CN101224196A - 一种盐酸氨溴索冻干粉针及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种盐酸氨溴索冻干粉针及其制备方法，该冻干粉针是由盐酸氨溴索与甘露醇组成，采用冷冻干燥工艺所得到的盐酸氨溴索冻干粉针的稳定性好，溶解速度快，其他各项指标均符合规定。

Description

一种盐酸氨溴索冻干粉针及其制备方法

技术领域

本发明涉及涉及一种盐酸氨溴索冻干粉针，还涉及盐酸氨溴索冻干粉针的制备方法，属于药物制剂技术领域。

背景技术

盐酸氨溴索又名沐舒痰，是一种呼吸道润滑祛痰药和粘液溶解药，具有粘液排除促进作用及溶解分泌物的特性，它可促进呼吸道内粘稠分泌物的排除及减少粘液的滞留，因而显著促进排痰，改善呼吸状况。能促进肺表面活性物质的分泌、气道液的分泌及纤毛运动。

盐酸氨溴索(Ambroxol Hydrochloride)，化学名称为反式-4-[(2-氨基-3，5-二溴苄基)氨基]环己醇盐酸盐，化学结构式：

盐酸氨溴索在临床上广泛用于各种急、慢性呼吸道疾病引起的痰液粘稠、咳痰困难，目前，国内盐酸氨溴索的制剂类型有盐酸氨溴索片剂及胶囊、盐酸氨溴索口服溶液剂、盐酸氨溴索缓释胶囊等，这些剂型生物利用较差，起效缓慢，而且较多出现胃肠道副作用，主要为胃部灼热、消化不良、偶尔出现恶心、呕吐等现象。为了适应临床上多种情况下需要，将其制备成粉针的剂型，使用时可配成所需浓度的溶液即可。专利CN1820749的盐酸氨溴索冻干粉中，除了赋形剂甘露醇之外，加入了抗氧化剂亚硫酸氢钠，盐酸氨溴索冻干粉针的冷冻工艺为：将盐酸氨澳索、甘露醇加到注射用水中，搅拌下加入亚硫酸氢钠使物料溶解并调pH3.5～6.0，加入0.01～0.5％的针剂用活性炭，搅拌15-30分钟，滤除活性炭，滤液装入托盘中，置于冷冻干燥机中，降温至-25℃～-30℃保持2小时后，再降温至-40℃～-45℃，开启真空，缓缓升温至-5℃～0℃升华干燥，至水分小于1％停止干燥，冷冻干燥毕。该专利中加入的抗氧化剂即使少量的摄入体内也有可能存在对机体的潜在危害。专利CN1587241、专利CN1843372中公开了盐酸氨溴索组合冻干粉，选用甘露醇为赋形剂，此外还有其他活性成分，如抗生素等成分。专利CN1954808公开的盐酸氨溴索冻干制剂中，选用柠檬酸、柠檬酸钠、柠檬酸钾、磷酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、天冬氨酸等物质作为助溶剂。

上述盐酸氨溴索冻干粉针中，由于盐酸氨溴索主药中所加入的辅料成分复杂时，对主药的稳定性产生影响，并且有可能引起未知的副作用，为了克服因辅料成分复杂而带来的副作用，使患者使用更安全，本发明人提供了一种处方简单的盐酸氨溴索冻干粉针。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种盐酸氨溴索冻干粉针，该冻干粉针的成分简单，稳定性好，可以较长时间的贮存。

本发明的另一个目的在于提供一种盐酸氨溴索冻干粉针的制备方法，该方法制得的盐酸氨溴索冻干粉针质地疏松，加水后能迅速溶解而恢复药液的原有特性。

本发明的提供的盐酸氨溴索冻干粉针是由盐酸氨溴索、甘露醇组成。

所述的盐酸氨溴索和甘露醇的重量比为：10～20∶90～120，优选盐酸氨溴索与甘露醇的重量比为15∶100。

从处方中辅料的选择来分析，本发明人遵循的原则是，在不影响药物稳定性、满足临床需要的产品的前提下，辅料的成分越简单越好。辅料的成分越简单，制剂在生产工艺中可大大简化配料步骤，同时，可避免辅料分成复杂带来的难以预料的副作用，因此，本发明仅仅选用甘露醇一种辅料。

专利CN1954808中记载盐酸氨溴索是的溶解度比较小，70mL水中大约溶解1mg盐酸氨溴索，根据《中国药典》2005版对溶解度的规定，盐酸氨溴索属于略溶物，要将其制成各项性能符合规定的注射用粉针，必须要加入助溶剂或增溶剂等物质。

本发明的甘露醇作为冻干粉针的辅料，对盐酸氨溴索有良好的助溶作用，不需要再加入其他助溶剂，避免引入更多的杂质，某些无机盐助溶剂的加入会使冻干粉针出现体积缩小、硬壳和脆散等现象；同时甘露醇也有很好的膨松骨架作用，通过添加甘露醇使得所制备的盐酸氨溴索冻干粉针基本保持原来的体积，色泽均匀，易于溶解形成澄明的溶液。

本发明的盐酸氨溴索冻干粉针中，其辅料甘露醇的用量相对来说比现有技术中盐酸氨溴索中的甘露醇用量较高，但是不会对人体造成不利影响，在注射时甘露醇的用量对于小孩按体重0.25～2g/kg使用，甘露醇时才有药效，而本发明每支盐酸氨溴索粉针中的甘露醇最多仅含120mg，对人体是不会有副作用的。

冷冻制剂的工艺、产品的质量与药物溶液的性质有着密切关系，冷冻干燥过程是一个动态变化的过程，不同的药物溶液需要对冷冻工艺的冷冻过程、干燥过程、真空控制三个过程进行相应的改进，才能得出符合标准的产品。对此，发明人付出了种种努力，得到了以下工艺。

为实现本发明另一个目的制备一种盐酸氨溴索冻干粉针，采用的技术方案为：

(1)将处方量的盐酸氨溴索加入到注射用水中，加热至60℃使之溶解，然后在上述溶液中加入甘露醇，搅拌溶解，调节溶液pH，补加灭菌注射用水至全量；

(2)在步骤(1)所配制好的溶液中加入活性炭，过滤；

(3)将步骤(2)得到的滤液冷冻干燥，在无菌条件下压盖、铝封，即得；

其特征在于，所述的冷冻干燥过程中，将滤液置于已降温在-18～-20℃的冷冻箱内，初步冷冻3小时，然后再将其降到-45℃左右，抽真空，在10～12小时内升温至-10～-5℃，维持-10～-5℃的时间为6小时，再在6～9小时内升温至20～25℃，维持20～25℃的时间为6小时。

上述步骤(1)中所述的加热溶解过程中，首先将盐酸氨溴索在60℃充分溶解，再加入甘露醇后，两者在溶液中均匀分布，最后得到的冷冻干燥产品的复溶性好，确切的原理本发明人还尚未得知，推测可能的原应为，在温度为60℃时，充分溶解的盐酸氨溴索能够和甘露醇形成更为稳定的可溶性络合物或者可溶性有机分子复合物，温度的筛选试验见实验例1。

上述步骤(1)中所述调节溶液PH时，所用的PH调节剂为浓度为0.1mol/L的盐酸和0.1mol/L氢氧化钠溶液。

上述步骤(1)所述的溶液PH调节到4.8～5.1，其优选5.0。

盐酸氨溴索在酸性条件下的水溶性较好，所以在溶解盐酸氨溴索时，要将溶液的PH调节到4.8～5.1。

上述步骤(2)中活性炭的用量为所配溶液体积的0.1％(g/ml)。

活性炭的用量对产品的影响，如果活性炭用量太多，会导致吸附溶液中的活性成分，使其产品的产率降低，如果活性炭用量太少，不能完全将溶液脱色、去热源、除杂质，进而影响产品的质量、纯度等性能。所以对活性炭的用量的选择应该综合考虑。

本发明人发现，在盐酸氨溴索溶液中，加入0.1％(g/mL)的活性炭，此时活性炭对主药盐酸氨溴索几乎不存在吸附作用，过滤之后溶液颜色为无色澄清溶液，经活性炭吸附后的盐酸氨溴索进行有关物质的检测，其总杂质在0.8％以下，最大杂质在0.2％以下，细菌内毒素符合规定。祥见实验例2。

上述步骤(2)中，加入活性炭之后，搅拌10～14分钟。

上述步骤(3)中，冷冻干燥过程分三个阶段，冷冻、升华、干燥过程。

1、冷冻

本发明所述的盐酸氨溴索冻干粉针的冷冻干燥过程中，盐酸氨溴索溶液的冷冻过程分两步完成。综合考虑冻结产品干燥过程、产品的外观形态和水分的含量，先将其快速冷冻至共熔点以下，并在在温度保持一段时间，使其初步冻结。将盐酸氨溴索溶液快速降温至-18～-20℃时，由于温度梯度和降温速度的控制，形成的冰晶的不会很小，干燥时干层阻力大、升华慢，也不会使得冰晶很大，产品外观粗糙，溶解速度比较慢等缺点。

初步冻结盐酸氨溴索后，再进一步将其降温，使其完全冻结，如果药液没有完全冻结，在真空升华干燥时，液体沸腾，造成喷瓶现象。

本发明所述的盐酸氨溴索冻干粉针的冷冻干燥过程中，由于在干燥时，水分升华的温度和时间控制，90％以上的水分除去，之后，升温干燥，可以将盐酸氨溴索冻干粉针的水分低于0.8％，并且活性药物的稳定性提高。

2、升华

药品冻结后，开动真空机抽真空至10Pa，关闭冷冻机，给药品升温使冻结品温度升至-10～-5℃；然后保温。

升华温度的选择关系到升华的速度，之所以选择-10～-5℃，而不是更高的更加接近共融点，是由于升华时，上层物料将率先干燥，如果其温度上升的过快，有可能达到坍塌温度(或称之为崩解温度)，多孔性骨架刚度降低，干燥层内的颗粒出现脱落，会封闭已干燥部分的微孔通道，阻止升华的进行，使升华速率减慢，甚至使下层部分略微萎缩，影响制品残留水分的含量，导致复溶性、稳定性和澄清度同时变差。

此外，保温时间不宜过长，这是由于本发明药液快速冻结产生的小晶体具有很高的表面能，在加热时有可能会发生再结晶，小冰晶之间相互结合形成大冰晶，使其表面积与体积之比达到最小，而大冰晶使冻干品外观不好，复溶性差。

因此，过高温度或过长时间地升华或保温，对本发明均有不利影响，经过大量实验筛选，可参见实验例3，得到升华温度为-10～-5℃，保温时间为6小时。

升华期间的压强为10Pa，而不是更低，这是因为压强低虽然有利于产品内冰的升华，但是由于压强太低时对传热不利，产品不易获得热量，升华速率反而降低。但是，当压强太高时，产品内冰的升华速率减慢，产品吸热量降减少。于是产品自身的温度上升，当高于共熔点温度时，产品将发生熔化，造成冻干失败。因此，将压强设定为10Pa，既利于热量的传递又利于升华的进行。

3、干燥

在干燥期即除去结合水的过程，在升华干燥后，还残存一部分吸附水和结合水，这些水是未被冻结的，在一次干燥中不能除去。本发明在升华干燥后，将温度在6～9小时内升温至20～25℃，维持20～25℃的时间为6小时，所得冻干产品的水分低于0.8％，本领域技术人员公知，冻干产品的水分越低，其稳定性越好。

本发明冷冻干燥工艺优选方案为：将滤液置于已降温在-20℃的冷冻箱内，初步冷冻3小时，然后再将其降到-45℃左右，抽真空，在11小时内升温至-8～-6℃，维持-8～-6℃的时间为6小时，再在7～7.5小时内升温至22～23℃，维持22～23℃的时间为6小时。

本发明的盐酸氨溴索冻干粉针中，除了甘露醇之外，没有加入其他成分，本发明人对专利CN1954808的盐酸氨溴索冻干粉针与本发明的盐酸氨溴索冻干粉针就稳定性方面做了考察，见实验例4的试验结果。

本发明中通过使用一种辅料甘露醇，这种简单组分的盐酸氨溴索粉针的主药的稳定性高，由于辅料的简单，可以最大可能的避免辅料之间的相互作用或者辅料对药物、人体的负面影响；本发明通过对盐酸氨溴索的冻干工艺的改进，使得所制得的盐酸氨溴索冻干粉的质地疏松，加水后能迅速溶解而恢复药液的原有特性，并且盐酸氨溴索的稳定性提高。同时，使得所得产品剂量可控，外观优良；包装体积小，包装材料要求低，降低了包装成本和运输成本。

具体实施方式

实施例1  每瓶含盐酸氨溴索15mg冻干粉的制备，共1000瓶。

每瓶含盐酸氨溴索15mg的冻干粉的组成：

盐酸氨溴索                15g

甘露醇                    100g

用注射用水溶解并定容至    2000mL

                                          

                          1000瓶

将盐酸氨溴索15g溶于无菌注射用水中，搅拌使其溶解，称取100g甘露醇加入上述溶液中，搅拌使溶解，加热到60℃，搅拌使其溶解，用0.1mol/L盐酸溶液及0.1mol/L氢氧化钠溶液调节溶液的pH至4.9，补加灭菌注射用水至2000mL，加入0.1％(g/mL)的活性炭，搅拌14分钟，药液再经0.22um滤膜过滤，滤液分装在西林瓶中，置于已经冷却到-20℃的冷冻干燥机中，并维持-20℃冷冻3小时，然后再将其降到-45℃，抽真空，在11小时内升温至-7℃，维持-7℃的时间为6小时，再在8小时内继续升温至20℃，维持20℃的时间为6小时，得到每瓶含盐酸氨溴索15mg的冻干粉针，水分为0.7％，在本冻干粉中加2mL的注射用水，约20秒钟即全溶，溶液无色透明。

实施例2每瓶含盐酸氨溴索15mg冻干粉的制备，共1000瓶。

每瓶含盐酸氨溴索15mg的冻干粉的组成：

盐酸氨溴索                15g

甘露醇                    150g

用注射用水溶解并定容至    2000mL

                                          

                          1000瓶

将盐酸氨溴索15g溶于无菌注射用水中，搅拌使其溶解，称取150g甘露醇加入上述溶液中，搅拌使溶解，加热到60℃，搅拌使其溶解，用0.1mol/L盐酸溶液及0.1mol/L氢氧化钠溶液调节溶液的pH至5.1，补加灭菌注射用水至2000mL，加入0.1％(g/mL)的活性炭，搅拌12分钟，药液再经0.22um滤膜过滤，滤液分装在西林瓶中，置于已经冷却到-18℃的冷冻干燥机中，并维持-18℃冷冻3小时，然后再将其降到-45℃，抽真空，在12小时内升温至-10℃，维持-10℃的时间为6小时，再在9小时内继续升温至22℃，维持22℃的时间为6小时，得到每瓶含盐酸氨溴索15mg的冻干粉针，水分为0.68％，在本冻干粉中加2mL的注射用水，约18秒钟即全溶，溶液无色透明。

实施例3  每瓶含盐酸氨溴索15mg冻干粉的制备，共1000瓶。

每瓶含盐酸氨溴索15mg的冻干粉的组成：

盐酸氨溴索    15g

甘露醇                    68g

用注射用水溶解并定容至    2000mL

                                           

                          1000瓶

将盐酸氨溴索15g溶于无菌注射用水中，搅拌使其溶解，称取68g甘露醇加入上述溶液中，搅拌使溶解，加热到60℃，搅拌使其溶解，用0.1mol/L盐酸溶液及0.1mol/L氢氧化钠溶液调节溶液的pH至4.8，补加灭菌注射用水至2000mL，加入0.1％(g/mL)的活性炭，搅拌10分钟，药液再经0.22um滤膜过滤，滤液分装在西林瓶中，置于已经冷却到-20℃的冷冻干燥机中，并维持-20℃冷冻3小时，然后再将其降到-45℃左右，抽真空，在10小时内升温至-10℃，维持-10℃的时间为6小时，再在7小时内继续升温至23℃，维持23℃的时间为6小时，得到每瓶含盐酸氨溴索15mg的冻干粉针，水分为0.74％，在本冻干粉中加2mL的注射用水，约22秒钟即全溶，溶液无色透明。

实施例4  每瓶含盐酸氨溴索10mg冻干粉的制备，共1000瓶。

每瓶含盐酸氨溴索10mg的冻干粉的组成：

盐酸氨溴索                10g

甘露醇                    75g

用注射用水溶解并定容至    2000mL

                                        

                          1000瓶

将盐酸氨溴索10g溶于无菌注射用水中，搅拌使其溶解，称取75g甘露醇加入上述溶液中，搅拌使溶解，加热到60℃，搅拌使其溶解，用0.1mol/L盐酸溶液及0.1mol/L氢氧化钠溶液调节溶液的pH至4.9，补加灭菌注射用水至2000mL，加入0.1％(g/mL)的活性炭，搅拌13分钟，药液再经0.22um滤膜过滤，滤液分装在西林瓶中，置于已经冷却到-20℃的冷冻干燥机中，并维持-20℃冷冻3小时，然后再将其降到-45℃左右，抽真空，在10小时内升温至-7℃，维持-7℃的时间为6小时，再在9小时内继续升温至20℃，维持20℃的时间为6小时，得到每瓶含盐酸氨溴索15mg的冻干粉针，水分为0.77％，在本冻干粉中加2mL的注射用水，约24秒钟即全溶，溶液无色透明。

实施例5  每瓶含盐酸氨溴索20mg冻干粉的制备，共1000瓶。

每瓶含盐酸氨溴索20mg的冻干粉的组成：

盐酸氨溴索    20g

甘露醇                    120g

用注射用水溶解并定容至    2000mL

                                          

                          1000瓶

将盐酸氨溴索20g溶于无菌注射用水中，搅拌使其溶解，称取120g甘露醇加入上述溶液中，搅拌使溶解，加热到60℃，搅拌使其溶解，用0.1mol/L盐酸溶液及0.1mol/L氢氧化钠溶液调节溶液的pH至5.1，补加灭菌注射用水至2000mL，加入0.1％(g/mL)的活性炭，搅拌14分钟，药液再经0.22um滤膜过滤，滤液分装在西林瓶中，置于已经冷却到-18℃的冷冻干燥机中，并维持-18℃冷冻3小时，然后再将其降到-45℃左右，抽真空，在11小时内升温至-8℃，维持-8℃的时间为6小时，再在7小时内继续升温至25℃，维持25℃的时间为6小时，得到每瓶含盐酸氨溴索15mg的冻干粉针，水分为0.75％，在本冻干粉中加2mL的注射用水，约22秒钟即全溶，溶液无色透明。

实验例1

本实验例是对盐酸氨溴索和甘露醇在注射用水中溶解时温度的筛选实验，其他参数及工艺参考实施例1。

表1溶解时溶液温度的筛选试验

温度(℃)	25	35	50	60	70	80
							澄明度	浑浊	乳光	澄明	澄明	澄明	乳光
溶解速度(s)	---	---	35	20	27	---
							有关物质	2.3％	1.9％	1.5％	0.7％	1.7％	2.7％

从表中实验数据可以得出，在水溶液为60℃时，所得冻干粉针的性能最好，在此温度，盐酸氨溴索与甘露醇形成稳定的可溶性络合物或可溶性复合物等。

实验例2

本实验例为活性碳浓度的筛选实验。其它组分工艺参数均同实施例1，分别选用不同浓度的注射用活性炭进行吸附，以盐酸氨溴索含量、澄清度为考察指标，筛选活性炭的用量。澄清度的检查采用《中国药典》2000年版二部澄清度检查法，结果见表2：

表2活性炭用量筛选试验

活性炭浓度(％)	盐酸氨溴索含量(％)	澄清度
			0.2	97.8	符合规定
0.1	99.0	符合规定

0.05	99.5	有乳光
			0.03	99.5	有乳光，浑浊
0	100.0	有乳光，浑浊

由表中得出，0.1％的活性炭可以使冻干液的澄清度合格，对主药吸附较小，并且污染最小，故此选用浓度为0.1％(g/ml)的活性炭进行吸附。

实验例3

本实验例为升华温度和时间的筛选实验。

表3是盐酸氨溴索冻结品冷冻干燥过程中升华温度的筛选试验，表4盐酸氨溴索冻结品冷冻干燥过程中升华时间的筛选试验。其它参数同实施例1。

表3升华温度和时间的筛选实验

参数	第一批	第二批	第三批	第四批	第五批
						升华温度(℃)	-15	-10	-5	-3	0
水分(％)	1.4	0.82	0.74	0.92	1.5
						有关物质(％)	0.6	0.7	0.6	0.7	0.7
澄明度	合格	合格	合格	乳光	浑浊
						性状	类白色疏松块状	类白色疏松块状	类白色疏松块状	分层	分层

表4升华时间的筛选

	第一批	第二批	第三批	第四批	第五批
						时间(h)	10	14	16	18	20
水分(％)	1.7	0.9	0.74	0.7	0.7
						有关物质(％)	0.6	0.7	0.6	0.7	0.7

根据表3、表4试验结果分析，在升华阶段，将温度控制在-10～-5℃、时间在16～18小时，从最终产品的各项指标均优良，虽然冷冻时间在延长，产品的性能没有明显的影响，但是从能耗角度方面考虑，冷冻18小时是最高限度。

实验例4

本实验例是利用本发明所制备的盐酸氨溴索冻干粉针与专利CN1954808盐酸氨溴索冻干粉针产品进行稳定性试验，按照常规加速试验法比较两种盐酸氨溴索冻干粉针的稳定性，本发明盐酸氨溴索冻干粉针采用实施例1的方法制备，专利CN1954808的盐酸氨溴索冻干粉针采用实施例8的方法制备，试验结果见下表。

表5本发明与专利CN1954808盐酸氨溴索冻干粉针的稳定性比较

试样	1月后纯度	2月后纯度	3月后纯度	6月后纯度
					本发明	99.6％	99.5％	99.3％	98.8％
CN1954808	99.5％	98.6％	98.2％	97.3％

实验例5

本实验例对五批本发明的盐酸氨溴索冻干粉针性能检测，具体检测方法均按照《中国药典》2000版第二部，结果见下表：

表6本发明盐酸氨溴索冻干粉针的性能检测

批次	澄明度	有关物质	主药含量	水分	无菌	细菌内毒素
							第一批	澄明	0.6％	99.8％	0.78％	符合规定	符合规定
第二批	澄明	0.5％	99.6％	0.81％	符合规定	符合规定
							第三批	澄明	0.6％	99.7％	0.80％	符合规定	符合规定
第四批	澄明	0.7％	100.2％	0.72％	符合规定	符合规定
							第五批	澄明	0.7％	99.8％	0.74％	符合规定	符合规定

在表6种可以得知，本发明所得盐酸氨溴索冻干粉针的各项性能均合格，并且有关物质的含量、水分含量均比现有技术提高。

Claims (7)

1.一种盐酸氨溴索冻干粉针，其特征在于，所述的盐酸氨溴索冻干粉针由盐酸氨溴索、甘露醇组成。

2.根据权利要求1所述的盐酸氨溴索冻干粉针，其特征在于，所述的盐酸氨溴索和甘露醇的重量比为：10～20∶90～120。

3.根据权利要求1或2所述的盐酸氨溴索冻干粉针，其特征在于，所述的盐酸氨溴索与甘露醇的重量比为15∶100。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的盐酸氨溴索冻干粉针，其特征在于，所述的盐酸氨溴索冻干粉针的制备方法为：

(1)将处方量的盐酸氨溴索加入到注射用水中，加热至60℃使之溶解，然后在上述溶液中加入甘露醇，搅拌溶解，调节溶液pH，补加灭菌注射用水至全量；

(2)在步骤(1)所配制好的溶液中加入活性炭，过滤；

(3)将步骤(2)得到的滤液冷冻干燥，在无菌条件下压盖、铝封，即得。

5.根据权利要求4所述的盐酸氨溴索冻干粉针，其特征在于，所述的步骤(2)中活性炭的用量为溶液体积的0.1％。

6.根据权利要求4所述的盐酸氨溴索冻干粉针，其特征在于，所述的冷冻干燥过程中，将滤液置于已降温在-18～-20℃的冷冻箱内，初步冷冻3小时，然后再将其降到-45℃左右，抽真空，在10～12小时内升温至-10～-5℃，维持-10～-5℃的时间为6小时，再在6～9小时内升温至20～25℃，维持20～25℃的时间为6小时。

7.根据权利要求6所述的盐酸氨溴索冻干粉针，其特征在于，所述的冷冻干燥过程中，将滤液置于已降温在-20℃的冷冻箱内，初步冷冻3小时，然后再将其降到-45℃左右，抽真空，在11小时内升温至-8～-6℃，维持-8～-6℃的时间为6小时，再在7～7.5小时内升温至22～23℃，维持22～23℃的时间为6小时。