CN101380379A - 千里香叶总黄酮及其制备方法及用途 - Google Patents
千里香叶总黄酮及其制备方法及用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101380379A CN101380379A CN 200710147357 CN200710147357A CN101380379A CN 101380379 A CN101380379 A CN 101380379A CN 200710147357 CN200710147357 CN 200710147357 CN 200710147357 A CN200710147357 A CN 200710147357A CN 101380379 A CN101380379 A CN 101380379A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- jack
- flavone
- murraya paniculata
- leaf
- leaf flavonoids
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 244000188192 Murraya paniculata Species 0.000 title claims abstract description 116
- 235000009696 Murraya paniculata Nutrition 0.000 title claims abstract description 116
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 title claims abstract description 36
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 title claims abstract description 36
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 30
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 title abstract description 23
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 title abstract description 9
- DYDFNKUHYXHWFM-UHFFFAOYSA-N 5,6,7-trimethoxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)chromen-4-one Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(C=2OC3=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C3C(=O)C=2)=C1 DYDFNKUHYXHWFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 7
- GIKVSFNAEBQLGB-UHFFFAOYSA-N 5,7-dimethoxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)chromen-4-one Chemical compound C=1C(OC)=CC(OC)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 GIKVSFNAEBQLGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- LKMNXYDUQXAUCZ-UHFFFAOYSA-N sinensetin Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC(=O)C2=C(OC)C(OC)=C(OC)C=C2O1 LKMNXYDUQXAUCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 claims description 78
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 claims description 76
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 claims description 76
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 50
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 38
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 27
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N benzo-alpha-pyrone Natural products C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 23
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 21
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 21
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 21
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 20
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 claims description 17
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 17
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 15
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N Alumina Chemical compound [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 claims description 14
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 claims description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 14
- CLXVBVLQKLQNRQ-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5,7-dimethoxychromen-4-one Chemical compound C=1C(OC)=CC(OC)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 CLXVBVLQKLQNRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 claims description 13
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 10
- FDWCURHFRQXFMX-UHFFFAOYSA-N 3,5,6,7,8-pentamethoxy-2-phenylchromen-4-one Chemical compound COC=1C(OC)=C(OC)C(OC)=C(C(C=2OC)=O)C=1OC=2C1=CC=CC=C1 FDWCURHFRQXFMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- AWXFHJXPYIPUSS-UHFFFAOYSA-N 3,5,6-trimethoxy-2-phenylchromen-4-one Chemical compound COC=1C(=O)C2=C(OC)C(OC)=CC=C2OC=1C1=CC=CC=C1 AWXFHJXPYIPUSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 9
- 150000004775 coumarins Chemical class 0.000 claims description 8
- YOZUDFLREPPXIO-UHFFFAOYSA-N 3,5,6,7-tetramethoxy-2-phenylchromen-4-one Chemical compound COC=1C(=O)C=2C(OC)=C(OC)C(OC)=CC=2OC=1C1=CC=CC=C1 YOZUDFLREPPXIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- MRIAQLRQZPPODS-UHFFFAOYSA-N nobiletin Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC(=O)C2=C(OC)C(OC)=C(OC)C(OC)=C2O1 MRIAQLRQZPPODS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 6
- 101100313763 Arabidopsis thaliana TIM22-2 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 claims description 4
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 3
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 claims description 3
- 229910001860 alkaline earth metal hydroxide Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 claims description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 claims description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- HLSQLCOADIMQBK-QYZOEREBSA-N (2r)-n-[(2s)-1-[[(2s)-1-amino-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-n'-hydroxy-2-(2-methylpropyl)butanediamide Chemical compound ONC(=O)C[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(N)=O)CC1=CC=CC=C1 HLSQLCOADIMQBK-QYZOEREBSA-N 0.000 claims 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- -1 comprises 5 Chemical class 0.000 abstract description 34
- NUJCNNARSCKFIJ-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-7-hydroxy-5-methoxychromen-4-one Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC(=O)C2=C(OC)C=C(O)C=C2O1 NUJCNNARSCKFIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 abstract description 3
- VOKKQGQOVVLTGK-UHFFFAOYSA-N [O].O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 Chemical compound [O].O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VOKKQGQOVVLTGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 79
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 72
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 66
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 45
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 25
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 23
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 12
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 11
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 11
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 11
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 11
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 10
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 229960000956 coumarin Drugs 0.000 description 9
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 8
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 description 7
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 238000005100 correlation spectroscopy Methods 0.000 description 7
- 238000002072 distortionless enhancement with polarization transfer spectrum Methods 0.000 description 7
- 238000003919 heteronuclear multiple bond coherence Methods 0.000 description 7
- 238000003929 heteronuclear multiple quantum coherence Methods 0.000 description 7
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 7
- XILIYVSXLSWUAI-UHFFFAOYSA-N 2-(diethylamino)ethyl n'-phenylcarbamimidothioate;dihydrobromide Chemical compound Br.Br.CCN(CC)CCSC(N)=NC1=CC=CC=C1 XILIYVSXLSWUAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- 241001104043 Syringa Species 0.000 description 6
- 235000004338 Syringa vulgaris Nutrition 0.000 description 6
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 6
- 238000001052 heteronuclear multiple bond coherence spectrum Methods 0.000 description 6
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 5
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 5
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 5
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 3
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 3
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 3
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 3
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 3
- ZPFXBGIJKDANBP-UHFFFAOYSA-N 3,5,7,8-tetrahydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)chromen-4-one Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C(O)=C3O2)O)=C1 ZPFXBGIJKDANBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QLVJRZMVFHRFAV-UHFFFAOYSA-N 5,7,8-trimethoxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)chromen-4-one Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(C=2OC3=C(OC)C(OC)=CC(OC)=C3C(=O)C=2)=C1 QLVJRZMVFHRFAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 206010016825 Flushing Diseases 0.000 description 2
- AFQWYRUBZJYCIF-UHFFFAOYSA-N Hibiscetin heptamethyl ether Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(OC)C=C(OC)C(OC)=C3O2)OC)=C1 AFQWYRUBZJYCIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241001529246 Platymiscium Species 0.000 description 2
- 241001093501 Rutaceae Species 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- HJYKMYKZGICPGU-UHFFFAOYSA-N 2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-5,7-dimethoxychromen-4-one Chemical compound C=1C(OC)=CC(OC)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(OC)C(O)=C1 HJYKMYKZGICPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XOMNGQLSQXRGSF-UHFFFAOYSA-N 3,5,6,7,8-pentamethoxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)chromen-4-one Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(OC)C(OC)=C(OC)C(OC)=C3O2)OC)=C1 XOMNGQLSQXRGSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IHINPAYZZAIILR-UHFFFAOYSA-N 5,7-dimethoxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)chromen-4-one 3,5,6,7,8-pentamethoxy-2-phenylchromen-4-one Chemical compound COC=1C(=C(C(=C2C(C(=C(OC12)C1=CC=CC=C1)OC)=O)OC)OC)OC.COC1=C2C(C=C(OC2=CC(=C1)OC)C1=CC(=C(C(=C1)OC)OC)OC)=O IHINPAYZZAIILR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- GNPMKQBOJBNVSR-UHFFFAOYSA-N COC=1C=C(C=2OC3=CC(=CC(=C3C(C2)=O)OC)OC)C=C(C1OC)OC.COC=1C=C(C=2OC3=CC(=CC(=C3C(C2)=O)OC)OC)C=C(C1OC)OC Chemical compound COC=1C=C(C=2OC3=CC(=CC(=C3C(C2)=O)OC)OC)C=C(C1OC)OC.COC=1C=C(C=2OC3=CC(=CC(=C3C(C2)=O)OC)OC)C=C(C1OC)OC GNPMKQBOJBNVSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000237970 Conus <genus> Species 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 1
- 206010018833 Haematocoele Diseases 0.000 description 1
- 208000005873 Hematocele Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- 240000001899 Murraya exotica Species 0.000 description 1
- 235000008766 Murraya exotica Nutrition 0.000 description 1
- WKCMAGXVHJSYDQ-UHFFFAOYSA-N Paniculatin Natural products CC(=O)OC1C(OC(=O)C)C2(C)C3CCC(c4cocc4)C3(C)CCC2C5(C)C=CC(=O)C(C)(C)C15 WKCMAGXVHJSYDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001005952 Rattus norvegicus H-2 class II histocompatibility antigen gamma chain Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001746 atrial effect Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- 239000001752 chlorophylls and chlorophyllins Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 201000004920 hematocele of tunica vaginalis testis Diseases 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000003601 intercostal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000876 intercostal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012567 medical material Substances 0.000 description 1
- 150000005217 methyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- ISNRVVKKHPECQN-BOLWDHOCSA-N paniculatin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=C(O)C([C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)=C(OC=C(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=O)C2=C1O ISNRVVKKHPECQN-BOLWDHOCSA-N 0.000 description 1
- 229940011964 pentobarbital sodium 30 mg Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明提供千里香叶总黄酮及其制备方法及用途。千里香叶总黄酮是从中药千里香的叶中提取分离的以黄酮类化合物为主要成分的有效部位，其中主要含有5，7，3′，4′－四甲氧基黄酮、5，7，3′，4′，5′－五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′－五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′，5′－六甲氧基黄酮以及7－羟基－5，3′，4′－三甲氧基黄酮。本发明的千里香叶总黄酮对急性心肌梗死具有治疗作用。
Description
技术领域
本发明属于天然药物化学研究领域。
背景技术
千里香[Murraya paniculata(L.)Jack]为芸香科九里香属植物，主要产自我国云南、贵州、湖南、广东、广西、福建、台湾等地。千里香与九里香属另外一种药用植物九里香[Murraya exotica L.]一起被中华人民共和国药典2005版一部所收载，是九里香药材的原植物之一。
到目前为止有人从千里香[Murraya paniculata(L.)Jack]叶中共分得5个黄酮类化合物，分别是3，5，6，7，8，3′，4′，5′-八甲氧基黄酮(3，5，6，7，8，3′，4′，5′-octamethoxyflavone)即月桔素(Exotiein)；3，5，7，8，3′，4′，5′-七甲氧基黄酮(3，5，7，8，3′，4′，5′-heptamethoxyflavone)即木槿黄素七甲醚(hibiscetin heptamethyl ether)；3，5，6，7，3′，4′，5′--七甲氧基黄酮(3，5，6，7，3′，4′，5′-heptamethoxyflavone)(江苏新医学院，中药大辞典，上册，上海人民出版社，1977：44-45)；5，7，8，3′，4′，5′-六甲氧基黄酮(5，7，8，3′，4′，5′-hexamethoxyflavone)即版纳九里香素(bannamurpanisin)(植物学报1984，26(2)：184-186)以及5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮(5，7，3′，4′，5′-pentamethoxyflavone)(化学学报1984，42，1308-1311)。
发明内容
本发明的目的是提供一种从千里香叶中得到的以新发现的黄酮类化合物为主要成分，具有生物活性的黄酮类化合物的混合物即千里香叶总黄酮，它是一种中药有效部位。其特征在于其中至少含有5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮、5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′，5′-六甲氧基黄酮、7-羟基-5，3′，4′-三甲氧基黄酮中的的两种或两种以上；而且其中5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮、5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′，5′-六甲氧基黄酮、7-羟基-5，3′，4′-三甲氧基黄酮的含量之和大于50％或者5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮、5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′，5′-六甲氧基黄酮的含量之和大于50％或者5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮和5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮的含量之和大于50％或者5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮的含量大于50％。本发明还提供了千里香叶总黄酮的制备方法，其特征在于提供如下步骤获得千里香叶总黄酮：(1)千里香叶水煎煮或有机溶剂回流提取，水提取液直接过大孔吸附树脂吸附，有机溶剂提取液先回收有机溶剂，加水溶解或悬浮后过大孔吸附树脂吸附(2)碱水或低浓度有机溶剂洗脱后水洗至中性(3)有机溶剂解吸(4)洗脱液浓缩，得千里香叶提取物(5)千里香叶提取物用水溶解或悬浮后过聚酰胺柱吸附，有机溶剂洗脱，洗脱液回收溶剂，获得千里香叶总黄酮(6)将千里香叶提取物或千里香叶总黄酮进行柱层析纯化获得纯度更高的九里香叶总黄酮。
其中所述的大孔吸附树脂选自AB-8、D4020、D101、D102、D103、860021、HP20的一种或一种以上混合物；所述的柱层析选自硅胶、氧化铝、ODS或聚酰胺柱层析的一种或一种以上；碱溶液选自碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物的水溶液。
本发明还提供了上述千里香叶总黄酮在制备治疗心肌缺血药物中的用途以及千里香叶总黄酮与医学上可接受的药用辅料组成的药物组合物；其剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液或注射剂。
本发明是通过如下技术方案完成的。(1)通过对千里香叶化学成分的提取分离及结构鉴定，从千里香叶中首次发现了5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮、5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′，5′-六甲氧基黄酮、7-羟基-5，3′，4′-三甲氧基黄酮以及3-羟基-5，7，4′-三甲氧基黄酮的存在(2)通过提取方法的研究，发明了以5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮、5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′，5′-六甲氧基黄酮、7-羟基-5，3′，4′-三甲氧基黄酮为主要成分的千里香叶总黄酮的制备工艺。本制备工艺可以获得上述黄酮类化合物的含量之和在50％至
氧基黄酮、5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′，5′-六甲氧基黄酮、7-羟基-5，3′，4′-三甲氧基黄酮的HPLC含量测定方法(4)通过动物实验发现了千里香叶总黄酮的医药用途(5)对以千里香叶总黄酮为活性成分的药物制剂进行了研究，具体如下。
1、千里香叶化学成分的提取分离
本发明用千里香叶购自云南，经鉴定为芸香科九里香属植物千里香[Murraya paniculata(L.)Jack]。将干燥的千里香叶2Kg粉碎后加水煎煮提取3次，加水量分别为30升，24升，20升，煎煮时间分别是2小时，1.5小时，1小时，合并三次提取液。滤液通过大孔吸附树脂柱吸附，水洗，95％的乙醇解吸，回收乙醇得到千里香叶提取物。将千里香叶提取物上Al2O3柱，用乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液，TLC检测，合并相同组分，得到A、B、C三部分。将A、B、C三部分反复进行硅胶柱层析，得到黄酮类单体化合物JA，JB，JC，JD，JE及JF六个单体化合物。
2.千里香叶化学成分的结构鉴定
2.1 化合物JA的结构鉴定
JA为白色粉末，熔点195.5-196.5℃，紫外灯下显示亮色荧光，易溶于氯仿，难溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯，不溶于水。HCl—Mg反应阳性，显示淡***。FeCl3反应呈阴性，提示可能不含酚羟基，AlCl3反应阳性，紫外灯下为黄绿色荧光。上述反应提示JA可能为黄酮类化合物。13CNMR谱中共有19个信号，由135°和90°DEPT谱可知，其中δC 55.70、55.98、56.01和56.36为甲氧基碳信号。1HNMR中δH 3.90、3.94、3.95处的单峰为甲氧基质子信号；7.46为1H、dd峰，J＝9.0Hz，1.8Hz，说明在母核的苯环上有相邻的氢，并且在这个氢的间位还有一个氢；6.58为1H、s峰，是3位质子信号；6.53、6.35各1H，均为d峰，J＝2.4Hz，说明这两个氢在苯环上处于间位。由HMBC谱可知，δH 6.35(1H，d，J＝2.4Hz)与C5、C7、C8、C10相关，应归属为H-6；δH 6.53(1H，d，J＝2.4Hz)与C6、C7、C9、C10相关，归属为H-8；δH 6.58(1H，s)与C2、C4、C10、C1′相关，归属为H-3；δH 7.26(1H，d，J＝1.8Hz)与C2、C1′、C3′、C4′、C6′相关，归属为H-2′；δH 6.92(1H，d，J＝9.0Hz)与C1′、C3′、C4′相关，归属为H-5′；δH 7.47(1H，dd，J＝9.0Hz，1.8Hz)与C2、C2′、C4′相关，归属为H-6′；δH 3.90(3H，s)与C7相关，归属为7-OCH3；而δH 3.95(3H，，s)与C3′相关，归属为3′-OCH3；δH 3.94(6H，brs)与C5和C4′相关，是4′位和5位甲氧基共同的吸收信号。ES-MS给出分子离子峰为343(M+H)，证明JA分子量为342。
根据以上分析，确定化合物JA为5，7，3′，4′，-四甲氧基黄酮(5，7，3′，4′-tetramethoxyflavone)，此化合物首次从千里香叶中分得。
化合物JA的结构式
Table 1 The 13CNMR and 1HNMR data for compound JA in CDCl3
2.2 化合物JB的结构鉴定
JB为白色粉末，熔点199-200℃，紫外灯下显示亮色荧光，易溶于氯仿，难溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯，不溶于冷水。HCl—Mg反应阳性，显示淡***。FeCl3反应阴性，提示可能不含有酚羟基。AlCl3反应阳性，紫外灯下为黄绿色荧光。上述反应提示JB能为黄酮类化合物。Molish反应阴性，显示分子中不含糖。13CNMR谱中共有17个信号，其中δC 153.43、103.27、56.28比正常碳信号约高2倍，表明分子中有化学环境完全相同的碳，即母核的B环上含有对称结构，且由135°和90°DEPT可知，δC 153.43为季碳信号，103.27为叔碳信号，56.28为甲氧基碳信号，60.95、56.36、55.76也为甲氧基信号。1HNMR中δH 3.92(3H)、3.93(3H)、3.95(6H)、3.96(3H)处的单峰均为甲氧基质子信号，7.07(s，2H)应为母核B环上非相邻对称位置上的质子信号，6.62(s，1H)为3位质子信号，6.57(1H，d，J＝2.4Hz)、6.38(1H，d，J＝2.4Hz)，为母核A环上的间位质子信号。通过HMBC谱可知，δH 7.07(2H，s，)与C2、C1′、C3′、C4′、C6′相关，归属为H-2′；δH 6.62(1H，s，)与C2、C4、C10、C1′相关，归属为H-3；δH 6.38(d，J＝2.4Hz)与C5、C7、C8、C10相关，归属为H-6；δH 6.57(1H，d，J＝2.4Hz)与C6、C7、C9、C10相关，归属为H-8；δH 3.96(3H，s)与C5相关，归属为5-OCH3；δH 3.93(3H，s)与C7相关，归属为7-OCH3；δH 3.95(6H，s)与C3′、C5′相关，归属为3′和5′-OCH3；δH 3.92(3H，s)与C4′相关，归属为4′-OCH3。ES-MS给出分子离子峰为373(M+H)，证明JB分子量为372。
根据以上分析，确定化合物JB为5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮(5，7，3′，4′，5′-pentamethoxyflavone)。
化合物JB的结构式
Table 2 The 13CNMR and 1HNMR data for compound JB in CDCl3
2.3 化合物JC的结构鉴定
JC为白色粉末，熔点200-201℃，紫外灯下显示红色荧光，易溶于氯仿，难溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯，不溶于水。HCl—Mg反应阳性，显示淡***。FeCl3反应阴性，提示可能不含有酚羟基。AlCl3反应阳性，紫外灯下为黄绿色荧光。上述反应提示JC可能为黄酮类化合物。Molish反应阴性，显示分子中不含糖。13CNMR谱中共有18个信号，与化合物JB相比较，大部分信号的化学位移值未发生显著变化，但C6由δC 96.13变为130.52，且在δC 56.49处多了1个甲氧基信号，1HNMR中较化合物JB少了间位偶合质子信号，δH 3.97(3H，s)为甲氧基质子信号，这表明化合物JC为六甲氧基黄酮，其多出的甲氧基应连接在6位碳上。通过HMBC谱可知，δH 6.45(1H，s，)与C6、C7、C9、C10相关，归属为H-8；δH 6.65(1H，s，)与C2、C4、C10、C1′相关，归属为H-3；δH 7.19(2H，s)与C2、、C1′、C3′、C4′、C6′相关，归属为H-2′和H-6′；δH 3.92(3H，s)与C4′相关，归属为4′-OCH3；δH 3.96(6H，s)与C3′、C5′相关，归属为3′和5′-OCH3；δH 3.97(3H，s)与C5相关，归属为5-OCH3；δH 4.00(3H，s)与C6相关，归属为6-OCH3；δH 4.02(3H，s)与C7相关，归属为7-OCH3。
ES-MS给出分子离子峰为403(M+H)，证明JC分子量为402。
根据以上分析，确定化合物JC为5，6，7，3′，4′，5′-六甲氧基黄酮(5，6，7，3′，4′，5′-hexamethoxyflavone)。此化合物亦为首次从千里香中分得。
化合物JC的结构式
Table 3 The 13CNMR and 1HNMR data for compound JC in CDCl3
2.4 化合物JD的结构鉴定
JD为白色粉末，熔点207-208℃，紫外灯下显示亮色荧光，易溶于氯仿，难溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯，不溶于水。HCl—Mg反应阳性，显示淡***。FeCl3反应阳性，产生墨绿色沉淀，提示可能含有酚羟基。AlCl3反应阳性，紫外灯下为黄绿色荧光。上述反应提示JD可能为黄酮类化合物。Molish反应阴性，显示分子中不含糖。13CNMR谱中共有18个信号，由135°DEPT谱可知，其中δC 55.87、56.07、56.19为甲氧基碳信号，其它各碳信号符合黄酮母核的结构。因135°DEPT谱显示有9个季碳，而只有三个甲氧基，说明在某一位置应带有一羟基。1HNMR中δH 3.805、3.837、3.876处的单峰为甲氧基质子信号；7.46为1H、dd峰，J＝9.0Hz，1.8Hz，说明在母核的苯环上有相邻的氢，并且在这个氢的间位还有一个氢；6.67为1H单峰为3位质子信号；6.37、6.57各1H，均为d峰，J＝2.4Hz，说明这两个氢在苯环上处于间位。由HMBC谱可知，δH 6.47(1H，d，J＝2.4Hz)与C5、C7、C8、C10相关，应归属为H-6；δH 6.77(1H，d，J＝2.4Hz)与C6、C7、C9、C10相关，归属为H-8；δH 6.58(1H，s)与C2、C4、C10、C1′相关，归属为H-3；δH 7.37(1H，d，J＝1.8Hz)与C2、C3′、C4′、C6′相关，归属为H-2′；δH 7.05(1H，d，J＝9.0Hz)与C1′、C3′、C4′相关，归属为H-5′；δH7.47(1H，dd，J＝9.0Hz，1.8Hz)与C2、C2′、C4′相关，归属为H-6′；δH 3.80(3H，s)归属为5-OCH3，δH 3.84(3H，s)归属为4′-OCH3，δH 3.87(3H，s)归属为7-OCH3。ES-MS给出分子离子峰为329(M+H)，证明JD分子量为328。
根据以上分析，确定化合物JD为3′-羟基-5，7，4′-三甲氧基黄酮.(3′-hydroxy-5，7，4′trimethoxyflavone)。此化合物亦为首次从千里香中分得。
化合物JD的结构式
Table 4 The 13CNMR and 1HNMR data for compound JD in DMSO
2.5 化合物JE的结构分析
JE为白色粉末，熔点235-236℃，紫外灯下显示亮色荧光，易溶于氯仿，难溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯，几乎不溶于冷水。HCl—Mg反应阳性，显示淡***。FeCl3反应阳性，产生墨绿色沉淀，提示可能含有酚羟基。AlCl3反应阳性，紫外灯下为黄绿色荧光。上述反应提示JE可能为黄酮类化合物。Molish反应阴性，显示分子中不含糖。13CNMR谱中共有18个信号，由135°DEPT谱可知，其中δC 55.99、55.93、55.82为甲氧基碳信号，其它各碳信号符合黄酮母核的结构。1HNMR中δH 3.786、3.823、3.855处的单峰为甲氧基质子信号；7.58为1H、dd峰，J＝9.0Hz，1.8Hz，说明在母核的苯环上有相邻的氢，并且在这个氢的间位还有一个氢；6.528、1H单峰为3位质子信号；6.47、6.77各1H，均为d峰，J＝2.4Hz，说明这两个氢在苯环上处于间位。由HMBC谱可知，δH 6.37(1H，d，J＝2.4Hz)与C5、C7、C8、C10相关，应归属为H-6；δH 6.57(1H，d，J＝2.4Hz)与C6、C7、C9、C10相关，归属为H-8；δH 6.67(1H，s)与C2、C4、C10、C1′相关，归属为H-3；δH 7.47(1H，d，J＝1.8Hz)与C2、C3′、C4′、C6′相关，归属为H-2′；δH 7.09(1H，d，J＝9.0Hz)与C1′、C3′、C4′相关，归属为H-5′；δH 7.58(1H，dd，J＝9.0Hz，1.8Hz)与C2、C2′、C4′相关，归属为H-6′；δH 3.79(3H，s)归属为5-OCH3，δH 3.82(3H，s)归属为4′-OCH3，δH 3.86(3H，s)归属为3′-OCH3。ES-MS亦给出分子离子峰为329(M+H)，证明JE分子量为328。
根据以上分析，确定化合物JE为7-羟基-5，3′，4′-三甲氧基黄酮。此化合物亦为首次从千里香叶中分得。
化合物JE的结构式
*13C化学位移可互换
2.6 化合物JF的结构鉴定
JF为白色粉末，紫外灯下显示亮色荧光，易溶于氯仿，难溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯，不溶于冷水。HCl—Mg反应阳性，显示淡***。FeCl3反应阴性，提示可能不含有酚羟基。AlCl3反应阳性，紫外灯下为黄绿色荧光。上述反应提示JB可能为黄酮类化合物。Molish反应阴性，显示分子中不含糖。13CNMR谱中共有17个信号，由135°和90°DEPT可知，61.47，56.53，56.25，56.03，55.90为甲氧基信号。1HNMR中δH 3.964(6H)、3.977(3H)、3.996(3H)、4.015(3H)处的单峰均为甲氧基质子信号。通过HMBC谱可知，6.444(s，1H)与C6、C7、C10相关，归属为8位质子信号；6.621(s，1H)与C2、C10、C2′相关，归属为3位质子信号，7.424(1H，d，J＝1.8Hz)与C2、C3′、C4′、C6′相关，归属为2′位质子信号，7.597(1H，dd，J＝8.4，J＝1.8Hz)与C2、C2′、C4′相关归属为6′位质子信号，7.002(1H，dd，J＝8.4)与C1′、C3′、C4′相关，归属为5′位质子信号。δH 4.015(3H，s)与C5相关，归属为5-OCH3；δH 3.996(3H，s)与C7相关，归属为7-OCH3；δH 3.964(6H，s)与C6、C4′相关，归属6和4′-OCH3；δH 3.977(3H，s)与C3′相关，归属为3′-OCH3。
根据以上分析，确定化合物JF为5，6，7，3′，4′-五甲氧基黄酮(5，6，7，3′，4′-pentamethoxyflavone)。此化合物亦为首次从千里香叶中分得。
化合物JF的结构式
化合物JA、JB、JC、JD、JE、JF的1H-NMR、13C-NMR、DEPT、1H-1H COSY、HMQC以及HMBC等光谱图如图1—36所示。
3、千里香叶总黄酮制备工艺研究
为了从千里香叶得到黄酮含量高杂质含量低的总黄酮，本发明经反复研究最终完成了如下制备工艺。千里香叶中的黄酮类化合物可以通过水煎煮或有机溶剂回流等方法进行提取。由于千里香叶中的黄酮类化合物均是低极性化合物，水煎煮提取效果不好，提取次数多达7-8次才能提取完全，因此最好是采用有机溶剂回流提取方法进行提取，具体可用氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇等回流提取。因为乙醇毒性小，价格便宜，因此最好用乙醇回流提取。研究发现千里香叶中的黄酮类化合物可以被大孔吸附树脂吸附，因此采用大孔吸附树脂吸附法进行初步纯化，将提取液中的黄酮类成分与蛋白、多糖、叶绿素等杂质分离。水提取液可以直接过大孔吸附树脂吸附，而有机溶剂提取液则回收溶剂至一定体积后加水稀释，然后过大孔吸附树脂吸附。吸附完毕后先用低浓度有机溶剂或碱溶液洗脱，目的是把被大孔吸附树脂吸附的部分杂质洗脱下来。碱水洗脱完毕后用水洗至中性，然后用有机溶剂解吸，把黄酮类成分洗脱下来，洗脱液经减压或常压浓缩，得千里香叶提取物。其中除了黄酮类成分外还含有香豆素及生物碱类成分，黄酮类成分的含量低于50％，不能直接用来研制开发中药新药。上述制备工艺中所述的大孔吸附树脂可选用AB-8、D4020、D101、D102、D103、860021、HP20的一种或一种以上混合物或具有相同或相似功能的其他厂商牌号的吸附树脂；所述的柱层析可选用硅胶、氧化铝、ODS或聚酰胺柱层析的一种或一种以上。除杂质或洗脱用有机溶剂可以使用甲醇、乙醇、丙酮、正丙醇、异丙醇、正丁醇等极性较大的有机溶剂或它们与水的混合溶液，最好是使用乙醇的水溶液。利用低浓度有机溶剂的水溶液洗脱除杂质时所谓的低浓度是以不把黄酮类化合物洗脱下来为上限，一般不高于20％。碱溶液洗脱除杂质时可以使用的碱溶液有碱金属氢氧化物、碱土金属氢氧化物的溶液或其他无机或有机碱的溶液，最好是氢氧化钠水溶液，浓度以千分之一为宜。将千里香叶提取物用水溶解或悬浮后过聚酰胺柱吸附，有机溶剂洗脱，洗脱液回收溶剂，即可以获得千里香叶总黄酮，其中除了黄酮类成分外还含有香豆素类成分但黄酮类成分的含量大于50％。将上述方法所得千里香叶提取物，加水溶解或悬浮后用有机溶剂萃取，萃取液减压浓缩，干燥，也可以获得千里香叶总黄酮，这样得到的千里香叶总黄酮，其中黄酮类成分的含量有所提高，杂质含量有所降低。用来萃取的有机溶剂可以是氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等与水不相混溶的溶剂，最好是氯仿或乙酸乙酯。最后将上述方法获得的千里香叶提取物或千里香叶总黄酮进一步进行柱层析纯化可以获得纯度更高的精制千里香叶总黄酮，经薄层色谱及高效液相色谱检测，其中主要成分是化合物JA、JB、JC、JD、JF，它们的含量之和在50％至100％之间，而且可以得到除了黄酮类成分外不含其他成分的总黄酮，其中包括只含有化合物JA、JB、JC、JD、JE、JF的千里香叶总黄酮。所述柱层析可选用硅胶、氧化铝、ODS、聚酰胺柱层析的一种或一种以上。
4、千里香叶总黄酮中黄酮类化合物的含量测定方法研究
利用分光光度法可以测定黄酮类化合物的总含量，但其结果没有HPLC法准确，故建立了HPLC含量测定方法。
(1)仪器、试剂、对照品
Agilent 1100 Series高效液相色谱仪
ZORBAX Extend—C18 4.6×250mm ODS，5μm色谱柱
VWD可变波长自外检测器
色谱甲醇、二次蒸馏水
将前述分离得到的JA、JB、JC、JD、JF单体通过重结晶或ODS纯化获得含量测定用对照品。按本方法色谱条件，归一化测得纯度均超过98％，符合相关要求。
(2)色谱条件
色谱柱用Zorbax Extend，4.6×250mm，5μm，ODS；柱温为25℃；流动相为甲醇：水＝58∶42；流速为1.2mL/min；检测波长为337nm；进样量为20μl。
(3)样品溶液的制备
取干燥的九里香茎叶粉末(过60目筛)1g，加甲醇78℃水浴回流提取3次，每次加甲醇15ml，回流时间分别是2h、1.5h、1h，合并提取液，蒸干溶剂后甲醇定容至50.00ml，过滤，取滤液2.0ml至10ml容量瓶中，定容，即得。
(4)测定方法
分别精密吸对照品液与供试品溶液各20μl，注入高效液相色谱仪，记录峰面积，利用外标一点法进行含量计算。
具体实施方式
实施例1
取千里香叶2公斤，加水煎煮提取7次，每次加水量为24升，煎煮时间为1小时，滤过，合并提取液，过AB-8大孔吸附树脂吸附，用水冲净后用50升千分之一氢氧化钠的水溶液冲洗，用水洗至中性后用85％乙醇溶液洗脱至薄层层析检测不到JA为止。洗脱液减压回收乙醇，得千里香叶提取物153克。经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为23％。将此千里香叶提取物用水加热溶解后过聚酰胺柱吸附，用水冲净后用85％乙醇洗脱，洗脱液减压回收乙醇，得千里香叶总黄酮74克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为51％，TLC表明其中还含有香豆素类成分。取此千里香叶总黄酮进行硅胶柱层析，用乙酸乙酯和乙醇的混合溶液为流动相进行梯度洗脱，TLC检测，收集黄酮部分，回收溶剂，得精制千里香叶总黄酮35克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为75％，其中JA、JB、JC的含量之和为53％，不含香豆素等其他别的成分。
实施例2
取千里香叶2公斤，85％乙醇回流提取3次，乙醇量分别为10、8、6倍，回流时间为45分钟，滤过，合并提取液，减压浓缩至无乙醇味，加水稀释，过860021大孔吸附树脂吸附，用40升10％乙醇水溶液冲洗后用甲醇洗脱至薄层层析检测不到JA为止，洗脱液减压回收甲醇，得千里香叶提取物132克。经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为28％。将此千里香叶提取物用水加热溶解后过聚酰胺柱吸附，用水冲净后用80％乙醇洗脱，洗脱液减压回收乙醇，得千里香叶总黄酮83克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为55％，TLC检测表明含有香豆素。最后取此千里香叶总黄酮进行氧化铝柱层析，用乙酸乙酯和甲醇的混合溶液为流动相进行梯度洗脱，TLC检测，收集黄酮部分，回收溶剂，得精制千里香叶总黄酮38克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为84％，其中JA、JB的含量之和为59％，不含香豆素类成分。
实施例3
取千里香叶2公斤，甲醇回流提取3次，甲醇量分别为10、8、6倍，回流时间为1小时，滤过，合并提取液，减压浓缩至干，加水加热溶解，过D4020大孔吸附树脂吸附，用水冲净后用50升千分之一氢氧化钾水溶液冲洗，用水洗至中性后用丙酮洗脱至薄层层析检测不到JA为止，洗脱液减压回收丙酮，得千里香叶提取物149克。经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为21％。将此千里香叶提取物用水加热溶解后过聚酰胺柱吸附，用水冲净后用80％甲醇洗脱，洗脱液减压回收甲醇，得千里香叶总黄酮89克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为58％，TLC检测含有香豆素类成分。最后取此千里香叶总黄酮进行聚酰胺柱层析，用氯仿和甲醇的混合溶液为流动相进行梯度洗脱，TLC检测，收集黄酮部分，回收溶剂，得精制千里香叶总黄酮41克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量为65％，另含有少量香豆素类成分。
实施例4
取千里香叶2公斤，丙酮回流提取3次，丙酮量分别为10、8、6倍，回流时间为1小时，滤过，合并提取液，减压浓缩至干，加水加热溶解，过D101大孔吸附树脂吸附，用水冲净后75％异丙醇洗脱至薄层层析检测不到JA为止，洗脱液减压回收异丙醇，得千里香叶提取物146克。经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为19％。将此千里香叶提取物用水加热溶解后过聚酰胺柱吸附，用水冲净后用80％乙醇洗脱，洗脱液减压回收乙醇，得千里香叶总黄酮68克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为54％，TLC检测含有香豆素。最后取此千里香叶总黄酮7克乙醇和水的混合溶液为流动相进行ODS柱层析，TLC检测，收集黄酮部分，回收溶剂，得精制千里香叶总黄酮2.9克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为83％，不含香豆素。
实施例5
取千里香叶2公斤，乙醇回流提取3次，乙醇量分别为10、8、6倍，回流时间为1小时，滤过，合并提取液，减压浓缩至干，加水加热溶解，过HP20大孔吸附树脂吸附，用水冲净后用50升千分之一氢氧化钙水溶液冲洗，用水洗至中性后用正丁醇洗脱至薄层层析检测不到JA为止，洗脱液减压回收正丁醇，得千里香叶提取物172克。经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量为18％。将此千里香叶提取物用水加热溶解后用氯仿萃取，氯仿层回收溶剂，得千里香叶总黄酮93克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为50.5％，TLC检测含有香豆素。最后取此千里香叶总黄酮用乙酸乙酯和乙醇的混合溶液为流动相进行硅胶柱层析，TLC检测，收集黄酮部分，回收溶剂，得精制千里香叶总黄酮39克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为85％，不含香豆素。
实施例6
取千里香叶2公斤，85％乙醇回流提取3次，乙醇量分别为10、8、6倍，回流时间为45分钟，滤过，合并提取液，减压浓缩至无乙醇味，加水稀释，过860021大孔吸附树脂吸附，用60升10％乙醇水溶液冲洗后用甲醇洗脱至薄层层析检测不到JA为止，洗脱液减压回收甲醇，得千里香叶提取物132克。经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为31％。将此千里香叶提取物用水加热溶解后过聚酰胺柱吸附，用水冲净后用80％乙醇洗脱，洗脱液减压回收乙醇，得千里香叶总黄酮83克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为58％，TLC检测表明含有香豆素。最后取此千里香叶总黄酮进行氧化铝柱层析，用乙酸乙酯和甲醇的混合溶液为流动相进行梯度洗脱，TLC检测，收集黄酮部分，回收溶剂后在进行硅胶柱层析纯化，得精制千里香叶总黄酮30克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为94％，其中JA的含量之和为51％，不含香豆素类成分。
实施例7
取千里香叶2公斤，加水煎煮提取7次，每次加水量为30升，煎煮时间为1小时，滤过，合并提取液，过AB-8大孔吸附树脂吸附，用水冲净后用70升千分之一氢氧化钠的水溶液冲洗，用水洗至中性后用85％乙醇溶液洗脱至薄层层析检测不到JA为止。洗脱液减压回收乙醇，得千里香叶提取物143克。经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为27％。将此千里香叶提取物用水加热溶解后过聚酰胺柱吸附，用水冲净后用85％乙醇洗脱，洗脱液减压回收乙醇，得千里香叶总黄酮74克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为61％，TLC表明其中还含有香豆素类成分。取此千里香叶总黄酮进行硅胶柱层析，用乙酸乙酯和乙醇的混合溶液为流动相进行梯度洗脱，TLC检测，收集黄酮部分，回收溶剂，得精制千里香叶总黄酮35克，将此精制千里香叶总黄酮用甲醇重结晶，得千里香叶总黄酮26克，经HPLC检测，其中JA、JB、JC、JD、JF的含量之和为95％，其中JA的含量之和为53％，不含香豆素等其他别的成分。
实施例8
取精制千里香叶总黄酮10克，加淀粉适量，制粒，装入胶囊，制成1000粒，得千里香叶总黄酮胶囊。
实施例9
取千里香叶总黄酮10克，加预胶化淀粉、羧甲基淀粉钠适量，制粒，压片，制成1000粒，得千里香叶总黄酮片。
实施例10
取精制千里香叶总黄酮10克，加入1000ml丙二醇和1000ml注射用水，搅拌溶解，过滤，灭菌，罐装，每支2ml，得千里香叶总黄酮注射液。
实施例11
取千里香叶总黄酮5克，加吐温80适量，加10升加热溶解，高温灭菌，分装成100瓶，得千里香叶总黄酮口服液。
实验实施例1
千里香叶总黄酮对实验性心肌缺血的保护作用研究
1 材料和方法
1.1.实验动物
Wistar大鼠，雌雄各半，体重240～260g，合格证号为：医动字第10-5112，由长春高新医学动物研究中心供给。
1.2.药品与试剂
1.千里香叶总黄酮(QLXYZHT)2.肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转换酶(AST)试剂为进口试剂。
1.3.实验方法
1.实验分组
将100只Wistar大鼠随机分为5组，每组20只，分组如下：
(1)假手术组：灌胃0.5％羧甲基纤维素钠5ml/kg.d×3d
(2)梗死模型组：灌胃0.5％羧甲基纤维素钠5ml/kg.d×3d
(3)小剂量组：灌胃千里香叶总黄酮25mg/kg.d×3d
(4)中剂量组：灌胃千里香叶总黄酮50mg/kg.d×3d
(5)大剂量组：灌胃千里香叶总黄酮100mg/kg.d×3d
2.实验方法及观测指标
于末次给药后30min将Wistar大鼠***麻醉，仰位固定于手术台上，测定大鼠II导联正常心电图后，正中剃毛，以10号线做荷包缝合，以手术刀正中切开，用止血钳剥离肋间肌肉，自左侧3～4肋间开胸，暴露心脏，在肺动脉圆锥及左心耳间找出左冠状动脉前降支，于左心耳下2～3mm处用0号线立即结扎之，将心脏送回胸腔，迅速挤出胸腔内气体，拉紧荷包缝合线结扎以关闭胸腔，整个开胸时间不超过30秒，假手术组不结扎而只置手术线。结扎冠脉24h后，以戊巴比妥钠30mg/kg腹腔静脉麻醉，每组一半动物腹主动脉插管取血，用COBAS-FARA自动生化分析仪测血清CK、AST及LDH活性。取血后剖取大鼠心脏，用生理盐水洗净心腔内积血，去掉心房组织及脂肪，称重，将左心室心肌横切4～5片，然后浸入N-BT磷酸缓冲液中，置37℃恒温水浴，待染色完全后取出，正常组织染色，缺血组织不染色。切下缺血心肌称重，用缺血心肌与左心室湿重的百分比计算心肌梗死面积(MIS)。
3.统计方法
实验数据用SPSS 10.0统计软件处理，以均数±标准差(x±s)表示，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用t检验。
2 结果
2.1.千里香叶总黄酮对急性心肌梗死大鼠MIS，血清CK、AST及LDH活性的影响
与假手术组相比，梗死模型组MIS，血清CK、AST及LDH活性均明显增加(P<0.05～P<0.001)，表明急性心肌梗死模型建成。与梗死模型组相比，千里香叶总黄酮25、50、100mg/kg组均能明显缩小MIS，降低血清CK、AST及LDH活性(P<0.05或P<0.01)，100mg/kg组对上述指标无明显影响(P>0.05)，见表1。
Tab.1 Effects of QLXYZHT on MIS and serum CK，AST and LDHactivities in acute myocardial infarct rats(x±s，n＝10)
*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001 compared with model.
实验结果表明，千里香叶总黄酮具有治疗急性心肌梗死的作用。
附图说明
附图1化合物JA的1H-NMR
附图2化合物JA的13C-NMR
附图3化合物JA的DEPT谱
附图4化合物JA的1H-1H COSY
附图5化合物JA的HMQC
附图6化合物JA的HMBC
附图7化合物JB的1H-NMR
附图8化合物JB的13C-NMR
附图9化合物JB的DEPT谱
附图10化合物JB的1H-1H COSY
附图11化合物JB的HMQC
附图12化合物JB的HMBC
附图13化合物JC的1H-NMR
附图14化合物JC的13C-NMR
附图15化合物JC的DEPT谱
附图16化合物JC的1H-1H COSY
附图17化合物JC的HMQC
附图18化合物JC的HMBC
附图19化合物JD的1H-NMR
附图20化合物JD的13C-NMR
附图21化合物JD的DEPT谱
附图22化合物JD的1H-1H COSY
附图23化合物JD的HMQC
附图24化合物JD的HMBC
附图25化合物JE的1H-NMR
附图26化合物JE的13C-NMR
附图27化合物JE的DEPT谱
附图28化合物JE的1H-1H COSY
附图29化合物JE的HMQC
附图30化合物JE的HMBC
附图31化合物JF的1H-NMR
附图32化合物JF的13C-NMR
附图33化合物JF的DEPT谱
附图34化合物JF的1H-1H COSY
附图35化合物JF的HMQC
附图36化合物JF的HMBC。
Claims (13)
1、一种千里香叶总黄酮，其特征在于其中至少含有5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮、5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′，5′-六甲氧基黄酮、7-羟基-5，3′，4′-三甲氧基黄酮中的两种或两种以上。
2、权利要求1所述的千里香叶总黄酮，其特征在于其中5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮、5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′，5′-六甲氧基黄酮、7-羟基-5，3′，4′-三甲氧基黄酮的含量之和大于50％。
3、权利要求1所述的千里香叶总黄酮，其特征在于其中5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮、5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮、5，6，7，3′，4′，5′-六甲氧基黄酮的含量之和大于50％。
4、权利要求1所述的千里香叶总黄酮，其特征在于其中5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮和5，7，3′，4′，5′-五甲氧基黄酮的含量之和大于50％。
5、权利要求1所述的千里香叶总黄酮，其特征在于其中5，7，3′，4′-四甲氧基黄酮的含量大于50％。
6、权利要求1所述的千里香叶总黄酮，其特征在于其中不含有香豆素类成分。
7、权利要求1所述的千里香叶总黄酮的制备方法，其特征在于通过如下步骤得到相应的千里香叶总黄酮：(1)千里香叶水煎煮或有机溶剂回流提取，水提取液直接过大孔吸附树脂吸附，有机溶剂提取液先回收有机溶剂，加水溶解或悬浮后过大孔吸附树脂吸附(2)碱水或低浓度有机溶剂洗脱，水洗至中性(3)有机溶剂解吸(4)洗脱液浓缩，得千里香叶提取物(5)千里香叶提取物用水溶解或悬浮后过聚酰胺柱吸附，有机溶剂洗脱，洗脱液回收溶剂，获得千里香叶总黄酮(6)将千里香叶提取物或千里香叶总黄酮进行柱层析纯化获得纯度更高的九里香叶总黄酮。
8、权利要求7所述的千里香叶总黄酮的制备方法，其特征在于所述的大孔吸附树脂选自AB-8、D4020、D101、D102、D103、860021、HP20的一种或使用它们的混合物。
9、权利要求7所述的千里香叶总黄酮的制备方法，其特征在于所述的柱层析选自硅胶、氧化铝、0DS或聚酰胺柱层析的一种或一种以上。
10、权利要求7所述的千里香叶总黄酮的制备方法，其特征在于所述的碱溶液选自碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物的水溶液。
11、权利要求1所述的千里香叶总黄酮在制备预防和治疗心肌缺血药物中的用途。
12、权利要求1所述的千里香叶总黄酮与医学上可接受的药用辅料组成的药物组合物。
13、权利要求12所述的药物组合物，其特征在于其剂型选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液或注射剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200710147357 CN101380379B (zh) | 2007-09-05 | 2007-09-05 | 千里香叶总黄酮及其制备方法及用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200710147357 CN101380379B (zh) | 2007-09-05 | 2007-09-05 | 千里香叶总黄酮及其制备方法及用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101380379A true CN101380379A (zh) | 2009-03-11 |
| CN101380379B CN101380379B (zh) | 2013-06-12 |
Family
ID=40460550
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 200710147357 Expired - Fee Related CN101380379B (zh) | 2007-09-05 | 2007-09-05 | 千里香叶总黄酮及其制备方法及用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101380379B (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101961408B (zh) * | 2009-07-24 | 2012-07-04 | 三九医药股份有限公司 | 一种千里香药材中九里香酮的含量测定方法 |
| CN102669195A (zh) * | 2012-06-07 | 2012-09-19 | 海南大学 | 一种从九里香茎叶中提取总黄酮的方法 |
| CN102697770A (zh) * | 2012-06-13 | 2012-10-03 | 长春瑞德医药科技有限公司 | 九里香叶提取物及单体化合物在制备镇静催眠药物中的应用 |
| CN102696699A (zh) * | 2012-06-07 | 2012-10-03 | 海南大学 | 一种九里香总黄酮可溶性粉剂及其制备方法 |
| CN103446294A (zh) * | 2013-09-18 | 2013-12-18 | 海南华拓天涯制药有限公司 | 一种九里香提取物的制备方法及该方法得到的九里香提取物及其应用 |
| CN111198235A (zh) * | 2020-01-13 | 2020-05-26 | 温州医科大学附属第二医院、温州医科大学附属育英儿童医院 | 一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法 |
-
2007
- 2007-09-05 CN CN 200710147357 patent/CN101380379B/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101961408B (zh) * | 2009-07-24 | 2012-07-04 | 三九医药股份有限公司 | 一种千里香药材中九里香酮的含量测定方法 |
| CN102669195A (zh) * | 2012-06-07 | 2012-09-19 | 海南大学 | 一种从九里香茎叶中提取总黄酮的方法 |
| CN102696699A (zh) * | 2012-06-07 | 2012-10-03 | 海南大学 | 一种九里香总黄酮可溶性粉剂及其制备方法 |
| CN102697770A (zh) * | 2012-06-13 | 2012-10-03 | 长春瑞德医药科技有限公司 | 九里香叶提取物及单体化合物在制备镇静催眠药物中的应用 |
| CN103446294A (zh) * | 2013-09-18 | 2013-12-18 | 海南华拓天涯制药有限公司 | 一种九里香提取物的制备方法及该方法得到的九里香提取物及其应用 |
| CN103446294B (zh) * | 2013-09-18 | 2015-06-24 | 海南华拓天涯制药有限公司 | 一种九里香提取物的制备方法及该方法得到的九里香提取物及其应用 |
| CN111198235A (zh) * | 2020-01-13 | 2020-05-26 | 温州医科大学附属第二医院、温州医科大学附属育英儿童医院 | 一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法 |
| CN111198235B (zh) * | 2020-01-13 | 2021-05-11 | 温州医科大学附属第二医院、温州医科大学附属育英儿童医院 | 一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101380379B (zh) | 2013-06-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101244129B (zh) | 拉萨大黄提取物、其制备方法及其在制备治疗心脑血管疾病制剂中的应用 | |
| CN101380379B (zh) | 千里香叶总黄酮及其制备方法及用途 | |
| CN108558837B (zh) | 黄烷醇生物碱及其制备方法和应用 | |
| CN108610387B (zh) | 一种具有神经细胞保护活性的四个异黄烷苷类化合物及其制备方法 | |
| CN104370871B (zh) | 从紫红獐牙菜中分离的口山酮类及抑制乙型肝炎病毒的应用 | |
| CN105524127B (zh) | 一种天麻素化合物及其制剂 | |
| CN108530430A (zh) | 酯型儿茶素吡咯烷生物碱及其制备方法和应用 | |
| CN108210566A (zh) | 一种柠檬苦素类提取物在制备治疗糖尿病药物中的应用 | |
| CA2502703C (en) | A natural compound for prevention and treatment of diabetes, process for preparing the same, and pharmaceutical use thereof | |
| CN111253247B (zh) | 一种具有抗炎活性的新酚酸类化合物的制备方法及应用 | |
| CN109232491A (zh) | 一种华泽兰中苯并呋喃类化合物的制备方法及用途 | |
| CN111018877B (zh) | 一种土木香中倍半萜类衍生物、其制备方法及应用 | |
| CN110028535A (zh) | 连钱草中的二萜苷类化合物及其提取分离方法 | |
| CN112851604B (zh) | 从酒茱萸提取具有降糖作用的化合物d及其制备方法与应用 | |
| CN110452110A (zh) | 一种间苯三酚类天然药物及其制备方法和用途 | |
| CN101396422B (zh) | 一种红车轴草提取物及其制备方法 | |
| CN114262294A (zh) | 一种苯基异喹啉生物碱化合物及其制备方法与应用 | |
| CN100584345C (zh) | 具抗病毒作用的小紫金牛提取物及其提取方法和应用 | |
| CN103110680A (zh) | 一种短葶飞蓬总酚酸的制备方法 | |
| CN109206392B (zh) | 一种香豆素类化合物及其制备方法与应用 | |
| CN108530505A (zh) | 一种黄酮苷类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN106928289B (zh) | 一种酰基化黄酮四糖苷及其提取方法和应用 | |
| CN115429790B (zh) | 异黄酮类化合物在制备预防或治疗酒精性肝损伤或解酒保肝的药物中的用途 | |
| CN104211678B (zh) | 噻吩类衍生物及其制备与在制备药物中的应用 | |
| CN108530504B (zh) | 一种化合物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130612 |