CH622528A5 - Process for the preparation of aminoglycoside antibiotics - Google Patents

Description

La présenté invention concerne un nouveau procédé de préparation d'antibiotiques aminoglycosidiques qui sont des dérivés de kanamycine à groupe 1-amino substitué. The present invention relates to a new process for the preparation of aminoglycosidic antibiotics which are derivatives of kanamycin with a substituted 1-amino group.

Des exemples de ces dérivés de kanamycine à groupe 1-amino protégé ont été décrits dans la demande de brevet britannique N° 46412/74 du 26 octobre 1974. D'autres sont des composés 40 connus tels que la l-N-[4-amino-2-hydroxybutyryl]kanamycine A (BB-K8) décrite dans le brevet britannique N° 1401221. Pour préparer ces composés à partir de kanamycine, produit de fermentation facile à obtenir, il est désirable de protéger certains ou la totalité des groupes amino autres que le groupe 1-amino. La 45 substitution peut ensuite être effectuée préférentiellement sur le groupe amino en position 1 et la séparation du produit final 1-N-substitué est ainsi simplifiée. La présente invention a pour but d'offrir un procédé de préparation de dérivés de kanamycine à groupe 1-amino substitué, à partir de ces composés intermédiaires 50 sélectivement N-protégés. En conséquence, l'invention concerne un procédé de préparation de composés de formule: Examples of these kanamycin derivatives with a protected 1-amino group have been described in British patent application No. 46412/74 of October 26, 1974. Others are known compounds such as lN- [4-amino- 2-hydroxybutyryl] kanamycin A (BB-K8) described in British Patent No. 1401221. To prepare these compounds from kanamycin, an easily obtained fermentation product, it is desirable to protect some or all of the amino groups other than the 1-amino group. Substitution can then preferably be carried out on the amino group in position 1 and the separation of the 1-N-substituted end product is thus simplified. The object of the present invention is to provide a process for the preparation of kanamycin derivatives with a substituted 1-amino group, from these selectively N-protected intermediate compounds. Consequently, the invention relates to a process for the preparation of compounds of formula:

R3NH R3NH

dans laquelle les symboles R1 à R4 ont les définitions données ci-dessus, à éliminer le groupe R2 s'il s'agit d'un groupe benzyle, et les groupes R3, et à isoler le composé de formule I. in which the symbols R1 to R4 have the definitions given above, eliminating the group R2 if it is a benzyl group, and the groups R3, and isolating the compound of formula I.

2. Application du procédé selon la revendication 1 à la préparation des composés de formule I à partir de composés de formule II obtenus par une méthode qui consiste à faire réagir avec un agent acylant un sel d'addition d'acide ou un dérivé de kanamycine A, kanamycine B ou 3-N-benzylkanamycine A protégé sur toutes ses fonctions amino, à éliminer les groupes protégeant les 2. Application of the method according to claim 1 to the preparation of the compounds of formula I from compounds of formula II obtained by a method which consists in reacting with an acylating agent an acid addition salt or a kanamycin derivative A, kanamycin B or 3-N-benzylkanamycin A protected on all its amino functions, to eliminate the groups protecting the

NHR NHR

3 3

622 528 622,528

dans laquelle: in which:

R est un groupe amino ou hydroxyle et R1 est un groupe alkyle inférieur éventuellement substitué avec des groupes hydroxyle ou avec des groupes amino ou les deux, procédé qui consiste à alkyler un composé de formule : R is an amino or hydroxyl group and R1 is a lower alkyl group optionally substituted with hydroxyl groups or with amino groups or both, process which consists in alkylating a compound of formula:

CK„NHR3 CK „NHR3

Ci This

30 30

dans laquelle: in which:

R2 est un atome d'hydrogène ou un groupe benzyle; R2 is a hydrogen atom or a benzyl group;

R3 est un groupe acyle labile protégeant la fonction amino, comme défini dans le présent mémoire, et R3 is a labile acyl group protecting the amino function, as defined in the present specification, and

R4 est un groupe hydroxyle ou un groupe NHR3, pour former 35 un composé de formule : R4 is a hydroxyl group or an NHR3 group, to form a compound of formula:

NHR1 45 NHR1 45

50 50

HO HO

dans laquelle : in which :

R1 à R4 ont les définitions données ci-dessus, R1 to R4 have the definitions given above,

à éliminer les groupes R2 (s'il s'agit de groupes benzyle) et R3, eliminating the groups R2 (if they are benzyl groups) and R3,

et and

à isoler le composé de formule I. isolating the compound of formula I.

Dans le présent brevet, l'expression alkyle inférieur signifie que ces groupes contiennent 1 à 6 atomes de carbone et que leur chaîne peut être droite ou ramifiée. Le groupe acyle labile R3 protégeant la fonction amino est un groupe acyle qui peut être éliminé sélectivement du composé de formule III par des opérations classiques. In the present patent, the expression lower alkyl means that these groups contain 1 to 6 carbon atoms and that their chain can be straight or branched. The labile acyl group R3 protecting the amino function is an acyl group which can be selectively removed from the compound of formula III by conventional operations.

R3 peut être un groupe halogénacétyle, de préférence un groupe trifluoracétyle, qui peut être éliminé par hydrolyse dans des conditions douces, par exemple avec une solution diluée R3 may be a haloacetyl group, preferably a trifluoroacetyl group, which can be removed by hydrolysis under mild conditions, for example with a dilute solution

60 60

65 65

d'hydroxyde d'ammonium. R3 peut aussi être un groupe formyle ou un groupe monochloracétyle, dichloracétyle ou trichloracétyle. R3 peut être, en outre, un groupe alcanoyle inférieur, par exemple un groupe acétyle, un groupe benzoyle éventuellement substitué dans le noyau aromatique, par exemple avec un groupe nitro ou avec un ou plusieurs atomes d'halogènes, ou un groupe alkoxy-carbonyle inférieur, par exemple un groupe éthoxycarbonyle ou méthoxycarbonyle. L'élimination de ces groupes nécessite des conditions d'hydrolyse plus énergiques. Des exemples de groupes acyle labiles, protégeant la fonction amino, avantageux à utiliser dans la présente invention comprennent les groupes acétyle et trifluoracétyle. ammonium hydroxide. R3 can also be a formyl group or a monochloroacetyl, dichloroacetyl or trichloroacetyl group. R3 may also be a lower alkanoyl group, for example an acetyl group, a benzoyl group optionally substituted in the aromatic ring, for example with a nitro group or with one or more halogen atoms, or an alkoxy-carbonyl group lower, for example an ethoxycarbonyl or methoxycarbonyl group. Removal of these groups requires more aggressive hydrolysis conditions. Examples of labile acyl groups, protecting the amino function, advantageous for use in the present invention include acetyl and trifluoroacetyl groups.

Ce procédé de préparation de composés de formule I comporte, comme étape initiale, une alkylation d'un composé de formule II en vue d'introduire le substituant R1 sur le groupe amino qui se trouve en position 1. Cette réaction peut être conduite de diverses façons bien connues de l'homme de l'art. Par exemple, on peut effectuer l'alkylation par voie de réduction, en utilisant un aldéhyde ou une cétone convenable ou un dérivé d'aldéhyde du type défini dans la demande de brevet britannique N° 7529/76 du 25 février 1976, ou par réduction du dérivé acylé correspondant (par exemple avec du diborane). Naturellement, au cas où on utilise un composé de formule II dans laquelle R2 est un atome d'hydrogène, la réaction a lieu également dans la position 3-amino mais, si l'on n'utilise qu'un léger excès de réactif, l'isomère requis substitué sur le groupe 1-amino peut être séparé assez facilement de l'isomère substitué sur le groupe 3-amino et du produit disubstitué sur les groupes amino en positions 1 et 3 par des opérations classiques, par exemple par Chromatographie par échange ionique. Cela peut être fait à ce stade du procédé ou plus avantageusement après l'élimination des groupes protégeant la fonction amino. This process for the preparation of compounds of formula I comprises, as an initial step, an alkylation of a compound of formula II with a view to introducing the substituent R1 on the amino group which is in position 1. This reaction can be carried out in various ways ways well known to those skilled in the art. For example, alkylation can be carried out by reduction, using a suitable aldehyde or ketone or an aldehyde derivative of the type defined in British Patent Application No. 7529/76 of February 25, 1976, or by reduction the corresponding acylated derivative (for example with diborane). Naturally, in the case where a compound of formula II is used in which R2 is a hydrogen atom, the reaction also takes place in the 3-amino position but, if a slight excess of reagent is used, the required isomer substituted on the 1-amino group can be separated quite easily from the substituted isomer on the 3-amino group and the product disubstituted on the amino groups in positions 1 and 3 by conventional operations, for example by chromatography by ion exchange. This can be done at this stage of the process or more advantageously after the removal of the groups protecting the amino function.

La seconde étape du procédé consiste à éliminer le groupe protecteur R3 du groupe 2'-amino éventuel et des groupes 6'-amino et 3"-amino et à éliminer aussi le groupe benzyle éventuel du groupe 3-amino. Dans quelques cas, lorsque le substituant du groupe 1-amino porte lui-même un substituant amino, il peut être désirable de protéger ce substituant amino en cours de procédé, et il peut ensuite être nécessaire d'éliminer également ce groupe protecteur dans l'étape finale du procédé. Il existe diverses conditions bien connues de l'homme de l'art pour éliminer complètement ces groupes protégeant la fonction amino et ces conditions dépendent naturellement de la nature du groupe protecteur utilisé et de l'environnement de l'amine protégée et, comme on l'a déjà mentionné, il est nécessaire de choisir ces conditions en tenant compte du substituant qui se trouve dans la psoition 1-amino. Le milieu utilisé peut être anhydre ou aqueux et, dans des cas particuliers, il peut être acide ou basique avec diverses forces. Par exemple, le groupe benzyle éventuel peut être éliminé par hydro-génolyse catalytique d'une manière classique, en présence d'un catalyseur au palladium. Certains groupes acyle peuvent être éliminés par hydrolyse dans des conditions basiques douces; par exemple, le groupe trifluoracétyle peut être éliminé par traitement avec de l'hydroxyde d'ammonium IN à la température ambiante pendant 24 h, tandis que les groupes acétyle, benzoyle et éthoxycarbonyle requièrent des conditions plus énergiques pour leur élimination, par exemple un chauffage avec de l'hydroxyde de sodium 5N pendant plusieurs heures à 60-80° C. Le produit (I) The second step of the process consists in removing the protective group R3 from the optional 2'-amino group and from the 6'-amino and 3 "-amino groups and also eliminating the possible benzyl group from the 3-amino group. In some cases, when the substituent of the 1-amino group itself carries an amino substituent, it may be desirable to protect this amino substituent during the process, and it may then be necessary to also remove this protective group in the final step of the process. There are various conditions well known to those skilled in the art for completely eliminating these groups protecting the amino function and these conditions naturally depend on the nature of the protecting group used and on the environment of the protected amine and, as is the case. already mentioned, it is necessary to choose these conditions taking into account the substituent which is in the 1-amino position. The medium used can be anhydrous or aqueous and, in particular cases, it can be acidic or basic with ec various forces. For example, the optional benzyl group can be removed by catalytic hydro-genolysis in a conventional manner, in the presence of a palladium catalyst. Certain acyl groups can be removed by hydrolysis under mild basic conditions; for example, the trifluoroacetyl group can be removed by treatment with IN ammonium hydroxide at room temperature for 24 h, while the acetyl, benzoyl and ethoxycarbonyl groups require more stringent conditions for their removal, for example heating with 5N sodium hydroxide for several hours at 60-80 ° C. The product (I)

peut finalement être purifié, le cas échéant, par des opérations classiques, par exemple par cristallisation ou par Chromatographie. can finally be purified, if necessary, by conventional operations, for example by crystallization or by chromatography.

Le procédé de l'invention est illustré par la préparation de la l-N-[(S)-4-amino-2-hydroxybutyl]kanamycine A. Dans ce cas, la kanamycine protégée intermédiaire (II) est tout d'abord alkylée, par exemple par alkylation par voie de réduction avec un dérivé aldéhydique, comme décrit dans la demande de brevet britannique N° 7529/76 précitée, et cette opération est suivie de l'élimination des groupes protégeant les fonctions amino et de l'isole The process of the invention is illustrated by the preparation of lN - [(S) -4-amino-2-hydroxybutyl] kanamycin A. In this case, the intermediate protected kanamycin (II) is first of all alkylated, by example by alkylation by reduction with an aldehyde derivative, as described in British patent application No. 7529/76 cited above, and this operation is followed by the elimination of the groups protecting the amino functions and of the isolate

622 528 622,528

ment du produit désiré. Ainsi, lorsqu'on utilise la 3-benzyl-6-[S]-dihydroxyméthyltétrahydro-l,3-oxazine-2-one dans l'alkylation par voie de réduction avec la 3",6'-di-N-acétylkanamycine A, une hydrolyse basique subséquente pour éliminer les groupes acétyle et une hydrogénolyse pour éliminer le groupe benzyle donnent le composé désiré de formule I, dans laquelle R est un groupe hydroxy et R1 est un groupe (S)-4-amino-2-hydroxybutyle. L'alkylation par voie de réduction peut avantageusement être effectuée en dissolvant les corps réactionnels dans un solvant organique approprié, par exemple du méthylformamide, en utilisant le borohydrure de sodium, et la réaction est en général terminée en quelques heures à 30° C. L'élimination des groupes acétyle est effectuée par hydrolyse à l'hydroxyde de sodium 3N à 80° pendant 4 h et le groupe benzyle est éliminé par hydrogénation catalytique à 60° C et sous pression de 4,2 bars pendant 16 h. Le produit désiré est ensuite séparé par Chromatographie de l'isomère à groupe 3-amino substitué, qui est formé en même temps. ment of the desired product. Thus, when 3-benzyl-6- [S] -dihydroxymethyltetrahydro-1,3-oxazine-2-one is used in the reduction alkylation with 3 ", 6'-di-N-acetylkanamycin A , subsequent basic hydrolysis to remove acetyl groups and hydrogenolysis to remove benzyl group give the desired compound of formula I, wherein R is hydroxy and R1 is (S) -4-amino-2-hydroxybutyl group. The reduction alkylation can advantageously be carried out by dissolving the reactants in a suitable organic solvent, for example methylformamide, using sodium borohydride, and the reaction is generally completed in a few hours at 30 ° C. elimination of the acetyl groups is carried out by hydrolysis with 3N sodium hydroxide at 80 ° for 4 h and the benzyl group is removed by catalytic hydrogenation at 60 ° C and under pressure of 4.2 bar for 16 h. The desired product is then separated by chromatography from the 3-a group isomer mino substituted, which is formed at the same time.

Les composés de formule II sont eux-mêmes des composés nouveaux. On peut les préparer par une réaction de migration sélective 0->N du groupe acyle. Ainsi, dans un procédé de préparation de ces composés, un sel d'addition d'acide de kanamycine A ou B ou de 3-N-benzylkanamycine A est tout d'abord traité avec un excès d'agent acylant, dans des conditions acides, choisies de manière que, initialement, les groupes hydroxyle soient seuls acylés. Ensuite, le sel d'addition d'acide du produit O-acylé, dissous dans un solvant organique inerte, est neutralisé. Dans ces conditions, il peut y,avoir une migration intramoléculaire du groupe acyle, qui vient se fixer sur tout groupe amino voisin d'un groupa acyloxy occupant une position adjacente du noyau, c'est-à-dire les groupes 6'-amino et 3'-amino et le groupe 2'-amino de la kanamycine B. Les groupes O-acyle restants sont ensuite éliminés de la manière usuelle, par exemple par hydrolyse ou par alcoolyse et le produit peut être purifié, le cas échéant, par Chromatographie. The compounds of formula II are themselves new compounds. They can be prepared by a selective 0-> N migration reaction of the acyl group. Thus, in a process for the preparation of these compounds, an acid addition salt of kanamycin A or B or of 3-N-benzylkanamycin A is first treated with an excess of acylating agent, under acidic conditions , chosen so that, initially, only the hydroxyl groups are acylated. Then, the acid addition salt of the O-acylated product, dissolved in an inert organic solvent, is neutralized. Under these conditions, there may be an intramolecular migration of the acyl group, which is fixed on any amino group adjacent to an acyloxy group occupying an adjacent position of the nucleus, that is to say the 6'-amino groups. and 3'-amino and the 2'-amino group of kanamycin B. The remaining O-acyl groups are then removed in the usual manner, for example by hydrolysis or alcoholysis and the product can be purified, if necessary, by Chromatography.

Ce procédé de préparation de composés de formule II s'est montré particulièrement efficace pour la préparation des composés dans lesquels R4 est un groupe hydroxyle et R3 est un groupe trifluoracétyle. Dans ce cas, la kanamycine A ou la 3-N-benzylkanamycine A est dissoute dans de l'acide trifluoracétique et la solution est traitée à 0° avec de l'anhydride trifluoracétique en excès. La réaction est sensiblement terminée au bout de quelques heures à 0°C (par exemple environ 16 h) et le dérivé per-O-trifluoracétylé de la kanamycine sous la forme de son trifluoracé-tate peut être isolé par évaporation des solvants sous vide. Le produit est dissous dans un solvant organique inerte, de préférence le tétrahydrofuranne, et la solution est neutralisée par traitement avec une base, par exemple en l'agitant avec du carbonate de sodium ou du carbonate de potassium. On a trouvé que, dans ces conditions, la réaction de migration 0->N du groupe acyle a lieu rapidement et est sensiblement terminée en 20 mn à la température ambiante. Les groupes O-trifluoracétyle restants sont éliminés d'une manière classique, par exemple par méthanolyse, et le produit 3",6'-di-N-trifluoracétylé peut ensuite être isolé par évaporation du solvant et purifié, le cas échéant, par Chromatographie classique sur colonne. This process for the preparation of compounds of formula II has been shown to be particularly effective for the preparation of compounds in which R4 is a hydroxyl group and R3 is a trifluoroacetyl group. In this case, kanamycin A or 3-N-benzylkanamycin A is dissolved in trifluoroacetic acid and the solution is treated at 0 ° with excess trifluoroacetic anhydride. The reaction is substantially completed after a few hours at 0 ° C (for example about 16 h) and the per-O-trifluoroacetylated derivative of kanamycin in the form of its trifluoroacetate can be isolated by evaporation of the solvents under vacuum. The product is dissolved in an inert organic solvent, preferably tetrahydrofuran, and the solution is neutralized by treatment with a base, for example by stirring it with sodium carbonate or potassium carbonate. It has been found that, under these conditions, the 0-> N migration reaction of the acyl group takes place quickly and is substantially completed in 20 min at room temperature. The remaining O-trifluoroacetyl groups are removed in a conventional manner, for example by methanolysis, and the 3 ", 6'-di-N-trifluoroacetylated product can then be isolated by evaporation of the solvent and purified, if necessary by chromatography. classic on column.

Dans une variante du procédé de préparation, la kanamycine A ou la 3-N-benzylkanamycine A est tout d'abord traitée avec un réactif capable d'introduire des groupes aminoprotecteurs qui peuvent être éliminés sélectivement. Des groupes protecteurs convenables sont, par exemple, le groupe tertiobutyloxycarbonyle et le groupe benzyloxycarbonyle. Le produit à fonctions amino entièrement protégées est ensuite O-acylé par des opérations connues, par exemple par traitement avec un anhydride ou un chlorure d'acide tel que l'anhydride acétique dans la pyridine ou avec un chloroformiate d'alkyle tel que le chloroformiate d'éthyle et les groupes aminoprotecteurs sont ensuite éliminés (par exemple les groupes tertiobutyloxycarbonyle sont éliminés par traitement à l'acide trifluoracétique et les groupes benzyloxycarbonyle sont éliminés par hydrogénolyse catalytique), et la solution est neutralisée. La migration 0->N des groupes acyle peut ensuite s'effectuer comme précédemment; les groupes O-acyle restants sont éliminés et le produit est isolé comme décrit ci-dessus. In a variant of the preparation process, kanamycin A or 3-N-benzylkanamycin A is first treated with a reagent capable of introducing aminoprotective groups which can be selectively eliminated. Suitable protecting groups are, for example, the tert-butyloxycarbonyl group and the benzyloxycarbonyl group. The product with fully protected amino functions is then O-acylated by known operations, for example by treatment with an anhydride or an acid chloride such as acetic anhydride in pyridine or with an alkyl chloroformate such as chloroformate ethyl and the aminoprotective groups are then removed (for example the tert-butyloxycarbonyl groups are removed by treatment with trifluoroacetic acid and the benzyloxycarbonyl groups are removed by catalytic hydrogenolysis), and the solution is neutralized. The 0-> N migration of the acyl groups can then be carried out as previously; the remaining O-acyl groups are removed and the product is isolated as described above.

Le procédé peut aussi être appliqué à la kanamycine B, la migration des groupes acyle s'effectuant en outre dans ce cas du groupe 3'-hydroxyle au groupe 2'-amino adjacent pour former un composé intermédiaire tri-N-acylé. The process can also be applied to kanamycin B, the migration of the acyl groups also taking place in this case from the 3'-hydroxyl group to the adjacent 2'-amino group to form a tri-N-acylated intermediate compound.

Les composés de formule II, de même que ceux qui répondent aux formules I et III, peuvent exister avec diverses configurations et l'invention n'est pas limitée à l'une quelconque de ces formes. Généralement, les noyaux sont chacun de la forme chaise et chacun des groupes substituant a une forme équatoriale par rapport au noyau. The compounds of formula II, as well as those which correspond to formulas I and III, can exist with various configurations and the invention is not limited to any of these forms. Generally, the nuclei are each of the chair form and each of the substituent groups has an equatorial form with respect to the nucleus.

En outre, les liaisons glycosidiques entre les noyaux d'hexopy-rannosyle et le noyau de 2-déoxystreptamine sont très souvent des liaisons en a par rapport aux premiers. La 3-N-benzylkanamycine A est elle-même un composé nouveau. On peut la préparer par alkylation par voie de réduction de la kanamycine A avec le benzaldéhyde dans des conditions de pH déterminées avec soin. On a découvert que, lorsque la kanamycine A en solution aqueuse est soumise à une alkylation par voie de réduction à la température ambiante ou à une température plus basse, avec un léger excès de benzaldéhyde en présence de cyanoborohydrure de sodium et en ajustant soigneusement le pH de la solution à 6, le produit réactionnel principal est alors la 3-N-benzylkanamy-cine A. Naturellement, des quantités secondaires des autres isomères à groupes amino substitués et des produits polysubsti-tués sont également formés dans la réaction, mais on peut les séparer en grande partie par Chromatographie classique par échange ionique. La fraction principale isolée de la colonne par élution à l'hydroxyde d'ammonium consiste en 3-N-benzylkana-mycine A contaminée avec une petite quantité de l'isomère 1-N-benzylique. Dans la pratique, ce produit est suffisamment pur pour qu'on puisse l'utiliser directement dans le procédé de l'invention, bien que l'isomère 1-N-benzylique présent conduise naturellement, après alkylation et élimination des groupes protecteurs, à la formation de l'isomère substitué sur le groupe 3-amino comme composant secondaire, en même temps que le produit désiré substitué sur le groupe 1-amino, de formule I. Toutefois, on peut ensuite le séparer aisément par l'étape chromatographique finale décrite. In addition, the glycosidic bonds between the nuclei of hexopy-rannosyle and the nucleus of 2-deoxystreptamine are very often bonds in α compared to the former. 3-N-Benzylkanamycin A is itself a new compound. It can be prepared by alkylation by reduction of kanamycin A with benzaldehyde under carefully determined pH conditions. It has been discovered that when kanamycin A in aqueous solution is subjected to alkylation by reduction at room temperature or at a lower temperature, with a slight excess of benzaldehyde in the presence of sodium cyanoborohydride and by carefully adjusting the pH of the solution at 6, the main reaction product is then 3-N-benzylkanamy-cine A. Naturally, secondary quantities of the other isomers with substituted amino groups and polysubstituted products are also formed in the reaction, but it is possible to largely separated by conventional ion exchange chromatography. The main fraction isolated from the column by elution with ammonium hydroxide consists of 3-N-benzylkana-mycin A contaminated with a small amount of the 1-N-benzyl isomer. In practice, this product is sufficiently pure so that it can be used directly in the process of the invention, although the 1-N-benzyl isomer present leads naturally, after alkylation and elimination of the protective groups, to the formation of the substituted isomer on the 3-amino group as a secondary component, together with the desired product substituted on the 1-amino group, of formula I. However, it can then be easily separated by the final chromatographic step described .

Dans les exemples qui suivent, l'exemple 1 décrit la préparation de la 3-N-benzylkanamycine A. Les exemples 2 à 5 décrivent la préparation des nouveaux composés de formule II. L'exemple 6 illustre le nouveau procédé de l'invention pour la préparation de composés de formule I. La Chromatographie en couche mince a été effectuée sur des plaques de silice, en utilisant le système de solvants indiqué. Les taches ont été révélées après séchage des plaques, par pulvérisation d'une solution à 5% d'hypochlorite tertiobutylique dans le cyclohexane, séchage des plaques à 100° pendant 10 mn dans une étuve ventilée, refroidissement et pulvérisation d'une solution d'amidon et d'iodure de potassium. In the examples which follow, Example 1 describes the preparation of 3-N-benzylkanamycin A. Examples 2 to 5 describe the preparation of the new compounds of formula II. Example 6 illustrates the new process of the invention for the preparation of compounds of formula I. The thin layer chromatography was carried out on silica plates, using the indicated solvent system. The spots were revealed after drying of the plates, by spraying with a 5% solution of tert-butyl hypochlorite in cyclohexane, drying of the plates at 100 ° for 10 min in a ventilated oven, cooling and spraying with a solution of starch and potassium iodide.

Les températures sont exprimées en degrés Celsius. Amberlite est une marque déposée. Temperatures are expressed in degrees Celsius. Amberlite is a registered trademark.

Exemple 1 : Example 1:

On dissout 24,3 g (0,03 mol) de sulfate de kanamycine A dans 150 ml d'eau et on ajuste le pH à 6 par l'addition goutte à goutte d'acide chlorhydrique 5N. On ajoute 1,95 g (0,03 mol) de cyanoborohydrure de sodium et on refroidit le mélange à 0°C, puis on l'agite tout en y ajoutant goutte à goutte, en 2,5 h, une solution de 3,61 g (0,033 mol) de benzaldéhyde dans 15 ml de méthanol. On laisse le mélange se réchauffer à la température ambiante. Au bout de 16 h, on ajuste le pH de la solution à 5,5 par l'addition d'acide chlorhydrique IN et on filtre la solution, puis on l'ajoute à une colonne de résine d'échange ionique Amberlite CG-50 sous la forme de l'ion ammonium. Par élution d'abord avec de l'eau, puis 24.3 g (0.03 mol) of kanamycin A sulfate are dissolved in 150 ml of water and the pH is adjusted to 6 by the dropwise addition of 5N hydrochloric acid. 1.95 g (0.03 mol) of sodium cyanoborohydride are added and the mixture is cooled to 0 ° C., then it is stirred while adding therein dropwise, over 2.5 h, a solution of 3, 61 g (0.033 mol) of benzaldehyde in 15 ml of methanol. The mixture is allowed to warm to room temperature. After 16 h, the pH of the solution is adjusted to 5.5 by the addition of IN hydrochloric acid and the solution is filtered, then it is added to a column of ion-exchange resin Amberlite CG-50 in the form of the ammonium ion. By elution first with water, then

4 4

5 5

10 10

15 15

20 20

25 25

30 30

35 35

.40 .40

45 45

50 50

55 55

60 60

65 65

5 5

622 528 622,528

avec un gradient d'hydroxyde d'ammonium de concentration croissant de 0 à 0,7 N, on obtient comme produit principal la 3-N-benzylkanamycine A contaminée avec un peu du dérivé 1-N-benzylique (5,0 g, 28%) de Rf égal à 0,44 dans un mélange de méthanol, de chloroforme et d'hydroxyde d'ammonium à 17% dans la proportion de 4:1:2 (la kanamycine A a une valeur de Rf de 0,15). with an ammonium hydroxide gradient of increasing concentration from 0 to 0.7 N, the main product is 3-N-benzylkanamycin A contaminated with a little of the 1-N-benzyl derivative (5.0 g, 28 %) of Rf equal to 0.44 in a mixture of methanol, chloroform and ammonium hydroxide at 17% in the proportion of 4: 1: 2 (kanamycin A has an Rf value of 0.15) .

On transforme un échantillon en dérivé tétra-N-acétylhepta-O-triméthylsilylique volatil par traitement avec de l'anhydride acétique dans du méthanol à la température ambiante pendant 24 h, suivi de la réaction avec un mélange à 2:1 d'hexaméthyldisi-lazane et de triméthylchlorosilane à la température ambiante pendant 24 h. On trouve une valeur m/e de 1246. la formule C54H106N4O15SÌ7 requiert m/e = 1246. A sample is transformed into a volatile tetra-N-acetylhepta-O-trimethylsilyl derivative by treatment with acetic anhydride in methanol at room temperature for 24 h, followed by the reaction with a 2: 1 mixture of hexamethyldisi- lazane and trimethylchlorosilane at room temperature for 24 h. We find a value m / e of 1246. the formula C54H106N4O15SÌ7 requires m / e = 1246.

La position de substitution a été confirmée par la séquence réactionnelle suivante : The substitution position was confirmed by the following reaction sequence:

a) un traitement au tertiobutyloxycarbonylazide qui donne un composé contenant trois groupes tertiobutyloxycarbonyle de même que le groupe benzyle (d'après la résonance magnétique nucléaire); b) une hydrogénation pour éliminer le groupe benzyle; c) une acylation avec le N-[(S)-4-benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybutyryloxy]succinimide, et d) une élimination des groupes protégeant les fonctions amino par hydrogénation suivie d'un traitement à l'acide trifluoracétique, donnant comme produit principal la 3-N-[(S)-4-amino-2-hydroxybutyryl]kanamycine A (BB-K29) identique à un échantillon préparé par le procédé décrit par Naito et collaborateurs («J. Antibiotics», 1973, 26,297). a) a treatment with tert-butyloxycarbonylazide which gives a compound containing three tert-butyloxycarbonyl groups as well as the benzyl group (according to nuclear magnetic resonance); b) hydrogenation to remove the benzyl group; c) acylation with N - [(S) -4-benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybutyryloxy] succinimide, and d) elimination of the groups protecting the amino functions by hydrogenation followed by treatment with trifluoroacetic acid, giving as product main 3-N - [(S) -4-amino-2-hydroxybutyryl] kanamycin A (BB-K29) identical to a sample prepared by the method described by Naito et al. ("J. Antibiotics", 1973, 26,297) .

Exemple 2: Example 2:

On ajoute lentement 5,0 ml d'anhydride trifluoracétique à une solution sous agitation de 1,0 g de kanamycine A dans 40 ml d'acide trifluoracétique à 0°. On laisse reposer la solution à 0-4° pendant 20 h. On évapore ensuite le solvant sous vide et on traite le résidu avec 10 ml de toluène, puis on l'évaporé à sec. On reprend le trifluoracétate dans du tétrahydrofuranne anhydre et on neutralise la solution en l'ajoutant lentement à une suspension sous agitation de carbonate de potassium anhydre en excès dans le tétrahydrofuranne. On agite le mélange à la température ambiante pendant 20 mn, puis on filtre la suspension et on évapore le filtrat à sec. On reprend le produit dans 20 ml de méthanol et on le maintient à la température ambiante pendant 30 mn. On évapore le solvant sous pression réduite et on Chromatographie le résidu sur de la silice, en effectuant l'élution avec un gradient des solvants, en passant du chloroforme et du méthanol à 3:1 au chloroforme, au méthanol et à l'hydroxyde d'ammonium à 17% dans la proportion de 8:4:1, pour obtenir 0,52 g d'hydrate de 3",6'-di-N-trifluoracétylkanamycine A sous la forme d'une substance solide blanche hygroscopique. Le Rf est égal à 0,7 dans le méthanol, le chloroforme et l'hydroxyde d'ammonium à 17% à 4:1:1 (la kanamycine A a un Rf de 0,05). vc=o 1665 cm ~1. 5.0 ml of trifluoroacetic anhydride is slowly added to a stirred solution of 1.0 g of kanamycin A in 40 ml of trifluoroacetic acid at 0 °. The solution is left to stand at 0-4 ° for 20 h. The solvent is then evaporated in vacuo and the residue is treated with 10 ml of toluene, then it is evaporated to dryness. The trifluoroacetate is taken up in anhydrous tetrahydrofuran and the solution is neutralized by slowly adding it to a suspension with stirring of anhydrous potassium carbonate in excess in tetrahydrofuran. The mixture is stirred at room temperature for 20 min, then the suspension is filtered and the filtrate is evaporated to dryness. The product is taken up in 20 ml of methanol and kept at room temperature for 30 min. The solvent is evaporated off under reduced pressure and the residue is chromatographed on silica, eluting with a gradient of solvents, passing from chloroform and methanol 3: 1 to chloroform, methanol and hydroxide. ammonium at 17% in the proportion of 8: 4: 1, to obtain 0.52 g of hydrate of 3 ", 6'-di-N-trifluoracetylkanamycin A in the form of a white solid hygroscopic substance. The Rf is 0.7 in methanol, chloroform and 17% ammonium hydroxide at 4: 1: 1 (kanamycin A has an Rf of 0.05). vc = o 1665 cm ~ 1.

On transforme un échantillon en dérivé di-N-acétylhepta-O-triméthylsilylique volatil, comme décrit dans l'exemple 1. La valeur m/e trouvée est égale à 1264. La formule C47H94N4O requiert m/e =1264. A sample is transformed into a volatile di-N-acetylhepta-O-trimethylsilyl derivative, as described in Example 1. The value m / e found is equal to 1264. The formula C47H94N4O requires m / e = 1264.

Exemple 3: Example 3:

On ajoute lentement 0,7 ml (5 mmol) d'anhydride trifluoracétique à une solution de 0,23 g (0,4 mmol) de 3-N-benzylkanamycine A dans 15 ml d'acide trifluoracétique à 0°C. On maintient la solution à 0-4° pendant 20 h. On évapore ensuite le solvant et on traite le résidu avec 10 ml de toluène, puis on l'évaporé à sec. On dissout le produit dans 20 ml de tétrahydrofuranne et on ajoute lentement la solution à une suspension sous agitation de carbonate de potassium en excès dans le tétrahydrofuranne. On agite la suspension à la température ambiante pendant 30 mn, on la filtre et on évapore le filtrat à sec sous pression réduite. On reprend le résidu dans 20 ml de méthanol puis on le laisse reposer à la température ambiante pendant 30 mn. On chasse ensuite le solvant sous vide pour obtenir la 3-N-benzyl-3",6'-di-N-trifluoracé-tylkanamycine A. Le Rf est égal à 0,5 dans le méthanol, le chloroforme et l'hydroxyde d'ammonium à 8% dans la proportion de 4:1:0,1 (la 3-N-benzylkanamycine A a une valeur de Rf de 0,01). 0.7 ml (5 mmol) of trifluoroacetic anhydride is slowly added to a solution of 0.23 g (0.4 mmol) of 3-N-benzylkanamycin A in 15 ml of trifluoroacetic acid at 0 ° C. The solution is kept at 0-4 ° for 20 h. The solvent is then evaporated and the residue is treated with 10 ml of toluene, then it is evaporated to dryness. The product is dissolved in 20 ml of tetrahydrofuran and the solution is slowly added to a suspension with stirring of excess potassium carbonate in tetrahydrofuran. The suspension is stirred at room temperature for 30 min, filtered and the filtrate is evaporated to dryness under reduced pressure. The residue is taken up in 20 ml of methanol and then left to stand at room temperature for 30 min. The solvent is then removed in vacuo to obtain 3-N-benzyl-3 ", 6'-di-N-trifluoraceous-tylkanamycin A. The Rf is equal to 0.5 in methanol, chloroform and hydroxide d ammonium at 8% in the proportion of 4: 1: 0.1 (3-N-benzylkanamycin A has an Rf value of 0.01).

Exemple 4: Example 4:

A) On agite pendant environ 16 h à la température ambiante, puis on verse dans 1,9 1 d'eau une solution de 189,4 g de 1,3,3",6'-tétra-N-benzyloxycarbonylkanamycine A («Bull. Chem. Soc. Japan», 1965, 38,1181) dans 568 ml de pyridine. On extrait la solution aqueuse avec une fois 1,8 1 et une fois 1,01 de chloroforme et on évapore l'extrait organique à sec sous pression réduite. Par trituration du résidu avec de l'éther, on obtient 224,8 g de penta-0-acétyl-l,3,3",6'-tétra-N-benzyloxycarbonyl-kanamycine A qu'on filtre et qu'on sèche sous vide. Le produit fond à 223-229°; son Rf est égal .à 0,55 dans un mélange de chloroforme et d'alcool dénaturé industriel (12:1); 5 1,8-2,05 (multiplet de 15 protons, 5 groupes acétyle) et 7,4 (singulet de 20 protons, 4 groupes phényle). A) The mixture is stirred for approximately 16 h at room temperature, then poured into 1.9 l of water a solution of 189.4 g of 1.3.3 ", 6'-tetra-N-benzyloxycarbonylkanamycin A (" Bull. Chem. Soc. Japan ", 1965, 38.1181) in 568 ml of pyridine. The aqueous solution is extracted with once 1.8 l and once 1.01 of chloroform and the organic extract is evaporated to dryness. under reduced pressure. By trituration of the residue with ether, 224.8 g of penta-0-acetyl-1, 3.3 ", 6'-tetra-N-benzyloxycarbonyl-kanamycin A are obtained and filtered and that we vacuum dry. The product melts at 223-229 °; its Rf is equal to 0.55 in a mixture of chloroform and denatured industrial alcohol (12: 1); 5 1.8-2.05 (multiplet of 15 protons, 5 acetyl groups) and 7.4 (singlet of 20 protons, 4 phenyl groups).

B) On hydrogène sur 15 g de palladium à 5% fixé sur du carbone, à 60° et sous pression de 3,5 bars pendant 7 h, une solution de 53 g de penta-O-acétyl-1,3,3",6'-tétra-N-benzyloxycar-bonylkanamycine A dans 260 ml d'acétate d'éthyle contenant 260 ml d'acide acétique cristallisable. On filtre la solution et on évapore le filtrat à sec sous pression réduite. On triture le résidu avec de l'éther et on recueille la penta-O-acétylkanamycine A obtenue comme produit, en quantité de 32,9 g, que l'on sèche sous vide; le produit fond à 97-105°; son Rf est égal à 0,0 dans un mélange de chloroforme et d'alcool dénaturé industriel (12:1), comparativement au Rf de 0,55 que l'on trouve pour la matière première. Le spectre de résonance magnétique des protons révèle l'absence totale de protons aromatiques. B) A solution of 53 g of penta-O-acetyl-1,3,3 "is hydrogenated on 15 g of 5% palladium fixed on carbon, at 60 ° and under pressure of 3.5 bars for 7 h. , 6'-tetra-N-benzyloxycar-bonylkanamycin A in 260 ml of ethyl acetate containing 260 ml of glacial acetic acid The solution is filtered and the filtrate is evaporated to dryness under reduced pressure. ether and collecting the penta-O-acetylkanamycin A obtained as product, in an amount of 32.9 g, which is dried under vacuum; the product melts at 97-105 °; its Rf is equal to 0, 0 in a mixture of chloroform and industrial denatured alcohol (12: 1), compared to the Rf of 0.55 found for the raw material. The magnetic resonance spectrum of the protons reveals the total absence of aromatic protons .

C) On laisse reposer pendant environ 16 h à la température ambiante, puis on évapore à sec sous pression réduite une solution de 139,2 g de penta-O-acétylkanamycine A dans 1,41 de méthanol saturé d'ammoniac, puis on l'évaporé à sec sous pression réduite. On dissout le résidu dans 140 ml de méthanol et on précipite le produit brut avec 2,5 1 de chloroforme, on filtre et on sèche sous vide. On met la substance solide brute en suspension dans 400 ml d'alcool dénaturé industriel et on recueille par filtra-tion 91,9 g de 3",6'-di-N-acétylkanamycine A, qu'on lave à l'éther et qu'on sèche sous vide. Le produit fond à 150-180° et son Rf est égal à 0,77 dans un mélange de méthanol et d'hydroxyde d'ammonium (0,880) à 1:1. Son spectre de résonance des noyaux de 13C et son spectre de résonance nucléaire des protons concordent tout à fait avec la structure requise. C) The mixture is left to stand for approximately 16 h at room temperature, then a solution of 139.2 g of penta-O-acetylkanamycin A in 1.41 of methanol saturated with ammonia is evaporated to dryness under reduced pressure. evaporated to dryness under reduced pressure. The residue is dissolved in 140 ml of methanol and the crude product is precipitated with 2.5 l of chloroform, filtered and dried in vacuo. The crude solid is suspended in 400 ml of industrial denatured alcohol and 91.9 g of 3 ", 6'-di-N-acetylkanamycin A is collected by filtration. It is washed with ether and which is dried under vacuum. The product melts at 150-180 ° and its Rf is equal to 0.77 in a mixture of methanol and ammonium hydroxide (0.880) at 1: 1. Its resonance spectrum of the nuclei of 13C and its proton nuclear resonance spectrum are in perfect agreement with the required structure.

Exemple 5: Example 5:

On ajoute lentement 3,6 ml d'anhydride trifluoracétique à une solution sous agitation de 960 mg (2 mmol) de kanamycine B dans 50 ml d'acide trifluoracétique à 0°C. On laisse reposer la solution à 0-4° pendant 20 h. On évapore ensuite le solvant sous pression réduite et on traite le résidu avec 10 ml de toluène, puis on l'évaporé à sec. On dissout le sel d'acide trifluoracétique dans 30 ml de tétrahydrofuranne et on ajoute lentement la solution à une solution sous agitation de triéthylamine en excès dans le tétrahydrofuranne. On laisse reposer la solution à la température ambiante pendant 40 mn, puis on évapore le solvant sous pression réduite. On dissout le résidu dans du méthanol pour hydrolyser les groupes O-trifluoracétyle restants et, après 30 mn à la température ambiante, on évapore le solvant sous pression réduite et on Chromatographie le produit sur de la silice en effectuant l'élution avec un gradient de solvants en passant d'un mélange de chloroforme et de méthanol à 3:1 à une mélange de chloroforme, de méthanol et d'hydroxyde d'ammonium à 17% dans la proportion de 20:10:1 pour obtenir 452 mg (29%) de 2',3",6'-tri-N-trifluora-cétylkanamycine B sous la forme d'une substance vitreuse. Le Rf est égal à 0,70 dans un mélange de méthanol, de chloroforme et 3.6 ml of trifluoroacetic anhydride is slowly added to a stirred solution of 960 mg (2 mmol) of kanamycin B in 50 ml of trifluoroacetic acid at 0 ° C. The solution is left to stand at 0-4 ° for 20 h. The solvent is then evaporated under reduced pressure and the residue is treated with 10 ml of toluene, then it is evaporated to dryness. The trifluoroacetic acid salt is dissolved in 30 ml of tetrahydrofuran and the solution is slowly added to a stirring solution of excess triethylamine in tetrahydrofuran. The solution is left to stand at room temperature for 40 min, then the solvent is evaporated off under reduced pressure. The residue is dissolved in methanol to hydrolyze the remaining O-trifluoroacetyl groups and, after 30 min at room temperature, the solvent is evaporated off under reduced pressure and the product is chromatographed on silica, eluting with a gradient of solvents from a mixture of chloroform and methanol at 3: 1 to a mixture of chloroform, methanol and ammonium hydroxide at 17% in the proportion of 20: 10: 1 to obtain 452 mg (29% ) of 2 ', 3 ", 6'-tri-N-trifluora-ketylkanamycin B in the form of a vitreous substance. The Rf is equal to 0.70 in a mixture of methanol, chloroform and

5 5

10 10

15 15

20 20

25 25

30 30

35 35

40 40

45 45

50 50

55 55

60 60

65 65

622 528 622,528

6 6

d'hydroxyde d'ammonium à 8% dans la proportion de 4:1:0,1 (la kanamycine B a un Rf de 0,0). 8% ammonium hydroxide in the proportion of 4: 1: 0.1 (kanamycin B has an Rf of 0.0).

La structure a été confirmée par la séquence réactionnelle suivante: The structure was confirmed by the following reaction sequence:

a) une acétylation à l'anhydride acétique dans le méthanol pendant 20 h à la température ambiante, suivie d'un traitement à l'hydroxyde d'ammonium IN pendant 18 h pour éliminer les groupes trifluoracétyle donne un produit contenant deux groupes acétyle; m/e (désorption dans un champ) m +1 trouvé, 568; la formule C22H41N5O12 requiert m +1 = 568 ; a) acetylation with acetic anhydride in methanol for 20 h at room temperature, followed by treatment with IN ammonium hydroxide for 18 h to remove the trifluoroacetyl groups gives a product containing two acetyl groups; m / e (desorption in a field) m +1 found, 568; the formula C22H41N5O12 requires m +1 = 568;

b) un traitement du dérivé di-N-acétylé à l'anhydride deuté-roacétique dans le méthanol à la température ambiante pendant 24 h, suivi d'une réaction avec un mélange à 2:1 d'hexaméthyldi-silazane et de triméthylchlorosilane à la température ambiante pendant 24 h, donne le dérivé tri-N-deutéroacétyldi-N-acétylhexa-O-triméthylsilylé volatil, m/e trouvé 1134; la formule C^gHgeNjOj jD9Si6 requiert m/e= 1134. Il est démontré qu'une diacétylation s'est produite sur le noyau de 2-déoxystreptamine d'après le diagramme de fragmentation, ce qui confirme le fait que la trifluoracétylation a eu lieu initialement dans les positions 2', 3" et 6' de la kanamycine B. b) a treatment of the di-N-acetylated derivative with deutero-roacetic anhydride in methanol at room temperature for 24 h, followed by a reaction with a 2: 1 mixture of hexamethyldi-silazane and trimethylchlorosilane at room temperature for 24 h, gives the derivative tri-N-deuteroacetyldi-N-acetylhexa-O-trimethylsilyl volatile, m / e found 1134; the formula C ^ gHgeNjOj jD9Si6 requires m / e = 1134. It is shown that a diacetylation has occurred on the nucleus of 2-deoxystreptamine from the fragmentation diagram, which confirms the fact that the trifluoroacetylation has taken place initially in the 2 ', 3 "and 6' positions of kanamycin B.

Exemple 6: Example 6:

On chauffe à 60° pendant 1 h une solution de 2,84 g de 3",6'- A solution of 2.84 g of 3 ", 6'- is heated at 60 ° for 1 h

di-N-acétylkanamycine A et 1,305 g de 3-benzyl-6-(S)-dihydroxy-méthyltétrahydro-l,3-oxazine-2-one dans 28,4 ml de diméthylfor-mamide, puis on la refroidit à 30°. On ajoute 0,189 g de borohy-drure de sodium et on agite le mélange pendant encore 1 h. On 5 ajoute 1;0 ml d'eau, on laisse reposer le mélange pendant environ 16 h, puis on chasse le solvant sous pression réduite. On chauffe le résidu avec 28,4 ml de solution d'hydroxyde de sodium 3N à 80° pendant 4 h et, après refroidissement, on ajuste le pH du mélange réactionnel à 5,7 par addition d'acide chlorhydrique concentré. 10 On fait descendre la solution brute de l-N-[(S)-4-benzylamino-2-hydroxybutyljkanamycine A et de 3-N-[(S)-4-benzylamino-2-hydroxybutyljkanamycine A sur une colonne de résine d'échange ionique Amberlite CG-50 (forme NH4+) en effectuant l'élution, d'abord avec de l'eau pour éliminer les substances minérales, puis 15 avec de l'ammoniaque 0,15M pour isoler le mélange brut d'ami-noglycosides. Les fractions désirées sont évaporées et le résidu est dissous dans un mélange de 15 ml de méthanol, 15 ml d'acide acétique et 15 ml d'eau et hydrogéné par passage sur un catalyseur à 30% de palladium fixé sur du carbone, à 60° et sous pression de 4,2 bars pendant 16 h. On filtre la solution et on chasse le solvant sous pression réduite. On purifie le produit par Chromatographie par échange ionique comme indiqué ci-dessus et on obtient ainsi 0,5 g de l-N-[(S)-4-amino-2-hydroxybutyl]kanamy-cine A identique à un échantillon de référence. di-N-acetylkanamycin A and 1.305 g of 3-benzyl-6- (S) -dihydroxy-methyltetrahydro-1,3-oxazine-2-one in 28,4 ml of dimethylfor-mamide, then it is cooled to 30 ° . 0.189 g of sodium borohydrid is added and the mixture is stirred for a further 1 h. 1.0 ml of water is added, the mixture is allowed to stand for about 16 h, then the solvent is removed under reduced pressure. The residue is heated with 28.4 ml of 3N sodium hydroxide solution at 80 ° for 4 h and, after cooling, the pH of the reaction mixture is adjusted to 5.7 by addition of concentrated hydrochloric acid. The crude solution of 1N - [(S) -4-benzylamino-2-hydroxybutyljkanamycin A and 3-N - [(S) -4-benzylamino-2-hydroxybutyljkanamycin A is lowered onto an exchange resin column ionic Amberlite CG-50 (NH4 + form) by eluting, first with water to remove the mineral substances, then with 0.15M ammonia to isolate the crude mixture of aminoglycosides. The desired fractions are evaporated and the residue is dissolved in a mixture of 15 ml of methanol, 15 ml of acetic acid and 15 ml of water and hydrogenated by passage over a catalyst at 30% palladium fixed on carbon, at 60 ° and under pressure of 4.2 bars for 16 h. The solution is filtered and the solvent is removed under reduced pressure. The product is purified by ion exchange chromatography as indicated above, to give 0.5 g of l-N - [(S) -4-amino-2-hydroxybutyl] kanamy-cine A identical to a reference sample.

20 20

R R

Claims (3)

622 528 622,528 REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation de composés de formule : CLAIMS 1. Process for the preparation of compounds of formula: 0 0 dans laquelle: in which: R est un groupe amino ou hydroxyle, et R1 est un groupe alkyle inférieur pouvant éventuellement être substitué avec des groupes hydroxyle ou avec des groupes amino ou avec les deux, procédé caractérisé par le fait qu'il consiste à alkyler un composé de formule : R is an amino or hydroxyl group, and R1 is a lower alkyl group which can optionally be substituted with hydroxyl groups or with amino groups or with both, process characterized in that it consists in alkylating a compound of formula: fonctions amino, à neutraliser le dérivé O-acylé ainsi formé pour effectuer la migration intramoléculaire 0->N du groupe axyle, à éliminer tous groupes O-acyle restants et à isoler le dérivé sélectivement N-protégé de formule (II). amino functions, to neutralize the O-acylated derivative thus formed to effect the intramolecular migration 0-> N of the axyl group, to eliminate all remaining O-acyl groups and to isolate the N-protected derivative of formula (II). 5 3. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé par le fait que R3 est un groupe trifluoracétyle et le composé II est de préférence la 3-N-benzyl-3",6'-di-N-trifluoracétylkanamycine A, la 3",6'-di-N-trifluoracétylkanamycine A ou la 2',3",6'-tri-N-trifluo-racétylkanamycine B. 3. Method according to claim 1, characterized in that R3 is a trifluoroacetyl group and the compound II is preferably 3-N-benzyl-3 ", 6'-di-N-trifluoroacetylkanamycin A, 3", 6'-di-N-trifluoracetylkanamycin A or 2 ', 3 ", 6'-tri-N-trifluo-racetylkanamycin B. io 4. Procédé suivant la revendication 1, caractérisé par le fait que R3 est un groupe acétyle et le composé de formule II est, de préférence, la 3",6'-di-N-acétylkanamycine A. 4. Process according to claim 1, characterized in that R3 is an acetyl group and the compound of formula II is preferably 3 ", 6'-di-N-acetylkanamycin A. 5. Procédé suivant l'une des revendications 1 à 4, caractérisé par le fait que R1 est un groupe (S)-4-amino-2-hydroxybutyle. 15 6. Application suivant la revendication 2, caractérisée par le fait que le dérivé à fonctions amino entièrement protégées est un dérivé benzyloxycarbonylique ou tertiobutyloxycarbonylique ou la tétra-N-benzyloxycarbonylkanamycine A ou la penta-N-benzyloxycarbonylkanamycine B. 5. Method according to one of claims 1 to 4, characterized in that R1 is a group (S) -4-amino-2-hydroxybutyl. 6. Application according to claim 2, characterized in that the derivative with fully protected amino functions is a benzyloxycarbonylic or tert-butyloxycarbonyl derivative or tetra-N-benzyloxycarbonylkanamycin A or penta-N-benzyloxycarbonylkanamycin B. 20 7. Application suivant la revendication 2 ou la revendication 6, caractérisée par le fait que l'agent acylant est un agent d'acétylation, de préférence l'anhydride acétique ou l'anhydride trifluoracétique, ou l'agent acylant est le chloroformiate d'éthyle ou le chloroformiate de méthyle, l'agent acylant étant de préfé-2s rence l'acide trifluoracétique lorsque le sel d'acide trifluoracétique de la kanamycine A, de la kanamycine B ou de la 3-N-benzylka-namycine A est utilisé. 7. Application according to claim 2 or claim 6, characterized in that the acylating agent is an acetylating agent, preferably acetic anhydride or trifluoroacetic anhydride, or the acylating agent is chloroformate d ethyl or methyl chloroformate, the acylating agent preferably being trifluoroacetic acid when the trifluoroacetic acid salt of kanamycin A, kanamycin B or 3-N-benzylka-namycin A is used. 8. Application suivant la revendication 6, caractérisée par le fait que les groupes benzyloxycarbonyle sont éliminés par hydro-30 génolyse catalytique. 8. Application according to claim 6, characterized in that the benzyloxycarbonyl groups are eliminated by catalytic hydro-genolysis. U3NH U3NH dans laquelle: in which: R2 est un atome d'hydrogène ou un groupe benzyle; R2 is a hydrogen atom or a benzyl group; R3 est un groupe acyle labile protégeant la fonction amino, et R4 est un groupe hydroxyle ou un groupe NHR3, pour former un composé de formule: R3 is a labile acyl group protecting the amino function, and R4 is a hydroxyl group or an NHR3 group, to form a compound of formula: