CN101390919A

CN101390919A - 葶苈子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用

Info

Publication number: CN101390919A
Application number: CNA2008102260629A
Authority: CN
Inventors: 唐亚林; 谭莉; 戴玮; 刘岩
Original assignee: Institute of Chemistry CAS
Current assignee: Institute of Chemistry CAS
Priority date: 2008-11-05
Filing date: 2008-11-05
Publication date: 2009-03-25

Abstract

本发明公开了一种葶苈子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。该提取物是用水和/或有机溶剂作为提取剂，从葶苈子中提取得到的。葶苈子提取物能够有效抑制人肿瘤细胞的生长，如人肝癌、结肠癌或肺癌细胞。因此，葶苈子提取物对制备抗肿瘤药物，尤其是抗肝癌、肺癌、结肠癌药物具有重要的意义。

Description

葶苈子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种葶苈子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，是我国位居第二的癌症“杀手”，常见于中年男性。因其恶性度高、病情进展快，病人早期一般没有什么不适，但一旦出现症状就诊，就已经属于中晚期。故肝癌的治疗难度大，一般患者发病后生存时间仅为6个月，人称“癌中之王”。根据调查结果表明，目前男性前三位的新发癌症分别是肺癌、结肠癌和鼻咽癌，女性则是乳癌、结肠癌及肺癌，充分说明了肺癌和结肠癌在新发癌症群中的危害性。

从植物中寻找高效低毒的抗癌药物，成为国内外抗癌药物研究的重点。有效的抗癌化合物和中草药有效部位的抗癌复方制剂都具有重要的临床价值。

葶苈子为十字花科植物独行菜Lepidium apetalum Willd.(***喘，利水消肿药。

发明内容

本发明的目的是提供葶苈子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明提供的葶苈子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用；其中，该提取物是按照如下方法进行制备的：用水和/或有机溶剂作为提取剂，从葶苈子中提取得到的。

其中，所用有机溶剂具体可为甲醇、乙醇、石油醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、苯或甲苯中的任意一种或其任意比例的混合物，优选体积百分含量为95％的乙醇水溶液。各种常用的提取方法均适用于该方法，优选回流提取；提取的温度为60-100℃；提取次数至少为1次，优选2-3次，每次提取时间为1-4小时。

葶苈子提取物对肝癌、结肠癌或肺癌，尤其是肝癌，均具有较强的抑制作用。以该提取物为活性成分的抗肿瘤药物，可通过注射、喷射、滴鼻、滴眼、渗透、吸收、物理或化学介导的方法，导入机体如肌肉、皮内、皮下、静脉、粘膜组织；或是被其他物质混合或包裹后导入机体。

需要的时候，在上述药物中还可加入一种或多种药学上可接受的载体；载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。

上述预防和/或治疗抗肿瘤的药物可制成注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂等多种形式。其制备方法均可按照药学领域的常规方法制备。

上述预防和/或治疗抗肿瘤药物的用量一般为200-800mg葶苈子提取物/kg体重/天，疗程为10至15天。

葶苈子提取物能够有效抑制人肿瘤细胞的生长，如人肝癌、结肠癌或肺癌细胞。因此，葶苈子提取物对制备抗肿瘤药物，尤其是抗肝癌、肺癌、结肠癌药物具有重要的意义。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

实施例1、制备葶苈子提取物

取葶苈子(宁波德康生物制品有限公司)200g，将其以1∶3(葶苈子：95％乙醇)的重量份数比与95％乙醇(乙醇∶水＝95∶5，体积比)混合，在60℃条件下回流提取3h，抽滤，收集第一次回流提取液1和滤渣1；将得到的所有滤渣1与95％乙醇混合，95％乙醇的量与第一次相同，在60℃条件下提取3h，收集第二次回流提取液2和滤渣2，并将提取液2与提取液1合并；将得到的所有滤渣2与95％乙醇混合，95％乙醇的量与第一次相同，60℃回流提取3h，抽滤，收集第三次回流提取液3；将提取液1、提取液2和提取液3合并，将所得的提取液进行真空减压浓缩、真空干燥(去除乙醇和水)至恒重，得到0.56g葶苈子提取物。

实施例2、葶苈子提取物在抑制肿瘤细胞生长中的应用

将对数生长的肿瘤细胞(人肝癌细胞BEL-7402、人结肠癌细胞HCT-8、人肺癌细胞A-549)用0.25％的胰蛋白酶消化，然后用含10％(体积百分含量)胎牛血清的DMEM完全培养基悬浮细胞，制成细胞悬液，并分别将各肿瘤细胞稀释至1.0×10⁵个/mL，再将其接种至96孔培养板中，每孔200uL，各肿瘤细胞分别接种3个孔，于37℃，5％ CO₂的培养箱内培养24h；然后倾去各孔培养液。

将实施例1制得的葶苈子提取物溶解于DMSO中，然后用DMEM完全培养基进行稀释，得到葶苈子提取物溶液，使葶苈子提取物的终浓度为50ug/mL，使DMSO的浓度为10％(体积百分含量)。

同时设实验组、对照组进行实验：

实验组：将葶苈子提取物溶液依次分别加入上述肿瘤细胞BEL-7402、HCT-8、A-549的培养孔内，各自接种3个孔，每孔加入200ul；

对照组：向上述各肿瘤细胞的培养孔内加入含10％(体积百分含量)DMSO的DMEM完全培养基，各自接种3个孔，每孔加入200ul；

将以上各组的培养板同时置于37℃、5％ CO₂的培养箱内培养2天。

2天后向每孔加入20ul新鲜配制的5mg/ml四甲基偶氮唑盐(MTT)溶液，并在37℃、5％ CO₂的条件下继续培养4h；小心弃上清，每孔加入200uL DMSO，室温放置15-20min，每5min振荡一次；在酶标仪上测定各孔在波长490nm处的光密度值(OD值)，按公式计算肿瘤细胞生长抑制率。抑制率(％)＝1-(OD_实验)/(OD_对照)×100％。

实验设三次重复，结果取平均数。葶苈子提取物对人不同肿瘤细胞BEL-7402、HCT-8、A-549的抑制作用的结果如表1所示。

表1、葶苈子提取物对人不同肿瘤细胞的抑制作用

葶苈子提取物的对多种肿瘤细胞的抑制作用实验结果表明(表1)，葶苈子提取物在浓度为50ug/mL时对人肝癌细胞BEL-7402、结肠癌细胞HCT-8均有一定程度的抑制作用，对肺癌细胞A-549抑制作用更加明显，达到42.85％。因此，葶苈子提取物可以用于制备抗肝癌、结肠癌尤其是抗肺癌的药物。

Claims

1、葶苈子提取物在制备抗肿瘤药物中的应用；

其中，所述葶苈子提取物是按照如下方法进行制备的：用水和/或有机溶剂作为提取剂，从葶苈子中进行提取，得到所述葶苈子提取物。

2、根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述有机溶剂为甲醇、乙醇、石油醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、苯或甲苯中的任意一种或其任意比例的混合物。

3、根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述提取剂为体积百分含量为95％的乙醇水溶液。

4、根据权利要求1-3任一所述的应用，其特征在于：所述提取为回流提取。

5、根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述提取温度为60-100℃。

6、根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述提取次数至少为1次，优选2-3次；每次提取时间为1-4小时。

7、根据权利要求1-3任一所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为肝癌、结肠癌或肺癌，优选肺癌。

8、根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为肝癌、结肠癌或肺癌，优选肺癌。

9、根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为肝癌、结肠癌或肺癌，优选肺癌。

10、根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为肝癌、结肠癌或肺癌，优选肺癌。