CH646686A5

CH646686A5 - Pentapeptides homologues d'enkephaline, leur preparation et composition pharmaceutique les contenant.

Info

Publication number: CH646686A5
Application number: CH927480A
Authority: CH
Inventors: Paul David Gesellchen; Robert Theodore Shuman
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1979-12-17
Filing date: 1980-12-16
Publication date: 1984-12-14
Also published as: IL61703A0; EP0030848A3; DE3070184D1; HU186375B; KR850000476B1; EP0030848A2; FR2471970A1; IE802642L; IT8026672A0; KR830004218A; GB2065132B; EP0030848B1; GB2065132A; IT1141135B; JPS5697257A; IL61703A; FR2471970B1; US4283329A; IE50883B1; BE886677A

Description

La présente invention concerne une nouvelle catégorie de composés qui font preuve d'une action analgésique.

Récemment, des substances endogènes ayant des propriétés similaires à celles de la morphine ont été extraites de la cervelle ou du liquide céphalo-rachidien (LCR) de mammifères. Ces substances, dénommées enképhalines, ont été identifiées par Hughes et al., «Nature», 258, 577 (1975) comme étant des pentapeptides avec les séquences d'aminoacides suivantes:

H-T y r-Gly-Gly-Phe-Met-OH

H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-OH.

Ces composés sont appelés respectivement méthionine-enképhaline et leucine-enképhaline.

Il a été démontré que la méthionine-enképhaline et la leucine-enképhaline faisaient preuve d'une action analgésique chez les souris par administration dans les ventricules cérébraux [Buscher et al., «Nature», 261,423 (1976)], mais elles sont pratiquement dénuées de toute action analgésique utile lorsqu'elles sont administrées par voie parenterale.

Par conséquent, depuis la découverte des enképhalines, des efforts importants ont été consacrés à la préparation d'analogues des enképhalines dans l'espoir de découvrir des composés ayant une activité et une utilité pratique accrues en raison de leur disponibilité biologique par administration parentérale ou orale.

Dutta et al., «Life Sciences», 21, pp. 559-562 (1977), rendent compte de certaines modifications de structure qui, suggèrent-ils, tendent à augmenter l'efficacité. Ils suggèrent que l'activité peut être augmentée par au moins un des moyens suivants:

a) substitution de Gly en position 2 par certains D ou a-aza-aminoacides;

b) transformation de la fonction carboxyle terminale en fonction ester méthylique ou en fonction amide;

c) modification du Phe en position 4 par substitution a-aza, par N-méthylation ou par hydrogénation du noyau aromatique.

En outre, Roemer et al., «Nature», 268, pp. 547-549 (1977), suggèrent, à titre de modifications utiles, la transformation du Met5 en son carbinol correspondant et l'oxydation du soufre du Met en suif-oxyde.

Une autre modification structurelle d'importance est celle qui est relatée dans le brevet belge N° 859026. Ce brevet suggère l'augmentation de l'activité et de la disponibilité biologiques des analogues de l'enképhaline par insertion d'un reste D-aminoacide en position 2, transformation de la fonction carboxyle terminale en fonction amide, et N-alkylation du reste aminoacide en position 5.

Une catégorie d'analogues de l'enképhaline présentant un haut degré d'action analgésique a maintenant été découverte. Ces analogues sont des enképhalines halogénées qui présentent une grande spécificité structurelle aussi bien quant à l'identité que quant à la position de l'halogène. Les composés de formule I ci-dessous sont des pentapeptides dans lesquels la position 4 du peptide est occupée par le reste d'une L-phénylalanine p-fluorosubstituée.

La littérature rencontre d'autres analogues 4-phénylalanyls halo-génés de l'enképhaline; cependant, aucun d'entre eux n'est un analogue 4-phénylalanylé dont le noyau phényle est monosubstitué par un atome de fluor en position para. A. R. Day et al., «Res. Comm. in Chem. Path. and Pharmacol.», 14 (4), 597-603 (1976) révèlent H-Tyr-Gly-Gly-pClPhe-Nle-OH. R. J. Miller et al., «Vitamins and Hormones», 36, 297-382, Academic Press (1978), mentionnent H-Tyr-D-Ala-Gly-PclPhe-D-Leu-OH ; H-Tyr-D-Ala-Gly-pClPhe-D-Leu-OMe, et H-Tyr-D-Ala-Gly-pCIPhe-D-Leu-NHEt. Pless et al., «Opiod Activity of Enkephalin Analogues», présentés au 15e Symposium européen des peptides, tenu du 4 au 9 septembre 1978 à Gdansk en Pologne, décrivent H-Tyr-D-Ala-Gly-pClPhe-Met(O)-OL. D. H. Coy et al., «BBRC», 83 (3), 977-983 (1978) mentionnent H-Ty r-D-Ala-Gly-F5 Phe-Met-NH2.

Aucune des références ci-dessus ne décrit les composés de formule I ci-dessous, et il a été découvert que l'identité et la position de l'atome d'halogène jouent toutes deux un rôle significatif dans le degré d'action analgésique de l'analogue de l'enképhaline.

Ainsi, la présente invention concerne une catégorie de composés ayant pour formule:

(L) (D) (L)

0 O OR O Rc

H II II II I3 II I5

CH—C—NH-CH-C—iNH-CH -C-N-CH—C-N-CH-Z K I I 2 I I

R

(I)

1 CH R

I 2 2

CH I 2

/\ fi f

/\ lì T

Il I

V

II I

V

I

OH

i

F

ainsi que leurs sels d'addition d'acides non toxiques et pharmaceutiquement acceptables, formule dans laquelle D et L définissent l'asymétrie;

R! est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle primaire en Ci-C3;

R2 est un radical alkyle primaire ou secondaire en C,-C4, un radical allyle, cyclopropylméthyle, hydroxyalkyle en Q-C2, ou —(CH2)m—U—CH3 dans lequel U est — S — ou ^ S—O et m est égal à 1 ou 2;

R3 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle primaire ou secondaire en Q-C4., ou un radical cyclopropylméthyle ou allyle;

R4 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle primaire ou secondaire en Cj-Cj; un groupement — (CH2)n—X—(CH2)p—CH3 dans lequel X est—O—,—S — ,

O

^S—Oou

X

o n est égal à 1 ou 2, et p est égal à 0 ou 1 ; un radical phényle; un radical phényle monosubstitué dont le substituant est un atome d'halogène, un groupement hydroxy ou nitro, ou un radical alcoxy en Cj-C3, alkyle en Q-C3 trifluorométhyle;

646 686

4

20

Rs est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle primaire en CrC4, et

Zest — CH2OR6,

O O

Il II 5

—C—NHRe ou —C—OR7i où R6 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en Ci-C3 et R7 est un radical alkyle en Q-C3;

sous réserve que, lorsque l'un de R3 et Rs est autre que l'hydrogène, l'autre est l'hydrogène.

On prépare les composés de formule I en faisant réagir avec un 10 agent de déblocage approprié un composé de formule générale:

n^N-CH-J-NH-CH--l-NH-CHs-J-l-CH-I-l-CH-Z' (II)

èHz Rs CHa R4 15

A A

Y Y

OR10 F

dans laquelle R3, R4 et Rs ont les mêmes définitions que ci-dessus; R8 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle primaire en CrC3, 25 ou un groupement de blocage de la fonction amine; R9 est R2 tel qu'il est défini ci-dessus ou bien est un groupement protecteur du groupement hydroxyle; R10 est un atome d'hydrogène ou un groupement protecteur du groupement hydroxyle; Z' est Z tel qu'il est défini ci-dessus ou bien est un précurseur de Z, y compris un support 30 de résine, avec cette réserve qu'au moins un des substituants Rs, R9, R10 ou Z' est un fragment bloqué.

Est également comprise dans le champ d'application de la présente invention une composition pharmaceutique comprenant un excipient et, à titre de principe actif, un composé de formule I. 35

Les sels d'addition d'acides non toxiques et pharmaceutiquement acceptables comprennent les sels d'addition d'acides organiques et minéraux, par exemple ceux qui sont préparés à partir d'acides tels que les acides chlorhydrique, sulfurique, sulfonique, tartrique, fuma-rique, bromhydrique, glycolique, citrique, maléique, phosphorique, 40 succinique, acétique, nitrique, benzoïque, ascorbique, paratoluène-sulfonique, benzènesulfonique, naphtalènesulfonique ou propioni-que. De préférence, les sels d'addition d'acides sont ceux que l'on prépare à partir de l'acide chlorhydrique, de l'acide acétique ou de l'acide succinique. Tous les sels ci-dessus sont préparés par des pro- 45 cédés classiques.

Comme on le notera d'après la définition des différents substituants qui apparaissent dans la formule I, les composés qui sont définis par cette structure sont des pentapeptides dont le carbone terminal porte une fonction alcool primaire ou son dérivé éther alky- so lique inférieur, une fonction amide primaire ou secondaire ou une fonction ester alkylique inférieur.

La configuration stéréochimique des composés de formule I en est une caractéristique essentielle. Pour plus de commodité, les restes d'aminoacides des pentapeptides de formule I seront numérotés 55 dans l'ordre en commençant par le reste qui se trouve sur la fonction amine terminale. L'asymétrie des restes d'aminoacides, lue de la position 1 à la position 4, est L, D, aucune et L.

Le reste qui occupe la position 3 est un fragment glycine et, ainsi, il n'y a aucune asymétrie quant à ce reste. Quant à la position 5 (la 60 position du carbone terminal), son asymétrie est définie comme étant celle qui est compatible avec et correspond au reste de L-aminoacide supposé correspondant ou au reste de D-aminoacide supposé correspondant ainsi que, bien entendu, leur mélange racé-mique. 65

Le substituant R! tel qu'il est utilisé ici est défini comme incluant le radical alkyle primaire en Q-C3. Par alkyle primaire en Ci-C3, on entend les radicaux méthyle, éthyle et n-propyle.

Les substituants R6 et R7 tels qu'ils sont utilisés ici sont définis comme incluant le radical alkyle en Ct-C3. Par alkyle en Q-C,, on entend les radicaux méthyle, éthyle, n-propyle et isopropyle.

Le substituant R5 tel qu'il est utilisé ici est défini comme incluant le radical alkyle primaire en Cj-Q. Par alkyle primaire en Q-Q, on entend les radicaux méthyle, éthyle, n-propyle et n-butyle.

Les substituants R2 et R3 qui apparaissent dans la formule I sont définis comme incluant le radical alkyle primaire ou secondaire en C1-C4. Par alkyle primaire ou secondaire en c,-c4, on entend les radicaux méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, isobutyle et sec.-butyle.

Le substituant R4 qui apparaît dans la formule I est défini comme incluant le radical alkyle primaire ou secondaire en Cx-Cs. Par alkyle primaire ou secondaire en Q-Cs, on entend les radicaux méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, isobutyle, sec.-butyle, n-pentyle, isopentyle, 2-méthylbutyle et néopentyle.

Le substituant R2 est également défini comme étant un radical hydroxyalkyle en Ci-C2. Par hydroxyalkyle en C1-C2, on entend les radicaux hydroxyméthyle, 1-hydroxyéthyle et 2-hydroxyéthyle.

Le substituant R2 qui apparaît dans la formule I est défini comme incluant le groupement — (CH2)m—U—CH3 dans lequel U est —S— ou ^S—Oetmestégalà 1 ou2.Par —(CH2)m—U—CH3, on désigne les radicaux méthylthiométhyle, méthylthioéthyle ainsi que les sulfoxydes de ces deux radicaux.

Le substituant R4 qui apparaît dans la formule I est défini comme incluant le groupement — (CH2)n—X—(CH2)p—CH3 dans lequel X est —O—, —S—,

\ \ y°

S-Oou S ,

/ /

n est égal à 1 ou 2, et p est égal à 0 ou 1.

Par —(CH2)n—X—(CH2)p—CH3, on désigne les radicaux méthylthiométhyle, éthylthiométhyle, méthylthioéthyle, éthylthioéthyle, et les sulfoxydes et les sulfones de chacun de ces radicaux, ainsi que les radicaux méthoxyméthyle, éthoxyméthyle, méthoxyéthyle et éthoxy-éthyle. Le terme halogène tel qu'il est utilisé ici comprend les atomes de fluor, de chlore, de brome et d'iode. Le terme alcoxy en Q-C3 tel qu'il est utilisé ici englobe les radicaux méthoxy, éthoxy, propoxy et isopropoxy.

Le substituant R4 est défini comme incluant les radicaux phényle monosubstitués dont le substituant est un atome d'halogène, un groupement hydroxy ou nitro, un radical alcoxy en Q-C3, alkyle en Cj-C3 ou trifluorométhyle. Des exemples de ces radicaux phényle substitués sont les radicaux p-chlorophényle, p-fluorophényle, m-bromophényle, p-iodophényle, o-chlorophényl.e, p-hydrophényle, o-hydroxyphényle, p-méthoxyphényle, m-éthoxyphényle, o-méthoxy-phényle, m-propoxyphênyle, p-isopropoxyphényle, p-nitrophényle, m-nitrophényle, p-tolyle, m-tolyle, o-éthylphényle, p-cumyle, m-cumyle, p-propylphényle, p-éthylphényle, p-trifluorométhylphényle et m-trifluorométhylphényle.

En ce qui concerne les restes d'aminoacides qui occupent les positions particulières des pentapeptides de formule I, les considérations suivantes s'appliquent:

A. Position 1.

Cette position représente le fragment terminal à fonction amine du peptide. Le reste est celui qui résulte de la L-tyrosine. Le reste peut n'être pas substitué sur l'azote, auquel cas Rt est un atome d'hydrogène. Par ailleurs, le reste peut être substitué par un radical alkyle primaire en C1-C3, c'est-à-dire N-méthyle, N-éthyle ou N-n-propyle. Pour les composés ayant un degré exceptionnellement élevé d'action analgésique lorsqu'ils sont administrés par voie parentérale, le reste tyrosyle qui occupe la position 1 n'est de préférence pas substitué sur l'azote. Pour les composés ayant un degré exceptionnellement élevé d'action analgésique lorsqu'ils sont administrés par voie orale, le reste tyrosyle qui occupe la position 1 est de préférence substitué sur l'azote. Dans le cas où le reste tyrosyle est substitué sur l'azote, le substituant est de préférence le radical méthyle.

5

646 686

B. Position 2.

Le reste aminoacide qui occupe la seconde position du peptide de formule I doit obligatoirement être le stéréo-isomère D, et c'est l'un quelconque de plusieurs restes d'aminoacides. Ceux-ci comprennent les restes provenant de la D-alanine (Ala) (R2 est le radical méthyle), de l'acide D-a-aminobutyrique (Abu) (R2 est le radical éthyle), de la D-norvaline (Nva) (R2 est le radical n-propyle), de la D-valine (Val) (R2 est le radical isopropyle), de la D-norleucine (Nie) (R2 est le radical n-butyle), de la D-leucine (Leu) (R2 est le radical isobutyle), de la D-isoleucine (Ile) (R2 est le radical sec.-butyle), de la D-allyl-glycine [Gly(Al)] (R2 est le radical allyle), de la D-cyclopropylméth-ylglycine [Gly(Cp)] (R2 est le radical cyclopropylméthyle), de la D-méthionine (Met) (R2 est le radical 2-méthylthioéthyle), de la D-S-méthylcystéine [Cys(Me)] (R2 est le radical méthylthiométhyle), du sulfoxyde de D-méthionine [Met(O)] (R2 est le radical méthylsulfin-yléthyle), du sulfoxyde de D-S-méthylcystéine [Cys(Me)] (R2 est le radical méthylsulfinylméthyle), de la D-sérine (Ser) (R2 est le radical hydroxyméthyle), de la D-thréonine (Thr) (R2 est le radical 1-hydr-oxyéthyle), et de la D-homosérine (Hse) (R2 est le radical 2-hydr-oxyéthyle). De préférence, R2 est un radical alkyle primaire ou secondaire en Cj-C4 ou un radical hydroxyalkyle en Cj-Cj. Des deux définitions, c'est le radical alkyle primaire ou secondaire en Cj-Q que l'on préfère et, à l'intérieur de cette définition, le reste provenant de la D-alanine.

C. Position 3.

Le reste d'aminoacide qui occupe cette position est celui qui provient de la glycine (Gly).

D. Position 4.

Le reste d'aminoacide qui occupe cette position est celui qui provient de la L-phénylalanine substituée en position para par un atome de fluor [Phe(F)]. Ce reste peut ou bien n'être pas substitué ou bien être substitué sur l'atome d'azote de la fonction amine (R3). Dans le cas où le reste est substitué sur l'atome d'azote, il s'agit d'un radical N-méthyle, N-éthyle, N-n-propyle, N-isopropyle, N-n-butyle, N-iso-butyle, N-sec.-butyle, N-cyclopropylméthyle ou N-allyle. De préférence, lorsque R3 est autre que l'hydrogène, il s'agit d'un radical alkyle primaire ou secondaire en Q-Q, et de préférence du radical méthyle ou éthyle.

E. Position 5.

Le reste qui occupe la position du carbone terminal des composés de formule I est un aminoacide transformé structurellement en son dérivé amide

O II

(Z est — C—NHR6), son alcool primaire ou son éther alkylique en Cj-C3 correspondant (Z est — CH2OR6), ou son ester alkylique en c,-c3

O

II

(Z est — C—OR7). L'asymétrie du reste d'aminoacides occupant la position 5 du pentapeptide est L, D ou D,L. De préférence, l'asymétrie du reste d'aminoacide est L. Le reste est représenté par l'un quelconque des restes suivants, dont chacun a été transformé en son dérivé amide, étheralcool primaire ou ester. Ces restes comprennent la glycine (Gly) (R4 est un atome d'hydrogène), l'alanine (Ala) (R4 est le radical méthyle), l'acide a-aminobutyrique (Abu) (R4 est le radical éthyle), la norvaline (Nva) (R4 est le radical n-propyle), la valine (Val) (R4 est le radical isopropyle), la norleucine (Nie) (R4 est le radical n-butyle), la leucine (Leu) (R4 est le radical isobutyle), l'isoleucine (Ile) (R4 est le radical sec.-butyle), l'acide a-aminohepta-noïque (Ahp) (R4 est le radical n-pentyle), Phomoleucine (Hle) (R4 est le radical isopentyle), l'homo-isoleucine (Hil) (R4 est le radical 2-mêthylbutyle), la néopentylglycine (Npg) (R4 est le radical néo-pentyle), la phénylglycine (Pgl) (R4 est le radical phényle), la para-hydroxyphénylglycine [Pgl(OH)] (R4 est le radical parahydroxy-

phényle), la S-méthylcystéine [Cys(Me)] (R4 est le radical méthylthiométhyle), le sulfoxyde de S-méthylcystéine [Cys(Me) (O)] (R4 est le radical méthylsulfinylméthyle), la S-méthylcystéinesulfone [Cys(Me) (02)] (R4 est le radical mêthylsulfonylméthyl), la S-éthyl-cystéine [Cys(Et)] (R4 est le radical éthylthiométhyle), le sulfoxyde de S-éthylcystéine [Cys(Et) (O)] (R4 est le radical éthylsulfinylmé-thyle), la S-éthylcystéinesulfone [Cys(Et) (02)] (R4 est le radical éthylsulfonylméthyle), la méthionine (Met) (R4 est le radical méthylthioéthyle), le sulfoxyde de méthionine [Met(O)] (R4 est le radical méthylsulfénylméthyle), la méthioninesulfone [Met(02)] (R4 est le radical méthylsulfonyléthyle), l'éthionine (Eth) (R4 est le radical éthylthioéthyl), le sulfoxyde d'éthionine [Eth(0)] (R4 est le radical éthylsulfinyléthyl), l'éthioninesulfone [Eth(02)] (R4 est le radical éthylsulfonyléthyle), l'O-méthylsérme [Ser(Me)] (R4 est le radical méthoxyméthyle), l'O-éthylsérine [Ser(Et)] (R4 est le radical éthoxy-méthyle), l'O-méthylhomosérine [Hse(Me)] (R4 est le radical mé-thoxyéthyle), et l'O-éthylhomosérine [Hse(Et)] (R4 est le radical éthoxyéthyle).

Une catégorie préférée de composés comprend ceux dans lesquels R4 est un radical alkyle primaire ou secondaire en Ci-Cs. Parmi ces derniers composés, on préfère nettement ceux dans lesquels R4 est un radical alkyle primaire ou secondaire en C4, et en particulier le radical isobutyle, qui définit le reste de leucine.

Une autre catégorie préférée comprend les composés dans lesquels R4 est — (CH2)n—X—(CH2)p—CH3. Parmi ceux-ci, on préfère nettement le radical méthylthioéthyle, qui définit le reste méthionine.

Une autre catégorie préférée comprend les composés dans lesquels Rs est un atome d'hydrogène et R4 est un radical phényle ou parahydroxyphényle.

Le reste de cet aminoacide terminal ou bien n'est pas substitué ou bien est substitué sur l'atome d'azote de sa fonction amine (Rs). Dans les cas où un substituant est présent, ce substituant est un radical alkyle primaire en C1-C4. Les substituants représentés sont les radicaux N-méthyle, N-éthyle, N-n-propyle et N-n-butyle. De préférence, l'atome d'azote de la fonction amine est substitué, c'est-à-dire que R5 est un radical alkyle primaire en Ci-Q. Le meilleur choix correspond au cas où le radical primaire est le radical méthyle. En outre, lorsque R5 est autre que l'hydrogène, R3 doit obligatoirement être l'hydrogène et, lorsque R3 est autre que l'hydrogène, R5 doit obligatoirement être l'hydrogène.

En outre, ainsi qu'on l'a déjà signalé, le reste qui occupe la position 5 est une fonction amide, alcool primaire, éther ou ester. De préférence, ce reste est une fonction amide, alcool ou ester et, dans le meilleur des cas, c'est une fonction amide. Dans ce dernier cas, le reste est de préférence une fonction amide primaire, c'est-à-dire que Z est

O

II

— C — NHR6 et R<5 est un atome d'hydrogène. Lorsque l'amide est un amide secondaire, R6 est un radical alkyle en Q-Q. Dans ces cas-là, le radical amide terminal est un radical N-méthyle, N-éthyle, N-n-propyle ou N-n-isopropyle, et c'est de préférence le radical N-méthyle.

Dans le présent mémoire descriptif, les abréviations suivantes, dont la plupart sont bien connues et sont communément utilisées dans ce domaine, sont employées:

Abu: acide a-aminobutyrique Ahp: acide a-aminoheptanoïque Ala: alanine Cys: cystéine Cys(Et): (S-éthyl)cystéine Cys(Et) (O): sulfoxyde de (S-éthyl)cystéine Cys(Et) (02) : (S-éthyl)cystéinesulfone Cys(Me): (S-méthyl)cystéine Cys(Me) (O): sulfoxyde de (S-méthyl)cystéine Cys(Me) (02): (S-méthyl)cystéinesulfone Eth: éthionine

Eth(O): sulfoxyde d'éthionine

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

646 686

6

Eth(02): éthionìnesulfone

Gly: glycine

Gly(Al): allylglycine

Gly(Cp) : cyclopropylméthylglycine

Hil: homo-isoleucine

Hle: homoleucine

Hse: homosérine

Hse(Me): (0-méthyl)homosérine

Hse(Et): (0-éthyl)homosérine

Ile: isoleucine

Leu: leucine

Met: méthionine

Met(O): sulfoxyde de méthionine

Met(02): méthioninesulfone

Nie: norleucine

Npg: néopentylglycine

Nva: norvaline

Pgl: phénylglycine

Pgl(OH): p-hydroxyphénylglycine

Phe: phénylalanine

Phe(F): p-fluorophénylalanine

Ser: sérine

Ser(Me): (0-méthyl)sêrine

Ser(Et): (0-êthyl)sérine

Thr: thréonine

Tyr: tyrosine

Val: valine

Ac: acétyle

Al: allyle

Cp: cyclopropylméthyle

Me: méthyle

Et: éthyle

Ip: isopropyle

Pr: n-propyle

Bu: n-butyle i-Bu: isobutyle t-Bu: t-butyle s-Bu: sec.-butyle

Boc: t-butyloxycarbonyle

Bzl: benzyle

Cbz: benzyloxycarbonyle

DDC : N,N'-dicyclohexylcarbodiimide

HBT: 1-hydroxybenzotriazole

DMF: N,N-diméthylformamide

TFA: àcide trifluoracétique

THF : tétrahydrofuranne

DEAE: diéthylaminoêthyle

IBCF: chloroformiate d'isobutyle

NMN : N-méthylmorpholine

18-couronne-6: 1,4, 7,10,13, 16-hexaoxacyclooctadécane

Des exemples de composés types de formule I comprennent les suivants:

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-L-Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-(N-Pr)Phe(F)-L-Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Bu)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Gly-NH2;

H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-(N-Ip)Phe(F)-L-Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Pr)Met-NH2 ;

H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Bu)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Pr)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Pr)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Pr)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-i-Bu)Phe(F)-L-Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Bu)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-s-Bu)Phe(F)-D-Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Ala-NH2 ;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Abu-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Nva-NH2 ; ■

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Val-NH2;

H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Nle-NH2;

H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Leu-NH2;

H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Ile-NH2;

H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Ahp-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Cp)Phe(F)-L-Nle-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Hse(Me)-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hle-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Hse(Me)-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(F)-L-Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Gly(Al)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Gly(Cp)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hil-NH2;

H-L-Tyr-D-Met-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Cys(Me)-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Met(0)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Cys(Me)(0)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Npg-NH2;

H-L-Tyr-D-Ser-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hse(Me)-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)-Phe(F)-L-Pgl-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Pgl(OH)-NH2 ;

H-L-Tyr-D-Thr-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Hse-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-NH2;

(N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Cys(Me)-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)-Cys(Me)(0)-NHz;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Cys(Et)-NH2;

(N-Et)-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Nle-NH2;

H-L-RTyr-D-Val-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Hse(Me)-NH2;

(N-Pr)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Cys(Et)(02)-NH2;

H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Pr)Met(0)-NH2;

H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Eth-NH2;

H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Pr)Eth(0)-NH2;

(N-Me)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Nle-NH2;

(N-Me)-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hse(Et)-NH2;

(N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-D-Ser(Me)-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-L-Ser(Et)-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-D-Leu-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Pgl-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(F)-L-Leu-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Pr)Phe(F)-L-Pgl(OH)-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-L-Met-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met(02)-NH2;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met-NH(Me);

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-NH(Me);

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Met-NH(Me);

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-NH(Et);

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met-NH(Et);

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Nle-NH(Me);

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Pgl-NH(Pr);

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Pr)Leu-NH(Me);

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(F)-L-Met-NH(Ip);

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-L-Met-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Met-CH20H;

H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Met-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Met-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-(N-Pr)Phe(F)-L-Met-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Bu)Met-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Gly-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-(N-Ip)Phe(F)-L-Met-CH2OH;

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H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Pr)Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Bu)Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Pr)Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Pr)Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Pr)Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-i-Bu)Phe(F)-L-Met(02)-CH20H; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Bu)Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-s-Bu)Phe(F)-D-Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Ala-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Abu-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Nva-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Val-CH2OH; H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Nle-CH2OH; H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Leu-CH2OH; H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Ile-CH2OH; H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Ahp-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Cp)Phe(F)-L-Nle-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Hse(Me)-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hle-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Hse(Me)-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(F)-L-Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Gly(Al)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Gly(Cp)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hil-CH2OH; H-L-Tyr-D-Met-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Cys(Me)-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Met(0)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Met-CH20H; H-L-Tyr-D-Cys(Me)(0)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Npg-CH20H; H-L-Tyr-D-Ser-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hse(Me)-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)-Phe(F)-L-Pgl-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Pgl(OH)-CH2OH; H-L-Tyr-D-Thr-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met-CH2OH; H-L-Tyr-D-Hse-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-CH2OH; (N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Cys(Me)-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Cys(Me)(0)-CH20H; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Cys(Et)(02)-CH20H; (N-Et)-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Nle-CH2OH; H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Hse(Me)-CH2OH; (N-Pr)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Cys(Et)(0)-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Pr)Met(0)-CH20H; H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Eth-CH2OH; H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Pr)Eth(02)-CH20H; (N-Me)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Nle-CH2OH; (N-Me)-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hse(Et)-CH2OH;

(N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-D-Ser(Me)-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-L-Ser(Et)-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-D-Leu-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Pgl-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(F)-L-Leu-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Pr)Phe(F)-L-Pgl(OH)-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-L-Met-CH2OH;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met(0)-CH20H;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met-CH2OMe;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-CH2OMe;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Met-CH2OMe;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-CH2OEt;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met-CH2OEt;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Nle-CH2OMe;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Pgl-CH2OPr;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Pr)Leu-CH2OMe;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(F)-L-Met-CH2OIp;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-L-Met-OMe;

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-OEt;

H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Met-OMe;

H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Met-OMe;

H-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-OPr; H-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met-OIp; H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Met-OMe; H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-(N-Pr)Phe(F)-L-Met-OEt; H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Bu)Met-OEt; H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Gly-OMe; H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-(N-Ip)Phe(F)-L-Met-OEt; H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Pr)Met-OPr; H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Bu)Met-OMe; H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Pr)Met-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Met-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Pr)Met-OEt; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Pr)Met(02)-0Ip; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-i-Bu)Phe(F)-L-Met-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Bu)Met-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-s-Bu)Phe(F)-D-Met-OEt; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Ala-OPr; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Abu-OIp; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Nva-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Val-OMe; H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Nle-OMe; H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Leu-OEt; H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Ile-OMe; H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Ahp-OEt; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Cp)Phe(F)-L-Nle-OPr; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Hse(Me)-OIp; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hle-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Hse(Me)-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(F)-L-Met-OEt; H-L-Tyr-D-Gly(Al)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-OEt; H-L-Tyr-D-Gly(Cp)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hil-OPr; H-L-Tyr-D-Met-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-OMe; H-L-Tyr-D-Cys(Me)-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Et)Met-OPr; H-L-Tyr-D-Met(0)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Met-0Ip; H-L-Tyr-D-Cys(Me)(0)-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Npg-0Me; H-L-Tyr-D-Ser-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hse(Me)-OEt; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)-Phe(F)-L-Pgl-OEt; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Pgl(OH)-OEt; H-L-Tyr-D-Thr-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met-OMe; H-L-Tyr-D-Hse-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Met-OMe; (N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Cys(Me)-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Cys(Me)(0)-0Me; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Me)Cys(Et)-OMe; (N-Et)-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Nle-OEt; H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Hse(Me)-OMe; (N-Pr)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Cys(Et)(0)-0Me; H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Pr)Met(0)-0Me; H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Eth-OEt; H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(F)-D-(N-Pr)Eth(0)-0Pr; (N-Me)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Et)Nle-OIp; (N-Me)-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe(F)-L-(N-Me)Hse(Et)-OIp; (N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-D-Ser(Me)OPr; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-L-Ser(Et)-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-D-Leu-OEt; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Pgl-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(F)-L-Leu-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Pr)Phe(F)-L-Pgl(OH)-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(F)-L-Met-OMe; H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(F)-L-Met(02)-0Me, etc. On prépare les composés de formule I par des procédés de routine pour la synthèse des peptides. Il est possible que, au cours de la synthèse de certains des composés de formule I, une racémisation partielle se produise. Cependant, le degré de la racémisation, dans le cas où elle se produit, n'est pas suffisant pour modifier de manière significative l'action analgésique des composés de formule I.

On peut synthétiser les composés de formule I soit par un procédé de synthèse de peptides en phase solide, soit par un procédé classique de synthèse en solution. Dans le procédé en phase solide, -

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on construit la chaîne du peptide morceau par morceau en utilisant un support de résine, typiquement une résine de benzhydrylamine ou une résine de polystyrène chlorométhylée. On coupe le produit de la résine à l'aide d'acide fluorhydrique à 0°C environ et on le purifie, généralement par voie chromatographique.

Quel que soit le procédé utilisé, la préparation des composés de formule I met enjeu le couplage d'aminoacides ou de fragments de peptide par réaction de la fonction carboxyle de l'un avec la fonction amine de l'autre pour former une liaison amide. Afin de réaliser ce couplage, il est souhaitable, premièrement, que toutes les fonctions réactives ne participant pas directement à la réaction soient inactivées à l'aide de groupements de blocage appropriés et, deuxièmement, que la fonction carboxyle qui doit être couplée soit activée de manière appropriée pour que le couplage puisse se faire. Tout cela implique une sélection soigneuse de la séquence réactionnelle et des conditions de réaction, ainsi que l'utilisation de groupements de blocage spécifiques pour que la synthèse du peptide voulu soit réalisée. On prépare chacun des aminoacides que l'on utilise pour produire les composés de formule I et qui comportent les groupements protecteurs et/ou les fonctions activantes choisis de manière particulière, par des techniques bien admises dans le domaine des peptides.

On utilise des combinaisons choisies de groupements de blocage à chaque stade de la synthèse totale des composés de formule I. On a constaté que ces combinaisons particulières opéraient de la manière la plus régulière. D'autres combinaisons agiraient dans la synthèse des composés de formule I, mais peut-être avec un moindre degré de succès. C'est ainsi, par exemple, que l'on peut employer de manières diverses les radicaux benzyloxycarbonyle, t-butyloxycarbonyle, t-amyloxycarbonyle, p-méthoxybenzyloxycarbonyle, adamantyloxy-carbonyle et isobornyloxycarbonyle comme groupements de blocage de la fonction amine dans la synthèse des composés de formule I. En outre, on utilise généralement le radical benzyle (Bzl) comme groupement protecteur du groupement hydroxyle pour le reste tyrosyle, même si l'on pouvait tout aussi bien employer d'autres radicaux, tels que les radicaux paranitrobenzile (PNB), paraméthoxybenzyle (PMB), etc.

Les groupements de blocage de la fonction carboxyle que l'on utilise pour préparer les composés de formule I peuvent être n'importe lequel des groupements types de formation d'ester, y compris, par exemple, les radicaux méthyle, éthyle, benzyle, paranitrobenzyle, paraméthoxybenzyle, 2,2,2-trichloréthyle, etc.

Le couplage de l'aminoacide ou du fragment de peptide à atome d'azote bloqué et convenablement protégé, à l'aide d'un aminoacide ou d'un fragment de peptide à fonction carboxyle bloqué et convenablement protégé pour la préparation des composés de formule I consiste à rendre active vis-à-vis de la réaction de couplage la fonction carboxyle libre de l'aminoacide ou du fragment de peptide. Cela peut se faire en utilisant n'importe laquelle de plusieurs techniques bien admises. L'une de ces techniques d'activation met enjeu la transformation de la fonction carboxyle en une fonction anhydride mixte. On active la fonction carboxyle libre en la faisant réagir avec un autre acide, typiquement un dérivé de l'acide carbonique, par exemple le chlorure de ce dernier. Des exemples de chlorures d'acides utilisés pour former des anhydrides mixtes sont le chloroformiate d'éthyle, le chloroformiate de phényle, le chloroformiate de sec.-butyle, le chloroformiate d'isobutyle, le chlorure de pivaloyle, etc. On utilise de préférence le chloroformiate d'isobutyle.

Un autre procédé d'activation de la fonction carboxyle afin de mettre en œuvre la réaction de couplage consiste à la transformer en son dérivé ester actif. De tels esters actifs comprennent, par exemple, un ester 2,4,5-trichlorophénylique, un ester pentachlorophénylique, un ester paranitrophénylique, etc. Un autre procédé de couplage que l'on peut utiliser est le procédé bien admis de couplage par un azide.

Le procédé de couplage préféré pour la préparation des composés de formule I implique l'utilisation de N,N'-dicyclohexylcarbodi-imide (DCC) pour activer la fonction carboxyle libre, ce qui permet au couplage de se faire. On met en œuvre cette technique d'activation et de couplage en utilisant une quantité équimolaire de DCC

par rapport à l'aminoacide ou au fragment de peptide, et on la met en œuvre en présence d'une quantité équimolaire de 1-hydroxy-benzotriazole (HBT). La présence de HBT supprime les réactions secondaires indésirables, y compris la possibilité de racémisation.

La coupure des groupements de blocage choisis est nécessaire à des stades particuliers de la séquence de synthèse utilisée pour la préparation des composés de formule I. Un chimiste moyennement qualifié dans le domaine de la synthèse des peptides peut facilement choisir parmi des groupements protecteurs représentatifs ceux qui sont compatibles, en ce sens qu'il est possible de réaliser une coupure sélective du produit permettant l'élimination d'un ou plusieurs mais pas de la totalité des groupements protecteurs présents sur l'aminoacide ou sur le fragment de peptide. Ces techniques sont bien admises dans le domaine des peptides. Une discussion plus approfondie des techniques qui sont disponibles pour la coupure sélective est fournie dans la littérature par Schröder et Liibke, «The Peptides», vol. I, Academic Press, New York (1965), et notamment dans le tableau des pages 72 à 75 de cette référence.

La coupure des groupements protecteurs de la fonction carboxyle peut se faire par saponification alcaline. On utilise généralement, pour désestérifier la fonction carboxyle protégée, des conditions alcalines relativement fortes, en utilisant typiquement un hydr-oxyde de métal alcalin, tel que la soude, la potasse, l'hydroxyde de lithium, etc. Les conditions de réaction dans lesquelles se fait la saponification sont bien admises dans ce domaine. Il est également possible d'éliminer un grand nombre des groupements de blocage de la fonction carboxyle par hydrogénolyse catalytique, y compris, par exemple, une hydrogénolyse en présence d'un catalyseur tel que le palladium sur charbon. En outre, dans les cas où le groupement de blocage de la fonction carboxyle est un radical paranitrobenzyle ou 2,2,2-trichloréthyle, on peut procéder au déblocage par réduction en présence de zinc et d'acide chlorhydrique.

On coupe un grand nombre des groupements de blocage de la fonction amine en traitant l'aminoacide ou le peptide protégé par un acide tel que l'acide formique, l'acide trifluoracétique (TFA), l'acide paratoluènesulfonique (TSA), l'acide benzènesulfonique (BSA), l'acide naphtalènesulfonique, etc., pour former le sel d'addition d'acide correspondant. On peut réaliser la coupure des autres groupements de blocage, par exemple du radical benzyloxycarbonyle, en traitant l'aminoacide ou le peptide bloqué par un mélange d'acide bromhydrique et d'acide acétique pour former le bromhydrate correspondant. Le procédé ou le réactif particulier utilisé dépendra des caractéristiques chimiques ou physiques des produits mis enjeu dans la réaction de déblocage spécifique. Le sel d'addition d'acide résultant peut être transformé en une forme plus acceptable du point de vue pharmaceutique, par traitement avec une résine d'échange d'ions appropriée, telle que DEAE Sephadex A25, Amberlyst A27, etc.

Le groupement protecteur du groupement hydroxyle peut rester sur le peptide tout au long de la séquence de sa préparation, n'étant éliminé que pendant l'opération de synthèse finale conjointement à la coupure du groupement de blocage de la fonction amine. Cependant, en fonction des conditions utilisées pour l'élimination du groupement de blocage de la fonction carboxyle, on peut l'éliminer plus tôt dans la séquence de préparation. Quand on coupe le groupement protecteur de la fonction carboxyle par saponification alcaline, le groupement protecteur de la fonction hydroxyle subsiste; cependant, quand on utilise l'hydrogénolyse catalytique pour éliminer le groupement protecteur de la fonction carboxyle, le groupement protecteur du groupement hydroxyle est lui aussi coupé. Ce dernier cas ne représente pas un problème sérieux, puisqu'il est possible de préparer les composés de formule I en présence d'un reste tyrosyle comportant un groupement hydroxyle libre, par exemple un reste tyrosyle.

Parmi les procédés classiques en solution, un procédé spécifique préféré de préparation des composés de formule I met enjeu le couplage d'un tripeptide à azote terminal, préparé séparément avec un dipeptide à carbone terminal, lui aussi préparé séparément, couplage

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35

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9

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suivi d'un déblocage approprié des fonctions bloquées éventuellement restantes. Le dipeptide à carbone terminal préparé séparément que l'on fait réagir avec le tripeptide à azote terminal peut avoir une structure telle qu'il contient la fonction amide, alcool, éther ou ester. Ou bien, il peut contenir un groupement qui représente un précur- 5 seur de la fonction à carbone terminal voulue. On peut décrire comme suit la séquence générale illustrant la préparation d'un pen-tapeptide de formule I. Dans cette séquence, la lettre Z représente la fonction à carbone terminal, qu'elle soit sous sa forme finale ou sous la forme d'un précurseur, le symbole AA représente un reste d'aminoacide et le nombre affecté au symbole AA représente la position de l'aminoacide dans la séquence du peptide final.

BOC-D-(AA)a-OH + H-G!y-09ZL

\

IBCF NMM -15°C /

BOC-D-C AA) z-G I y-OBz !

\

HCl/HOAc /

BOC-Phe(F)-OH + H-(AA)s-Z

DCC HBT

\ /

BOC—L—P h e(F) —( AA)s—Z

Cl Ha —D—(AA)a—GI y—OBz!

neutralisation

\

/

BOC—L—Tyr(OBz I )—OH + H-D-(AA)2-GIy-OBzI \

HCl/HOAc

/

\

IBCF

NMM

-15°C

/

BOC-L-Tyr(OBzI)-D-( AA)z-GIy-OBzI

Cl H2 -L—Phe(F)—(AA)s-Z

neutralisation

\

Ha

PD/C

BOC L T y r—D—( AA)2—GI y—OH

\

/

H-L-Phe(F)—(AA)s-Z

DCC

HBT

\

/

\

1) TFA

2) Chromatographie liquide en phase inversée sur Cl8-silice

3) Sephadex G—tôv /

AcOH • H-L-Ty r-D-( AA) a-G I y-L-Phe ( F) -( AA) s-Z

Le schéma ci-dessus ne représente qu'une séquence de préparation des composés de formule I. D'autres séquences sont possibles. Un autre procédé en solution que l'on peut utiliser met en jeu l'addition successive, par étapes, d'aminoacides simples pour la construc-

65 tion de la chaîne du peptide, en commençant par le fragment aminoacide à carbone terminal. On utilise des techniques de réaction telles que celles décrites ci-dessus dans cette séquence ainsi que dans toute autre séquence de préparation envisagée.

646 686

10

Dans certains des composés de formule I, un ou plusieurs des substituants Rls R3 et R5 sont, de manières diverses, des radicaux alkyle, allyle ou cyclopropylméthyle. Dans ces cas, on utilise dans la

H I

KH

séquence de préparation l'aminoacide substitué sur l'azote approprié. On peut préparer n'importe lequel des aminoacides monosubs-titués sur l'azote de la manière suivante, en utilisant comme produit de départ un aminoacide à azote protégé:

K

BOC-N—(AA)—C00H

l8-couronne-.6 /

X BOG-N -(AA)—COO K+

THF DMF

Xodure d'allyle, de cyclopro-pylmethyliou d'alkyle (Rai)

\ /

R

a

I

BOC—N—( AA)—COOH

Comme l'indique la séquence ci-dessus, on commence par traiter l'aminoacide par de l'hydrure de potassium en présence d'un éther-couronne approprié pour former le dianion. On traite ensuite cet intermédiaire par l'iodure d'allyle, de cyclopropylméthyle ou d'alkyle approprié, pour obtenir l'aminoacide substitué sur l'azote voulu.

Il sera évident pour un spécialiste dans le domaine de la synthèse des peptides que la racémisation sur l'atome de carbone peut se produire dans des conditions fortement alcalines telles que celles qui sont utilisées dans le procédé d'alkylation ci-dessus. Le degré de racémisation peut varier en fonction de l'aminoacide particulier qui entre enjeu. On peut réduire la racémisation au minimum en utilisant un excès d'agent d'alkylation et en faisant en sorte que la durée de la réaction soit aussi courte que possible. Néanmoins, même dans le cas où il se produit une racémisation excessive, on peut purifier le produit par recristallisation sous la forme du sel d'une amine asymétrique appropriée, par exemple sous la forme du sel de d(+)a-phényl-éthylamine.

On transforme la partie à carbone terminal des peptides de formule I en son dérivé amide primaire ou secondaire, ester, alcool ou éther. Dans les pentapeptides à fonction amide de formule I, la fonction amide ou bien n'est pas substituée ou bien est monosubsti-tuée sur l'azote. On réalise la transformation en dérivé amide en activant le groupement carboxyle de l'aminoacide à l'aide de N,N'-di-cyclohexylcarbodiimide (DCC) en présence de 1-hydroxybenzotri-azole (HBT) pour obtenir l'ester de HBT. Pour obtenir les pentapeptides de formule I, on fait ensuite réagir l'ester avec de l'ammoniac anhydre ou avec l'amine primaire appropriée, pour obtenir l'amide non substitué ou monosubstitué sur l'azote. Des aminés primaires appropriées pour la préparation des pentapeptides de formule I comprennent la méthylamine, l'éthylamine, la n-propylamine et l'isopropylamine.

On peut obtenir les esters à carbone terminal à partir des acides correspondants par des techniques bien admises dans ce domaine. On réalise la transformation en dérivé alcool primaire en préparant l'ester méthylique de l'aminoacide ou du peptide à carbone terminal. On réduit ensuite l'ester à l'aide de borohydrure de sodium et de chlorure de lithium pour obtenir le dérivé alcool primaire correspondant.

On peut préparer les éthers par l'un quelconque de divers procédés bien admis. L'un d'eux met en jeu le traitement de l'alcool correspondant dans un milieu de soude aqueuse, à l'aide d'un bromure d'alkyle dont le radical alkyle correspond à celui que l'on veut avoir dans l'éther à produire.

Les composés de formule I sont des agents pharmaceutiques intéressants. Ils font preuve d'une action analgésique et aussi d'une action neuroleptique. Ils sont particulièrement utiles pour calmer la douleur et améliorer les perturbations émotionnelles lorsqu'ils sont administrés par voie parentérale ou orale à des mammifères, y compris des humains.

20 On peut administrer les composés de formule I seuls ou en association avec des porteurs pharmaceutiquement acceptables dont la proportion sera déterminée par la solubilité et la nature chimique du composé, par la voie d'administration choisie, et par la pratique pharmaceutique normale.

25 Les compositions préférées sont celles qui conviennent à l'administration parentérale, c'est-à-dire intramusculaire, sous-cutanée ou intraveineuse. Ces compositions comprennent des solutions ou des suspensions injectables stériles, et des formules injectables stériles à dépôt ou à libération lente. Conviennent particulièrement bien les 30 solutions injectables stériles complétées par une solution saline isotonique ou dextrose isotonique. Les compositions injectables stériles peuvent être préparées et conservées telles quelles ou bien on peut les préparer juste avant de les utiliser en ajoutant un milieu stérile, de l'eau par exemple, à un poids connu d'ingrédients stériles enfermés 35 dans un véhicule, par exemple dans une fiole ou une ampoule, qui conservent la stérilité de l'ingrédient. Le poids connu d'ingrédients stériles peut également contenir une quantité suffisante de dextrose ou de chlorure de sodium stérile pour donner une solution ou une suspension isotonique après addition du milieu stérile. 40 Les compositions préférées sont celles qui conviennent à l'administration orale. On peut les préparer sous forme d'unités distinctes telles que capsules, comprimés, etc., contenant chacune une quantité prédéterminée du principe actif. En outre, on peut, par exemple, les préparer sous forme de poudre ou de granules, sous la forme d'une 45 solution ou d'une suspension dans un milieu aqueux ou non aqueux, ou bien sous la forme d'une émulsion.

On peut préparer les comprimés par compression, généralement avec un ou plusieurs ingrédients accessoires. On prépare les comprimés en comprimant le principe actif pour le mettre sous une forme 50 fluide, telle que poudre ou granule, et on le mélange généralement avec un ou plusieurs autres ingrédients, tels que liants, lubrifiants, diluants inertes, agents tensio-actifs, tampons, agents aromatisants, épaississants, conservateurs, agents dispersants, etc.

Le médecin déterminera la posologie particulière des composés 55 de formule I qui convient le mieux. La posologie choisie variera en fonction du mode d'administration, du composé particulier administré, du patient à traiter et du type de traitement. Mais, en général, la posologie sera comprise entre environ 10 |ig et 2 mg environ par kilogramme de poids corporel du patient, et de préférence entre 60 environ 100 et environ 500 (igpar kilogramme de poids corporel, lorsque le médicament sera administré par voie intramusculaire ou sous-cutanée et entre environ 1 et environ 200 |xg par kilogramme de poids corporel du patient, et de préférence entre environ 3 et environ 50 |ig par kilogramme de poids corporel, en cas d'administration in-65 traveineuse. En cas d'administration orale, la posologie sera généralement comprise entre environ 1 et environ 500 mg par kilogramme de poids corporel du patient, et de préférence entre environ 50 et environ 200 mg par kilogramme de poids corporel, et dans le meil

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leur des cas entre environ 50 et environ 100 mg par kilogramme de poids corporel.

Les exemples suivants sont fournis pour illustrer la préparation et l'activité des composés de formule I. Ils ne sont pas destinés à limiter le champ d'application de l'invention. Toutes les abréviations utilisées dans ces exemples ont été définies ci-dessus.

Exemple 1. Préparation de l'acétate de L-tyrosyl-D-alanylglycyl-L-p-fluorophénylalanyl-L- ( Na-méthyljmèthioninamide.

A. Sel d'acide trifluoracétique de L-tyrosyl-D-alanylglycyl-D,L-p-fluorophénylalanyl-L-(N"-méthyl)méthionylrésine de benzhydryl-amine.

On a synthétisé le peptide/résine par synthèse automatique en phase solide dans un appareil de synthèse de peptides Beckman 990, en utilisant 4 g de résine de benzhydrylamine (Beckman, 0,47 mmol d'azote par gramme). On a neutralisé la résine avec de la diisoprop-yléthylamine (DIEA) à 4% dans du chlorure de méthylène, puis on l'a laissée se combiner avec Boc-(N-Me)Met-OH et du DCC dans du chlorure de méthylène pour obtenir la résine substituée par Boc-(N-Me)-Met. On a incorporé successivement à cette combinaison peptide/résine les fragments Boc-D,L-(p,F)-Phe-OH, Boc-Gly-OH, Boc-D-Ala-OH et Boc-Tyr-OH par couplage initial selon le programme N° 1 ci-dessus, et recouplage ultérieur du même aminoacide selon le programme N° 2 ci-dessous. On a supprimé la protection de la combinaison Boc-pentapeptide/résine résultante, selon les étapes 1 à 8 du programme N° 1, pour obtenir 4,98 g du composé du titre. On a procédé au lavage selon les programmes Nos 1 et 2 avec 8 ml par gramme de résine.

Programme N° 1.

1. Laver trois fois avec CH2C12.

2. Traiter pendant 5 min avec un mélange 30:5:65 en volume de TFA : Et3SiH : CH2C12.

3. Traiter comme dans l'étape N° 2 pendant 30 min.

4. Laver deux fois avec CH2C12.

5. Laver avec un mélange 1:1 de méthanol et de CH2C12.

6. Laver deux fois avec du méthanol.

7. Laver avec un mélange 1:1 de méthanol et de CH2C12.

8. Laver deux fois avec du CH2C12.

9. Traiter quatre fois pendant 2 min chaque fois avec de la DIEA à 4% dans CH2C12.

10. Répéter les opérations 4 à 8.

11. Traiter avec 2,5 Eq du dérivé d'aminoacide dans CH2C12 et avec 1,25 Eq de DCC dans CH2C12 pendant 120 min.

12. Laver quatre fois avec CH2C12.

13. Répéter les opérations 5 à 7.

14. Laver trois fois avec CH2C12.

Programme N" 2.

1. Traiter quatre fois pendant 2 min chaque fois avec de la DIEA à 4% dans CH2C12.

2. Laver deux fois avec CH2C12.

3. Laver avec un mélange 1:1 de méthanol et de CH2C12.

4. Laver deux fois avec du méthanol.

5. Laver avec un mélange 1:1 de méthanol et de CH2C12.

6. Laver deux fois avec du CH2C12.

7. Laver trois fois avec un mélange 1:1 de DMF et de CH2C12.

8. Traiter par 2,5 Eq du dérivé d'aminoacide voulu dans un mélange 1:1 de DMF et de CH2C12, et par 1,25 Eq de DCC dans CH2C12 pendant 120 min.

9. Laver quatre fois avec un mélange de DMF et de CH2C12.

10. Répéter les opérations 4 à 6.

B. Fluorhydrate de L-tyrosyl-D-alanylglycyl-D,L-parafluorophényl-alanyl-L-(Na-mêthyl)mêthioninamide.

On a fait réagir la combinaison peptide/résine de la partie A avec de l'acide fluorhydrique anhydre liquide sous vide pendant 60 min à 0°C, en utilisant l'anisole comme nettoyeur. On a chassé sous vide les composants volatils du mélange réactionnel et on a trituré la combinaison peptide/résine avec de l'éther et on l'a filtrée pour éliminer l'acide fluorhydrique et l'anisole résiduels. On a extrait le peptide de la résine par trituration avec de l'acide acétique à 10%. On a lyophilisé l'extrait à l'acide acétique à 10% pour obtenir 745 mg du composé du titre à l'état brut.

C. Purification chromatographique pour obtenir le produit final.

On a fait subir au mélange brut de diastéréo-isomères de peptide une Chromatographie dans une colonne (5 x 72 cm) de gel de silice en phase inverse (C18) sous basse pression (4,9 à 5,6 kg/cm2 au manomètre) avec de l'acétonitrile à 26% dans de l'acétate d'ammonium 0,1N. Après avoir recueilli 2000 ml d'éluant, on a recueilli des fractions de 1,5 min, soit 17,0 ml chacune. On a rassemblé les fractions 36 à 65 et on les a lyophilisées pour obtenir le produit final, et on a rassemblé et lyophilisé les fractions 78 à 110 pour obtenir le composé D-p-fluorophénylalanylé correspondant. On a fait subir aux deux produits une Chromatographie séparée dans une colonne de Sephadex G-10 (2,5 x 100 cm) dans de l'acide acétique 0,2N, pour éliminer l'acétate d'ammonium. On a lyophilisé cette fraction pour obtenir les peptides sous forme de solides blancs amorphes.

1 ) Composé L-para-fluorophénylalanylé (253,8 mg) :

[a] g + 14,4 (c = 0,5, HCl IN).

[a]365 + 57,8 (c = 0,5, HCl IN).

Analyse pour C31H43FN608S (678,876):

Calculé: C 54,85 H 6,39 N 12,38 F 2,80%

Trouvé: C 55,05 H 6,17 N 12,62 F 3,07%

Analyse des aminoacides:

Gly

Ala

Tyr

NH3

Phe(F)

% Peptides

1)

0,99

1,00

0,98

1,03

97,1

2)

1,01

1,00

1,05

96,8

2) Composé D-p-fluorophénylalanylé (223,1 mg) : [a] g + 5,14 (c = 0,5, HCl).

Analyse pour C31H43FN608S (678,876):

Calculé: C 54,85 H 6,39 N 12,38 F 2,80% Trouvé: C 54,62 H 6,58 N 12,59 F 2,49%

Analyse des aminoacides:

Gly

Ala

Tyr nh3

Phe(F)

% Peptides

1)

1,00

1,01

0,99

1,04

95,2

2)

0,99

1,00

1,03

96,4

Exemple 2. Préparation de l'acétate de L-tyrosyl-D-alanylglycyl-L-p-fluorophénylalanyl-L-p-mëthoxyphénylglycinamide.

A. Boc-L-p-mëthoxyphénylglycinamide.

A 50 ml de tétrahydrofuranne (THF), on a ajouté 5,03 g (17,9 mmol) de Boc-p-méthoxyphénylglycine. On a refroidi ce mélange dans un bain de glace et d'acétone à — 9°C. Au mélange on a ensuite ajouté 1,99 ml (17,9 mmol) de N-méthylmorpholine et 2,34 ml (17,9 mmol) de chloroformiate d'isobutyle. On a agité le mélange pendant 2,5 min. On a fait barboter pendant 1 h de l'ammoniac dans le mélange réactionnel refroidi. On a ajouté au mélange 80 ml d'eau distillée, et on a extrait le mélange avec 80 ml d'acétate d'éthyle. On a ensuite lavé l'extrait à l'acétate d'éthyle successivement avec du bicarbonate de potassium IN, de l'acide chlorhydrique IN et de l'eau. On a séché l'extrait à l'acétate d'éthyle sur du sulfate de magnésium anhydre, on l'a filtré et on l'a concentré pour obtenir 4,77 g d'un solide blanc que l'on a recristallisé dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole pour obtenir 3,32 g de produit (49%).

B. Chlorhydrate de L-p-méthoxyphénylglycinamide.

A 32 g (12,0 mmol) du produit de la partie A dans 6,0 ml d'acide s

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acétique glacial on a ajouté 4,7 ml de triéthylsilane et 4,7 ml d'ani-sole. On a ensuite ajouté au mélange 47 ml (3 Eq) d'une solution d'acide chlorhydrique 0,77N et d'acide acétique. On a agité le mélange à la température ambiante pendant 35 min. On a ajouté 600 ml d'éther et on a trituré le précipité blanc résultant. On a filtré le mélange, et on a lavé le précipité recueilli avec de l'éther pour obtenir 2,53 g (66%) du composé du titre.

C. N"-terbutyloxycarbonyl-D,L,p-fluorophénylalanyl-L-p-méthoxy-phénylglycinamide.

A une suspension du composé de la partie B (0,65 g; 3 mmol) dans 8,0 ml de DMF froid (0°C) on a ajouté de la DIEA (0,52 ml; 3 mmol). On a ensuite ajouté au mélange une solution de Boc-D,L-(p-F)Phe-OH (0,85 g; 3 mmol) dans 8,0 ml de DMF, puis du HBT (0,81 g; 6 mmol) et une solution de DCC (0,62 g; 3 mmol) dans 4 ml de DMF. On a agité le mélange résultant sous un tube de séchage contenant du sulfate de calcium à 0°C pendant 1,5 h, puis à la température ambiante pendant 16 h. On a filtré le mélange pour éliminer la dicyclohexylurée (DCU), et on a concentré le filtrat sous vide pour obtenir un résidu jaune. On a partagé ce résidu entre 300 ml d'acétate d'éthyle et 200 ml d'eau, et on a séparé les couches. On a lavé la couche acétate d'éthyle avec trois fois 300 ml d'un tampon à pH 10, trois fois 300 ml d'acide chlorhydrique 0,1N et 300 ml d'eau. On a séché la couche acétate d'éthyle sur du sulfate de magnésium, on l'a filtrée, et on a chassé le solvant sous vide pour obtenir 1,44 g (100%) du composé du titre. La Chromatographie en couche mince (CCM) a révélé la présence de DCU dans cette substance.

D. D-L-p-fluorophénylalanyl-L-p-méthoxyphénylglycinamide.

A une solution du composé de la partie D dans 4 ml d'acide acétique on a ajouté 1,0 ml d'anisole, 1,0 ml de triéthylsilane et 10 ml d'acide chlorhydrique 1,54N dans de l'acide acétique. On a injecté la solution sous un tube de séchage contenant du sulfate de calcium, à la température ambiante pendant 30 min, puis on l'a diluée avec 600 ml d'éther. On a filtré le précipité résultant, on l'a lavé avec deux fois 25 ml d'éther et on l'a séché sous vide à 35° C pour obtenir 1,10 g (96%) du composé du titre. L'analyse CCM a révélé que ce composé était pur.

E. Trifluoracétate de L-tyrosyl-D-alanylglycyl-D,L-p-fluorophényl-alanyl-L-p-méthoxyphénylglycinamide.

A une suspension du produit de la partie D (1,10 g; 2,89 mmol) dans 9 ml de DMF froid (0°C) on a ajouté du sel de dicyclohexyl-amine de Boc-L-Tyr-D-Ala-Gly-OH (1,70 g; 2,88 mmol) en suspension dans 21 ml de DMF. Au mélange agité résultant on a ajouté du HBT (770 mg; 5,76 mmol) et une solution de DCC (594 mg; 2,88 mmol) dans 2,5 ml de DMF. On a agité le mélange résultant à 0°C pendant 1,25 h, puis à la température ambiante pendant 16 h. On a filtré le mélange pour éliminer la DCU, et on a concentré le filtrat sous vide pour obtenir un résidu jaune. A ce résidu on a ajouté 6,0 ml d'anisole, 6,0 ml de triéthylsilane et 60 ml d'acide tri-fluoracétique. On a agité la solution résultante sous un tube desséchant contenant du sulfate de calcium, à la température ambiante pendant 0,5 h, après quoi on a concentré le mélange réactionnel sous vide pour obtenir une huile jaune. On a ajouté 1,5 1 d'éther à cette huile jaune, et on a recueilli le précipité résultant par filtration et on l'a séché sous vide pour obtenir 2,01 g (93%) du composé du titre à l'état brut.

F. Purification chromatographique pour obtenir le produit final.

On a traité le produit de la partie E de la manière décrite dans la partie C de l'exemple 1 pour séparer les deux diastéréo-isomères et obtenir 763 mg du titre du composé du titre.

[a]g + 67,06° (c = 0,375; 75% HCl IN: 25% DMF).

[a]"s + 263,88° (c = 0,375; 75% HCl IN: 25% DMF).

Analyse pour C34H4.iFN609 (696,738):

Calculé: C 58,61 H 5,93 N 12,06 F 2,73%

Trouvé: C 58,90 H 6,03 N 12,34 F 2,53%

Analyse des aminoacides:

Gly Ala Tyr Pgl(MeO) Phe(F) NH3 % Peptides

1.00 1,00 0,99 1,04 0,89 0,99 90

Exemple 3. Préparation de l'acétate de L-tyrosyl-D-alanylglycyl-L-p-fluorophénylalànyl-L-phénylglycinamide et de l'acétate de L-tyrosyl-D-alanylglycyl-L-p-fiuorophénylalanyl-D-phénylglycinamide.

On a préparé ces deux produits conformément au mode opératoire de l'exemple 2, et ils présentaient les caractéristiques suivantes:

1 ) Composé L-phénylglycinamide (1,043 g) :

[a]o + 90,72° (c = 0,5, HCl IN).

[<x]!s + 333,33° (c = 0,5, HCl IN).

Analyse pour C33H39FN6Os (666,712):

Calculé: C 59,45 H 5,90 N 12,61 F 2,85%

Trouvé: C 59,25 H 6,09 N 12,43 F 3,08%

Analyse des aminoacides:

Gly Ala Tyr Pgl Phe(F) NH3 % Peptides

1.01 1,00 1,00 0,99 0,98 1,01 90

2) Composé D-phénylglycinamide (626 mg) :

[a]" + 17,50° (c = 0,5, HCl IN).

[a]3« + 79,76 (c = 0,5, HCl IN).

Analyse pour C33H39FN608 (666,712):

Calculé: C 59,45 H 5,90 N 12,61 F 2,85%

Trouvé: C 59,46 H 5,88 N 12,35 F 2,68%

Analyse des aminoacides:

Gly Ala Tyr Pgl Phe(F) NH3 % Peptides 0,99 1,00 0,96 1,02 1,00 1,05 88

Exemple 4. Préparation de l'acétate de L-tyrosyl-D-thréonylglycyl-L-p-fiuorophénylalanyl-L- (Na-méthyl) méthioninamide.

On a préparé ce produit conformément au mode opératoire de l'exemple 1 pour obtenir 216 mg d'un produit qui présentait les caractéristiques suivantes :

[<x]d + 14,99° (c = 0,5, HCl IN).

[a]|l5 + 51,88° (c = 0,5, HCl IN).

Analyse pour C32H4.5FN(i09S (708,813):

Calculé: C 54,23 H 6,40 N 11,86 F 2,86%

Trouvé: C 54,47 H 6,28 N 11,91 F 2,51%

Analyse des aminoacides:

Thr Gly Tyr Phe(F) NH3 % Peptides 0,98 1,00 1,03 0,96 1,27 86

L'action analgésique des composés de formule I est démontrée par le test de la plaque chaude sur les souris. Dans ce test, on place une souris à l'intérieur d'un cylindre vertical en résine acrylique comprenant, comme fond, une surface de plaque chaude que l'on maintient à 52° C. On donne à la souris, par voie orale ou par injection sous-cutanée, une quantité prédéterminée du composé d'essai dissous ou en suspension dans un porteur approprié et, 15 min après l'administration du composé d'essai, on place la souris sur la surface de la plaque chaude. On mesure en secondes le temps de latence qui s'écoule avant que la souris saute de la surface de la plaque chaude. Un agent qui fait preuve d'action analgésique provoque une augmentation de ce temps de latence par rapport à celui que l'on mesure avec des souris témoins ne recevant que le porteur. Cela doit se produire pour une dose qui ne provoque ni défaut de coordination ni invalidation motrice. Le tableau 1 donne les résultats de DES0 obtenus dans ce test.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

13

646 686

Tableau 1 :

Action analgésique, test de la plaque chaude

Composé

DES0 (mg/kg) voie sous-cutanée

Exemple 1

0,023

Exemple 2

1,04

Exemple 3

L-Pgl

0,063

D-Pgl

0,103

Exemple 4

0,088

Un autre test utilisé pour évaluer l'action analgésique des composés de formule I est le test de contorsions sur les souris. On utilise dans ce test des souris mâles albinos de souche normale Cox, pesant 20 à 22 g, et que l'on fait jeûner pendant une nuit. Les contorsions, qui se caractérisent par une contraction de la musculature abdominale, une extension des pattes de derrière et une rotation du tronc, sont induites par l'administration intrapéritonéale de 55 mg par kilogramme d'acide acétique (0,55%). Chaque groupe de traitement se compose de cinq souris. On détermine le nombre total de contorsions pour ce groupe de traitement au cours d'une période d'observation de 10 min commençant 5 min après l'administration de l'acide acétique. Les groupes témoins ont un total de 200 à 350 con-5 torsions par période d'observation. On administre les composés d'essai à une dose de 100 mg/kg par la voie orale, 30,90 et 180 min avant l'administration intrapéritonéale de l'acide acétique, et par la voie sous-cutanée 30 min avant cette administration. Le tableau 2 donne les résultats de DE50 obtenus dans ce test.

Tableau 2:

Action analgésique, test de contorsions sur les souris

Composé

DE50 (mg/kg) voie sous-cutanée

DES0 (mg/kg) voie orale

Exemple 2 Exemple 3 D-Pgl5 L-Pgl5

3,7 0,25

0,53

73

(230 à 15 min)

20

r

Claims

646 686

2

REVENDICATIONS

1. Composé de formule générale: (L) (D)

(L)

0 R 0 R , a

0 0

R il II II I" Il

N—CK—C-NH-CH-C-MH-CH -C-t-l-CH-C-N-CH-Z K I I 2 I I

CH^

A

Il î \/*

R

CH

/\ îi !

R
10. L-tyrosyl-D-alanylglycyl-L-p-fluorophénylalanyl-L-p-méth-oxyphénylglycinamide, ainsi que ses sels d'addition d'acides non toxiques et pharmaceutiquement acceptables, selon la revendication 1.

5 11. L-tyroxyl-D-alanylglycyl-L-p-fluorophénylalanyl-L-phényl-glycinamide, ainsi que ses sels d'addition d'acides pharmaceutiquement acceptables, selon la revendication 1.

(I) 12. L-tyrosyl-D-thréonylglycyl-L-p-fluorophénylalanyl-L-(Na-

méthyl)méthioninamide, ainsi que ses sels d'addition d'acides phar-îo maceutiquement acceptables, selon la revendication 1.
13. L-tyrosyl-D-alanylglycyl-L-p-fluorophénylalanyl-L-(Na-méthylalaninamide, ainsi que ses sels d'addition d'acides pharmaceutiquement acceptables, selon la revendication 1.
14. Procédé de préparation d'un composé de formule générale:

15 (L) (D) (L)

OH F

ainsi que ses sels d'addition d'acides non toxiques et pharmaceutiquement acceptables, formule dans laquelle L et D définissent l'asy- 20 métrie;

Ri est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle primaire en

C1-C3 ;

R2 est un radical alkyle primaire ou secondaire en CrC4, un radical allyle, cyclopropylméthyle, hydroxyalkyle en Cx-C2, ou 25 —(CH2)m—U—CH3 dans lequel U est —S— ou ^S—O et m est égal à 1 ou 2;

R3 est un atome d'hydrogène, ou un radical alkyle primaire ou secondaire en Q-Q, ou un radical cyclopropylméthyle ou allyle;

R4 est un atome d'hydrogène; un radical alkyle primaire ou secondaire en Q-C5; un groupement de formule (CH2)n—X—(CH2)p—CH3 dans lequel X est -O-, -S-,

^S-Oou^S^ ,

n est égal à 1 ou 2, et p est égal à 0 ou 1 ; phényle ou phényle mono-substitué dont le substituant est un atome d'halogène, un groupement hydroxy ou nitro, ou un radical alcoxy en Q-C3, alkyle en Q C3 ou trifluorométhyle;

R5 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle primaire en CrCt, et

Zest — CH2ORe,

O O

/

—C—NHR6 ou — C—OR7 où R6 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en Cj-C3 et R7 est un radical alkyle en C]-C3;

avec cette réserve que, lorsque l'un de R3 et Rs est autre que l'hydrogène, l'autre est l'hydrogène.
2. Composé selon la revendication 1, dans lequel Rj est un atome d'hydrogène.
3. Composé selon la revendication 1, dans lequel R2 est un radical alkyle primaire ou secondaire en Q-C^..
4. Composé selon la revendication 1, dans lequel R2 est un radical hydroxyalkyle en Q-Q..
5. Composé selon la revendication 1, dans lequel R4 est un radical méthylthioéthyle.
6. Composé selon la revendication 1, dans lequel Rs est un radical méthyle.
7. Composé selon la revendication 1, dans lequel Z est

O

II

— CNHR6 et Re est comme défini dans la revendication 1.
8. Composé selon la revendication 1, dans lequel la chiralité du reste d'aminoacide en position 5 est la chiralité L.
9. L-tyrosyl-D-alanylglycyl-L-p-fluorophényIalanyl-L-(Na-méth-yl)méthioninamide, ainsi que ses sels d'addition d'acides non toxiques et pharmaceutiquement acceptables, selon la revendication 1.

\

0 II

O II

O R II I3

0 R=

II I5

>1—CH-C-NH-CH-C-NH—CH -C-N-CH-C-N-CH-H I * 2

(I)

1 CH R 2 2

CH I 2

/\ fi t

/\ r, t

Il I \/'

Il l \/'

I

OH

I

F

30 ainsi que ses sels d'addition d'acides non toxiques et pharmaceutiquement acceptables, formule dans laquelle L et D définissent l'asymétrie;

Rj est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle primaire en CVC3;

3Î R2 est un radical alkyle primaire ou secondaire en Ci-C^, un radical allyle, cyclopropylméthyle ou hydroxyalkyle en Q-C^ ou un groupement de formule — (CH2)m—U—CH3 dans laquelle U est —S—ou S—O et m est égal à 1 ou 2;

R3 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle primaire ou se-40 condaire en Ci-C4, ou un radical cyclopropylméthyle ou allyle;

R4 est un atome d'hydrogène; un radical alkyle primaire ou secondaire en Q-C5 ; un groupement de formule —(CH2)n—X—(CH2)p—CH3 dans laquelle X est -O-, -S-,

.O

45

\

S—O ou

/ \

O

n est égal à 1 ou 2, et p est égal à 0 ou 1 ; phényle; ou phényle mono-- substitué dont le substituant est un atome d'halogène, un groupe-50 ment hydroxy ou nitro, ou un radical alcoxy en Cj-C3, alkyle en Cx-C3 ou trifluorométhyle;

Rs est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle primaire en Cj-C4, et

Z est un groupement de formule — CH2OR6,

55 O O

II II

—C—NHRe ou — C — OR7, où R6 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en C1-C3 et R7 est un radical alkyle en Cj-C3 ;

avec cette réserve que, lorsque l'un de R3 et Rs est autre que l'hy-60 drogène, l'autre est l'hydrogène,

caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir avec un agent de déblocage approprié un composé de formule:

(Formule en tête de la colonne suivante)

65 dans laquelle R3, R4 et R5 ont les mêmes définitions que ci-dessus, R8 est un atome d'hydrogène, un radical alkyle primaire en CrC3 ou un groupement de blocage de la fonction amine; R9 est R2 tel qu'il est défini ci-dessus ou bien est un groupement hydroxyalkyle en

3

646 686

Rs'

(II)

^-CH j-NH-CH-l-NH-CHs-S-l-CH-J-l-CH-Z ' CHa Rs CHa K4

A A

Y Y

ORio F

Cj ou C2 à groupement hydroxy protégé; R10 est un atome d'hydrogène ou un groupement protecteur du groupement hydroxy; Z' est Z tel qu'il est défini ci-dessus ou bien est un précurseur de Z, y compris un support de résine, avec cette réserve qu'au moins un des substituants Rs, R,, Ri,, ou Z' est un fragment bloqué.
15. Procédé selon la revendication 14, dans lequel l'agent de déblocage est l'acide trifluoracétique.
16. Procédé selon la revendication 14, dans lequel Z' est un support de résine et l'agent de déblocage est l'acide fiuorhydrique à 0°C environ.
17. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend un excipient et, à titre de principe actif, un composé de formule I telle qu'elle est définie dans la revendication 1.

25