CH679857A5 - - Google Patents

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L'invention se rapporte à des nouveaux composés qui sont pharmaceutiquement actifs vis-à-vis du Pneumocystis carinii, à des formulations pharmaceutiques contenant de tels composés.

La Pentamidine, sous la forme de son chlorhydrate, fut initialement découverte par Ewins et al., comme décrit dans le brevet U.S. No 2 277 861, et ses sels solubles dans l'eau furent ultérieurement étudiés et mis au point, comme décrit dans le brevet U.S. No 2 410 796 de Newberry et al, qui concerne de tels sels solubles dans l'eau, en particulier les sels hydroxy-éthane acide sulfonique et hydroxy-propane acide sulfonique de la Pentamidine. Le premier composé est désigné généralement sous le nom de Pentamidine iséthionate.

Le Pentamidine iséthionate est actuellement distribué par LyphoMed, Inc. sous la marque déposée Pentam, pour injections intraveineuse et intramusculaire, et est indiqué pour le traitement de la pneumonie due au Pneumocystis carinii, cette dernière maladie étant couramment désignée par «PCP». L'importance du Pentamidine iséthionate s'est notablement accrue ces derniers temps, en raison du nombre de plus en plus grand de malades souffrant du PCP. L'accroissement de la population malade ainsi atteinte est une conséquence malheureuse de la présence croissante du Syndrome Immuno-déficitaire Acquis (SIDA). On estime actuellement qu'environ 70% des malades atteints du SIDA contractent le PCP. En raison de l'incidence élevée du PCP chez les malades atteints du SIDA, le Pentamidine iséthionate s'est avéré d'une grande utilité non seulement dans le traitement du PCP, mais également en prophylaxie, pour empêcher ou retarder la première attaque ou la récidive du PCP, notamment chez les malades atteints du SIDA.

Toutefois, un effet secondaire malheureux du Pentamidine iséthionate est sa toxicité. Certains accidents mortels ont été attribués à une forte hypotension ou hypoglycémie et à des arythmies cardiaques chez des malades traités par le Pentamidine iséthionate, que ce dernier soit employé par voie intramusculaire ou par voie intraveineuse. Les problèmes liés à la toxicité du Pentamidine iséthionate ont rendu impérativement nécessaire le remplacement du Pentamidine iséthionate par un produit capable d'éviter ou de minimiser les effets secondaires indésirables associés à l'utilisation de la Pentamidine.

La Giardia lamblia est le parasite entérique le plus fréquemment identifié aux Etats-Unis. Pe-diatr.Clin.North AM. juin 1988, 35(3). 565-77. C'est assurément le protozoaire entérique pathogène le plus courant, lequel est d'ailleurs une cause importante de maladies gastro-intestinales dans le monde entier. Il constitue un problème particulièrement critique dans les pays du Tiers-Monde et soulève des problèmes particulièrement difficiles lorsqu'il infecte des enfants.

Dans une étude portant sur des infections observées chez des enfants sous-alimentés en Jamaïque, dans les cas d'infection où un agent étiologique fut identifié, la Giardia lamblia s'est révélée être l'agent pathogène entérique le plus fréquent. J. Trop. Med. Hvo.. 91 M. 173-80, août 1988. Dans une autre étude portant sur des familles habitant la région du delta du Nil, en Egypte, et impliquant 724 enfants, un enfant seulement demeura giardia-négatif au cours de cette étude. Am. J. Epidemiol.. 127(6). 1272-81, juin 1988.

Malheureusement, bien que la Giardia lamblia soit le protozoaire pathogène le plus fréquent, se localisant dans la partie supérieure de l'intestin grêle, responsable à la fois de diarrhées aiguës et chroniques et de malabsorption, les agents thérapeutiques actuellement utilisés sont moins que satisfaisants. En réalité, les agents thérapeutiques d'un choix courant ont été développés principalement pour le traitement d'autres infections et furent ultérieurement reconnus efficaces contre la Giardia lamblia. Le traitement de la giardiase fait généralement appel au métronidazole, tinidazole, à la quinacrine ou à la furazoli-done, mais un tel traitement est couramment associé à des effets secondaires indésirables et ne donne pas toujours satisfaction.

Bien que la Pentamidine soit connue depuis des décades, elle n'a jusqu'à présent pas été reconnue comme présentant une utilité dans le traitement de la giardiase.

Il va sans dire que compte tenu de l'importance des infections dues à la Giardia lamblia dans le monde entier et de l'absence d'agents donnant satisfaction pour leur traitement, il est particulièrement urgent de disposer d'un agent anti-aiardia plus efficace et doté de bonnes propriétés thérapeutiques.

Les Leishmania sont des parasites protozoaires intracellulaires bien connus pouvant donner lieu à de sévères infections chez l'homme. Les organismes sont transmis par la piqûre d'un phlébotome, ou mouche des sables, infecté, et envahissent le système réticuloendothélial (RES). Les parasites ont toute latitude à se développer et à se multiplier dans les tissus vrais de l'hôte vertébré, lesquels sont responsables de la réaction aux organismes envahisseurs. Comme on peut le prévoir, une telle localisation des Leishmania rend difficile une approche satisfaisante faisant appel à la chimiothérapie et l'on est en présence de réactions mutuelles d'une haute complexité entre les parasites et des réponses immunes cellulaires de l'hôte. Dans le RES, les parasites sont localisés dans le macrophage hôte pendant au moins une partie de leur cycle de vie. Une fusion des lysosomes secondaires de la cellule hôte avec les vacuoles parasitophores se produit apparemment sans qu'il y ait empêchement d'une multiplication subséquente des Leishmania. Une telle fusion peut fournir des moyens pour l'accès d'agents nutritifs au parasite, mais expose également le parasite aux anticorps hôtes et aux enzymes du lysosome.

Chez l'homme, l'envahissement total de la rate et du foie par les Leishmania donovani signifie le plus souvent la mort. Des cicatrices présentes sur la peau peuvent être l'unique manifestation d'une infec2

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tion par les Leishmania tropica et les organismes dermatotropes associés (tels que Leishmania aethiopi-ca. L. mexican. L. peruviana et L. Guvanensis). D'une sévérité intermédiaire, on relève des envahissements de tissus muco-cutanés par des Leishmania Braziliensis. Malheureusement, un nombre relativement restreint de produits pharmaceutiques s'est avéré présenter une activité appréciable anti-leishmaniose, et un nombre encore moindre a mérité d'être expérimenté chez l'homme. Des médicaments à base d'antimoine constituent les principaux piliers auxquels on a recours pour le traitement, mais des effets secondaires toxiques sévères peuvent toutefois se manifester, en particulier chez des malades souffrant de malnutrition. Parmi les produits à base d'antimoine, l'un d'eux qui est largement utilisé en clinique est le sel N-méthyl glucamine de l'acide antimonique, souvent appelé méglumine antimoniate. La toxicité de ces produits peut affecter le foie (hépathite), les reins (néphrite) ou le cœur (myocardite). Parmi ces effets toxiques, la myocardite représente le problème le plus sévère et le plus courant.

La Pentamidine s'est présentée initialement comme utile pour le traitement de la trypanosomiase et, plus récemment, la Pentamidine, comme indiqué précédemment, s'est révélée extrêmement utile dans le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie, notamment chez des malades souffrant du Syndrome Immuno-déficitaire Acquis (SIDA). La Pentamidine, mais non ses analogues, est connue jusqu'à présent comme étant d'une certaine utilité limitée dans le traitement de la leishmaniose.

Compte tenu de l'inexistence d'un agent donnant satisfaction pour le traitement de la leishmaniose, il est nécessaire de disposer d'un agent anti-leishmaniose plus efficace et doté de bonnes propriétés thérapeutiques.

La malaria, chez l'homme, est causée par des espèces d'organismes parasites du genre Plasmodium. Elle est transmise par des moustiques qui ingèrent des formes sexuelles du parasite par succion sanguine. Des formes sporozoaires du parasite se développent dans le moustique et sont transmises aux nouveaux individus hôtes piqués par l'insecte. Le principal agent pathogène humain est le Plasmodium falcioarum.

La malaria représente l'un des plus importants problèmes pour la santé dans les pays tropicaux sous-développés. On estime qu'une population de plus d'un billion dans le monde habite des régions dans lesquelles la malaria est transmise. Bien que la chloroquine ait été utilisée en tant que produit pharmaceutique efficace, ce dernier présente certains effets secondaires et, fait plus important à relever, des parasites de la malaria ont acquis une résistance à la chloroquine.

La malaria a donc posé de plus en plus de problèmes dans les zones tropicales, avec la venue de souches de parasites de la malaria résistant à la chloroquine, associée à une efficacité décroisante d'insecticides à action prolongée, tels que le DDT. Le problème est d'autant plus étendu, que la malaria est la maladie infectieuse la plus importante dans le monde. Sur une population de un billion habitant dans des régions endémiques de la malaria, environ 25 à 200 millions d'individus sont atteints par la maladie à tout moment.

On estime qu'il y a chaque année un million de décès dus à la malaria, en Afrique, en majorité des enfants de moins de 5 ans. Même s'ils survivent à l'infection pendant l'enfance, de très nombreux adultes demeurent néanmoins sensibles à l'infection et présentent des parasitémies périodiques, bien que leur sérum renferme des anticorps antiplasmodiques «protecteurs». Dans des régions hyperendémiques d'Afrique, on pense que la quasi-totalité des habitants entretiennent tout au long de leur vie, une série continue d'infections falcioarum d'une pathogénicité faible à modérée.

Le problème de l'infection due à la malaria s'aggrave d'autant plus que des souches de plus en plus nombreuses de malaria résistent à la chloroquine, principal produit pharmaceutique antimalaria. De plus en plus de souches de Plasmodium falciparum résistant à la chloroquine font leur apparition en Amérique Centrale, en Amérique du Sud, en Afrique et dans le Sud-Est asiatique.

Des chercheurs ont réalisé la synthèse de variantes chimiques de la chloroquine en vue de combattre les nouvelles souches résistantes de la malaria; toutefois, ces souches ont déjà acquis une résistance vis-à-vis des nouveaux produits pharmaceutiques. Récemment, un nouveau produit, la méfloquine, a été introduit, mais des souches résistantes ont déjà fait leur apparition. Un produit pharmaceutique entièrement nouveau, doté de propriétés chimiques différentes de la chloroquine s'avère nécessaire pour enrayer l'épidémie croissante due aux souches résistantes de malaria.

La Pentamidine est connue depuis des décades et s'est révélée initialement utile pour le traitement de la trypanosomiose. Comme précédemment décrit en détail, la Pentamidine s'est révélée extrêmement utile pour le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie, notamment chez des malades immuno-compro-mis, souffrant du Syndrome Immuno-déficitaire Acquis (SIDA). De même, la Pentamidine, mais non ses analogues, est connue comme présentant une utilité pour le traitement de la malaria.

Il va sans dire que devant l'ampleur des infections dues à la malaria dans le monde entier, et en l'absence d'un agent satisfaisant pour son traitement, il est à la fois urgent et nécessaire de disposer d'un agent anti-plasmodique doté de bonnes propriétés thérapeutiques.

Conformément à un aspect de la présente invention, on a découvert avec surprise que la Pneumocystis carinii pneumonie peut être traitée efficacement en utilisant certains composés tels que définis par la formule I ci-après:

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R1^\^

R2 R2

dans laquelle chaque Ri est un H, ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -(CH2)m- où m = 2,3 ou 4; R2 est H, OCH3, NO2 ou NH2; R3 est H, CH3 ou CH2CH3; n = 2, 3, 4 ou 5; et X est O, N ou S; à la condition que lorsque Ri et R2 sont tous deux un H et X = O, n ne puisse être égal à 5.

Comme composés particulièrement préférés, on mentionne les composés de formule I ayant une structure para-amidine, telle qu'indiquée par la sous-formule la:

R3 2 R2 R3

dans laquelle Ri, R2, R3, X, m et n ont les mêmes significations que dans la formule I.

De nombreux composés que l'on a trouvé comme étant utiles pour le traitement ou la prophylaxie de la Pneumocystis carinii pneumonie sont eux-mêmes des composés nouveaux. Ces composés nouveaux sont définis par la formule II comme suit:

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11 R< <CH2>—*—

R2 R2

dans laquelle chaque Ri est un H, ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -(CH2)m-,où m = 2,3 ou 4; R2 est H, OCH3, NO2 ou NH2; R3 est H, CH3 ou CH2CH3; n = 2,3, 4 ou 5; et X est O, N ou S; à la condition que lorsque Ri et R2 sont tous deux un H, X est un N ou un S, et que lorsque R2 est un H et X est un O, deux groupes Ri représentent conjointement -(CH2)m-, et n = 3 ou 4.

Comme composés particulièrement préférés, on mentionne des composés de formule II ayant la structure para-amidine, comme indiqué par la sous-formule lia:

^2 R~ ^2

dans laquelle Ri, R2, R3, X, m et n ont les mêmes significations que dans la formule II. De plus.de nouveaux composés tels que définis par ailleurs dans la formule II, mais dans laquelle n = 6, présentent une efficacité vis-à-vis du PCP, mais ont une toxicité élevée.

On a également découvert que la Giardia lamblia peut être traitée par la Pentamidine et ses analogues. En conséquence, un procédé pour le traitement de la giardiase, consiste à administrer à un hôte affecté, une quantité thérapeutiquement efficace d'un composé ayant la structure de formule I, dans laquelle X est un O, un N ou un S; Ri est un H ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -(CH2)m, où m = 2, 3 ou 4; R2 est H, NH2, OCH3, Cl ou NO2; R3 est H, CH3 ou CH2CH3 et n = 2-6, ou des sels pharmaceutiquement acceptables de composé ou, de préférence, un composé de formule II, dans laquelle X, Ri, R2, R3, m et n ont les désignations précitées, ou un sel pharmaceutiquement acceptable de ce composé.

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On a découvert avec surprise que la leishmaniose peut être traitée par certains composés analogues de la Pentamidine. En conséquence, un procédé pour le traitement de la leishmaniose consiste à administrer, à un hôte affecté, une quantité thérapeutiquement efficace du composé ayant la structure de formule I, dans laquelle X est O, N ou S; Ri est H, ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -{CH2)m, où m = 2, 3 ou 4; R2 est H, NH2, OCH3, Cl ou NO2; R3 est H, CH3 ou CH2CH3 et n = 2-6, à condition que lorsque Ri et R2 sont tous deux un H et X=0, n ne peut être égal à 5, ou des sels pharmaceutiquement acceptables de ce composé, ou de préférence, un composé de formule II, où X, Ri, R2, R3, m et n ont les mêmes significations que précédemment, ou un sel pharmaceutiquement acceptable de ce composé.

On a maintenant découvert que la malaria peut être traitée par la Pentamidine et des analogues de celle-ci. En conséquence, un procédé pour le traitement de la malaria, consiste à administrer à un hôte affecté, une quantité thérapeutiquement efficace du composé ayant la structure de formule I, dans laquelle X est O, N ou S; Ri est un H, ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement —(CH2)m, où m = 2, 3 ou 4; R2 est H, NH2, OCH3, Cl, ou NO2; R3 est H, CH3 ou CH2CH3 et n = 2-6, à condition que lorsque Ri et R2 sont tous deux un H et X=0, n ne puisse être égal à 5, ou des sels pharmaceutiquement acceptables de ce composé, ou de préférence, un composé de formule II, dans laquelle X, Ri, R2, R3, m et n ont les mêmes significations que précédemment, ou un sel pharmaceutiquement acceptable de ce composé.

De façon générale, la présente invention permet également d'obtenir des formulations pharmaceutiques comprenant les nouveaux composés précités de formule II (ou, de préférence, de formule lia), ou des sels pharmaceutiquement acceptables de ceux-ci, dans des supports physiologiquement acceptables. En outre, la présente invention fournit des nouveaux composés ou des sels de ceux-ci, qui ont été lyophilisés et qui peuvent être reconstitués pour former des formulations pharmaceutiquement acceptables pour l'administration, aussi bien par injection intraveineuse que par injection intramusculaire.

De plus, la présente invention permet d'obtenir les composés précités ou leurs sels, en tant que formulations pour l'administration par aérosolisation en particules ou en gouttelettes pour l'inhalation.

Les caractéristiques distinctives de structure existant entre les nouveaux composés de l'invention et ceux de la technique connue apparaissent clairement et peuvent être facilement déterminées en comparant les structures de ces composés avec la structure de la Pentamidine qui est illustrée par la formule III ci-après:

dans laquelle Am représente un groupe amidine.

Dans un aspect de l'invention, les nouveaux composés se différencient de la Pentamidine et de ses analogues déjà connus, par la présence d'un atome d'azote ou de soufre, à la place des oxygènes éthé-rés dans le groupe pontant les deux noyaux aromatiques. Ces nouvelles compositions sont représentées par la formule II (ou la sous-formule lia), dans laquelle X est un N ou un S. Dans de tels cas, les nouveaux composés ont alors la structure correspondant à la formule générale suivante IVa ou IVb ou, de préférence, la structure para-amidine spécifique correspondant à la sous-formule IVc ou IVd:

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IVC

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IVd dans lesquelles chaque Ri est un H, ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représente conjointement —{CH2)m—, où m est égal à 2, 3 ou 4; R2 est H, OCH3, NH2 ou NO2; R3 est H, GH3 ou CH2CH3; et n = 2,3,4 ou 5. Comme indiqué, aucune de ces compositions n'existe dans la technique connue, dans laquelle la liaison entre les deux noyaux aromatiques se fait par un groupe ayant la formule -N-(CH2)n-N-ou-S-(CH2)n-S-, et cette caractéristique seule différencie les composés ayant la formule IV de ceux de la technique connue.

Un autre aspect de l'invention différencie les nouveaux composés de l'invention, de la technique connue, par la présence d'un groupe méthoxy, d'un groupe amino ou d'un groupe nitro sur les deux noyaux aromatiques. De telles compositions sont représentées dans la formule II (ou, de préférence, dans la formule lia), lorsque R2 est OCH3, NH2 ou NO2, et peuvent être représentées spécifiquement par la formule V ou, de préférence, par la structure para-amidine de sous-formule Va:

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formules dans lesquelles chaque Ri est un H, ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -(CH2)m-, où m est égal à 2, 3 ou 4; R2 est OCH3, NH2 ou NO2; R3 est H, CH3 ou CH2CH3; X est un O, un N ou un S; et n = 2, 3, 4 ou 5. De telles compositions se différencient alors de la Pentamidine et de ses analogues par la présence du groupe méthoxy, du groupe amino ou du groupe nitro, le groupe méthoxy et le groupe amino s'étant révélés accroître l'efficacité thérapeutique de ces composés, en ce qui concerne leur activité à rencontre de la Pneumocystis carinii. Le groupe méthoxy, en particulier, accroît sensiblement l'efficacité thérapeutique du composé.

Dans un autre aspect de l'invention, certains des nouveaux composés se différencient des composés de la technique connue par l'existence de dérivés à cycles fermés du groupe amidine, tels que des cycles imidazoline sur deux des noyaux aromatiques. Le cycle fermé, tel que l'imidazoline, est formé par pontage des atomes d'azote sur deux des groupes amidine, par un groupe -(CHzîm, tel que CH2CH2-. En se référant à la formule II, de tels composés sont représentés lorsque deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -(CH2)m-, où m = 2, 3 ou 4. Ces composés ne sont pas connus dans la technique, lorsque X est un N ou un S et/ou lorsque R2 est OCH3, NH2 ou NO2. En outre, de tels composés ne sont pas connus dans la technique, lorsque X est un O et n = 2,3 ou 4. Le composé imidazoline est connu, toutefois, lorsque X est O, R2 est H et n = 5. Ledit composé n'est toutefois pas connu comme ayant une efficacité thérapeutique vis-à-vis du Pneumocystis carinii. Toutefois, la présence du cycle fermé, tel qu'un groupe imidazoline sur les nouveaux composés de l'invention s'est avéré accroître, de façon surprenante, l'efficacité thérapeutique des composés pour ce qui est du traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie. De tels nouveaux composés imidazoline sont représentés spécifiquement par la formule VI ou, de préférence, par la structure para-imidazoline selon la sous-formule Via:

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Cv-<ö^x <cVn x RC^p dans laquelle R2 est H, OCH3, NH2 ou NO2; R3 est H, CH3 ou CFfeCl-te, X est un O, un N ou un S; et n = 2, 3, 4 ou 5, à condition que lorsque R2 est un H, n n'est pas égal à 5. Le composé utilisé de préférence est représenté par la sous-formule Via lorsque R2=OCH3, R3=H, X=0 et n = 3.

Un aspect particulièrement important de la présente invention est la présentation d'une méthode pour le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie. Cette méthode comprend l'administration à un patient qui souffre de Pneumocystis carinii pneumonie, une certaine quantité thérapeutiquement efficace d'un composé de la formule l ou un sel de ce dernier pharmaceutiquement acceptable. Jusqu'à présent, la Pentamidine n'était qu'un composé parmi le très petit nombre de ceux dont la structure était similaire à la structure des composés de la formule I, à être connu comme étant efficace dans le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie ou dans la prophylaxie à utiliser contre cette dernière. Les seules autres dia-midines connues pour être d'une certaine efficacité contre la PCP sont la dibromopropamidine, la stilba-midine et l'hydroxystilbamidine.

Outre le fait qu'elle fournit une méthode destinée au traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie, la présente invention apporte en plus une méthode de prophylaxie contre la Pneumocystis carinii pneumonie chez des patients atteints dans leurs défenses immunitaires, tels que les malades du SIDA, ayant subi au moins un épisode de Pneumocystis carinii pneumonie, mais ne manifestant, au moment du traitement, aucun signe de pneumonie. Etant donné que la Pneumocystis carinii pneumonie est une maladie dont les effets peuvent être particulièrement froudroyants sur des patients touchés dans leurs défenses immunitaires, il est préférable d'éviter l'attaque de Pneumocystis carinii pneumonie plutôt que d'avoir à traiter la maladie après que ces symptômes en soient apparus. En conséquence la présente invention foumit une méthode de prophylaxie contre la Pneumocystis carinii pneumonie, méthode qui comprend l'administration au patient d'une certaine quantité prophylactiquement efficace d'un composé de la formule I (et de préférence de la sous-formule la) ou d'un sel de ce dernier pharmaceutiquement acceptable. Les formes d'administration de ce composé ou sel dans l'application de cette méthode peuvent être les mêmes que celles qui sont utilisées en vue du traitement effectif d'un patient souffrant de Pneumocystis carinii pneumonie.

Un autre aspect utile de la présente invention est représenté par la méthode de prophylaxie contre un épisode de Pneumocystis carinii pneumonie, même dans sa phase initiale, chez un patient atteint dans ses défenses immunitaires et n'ayant jamais connu auparavant un épisode de Pneumocystis carinii pneumonie. A cet égard, un patient dont un diagnostic a révélé qu'il est atteint dans ses défenses immunitaires, par exemple un malade atteint du SIDA ou de l'ARC (ensemble de type SIDA), même avant l'attaque d'un premier épisode de Pneumocystis carinii pneumonie, peut éviter ou retarder les atteintes de l'infection grâce à l'administration préalable d'une certaine quantité prophylactiquement efficace d'un composé de la formule I (ou de préférence de la sous-formule la) ou d'un sel de ce demier, pharmaceutiquement acceptable. Le composé ou sel peut être administré de la même manière que dans le traitement de patients souffrant de Pneumocystis carinii pneumonie.

La présente invention apporte également une nouvelle méthode pour le traitement de la Giardiasis par administration d'une dose thérapeutiquement efficace d'un composé de la formule I ci-dessus ou de sels de ce dernier pharmaceutiquement acceptables. La formule I comporte de la Pentamidine ainsi que différentes substances analogues à cette dernière ou dérivés de celle-ci dont tous sont des diamidines aromatiques.

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Il a été établi qu'en ce qui concerne la pratique de la méthode objet de la présente invention, le traitement de la Giardia lamblia avec un composé de la formule I ou de préférence de la formule II ou d'un sel de ces derniers pharmaceutiquement acceptable, certains composés apparaissent comme présentant une efficacité supérieure à celle des autres. La Pentamidine par exemple s'est révélée comme étant d'une efficacité relative contre la Giardia lamblia, par rapport à la plupart des composés de la formule I (ou II) citée ci-avant. Il a été découvert avec une surprise particulière que le produit le plus efficace dans la cadre de la présente invention, était un composé présentant une structure telle que défini dans la formule II dans laquelle X=0, Ri et R3=H, R2=OCH3 et n = 3. Un autre produit à peu près identique par son efficacité thérapeutique contre la Giardia lamblia est le composé défini par la formule II dans laquelle X=N, Ri, R2 et R3=H et n = 6. Lorsque ces composés sont comparés aux composés mentionnés ci-dessus et actuellement disponibles en vue du traitement de la giardiasis, il apparaît que ces composés dans le cadre de la présente invention sont essentiellement aussi thérapeutiquement efficaces que les produits courants destinés au traitement de la Giardia lamblia.

La présente invention permet en outre d'obtenir une nouvelle méthode pour le traitement de la Leishma-niasis par l'administration de composés de la formule I, ci-dessus ou de sels de ces derniers pharmaceutiquement acceptables. La formule I comprend la Pentamidine ainsi que différents produits analogues à celle-ci ou dérivés de cette dernière, toutes ces substances étant des diamidines aromatiques.

On a trouvé qu'en ce qui concerne la mise en pratique de la méthode objet de la présente invention, dans le traitement de l'infection de Leishmania avec un composé de la formule I (ou de préférence de la formule II), ou d'un sel de ce dernier, pharmaceutiquement acceptable certains composés apparaissent comme possédant une efficacité supérieure à d'autres. La Pentamidine, par exemple, s'est révélée comme modérément efficace contre la Leishmania par rapport à la plupart des composés dans le cadre la formule I (ou II) ci-dessus. On a découvert avec une surprise particulière que les produits les plus efficaces dans le cadre de la présente invention sont un composé ayant une structure telle qu'elle est définie par la formule II, dans laquelle X=N; Ri, R2 et R3=H, et n = 5 et un composé ayant une structure telle qu'elle est définie par la formule II dans laquelle X=0 Ri, R2 et R3=H et n = 6. Ces deux composés sont similaires par leur structure à la Pentamidine.

La présente invention fournit également une nouvelle méthode pour le traitement de la malaria par l'administration de composés de la formule I cités ci-avant ou de sels de ces derniers, pharmaceutiquement acceptables. La formule I comprend la Pentamidine ainsi que différents produits analogues à celle-ci ou dérivés de cette dernière, toutes ces substances étant des diamidines aromatiques.

On a trouvé qu'en ce qui concerne la mise en pratique de la méthode de la présente invention, pour le traitement de la malaria avec un composé de la formule I, (ou de préférence de la formule II), ou avec un sel de ce dernier, pharmaceutiquement acceptable, certains composés apparaissent comme possédant une efficacité supérieure à d'autres. La Pentamidine par exemple, s'est révélée comme étant modérément efficace contre la malaria en comparaison avec la plupart des composés dans le cadre de la formule I (ou II) cités ci-dessus. On a découvert avec une surprise particulière que le produit le plus efficace identifié à l'heure actuelle dans le cadre de la présente invention est un composé n° 106 ayant une structure telle que définie par la formule II dans laquelle X=N; Ri, R2 et R3=H; et n = 5. Un tel composé est identique à la Pentamidine, mais possède des atomes d'azote à ia place des atomes d'oxygène de liaison trouvés dans la Pentamidine. On a également découvert avec beaucoup de surprise qu'un tel composé était le plus efficace, à la fois contre la souche résistant à la chloroquine (W2) et contre la souche résistant à la méfloquine (D6).

D'une efficacité thérapeutiquement très voisine contre la malaria, sont les composes N° 110,113 et 116. Dosages et formes de dosaoe

Il est évident que le dosage thérapeutiquement efficace de tout composé spécifique pourra varier quelque peu d'un composé à l'autre et d'un patient à l'autre. D'une manière générale, un dosage d'environ 0,1 à environ 20 mg/kg sera thérapeutiquement efficace. Cependant, des problèmes de toxicité à un degré élevé peuvent restreindre le dosage à un degré inférieur, tel que jusqu'à environ 10 mg/kg, en se fondant sur le poids de base libre. De manière typique, un dosage d'environ 0,5 mg/kg à environ 5 mg/kg sera utilisé. La durée du traitement est d'environ une fois par jour à raison d'une longueur de temps suffisante pour devenir asymptomatique pour le patient. En fonction de la gravité de l'infection chez chaque patient, le traitement peut, selon les cas, s'appliquer de deux à trois semaines ou plus.

Conformément aux méthodes actuelles, un composé de la formule I ou un sel de ce dernier, pharmaceutiquement acceptable, peut être administré par voie orale ou par inhalation s'il est solide, ou bien il peut être administré par voie orale par inhalation, par voie intramusculaire ou intraveineuse sous forme de solution, de suspension ou d'émulsion. De manière alternative, le composé ou sel peut être administré par inhalation, par voie intraveineuse ou intramusculaire sous forme de suspension liposomale. Lorsqu'il est administré par inhalation, le composé ou sel peut être sous la forme d'une pluralité de particules solides ou de gouttelettes ayant une granulométrie allant d'environ 0,5 à environ 5 microns, et de préférence d'environ 1 à environ 2 microns.

La présente invention fournit également de nouvelles compositions pharmaceutiques convenant pour des injections intraveineuses ou intramusculaires. Ces compositions pharmaceutiques comprennent un

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composé de la formule II (et de préférence de la sous-formule lia) ou un sel de ce dernier, pharmaceutiquement acceptable avec tout support pharmaceutiquement acceptable. Si l'on désire obtenir une solution, l'eau est le support de choix pour ce qui concerne les composés ou sels solubles dans l'eau. En ce qui concerne les composés ou sels insolubles dans l'eau, un véhicule organique tel que le giycérol, le propylène glycol, le polyéthylène glycol ou des mélanges de ces derniers, peuvent convenir. Dans ce dernier cas, le véhicule organique peut contenir une quantité importante d'eau. La solution, quel que soit le cas considéré, peut alors être stérilisée de toute manière appropriée, de préférence par filtrage à travers un filtre de 0,22 microns. A la suite de la stérilisation, la solution peut être filtrée dans des récipients appropriés tels que des fioles de verre dépyrogénées. Naturellement, le remplissage devrait être effectué selon une méthode aseptique. Des fermetures stérilisées peuvent alors être placées sur les fioles, et si on le désire, le contenu des fioles peut être lyophilisé.

En plus des composés de la formule II (et de préférence de la sous-formule lia) ou de leurs sels, les compositions pharmaceutiques peuvent contenir d'autres additifs, tels que des additifs pour le réglage du pH. En particulier, les agents utiles pour le réglage du pH, comprennent des acides ou des bases ou tampons tels qu'un lactate de sodium, un acétate de sodium ou un gluconate de sodium. En outre, lesdites compositions peuvent contenir des agents de protection antimicrobiens. Parmi les agents anti-microbiens utiles, on compte l'alcool méthylparabène, l'alcool propylparabène et l'alcool benzylique. L'agent de protection anti-microbien est employé de façon typique lorsque la formulation est placée dans une fiole destinée à un usage multi-dose. Naturellement, ainsi qu'il a été indiqué, les compositions pharmaceutiques objets de la présente invention, peuvent être lyophilisées en utilisant des techniques connues de l'invention.

Dans un autre aspect de la présente invention, il est fourni une composition injectable, stable et stérile comprenant un composé de la formule il (et de préférence de la sous-formule lia) ou un sel de ce dernier, sous une forme de dosage unitaire dans un container scellé. Le composé ou sel est fourni sous la forme d'un sel lyophylisé qui est capable d'être reconstitué avec un support approprié pharmaceutiquement acceptable, de manière à former une composition liquide appropriée pour l'administration de ce dernier sous forme d'injection à un individu. La forme de dosage unitaire comprend de manière typique d'environ 10 mg à environ 10 grammes du composé ou sel. Si le composé ou sel est par sa substance insoluble dans l'eau, une quantité suffisante d'agent émulsifiant qui soit physiologiquement acceptable peut être employée pour émulsionner le composé ou sel dans un support aqueux. L'un de ces agents émulsifiants utiles est la choline phosphatidyle.

Conformément à l'invention, d'autres compositions pharmaceutiques peuvent être préparées à partir de composés insolubles dans l'eau de la formule II (et de préférence de la sous-formule lia), ou de sels de ce dernier, telles que des émulsions aqueuses. Dans un tel cas, la composition contiendra un agent émulsifiant pharmaceutiquement acceptable en quantité suffisante pour émulsionner la quantité désirée du composé de la formule II (et de préférence de la sous-formule lia), ou sel de ce dernier. Parmi les agents émulsifiants particulièrement utiles, on compte les phosphatidylcholines et la lécithine.

En outre, la présente invention fournit des formulations liposomales des composés de la formule 11 (et de préférence de la sous-formule lia) et des sels de ces derniers. Les techniques de production de suspension liposomales sont bien connues de l'invention. Lorsque le composé de la formule II ou un sel de ce dernier est un sel soluble dans l'eau, on peut, en employant la technique conventionnelle du liposome, incorporer ces derniers dans des vésicules de lipides. Dans un tel cas, étant donnée la solubilité dans l'eau du composé ou du sel, ledit composé ou sel sera en substance entraîné avec le noyau hydro-philique des liposomes. La couche de lipide employée peut être de n'importe quelle composition conventionnelle et peut, soit contenir du cholestérol, soit en être exempt. Si le composé ou le sel concerné est insoluble dans l'eau, on peut, en employant de nouveau une technique de formation de liposome conventionnel, entraîner de façon substantielle le sel avec la double couche de lipide hydrophobique qui forme la structure du liposome. Dans tous les cas, les liposomes qui sont produits peuvent être réduits en dimension par exemple en utilisant des techniques de sonication et d'homogénisation normalisées.

Naturellement, les formulations liposomales composées de la formule II ou des sels de ces derniers peuvent être lyophilisées de manière à produire un sel lyophilisé qui peut être reconstitué avec un support pharmaceutiquement acceptable, tel que l'eau, de manière à régénérer une suspension liposomale.

Dans un autre aspect de la présente invention il est fourni des formulations pharmaceutiques qui sont appropriées pour l'administration sous forme d'aérosols par inhalation. Ces formulations comprennent une solution ou une suspension de la composition désirée de la formule II (et de préférence de la sous-formule lia) ou d'un sel de ce dernier ou d'une pluralité de particules solides du composé ou sel. La formulation désirée peut être placée dans une petite chambre et être vaporisée. La vaporisation peut être accomplie à l'aide d'air comprimé ou au moyen d'énergie ultrasonique, de manière à former une pluralité de gouttelettes liquides ou de particules solides comprenant les composés ou sels. Les gouttelettes liquides ou les particules solides devraient avoir une granulométrie située entre environ 0,5 et environ 5 microns. Les particules solides peuvent être obtenues en travaillant sur le composé solide de la formule II ou sur un sel de ce dernier, selon tout procédé approprié connu de la présente invention, tel que par exemple la micronisation. De préférence, la dimension des particules solides ou gouttelettes se situera entre environ 1 et environ 2 microns. A cet égard, les vaporisateurs du commerce conviennent pour la réalisation de cet objectif.

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De préférence, lorsque la formulation pharmaceutique convenant pour l'administration sous forme d'aérosol est sous la forme liquide, la formulation comprendra un composé soluble dans l'eau de la formule Il (et de préférence de la sous-formule lia) ou d'un sel de ce dernier, dans un support qui comporte de l'eau. Un corps tensio-actif peut être présent; il abaisse la tension de surface de la formulation de façon suffisante pour aboutir à la formation de petites gouttes de la dimension désirée, lorsqu'elle est soumise à une vaporisation.

Ainsi qu'il a été indiqué, la présente invention fournit des composés et des sels, soit solubles, soit insolubles dans l'eau. Tel qu'il a été utilisé dans la présente spécification, le terme «soluble dans l'eau» s'entend dans le sens qu'il définit toute composition qui est soluble dans l'eau pour une quantité d'environ 50 mg/ml ou plus. De même, tel qu'il est utilisé dans la présente spécification, le terme «insoluble dans l'eau» s'entend tel qu'il définit toute composition qui a une solubilité dans l'eau inférieure à environ 20 mg/ml. Pour certaines applications les composés ou sels solubles dans l'eau peuvent être souhaitables, alors que pour d'autres applications, des composés ou des sels insolubles dans l'eau peuvent de même être souhaitables.

Les composés employés dans la présente invention, qu'il s'agisse de composés connus ou de composés originaux, peuvent être synthétisés selon des procédés généralement connus et proprement compris par les spécialistes dans la matière. C'est pourquoi, il n'est pas nécessaire d'expliquer très en détail la méthodologie employée pour la synthèse de la plupart de ces composés. Le résumé ci-après des procédés de synthèse utilisés, constitue une aide pour les spécialistes dans la matière, grâce à la sélection de la procédure de synthèse connue appropriée qui doit être employée pour les catégories respectives de composés.

En général, les différents schémas de réaction qui peuvent être employés pour réaliser la synthèse des composés objets de la présente invention, sont présentés dans les diagrammes l-lli. Ainsi qu'il est montré dans le diagramme l, les composés de la formule I dans laquelle n = 2-5 (et à des fins de comparaison lorsque n = 6), Ri=H, X=0 et R2=H ou OCH3 peuvent être préparés par alkylation du cyanophénol (avec substitution méthoxy le cas échéant) avec des dibromoalkanes, de façon à obtenir les cyano analogues correspondants aux composés de la formule II, en employant généralement la procédure de Gerate et al.; J. Med. Chem. 16:970, 1973. Les cyano analogues peuvent alors être soumis à la synthèse amidine de Pinner, de façon à obtenir les produits désirés. En outre, Pimidate qui est également obtenu par la réaction d'alkylation mentionnée plus haut, peut être reflué avec une éthylène diamine de façon à obtenir les produits imidasoline de la présente invention qui sont représentés par la formule I lorsque deux groupes R1 ou un groupe amidine représentent ensemble -CH2CH2-. D'autre part les cyano composés obtenus comme résultats de la réaction d'alkylation mentionnée plus haut, peuvent être d'autre part mis en réaction par nitratisation desdits composés en utilisant l'acétyl nitrate dans un acide trifluor-acétique obtenu dans des dinitrodicyano composés qui peuvent alors être convertis en amidine correspondante en utilisant la synthèse d'amidine de Pinner mentionnée plus haut. Les composés dinitrodiami-dine qui résultent peuvent être examinés pour d'autres objectifs comparatifs. Ces composés dinitrodia-midine peuvent ensuite être convertis par réduction catalytique avec H2 et pd/C, de façon à obtenir les diaminodiamidines correspondantes utiles conformément à I invention.

Ainsi qu'il est montré dans le diagramme II, les diazo dérivés qui sont représentés par la formule I dans laquelle X=N et R2=H peuvent être synthétisés par réaction de déplacement nucleophilique de fluorobenzonitrile-4 avec des diaminoalkanes, suivie d'une synthèse d'amidine de Pinner. De même, le nitrobenzonitrile-3-chloro-4 peut être mis en réaction avec des alkanes-diamino, de manière à obtenir le cyano dérivé correspondant. La transformation de ce produit intermédiaire en produit définitif dépend alors des solubilités relatives. A cet égard, il est fait référence au diagramme III qui présente la synthèse du composé dans lequel X=N, R2=NH2 et n = 2, par réaction du nitrobenozonitrile-3-chloro-4 avec un excès décuple d'éthylène diamine à 25 degrés C, afin d'obtenir le monodérivé correspondant qui peut alors être réduit de manière catalytique, de façon à former l'amine correspondante, suivie par une seconde réaction de déplacement nucléophilique avec le nitrobenzonitrile-3-chloro-4, de façon à obtenir la dicyanomonoaminomononitrile correspondante qui peut être alors soumise à une synthèse amidine de Pinner et à une réduction finale de façon à obtenir le produit diaminodiamidine désiré.

Les composés de la formule I dans laquelle X=N et R2=NH2, avec n = 4 ou 6, présentent de même un résultat de synthèse en ce sens que le cyano dérivé intermédiaire obtenu par la réaction du nitrobenzo-nitrile-3-chloro-4 avec les diamino alkanes correspondants aboutissent à un intermédiaire qui n'est soluble dans aucun des solvants appropriés pour la conversion des dérivés de diamidine correspondants. Dans un tel cas, les groupes nitro peuvent être réduits en des groupes amino et convertis ensuite dans les diamidines désirées. Ainsi qu'il est montré dans la démarche 2 du diagramme II. Les composés par ailleurs identiques mais dans lesquels n = 3 ou 5, sont légèrement solubles dans la dioxane et, pour cette raison, susceptibles d'être transformés directement en diamidines, avant réduction des groupes nitro, de façon à obtenir les composés finaux de diaminodiamidine désirés.

Comme déjà indiqué, les composés employés dans la présente invention peuvent être présents sous la forme de sels pharmaceutiquement acceptables. De tels sels comprennent le gluconate, le lactate, l'acétate, le tartrate, le citrate, le phosphate, le borate, le nitrate, le sulfate et les sels hydrochloridiques.

Les sels de la présente invention peuvent être préparés en général en faisant réagir le composé de base amidine avec un léger excès de deux équivalents de l'acide désiré en solution. La réaction une fois

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achevée, les sels sont cristallisés à partir de la solution, par addition d'une quantité appropriée de solvant dans lequel le sel est insoluble.

La présente invention est illustrée ci-après par les exemples suivants qui ne sont pas limitatifs.

Exemples 1-44 (comprenant des exemples comparatifs)

Les composés ayant la structure représentée dans la formule I sont synthétisés conformément aux procédures appropriées préalablement exposées. Les schémas de réaction présentés dans les diagrammes l=lll identifient de façon spécifique la méthodologie employée pour synthétiser les composés des exemples respectifs. Les composés qui ont été synthétisés sont présentés dans le tableau IA et l'analyse élémentaire ainsi que les points de fusion des composés sont présentés dans le tableau IB. La plupart des composés ont été testés en ce qui concerne leurs taux de toxicité, en utilisant la procédure de laboratoire normalisée et les résultats de ce test de toxicité sont présentés dans le tableau XII. Les composés des exemples 31, 32 et 34 n'ont pas été synthétisés, mais peuvent l'être de la façon générale exposée antérieurement.

TEST DES COMPOSES QUANT A LEUR EFFICACITE THERAPEUTIQUE CONTRE LA pneumocvtis carinii

Induction et traitement de la pneumocvtis carinii chez les rats de Spraaue-Dawlev

Des rats mâles d'élevage de Spraque-Dawlay, non garantis comme exempts de virus et pesant entre 150-200 grammes avaient été fournis par des laboratoires Hilltop et logés séparément. On commença par soumettre les animaux à un régime faible en protéines (8%) (ICN Biomedicals, Cincinnati, OH) et on leur fit boire de l'eau contenant de la tétracycline (0,5 mg/ml) et de la déxaméthanose (1,0 g/ml) immédiatement après leur arrivée. Ce traitement fut administré pendant les 8 semaines suivantes, en surveillant chaque jour ia consommation de liquide et en pesant les animaux une fois par semaine. On pratiquait des réductions de la solution de boisson, lorsque les animaux consommaient trop de liquide, de manière à prévenir un empoisonnement par la cortisone. Au début de la sixième semaine, les animaux furent répartis en plusieurs groupes de 8 animaux chacun et les composés testés furent administrés chaque jour par injection intraveineuse selon un dosage de 10 mg/kg, sauf indication contraire, pendant les 14 jours suivants.

Les animaux furent sacrifiés à la fin de la huitième semaine par inhalation de chloroforme et leur poumon gauche fut enlevé de manière aseptique et placé dans une solution équilibrée stérile de sels de Hank sans calcium ni magnésium (HBSS-) pour la procédure de base des tissus. Le poumon droit fut gonflé in situ avec une formule à 10% et enlevé pour examen histologique avec coloration GMS. Procédure de traitement des tissus.

Les poumons de rats non traités immédiatement furent congelés rapidement et stockés à une température inférieure à 70 degrés C. Les tissus furent retirés du congélateur lorsqu'ils furent prêts à être traités et décongelés rapidement dans un bain d'eau à 25 degrés C. Les poumons furent ensuite découpés en petits morceaux et moulus à travers un tamis à fils de 60 avec un mortier de verre. Les poumons hachés étaient suspendus dans 10 ml de HBSS- et agités dans un tourbillon pendant 30 secondes. La suspension fut centrifugée à 60 X g pendant 10 minutes, en écartant le pellet de centrifugation, en transvasant le liquide surnageant en surface dans un autre tube et en centrifugeant à 150 X g pendant 10 minutes pour enlever les débris cellulaires restants. Le liquide de surface résultant de ia centrifugation fut alors agité de façon circulaire à 10 000 X g pendant 10 minutes, de façon à mettre sous forme de pellet les organismes de Pneumocystis. Ce pellet hit remis en suspension dans 2 ml de HBSS, pour coloration. Des plaques furent préparées en plaçant une goutte de 10 (il de suspension de poumon sur une plaque de microscope propre et en permettant à la goutte de sécher à l'air libre. Les plaques furent ensuite colorées avec du crésyl violet pur (Kodak Chemicals, Rochester, NY), de manière à mettre en évidence la forme de kyste de l'organisme.

Etudes statistiques

Un total de 20 champs microscopiques à haute puissance ont été comptés pour chaque suspension de poumon et le nombre moyen de kystes a été calculé.

RESULTATS DES EXPERIENCES

Tableau II

Un composé utile dans le traitement de la PCP conformément à la présente invention, exemple 4, a été testé par comparaison avec la Pentamidine, à la fois dans la forme para-normale et dans la forme méta. Le composé de l'exemple 4 différait de la Pentamidine (para) en ceci que le groupe réunissant les deux noyaux aromatiques était un groupe -(CH2)3- plutôt que le groupe -(CH2)s- de Pentamidine. Le composé

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de l'exemple 4 a été jugé meilleur que la Pentamidine para ou méta pour le contrôle de l'extension de l'infection de PCP.

Tableau III

Deux composés originaux de la présente invention présentant la structure de ia formule II (et de la sous-formule lia) dans laquelle la structure diffère de celle de la Pentamidine dans un des cas, parce que R2 est un groupe méthoxy et dans l'autre cas, parce que R2 est un groupe amino (respectivement exemples 15 et 14), ont été testés par comparaison avec la Pentamidine. Dans cette étude était également inclu un composé connu dans lequel la structure différait de celle de la Pentamidine en ceci que n était 6, représentant alors l'hexamidine (exemple 20). On a découvert avec surprise que les trois variantes de structure par rapport à celle de la Pentamidine aboutissaient à des résultats améliorés dans le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie.

Tableau IV

Un composé de la formule I (et de la sous-formule la), la butamidine (exemple 9) a été comparé avec la Pentamidine et deux analogues de celle-ci, le premier étant dans le cadre de la formule II (et de la sous-formule lia) dans laquelle R2 représente NH2 (exemple 19) et le second dans le cadre des deux formules I (et de la sous-formule la) et II (et de la sous-formule lia) dans lesquelles R2=NÛ2. Dans le cas du composé substitué amino (exemple 19), les oxygènes éthériques de Pentamidine (position X) ont été également remplacés par de l'azote. Il a été très surprenant de découvrir que la butamidine était nettement meilleure que la Pentamidine dans la maîtrise de la Pneumocystis carinii pneumonie. Les deux autres composés étaient meilleurs que le témoin, mais n'étaient pas aussi bons que la Pentamidine pour maîtriser la Pneumocystis carinii pneumonie.

Tableau V

Quatre composés de la formule II (et de la sous-formule lia, exemples 7,8,17 et 18) similaires à la Pentamidine avec n = 3-5, mais ayant N à la place de O (position X) ont été testés par comparaison avec la Pentamidine et ses dérivés dans lesquels la longueur de chaîne du groupe de liaison était n = 6, aboutissant à une toxicité élevée. Le nouveau composé avec substitution nitro (n = 5, exemple 18) était meilleur que le témoin, mais moins efficace que la Pentamidine, tandis que les nouveaux composés des exemples 7,8 et 17 étaient meilleurs ou équivalents à la Pentamidine, avec le composé n = 3 (exemple 7) étant le plus efficace et le composé n = 5 (exemple 17) étant le moins efficace. Les dérivés n = 6 étaient alors comparables à la Pentamidine, mais avec des problèmes de toxicité (voir tableau XIII).

Tableau VI

Quatre nouveaux composés de la formule II (et de la sous-formule lia, exemples 3, 5,10 et 14) ont été testés par comparaison avec la Pentamidine, en ce qui concerne leur efficacité dans le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie, tous ces composés ayant une substitution amino (NH2) sur les noyaux aromatiques, comme montré dans la formule II (et dans la sous-formule lia) dans laquelle R2=NH2.

D'autre part, dans tous les cas, le groupe de liaison des noyaux aromatiques contenait deux oxygènes éthériques comme représenté lorsque X=0. La longueur de chaîne du groupe alkyl de liaison variait de 2 à 5 et, à défaut de comparaison, un composé supplémentaire identique d'autre part aux composés de la formule II, était employé, dans lequel la longueur de chaîne alkyl était 6 (comme représenté lorsque n = 6). Les composés dans le cadre de la formule II (et de la sous-formule lia) étaient tous nettement meilleurs que le témoin en ce qui concerne le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie et étaient approximativement comparables en efficacité à la Pentamidine. Le composé de l'exemple 22 dans lequel n = 6 était nettement moins efficace que les autres composés ou la Pentamidine dans le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie et était toxique (cf tableau XIII).

Tableau VII

A des fins de comparaison, la Pentamidine et quatre analogues dans lesquels le groupe amidine était dans la position méta, ont été analysés pour leur efficacité dans le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie. Les analogues de la méta-amidine avaient des groupes de liaison variant dans ia longueur de leur chaîne de carbone de 3 à 6, comme indiqué lorsque n = 3-6. Bien qu'aucune des amidines méta n'ait fonctionné aussi bien que la para-pentamidine en ce qui concerne l'efficacité thérapeutique, toutes ont été meilleures que le témoin. Il est particulièrement intéressant de noter que les composés méta ayant des groupes de liaison avec une longueur de chaîne plus courte (a = 3,4) étaient meilleurs que la forme méta de la Pentamidine. Egalement à des fins de comparaison, une amidine bloquée, par ailleurs identique à la Pentamidine a été employée et on a trouvé que celle-ci était comparable, voire même légèrement meilleure que la Pentamidine en ce qui concerne l'efficacité thérapeutique et le traitement par la Pentamidine.

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Tableau Vili

Trois composés dans le cadre de la formule II (et de la sous-formule lia, exemples 6,11 et 15) contenant des groupes méthoxy ont été comparés à raison de 5 mg/kg à de la Pentamidine en ce qui concerne l'efficacité thérapeutique dans le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie. Lesdits composés sont représentés dans la formule II (et de la sous-formule lia) lorsque R2=OCH3. D'autre part, ces composés spécifiques contenaient de l'oxygène dans le groupe reliant les deux noyaux aromatiques, comme montré dans la formule II lorsque X=0. La longueur de la chaîne de carbone de liaison variait de 3 à 5 comme indiqué lorsque n = 3-5. Faisaient également partie de cette étude deux composés dans lesquels des atomes de chlorine étaient substitués sur les noyaux aromatiques, comme il aurait été représenté dans la formule lia si R2=CI, qui était légèrement meilleur que le contrôle, mais bien plus mauvais à une dose de 2,5 mg/kg que la Pentamidine dans le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie. Les composés contenant le groupe méthoxy étaient nettement meilleurs à une demi-dose, que le témoin et, en fonction de la longueur de la chaîne, plus mauvais ou égaux, ou nettement meilleurs que la Pentamidine dans le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie, à une demi-dose de la Pentamidine. Plus la longueur de la chaîne est courte (n = 3) plus l'efficacité est meilleure pour de tels composés méthoxy substitués, avec une efficacité diminuant à mesure qu'augmentait la longueur de la chaîne.

Tableau IX

Quatre composés dans le cadre de la formule II (exemples 33,41,42 et 44) ont été comparés à la Pentamidine en ce qui concerne l'efficacité thérapeutique dans le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie. Dans un cas (exemple 33), le nouveau composé de la présente invention contenait un substitut amino sur les noyaux aromatiques (R2=NH2) et avait des atomes d'azote dans le groupe reliant les deux noyaux aromatiques (X=N), avec une courte longueur de chaîne de liaison alkyl (n = 2). Ce composé était meilleur que le témoin, mais plus mauvais que la Pentamidine. Trois composés dans lesquels les groupes amidine nitrogène avaient été reliés par un lien éthylène, de manière à produire des imidazolines, ont été également comparés à 2,5 mg/kg (exemples 41,42 et 44). Le composé de l'exemple 44 ayant une substitution méthoxy sur les noyaux aromatiques (R2=OCH3) et comme le groupe de liaison des noyaux aromatiques -0(CH2)30-, comme représenté lorsque X=0 et n = 3, s'était révélé comme étant très efficace dans le traitement de la Pneumocystis carinii, étant bien meilleur que la Pentamidine à seulement un quart de la dose. On a testé également deux composés similaires qui avaient des substituants méthyl sur les groupes imidazoline. On a trouvé que la présence de tels groupes méthyl diminuait de façon significative l'efficacité du composé qui était cependant encore meilleur que le témoin. Le composé 44 représente la forme d'exécution préférée de la présente invention en ceci que l'efficacité dans le traitement de la Pneumocystis carinii pneumonie est très bonne à un quart de la dose de Pentamidine.

Tableau X

Six nouveaux composés dans le cadre de la formule lia (exemples 35, 36, 37, 38,40 et 43) ont été testés en ce qui concerne leur efficacité thérapeutique contre la Pneumocystis carinii pneumonie. Deux nouveaux composés (exemples 36 et 37) avaient une substitution amino (R2=NH2) sur les noyaux aromatiques, en même temps que des atomes d'azote dans le groupe reliant les noyaux aromatiques (X=N). Ces composés ont été comparés à de nouveaux composés simulaires dans lesquels les substituants des noyaux aromatiques étaient des groupes nitro (exemples 35 - testé à 5 mg/kg - et 38 - testé à 2,5 mg/kg), la longueur de chaîne du groupe de liaison variant de 3 à 4 (n = 3-4). Il a été trouvé que les composés substitués amino étaient meilleurs que les composés substitués nitro, bien que les composés substitués amino étaient testés à un degré de dosage plus élevé. On a également testé deux composés dans le cadre de la formule lia (exemples 40 et 43) ayant des groupes imidazoline (dans lesquels deux groupes Ri égaux -CH2CH2-), un composé (exemple 43) ayant une substitution méthoxy sur les noyaux aromatiques (R2=OCH3), le groupe de liaison des noyaux aromatiques étant -0(CH2)50- et dans l'autre cas (exemple 40) sans substitution sur les noyaux aromatiques, le groupe de liaison étant -0(CH2)40-. On a trouvé que ces deux nouveaux composés étaient nettement meilleurs que le témoin, bien que cependant le composé de l'exemple 43 ait été testé à un niveau inférieur à 5 mg/kg.

Tableau XI

Pour comparer l'efficacité de la butamidine (Ri=H, R2=H, X=0 n = 5) par rapport à la Pentamidine, une comparaison logarithmique a été entreprise, dans laquelle la butamidine, de même que la Pentamidine ont été testées en ce qui concerne leur efficacité contre la Pneumocystis carinii pneumonie à des dosages de 10 mg/kg, 1 mg/kg et 0,1 mg/kg. La butamidine a été nettement meilleure que la Pentamidine à un niveau de dosage de 10 mg/kg, confirmant les résultats enregistrés auparavant dans le tableau IV. Toutefois, lorsque le niveau de dosage était réduit à 1 mg/kg ou 0,1 mg/kg, il n'y avait pas de différence essentielle entre les deux composés.

Les résultats composites du test in vivo précédents sont présentés dans le tableau XII. Bien que de

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telles complications ont une signification relativement incertaine, en raison des variations dans les résultats de contrôle d'une expérience à l'autre, cela sert néanmoins d'instrument utile et récapitule sommairement l'utilité de la présente invention.

Exemples 45-80

La présente invention sera décrite plus loin conformément aux exemples non limitatifs suivants. Exemples 45-88 (comprenant des exemples comparatifs).

Des composés entrant dans le cadre de la formule I (et II) ont été obtenus, dont les structures ont été identifiées dans les tableaux XIV à XVI. Afin de tester ces composés contre la Giardia lamblia, la procédure générale suivante a été employée.

Culture axénique de Giardia lamblia. Trophozoites.

Une souche WB de Giardia lamblia (ATCC 30 957) a été cultivée dans un milieu TY-S-33 stérilisé dans un filtre (Diamond et al., 1978) modifié par l'addition de bile (Keister, 1983) et contenant 10% de sérum bovin fœtal inactivé et 5 ng/ml d'ampicilline (Sigma) et 50 (ig/mi de sulfate de gentamicine (Sigma). Des cultures en stock de trophozoites ont été cultivées dans 13 x 100 mm tubes en verre de borosilicate à fermeture vissée, à 37 degrés C. Les organismes ont été repiqués toutes les 72 heures en refroidissant le tube de culture dans un bain d'eau glacé pendant 5 minutes. Les trophozoites étaient détachés du verre en retournant vigoureusement le tube refroidi. Le nombre d'organismes par ml a été déterminé en plaçant 10 fil de la suspension sur un hémocytomètre. Environ 5 x 104 organismes d'une culture se développant de façon logarithmique ont été transférés dans des milieux frais.

Agents chimiothérapeutiaues

La Pentamidine et les analogues de la Pentamidine employés dans cette étude ont été synthétisés en employant les procédures détaillées plus haut. Le métronidazole, la quinacrine hydrochloride et le fura-zolidone ont été obtenus à partir de Sigma. Les solutions mères de 2 mM dans un milieu TYI-S-33 modifié ont été réalisées puis diluées dans ce milieu pour être utilisées dans les essais de sensibilité du médicament. Microculture de Giardia lamblia.

Les trophozoites de la Giaridia lamblia ont été obtenus à partir de cultures mères à croissance logarithmique. Dans les cavités d'une plaque de culture de tissus à 96 cavités à fond en U (Costar), on a placé 100 ni d'un milieu TYI-S-33, modifié contenant 2,5 x 104 trophozoites. La plaque de culture de tissu a été maintenue dans un environnement anaérobique en la plaçant à l'intérieur d'une boîte en plastique modifiée de manière à permettre à l'azote de passer à travers la boîte par des tubulures d'accès et de sortie qui pouvaient être obturées. L'azote fut introduit à travers la boîte pendant 2 minutes et le container fut placé dans un incubateur à 37 degrés C ventilé par de l'air à 5% de C02. Dosage de viabilité d'incorporation de 3H-thymidine.

Des concentrations variables de 3H-thymidine (0,5, 1,0 1,5 et 2,0 |iCi/cavité) étaient ajoutées dans les cavités contenant 2,5 x 104 trophozoites de Giardia lamblia à des intervalles de 2 heures de telle manière que la 3H-thymidine put rester en contact avec les trophozoites pendant une période de 2 à 24 heures. Au bout de 24 heures d'incubation, les cellules furent recueillies à l'aide d'un récolteur à multi-broyage de cellules en les lavant vigoureusement avec une solution saline équilibrée très froide de Hank. Les échantillons ont été recueillis sur un papier en microfibres de verre de Whatman. Le papier fut séché à l'air, les échantillons furent placés dans des fioles de scintillation de 7 ml et l'incorporation de 3H-thymidine fut déterminée par comptage du liquide par scintillation. Les valeurs moyennes étaient calculées à partir de 5 répétitions pour chaque durée et chaque concentration. Ces données étaient utilisées pour déterminer la durée et la concentration optimales de 3H-thymidine à employer dans le dosage de sensibilité du médicament.

Dosaoe de sensibilité du médicament

Cent ni du milieu TVI-S-33 modifié contenant 2,5 x 104 trophozoites ont été placés dans chaque cavité d'une plaque à 96 cavités à fond en U. Les plaques ont été incubées dans des conditions anaéro-biques pendant 24 heures. A l'issue de ces 24 heures, les composés à tester ont été préparés à partir de solutions mères de 2mM et 100 fil de chaque solution furent ajoutés, de manière à obtenir des concentrations de 1, 10, 100 et 1000 fiM dans les cavités Dix ni d'une solution de 150 |xCi/ml de 3H-thymidine (SA =10 Ci/mmole) dans un milieu TYI-S-33 modifié ont été ajoutés 6 heures après l'addition du médicament, de façon à obtenir une concentration finale de 1,5 nCi/cavité A l'issue d'une période d'incubation supplémentaire de 18 heures, les cellules ont été recueillies. Ces opérations ont été répétées cinq fois pour chaque concentration de produit et les valeurs moyennes ont été déterminées. Un dépôt non spécifique de 3H-thymidine sur le papier à microfibres a été déterminé grâce à l'emploi de cavités témoins auxquelles aucun organisme n'avait été ajouté. Les activités des composés testés ont été déterminées en comparant l'incorporation de 3H-thymidine dans les cavités auxquelles ces composés ont été ajoutés, avec celles des cavités témoins sans médicament. La concentration de médicament nécessaire pour inhiber une incorporation à 50% de 3H-thymidine (IC50) a été déterminée (Chou, 1974).

15

5

10

15

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30

35

40

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RESULTATS DU TEST

Les résultats de l'emploi de la procédure précédente en vue de déterminer l'efficacité des composés dans le cadre de la formule I ou II ci-dessus dans le traitement de la Giardia lamblia se trouvent dans les tableaux XIV-XVI. Ces tableaux font ressortir de manière tout à fait apparente que la très courte longueur de chaîne du groupe de liaison dans lequel n = 2 est la moins efficace, en tout cas lorsque R2=NH2. Toutefois lorsque n = 3, on obtient des résultats très efficaces, que R2=H, NH2 ou OCH3. Cependant, lorsque R2=OCH3 et que Ri et R3 = 1, on obtient le résultat le plus bénéfique. Il est certainement intéressant de constater alors que le second meilleur composé pour le traitement de la Giardia lamblia. conformément à la pratique de la présente invention, est défini par la formule I dans laquelle X=N, Ri, R2 et R3=H, et n = 6, faisant apparaître un groupe relativement long reliant les deux noyaux aromatiques.

Le tableau XIV met en évidence ie fait que les amidines méta sont comparables aux para-amidines, bien qu'avec une activité un peu moindre lorsque la longueur du groupe reliant les noyaux aromatiques se situe dans la fourchette de n = 4-6. Lorsque n = 3, la méta amidine est beaucoup plus mauvaise que son équivalent para-amidine.

Le tableau XV permet de voir que les composés de la formule II dans laquelle les groupes amidine ont été convertis en imidazolines sont dans leur ensemble un peu moins efficaces que leurs équivalents en amidine simple. En conséquence, la comparaison de l'exemple 5 avec l'exemple 31 montre que l'imidazoline de l'exemple 31 est un peu moins efficace que son équivalent amidine de l'exemple 5. Il ressort également de façon tout à fait apparente du tableau XV que la substitution sur le groupe imidazoline comme avec un groupe méthyl, entraîne une forte baisse de l'efficacité. Le tableau XVII contient les chiffres d'efficacité concernant trois des composés généralement disponibles pour le traitement de la Giardia lamblia. Lorsque l'on compare l'efficacité de ces composés avec les chiffres d'efficacité de la plupart des composés préférés de la présente invention, on peut constater que, si elle existe, la différence d'efficacité est très faible.

Exemples 81-98

Essais contre la Leishmania

La présente invention sera décrite plus loin conformément aux exemples non limitatifs suivants. Exemples 81-98.

Des composés entrant dans le cadre de la formule I (et II) ont été obtenus, dont les structures ont été identifiées dans les tableaux XVIII à XX. Afin de tester ces composés contre la Giardia lamblia, la procédure générale suivante a été employée.

Agents chimiotheuropathiaues

La Pentamidine et les analogues de la Pentamidine employés dans cette étude ont été synthétisés en employant les procédures détaillées plus haut.

Examen in vitro de l'activité anti-Leishmaniale

La Leishmania mexicana amazonensis. souche MHOM/BR/73M2269 (WR669), des promastigotes ont été cultivés dans une phase logarithmique initiale dans le milieu de Drosophile de Schneider (GIBCO) complété par 20% de sérum bovin foetal inactif (GIBCO) et 100 ng/ml de sulfate de gentamicine Parasito-logy 76:309 (1978). Le milieu expérimental était du sérum bovin fœtal de Schneider plus 10%. Les dilutions en série des composés employés dans la présente invention furent suspendues dans le milieu d'essai et préparées dans des doubles rangées d'une plaque de microtitrage à 96 cavités. Une suspension parasite (200 ni) à 2,5 x 106 cellules/ml a été ajoutée à chaque cavité et chaque plaque a été scellée et incubée dans de l'air à 25 degrés C. Au bout de 24 heures, on a ajouté de la méthyl-3H-thymidine (20 Ci/mmol) afin d'obtenir 1-2 nCi/cavité.

Après une période supplémentaire de 18 heures, les cellules ont été recueillies avec un récolteur de cellules Skatron sur des filtres en microfibres de verre. Les disques des filtres ont été lavés, séchés et comptés en utilisant un scintillateur LS3801 de Beckman. Les données concernant la prise de 3H-thymi-dine convenaient pour une fonction de réponse relative à une concentration logistique-logarithmique avec une méthode de régression non linéaire et les concentrations de médicaments nécessaires pour inhiber une incorporation de 50% de 3H-thymidine ont été déterminées (Antimicrobe Agents Chemother. 16:710 (1979); Expert. Parasitai. 66:86 (1988). Ces résultats sont présentés dans les tableaux XVIII-XX.

RESULTATS DU TEST

Les résultats de l'emploi de la procédure précédente en vue de déterminer l'efficacité des composés dans le cadre de la formule l ou II ci-dessus dans le traitement de la Leishmania se trouvent dans les tableaux XVIII-XX qui montrent que les para-amidines, les méta-amidines et les para-imidazolines, ont

16

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

toutes une activité anti-Leishmaniale. Les composés N° 88 et 89 ont présenté un degré élevé d'activité anti-Leishmaniale. Le composé 88 est identique à la Pentamidine, excepté le fait qu'il possède des atomes d'azote à la place des atomes d'oxygène de liaison. Le composé 89 (hexamidine) est identique à la Pentamidine, excepté le fait qu'il contient en plus un groupe de liaison de méthylène.

Le tableau XIX fait apparaître que les méta-amidines sont comparables aux para-amidines, bien qu'elles présentent une activité un peu plus faible par comparaison avec les para-amidines.

Le tableau XX permet de voir que les composés de la formule II dans laquelle les groupes amidine ont été convertis en imidazolines sont dans l'ensemble essentiellement aussi efficaces que leurs équivalents en amidine simple.

Exemples 99-116

Activité du Plasmodium

La présente invention est illustrée plus loin conformément aux exemples non limitatifs suivants.

Les composés entrant dans le cadre de la formule I (et II) ont été obtenus en ayant des structures identifiées dans les tableaux XXI à XXIII. Pour tester l'efficacité de ces composés dans le traitement de la malaria, on a employé la procédure générale in vitro suivante.

Agents chimiothérapeutiaues

La Pentamidine et les analogues de la Pentamidine employés dans cette étude ont été synthétisés en employant les procédures détaillées décrites plus haut.

Essai de sensibilité du médicament

Des souches W2 de Plasmodium falcioarum (résistantes à la chloroquine, sensibles à la méfloquine) et D6 (résistantes à la méfloquine, sensibles à la chloroquine) ont été cultivées dans un milieu consistant en RPMI-1640, 25 mM HEPES, 25 mM NaHC03 et 10% (v/v) de plasma humain frais congelé. Dans les cavités d'une plaque de microtitrage à 96 cavités, on a placé 200 jil par cavité d'une suspension de érythrocyte à 1,5% contenant 0,2% à 0,4% d'érythrocyte parasité contenant des dilutions sérielles des composés faisant l'objet du test. La plaque était alors placée dans une chambre anaérobique, traversée par un gaz azoté et incubé à 37 degrés C. Au bout de 24 heures, 25 ni par cavité de 3H-hypoxanthine (1 mCi/ml) ont été ajoutés et la plaque réincubée comme ci-dessus. Au bout de 42 heures, les cellules étaient récoltées avec un récolteur de cellules de type multibroyage sur un papier en microfibres de verre. Un scintillateur a été utilisé pour définir l'incorporation de 3H-hypoxanthine. Les activités des composés testés ont été déterminées par comparaison de l'incorporation de 3H-hypoxanthine dans la concentration du médicament en utilisant une analyse informatisée de régression non-linéaire (Antimicrob. Agents Chemother. 16:710. (1979); Am.J.Trop.Med.Hvaiene 34:209, (1985). Les résultats sont exposés dans les tableau XIX-XXI.

RESULTATS DU TEST

Les résultats de l'emploi de la procédure précédente en vue de déterminer l'efficacité des composés dans le cadre de la formule I ou II ci-dessus dans le traitement de la malaria, se trouvent dans les tableaux XXI—XXIIE, qui montrent que les para-amidines, les méta-amidines et les para-imidazolines, ont toutes une activité anti-plasmodiale. Le meilleur composé pour le traitement des deux souches de Plasmodium falciparum conformément à la mise en pratique de la présente invention est le composé N° 106, tel que défini par la formule I dans laquelle X=N, Ru, R2 et R3=H, et n = 5.

Le tableau XXII permet de voir que les méta-amidines sont comparables aux para-amidines, bien qu'en moyenne elles soient un peu moins actives que les para-amidines.

Le tableau XXIII permet de voir que les composés de la formule II dans laquelle les groupes amidine ont été convertis en imidazolines sont dans l'ensemble essentiellement aussi efficaces que leurs équivalents en amidine simple.

17

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

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18

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

Tableau IA (suite)

n

11. O 4 OCH3

12. O 5 H

13. O S N02

14. O 5 NH2

15. O 5 OCH3

16. O 5 Br

17. N 5 H

18. N 5 N02

19. N 5 NH2

20. O 6 H

21. O 6 N02

22. O 6 NH2

23. N 6 NH2

24. O 4 Cl

25. O 5 Cl

19

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

Tableau IA (suite)

Am

JL £ n

26. O 3

27. O 4

28. O 5

29. O 6

20

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

Tableau IA (suite)

Am—x—<ch2>—x—^—«Œ

J_ X n

31. N 2 H

32. N 2 NO

2

33. N 2 NH2

34. O 3 N02

35. N 3 N02

36. N 3 NH2

37. N 4 NH2

38, O 4 N02

39. N 6 H

21

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

Tableau IA (suite)

# X n _r3

30. O 5 H H

40. O 4 H H

41. O 4 H CH3

42. O 5 H CH3

43. O 5 OCH3 H

44. O 3 OCH3 H

22

o>

o a

en o

&

O

CO Ol co o

IO

en io o

TABLEAU IB

Analyse élémentaire et points de fusion des exemples 1-44

Numéro décomposé

Formule analysée

Analyse élémentaire Calculé C H

N

Trouvé C

H

N

P.F.

Obtenu

1

C16H18N4O2/2HCI

49.14

5.72

14.33

49.18

5.75

14.28

>300

6%

2

Ci6Hi6N806/1.1HCI/1.3hfe0

42.53

4.39

18.60

42.83

4.01

17.07

287

39%

3

Ci6H2ONB02/4HCI/0.4H20

39.92

5.19

17.46

40.21

5.46

17.08

>300

26%

4

C17H20N4O2/2HCI/I.3H2O

49.96

6.07

13.71

49.96

6.10

13.59

Dec. at 144-145

82%

5

C17H22N6O2/4HCI/O.6EIOH

40.81

5.98

15.69

40.72

5.62

15.31

Dec. at 273

6%

6

C19H24N4O4/2HCI

51.24

5.88

12.58

51.04

5.91

12.50

293

76%

7

Ci7H22Ne/2HCI

53.27

6.31

21.92

53.11

6.39

21.96

298-300

22%

8

C18H24N6/2HCI/O.5H2O

53.20

6.70

20.68

53.04

6.73

20.54

>300

43%

9

C18H22N4O2/2HCI/O.4H2O

53.18

6.15

13.78

53.41

6.21

13.41

>300

95%

10

C18H24NBO2/4HCI/IH2O.

.41.55

5.81

16.15

41.64

5.84

16.08

285

18%

11

C20H26N4O4/2HCI/1.2H2O

49.94

6.37

11.65

49.98

6.29

11.61

297-299

70%

12

C19H24N4O2/2HCI/IH2O

52.90

6.54

12.99

52.66

6.29

12.92

247

86%

13

C19H22N6O6/2HCI

45.34

4.81

16.70

45.22

4.86

16.64

255

74%

14

C19H26N6O2/4HCI/I.6H2O

41.86

6.14

15.42

41.83

6.12

15.37

270

40%

15

C21H28N4O4/2HCI/2H2O

49.51

6.73

11.00

49.57

6.74

10.99

258-259

63%

16

Ci 9H22N4O2B1Ï/2HCI/IH2O

38.73

4.45

9.51

38.84

4.64

9.46

254-255

58%

17

Ci9H26N62HCI/1.33H20

52.42

7.10

19.30

52.32

7.08

19.17

295

48%

18

C19H24NBO4/2HCI/2H2O

42.71

5.76

20.12

43.08

5.41

20.07

293-294

39%

19

Ci 9H28N8/4HCI/2H2O

41.47

6.59

20.36

41.60

6.55

20.42

300-303

16%

20

C20H26N4O2/2HCI/2.5H2O

50.91

7.32

11.31

50.94

7.05

11.31

252

69%

21

C20H24N6O8/2HCI

46.43

5.07

16.24

46.51

5.05

16.41

Dec at 287-288

35%

22

C2oH2aN602/4HCI/0.6H20

45.49

6.45

15.01

45.13

6.84

14.61

Dec at 290

18%

23

C2oH3oNe/4HCI/1.7H20

42.97

6.74

20.05

43.05

6.76

19.97

Dec at 285

18%

24

C18H18N4O2/4HCI

46.18

4.74

11.97

46.17

4.79

11.90

>300

43%

Gì O

Ol Ol

Ol o

Sì

o

CO Ol

CO o ro

Ol m o

TABLEAU IB (suite)

Analyse élémentaire et points de fusion des exemples 1-44

Numéro de composé

Formule analysée

Analyse élémentaire Calculé C H

N

Trouvé C

H

N

P.F.

Obtenu

25

C10H2ON4Q2/4HCI/I.IH2O

45.46

5.26

11.16

45.49

5.23

10.98

247-248

55%

26

C17H20N4O2/2HCI/I.9H2O

48.67

6.20

13.35

48.64

6.24

13.31

300

42%

27

C18H22N2O2/2HCI/1.8H2O

50.07

6.44

12.98

50.10

6.46

12.97

257

68%

28

Ci 9H24N4O2/2HCI

55.21

6.34

13.55

55.47

6.51

13.15

133-134

51%

29

C20H28N4O2/ÖHCI/O.3H2O

55.51

6.66

12.95

55.45

6.67

12.88

268

64%

30

C23H28N402/2.2H20

54.70

6.87

11.09

54.69

6.87

11.06

147

81%

31

Non synthétisé

32

Non synthétisé

33

CieH22N8/4HCI/1.6H2O/0.4EtOH

38.84

6.13

21.57

38.83

6.00

21.81

>300

27%

34

Non synthétisé

35

C17H20H8O4/2HCI/IH2O

41.56

4.92

22.81

41.71

4.89

22.73

Dec at 295

58%

36

C17H24H8/4HCI/1.1 H2O/0.3EtOH

40.66

6.20

21.55

40.29

6.29

21.21

229

10%

37

Ci8H26Na/4HCI

43.21

6.04

22.40

43.30

6.09

22.36

Dec at 274-275

27%

38

Ci8H2oN80e/2HCI

44.18

4.53

17.18

44.08

4.55

17.10

298

26%

39

C2oH28Ne/2HCI/0.3H20

55.76

7.16

19.15

55.80

7.17

19.44

300

54%

40

C22H26N4O2/2HCI/2.2H2O

53.81

6.65

11.41

53.80

6.70

11.36

249-250

76%

41

C24H30N4O2/IHCI/I.5H2O

61.33

7.29

11.92

61.17

7.40

11.75

203-205

15%

42

C25H32N4O2/2HCI/IH2O

58.71

7.09

10.95

58.73

7.16

10.88

203-204

19%

43

C25H32N4O4/2HCI/2.5H2O

52.63

6.89

9.82

52.47

6.85

9.97

175

70%

44

C23H2BN4O4/1.75HCI/2.00H20

52.69

6.49

10.69

52.59

6.38

10.46

252

62%

0> Ol

0>

o a

Ci o

à

O

S

tt o

ro

CJl ro o

Cl

TABLEAU II

Extension de la maladie d'après examen histologique Amvrrv /~rr\ Am

-(c«2)—X—

A3

en

E> N"

12

NOMBRE D'ANIMAUX

28

Témoin R=t=H, X=Oj n=î5.

Amidine en position para

R=>=H, X=0, n=3.

Amidine en position para

0

1

1

5

_2_ 2 2

JL

1

0

0

JL

0

R=e-H, X=0, n—5« Amidine en position méta

Examen histologique:

0,5 =<10 kystes trouvés pour 2 sections

1 =kystes dispersés, <5% de poumon impliqué

2 è kystes dispersés, 5-10% de poumon impliqué ou petits foyers d'infection

3 =kystes dispersés, 10-50% de poumon impliqué avec quelques fortes zones d'infection

4 =>>50% de poumon impliqué avec nombreuses fortes zones de foyers d'infection C =Comparatif, I représente un composé connu de là formule I

et II représente un nouveau composé de la formule II

O X

O)

u> §

ï>

CI

Ol o

en o

co

Ol co o

ro 01

ro o

01

Ol

TABLEAU ÎIÏ

Extension de la maladie d'après examen histologique

-|cvr i ^

NOMBRE D*

animaux

E:-te?mple

N>

»i5

1

2

3

J.

Témoin •

1

0

0

3

12

C

n2=". X=0, n=5

0

3

4

1 .

0

20

C

B2=H, XsO, n=6

3

3

1

0

0

15

11

R2=0CH3, X=0f n=5

2

1

3

0

0

11

R2=NH2, X=0, n=5

2

H

1

1

0

Examen histologique:

0,5 =<10 kystes trouvés pour 2 sections

1 =kystes dispersés, <5% de poumon impliqué

2 =kystes dispersés, 5-10% de poumon impliqué ou petits foyers d'infection

3 =kystes dispersés, 10-50% de poumon Impliqué avec quelques fortes' zones d'infection

4 =>50% de poumon impliqué avec nombreuses fortes zones de foyers d'infection C = Comparatif, X représenté un composé connu de la formule I

et II représente un nouveau composé de la formule II

o>

Ol

O)

o en en en o

à

à

a co o

IO

en io o

TABLEAU IV

Extension de la maladie d'après examen histologique

/ta—*—

-Am

NOMBRE D'ANIMAUX

Exemple N

ro

-vi

Témoin

M 0

1

0

2 2

«1

srj CM

12

C

n2=ll, X=0, n=5

4

i)

0

0

0

9

I

n2*n, X=0, nslJ

8

0

0

0

0

19-

II

R2=NH2, XsM, n=5

0

2

4

2

0

13

11

n2=M02, X*0, n=5

3

2

3

0

0

Examen histologique:

0,5= <10 kystes trouvés pour 2 sections

1 =kystes dispersés, <5% de poumon impliqué

2 = kystes dispersés, 5-10% de poumon impliqué ou petits foyers d'infection

3 =kystes dispersés, 10-50% de poumon impliqué avec quelques fortes zones d'infection

4 =>50% de poumon impliqué avec nombreuses fortes zones de foyers d'infection C = Comparatif, I représente un composé connu de la formule I

et II représente un nouveau composé de la formule II

0 X

01

<o

8

">l >

en

Ol o

è

O

CO cn co o

ro ci io o

cn

TABLEAU V

Extension de la maladie d'après examen histologique

-Am

-Or

^nn

-<CH2>ÏT

-0-

Ë:<empjç

NOMBRE

D'ANIMAUX

n°

J_

2

JL

JL

Témoin

1

• 1

3

1

2

12

C

B2=H, X=O,

n=5

2

1

3

i

0

7

II

R2=H, X=N,

n=3

5

1

2

0

o

8

II

r2=ii, X=N,

n=4

3

1

0

0

o

17

II

R2=H, x-n,

n=5

1

2

3

1

o

39

C

n2=n, XÏN,

n=6

2

1

0

0

o

21

.C

R2=no2, X=0

n=6

II

1

1

0

o

18

(I

H2ÏN02, X=N

. ns5 .

1

3

0

2

1

23

C

R2=NII2r- X=N

, n=6

3

1

2

0

1

Examen histologique:

0,5 =<10 kystes trouvés pour 2 sections

= kystes dispersés, <5% de poumon impliqué

=kystes dispersés, 5-10% de poumon impliqué ou petits foyers d'infection = kystes dispersés, 10-50% de poumon impliqué avec quelques fortes zones.d'infection =>50% de poumon impliqué avec nombreuses fortes zones de foyers d'infection = Comparatif, I représente un composé connu de la formule I et II représente un nouveau composé de la formule II

Cl o

Sì

O

g

U) o

IO U1

IO

o

TABLEAU VI

Extension de la maladie d'après examen histologique

Exemple NOMBRE D'ANIMAUX

N".

JL

2

JL

J_

Témoin

0

0

0

il

11

12

C

R2=ll, X=0, n=5

5

3

0

0

0

3

II

R2=KH2, X=0, n=2

«1

1

0

0

0

5

11

R2smi2, XrO, n=3

2

1

1

0

0

10

II

n2=NH2, X=0, n=1

2

5

1

0

0

11

II

R2=NH2, X=0, n=5

6

1

0

0

0

22

C

R2=NII?i X=0f n=6

0

1

3

0

Examen histologique:

0,5 =<10 kystes trouvés pour 2 sections

1 =kystes dispersés, <5% de poumon impliqué

2 =kystes dispersés, 5-10% de poumon impliqué ou petits foyers d'infection

3 =kystes dispersés, 10-50% de poumon impliqué avec quelques fortes zones d'infection

4 =>50% de poumon impliqué avec nombreuses fortes zones de foyers d'infection C = Comparatif, I représente un composé connu de la formule I

et II représente un nouveau composé de la formule II

0>

en o>

o

Ol en

Ü1

o

&

o

CO ai co o

lu en ro o

TABLEAU VII

Extension cle la maladie d'après examen histologique

Am ri^ \ y~~x , Am

.. —<CHa)0

R-

CO

o

Exe N°.

12

26

27

28

29

NOMBRE D'ANIMAUX

C I I C C I

Témoin

Pentamidine n=3, Am=méta n=4„ Am méta n=5. Am=méta n=6, Am=méta n=5, Am=bloqué

5L5

1

2

JL

_4

0

0

1

3

4

1

2

2

0

0

2

1

4

1

0

2

1

1

3

0

1

1

4

2

0

1

'1

1

2

0

5

3

0

0

0

Examen histologique:

0,5 =<10 kystes trouvés pour 2'sections

1 = kystes dispersés, <5% de poumon impliqué

2 = kystes dispersés, 5-10% de poumon impliqué ou petits foyers d'infection

3 =kystes dispersés, 10-50% de poumon impliqué avec quelques fortes zones d'infection

4 =>50% de poumon impliqué avec nombreuses fortes zones de foyers d'infection C = Comparatif, X représente un composé connu de la formule I

et II représente un nouveau composé de la formule II

O X os

(O

oo £

i

0> Ol

O)

o en en en o en

O

CO en co o

IO

en ro o

00

Exemple N".

TABLEAU VIII

Extension de la maladie d'après examen histoloaique

Am-

~X ( CHg ) ~—X V^J/

"2 "2

NOMBRE D'ANIMAUX

QiS

1

2

JL

JL

Témoin

0

0

0

1

7

12

C

n2=ll, X=0, n=5

4

2

0

0

0

O 3

6

II

R2=OCH3, X=0, n=3

7

1

0

0

0

o>

S

11

II

R2=OCH3, X=0, n=4

3

4

1

0

0

8

15

II

R2=OCH3, X=0, n=5

0

3

4

1

0

î>

01

21

C

R2=C1, XïO, n=4

0

1

2

3

2

25

C

R2=C1, X=0, ns5

0

0

0

4

4

Examen histologique:

0,5 =<10 kystes trouvés pour 2 sections

1 =kystes dispersés, <5% de poumon impliqué

2 =kystes dispersés, 5-10% de poumon impliqué ou petits foyers d'infection

3 =kystes dispersés, 10-50% de poumon impliqué avec quelques fortes zones d'infection

4 =>50% de poumon impliqué avec nombreuses fortes zones de foyers d'infection C = Comparatif, I représente un composé connu de la formule I

et II représente un nouveau composé de.la formule II

O)

en o>

o

01 01

Ol o

&

o co

Ol co o ro 01

io o

Ol co ro

Exemple N°

12 33

TABLEAU IX

Extension de la maladie d'après examen histologique

Témoin C n2sll, X=0, n*5

II R2=NH2, X=N, n=2

-<cll2>r

0^5 0 0 0

JL

0 6 0

2

0

1 4

NOMBRE D'ANIMAUX

"(CIL)

2 n

6 0 3

Am

JL

2 0 t

O ZE o>

(O

S

■>1 >

en

12 41 44

i! Il II

n3=cn3, r2=ii, x=o, n=5

R3=CH3, R2=H, X=0, n=4 R3=H, B2=0CH3, X=0, n=3

0 0 6

0 0 2

3 2 0

Examen histologique:

0,5 =<10 kystes trouvés pour 2 sections

1 =kystes dispersés, <5% de poumon impliqué

2 =kystes dispersés, 5-10% de poumon impliqué ou petits foyers d'infection

3 =kystes dispersés, 10-50% de poumon impliqué avec quelques fortes zones d'infection

4 =>50% de poumon impliqué avec nombreuses ;fortes zones de foyers d'infection C =Comparatif, I représente un composé connu de la formule I

et II représente un nouveau composé de la formule II

f

a o>

o

Cl

01

O! O

è

4» O

CO Ol co o

w

Ol w

o

TABLEAU X

co co

Ex erno i e N*\

35

36 .

37 30

Extension de la maladie diaprés examen histologique Am ^ x (C"2)—* A

Témoin

11 R2=N02, X=M, n=3

II R2=NH2, X=N, n=3

II R2=NH2, X=N, n=l|

II n2=H02, X=0, n=l»

n2

NOMBRE D'ANIMAUX

0i§ 0

0

1

0 0

0

0 I)

1 0

-(CH )—X-d n

2 2

0

1 1

1

5

6 0 0 »I

5 mg/kg 10 mg/kg 10 mg/kg 2.5 mg/kg

0 X

O) -J

co §

>

01

10 13

II R2=H, R3=Hp X=0, n=l|

II R3=ll, R2sOCH3, X»0, n»5

0 0

10 mg/kg 5 mg/kg

Examen histologique:

0,5= <10 kystes trouvés pour 2 sections

1 »kystes dispersés, <5% de poumon impliqué

2 =kystes dispersés, 5-10% de poumon impliqué ou petits foyers d'infection

3 =kystes dispersés, 10-50% de poumon impliqué avec quelques fortes zones d'infection

4 =>50% de poumon Impliqué avec nombreuses fortes zones de foyers d'infection C »Comparatif, I représente un composé connu de la formule I

et II représente un nouveau composé de la formule II

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

TABLEAU XI

Extension de la maladie d'après examen histologique

Nombre d'animaux 0.5 1

2

3

4

Témoin

0

0

2

5

5

Pentamidine 10 mg/kg

3

5

2

1

0

Butamidine 10 mg/kg

10

2

0

0

0

Pentamidine 1 mg/kg

1

0

3

5

3

Butamidine 1 mg/kg

0

1 .

3

5

3 .

Pentamidine 0.1 mg/kg

0

0

0

7

5

Butamidine 0.1 mg/kg

0

0

4

5

. 2

Examen histologique:

0,5 = < 10 kystes trouvés pour 2 sections

1 = kystes dispersés, < 5% de poumon impliqué

2 = kystes dispersés, 5-10% de poumon impliqué ou petits foyers d'infection

3 = kystes dispersés, 10-50% de poumon impliqué avec quelques fortes zones d'infection

4 = > 50% de poumon impliqué avec nombreuses fortes zones de foyers d'infection

34

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

TABLEAU XII

Extension de la maladie d'après examen histologique (combiné)

Nombre

Nombre d'animaux par groupes examinés

Composé

0,5

1

2

3

4

Saline

1

2

9

25

35

1.

Non testé sur les animaux -

■insoluble

2.

Non testé sur les animaux -

■ insoluble

3.

4

4

0

0

0

4.

3

4

1

0

0

5.

2

4

1

0

0

6.°

7

1

0

0

0

7.

5

1

2

0

0

8.

3

1

0

0

0

9.

8

0

0

0

0

10.

2

5

1 •

0

0

11.°

3

4

1

0

0

12. (Pentamidine)

20

26

12

2

0

13.c

0

2

4

2

0

14.

8

5

1

1

0

15.d

2

4

7

1

0

16.

Non testé sur les animaux -

insoluble

17.

1

2

3

1

0

18.°

1

3

0

2

1

19.

3

2

3

0

0

20.

3

3

1

0

0

21.®

4

1

1

0

0

22.°

0

1

4

3

0

23.

3

1

2

0

1

24*

0

1

2

3

2

25.d

0

0

0

4

4

26.

2

1

4

1

0

27.

2

1

1

3

0

28.

4

3

6

2

1

29.

1

4

1

2

0

30.

5

3

0

0

0

31.

Non testé sur Ii as animaux -

synthèse en cours

32.

Non testé sur les animaux -

synthèse en cours

33.

0

0

4

3

1

34.

Non testé sur les animaux

35.°

0

0

0

2

6

36.

1

4

2

0

0

37.

0

4

3

1

0

38.d

0

0

3

1

4

39.

Non testé sur Ii ss animaux

40.

1

2

3

1

0

35

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

TABLEAU XII (suite)

Extension de la maladie d'après examen histologique (combiné)

Nombre

Nombre d'animaux par groupes examinés

Composé

0,5

1

2

3

4

Saline

1

2

9

25

35

41.d

0

0

2

4

2

42.d

0

0

2

3

3

43.°

1

3

1

2

0

44.d

6

2

0

0

0

a Examen histologique:

0,5 - < 10 tystes trouvés pour 2 sections

1 « kystes dipersés, < 5% de poumon impliqué

2 » kystes dispersés, 5-10% de poumon impliqué

3 » kystes dispersés, 10-50% de poumon impliqué avec quelques fortes zones d'infection

4 = > 50% de poumon impliqué avec nombreuses fortes zones de foyers d'infection b Tous les composés ont été testés à 10 mg/kg sauf indication contraire cTestéà5mgÂ<g d Testé à 2,5 mg/kg e Testé à 1,25 mg/kg

36

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

TABLEAU XIII

Toxicité des amidines

Numéro de composé Effet

1. Non testé sur des animaux - insoluble

2. Non testé sur des animaux—insoluble

3. Aucun

4. Légère tuméfaction à l'endroit de l'injection

5. Aucun

6. Aucun -testé à 5 mg/kg seulement

7. Aucun

8. Nécrose à l'extrémité de la queue, toxicité chronique, 3 morts le 7^ jour avec 10 mg/kg

9. Aucun

10. Aucun

11. Aucun -testé à 5 mg/kg seulement

12. Un peu d'hypotension, queues oedémateuses

13. Toxicité aiguë, mortà 10 mg/kg

14. Aucun

15. Forte hypotension, toxicité aiguë - mort à 10 mg/kg

16. Non testé chez les animaux-insoluble

17. Toxicité chronique-2 morts le 1 Séjour avec 10 mg/kg

18. Toxicité aiguô-mortà 10 mg/kg

19. Tremblements

20. Un peu d'hypotension, queues oedémateuses, effet anticoagulant prononcé

21. Toxicité aiguë, mort à 10,5 et 2,5 mg/kg

22. Toxicité aiguë - mort à 10 mg/kg

23. Spasmes en cas d'injection rapide

24. Aucun -testé à 2,5 mg/kg en raison de la solubilité

25. Aucun - testé à 2,5 mg/kg en raison de la solubilité

26. Aucun

27. Aucun

28. Légère tuméfaction à l'endroit de l'injection

29. Queues légèrement oedémateuses

30. Aucun

31. Non testé

32. Non testé

33. Certains effets anticoagulants

34. Non testé

35. Testé à 5 mg/kg en raison de la solubilité - pas de toxicité

36. Aucun

37. Aucun

38. Toxicité aiguë à 10 mg/kg et 5 mg/kg - testé à 2,5 mg/kg sans toxicité

39. Non testé chez des animaux

40. Aucun

41 . Testé à 2,5 mg/kg en raison de la solubilité - pas de toxicité

37

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

TABLEAU XIII (suite)

Numéro de composé

Effet

42.

Toxicité aiguë à 10 mg/kg et 5 mg/kg - testé à 2,5 mg/kg sans toxicité

43.

Toxicité aiguë à 10 mg/kg «frissons».et arythmie cardiaques-testé à 5 mg/kg

sans toxicité

44.

Testé à 2,5 mg/kg en raison de la solubilité - pas de toxicité

38

81 g & è a § K

TABLEAU XIV

GIARDIA LAMBLIA : PARA-AMIDINES

".VQp—0-<I

1R^ R2 R2 R3

EXEHPLE N°

X

n

—2

IC50<uM)

45

0

2

nh2

1183.8

46

N

2

nh2

713.7

47

0

3

h

12.3

48

0

3

nh2

15.1

49

0

3

och3

3.2

50

N

3

H

68.2

51

N

3

no2

81.2

52

0

<1

H

61.6

53

0

1

nh2

96.8

54

0

1

no2

53.2

oiui^^cocororo uiocnocnocno

EXtilPLE N°

TABLEAU XIV (suite) BIARDIA LAMBLIA s PARA AMIDINES

x n

—2

Icso(uH)

55

0

4

och3

68.8

56

0

4

Cl

27.7

57

n

4

h

50.7

58

n i)

nh2

107.7

59

0

5

h

76.5

60

0

5

nh2

66.3

61

0

5

no2

26.1

62

0

5

OCH3

24.0

63

0

5

Cl

16.3

64

n

5

h

40.6

65

n

5

nh2

48.6

66

n

5

no2

29.9

67

0

6

h

34.3

68

0

6

nh2

38.7

69

n

6

H

4.2

70

n

6

nh2

21.9

ü è g § 8? 8 5

TABLEAU XV GIARDIA LAMBLIA : META- AMIDINES

B< (CH2'—^R"1

EXEHPLE N"

^ n 5.2 ICgq(uM)

71 0 3 H 560.1

72 O »1 H 105.8

73 0 5 H 55.8

74 0 6 H 81.2

Ol en

MPI

75

76

77

78

79

80

O Ol O 01 O Î

TABLEAU XVI GIARDIA LAMBLIA : PARA-IMIDAZOLINES

X

n

—3

«3-

0

3

h

0ch3

0

4

h h

0

<1

ch3

h

0

5

m h

0

5

ch3

h

0

5

h och3

g è è S § 8

TABLEAU XVII

COMPOSES COURAMMENT EMPLOYES POUR LE TRAITEMENT DE LA

SIARDIASIS AUX ETATS-UNIS ET LEUR INCORPORATION DETERMINEE PAR

IC50 AVEC 3H-THYMIDINE

Metronidazole Furazolldone Qulnacrlne . HCl

IC50 =

3.65 UM«

Ic50

O

O"»

If vM»

IC50 =

1.41

PM»

IC50 =

0.91 pMf

1C50

= 0.74

nMf

IC50 =

1.18

jiMt ic50 =

2.14 uMS

IC50

= 0.60

mM§

IC50 =

1.09

MHS

IC50 -

1.08 11MI

IC50

= 2.50

m

IC50 =

1.59

nMl

1C50 s

2.21 pM±

IC50

= 0.43

»iM±

1C50 =

4.02

yM±

* Stock - HB (ATCC 30957)

f Stock - BRIS/83/HEPU/106

$ Stock - BRIS/82/HEPU/41

1 Stock - BRIS/83/HEPU/120

± Stock - BRI/83/HEPU/136

(Boreham et al., 190*1 )

(Boreham et al., 1984)

(Boreham et al., 1984)

(Boreham et al., 1984)

81

82

83

84

85

86

87

88

89

90

40 45

co en u 0

TABLEAU

8

XVIII

ro

O Ol

_JL

O

LEISHMANIASIS

MEXICANA AMAZONENSIS :

PARA-AMIDINES

'VC

R.N ^ "3

(CH,»-

R2

2

K

(NOUVEAU)

(ANCIEN)

n fia

îâz

Rang là?

Rang

3

och3

1.69

10

1.93

12

«1

il

0.58

3

0.60

3

4

h

1.23

7

1.19

9

5

h

0.65

4

0.75 Ave.

5

5

m2

2.57

13

1.07

8

5

m2

2.32

12

0.95

6

5

och3

6.53

16

2.12

13

5

h

0.35

2

0.35

1

6

H

0.33

1

0.43

2

5

cl

1.11

6

1.06

7

a> en

Oi o en en en o

CD o ro en ro o

Ä O S

TABLEAU XIX

LEISHMANIASIS MEXICANA AMAZONENSIS : META-AMIDINES

"'C

y

NR,

"NR,

4^.

01

(NOUVEAU)

(ANCIEN)

EXEMPLE N°

X

n

Ü2

ëb

Rang

(or 18)

Rang

(or 18)

17-14

91

0

3

H

7.20

17

>4.5

92

0

4

H

3.28

15

>4.5

17-14

93

0

5

H

1.66

9

1.51

11

94

0

6

H

2.92

14

1.35

10

R,, R3 - H

O X O)

co §

>

en

a>encnj^4^cocoroM-j-o^ooîoaioutooi

TABLEAU XX

LEISHMANIASIS MEXICANA AMAZONENSIS s PARA-AMIDINES

(NOUVEAU)

(ANCIEN)

EXEMPLE Nc

95

96

97

98

0 0 0 0

5 5 3 3

»3

h ch3

h h

«2

h h ocii3 h

§3

1.06 12.2 1.71 1.17

Rang

5 18 11 8

IC

0.67 >1.5 >'1.5

Rang

17-11 17-11 x

55 60

Ol o

&

4^ O

co

Ol co 0

20

25

CI

TABLEAU XXI

PLASMODIUM FALCIPARUM :

PARA-AMIDINES

/C

rtn "3

-Qr

2

<CH2>—*— r2

hr, ^mr,

"3

EXEMPLE N°

W2

Rang

1)6 Rang

X

n

«2

ic50("m)

(of 18)

1C,J0(uM)

(of 18)

99

0

3

0CH3

0.065

6

0.077

11

100

N

1

H

0.057

3

0.025

3/1

101

0

(1

0.120

13

0.057

b

102

0

5

H

0.083

11

0.038

5

103

0

5

no2

0.069

8

0.071

10

104

0

5

nii2

0.076

9

0.016

6/7

105

0

5

och3

0.066

7

0.106

11

106

n

5

H

0.022

1

<0.020

1

107

0

6

H

0.315'

17

0.118

16

108

0

5

Cl

0.165

16

0.107

t5

Sg&èSìgKgoì

TABLEAU XXII PLASMODIUM FALCIPARUM s META-AMIDINES

EXEMPLE N'

^NB.

R1

W2 c. D6 c.

Rang Rang n2 ic50(uM) (or 18) ic50(um) (or 18)

109 0 3 H 0.156 15 0.191 18

110 0 1 H 0.013 2 0.016 6/7

111 0 5 H 0.080 10 0.069 9

112 0 6 h 0.125 11 0.132 17

Ol o

EXEMPLE N°

113

114

115

116

tableau xxiii PLASMODIUM FALCIPARÜM : PARA-IMIDAZOLINES

n3 "2 2 3

W2

Rang

D6

Rang

-2

icgo^uM)

(of 18)

IC50(uM)

(of 18)

H

0.101

12

0.023

2

H

1.817

18

0.089

12

och3

0.060

5/1

0.100

13

H

0.060

5/1

0.025

3/1

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

CH 679 857 A5

DIAGRAMME I

NC

+ Br—(CHj),—Br

N«. EtOH

NC

1. HCL EtOH 2. EtOH, NHj

K X

1. HO. EtOH lNHi-(CHdr-NHi

K

Hi, W/C

NH: HjN

W.1Û.14.* 22

i - (o - S) c - (a — O

d - (n - 5) c » (s « O

50

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

CH 679 857 A5

DIAGRAMME II

I. EtOH. Ha 2-NHj. EtOH

Pd/C, Hj

7.M7JU9

nh2

H2N

d ~ - 3) 1V3.33.3ÂÉ37

c — (n — 6)

51

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

CH 679 857 A5

DIAGRAMME XII

NH:

OjN

I. HG/EtOH 2-NHj/EtOH 3. Pd/C, Hj

NK2

h2n

Claims (12)

Revendications

1. Composé caractérisé en ce qu'il présente la structure ayant la formule II ci-après:

R,\

il n

HR,

y 1

"HR.

52

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

dans laquelle chaque Ri est un H, ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -{CH2)m-,où m = 2, 3 ou 4; R2 est H, OCH3, NO2 ou NH2; R3 est H, CH3 ou CH2CH3; n = 2, 3, 4 ou 5; et X est un O, un N ou un S; à la condition que lorsque Ri et R2 sont tous deux un H, X est un N ou un S, et que lorsque R2 est un H et X est un 0, deux groupes Ri représentent conjointement -(CH2)rn-, et n = 3 ou 4.

2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il présente la structure suivante:

3. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il présente la structure suivante:

1R3 2 h 3

dans laquelle chaque Ri est un H,ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -CH2CH2-; R2 est H, OGH3, NO2 ou NH2; et n = 2, 3, 4 ou 5, et R3 et X ont les mêmes significations que dans la revendication 1.

4. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il présente la structure suivante:

>

R.M S3

—x—<ch2>—*—<0>-^

p o >

vNR

S

"^NiR 3

t dans laquelle chaque Ri est un H, ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -CH2CH2-; R2 est OCH3, NO2 ou NH2; X est un O ou un N; n = 2, 3, 4 ou 5, et X a la signification donnée en revendication 1.

5. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il présente la structure suivante:

■X- (CH2)—X-

Rj R£

dans laquelle R2 est H, OCH3, NO2 ou NH2; X est un O ou un N; et n = 2, 3, 4 ou 5, et R2 a la signification donnée en revendication 1, à condition que lorsque R2 est un H, n ne soit pas égal à 5.

6. Composé selon la revendication 5, caractérisé en ce que R2=OCH3, R2=H, X=0 et n = 1.

7. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend une quantité thérapeutiquement efficace d'un composé ayant la structure de formule II,

53

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

CH 679 857 A5

■X (CH,)

dans laquelle chaque Ri est un H, ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -(CH2)m-, où m = 2, 3 ou 4; R2 est H, OCH3, NO2 ou NH2; R3 est H, CH3 ou CH2CH3, n = 2, 3, 4 ou 5; et X est un O, un N ou un S; à la condition que lorsque Ri et R2 sont tous deux un H, X est un N ou un S, et lorsque R2 est un H et X est un O, deux groupes Ri représentent conjointement -(CH2)nr- et n = 3 ou 4, et un support pharmaceutiquement acceptable.

8. Composition pharmaceutique selon la revendication 7, caractérisée en ce que le composé présente la structure suivante:

*1%

N<

/

R1H Ro

^NR1

'NR

1

dans laquelle Ri, R2, R3, X et n ont les significations données en revendication 1.

9. Composition pharmaceutique selon la revendication 7, caractérisée en ce que le composé présente la structure suivante:

R«N

-(ou

R,N

>NR<

dans laquelle chaque Ri est un H, ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -CH2CH2-; R2 est H,

OCH3, NO2 ou NH2; et n = 2, 3, 4 ou 5, et R3 et X ont les mêmes significations que celles données en revendication 1.

10. Composition pharmaceutique selon la revendication 7, caractérisée en ce que le composé présente la structure suivante:

'Hj 2 2 3

dans laquelle chaque Ri est un H, ou deux groupes Ri sur le même groupe amidine représentent conjointement -CH2CH2-; R2 est OCH3, NO2 ou NH2; X est un O ou un N; n = 2, 3,4 ou 5, et X a la signification donnée en revendication 1.

11. Composition pharmaceutique selon la revendication 7, caractérisée en ce que le composé présente la structure suivante:

54

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

CH 679 857 A5

"v- '

dans laquelle R2 est H, OCH3 ou NH2; X est un O ou un N; et n = 2, 3, 4 ou 5 et R3 a la signification donnée en revendication 1, à condition que lorsque R2 est un H, n ne soit pas égal à 5.

12. Composition pharmaceutique selon la revendication 11, caractérisée en ce que R2=OCH3, R3=H et n = 3.

55