CN101410131B - 脂质代谢改善剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及含有αs-酪蛋白作为有效成分的脂质代谢改善剂、饮食品以及饲料。而且,本发明还涉及含有该脂质代谢改善剂的体重增加抑制剂、体脂肪减少剂和血脂减少剂。
Description
技术领域
本发明涉及以乳来源的酪蛋白中、尤其是αs-酪蛋白作为有效成分,且具有脂质代谢改善效果的药物、饮食品以及饲料。更详细的是,本发明涉及促进或改善由于过量摄取饮食而累积在生物体的脂肪、尤其是皮下脂肪和内脏脂肪的代谢,具有使体脂肪率归于正常的作用的药物、饮食品以及饲料。而且,还涉及具有使血液中的胆固醇和中性脂质等血脂浓度归于正常的作用的药物、饮食品以及饲料。
本申请基于2006年6月9日申请的日本特愿2006-161076号要求优先权,其内容在本申请中引用。
背景技术
已知肥胖容易并发以脂质代谢异常为代表的高血压、糖耐量减低等多种危险因子。内脏脂肪的累积量越增加,总胆固醇和中性脂肪越增加、HDL(高密度脂蛋白)减少。而且,LDL(低密度脂蛋白)发生质的异常,通过内脏脂肪累积而从量上、质上对脂质代谢产生影响。在肥胖者中,经常可见到脂质代谢异常,尤其是血液中总胆固醇量的增加、血液中中性脂肪的增加等。
近年来,糖尿病等生活习惯病持续增加,现在已报道了用于预防这些疾病的对策。生活习惯病中,作为高血脂、高血压和糖尿病等的最大诱因,可以例举出肥胖,为了预防这些疾病,必需提倡预防·改善肥胖。而且,肥胖对于体形、美容而言不好,有时会引起厌食症或贪食症,很多情况下需要医治。
这种对肥胖的意识正在提高,2000年日本肥胖学会以“新的肥胖的判定和肥胖症的诊断标准”形式定义了所谓与健康损害相伴的“肥胖症”这一疾病。也就是说,从表示脂肪累积的状态的“肥胖”中区分出成为疾病发病的基础因而必需进行治疗的“肥胖症”,并确立了诊断方案。而且,2005年4月总结出未来发展成生活习惯病的可能性高的“代谢综合症”的诊断标准,该标准将根据腰围判断内脏脂肪的累积作为必须条件。而且,为了预防和改善肥胖而提倡运动疗法和改善饮食等。
牛奶由于含有脂肪成分,因此人们渐渐认为其是不适于减肥的食物。的确,奶原本是用于使小孩成长的食物,因此含有作为能量源的脂质也是事实。牛奶的脂质被用作例如黄油,从过量摄取黄油会发胖这样的印象来说,大多数人存在着牛奶也是容易发胖的食品这样的印象。
但是,喝奶的婴儿并不过于肥胖,更没有婴儿胖到发生生活习惯病的程度的报道。也就是说,这提示奶中可能含有可以将奶中原本含有的脂质作为能量源来有效利用的某种物质。
例如,在下述非专利文献1中,川崎等人在通过饮食指导和运动进行的为期4个月的减肥时,分成每日摄取200ml牛奶的牛奶摄取组和不特别强制摄取牛奶的对照组,来进行观察。据报道,其结果是:在为期4个月的减肥前后,在体重减少方面,对照组和牛奶摄取组几乎没有差别,但牛奶摄取组与对照组相比,躯干部的体脂肪率明显减少,并推测该效果是由牛奶中所含的钙和维生素D产生的。
而且,与之相同,在下述非专利文献2、3中,还报道了奶中的钙、奶制品所产生的减少体重的效果。
此外,就奶中的蛋白质或它们的水解产物和多肽所产生的作用效果,例如下述专利文献1中记载了以奶来源的酪蛋白被胰蛋白酶水解后的多肽作为有效成分的血脂抑制食物。在下述专利文献2中记载了用于降低胆固醇水平、脂质水平、甘油三酯水平等的β-酪蛋白A2的用途,以及含有β-酪蛋白A2的营养辅助食品。而且,在下述专利文献3中公开了含有乳矿质元素(milkmineral)混合物和K-酪蛋白片段106-169等蛋白质成分的、对体重减少的增强和/或体重增加的限制有效的营养组合物。
专利文献1:日本特开平6-211690号公报
专利文献2:日本特表2006-501299号公报
专利文献3:日本特表2006-507217号公报
非专利文献2:Journal of the American College of Nutrition,第19卷,2000年,第754-760页
非专利文献3:FASEB Journal,第14卷,2000年,第1132-1138页
发明内容
发明要解决的问题
然而,上述这些现有技术的效果并不一定充分,需要开发安全性高,具有优异的脂质代谢改善效果,且对由肥胖引起的生活习惯病症状有效的药物和饮食品或饲料。
本发明鉴于上述事实,目的在于提供安全性高、具有优异的脂质代谢改善效果,且对由肥胖引起的生活习惯病症状有效的药物。
用于解决问题的方法
本发明人等就便宜又安全且可以改善体内脂质代谢的有效成分反复进行了研究。具体而言,着眼于一直食用的天然来源的成分即乳成分,探寻具有以往所没有的优异的脂质代谢改善效果的物质,结果发现酪蛋白中的αs-酪蛋白与其它的酪蛋白成分即β-酪蛋白和κ-酪蛋白等相比,具有显著的脂质代谢改善效果,从而完成了本发明。
对于α-酪蛋白、尤其是αs-酪蛋白所产生的改善脂质代谢的效果,此前完全不了解。
也就是说,本发明涉及含有αs-酪蛋白作为有效成分的脂质代谢改善剂。
而且,本发明还涉及含有前述脂质代谢改善剂的体重增加抑制剂,体脂肪减少剂和血脂减少剂。
而且,本发明还涉及αs-酪蛋白用于制备前述脂质代谢改善剂、前述体重增加抑制剂、前述体脂肪减少剂或前述血脂减少剂的用途。
而且,本发明还涉及通过给予前述脂质代谢改善剂改善哺乳类的脂质代谢的方法。
而且,本发明还涉及通过给予前述体重增加抑制剂抑制哺乳类的体重增加的方法。
而且,本发明还涉及通过给予前述体脂肪减少剂减少哺乳类的体脂肪的方法。
而且,本发明还涉及通过给予前述血脂减少剂减少哺乳类的血脂的方法。
而且,本发明还涉及含有αs-酪蛋白作为有效成分的、用于改善脂质代谢的饮食品,和αs-酪蛋白用于制备该饮食品的用途。
前述饮食品可以是健康食品、功能性食品、特殊用途食品、营养功能食品或特定保健用食品的形态。
而且,本发明还涉及含有αs-酪蛋白作为有效成分的用于改善脂质代谢的饲料。
而且,本发明还涉及将αs-酪蛋白作为药物,在脂质代谢改善治疗、体重增加抑制治疗、体脂肪减少治疗或血脂减少治疗中使用的方法。
发明效果
根据本发明,可以获得安全性高且具有优异的脂质代谢改善效果的脂质代谢改善剂。
由本发明的脂质代谢改善剂获得的效果如下所示。
(1)本发明的脂质代谢改善剂具有促进由于过量摄取食物而累积于生物体内的皮下脂肪和内脏脂肪的代谢的作用。由此,在体重增加的抑制以及以内脏脂肪为代表的体脂肪的减少中可获得显著的效果。因此有助于预防和改善肥胖。
(2)本发明的脂质代谢改善剂具有减少由于过量摄取食物而滞留于血管内而诱发循环***疾病的、血液中的胆固醇和中性脂肪等血脂的效果。因此,有助于预防和改善心肌梗塞和脑梗塞等疾病。
(3)本发明的脂质代谢改善剂对人和动物的安全性高,可以长期持续地日常摄取而不必担心副作用。因此,适于预防和/或治疗由于肥胖而引起的高血脂症、高血压症和糖尿病等生活习惯病。
(4)由于本发明的有效成分即αs-酪蛋白可以由作为生物体材料的比较便宜的乳类等原料大量稳定地制造,因此可以便宜地提供脂质代谢改善剂。进而,还可以以饮食品或饲料形态来提供脂质代谢改善剂。因此,即使从费用负担方面出发,也可以提供易于长期连续地日常摄取的脂质代谢改善剂、和含有这种脂质代谢改善剂的饮食品或饲料。
因此,根据本发明可以获得安全性高的体重增加抑制剂。
而且,根据本发明可以获得安全性高的体脂肪减少剂。
而且,根据本发明可以获得安全性高的血脂减少剂。
附图说明
图1是表示试验例中内脏脂肪重量随时间变化的图。
图2是表示试验例中皮下脂肪重量随时间变化的图。
图3是表示试验例中综合了内脏脂肪重量和皮下脂肪重量的体脂肪重量随时问变化的图。
图4是表示试验例中体脂肪率随时间变化的图。
图5是表示试验例中αs-酪蛋白给予量和腹腔内脂肪重量在体重中所占比例之间的关系的图。
图6是表示试验例中αs-酪蛋白给予量和血脂之间的关系的图。
图7是表示试验例中αs-酪蛋白给予量和血液中游离脂肪酸浓度之间的关系的图。
具体实施方式
对本发明的优选实施方式进行详细的说明。但是,本发明不限于以下优选的实施方式,可以在本发明的范围内自由地变化。而且本说明书中的百分率只要没有特别说明就表示质量百分率。
所谓由本发明获得的脂质代谢改善效果,主要是指促进由于过量摄取食物而累积于生物体的皮下脂肪和内脏脂肪(以下合并定义为体脂肪)的代谢,使“用体内所含的脂肪组织重量除以体重获得的所谓体脂肪率”归于正常的作用。通过这种作用,具体可以获得选自体重增加抑制、体脂肪减少和血脂减少中的1种以上效果。
因此,本发明的脂质代谢改善剂适合作为体重增加抑制剂、体脂肪减少剂和/或血脂减少剂使用,可以提供含有本发明脂质代谢改善剂的体重增加抑制剂、体脂肪减少剂和血脂减少剂。而且,提供通过给予这些药物来改善哺乳类的脂质代谢的方法、抑制体重增加的方法、减少体脂肪的方法或减少血脂的方法。
前述“哺乳类”包括人和家畜动物(例如马、狗、猫、兔、牛、绵羊、山羊等)。
而且,如后述试验例中所示,本发明的效果为代谢体内累积的多余的脂质,几乎不会使必需的脂质减少。而且,也基本没有发现称之为所谓“除脂肪外的体重”即脂质之外的组织的影响。
本发明中,所谓“治疗”包括缓和(改善)症状的效果和治疗疾病的效果。由本发明获得的治疗效果优选获得缓解的效果和维持该状态的效果。根据本发明,通过日常给予或摄取有效成分αs-酪蛋白,几乎不产生副作用等,并可发挥前述脂质代谢改善效果。
本发明中使用的αs-酪蛋白可以从乳等原料中通过例如离子层析法等常规方法工业制备。例如,可以通过J.Dairy Research,第59卷,1992年,第551-556页公开的方法制备。
或者根据希望,还可以使用市售的天然物质来源的αs-酪蛋白(例如Sigma公司制等)或重组型αs-酪蛋白等。
αs-酪蛋白为来源于哺乳类的奶的αs-酪蛋白是合适的。尤其是,在给予对象是人的脂质代谢改善剂的情况下,优选来源于在传统饮食中使用的牛、羊、山羊等的乳的αs-酪蛋白。这些奶长期在人的饮食中使用,故可极高水准地确保对人的安全性。这其中优选使用牛奶来源的αs-酪蛋白。
本发明的脂质代谢改善剂、体重增加抑制剂、体脂肪减少剂和血脂减少剂的给予方法没有特殊的限定。例如可以经口给予,也可以是经肠给予等非经口给予。
由于本发明的脂质代谢改善剂中的有效成分αs-酪蛋白包含于牛奶等食品中,而被日常摄取,因此没有毒性,认为即使长期连续摄取也基本无副作用。也就是说,摄取时的安全性非常高,尤其适于经口给予或经肠给予。
本发明的脂质代谢改善剂可以是只含αs-酪蛋白的制剂,也可以是由含有其它成分的组合物制成的制剂。在任意一种情况下,均优选将其根据用途制成剂型。
而且,本发明的体重增加抑制剂、体脂肪减少剂和血脂减少剂可以是只含脂质代谢改善剂的制剂,也可以是由含有其它成分的组合物制成的制剂。
脂质代谢改善剂、体重增加抑制剂、体脂肪减少剂和血脂减少剂的剂型没有特别的限定。可以制成例如片剂、胶囊剂、锭剂(troch)、糖浆剂、颗粒剂、粉剂等、乳剂、喷雾剂等公知的经口给予的剂型。
而且还可以是栓剂、注射剂、软膏、贴剂等非经口给予的剂型。
本发明的脂质代谢改善剂的有效成分αs-酪蛋白的给予量因剂型、症状、年龄、体重等而不同,但为了有效发挥选自脂质代谢改善效果、体重增加抑制效果、体脂肪减少效果和血脂减少效果中的一种以上的效果,优选给予量为80mg/kg体重/天以上。而且,αs-酪蛋白安全性高,因此给予量的上限没有限制,但是如果给予尤其是320mg/kg体重/天左右的量,则可充分享受本发明产生的脂质代谢改善效果。而且,由于即使给予这之上的量,对脂肪代谢改善效果也几乎不发生变化,因此给予量的上限优选在320mg/kg体重/天以下。
本发明的脂质代谢改善剂、体重增加抑制剂、体脂肪减少剂和血脂减少剂优选制成αs-酪蛋白的给予量在上述范围内的制剂,而且优选给予αs-酪蛋白的1天给予量在上述范围内。
制剂时可以适当使用例如药学上允许的赋形剂等任意的添加剂,通过公知的方法对αs-酪蛋白制剂。在制剂时,可以使用赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、矫味矫臭剂、稀释剂、注射用溶剂等添加剂。
脂质代谢改善剂由含有αs-酪蛋白、和添加剂等其它成分的组合物构成时,该组合物中αs-酪蛋白的含量没有特别的限定,通常为0.1~90质量%,优选0.5~40质量%,更优选1~20质量%。体重增加抑制剂、体脂肪减少剂或血脂减少剂由含有脂质代谢改善剂、和其它成分的组合物构成时,该组合物中脂质代谢改善剂的含量没有特别限定,通常为0.1~90质量%,优选0.5~40质量%,更优选1~20质量%。
赋形剂可以列举例如乳糖、白糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇等糖衍生物;玉米淀粉、马铃薯淀粉、α-淀粉、糊精、羧甲基淀粉等淀粉衍生物;晶态纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙等纤维素衍生物;***胶;葡聚糖;支链淀粉;轻质二氧化硅、合成硅酸铝、硅酸镁铝(Magnesium metasilicate aluminate)等硅酸盐衍生物;磷酸钙等磷酸盐衍生物;碳酸钙等碳酸盐衍生物;硫酸钙等硫酸盐衍生物等。
粘合剂除上述赋形剂以外可列举例如明胶;聚乙烯吡咯烷酮;聚乙二醇(macrogol)等。
崩解剂除上述赋形剂之外,可列举例如交联羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮等被化学修饰的淀粉或纤维素衍生物等。
润滑剂可列举例如滑石;硬脂酸;硬脂酸钙、硬脂酸镁等硬脂酸金属盐;胶态二氧化硅;镁铝硅酸盐(VEEGUM,注册商标)、鲸蜡等蜡类;硼酸;甘油;富马酸、己二酸等羧酸类;安息香酸钠等羧酸钠盐;硫酸钠等硫酸类盐;亮氨酸;月桂基硫酸钠、月桂基硫酸镁等月桂基硫酸盐;硅酸酐、硅酸水合物等硅酸类;淀粉衍生物等。
稳定剂可列举例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯等对氧代安息香酸酯类;氯代丁醇、苯甲醇、苯乙醇等醇类;苯扎氯铵;乙酸酐;山梨酸等。
矫味矫臭剂可列举例如甜味剂、酸味剂、香料等。
注射剂用溶剂可列举例如水、乙醇、甘油等。
本发明的脂质代谢改善剂,除了作为前述医药品的用途之外,还可以将其配合到饮食品或饲料中再经口给予。
含有本发明的脂质代谢改善剂的饮食品是含有αs-酪蛋白作为有效成分且具有脂质代谢改善效果的饮食品。该饮食品的用途可以是利用脂质代谢改善效果的各种用途。特别合适的用途是选自体重增加抑制、体脂肪减少和血脂减少中的1种或2种以上用途。
这种饮食品可如下制造:在αs-酪蛋白中适当配合例如糊精、淀粉等糖类;明胶、大豆蛋白、玉米蛋白质等蛋白质;丙氨酸、谷氨酸、异亮氨酸等氨基酸类;纤维素、***胶等多糖类;大豆类、中链脂肪酸三甘油酯等油脂类等进行制备。
饮食品的形态优选为可日常摄取的形态。可列举例如清凉饮料、碳酸饮料、营养饮料、果汁饮料、乳酸饮料等饮料(包括这些饮料的浓缩原液和调制用粉末);冰淇淋、冰冻果子露、刨冰等冰点;乔麦面条、面条、粉丝、饺子皮、烧麦皮、中国面条(chinese noodles)、方便面等面类;饴糖、口香糖、糖果、透明果味糖、巧克力、片型点心、小点心、饼干、果冻、黄油、奶油、烘培食品等点心类;鱼糕、火腿、香肠等水产·畜产加工食品;加工乳、发酵乳等乳制品;色拉油、油炸用油、人造奶油、蛋黄酱、起酥油、搅打奶油、调味品等油脂和油脂加工食品;调味汁、辣酱油等调味品;汤、炖菜、沙拉、家常菜、泡菜、面包;经肠营养食品、功能性食品等。
这其中,优选可以在体重增加抑制、体脂肪减少和血脂减低中的1种或2种以上的用途中使用的、具有脂质代谢改善效果的功能性食品。
含有本发明的脂质代谢改善剂的饲料是含有αs-酪蛋白作为有效成分,且具有脂质代谢改善效果的饲料。该饲料的用途可以是利用脂质代谢改善效果的各种用途。特别合适的用途是选自体重增加抑制、体脂肪减少和血脂减少中的1种或2种以上的用途。
该饲料可以如下制造:例如在αs-酪蛋白中配合玉米、小麦、大麦、黑麦、西非高粱(milo)等谷物类;大豆油粕、菜籽油粕、亚麻油粕等植物性油粕类;麸子、麦糠、米糠、脱脂米糠等糠类;玉米面筋粉、玉米胚芽粉等加工粕类;鱼粉、脱脂奶粉、乳清、黄色油脂、牛油等动物性饲料类;产朊假丝酵母(Candida utilis)、啤酒酵母等酵母类;磷酸钙、碳酸钙等矿物质饲料;油脂类;氨基酸单质;糖类等来制造。
饲料的形态优选是可日常饲喂的形态。具体例子可以列举宠物食品、家畜饲料、养鱼饲料等。
本发明的脂质代谢改善剂可以单独使用,也可以同时使用其它有脂质代谢改善效果的药物组合物、饮食品或饲料。通过同时使用,可以进一步提高体重增加抑制、体脂肪减少、血脂减少等效果。被同时使用的药剂组合物、饮食品或饲料,既可以作为本发明的这种药剂组合物、饮食品或饲料中的有效成分被包含,也可以是不包含在本发明的药剂组合物、饮食品或饲料中,而作为单独的药剂、饮食品等进行组合而商品化。
本发明的饮食品,优选为标示出用于改善脂质代谢的用途的饮食品等,优选以例如“标示为脂质代谢改善用的、具有脂质代谢改善效果的饮食品”或“标示为脂质代谢改善用的、含有αs-酪蛋白的饮食品”或“标示为体脂肪累积预防用的、含有αs-酪蛋白的饮食品”等形式进行售卖。
而且,用于进行以上标示所使用的文字不仅限于例如“脂质代谢改善用”或“体脂肪累积预防用”这样的文字,也可以是这之外的文字,只要是标示出了脂质代谢改善效果的文字,当然也包含于本发明的范围中。作为这种文字,也可以是例如基于可使需求者了解脂质代谢改善效果和/或改善效果的各种用途的标示。
而且,同样,可以以标示出选自体重增加抑制、体脂肪减少和血脂减少中的1种以上用途的饮食品等形式进行售卖。
而且,同样,作为预防和/或改善肥胖引起的高血脂症、高血压症和糖尿病等生活习惯病用时,还可以以标示出用于预防和/或改善生活习惯病的用途的饮食品等形式进行售卖。
前述“标示”的行为(标示行为)包括用于使需要者了解上述用途的所有行为,只要是能使需要者想起、类推出上述用途的标示,不论标示的目的、标示的内容、标示的对象物·介质等为何种,均符合本发明的“标示”。但是,优选需求者通过可以直接识别上述用途的表达来标示。具体而言,标示行为可以列举在饮食品相关的商品或商品的包装上记载上述用途的行为,进一步可列举出在商品或商品包装上记载上述用途的行为;对在商品或商品的包装上记载了上述用途的物品进行转让、交货、为了转让或交货而进行展示、进口的行为;在与商品有关的广告、价格表或交易文件中记载上述用途而展示或发布、或在以这些为内容的信息中记载上述用途而通过电、磁方法(互联网等)进行提供的行为;等。
标示的内容(标示内容)优选为被行政等认可的标示(例如,基于行政规定的各种制度而受认可、并以基于该被认可的形态进行的标示),特别优选在包装、容器、商品目录、宣传手册、POP等的销售现场的宣传材料、其他文件等带有上述的标示内容。
另外,可以例示出例如健康食品、功能性食品、经肠营养食品(enteral food)、特别用途食品、保健功能食品、特定保健用食品、营养功能食品、医药外用品等形式的标示,此外,可以例示被厚生劳动省认可的标示例如特定保健用食品制度、被与其类似的制度认可的标示。后者的例子可以例示:以特定保健用食品形式的标示、以附加条件的特定保健用食品形式的标示、对身体的结构和功能带来影响的主旨的标示、降低疾病危险性的标示等,详细而言,典型的例子可以列举健康增进法施行规则(平成15年4月30日、日本国厚生劳动省第86号令)中规定的特定保健用食品形式的标示(特别是保健用途的标示)和与此类似的标示。
在本发明中,为了评价αs-酪蛋白的脂质代谢改善效果,可以通过例如记载于Obesity Research,第10卷,2002年,第956~963页中的试验来评价,即,使用遗传学上不具有肥胖背景的正常动物,通过改变饲料中所含脂质和碳水化合物的比例获得食物诱导性肥胖模型动物,使用该模型动物进行试验来评价。也就是说,可以通过用常规方法给予食物中脂质含量高的高脂肪食物来诱导肥胖和高血脂症,评价αs-酪蛋白对该症状的效果(体重增加抑制作用、体脂肪增加抑制作用、血脂增加抑制作用)。
实施例
接着,通过列示实施例对本发明进行更详细的说明,但本发明不限于以下实施例。
[实施例1](αs-酪蛋白的制造)
首先,准备用含有4M的尿素和6.5×10-5M的二硫苏糖醇的0.02M Tris盐酸缓冲液(pH8.0)平衡的2.4L强阴离子交换体(Pharmacia Corporation制)。从该强阴离子交换体中除去缓冲液后,加入溶解于3L缓冲液的90g酪蛋白钠(森永乳业公司制),缓缓搅拌离子交换体30分钟左右后,用玻璃过滤器分离上清。由此获得了吸附有酪蛋白(α酪蛋白、K酪蛋白和β酪蛋白)的强阴离子交换体。
接着,向上述缓冲液中加入氯化钠至0.2M,将1.5L该溶液加入前述强阴离子交换体中,缓缓搅拌离子交换体30分钟左右后,用玻璃过滤器分离上清。由于该上清中含有κ和β-酪蛋白,为了防止混入到以后的馏分中,再次重复该操作。
然后,向上述缓冲液中加入氯化钠至0.3M,将1.5L该溶液加入前述强阴离子交换体中,缓缓搅拌离子交换体30分钟左右后,用玻璃过滤器回收上清。在该上清中含有αs-酪蛋白。为了提高回收率,再次重复该操作。将获得的含有αs-酪蛋白的馏分进行喷雾干燥或冷冻干燥,形成粉状,冷藏保存至使用时。通过该方法制备出35g的αs-酪蛋白(纯度99%)。
[实施例2](片状脂质代谢改善剂的制造)
在150g由实施例1的方法获得的αs-酪蛋白中添加100g乳果糖(LACTULOSE)粉末(森永乳业公司制),635g麦芽糊精(松谷化学工业公司制),85g脱脂奶粉(森永乳业公司制),1g甜叶菊甜味剂(San-Ei Gen F.F.I.,Inc.制),5g酸奶香料(San-Ei Gen F.F.I.,Inc.制),24g甘油脂肪酸酯制剂(RIKEN VITAMIN CO.,LTD.制)各自的粉末,均匀混合,使用压片机(畑铁钢所公司制),每片0.5g,以12片/分钟的压片速度,在9.8KPa的压力下将前述混合粉末连续压片,制造出1800片(约900g)含有αs-酪蛋白的片剂(脂质代谢改善剂)。每1片的αs-酪蛋白为约15质量%。
[实施例3](含有脂质代谢改善剂的经肠营养食品粉末的制备)
在槽内制备如下的水相:将10kg乳清蛋白水解产物(森永乳业公司制)、36kg糊精(昭和产业社制)和少量的水溶性维生素、矿物质溶解在200kg水中的水相。此外,混合溶解3kg大豆色拉油(太阳油脂公司制)、8.5kg棕榈油(太阳油脂公司制)、2.5kg红花油(太阳油脂公司制)、0.2kg卵磷脂(味之素公司制)、0.2kg单脂肪酸甘油酯(花王公司制)、和少量脂溶性维生素,制备油相。向槽内的水相中添加油相,搅拌混合后,加温到70℃,再用均质器在14.7Mpa的压力下均质化。然后,90℃下杀菌10分钟后,浓缩,喷雾干燥,制成约59kg中间制品粉末。在50kg这种中间制品粉末中添加6.8kg蔗糖(HOKUREN公司制),167g氨基酸混合粉末(味之素公司)和由实施例1的方法获得的1kg的αs-酪蛋白,均匀混合,制造出约56kg含有αs-酪蛋白的经肠营养食品粉末。
[实施例4](具有脂质代谢改善效果的、含有αs-酪蛋白的炖制品的制备)
用7g黄油炒制切成1cm方块的1/2个洋葱,加入低筋粉2/3大匙,然后继续炒。再加入200ml水和1/3茶匙的颗粒肉汤,搅拌至溶解,加入切成1cm方块的1个马铃薯、15g烤火腿、混合豆罐头(1/3罐),炖。马铃薯***时,加入用与实施例1一样的方法制备的15g的αs-酪蛋白,煮开,加入盐,胡椒,制备出具有脂质体代谢改善效果的、含有αs-酪蛋白的炖制品。
[实施例5](具有脂质代谢改善效果的,含有αs-酪蛋白的桔子奶冻的制备)
将1个桔子去皮,切碎。并且在50ml水中添加5g粉末明胶(JELLICE Co.,Ltd.制)形成液状。其中,在锅里加入40g用与实施例1相同的方法制备的αs-酪蛋白,3大匙砂糖,100ml水,然后加热,在就要沸腾前关火,加入事先形成液状的明胶,用余热使其溶化。明胶溶化后,用冰水冷却,冷却到变稠后,加入150ml桔子汁和事先切好的桔子皮以及1大匙君度(COINTREAU),混合,转入适当的容器中,用冰箱保藏2~3小时,制备出具有脂质代谢改善效果的、含有αs-酪蛋白的桔子奶冻。
接着示出试验例。
[试验例1](效能确认试验-1)
为了确认αs-酪蛋白产生的体重增加抑制效果,在摄取高脂肪食物条件下给予各种酪蛋白溶液,观察体重变化。而且,为了比较也给予含有αs-酪蛋白,β-酪蛋白和κ-酪蛋白的酪蛋白混合物:酪蛋白钠。进而,制备含有常规量的脂肪(用碳水化合物调节其卡路里)的食物(常规脂肪食物),对摄取常规脂肪食物时的体重的下限值进行研究。
(1)饲料
按表1所示的组成制备高脂肪的饲料(高脂肪食物。以下简称为HF)。且按表2所示的组成制备常规脂肪的食物(常规脂肪食物。以下简称为NF)。
表1
表2
(2)试样的制备
对照试样:注射用蒸馏水
(3)试验动物
使用从Japan SLC Inc.,购入的雄性4周龄的ICR小鼠。
(4)试验方法
用高脂肪食物进行1周预饲养后,按体重基本一样地分成6组,每组8只,使各组自由摄取饲料和水。而且,一周中有5天1天一次用胃管按0.5ml/只的量给予试样。各组情况如下。
1组(阴性对照,以下简称为NC组):饲料NF,对照试样
2组(阳性对照,以下简称为PC组):饲料HF,对照试样
3组(αs-酪蛋白给予组,以下简称为αs组):饲料HF,αsCs试样
4组(β-酪蛋白给予组,以下简称为β组):饲料HF,βCs试样
5组(κ-酪蛋白给予组,以下简称为K组):饲料HF,κCs试样
6组(酪蛋白钠组,以下简称为CsNa组):饲料HF,CsNa试样
(5)试验结果
试验期间,每周测定1次摄食量,各组间未发现差异。8周后各组的体重平均值如表3所示。体重在组内偏差很大,但组间差异无显著性,“用高脂肪食物、给予αsCs试样的αs组”与“用高脂肪食物、给予对照试样的PC组”相比,体重的增加明显受到抑制。
而且,该αs组与“用常规脂肪食物、给予对照试样的NC组”8周后的体重几乎相同,体重并没有过度减少。由此认为,αs组累积于体内的多余的脂质的代谢受到促进,且发现几乎没有使必需的脂质减少的影响。
表3
组 | 试样 | 平均体重(g) |
1 | NC | 46.9 |
2 | PC | 51.6 |
3 | αs | 45.7 |
4 | β | 50.0 |
5 | κ | 48.9 |
6 | CsNa | 55.0 |
[试验例2](效能确认试验-2)
为了确认αs-酪蛋白产生的对内脏脂肪和皮下脂肪等体脂肪增加的抑制效果,在摄取高脂肪食物条件下给予各种酪蛋白溶液,对其变化用小动物用CT扫描仪测定内脏(腹腔内)脂肪和皮下脂肪和腹部“除脂肪外的重量”,进而测定体脂肪率。而且,还制备含有常规量脂肪的食物(常规脂肪食物),对摄取常规脂肪食物时的体内的上述重量和体脂肪率的下限值进行研究。
(1)饲料
使用与试验例1相同的饲料。
(2)试样的制备
使用与试验例1相同的试样
(3)试验动物
使用与试验例1相同的动物。
(4)试验方法
用高脂肪食物进行1周预饲养后,按体重基本一样地分成6组,每组8只,使各组自由摄取饲料和水。而且,一周中有5天1天一次用胃管按0.5ml/只的量给予试样。各组中饲料和试样的种类与试验例1相同。
而且,给予期间,在第2周~第6周期间,以两周1次的比例对于各组平均值附近的2~3只小鼠,用小动物用CT扫描仪(ALOKA CO.,LTD.制:LaTheta(注册商标))测定小鼠腹部的内脏(腹腔内)脂肪重量,皮下脂肪重量和体脂肪率。
而且,对于饲养8周后的所有小鼠,用小动物用CT扫描仪测定小鼠腹部的皮下脂肪重量,内脏脂肪重量、“除脂肪外的重量”和体脂肪率。
(5)试验结果
试验期间,每周测定1次摄食量,各组间未发现差异。8周后各组动物腹部的皮下脂肪重量、内脏(腹腔内)脂肪重量、“除脂肪外的重量”平均值如表4~表6所示。而且,8周后的体脂肪率的平均值如表7所示。
可知与“用常规脂肪食物、给予对照试样的NC组”相比,“用高脂肪食物、给予对照试样的PC组”的脂肪组织的重量明显多,与之相反,“除脂肪外的重量”减少。发现NC组和PC组的内脏脂肪和皮下脂肪差异均有显著性,可知试验例1中观察到的PC组体重增加的原因是由于体内的脂肪重量的增加。
该结果还反映在体脂肪率上,如表7所示,可知PC组比NC组体脂肪率显著高。
另一方面,“用高脂肪食物、给予αsCs试样的αs组”虽然摄取高脂肪食物,但与PC组相比,内脏脂肪重量和皮下脂肪重量的增加均受到显著抑制。而且,体脂肪率也同样显著降低。
但是,αs组中体脂肪的累积抑制的程度与NC组基本相同,脂肪组织并没有由于摄取αsCs试样而极端地减少或消失。另一方面,αs组的“除脂肪外的重量”的减少没有像PC组那样显著,我们认为αsCs试样的给予所产生的体重增加抑制效果基本来自于脂肪组织的重量增加受抑制。而且,还发现可维持脂肪组织以外的组织(“除脂肪外的重量”)在正常水平的效果。
而且,在给予αsCs之外的酪蛋白的β组,K组和CsNa组中,8周后的内脏脂肪重量和皮下脂肪重量与PC组几乎相同,看不到脂肪组织重量的增加抑制效果。
表4
组 | 试样 | 平均皮下脂肪重量(g) |
1 | NC | 1.114* |
2 | PC | 3.165 |
3 | αs | 1.158* |
4 | β | 2.420 |
5 | κ | 2.142 |
6 | CsNa | 3.069 |
*P<0.05,与PC差异具有显著性
表5
组 | 试样 | 平均腹腔内脂肪重量(g) |
1 | NC | 2.103* |
2 | PC | 5.240 |
3 | αs | 2.818* |
4 | β | 5.737 |
5 | κ | 5.205 |
6 | CsNa | 6.044 |
*P<0.05,与PC差异具有显著性
表6
组 | 试样 | 平均腹部“除脂肪外的重量”(g) |
1 | NC | 20.168 |
2 | PC | 18.491 |
3 | αs | 19.156 |
4 | β | 17.887 |
5 | κ | 17.854 |
6 | CsNa | 19.505 |
表7
组 | 试样 | 平均体脂肪率(%) |
1 | NC | 13.6* |
2 | PC | 27.8 |
3 | αs | 16.5* |
4 | β | 30.9 |
5 | κ | 28.5 |
6 | CsNa | 30.8 |
*P<0.05,与PC差异具有显著性
图1是表示内脏脂肪重量随着时问而变化的图。NC组从第2周已观察不到PC组那样的重量增加(NC组:1.6g,PC组:2.1g),αs组到第2周为止与PC组和αs酪蛋白之外的酪蛋白组一样重量增加(αs组:2.5g,β组:2.1g,K组:2.7g,CsNa组:2.5g)。此后,可知αs组重量随着时间而减少,第6周时重量变得比NC组还少(NC组:1.7g,αs组:0.9g),在第8周时,再次恢复到与NC组同等的重量(NC组:2.1g,αs组:2.9g)。
图2是表示皮下脂肪重量随着时间而变化的图。αs组在第2~4周皮下脂肪重量的增加与PC组一样大幅增加(PC组:1.6g,αs组:2.0g),但此后,增加的倾向变缓,到第8周时急剧减少(PC组:2.8g,αs组:1.2g)。
图3是表示综合了内脏脂肪重量和皮下脂肪重量的体脂肪重量随时间变化的图。αs组到第2周为止,与PC组和其它酪蛋白组同样观察到了体脂肪重量增加的倾向(PC组:3.3g,αs组:4.2g,β组:3.1g,κ组:4.1g,CsNa组:4.9g),此后,增加的曲线变缓后,转变为减少,在第6周时下降到与NC组相同的水平后(第6周,NC组:2.6g,αs组:3.0g),观察到了再次增加到与NC组相同程度的倾向(第8周,NC组:3.2g,αs组:4.1g)。
如图3所示,在第6周后,发现NC组和αs组体重缓慢增加,认为这是年龄增长带来的自然现象。而且,如图4表示的体脂肪率随时间变化的图所示那样,可知,若换算成体脂肪率,并没有激剧上升。但是,可知PC组、β组、K组和CsNa组体脂肪率在第2周至第8周显著增加。
[试验例3](效能确认试验-3)
对于前述试验例2中确认的体内的脂肪累积抑制效果,解剖饲育8周后的动物,测定内脏(腹腔内)脂肪的各部位的重量。
(1)饲料
使用与试验例1相同的饲料。
(2)试样的制备
使用与试验例1相同的试样
(3)试验动物
使用与试验例1相同的动物。
(4)试验方法
用高脂肪食物进行1周预饲养后,按体重基本一样地分成6组,每组8只,使各组自由摄取饲料和水。而且,一周中有5天1天一次用胃管按0.5ml/只的量给予试样。各组中饲料和试样的种类与试验例1相同。
而且,在第8周后解剖所有个体,从附睾、肠系膜和腹膜后腔这3个部位摘出内脏脂肪,求出各处的重量。
(5)试验结果
本试验的结果示于表8。其结果是,将小鼠的内脏脂肪分3个部位来观察重量时,NC组与PC组相比,所有的部位的重量减少均具有显著性。
而且,αs组的附睾和肠系膜这两个部位,重量减少具有显著性,尤其是,αs组的肠系膜脂肪重量与NC组大致相等。而且,尽管没有发现显著性差异,但发现腹膜后腔脂肪有明显减少的倾向。在给予其它酪蛋白的组(β组、K组和CsNa组)中,与PC组相比,没有发现显著性差异。
而且,试验期间,每周测定1次摄食量,各组间未发现差异。
表8
组 | 试样 | 平均附睾脂肪重量(g) | 平均肠系膜脂肪重量(g) | 平均腹膜后腔脂肪重量(g) |
1 | NC | 1.131* | 0.495* | 0.337* |
2 | PC | 3.075 | 0.968 | 0.714 |
3 | αs | 1.614** | 0.529** | 0.450 |
4 | β | 3.280 | 0.963 | 0.796 |
5 | κ | 2.861 | 0.871 | 0.758 |
6 | CsNa | 3.253 | 1.078 | 0.811 |
*P<0.01,与PC差异具有显著性
**P<0.05,与PC差异具有显著性
[试验例4](效能确认试验-4)
为了研究αs-酪蛋白产生的血脂减少效果,在摄取高脂肪食物条件下,测定给予了各种酪蛋白溶液后的血脂。再制造含有常规量脂肪的食物(常规脂肪食物),对摄取常规脂肪食物时的血脂值进行了研究。
(1)饲料
使用与试验例1相同的饲料。
(2)试样的制备
使用与试验例1相同的试样
(3)试验动物
使用与试验例1相同的动物。
(4)试验方法
用高脂肪食物进行1周预饲养后,按体重基本一样地分成6组,每组8只,使各组自由摄取饲料和水。而且,一周中有5天1天一次用胃管按0.5ml/只的量给予试样。各组中饲料和试样的种类与试验例1相同。
各组均在8周后解剖,进行采全血,用自动生化分析仪(ARKRAY,Inc:SPOTCHEM)分析血清脂质,测定总胆固醇(T-Cho,单位:mg/dL)和中性脂肪(TG,单位:mg/dL)。
(5)试验结果
本试验的结果示于表9。其结果是,NC组和PC组在T-Cho上差异具有显著性,除此之外没有观察到各组间有差异。αs组在T-Cho和TG上均显示低值,确认αs-酪蛋白的给予对血中的脂质有降低效果。而且,试验期间,每周测定1次摄食量,各组问未发现差异。
表9
组 | 试样 | T-Cho | TG |
1 | NC | 118.0* | 127.0 |
2 | PC | 179.6 | 97.8 |
3 | αs | 150.4 | 85.1 |
4 | β | 169.3 | 122.7 |
5 | κ | 166.7 | 220.3 |
6 | CsNa | 175.0 | 165.3 |
*P<0.05,与PC差异具有显著性
[试验例5](用量依赖性试验-1)
对于αs-酪蛋白产生的体内的脂肪代谢改善效果,为了研究其有效给予量,对高脂肪食物饲育下的动物,给予通过改变浓度而制备的αs-酪蛋白溶液,测定相对于体重的内脏脂肪重量。
(1)饲料
使用与试验例1相同的饲料。
(2)试样的制备
对照:注射用蒸馏水
(3)试验动物
使用与试验例1相同的动物。
(4)试验方法
用高脂肪食物进行1周预饲养后,按体重基本一样地分成6组,每组8只,使各组自由摄取饲料和水。而且,一周中有5天1天一次用胃管按0.5ml/只的量给予试样。在试验期结束后测定各组体重,然后解剖,测定腹腔内脂肪重量。测试期为分组后12周。各组情况如下。
1组:给予对照(对照组)
2组:给予0.5mg/ml αs-酪蛋白(α-0.5组)
3组:给予5mg/ml αs-酪蛋白(α-5组)
4组:给予20mg/ml αs-酪蛋白(α-20组)
(5)试验结果
本试验的结果示于图5。其结果是,12周后的各组的腹腔内脂肪重量在体重中所占比例中,对照组为10.8%,而通过给予αs-酪蛋白,腹腔内脂肪重量在体重中所占比例减少且该减少依赖于浓度,α-0.5达到10.2%,α-5达到9.1%,α-20达到8.8%。而且,该试验期间,每周测定1次摄食量,各组间未发现差异。
根据该结果,可知通过给予蛋白质浓度在5mg/ml以上的αs-酪蛋白溶液,可获得腹腔内脂肪重量在体重中所占比例明显减少这一良好的结果。而且,其中的蛋白质浓度为5mg/ml的αs-酪蛋白溶液给予量,若换算则相当于80mg/kg体重/天。
[试验例6](用量依赖性试验-2)
对高脂肪食物饲养下的动物给予改变了浓度而制备的αs-酪蛋白溶液,测定血液中所含脂质的量。
(1)饲料
使用与试验例1相同的饲料。
(2)试样的制备
使用与试验例5相同的试样
(3)试验动物
使用与试验例1相同的动物。
(4)试验方法
用高脂肪食物进行1周预饲养后,按体重基本一样地分成6组,每组8只,使各组自由摄取饲料和水。而且,一周中有5天1天一次用胃管按0.5ml/只的量给予试样。各组在试验期(12周)结束后,解剖,进行心脏采血。用装入了促凝分离剂的血清分离管(COSMO BIO co.,ltd.制)分离所采血液的血清。用自动生化分析仪(ARKRAY,Inc:SPOTCHEM(注册商标))分析血液中的T-Cho和TG。而且,对血清中的游离脂肪酸,用NEFA-CTest Wako(和光纯药社制)测定。各组情况如下。
1组:给予对照(对照组)
2组:给予0.5mg/ml αs-酪蛋白(α-0.5组)
3组:给予5mg/ml αs-酪蛋白(α-5组)
4组:给予20mg/ml αs-酪蛋白(α-20组)
(5)试验结果
T-Cho和TG的测定结果示于图6。其结果是,对照组中T-Cho:211.8mg/dL,TG:195.1mg/dL,与之相对,在给予了αs-酪蛋白的组中,T-Cho和TG均减少且减少均依赖于浓度,在α-0.5中T-Cho:211.6mg/dL,TG:158.9mg/dL,在α-5中T-Cho:196.3mg/dL,TG:174.4mg/dL,在α-20中,T-Cho:166.1mg/dL,TG:149.9mg/dL。
根据该结果,可知通过给予蛋白质浓度在5mg/ml以上的αs-酪蛋白溶液,可获得T-Cho和TG明显比对照组减少这一良好的结果。而且,试验期间每周测定1次摄食量,各组间未发现差异。
此外,血液中的游离脂肪酸浓度的测定结果示于图7。其结果是对照组为1.61mEq/l,与之相对,α-0.5:0.999mEq/l,α-5:1.305mEq/l,在α-20:1.312mEq/l,给予αs-酪蛋白的组与对照组相比,血液中的游离脂肪酸浓度均显著降低。
工业上利用的可能性
根据本发明,可以得到对人和动物安全性高,且通过日常给予或摄取可以使由于肥胖等引起的高血脂症,高血压症和糖尿病等生活习惯病症状缓和(缓解与维持)的脂质代谢改善剂。而且,本发明中的有效成分αs-酪蛋白可以由乳等原料大量制备,因此可以便宜地提供脂质代谢改善剂和含有这种改善剂的饮食品、饲料。
Claims (11)
1.仅使用αs-酪蛋白来制备脂质代谢改善剂的用途。
2.仅使用αs-酪蛋白来制备体重增加抑制剂的用途。
3.仅使用αs-酪蛋白来制备体脂肪减少剂的用途。
4.仅使用αs-酪蛋白来制备血脂减少剂的用途。
5.仅使用αs-酪蛋白来制备用于改善脂质代谢的饮食品的用途。
6.根据权利要求5所述的用途,所述饮食品是健康食品、功能性食品、特殊用途食品、营养功能食品或特定保健用食品的形态。
7.仅由αs-酪蛋白来制备用于改善脂质代谢的饲料的用途。
8.仅αs-酪蛋白本身在制备用于脂质代谢改善治疗中的药物中的应用。
9.仅αs-酪蛋白本身在制备用于体重增加抑制治疗中的药物中的应用。
10.仅αs-酪蛋白本身在制备用于体脂肪减少治疗中的药物中的应用。
11.仅αs-酪蛋白本身在制备用于血脂减少治疗中的药物中的应用。
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