CH633110A5 - Method and device for determining the sensitivity of bacteria and yeasts to antibiotic products - Google Patents

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CH633110A5
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inhibition
radiation
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discs
zone
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CH635779A
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French (fr)
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Yves Achille Chabbert
Lionel Drugeault
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Pasteur Institut
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    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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    • C12Q1/02Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/18Testing for antimicrobial activity of a material

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Description

La présente invention est relative à un procédé et à un dispositif pour déterminer la sensibilité de bactéries et levures aux produits antibiotiques. The present invention relates to a method and a device for determining the sensitivity of bacteria and yeasts to antibiotic products.

Il est connu depuis longtemps de déterminer la sensibilité de bactéries ou levures aux antibiotiques par la technique de la culture sur gélose en boîte de Pétri. Dans cette technique, on dépose un disque d'antibiotique contenant une quantité dosée de l'antibiotique à étudier sur une couche de gélose ensemencée au préalable avec la bactérie ou levure. L'antibiotique diffuse dans la gélose, où se crée un gradient de concentration, et, après un séjour dans des conditions appropriées, le disque d'antibiotique est entouré d'une zone d'inhibition circulaire d'autant plus large que la bactérie ou levure est plus sensible à l'antibiotique considéré. Dans cette zone, la gélose paraît intacte, alors qu'en dehors ses propriétés optiques sont altérées et elle a un aspect dépoli. Il est connu de mesurer le diamètre de la zone d'inhibition avec des moyens de mesure très simples gradués en millimètres, éventuellement à l'aide d'un agrandisseur de profil. It has long been known to determine the sensitivity of bacteria or yeasts to antibiotics by the culture technique on agar in petri dishes. In this technique, an antibiotic disc containing a dosed quantity of the antibiotic to be studied is deposited on an agar layer seeded beforehand with the bacteria or yeast. The antibiotic diffuses into the agar, where a concentration gradient is created, and, after a stay under appropriate conditions, the antibiotic disc is surrounded by a circular inhibition zone that is wider as the bacteria or yeast is more sensitive to the antibiotic under consideration. In this area, the agar appears intact, while outside its optical properties are altered and it has a frosted appearance. It is known to measure the diameter of the inhibition zone with very simple measuring means graduated in millimeters, possibly using a profile enlarger.

Cette méthode, toutefois, est manuelle et demande du temps. This method, however, is manual and takes time.

Il est apparu des méthodes automatiques de détermination de sensibilité des bactéries et levures aux antibiotiques, mais ces méthodes utilisent d'autres techniques, à savoir des techniques où on opère en milieu liquide et on mesure la transmission de la lumière à travers des éprouvettes dans lesquelles on a introduit, outre les bactéries ou levures, une solution de l'antibiotique. Pour obtenir l'équivalent d'un gradient de concentration, il faut une série d'éprou-vettes contenant des concentrations différentes de l'antibiotique. Ces méthodes sont donc coûteuses. Automatic methods for determining the sensitivity of bacteria and yeasts to antibiotics have appeared, but these methods use other techniques, namely techniques where one operates in a liquid medium and one measures the transmission of light through test tubes in which in addition to bacteria or yeasts, a solution of the antibiotic was introduced. To obtain the equivalent of a concentration gradient, a series of test tubes containing different concentrations of the antibiotic is required. These methods are therefore expensive.

Le but de la présente invention est de fournir un procédé et un dispositif automatique qui permettent d'obtenir très rapidement, et à des frais réduits, une indication chiffrée de la sensibilité. The object of the present invention is to provide an automatic method and device which make it possible to obtain very quickly, and at reduced cost, a quantified indication of the sensitivity.

Le procédé selon l'invention pour déterminer la sensibilité des bactéries et levures à des produits antibiotiques est défini par la revendication 1. The method according to the invention for determining the sensitivity of bacteria and yeasts to antibiotic products is defined by claim 1.

L'appareil n'a toute son efficacité que si les disques d'antibiotique, ou autres moyens qui fixent le centre du cercle d'inhibition, sont mis en place par un appareil automatique qui détermine avec précision leur position, car alors le défilement peut aisément être fait de manière automatique. Par exemple, il existe des appareils simples qui assurent la mise en place de 16 disques d'antibiotique sur une boîte de Pétri carrée, selon un réseau à maille carrée. Dans ce cas, on fera avantageusement défiler la boîte dans la direction d'une diagonale du carré, devant une série de 7 capteurs, avec sources associées. Le fait d'adopter un défilement en diagonale assure une meilleure détermination de la valeur du rayonnement reçu en dehors des zones d'inhibition (niveau de référence). The device is only fully effective if the antibiotic discs, or other means which fix the center of the inhibition circle, are put in place by an automatic device which precisely determines their position, because then the scrolling can easily be done automatically. For example, there are simple devices that ensure the placement of 16 antibiotic discs on a square Petri dish, according to a square mesh network. In this case, we will advantageously scroll the box in the direction of a diagonal of the square, in front of a series of 7 sensors, with associated sources. Adopting a diagonal scroll ensures better determination of the value of the radiation received outside the inhibition zones (reference level).

Suivant une modalité intéressante, pour obtenir une détermination encore plus sûre de cette valeur, on laisse un blanc, ou témoin, c'est-à-dire qu'on ne met aucun antibiotique à l'un des emplacements du réseau. According to an interesting modality, to obtain an even more reliable determination of this value, a blank space is left, or control, that is to say that no antibiotic is put at one of the locations of the network.

Il existe également des appareils automatiques, par exemple celui décrit dans le brevet FR N° 2027365, dans lesquels une zone d'inhibition est analysée au moyen d'une rangée de plusieurs détecteurs photoconducteurs, en déplaçant la boîte de Pétri à vitesse constante dans une direction perpendiculaire à l'axe de la rangée de détecteurs. Les dimensions d'une zone d'inhibition sont déterminées avec ce type d'appareil en mesurant électriquement le temps pendant lequel l'un au moins des détecteurs est en fonctionnement sous l'effet de la lumière traversant la zone d'inhibition. Dans ce cas, on voit que le diamètre de la zone est mesuré en fonction de la vitesse de déplacement de la boîte, vitesse supposée constante. Cette méthode de mesure consiste également à considérer que la zone d'inhibition, transparente par rapport aux zones adjacentes, c'est-à-dire le disque d'antibiotique et la zone de croissance de bactéries correspondants, est parfaitement délimitée entre ces zones. There are also automatic devices, for example that described in patent FR No. 2027365, in which an inhibition zone is analyzed by means of a row of several photoconductive detectors, by moving the Petri dish at constant speed in a direction perpendicular to the axis of the row of detectors. The dimensions of an inhibition zone are determined with this type of device by electrically measuring the time during which at least one of the detectors is in operation under the effect of light passing through the inhibition zone. In this case, we see that the diameter of the zone is measured as a function of the speed of movement of the box, speed assumed to be constant. This measurement method also consists in considering that the inhibition zone, transparent with respect to the adjacent zones, that is to say the antibiotic disc and the zone of growth of corresponding bacteria, is perfectly delimited between these zones.

En fait, le disque d'antibiotique, la zone d'inhibition et la zone de croissance peuvent présenter des irrégularités locales entraînant des variations d'absorption de lumière et donc des erreurs souvent non négligeables dans les mesures effectuées avec des appareils de ce type. In fact, the antibiotic disc, the inhibition zone and the growth zone may exhibit local irregularities causing variations in light absorption and therefore often significant errors in the measurements carried out with devices of this type.

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En outre, des défauts de mécanique peuvent provoquer des variations de la vitesse de déplacement de la boîte examinée dont il n'est pas tenu compte dans les mesures effectuées, puisque la vitesse de déplacement est supposée constante. In addition, mechanical defects can cause variations in the speed of movement of the box examined, which is not taken into account in the measurements made, since the speed of movement is assumed to be constant.

Un objet de la présente invention est un procédé et un dispositif pour mesurer automatiquement le diamètre d'une zone d'inhibition à l'aide de moyens de détection directe de la zone d'inhibition et du disque d'antibiotique correspondant. An object of the present invention is a method and a device for automatically measuring the diameter of an inhibition zone using means for direct detection of the inhibition zone and of the corresponding antibiotic disc.

Dans le but de détecter un disque d'antibiotique et la zone d'inhibition qui l'entoure, il a été constaté que les meilleurs résultats étaient obtenus en utilisant un type de capteur sensible non pas à la lumière visible, mais à un rayonnement infrarouge dans une gamme de 950 nm. In order to detect an antibiotic disc and the zone of inhibition which surrounds it, it has been found that the best results are obtained by using a type of sensor sensitive not to visible light, but to infrared radiation. in a range of 950 nm.

On peut pour cela utiliser : We can for this use:

— un organe de lecture qui comporte un émetteur de rayons infrarouges à la longueur d'onde 950 nm, un capteur sensible à la même longueur d'onde, une mécanique pour déplacer linéairement les boîtes de Pétri entre capteur et émetteur avec un moteur pas à pas couplé avec l'électronique, et des moyens de commande, - a reading device which includes an emitter of infrared rays at the wavelength 950 nm, a sensor sensitive to the same wavelength, a mechanism for linearly moving the Petri dishes between sensor and emitter with a stepper motor not coupled with electronics, and control means,

— des moyens de fixation du niveau de référence soit à l'avance, soit à partir de mesures faites sur la boîte de Pétri elle-même, en particulier au voisinage de l'emplacement d'un disque manquant, - means for fixing the reference level either in advance or from measurements made on the Petri dish itself, in particular in the vicinity of the location of a missing disc,

— un microprocesseur qui commande le moteur pas à pas, séquence les mesures transmises par le capteur, fait les calculs statistiques à partir de ces mesures et imprime les résultats sous la forme d'un tableau donnant les valeurs de diamètres et/ou des indications simplifiées telles que: sensible - résistant - intermédiaire. - a microprocessor which controls the stepping motor, sequences the measurements transmitted by the sensor, makes the statistical calculations from these measurements and prints the results in the form of a table giving the values of diameters and / or simplified indications such as: sensitive - resistant - intermediate.

Les calculs statistiques effectués par le microprocesseur comprennent en particulier la détermination de la valeur du niveau de référence et de son écart type et les mêmes déterminations à l'intérieur des zones d'inhibition. The statistical calculations carried out by the microprocessor include in particular the determination of the value of the reference level and its standard deviation and the same determinations within the zones of inhibition.

Il est aisé ensuite d'en tirer des valeurs de diamètre soit en chiffres, soit de façon simplifiée comme indiqué ci-dessus. It is then easy to derive values for the diameter thereof either in figures or in a simplified manner as indicated above.

Un autre objet de l'invention est un procédé et un dispositif comportant des moyens pour mesurer le diamètre d'une zone d'inhibition avec précision, en tenant compte des défauts d'appareils et des irrégularités de zones. Another object of the invention is a method and a device comprising means for measuring the diameter of an inhibition zone with precision, taking account of device faults and zone irregularities.

Un autre objet de l'invention est un dispositif comportant des moyens de mesure automatique permettant une analyse rapide et à frais réduits d'une série de boîtes de Pétri. Another object of the invention is a device comprising automatic measurement means allowing rapid analysis and at reduced cost of a series of Petri dishes.

Un dispositif pour déterminer la sensibilité de bactéries et levures à des produits antibiotiques selon le procédé de l'invention est défini par la revendication 7. A device for determining the sensitivity of bacteria and yeasts to antibiotic products according to the method of the invention is defined by claim 7.

Les caractéristiques et avantages de la présente invention ressorti-ront de la description suivante, donnée à titre d'exemple non limitatif, en référence aux dessins annexés dans lesquels: The characteristics and advantages of the present invention will emerge from the following description, given by way of nonlimiting example, with reference to the appended drawings in which:

la fig. 1 est un schéma de principe d'un dispositif selon la présente invention, fig. 1 is a block diagram of a device according to the present invention,

la fig. 2 est un diagramme de variation de l'absorption de la lumière sur les différentes zones d'une rangée de disques, et la fig. 3 est le schéma d'un exemple de réalisation d'un dispositif selon l'invention. fig. 2 is a diagram of variation of the absorption of light on the different zones of a row of discs, and FIG. 3 is the diagram of an exemplary embodiment of a device according to the invention.

Un dispositif selon l'invention comprend, à la fig. 1, un organe de lecture 1 comportant un émetteur de rayons infrarouges de longueur d'onde 950 nm, un capteur 2 sensible aux rayons émis, une mécanique (non représentée) pour déplacer linéairement chaque boîte de Pétri à analyser, telle que la boîte 3 de la fig. 1, entre l'émetteur et le capteur 2, à l'aide d'un moteur 4 pas à pas couplé à des moyens de commande classiques reliés à un microprocesseur 5. Le microprocesseur 5 est relié, d'autre part, au capteur 2 pour enregistrer séquentiellement les mesures transmises par le capteur et pour calculer les valeurs de diamètre des différentes zones d'inhibition analysées. Une imprimante 6 permet d'imprimer les résultats, sur des tickets par exemple. A device according to the invention comprises, in FIG. 1, a reading member 1 comprising an emitter of infrared rays of wavelength 950 nm, a sensor 2 sensitive to the emitted rays, a mechanism (not shown) for linearly moving each Petri dish to be analyzed, such as dish 3 of fig. 1, between the transmitter and the sensor 2, using a stepper motor 4 coupled to conventional control means connected to a microprocessor 5. The microprocessor 5 is connected, on the other hand, to the sensor 2 to sequentially record the measurements transmitted by the sensor and to calculate the diameter values of the different inhibition zones analyzed. A printer 6 makes it possible to print the results, on tickets for example.

Le diagramme de variation de l'absorption de la lumière émise par un émetteur, tel que l'émetteur de la fig. 1, le long d'une rangée de disques est représenté sur la fig. 2. Il est clair que ce diagramme représente les variations théoriques d'absorption de la lumière et qu'il ne tient donc pas compte des irrégularités possibles des zones considérées, mais il permet de mieux comprendre la conception et le fonctionnement du dispositif de la fig. 3. Si on prend comme origine un bord de la boîte, les références Di indiquent les abscisses des bords des disques de la rangée et les références Ci représentent les abscisses des points de transition entre les zones de croissance et les zones d'inhibition. Les disques sont les zones de plus grande absorption de la lumière et les zones d'inhibition sont les zones de plus faible absorption de la lumière, tandis que les zones de croissance sont les zones d'absorption intermédiaire. Dans le cas de la fig. 2, les quatre disques de la rangée considérée ont respectivement des diamètres égaux à: The diagram of variation of the absorption of the light emitted by an emitter, such as the emitter of fig. 1, along a row of discs is shown in FIG. 2. It is clear that this diagram represents the theoretical variations in light absorption and that it therefore does not take account of the possible irregularities of the zones considered, but it allows a better understanding of the design and the operation of the device of FIG. . 3. If we take as an origin an edge of the box, the references Di indicate the abscissa of the edges of the disks of the row and the references Ci represent the abscissa of the transition points between the growth zones and the inhibition zones. The discs are the areas of greatest light absorption and the areas of inhibition are the areas of lowest light absorption, while the growth areas are the areas of intermediate absorption. In the case of fig. 2, the four disks of the row considered respectively have diameters equal to:

D2 - Dl, D4 - D3, D6 - D5, D8 - D7, D2 - Dl, D4 - D3, D6 - D5, D8 - D7,

et les zones d'inhibition correspondantes ont des diamètres respectivement égaux à: and the corresponding inhibition zones have diameters respectively equal to:

C2 - Cl, C4 - C3, C6 - C5, C8 - C7. C2 - Cl, C4 - C3, C6 - C5, C8 - C7.

Les valeurs des diamètres d'un disque et de la zone d'inhibition correspondante permettent de délimiter cette zone. The values of the diameters of a disc and the corresponding inhibition zone make it possible to delimit this zone.

Comme on l'a prévu, bien que théoriquement les points d'abscisses Di et Ci aient des positions parfaitement définies, celles-ci sont en fait souvent sujettes à des dispersions importantes (de l'ordre de 2 mm) dues à des jeux mécaniques pendant le déplacement d'une boîte, ainsi qu'à des variabilités d'état de surface de la gélose. As expected, although theoretically the abscissa points Di and Ci have perfectly defined positions, these are in fact often subject to significant dispersions (of the order of 2 mm) due to mechanical play during the movement of a box, as well as variability in the surface texture of the agar.

Pour tenir compte de ces causes d'erreur, le procédé et un dispositif selon l'invention mettent en œuvre des moyens pour capter la lumière transmise en des points très rapprochés le long d'une rangée de disques. Par exemple, si la boîte de Pétri a une longueur de 120 mm, on choisit, dans un mode préféré de réalisation de l'invention, un pas d'avancement de la boîte égal à 0,2 mm. Une rangée de disques comporte ainsi 600 points de mesure et une boîte de 4 rangées de disques comporte 2400 points de mesure. To take these causes of error into account, the method and a device according to the invention employ means for capturing the light transmitted at very close points along a row of discs. For example, if the Petri dish has a length of 120 mm, in a preferred embodiment of the invention, a step of advancement of the dish equal to 0.2 mm is chosen. A row of discs thus has 600 measurement points and a box of 4 rows of discs has 2400 measurement points.

Un dispositif selon l'invention, tel que le dispositif de la fig. 3, permet de détecter un ensemble de valeurs d'absorption ou d'intensité de lumière transmise en un point (inversement proportionnelle) au lieu de détecter une valeur supposée constante d'un bout à l'autre d'une zone, comme c'est le cas dans des appareils de l'art antérieur. La valeur théorique constante est donnée par une valeur moyenne calculée à partir de valeurs mesurées en un ensemble de points successifs par le dispositif de la fig. 3. A device according to the invention, such as the device of FIG. 3, makes it possible to detect a set of absorption or intensity values of light transmitted at a point (inversely proportional) instead of detecting a value assumed to be constant from one end to the other of an area, such as c ' is the case in devices of the prior art. The constant theoretical value is given by an average value calculated from values measured at a set of successive points by the device of FIG. 3.

Le procédé selon l'invention consiste aussi à tenir compte des variabilités de l'état de surface des zones en déterminant un coefficient de pondération pour pondérer les valeurs moyennes calculées. Les points de transition Ci sont ainsi déterminés à partir de la valeur minimale et de la valeur maximale de ces moyennes. La zone de croissance est celle dont tous les points sont au-dessus de la moyenne de la valeur minimale et de la valeur maximale pondérée du coefficient de pondération. La zone d'inhibition est celle dont tous les points sont au-dessous de cette moyenne pondérée du même coefficient. The method according to the invention also consists in taking into account the variability of the surface condition of the zones by determining a weighting coefficient to weight the calculated average values. The transition points Ci are thus determined from the minimum value and the maximum value of these means. The growth zone is that where all the points are above the average of the minimum value and the maximum weighted value of the weighting coefficient. The inhibition zone is that in which all the points are below this weighted average of the same coefficient.

Les dispositifs des fig. 1 et 3 comprennent une mécanique, non représentée, se composant d'un banc de mesure sur lequel une boîte peut se déplacer longitudinalement. Un système de courroie crantée mue par un moteur pas à pas 4 à la fig. 1 prend la boîte à l'entrée du système, la déplace rapidement jusqu'au système de lecture, puis l'éjecte une fois les mesures faites. The devices of fig. 1 and 3 comprise a mechanism, not shown, consisting of a measuring bench on which a box can move longitudinally. A toothed belt system driven by a stepping motor 4 in fig. 1 takes the box at the entrance of the system, quickly moves it to the reading system, then ejects it once the measurements have been made.

Ce principe de déplacement longitudinal permet de mettre les boîtes de Pétri les unes derrière les autres afin d'effectuer une série de mesures en chaîne. This principle of longitudinal displacement enables the Petri dishes to be placed one behind the other in order to carry out a series of chain measurements.

Les émetteurs 11,12,13,14 de la fig. 3 sont montés sur de petites platines qui peuvent être déplacées dans deux directions afin d'effectuer l'alignement correct de l'axe optique émetteur-capteur pour l'ensemble des émetteurs 11,12,13,14 et des capteurs 21,22,23,24, placés dans un plan perpendiculaire à la direction de déplacement de la boîte avec leurs axes optiques respectifs coupant les quatre rangées de disques. Dans l'exemple de réalisation d'un dispositif représenté, fig. 3, le banc de mesure est surmonté d'un bloc imprimant fixe, cette imprimante numérique servant à établir le ticket final des résultats The transmitters 11, 12, 13, 14 of FIG. 3 are mounted on small plates which can be moved in two directions in order to carry out the correct alignment of the optical emitter-sensor axis for all the emitters 11,12,13,14 and the sensors 21,22, 23.24, placed in a plane perpendicular to the direction of movement of the box with their respective optical axes intersecting the four rows of discs. In the embodiment of a device shown, fig. 3, the measurement bench is surmounted by a fixed printing block, this digital printer used to establish the final ticket for the results

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4 4

comportant le numéro du disque d'antibiotique et la valeur du diamètre d'inhibition. with the number of the antibiotic disc and the value of the inhibition diameter.

Le dispositif de la fig. 3 comporte en outre une partie électronique comprenant plusieurs sous-ensembles de commande: The device of fig. 3 further comprises an electronic part comprising several control sub-assemblies:

— du moteur pas à pas avec un système de compensation 40 pour avoir le couple maximal, ce qui permet d'employer un moteur de dimension très faible; - The stepping motor with a compensation system 40 to have the maximum torque, which allows the use of a very small motor;

— de l'alimentation 10 des émetteurs en régime puisé, ce qui permet d'avoir le flux lumineux maximal et d'effectuer les mesures de façon synchrone afin d'éviter l'influence des lumières parasites; - the power supply 10 of the emitters in pulsed mode, which makes it possible to have the maximum light flux and to carry out the measurements synchronously in order to avoid the influence of stray lights;

— du multiplexage des signaux venant des capteurs par le bloc 20, afin de n'avoir qu'un seul système amplificateur 30 et d'éviter les réglages multiples de conversion analogique-numérique sur 8 bits pour communiquer avec le microprocesseur 5 de la fig. 1 ; - Multiplexing of the signals coming from the sensors by the block 20, in order to have only one amplifier system 30 and to avoid multiple adjustments of analog-digital conversion on 8 bits to communicate with the microprocessor 5 of FIG. 1;

— de l'imprimante 6 à partir du microprocesseur; - from the printer 6 from the microprocessor;

— de l'alimentation en courant continu nécessaire pour les 5 différentes cartes d'électronique. - the DC power supply required for the 5 different electronic cards.

Dans un exemple de réalisation préféré de l'invention, le microprocesseur 5 est du type Zilog 80 de la société Zilog. En utilisant des moyens de programmation classiques appropriés, le calcul des diamètres des zones d'une boîte peut être réduit à un temps de io traitement de 3 s. On voit donc que, dans ces conditions de traitement des mesures, le temps d'exécution n'est lié qu'à la vitesse du moteur pas à pas qui peut être augmentée dans le cas d'exploitation industrielle. In a preferred embodiment of the invention, the microprocessor 5 is of the Zilog 80 type from the company Zilog. By using suitable conventional programming means, the calculation of the diameters of the zones of a box can be reduced to a treatment time of 3 s. It can therefore be seen that, under these measurement processing conditions, the execution time is only linked to the speed of the stepping motor which can be increased in the case of industrial operation.

R R

1 feuille dessin 1 drawing sheet

Claims (12)

633110633110 1. Procédé pour déterminer la sensibilité de bactéries et levures à des produits antibiotiques selon la technique des cultures sur gélose en boîte de Pétri, par mesure du diamètre des zones d'inhibition qui apparaissent autour d'un disque d'antibiotique, dans lequel on fait défiler lesdites zones d'inhibition par un déplacement rectiligne entre un émetteur d'un rayonnement pour lequel le facteur de transmission est différent dans une telle zone et en dehors de celle-ci et un capteur sensible audit rayonnement, et on traite le rayonnement reçu par le capteur dans une électronique appropriée qui en extrait les valeurs de diamètre, caractérisé en ce qu'on détermine les variations de l'intensité du rayonnement reçu par le capteur pendant le temps où la région traversée par le rayonnement décrit par rapport à la zone d'inhibition un trajet coupant les bords de ladite zone et passant par le centre de celle-ci, et en ce qu'on déduit le diamètre de ladite zone des variations de ladite intensité de rayonnement. 1. Method for determining the sensitivity of bacteria and yeasts to antibiotic products according to the culture technique on agar in a petri dish, by measuring the diameter of the zones of inhibition which appear around an antibiotic disc, in which scrolls through said zones of inhibition by a rectilinear movement between a transmitter of radiation for which the transmission factor is different in and outside such a zone and a sensor sensitive to said radiation, and the radiation received is processed by the sensor in appropriate electronics which extracts the diameter values therefrom, characterized in that the variations in the intensity of the radiation received by the sensor are determined during the time in which the region traversed by the radiation described with respect to the area inhibition a path cutting the edges of said zone and passing through the center thereof, and in that the diameter of said zone is deduced from variations in said intensity of radiation. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que les disques d'antibiotique sont mis en place par un appareil automatique qui détermine avec précision leur position, et en ce que le défilement des zones d'inhibition est fait de manière automatique. 2. Method according to claim 1, characterized in that the antibiotic discs are put in place by an automatic device which precisely determines their position, and in that the scrolling of the inhibition zones is done automatically. 2 2 REVENDICATIONS 3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'on utilise un appareil qui place 16 disques suivant un réseau carré dans une boîte de Pétri également carrée, et en ce qu'on fait défiler les disques suivant un trajet parallèle à une diagonale de ce carré. 3. Method according to claim 2, characterized in that one uses a device which places 16 discs according to a square network in a Petri dish also square, and in that the discs are scrolled along a path parallel to a diagonal of this square. 4. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le rayonnement est un rayonnement infrarouge, de préférence dans la gamme de 950 nm. 4. Method according to one of claims 1 to 3, characterized in that the radiation is infrared radiation, preferably in the range of 950 nm. 5. Procédé selon l'une des revendications 3 ou 4, caractérisé en ce qu'on supprime un disque sur la série d'une même boîte de façon à avoir un témoin pour le niveau de base. 5. Method according to one of claims 3 or 4, characterized in that one removes a disc on the series of the same box so as to have a witness for the basic level. 6. Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu'on utilise un moteur pas à pas, commandé par l'électronique, 6. Method according to one of claims 1 to 5, characterized in that a stepping motor, controlled by the electronics, is used, pour déplacer les zones d'inhibition. to move the zones of inhibition. 7. Dispositif pour la mise en œuvre du procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu'il comprend un moyen pour déplacer pas à pas la boîte dans une direction parallèle à chacune des rangées de disques, un nombre d'émetteurs et de capteurs de lumière associés par paires, égal au nombre de rangées de disques, les capteurs étant agencés chacun pour détecter les rayons ayant traversé respectivement un disque et la zone d'inhibition correspondante et pour détecter les rayons ayant traversé successivement les différents disques et les zones d'inhibition correspondantes d'une rangée déterminée, des moyens pour enregistrer successivement les valeurs de mesures transmises par chaque capteur à chaque pas d'avancement de la boîte, et des moyens pour calculer les valeurs moyennes minimale et maximale desdites valeurs de mesures, de sorte que chaque disque et la zone d'inhibition correspondante sont déterminés par ces valeurs moyennes minimale et maximale. 7. Device for implementing the method according to one of claims 1 to 6, characterized in that it comprises means for moving the box step by step in a direction parallel to each of the rows of discs, a number of 'emitters and associated light sensors in pairs, equal to the number of rows of discs, the sensors being each arranged to detect the rays having crossed respectively a disc and the corresponding inhibition zone and to detect the rays having successively passed through the different discs and the corresponding inhibition zones of a determined row, means for successively recording the measurement values transmitted by each sensor at each step of advancement of the box, and means for calculating the minimum and maximum mean values of said values measurements, so that each disc and the corresponding inhibition zone are determined by these minimum and maximum mean values. 8. Dispositif selon la revendication 7, caractérisé en ce que le pas d'avancement de la boîte est choisi de façon que chaque capteur effectue plusieurs mesures d'un bout à l'autre d'un disque et d'un bout à l'autre de la zone d'inhibition correspondante. 8. Device according to claim 7, characterized in that the step of advancement of the box is chosen so that each sensor performs several measurements from one end to the other of a disc and from one end to the other from the corresponding inhibition zone. 9. Dispositif selon l'une des revendications 7 ou 8, caractérisé en ce que le rayonnement émis par chacun des émetteurs est un rayonnement infrarouge, de préférence dans la gamme de 950 nm. 9. Device according to one of claims 7 or 8, characterized in that the radiation emitted by each of the emitters is infrared radiation, preferably in the range of 950 nm. 10. Dispositif selon l'une des revendications 7 à 9, caractérisé en ce que lesdits moyens pour enregistrer successivement les valeurs de mesures transmises par chaque capteur sont des circuits multiplexeurs. 10. Device according to one of claims 7 to 9, characterized in that said means for successively recording the measurement values transmitted by each sensor are multiplexer circuits. 11. Dispositif selon l'une des revendications 7 à 10, caractérisé en ce que lesdits moyens pour calculer des valeurs moyennes minimale et maximale sont constitués par un microprocesseur. 11. Device according to one of claims 7 to 10, characterized in that said means for calculating minimum and maximum average values consist of a microprocessor. 12. Dispositif selon l'une des revendications 7 à 11, caractérisé en ce que lesdits moyens de calcul comprennent en outre des moyens pour pondérer les valeurs moyennes calculées d'un coefficient de pondération qui tient compte des irrégularités de surface des zones considérées. 12. Device according to one of claims 7 to 11, characterized in that said calculating means further comprises means for weighting the calculated average values of a weighting coefficient which takes account of the surface irregularities of the zones considered.
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