CN101224274A - 一种瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物及其制备方法,该药物组合物是由瓜蒌皮提取物50~90重量份,薤白提取物10~50重量份组成;其中,瓜蒌皮提取物中总氨基酸含量以精氨酸计不小于50%,薤白提取物中总皂苷含量以薯蓣皂苷计不小于50%。该组合物质量稳定,有效成分含量高,该组合物的制备方法工艺稳定,重现性好。药理实验证明该组合物对于大鼠垂体后叶素致急性心肌缺血具有较好的保护作用,对于冠脉结扎所致犬心肌缺血具有较好保护作用,本发明药物组合物在治疗心血管***疾病方面有良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于中药制药领域,具体涉及一种用于治疗心血管***疾病的瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物及其制备方法。
背景技术
冠心病属中医的“胸痹”、“心悸”等范畴,中医辨证为气滞血瘀,胸阳不振,痰浊内生,使心脉痹阻而致病。“瓜蒌薤白汤”是东汉名医张仲景《金匮要略》中胸痹心痛短气篇的首方,主治“胸痹病”,表现为胸背痛、喘息咳唾、短气、脉沉弦等症状,即现在的冠心病心绞痛。历经几千年临床实践的考验,“瓜蒌薤白汤”成为中医宣痹通阳法治疗胸痹的经典方,临床上治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞等疾病取得了良好的疗效。本方由瓜蒌、薤白两味中药组成,其中主药瓜蒌(栝楼)是中医治疗胸痹之要药,性寒、味甘,具有清热涤痰、宽胸散结之功效,主要用于痰热咳嗽,胸痹心痛。辅药薤白味辛、苦,性温,无毒,具有宽胸、通阳、散结、理气止痛之功效,中医长期用于治疗胸闷刺痛、泻痢后重、肺气喘急等疾病。瓜蒌薤白两药合用,一除痰结,一通气机,相辅相成,为治疗胸痹之要药。
瓜蒌皮为葫芦科植物栝楼Trichosanthes kirilowii Maxim.或双边栝楼Trichosanthes rosthornii Harms的干燥成熟果皮。秋季采摘成熟果实,剖开,除去果瓤及种子,阴干。瓜蒌皮性甘,寒,归肺、胃经。具有清化热痰,利气宽胸之功效,用于痰热咳嗽,胸闷胁痛。现代研究表明瓜蒌皮主要含挥发油、有机酸、生物碱、皂苷、黄酮、多糖以及精氨酸、赖氨酸、丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甘氨酸等17种氨基酸成分。具有扩张冠状动脉、增加冠脉流量、保护缺血心肌、抗心率失常、提高耐缺氧能力、抑制血小扳聚集等多种作用。其中起主要作用的是氨基酸类成分。临床开发有瓜蒌片和瓜蒌皮注射液,主要应用于扩张冠状动脉,增加血流量,改善心肌缺学微循环的作用,特别是对垂体后叶素所致的急性心肌缺血有明显得保护作用。瓜蒌皮注射液的主要成分就是氨基酸。
薤白为百合科葱属植物小根蒜Album macrostemon Bunge和薤Albumclzinese G.Don的干燥鳞茎,为常用中药。薤白性温,味辛、苦,归肺、胃、大肠经。无毒,具有理气、宽胸、通阳、散结之功效,中医长期用于治疗胸闷刺痛、泻痢后重、肺气喘急等疾病。现代研究表明薤白含有挥发油、皂苷类、含氮化合物等成分,具有抗菌消炎、解痉平喘、抗血小板聚集和耐缺氧、镇痛、抗氧化作用、降低血脂、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤等多种药理作用。临床上主要用于治疗呼吸***疾病、心血管***疾病以及肿瘤的辅助。薤白中主要有效成分是甾体皂苷类成分,药理实验表明薤白中的多种甾体皂苷均有较强的抗体外ADP诱导的血小板聚集活性,并可以延长小鼠凝血时间及抑制体内血栓的形成。
可见在心血管***疾病的治疗方面,瓜蒌薤白汤以及瓜蒌皮、薤白单味药都具有良好的作用,在临床上也有大量的应用。但是瓜蒌薤白汤还没有作为药物开发,临床都是以水煎剂使用。传统中药使用有许多不便之处:(1)传统中药多数采取水煎煮,需要专用的煎药工具,操作麻烦,工艺不稳定,而且水溶液也不利于长期保存,一般都是临用临煎,严重制约了临床的使用。(2)传统中药服用量大,以常规水煎煮方法提取以后,即使做成制剂,也需要几克甚至几十克。病人服用的顺应性差。(3)传统中药对于药材的来源仅仅进行真伪鉴别,而对其质量没有明确的控制手段,难以保障药材质量的好坏,也影响了药物的疗效。
发明内容
本发明的目的之一针对克服这些缺点提供一种疗效确切、质量稳定可控、服用量小的瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物。
本发明的另一目的是提供一种工艺稳定,重现性好的该组合物的制备方法。
本发明还有一个目的是提供该组合物在制备治疗冠心病、心绞痛、心肌缺血等心血管***疾病药物中的应用。
为达上述目的采用以下技术措施:
一种用于治疗心血管***疾病的瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物,该组合物主要由瓜蒌皮提取物与薤白提取物组成,其特征在于所述组合物中瓜蒌皮提取物50~90重量份,薤白提取物10~50重量份;优选由瓜蒌皮提取物60~80重量份,薤白提取物20~40重量份组成。上述瓜蒌皮提取物中总氨基酸含量以精氨酸计不小于50%,薤白提取物中总皂苷含量以薯蓣皂苷计不小于50%。
上述药物组合物经过常规工序直接或加入药学上可接受的辅助剂制成临床可接受的散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂或口服液。
本发明瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物的制备方法包括下列步骤:
a、瓜蒌皮药液的提取:将瓜蒌皮加水或浓度小于50%C1-3醇提取,提取液过滤浓缩,向浓缩液中加入C1-3醇,边加边搅拌,加至含醇量为50~90%,静置,滤取上清液,沉淀离心,合并上清液;或者将瓜蒌皮加50-95%C1-3醇提取,滤取上清液;
b、瓜蒌皮提取液上柱吸附及洗脱:所得上述上清液回收C1-3醇,浓缩至1ml回收液相当于0.5~2g生药,过滤,滤液上阳离子交换树脂柱,弃去流出液,用去离子水洗涤至流出液接近无色,弃去洗脱液,然后用1~10%的NH4OH作洗脱剂,洗脱至无色,洗脱液回收,浓缩至1ml回收液相当于0.5~2g生药;冷却,浓缩液0~5℃冷藏;
c、瓜蒌皮提取物的制备:所得浓缩液再过滤,浓缩,低温干燥后粉碎得到瓜蒌皮提取物;
d、薤白药液的提取:将薤白加水提取,提取液过滤,浓缩,每kg生药浓缩至2000-6000ml药液后,再滤取上清液;或者薤白加C1-3醇提取,提取液过滤,浓缩至无醇味,再滤取上清液;
e、薤白提取液上柱吸附及洗脱:将所得上清液上大孔吸附树脂柱,弃去流出液,用去离子水洗涤至流出液为淡黄色,弃去流出液,然后用5~20%的C1-3醇作洗脱剂洗脱至流出液为淡黄色,弃去流出液,再用50~80%的C1-3醇洗脱至淡黄色,收集洗脱液,洗脱液减压回收除去C1-3醇,浓缩至1ml回收液相当于0.5~2g生药,冷却;
f、薤白提取物的制备:所得浓缩液过滤,浓缩,低温干燥后粉碎得到薤白提取物;
g、按照上述的重量比例分别取瓜蒌皮提取物和薤白提取物,配制瓜蒌皮薤白提取物的组合物。
该药物组合物的制备方法具体包括下列步骤:
a、瓜蒌皮药液的提取:将瓜蒌皮加水或浓度小于50%的C1-3醇提取三次,体积倍数分别为药材质量的10倍、8倍、8倍,第一次提取3小时,第二次提取2小时,第三次提取2小时,合并三次提取液,过滤,滤液减压浓缩至每kg生药浓缩至1000~4000ml药液,趁热加入90~95%的C1-3醇,边加边搅拌,加至含醇量为50~90%,静置24小时以上,滤取上清液,沉淀离心,合并上清液;或者将瓜蒌皮加50~95%C1-3醇提取,滤取上清液;
b、瓜蒌皮提取液上柱吸附及洗脱:将上述上清液液减压回收C1-3醇,浓缩至1ml回收液相当于0.5~2g生药,过滤,滤液以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速上阳离子交换树脂柱,弃去流出液,用去离子水洗涤至流出液接近无色,弃去洗脱液,然后用1~10%的NH4OH作洗脱剂,洗脱至无色,收集洗脱液,洗脱液减压回收除去NH3,浓缩至1ml回收液相当于0.5~2g生药,冷却,浓缩液置于0~5℃冷藏24小时以上;
c、瓜蒌皮提取物的制备:浓缩液过滤,滤液浓缩至干,置真空干燥箱中低温减压干燥成块状,将干燥的块状物粉碎,得到瓜蒌皮提取物;
d、薤白药液的提取:将薤白加水提取三次,体积倍数分别为药材质量的10倍、8倍、8倍,第一次提取3小时,第二次提取2小时,第三次提取2小时,合并三次提取液,过滤,滤液减压,每kg生药浓缩至2000~6000ml药液,滤取上清液;或者用C1-3醇提取三次,体积倍数分别为药材质量的10倍、8倍、8倍,第一次提取3小时,第二次提取2小时,第三次提取2小时,合并三次提取液,过滤,浓缩至无醇味,再滤取上清液;
e、薤白提取液上柱吸附及洗脱:上清液以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速上大孔吸附树脂柱,弃去流出液,用去离子水洗涤至流出液为淡黄色,弃去流出液;然后用5~20%的C1-3醇作洗脱剂,洗脱至流出液为淡黄色,弃去流出液;再用50~80%的C1-3醇,洗脱至淡黄色,收集洗脱液,洗脱液减压回收除去C1-3醇,浓缩至1ml回收液相当于0.5~2g生药,冷却;
f、薤白提取物的制备:浓缩液过滤,滤液浓缩至干,低温减压干燥成块状,将干燥的块状物粉碎,得到薤白提取物;
g、按照上述的重量比例分别取瓜蒌皮提取物和薤白提取物,配制瓜蒌皮、薤白提取物的组合物。
上述的阳离子交换树脂可以为强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂,如001×7型强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂(别名732型),D001型大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂,Amberrlite IR-120 Dowex-50(美国),DiaonSK-1(日本);上述的大孔吸附树脂可以为D101,HPD-100(沧州宝恩化工有限公司),HPD-300(沧州宝恩化工有限公司),AB-8(蚌埠市辽源新材料有限公司)大孔吸附树脂。
上述瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物在制备治疗心血管***疾病药物中应用。
上述瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物在制备治疗冠心病、心绞痛、心肌缺血药物中应用。
本发明所述C1-3醇为甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇,优选甲醇和乙醇。
本发明所述的瓜蒌皮提取物中,主要含精氨酸、亮氨酸、谷氨酸、天冬氨酸等17种氨基酸,其中精氨酸含量最高,故以精氨酸为对照测定总氨基酸含量,测定按以下方法进行:分别取0.4mg/ml精氨酸对照品1ml和2mg/ml瓜蒌皮总氨基酸样品溶液(瓜蒌皮提取物水溶液)1ml,加入2%茚三酮溶液1ml,PH8.0磷酸盐缓冲液1ml,沸水浴中显色15min,流水冷却,加蒸馏水定容至25ml。以溶剂对照为空白,用紫外分光光度计在570nm处,测定对照品和样品的吸收值,计算含量。磷酸盐缓冲液的配制:95ml 1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液+5ml 1/15mol/L的磷酸二氢钾溶液(PH=8.0)。2%茚三酮溶液的配制:水合茚三酮20g,加水50ml,0.080g氯化亚锡搅拌溶解,于暗处静置过夜,过滤后,加水定容至100ml。(避光保存)
本发明所述的薤白提取物中总皂苷含量的测定按以下方法进行的:分别取1mg/ml的薯蓣皂苷对照品溶液200μl和1mg/ml的薤白总皂苷样品溶液(薤白提取物水溶液)200μl置于10ml具塞试管中,水浴蒸干,加入0.5%茴香醛-5%浓硫酸-乙醇溶液1ml,100℃水浴15min,取出,迅速置于冰水浴中冷却10min,加甲醇定容至5ml。以溶剂对照为空白,用紫外分光光度计在429nm处,测定对照品和样品的测定吸收值,计算含量。
本发明瓜蒌皮、薤白提取物的组合物在制备治疗心血管***疾病方面药物的应用时,该组合物的每日用量为50至400mg,优选每日100至200mg。
本发明的有益效果:
通过大量的实验我们根据传统中医药理论,结合现代科技手段成功的制备了瓜蒌皮、薤白提取物的组合物,并且提供了该组合物的制备方法。该方法工艺稳定,重现性好;按照该方法制备的组合物质量稳定,有效成分含量高,药理实验也证明该组合物对于大鼠垂体后叶素致急性心肌缺血具有保护作用,对于冠脉结扎所致犬心肌缺血具有保护作用。本发明与同类治疗心血管***疾病药品比较,疗效确切,安全无明显毒副作用,单独使用或与其他药物复配都有良好的应用前景。我们制备的该组合物与原方相比较:(1)服用量由原来的22g生药缩减为50至400mg,缩减为原来的1/50至1/400。(2)药物有效成分(总氨基酸、总皂苷)的含量由原来的1~2%提高为50~70%,提高了约50倍。(3)该组合物为固体粉末,稳定性好,可制备多种口服药物制剂,使用方便。(4)对于大鼠垂体后叶素致急性心肌缺血,冠脉结扎所致犬心肌缺血的药效上,该组合物部分指标优于原方,达到了减少服用量而不降低药效的目的。
具体实施方式
实施例1:
将瓜蒌皮药材置于提取罐内,加水沸腾提取三次,每次加水体积分别为药材质量的10倍、8倍、8倍,第一次提取3小时,第二次提取2小时,第三次提取2小时,合并三次提取液,以筛网过滤,滤液置于减压蒸馏锅中80℃减压浓缩至适量(每kg生药浓缩至4000ml药液),趁热加入90~95%的乙醇,边加边搅拌,加至含醇量为65%(按乙醇比重计),静置36小时,使其充分沉淀,滤取上清液,沉淀离心,合并上清液;将上清液减压回收乙醇,浓缩至1ml回收液相当于2g生药,过滤,滤液以每分钟相当于树脂体积的1~2%流速上732型阳离子交换树脂柱(树脂和瓜蒌皮药材的质量比为1∶1),吸附有效成分,弃去流出液,上柱结束;用去离子水适量洗涤至流出液接近无色,弃去洗脱液,然后用1%的NH4OH作洗脱剂洗脱至无色,收集有颜色的洗脱液,洗脱液减压回收除去NH3,浓缩至1ml回收液相当于2g生药,冷却,浓缩液置于4℃冷藏24小时。浓缩液过滤,滤液浓缩至干,置真空干燥箱中60℃减压干燥成块状,将干燥的块状物粉碎,得到瓜蒌皮提取物。
将薤白药材置于提取罐内,加水沸腾提取三次,每次加水体积分别为药材质量的10倍、8倍、8倍,第一次提取3小时,第二次提取2小时,第三次提取2小时,合并三次提取液,以筛网过滤,滤液置于减压蒸馏锅中减压浓缩至适量(每kg生药浓缩至2000ml药液),滤取上清液;上清液以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速上D101型大孔吸附树脂柱(树脂和薤白药材的质量比为1∶1),弃去流出液,上柱结束;用去离子水适量洗涤至流出液为淡黄色,弃去流出液;然后用5%的乙醇作洗脱剂洗脱至流出液为淡黄色,弃去流出液;再用50%的乙醇洗脱至流出液为淡黄色,收集洗脱液,洗脱液减压回收除去乙醇,浓缩至1ml回收液相当于2g生药,冷却;浓缩液过滤,滤液浓缩至干,置真空干燥箱中60℃减压干燥成块状,将干燥的块状物粉碎,得到薤白提取物。
取瓜蒌皮提取物和薤白提取物按照50∶50的重量比例,配制瓜蒌皮薤白提取物的组合物。
将上述组合物按常规工艺加糊精等常规药用辅料混匀制颗粒剂。
实施例2:
将瓜蒌皮药材置于提取罐内,加30%乙醇加热回流提取三次,每次溶剂体积分别为药材质量的10倍、8倍、8倍。第一次加热提取3小时,第二次提取2小时,第三次提取2小时,合并三次提取液,以筛网过滤,滤液置于减压蒸馏锅中减压浓缩至适量(每kg生药浓缩至1500ml药液),趁热加入90~95%的乙醇,边加边搅拌,加至含醇量为90%(按乙醇比重计),静置48小时,使其充分沉淀,滤取上清液,沉淀离心,合并上清液;将上清液减压回收乙醇,浓缩至1ml回收液相当于0.5g生药,过滤,滤液以每分钟相当于树脂体积的1-2%流速上D001型大孔强酸性苯乙烯阳离子交换树脂(树脂和瓜蒌皮药材的质量比为1∶1),吸附有效成分,弃去流出液,上柱结束;用去离子水适量以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速洗涤至流出液接近无色,弃去洗脱液,然后用10%的NH4OH作洗脱剂,以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速洗脱至无色,收集有颜色的洗脱液,洗脱液减压回收除去NH3,浓缩至1ml回收液相当于0.5g生药,冷却,浓缩液置于0℃冷藏48小时;浓缩液过滤,滤液浓缩至干,置真空干燥箱中60℃减压干燥成块状,将干燥的块状物粉碎,得到瓜蒌皮提取物。
将薤白药材置于提取罐内,加45%乙醇加热回流提取三次,每次溶剂体积分别为药材质量的10倍、8倍、8倍。第一次提取3小时,第二次提取2小时,第三次提取2小时,合并三次提取液,以筛网过滤,置于减压蒸馏锅中减压浓缩至无醇味,滤取上清液。上清液以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速上AB-8型大孔吸附树脂柱(树脂和薤白药材的质量比为1∶1),弃去流出液,上柱结束。用去离子水适量以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速洗涤至流出液为淡黄色,弃去流出液,然后用5%的乙醇作洗脱剂以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速洗脱至流出液为淡黄色,弃去流出液。再用50%的乙醇以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速洗脱至流出液为淡黄色,收集洗脱液,洗脱液减压回收除去乙醇,浓缩至1ml回收液相当于2g生药,冷却;浓缩液过滤,滤液浓缩至干,置真空干燥箱中60℃减压干燥成块状,将干燥的块状物粉碎,得到薤白提取物。
取瓜蒌皮提取物和薤白提取物按照80∶20重量比例,配制瓜蒌皮薤白提取物的组合物。
将上述组合物按照常规工艺加淀粉等药学常用辅料压制成片剂。
实施例3:
将瓜蒌皮药材置于提取罐内,加95%乙醇加热回流提取三次,每次溶剂体积分别为药材质量的10倍、8倍、8倍。第一次加热提取3小时,第二次提取2小时,第三次提取2小时,合并三次提取液,过滤,将上清液减压回收乙醇,浓缩至1ml回收液相当于1g生药。瓜蒌皮提取液上柱吸附洗脱方法、瓜蒌皮提取物的制备、薤白药液的提取、薤白提取液上柱吸附及洗脱及薤白提取物的制备方法同实施例2。
取瓜蒌皮提取物和薤白提取物按照90∶10重量比例,配制瓜蒌皮薤白提取物的组合物。
将上述组合物按照常规工艺加水溶解滤过再加入适量炼蜜制成口服液。
实施例4:
将瓜蒌皮置于提取罐内,加55%甲醇加热回流提取三次,每次溶剂体积分别为药材质量的10倍、8倍、8倍。第一次加热提取3小时,第二次提取2小时,第三次提取2小时,合并三次提取液,过滤。将上清液减压回收甲醇,浓缩至1ml回收液相当于1.5g生药。
瓜蒌皮提取液上柱吸附洗脱方法、瓜蒌皮提取物的制备同实施例2。
将薤白置于提取罐内,加60%甲醇加热回流提取三次,每次溶剂体积分别为药材质量的10倍、8倍、8倍。第一次提取3小时,第二次提取2小时,第三次提取2小时,合并三次提取液,以筛网过滤,置于减压蒸馏锅中减压浓缩至无味,滤取上清液。上清液以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速上HPD-100型大孔吸附树脂柱(树脂和薤白药材的质量比为1∶1),弃去流出液,上柱结束。用去离子水适量以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速洗涤至流出液为淡黄色,弃去流出液,然后用10%的甲醇作洗脱剂以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速洗脱至流出液为淡黄色,弃去流出液。再用70%的甲醇以每分钟相当于树脂体积的0.1~2%流速洗脱至流出液为淡黄色,收集洗脱液,洗脱液减压回收除去甲醇,浓缩至1ml回收液相当于1.5g生药,冷却;浓缩液过滤,滤液浓缩至干,置真空干燥箱中60℃减压干燥成块状,将干燥的块状物粉碎,得到薤白提取物。
取瓜蒌皮提取物和薤白提取物按照60∶40重量比例,配制瓜蒌皮薤白提取物的组合物。
将上述组合物按常规方法加淀粉混匀制成颗粒、再加适量硬脂酸镁按规格制成胶囊剂。
实施例5:
瓜蒌皮、薤白提取物的制备方法同实施例2,取瓜蒌皮提取物和薤白提取物按照70∶30重量比例,配制瓜蒌皮薤白提取物的组合物。
将上述组合物按常规方法制成散剂。
实施例6:
瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血心电图的影响研究
实验药物:本发明的瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物(江苏吴中苏药医药开发有限公司提供,简称瓜蒌皮、薤白的药物组合物)。实验中加蒸馏水按所需剂量配制。
实验动物: SD大白鼠50只,雌雄各半,体重227-287g。
实验分组:SD大白鼠按体重随机分为5组,每组10只,雌雄各半,分别为①模型对照组,给予等容积的蒸馏水。②丹参片组,给予丹参片0.32g/kg。③组为瓜蒌皮、薤白原方水煎液2.2g生药/kg.④⑤⑥组为瓜蒌皮、薤白药物组合物的高、中、低剂量组剂量组,分别给与瓜蒌皮、薤白药物组合物4.4g生药/kg、2.2g生药/kg、1.1g生药/kg。各组给药容积均为0.44ml/100g。
实验方法:各组大鼠均灌胃给药,每天一次,连续给药5天,末次给药后20min,将大鼠用20%乌拉坦以1.2g/kg的剂量腹腔注射麻醉后,仰卧位固定,分离一侧股静脉,记录一段正常II导心电图,观察R-R间期(心率),J点及T波的高度,然后静脉推注脑垂体后叶素0.7u/kg,10秒内推完,于注射前(Osec)及注射后5sec、10sec、30sec、1min、2min、5min、10min、20min记录II导联心电图。将注射垂体后叶素后各时间点心电图各指标数值与注射前进行自身前后t检验比较,并进行给药前后差值的组间t检验比较。结果见表1~3:
药物组别 | 剂量(g生药/kg | 给药前(mv) | 给药后(mv) | |||||||
5″ | 10″ | 30″ | 1′ | 2′ | 5′ | 10′ | 20′ | |||
模型对照丹参片原方水煎液瓜蒌皮薤白的药物组合物 | 0.32g/kg2.24.42.21.1 | -0.325±0.117-0.308±0.182-0.275±0.192-0.331±0.135-0.288±0.107-0.230±0.160 | -0.131±0.086##(0.194±0.099)-0.236±0.159(0.072±0.032)**-0.212±0.155(0.063±0.065)**-0.258±0.147(0.072±0.032)**-0.222±0.104(0.066±0.053)**-0.151±0.133(0.079±0.091)* | -0.046±0.082##(0.279±0.126)-0.170±0.201(0.138±0.070)**-0.198±0.141(0.077±0.079)**-0.124±0.139##(0.206±0.177)-0.182±0.084#(0.106±0.089)**-0.114±0.130(0.116±0.138)* | -0.120±0.108##(0.205±0.113)-0.150±0.189(0.158±0.129)-0.138±0.117(0.137±0.092)-0.170±0.106##(0.160±0.124)-0.231±0.091(0.057±0.092)**-0.136±0.144(0.094±0.094)* | -0.166±0.128##(0.159±0.109)-0.146±0.150#(0.162±0.073)-0.150±0.255(0.125±0.136)-0.217±0.138(0.113±0.095)-0.164±0.102#(0.124±0.125)-0.121±0.118(0.109±0.080) | -0.075±0.107##(0.25±0.103)-0.074±0.117##(0.234±0.100)-0.127±0.172(0.149±0.064)*-0.176±0.126#(0.154±0.0922)*-0.146±0.747##(0.142±0.108)*-0.106±0.119(0.124±0.135)* | -0.059±0.088##(0.266±0.105)-0.082±0.132##(0.226±0.082)-0.103±0.163#(0.172±0.087)*-0.134±0.137##(0.196±0.118)-0.100±0.055##(0.188±0.094)-0.680±0.920#(0.162±0.108)* | -0.390±0.187(0.065±0.094)-0.124±0.139#(0.184±0.083)**-0.106±0.130#(0.169±0.087)**-0.183±0.161#(0.147±0.096)**-0.144±0.112##(0.144±0.121)**-0.121±0.108(0.109±0.103)** | -0.135±0.175#(0.19±0.126)-0.203±0.178(0.105±0.106)-0.175±0.191(0.1±0.043)*-0.274±0.1 69(0.056±0.106)*-0.242±0.100(0.046±0.086)**-0.167±0.193(0.063±0.079)* |
注:表中括号中数值表示各组大鼠注射垂体后叶素后各时间点心电图J点高度减去注射前(Osec)J点高度的差值;*P<0.05,**P<0.01,与模型对照组进行组间比较;#P<0.05,##P<0.01,造模后各时间点与造模前进行自身前后比较。
药物组别 | 剂量(g生药/kg) | 给药前(mv) | 给药后(mv) | |||||||
5″ | 10″ | 30″ | 1′ | 2′ | 5′ | 10′ | 20′ | |||
模型丹参片原方水煎液瓜蒌皮薤白的药物组合物 | 0.32片剂粉末2.24.42.21.1 | 0.195±0.0460.224±0.0690.179±0.0490.262±0.0720.203±0.0510.182±0.047 | 0.274±0.058##(0.079±0.065)0.289±0.103#(0.065±0.088)0.207±0.088(0.028±0.088)0.301±0.059##(0.039±0.034)0.208±0.058(0.005±0.054)*0.212±0.061(0.03±0.068) | 0.301±0.081##(0.106±0.076)0.297±0.111(0.073±0.118)*0.194±0.079(0.015±0.009)**0.277±0.064(0.015±0.053)**0.213±0.073(0.01±0.092)**0.234±0.098(0.052±0.097)* | 0.284±0.149(0.089±0.138)0.228±0.149(0.004±0.144)*0.217±0.091(0.038±0.098)*0.237±0.101(-0.025±0.094)**0.172±0.072(-0.031±0.097)**0.164±0.104(-0.018±0.082)** | 0.181±0.084(-0.014±0.069)0.249±0.147(0.025±0.124)*0.222±0.117(0.043±0.109)*0.272±0.090(0.01±0.089)0.212±0.049(0.009±0.493)*0.119±0.103(-0.083±0.087) | 0.161±0.074(-0.034±0.064)0.326±0.068##(0.102±0.081)**0.220±0.092(0.041±0.083)**0.295±0.081(0.0033±0.076)**0.228±0.079(0.025±0.064)**0.135±0.101(-0.047±0.094) | 0.207±0.065(0.012±0.049)0.303±0.046##(0.079±0.077)**0.224±0.072(0.045±0.073)*0.280±0.055(0.018±0.052)0.209±0.070(0.006±0.067)0.227±0.093(0.045±0.098)* | 0.226±0.071#(0.031±0.039)0.308±0.039##(0.084±0.076)**0.221±0.056(0.042±0.064)0.303±0.068(0.041±0.066)0.208±0.045(0.005±0.072)*0.229±0.098(0.047±0.095) | 0.240±0.070(0.045±0.044)0.265±0.049(0.041±0.076)0.238±0.040##(0.059±0.044)*0.275±0.079(0.013±0.041)*0.229±0.049(0.062±0.063)*0.215±0.049(0.033±0.058) |
注:表中括号中数值表示各组大鼠注射垂体后叶素后各时间点心电图T波高度减去注射前(Osec)T波高度差值;
*P<0.05,**P<0.01,与模型组进行组间比较;#P<0.05,##P<0.01,造模后各时间点与给造模前进行组内比较。
表3.瓜蒌皮、薤白的药物组合物对垂体后叶素所致心肌缺血大鼠R-R间期(s)的影响()(n=10)
药物组别 | 剂量(g生药/kg) | 给药前(s) | 给药后(s) | |||||||
5″ | 10″ | 30″ | 1′ | 2′ | 5′ | 10′ | 20′ | |||
模型丹参片原方水煎液瓜蒌皮薤白的药物组合物 | 0.32g/kg2.24.42.21.1 | 0.125±0.0120.133±0.0150.109±0.0130.137±0.0310.119±0.0200.119±0.018 | 0.143±0.018#(0.018±0.016)0.134±0.013(0.001±0.012)*0.122±0.011#(0.012±0.016)0.134±0.019(-0.002±0.017)*0.121±0.015(0.001±0.015)*0.126±0.016(0.006±0.013) | 0.154±0.038#(0.029±0.036)0.146±0.015#(0.013±0.046)0.124±0.013##(0.014±0.008)0.147±0.028(0.010±0.033)0.135±0.022##(0.015±0.010)0.133±0.022(0.012±0.025) | 0.178±0.046##(0.053±0.049)0.166±0.033##(0.033±0.027)0.147±0.040#(0.037±0.042)0.159±0.028(0.023±0.039)0.165±0.055#(0.045±0.054)0.211±0.132(0.091±0.139) | 0.228±0.083##(0.103±0.086)0.209±0.069##(0.075±0.071)0.185±0.075#(0.075±0.077)0.182±0.062(0.045±0.075)0.199±0.059##(0.079±0.050)0.188±0.081#(0.068±0.090) | 0.221±0.062##(0.095±0.062)0.225±0.049##(0.092±0.047)0.164±0.021##(0.054±0.029)0.194±0.036##(0.058±0.050)0.203±0.046##(0.084±0.046)0.182±0.040##(0.061±0.049) | 0.215±0.039##(0.090±0.037)0.204±0.037##(0.071±0.037)0.168±0.017##(0.059±0.025)*0.197±0.018##(0.060±0.038)0.186±0.028##(0.067±0.029)0.182±0.035##(0.061±0.047) | 0.195±0.034##(0.071±0.033)0.187±0.046##(0.054±0.044)0.153±0.019##(0.044±0.029)0.169±0.030#(0.033±0.039)*0.168±0.018##(0.049±0.024)0.166±0.037##(0.046±0.034) | 0.147±0.020##(0.022±0.016)0.142±0.023(0.009±0.023)0.121±0.013(0.012±0.018)0.136±0.025(-0.0004±0.021)*0.140±0.023*(0.021±0.031)0.136±0.029(0.153±0.226) |
注:表中括号中数值表示各组大鼠注射垂体后叶素后各时间点心电图R-R间期减去注射前(Osec)R-R间期差值;
*P<0.05,**P<0.01,与模型组进行组间比较;#P<0.05,##P<0.01,造模后各时间点与给造模前进行组内比较。
实施例7:瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物对麻醉犬冠脉结扎致心肌缺血的影响的研究
实验药物:本发明的瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物(江苏吴中苏药医药开发有限公司提供,简称瓜蒌皮、薤白药物组合物)。实验中加蒸馏水按所需剂量配制。
实验动物:家犬36只,雌雄兼用,体重7.0-10.0kg。
实验分组:随机将家犬36只均分为六组。分别为①伪手术组;②模型组;③丹参片组,给予丹参片0.11g/kg;④组为瓜蒌皮、薤白原方水煎液0.72g生药/kg。⑤⑥⑦组为瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物的高、中、低剂量组剂量组,分别给与瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物1.44g生药/kg、0.72g生药/kg、0.36g生药/kg。
实验方法:实验犬由前肢静脉用3%戊巴比妥钠1ml/kg麻醉后,仰卧位固定于手术台上。剪去颈部、胸部、腹部和右后肢内侧的毛,75%酒精消毒剪毛区。分离右侧股动脉、股静脉,股动脉***动脉插管,并以0.1%肝素钠生理盐水液导与压力换能器(TP-400T)相连,由RM-6000型多导生理记录仪记录动脉收缩压(SAP)、动脉舒张压(DAP),心率(HR),定标灵敏度为13.33kPa(100mmHg)/cm。股静脉插管以生理盐水静脉滴注,保持滴速约10滴/min,并以备实验途中犬出现苏醒症状后补麻药。颈部正中线切口,分离气管,接人工呼吸机。打开腹腔,分离十二指肠,以备给药。将犬侧位,于左侧第四、五肋间开胸,暴露心脏,剪开心包膜,缝于胸壁,做成心包摇篮。在左冠状动脉前降支中上1/3处游离一小段,并穿0号丝线,以备结扎。伪手术组不结扎。选择梗塞区附近位置12个标测点,并在远离梗塞区选一对照点,均以龙胆紫标记,用手持绝缘金属点状电极按标测点顺序进行标测,经传感器(JB-642G)、放大器(AB-621G),用多导生理记录仪记录胸导联心外膜电图(EECG)。结扎冠状动脉的同时经十二指肠给药。记录缺血前、给药30min,60min,90min,120min,150min,180min的SAP、DAP、MAP、HR。统计各标测点EECG的ST段于结扎前抬高的差值Δ∑-ST,以及ST段比结扎前抬高≥2mv以上的ΔN-ST。各组于给药前和给药后60min,120min,180min由股动脉三通管取血,血液标本以3500rpm的速度离心20min分离出血浆,置于-20℃冷冻保存待测。测定血清AST(谷草转氨酶)、CK、LDH、SOD、MDA值。实验结束后,立即取出心脏,用生理盐水洗去血液,称取全心重及心室重量,并把心室横切成5片,置于37℃水浴,0.25%NBT溶液中染色5-10min,并拍照片,剪去各心肌片被染色的非梗塞区,把未染色的梗塞区心肌称重,除以全心重或心室重分别得到梗塞范围占全心重或占心室重的百分比。然后进行数据统计处理,各组均与缺血模型组及伪手术组进行组间t检验比较。结果见表4-15。
组别 | 剂量(g生药/kg) | 给药前(mmHg) | 给药后(mmHg) | |||||
30min | 60min | 90min | 120min | 150min | 180min | |||
伪手术变化率(%)模型对照变化率(%)丹参片变化率(%)原方水煎液变化率(%)组合物高变化率(%)组合物中变化率(%)组合物低变化率(%) | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 130.16±21.12127.05±22.49153.23±24.13134.48±32.52119.83±28.35123.36±14.42119.97±19.51 | 130.87±17.641.24±8.38116.74±16.31-6.31±17.52144.57±26.30-5.61±9.34127.71±29.74-4.50±10.60129.32±23.1110.21±16.85128.00±13.855.12±19.03122.86±27.491.98±13.71 | 130.80±20.980.81±8.25119.28±13.82-4.19±16.49136.31±36.00-11.50±16.26126.64±22.20-4.52±8.11127.22±22.459.77±26.21126.86±10.774.51±19.63130.14±22.848.38±6.45 | 133.31±18.973.15±9.60111.02±15.52-10.47±18.15143.06±41.50-7.70±16.70121.44±21.59-7.37±15.82118.23±18.053.26±29.18125.80±11.803.22±16.75113.62±22.83-5.38±10.92 | 134.81±21.48*4.20±11.23110.01±15.95#-11.37±17.54140.18±38.81-9.09±17.19130.11±24.08-1.63±11.67118.69±19.784.03±31.32120.88±12.48-1.14±13.21116.68±28.19-3.36±13.45 | 138.48±22.27*7.30±14.41108.29±16.48#-12.10±21.60129.23±35.75-16.01±17.83#129.61±20.33-0.47±20.26113.29±19.77-0.53±31.94119.36±12.82-2.51±12.48116.76±23.61-2.92±10.05 | 133.21±19.03**2.92±7.51101.85±14.41##-16.90±21.25122.80±31.54-20.15±14.63##124.44±28.58-5.92±18.56119.04±25.304.18±34.17118.77±11.88-2.93±12.42122.44±26.921.48±11.22 |
注:*P<0.05,**P<0.01,各剂量组与模型组比较;#P<0.05,##P<0.01,各剂量组与伪手术组比较。
组别 | 剂量(g生药/kg) | 给药前(mmHg) | 给药后(mmHg) | |||||
30min | 60min | 90min | 120min | 150min | 180min | |||
伪手术变化率(%)模型对照变化率(%)丹参片变化率(%)原方水煎液变化率(%)组合物高变化率(%)组合物中变化率(%)组合物低变化率(%) | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 87.26±17.4281.55±20.9094.38±15.7485.74±31.2969.79±14.4973.22±11.8576.34±20.60 | 86.47±16.28-0.03±11.5271.52±9.61-8.01±23.7188.54±14.47-6.02±5.8480.81±25.35-4.36±8.0875.81±11.4311.24±19.1078.84±7.7711.17±29.2272.58±21.68-4.28±19.25 | 86.78±15.830.43±12.3672.87±8.55-6.88±20.0982.44±24.79-13.74±17.5280.20±21.39-3.89±8.9574.42±9.9012.18±36.1578.63±5.9911.04±27.7880.28±17.346.67±13.06 | 87.06±15.398*1.22±15.7766.68±12.46#-14.19±23.9187.68±27.04-8.47±17.3573.37±17.88-9.97±19.3368.89±13.544.12±38.6878.53±5.739.45±19.0766.72±18.08-11.46±18.21 | 88.29±16.75*2.76±17.5766.15±10.50#-14.68±22.7885.35±26.40-10.64±17.4784.27±22.322.02±16.6068.55±14.074.15±42.1374.12±2.653.60±17.8467.20±21.59-11.87±17.09 | 89.60±17.46*4.05±16.3465.98±11.60#-13.65±29.4078.91±24.80-17.45±17.6181.90±16.801.42±23.8067.94±16.913.54±45.7573.93±2.823.28±17.8767.43±19.13-11.30±13.69 | 88.46±14.44**2.82±13.2961.44±11.03##-19.36±27.2572.98±20.74-23.62±12.81##79.65±20.49-2.90±20.5068.40±19.804.13±47.6877.68±7.53*8.47±21.4672.38±22.57-5.18±16.44 |
注:*P<0.05,**P<0.01,各剂量组与模型组比较;#P<0.05,##P<0.01,各剂量组与伪手术组比较。
组别 | 剂量(g生药/kg) | 给药前(mmHg) | 给药后(mmHg) | |||||
30min | 60min | 90min | 120min | 150min | 180min | |||
伪手术变化率(%)模型对照变化率(%)丹参片变化率(%)原方水煎液变化率(%)组合物高变化率(%)组合物中变化率(%)组合物低变化率(%) | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 101.56±18.5696.72±21.28114.00±17.98101.99±31.6186.47±17.8989.93±12.5090.88±20.02 | 101.27±16.580.51±10.0687.26±12.81-6.70±21.55106.38±16.91-6.56±5.5196.44±26.57-4.49±9.0593.65±14.5310.63±17.9295.22±9.368.27±24.1589.34±23.48-1.60±16.71 | 101.45±17.430.56±10.4988.34±9.96-5.82±18.17100.40±28.34-12.75±16.7995.68±21.50-4.28±7.6892.02±13.2910.90±31.4694.71±6.657.96±23.7696.90±18.647.34±9.55 | 102.48±16.37*1.99±12.7781.13±13.58#-13.06±21.29106.14±31.81-8.22±16.6389.39±18.72-8.95±16.9684.78±13.173.12±34.3094.28±6.706.58±17.6982.35±19.47-8.87±14.77 | 104.24±18.01*3.90±15.8780.77±12.09#-13.38±20.08103.62±30.48-10.01±17.0999.55±22.820.22±13.6984.15±14.522.76±36.9089.04±5.950.66±15.7683.70±23.61-8.16±15.43 | 105.56±19.06*5.14±15.9480.08±12.95#-13.14±25.6695.68±28.33-16.86±17.36#97.80±17.490.39±21.4782.34±18.500.66±39.3887.74±5.20-0.96±14.4583.87±20.34-7.63±11.88 | 103.38±15.75**2.81±10.4974.91±11.73##-18.40±24.2989.58±24.18-22.13±13.14##94.58±22.88-4.42±19.1785.28±20.784.03±40.9993.82±7.37**6.28±19.5789.07±23.72-2.31±13.89 |
注:*P<0.05,**P<0.01,各剂量组与模型组比较;#P<0.05,##P<0.01,各剂量组与伪手术组比较。
组别 | 剂量(g生药/kg) | 给药前(beats/min) | 给药后(beats/min) | |||||
30min | 60min | 90min | 120min | 150min | 180min | |||
伪手术变化率(%)模型对照变化率(%)丹参片变化率(%)原方水煎液变化率(%)组合物高变化率(%)组合物中变化率(%)组合物低变化率(%) | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 157.11±23.37176.53±31.47185.01±26.76159.79±30.97162.68±29.06171.19±38.08177.02±10.90 | 158.08±22.970.67±1.88177.59±31.590.89±10.10190.27±30.472.80±7.45165.33±33.183.66±8.18165.44±29.381.77±2.35176.98±47.212.62±9.38178.11±15.330.56±4.50 | 156.53±23.18-0.34±1.74174.15±31.10-1.32±6.54183.90±37.10-0.87±12.72163.26±30.742.63±9.27169.02±28.034.29±7.23170.55±43.60-0.67±10.19179.91±19.941.43±6.10 | 156.10±23.94-0.66±2.26164.46±25.17-6.14±9.90185.60±34.940.21±11.43157.47±26.62-0.76±8.89164.24±32.090.94±9.68163.89±42.24-4.62±9.95174.16±11.90-1.61±2.77 | 154.95±25.15-1.48±2.98160.87±24.81-8.11±10.18183.70±34.06-0.41±13.26166.23±34.274.56±13.56162.96±31.980.29±11.78160.21±42.46-6.94±9.56174.09±19.82-1.81±7.00 | 155.78±24.41-0.91±2.26157.53±28.10-10.09±12.94182.40±34.49-0.89±14.98156.12±24.06-1.21±11.37168.19±24.944.33±12.40157.76±43.90-8.54±11.03177.27±24.73-0.11±9.57 | 154.76±25.23-1.59±5.00153.47±31.74-12.57±15.01178.84±33.78-3.21±12.19155.25±28.19-2.14±11.71169.43±24.025.22±12.91156.17±45.75-9.65±12.85175.93±24.96-0.78±10.70 |
组别 | 剂量(g生药/kg) | 心脏重(g) | 心室重(g) | 梗塞心肌重(g) | 梗塞区/心脏(%) | 梗塞区/心室(%) |
伪手术模型对照丹参片原方水煎液组合物 | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 76.70±7.4475.41±8.3776.35±11.0472.53±8.2773.96±5.3567.45±8.5377.86±11.76 | 55.47±4.7256.55±6.1957.09±6.0855.38±7.0052.60±3.7748.84±9.7559.53±11.87 | 0**17.42±5.1310.31±1.75**##10.15±1.46**##10.21±1.30**##10.95±1.62*##13.90±2.54## | 0**0.23±0.070.13±0.01**##0.14±0.01**##0.14±0.01**##0.16±0.01*##0.18±0.02## | 0**0.31±0.080.18±0.02**##0.18±0.02**##0.19±0.03**##0.23±0.02*##0.24±0.02## |
注:*P<0.05,**P<0.01,各剂量组与模型组比较;#P<0.05,##P<0.01,各剂量组与伪手术组比较。
组别 | 剂量(g生药/kg) | 给药前 | 给药后 | |||||
30min | 60min | 90min | 120min | 150min | 180min | |||
伪手术模型对照丹参片原方水煎液组合物 | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 0.17±0.410.33±0.520.00±0.000.50±0.840.00±0.000.00±0.000.67±0.82 | 0.17±0.41**8.50±0.84##5.67±3.01##5.83±2.40##*5.00±0.89##**7.17±2.32##6.33±1.86##* | 0.17±0.41**9.67±0.82##5.50±3.02##**5.00±3.22##**4.33±0.52##**6.00±2.00##**7.00±3.90## | 0.50±0.84**8.50±2.35##5.33±3.20##5.17±2.56##*4.67±0.82##**6.67±2.42##4.67±2.66##* | 0.33±0.52**8.17±2.14##4.50±3.39#*4.67±2.80##*4.00±1.26##**5.00±2.10##*5.33±1.51##* | 0.33±0.52**9.17±1.47##4.67±4.08#*4.17±2.14##**4.67±1.63##**7.00±2.61##6.00±3.22## | 0.33±0.52**9.67±0.82##3.83±2.23##**4.17±3.37#**5.33±2.34##**5.00±1.67##**6.67±2.88##* |
注:*P<0.05,**P<0.01,各剂量组与模型组比较;#P<0.05,##P<0.01,各剂量组与伪手术组比较。
组别 | 剂量(g生药/kg) | 给药前 | 给药后 | |||||
30min | 60min | 90min | 120min | 150min | 180min | |||
伪手术模型对照丹参片原方水煎液组合物 | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 10.33±5.9310.35±2.9410.69±2.528.76±3.6212.11±4.0911.26±2.6213.32±2.81 | 10.71±2.08**83.80±29.85##43.44±22.05##*42.24±30.18#*27.02±7.90##**43.68±17.11##*45.54±25.04##* | 8.24±3.24**104.35±47.53##44.16±27.21##*40.82±25.82#*32.05±7.75##**48.96±31.93#*49.83±29.73##* | 8.57±4.45**88.24±37.50##41.39±19.95##*29.84±17.33#**35.12±11.71##**47.56±22.00##*34.87±18.41##* | 7.83±2.56**86.06±53.88##32.46±20.50#*39.96±20.44##27.68±11.56##*38.82±21.44##35.74±19.67## | 8.82±3.79**73.69±33.90##33.29±24.45#*29.38±18.09#*30.19±12.20##*39.27±15.35##*36.31±17.44##* | 9.76±2.78**84.19±29.47##36.38±37.74*34.39±30.25*37.96±19.78##**34.26±12.42##**40.24±20.02##* |
注:*P<0.05,**P<0.01,各剂量组与模型组比较;#P<0.05,##P<0.01,各剂量组与伪手术组比较。
组别 | 剂量(g生药/kg) | 结扎前 | 结扎后 | ||
60min | 120min | 180min | |||
伪手术组变化率(%)模型组变化率(%)丹参片组变化率(%)原方水煎液变化率(%)组合物高变化率(%)组合物中变化率(%)组合物低变化率(%) | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 4.30±0.734.20±0.914.33±0.854.55±0.684.83±0.884.42±1.204.68±0.60 | 4.20±0.7719.17±10.676.32±1.47##61.00±39.354.75±0.89**9.87±4.985.17±0.71**#14.34±6.075.70±0.76**##18.50±7.125.33±0.97*#23.21±13.416.42±0.70##35.94±6.44 | 4.30±0.7719.00±10.246.44±1.32##61.50±32.835.28±0.94*22.38±5.735.60±0.72*#23.67±8.964.85±0.95**5.47±3.974.82±0.86**14.22±7.236.46±1.05##37.62±6.86 | 4.11±0.7112.83±14.486.87±1.62##51.00±31.826.22±0.77##40.24±13.956.35±1.0139.59±7.225.00±1.15*10.00±6.886.07±0.6742.2±24.266.28±0.96##33.91±6.57 |
各剂量组与模型对照组相比,*P<0.05,**P<0.01;各剂量组与伪手术组相比,#P<0.05,##P<0.01.
组别 | 剂量(g生药/kg) | 结扎前 | 结扎后 | ||
60min | 120min | 180min | |||
伪手术组变化率(%)模型组变化率(%)丹参片组变化率(%)原方水煎液变化率(%)组合物高变化率(%)组合物中变化率(%)组合物低变化率(%) | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 72.15±10.9185.72±11.5672.15±33.4074.62±7.9172.77±15.4667.83±21.2878.93±10.38 | 73.38±8.253.52±18.1551.80±18.13#-39.52±18.7288.18±23.68*39.28±45.36100.52±7.91**##36.09±18.7791.88±9.19**##6.68±5.3778.93±11.38*24.21±31.9673.38±11.56*-6.52±12.80 | 65.37±9.84-8.78±11.3746.25±13.59#-45.08±10.25102.98±28.36**#63.82±58.2577.70±17.51**4.37±23.4576.47±9.26**1.49±6.0474.00±15.34**35.29±27.3464.13±23.36-19.01±27.21 | 66.6±17.82-6.17±27.0845.02±13.32#-45.85±14.3061.05±15.308.52±67.2373.38±8.57**-1.51±6.9074.00±15.17**0.70±7.8948.72±16.28-21.17±33.8362.9±21.83-16.91±36.76 |
各剂量组与模型对照组相比,*P<0.05,**P<0.01;各剂量组与伪手术组相比,#P<0.05,##P<0.01.
组别 | 剂量(g生药/kg) | 结扎前 | 结扎后 | ||
60min | 120min | 180min | |||
伪手术组变化率(%)模型组变化率(%)丹参片组变化率(%)原方水煎液变化率(%)组合物高变化率(%)组合物中变化率(%)组合物低变化率(%) | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 410.59±85.06356.76±88.45461.91±161.98453.15±78.44359.26±126.5241 0.59±87.42424.36±107.88 | 329.22±84.10-15.43±29.031836.37±318.08##441.00±169.14817.42±219.20**##94.21±73.51619.64±273.24**#42.93±71.86871.24±277.84**##148.48±47.281490.88±196.93*##281.87±115.821890.20±277.78##364.95±109.28 | 363.02±194.74-4.98±58.961855.15±129.66##442.83±115.551558.48±174.84**##278.01±151.131301.86±357.58**##192.12±94.87962.63±81.78**##208.39±143.081482.12±143.03**##275.43±89.441823.86±132.10##347.13±92.55 | 327.97±87.93-16.58±27.001861.41±63.98##449.75±138.701881.44±219.06##373.21±235.231669.89±206.93##275.68±63.501672.39±458.77405.14±167.081753.76±162.53##341.58±90.621816.35±214.89##342.35±83.73 |
各剂量组与模型对照组相比,*P<0.05,**P<0.01;各剂量组与伪手术组相比,#P<0.05,##P<0.01.
表14瓜蒌皮、薤白的药物组合物对麻醉犬冠脉结扎所致心肌缺血的血清AST的影响()(n=6)(单位:U/L)
组别 | 剂量(g生药/kg) | 结扎前 | 结扎后 | ||
60min | 120min | 180min | |||
伪手术组变化率(%)模型组变化率(%)丹参片组变化率(%)原方水煎液变化率(%)组合物高变化率(%)组合物中变化率(%)组合物低变化率(%) | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 63.04±13.6465.16±42.0397.12±43.7793.07±35.6871.45±6.7686.34±28.3754.87±42.82 | 62.47±9.060.84±10.77125.48±41.60##153.51±124.2953.64±21.09**-39.68±24.8461.76±47.20*-30.04±53.7378.67±3.21*##10.61±6.9592.74±38.9921.21±65.3871.57±51.9772.71±147.06 | 65.39±16.823.46±13.32135.48±34.25##216.73±248.8164.22±35.07**-34.49±26.1176.48±45.25*-16.24±52.3996.82±6.39*##36.20±11.9475.08±52.94*-3.34±79.0577.14±69.0666.71±154.50 | 58.32±14.48-7.55±11.38150.94±44.48##235.13±245.58102.04±60.440.46±31.4799.95±54.519.20±61.40144.65±13.33##103.02±16.75101.82±21.50*##23.42±31.45101.21±51.02119.75±90.32 |
各剂量组与模型对照组相比,*P<0.05,**P<0.01;各剂量组与伪手术组相比,#P<0.05,##P<0.01.
组别 | 剂量(g生药/kg) | 结扎前 | 结扎后 | ||
60min | 120min | 180min | |||
伪手术组变化率(%)模型组变化率(%)丹参片组变化率(%)原方水煎液变化率(%)组合物高变化率(%)组合物中变化率(%)组合物低变化率(%) | 0.11g/kg0.721.440.720.36 | 96.19±40.6286.24±51.3887.89±35.2787.89±34.1387.89±40.50109.45±39.8097.84±34.13 | 76.29±45.23-39.42±31.51190.71±72.14##229.51±264.1099.50±63.24*17.91±63.91109.45±28.83*30.09±21.0282.92±35.97**-3.48±25.16114.43±37.10*7.40±15.72199.01±63.24##114.46±79.04 | 89.55±90.54-33.16±72.64232.17±62.19##266.23±294.04182.42±80.75113.99±61.54169.15±42.22105.04±53.36145.94±61.55*78.12±55.52242.12±29.96##144.24±79.05255.39±35.97##193.54±126.12 | 91.21±108.89-38.17±93.71296.85±52.05##395.45±483.51290.22±45.12##260.58±96.14245.44±69.98#199.02±84.34275.29±101.21246.89±146.90291.87±27.91##197.23±101.49300.17±52.05##251.58±159.05 |
各剂量组与模型对照组相比,*P<0.05,**P<0.01;各剂量组与伪手术组相比,#P<0.05,##P<0.01
实施例8:
瓜蒌皮、薤白药材和提取物的含量测定瓜蒌皮药材和提取物的总氨基酸含量测定:
瓜蒌皮药材供试品溶液的制备:取瓜蒌皮4g,加水100ml,回流提取2次(2h、1h),滤过残渣用20ml水分2次洗涤,洗涤液与滤液合并,浓缩至约2ml,加95%乙醇10ml沉淀,搅匀,冷藏12h,滤过。滤液蒸干,残渣加水使溶解并转移至50ml量瓶中,稀释至刻度,作为瓜蒌皮药材供试品溶液(0.08g/1ml)。
分别取0.4mg/ml精氨酸对照品1ml,2mg/1ml瓜蒌皮提取物(按照实施例2方法制备得到)样品1ml,0.08g/1ml瓜蒌皮药材供试品溶液1ml,加入2%茚三酮溶液1ml,PH8.0磷酸盐缓冲液1ml,沸水浴中显色15min,流水冷却,加蒸馏水定容至25ml。以溶剂对照为空白,用紫外分光光度计在570nm处,测定对照品和样品的吸收值,计算含量,结果见表16。磷酸盐缓冲液的配制:95ml 1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液+5ml 1/15mol/L的磷酸二氢钾溶液(PH=8.0)。2%茚三酮溶液的配制:水合茚三酮20.g,加水50ml,0.080g氯化亚锡搅拌溶解,于暗处静置过夜,过滤后,加水定容至100ml。(避光保存)
表16瓜蒌皮药材和提取物的总氨基酸含量测定结果
样品名称 | 总氨基酸百分含量(%) |
瓜蒌皮药材1(江苏) | 1.52 |
瓜蒌皮药材2(浙江) | 1.38 |
瓜蒌皮药材3(湖南) | 1.56 |
瓜蒌皮提取物1(江苏) | 71 |
瓜蒌皮提取物2(浙江) | 65 |
瓜蒌皮提取物3(湖南) | 72 |
薤白药材和提取物的总皂苷含量测定:
薤白药材供试品溶液的制备:取薤白4g,加水100ml,回流提取2次(2h、1h),滤过残渣用20ml水分2次洗涤,洗涤液与滤液合并,浓缩至约2ml,加95%乙醇10ml沉淀,搅匀,冷藏12h,滤过。滤液蒸干,残渣加水使溶解并转移至10ml量瓶中,稀释至刻度,作为薤白药材供试品溶液(0.4g/1ml)。
分别取1mg/ml的薯蓣皂苷对照品溶液200μl、0.4g/ml的薤白药材供试品溶液200μl和1mg/ml的薤白提取物(按照实施例2方法制备得到)样品溶液200μl置于10ml具塞试管中,水浴蒸干,加入0.5%茴香醛-5%浓硫酸-乙醇溶液1ml,100℃水浴15min,取出,迅速置于冰水浴中冷却10min,加甲醇定容至5ml。以溶剂对照为空白,用紫外分光光度计在429nm处,测定对照品和样品的测定吸收值,计算含量,结果见表17。
表17 薤白药材和提取物的总皂苷含量测定结果
样品名称 | 总皂苷百分含量(%) |
薤白药材1(江苏) | 0.64 |
薤白药材2(河南) | 0.71 |
薤白药材3(安徽) | 0.76 |
薤白提取物1(江苏) | 53 |
薤白提取物2(河南) | 56 |
薤白提取物3(安徽) | 60 |
Claims (8)
1.一种瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物,该组合物主要由瓜蒌皮提取物与薤白提取物组成,其特征在于该组合物中瓜蒌皮提取物50~90重量份,薤白提取物10~50重量份;其中,瓜蒌皮提取物中总氨基酸含量以精氨酸计不小于50%,薤白提取物中总皂苷含量以薯蓣皂苷计不小于50%。
2.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于该组合物中瓜蒌皮提取物60~80重量份,薤白提取物20~40重量份;其中,瓜蒌皮提取物中总氨基酸含量以精氨酸计不小于50%,薤白提取物中总皂苷含量以薯蓣皂苷计不小于50%。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物,其特征在于所述剂型为散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂或口服液。
4.权利要求1或2所述的瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物的制备方法,其特征在于该方法包括下列步骤:
a、瓜蒌皮药液的提取:将瓜蒌皮加水或浓度小于50%C1-3醇提取,提取液过滤浓缩,向浓缩液中加入C1-3醇,边加边搅拌,加至含醇量为50~90%,静置,滤取上清液,沉淀离心,合并上清液;或者将瓜蒌皮加50-95%C1-3醇提取,滤取上清液;
b、瓜蒌皮提取液上柱吸附及洗脱:所得上述上清液回收C1-3醇,浓缩至1ml回收液相当于0.5~2g生药,过滤,滤液上阳离子交换树脂柱,弃去流出液,用去离子水洗涤至流出液接近无色,弃去洗脱液,然后用1-10%的NH4OH作洗脱剂,洗脱至无色,洗脱液回收,浓缩至1ml回收液相当于0.5~2g生药,冷却,浓缩液0~5℃冷藏;
c、瓜蒌皮提取物的制备:所得浓缩液再过滤,浓缩,低温干燥后粉碎得到瓜蒌皮提取物;
d、薤白药液的提取:将薤白加水提取,提取液过滤,浓缩,每kg生药浓缩至2000-6000ml药液后,再滤取上清液;或者薤白加C1-3醇提取,提取液过滤,浓缩至无醇味,再滤取上清液;
e、薤白提取液上柱吸附及洗脱:将所得上清液上大孔吸附树脂柱,弃去流出液,用去离子水洗涤至流出液为淡黄色,弃去流出液,然后用5~20%的C1-3醇作洗脱剂洗脱至流出液为淡黄色,弃去流出液,再用50~80%的C1-3醇洗脱,收集洗脱液,洗脱液减压回收除去C1-3醇,浓缩至1ml回收液相当于0.5~2g生药,冷却;
f、薤白提取物的制备:所得浓缩液过滤,浓缩,低温干燥后粉碎得到薤白提取物;
g、按照权利要求1或2所述的重量比例分别取瓜蒌皮提取物和薤白提取物,配制瓜蒌皮薤白提取物的组合物。
5.根据权利要求4所述的瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物的制备方法,其特征在于所述的C1-3醇为甲醇或乙醇。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于所述的阳离子交换树脂为强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂;所述的大孔吸附树脂为D101型,HPD-100型,HPD-300型或AB-8型大孔吸附树脂。
7.权利要求1或2所述的瓜蒌皮、薤白提取物的药物组合物在制备治疗心血管***疾病药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于该组合物在制备治疗冠心病、心绞痛、心肌缺血药物中的应用。
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Cited By (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101461882B (zh) * | 2009-01-09 | 2011-06-08 | 江苏吴中苏药医药开发有限责任公司 | 一种瓜蒌皮和薤白的提取物及其制备方法 |
CN101757391B (zh) * | 2008-11-13 | 2012-01-11 | 代龙 | 一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法和用途 |
CN102670935A (zh) * | 2012-05-23 | 2012-09-19 | 湖南师范大学 | 一种从藠头中提取总皂苷的方法 |
CN103316197A (zh) * | 2013-06-21 | 2013-09-25 | 南昌大学 | 一种清除亚硝酸盐的藠头皂苷提取物制备方法 |
CN103768348A (zh) * | 2012-10-24 | 2014-05-07 | 贵州益佰制药股份有限公司 | 治疗心脑血管疾病的药物组合物、药物制剂及应用和制法 |
CN103800635A (zh) * | 2014-03-12 | 2014-05-21 | 邹琳 | 一种预防与治疗冠心病的药食两用品种组合物及制备方法 |
CN103908487A (zh) * | 2013-01-05 | 2014-07-09 | 西藏博睿生物科技有限公司 | 一种瓜蒌皮提取物的制备方法及其制剂 |
CN104510904A (zh) * | 2013-10-08 | 2015-04-15 | 肖延斌 | 一种治疗心脑血管疾病的复方中药制剂 |
CN105853928A (zh) * | 2016-05-24 | 2016-08-17 | 南京市妇幼保健院 | 用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物组合物及制备方法 |
CN106706530A (zh) * | 2016-12-28 | 2017-05-24 | 佛山市海科知识产权交易有限公司 | 一种藠头中游离氨基酸的测定方法 |
CN107296877A (zh) * | 2017-06-09 | 2017-10-27 | 吉林瑞诺科技有限公司 | 一种薤白分组皂苷的制备方法 |
CN107349318A (zh) * | 2017-07-25 | 2017-11-17 | 盐城师范学院 | 一种降血脂瓜蒌皮复方及其制备方法 |
CN112500448A (zh) * | 2020-11-19 | 2021-03-16 | 西安集佰侬生物科技有限公司 | 从百合科葱属植物中提取拉肖皂苷元的方法 |
-
2008
- 2008-01-10 CN CNA2008100190265A patent/CN101224274A/zh active Pending
Cited By (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101757391B (zh) * | 2008-11-13 | 2012-01-11 | 代龙 | 一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法和用途 |
CN101461882B (zh) * | 2009-01-09 | 2011-06-08 | 江苏吴中苏药医药开发有限责任公司 | 一种瓜蒌皮和薤白的提取物及其制备方法 |
CN102670935A (zh) * | 2012-05-23 | 2012-09-19 | 湖南师范大学 | 一种从藠头中提取总皂苷的方法 |
CN102670935B (zh) * | 2012-05-23 | 2013-11-27 | 湖南师范大学 | 一种从藠头中提取总皂苷的方法 |
CN103768348A (zh) * | 2012-10-24 | 2014-05-07 | 贵州益佰制药股份有限公司 | 治疗心脑血管疾病的药物组合物、药物制剂及应用和制法 |
CN103908487A (zh) * | 2013-01-05 | 2014-07-09 | 西藏博睿生物科技有限公司 | 一种瓜蒌皮提取物的制备方法及其制剂 |
CN103316197A (zh) * | 2013-06-21 | 2013-09-25 | 南昌大学 | 一种清除亚硝酸盐的藠头皂苷提取物制备方法 |
CN104510904A (zh) * | 2013-10-08 | 2015-04-15 | 肖延斌 | 一种治疗心脑血管疾病的复方中药制剂 |
CN103800635A (zh) * | 2014-03-12 | 2014-05-21 | 邹琳 | 一种预防与治疗冠心病的药食两用品种组合物及制备方法 |
CN105853928A (zh) * | 2016-05-24 | 2016-08-17 | 南京市妇幼保健院 | 用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物组合物及制备方法 |
CN106706530A (zh) * | 2016-12-28 | 2017-05-24 | 佛山市海科知识产权交易有限公司 | 一种藠头中游离氨基酸的测定方法 |
CN107296877A (zh) * | 2017-06-09 | 2017-10-27 | 吉林瑞诺科技有限公司 | 一种薤白分组皂苷的制备方法 |
CN107349318A (zh) * | 2017-07-25 | 2017-11-17 | 盐城师范学院 | 一种降血脂瓜蒌皮复方及其制备方法 |
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