装置中，用水热回流提取2次以上；合并部分提取液，过滤，清液加入大孔吸附树脂柱上，以10倍以上体积的去离子蒸馏水洗脱糖类部分，再以5倍以上体积的0.05％～0.5％的氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化钙水溶液进行洗脱，继以5倍以上体积的20％～50的乙醇洗脱进行脱色，再以70％～90％的乙醇洗脱黄芪皂甙，洗脱液浓缩到小体积，离心得到沉淀，即高纯度的黄芪甲苷；向母液中加入乙醇至乙醇浓度为70％～90％，离心，分得上清液，浓缩干燥后的沉淀，与黄芪甲苷混合后，得到黄芪总皂苷。

6、一种以权利要求1所述的中药有效部位组合物为有效成分的制剂，其特征在于该中药有效部位组合物和一种或几种药用赋形剂，或可与该药物组合组方的其他药物制备成口服药物制剂或非肠道药物制剂。

7、根据权利要求6所述的制剂，其特征在于所述口服药物制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、混悬剂、口服液体制剂等；所述非肠道给药剂型为注射液、输液剂、冻干注射剂等；所述药用赋形剂为溶剂、崩解剂、矫味剂、粘合剂、着色剂、防腐剂等；所述的其它配伍用的药物，指的是以有效剂量的权利要求1所述的组合物为一定的药物原料，再配伍其它已允许合用的中药或化学药品。