CN100551404C - 利水消肿药物组合物的制备与检测方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明是一种利水消肿药物组合物，其特征在于，它是由以下重量配比的原料制成的药剂，龙葵果3-6、半枝莲1-4、泽兰1-4、楮实子1-4、黑大豆1-4、路路通0.5-2。本发明还公开了其制备方法、质量控制方法和用途。本发明药物组合物配伍严谨，遣药精当，在利水活血消肿、解毒抗癌散结的同时，辅以滋肾养阴固本，寓扶正于祛邪之中，攻补兼施，标本兼顾。

Description

利水消肿药物组合物的制备与检测方法和用途

技术领域

本发明涉及一种以中草药为原料制成的药物组合物，特别是一种利水消肿药物组合物，本发明还涉及该药物组合物的制备方法、质量控制方法和医药用途。

背景技术

癌性胸、腹水也叫恶性胸、腹腔积液，或癌性胸、腹膜炎，系恶性肿瘤的胸、腹膜转移或胸、腹膜本身恶性肿瘤所致的胸、腹腔积液。该病是晚期恶性肿瘤的常见并发症。临床上，恶性肿瘤病人一旦出现胸、腹腔积液，即意味着病变已局部或周身播散，已失去了手术治愈的可能性。又因积液量往往较多，且发生迅速，常造成病人严重的呼吸困难、心力衰竭，短期内周身状况急剧恶化，往往未能采用任何有效的治疗病人即已丧失生命。因此，这一被动局面越来越引起人们广泛的重视。特别是近十余年来，对癌性胸、腹水这一临床难题的研究有了长足的进展。不少临床实例和经验均说明了有可能通过适当积极的治疗获得较长期的缓解，为进一步化疗、放疗，甚至手术治疗争取到宝贵的机会和时间。因此，尽早积极地诊治癌性胸、腹腔积液，对延长病人的生命具有十分重要的意义。目前现代医学对癌性胸、腹水尚无理想的治疗药物，一般利尿剂对此无效。传统腔内化疗虽可高浓度直接抑杀癌细胞，但毒副反应明显，甚至有人认为有效率一般不超过60％。而频繁的外科治疗手段如抽水、引流等，患者只有一时性舒服感，往往使胸、腹水产生更快、更多；同时使机体丢失大量营养物质，如蛋白等，并易引起水、电解质代谢紊乱。目前常规西医疗法往往导致患者一般状况更差，病情恶化，日渐消瘦，体重下降，全身进一步衰竭。因此，有效地控制和消除癌性胸、腹水，对延长、拯救患者的生命有着及其重要的现实意义。控制了癌性胸、腹水就等于控制了肿瘤的生长与蔓延，就为临床进一步的有效治疗创造了机会，也就为患者获得“长期带瘤生存”创造了“生”的条件。

目前现代医学对癌性胸、腹水的主要治疗方法为胸、腹腔穿刺抽放积液，以暂时缓解患者的痛苦；其次为腔内注射化疗药，即给胸腔或腹腔内注射细胞毒性化疗药物，如5-氟脲嘧啶(5-FU)、丝裂毒素(MMc)、顺铂(PDD)、卡铂(CBP)、足叶已甙(VP-16)等；或腔内注射生物制品，如短小棒状杆菌(CP)、白细胞介素-2(IL-2)、干扰素等。最后才是利尿剂的应用，如双氢克脲噻、速尿等。但上述常规治疗手段均存在着严重的局限性及不同程度的毒副作用。如穿刺抽放水后短期内极易复发(反复)，一般穿刺后3天胸、腹水开始增加，一周后增至放水前的水平；而且穿刺抽放水，胸、腹水的产生越抽越多，渗出速度越抽越快；同时抽放水后患者体内丢失大量蛋白，消耗极大，一般状况更差，消瘦更加明显，恶液质加重。另外，反复多次抽放水后病人还易出现包裹性积液，患者咳嗽、气短、胸痛进一步加重，呼吸功能更差。至于胸、腹腔内注射药物，可出现恶心、呕吐、乏力、胸痛、发热、寒战、白细胞下降等不良反应。频繁使用利尿剂，不但疗效有限，而且可导致电解质紊乱，造成恶性循环，使上述症状更加严重。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种新的、配伍严谨、标本兼顾的利水消肿药物组合物。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供了上述药物组合物的制备方法。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供了上述药物组合物的质量控制方法。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供了上述药物组合物的医药用途。

本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种利水消肿药物组合物，其特点是，它是由以下重量配比的原料制成的药剂，

龙葵果  3-6            半枝莲  1-4

泽  兰  1-4            楮实子  1-4

黑大豆  1-4            路路通  0.5-2。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种利水消肿药物组合物，其特点是，各原料的重量配比为，

龙葵果  4-5        半枝莲  2-3

泽  兰  2-3        楮实子  2-3

黑大豆  2-3        路路通  1-2。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种利水消肿药物组合物，其特点是，各原料的重量配比为，

龙葵果  4.4        半枝莲  2.2

泽  兰  2.2        楮实子  2.2

黑大豆  2.2        路路通  1.1。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。本发明还提供了一种利水消肿药物组合物的制备方法，其特点是，其步骤是，取龙葵果、半枝莲、泽兰、楮实子、路路通、80-90％黑大豆6味药材水提取2-4次，加4-10倍量水煎煮40-100分钟，滤过，滤液浓缩成在80℃时其相对密度为1.05-1.10的清膏，喷雾干燥，粉碎过筛，加剩余部分10-20％的黑大豆粉，加入药用辅料，制成药剂学上可接受的任何一种剂型的药剂。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种利水消肿药物组合物的制备方法，其特点是，其步骤是，取龙葵果、半枝莲、泽兰、楮实子、路路通、90％黑大豆6味药材水提取3次，第一次加8倍量水煎煮80分钟，第二次加7倍量水煎煮60分钟，第三次加5倍量水煎煮50分钟，滤过，滤液浓缩成在80℃时相对密度为1.05-1.10的清膏，喷雾干燥，粉碎过筛，加剩余部分10％黑大豆粉，加入药用辅料，制成浓缩丸。

本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种利水消肿药物组合物的制备方法，其特点是，所制成的浓缩丸每克以野黄芩苷C₂₁H₁₈O₁₂计，不少于1.5mg。

本发明药物组合物可以制成药剂学上可接受的任何一种剂型的药物，优选浓缩丸剂，其质量控制方法如下：

【鉴别】

(1)取本品10丸，研细，加甲醇10ml，浸渍30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取半枝莲对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液各10ul，分别点于同一硅胶G板上，以乙酸乙酯-甲酸-水(6∶1∶5)的上层为展开剂，展开，取出，晾干。喷以10％三氯化铝乙醇液，烘干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上有相同颜色的荧光斑点。

(2)取本品20丸，研细，置100ml锥形瓶中，加5％甲酸的甲醇溶液50ml，摇匀，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加5％的氢氧化钠溶液溶解，滤过，滤液用盐酸调pH至4用***振摇萃取3次，每次15ml，合并***液，挥干，残渣加1ml***使溶解作为供试品溶液。称取咖啡酸对照品加***制成每1ml含0.5mg的对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液各10ul，分别点于同一硅胶G板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(2∶2∶0.1)为展开剂，展开10cm，取出，晾干，氨水熏，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。

【检查】应符合中国药典2005年版一部附录I A丸剂项下有关的各项规定。

【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与***适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；四氢呋喃-乙腈-0.1％磷酸(5∶11∶84)为流动相；检测波长为335nm，柱温：30℃，流速：1ml/min。理论板数按野黄芩苷计应不低于3000。

对照品溶液的制备：精密称取野黄芩苷对照品适量，加甲醇溶解制成0.02mg/ml的溶液，即得。

供试品溶液的制备：取本品5丸，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，加50％甲醇补足减失重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本发明所述的利水消肿药物组合物具备在制备治疗癌性胸腹水的药物中的用途，所述的药物为任何一种剂型的药物。

本发明组方中龙葵果味苦、微甘，性寒，归肺、肝、胃经，它既有解毒利水消肿之长，又有抗癌化瘀散结之功，兼有扶正达邪之妙，一举而三得，故用为君药。半枝莲味辛、苦，性寒，入肺、肝、肾经，清热解毒，利尿消肿，散瘀止血，抗癌；泽兰苦、辛，微温，入肝、脾二经，活血祛瘀，行水消肿，解毒消痈，二者合用以之加强龙葵果利水消肿，活血散结，解毒抗癌之力，故用为臣药。佐以楮实子味甘，性寒，入肝、肾、脾经，滋肾益阴，清肝明目，健脾利水，在滋养肾阴的同时，兼有利水消肿之功，助龙葵果扶正利水的同时，兼防其利水伤阴之弊；黑大豆味甘，性平，色黑入肾，兼入脾经。益肾养阴利水，活血祛风解毒，助龙葵果解毒活血利水的同时，补益脾肾，先后天并调，兼防龙葵果、半枝莲苦寒伤胃之弊。路路通性味甘平，能通行十二经穴，《本草纲目拾遗》谓其能搜逐伏水，行气活血，通络利水，故用为使药。诸药合用，共奏利水活血消肿，解毒散结抗癌，滋肾养阴固本之功。补虚泻实，标本兼顾，故为治疗癌性胸、腹水的难得良方。

与现有技术相比，本发明药物组合物从中医基本理论出发，配伍严谨，遣药精当，在利水活血消肿、解毒抗癌散结的同时，辅以滋肾养阴固本，寓扶正于祛邪之中，攻补兼施，标本兼顾。对于改善癌性胸、腹水患者的局部症状和全身状况都具有重要的作用，也可以弥补胸、腹腔穿刺抽水治疗的不足，又能加强局部腔内化疗药的疗效；癌性胸、腹水患者在局部状况好转的同时，全身状况也得到改善。本发明药物组合物经济便宜，服用方便，毒副作用小，其原料(中药材)药物丰富易得，价格低廉；组方合理，长期临床实践证明对癌性胸、腹水患者疗效确切；其主要药物组成从药理上来看，具有利水消肿、解毒抗癌、活血散结等作用，与癌性胸、腹水的主要病理改变相吻合。通过对制剂的提取工艺研究，可制成任何一种剂型的药物，特别是浓缩丸剂，通过初步临床观察和药学研究，认为制剂稳定，完全能达到治疗的质量要求。

具体实施方式

实施例1。一种利水消肿药物组合物，它是由以下重量配比的原料制成的药剂，

龙葵果  3        半枝莲  1

泽  兰  1        楮实子  1

黑大豆  1        路路通  0.5；

其制备方法是，按常规工艺提取其有效成份，加入常规药用辅料，制成丸剂。

实施例2。一种利水消肿药物组合物，它是由以下重量配比的原料制成的药剂，

龙葵果  3.5        半枝莲  3.5

泽  兰  3.5        楮实子  3.5

黑大豆  3.5        路路通  0.8；

其制备方法是，按常规工艺提取其有效成份，加入常规药用辅料，制成口服液。

实施例3。一种利水消肿药物组合物，它是由以下重量配比的原料制成的药剂，

龙葵果  6        半枝莲  4

泽  兰  4        楮实子  4

黑大豆  4        路路通  2

其制备方法是，按常规工艺提取其有效成份，加入常规药用辅料，制成片剂。

实施例4。一种利水消肿药物组合物，它是由以下重量配比的原料制成的药剂，

龙葵果  5.5        半枝莲  1.5

泽  兰  1.5        楮实子  1.5

黑大豆  1.5        路路通  1.5

其制备方法是，按常规工艺提取其有效成份，加入常规药用辅料，制成冻干粉针剂。

实施例5。一种利水消肿药物组合物，它是由以下重量配比的原料制成的药剂，

龙葵果  4        半枝莲  2

泽  兰  2        楮实子  2

黑大豆  2        路路通  1；

其制备方法是，按常规工艺提取其有效成份，加入常规药用辅料，制成胶囊。

实施例6。一种利水消肿药物组合物，它是由以下重量配比的原料制成的药剂，

龙葵果  5        半枝莲  3

泽  兰  3        楮实子  3

黑大豆  3        路路通  2；

其制备方法是，按常规工艺提取其有效成份，加入常规药用辅料，制成注射剂。

实施例7。一种利水消肿药物组合物，它是由以下重量配比的原料制成的药剂，

龙葵果  4.5        半枝莲  2.5

泽  兰  2.5        楮实子  2.5

黑大豆  2.5        路路通  1.5；

其制备方法是，按常规工艺提取其有效成份，加入常规药用辅料，制成颗粒剂。

实施例8。一种利水消肿药物组合物，它是由以下重量配比的原料制成的药剂，

龙葵果  4.4        半枝莲  2.2

泽  兰  2.2        楮实子  2.2

黑大豆  2.2        路路通  1.1；

其制备方法步骤是，取龙葵果、半枝莲、泽兰、楮实子、路路通、80％黑大豆6味药材水提取2次，分别加10、8倍量水煎煮100、80分钟，滤过，滤液浓缩成在80℃时其相对密度为1.05-1.10的清膏，喷雾干燥，粉碎过筛，加剩余部分20％的黑大豆粉，加入药用辅料，制成口服药剂。

实施例9。一种利水消肿药物组合物，它是由以下重量配比的原料制成的丸剂，(单位：克)

龙葵果  400        半枝莲  200

泽  兰  200        楮实子  200

黑大豆  200        路路通  100；

其制备方法步骤是，取龙葵果、半枝莲、泽兰、楮实子、路路通、85％黑大豆6味药材水提取4次，第一次加8倍量水煎煮80分钟，第二次加7倍量水煎煮60分钟，第三次加5倍量水煎煮50分钟，第四次加4倍量水煎煮40分钟，滤过，滤液浓缩成在80℃时相对密度为1.05-1.10的清膏，喷雾干燥，粉碎过筛，加剩余部分15％黑大豆粉，加入药用辅料，制成浓缩丸1000丸。用于治疗癌性胸腹水。

实施例10。一种利水消肿药物组合物，它是由以下重量配比的原料制成的丸剂，(单位：克)

龙葵果  440        半枝莲  220

泽  兰  220        楮实子  220

黑大豆  220        路路通  110；

其制备方法步骤是，取龙葵果、半枝莲、泽兰、楮实子、路路通、90％黑大豆6味药材水提取3次，第一次加8倍量水煎煮80分钟，第二次加7倍量水煎煮60分钟，第三次加5倍量水煎煮50分钟，滤过，滤液浓缩成在80℃时相对密度为1.05-1.10的清膏，喷雾干燥，粉碎过筛，加剩余部分10％黑大豆粉，加入药用辅料，制成浓缩丸1000丸。用于治疗癌性胸腹水。

实施例11。实施例8所制得的浓缩丸每克以野黄芩苷C₂₁H₁₈O₁₂计，为1.5mg。

实施例12。实施例9所制得的浓缩丸每克以野黄芩苷C₂₁H₁₈O₁₂计，为1.8mg。

实施例13。实施例10所制得的浓缩丸每克以野黄芩苷C₂₁H₁₈O₁₂计，为2.0mg。

实施例14。实施例8所制备的浓缩丸的质量控制方法。

【性状】本品为黑色浓缩丸；气微香，味微苦。

【鉴别】

(1)取本品10丸，研细，加甲醇10ml，浸渍30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取半枝莲对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液各10ul，分别点于同一硅胶G板上，以乙酸乙酯-甲酸-水(6∶1∶5)的上层为展开剂，展开，取出，晾干。喷以10％三氯化铝乙醇液，烘干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上有相同颜色的荧光斑点。

(2)取本品20丸，研细，置100ml锥形瓶中，加5％甲酸的甲醇溶液50ml，摇匀，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加5％的氢氧化钠溶液溶解，滤过，滤液用盐酸调pH至4用***振摇萃取3次，每次15ml，合并***液，挥干，残渣加1ml***使溶解作为供试品溶液。称取咖啡酸对照品加***制成每1ml含0.5mg的对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液各10ul，分别点于同一硅胶G板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(2∶2∶0.1)为展开剂，展开10cm，取出，晾干，氨水熏，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。

【检查】应符合中国药典2005年版一部附录I A丸剂项下有关的各项规定。

【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与***适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；四氢呋喃-乙腈-0.1％磷酸(5∶11∶84)为流动相；检测波长为335nm，柱温：30℃，流速：1ml/min。理论板数按野黄芩苷计应不低于3000。

对照品溶液的制备：精密称取野黄芩苷对照品适量，加甲醇溶解制成0.02mg/ml的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品5丸，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形

瓶中，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，加50％甲醇补足减失重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含半枝莲以野黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₂)计，每1g不得少于1.5mg。

【功能与主治】利水消肿、解毒抗癌、活血散结、扶正祛邪作用，用于癌性胸腹水。

【用法与用量】口服。一次15丸，一日3次。

【规格】每丸重0.2g

【贮藏】密封。

实验例1。按实施例10制备的本发明药物组合物浓缩丸(以下简称龙莲消水浓缩丸)对Hep和EAC腹水癌抑制作用的实验。

一、实验材料

(一)药品及试剂

龙莲消水浓缩丸，江苏中康药物科技有限公司提供；氟尿嘧啶注射液，0.25g/10ml，天津金耀氨基酸有限公司，批号：0505231；0.9％氯化钠注射液，南京小营制药厂，批号：2005052505。

(二)实验动物

KM小鼠，由南京医科大学实验动物中心提供，生产许可证：SCXK(苏)2002-0031；江苏中康药物科技有限公司，使用许可证：SYXK(苏)2003-0029

(三)仪器

MP12001电子天平，上海市恒平科学仪器有限公司；

二、实验条件及统计方。

(一)实验条件

给药前后，实验动物雌雄分笼，用全价颗粒饲料喂养；室温20～22℃，湿度40～70％。实验动物饲料由南京安立默科技有限公司提供。

(二)统计方法。本实验量反应资料采用Student-T检验法，统计软件用微软Excel软件。

三、实验方法与结果

(一)龙莲消水浓缩丸对EAC腹水癌延命率的影响

1.实验方法

无菌条件下抽取KM小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1∶3稀释，取KM小鼠50只，接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腹腔。24h后随机分为5组，即模型组、5-Fu组(0.025g/kg)和龙莲消水浓缩丸低、中、高剂量组(1.17g/kg、2.34g/kg、4.68g/kg)，每组10只，分别灌胃给予相应药物(模型组灌胃给予等容积蒸馏水)，连续给药2周。从接种瘤液后开始观察，每天观察各组动物死亡情况，计算30天内的平均生存期，计算各组延命率。此实验重复3次。

2.实验结果

小鼠接种EAC腹水癌后，5天可见明显腹水，龙莲消水浓缩丸三个剂量组小鼠生存期明显长于模型组，其中龙莲消水浓缩丸中、高剂量组小鼠的延命率大于50％。结果见表1。

表1  龙莲消水浓缩丸对EAC腹水癌延命率的影响(X±S，n＝10)

注：和模型组相比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

(二)龙莲消水浓缩丸对Hep肝癌腹水癌延命率的影响

1.实验方法

无菌条件下抽取KM小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1∶3稀释，取KM小鼠50只，接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腹腔。24h后随机分为5组，即模型组、5-Fu组(0.025g/kg)和龙莲消水浓缩丸低、中、高剂量组(1.17g/kg、2.34g/kg、4.68g/kg)，每组10只，分别灌胃给予相应药物(模型组灌胃给予等容积蒸馏水)，连续给药2周。从接种瘤液后开始观察，每天观察各组动物死亡情况，计算30天内的平均生存期，计算各组延命率。

2.实验结果

小鼠接种Hep腹水癌后，5天可见明显腹水，龙莲消水浓缩丸三个剂量组小鼠生存期明显长于模型组，其中龙莲消水浓缩丸中、高剂量组小鼠的延命率大于50％。结果见表2。

表2  龙莲消水浓缩丸对Hep腹水癌延命率的影响(X±S)

注：和模型组相比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

四、结论

通过S₁₈₀和Hep腹水癌实验，提示龙莲消水浓缩丸均具有一定的抗S₁₈₀和Hep腹水癌的作用。

Claims (8)

1、一种利水消肿药物组合物的制备方法，其特征在于，它由以下重量配比的原料制成，

龙葵果  3-6    半枝莲  1-4

泽  兰  1-4    楮实子  1-4

黑大豆  1-4    路路通  0.5-2；

其步骤是，取龙葵果、半枝莲、泽兰、楮实子、路路通、80-90％黑大豆6味药材水提取2-4次，加4-10倍量水煎煮40-100分钟，滤过，滤液浓缩成在80℃时其相对密度为1.05-1.10的清膏，喷雾干燥，粉碎过筛，加剩余部分10-20％的黑大豆粉，加入药用辅料，制成药剂学上可接受的任何一种剂型的药剂。

2、根据权利要求1所述的一种利水消肿药物组合物的制备方法，其特征在于，各原料的重量配比为，

龙葵果  4-5    半枝莲  2-3

泽  兰  2-3    楮实子  2-3

黑大豆  2-3    路路通  1-2。

3、根据权利要求1所述的一种利水消肿药物组合物的制备方法，其特征在于，各原料的重量配比为，

龙葵果  4.4    半枝莲  2.2

泽  兰  2.2    楮实子  2.2

黑大豆  2.2    路路通  1.1。

4、根据权利要求1所述的一种利水消肿药物组合物的制备方法，其特征在于，其步骤是，取龙葵果、半枝莲、泽兰、楮实子、路路通、90％黑大豆6味药材水提取3次，第一次加8倍量水煎煮80分钟，第二次加7倍量水煎煮60分钟，第三次加5倍量水煎煮50分钟，滤过，滤液浓缩成在80℃时相对密度为1.05-1.10的清膏，喷雾干燥，粉碎过筛，加剩余部分10％黑大豆粉，加入药用辅料，制成浓缩丸。

5、根据权利要求1所述的一种利水消肿药物组合物的制备方法，其特征在于，所制成的浓缩丸每克以野黄芩苷C₂₁H₁₈O₁₂计，不少于1.5mg。

6、一种如权利要求1所述方法制得的利水消肿药物组合物浓缩丸剂的鉴别方法，其特征在于，其步骤如下：

(1)取本品10丸，研细，加甲醇10ml，浸渍30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；取半枝莲对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液各10ul，分别点于同一硅胶G板上，以6∶1∶5的乙酸乙酯-甲酸-水的上层为展开剂，展开，取出，晾干；喷以10％三氯化铝乙醇液，烘干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上有相同颜色的荧光斑点；

(2)取本品20丸，研细，置100ml锥形瓶中，加5％甲酸的甲醇溶液50ml，摇匀，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加5％的氢氧化钠溶液溶解，滤过，滤液用盐酸调pH至4用***振摇萃取3次，每次15ml，合并***液，挥干，残渣加1ml***使溶解作为供试品溶液；称取咖啡酸对照品加***制成每1ml含0.5mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液各10ul，分别点于同一硅胶G板上，以2∶2∶0.1的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开10cm，取出，晾干，氨水熏，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。

7、一种如权利要求1所述方法制得的利水消肿药物组合物浓缩丸剂的含量测定方法，其特征在于，其步骤如下：

(1)色谱条件与***适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；5∶11∶84的四氢呋喃-乙腈-0.1％磷酸为流动相；检测波长为335nm，柱温：30℃，流速：1ml/min；理论板数按野黄芩苷计应不低于3000；

(2)对照品溶液的制备：精密称取野黄芩苷对照品适量，加甲醇溶解制成0.02mg/ml的溶液，即得；

(3)供试品溶液的制备：取本品5丸，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，加50％甲醇补足减失重量，摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；

(4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

8、权利要求1-3中任何一项所述的方法制得的利水消肿药物组合物在制备治疗癌性胸腹水的药物中的用途，所述的药物为任何一种剂型的药物。