CN101196464A - 一种激光双模式微体积样品分析方法及所用装置 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种基于激光热透镜和激光回射干涉技术的激光双模式微体积样品分析方法及所用装置，通过对经液相分离后的各组份，在所用激光波长下，激光热透镜检测模式可检测具有吸光特性物质的信号，激光回射干涉检测模式可检测不具有荧光和吸光特性物质的信号。本发明无须对样品进行任何样品衍生、富集处理步骤。由于待测样品池为微检测池，所需样品量极少，最低可至纳升级。本发明所用装置操作简单，日常维护费用低，测试速度快，结果准确，可以广泛应用于包含有各类不同化学物质的待测体系的定性、定量检测。

Description

一种激光双模式微体积样品分析方法及所用装置
技术领域
本发明涉及微体积样品分析方法及所用装置，尤其是一种利用激光热透镜、激光回射干涉技术进行同时检测微体积样品的分析方法及所用装置，属于光学领域，也属于分析化学仪器领域。
背景技术
液相分离分析仪器是近年来发展最为迅速的一类分析仪器，它包括高效液相色谱(HPLC)，毛细管电泳(CE)，离子色谱，超临界流体色谱(SFC)和微流控芯片等仪器，这类仪器具有高效、快速、样品用量和试剂消耗量少等特点。可用于无机、有机和生物大分子的分离分析，在科学研究和生产领域得到了广泛的应用。
分离效率和灵敏度是衡量这类仪器的重要技术指标，这些指标既取决于所用色谱柱或毛细管柱的性质，同时也受制于检测器的性能。研究和开发适用于液相分离分析仪器的微池检测器已成为这类仪器研制的热门领域。紫外吸收检测器是这类仪器中使用最为广泛的一类微池检测器，由于采用二极管阵列或CCD器件作光探测器，可实现紫外/可见光谱的快速扫描，在色谱或电泳分离的同时得到从190到800nm的实时紫外/可见光谱，从而实现对未知成分的定性和已知物的测定。由于微池检测器的光程较短，使得紫外吸收检测器的灵敏度难以提高，而且很难用于目前蓬勃发展的芯片电泳检测。电化学检测器也是在液相分离分析商品仪器中使用较广的一类检测器，它可避免紫外吸收检测器光程较短的不足，在电活性组分的检测上具有灵敏度高，选择性好和线性范围宽等优点，其局限性在于被检测物质必须具有良好的电化学活性，应用于电泳检测时难以消除分离电流对检测电流的干扰，仅能进行柱后和离柱检测，因而成为一种实用性强的商品化电泳仪器的在柱检测器尚待时日。与其它检测技术相比，质谱检测(MS)与液相分离分析仪器联用可获得分离组分的结构信息，一直是众多仪器厂商青睐的对象。目前HPLC-MS、CE-MS、SFC-MS联用商品化仪器已推向市场，但仪器复杂和昂贵，其联用接口和灵敏度仍需进一步完善和提高。基于物质折射指数变化进行检测的折射指数检测器已用作HPLC等仪器的检测器，这种检测器通用性好，但灵敏度不高。已见文献报道的化学发光、核磁共振、毛细管共振等各种检测器也都不同程度的存在灵敏度不足的问题。因而发展灵敏度高和通用性强的检测器仍是液相分离分析仪器研制的重要课题。
一般来说，激光相干性好，易聚焦成微束，特别适用于微体积样品的测定，因而基于激光优良特性的各类激光检测器的研制和应用已成为液相分离分析仪器检测器研究的热门领域。激光诱导荧光检测器是激光类检测器中灵敏度最高并已成为商品化毛细管电泳仪器的一种微池检测器。它的灵敏度比紫外吸收检测器高2～3个数量级，但只有极少数化合物在激光激发下可产生自身荧光，大多数化合物需采用荧光标记或衍生后方可分析。基于弱光吸收检测的激光热透镜检测器测量的不是透射，反射或散射光，而是直接测量光的吸收，与紫外吸收检测器相比，灵敏度可提高2个数量级以上，在非荧光和弱吸收物质的检测中体现出高灵敏，高空间分辨率的优点。激光拉曼光谱检测器也见报道，但检测灵敏度不高仍是这类检测器面临的严峻现实。目前，激光类检测器多为单信号检测，尚未见多信号同时检测器用于液相分离分析的仪器的报道，并且除激光诱导荧光检测器外，其它激光光信号检测器尚未成为液相分离分析商品仪器的检测器。
液相分离分析仪器的分析对象(特别是生物样品)，往往是含有多种物质的复杂***。这类样品既含有蛋白质、核酸等生物大分子，又含有多巴胺、氨基酸等小分子，并且这些分子的荧光和吸收特性各异。准确测定它们的种类和含量，对于生命科学研究和临床诊断意义十分重大。然而由于商品检测器的限制，难以同时获取大分子和小分子以及具有和不具有荧光和吸光特性物质的信息。因此，探索同时对具有和不具有荧光和吸光特性的各类物质进行灵敏检测的多信号检测器将极大拓展液相分离分析商品仪器的应用的空间。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术之不足，提供一种基于激光诱导荧光、激光回射干涉技术的激光双模式微体积样品分析方法及所用装置，对经液相分离后的各组份，在所用激光波长下，激光热透镜检测模式检测具有吸光特性物质的信号，激光回射干涉检测模式检测不具有荧光和吸光特性物质的信号，并使其光学构型和信号采集模式对液相分离组份达到同时获取激光热透镜和激光回射干涉的光信号。
实现本发明目的采用的技术方案：一种基于激光诱导荧光、激光回射干涉技术的激光双模式微体积样品分析方法，包括以下步骤：
1)将毛细管电泳仪中去除外保护层的一段毛细管作为微检测池，将毛细管的两端分别浸没于缓冲溶液承载池和缓冲溶液承载池的缓冲溶液液面下，直流高压电源的正负极分别通过圆柱形铂电极分别浸没于缓冲溶液承载池和缓冲溶液承载池的缓冲溶液液面下，进样时用装有样品的样品池取代其中一个缓冲溶液承载池，然后利用电驱动或者压差进行进样操作，进样完毕后将原缓冲溶液承载池还原至原本位置，然后打开直流高压电源输出一定的直流高压，使毛细管电泳仪通电，在直流高压电源的作用下，不同的微体积样品电泳趟度不同，导致不同的微体积样品将以不同速度向毛细管运动，不同的化学物质依次通过被剥离外防护层的毛细管区域即微检测池；
2)将半导体激光器射出的激光光束先后经过斩光器和偏振片的调制后，在分束器与热透镜检测激光器发出的激光耦合成同一道激光束，所得的耦合光束在透过分束器后被聚焦透镜聚焦于微检测池的中心处，透射过微检测池的耦合激光束经过高通滤光片滤去泵浦激光束，再由光电检测器件进行检测得到激光热透镜检测原始信号，由激光散射所产生的回射散射光由分束器反射至垂直方向并产生肉眼可见的规整干涉条纹，经过光阑的调制后由光电检测器件进行检测得到激光回射干涉检测原始信号，将所得激光热透镜和激光回射干涉两种检测模式下的原始信号分别通过锁相放大解析后得到更加灵敏的两种检测模式下的检测信号，将所得检测信号由数据采集卡导入计算机得到实时数据图线，由实时数据图线实现对微体积样品的分析测定。
上述基于激光热透镜、激光回射干涉技术的激光双模式微体积样品分析方法所用检测装置，至少包括光学检测调制部分、毛细管电泳部分和信号采集处理部分，光学检测调制部分中的半导体激光器、斩光器、偏振片、分束器、分束器、聚焦透镜、微检测池、高通滤光片和光电检测器件依次排列，且中心均位于同一水平线，分束器垂直方向设有热透镜检测激光器，分束器通过光阑与光电检测器件连接，其中微检测池为毛细管电泳仪中去除外保护层的一段毛细管；信号采集处理部分中的计算机与光电检测器件之间设有锁相放大器，计算机和光电检测器件之间设有锁相放大器，斩光器上设有斩光器控制器，且斩光器控制器通过锁相放大器和光电检测器件与计算机连接。斩光器控制器将锁相参比信号提供给锁相放大器，经过锁相放大过程，锁相放大器分别提供激光热透镜信号、激光回射干涉信号，然后为计算机所采集，从而实现对微体积样品的分析测定。
所述的微检测池由光透过率高的材质如玻璃、有机玻璃、石英等制成，其形状为立方体或圆柱体，且内径大于75微米。
所述的光电检测器件为光二极管、光电倍增管、光电耦合器件或二极管阵列。
所述的半导体激光器为各波段激光器，光束光能大于20毫瓦。
所述的热透镜检测激光器为各波段激光器，光束波长大于半导体激光束波长。
所述的激光热透镜检测信号的光电检测器件与毛细管电泳仪中的样品池之间的距离需大于或等于150毫米。
所述的聚焦透镜为双凸透镜，其焦距大于9毫米且小于15.4毫米，最佳焦距为11毫米。
本发明所提供的激光多模式微体积样品分析方法与液相分离方法相结合对待测微体积样品进行分离检测，无须对样品进行任何样品衍生、富集处理步骤。由于待测样品池为微检测池，所需样品量极少，最低可至纳升级。本发明所用装置操作简单，日常维护费用低，测试速度快，结果准确，可以广泛应用于包含有各类不同化学物质的待测体系的定性、定量检测。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
图1是本发明激光双模式微体积样品分析方法所用装置的光学结构示意图。
图2是激光热透镜、激光回射干涉激光双模式微体积样品分析方法所用电泳仪***结构示意图。
图3是本发明激光双模式微体积样品分析方法所用装置的信号采集部分结构示意图。
图中：1.半导体激光器，2.斩光器，3.偏振片，4.分束器，5.热透镜检测激光器，6.分束器，7.光阑，8.光二极管，9.聚焦透镜，10.微检测池(剥离外防护层的毛细管)，11.高通滤光片，12.光二极管，13.毛细管，14.直流高压电源，15.缓冲溶液承载池、16.样品池，17.缓冲溶液承载池，18.斩光器控制器，19.锁相放大器，20.锁相放大器，21.计算机。
具体实施方式
本发明基于激光热透镜、激光回射干涉技术的激光双模式微体积样品分析方法所用检测装置的光学结构如图1所示，至少包括光学检测调制部分、毛细管电泳部分和信号采集处理部分，其中光学检测调制部分中的半导体激光器1、斩光器2、偏振片3、分束器4、分束器6、聚焦透镜9、微检测池10、高通滤光片11和光电检测器件12依次排列，且中心均位于同一水平线，分束器4垂直方向设有热透镜检测激光器5，分束器6通过光阑7与光电检测器件8连接，其中微检测池10为毛细管电泳仪中去除一段外保护层的毛细管；信号采集处理部分中的计算机21与光电检测器件8之间设有锁相放大器19，计算机21和光电检测器件12之间设有锁相放大器20，斩光器2上设有斩光器控制器18，且斩光器控制器18通过锁相放大器19和光电检测器件12与计算机21连接。其中半导体激光器1为可选用各波段激光器，光束光能大于20毫瓦。斩光器2的工作频率为5Hz至1000Hz；分束器4和分束器的分束比为5∶5，其分束波段分别对应于半导体激光和热透镜检测激光的波段；热透镜检测激光器可选用各波段激光器，其光束波长大于半导体激光束波长；光电检测器件8和光电检测器件12为光二极管、光电倍增管、光电耦合器件、二极管阵列；聚焦透镜9为双凸透镜，其焦距大于9毫米而小于15.4毫米，最佳焦距为11毫米；1微检测池0为光透过率高的材质如玻璃、有机玻璃、石英等制成，其形状为立方体或圆柱体，其内径大于75微米；高通滤光片11波段的选择应根据半导体激光和热透镜检测激光的波段情况予以选择，其截止波段高于半导体激光的波段；偏振片3和光阑7无严格要求，各技术参数之产品皆可满足要求；激光热透镜检测信号的光电检测器件与样品池之间的距离要大于或等于150毫米。
半导体激光器1所射出的激光光束经过斩光器2和偏振片3的调制后，在分束器4处与热透镜检测激光器5所射出的激光光束耦合成同一道激光束，所得耦合光束在透过分束器6后被聚焦透镜9聚焦于微检测池10的中心处；透射过样品池的耦合激光束经过高通滤光片11滤去泵浦激光束，然后再由光电检测器件12进行检测得到激光热透镜检测模式原始信号；样品池处由于散射所产生的回射散射光经分束器6反射至垂直方向并产生肉眼可见的规整干涉条纹，经过光阑7的调制后由光电检测器件8进行检测得到激光回射干涉检测模式原始信号。
本发明基于激光热透镜、激光回射干涉技术的激光双模式微体积样品分析方法所用毛细管电泳仪构成如图2所示。毛细管13的两端分别浸没于缓冲溶液承载池15和缓冲溶液承载池17的缓冲溶液液面下。直流高压电源14的正负极分别与圆柱形铂电极相连，两支电极分别浸没于缓冲溶液承载池的缓冲溶液液面下。进样时用装有微体积样品的样品池16取代其中一个缓冲溶液承载池15，然后利用电驱动或者压差进行进样操作。在毛细管13上适当的位置处将毛细管的外保护层除去(采用明火烧蚀或利刃刮除的方式皆可)，将毛细管剥离外防护层的一段作为微检测池10，从而实现激光多模式微检测池检测器对毛细管电泳动态过程的实时检测。其中毛细管13为各种外径参数的毛细管皆可，内径大于等于75微米；高压直流电源14，其最高输出电压应大于20千伏；缓冲溶液承载池15、缓冲溶液承载池17，样品池16，其材质需选用绝缘体。
本实施例信号采集过程如图3所示。信号采集处理部分中的计算机21与光电检测器件8之间设有锁相放大器19，计算机21和光电检测器件12之间设有锁相放大器20，且斩光器控制器18通过锁相放大器19和光电检测器件12与计算机21连接。在图2所述的电泳仪进行电泳过程中从光电检测器件8、光电检测器件12得到流动体系的激光回射干涉检测原始信号和激光热透镜检测原始信号。然后将两种信号分别导入锁相放大器19、锁相放大器20，结合从斩光器控制器18导入的参比信号，通过锁相放大处理得到背景噪声更低的激光热透镜检测待采集信号、激光回射干涉检测待采集信号。通过个人计算机21附带的数字采集卡对上述的三种待采集信号进行采集，得到对应于实时变化的数据图线，从而根据实时数据图线实现对微体积样品的分析测定。
具体检测过程：
首先将毛细管13依次用0.1mol/LNaOH溶液、二次蒸馏水及缓冲溶液冲洗，在缓冲溶液承载池15、缓冲溶液承载池17中充满缓冲溶液，并将毛细管13的两端分别浸没于缓冲溶液承载池15和缓冲溶液承载池17的缓冲溶液液面下。直流高压电源14的正负极分别与圆柱形铂电极相连，两支电极分别浸没于缓冲溶液承载池15和缓冲溶液承载池17的缓冲溶液液面下。
在开始电泳过程前约半小时，将半导体激光器1、斩光器2、热透镜检测激光器5、光电检测器件8、光电检测器件12、锁相放大器19、锁相放大器20、斩光器控制器18、计算机21通电直至所得信号相对稳定。
进样时用装有微体积样品样品池16取代其中一个缓冲溶液承载池15，然后利用电驱动或者压差进行进样进样操作一定时间，进样完毕后将原缓冲溶液承载池15还原至原本位置，然后打开直流高压电源14输出一定的直流高压。通电后，在直流高压电源14的作用下，不同的化学物质电泳趟度不同，导致不同的化学物质将以不同速度向毛细管13末端运动。经过一定时间，不同的化学物质依次通过被剥离外防护层的毛细管区域10，然后利用本发明所提供的激光双模式微体积样品分析方法所用检测装置进行检测，从光电检测器件8、光电检测器件12处分别得到对应于各不同化学物质的激光回射干涉检测原始信号、激光热透镜检测原始信号(皆为数百毫伏大小的电压数据)，然后经过锁相放大处理过程，分别为数据采集卡采集导入计算机21，从而实现了对待测体系实时电泳分离过程的检测。所得图线中各峰对应的出现顺序是各不同化学物质定性测量的依据，各峰对应的峰高或者峰面积是各不同化学物质定量测量的依据。
以下公开一组具体实施测试结果：
半导体激光器1激光波段为532nm。分束器4选用波段532nm，分束比为5∶5的分束器。热透镜检测激光器5选用632.8nm，2毫瓦氦氖激光器，分束器6选用波段632.8nm，分束比为5∶5的分束器。光电检测器件8和光电检测器件12选用光二极管，聚焦透镜9选用双凸聚焦透镜，其焦距为11毫米。高通滤光片11选用截止波长600nm，截止宽度20nm的高通滤光片。毛细管13长度40厘米，内径100微米；除去毛细管的外保护层区域即微检测池10离毛细管13尾端5厘米。将12.5mol/L硼砂溶液作为缓冲溶液，进样电压和分离电压均为9KV，进样8秒，检测时间约15分钟，在除去外保护层的毛细管微检测池10处，依次分离出多巴氨、苋菜红(未经任何样品富集或者衍生处理)，采用本发明提供的基于激光热透镜、激光回射干涉的激光双模式微体积样品分析方法所用检测装置得到两幅分别对应激光热透镜检测信号、激光回射干涉检测信号的图线。依据多巴氨、苋菜红被分离的顺序和峰面积的大小，检测出待测样品中这些化学物质的浓度，这两种化学物质的检出限：多巴氨为5.0×10-6mol/L，苋菜红为2×10-9mol/L。

Claims (10)

1.一种激光双模式微体积样品分析方法，其特征在于包括以下步骤：1)将毛细管电泳仪中去除外保护层的一段的毛细管(13)作为微检测池(10)，将毛细管(13)的两端分别浸没于缓冲溶液承载池(15)和缓冲溶液承载池(17)的缓冲溶液液面下，直流高压电源(14)的正负极分别通过圆柱形铂电极分别浸没于缓冲溶液承载池(15)和缓冲溶液承载池(17)的缓冲溶液液面下，进样时用装有样品的样品池(16)取代其中一个缓冲溶液承载池，然后利用电驱动或者压差进行进样操作，进样完毕后将原缓冲溶液承载池还原至原本位置，然后打开直流高压电源(14)输出一定的直流高压，使毛细管电泳仪通电，在直流高压电源的作用下，不同的微体积样品电泳趟度不同，导致不同的微体积样品将以不同速度向毛细管(13)运动，使样品中不同的化学物质依次通过被去除外防护层的毛细管区域即微检测池(10)；
2)将半导体激光器(1)射出的激光光束先后经过斩光器(2)和偏振片(3)的调制后，在分束器(4)与热透镜检测激光器(5)发出的激光耦合成同一道激光束，所得的耦合光束在透过分束器(6)后被聚焦透镜(9)聚焦于微检测池(10)的中心处，透射过微检测池(10)的耦合激光束经过高通滤光片(11)滤去激光束，再由光电检测器件(12)进行检测得到激光热透镜检测原始信号，由激光散射所产生的回射散射光由分束器(6)反射至垂直方向并产生肉眼可见的规整干涉条纹，经过光阑(7)的调制后由光电检测器件(8)进行检测得到激光回射干涉检测原始信号，将所得激光热透镜和激光回射干涉两种检测模式下的原始信号分别通过锁相放大解析后得到更加灵敏的两种检测模式下的检测信号，将所得检测信号由数据采集卡导入计算机得到实时数据图线，由实时数据图线实现对微体积样品的分析测定。
2.根据权利要求所述的激光双模式微体积样品分析方法，其特征在于：所用光电检测器件(8)和光电检测器件(12)为光二极管、光电倍增管、光电耦合器件或二极管阵列。
3.权利要求1所述激光双模式微体积样品分析方法所用装置，至少包括光学检测调制部分、毛细管电泳部分和信号采集处理部分，其特征在于：光学检测调制部分中的半导体激光器(1)、斩光器(2)、偏振片(3)、分束器(4)、分束器(6)、聚焦透镜(9)、微检测池(10)、高通滤光片(11)和光电检测器件(12)依次排列，且中心均位于同一水平线，分束器(4)垂直方向设有热透镜检测激光器(5)，分束器(6)通过光阑(7)与光电检测器件(8)连接，其中微检测池(10)为毛细管电泳仪中毛细管(13)去除外保护层的一段；信号采集处理部分中的计算机(21)与光电检测器件(8)之间设有锁相放大器(19)，计算机(21)和光电检测器件(12)之间设有锁相放大器(20)，斩光器(2)上设有斩光器控制器(18)，且斩光器控制器(18)通过锁相放大器(19)和光电检测器件(12)与计算机(21)连接。
4.根据权利要求3所述激光双模式微体积样品分析方法所用装置，其特征在于：微检测池(10)由光透过率高的材质制成，其形状为立方体或圆柱体，且内径大于75微米。
5.根据权利要求3或4所述激光双模式微体积样品分析方法所用装置，其特征在于：微检测池(10)为玻璃、有机玻璃、石英制成。
6.根据权利要求3所述激光双模式微体积样品分析方法所用装置，其特征在于：光电检测器件为光二极管、光电倍增管、光电耦合器件或二极管阵列。
7.根据权利要求3所述激光双模式微体积样品分析方法所用装置，其特征在于：半导体激光器(1)为各波段激光器，光束光能大于20毫瓦。
8.根据权利要求3所述激光双模式微体积样品分析方法所用装置，其特征在于：热透镜检测激光器(5)为各波段激光器，光束波长大于半导体激光束波长。
9.根据权利要求3所述激光双模式微体积样品分析方法所用装置，其特征在于：光电检测器件(12)与毛细管电泳仪中的样品池(16)之间的距离大于或等于150毫米。
10.根据权利要求3所述激光双模式微体积样品分析方法所用装置，其特征在于：聚焦透镜(9)为双凸透镜，其焦距大于9毫米且小于15.4毫米，最佳焦距为11毫米。
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Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102374979A (zh) * 2010-08-06 2012-03-14 中国科学院烟台海岸带研究所 一种石油类污染物探测***及检测方法
CN102680407A (zh) * 2012-06-15 2012-09-19 合肥知常光电科技有限公司 一种基于激光阵列诱导表面热形变效应的成像方法及装置
CN102692394A (zh) * 2012-06-15 2012-09-26 合肥知常光电科技有限公司 一种基于热透镜效应的二维成像方法及装置
CN103424389A (zh) * 2013-07-25 2013-12-04 华南师范大学 一种测量荧光粉的pl光谱及ple光谱的测试***
CN103940787A (zh) * 2013-01-17 2014-07-23 中国科学院生物物理研究所 双波长量化相位成像和荧光成像联合***
CN104034697A (zh) * 2014-06-25 2014-09-10 天津大学 一种制造表面粗糙度影响激光测量性能的试验装置及方法
CN110470639A (zh) * 2019-08-22 2019-11-19 合肥利弗莫尔仪器科技有限公司 一种基于激光诱导光热效应的多模式扫描显微镜成像***

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102374979B (zh) * 2010-08-06 2014-08-13 中国科学院烟台海岸带研究所 一种石油类污染物探测***及检测方法
CN102374979A (zh) * 2010-08-06 2012-03-14 中国科学院烟台海岸带研究所 一种石油类污染物探测***及检测方法
CN102680407A (zh) * 2012-06-15 2012-09-19 合肥知常光电科技有限公司 一种基于激光阵列诱导表面热形变效应的成像方法及装置
CN102692394A (zh) * 2012-06-15 2012-09-26 合肥知常光电科技有限公司 一种基于热透镜效应的二维成像方法及装置
CN102680407B (zh) * 2012-06-15 2014-07-02 合肥知常光电科技有限公司 一种基于激光阵列诱导表面热形变效应的成像方法及装置
CN102692394B (zh) * 2012-06-15 2015-03-11 合肥知常光电科技有限公司 一种基于热透镜效应的二维成像方法及装置
CN103940787B (zh) * 2013-01-17 2016-03-30 中国科学院生物物理研究所 双波长量化相位成像和荧光成像联合***
CN103940787A (zh) * 2013-01-17 2014-07-23 中国科学院生物物理研究所 双波长量化相位成像和荧光成像联合***
CN103424389A (zh) * 2013-07-25 2013-12-04 华南师范大学 一种测量荧光粉的pl光谱及ple光谱的测试***
CN103424389B (zh) * 2013-07-25 2016-06-22 华南师范大学 一种测量荧光粉的pl光谱及ple光谱的测试***
CN104034697A (zh) * 2014-06-25 2014-09-10 天津大学 一种制造表面粗糙度影响激光测量性能的试验装置及方法
CN110470639A (zh) * 2019-08-22 2019-11-19 合肥利弗莫尔仪器科技有限公司 一种基于激光诱导光热效应的多模式扫描显微镜成像***
CN110470639B (zh) * 2019-08-22 2024-05-28 合肥利弗莫尔仪器科技有限公司 一种基于激光诱导光热效应的多模式扫描显微镜成像***

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