Verfahren zur Gewinnung von Hefe aus kohlehydrathaltigen Lösungen. Es ist bereits vorgeschlagen worden, bei der Gewinnung von Hefe durch Züchtung von Mikroorganismen in kohlehydrathaltigen Lö sungen, insbesondere Holzzuckerwürzen, Sul fitablaugen und deren auf Alkohol, Butanol oder andere Gärungserzeugnisse verarbeiteten Schlempen als Hefe-Eiweissbildner, Mikro organismen der Gattung Monilia zu ver wenden.
Es wurde nun festgestellt, dass innerhalb dieser Gattung Monilia, welche eine grössere Gruppe von Mikroorganismen umfasst, eine Untergruppe, nämlich die Candida-Arten, eine Sonderstellung einnehmen, insofern, als diese Candida-Arten für die eingangs er wähnten Zwecke der Verwendung als Eiweiss bildner in kohlehydrathaltigen Lösungen be sonders geeignet sind. Dies gilt vor allem für die Candida-Arten Candida tropicalis, Can dida pelliculosa, Candida pulcherrima und Candida Guilliermondi, von welchen wie derum Candida tropicalis sich als ganz be- sonders geeignet erwiesen und zu den besten Ergebnissen geführt hat.
Die bei Verwendung von Mikroorganis men der Gattung Monilia für die eingangs erwähnten Zwecke als Hefe-Eiweissbildner in kohlehydrathaltigen Lösungen erzielbaren Vorteile treten bei einem Arbeiten mit Can dida-Arten, vor allem Candida tropicalis, be sonders deutlich in Erscheinung. Dies gilt vor allem hinsichtlich der Lebenskräftigkeit, der Möglichkeit einer Dauerzüchtung mit ein und demselben Stamm und der Eignung zur Verarbeitung von Pentosen. Die Candida- Arten sind ferner auch befähigt, Nicht- Kohlehydrate, wie z. B. Essigsäure und andere organische Säuren, Aldehyde und Alkohole, in vorteilhafter Weise als Nähr stoff quelle auszunutzen.
Wie weiterhin gefunden wurde, können mit Vorteil auch Mischungen von mindestens zwei verschiedenen Candida-Arten oder Mi schungen solcher mit andern Mikroorganis men, vorzugsweise Torulopsis-Arten, verwen- det werden. So wurden sehr gute Ergebnisse z. B. mit Mischungen von 8025 Candida tro- picalis und 20% Torula utilis, mit Mischun gen von 90% Candida tropicalis und 10% Candida pulcherrima und mit Mischungen von 75% Candida tropicalis, 10ö Candida Guilliermondi, 5% Candida pulcherrima, und in % Torula utilis erzielt.
Ferner wurde durch Versuche festgestellt. dass unter vergleichbaren Bedingungen in pentosehaltigen Lösungen z. B. Candida tro- picalis gegenüber Torula utilis die 1, 7fache Vermehrungsgeschwindigkeit besitzt.
Von den besonderen Vorteilen der erfin dungsgemäss zu verwendenden Candida-Arten für die eingangs genannten Zwecke seien noch die folgenden hervorgehoben: 1. Sie besitzen ausgesprochen dicke Zell- wände und können daher nur sehr schwer mechanisch geschädigt oder von Bakterien angegriffen werden.
2. Sie zeigen eine grosse Widerstands fähigkeit gegen physikalische Änderungen, wie Änderungen des PH oder der Temperatur oder der Zusammensetzung der Nährmedien.
3. Sie besitzen eine grosse Vermehrungs geschwindigkeit gegenüber andern Wuchs hefen.
4. Die bei ihrer Verwendung erzeugte Trockenhefe besitzt nur einen geringen Eigengeruch.
Die für die Zwecke der Erfindung mit besonderem Vorteil zu verwendenden Arten Candida tropicalis, Candida pelliculosa, Can dida pulcherrima und Candida Guilliermondi sind durch folgende Eigenschaften gekenn zeichnet Candida tropicalis Makroskopische Eigenschaften: A) Auf Würzeagar: Kolonien fast weiss, infolge der Vielfalt der Zellformen sehr ver schieden aussehend. Im allgemeinen sind junge Kulturen glatt, matt oder etwas glän zend, rundlich und konvex. Nach 2-3 Wo chen wird die Mitte meist unregelmässig und faltet sich. Eine ringförmige, glatte Zone um schliesst die Mitte, und um diese herum wächst Pseudomyzel in den Agar. Manche (sogenannte "membranöse") Stämme falten sich von vornherein, andere (sogenannte "kremöse") Stämme bleiben lange Zeit glatt lind glänzend.
13) In Nährlösungen und Würze bildet sich Bodensatz, jedoch weder Ring noch Decke. (Ausnahme: stark membranöseStämme können Decke bilden.) Mikroskopische Eigenschaften auf festen und in flüssigen Nährböden: In den ersten Tagen finden sich meist Einzelzellen, dann auch kleinere Zellverbände. in denen die Zell- grösse allmählich mehr und mehr divergiert. Später tritt Pseudomyzel hinzu mit sehr ver schiedenen grossen, oft recht langen Zellen und schliesslich noch grosse runde Chlamydo- sporen und Pseudokonidien, so dass das Mikro bild mehr uneinheitlich ist.
Nach einem Tag in Würze bei 28 C in Winge-Ranviersehen Kammern sind die Zel len oval, gegen den luftnahen Rand der kul- tur dagegen länglich. Sie messen 5,2 X 8 bezw. 3.3 X 8.2 . Gärung: -: Galaktose, Glukose, Saccharose, Maltose; -: Laktose, Raffinose.
Assimilation der Zucker (nach der auxano- graphischen Methode @ii Lodder): +: Galaktose, Glukose, Saccharose, Maltose/Xylose; -: Laktose, Raffinose.
Assimilation der Sticksloff verbindungen (gleiche Methode): +: Ammonsulfat, Tryptophan, Pepton, G T Ivkokoll, Asparagin; -: Kaliuninitrat, Harnstoff.
Besondere Kennzeichen: Vielförmigkeit. Vergärun- - der Zucker (siehe oben), Nicht- assiniilierbarkeit von Kaliumnitrat undHarn- stoff unter den Bedingungen der angegebenen Methode.
Selbstverständlich kommen auch Stämme von Candida tropiealis vor, die in dem einen oder dem andern Merkmal von den gegebenen Beschreibungen abweichen. Die schon er wähnte Vielförmigkeit der Zellen bedingt ge rade bei dieser Art öfter Abweichungen. Die biologische Beurteilung muss stets nach dem Gesamtbild erfolgen.
Candida pelliculosa Makroskopische Eigenschaften: A) Auf Würzeagar: Kolonien gelblich weiss, matt oder schwach glänzend, ganz glatt, rund, flach, Rand glatt, selten wenig Pseudomyzel.
B) In Nährlösungen und Würze: Nach einigen Tagen weisse, dichte, staubige Decke, kein Ring, etwas Bodensatz.
Mikroskopische Eigenschaften: Meist ein zelne Zellen, manchmal kleine, lockere Ver bände von Sprosszellen. Zellen weniger dick wandig als bei den andern Arten. Die Grösse der Zellen beträgt nach einem Tag in Würze bei 28 3,9 X 4,2 , sind also ziemlich klein, kurzoval bis rund. Sporenbildung selten, wie bei Candida tropicalis. Gärung: +: Galaktose, Glukose, Maltose, Saccha- rose (sämtlich stark); -: Laktose, Raffinose. Zuckerauxanogramm (Methode nach Lod- der): +: Galaktose, Glukose, Maltose, Saccha- rose/Xylose; -: Laktose, Raffinose.
Stickstoffauxanogramm (gleiche Methode): +: deutlich positiv nur für Pepton, alle andern sind meist negativ, zuweilen ganz schwach positiv sind: Ammon sulfat, Kaliumnitrat, Glykokoll und Asparagin.
Stickstoffauxanogramme sind meist undeutlich.
Candida pulcherrima (Synonym mit Torulopsis pulcherrima, umbenannt von Windisch in Candida p. we gen der starken Fähigkeit zur Pseudomyzel- Bildung.) Makroskopische Eigenschaften: A) Auf Würzeagar: 1. Kremöse Stämme: Kolonien weiss, in manchen Fällen rosa bis rot, glänzend, glatt, im Alter warzig wer dend durch Sekundärkolonien, in der Mitte erhaben rundlich, Rand jedoch lappig ge kerbt, sonst jedoch glatt, kein Pseudomyzel.
2. Membranöse Stämme: Kolonien gelb lich, stark gefältelt, runzlieh-netzig bis auf gewölbt gefaltet, unregelmässig erhaben. Form und Rand unregelmässig, fast lauter wirres Pseudomyzel.
B) In Nährlösung und Würze: Bodensatz und Ring, nach Wochen einige dünne Haut inseln.
Mikroskopische Eigenschaften: Bei den kremösen Stämmen Zellen einzeln oder zu wenigen, oval, ziemlich gross, nach einem Tag in Würze bei 28 Zellen 6,5 X 7,9,u läng lich 3,8 X 8,1 und 4,9 X 12 . In älteren Kulturen fallen grosse runde Zellen von 8 bis 20 auf mit je einem grossen runden Öl- tropfen: Askusmutterzellen, die Askus mit vier Sporen bilden. Nach Entlassung der vier Sporen hängt die leere Askushaut oft noch an der Mutterzelle wie bei Candida tropicalis. Bei den membranösen Stämmen üppiges, dik- kes und grosszelliges Pseudomyzel. Gärung: +: Glykose; -: alle andern.
Zuckerauxanogramm (nach Lodder): +: Galaktose, Glukose, Saccharose, Mal tose; -: Laktose, Raffinose/Xylose. Stickstoffauxantogramm (gleiche Methode): +: Ammonsulfat, Tryptophan, Pepton, Harnstoff, Asparagin; -: Kaliumnitrat, Glykokoll, Histidin. Candida Guilliermondi Makroskopische Eigenschaf ten: <I>A) -Auf</I> Würzeagar: <I>1.</I> Kremöse <I>Stämme:</I> Kolonien weiss, glänzend, glatt, etvas er haben, rund. Rand glatt. Kein Pseudomyzel. 2.
Membranöse Stämme: Kolonien weiss, meist von vornherein Fältelung und Krater bildung, dadurch Aufwölbung in der Mitte, aussen Pseudomyzel-Hof.
B) In Nährlösung und Würze: Auf der Oberfläche Inseln, die manchmal zu einer Decke verwachsen. Bodensatz.
Mikroskopische Eigenschaften: Zellen viel förmig, alle Übergänge von fast runden Sprosszellen bis zu 60 bis 80 langen Zellen, die Bruchtücke von Pseudomyzel darstellen. Zellen einzeln oder in engen Verbänden aller Grössen. Daneben sprossend Blastosporen und dünnes Pseudomyzel von unter 3 . Zellen in Würze nach einem Tag bei 2S C in der Mitte der Winge-Ranvierschen Kammer durchschnittlich 4,5 y 4,8 , in Richtung auf den Rand Neigung zur Pseudomyzcl-Bildung, daher Zellen länger 3,9 X 7.2 Am Rand selbst wirr verzweigtes Pseudomyzel das fast in Myzel übergeht, Zellgrösse sehr schwan kend. oft geringer, bei manchen Zellen nur 2-3 X 3-6 .
Gärung: +: Galaktose (schwach), Glukose, Saccharose, Raffinose (schwach); -: Maltose, Laktose.
Zuckerauxanogramm (Menthode nach Lod- der): +: Galaktose, Glukose. Saccharose, Raf finose; -: Maltose, Laktose/Nylose (Maltose manchmal schwach positiv). Stickstoffauxanogramm (gleiche Methode): +: Ammonsulfat, Tryptophari, Pepton.
Glykokoll, Asparagin; -: Kaliumnitrat.
Histidin und Harnstoff sind un sicher.
Weiterhin ist, wie gefunden wurde, eine neue Candida Art, nämlich Candida arborea, für den angegebenen Zweck besonders brauch bar, ist sie doch selbst der oben genannten Candida tropicalis noch überlegen, insbeson dere bei der Verarbeitung von Zellstoff ablaugen und deren auf Alkohol, Butanol oder andere Gärungserzeugnisse verarbeite ten Schlempen. Bei Candida arborea handelt es sich unm einen Organismus, von welchem eine Beschreibung im einschlägigen Schrift tum nicht ermittelt werden konnte.
Es sei daher im nachstehenden eine genaue Beschrei btung dieses Organismus gegeben: Eigenschaf ten der Canrdida arborea: A_l) Auf Würzeagar: Kolonien weisslich bis gelblichgranx im Alter etwas nachdun kelnd, griessig, rund, oft radial etwas gefäl- telt, mässig konvex in der Mitte stumpflkege- lig, Rand zunächst glatt, später gekerbt. Junge Kolonien ohne Pseudomyzel, nach Monaten manchmal schvacber Pseudonmyzel- Hof. Kein Psexidomyzel im Agar.
<I>B) In</I> N iihrtiisrnagen <I>und</I> Würze bildet sich starleer Bodensatz, jedoch weder Ring noch Decke.
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<I>3Iilrosl-o,rüs(,he <SEP> Eigc>risrhaffeir <SEP> auf <SEP> festen</I>
<tb> <I>oder <SEP> irr <SEP> flüssigen <SEP> Niihrbiideii:
</I> <SEP> Schon <SEP> nach
<tb> ein <SEP> oder <SEP> zwei <SEP> Tagen <SEP> herrscht <SEP> Bildung <SEP> von
<tb> Sprossverbänden <SEP> vor, <SEP> Ketten <SEP> von <SEP> ovalen,
<tb> bleichartigen <SEP> Zellen. <SEP> die <SEP> sich <SEP> stark <SEP> verzwei gen, <SEP> und <SEP> zwar <SEP> oft <SEP> nur <SEP> nach <SEP> einer <SEP> Seite, <SEP> wo durch <SEP> besenartige <SEP> Verbinde <SEP> entstehen, <SEP> die
<tb> sehr <SEP> charakteristisch <SEP> sind. <SEP> Ältere <SEP> Verbände
<tb> sind <SEP> dicht <SEP> und <SEP> fest <SEP> und <SEP> infolge <SEP> zentrifuga ler <SEP> Entfaltung <SEP> unübersichtlich, <SEP> wenig <SEP> Ein zelzellen.
<SEP> Die <SEP> Zellen <SEP> sind <SEP> ziemlich <SEP> gleich mässi@- <SEP> gross, <SEP> nach <SEP> einem <SEP> Tag <SEP> in <SEP> Würze <SEP> bei
<tb> ?S <SEP> 4,4X <SEP> 7,6 <SEP> ,er, <SEP> wenige <SEP> rundlichere <SEP> 4,4 <SEP> bis
<tb> 6,\x <SEP> u <SEP> 4,9-7,4,c(.
<tb> <I>Gasrun <SEP> g:</I>
<tb> -f-: <SEP> Gluleosc. <SEP> Sarcharose, <SEP> Rnffinose;
<tb> -: <SEP> Galaktose, <SEP> Maltose, <SEP> Laktose.
<tb> <I>_lssi.initatioir <SEP> derZucker <SEP> ()iacir.der-aitxaiio-</I>
<tb> <I>!tiap@[email protected] <SEP> Methode <SEP> ron <SEP> Lodder):</I>
<tb> i-: <SEP> Glukose, <SEP> Saccharose, <SEP> Maltose. <SEP> Raf finose/Kylose <SEP> ;
<tb> -: <SEP> Galaletose, <SEP> Laktose.
<tb> <I>_tssintil(ctinri <SEP> der <SEP> Stickstof <SEP> f <SEP> tlerWudangen</I>
<tb> <I>(gleiche <SEP> Methode):</I>
<tb> -f-:
<SEP> Axnmonsulfat. <SEP> Pepton. <SEP> KNO:" <SEP> Glyko holl, <SEP> Harnstoff, <SEP> Asparagin:
<tb> -: <SEP> Tryptophan, <SEP> Histidin. Die physiologischen Eigenschaften glei chen einerseits Torulopsis (= Torula) utilis, anderseits Candida Guilliermondi. Die mor phologischen Eigenschaften jeder jungen Kultur unterscheiden Candida arborea un verkennbar von beiden. Die Candida arborea bildet, auch wenn sieimBelüftungsverfahren gezüchtet wird, grosse Sprossverbände und fast keine Einzelzellen. Darum ist diese Hefe art besonders leicht direkt auf Filtern ab trennbar.
Selbstverständlich kommen auch Stämme von Candida arborea vor, die irr einem oder andern Merkmal von den gegebenen Be schreibungen abweichen.
Die biologische Beurteilung muss stets nach dem Gesamtbild erfolgen.
Die Candida arborea ist auch befähigt, Nicht-Kohlehydrate, wie z. B. Essigsäure und andere organische Säuren, Aldehyde und Al kohole, in vorteilhafter Weise als Nährstoff quelle auszunutzen.
Ausf ührungsbeispiele: 1. 5000 Teile Schlempe mit 0,8 % redu- 25 zierender Substanz werden mit Schwefelsäure auf PH 3,9 gebracht und nach Zusatz von
EMI0005.0003
0,6 <SEP> Teilen <SEP> Bittersalz,
<tb> 0,7 <SEP> " <SEP> Ätzkali,
<tb> 15,0 <SEP> " <SEP> Ammonsulfat zum Kochen erhitzt, worauf der Nieder schlag abfiltriert wird. In einem Gärgefäss werden 200 Teile einer Stellhefe der Art Candida arborea (die laut der Analyse 23,5 Trockensubstanz mit 45,4% Eiweiss hat) in 250 Teilen Wasser und 1000 Teilen der Würze gleichzeitig mit 0,03 Teilen techni scher Phosphorsäure eingebracht und gelüf tet. Nach einer Stunde beginnt der konti nuierliche Zulauf der restlichen 4000 Teile Würze zusammen mit 0,12 Teilen techni scher Phosphorsäure, der nach 7 Stunden beendet ist.
Nach weiteren 5 Stunden Reife zeit wird die Hefe von der Würze getrennt, gewogen und analysiert. Die Ausbeute be trägt 303 Teile abgepresster Hefe mit 23,0% Trockensubstanz und 51,2% Eiweiss in der Hefetrockensubstanz, der Zuwachs 22,6 Teile Hefetrockensubstanz = 14,3 Teile Eiweiss. Aus einem Liter Schlempe werden somit 2,9 g Eiweiss erhalten. Aus dem verschwun denen Stickstoff der Würze errechnet sich eine Ausbeute von 2,75 g Eiweiss auf einen Liter Schlempe.
2. 1000 Teile einer Buchenholzsulfit ablauge, die auf Butanol vergoren und durch Destillation entgeistet ist (Butanolschlempe), werden mit der nötigen Schwefelsäuremenge auf pH 4,8-5,0 eingestellt, mit einem wäs serigen Auszug von 2 Teilen Superphosphat, 0,15 Teilen Bittersalz (MgS047H20), 0,2 Tei len KCl, 1,7 Teilen Ammonsulfat versetzt und aufgekocht. Nach der Filtration enthält diese verhefungsfertige Schlempe 8,4g pro Liter Zucker.
In einem Gärgefäss werden 710 Teile die ser Schlempe im Zulaufverfahren bei pH 5,0 verheft, wozu man 20 Teile Stellhefe der Art "Candida arborea" verwendet. Die Zu laufzeit beträgt 7 Stunden, die Gesamtgär- zeit 10 Stunden. Nach Beendigung der Ver- hefung werden 34 Teile Hefe geerntet; die zugewachsene Hefemenge beträgt also 14 Teile. Bei einem Eiweissgehalt in der Hefe trockensubstanz von 50 % errechnet sich die Eiweissausbeute zu 28 %, bezogen auf einge brachte reduzierende Substanz.
3. 1000 Teile Buchenholzsulfitablauge, die ca. 4,3 % reduzierende Substanz enthalten und die durch bekannte Verfahren (z. B. durch Lüftung) verhefungsfähig gemacht worden sind, werden mit
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8 <SEP> Teilen <SEP> Superphosphat,
<tb> 0,65 <SEP> Bittersalz,
<tb> 1,2 <SEP> Ätzkali,
<tb> 8,75 <SEP> Ammoniakwasser
<tb> (mit <SEP> 20 <SEP> % <SEP> Stickstoff) und so viel Kalk versetzt, dass ein pH von 4,6-4,8 eingestellt wird.
Nach der Abtren nung der Feststoffe läuft diese Würze kon tinuierlich einem mit der nötigen Stellhefe der Art Candida arborea beschickten Gär- apparat zur kontinuierlichen Verhefung zu. Nach entsprechender Verweilzeit der Würze im Gärapparat wird sie kontinuierlich, ent sprechend dem Zulauf abgezogen und von der Hefe abgetrennt. Der hefefreie, verlhefte Ablauf enthält noch etwa 0,6-0,7% redu zierende Substanz und 0,0001-C,001% an organischen Stickstoff. Die Eiweissausbeute liegt also bei etwa 2)6-27%, berechnet auf eingebrachte reduzierende Substanz.
Process for the production of yeast from solutions containing carbohydrates. It has already been proposed to use in the production of yeast by cultivating microorganisms in carbohydrate-containing solutions, especially wood sugar spices, Sul fitablaugen and their stills processed on alcohol, butanol or other fermentation products as yeast protein builders, microorganisms of the Monilia genus.
It has now been found that within this genus Monilia, which includes a larger group of microorganisms, a subgroup, namely the Candida species, occupy a special position insofar as these Candida species are used as protein formers for the purposes mentioned at the beginning are particularly suitable in solutions containing carbohydrates. This applies above all to the Candida species Candida tropicalis, Can dida pelliculosa, Candida pulcherrima and Candida Guilliermondi, of which, like Candida tropicalis, it has proven to be particularly suitable and has led to the best results.
The advantages that can be achieved when using microorganisms of the genus Monilia for the purposes mentioned above as yeast protein formers in carbohydrate-containing solutions are particularly evident when working with Can dida species, especially Candida tropicalis. This is especially true with regard to vigor, the possibility of permanent breeding with one and the same strain and the suitability for processing pentoses. The Candida species are also able to use non-carbohydrates such as. B. acetic acid and other organic acids, aldehydes and alcohols, advantageously as a nutrient source.
As has also been found, mixtures of at least two different Candida species or mixtures of such with other microorganisms, preferably Torulopsis species, can also be used with advantage. So very good results were achieved e.g. B. with mixtures of 8025 Candida tropicalis and 20% Torula utilis, with mixtures of 90% Candida tropicalis and 10% Candida pulcherrima and with mixtures of 75% Candida tropicalis, 10ö Candida Guilliermondi, 5% Candida pulcherrima, and in% Torula utilis scored.
It was also established through experiments. that under comparable conditions in pentose-containing solutions z. B. Candida tropicalis compared to Torula utilis has 1.7 times the multiplication rate.
Of the particular advantages of the Candida species to be used according to the invention for the purposes mentioned above, the following should also be emphasized: 1. They have extremely thick cell walls and are therefore very difficult to mechanically damage or attack by bacteria.
2. They show great resistance to physical changes, such as changes in pH or temperature or the composition of the nutrient media.
3. They have a high rate of multiplication compared to other growth yeasts.
4. The dry yeast produced when using it has only a slight odor of its own.
The species Candida tropicalis, Candida pelliculosa, Can dida pulcherrima and Candida Guilliermondi to be used with particular advantage for the purposes of the invention are characterized by the following properties Candida tropicalis Macroscopic properties: A) On wort agar: Colonies almost white, very much due to the variety of cell shapes looking different. In general, young cultures are smooth, dull or slightly shiny, rounded and convex. After 2-3 weeks, the middle usually becomes irregular and folds. A ring-shaped, smooth zone closes the middle, and around this pseudomycelium grows in the agar. Some (so-called "membranous") trunks fold in advance, others (so-called "cremous") trunks remain smooth and shiny for a long time.
13) Sediment forms in nutrient solutions and wort, but neither a ring nor a blanket. (Exception: strongly membranous trunks can form a blanket.) Microscopic properties on solid and in liquid nutrient media: In the first few days there are mostly single cells, then also smaller cell clusters. in which the cell size gradually diverges more and more. Later, pseudomycelia appear with very different, large, often quite long cells and finally large, round chlamydospores and pseudoconidia, so that the micrograph is more inconsistent.
After a day in wort at 28 C in Winge-Ranviersehen chambers, the cells are oval, but elongated towards the edge of the culture near the air. They measure 5.2 X 8 respectively. 3.3 X 8.2. Fermentation: -: galactose, glucose, sucrose, maltose; -: lactose, raffinose.
Assimilation of sugars (using the auxographic method @ii Lodder): +: galactose, glucose, sucrose, maltose / xylose; -: lactose, raffinose.
Assimilation of the nitrogen compounds (same method): +: ammonium sulfate, tryptophan, peptone, G T ivocoll, asparagine; -: Potassium nitrate, urea.
Special features: multiformity. Fermentation - the sugar (see above), inassembly of potassium nitrate and urea under the conditions of the specified method.
Of course, there are also strains of Candida tropiealis that deviate from the descriptions given in one or the other characteristic. The already mentioned multiformity of the cells is due to this type of frequent deviations. The biological assessment must always be based on the overall picture.
Candida pelliculosa Macroscopic properties: A) On wort agar: Colonies yellowish white, dull or slightly shiny, completely smooth, round, flat, edge smooth, rarely a little pseudomycelium.
B) In nutrient solutions and seasoning: After a few days, white, dense, dusty cover, no ring, some sediment.
Microscopic properties: mostly individual cells, sometimes small, loose associations of sprout cells. Cells less thickly walled than in the other species. The size of the cells after a day in wort is 28 3.9 X 4.2, so they are quite small, short oval to round. Sporulation rare, as in Candida tropicalis. Fermentation: +: galactose, glucose, maltose, sucrose (all strong); -: lactose, raffinose. Sugar auxanogram (Lodder method): +: galactose, glucose, maltose, sucrose / xylose; -: lactose, raffinose.
Nitrogen auxanogram (same method): +: clearly positive only for peptone, all others are mostly negative, sometimes very weakly positive are: ammonium sulfate, potassium nitrate, glycocolla and asparagine.
Nitrogen auxanograms are usually indistinct.
Candida pulcherrima (synonym with Torulopsis pulcherrima, renamed from Windisch to Candida p. Because of the strong ability to form pseudomycelia.) Macroscopic properties: A) On wort agar: 1. Cremous stems: Colonies white, in some cases pink to red, shiny , smooth, becoming warty as a result of secondary colonies, raised round in the center, but with lobed, notched edge, otherwise smooth, no pseudomycelium.
2. Membrane stems: colonies yellowish in color, heavily wrinkled, wrinkled-reticulated to arched, irregularly raised. Irregular shape and edge, almost all confused pseudomycelium.
B) In nutrient solution and seasoning: sediment and ring, after weeks some thin skin islands.
Microscopic properties: In the cremous strains cells single or too few, oval, quite large, after one day in wort in 28 cells 6.5 X 7.9, u elongated 3.8 X 8.1 and 4.9 X 12 . In older cultures, large round cells of 8 to 20 are conspicuous, each with a large round oil drop: Askus mother cells, which form askus with four spores. After the four spores have been released, the empty ascus skin often still clings to the mother cell, as in Candida tropicalis. In the membranous trunks lush, thick and large-celled pseudomycelium. Fermentation: +: glycose; -: all others.
Sugar auxanogram (according to Lodder): +: galactose, glucose, sucrose, mal tose; -: lactose, raffinose / xylose. Nitrogen auxantogram (same method): +: ammonium sulfate, tryptophan, peptone, urea, asparagine; -: potassium nitrate, glycocolla, histidine. Candida Guilliermondi Macroscopic Characteristics: <I> A) -On </I> Spice Agar: <I> 1. </I> Creamy <I> Stems: </I> Colonies white, shiny, smooth, some have, round . Edge smooth. No pseudomycelium. 2.
Membrane trunks: Colonies white, usually folds and craters from the start, resulting in bulging in the middle, outside a pseudomycelium halo.
B) In nutrient solution and seasoning: islands on the surface that sometimes grow together to form a blanket. Sediment.
Microscopic properties: cells are much shaped, all transitions from almost round stem cells to 60 to 80 long cells, which represent fragments of pseudomycelium. Cells individually or in close associations of all sizes. In addition, sprouting blastospores and thin pseudomycelium of less than 3. Cells in wort after one day at 2 ° C in the center of the Winge-Ranvier chamber average 4.5 and 4.8, tendency towards the edge to form pseudomycles, therefore cells longer 3.9 X 7.2 At the edge itself confusingly branched Pseudomycelium that almost transforms into mycelium, cell size fluctuates very much. often less, in some cells only 2-3 X 3-6.
Fermentation: +: galactose (weak), glucose, sucrose, raffinose (weak); -: maltose, lactose.
Sugar auxanogram (Menthode according to Lodder): +: galactose, glucose. Sucrose, refinose; -: Maltose, lactose / nylose (maltose sometimes weakly positive). Nitrogen auxanogram (same method): +: ammonium sulfate, tryptophari, peptone.
Glycocolla, asparagine; -: potassium nitrate.
Histidine and urea are unsafe.
Furthermore, as has been found, a new Candida species, namely Candida arborea, is particularly useful for the stated purpose, but it is even superior to the above-mentioned Candida tropicalis, in particular in the processing of pulp and leach it on alcohol, butanol or other fermentation products processed stills. Candida arborea is an organism of which a description in the relevant literature could not be determined.
A precise description of this organism is therefore given below: Properties of Canrdida arborea: A_l) On wort agar: Colonies whitish to yellowish-gray with age, slightly darkening, gritty, round, often radially slightly puckered, moderately convex in the center obtuse conical, edge initially smooth, later notched. Young colonies without pseudomycelium, sometimes after months a pseudo mycelium halo becomes vacuous. No psexidomycelium in the agar.
<I> B) In </I> N urtiisrnagen <I> and </I> wort rigid sediment forms, but neither ring nor cover.
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<I> 3Iilrosl-o, rüs (, he <SEP> Eigc> risrhaffeir <SEP> on <SEP> fixed </I>
<tb> <I> or <SEP> irr <SEP> liquid <SEP> nutrient biideii:
</I> <SEP> Already <SEP> after
<tb> one <SEP> or <SEP> two <SEP> days <SEP> there is <SEP> formation <SEP> of
<tb> sprout associations <SEP> before, <SEP> chains <SEP> of <SEP> oval,
<tb> pale <SEP> cells. <SEP> the <SEP> branch <SEP> heavily <SEP>, <SEP> and <SEP> although <SEP> often <SEP> only <SEP> after <SEP> a <SEP> page, <SEP> where <SEP> broom-like <SEP> connections create <SEP>, <SEP> the
<tb> are very <SEP> characteristic <SEP>. <SEP> Older <SEP> associations
<tb> are <SEP> tight <SEP> and <SEP> firm <SEP> and <SEP> due to <SEP> centrifugal <SEP> unfolding <SEP> confusing, <SEP> few <SEP> individual cells.
<SEP> The <SEP> cells <SEP> are <SEP> fairly <SEP> the same size @ - <SEP>, <SEP> after <SEP> a <SEP> tag <SEP> in <SEP> wort <SEP > at
<tb>? S <SEP> 4,4X <SEP> 7,6 <SEP>, er, <SEP> a few <SEP> more rounded <SEP> 4,4 <SEP> to
<tb> 6, \ x <SEP> u <SEP> 4,9-7,4, c (.
<tb> <I> Gasrun <SEP> g: </I>
<tb> -f-: <SEP> Gluleosc. <SEP> Sarcharose, <SEP> Rnffinose;
<tb> -: <SEP> galactose, <SEP> maltose, <SEP> lactose.
<tb> <I> _lssi.initatioir <SEP> derZucker <SEP> () iacir.der-aitxaiio- </I>
<tb> <I>! tiap @ iisc @ r.en <SEP> method <SEP> ron <SEP> Lodder): </I>
<tb> i-: <SEP> glucose, <SEP> sucrose, <SEP> maltose. <SEP> Raf finose / Kylose <SEP>;
<tb> -: <SEP> galaletose, <SEP> lactose.
<tb> <I> _tssintil (ctinri <SEP> der <SEP> nitrogen <SEP> f <SEP> tlerWudangen </I>
<tb> <I> (same <SEP> method): </I>
<tb> -f-:
<SEP> Axmon sulfate. <SEP> peptone. <SEP> KNO: "<SEP> Glyko holl, <SEP> urea, <SEP> asparagine:
<tb> -: <SEP> tryptophan, <SEP> histidine. The physiological properties are the same as Torulopsis (= Torula) utilis on the one hand and Candida Guilliermondi on the other. The morphological properties of each young culture unmistakably distinguish Candida arborea from both. The Candida arborea forms, even if it is cultivated using the ventilation method, large shoot groups and almost no individual cells. This is why this type of yeast is particularly easy to separate directly on filters.
Of course, there are also strains of Candida arborea that deviate from the given descriptions in one or another characteristic.
The biological assessment must always be based on the overall picture.
The Candida arborea is also able to use non-carbohydrates such as B. acetic acid and other organic acids, aldehydes and alcohols to be used advantageously as a source of nutrients.
Exemplary embodiments: 1. 5000 parts of vinasse with 0.8% reducing substance are brought to pH 3.9 with sulfuric acid and, after adding
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0.6 <SEP> share <SEP> Epsom salt,
<tb> 0.7 <SEP> "<SEP> caustic potash,
<tb> 15.0 <SEP> "<SEP> Ammonium sulfate is heated to the boil, whereupon the precipitate is filtered off. 200 parts of a yeast of the species Candida arborea (which, according to the analysis, is 23.5 dry matter with 45.4 % Protein) in 250 parts of water and 1000 parts of the wort at the same time with 0.03 parts of technical phosphoric acid and aerated. After one hour the continuous supply of the remaining 4000 parts of wort begins together with 0.12 parts of technical phosphoric acid, which ends after 7 hours.
After a further 5 hours of ripening, the yeast is separated from the wort, weighed and analyzed. The yield be 303 parts of pressed yeast with 23.0% dry matter and 51.2% protein in the yeast dry matter, the increase 22.6 parts yeast dry matter = 14.3 parts protein. 2.9 g protein are obtained from one liter of stillage. From the vanished nitrogen in the wort, a yield of 2.75 g of protein per liter of stillage is calculated.
2. 1000 parts of a beechwood sulfite waste liquor that has fermented on butanol and defrosted by distillation (butanol slurry) are adjusted to pH 4.8-5.0 with the necessary amount of sulfuric acid, with an aqueous extract of 2 parts of superphosphate, 0.15 Parts of Epsom salt (MgS047H20), 0.2 parts of KCl, 1.7 parts of ammonium sulfate are added and the mixture is boiled. After filtration, this ready-to-use stillage contains 8.4g per liter of sugar.
In a fermentation vessel, 710 parts of this stillage are attached in the feed method at pH 5.0, for which 20 parts of yeast of the type "Candida arborea" are used. The running time is 7 hours, the total fermentation time 10 hours. After the fermentation has ended, 34 parts of yeast are harvested; the added amount of yeast is therefore 14 parts. With a protein content in the yeast dry matter of 50%, the protein yield is calculated to be 28%, based on the reducing substance introduced.
3. 1000 parts of beechwood sulphite waste liquor, which contain approx. 4.3% reducing substance and which have been made capable of devastating by known methods (e.g. by ventilation), are added
EMI0005.0014
8 <SEP> parts <SEP> superphosphate,
<tb> 0.65 <SEP> Epsom salt,
<tb> 1,2 <SEP> caustic potash,
<tb> 8.75 <SEP> ammonia water
<tb> (with <SEP> 20 <SEP>% <SEP> nitrogen) and so much lime added that a pH of 4.6-4.8 is set.
After the solids have been separated off, this wort is continuously fed to a fermentation apparatus that is fed with the necessary yeast of the Candida arborea species for continuous fermentation. After the wort has stayed in the fermenter for a certain period of time, it is continuously drawn off according to the feed and separated from the yeast. The yeast-free, stitched process still contains about 0.6-0.7% reducing substance and 0.0001-C.001% organic nitrogen. The protein yield is therefore around 2) 6-27%, calculated on the reducing substance introduced.