CN100529055C - 一种产碱杆菌及其在制备威兰胶中的应用 - Google Patents
一种产碱杆菌及其在制备威兰胶中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN100529055C CN100529055C CNB2006100883560A CN200610088356A CN100529055C CN 100529055 C CN100529055 C CN 100529055C CN B2006100883560 A CNB2006100883560 A CN B2006100883560A CN 200610088356 A CN200610088356 A CN 200610088356A CN 100529055 C CN100529055 C CN 100529055C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- welan gum
- substratum
- strain
- application according
- fermented liquid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 229920002310 Welan gum Polymers 0.000 title claims abstract description 55
- 241000588986 Alcaligenes Species 0.000 title claims abstract description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 18
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 12
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 35
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 16
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 15
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 10
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 8
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 8
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 8
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 5
- 239000004567 concrete Substances 0.000 claims description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 3
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000015598 salt intake Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 claims description 3
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M dihydrogenphosphate Chemical compound OP(O)([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 2
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 12
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 abstract description 12
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 abstract description 4
- 238000004321 preservation Methods 0.000 abstract description 3
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 abstract description 2
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 9
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 9
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 8
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 8
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 8
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 5
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 230000003311 flocculating effect Effects 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Inorganic materials [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PQMKYFCFSA-N alpha-D-mannose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PQMKYFCFSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000007639 printing Methods 0.000 description 2
- 238000012807 shake-flask culturing Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 2
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 235000019890 Amylum Nutrition 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 239000003905 agrochemical Substances 0.000 description 1
- 238000009635 antibiotic susceptibility testing Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- -1 makeup Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 1
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 239000011376 self-consolidating concrete Substances 0.000 description 1
- 239000001117 sulphuric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000004753 textile Substances 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 1
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 description 1
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 description 1
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000001052 yellow pigment Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种产碱杆菌及其在制备威兰胶中的应用。该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.1737。该菌株可用于制备威兰胶,利用该菌株制备威兰胶的方法是将此菌株接种于含碳源、氮源、无机盐和水的无菌培养基中,在合适生长的条件下进行通风、搅拌培养,发酵液经提取即得威兰胶。该菌株能利用多种碳源和氮源,培养条件粗放,操作方便简单,威兰胶产量高,质量好,生产成本低。
Description
技术领域
本发明属于发酵工程技术领域,涉及一种高产威兰胶(Welan gum)的微生物菌株产碱杆菌(Alcaligenes.sp.)NXG-3,本发明还涉及该菌在制备威兰胶中的应用。
背景技术
半个世纪以来,微生物多糖获得了极大的发展,尤其是60年代,黄原胶产品第一次实现了商业化,引起了科学界和工业界的浓厚兴趣。随后新型的微生物多糖层出不穷。威兰胶是由微生物合成的异型多糖共聚物,它的单体组成为葡萄糖、葡萄糖醛酸、甘露糖和鼠李糖。威兰胶具有许多优良而独特的理化特性,可以作为增稠剂、悬浮剂、稳定剂等广泛用于石油、混凝土、涂料行业,也可用于油墨、食品、纺织印染、农药、化妆品、医药等行业。美国凯乐(Kelco)公司于20世纪80年代,实现了威兰胶的产业化生产,目前主要用于混凝土添加剂。日本也在制备自密实混凝土和自流平混凝土中使用了威兰胶,并于1994年批准威兰胶用于食品添加剂。
目前,威兰胶的生产主要是采用微生物发酵法,美国kelco公司筛选到一株威兰胶产生菌,保藏号ATCC31555,并以此菌为生产菌株实现了威兰胶的产业化生产,此外未见其他关于威兰胶生产的相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一株高产威兰胶的产碱杆菌。
本发明还有一个目的是提供该产碱杆菌在制备威兰胶中的应用。
本发明目的可以通过下列措施来达到:
本发明人实验室选育并保藏的微生物菌株产碱杆菌(Alcaligenes.sp.)NXG-3,目前该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),登记入册的编号是CGMCC No.1737,保藏日期是:2006年6月15日。以此菌作为生产菌株。
CGMCC No.1737菌株具有下述性质:
(1)菌落形态学特征:
在营养琼脂上,30℃培养20h出现黄色小菌落,菌落呈圆形,表面光滑,粘状,中央凸起,不透明。适当延长培养,菌落颜色加深,细胞的尺寸和形状变化很小。
(2)生理与生化特性:
a.培养温度:20~40℃,最适温度为30℃;
b.在pH 4~10范围内生长;
c.色素产生:产黄色素;
d.耐NaCl浓度:在6%浓度可以生长。
(3)抗生素敏感性试验:
NXG-3菌株对以下抗生素的最小抑菌浓度如下:
(4)营养特征:
产碱杆菌NXG-3的培养基中不需要添加生长因子,可以利用多种化合物作为碳源,这些物质既可以单独使用,也可以适当的比例复配充当碳源。有机氮或无机氮都可以作为氮源使用。培养基中各组分用量按各组分与培养基重量体积百分比的计为:碳源用量为培养基的2~7%(即每100ml培养基中含有碳源2~7克,下同),氮源用量为培养基的0.1~1%,无机盐用量为培养基的0.01~1%,其余为水。碳源一般采用葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖和淀粉水解液等,氮源可采用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、豆饼粉、棉子饼粉、尿素以及(NH4)25O4、NH4Cl等,培养基中还包括钾盐、镁盐、磷酸盐、硫酸盐等常用的无机盐类。
所述的保藏号为CGMCC No.1737的菌株在制备威兰胶中的应用。
所述应用的具体方法为:将保藏号为CGMCC No.1737的菌株接种于含碳源、氮源、无机盐和水的无菌培养基中,在合适生长的条件下进行通风、搅拌培养,生成的威兰胶发酵液经提取得到威兰胶。
所述的制备威兰胶的方法,其中培养基中各组分用量按各组分与培养基重量体积百分比的计为:碳源用量为培养基的2~7%,氮源用量为培养基的0.1~1%,无机盐用量为培养基的0.01~1%,其余为水。
所述的制备威兰胶的方法,其中培养基的碳源为葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、淀粉水解液中的一种或多种;氮源为牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、玉米浆、豆饼粉、棉籽饼粉、尿素、(NH4)2SO4、NH4Cl中的一种或多种;无机盐为钾盐、镁盐、磷酸盐、磷酸二氢盐、硫酸盐中的一种或多种。
所述的制备威兰胶的方法,其中合适生长的条件是:初始pH为5.5~8.0、培养温度为25~35℃、培养时间为36~72小时。
所述的制备威兰胶的方法,其中提取方法包括以下步骤:将发酵液进行粗滤,除去菌体;将经过粗滤处理的发酵液进行超滤,浓缩发酵液,去除小分子物质;将经过超滤处理的发酵液用有机溶剂分离,形成沉淀;对所得沉淀进行过滤;干燥、粉碎即可。
所述的制备威兰胶的方法,其中粗滤是在80~200目条件下进行。
所述的制备威兰胶的方法,其中超滤是在超滤膜截流分子量为105~106道尔顿,操作压力为0.06~0.6MPa,温度在20~90℃,发酵液膜面流速为2~6m/s的条件下进行。
所述的制备威兰胶的方法,其中有机溶剂为醇溶剂,醇溶剂加入量为超滤处理后发酵液体积的0.6~1.2倍。常用的醇溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇。
具体地说:
本发明提供的利用产碱杆菌NXG-3制备威兰胶的方法,是将CGMCC No.1737号菌株斜面活化一天后(斜面培养基采用牛肉膏蛋白胨培养基),在含有碳源、氮源和无机盐的培养基上培养36~72小时,可以生成浓度为10~30g/L的威兰胶发酵液,通常发酵条件还包括:培养基为:葡萄糖或玉米淀粉水解液2~7%,蛋白胨或豆饼粉0.1~1%,MgSO40.01~0.5%,K2HPO40.01~0.5%,各组分的含量均为各组分与培养基的重量体积百分比,即g/100ml,以下同。发酵温度25~35℃,较佳的为28~30℃;培养基的初始pH范围为5.5~8.0,较佳的为6.5~7.5;转速100-200r/min。这样的发酵条件既适用于摇瓶发酵,也可以放大至50L的发酵罐中使用。
本发明提供的提取威兰胶的生产方法,它包括步骤:
(a)发酵液进行粗滤:粗滤作用是除去大颗粒菌体碎片及其它大分物质,粗滤通常在80~180目,较佳地是在100~140目的工业滤布条件下进行。粗滤时对于助滤剂没有特别要求,食品领域中用的各种助滤剂都可用于本发明。合适的助滤剂有(并不限于):硅藻土、珍珠岩,其用量按照助滤剂与发酵液的重量体积百分比计通常为0.4~3%,较佳地为0.8~2%。
(b)超滤浓缩:对步骤(a)中经粗滤处理的发酵液在超滤器内进行超滤浓缩,以除去可溶性蛋白质、小分子物质和部分水,超滤膜截流分子量为105~106道尔顿较好,操作压力为0.06~0.6MPa,较佳的为0.1~0.5MPa,通常控制温度在20~90℃,较佳的为40~60℃,膜面速度2~6m/s。
(c)沉淀分离:向(b)步骤中制成的威兰胶浓缩液中加入有机溶剂,如95%的乙醇,使胶沉淀,较佳的乙醇用量是经超滤浓缩后的发酵液体积的0.6~1.2倍。用常规方法将沉淀过滤、干燥即可。所得的威兰胶可根据需要粉碎成所需的粉末。
本发明制备的威兰胶具有如下的理化性质:
(1)产品易溶于水,1%的威兰胶水溶液粘度可达1800-3300cp,威兰胶不溶于乙醇、异丙醇等有机溶剂。
(2)产品具有很好的温度耐受性,在150℃下处理半小时,粘度不变;在pH2~13的范围内,性质稳定。
(3)产品经4mol/L硫酸水解、糖腈乙酸酯衍生化处理后,气相色谱检测得威兰胶的单糖组分为:葡萄糖、甘露糖、鼠李糖;化学法测得该产品中还含有葡萄糖醛酸。结构式如下:
(4)采用高碘酸氧化法,鉴定了本品的糖苷键类型主要为1→4键和1→3键。
本发明的优点:
(1)本发明筛选到一株威兰胶生产菌,该菌能利用多种碳源和氮源发酵生产威兰胶,操作方便简单,培养条件十分粗放。
(2)可以使用粗淀粉水解糖液(替代葡萄糖或蔗糖)和豆饼粉(替代酵母膏或蛋白胨)作为威兰胶发酵培养基的碳源和氮源,使发酵原料成本大幅下降。
(3)采用了粗滤、超滤浓缩、醇提取法替代传统的直接用醇沉淀脱水法从溶液中分离威兰胶,使产品蛋白质含量减少20%左右,使单位产品的醇溶剂消耗量下降50%左右。该方法不仅可获得高品质的威兰胶,而且将提取过程中的醇溶剂用量大幅减少。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步说明,但对本发明没有限制。
实施例1
斜面培养基:蛋白胨10g/L,牛肉膏3g/L,NaCl 5g/L,琼脂20g/L,pH7.2。
摇瓶培养基:葡萄糖50g/L,豆饼粉4g/L,蛋白胨1g/L,K2HPO42g/L,MgSO40.1g/L,pH7.2。250ml容积的三角瓶中装液量50ml,121℃灭菌15分钟。
将保藏号为CGMCC No.1737的产碱杆菌NXG-3在斜面培养基上28~32℃培养72h,然后接一环此菌于摇瓶培养基中,30℃培养72h,摇瓶转速200r/min,最后得到的发酵液中威兰胶的含量为18g/L。
实施例2
将葡萄糖175g,蛋白胨14g,K2HPO47g,MgSO40.35g,pH7.2,用水定容到3.5L,配成发酵液,装入一个7.5升玻璃搅拌发酵罐中,121℃蒸汽灭菌15分钟。配制种子培养基:葡萄糖20g/L,蛋白胨4g/L,酵母膏1g/L,K2HPO42g/L,MgSO40.1g/L,pH7.2。将保藏号为CGMCC No.1737的产碱杆菌NXG-3接两环于种子培养基中,30℃培养16h得种子液,将种子液按发酵液体积10%的接种量接入冷却后的发酵液中,30℃培养(通风量1vvm,搅拌转速为600r/min)60h,发酵液中含威兰胶27g/L,粘度达8000cp。
实施例3
将1750克玉米淀粉与适量的水混合,加入适量的高温α-淀粉酶液,同时加入豆饼粉140g,K2HPO470g,MgSO43.5g,pH7.2,用水定容至35L,装入50升机械搅拌发酵罐中,90℃保温液化10分钟,再升温至121℃蒸汽灭菌10分钟。配制种子培养基,配方与培养方法同实施例2,将种子液按发酵液体积10%的接种量接入冷却后的发酵液中,30℃培养60小时,成熟的发酵液升温至80~90℃灭活15分钟,冷却后加入发酵液体积两倍的浓度为95%的乙醇,4℃保温过夜,过滤去除上清液,沉淀物在55℃真空干燥箱中烘干约3小时,即得威兰胶成品。
实施例4
威兰胶的后提取工艺:
A.粗滤:取50mL按实施例2得到的成熟发酵液,用HCl调节pH为6.5~7.5,进行粗滤,粗滤方式选用110目工业滤布,发酵液中加0.5g助滤剂(硅藻土),抽滤。
B.超滤浓缩:将经过粗滤的威兰胶发酵液在超滤器内进行浓缩,超滤膜截流分子量为106道尔顿,操作压力为0.2MPa,控制温度50℃,膜面速度4m/s。
C.醇析:将超滤后的发酵液在不断搅拌下加入95%的工业乙醇,乙醇用量为威兰胶超滤浓缩液体积的1.2倍,静置形成沉淀。
D.烘干和粉碎:将沉淀块搅碎,装入滤布中抽滤至无液体流出,沉淀物55℃真空干烘干3小时,粉碎即为产品。
Claims (9)
1、一株生产威兰胶的菌株,其分类命名为产碱杆菌(Alcaligenes.sp.)NXG-3,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号CGMCCNo.1737。
2、权利要求1所述的菌株在制备威兰胶中的应用。
3、根据权利要求2所述的应用,其特征在于该应用的具体方法为:将保藏号为CGMCC No.1737的菌株接种于含淀粉水解液、豆饼粉、无机盐和水的无菌培养基中,在合适生长的条件下进行通风、搅拌培养,生成的威兰胶发酵液经提取得到威兰胶,合适生长的条件是:初始pH为5.5~8.0、培养温度为25~35℃、好氧培养时间为36~72小时。
4、根据权利要求3所述的应用,其特征在于培养基中各组分用量按各组分与培养基重量体积百分比计为:淀粉水解液用量为培养基的2~7%,豆饼粉用量为培养基的0.1~1%,无机盐用量为培养基的0.01~1%,其余为水;无机盐为钾盐、镁盐、磷酸盐、磷酸二氢盐、硫酸盐中的一种或多种。
5、根据权利要求3所述的应用,其特征在于所述提取方法包括以下步骤:
将发酵液进行粗滤,除去菌体;将经过粗滤处理的发酵液进行超滤,浓缩发酵液,去除小分子物质;将经过超滤处理的发酵液用有机溶剂分离,形成沉淀;对所得沉淀进行过滤;干燥、粉碎即可。
6、根据权利要求5所述的应用,其特征在于粗滤是在80~200目条件下进行。
7、根据权利要求5所述的应用,其特征在于超滤是在超滤膜截流分子量为105~106道尔顿,操作压力为0.06~0.6MPa,温度在20~90℃,发酵液膜面流速为2~6m/s的条件下进行。
8、根据权利要求5所述的应用,其特征在于有机溶剂为醇溶剂,醇溶剂加入量为超滤处理后发酵液体积的0.6~1.2倍。
9、根据权利要求8所述的应用,其特征在于醇溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNB2006100883560A CN100529055C (zh) | 2006-07-13 | 2006-07-13 | 一种产碱杆菌及其在制备威兰胶中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNB2006100883560A CN100529055C (zh) | 2006-07-13 | 2006-07-13 | 一种产碱杆菌及其在制备威兰胶中的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1888054A CN1888054A (zh) | 2007-01-03 |
CN100529055C true CN100529055C (zh) | 2009-08-19 |
Family
ID=37577339
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNB2006100883560A Expired - Fee Related CN100529055C (zh) | 2006-07-13 | 2006-07-13 | 一种产碱杆菌及其在制备威兰胶中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN100529055C (zh) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101275154B (zh) * | 2008-01-22 | 2011-04-13 | 江南大学 | 一种微生物多糖威兰胶的生产方法 |
CN101942491A (zh) * | 2010-08-10 | 2011-01-12 | 江南大学 | 一种从威兰胶发酵液中高效分离提取威兰胶的方法 |
CN102618468B (zh) * | 2012-03-28 | 2013-06-19 | 南京工业大学 | 一种耐温型产碱杆菌及其在威兰胶生产中的应用 |
CN103614432B (zh) * | 2013-10-22 | 2016-06-29 | 广东中科天元新能源科技有限公司 | 一种威兰胶的发酵方法 |
CN104845896B (zh) * | 2014-09-23 | 2018-05-08 | 中国石油大学(华东) | 生产威兰胶的菌株及方法 |
-
2006
- 2006-07-13 CN CNB2006100883560A patent/CN100529055C/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
中空纤维超滤膜浓缩胞外多糖PS-9415发酵液的研究. 张宁,彭志英.食品工业科技,第24卷第2期. 2003 |
中空纤维超滤膜浓缩胞外多糖PS-9415发酵液的研究. 张宁,彭志英.食品工业科技,第24卷第2期. 2003 * |
产碱杆菌NX-3胞外多糖的结构与性能. 李莎,徐虹,姜岷.微生物学通报,第32卷第6期. 2005 |
产碱杆菌NX-3胞外多糖的结构与性能. 李莎,徐虹,姜岷.微生物学通报,第32卷第6期. 2005 * |
微生物聚多糖PS-238合成条件的研究. 李莎,徐虹,石宁宁.食品与发酵工业,第30卷第12期. 2004 |
微生物聚多糖PS-238合成条件的研究. 李莎,徐虹,石宁宁.食品与发酵工业,第30卷第12期. 2004 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN1888054A (zh) | 2007-01-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101215592B (zh) | 生产普鲁兰多糖的发酵方法 | |
CN101543285B (zh) | 麦麸膳食纤维复合功能菌粉制品及其制备工艺 | |
CN103804034B (zh) | 氨基酸叶面肥的制备方法 | |
CN100475951C (zh) | 利用费氏丙酸杆菌nx-4制备丙酸及联产维生素b12的方法 | |
CN103275876A (zh) | 茶源冠突散囊菌菌株及其应用 | |
CA3121566C (en) | Aspergillus oryzae blcy-006 strain and application thereof in preparation of galactooligosaccharides | |
CN101948785A (zh) | 一株γ-聚谷氨酸产生菌及利用其制备γ-聚谷氨酸及其盐的方法 | |
CN100529055C (zh) | 一种产碱杆菌及其在制备威兰胶中的应用 | |
CN105176883A (zh) | 一株高产中温α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌及其液体发酵方法 | |
CN111517860A (zh) | 富含海藻活性寡糖的植物营养剂及其制备方法 | |
CN101041837B (zh) | 一种新的天然脱落酸制备方法 | |
CN110129216A (zh) | 一种适于固体发酵生产γ-聚谷氨酸的枯草芽孢杆菌诱变菌株及其培养方法 | |
CN101831416B (zh) | 一种普鲁兰酶及其生产方法 | |
CN105420127A (zh) | 高分子量普鲁兰多糖的高产菌株及利用该菌株生产高分子量普鲁兰多糖的方法 | |
CN110129225A (zh) | γ~聚谷氨酸产生菌及选育、制备γ~聚谷氨酸的方法 | |
CN102127515B (zh) | 一株高产l-脯氨酸短波单胞杆菌(jnpp-1)的筛选及应用 | |
CN107365730B (zh) | 枯草芽孢杆菌菌株及利用该菌株生产支链淀粉酶的方法 | |
CN102618468B (zh) | 一种耐温型产碱杆菌及其在威兰胶生产中的应用 | |
CN105175275A (zh) | 一种l-鸟氨酸的分离纯化方法 | |
CN104673681A (zh) | 一株桦褐孔菌qd04及其转化虎杖生成白藜芦醇、三萜皂苷和多糖的方法 | |
CN107325975A (zh) | 一株酿酒酵母菌及其在发酵生产s‑腺苷蛋氨酸中的应用 | |
CN112481330A (zh) | 一种藻源β-1,3-葡聚糖发酵生产方法 | |
CN105349591A (zh) | 一种天然食品添加剂谷氨酸钠及其制备工艺 | |
CN105002228A (zh) | 一种以精氨酸为原料制备l-鸟氨酸的方法 | |
CN1327051A (zh) | 一种生产纤维素酶的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20090819 Termination date: 20210713 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |