CN101124325A - 开花时间的调节子、用其转化的转基因植物以及调控开花时间的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及从稻中分离的开花时间和/或茎伸长的调节子，所述调节子选自OsMADS50、OsMADS51、OsMADS56、OsMADS14、OsTRX1、OsVIN2、OsCOL4和OsCOL8；本发明还涉及含有该调节子的DNA构建体、转基因植物、转基因植物的部分以及用该DNA构建体转化的植物细胞；本发明还涉及使用该调节子控制开花时间和/或茎伸长的方法。根据本发明可以控制开花时间和/或茎伸长，由此可获得各种农业上的益处。

Description

开花时间的调节子、用其转化的转基因植物以及调控开花时间的方法
技术领域
本发明涉及开花时间和/或节间伸长的调节子、用该调节子转化的转基因植物以及在植物中调节开花时间和/或茎伸长的方法。
背景技术
植物的生长期通常包括营养生长期和生殖生长期。从营养生长向生殖生长的转变受到多种开花信号的影响。开花信号也受到多种因素的影响，例如遗传因素例如基因型，以及环境因素例如光周期和光强度等等(Dunget al.，1998；Yamamoto et al.，1998)。生长期的转变会引起植物形态学上的各种变化，从科学的角度来看这是一种很有意思的现象。而且，由于调节开花可以带来经济效益，因此对于开花机制已经进行了多项研究。
具体而言，对于拟南芥(Arabidopsis)的分子遗传学研究表明了开花的调节基因的功能以及它们之间的相互关系，阐明了开花的信号传导途径。在拟南芥中，开花受到外部信号(例如光、温度、光周期等等)和内部信号(例如营养条件、激素等等)的影响。开花途径通常包括光周期依赖性途径、春化作用依赖性途径、GA(赤霉素)依赖性途径和内源途径。
据报道，稻的开花时间主要受光周期依赖性途径和内源途径的控制(Yamamoto et al.，1998)。最近，分离并鉴定了稻中的被认为参与了光周期依赖性途径的一些基因，在一定程度上表征了光周期依赖性途径(Yanoet al.，2001 Mouradov et al.，2002)。首先，鉴定了一些参与控制光周期敏感性的特异性基因座，例如Se(光周期敏感性)1(Se1)、Se3-Se7以及EE1-E3(Poonyarit et al.，1989；Sano，1992；Tsai，1995；Yokooet al.，1980；Yokoo和Okuno，1993)。此外，通过使用分子水平标记的数量性状基因座(QTL)分析，检测到了几十种参与控制抽穗期(headingdate)的基因座，例如Heading date 1(Hd1)、Heading date 6(Hd6)、Heading date 3a(Hd3a)等(Li et al.，1995；Lin et al.，1996，1998；Maheswaran et al.，2000；Yano et al.，1997；Xiao et al.，1995)。
在上述基因中，Se5、Hd1、Hd6和Hd3a分别是拟南芥中的LONGHYPOCOTYL1(HY1)、CONSTANS(CO)、CASEINKINASE 2(CK2)和FLOWERING LOCUST(FT)的对应物，预计它们具有与其在拟南芥中的对应物相似的生物化学功能。
然而在某些情况下，稻和拟南芥中的上述基因对于光周期表现出不同的反应。拟南芥的CO基因是一种参与长日照(LD)促进途径以激活开花的基因。在稻中有几个CONSTANS的直向同源物，其中Hd1(Heading datel )基因调节开花时间。稻的Hd1基因编码一种含有锌指结构域和核定位信号的蛋白质，Hd1基因在短日照(SD)条件下可提高Hd3a基因的表达以激活开花，而它在LD条件下会降低Hd3a基因的表达以抑制开花(Izawa et al.，2002)。拟南节中的CO基因是稻Hd1基因的直向同源物，它在长日照条件下提高FT基因(稻Hd3a的直向同源物)的表达以激活开花。然而，CO在短日照条件下并不起开花抑制物的作用(Putterill et al.，1995)。对于这种因植物种类而产生的不同光周期反应的分子水平的理解，有望为理解LD植物和SD植物之间的差异提供线索。
虽然已发现了例如上述基因的开花相关基因，但在数量上还是很少。
而且，对于可区别于拟南芥基因的稻特异性基因目前还知之甚少，对于长日照特异性开花调节子和控制内源途径(该途径与光周期途径不同)的调节子也知之甚少。由于开花时间是确定种植季节和地区适应性的关键性状，而且通过控制开花时间可以获得丰厚的农业收益，因此有必要阐明稻中的开花时间调节途径并找到参与该途径的基因。
本发明人鉴别出了稻中的有用的开花调节子并研究了它们的特征，从而实现了本发明。在本发明中，发现了以前未知的开花调节子，还发现了它们在稻中的特异性分化的功能。
发明内容
本发明的目的是找到稻中参与调节开花时间的基因以及它们起作用的条件，以便获得农业上的益处。
为实现这一目的，本发明人从T-DNA***的稻种系中筛选出了表现出早开花或晚开花表型的稻突变种系，并分析了所筛选出的突变种系的基因型，以分离出稻的开花时间调节子，包括拟南芥的开花时间调节子(例如AGL20、CONSTANS等)的对应物，还通过附加的转化分析阐明了所分离的调节子的功能和起作用的条件，从而完成了本发明。此外，还发现一些调节子可以刺激稻的节间伸长。预计稻的开花时间调节子在其它与稻在发育上同源的单子叶植物(例如玉米、大麦、小麦等)中也能呈现出类似的作用。
更具体而言，本发明提供：1)开花时间调节子和/或节间伸长调节子；2)由上述调节子编码的开花时间调节蛋白；3)构建体，其中上述调节子过表达或抑制；4)用上述构建体转化的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞；5)制备上述转基因植物的方法；以及6)使用上述调节子调节开花时间和/或节间伸长的方法。
本发明提供一种参与开花时间和/或节间伸长的调节机制的调节子。
在本发明中，从带有T-DNA标签的转基因植物中筛选开花时间有所改变的突变种系，例如具有早开花或晚开花表型的突变种系，还分析了与***的T-DNA相邻区域的核苷酸序列，从而找到了下述的一些开花时间调节子。
这类开花时间调节子中的一种为Oryza stavis的MADS50基因(下文称为“OsMADS50”)，它是稻的MADS-box基因的一种。它的核苷酸序列示于SEQ ID NO：1。
所述调节子是使用其特异性引物对，通过PCR方法从NCBI(国家生物技术信息中心，National Center for Biotechnology Information)数据库中登记的编号为No.AB003328的基因中分离出来的。对分离出的调节子的核苷酸序列进行了分析，并将该调节子命名为OsMADS50。OsMADS50是一种MADS-box基因，并且是一种常规的MIKC[(MAPS、间插型、角蛋白样和C-端结构域)]型MADS-box基因。OsMADS50基因的基因组DNA的序列已被登记，编号为No.AC098695。OsMADS50基因位于3号染色体上，具有七(7)个外显子和六(6)个内含子(见图2a以及a lvarez-Buyalla et al.，2000；Lee et al.，2003)。在稻中存在的MIKC型MADS-box蛋白中(Leeet al.，2003)，OsMADS50蛋白与OsMADS56蛋白的同源性最高(60.8％)。
发现OsMADS50是稻中的开花激活物(加速因子)，它作为拟南芥的SURPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1/AGAMOUS-LIKE 20(SOC1/AGL20)在稻中的直向同源物起作用。OsMADS50的这种使开花提前的作用通过下述事实表现：在以下种系中开花延迟：OsMADS50基因敲除(KO)种系(其中OsMADS50的功能被T-DNA的***等抑制)，OsMADS50 RNAi(干扰)种系(其中OsMADS50区域或者OsMADS50中存在的MADS-box的全部或部分M、I、K和C结构域都缺失)，或者经修饰的种系(其中全部或部分上述结构域通过核苷酸替换等修饰)；而在含有在植物中可操作的强启动子(例如肌动蛋白、细胞色素C或玉米泛蛋白(ubi)的启动子)的OsMADS50过表达种系(例如ubi：OsMADS50)中，在愈伤组织阶段开花明显提前。
在本发明中，可通过下述方式诱导基因的过表达：将植物中可操作的强启动子(例如肌动蛋白启动子、细胞色素C启动子或玉米泛蛋白(ubi)启动子(Pubi)等)与基因可操作地连接，或者将含有增强子的DNA片段***至合适的位点。可通过下述手段进行基因的抑制：可***至植物基因中的外源基因例如T-DNA，内源转座子例如TOS17，由X射线或γ射线辐照诱导的突变，或者通过RNAi或其它反义方法。上述的过表达方法和抑制方法也可以应用于本发明的基因。
对OsMADS5O KO、OsMADS50 RNAi和ubi：OsMADS50植物进行的分析表明OsMADS50为OsMADS1、OsMADS14、OsMADS15、OsMADS18和Hd3a的上游调节子，它参与稻中的开花机制。这一结果表明OsMADS5O基因对稻的开花的调节不是通过独立和直接的途径进行，而是通过控制参与稻开花机制的多个基因以一种更基本的方式进行。
此外，还观察到OsMADS50抑制种系表现出比野生型种系更明显的节间伸长，这表明OsMADS50基因不但控制开花时间还控制茎伸长。也就是说，在本发明中，观察到具有被抑制的OsMADS50基因的突变种系表现出开花晚而节间延长的表型，由此证明OsMADS50基因不但参与开花时间的控制还参与茎伸长。
此外，还观察到在具有被抑制的OsMADS50基因的突变种系中，开花时间仅在长日照条件下被延迟，这表明OsMADS50基因是在长日照条件下起作用的开花激活物。
除了OsMADs50基因之外，还分离了以过表达或抑制方式起作用的开花时间调节子OsMADS51、OsMADS56、OsTRX1和OsVIN2基因。
OsMADS51基因在NCBI数据库中登记为编号No.AB003327(SEQ ID NO：3)。已经知道了该基因的器官依赖性表达特征，但是还不知道它的功能(Shinozuka et al.，1999)。OsMADS51基因的基因组DNA的序列被登记为编号No.AP008207。在本发明中，发现的OsMADS51基因是一种以过表达或抑制方式改变开花时间的基因，并且是通过PCR分离的。在本发明中，发现在OsMADS51过表达种系中，在野外条件下开花时间提前了1至2周，在OsMADS51基因敲除种系中，在短日照条件下开花时间被延迟(见图11)，说明OsMADS51基因也是一种开花时间调节子。
还分离和表征了另一种以过表达或抑制方式改变开花时间的基因一-OsMADS56基因，它在NCBI中的登记编号为No.AY345224(SEQ ID NO：5)。OsMADS56基因的基因组DNA的序列被登记为编号No.AC092697。在本发明中，在OsMADS56过表达突变株中，开花时间延迟了1至2周。当对光周期条件进行控制时，在短日照条件下开花时间没有改变，而在长日照条件下开花时间延迟了大约一个月(见图12)。
还研究了另一种通过T-DNA***导致的抑制而改变开花时间的基因--OsTRX1和OsVIN2基因，它们的核苷酸序列分别示于SEQ ID NO：7(OsTRX1)和SEQ ID NO：9(OsVIN2)。这些基因的基因组序列已分别被登记为编号No.AP008215(OsTRX1)和AP008208(OsVIN2)。在本发明中，OsTRX1基因敲除种系在野外条件下开花时间至少延迟了-个月。在OsVIN2基因敲除种系中，在长日照条件下开花时间延迟了大约32天，在短日照条件下开花时间延迟了大约10天。这些结果表明OsTRX1和OsVIN2基因也起开花调节子的作用(见图13)。
还研究了另一种通过T-DNA***导致的抑制而改变开花时间的基因--OsCOL4(Oryza sativa CONSTANS Like4)基因。OsCOL4基因的核苷酸序列(SEQ ID NO：11)是通过稻基因组计划(Rice Genome Project)而获知的。已知该基因是拟南芥的CONSTANS基因在稻中的同源物，但是它的功能还不清楚。它的基因组DNA序列被登记为编号No.AP004063。
在本发明中，OsCOL4激活的突变种系(通过过表达等诱导)表现出开花时间延迟的表型，与野生型相比可延迟15天或更长(见图14)；而OsCOL4抑制的突变种系表现出开花时间提前的表型，与野生型相比可提前大约10天。这些结果表明OsCOL4基因作为开花抑制物起作用。OsCOL4基因仅具有抑制开花的功能，对于营养性生长例如茎伸长并没有影响。在对OsCOL4被修饰的突变株的开花时间由于光周期条件所发生的改变进行研究时，发现OsCOL4过表达的突变株与野生型种系相比在长日照和短日照条件下均表现出晚开花表型，而OsCOL4被抑制的突变株与野生型相比在长日照和短日照条件下均表现出早开花表型。这些结果表明不论光周期条件如何，OsCOL4基因在稻中均起开花抑制物的作用。
在本发明的一个实施方案中，可以使用OsCOL4基因的启动子区域中***的T-DNA中的35S增强子来诱导OsCOL4基因的激活(见图15和16)，或通过与OsCOL4基因可操作地连接的泛蛋白(ubi)启动子来诱导OsCOL4基因的激活(见图17)。可通过向OsCOL4基因的第一外显子或3’UTR区域中***T-DNA来诱导OsCOL4基因的抑制(见图18)。
现已知有许多植物的开花调节子，它们中的大多数是开花时间激活物，只有少数几个是开花抑制物。因此，开花抑制物例如OsMADS56和OsCOL4的发现是很有价值的。在激活开花的过程中，开花抑制物被抑制的突变株比开花激活物过表达的突变株在遗传上更稳定。此外，OsCOL4被抑制的突变株可通过转化以外的方法获得，例如由通过稻的内源转座子Tos17的突变获得，因此，可以避免遗传修饰生物(GMO)的问题。
还研究了另一种开花调节子OsCOL8(Oryza sativa CONSTANS Like 8)，它是稻中存在的CONSTANS样基因，它和小麦中的通过春化处理控制开花时间的VRN2基因类似。OsCOL8基因的核苷酸序列(SEQ ID NO：13)是通过稻基因组工程而被发现的，但是它的功能还不清楚。该基因的基因组DNA序列被登记为编号No.AC079874。在本发明中，发现OsCOL8被抑制的突变株在长日照条件下并不表现出对开花时间的改变，而在短日照条件下表现出晚开花表型。这些结果表明OsCOL8基因在短日照条件下是植物中的开花激活物。
本发明的开花调节子可以彼此独立的起作用。此外，每种调节子通过与另一种具有相似或相反调节活性的调节子共同作用以产生对开花调节作用的补偿效应或协同效应，从而可更有效地控制开花时间。
除了上述基因之外，还研究了另一种开花调节子OsMADSI4。OsMADS14基因的基因组DNA序列和cDNA序列分别示于SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16。已知拟南芥的APETALA1(AP1)基因参与花器的形成和开花时间的调节。已知在水稻中至少存在4个作为AP1样基因的基因。这4个基因分别被命名为OsMADS14、OsMADS1、OsMADS18和OsMADS20。其中OsMADS14基因是作为OsMADS6蛋白的相互结合伴侣的编码基因而被最先克隆的，已知该基因的过表达会诱导早开花，但是这种功能的具体机制和条件还不清楚。
在本发明中，观察到T-DNA或Tos17被***到OsMADS14基因中的突变株在开花时间和花发育方面并未表现出值得注意的改变(见图21)。这一结果表明，除了OsMADS14基因以外，其他基因也足以起到调节开花时间的作用。对OsMADS14蛋白进行修饰，使得在OsMADS14的MADS-box中存在的M、I、K(KI、KII、KIII、KIV)和C结构域中，含有C结构域的末端缺失，这种经修饰蛋白的过表达导致在短日照条件下开花提前了大约一个月，而在长日照条件下导致开花延迟大约两周。可以通过使OsMADS14基因的含有C结构域编码序列的3’末端区域缺失并表达该基因，从而得到C结构域缺失的不完整OsMADS14蛋白。在本发明的一个实施方案中，可以通过在K结构域和C结构域之间***一个终止密码子而获得C结构域缺失的不完整OsMADS14蛋白。C结构域编码区域缺失的OsMADS14基因的核苷酸序列示于SEQ ID NO：17，由此所编码的C结构域缺失的不完整OsMADS14蛋白的氨基酸序列示于SEQ ID NO：18。上述结果表明C结构域缺失的不完整OsMADS14蛋白在短日照条件下激活开花时间，而它在长日照条件下通过与开花激活物相互作用而抑制开花。
在与稻相似的单子叶植物玉米、小麦等中，稻的OsMADS50、OsMADS51、OsMADS556、OsMADS14、OsTRX1、OsVIN2、OSCOL4和OsCOL8的对应物也有望作为开花和/或茎伸长的调节子起作用。
本发明的另一方面提供了由下述基因编码的开花调节性蛋白：OsMADS50、OsMADS51、OsMADS56、截短型OsMADS14(其中含有C结构域编码序列的3’末端区域缺失)、OsTRX1、OsVIN2、OSCOL4或OsCOL8基因。所述开花调节性蛋白可具有选自下列序列的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14和SEQ ID NO：18。
本发明的另一方面提供了含有过表达的或被抑制的开花调节子的DNA构建体。
所述DNA构建体可含有被抑制的OsMADS50、OsMADS51、OsMADS56、OsMADS14、OsTRX1或OsVIN2基因。更具体而言，所述DNA构建体可含有通过外源基因的***所诱导的OsMADS50、OsMADS51、OsMADS56、OsMADS14、OsTRX1或OsVIN2基因的基因敲除变体。例如，DNA构建体可含有一种基因敲除变体，其中可***至植物基因的DNA片段例如T-DNA被***至OsMADS50、OsMADS51、OsMADS56、OsMADS14、OsTRX1或OsVIN2基因的特定位点。特别地，对于OsMADS50，T-DNA可被***至六个内含子中的第四(4th)内含子中(见图2a)。或者，本发明的DNA构建体可含有通过使完整的或部分的OsMADS50、OsMADS51或OsMADS56基因缺失或对其进行核苷酸置换而形成的被抑制的OsMADS50、OsMADS51、OsMADS56或OsMADS14基因，优选地使至少含有MADS-box区域的部分缺失或对其进行核苷酸置换。
本发明的DNA构建体还可含有过表达的OsMARS50、OsMADS51、OsMADS56、OsTRX1或OsVIN2基因。在本发明的一个实施方案中，DNA构建体可含有过表达的OsMADS50、OsMADS51、OsMADS56、OsTRX1或OsVIN2基因，其中上述基因与植物中的可操作的强启动子可操作地连接，所述强启动子例如肌动蛋白启动子、细胞色素C启动子和玉米泛蛋白(ubi)启动子。
本发明的DNA构建体可含有截短型OsMADS14基因，该基因通过含有C结构域编码序列的3’末端区域的缺失产生C结构域缺失的不完整OsMADS14蛋白。含有C结构域编码序列的3’末端区域缺失的截短型OsMADS14可与植物中可操作的强启动子连接，以诱导该基因的过表达。
DNA构建体可含有过表达的OsCOL4基因。在本发明的一个实施方案中，可通过与强启动子如肌动蛋白启动子、细胞色素C启动子、玉米泛蛋白(ubi)启动子等可操作地连接来诱导OsCOL4的过表达，或可通过将可***至植物基因的DNA片段例如T-DNA***至OsCOL4基因的启动子中来诱导dsCOL4的过表达，其中***基因的增强子(例如T-DNA的35S增强子)诱导该基因的过表达。本发明的DNA构建体可含有被抑制的OsCOL4基因。
在本发明的一个实施方案中，可通过将可***至植物基因的DNA片段例如T-DNA***至OsCOL4基因的特异位点中来抑制OsCOL4基因，更具体而言，可通过将T-DNA***至第一外显子或3’UTR区域来抑制OsCOL4基因。
本发明的DNA构建体可含有过表达的OsCOL8基因。在本发明的一个实施方案中，可通过与强启动子例如玉米泛蛋白(ubi)启动子可操作地连接来过表达OsCOL8基因。此外，本发明的DNA构建体可含有被抑制的OsCOL8基因。在本发明的一个实施方案中，可通过将可***至植物基因的DNA片段例如T-DNA***至OsCOL8基因的特异位点中来抑制OsCOL8基因，更具体而言，可通过将T-DNA***至第一外显子区域来抑制OsCOL8基因。
本发明的另一方面提供了一种转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞，其中如上所述地直接诱导开花时间调节子的过表达或抑制，或者其中用含有过表达的或被抑制的开花时间调节子的DNA构建体进行转化。
用于植物、植物的一部分或植物细胞的转化的载体并没有限制。可用于植物转化的任何常规载体都可使用，更具体而言，可以使用pGA1611家族的二元载体。
更具体而言，本发明的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞中可存在如上所述地被直接诱导的OsMADS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因的过表达，或者本发明的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞被DNA构建体转化，所述DNA构建体含有被诱导过表达的OsMADS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因，由此使开花时间提前。在本发明的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞中，可如上所述地直接诱导OsMADS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因的抑制，或者用DNA构建体进行转化，所述DNA构建体含有被抑制的OsMADS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因，由此延迟开花时间。
在本发明的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞中，可如上所述地直接诱导OsMADS56或OsCOL4基因的过表达，或者用DNA构建体进行转化，所述DNA构建体含有过表达的OsMADS56或OsCOL4基因，由此延迟开花时间。在本发明的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞中，可如上所述地直接诱导OsMADS56或OsCOL4基因的抑制，或者用DNA构建体进行转化，所述DNA构建体含有被抑制的OsMADS56或OsCOL4基因，由此使开花时间提前。
本发明的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞可用含有C结构域编码区域缺失的OsMADS14基因的DNA构建体进行转化，以产生C结构域缺失的不完整OsMADS14蛋白，由此在长日照条件下延迟开花时间，在短日照条件下使开花时间提前。
在本发明的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞中，可以直接诱导OsMADS50基因的抑制，或者用含有被抑制的OsMADS50基因的DNA构建体转化，从而使得该转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞表现出比野生型更显著的茎伸长。
本发明的另一方面提供一种调节开花时间和/或茎伸长的方法，所述方法通过如上所述地诱导调节子的过表达或抑制而进行。
本发明的调节开花时间的方法可包括诱导OsMADS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因的抑制以延迟开花时间的步骤。更具体而言，本发明的调节开花时间的方法可包括直接诱导OsMADS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因的抑制以延迟开花时间的步骤，所述直接诱导可通过外源基因的***或基因缺失或用含有被抑制的OsMADSS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因的DNA构建体转化而进行。例如，可以通过将可***至植物基因的DNA片段例如T-DNA***至OsMADSS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因的特异位点来诱导上述基因的抑制。例如，对于OsMADS50基因可将T-DNA***至六个内含子中的第四内含子，对于OsCOL8基因可将T-DNA***至第一个外显子，以抑制上述基因。
或者，可以通过缺失OsMADS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因的完整基因或部分基因来诱导上述基因的抑制。例如，对于OsMADSS50、OsMADS50或OsMADS51基因，至少要缺失MADS-box区域才能抑制基因。
本发明的调节开花时间的方法可含有下述步骤：如上所述地用含有被抑制的OsMADS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因的DNA构建体转化植物，以延迟植物的开花时间。
此外，本发明提供了一种刺激茎伸长的方法，所述方法是通过将外源基因***至OsMADS50基因中或通过缺失完整的或部分的OsMADS50基因从而诱导该基因的抑制而进行的。
本发明的调节开花时间的方法可包括诱导OsMADS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因的过表达以激活开花的步骤。例如，本发明的调节开花时间的方法可包括通过将植物中可操作的强启动子与OsMADS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因可操作地连接以诱导过表达从而使开花时间提前的步骤。本发明的调节开花时间的方法可包括用含有过表达的OsMADS50、OsMADS51、OsTRX1、OsVIN2或OsCOL8基因的DNA构建体转化植物以使开花时间提前的步骤，其中上述基因与上述强启动子可操作地连接。所述强启动子包括肌动蛋白启动子、细胞色素C启动子、玉米泛蛋白(ubi)启动子等。
本发明的调节开花时间的方法可包括诱导OsMADS56或OsCOL4基因的过表达以抑制开花的步骤，或者诱导OsMADS56或OsCOL4基因的抑制以激活开花的步骤。
更具体而言，本发明的调节开花时间的方法可包括如下步骤：通过将OsMADS56或OsCOL4基因与强启动子可操作地连接，或者通过将可***至植物基因组的含有增强子的外源基因***至OsMADS56或OsCOL4基因的启动子区域，从而诱导OsMADS56或OsCOL4基因的过表达以抑制开花。例如，本发明的调节开花时间的方法可包括如下步骤：通过将OsMADS56基因与玉米泛蛋白(ubi)启动子可操作地连接以诱导OsMADS56的过表达，或者通过将含有35S增强子的T-DNA***至OsCOL4基因的启动子区域以诱导OsCOL4基因的过表达，从而抑制开花。本发明的调节开花时间的方法可包括如上所述地用含有过表达的OsMADS56或OsCOL4基因的DNA构建体转化植物以抑制开花的步骤。
本发明的调节开花时间的方法可包括通过使OsMADS14基因的含有C结构域编码序列的3’末端区域缺失而诱导C结构域缺失的不完整OsMADS14蛋白的过表达的步骤，以便在长日照条件下延迟开花时间，在短日照条件下使开花时间提前。
本发明的调节开花时间的方法可包括如下步骤：通过将可***至植物基因的外源基因***至OsMADS56或OsCOL4基因的特异位点，从而诱导OsMADS56或OsCOL4基因的抑制，以激活开花。更具体而言，本发明的调节开花时间的方法可包括如下步骤：通过将T-DNA***至OsCOL4基因的第一外显子或3’UTR区域来诱导OsCOL4基因的抑制，以激活开花。本发明的调节开花时间的方法可包括如上所述地用含有被抑制的OsMADS56或OsCOL4基因的DNA构建体转化植物以激活开花的步骤。
本发明的调节开花时间的方法可包括诱导OsMADS14基因的过表达，以便在短日照条件条件下使开花提前和在长日照条件下延迟开花的步骤。
可以通过过表达C末端区域缺失的不完整OsMADS14蛋白的方式实行OsMADS14基因的这种过表达。
本发明的另一方面提供一种用于制备开花时间被调节的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞的方法，所述方法包括用含有过表达的或被抑制的开花时间调节子的DNA构建体进行转化的步骤。本发明的制备方法包括如下步骤：提供一种植物细胞；用上述DNA构建体转化该植物细胞；以及培养转化的细胞。开花时间调节子可选自通过上述的方法过表达的或被抑制的OsMADS50、OsMADS51、OsMADS56、OsMADS14、OsTRX1、OsVIN2、OsCOL4和OsCOL8。转化的植物细胞可按照细胞进行培养，或通过常规的诱导组织分化的方法分化为特定的组织，或发育为植物体。
本发明的调节开花时间的方法或制备转基因植物的方法也可以应用到稻以外的单子叶植物，例如玉米和小麦，其中可以使用稻的OsMADS50、OsMADS51、OsMADS56、OsMADS14、OsTRX1、OsVIN2、OsCOL4和OsCOL8基因的对应物。
附图说明
图1显示T-DNA***至OsMADS50基因中形成的突变株(T/T)和野生型对照(W/W)。
图2显示OsMADS50 KO(基因敲除)植物的因子、表型和开花时间，其中(a)显示OsMADS50的结构和其中的T-DNA***位置；(b)显示被抑制的、T-DNA***的T2(第二代)植物的表型。
图3显示对用OsMADS550 RNAi(干扰)载体转化的转基因植物进行分析的结果，其中(a)显示OsMADS50RNAi载体的结构；(b)显示稻T1(第一代)的开花时间的分布；(c)显示稻T1植物伸长的节间的数量分布。
图4显示对OsMADS50 RNA干扰作用的分析结果，其中(a)显示内源表达OsMADS50和外源RNAi基因的表达情况的RNA凝胶印迹结果；(b)显示内源表达OsMADS50的RT-PCR结果。
图5显示对OsMADS50过表达的突变株的分析结果，其中(a)显示OsMADS50过表达载体的结构；(b)至(e)显示稻T1植物的表型；(f)显示OsMADS3和OsMADS4在类花器中的表达情况。
图6显示OsMADs50和其他开花调节子的表达情况的结果，其中(a)显示OsMADS50在不同器官中的表达情况；(b)显示开花时间调节子在叶的不同发育阶段的表达情况。
图7显示对开花调节子在OsMADS50 KO突变株和OsMADS50过表达的突变株中的表达改变的分析结果，其中(a)显示OsMADS50 KO突变株的RT-PCR结果；(b)显示以上(a)中所得的RT-PCR结果的示意图；(c)显示在OsMADS50过表达的突变株中进行RT-PCR的结果。
图8为显示OsMADS50 KO植物在长日照条件和短日照条件下的开花时间的图。
图9显示开花时间调节子在OsMADS50 KO植物中的表达模式。
图10显示OsTRX1 KO植物的晚开花表型。
图11为显示OsMADS51 KO植物的开花时间延迟的图。
图12为显示OsMADS56过表达的植物的开花时间延迟的图。
图13为显示OsVIN2 KO植物的开花时间延迟的图。
图14显示OsCOL4过表达的植物的晚开花表型。
图15为显示含有35S增强子的T-DNA***至OsCOL4的启动子区域的示意图。
图16为显示OsCOL4过表达的电泳结果。
图17为显示OsCOL4过表达的植物的晚开花表型的图。
图18为显示OsCOL4被抑制的植物的早开花表型的图。
图19显示OsCOL4被抑制的植物在长日照、短日照和野生条件下的开花时间的改变。
图20显示OsCOL8被抑制的植物在长日照和短日照条件下开花时间的改变。
图21显示含有T-DNA***物的OsMADS14的结构及其表达情况。
图22显示OsMADS50 cDNA的核苷酸序列(SEQ ID NO：1)。
图2 3显示OsMADS51 cDNA的核苷酸序列(SEQ ID NO：3)。
图24显示OsMADS56 cDNA的核苷酸序列(SEQ ID NO：5)。
图25显示OsTRX1 cDNA的核苷酸序列(SEQ ID NO：7)。
图26显示OsVIN2 cDNA的核苷酸序列(SEQ ID NO：9)。
图27显示OsCOL4 cDNA的核苷酸序列(SEQ ID NO：11)。
图28显示OsCOL8 cDNA的核苷酸序列(SEQ ID NO：13)。
图29A至29F显示OsMADS14的基因组DNA的核苷酸序列(SEQ ID NO：15)。
图30A显示dsMADS14 cDNA的核苷酸序列(SEQ ID NO：16)。
图30B显示截短型OsMADS14的核苷酸序列(SEQ ID NO：17)，其中所述OsMADS14基因缺失了含有C结构域编码序列的3’末端区域。
实施例
<实施例1>在T-DNA标记种系中对开花时间突变株的第一次筛选。
用Ti质粒二元载体pGA2144处理稻细胞(Oryza sativa var.japonicacv.Dongjin诱导的愈伤组织)(Jeon et al.，The Plant Journal(2000)22(6)，561-570)，以构建***了T-DNA的T1(第一代)突变种系。根据“Jeon et al.2000b”所述，使用Ti质粒二元载体pGA2144进行处理。
也就是说，将稻细胞与重组质粒转化脓杆菌共培养，以便使T-DNA转化至稻细胞中，使用抗生素筛选被T-DNA转化的细胞并进行再分化。使得到的2933个T1突变种系在田间发育，以产生T2(第二代)转基因植物，筛选其中表现出开花时间改变的突变种系。观察到有二十五(25)个种系的开花时间与野生型种系相比变化了至少两周，其中有16个种系表现早开花表型，9个种系表现晚开花表型。
图1显示T-DNA被***至OsMADS50基因中的OsMADS50基因敲除(KO)植物和野生型(WT)植物的表型比较。该图拍摄于WT植物开花的时候。然而当时OsMADS50 KO植物还没开花。
为分析开花时间突变株的基因型，使用“An et al.2003，”中报道的反向PCR方法分析了T-DNA***区域附近区域的核苷酸序列，其中用限制性酶切割基因组DNA，把两端连在一起后进行两次PCR，以鉴定T-DNA***区域附近区域的核苷酸序列。然后，使用国家生物技术信息中心(NCBI)数据库确认T-DNA的***位点。结果显示，在图1右侧显示的一个种系(0-153-43种系)中，检索序列为MADS-box基因OsMADS50，T-DNA的***位点在OsMADS50的第四内含子(见图2a)。OsMADS50蛋白显示出与拟南芥的开花激活物SOC1/AGL20具有50.6％的氨基酸序列同一性。在稻中存在的36种MIKC(MAPS、间插型、角蛋白样和C末端结构域)型MADS-box蛋白中，OsMADS50蛋白与OsMADS56的同源性最高(60.8％)，它与下列蛋白也具有同源性，分别为：玉米ZmMADS1(75.2％)、烟草TobMADS1(51.1％)和芥菜SaMADSA(50.0％)。同源性是通过全长蛋白序列的比对计算得到的。
如图1所示，在T-DNA被***至OsMADS50基因的突变种系(T/T)中，开花时间与野生型(W/W)对照的相比延迟了大约一个月。因为认为OsMADS50基因是拟南芥的开花时间调节子AGL20的对应物，所以认为由OsMADS50突变引起的开花延迟是有意义的结果。
如图2a所示，OsMADS50是一种MADS-box基因，位于3号染色体上，包括六个内含子和编码一种典型的MIKC型MADS-box蛋白的七个外显子。在本实施例中的T-DNA***种系中，T-DNA被***至第四内含子中，T-DNA中的β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因的转录方向与OsMADS50的相反。
由图2a可见，使用定位于OsMADS50和T-DNA的引物通过PCR测定了T2植物的基因型。使用引物F2(I区域中的正向引物：5’-aaagctgacgctgatggttt-3’，SEQ ID NO：23)和R1(3’UTR处的反向引物：5’-ttgggtaccgagatccagct tattcctgg-3’，SEQ ID NO：22)，通过PCR确认了正常OsMADS50基因(W)的扩增，使用引物F2和R2(潮霉素磷酸转移酶(hph)中的反向引物)通过PCR确认了T-DNA***的OsMADS5D基因(T)的扩增。
结果显示，在13株植物中，有3株为T-DNA***的纯合型(T/T)(见图2b，样本4、10和13)。这几株植物都在种植后约99天时开花。而其他的T2植物均为杂合型(W/T)或野生型(W/W)分离株，在种植后约73天开花。
图2为OsMADS50的示意图，显示T-DNA***的位置和OsMADS50 KO子代的基因型。图2a显示OsMADS50结构和T-DNA***情况。显示了七个外显子(实心框)和六个内含子(实心框之间的线)。在图2a中，M、I、K和C区域表示外显子。K区域由四个外显子组成，而其他每个区域各包含一个外显子。T-DNA被***至第四内含子中。箭头表示引物。F1为5’UTR处的正向引物，F2为I区域中的正向引物，R1为3’UTR处的反向引物，R2为T-DNA中的潮霉素磷酸转移酶(hph)基因中的反向引物。
图2b显示OsMADS50 KO子代的基因型。如果未发生T-DNA***，F2和R1引物应扩增出1.6 kb的基因组DNA。如果发生了T-DNA***，则两个引物之间的长度就会非常大而无法被扩增出来。而且，当T-DNA被***至第四内含子时，F2和R2引物应扩增出约2kb的条带。样本2、3、5、11和12中仅扩增出了基因组DNA，因此认为它们是野生型(W/W)；样本4、10和13是从晚开花突变株上获得的，它们仅扩增出了2kb的条带，因此认为它们是纯合型(T/T)；其它样本中显示上述两条带都被扩增出来，因此认为它们是杂合型(W/T)。每株植物在种植之后至抽穗的天数都在图中示出。
由此可见，所有的晚开花植物仅包含T-DNA***的OsMADS50(T/T)，正常开花的植物含有至少一个正常的OsMADS50基因(W)。因此，可以确定T-DNA***可诱导晚开花突变。
<实施例2>OsMADS50基因的分离
上述OsMADS50基因的核苷酸序列示于SEQ ID NO：1。OsMADS50基因的核苷酸序列在NCBI数据库中还被登记为编号No.AB003328。然而，仅仅知道该基因在不同器官中的表达情况，还不知道它的功能(Shinozuka etal.，1999)。本发明的发明人在此设计了两对特异性引物对，使用该引物对通过PCR分离了该基因，并将该基因命名为OsMADS50。对该基因进行的第一次PCR使用的引物对具有SEQ ID NO：19(F1：5’UTR处的正向引物：5’-atcaagcttt acggccaaac cctacagc-3’)和SEQ ID NO：20(R1：3’UTR处的反向引物：5’-ttgggtaccg atgggtagtg gagtctgc-3’)的核苷酸序列，然后，使用上述PCR扩增产物作为模板，用与PCR产物中存在的核苷酸序列SEQ ID NO：21(5’-atcaagcttg ttggttcatc ggcgatcg-3’))和SEQ ID NO：22(5’-ttgggtaccg agatccagct tattcctgg-3’)相应的引物对进行PCR，以扩增所需基因。含有S11905的完整编码区域和邻近区域的PCR扩增产物被HindIII-BamH I(Roche)切割，并被克隆至pBluescriptSK(-)载体(Stratagene)中。通过测序仪(AbI3100)确定其核苷酸序列，将所得的基因命名为OsMADS50。这一基因存在于登记号为AP004322的克隆中，位于3号染色体的短臂上，并且该基因座与已知为Hd9的突变的基因座相同(Lin et a1.，2000)。
<实施例3>OsMADS50 RNA干扰(RNAi)植物的分析
为确认晚开花表型是由OsMADS50基因表达的抑制导致的，通过表达图3所示的基因的RNAi构建体而形成了转基因植物。将MADS-box缺失的OsMADS50基因反向克隆至pBluescript SK(-)载体(Stratagene)的GUS基因两侧，然后再***至pGAl611载体(AY373338)中的玉米泛蛋白启动子(Pubi)和nos终止子(Tnos)之间的位置。在82株T1植物中，有76株表现出晚开花表型，开花延迟至少一个月(图3b)。六株植物在种植后74至78天开花，这与野生型对照和转基因植物对照相似；有八株植物直到种植后140天才开花。上述结果表明OsMADS50基因是一种重要的开花激活物。
除了晚开花表型之外，转基因植物还具有伸长更长的节间(图3c)。相反地，大多数OsMADS50RNAi植物具有六个(23.5％)至七个(62.7％)伸长的节间，而还有一些植物(13.7％)具有八个伸长的节间。与之相比，野生型(WT)和转基因对照(CON)植物具有五个至六个伸长的节间。上述结果表明OsMADS50 RNAi植物不但表现出晚开花表型，还表现出节间伸长的表型。
图3为OsMADS50 RNAi构建体和表达该RNAi构建体的转基因植物表型的示意图。图3a显示OsMADS50 RNAi构建体，该构建体在OsMADS50的两个IKC区域之间***了一个GUS间隔物。将该构建体***至玉米ubi启动子(Pubi)和nos终止子(Tnos)之间。图3b显示OsMADS50 RNAi T1转基因植物抽穗前天数即从移栽到开花所需的天数的频率分布。野生型(WT)和其他转基因对照植物在种植后74至78天开花。有九个种系直至种植后140天才开花。图中双斜线表示在X轴的两个值之间有很大的间隔。
图3c显示在OsMADS50 RNAi植物和WT对照中伸长节间的数目比例。该值是从63株WT、152株转基因对照植物和102株OsMADS50RNAi植物中平均得来。Y轴表示具有4个至8个伸长节间的茎的相对比例。
RNA凝胶印迹分析显示，在表现晚开花表型的转基因植物中存在的OsMADS50 RNAi转录物的水平很高。由于表达如此之高，因此很难在印迹中观察内源OsMADS50转录物的水平。因此，使用RT-PCR分析来证实OsMADS50表达的抑制(图4b)。在晚开花转基因植物中，转录物水平(通过F1/R1引物证实)明显降低。上述结果表明OsMADS50表达的减少导致稻植物的开花延迟。由于RNAi植物9和植物10开花比植物6至植物8更晚，因此认为开花的延迟程度与RNAi的水平成比例。
图4为OsMADS50 RNA干扰作用的分析，显示了OsMADS50 RNAi植物中内源OsMADS50的水平。图4a为对表达OsMADS50 RNAi构建体的转基因植物中OsMADS50和OsMADS50RNAi转录物的RNA凝胶印迹分析结果，结果显示在OsMADS50 RNAi转基因植物中OsMADS50 RNAi基因有很强的表达。检测了五株WT植物(1至5)和五株独立的转基因植物(6至10)。转基因植物6、7、8、9和10分别在种植后111、115、115、130和135天开花。
观察到的rRNA水平作为对照(底部)。“RNAi”指的是OsMADS50RNAi转录物；“sense”指的是内源OsMADS50转录物。图4b显示对WT植物(1至5)和转基因植物(6至10)中OsMADS50和OsMADS50RNAi转录物的RT-PCR分析结果。将从RNA凝胶印迹分析中分离的相同RNA反转录以合成cDNA。
用于检测全长OsMADS50的引物对为F1(SEQ ID NO：2)/R1(SEQ ID NO：5)，示于图2a。使用肌动蛋白作为对照。用于扩增OsMADS50和肌动蛋白的PCR循环次数分别为26次和23次。使用F1/R1引物对进行的RT-PCR分析结果显示，在OsMADS50RNAi转化体中内源表达的OsMADS50基因被抑制。
<实施例4>对OsMADS50过表达的植物的分析
为进一步研究OsMADS50在开花时间方面的功能作用，生产了如图5a所示的过表达该基因的有义构建体的转基因稻植物。使用玉米ubi启动子来驱动组成型表达。也就是说，使用分别具有SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3的序列的引物对扩增OsMADS50基因的整个编码区域，用HindIII-Asp718(Roche)切割，将其克隆至pBluescript SK(-)载体(Stratagene)中以确认核苷酸序列，并将其***至pGA1611载体(AY373338)的泛蛋白启动子和nos终止子之间。
当将转化的愈伤组织转移到芽诱导培养基(MRS培养基)上时，大约20％的愈伤组织发育为能组成花器的结构，例如内稃/外稃(图5b)、柱头(图5b)、雄蕊(图5c)、子房(图5c)和圆锥花序(图5d)。偶尔还能观察到包含所有花器的小穗。虽然有大约80％的愈伤组织发育为芽，但是它们中有三分之二表现出非常矮小和叶片生长缺陷的表型(图5e)。上述植物最终均死亡。剩余三分之一的芽分化为正常植物。其中有一些开花比对照要早，另一些与WT植物同时开花。
为检测在转基因植物愈伤组织中观察到的花器样结构是否确实具有繁殖能力，测定了花特异性MADS-box基因OsMADS3和OsMADS4的转录物水平。OsMADS3为C功能基因(参与雄蕊和雌蕊的发育)，OsMADS4为B功能基因(参与花萼和雄蕊的发育)。这些基因在ubi：OsMADS50转基因植物愈伤组织发育成的花器中有特异性表达，表明它们是可靠的。
图5显示对ubi：OsMADS50植物的分析结果。图5a为OsMADS50有义构建体的示意图(Pubi：玉米ubi启动子；Tnos：nos终止子)。图5b显示具有内稃/外稃(p/l)样和柱头(s)样结构的再生芽。图5c显示具有雄蕊(st)样和子房(o)样结构的再生芽。图5d显示具有圆锥花序(p)样结构的再生芽。图5e显示表现矮小和叶片生长缺陷的再生芽。图5f显示在花器样结构中OsMADS3和OsMADS4的表达情况(对照叶：用空载体转化的叶；50S叶：过表达OsMADS50的转基因植物叶；50S花：过表达OsMADS50的花器样结构)。使用肌动蛋白作为对照。如RT-PCR结果所示，在花器中特异性表达的OsMADS3和OsMADS4基因在花样结构的50S花中表达增加。
相反地，在对照叶和转基因植物叶(50S叶)中没有检测到上述基因的表达。
<实验实施例1>对包括OsMADS50在内的开花时间调节子的表达分析
RNA凝胶印迹分析显示，OsMADS50在大多数器官中有不同程度的表达(图6a)。为进行分析，选择了幼苗根、幼苗芽、9至10片叶阶段的嫩叶片(LB)、80 DAP(种植后天数)的叶片、105 DAP的叶片、105 DAP的旗叶片、长度小于2cm的圆锥花序和10cm至20cm之间的圆锥花序。在幼苗阶段检测到的该基因水平很低，随着植物成熟转录物逐渐增加。在幼小的圆锥花序中初始的表达较低，并且随着这些器官的成熟继续降低。在叶器官中该基因表达很强。对四个发育阶段的叶所进行的半定量RT-PCR分析证实了RNA凝胶印迹分析的结果(图6b)。在全部四个阶段中都检测到了OsMADS50转录物，并且49天的植物比20天的植物中的表达水平略有升高。Hd3a、OsMADS14、OsMADS15和OsMADS18的转录物的水平逐渐提高，在80天时达到最大值。
图6显示OsMADS50和其他开花时间调节子的表达情况。图6a显示RNA凝胶印迹分析的结果，在每一样本中使用15μg的总RNA，使用OsMADS50的KC区域作为探针。图底部是对照核糖体RNA。从左向右依次为：发芽7天后的幼苗根和幼苗芽、9至10片叶阶段的嫩叶片(LB)(种植后35天；DAP)、80DAP的LB、105DAP的LB、105DAP的旗叶片、长度小于2cm的圆锥花序和10cm至20cm之间的圆锥花序。植物在90DAP时开花。图6b显示在各个发育阶段对推测的开花时间调节子的RT-PCR分析结果。WT植物在短日照条件(10h光照/14h黑暗，30℃)下在人工气候箱(growthchamber)中生长，在20、49、80和113DAP时采集LB样本。所有样本在光源打开6小时后采集。开花时间为种植后87天。
表达分析表明该基因在植物发育早期起作用，在营养性器官中大量表达，但是在花器形成期间就降低至相当低的水平。
<实验实施例2>在OsMADS50被抑制或过表达的植物中对包括OsMADS50在内的开花时间调节子的表达分析
为进一步研究OsMADS50的作用，分析了OsMADS50 KO突变株和OsMADS50过表达的植物的表达的改变，结果示于图7。在实施例1中制备的OsMADS50 KO植物中，对Hd1、Hd3a和OsGI进行了RT-PCR分析，它们都是在光周期途径中控制开花时间。还检测了四种有可能参与的MADS-box基因(OsMADS1、OsMADS14、OsMADS15和OsMADS18)。在这些实验中，Hd1和OsGI在OsMADS50基因敲除植物中的表达没有改变(图7)。值得注意的是，在OsMADS50KO突变株中检测不到Hd3a转录物，表明Hd3a是在OsMADS50的下游。在OsMADS50KO突变植物中，所有MADS-box基因的表达水平都显著下降，但是OsMADS18转录物的下降程度不如其他基因明显。
检测了再生的ubi：OsMADS50植物的叶中的调节基因的表达水平(图7c)。这些植物在转移到再生培养基几周以后开花。与KO植物相反，OsMADS14和OsMADS18转录物的水平在ubL：OsMADS50植物中提高，而OsMADS1、OsGI和Hd1的转录物水平没有明显变化。OsMADS15和Hd3a的表达水平过低，以至于检测不到它们的转录物的任何变化。
图7显示MADS-box基因和光周期途径基因在OsMADS50KO和ubi：OsMADS50叶中的表达情况。图7a显示对OsMADS50KO叶的RT-PCR分析结果。在种植后73天，在日落前2小时从KO植物上采集叶片。在RT-PCR之后，使用特异性探针进行DNA凝胶印迹分析。检测了两株独立的WT分离株和两株独立的OsMADS50KO植物。图7b显示对OsMADS50KO植物的RT-PCR结果的示意图。测量了DNA条带的强度并针对肌动蛋白转录物水平进行了标准化。结果为对每株植物进行三次独立实验的平均值。两株WT植物和两株KO植物的平均值分别用条柱和标准差表示。图7c显示在ubi：OsMADS50植物中的表达情况。从过表达OsMADS50的转基因植物和对照植物上采集叶片，并通过定量RT-PCR分析测定基因的转录物水平。数据为两个至三个独立样本的平均值。Con：用空载体转化的T1对照；5OS：Ubi：OsMADS50叶，分别用条柱和标准差表示。扩增每个基因所使用的PCR引物和循环次数列于下表1。
表1PCR分析中使用的引物和循环次数
基因 正向引物 反向引物   50KO的PCR循环次数a   50S的PCR循环次数b
  OsMADS1OsMADS14OsMADS15OsMADS18OsMADS50OsG1Hd1Hd3a乳动蛋白   tccatatgtcctggcaagattcctatgcagaaaaggtccttgctcttatttcagctgaaccaaactggatgcacttcagaaagctgacgctgatggtttgtggagaaaggttgtggatgcttctcctctccaaagattccatggccggaagtggcagggacgtatccatgagactacatacaact   aagagagcacgcacgtacttggacgaagccaaaatatacactcatatgtagcctgtaggatcaatatcgctggaagatgttgggtaccgagatccagcttattcctgggatagacggcacttcagcagatcatacgcctttcttgtttcaatcgatcgggatcatcgttagtactcagccttggcaatccaca   283636232323283623   323636322626263626
a OsMADS50KO植物和野生分离株所用的PCR循环次数。
b ubi：OsMADS50植物和野生对照所用的PCR循环次数。
在对OsMADS50 KO突变株进行的RT-PCR中，观察到OsMADS1、OsMADS14、OsMADS15、OsMADS18和Hd3a的表达比野生型(WT)的显著降低，而未观察到Hd1和OsGI的表达有明显变化。此外，在对OsMADS50过表达的突变株进行的RT-PCR中，观察到OsMADS14和OsMADS18的表达提高，而未观察到OsMADS1、OsMADS15、Hd3a、Hd1和OsGI的表达有明显变化。从上述结果可以推测，OsMADS50基因在其他开花时间调节子例如OsMADS14或OsMADS15的上游起作用从而控制它们的表达，而OsMADS50基因在Hd1或OsGI的下游或平行(独立地)起作用。
<实验实施例3>对OsMADS50 KO突变株依赖于光周期条件的开花时间的分析
在不同光周期条件下，观察了从实施例1的T-DNA***种系中分离的两株独立的T2 OsMADS50 KO种系(分别命名为50KO23和50KO24)和野生型种系(对照)的开花时间。光周期条件为短日照条件(SD：10h光/14h暗)和长日照条件(LD：14h光/10h暗)。上述观察的结果示于图8。如图8所示，在短日照条件下，在对照和OsMADS50 KO种系之间没有观察到显著差异。然而在长日照条件下，对照大约在种植后78天开花，而OsMADS50 KO种系直至种植后140天才开花。因此，这一结果证实了OsMADS50是在长日照条件下起作用的开花时间调节子。
<实验实施例4>对开花时间调节子在OsMADS50 KO种系中的表达模式的分析
在种植后60天，分别从实施例1的OsMADS50 KO种系和野生种系(对照)上采集叶片样本。分析了开花时间调节子例如OsMADS14、OsMADS18、Hd3a、Hd1和OsGI以及OsMADS50在所得样本中的表达，结果示于图9。如图9所示，在长日照条件下，OsMADS14、OsMADS18和Hd3a在OsMADS50KO种系中的表达下调，而Hd1和OsGI的表达没有明显改变。因此，这一结果证实OsMADS50是其他调节子例如OsMADS14、OsMADS18和Hd3a的上游的开花时间调节子。
<实施例5>OsMADS51、OsMADS56、OsTRX1和OsVIN2的分离
在如实施例1中所述制备的T-DNA标记种系中，分离出了T-DNA分别***至OsMADS51、OsMADS56、OsTRX1和OsVIN2中的种系。
分离并鉴定了OsMADS51基因的核苷酸序列，该序列示于SEQ ID NO：2。OsMADS51基因已在NCBI数据库中被登记为AB003327。然而，现在仅已知该基因在不同组织中的表达情况，还并不知道它的功能(Shinozuka etal.，1999)。在本发明中，通过PCR分离了该基因并测定了它的功能。
此外，还分离并鉴定了OsMADS56基因的核苷酸序列，该序列示于SEQID NO：3。该基因是通过PCR分离的，它的核苷酸序列在NCBI数据库中被本发明的发明人登记为AY345224。
另外，OsTRX1和OsVIN2的核苷酸序列分别示于SEQ ID NO：4和SEQID NO：5。
<实验实施例5>对OsMADS51、OsMADS56、OsTRX1和OsVIN2过表达的或被抑制的突变株的开花时间的分析
为进一步研究实施例5中分离的基因在调节开花时间方面的功能作用，制备了一种转基因稻，该转基因稻过表达在实验室中使用pGA1611载体(AY373338)制备的OsMADS51或OsMADS56的有义构建体，其中使用玉米泛蛋白(ubi)启动子诱导组成型表达[见图5(a)]。观察到在OsMADS51过表达的突变株中，野生条件下的开花时间提前了1至2周，而在OsMADS56过表达的突变株中，野生条件下的开花时间延迟了1至2周(见图12)。
值得注意的是，在短日照条件(SD：10h光/14h暗)和长日照条件(LD：14h光/10h暗)下的实验中，观察到在OsMADS51 KO突变株中，开花时间仅在短日照条件下延迟了约一个月(见图11)，在OsMADS56过表达的突变株中，开花时间仅在长日照条件下延迟(见图12)。对于OsMADS56突变株，检测了两个独立的种系(分别命名为8号和10号)。
此外，OsMADS51 KO种系在野生条件下表现衰老被延缓(delayed-aging)的表型。
此外，使用与制备OsMADS50 KO种系相同的方法，分别敲除OsTRX1和OsVIN2基因而制备了OsTRX1 KO种系和OsVIN2 KO种系。OsTRX1 KO种系在野生条件下表现出开花至少延迟一个月的晚开花表型(见图1O)，OsVIN2 KO种系表现在长日照条件下延迟约32天的晚开花表型，和在短日照条件下延迟约10天的晚开花表型(见图13)。
<实施例6>OsCOL4的分离
为研究其他的开花时间调节子，从***了激活标记载体(pGA2715；Joeng et al，Plant Physiology，December 2002，Vol.130，pp.1636-1644)的稻突变群体中筛选了表现出开花时间有所改变的种系。其中被命名为1B-00735的种系为晚开花表型，与野生型种系相比开花时间延迟至少15天(见图14)。对突变种系的基因型的分析显示，T-DNA被***至OsCOL4基因的启动子区域中，并且T-DNA中存在的35S增强子使得OsCOL4基因过表达(见图15和16)。OsCOL4基因中的T-DNA***位置和T-DNA中存在的35S增强子的功能示于图15。基于上述结果，分离了OsCOL4基因，它的核苷酸序列示于SEQ ID NO：6。
<实验实施例6>对OsCOL4过表达或被抑制的突变株的开花时间的分析
如上所述，将T-DNA***到OsCOL4基因的启动子区域中，所得的OsCOL4过表达的突变株由于T-DNA中存在35S增强子而表现出晚开花表型。此外，通过观察下述突变株再次证实了这种开花的延迟是由OsCOL4基因的过表达(激活标记)导致的，所述突变株中OsCOL4基因与强启动子pUbi可操作地连接而过表达，该突变株表现延迟约2周的晚开花表型(见图17)。图17中的Act1表示用作对照的稻肌动蛋白基因。
相反地，OsCOL4被抑制的突变种系表现提前约2周的早开花表型(见图18)。这种OsCOL4抑制在以下突变株中得到确认，所述突变株为T-DNA被***至OsCOL4基因的第一外显子(图18所示的OsCOL4-1)的突变株和T-DNA被***至3’UTR区域(图18所示的OsCOL4-2)的突变株。
在改变光周期条件的实验中，OsCOL4激活标记种系在任何光周期条件下均表现比野生型种系晚开花，而OsCOL4被抑制的种系在任何光周期条件下均表现早开花(见图19)。图19中的‘OsCOL4-D’表示OsCOL4激活标记突变株。
<实施例7>OsCOL8的分离
OsCOL8基因为稻中存在的CONSTANS样基因，它与小麦中的通过春化处理调节开花时间的VRN2相似。通过对本发明的T-DNA***突变种系的分析，将OsCOL8基因作为通过其中的T-DNA***而诱导开花时间改变的开花时间调节子而分离出来，它的核苷酸序列示于SEQ ID NO：7。
<实验实施例7>对OsCOL8被抑制的突变株的开花时间的分析
为检测OsCOL8基因对开花时间的调节，分析了T-DNA被***至OsCOL8基因的第一外显子的突变株。分析结果显示，在长日照条件下突变株的开花时间与野生型的相似，而在短日照条件下开花时间延迟(见图20)。因此，预计OsCOL8基因在短日照条件下起开花激活物的作用。
<实施例8>OsMADS14的分离
已知有四(4)个基因是拟南芥的APETALA1(AP1)在稻中的直向同源物(稻的APETALA1样基因)，它们参与花器的形成和开花时间的调节，它们分别被命名为OsMADS14、OsMADS15、OsMADS18和OsMADS20。其中，OsMADS14基因最先是作为OsMADS6蛋白的结合伴侣而被克隆的，但是它的具体功能并不清楚。在本实施例中，当DNA片段例如T-DNA***至OsMADS14基因时，开花时间会有改变，基于上述观察结果，该基因作为开花时间调节子而被分离。该基因的核苷酸序列示于SEQ ID NO：8。
<实验实施例8>对OsMADS14被抑制或过表达的突变株的开花时间的分析
对T-DNA或Tos17被***至OsMADS14基因内的突变株的分析结果显示，开花时间和花发育没有明显改变(见图21)。T-DNA和Tos17在OsMADS14基因中的***位置示于图21。上述结果表明除OsMADS14基因之外的其他基因的作用是多余的。
将在OsMADS14基因的最后一个K结构域和C结构域之间人工***一个终止密码子形成的基因引入pGA1611(AY373338)载体中，以诱导OsMADS14不完整蛋白的过表达，该不完整蛋白中含有C结构域的末端区域缺失。对上述含有C结构域的末端区域缺失的OsMADS14不完整蛋白过表达的观察结果显示，在短日照条件下开花时间提前了约一个月，在长日照条件下开花时间延迟了约两周。上述结果表明，3’区域缺失的OsMADS14不完整基因的过表达导致了在短日照条件下的开花激活，而在长日照条件下通过与其它开花激活物的相互作用导致开花抑制。
序列表
<110>   POSCO公司
        学校法人浦项工科大学校
<120>   开花时间的调节子、用其转化的转基因植物以及调控开花时间的方法
<130>   OPP20052882KR
<150>   US 60/638,460
<151>   2004-12-22
<160>   24
<170>   KopatentIn 1.71
<210>   1
<211>   744
<212>   DNA
<213>   人工序列
<220>
<223>   OsMADS50的cDNA序列
<220>
<221>   CDS
<222>   (23)..(712)
<400>   1
gttggttcat cggcgatcga ag    atg gtg cgg ggg aag acg cag atg        46
                            Met Val Arg Gly Lys Thr Gln Met
                            1               5
aag cgg ata gag gac ccc acg agc cgc cag gtc acc ttc tcc aag cgc    94
Lys Arg Ile Glu Asn Pro Thr Ser Arg Gln Val Thr Phe Ser Lys Arg
    10                  15                  20
cgc aac ggc ctg ctc aag aag gcc ttc gag ctc tcc gtc ctc tgc gac    142
Arg Asn Gly Leu Leu Lys Lys Ala Phe Glu Leu Ser Val Leu Cys Asp
25                  30                  35                  40
gcc gag gtc gcg ctc atc gtc ttc tcc ccg cgc ggc aag ctc tac gaa    190
Ala Glu Val Ala Leu Ile Val Phe Ser Pro Arg Gly Lys Leu Tyr Glu
                45                  50                  55
ttc gcc agc gcc agt acg cag aaa aca att gaa cgc tat agg acg tat    238
Phe Ala Ser Ala Ser Thr Gln Lys Thr Ile Glu Arg Tyr Arg Thr Tyr
            60                   65         70
aca aag gaa aat atc ggc agc aag aca gta cag caa gat ata gag caa    286
Thr Lys Glu Asn Ile Gly Asn Lys Thr Val Gln Gln Asp Ile Glu Gln
        75                  80                  85
gta aaa gct gac gct gat ggt ttg gca aag aaa ctt gaa gct ctt gaa    334
Val Lys Ala Asp Ala Asp Gly Leu Ala Lys Lys Leu Glu Ala Leu Glu
    90                  95                  100
act tac aaa aga aaa ctg ctg ggt gaa aag ttg gat gaa tgt tct att    382
Thr Tyr Lys Arg Lys Leu Leu Gly Glu Lys Leu Asp Glu Cys Ser Ile
105                 110                 115                 120
gaa gaa ctg cat agc ctg gag gtc aag ctg gag aga agc ctc att agc    430
Glu Glu Leu His Ser Leu Glu Val Lys Leu Glu Arg Ser Leu Ile Ser
                125                 130                 135
atc agg gga agg aag aca aag ctg ctt gag gag cag gtt gcc aaa ctg    478
Ile Arg Gly Arg Lys Thr Lys Leu Leu Glu Glu Gln Val Ala Lys Leu
            140             145                     150
aga gag aag gag atg aag ctg cgc aag gac aat gaa gag tta cgc gaa    526
Arg Glu Lys Glu Met Lys Leu Arg Lys Asp Asn Glu Glu Leu Arg Glu
        155                 160             165
aag tgt aag aat cag cct ccc ttg tct gct cct ttg act gtc cgg gcc    574
Lys Cys Lys Asn Gln Pro Pro Leu Ser Ala Pro Leu Thr Val Arg Ala
    170                 175                 180
gaa gat gag aac ccg gac cgt aac atc aac acc acc aac gac aac atg    622
Glu Asp Glu Asn Pro Asp Arg Asn Ile Asn Thr Thr Asn Asp Asn Met
185                 190                 195                 200
gat gtc gaa act gag cta ttc ata ggg ctg cct ggc aga agt cgc tcc    670
Asp Val Glu Thr Glu Leu Phe Ile Gly Leu Pro Gly Arg Ser Arg Ser
                205                 210                 215
agc ggc ggt gct gca gaa gat agc caa gcg atg ccc cat tct taagtaac   720
Ser Gly Gly Ala Ala Glu Asp Ser Gln Ala Met Pro His Ser
            220                 225                 230
aggccaggaa taagctggat ctct                                         744
<2l0>    2
<211>    230
<212>    PRT
<213>    人工序列
<400>    2
Met Val Arg Gly Lys Thr Gln Met Lys Arg Ile Glu Asn Pro Thr Ser
  1               5                  10                  15
Arg Gln Val Thr Phe Ser Lys Arg Arg Asn Gly Leu Leu Lys Lys Ala
             20              25                      30
Phe Glu Leu Ser Val Leu Cys Asp Ala Glu Val Ala Leu Ile Val Phe
         35                  40                  45
Ser Pro Arg Gly Lys Leu Tyr Glu Phe Ala Ser Ala Ser Thr Gln Lys
     50                  55                  60
Thr Ile Glu Arg Tyr Arg Thr Tyr Thr Lys Glu Asn Ile Gly Asn Lys
 65                  70                  75                  80
Thr Val Gln Gln Asp Ile Glu Gln Val Lys Ala Asp Ala Asp Gly Leu
                 85                  90                  95
Ala Lys Lys Leu Glu Ala Leu Glu Thr Tyr Lys Arg Lys Leu Leu Gly
            100                 105                 110
Glu Lys Leu Asp Glu Cys Ser Ile Glu Glu Leu His Ser Leu Glu Val
        115                 120                 125
Lys Leu Glu Arg Ser Leu Ile Ser Ile Arg Gly Arg Lys Thr Lys Leu
    130                 135         140
Leu Glu Glu Gln Val Ala Lys Leu Arg Glu Lys Glu Met Lys Leu Arg
145                 150                 155                 160
Lys Asp Asn Glu Glu Leu Arg Glu Lys Cys Lys Asn Gln Pro Pro Leu
                165                 170             175
Ser Ala Pro Leu Thr Val Arg Ala Glu Asp Glu Asn Pro Asp Arg Asn
            180                 185                 190
Ile Asn Thr Thr Asn Asp Asn Met Asp Val Glu Thr Glu Leu Phe Ile
        195                 200                 205
Gly Leu Pro Gly Arg Ser Arg Ser Ser Gly Gly Ala Ala Glu Asp Ser
    210                 215                 220
Gln Ala Met Pro His Ser
225                 230
<210>    3
<211>    495
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    OsMADS51的cDNA序列
<220>
<221>    CDS
<222>    (1)..(492)
<400>    3
atg gcg cgg agg ggg aga gtg cag ctg agg cgg atc gag gac aag gcg    48
Met Ala Arg Arg Gly Arg Val Gln Leu Arg Arg Ile Glu Asp Lys Ala
  1               5                  10                  15
agc cgg cag gtg cgg ttc tcc aag agg agg gcg ggg ctg ttc aag aag    96
Ser Arg Gin Val Arg Phe Ser Lys Arg Arg Ala Gly Leu Phe Lys Lys
             20                  25                  30
gcg ttc gag ctc gcc ctg ctc tgc gac gtg gag gtg gcg ctc ctc gtc    144
Ala Phe Glu Leu Ala Leu Leu Cys Asp Val Glu Val Ala Leu Leu Val
         35                  40                  45
ttc tcc ccc gtc ggc aag ctc tac gag tac tcc tcc tcc agc att gaa    192
Phe Ser Pro Val Gly Lys Leu Tyr Glu Tyr Ser Ser Ser Ser Ile Glu
     50                  55                  60
ggt acc tat gat cgc tat cag caa ttc gct gga gcc agg aga gac ctg    240
Gly Thr Tyr Asp Arg Tyr Gln Gln Phe Ala Gly Ala Arg Arg Asp Leu
 65                  70                  75                  80
aac gaa gga agt aca agc atc aac agt gat gaa aat gca agt ata cac    288
Asn Glu Gly Ser Thr Ser Ile Asn Ser Asp Glu Asn Ala Ser Ile His
                 85                  90                  95
tcc agg ctt agg gac ata acg gcc tgg tct ctc caa aac aat gct gac    336
Ser Arg Leu Arg Asp Ile Thr Ala Trp Ser Leu Gln Asn Asn AIa Asp
            100                 105                 110
gag tcg gat gct aat cag cta gag aaa ctg gag aaa ctg ctg aca aat    384
Glu Ser Asp Ala Asn Gln Leu Glu Lys Leu Glu Lys Leu Leu Thr Asn
        115                 120                 125
gct ttg agg gat acg aaa tca aag aag atg ttg gca aaa caa aat ggt    432
Ala Leu Arg Asp Thr Lys Ser Lys Lys Met Leu Ala Lys Gln Asn Gly
    130                 135                 140
gaa ggg agt agg agc aga gca aac tcc agt ggc tct agg ggg cag gag    480
Glu Gly Ser Arg Ser Arg Ala Asn Ser Ser Gly Ser Arg Gly Gln Glu
145                 150                 155                  160
gaa gga agt gca         tga                                         495
Glu Gly Ser Ala
<210>    4
<211>    164
<212>    PRT
<213>    人工序列
 <400>    4
 Met Ala Arg Arg Gly Arg Val Gln Leu Arg Arg Ile Glu Asp Lys Ala
   1               5                  l0                  15
 Ser Arg Gln Val Arg Phe Ser Lys Arg Arg Ala Gly Leu Phe Lys Lys
              20                  25                  30
Ala Phe Glu Leu Ala Leu Leu Cys Asp Val Glu Val Ala Leu Leu Val
         35                  40                  45
Phe Ser Pro Val Gly Lys Leu Tyr Glu Tyr Ser Ser Ser Ser Ile Glu
     50                  55                  60
Gly Thr Tyr Asp Arg Tyr Gln Gln Phe Ala Gly Ala Arg Arg Asp Leu
 65                  70                  75                  80
Asn Glu Gly Ser Thr Ser lle Asn Ser Asp Glu Asn Ala Ser Ile His
                 85                  90                  95
Ser Arg Leu Arg Asp Ile Thr Ala Trp Ser Leu Gln Asn Asn Ala Asp
            100                 105                 110
Glu Ser Asp Ala Asn Gln Leu Glu Lys Leu Glu Lys Leu Leu Thr Ash
        115                 120                 125
Ala Leu Arg Asp Thr Lys Ser Lys Lys Met Leu Ala Lys Gln Asn Gly
    130                 135                 140
Glu Gly Ser Arg Ser Arg Ala Asn Ser Ser Gly Ser Arg Gly Gln Glu
145         150                         155                 160
Glu Gly Ser Ala
<210>    5
<211>    693
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    OsMADS56的cDNA序列
<220>
<221>    CDS
<222>    (1)..(690)
<400>    5
atg gtg cgg ggg agg acg gag ctg aag cgg att gag aac ccg acg agc    48
Met Val Arg Gly Arg Thr Glu Leu Lys Arg Ile Glu Asn Pro Thr Ser
  1               5                  10                  15
cgg cag gtg acc ttc tcc aag cgc cgg aat ggc ctc ctc aag aag gcg    96
Arg Gln Val Thr Phe Ser Lys Arg Arg Asn Gly Leu Leu Lys Lys Ala
             20              25                      30
ttc gag ctc tcc gtc ctc tgc gac gcc gag gtc gcc ctc atc gtc ttc    144
Phe Glu Leu Ser Val Leu Cys Asp Ala Glu Val Ala Leu Ile Val Phe
         35                  40                  45
tcc ccc cgc ggc cgc ctc tac gag ttc gcc agc gcc ccc agc cta cag    192
Ser Pro Arg Gly Arg Leu Tyr Glu Phe Ala Ser Ala Pro Ser Leu Gln
     50                  55                  60
aaa acc atc gac cgc tat aaa gca tac aca aag gat cat gtc aac aat    240
Lys Thr 1le Asp Arg Tyr Lys Ala Tyr Thr Lys Asp His Val Asn Asn
 65                  70                  75                  80
aag aca att caa caa gat atc cag caa gtc aaa gat gat act tta ggc    288
Lys Thr Ile Gln Gln Asp Ile Gln Gln Val Lys Asp Asp Thr Leu Gly
                 85                 90                  95
ttg gcc aag aaa ctt gaa gct ctt gat gag tcc aga cgg aaa ata ttg    336
Leu Ala Lys Lys Leu Glu Ala Leu Asp Glu Ser Arg Arg Lys Ile Leu
            100                 105                 110
gga gaa aat tta gaa gga tgc tct att gaa gaa ctg cgt ggt cta gaa    384
Gly Glu Asn Leu Glu Gly Cys Ser Ile Glu Glu Leu Arg Gly Leu Glu
        115                 120                 125
atg aaa ctt gag aag agc ctc cac aac ata aga cta aag aag acc gag    432
Met Lys Leu Glu Lys Ser Leu His Asn Ile Arg Leu Lys Lys Thr Glu
    130                 135                 140
ctt ctg gag cgg cag ata gcc aag ctg aaa gag aag gag cgg act ttg    480
Leu Leu Glu Arg Gln Ile Ala Lys Leu Lys Glu Lys Glu Arg Thr Leu
145                 150                 155                 160
ctt aaa gac aac gaa aat tta cgc gga aag cat cgc aac ctt gag gct    528
Leu Lys Asp Asn Glu Asn Leu Arg Gly Lys His Arg Asn Leu Glu Ala
                165                 170                 175
gcg gcg ctg gtg gct aac cac atg acg acg acg acg gcg ccg gcg gcg    576
Ala Ala Leu Val Ala Asn His Met Thr Thr Thr Thr Ala Pro Ala Ala
            180                 185                 190
tgg ccg cgg gac gtg cct atg acg agc agc aca gcc ggc gcc atg gac    624
Trp Pro Arg Asp Val Pro Met Thr Ser Ser Thr Ala Gly Ala Met Asp
        195                 200                 205
gtg gag act gat ctg tac att gga ttg ccc ggc act gag cgc tcc tcc    672
Val Glu Thr Asp Leu Tyr Ile Gly Leu Pro Gly Thr Glu Arg Ser Ser
    210                 215                 220
aac cgg tcg gag aca ggt tga                                         693
Asn Arg Ser Glu Thr Gly
225                 230
<210>    6
<211>    230
<212>    PRT
<213>    人工序列
<400>     6
Met Val Arg Gly Arg Thr Glu Leu Lys Arg Ile Glu Asn Pro Thr Ser
  1               5                  10                  15
Arg Gln Val Thr Phe Ser Lys Arg Arg Asn Gly Leu Leu Lys Lys Ala
             20              25                      30
Phe Glu Leu Ser Val Leu Cys Asp Ala Glu Val Ala Leu Ile Val Phe
         35                  40                  45
Ser Pro Arg Gly Arg Leu Tyr Glu Phe Ala Ser Ala Pro Ser Leu Gln
     50                  55                  60
Lys Thr Ile Asp Arg Tyr Lys Ala Tyr Thr Lys Asp His Val Asn Asn
 65                  70                  75                  80
Lys Thr Ile Gln Gln Asp Ile Gln Gln Val Lys Asp Asp Thr Leu Gly
                 85                  90                  95
Leu Ala Lys Lys Leu Glu Ala Leu Asp Glu Ser Arg Arg Lys Ile Leu
            100                 105                 110
Gly Glu Asn Leu Glu Gly Cys Ser Ile Glu Glu Leu Arg Gly Leu Glu
        115                 120                 125
Met Lys Leu Glu Lys Ser Leu His Asn Ile Arg Leu Lys Lys Thr Glu
    130                 135                 140
Leu Leu Glu Arg Gln Ile Ala Lys Leu Lys Glu Lys Glu Arg Thr Leu
145                 150                 155                 160
Leu Lys Asp Asn Glu Asn Leu Arg Gly Lys His Arg Asn Leu Glu Ala
                165                 170                 175
Ala Ala Leu Val Ala Asn His Met Thr Thr Thr Thr Ala Pro Ala Ala
            180                 185                 190
Trp Pro Arg Asp Val Pro Met Thr Ser Ser Thr Ala Gly Ala Met Asp
        195                 200                 205
Val Glu Thr Asp Leu Tyr Ile Gly Leu Pro Gly Thr Glu Arg Ser Ser
    210                 215                 220
Asn Arg Ser Glu Thr Gly
225                 230
<210>    7
<211>    3069
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    OSTRX1的cDNA序列
<220>
<221>    CDS
<222>    (1)..(3066)
<400>    7
atg gtg atc gcg gtg gag ggg ggc ttc gtg cac gag gag gag gag gtg    48
Met Val Ile Ala Val glu Gly Gly Phe Val His Glu Glu Glu Glu Val
  1               5                  10                  15
gac cac cca att cgc tac ctc cca ctt ggc cgc gtc tac tcc tcc tct    96
Asp His Pro Ile Arg Tyr Leu Pro Leu Gly Arg Val Tyr Ser Ser Ser
             20                  25                  30
gct ccg tgc cct ctc ccc aag aag ccc cgc tcc gcc gag gac ggc aag    144
Ala Pro Cys Pro Leu Pro Lys Lys Pro Arg Ser Ala Glu Asp Gly Lys
         35                  40                  45
ccc ccc gtg atc gtc tac tac cgc cgc cgc cgt aag aag ccg cgg gtc    192
Pro Pro Val Ile Val Tyr Tyr Arg Arg Arg Arg Lys Lys Pro Arg Val
     50                  55                  60
gag ggg cca cct ccc tcg cct gcc aca gca cca ccg atg ctg cac ccc    240
Glu Gly Pro Pro Pro Ser Pro Ala Thr Ala Pro Pro Met Leu His Pro
 65                  70                  75                  80
cgg gag gac gac gag gat gag gag gtt aca cgg cgg aag ggt tct ctc    288
Arg Glu Asp Asp Glu Asp Glu Glu Val Thr Arg Arg Lys Gly Ser Leu
                 85                  90                  95
aag tac gag ctg ctg agc ctg ggg caa gcc ccg ccc gca tta ggc ggg    336
Lys Tyr Glu Leu Leu Ser Leu Gly Gln Ala Pro Pro Ala Leu Gly Gly
            100                 105                 110
gat ggg gag gag ccc gcg cgg cgg cgc tgc ctg agg cgt agc gga ggg    384
Asp Gly Glu Glu Pro Ala Arg Arg Arg Cys Leu Arg Arg Ser Gly Gly
        115                 120                 125
gct gag agg agg ggt tac ttc tct gaa ccc aag agg cgg cag cgg cag    432
Ala Glu Arg Arg Gly Tyr Phe Ser Glu Pro Lys Arg Arg Gln Arg Gln
    130                 135                 140
ggc gtg cac aag gaa gct gcc tcc tcg gct ggg agg aga tgg ttg gag    480
Gly Val His Lys Glu Ala Ala Ser Ser Ala Gly Arg Arg Trp Leu Glu
145                 150                 155                 160
ttg gaa att gag gct gcg gat cca ctg gcc ttt gtg gga tta gga tgc    528
Leu Glu Ile Glu Ala Ala Asp Pro Leu Ala Phe Val Gly Leu Gly Cys
                165                 170                 175
aag gtt ttc tgg ccc ctc gat gag gat tgg tac aag ggt tct atc aca    576
Lys Val Phe Trp Pro Leu Asp Glu Asp Trp Tyr Lys Gly Ser Ile Thr
            180                 185                 190
ggg tac aat gaa gcg act aag aaa cat tcc gta aag tat gat gat ggc    624
Gly Tyr Asn Glu Ala Thr Lys Lys His Ser Val Lys Tyr Asp Asp Gly
        195             200                     205
gaa tca gag gac ctt aac cta gct gat gaa agg ata aaa ttt tct att    672
Glu Ser Glu Asp Leu Asn Leu Ala Asp Glu Arg Ile Lys Phe Ser Ile
    210                 215                 220
tca tct gaa gaa atg aag tgc agg aac ttg aaa ttt gga att tcc aat    720
Ser Ser Glu Glu Met Lys Cys Arg Asn Leu Lys Phe Gly Ile Ser Asn
225                 230                 235                 240
ctg aac aag agg ggc tat gat gag ttg ctt gcc ctt gct gtt agc ctt    768
Leu Asn Lys Arg Gly Tyr Asp Glu Leu Leu Ala Leu Ala Val Ser Leu
                245             250                     255
cat gat tac caa ggt ctt gat cca ggt gat ctt gtg tgg gct aaa ctt    816
His Asp Tyr Gln Gly Leu Asp Pro Gly Asp Leu Val Trp Ala Lys Leu
            260                 265                 270
aca ggt cat gcc atg tgg cca gct gtt gtg gtg gat gaa tca aat gtt    864
Thr Gly His Ala Met Trp Pro Ala Val Val Val Asp Glu Ser Asn Val
        275                 280                 285
cct gct aac agg gct ttg aag cca ggc cga cta gat cag tcg ata ctt    912
Pro Ala Asn Arg Ala Leu Lys Pro Gly Arg Leu Asp Gln Ser Ile Leu
    290                 295                 300
gtt caa ttc ttt ggt act cat gat ttt gcc agg att aag ttg aag caa    960
Val Gln Phe Phe Gly Thr His Asp Phe Ala Arg Ile Lys Leu Lys Gln
305                 310                 315                 320
gcg gtg ccc ttt ctg aat ggc ctt ctt tct tct ttg cat ctt aaa tgc    1008
Ala Val Pro Phe Leu Asn Gly Leu Leu Ser Ser Leu His Leu Lys Cys
                325                 330                 335
aag caa gca cgc ttc tat cgg agt tta gaa gaa gcc aag gag ttt ctc    1056
Lys Gln Ala Arg Phe Tyr Arg Ser Leu Glu Glu Ala Lys Glu Phe Leu
            340                 345                 350
tgc aca cag ctt ctc cca gaa aat atg ttg caa cta cag aaa tcc atg    1104
Cys Thr Gln Leu Leu Pro Glu Asn Met Leu Gln Leu Gln Lys Ser Met
        355                 360                 365
gaa aag ggc agt tct gat gct aat tcc aat aaa gat gta cat tct tgt    1152
Glu Lys Gly Ser Ser Asp Ala Asn Ser Asn Lys Asp Val His Ser Cys
    370                 375                 380
gac aat tta tct gaa gat aaa aca gct gaa agc gga ggg gat tat gat    1200
Asp Asn Leu Ser Glu Asp Lys Thr Ala Glu Ser Gly Gly Asp Tyr Asp
385                 390                 395                 400
gag atg act cca ata gaa cta gga aat ctt cgt gtg agc aaa tta ggt    1248
Glu Met Thr Pro Ile Glu Leu Gly Asn Leu Arg Val Ser Lys Leu Gly
                405                 4l0                 415
agg ata gta act gac tca gac tat ttc cat aac aaa aag cat ata tgg    1296
Arg Ile Val Thr Asp Ser Asp Tyr Phe His Asn Lys Lys His Ile Trp
            420                 425                 430
cct gaa ggg tat act gct ttc agg aag ttc aga tca gtg aaa gat cca    1344
Pro Glu Gly Tyr Thr Ala Phe Arg Lys Phe Arg Ser Val Lys Asp Pro
        435                 440                 445
cat gta gta ata ctt tac aaa atg gag gta ctg agg aat tca gat ata    1392
His Val Val Ile Leu Tyr Lys Met Glu Val Leu Arg Asn Ser Asp Ile
    450                 455                 460
aaa gct cgg cca ttg ttt agg gtc aca tca gaa gat gga aca cag att    1440
Lys Ala Arg Pro Leu Phe Arg Val Thr Ser Glu Asp Gly Thr Gln Ile
465                 470                 475                 480
gat ggc tct acc cca aat aca tgt tgg aag gag ata tat tgt aga tta    1488
Asp Gly Ser Thr Pro Asn Thr Cys Trp Lys GluIle Tyr Cys Arg Leu
                485                 490                495
aag gaa aaa cag cgc aat gtg gcc tct gga ttg gac aga gat gtt tgt    1536
Lys Glu Lys Gln Arg Asn Val Ala Ser Gly Leu Asp Arg Asp Val Cys
            500                 505                 5l0
cag gga tct ggt tcc tat atg ttt ggc ttt tca aat cca caa ata cgg    1584
Gln Gly Ser Gly Ser Tyr Met Phe Gly Phe Ser Asn Pro Gln Ile Arg
        515                 520                 525
caa ctt att cag gag tta ccc aat gca agg tca tgc tta aag tat ttt    1632
Gln Leu Ile Gln Glu Leu Pro Asn Ala Arg Ser Cys Leu Lys Tyr Phe
    530                 535                 540
gaa aat gct gga gac acc ttt cgt ggg tat aga gct gtt cat gta aat    1680
Glu Asn Ala Gly Asp Thr Phe Arg Gly Tyr Arg Ala Val His Val Asn
545                 550                 555                 560
tgg aaa gat cta gac tat tgt agt gtt tgt gat atg gat gag gaa tac    1728
Trp Lys Asp Leu Asp Tyr Cys Ser Val Cys Asp Met Asp Glu Glu Tyr
                565                 570                 575
gaa gac aat ttg ttc ttg caa tgt gat aag tgc cgt atg atg gta cat    1776
Glu Asp Asn Leu Phe Leu Gln Cys Asp Lys Cys Arg Met Met Val His
            580                 585                 590
gct aga tgc tat ggt gaa ctc gaa cca ttg aat gga gtc ctt tgg ctt    1824
Ala Arg Cys Tyr Gly Glu Leu Glu Pro Leu Asn Gly Val Leu Trp Leu
        595                 600                 605
tgc aac ctg tgt cga cct gag gcg cct cgt gtt tct cca cga tgc tgt    1872
Cys Asn Leu Cys Arg Pro Glu Ala Pro Arg Val Ser Pro Arg Cys Cys
    610                 615                 620
ctt tgt cca gta aca ggg ggc gca atg aaa cca aca aca gat ggt cgt    1920
Leu Cys Pro Val Thr Gly Gly Ala Met Lys Pro Thr Thr Asp Gly Arg
625                 630                 635                 640
tgg gct cat ctt gca tgt gct ata tgg att cct gaa act tgc tta aaa    1968
Trp Ala His Leu Ala Cys Ala Ile Trp Ile Pro Glu Thr Cys Leu Lys
                645                 650                 655
gat gtg aag aga atg gaa ccg att gat gga ttg agc aga atc aac aag    2016
Asp Val Lys Arg Met Glu Pro Ile Asp Gly Leu Ser Arg Ile Asn Lys
            660                 665                 670
gac cgc tgg aaa ctt cta tgc agc att tgc gga gtt gct tat gga gct    2064
Asp Arg Trp Lys Leu Leu Cys Ser Ile Cys Gly Val Ala Tyr Gly Ala
        675                 680                 685
tgc ata cag tgt tct cat cct acc tgt cgt gtt gca tat cac cct ctt    2112
Cys Ile Gln Cys Ser His Pro Thr Cys Arg Val Ala Tyr His Pro Leu
    690                 695                 700
tgt gca cgt gct gct gat ctt tgt gtt gag ctt gaa gat gat gac aaa    2l60
Cys Ala Arg Ala Ala Asp Leu Cys Val Glu Leu Glu Asp Asp Asp Lys
705                 710                 715                 720
atc cac ctc atg tta ctt gat gag gat gag gac cca tgt att cgt cta    2208
Ile His Leu Met Leu Leu Asp Glu Asp Glu Asp Pro Cys Ile Arg Leu
                725         730                         735
ctt tca tac tgc aag aag cac aga caa cca tcg act gaa cgt cca tct    2256
Leu Ser Tyr Cys Lys Lys His Arg Gln Pro Ser Thr Glu Arg Pro Ser
            740                 745                 750
ctt gaa agt aac ctt gct aag cct gct gtg gta gtt cag aca gat gca    2304
Leu Glu Ser Asn Leu Ala Lys Pro Ala Val Val Val Gln Thr Asp Ala
        755                 760                 765
gtt cca cca tcc ggt tgt gca agg act gaa cct tat aat atc cat ggg    2352
Val Pro Pro Ser Gly Cys Ala Arg Thr Glu Pro Tyr Asn Ile His Gly
    770                 775                 780
aga agg ggc caa aag caa cct caa gtt atg gct acc gct tct gta aaa    2400
Arg Arg Gly Gln Lys Gln Pro Gln Val Met Ala Thr Ala Ser Val Lys
785                 790                 795                 800
cgt tta tat gta gag aat atg cct tat att gtt agt ggt ttc tgc caa    2448
Arg Leu Tyr Val Glu Asn Met Pro Tyr Ile Val Ser Gly Phe Cys Gln
                805                 810                 815
aat aga gta ggc cat gat gct atc agt gaa cca att caa tca gtt ggc    2496
Asn Arg Val Gly His Asp Ala Ile Ser Glu ProIle Gln Ser Val Gly
            820                 825                830
ttt ttg gat gtt gca cat caa gaa gct gtt ggc aac gtg tct tct atg    2544
Phe Leu Asp Val Ala His Gln Glu Ala Val Gly Asn Val Ser Ser Met
        835                 840                 845
att gaa aag tat aaa agc atg aag gct aca ttc agg agg aga cta gct    2592
Ile Glu Lys Tyr Lys Ser Met Lys Ala Thr Phe Arg Arg Arg Leu Ala
    850                 855                 860
ttt gga aag tca aga att cat gga ttt ggt gtc ttt gca aag gtt tcg    2640
Phe Gly Lys Ser Arg Ile His Gly Phe Gly Val Phe Ala Lys Val Ser
865             870                  875                 880
cac aag gca ggc gac atg atg att gag tac atc gga gag ctc gtc agg    2688
His Lys Ala Gly Asp Met Met Ile Glu Tyr Ile Gly Glu Leu Val Arg
                885                 890                 895
cca cca ata tca gac att aga gag cgg cgc ata tac aac tct tta gtg    2736
Pro Pro Ile Ser Asp Ile Arg Glu Arg Arg Ile Tyr Asn Ser Leu Val
            900                 905                 910
ggt gct ggg acg tac atg ttc agg ata gat gat gag cgt gtt ata gat    2784
Gly Ala Gly Thr Tyr Met Phe Arg Ile Asp Asp Glu Arg Val Ile Asp
        915                 920                 925
gct acg cgg gca gga agc att gcc cat tta att aat cat tct tgt gag    2832
Ala Thr Arg Ala Gly Ser Ile Ala His Leu Ile Asn His Ser Cys Glu
    930                 935                 940
ccg aat tgt tat tca cgc gtc ata agt gtt ctc ggg gat gag cat atc    2880
Pro Asn Cys Tyr Ser Arg Val Ile Ser Val Leu Gly Asp Glu His Ile
945                 950                 955                 960
atc att ttt gca aag cgg gat ata aat cca tgg gaa gag ttg act tat    2928
IleIle Phe Ala Lys Arg Asp Ile Asn Pro Trp Glu Glu Leu Thr Tyr
               965                 970                 975
gat tat agg ttt gtt tcg agt gat cag cga ctt cot tgt tat tgt gga    2976
Asp Tyr Arg Phe Val Ser Ser Asp Gln Arg Leu Pro Cys Tyr Cys Gly
            980                 985                 990
ttc cca aaa tgc cgt gga gtt gtt aac gat gtt gaa gca gag ggg caa    3024
Phe Pro Lys Cys Arg Gly Val Val Asn Asp Val Glu Ala Glu Gly Gln
        995             1000                    1005
tca gcc aaa ata agg gtc aat aga agt gaa tta ttt caa caa    tga    3069
Ser Ala Lys Ile Arg Val Asn Arg Ser Glu Leu Phe Gln Gln
    1010                1015                1020
<210>    8
<211>    1022
<212>    PRT
<213>    人工序列
<400>    8
Met Val Ile Ala Val Glu Gly Gly Phe Val His Glu Glu Glu Glu Val
  1               5                  10                  15
Asp His Pro Ile Arg Tyr Leu Pro Leu Gly Arg Val Tyr Ser Ser Ser
             20          25                          30
Ala Pro Cys Pro Leu Pro Lys Lys Pro Arg Ser Ala Glu Asp Gly Lys
         35              40                      45
Pro Pro ValIle Val Tyr Tyr Arg Arg Arg Arg Lys Lys Pro Arg Val
     50             55                      60
Glu Gly Pro Pro Pro Ser Pro Ala Thr Ala Pro Pro Met Leu His Pro
 65                  70                  75                  80
Arg Glu Asp Asp Glu Asp Glu Glu Val Thr Arg Arg Lys Gly Ser Leu
                 85                  90                  95
Lys Tyr Glu Leu Leu Ser Leu Gly Gln Ala Pro Pro Ala Leu Gly Gly
            100                 105                 110
Asp Gly Glu Glu Pro Ala Arg Arg Arg Cys Leu Arg Arg Ser Gly Gly
        115                 120                 125
Ala Glu Arg Arg Gly Tyr Phe Ser Glu Pro Lys Arg Arg Gln Arg Gln
    130                 135                 140
Gly Val His Lys Glu Ala Ala Ser Ser Ala Gly Arg Arg Trp Leu Glu
145                 150                 155                 160
Leu Glu Ile Glu Ala Ala Asp Pro Leu Ala Phe yal Gly Leu Gly Cys
                165                 170                 175
Lys Val Phe Trp Pro Leu Asp Glu Asp Trp Tyr Lys Gly Ser Ile Thr
            180                 185                 190
Gly Tyr Asn Glu Ala Thr Lys Lys His Ser Val Lys Tyr Asp Asp Gly
        195                 200                 205
Glu Ser Glu Asp Leu Asn Leu Ala Asp Glu Arg Ile Lys Phe Ser Ile
    210                 215                 220
Ser Ser Glu Glu Met Lys Cys Arg Asn Leu Lys Phe Gly Ile Ser Asn
225                 230                 235                 240
Leu Asn Lys Arg Gly Tyr Asp Glu Leu Leu Ala Leu Ala Val Ser Leu
                245                 250                 255
His Asp Tyr Gln Gly Leu Asp Pro Gly Asp Leu Val Trp Ala Lys Leu
            260                 265                 270
Thr Gly His Ala Met Trp Pro Ala Val Val Val Asp Glu Ser Asn Val
        275                 280                 285
Pro Ala Asn Arg Ala Leu Lys Pro Gly Arg Leu Asp Gln Ser Ile Leu
    290                 295                 300
Val Gln Phe Phe Gly Thr His Asp Phe Ala Arg Ile Lys Leu Lys Gln
305                 310                 315                 320
Ala Val Pro Phe Leu Asn Gly Leu Leu Ser Ser Leu His Leu Lys Cys
                325                 330                 335
Lys Gln Ala Arg Phe Tyr Arg Ser Leu Glu Glu Ala Lys Glu Phe Leu
            340                 345                 350
Cys Thr Gln Leu Leu Pro Glu Asn Met Leu Gln Leu Gln Lys Ser Met
        355                 360                 365
Glu Lys Gly Ser Ser Asp Ala Asn Ser Asn Lys Asp Val His Ser Cys
    370                 375                 380
Asp Asn Leu Ser Glu Asp Lys Thr Ala Glu Ser Gly Gly Asp Tyr Asp
385                 390                 395                 400
Glu Met Thr Pro Ile Glu Leu Gly Asn Leu Arg Val Ser Lys Leu Gly
                405                 410                 415
Arg Ile Val Thr Asp Ser Asp Tyr Phe His Asn Lys Lys His Ile Trp
            420                 425                 430
Pro Glu Gly Tyr Thr Ala Phe Arg Lys Phe Arg Ser Val Lys Asp Pro
        435                 440                 445
His Val Val Ile Leu Tyr Lys Met Glu Val Leu Arg Asn Ser Asp Ile
    450                 455                 460
Lys Ala Arg Pro Leu Phe Arg Val Thr Ser Glu Asp Gly Thr Gln Ile
465                 470                 475                 480
Asp Gly Ser Thr Pro Asn Thr Cys Trp Lys Glu Ile Tyr Cys Arg Leu
                485                 490                 495
Lys Glu Lys Gln Arg Asn Val Ala Ser Gly Leu Asp Arg Asp Val Cys
            500                 505                 510
Gln Gly Ser Gly Ser Tyr Met Phe Gly Phe Ser Asn Pro Gln Ile Arg
        515                 520                 525
Gln Leu Ile Gln Glu Leu Pro Asn Ala Arg Ser Cys Leu Lys Tyr Phe
    530                 535                 540
Glu Asn Ala Gly Asp Thr Phe Arg Gly Tyr Arg Ala Val His Val Asn
545                 550                 555                 560
Trp Lys Asp Leu Asp Tyr Cys Ser Val Cys Asp Met Asp Glu Glu Tyr
                565                 570                 575
Glu Asp Asn Leu Phe Leu Gln Cys Asp Lys Cys Arg Met Met Val His
            580                 585             590
Ala Arg Cys Tyr Gly Glu Leu Glu Pro Leu Asn Gly Val Leu Trp Leu
        595                 600                 605
Cys Asn Leu Cys Arg Pro Glu Ala Pro Arg Val Ser Pro Arg Cys Cys
    610                 615                 620
Leu Cys Pro Val Thr Gly Gly Ala Met Lys Pro Thr Thr Asp Gly Arg
625                 630                 635                 640
Trp Ala His Leu Ala Cys Ala Ile Trp Ile Pro Glu Thr Cys Leu Lys
                645                 650                 655
Asp Val Lys Arg Met Glu Pro Ile Asp Gly Leu Ser Arg Ile Asn Lys
            660                 665                 670
Asp Arg Trp Lys Leu Leu Cys Ser Ile Cys Gly Val Ala Tyr Gly Ala
        675                 680                 685
Cys Ile Gln Cys Ser His Pro Thr Cys Arg Val Ala Tyr His Pro Leu
    690                 695                 700
Cys Ala Arg Ala Ala Asp Leu Cys Val Glu Leu Glu Asp Asp Asp Lys
705                 710                 715                720
Ile His Leu Met Leu Leu Asp Glu Asp Glu Asp Pro CysIle Arg Leu
                725         730                        735
Leu Ser Tyr Cys Lys Lys His Arg Gln Pro Ser Thr Glu Arg Pro Ser
            740                 745                 750
Leu Glu Ser Asn Leu Ala Lys Pro Ala Val Val Val Gln Thr Asp Ala
        755                 760                 765
Val Pro Pro Ser Gly Cys Ala Arg Thr Glu Pro Tyr Asn Ile His Gly
    770                 775                 780
Arg Arg Gly Gln Lys Gln Pro Gln Val Met Ala Thr Ala Ser Val Lys
785                 790                 795                 800
Arg Leu Tyr Val Glu Asn Met Pro Tyr Ile Val Ser Gly Phe Cys Gln
                805                 810                 815
Asn Arg Val Gly His Asp Ala Ile Ser Glu Pro Ile Gln Ser Val Gly
            820                 825                 830
Phe Leu Asp Val Ala His Gln Glu Ala Val Gly Asn Val Ser Ser Met
        835                 840                 845
Ile Glu Lys Tyr Lys Ser Met Lys Ala Thr Phe Arg Arg Arg Leu Ala
    850                 855                 860
Phe Gly Lys Ser Arg Ile His Gly Phe Gly Val Phe Ala Lys Val Ser
865                 870                 875                 880
His Lys Ala Gly Asp Met MetIle Glu Tyr Ile Gly Glu Leu Val Arg
                885                890                 895
Pro Pro Ile Ser Asp Ile Arg Glu Arg Arg Ile Tyr Asn Ser Leu Val
            900                 905                 910
Gly Ala Gly Thr Tyr Met Phe Arg Ile Asp Asp Glu Arg Val Ile Asp
        915                 920                 925
Ala Thr Arg Ala Gly Ser Ile Ala His Leu Ile Asn His Ser Cys Glu
    930                 935                 940
Pro Asn Cys Tyr Ser Arg Val Ile Ser Val Leu Gly Asp Glu His Ile
945                 950                 955                 960
Ile Ile Phe Ala Lys Arg Asp Ile Asn Pro Trp Glu Glu Leu Thr Tyr
                965                 970                 975
Asp Tyr Arg Phe Val Ser Ser Asp Gln Arg Leu Pro Cys Tyr Cys Gly
            980                 985                 990
Phe Pro Lys Cys Arg Gly Val Val Asn Asp Val Glu Ala Glu Gly Gln
        995             1000                    1005
Ser Ala Lys Ile Arg Val Asn Arg Ser Glu Leu Phe Gln Gln
    10l0                1015                1020
<210>    9
<211>    2250
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    OsgIN2的cDNA序列
<220>
<221>    CDS
<222>    (1)..(2247)
<400>    9
atg gat cca ccc tac gca gga gta cct att gat cct gct aaa tgc cga    48
Met Asp Pro Pro Tyr Ala Gly Val Pro Ile Asp Pro Ala Lys Cys Arg
  1               5                  10                  15
ttg atg agt gtg gat gaa aag cgg gaa ctt gtc cgt gaa tta tcg aag    96
Leu Met Ser Val Asp Glu Lys Arg Glu Leu Val Arg Glu Leu Ser Lys
             20                  25                  30
cgg cca gaa agt gct cct gac aaa ctg cag tct tgg agt cgc cgt gaa    144
Arg Pro Glu Ser Ala Pro Asp Lys Leu Gln Ser Trp Ser Arg Arg Glu
         35                  40                  45
att gta gag att ctt tgt gct gat tta gga agg gaa agg aag tac act    192
Ile Val Glu Ile Leu Cys Ala Asp Leu Gly Arg Glu Arg Lys Tyr Thr
     50                  55                  60
gga tta tcg aag cag aga atg ttg gaa tat ctc ttc aga gtt gtg act    240
Gly Leu Ser Lys Gln Arg Met Leu Glu Tyr Leu Phe Arg Val Val Thr
 65                  70                  75                  80
ggc aaa tca tct ggt ggt ggc gtt gtg gag cat gtg caa gag aag gag    288
Gly Lys Ser Ser Gly Gly Gly Val Val Glu His Val Gln Glu Lys Glu
                 85                  90                  95
cct acc cct gaa ccc aac aca gcc aac cat cag tcc cct gcg aaa cgg    336
Pro Thr Pro Glu Pro AsnThr Ala Asn His Gln Ser Pro Ala Lys Arg
            100                105                 110
cag cga aag agt gac aac cea tca cga cta cca att gtt gca agc agt    384
Gln Arg Lys Ser Asp Asn Pro Ser Arg Leu Pro Ile Val Ala Ser Ser
        115                 120                 125
cca act aca gaa ata ccc agg cca gca agt aat gct cgc ttc tgc cac    432
Pro Thr Thr GluIle Pro Arg Pro Ala Ser Asn Ala Arg Phe Cys His
    130                135                 140
aat tta gct tgc aga gcg act ctt aat cca gaa gat aaa ttt tgc aga    480
Asn Leu Ala Cys Arg Ala Thr Leu Asn Pro Glu Asp Lys Phe Cys Arg
145                 150                 155                 160
cgc tgt tca tgc tgt att tgt ttc aag tac gat gac aat aag gat cct    528
Arg Cys Ser Cys Cys Ile Cys Phe Lys Tyr Asp Asp Asn Lys Asp Pro
                165                 170                 175
agc ctc tgg tta ttc tgt agt tca gat caa ccc ttg cag aaa gat tct    576
Ser Leu Trp Leu Phe Cys Ser Ser Asp Gln Pro Leu Gln Lys Asp Ser
            180                 185                 190
tgt gta ttt tcg tgc cat ctt gaa tgt gct ctt aag gat gga aga act    624
Cys Val Phe Ser Cys His Leu Glu Cys Ala Leu Lys Asp Gly Arg Thr
        195                 200                 205
ggc atc atg cag agt ggg cag tgc aag aaa ctt gat ggt ggt tat tac    672
Gly Ile Met Gln Ser Gly Gln Cys Lys Lys Leu Asp Gly Gly Tyr Tyr
    210                 215                 220
tgc act cgc tgt cgg aaa cag aat gat ctg ctt ggg tcc tgg aag aaa    720
Cys Thr Arg Cys Arg Lys Gln Asn Asp Leu Leu Gly Ser Trp Lys Lys
225                 230                 235                 240
caa ctg gtg ata gct aaa gat gct cgc cgg ttg gat gta ttg tgt cat    768
Gln Leu Val Ile Ala Lys Asp Ala Arg Arg Leu Asp Val Leu Cys His
                245             250                     255
cgg att ttt ttg agt cat aag att ctt gtc tcc acg gag aag tac ttg    816
ArgIle Phe Leu Ser His Lys Ile Leu Val Ser Thr Glu Lys Tyr Leu
           260                 265                 270
gtt ttg cat gaa att gtt gac aca gcg atg aag aaa ctg gag gct gag    864
Val Leu His Glu Ile Val Asp Thr Ala Met Lys Lys Leu Glu Ala Glu
        275                 280                 285
gtt ggt cct ata tct gga gtt gca aat atg ggt cgt gga att gtg agc    912
Val Gly Pro Ile Ser Gly Val Ala Asn Met Gly Arg Gly Ile Val Ser
    290                 295                 300
cgg ctt gct gtt ggt gct gaa gtt cag aaa ctt tgt gct cga gca ata    960
Arg Leu Ala Val Gly Ala Glu Val Gln Lys Leu Cys Ala Arg Ala Ile
305                 3l0                 315                 320
gaa acc atg gag tct ctg ttt tgt gga tct cct tct aac ttg caa ttt    1008
Glu Thr Met Glu Ser Leu Phe Cys Gly Ser Pro Ser Asn Leu Gln Phe
                325                 330                 335
caa cgt tca cgg atg ata cca tca aac ttc gta aag ttt gaa gct ata    1056
Gln Arg Ser Arg Met Ile Pro Ser Asn Phe Val Lys Phe Glu Ala Ile
            340                 345                 350
acc caa aca tct gtc act gta gtt ttg gat ttg ggt cct ata ctt gct    1104
Thr Gln Thr Ser Val Thr Val Val Leu Asp Leu Gly Pro Ile Leu Ala
        355                 360                 365
caa gat gta aca tgc ttt aat gta tgg cac aga gtg gca gcc aca ggc    1152
Gln Asp Val Thr Cys Phe Asn Val Trp His Arg Val Ala Ala Thr Gly
    370                 375                 380
tcg ttc tca tca agt  cca act ggc atc ata ctt gca cca tta aaa acg    1200
Ser Phe Ser Ser Ser Pro Thr Gly Ile Ile Leu Ala Pro Leu Lys Thr
385                 390                 395                 400
tta gtg gtc act caa ctt gtg cca gct aca agc tat ata ttc aag gta    1248
Leu Val Val Thr Gln Leu Val Pro Ala Thr Ser Tyr Ile Phe Lys Val
                405                 410                 415
gtt gcc ttc agt aac tac aag gag ttt gga tcg tgg gaa gcc aaa atg    1296
Val Ala Phe Ser Asn Tyr Lys Glu Phe Gly Ser Trp Glu Ala Lys Met
            420                 425                 430
aag aca agc tgt cag aag gaa gtt gat ctg aag ggt ttg atg cca ggt    1344
Lys Thr Ser Cys Gln Lys Glu Val Asp Leu Lys Gly Leu Met Pro Gly
        435                 440                 445
ggg tct ggg cta gac caa aac aat ggg agc cca aag gea aac agt ggt    1392
Gly Ser Gly Leu Asp Gln Asn Asn Gly Ser Pro Lys Ala Asn Ser Gly
    450                 455                 460
ggt cag tct gat cct tct tca gaa ggt gtg gac tca aat aat aac act    1440
Gly Gln Ser Asp Pro Ser Ser Glu Gly Val Asp Ser Asn Asn Asn Thr
465                 470                 475                 480
gcg gtg tat gct gat ctc aat aaa tca cca gaa agt gat ttt gaa tat    1488
Ala Val Tyr Ala Asp Leu Asn Lys Ser Pro Glu Ser Asp Phe Glu Tyr
                485                 490                 495
tgt gaa aat cct gag ata ett gat tca gac aaa gca agt cat cac ccc    1536
Cys Glu Asn Pro Glu Ile Leu Asp Ser Asp Lys Ala Ser His His Pro
            500                 505                 510
aat gaa cct aca aac aac tca cag agt atg ccg atg gtc gta gct agg    1584
Asn Glu Pro Thr Asn Asn Ser Gln Ser Met Pro Met Val Val Ala Arg
        515                 520                 525
gtt acg gag gta tct gga ttg gag gaa gct cct gga ctc tca gca tca    1632
Val Thr Glu Val Ser Gly Leu Glu Glu Ala Pro Gly Leu Ser Ala Ser
    530                 535                 540
gct ttg gac gag gag ccc aat tca gca gtt caa aca caa tta ctt aga    1680
Ala Leu Asp Glu Glu Pro Asn Ser Ala Val Gln Thr Gln Leu Leu Arg
545                 550                 555                 560
gaa tcc tca aat tca atg gag cag aac cag aga agc gaa gtt cct gga    1728
Glu Ser Ser Asn Ser Met Glu Gln Asn Gln Arg Ser Glu Val Pro Gly
                565                 570                 575
tca cag gat gca tca aat gct cct gct gga aat gag gtg gtg att gtt    1776
Ser Gln Asp Ala Ser Asn Ala Pro Ala Gly Asn Glu Val Val Ile Val
            580                 585             590
cca cct cga tat tct ggc tct att cca cca act gca cct aga tat atg    1824
Pro Pro Arg Tyr Ser Gly Ser Ile Pro Pro Thr Ala Pro Arg Tyr Met
        595                 600                 605
gaa aat ggt aag gat atc agt ggg agg agc ttg aaa gca aaa cct ggt    1872
Glu Asn Gly Lys Asp Ile Ser Gly Arg Ser Leu Lys Ala Lys Pro Gly
    610                 615                 620
gat aac atc ctt caa aat ggc tct  tcc aag cct gaa agg gaa cca ggg    1920
Asp AsnIle Leu Gln Asn Gly Ser Ser Lys Pro Glu Arg Glu Pro Gly
625                630                 635                 640
aat tct tca aat aaa aga aca tca ggt aaa tgt gag gaa atc ggc cac    1968
Asn Ser Ser Asn Lys Arg Thr Ser Gly Lys Cys Glu Glu Ile Gly His
                645                 650                 655
aag gat gga tgc cca gaa gca tct tat gag tac tgt gtt aag gtg gtc    2016
Lys Asp Gly Cys Pro Glu Ala Ser Tyr Glu Tyr Cys Val Lys Val Val
            660                 665                 670
agg tgg ctg gaa tgt gag ggt tac att gag acc aac ttc aga gtg aag    2064
Arg Trp Leu Glu Cys Glu Gly Tyr Ile Glu Thr Asn Phe Arg Val Lys
        675                 680                 685
ttt ctg act tgg tat agc ctt cgt gct acc cct cat gac agg aag ata    2112
Phe Leu Thr Trp Tyr Ser Leu Arg Ala Thr Pro His Asp Arg Lys Ile
    690                 695                 700
gtc agc gtc tac gta aac act ctt att gat gat cct gtt agc ctt tct    2160
Val Ser Val Tyr Val Asn Thr Leu Ile Asp Asp Pro Val Ser Leu Ser
705                 710             715                     720
ggc cag ctt gct gac act ttc tct gag gcc atc tac agc aaa agg cca    2208
Gly Gln Leu Ala Asp Thr Phe Ser Glu Ala Ile Tyr Ser Lys Arg Pro
                725                 730                 735
cct tct gtt cgc tcc ggt ttc tgc atg gaa ctt tgg cat taa    2247
Pro Ser Val Arg Ser Gly Phe Cys Met Glu Leu Trp His
            740                 745
taa      2250
<210>    10
<211>    749
<212>    PRT
<213>    人工序列
<400>    10
Met Asp Pro Pro Tyr Ala Gly Val Pro Ile Asp ProAla Lys Cys Arg
  1               5                  10                 15
Leu Met Ser Val Asp Glu Lys Arg Glu Leu Val Arg Glu Leu Ser Lys
             20                  25                  30
Arg Pro Glu Ser Ala Pro Asp Lys Leu Gln Ser Trp Ser Arg Arg Glu
         35                  40                  45
Ile Val Glu Ile Leu Cys Ala Asp Leu Gly Arg Glu Arg Lys Tyr Thr
     50                  55                  60
Gly Leu Ser Lys Gln Arg Met Leu Glu Tyr Leu Phe Arg Val Val Thr
 65                  70                  75                  80
Gly Lys Ser Ser Gly Gly Gly Val Val Glu His Val Gln Glu Lys Glu
                 85                  90                  95
Pro Thr Pro Glu Pro Asn Thr Ala Asn His Gln Ser Pro Ala Lys Arg
            100                 105                 110
GlnArg Lys Ser Asp Asn Pro Ser Arg Leu Pro Ile Val Ala Ser Ser
       115                 120                 125
Pro Thr Thr Glu Ile Pro Arg Pro Ala Ser Asn Ala Arg Phe Cys His
    130                 135                 140
Asn Leu Ala Cys Arg Ala Thr Leu ASh Pro Glu Asp Lys Phe Cys Arg
145                 150                 155                 160
Arg Cys Ser Cys Cys Ile Cys Phe Lys Tyr Asp Asp Asn Lys Asp Pro
            165                     170                 175
Ser Leu Trp Leu Phe Cys Ser Ser Asp Gln Pro Leu Gln Lys Asp Ser
            180                 185                 190
Cys Val Phe Ser Cys His Leu Glu Cys Ala Leu Lys Asp Gly Arg Thr
        195                 200                 205
Gly Ile Met Gln Ser Gly Gln Cys Lys Lys Leu Asp Gly Gly Tyr Tyr
    210                 215                 220
Cys Thr Arg Cys Arg Lys Gln Asn Asp Leu Leu Gly Ser Trp Lys Lys
225                 230                 235                 240
Gln Leu Val Ile Ala Lys Asp Ala Arg Arg Leu Asp Val Leu Cys His
                245             250                     255
Arg Ile Phe Leu Ser His Lys Ile Leu Val Ser Thr Glu Lys Tyr Leu
            260                 265                 270
Val Leu His Gh Ile Val Asp Thr Ala Met Lys Lys Leu Glu Ala Glu
        275                 280                 285
Val Gly Pro Ile Ser Gly Val Ala Asn Met Gly Arg Gly Ile Val Ser
    290                 295                 300
Arg Leu Ala Val Gly Ala Glu Val Gln Lys Leu Cys Ala Arg Ala Ile
305                 310                 315                 320
Glu Thr Met Glu Ser Leu Phe Cys Gly Ser Pro Ser Asn Leu Gln Phe
                325                 330                 335
Gln Arg Ser Arg Met Ile Pro Ser Asn Phe Val Lys Phe Glu Ala Ile
            340                 345                 350
Thr Gln Thr Ser Val Thr Val Val Leu Asp Leu Gly Pro Ile Leu Ala
        355                 360                 365
Gln Asp Val Thr Cys Phe Asn Val Trp His Arg Val Ala Ala Thr Gly
    370                 375                 380
Ser Phe Ser Ser Ser Pro Thr Gly Ile Ile Leu Ala Pro Leu Lys Thr
385                 390                 395                 400
Leu Val Val Thr Gln Leu Val Pro Ala Thr Ser Tyr Ile Phe Lys Val
                405                 410                 415
Val Ala Phe Ser Asn Tyr Lys Glu Phe Gly Ser Trp Glu Ala Lys Met
            420                 425                 430
Lys Thr Ser Cys Gln Lys Glu Val Asp Leu Lys Gly Leu Met Pro Gly
        435                 440                 445
Gly Ser Gly Leu Asp Gln Asn Asn Gly Ser Pro Lys Ala Asn Ser Gly
    450                 455                 460
Gly Gln Ser Asp Pro Ser Ser Glu Gly Val Asp Ser Asn Asn Asn Thr
465                 470                 475                 480
Ala Val Tyr Ala Asp Leu Asn Lys Ser Pro Glu Ser Asp Phe Glu Tyr
                485                 490                 495
Cys Glu Asn Pro Glu Ile Leu Asp Ser Asp Lys Ala Ser His His Pro
            500                 505                 510
Asn Glu Pro Thr Asn Asn Ser Gln Ser Met Pro Met Val Val Ala Arg
        515                 520                 525
Val Thr Glu Val Ser Gly Leu Glu Glu Ala Pro Gly Leu Ser Ala Ser
    530                 535                 540
Ala Leu Asp Glu Glu Pro Asn Ser Ala Val Gln Thr Gln Leu Leu Arg
545                 550                 555                 560
Glu Ser Ser Asn Ser Met Glu Gln Asn Gln Arg Ser Glu Val Pro Gly
                565                 570                 575
Ser Gln Asp Ala Ser Asn Ala Pro Ala Gly Asn Glu Val Val Ile Val
            580                 585                 590
Pro Pro Arg Tyr Ser Gly Ser Ile Pro Pro Thr Ala Pro Arg Tyr Met
        595                 600                 605
Glu Asn Gly Lys Asp Ile Ser Gly Arg Ser Leu Lys Ala Lys Pro Gly
    610                 615                 620
Asp Asn Ile Leu Gln Asn Gly Ser Ser Lys Pro Glu Arg Glu Pro Gly
625                 630                 635                 640
Asn Ser Ser Asn Lys Arg Thr Ser Gly Lys Cys Glu Glu Ile Gly His
                645                 650                 655
Lys Asp Gly Cys Pro Glu Ala Ser Tyr Glu Tyr Cys Val Lys Val Val
            660                 665                 670
Arg Trp Leu Glu Cys Glu Gly Tyr Ile Glu Thr Asn Phe Arg Val Lys
        675                 680                 685
Phe Leu Thr Trp Tyr Ser Leu Arg Ala Thr Pro His Asp Arg Lys Ile
    690                 695                 700
Val Ser Val Tyr Val Asn Thr Leu lie Asp Asp Pro Val Ser Leu Ser
705                 710                 715                 720
Gly Gln Leu Ala Asp Thr Phe Ser Glu Ala Ile Tyr Ser Lys Arg Pro
                725                 730                 735
Pro Ser Val Arg Ser Gly Phe Cys Met Glu Leu Trp His
            740                 745
<210>    11
<211>    999
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    OsCOL4的cDNA序列
<220>
<221>    CDS
<222>    (1)..(996)
<400>    11
atg gag gcg gtg gag gac aag gcg atg gtg gga gtg gga gga gcg gtg    48
Met Glu Ala Val Glu Asp Lys Ala Met Val Gly Val Gly Gly Ala Val
  1               5                  10                  15
gcg gcg ggg tac tcc tcg tcg tcg tgg ggg ttg ggg acg cgg gcg tgc    96
Ala Ala Gly Tyr Ser Ser Ser Ser Trp Gly Leu Gly Thr Arg Ala Cys
             20                  25                  30
gac tcg tgc ggc ggg gag gcg gcg cgg ctc tac tgc cgc gca gac ggg    144
Asp Ser Cys Gly Gly Glu Ala Ala Arg Leu Tyr Cys Arg Ala Asp Gly
         35              40                      45
gcg ttc ctg tgc gcc cgg tgc gac gcg cgg gcg cac ggc gcc ggg tcg    192
Ala Phe Leu Cys Ala Arg Cys Asp Ala Arg Ala His Gly Ala Gly Ser
     50                  55                  60
cgc cac gcg cgg gtg tgg ctg tgc gag gtg tgc gag cac gcg ccc gcc    240
Arg His Ala Arg Val Trp Leu Cys Glu Val Cys Glu His Ala Pro Ala
 65                  70                  75                  80
gcc gtc acg tgc cgg gcg gac gcc gcg gcg ctg tgc gcc gcc tgc gac    288
Ala Val Thr Cys Arg Ala Asp Ala Ala Ala Leu Cys Ala Ala Cys Asp
                 85                  90                  95
gcc gac atc cac tcg gcg aac ccg ctc gcg cgc agg cac gag cgc ctc    336
Ala Asp Ile His Ser Ala Asn Pro Leu Ala Arg Arg His Glu Arg Leu
            100                 105                 110
ccc gtc gcg ccc ttc ttc ggc ccg ctc gcc gac gcg ccg cag ccc ttc    384
Pro Val Ala Pro Phe Phe Gly Pro Leu Ala Asp Ala Pro Gln Pro Phe
        115                 120                 125
acc ttc tcc cag gcc gcc gcg gat gcc gcc ggg gcg cgg gag gag gat    432
Thr Phe Ser Gln Ala Ala Ala Asp Ala Ala Gly Ala Arg Glu Glu Asp
    130                 135                 140
gcg gac gat gac cgg agc aac gag gcc gag gcg gcg tcg tgg ctt ctc    480
Ala Asp Asp Asp Arg Ser Asn Glu Ala Glu Ala Ala Ser Trp Leu Leu
145                 150                 155                 160
ccc gag ccc gac gac aat agc cac gag gat agc gcc gca gcc gcc gac    528
Pro Glu Pro Asp Asp Asn Ser His Glu Asp Ser Ala Ala Ala Ala Asp
            165                     170                 175
gcg ttc ttc gcc gac acc ggc gcg tac ctc ggc gtc gac ctg gac ttc    576
Ala Phe Phe Ala Asp Thr Gly Ala Tyr Leu Gly Val Asp Leu Asp Phe
            180                 185                 190
gcc cgg tcc atg gac gga atc aag gcc atc ggg gta ccg gtc gcg ccg    624
Ala Arg Ser Met Asp Gly Ile Lys Ala Ile Gly Val Pro Val Ala Pro
        195                 200                 205
ccc gag ctg gac ctc acc gcc ggc agc ctt ttc tac ccc gaa cac tcc    672
Pro Glu Leu Asp Leu Thr Ala Gly Ser Leu Phe Tyr Pro Glu His Ser
    210                 215                 220
atg gcc cac agc ttg tcg tcg tcg gag gtc gcg atc gta ccg gac gcg    720
Met Ala His Ser Leu Ser Ser Ser Glu Val Ala Ile Val Pro Asp Ala
225                 230                 235                 240
ctg tcg gcg ggc gcg gcg gcg ccg ccc atg gtg gtg gtg gtg gcg agc    768
Leu Ser Ala Gly Ala Ala Ala Pro Pro Met Val Val Val Val Ala Ser
                245                 250                 255
aag ggg aag gag agg gag gcg cgg ctg atg cgg tac agg gag aag cgc    816
Lys Gly Lys Glu Arg Glu Ala Arg Leu Met Arg Tyr Arg Glu Lys Arg
            260                 265                 270
aag aac cgg cgg ttc gac aag acc atc cgg tac gcg tcc cgc aag gcg    864
Lys Asn Arg Arg Phe Asp Lys Thr Ile Arg Tyr Ala Ser Arg Lys Ala
        275                 280                 285
tac gcc gag acg cgg ccg cgc atc aag ggc cgg ttc gcc aag cgc acc    912
Tyr Ala Glu Thr Arg Pro Arg Ile Lys Gly Arg Phe Ala Lys Arg Thr
    290                 295                 300
gcc gac gcc gac gac gac gac gag gcg cca tgc tcg ccg gcg ttc tcc    960
Ala Asp Ala Asp Asp Asp Asp Glu Ala Pro Cys Ser Pro Ala Phe Ser
305                 310                 315                 320
gcc ctc gcc gcg tcg gac ggc gtc gtg ccg tcg ttc tga                999
Ala Leu Ala Ala Ser Asp Gly Val Val Pro Ser Phe
                325                 330
<210>    12
<211>    332
<212>    PRT
<213>    人工序列
<400>    12
Met Glu Ala Val Glu Asp Lys Ala Met Val Gly Val Gly Gly Ala Val
  l               5                  10                  15
Ala Ala Gly Tyr Ser Ser Ser Ser Trp Gly Leu Gly Thr Arg Ala Cys
             20                  25                  30
Asp Ser Cys Gly Gly Glu Ala Ala Arg Leu Tyr Cys Arg Ala Asp Gly
         35                  40                  45
Ala Phe Leu Cys Ala Arg Cys Asp Ala Arg Ala His Gly Ala Gly Ser
     50                  55                  60
Arg His Ala Arg Val Trp Leu Cys Glu Val Cys Glu His Ala Pro Ala
 65                  70                  75                  80
Ala Val Thr Cys Arg Ala Asp Ala Ala Ala Leu Cys Ala Ala Cys Asp
                 85                  90                  95
Ala Asp Ile His Ser Ala Asn Pro Leu Ala Arg Arg His Glu Arg Leu
            100                 105                 110
Pro Val Ala Pro Phe Phe Gly Pro Leu Ala Asp Ala Pro Gln Pro Phe
        115                 120                 125
Thr Phe Ser Gln Ala Ala Ala Asp Ala Ala Gly Ala Arg Glu Glu Asp
    130                 135                 140
Ala Asp Asp Asp Arg Ser Asn Glu Ala Glu Ala Ala Ser Trp Leu Leu
145                 150                 155                 160
Pro Glu Pro Asp Asp Asn Ser His Glu Asp Ser Ala Ala Ala Ala Asp
                165                 170                 175
Ala Phe Phe Ala Asp Thr Gly Ala Tyr Leu Gly Val Asp Leu Asp Phe
            180                 185                 190
Ala Arg Ser Met Asp GlyIle Lys Ala Ile Gly Val Pro Val Ala Pro
        195                200                 205
Pro Glu Leu Asp Leu Thr Ala Gly Ser Leu Phe Tyr Pro Glu His Ser
    2l0                 215                 220
Met Ala His Ser Leu Ser Ser Ser Glu Val Ala Ile Val Pro Asp Ala
225                 230                 235                 240
Leu Ser Ala Gly Ala Ala Ala Pro Pro Met Val Val Val Val Ala Ser
        245                         250                 255
Lys Gly Lys Glu Arg Glu Ala Arg Leu Met Arg Tyr Arg Glu Lys Arg
            260                 265                 270
Lys Asn Arg Arg Phe Asp Lys Thr Ile Arg Tyr Ala Ser Arg Lys Ala
        275                 280                 285
Tyr Ala Glu Thr Arg Pro Arg Ile Lys Gly Arg Phe Ala Lys Arg Thr
    290                 295                 300
Ala Asp Ala Asp Asp Asp Asp Glu Ala Pro Cys Ser Pro Ala Phe Ser
305                 310                 315                 320
Ala Leu Ala Ala Ser Asp Gly Val Val Pro Ser Phe
                325                 330
<210>    13
<211>    894
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    OsCOL8的cDNA序列
<220>
<221>    CDS
<222>    (1)..(891)
<400>    13
atg tcg gcg gcg tcg ggc gcc gcg tgc ggg gtg tgt ggg gga ggg gtg    48
Met Ser Ala Ala Ser Gly Ala Ala Cys Gly Val Cys Gly Gly Gly Val
  1               5                  10                  15
ggg gag tgc ggg tgc ctg ctg cat cag cgg cgt ggg gga ggc ggt ggt    96
Gly Glu Cys Gly Cys Leu Leu His Gln Arg Arg Gly Gly Gly Gly Gly
             20                  25                  30
ggt gga ggt gga ggg gtg agg tgc ggg atc gcg gcg gac ctg aac cgg    144
Gly Gly Gly Gly Gly Val Arg Cys GlyIle Ala Ala Asp Leu Asn Arg
     35                      40                 45
ggg tit ccg gcg atc ttt cag ggg gtg ggg gtg gag gag acg gcg gtg    192
Gly Phe Pro Ala Ile Phe Gln Gly Val Gly Val Glu Glu Thr Ala Val
     50                  55                  60
gaa ggg gat gga gga gcc cag ccg gcg gcc ggg ctg cag gag ttc cag    240
Glu Gly Asp Gly Gly Ala Gln Pro Ala Ala Gly Leu Gln Glu Phe Gln
 65                  70                  75                  80
ttc ttc ggc cac gac gac cac gac agc gtc gcg tgg ctc ttc aac gac    288
Phe Phe Gly His Asp Asp His Asp Ser Val Ala Trp Leu Phe Asn Asp
                 85                  90                  95
ccg gcg ccg ccc ggc ggg acg gac cac cag ctt cac cgc caa acc gcg    336
Pro Ala Pro Pro Gly Gly Thr Asp His Gln Leu His Arg Gln Thr Ala
            100                 105                 110
ccc atg gcg gtc ggc aac ggc gcg gcg gcg gcg cag cag cgg cag gcg    384
Pro Met Ala Val Gly Asn Gly Ala Ala Ala Ala Gln Gln Arg Gln Ala
        115                 120                 125
ttc gac gcg tac gcg cag tac cag ccg ggg cac ggg ctc acg ttc gac    432
Phe Asp Ala Tyr Ala Gln Tyr Gln Pro Gly His Gly Leu Thr Phe Asp
    130                 135                 140
gtg ccg ctc acc cga ggc gag gcc gcc gcc gcg gtg ctc gag gcc agc    480
Val Pro Leu Thr Arg Gly Glu Ala Ala Ala Ala Val Leu Glu Ala Ser
145                 150                 155                 160
ctc ggc ctc ggc ggc gcc ggc gcc ggc ggc agg aac ccg gcg acg tcg    528
Leu Gly Leu Gly Gly Ala Gly Ala Gly Gly Arg Asn Pro Ala Thr Ser
                165                 170                 175
agc agc aca atc atg tcc ttc tgt ggg agc acg ttc act gac gcc gtg    576
Ser Ser Thr Ile Met Ser Phe Cys Gly Ser Thr Phe Thr Asp Ala Val
            180                 185                 190
agc tcc atc ccg aaa gat cac gcg gcg gcg gcg gcg gtc git gcc aac    624
Ser Ser Ile Pro Lys Asp His Ala Ala Ala Ala Ala Val Val Ala Asn
        195                 200                 205
ggc ggc ctg agc ggc ggc ggc ggc gac ccg gcg atg gac cgg gag gcg    672
Gly Gly Leu Ser Gly Gly Gly Gly Asp Pro Ala Met Asp Arg Glu Ala
    210                 215                 220
aag gtg atg cgg tac aag gag aag agg aag cgg agg cga tac gag aag    720
Lys Val Met Arg Tyr Lys Glu Lys Arg Lys Arg Arg Arg Tyr Glu Lys
225                 230                 235                 240
cag atc cgg tac gcc tcg cgc aag gcc tac gcc gag atg cgg ccg cgc    768
Gln Ile Arg Tyr Ala Ser Arg Lys Ala Tyr Ala Glu Met Arg Pro Arg
                245                 250                     255
gtg aag ggc cgc ttc gcc aag gtg ccc gac ggc gag ctg gac ggc gcg 816
Val Lys Gly Arg PheAla Lys Val Pro Asp Gly Glu Leu Asp Gly Ala
            260                265                 270
aca ccg ccg ccg ccg tcc tcc gcc gcc ggc ggc ggc tac gag ccc ggc 864
Thr Pro Pro Pro Pro Ser Ser Ala Ala Gly Gly Gly Tyr Glu Pro Gly
        275                 280                 285
cgg ctc gac ctc gga tgg ttc cgt tcg tag                         894
Arg Leu Asp Leu Gly Trp Phe Arg Ser
    290                 295
<210>    14
<211>    297
<212>    PRT
<213>    人工序列
<400>    14
Met Ser Ala Ala Ser Gly Ala Ala Cys Gly Val Cys Gly GIy Gly Val
  1               5                  10                  15
Gly Glu Cys Gly Cys Leu Leu His Gln Arg Arg Gly Gly Gly Gly Gly
             20                  25                  30
Gly Gly Gly Gly Gly Val Arg Cys Gly Ile Ala Ala Asp Leu Asn Arg
         35                  40                  45
Gly Phe Pro Ala Ile Phe Gln Gly Val Gly Val Glu Glu Thr Ala Val
     50                  55                  60
Glu Gly Asp Gly Gly Ala Gln Pro Ala Ala Gly Leu Gln Glu Phe Gln
 65                  70                  75                  80
Phe Phe Gly His Asp Asp His Asp Ser Val Ala Trp Leu Phe Asn Asp
                 85                  90                  95
ProAla Pro Pro Gly Gly Thr Asp His Gln Leu His Arg Gln Thr Ala
           100                 105                 110
Pro Met Ala Val Gly Asn Gly Ala Ala Ala Ala Gln Gln Arg Gln Ala
        115                 120                 125
Phe Asp Ala Tyr Ala Gln Tyr Gln Pro Gly His Gly Leu Thr Phe Asp
    130                 135                 140
Val Pro Leu Thr Arg Gly Glu Ala Ala Ala Ala Val Leu Glu Ala Ser
145                 150             155                     160
Leu Gly Leu Gly Gly Ala Gly Ala Gly GlyArg Ash Pro Ala Thr Ser
                165             170                    175
Ser Ser Thr Ile Met Ser Phe Cys Gly Ser Thr Phe Thr Asp Ala Val
            180                 185                 190
Ser Ser Ile Pro Lys Asp His Ala Ala Ala Ala Ala Val Val Ala Asn
        195                 200                 205
Gly Gly Leu Ser Gly Gly Gly Gly Asp Pro Ala Met Asp Arg Glu Ala
    210                 215                 220
Lys Val Met Arg Tyr Lys Glu Lys Arg Lys Arg Arg Arg Tyr Glu Lys
225                 230                 235                 240
Gln Ile Arg Tyr Ala Ser Arg Lys Ala Tyr Ala Glu Met Arg Pro Arg
                245                 250                 255
Val Lys Gly Arg Phe Ala Lys Val Pro Asp Gly Glu Leu Asp Gly Ala
            260                 265                 270
Thr Pro Pro Pro Pro Ser Ser Ala Ala Gly Gly Gly Tyr Glu Pro Gly
        275                 280                 285
Arg Leu Asp Leu Gly Trp Phe Arg Ser
    290                 295
<210>    15
<211>    13000
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    OsMADS14的基因组DNA序列
<400>    15
gcttcagtta ataagatata tacttggtat tttgcttaca ttttcatttt ttttcccctt     60
gtcacagcaa attccccaag cataacatgt gagtgtgaca acacagttcc tgttctctta    120
gcttatcttg gattcaatcc cctcatccaa aattaaattc catttgttcc ctatttcaga    180
ggggaatttc tcggggtatc tctagtattt agcaacactt taatgtgtcc tatatattcc    240
cttggttcat cccctatagt catttcccat gattctctgt tcccttgggt ccactatgta    300
caggtattgc acatataaat catgaaacta ccaaatgcat tggcaattgc aagttgatgt    360
acaactatag aagtgtgttt atttggggat gaagtgggat atgttaggtc catccttatt    420
ttctgagatg ggatagcccc atctatgtct ttggcataag ggatataatg ctcttatttt    480
ttttataagg aatgtgaggg tgtggcccgc atctcaattc gagtccgtta atttttttca    540
tataaagttg acctggatct agaaaaatat tccatttcaa ggattattct gtcccacctg    600
ttatcgaacc gaacaccctg aaaatagatt tgtccccaca tgactatctc atccctttca    660
accaaataca ttataactta ttgacggttc tgcagctctg gctcgtttcg gaaaagagct    720
atgatggagg ctcgggctca gctaatttgg cttacaagct gagctgagct ttttgtcctc    780
acctagttct gcccatgggg aatctaacat tatcaatcat acaccatatc ttaaagagat    840
gctgctatga tacgtcaaga agtcaagttt taaggtagaa tatatggtag ttgggaaaat    900
agaatcatta cataaatgtt agaaaatagg gatgccaacg cgacatgctt gcaggctttg    960
aggcccagta aacctaattg tacttttttt tcatccattt ttattatata cttgttgatg    1020
aaaattaact tagaatatgg gctcttatgt aagatagcat cgcctgcatc cttacaaaga    1080
gacagataga tccaatcgta caattaaatc agtaatttta taagagaatg aaataacatt    1140
ctagctagtg tatccaagaa tgcacagtga agtccgtatt taagtcccat ccaaaacgat    1200
gtgatgttag atctgatcca aaatatttaa taatgtagct caagttttgc atagcccctg    1260
agaaccagac aagccaatgt taaaattcct actgtgcata gggagggcaa tcaatcatcc    1320
tactgcatga gtaggtccct gcttcctgtt caaaatactt tctccgttct acgaagacta    1380
catttttaga acaaagctaa caaactaatg gtgagagaag aaaaatcaaa tgaacactca    1440
ttaatacgaa aataaattat cgtcaaatga taacctagga ataattttga gttacagatt    1500
aattataggt aagaaagaac aaagttaaag cgatcgaaaa tgaagtctat  ttaaggacca   1560
gtttagtatg gctctagcta tagctccact cattctatag ctggagtcca accaaatagt    1620
ttctacacct aaaatagaaa tatagttggc tagagcgtta tcacaaaata aactagagag    1680
gtggagttga gttcagaccg ctacacaact tcactttaaa ctttaactcc taaagttaaa    1740
ttttaagaga tgaagatcta ctaaacaggc tttaatacgg aggaaatgca ttcatccaca    1800
aaggtcaaaa gcagcagaaa gagaacgaat gcctttgctg cattcaaccc caagcagagc    1860
tgcaggggtg ccaactgcca atcaggcaat catccactct gggagcgaca ggcgacgcca    1920
ttgatgggca caccccctcg ccggggccga cgggagacga gacgacgcag gcactgtttt    1980
gcggccgacc caagccaagc caagccagga gccatcccgt cccatcacga cgcattgctg    2040
ccgcggccta attgggcagg aaaagccatg gcccaccccc accgcctggc cagacgagac    2100
ggcccaaaaa aggatcggcc cagaaaagcc cacgagagta cgacgcacgc acgcgtcgcc    2160
gggaggcggg gcccgggccg gcgccgcctc gcccaatggc cgttcgacag cggaggcgat    2220
cgaaaccacc  ccggtatcgc caaaccgcct cctcctcctc cgacgatccg gcgcgcgctc   2280
cctttaaaat ccccccattt cctcctcctc ctcctcctcg tcgtcgtcgt ctcccccact    2340
cgatcgatcc  atccatcgat cgatcggtcc cccccatcgc gcgcgacgca ttccgccgcc   2400
gtctcgccgt gtccacgtga tgggggccgg ggctagggga taggcggata gccagcagcc    2460
accaccacca gtagttgccg tgtggggata ggtgtggcta tagggctagt ggtcgtcgct    2520
gatagcgagg tgggtagggt taattttggt tggaggtaga gagagagaga gagggaggga    2580
gggaggagga ggaggaggag gaggaggagg aagaacagga ggaagatggg gcggggcaag    2640
gtgcagctga agcggatcga gaacaagatc aaccggcagg tgaccttctc caagcgcagg    2700
tcggggctgc tcaagaaggc gaatgagatc tccgtgctct gcgacgccga ggtcgcgctc    2760
atcatcttct ccaccaaggg caagctctac gagtacgcca ccgactcatg gtacgtacgt    2820
acgtacgtgt gcttgattaa atttcatcct catcgcttgt ctctaagctt tcagttcttt    2880
tcgcttaatc gagcaatcct tgcgctacat gatgtgttcc cgtttccgtt ctgttcgtat    2940
cgatcgattg cctttgaatt ctgtgtgtga ttaattcgat ctgtcctgat tgctcgaatt    3000
aattttgttg cgtgtgtttc ggggttatcc ccaataatct gtttgaattt ctgctgcgat    3060
tgttgattgc ttgccggcga tggaggaggc agcgtgtttt gctatttcag gctttgagct    3120
gacggcgtga ggtgagatgc gttgcatctg tgcactgtag ctacagtgcc cgtacgaggg    3180
taattttatg ctccgctttc gctggagagg gcgttgctgc tgcgctattt ggggaatttt    3240
tttttggccc tgccgatggg tgctgcttgc ttggcgacaa gctagctttg cacccaaagg    3300
ggagaggggt gattagctag gaactctagt acgtagattt gatggacctg ggattatttg    3360
gggattaaaa tggtcttggc ttgtgttcat ctaaaattct actgaacttg ctgcttgtgt    3420
tgtgtgtgcc tcttctttct tcactattcc ccatattaat tctgggctcg tttagatctt    3480
ctttctctct ccctggccat ctctttctct tgaggcaact aagcatatta agggagaaga    3540
tgaaacggga tgcatcggga gatggaggag ttcatatctt aagctgctgg tgacttgttg    3600
gaaccctttt cgctggttcg tctgcctcta gctttcttgg actctttgct gatgcatgcc    3660
atgcttttca gaacgaaaag attttactag aacaaactta taagctaggg ctggccttta    3720
atctttactt cttaattccc ggctgtcatt agttcaatct aatggttcat tagttgctgg    3780
gttctacctt tcctataagg ttctttttga gatgtacatg gtttctgaag aaacatccat    3840
gcttctagct agcctgatta cagactggtt tcatgctgct tcttttttat cgaaaagtca    3900
ccttggggga gagtttccca cttaactcat tcgattttct tagttcagag gggaggtaca    3960
aaggt tacaa cattacatcg gaggtctgtt aagatgttaa gacttagtaa gaggtagaga   4020
ggagttaaca ggaaaaaaaa gaacttataa gctaaaggtt catcctagtt agcgctttag    4080
ttgctgggtt ctaccttttc tgtcaggttc ttcttgggat gtgcatatgg ttcctgaaga    4140
aacagacatt agaaatttag aactaagaag caaaacgttg gatgcttcca gtataccata    4200
tcatctgaag gatatttatc cttcttgatg ttttcgacaa tgatttacta ttaatgcatt    4260
gttatgcaag ctttgttaag tcaacatgca aatcttagag tttgatggtt aattccagtt    4320
cttatatatt ttttaagtta aaaattttct tatctctcct ttttcctcac tacatacgaa    4380
tagagtttga tctggctgtt ataaattttc ttcagttttg tgggcatcct tatatctact    4440
aatcagactc cccatatgat cagtgattat cagcttatac tctattctaa ttctatgaat    4500
gaacgactaa ttaacttaat taactcctcg ctgatttaat ccaataaggg tagtgtgttg    4560
ggcatcccca taatgctagc aaccacatct ctagataaga gtcattagta tcacatattt    4620
tgaaatcctt ctcactctaa ccattgatca gtgagttaag acataggagt agagcttcac    4680
gtgaggtaac agtgtttgga tttcaaggta tcaagtttgg ggtgggagta cacgagccga    4740
tggattaatc tgattttttt ttcgtttctc gtacgtcatt aaacgtctta tttggaaatc    4800
aactccatta ggttcctgca gggtactgta gttatgctaa ttaatccttc ttaagacttt    4860
tccaagattt agctttaaac agatgctttc atgaacctag ttgggaaaca tgacaaatcc    4920
tcttcgaact ttaattaaga tgttacttta attagcatgc cttaagctgg catacgtagc    4980
ggcaaatgca accacttaca attcatcaca aggcaataga tcgactggct ttcttgttaa    5040
agctaagcaa gtagttacct actgcgccaa taagaatatt gagcctactc cattggtacg    5100
atgggtaata tttataaatg cttgtcgttt aggagtagca agacactagt tctttcatat    5160
ttgtttgggt gccaatttag aaaactctcc gtacttcaaa tgtagtaaaa tactctccta    5220
ctgctctttg gacgatgaac gtctacacag acaaacagta gtcatatttg aagtgactcg    5280
ggagatattt taattctttt taactataag cagtagaatt gtaaagttgg tttcctccat    5340
cttaatccaa tgcacgaagt tcagaactct gctttgatta atagagctcg cagcgacttg    5400
catgctgttt tcacaacaag actcttgtag tattgcatct agccgtatat agatgagtcg    5460
gcaatgagtt aactctggct ctcactgtct cacacgctat tagggttcca gacttccagt    5520
ctacttgatt cagaaaaata caaatattct cttataagtt agcccaaaat aataaaatgg    5580
atatatattt gcgggcatta attggtctaa ctatgctcgg aggcctactg gtccaactcg    5640
cgtaggacat acaaactcat aaccgcataa tatacctgtt cagctatttg gttatacagt    5700
attgagttga ttcctgctgt tgactgaact gtagcaacgt ctgtatatat ccgggactaa    5760
tgataaattt tcagtttgga ttgcattatt cacaatatct tttaagcatt aatactgtat    5820
taattctctt gacacttcat ttttgtaata attttgttaa ttttccatag gttgattaat    5880
ttcaagttat cctatatact tatatagttc atctccacta agtgtagtta atgatatttc    5940
tctcctctta ttagactaca ttaccccaat tatttctagc cattggataa tagatatatg    6000
gttcaaattt tctcttcttt cttctctcat tacaccaagt aatctcaatc atttttaggc    6060
cttaaactca taagtatcaa tttgttttag ttttaatatt catatttcat cttatttgta    6120
catattatgc aacttaattt cccgcagcaa cgcggcagag tattcattta gttaatgtag    6180
acaacccaat atcacatgtg atcttacttg attatcattg attagaccct gtctaggaat    6240
aagaagcaaa tatgttctct ttcaacaaag ttatgtttgc ttaagagtct agggtgttgt    6300
atttcccctt aattctttct atagatagtt atacttgcta tcctgtttca tttctttttc    6360
ttaacgaaaa tgagatacag ttcagttgct taagcttttc ttgacatgta tgcttgtatt    6420
acatgtttac cttgactttg ccccagaagt ataccttcta tatatatgca tattatcttt    6480
ccccaaaagg ttatacagac ccttttgaaa ggttgacatt ttagtatgcc gtagaaagta    6540
tatatccttt ggttataaag tgaacttgtt caaagtgcct caagaacatg gaaatacttt    6600
agcaaacaat gaagctactc cctccattta taattcattt catattataa gttactttga    6660
atttatttcc tagtcaaact attttaagtt cgactaaatt tatagaaaaa aataaaaata    6720
tttctaacac aaaataaaca ttttatcaaa tatgttcaat attaaattta acgaaactaa    6780
tttggtattg ttgatgttgc tatttttttt ctataaattg gtcaaatgta aagatgcttg    6840
acttgggaaa aagtcaaaac gacttgtaat atgaaacgga tggagtaaga cttaataatg    6900
tttcagaact tgaaccatat cagtgctacc accaaaagct gatcattctg atatatgaaa    6960
atgtttattg ttagctttgc ccaaaaaacc gttttcatga actgcataaa tacaacaatt    7020
tattgttttt ttagggttct gtgtgtgggg gggtggtgtg ttaatccaac tcttgtgtta    7080
gaagtagatt ggcaaatcta ttctgtatta tatcttacat aagttcttat aagaataaac    7140
tgcaaaatgt aggtgttgtt atttacacca ctacgaagta cccccattta aattttgaat    7200
gtataacacc gttgactttt atacatatgt ttgaccgttc gtcttattaa aaaatacgta    7260
attgtcattt attttgttgt gatgtgtttt aagcatcaaa ggtagtttaa gcatgacttt    7320
tttttacata attgcaaaaa agaatttgaa taaaacaaat ggcattttat tatgggttac    7380
gcatttacat gtcataatat ccactgtgac atttgagaaa cctattcatg ttttgaacta    7440
gagattatta gtagttgagg gcctttgtta gatgctgcta gtcctatgat tttggttagt    7500
acatgtatgg caagtgaaat cgtattgata ttatattccc acacaatatg taagttactt    7560
caacacataa atatataaca atatctagtt ttgtattact tatatatata tattctcatc    7620
atagtgatag tcactaactt acctattaag acattcaaag aaatgggcat ccttcagtta    7680
ggatgttaca gtgatacacc ttttcgtttt gacaatactg catacgcagt ttctaaaaca    7740
actccatgtt aaaacataag gggttgcact caagtagatt ttgaagtgtg tgtgcgcgcc    7800
tgtgcaactt tcttgttctt ccttcgtttt attttaaacc tggaaactaa agtaggtttc    7860
ctgttaaatt cctatccttt cttaaaaaaa tggacttcaa gaaaaaacag accagaatca    7920
taaatacagt gtatgtatct gacctgtata tgaaaaggta cagccatatg tgcatttgtt    7980
gttgagatgg aagaatatat atactgctta gttattatta caattatttc aaatgatgaa    8040
acgtatattc ctcatttttc acagtatgga caaaatcctt gaacgttatg agcgctactc    8100
ctatgcagaa aaggtcctta tttcagctga atctgacact caggtaaaaa taaagagctc    8160
taattctgtt gtttctcata tctcaatatc ttgtttattt tttgaacttt tcactacacc    8220
tgtttcggtt gactcattca agacgggtac atccaacatt ttagctctcc tcaagttgga    8280
taaatcaatt aggcatcatt ttttatggca attttccatt gttatgtaga tcaactttta    8340
ataaatattg ctttacatct ctttgaacag taatctctta cttcaatgta cttatcaaat    8400
atgtagattt attctaaatt agattatatc cattttttat tacatagcgt cctgaccttt    8460
tggcatccca gcccaattga acctatttgc tgtctgaaat cttgaaaact caaactgaac    8520
tgttctttat attggtgcaa ttaattaggc tctctctctc aggtcagatc attaaaaatt    8580
gtggtattgt tacatttcat aagtgaaatt ttgttcacaa attagatcaa atttatcttc    8640
catgtttgtt tacacgtata cagctttgcc agttccctct tattcaaaca ttttttacac    8700
tatgattcaa tatacctttt gtggatttta ctggaacaaa atcatagtta ttgcctaatg    8760
aaaaactata aaaaaaaatt ttggatgcat gactacatca acactcatta tggaattttg    8820
tgtgccagag aatatcacaa aacatatttt tcatcaaata aaacaaaata aacattttcc    8880
agaacttttg gcgtggctca tcagaagttt ggaaccttaa ataatccttg ttttcattta    8940
gctgggactt actatagtca attatgctat taaaaagatc cattcgtcta tttgttacga    9000
ataatcttta ctctttagtt ggggttgatg gactaatggt gtactccaaa atcagaagtt    9060
cttttatggc tagatacatg tagaccggat ttgaaaactt tcaagtttag atttgacaaa    9120
aactttcaac tcgcgattga aaattttcaa gtccacattt gaaaactttc aagtttagat    9180
ttgaaaactt tcgacccaga tttgaaaact ttcaactcga gatttgaaaa ctttcaagcc    9240
tagatttaaa aactttcaag ttcagattga aaaactttca agttaagatt tgaaaatttt    9300
cagctcaaat atttttgaaa acacgtatcc taacaattaa aaaaatcaga aaaaacacga    9360
aagaatagcg aaaaaaagaa aaaaacgaaa aagatggaaa aaaaggaaac acaaaaaaaa    9420
aggaaaaaaa tcgcgtggga ccgccagctg gcgcgcgcgc cagttccgta actgacttgc    9480
gctcgccaat tagcatcccc catgtagaca tgcatattct tcgtttgcaa tattttttgt    9540
aagaagttgc tgtgtatgaa cattgttgac tgaactaatg tagttattat gcagacagtg    9600
gtaagtcata tttccatacc ataaagagtg agactgagaa ttttctaatc aagatattac    9660
aaaaagctga actagctagg cagactgtaa ccctgttatc attcctagaa atgtttgcta    9720
ctttggagat agtagataat atagttatca cgctgatgaa ttgtcaagga aacatacatt    9780
atagttccct ttcctaacat gcactatctg cttagagctt ttctctatat agattttgga    9840
tggcactatt gtatactctt cagcacattc aatttctaaa cttgtaatat tagtgattct    9900
gtgcttagaa ttgtggaggt cactgtacat ccaccagtaa atttagtttg atgagtgtcg    9960
agaagaaaag gtaagtgtgg agtgggggac aaagttaatc atattttact gcaagcacac   10020
tgaagtaaat ccatttattc aatatacact gtacctaagc aattctccac ggaggtatct   10080
tgcagttcta ggtgtccaca gttttagcta tatgcagtgc caaaatcgat taaagttaca   10140
cttgttaata tagaaattca aggtactcca aagggcacaa tcatttgcac aatcagttct   10200
tcctggcaat ttttcaaata tcagctaatg tatgaatagt attgtgatac ttcctattta   10260
ctcaaattta ttaatgtaaa tcttctatgc ttgcttgtat agggcaactg gtgccacgaa   10320
tataggaaac tgaaggctaa ggttgagaca atacagaaat gtcaaaagta attggaaact   10380
actcacaact ggtgccatta tgacattatg tactatacac tgttgacata aaattgttcg   10440
ccttaaatcc tgcaggcacc tcatgggaga ggatcttgaa tctttgaatc tcaaagagct   10500
gcagcagctg gagcagcagc tggaaaattc gttgaaacat atcagatcca gaaaggtggt   10560
ttttgtgatg agaattattc aaggctgata tcaacaatat gtgcaaaatt tatatggttt   10620
ttatacagct aaatatagat gtcctgtatg ttttacgagc tgacaattac aaatctcctt   10680
tatgtgcaga gccaactaat gctcgagtcc attaacgagc ttcaacggaa ggtaatgatg    10740
tcaaccatgt tagaccttta attgagtact gggacttgct agaaataacc ttgtcaaaac    10800
tcgagaaatc tttggccggc caccagttga taccatcgcg tgttatgttt catactctta    10860
ttttaagttc ccgccatgct tgcaactgca agtgctgcca cactttcatt ttctaacatg    10920
cacgccggat tcttgctgca ggaaaagtca ctgcaggagg agaataaggt cctacagaaa    10980
gaagtaggct gctagccttg atgcccccta gtttccatgc ttcagctgat cttggtttgt    11040
ttaacatcaa tcaagttaaa ttgacagaac ccttgctcct tcctacagct ggtggagaag    11100
cagaaagtcc agaagcaaca agtgcaatgg gaccagacac aacctcaaac aagttcctca    11160
tcatcctcct tcatgatgag ggaagccctt ccaacaacta atatcaggta agtaactagc    11220
agcctgaagt tagtttcgtc cttatgtagc acagacgaat aaccttttgg actaaagatc    11280
attagatcca gctttattag aaaacaaaat taaatggctc gtttagttca ctaccatatc    11340
aaaatattga cgatactaaa acctagacaa atattggaag tgctacattt ttttgtcaac    11400
ttatatatgt  tatcactata ttttaatagc aaatcaaaca ttagctaaaa tactattaaa   11460
aataccaaca acttaatagg ggcatatttt ggcaccaacc accaaacaac tgaaagttct    11520
aacaaggttg tataaaccaa taactatcaa acctttttta ggcacctcag aattttacgc    11580
ttttttttgt ctgaaaacac gccaaatctg ccccttttcc cccaaaacgc cagcgggctt    11640
tttcttgtca ttttggttgg tgatgtagct aagaggtgtg cttattcgtt ccacagtaac    11700
taccctgcag cagctggcga aaggatagag gatgtagcag cagggcagcc acagcatgtt    11760
cgcattgggc tgccaccatg gatgctgagc cacatcaacg gctaaggagg cttcagatcc    11820
ataccagtaa tcacaagttg caacctgacc cggtccggtc gcctgctgct ctggtttact    11880
actagtacta ttgtcatctt gcggttgcga gacgaggaaa gcattttagc cctaaattca    11940
gcattagtag caagctgcaa tgtgtatatt ttggcttcgt ccagcaccgt cttcctccca    12000
ccagtaattt acccatgtaa tatatgcgag tagcatgaac aaattttccc gtttccaacc    12060
atctccattg gtgtcatgtg tgacttaaat agcgaaattt cagcattgtg catagtgtga    12120
ttactgtaag ataaataaac tttgtagaca ataagtctcc gttatcttgc tgattggagc    12180
tgaatctgtc cgatcaccgg cagagctgat tgagcgcata ctgcataacg aataaattgt    12240
atgcgaacaa gttgataggc ataaatcgtt cgactgttta caaagaaaat aaggcgtgac    12300
attctcagtt aaataatggg agatcatctt gtatataatg atcttctgcc gtcactccta    12360
tacaaacatt ttacccatta caaaaaccaa gaaatatacc aaggcgccca agctcactgt    12420
cactgctgac tcccctacca ctaaaaattc tcaagagagg ataacgaatg ctaagcatta    12480
gtcttctaag aatggcattc agaactgtgg aactatgtgc cggctgatga gaactcagcc    12540
tatgaataaa ttaatctagc cacaacttta acataaagat attggtcaga ggttgtattt    12600
aactgaacag ggatatgcta gtattaaact cgaagcatct tctctttcag gcgtgaaatg    12660
aacttgaatg tctcctctgc tttgacctgt tgatacatat cacttcttga tactctgtcc    12720
ggatggaatt tcaaaagagc ttgcttgtaa gcagctttaa cctgaaaaaa gtttcatatt    12780
aaacaattgt cagcgggaag agatcaataa ttccttattt acatttatgg gtatcatttt    12840
atgaacttat atcagaacat ggcataaggt ggtaattgat ctcgcctaga ttgccagagg    12900
caataattgg caaatcttcc aaaatttgtc atgagaagct atctcttcta taaataaaca    12960
aacgaatttg ggatttctcc atagaaaatt gaaatacaat                          13000
<210>    16
<211>    947
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    OsMADS14的cDNA序列
<400>    16
atgggggccg gggctagggg ataggcggat agccagcagc caccaccacc agtagttgcc     60
gtgtggggat aggtgtggct atagggctag tggtcgtcgc tgatagcgag gtgggtaggg    120
ttaattttgg ttggaggtag agagagagag agagggaggg agggaggagg aggaggagga    180
ggaggaggag gaagaacagg aggaagatgg ggcggggcaa ggtgcagctg aagcggatcg    240
agaacaagat caaccggcag gtgaccttct ccaagcgcag gtcaaaactg ctcaagaagg    300
cgaatgagat ctccgtgctc tgcgacgccg aggtcgcgct catcatcttc tccaccaagg    360
gcaagctcta cgagtacgcc accgactcat gtatggacaa aatccttgaa cgttatgagc    420
gctactccta tgcagaaaag gtccttattt cagctgaatc tgacactcag ggcaactggt    480
gccacgaata taggaaactg aaggctaagg ttgagacaat acagaaatgt caaaagcacc    540
tcatgggaga ggatcttgaa tctttgaatc tcaaagagct gcagcagctg gagcagcagc    600
tggaaaattc gttgaaacat atcagatcca gaaagagcca actaatgctc gagtccatta    660
acgagcttca acggaaggaa aagtcactgc aggaggagaa taaggtccta cagaaagaac    720
tggtggagaa gcagaaagtc cagaagcaac aagtgcaatg ggaccagaca caacctcaaa    780
caagttcctc atcatcctcc ttcatgatga gggaagccct tccaacaact aatatcagta    840
actaccctgc agcagctggc gaaaggatag aggatgtagc agcagggcag ccacagcatg    900
aacgcattgg gctgccacca tggatgctga gccacatcaa cggctaa                  947
<210>    17
<211>    540
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    截短型OsMADS14的cDNA序列
<g20>
<221>    CDS
<222>    (1)..(537)
<400>    17
atg ggg cgg ggc aag gtg cag ctg aag cgg atc gag aac aag atc aac    48
Met Gly Arg Gly Lys Val Gln Leu Lys Arg Ile Glu Asn Lys Ile Asn
  1               5                  10                  15
cgg cag gtg acc ttc tcc aag cgc agg tca aaa ctg ctc aag aag gcg    96
Arg Gln Val Thr Phe Ser Lys Arg Arg Ser Lys Leu Leu Lys Lys Ala
             20                  25                  30
aat gag atc tcc gtg ctc tgc gac gcc gag gtc gcg ctc atc atc ttc    144
Asn Glu Ile Ser Val Leu Cys Asp Ala Glu Val Ala Leu Ile Ile Phe
         35                  40                  45
tcc acc aag ggc aag ctc tac gag tac gcc acc gac tca tgt atg gac    192
Ser Thr Lys Gly Lys Leu Tyr Glu Tyr Ala Thr Asp Ser Cys Met Asp
     50                  55                  60
aaa atc ctt gaa cgt tat gag cgc tac tcc tat gca gaa aag gtc ctt    240
Lys Ile Leu Glu Arg Tyr Glu Arg Tyr Ser Tyr Ala Glu Lys Val Leu
 65                  70                  75                  80
att tca gct gaa tct gac act cag ggc aac tgg tgc cac gaa tat agg    288
Ile Ser Ala Glu Ser Asp Thr Gln Gly Asn Trp Cys His Glu Tyr Arg
                 85                  90                  95
aaa ctg aag gct aag gtt gag aca ata cag aaa tgt caa aag cac ctc    336
Lys Leu Lys Ala Lys Val Glu Thr Ile Gln Lys Cys Gln Lys His Leu
            100                 105                 110
atg gga gag gat ctt  gaa tct ttg aat ctc aaa gag ctg cag cag ctg    384
Met Gly Glu Asp Leu Glu Ser Leu Asn Leu Lys Glu Leu Gln Gln Leu
        115                 120                 125
gag cag cag ctg gaa aat tcg ttg aaa cat atc aga tcc aga aag agc    432
Glu Gln Gln Leu Glu Asn Ser Leu Lys His Ile Arg Ser Arg Lys Ser
    130                 135                 140
caa cta atg ctc gag tcc att aac gag ctt caa cgg aag gaa aag tca    480
Gln Leu Met Leu Glu Ser Ile Asn Glu Leu Gln Arg Lys Glu Lys Ser
145                 150                 155                 160
ctg cag gag gag aat aag gtc cta cag aaa gaa ctg gtg gag aag cag    528
Leu Gln Glu Glu Asn Lys Val Leu Gln Lys Glu Leu Val Glu Lys Gln
                165                 170                 175
aaa gtc cag taa                                                    540
Lys Val Gln
<210>    18
<21l>    179
<212>    PRT
<213>    人工序列
<400>    18
Met Gly Arg Gly Lys Val Gln Leu Lys Arg Ile Glu Asn Lys Ile Asn
  1               5                  10                  15
Arg Gln Val Thr Phe Ser Lys Arg Arg Ser Lys Leu Leu Lys Lys Ala
             20                  25                  30
Asn Glu Ile Ser Val Leu Cys Asp Ala Glu Val Ala Leu Ile Ile Phe
         35                  40                  45
Ser Thr Lys Gly Lys Leu Tyr Glu Tyr Ala Thr Asp Ser Cys Met Asp
     50                  55                  60
Lys Ile Leu Glu Arg Tyr Glu Arg Tyr Ser Tyr Ala Glu Lys Val Leu
 65                  70                  75                  80
Ile Ser Ala Glu Ser Asp Thr Gln Gly Asn Trp Cys His Glu Tyr Arg
                 85                  90                  95
Lys Leu Lys Ala Lys Val Glu Thr Ile Gln Lys Cys Gln Lys His Leu
            100                 105                 110
Met Gly Glu Asp Leu Glu Ser Leu Asn Leu Lys Glu Leu Gln Gln Leu
        115                 120                 125
Glu Gln Gln Leu Glu Ash Ser Leu Lys His Ile Arg Ser Arg Lys Ser
    130                 135                 140
Gln Leu Met Leu Glu Ser Ile Asn Glu Leu Gln Arg Lys Glu Lys Ser
145                 150                 155                 160
Leu Gln Glu Glu Asn Lys Val Leu Gln Lys Glu Leu Val Glu Lys Gln
                165                 170                 175
Lys Val Gln
<210>    19
<211>    28
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    5’UTR处正向引物(F1)的序列
<400>    19
atcaagcttt acggccaaac cctacagc                                       28
<210>    20
<211>    28
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    3’UTR处反向引物(R1)的序列
<400>    20
ttgggtaccg atgggtagtg gagtctgc                                       28
<210>    21
<211>    28
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    正向引物的序列
<400>    21
atcaagcttg ttggttcatc ggcgatcg                                       28
<210>    22
<211>    29
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    反向引物的序列
<400>    22
ttgggtaccg agatccagct tattcctgg                                      29
<210>    23
<211>    20
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    I区域中的正向引物(F2)的序列
<400>    23
aaagctgacg ctgatggttt                                                20
<210>    24
<211>    21
<212>    DNA
<213>    人工序列
<220>
<223>    T-DNA中的hph基因中的反向引物(R2)的序列
<400>    24
atccagactg aatgcccaca g                                              21

Claims (36)

1.一种开花时间调节子，所述调节子含有选自下列的基因：具有SEQ IDNO：1的核苷酸序列的OsMADS50基因；具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因；具有SEQ ID NO：5的核苷酸序列的OsMADS56基因；SEQ ID NO：17的截短型OsMADS14基因，其中含有C结构域编码序列的3’末端区域缺失；具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因；具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因；具有SEQ ID NO：11的核苷酸序列的OsCOL4基因；以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因。
2.根据权利要求1的开花时间调节子，所述调节子含有选自下列的基因并且具有激活开花的功能：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS5O基因；具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因；具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因；具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因。
3.根据权利要求1的开花时间调节子，所述调节子含有选自下列的基因并且具有抑制开花的功能：具有SEQ ID NO：5的核苷酸序列的OsMADS56基因以及具有SEQ ID NO：11的核苷酸序列的OsCOL4基因。
4.根据权利要求1的开花时间调节子，所述调节子含有SEQ ID NO：17的截短型OsMADS14基因，其中含有C结构域编码序列的3’末端区域缺失；而且所述调节子具有在短日照条件下激活开花和在长日照条件下抑制开花的活性。
5.一种单子叶植物的开花时间调节子，所述调节子含有与选自下列的稻基因相应的对应基因，所述稻基因选自：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS50基因；具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因；具有SEQ ID NO：5的核苷酸序列的OsMADS56基因；SEQ ID NO：17的截短型OsMADS14基因，其中含有C结构域编码序列的3’末端区域缺失；具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因；具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因；具有SEQ ID NO：11的核苷酸序列的OsCOL4基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因。
6.一种稻的茎伸长调节子，所述调节子含有具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS5O基因。
7.一种开花时间调节性蛋白，所述蛋白由权利要求1的调节子编码，并且具有选自下列序列的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4、SEQ IDNO：6、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14和SEQ ID NO：18。
8.一种DNA构建体，所述构建体含有开花时间调节子，所述调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS5O基因；具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因；具有SEQ ID NO：5的核苷酸序列的OsMADS56基因；SEQ ID NO：17的截短型OsMADS14基因，其中含有C结构域编码序列的3’末端区域缺失；具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因；具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因；具有SEQ ID NO：11的核苷酸序列的OsCOL4基因以及具有SEQ IDNO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因；
其中所述开花时间调节子通过与植物中可操作的强启动子或增强子可操作地连接而过表达；或者所述开花时间调节子通过可***至植物基因的外源基因或内源转座子的***而被抑制，或者通过完整序列或部分序列的缺失而被抑制。
9.根据权利要求8的DNA构建体，其中所述开花时间调节子通过与玉米泛蛋白(ubi)启动子可操作地连接而过表达。
10.根据权利要求8的DNA构建体，其中所述开花时间调节子通过将含有35S增强子的T-DNA***至所述调节子的启动子区域而过表达。
11.根据权利要求8的DNA构建体，其中所述开花时间调节子通过T-DNA或内源转座子的***而被抑制。
12.根据权利要求8的DNA构建体，其中所述开花时间调节子通过完整序列或部分序列的缺失而被抑制。
13.根据权利要求8的DNA构建体，所述构建体含有开花时间调节子，所述开花时间调节子含有具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS5O基因，其中所述OsMADS50基因通过在其第四内含子***T-DNA而被抑制。
14.根据权利要求8的DNA构建体，所述构建体含有开花时间调节子，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：11的核苷酸序列的OsCOL4基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因，其中所述开花时间调节子通过在其第一外显子或3’UTR区域***T-DNA而被抑制。
15.一种转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞，由含有开花时间调节子的DNA构建体转化，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS50基因；具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因；具有SEQ ID NO：5的核苷酸序列的OsMADS56基因；SEQ ID NO：17的截短型OsMADS14基因，其中含有C结构域编码序列的3’末端区域缺失；具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因；具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因；具有SEQ ID NO：11的核苷酸序列的OsCOL4基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因；
其中所述开花时间调节子通过与植物中可起作用的强启动子或增强子可操作地连接而过表达，或者所述开花时间调节子通过可***至植物基因的外源基因或内源转座子的***而被抑制，或者通过完整序列或部分序列的缺失而被抑制，从而表现晚开花表型或早开花表型。
16.根据权利要求15的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞，由含有开花时间调节子的DNA构建体转化，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS50基因、具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因、具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因、具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因，其中所述开花时间调节子通过与玉米泛蛋白(ubi)启动子可操作地连接而过表达，从而表现早开花表型。
17.根据权利要求15的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞，由含有开花时间调节子的DNA构建体转化，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS50基因、具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因、具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因、具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因，其中所述开花时间调节子通过在启动子区域中***含有35S增强子的T-DNA而过表达，从而表现早开花表型。
18.根据权利要求15的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞，由含有开花时间调节子的DNA构建体转化，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS5O基因、具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因、具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因、具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因，其中所述开花时间调节子通过T-DNA或内源转座子的***而被抑制，从而表现晚开花表型。
19.根据权利要求15的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞，由含有开花时间调节子的DNA构建体转化，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS5O基因、具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因、具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因、具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因，其中所述开花时间调节子通过所述基因的全部或部分被修饰而被抑制，从而表现晚开花表型。
20.根据权利要求15的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞，由含有开花时间调节子的DNA构建体转化，所述开花时间调节子含有具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS5O基因，其中所述OsMADS5O基因通过在其第四内含子中***T-DNA而被抑制；或者
由含有开花时间调节子的DNA构建体转化，所述开花时间调节子含有具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因，其中所述OsCOL8基因通过在其第一外显子或3’UTR区域***T-DNA而被抑制，从而表现晚开花表型。
21.根据权利要求15的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞，由含有开花时间调节子的DNA构建体转化，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：5的核苷酸序列的OsMADS56基因和具有SEQ ID NO：11的核苷酸序列的OsCOL4基因，其中所述开花时间调节子通过与强启动子可操作地连接而过表达，或通过将含有可***至植物基因中的增强子的外源基因***至启动子区域中而过表达，从而表现晚开花表型。
22.根据权利要求15的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞，由含有开花时间调节子的DNA构建体转化，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：5的核苷酸序列的OsMADS56基因和具有SEQ ID NO：11的核苷酸序列的OsCOL4基因，其中所述开花时间调节子通过T-DNA或内源转座子的***而被抑制，或者通过完整序列或部分序列的修饰而被抑制，从而表现早开花表型。
23.根据权利要求15的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞，由含有开花时间调节子的DNA构建体转化，所述开花时间调节子含有SEQID NO：17的截短型OsMADS14基因，其中含有C结构域编码序列的3’末端区域缺失，其中C结构域区域缺失的不完整OsMADS14蛋白被过表达，从而表现早开花表型。
24.根据权利要求15至23任一项的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞，其中所述植物为稻。
25.一种调节开花时间的方法，所述方法包括如下步骤：通过与在植物中可起作用的强启动子或在植物中可起作用的增强子可操作地连接以诱导开花时间调节子的过表达，或者通过可***至植物基因的外源基因或内源转座子的***来诱导抑制，或者通过完整的或部分的下列序列的缺失来诱导抑制，从而激活或抑制植物的开花，
其中所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS5O基因；具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因；具有SEQ ID NO：5的核苷酸序列的OsMADS56基因；SEQ ID NO：17的截短型OsMADS14基因，其中含有C结构域编码序列的3’末端区域缺失；具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因；具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因；具有SEQ ID NO：11的核苷酸序列的OsCOL4基因以及具有SRQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因。
26.根据权利要求25的方法，所述方法包括如下步骤：通过与玉米泛蛋白(ubi)启动子可操作地连接来诱导开花时间调节子的过表达，以激活植物的开花，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS50基因；具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因；具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因；具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因。
27.根据权利要求25的方法，所述方法包括如下步骤：通过在调节子的启动子区域中***含有35S增强子的T-DNA来诱导开花时间调节子的过表达，以激活植物的开花，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS50基因；具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因；具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因；具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因。
28.根据权利要求25的方法，所述方法包括如下步骤：通过***T-DNA或内源转座子来诱导开花时间调节子的抑制，以抑制植物的开花，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS50基因；具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因；具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因；具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因。
29.根据权利要求25的方法，所述方法包括如下步骤：通过对完整序列或部分序列进行修饰来诱导开花时间调节子的抑制，以抑制植物的开花，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS50基因；具有SEQ ID NO：3的核苷酸序列的OsMADS51基因；具有SEQ ID NO：7的核苷酸序列的OsTRX1基因；具有SEQ ID NO：9的核苷酸序列的OsVIN2基因以及具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因。
30.根据权利要求25的方法，所述方法包括如下步骤：
通过在具有SEQ ID NO：1的核苷酸序列的OsMADS5O基因的第四内含子中***T-DNA来诱导该基因的抑制，或者
通过在具有SEQ ID NO：13的核苷酸序列的OsCOL8基因的第一外显子或3’UTR区域中***T-DNA诱导该基因的抑制，
从而抑制植物的开花。
31.根据权利要求25的方法，所述方法包括如下步骤：通过与强启动子可操作地连接或通过将含有可***至植物基因中的增强子的外源基因***至启动子区域来诱导开花时间调节子的过表达，以抑制植物的开花，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SFQ ID NO：5的核苷酸序列的OsMADS56基因和具有SEQ ID NO：11的核苷酸序列的OsCOL4基因。
32.根据权利要求25的方法，所述方法包括如下步骤：通过T-DNA或内源转座子的***或通过完整序列或部分序列的缺失诱导开花时间调节子的抑制，以激活植物的开花，所述开花时间调节子含有选自下列的基因：具有SEQ ID NO：5的核苷酸序列的OsMADS56基因和具有SEQ ID NO：11的核苷酸序列的OsCOL4基因。
33.根据权利要求25的方法，所述方法包括如下步骤：使含有SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：15的核苷酸序列的3’末端区域缺失，并使具有SEQ IDNO：18的氨基酸序列的C结构域缺失的不完整OsMADS14蛋白过表达，从而激活植物的开花。
34.根据权利要求25至33任一项的方法，其中所述植物为稻。
35.一种制备开花时间被调节的转基因植物、转基因植物的一部分或植物细胞的方法，所述方法包括如下步骤：
提供一种植物细胞；
用权利要求8至14任一项的DNA构建体转化所述植物细胞；并
培养所述转化的细胞。
36.一种调节茎伸长的方法，所述方法包括如下步骤：诱导具有SEQ IDNO：1的核苷酸序列的OsMADS50基因的过表达或抑制。
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Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102181456A (zh) * 2011-05-10 2011-09-14 石河子大学 棉花成花素基因GhFT及其载体、构建体、细胞和多肽
CN103382483A (zh) * 2012-05-04 2013-11-06 中国科学院微生物研究所 OsNRRa蛋白或其编码基因在调节植物开花时间中的应用
CN105543276A (zh) * 2016-01-28 2016-05-04 中国科学院植物研究所 一种培育由生殖生长逆转为营养生长的转基因植物的方法
CN109867716A (zh) * 2019-03-11 2019-06-11 西南大学 蜡梅CpVIN3基因及其应用
CN111548400A (zh) * 2020-05-18 2020-08-18 扬州大学 一种玫瑰花香调控基因RrMYB114及其应用
CN111996196A (zh) * 2020-07-28 2020-11-27 河南大学 水稻基因ljs1-1及其同源基因在控制水稻叶枕发育和叶夹角大小中的应用
CN112626081A (zh) * 2020-12-23 2021-04-09 重庆文理学院 一种龙眼开花调控基因DlWRKY25及其调控蛋白与应用
CN112646016A (zh) * 2021-01-22 2021-04-13 华中农业大学 改变玉米开花期的基因及方法
CN113684290A (zh) * 2020-05-19 2021-11-23 中国农业科学院作物科学研究所 长日照抑制基因变异在培育栽培稻中的应用

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101148673B (zh) * 2006-09-19 2011-09-21 中国农业科学院作物科学研究所 大豆开花时间调节基因gal1
JP2010233509A (ja) * 2009-03-31 2010-10-21 National Institute Of Agrobiological Sciences 青色ｌｅｄを利用した、イネを短期間で低コストに育成収穫する方法、及びこの方法に適した系統の選抜
EP2366791A1 (fr) 2010-03-16 2011-09-21 Biogemma Méthode pour modifier la date de floraison d'une plante
KR101348131B1 (ko) 2011-08-05 2014-01-10 경상대학교산학협력단 염분 스트레스 저항성을 조절하는 지잔티아 단백질
US20160138032A1 (en) * 2013-03-04 2016-05-19 National Institute Of Agrobiological Sciences Poaceae plant whose flowering time is controllable
EP3017049B1 (en) 2013-07-01 2018-08-22 Bayer CropScience NV Methods and means for modulating flowering time in monocot plants
CN105524154B (zh) * 2016-01-14 2019-07-09 华南农业大学 稻瘟病抗性相关基因OsCOL9的应用
CN108017695B (zh) * 2016-11-01 2020-06-19 中国科学院植物研究所 蛋白质OsMADS14在调控植物种子灌浆、千粒重和结实率中的应用
WO2020041079A1 (en) * 2018-08-21 2020-02-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Compositions and methods for modifying maturity in rice plants
JP7303519B2 (ja) 2019-03-05 2023-07-05 トヨタ自動車株式会社 変異型花成誘導遺伝子、当該変異型花成誘導遺伝子を有する形質転換植物、及び当該変異型花成誘導遺伝子を用いた花成制御方法
JP7299589B2 (ja) 2019-03-05 2023-06-28 トヨタ自動車株式会社 形質転換植物、及び花成誘導遺伝子を用いた花成制御方法
CN115807005B (zh) * 2022-09-14 2023-08-11 广东省农业科学院环境园艺研究所 国兰花发育调控基因sep4编码序列及其应用

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9422083D0 (en) * 1994-11-02 1994-12-21 Innes John Centre Genetic control of flowering
KR19990030639A (ko) * 1997-10-02 1999-05-06 정명식 개화시기 조절 유전자, 이를 포함하는 벡터 및 이에 의해 형질 전환된 식물체
US20110131679A2 (en) * 2000-04-19 2011-06-02 Thomas La Rosa Rice Nucleic Acid Molecules and Other Molecules Associated with Plants and Uses Thereof for Plant Improvement
KR20020031139A (ko) * 2002-03-28 2002-04-26 임학태 무 형질전환 방법과 그에 의해 생산된 만추대성 무품종 육성
EP2272962B1 (en) * 2002-09-18 2017-01-18 Mendel Biotechnology, Inc. Polynucleotides and polypeptides in plants
CA2511824A1 (en) 2002-12-26 2004-07-22 Syngenta Participations Ag Cell proliferation-related polypeptides and uses therefor
JP4504049B2 (ja) * 2003-03-10 2010-07-14 独立行政法人農業生物資源研究所 植物の開花を制御する遺伝子Ｌｈｄ４とその利用
KR100527285B1 (ko) * 2004-01-16 2005-11-09 학교법인고려중앙학원 벼 수술 특이적 발현 시스테인 프로테아제 유전자, 상기유전자의 수술 특이적 발현 프로모터, 상기 유전자의 발현억제를 이용한 웅성불임 도입벼의 생산방법

Cited By (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102181456B (zh) * 2011-05-10 2013-04-24 石河子大学 棉花成花素基因GhFT及其载体、构建体、细胞和多肽
CN102181456A (zh) * 2011-05-10 2011-09-14 石河子大学 棉花成花素基因GhFT及其载体、构建体、细胞和多肽
CN103382483A (zh) * 2012-05-04 2013-11-06 中国科学院微生物研究所 OsNRRa蛋白或其编码基因在调节植物开花时间中的应用
CN103382483B (zh) * 2012-05-04 2015-09-16 中国科学院微生物研究所 OsNRRa蛋白或其编码基因在调节植物开花时间中的应用
CN105543276A (zh) * 2016-01-28 2016-05-04 中国科学院植物研究所 一种培育由生殖生长逆转为营养生长的转基因植物的方法
CN109867716B (zh) * 2019-03-11 2020-11-27 西南大学 蜡梅CpVIN3基因及其应用
CN109867716A (zh) * 2019-03-11 2019-06-11 西南大学 蜡梅CpVIN3基因及其应用
CN111548400A (zh) * 2020-05-18 2020-08-18 扬州大学 一种玫瑰花香调控基因RrMYB114及其应用
CN113684290A (zh) * 2020-05-19 2021-11-23 中国农业科学院作物科学研究所 长日照抑制基因变异在培育栽培稻中的应用
CN111996196A (zh) * 2020-07-28 2020-11-27 河南大学 水稻基因ljs1-1及其同源基因在控制水稻叶枕发育和叶夹角大小中的应用
CN111996196B (zh) * 2020-07-28 2023-01-03 河南大学 水稻基因ljs1-1及其同源基因在控制水稻叶枕发育和叶夹角大小中的应用
CN112626081A (zh) * 2020-12-23 2021-04-09 重庆文理学院 一种龙眼开花调控基因DlWRKY25及其调控蛋白与应用
CN112626081B (zh) * 2020-12-23 2021-10-01 重庆文理学院 一种龙眼开花调控基因DlWRKY25及其调控蛋白与应用
CN112646016A (zh) * 2021-01-22 2021-04-13 华中农业大学 改变玉米开花期的基因及方法

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Publication number Publication date
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