CA2658076C - Metallic ion chelating agents, method for producing them and use of same - Google Patents

Abstract

The present invention pertains to compounds apt to be used as metallic ion chelating agents or as de-pollutant agents, responding to the following general formula (I): (see formula I) as well as to precursor compounds of formula (II) and to marked compounds in formula (III) deriving compounds from formula (I). The object of present invention is also the use of compounds (I), (II), or (III) as medication, as well as their use for diagnosis, prevention and treatment of neurodegenerative diseases such as Wilsons and Alzheimers diseases.

Description

AGENTS CHELATANTS D'IONS METALLIQUES, LEURS PROCEDES DE
PREPARATION ET LEURS APPLICATIONS
La présente invention concerne de nouveaux composés de formule (I) susceptibles d'être utilisés comme agents chélatants d'ions métalliques ou comme agents dépolluants, de nouveaux composés de formule (II) susceptibles d'être utilisés comme agents précurseurs des composés de formule (I), ainsi que des composés marqués de formule (III), l'utilisation des composés de formule (I), (II) ou (III) en tant que médicament, ainsi que leur utilisation pour le diagnostic, la prévention et le traitement de maladies neurodégénératives, telles que les maladies de Wilson et d'Alzheimer, et d'intoxications avec des ions métalliques tels que les ions argent, cadmium, cobalt, cuivre, mercure, nickel, or, plomb et zinc.
Les maladies liées à des dérèglements du transport du cuivre, comme la maladie de Wilson, conduisent à une accumulation du cuivre dans le foie, qui est l'unique organe capable de l'excréter. Ainsi, bien que le cuivre soit un élément essentiel à la vie, il peut, à l'état libre, induire des réactions d'oxydation de type Fenton, et par conséquent se révéler extrêmement toxique.
Plus particulièrement, la maladie de Wilson est une maladie génétique liée à
une déficience d'un transporteur du cuivre conduisant à une accumulation du cuivre dans différentes zones de l'organisme (jusqu'à 20 fois les taux normaux), et se manifestant par des atteintes du foie et du système nerveux. Des troubles psychiques peuvent également apparaître avec des modifications du caractère, conduisant à une hyperémotivité avec une grande labilité de l'humeur, des syndromes dépressifs et des états de psychose.
La maladie de Wilson est induite par la mutation du gène ATP7B, qui code pour une protéine transmembranaire de type ATPase, intervenant dans le transport intra-et extra-cellulaire du cuivre, permettant ainsi de réguler la concentration de ce métal et son excrétion dans la bile. Si la protéine est déficiente, le métal s'accumule alors à
l'intérieur des cellules.
L'atteinte du foie précède en règle générale l'atteinte neurologique de quelques années.
Les signes neurologiques ou psychiatriques concernent près de 50% des patients atteint de la maladie de Wilson. L'imagerie par résonance magnétique (IRM) montre des lésions de plusieurs structures cérébrales, même en l'absence de tout signe clinique et l'importance de celles-ci semble corréler avec le degré d'avancement de la maladie.
Dans les cas gravissimes d'hépatites fulminantes ou dans les atteintes graves essentiellement hépatiques, une transplantation du foie peut être envisagée. CHELATING AGENTS OF METAL IONS, METHODS OF THEIR
PREPARATION AND THEIR APPLICATIONS
The present invention relates to novel compounds of formula (I) likely to be used as metal ion chelating agents or as agents depolluting agents, new compounds of formula (II) capable of being used as agents precursors compounds of formula (I), as well as labeled compounds of formula (III), the use of compounds of the formula (I), (II) or (III) as a medicinal product and their use for the diagnosis, prevention and treatment of neurodegenerative diseases, such as Wilson and Alzheimer's diseases, and intoxications with ions Metals such as silver ions, cadmium, cobalt, copper, mercury, nickel, gold, lead and zinc.
Diseases related to disturbances of copper transport, such as the disease of Wilson, lead to an accumulation of copper in the liver, which is the only able organ to excrete it. So, although copper is a vital part of life, he may, in the free state, induce Fenton-type oxidation reactions, and therefore prove to be extremely toxic.
In particular, Wilson's disease is a genetic disease related to a deficiency of a copper carrier leading to copper build-up in different areas of the body (up to 20 times the normal rates), and demonstrating by liver and nervous system disorders. Psychic disorders can also appear with character modifications, leading to a hyperemotivity with a great lability of mood, depressive syndromes and states of psychosis.
Wilson's disease is induced by the mutation of the ATP7B gene, which encodes a ATPase transmembrane protein, involved in the intra-and extra-copper cell, thereby regulating the concentration of this metal and its excretion in the bile. If the protein is deficient, then the metal accumulates inside the cells.
Liver involvement usually precedes the neurological involvement of a few years.
Neurological or psychiatric signs affect almost 50% of patients has Wilson's disease. Magnetic resonance imaging (MRI) shows lesions of several brain structures, even in the absence of any sign clinical and the importance of these seems to correlate with the degree of progress of the sickness.
In very serious cases of fulminant hepatitis or in serious cases liver-related liver transplantation may be considered.

2 A l'heure actuelle, il existe des traitements dont l'objectif consiste à
éradiquer la toxicité du cuivre accumulé dans l'organisme.
Ces traitements doivent être suivis à vie, et ne doivent jamais être interrompus. Ils sont à base de médicaments chélateurs diminuant l'absorption du cuivre dans l'organisme, ou augmentant l'excrétion de ce métal. Les traitements doivent être soumis à une surveillance périodique, de façon à repérer l'apparition d'effets secondaires indésirables.
Les traitements existants emploient différents principes actifs, tels que :
- la D-pénicillamine (Pen), qui augmente l'excrétion urinaire du cuivre (G.
J.
Brewer, DDT, 2005, 10, pp. 1103-1109). La D-pénicillamine a une efficacité
reconnue mais ses effets secondaires tendent à la faire remplacer par d'autres molécules. De plus, un certain nombre d'articles récents font état d'une aggravation de la maladie de Wilson par la D-pénicillamine et suggèrent de restreindre sa prescription dans cette indication ;
- la triéthylènetétramine (Trien), qui est un chélateur du cuivre souvent mieux toléré que la D-pénicillamine ;
l'anion de l'ammonium tétrathiomolybdate (TTM), absorbé avec l'alimentation, qui se fixe avec les ions cuivre dans le tube digestif, empêchant ainsi leur absorption ;
- le zinc active la production de protéines, les métallothionéines, qui vont fixer le cuivre dans les cellules de la paroi de l'intestin (entérocytes) empêchant le passage de cet ion dans la circulation sanguine (B. Sarkar, Chem. Rev., 1999, 99, 2535-2544).
Actuellement, ce sont les médicaments à base de D-pénicillamine, dont le mécanisme d'action est encore mal connu, qui sont le plus utilisés. Par sa fonction SI-I, la D-pénicillamine peut :
- chélater le cuivre et le zinc, mais aussi le mercure et le plomb, et augmenter leur excrétion urinaire, réduire les ponts disulfures de certaines molécules : collagène, fibres élastiques, immunoglobulines, et ainsi modifier leur activité biologique, - se combiner à d'autres molécules soufrées, en particulier la cystéine, en formant des ponts disulfures.
Il existe également d'autres médicaments, dont l'action est à rapprocher de la D-pénicillamine en raison de la ressemblance de leurs propriétés pharmacologiques :
le pyritinol, qui est une molécule symétrique formée de deux parties liées par un pont disulfure. Dans l'organisme, le pyritinol est coupé en deux molécules comportant chacune un groupement -SI-I. Toutefois, le pyritinol a été utilisé dans le traitement de la 2 At present, there are treatments whose objective is to eradicate the copper toxicity accumulated in the body.
These treatments should be followed for life, and should never be interrupted. They are based on chelating drugs decreasing the absorption of copper in the body, or increasing the excretion of this metal. Treatments must be submitted to a oversight periodically, so as to identify the occurrence of undesirable side effects.
Existing treatments use different active ingredients, such as:
- D-penicillamine (Pen), which increases the urinary excretion of copper (G.
J.
Brewer, DDT, 2005, 10, pp. 1103-1109). D-penicillamine is effective recognized but its side effects tend to have it replaced by other molecules. Of plus, a certain number of recent articles report worsening of Wilson's disease by the D-penicillamine and suggest to restrict its prescription in this indication;
Triethylenetetramine (Trien), which is a chelator of copper often better tolerated as D-penicillamine;
the anion of ammonium tetrathiomolybdate (TTM), absorbed with the diet, which binds with the copper ions in the digestive tract, thus preventing their absorption;
zinc activates the production of proteins, metallothioneins, which will set the copper in the cells of the intestinal wall (enterocytes) preventing the passage of this ion in the bloodstream (B. Sarkar, Chem Rev., 1999, 99, 2535-2544).
Currently, these are the drugs containing D-penicillamine, whose mechanism action is still poorly known, which are the most used. By its function SI-I, D-penicillamine can :
- chelate copper and zinc, but also mercury and lead, and increase their urinary excretion, reduce the disulfide bridges of certain molecules: collagen, fibers elastic, immunoglobulins, and thus modify their biological activity, - to combine with other sulfur molecules, in particular cysteine, in forming disulfide bridges.
There are also other drugs, the action of which is to be compared with D-penicillamine because of the similarity of their properties pharmacological:
pyritinol, which is a symmetrical molecule made up of two parts linked by a disulfide bridge. In the body, pyritinol is cut into two molecules comprising each a group -SI-I. However, pyritinol has been used in the treatment of the

3 polyarthrite rhumatoïde avec des indications et des effets indésirables du même type que ceux de la D-pénicillamine, la tiopronine, qui est utilisée dans le traitement de fond de la polyarthrite rhumatoïde et de la lithiase cystinique.
Toutefois, les effets indésirables de la D-pénicillamine et des médicaments ayant un mode d'action similaire sont assez nombreux :
cutanéo-muqueux précoces et peu graves : érythème, stomatite, cutanéo-muqueux tardifs et graves :
toxicoderm ie, pemphigus, dermatomyosite, -hématologiques : thrombopénie, leucopénie, agranulocytose, anémie hémolytique, justifiant la surveillance hématologique des malades traités, digestifs : agueusie, rénaux : protéinurie.
Les métaux sont également considérés comme des cibles thérapeutiques d'intérêt pour le diagnostic, la prévention et le traitement de maladies neurodégénératives telle que la maladie d'Alzheimer, pour laquelle la dérégulation de l'homéostasie du zinc et du cuivre joue un rôle critique. Le cuivre Cu(11) est complexé et réduit en cuivre Cu(I) par la protéine APP et le peptide A13, le cuivre Cu(I) s'accumulant alors dans les plaques amyloïdes avec le fer et le zinc (E. Gaggelli, H. Kozlowski, D. Valensin, G. Valensin, Chem. Rev., 2006, 106, pp. 1995-2044).
Le cuivre peut se présenter sous deux degrés d'oxydation différents : le cuivre Cu(I) ayant un degré d'oxydation +I, stable en milieu réducteur, et le cuivre Cu(II) ayant un degré
d'oxydation +II, stable en milieu oxydant. Le cuivre présent dans les cellules humaines est principalement du cuivre Cu(I).
Des molécules, autres que la D-pénicillamine (Pen), peuvent donc également être utilisées pour chélater le cuivre in vivo. Il s'agit, par exemple, de l'acide 2,3-dimercaptosuccinique (DMSA) et de l'acide 2,3-dimercapto- 1 -propanesulfonique (DMPS) (O. Andersen, Chem. Rev., 1999, 99, pp. 2683-2710), du 2,3-dimercaptopropanol (BAL), de la triéthylènetétramine (Trien), de l'anion de l'ammonium de tétrathiomolybdate (TTM) (G. J.
Brewer, F. K. Askari, J. Hepatol., 2005, 42, pp. S13-S21) et de l'acide éthylène-diamine-tétraacétique (EDTA), répondant aux formules semi-développées suivantes : 3 rheumatoid arthritis with indications and side effects of same type as those D-penicillamine, tiopronine, which is used in the long-term treatment of rheumatoid arthritis rheumatoid and cystine lithiasis.
However, the side effects of D-penicillamine and drugs having a similar mode of action are quite numerous:
cutaneo-mucous membrane early and mild: erythema, stomatitis, Mucocutaneous, late and severe:
toxicoderm ie, pemphigus, dermatomyositis, -hematologic: thrombocytopenia, leukopenia, agranulocytosis, anemia haemolytic, justifying haematological monitoring of treated patients, digestive: ageusia, renal: proteinuria.
Metals are also considered therapeutic targets of interest for diagnosis, prevention and treatment of neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, for which deregulation of zinc homeostasis and copper plays a critical role. Cu (11) copper is complexed and reduced to Cu (I) copper by the APP protein and the A13 peptide, the Cu (I) copper then accumulating in the amyloid plaques with iron and zinc (E. Gaggelli, H. Kozlowski, D. Valensin, G. Valensin, Chem Rev, 2006, 106, pp. 1995-2044).
Copper can be in two different degrees of oxidation: the copper Cu (I) having a degree of oxidation + I, stable in a reducing medium, and copper Cu (II) having a degree oxidation + II, stable in an oxidizing medium. Copper present in cells human is mainly Cu (I) copper.
Molecules, other than D-penicillamine (Pen), can therefore also to be used to chelate copper in vivo. This is, for example, acid 2,3 dimercaptosuccinic acid (DMSA) and 2,3-dimercapto-1-propanesulfonic acid (ASD) (O. Andersen, Chem Rev., 1999, 99, pp. 2683-2710), 2,3-dimercaptopropanol (BAL), from triethylenetetramine (Trien), ammonium anion tetrathiomolybdate (TTM) (GJ
Brewer, FK Askari, J. Hepatol., 2005, 42, pp. S13-S21) and acid ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA), corresponding to the following semi-developed formulas:

4 COOH ( HS
HS SH HS SH SH

Pen DMSA DMPS BAL
COOH

HOOC
Trien TTM HOOC'j EDTA
Ces composés sont des agents chélatants connus du cuivre Cu(I) et/ou du cuivre Cu(I1), bloquant l'absorption intestinale du cuivre.
Toutefois, ces composés conduisent à des effets secondaires indésirables, et ne permettent pas le traitement de patients pour lesquels les maladies ont été
détectées à un stade déjà avancé (détection non précoce), et pour lesquels il existe une accumulation intracellulaire importante du cuivre.
De plus, certains agents chélatants, tels que le Trien et l'EDTA, sont des agents chélatants très forts, chélateurs de nombreux ions métalliques, et dont l'un des principaux inconvénients est leur manque de sélectivité.
Ainsi, il existe aujourd'hui un besoin en agents chélatants plus sélectifs, en particulier à l'égard du cuivre Cu(I) intracellulaire, et surtout moins toxiques, dont les effets secondaires seraient moins violents que ceux des molécules actuellement utilisées.
Les inventeurs ont trouvé de manière surprenante que les nouveaux composés de l'invention décrits ci-après apparaissent comme une meilleure alternative, en particulier en terme de sélectivité, par rapport aux molécules précédemment développées, pour le diagnostic, la prévention et le traitement de maladies neurodégénératives et d'intoxications avec des ions métalliques tels que les ions argent, cadmium, cobalt, cuivre, mercure, nickel, or, plomb et zinc.
Ainsi, la présente invention concerne de nouveaux composés de formule (I) susceptibles d'être utilisés comme agents chélatants d'ions métalliques ou comme agents dépolluants, de nouveaux composés de formule (II) susceptibles d'être utilisés comme agents précurseurs des composés de formule (I) de l'invention, et des composés marqués de formule (III). La présente invention a également pour objet, l'utilisation des composés de formule (I), , (II) ou (III) en tant que médicament, ainsi que leur utilisation pour le diagnostic, la prévention et le traitement de maladies neurodégénératives, telles que les maladies de Wilson et d'Alzheimer.
Les composés de l'invention peuvent ainsi être utilisés pour le diagnostic et la 4 COOH ( HS
HS SH HS SH SH

Pen DMSA DMPS BAL
COOH

HOOC
Trien TTM HOOC'j EDTA
These compounds are known chelating agents of Cu (I) copper and / or copper Cu (I1), blocking the intestinal absorption of copper.
However, these compounds lead to undesirable side effects, and born not allow the treatment of patients for whom the diseases have been detected at a stage already advanced (non-early detection), and for which there is a intracellular accumulation important copper.
In addition, some chelating agents, such as Trien and EDTA, are agents very strong chelants, chelators of many metal ions, and one of which of the main disadvantages is their lack of selectivity.
Thus, there is today a need for more selective chelating agents, particular with respect to intracellular Cu (I) copper, and especially less toxic, whose Side effects would be less violent than those of the molecules currently used.
The inventors have surprisingly found that the novel compounds of the invention described below appear as a better alternative, in particular particular in term of selectivity, compared to previously developed molecules, for the diagnosis, prevention and treatment of neurodegenerative diseases and poisoning with metal ions such as silver ions, cadmium, cobalt, copper, mercury, nickel, gold, lead and zinc.
Thus, the present invention relates to novel compounds of formula (I) may be used as metal ion chelating agents or as agents depolluting agents, novel compounds of formula (II) which may be used as agents precursors of the compounds of formula (I) of the invention, and marked with formula (III). Another subject of the present invention is the use of compounds of formula (I), , (II) or (III) as a medicinal product, as well as their use for the diagnosis, prevention and the treatment of neurodegenerative diseases, such as Wilson and Alzheimer.
The compounds of the invention can thus be used for the diagnosis and the

5 prévention de maladies neurodégénératives chez des personnes présentant un risque plus important, du fait de facteurs génétiques ou environnementaux.
La présente invention a donc pour objet de nouveaux composés de formule (I) pouvant être utilisés comme agents chélatants d'ions métalliques, lesdits composés de formule (I) étant dérivés de l'acide nitrilotriacétique (NTA) ou de l'acide 1,4,7-triazacyclononane-1,4,7-triacétique (NOTA), le NTA et le NOTA étant déjà connus pour complexer des ions métalliques dans de nombreuses applications industrielles ou médicales.
Le NTA est un acide aminotricarboxylique dont la formule empirique est C6H9N06, qui peut se lier à des ions métalliques, tels que les ions des métaux alcalins ou alcalino-terreux, les ions métalliques des blocs d, f et p de la classification périodique de Mendeleiev, et plus particulièrement les ions Ca2+, Cu2+, Mg2+ ou Fe3+, pour former des complexes hydrosolubles. Cet agent chélatant est habituellement utilisé pour séquestrer les ions calcium et magnésium dans les détergents (en remplacement des phosphates), dans le traitement de l'eau pour prévenir l'entartrage, mais aussi pour la fabrication de textiles ou la production de papier, ce composé étant facilement biodégradable et facilement dégradable par réaction chimique ou photochimique. Le NTA est également connu en tant que chélateur thérapeutique pour le traitement d'intoxications par le manganèse ou pour le traitement de surcharges en fer (Kaur G., Hasan S. K. et Srivastava R. C., Arch. Toxicol., 45 : 203 (1980) ;
Pollack S. et Ruocco S., Blood, 57(6) : 1117 (1981)).
Le NOTA est un composé organique cyclique de formule C12H21N306, qui dérive du cyclononane dans lequel trois groupes CH2 équidistants ont été remplacés par des groupes N-CH2-COOH. Le NOTA est un ligand hexadenté, ce qui signifie qu'il possède 6 atomes susceptibles de se lier à des ions métalliques. Cet agent chélatant est également très utilisé
dans les compositions détergentes et pour le traitement de l'eau.
Ainsi, le premier objet de la présente invention concerne les composés de formule (I) suivante : 5 prevention of neurodegenerative diseases in individuals with a risk more important because of genetic or environmental factors.
The subject of the present invention is therefore new compounds of formula (I) up be used as chelating agents of metal ions, said compounds of formula (I) being derived from nitrilotriacetic acid (NTA) or 1,4,7-1,4,7-triazacyclononane triacetic (NOTE), NTA and NOTA are already known to complex ions in many industrial or medical applications.
NTA is an aminotricarboxylic acid whose empirical formula is C6H9N06, which can bind to metal ions, such as alkali metal ions or alkaline earth, the metal ions of the blocks d, f and p of the classification periodical of Mendeleiev, and more particularly the Ca2 +, Cu2 +, Mg2 + or Fe3 + ions, to form complex water-soluble. This chelating agent is usually used to sequester calcium ions and magnesium in detergents (replacing phosphates), in the Treatment of water to prevent scaling, but also for the manufacture of textiles or the production of paper, this compound being easily biodegradable and easily degradable by reaction chemical or photochemical. NTA is also known as a chelator therapeutic for the treatment of manganese intoxication or for the treatment of iron surcharges (Kaur G., Hasan SK and Srivastava RC, Arch Toxicol., 45: 203 (1980);
Pollack S. and Ruocco S., Blood, 57 (6): 1117 (1981)).
NOTE is a cyclic organic compound of formula C12H21N306, which derives from cyclononane in which three equidistant CH2 groups have been replaced by N groups CH2-COOH. The NOTA is a hexadentate ligand, which means that it has 6 carbon likely to bind to metal ions. This chelating agent is also very used in detergent compositions and for the treatment of water.
Thus, the first object of the present invention relates to formula (I) next :

6 SH

Ri R'i R"2 ________________________________ ( NH
NH R"10 HS 0 \SH
R'2 (I) dans lesquels le groupement A représente :
= soit un atome d'azote, = soit un cycle répondant à la formule ci-dessous, et dans lequel la substitution se fait sur les atomes d'azote :
N
N¨

et dans lesquels :
- les radicaux RI, R'1 et R"1, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué ayant 1 à 12 atomes de carbone, les radicaux RI, R'1 et R"1 étant de préférence des atomes d'hydrogène, - les radicaux R2, R'2 et R"2, identiques ou différents, sont choisis parmi les groupements -OH, -OR, -NHR et -NRR' dans lesquels R et R', identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué ayant 1 à 12 atomes de carbone, les radicaux R2, R'2.

et R"2 étant de préférence des groupements -NH2, -OH ou -OR dans lesquels R représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué ayant 1 à 12 atomes de carbone, et de manière encore plus préférée un radical éthyle. 6 SH

Ri R'i R "2 ________________________________ (NH
NH R "10 HS 0 \ SH
R'2 (I) in which the group A represents:
= either a nitrogen atom, = a cycle corresponding to the formula below, and in which the substitution done on nitrogen atoms:
NOT
NOT

and in which:
the radicals RI, R'1 and R "1, which are identical or different, represent a atom of hydrogen or an optionally substituted alkyl radical having 1 to 12 atoms of carbon, the radicals R1, R'1 and R "1 being preferably atoms hydrogen, the radicals R2, R'2 and R "2, which are identical or different, are chosen from the groups -OH, -OR, -NHR and -NRR 'in which R and R', which are identical or different, represent a hydrogen atom or an alkyl radical optionally substituted having 1 to 12 carbon atoms, the radicals R2, R'2.

and R "2 being preferably -NH2, -OH or -OR groups in which R represents a hydrogen atom or an optionally alkyl radical substituted having 1 to 12 carbon atoms, and even more preferably an ethyl radical.

7 Lorsque le groupement A des composés de formule (1) représente un atome d'azote, c'est-à-dire lorsque les composés de formule (I) de l'invention sont dérivés du NTA, ces derniers peuvent être représentés par une structure de formule (la) spécifique :
SH

HN \O
R _______________________________________ 0 R1 R'1 R"2i _______________________________ ( NH
NH R'10 \

R.2 (la) Lorsque les composés de l'invention répondent à la structure (1,), les radicaux R2, R'2 et R"2 peuvent avantageusement être des groupements -NH2, -OH ou des groupements -OR
dans lesquels R représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué ayant 1 à 12 atomes de carbone. De manière encore plus préférée, R
est un groupement éthyle.
Le procédé de préparation des composés de formule (1a) de l'invention peut alors être généralisé selon le schéma réactionnel suivant : 7 When the group A of the compounds of formula (1) represents an atom nitrogen, that is to say when the compounds of formula (I) of the invention are derived NTA, these can be represented by a specific structure of formula (la) :
SH

HN \ O
R _______________________________________ 0 R1 R'1 R "2i _______________________________ (NH
NH R'10 \

A.2 (the) When the compounds of the invention correspond to the structure (1), the radicals R2, R'2 and R "2 may advantageously be -NH 2, -OH groups or -OR groupings in which R represents a hydrogen atom or an alkyl radical eventually substituted having 1 to 12 carbon atoms. Even more preferably, R
is a ethyl group.
The process for preparing the compounds of formula (1a) of the invention may then to be generalized according to the following reaction scheme:

8 _____________________________________ S-(groupe protecteur) _____________________________________ S-(groupe protecteur) 1 H2N ___________________ R
CO%
HOOC )---COOH
) ________ N ________________________ S-(groupe protecteur) R"1 )Ri 1H2N
HOOC COR"2 Couplage peptidique S-(groupe protecteur) R"2) ___________ ( NH
NH RIO __________________ \
(groupe protecteur)-S S-(groupe protecteur) Déprotection du soufre Hydrolyse SH S-(groupe protecteur) R"21_ R1R0 0 ¨ R'1 R1 R'1 NH
( ir-NH
NH
HS 0R ___ SH (groupe protecteur)-S 0 S-(groupe protecteur;
(la) OH
Déprotection du soufre SH
OH

R'1 0 0 N¨S,/_ HO > NH
NH R"1 OH
(la) dans laquelle R2, R'2 et R"2 représentent un groupement -OH 8 _____________________________________ S- (protecting group) _____________________________________ S- (protecting group) 1 H2N ___________________ R
CO%
HOOC) --- COOH
) ________ N ________________________ S- (protecting group) R "1) Ri 1H2N
HOOC COR "2 Peptide coupling S- (protecting group) R "2) ___________ (NH
NH RIO __________________ (protecting group) -S S- (protecting group) Deprotection of sulfur Hydrolysis SH S- (protecting group) R "21_ R1R0 0 ¨ R'1 R1 R'1 NH
(ir-NH
NH
HS 0R ___ SH (protecting group) -S 0 S- (protecting group;
(la) OH
Deprotection of sulfur SH
OH

R'1 0 0 N¨S, / _ HO> NH
NH R "1 OH
(la) in which R2, R'2 and R "2 represent a group -OH

9 Les groupes protecteurs des fonctions thiols sont bien connus de l'homme du métier, et peuvent être choisis parmi ceux mentionnés dans l'ouvrage de référence Protective groups in Organic Synthesis de T. W. Greene et P. G. M. Wuts, 3ème édition, Wiley, 1999. Les groupes protecteurs les plus préférés sont choisis parmi les groupements triphénylméthane -C(C6H5)3, terbutyle -C(CH3)3, thio-terbutyle -S-C(CH3)3, 3-nitro-2-pyridinesulfonyle (Npys) et acétamidométhyle -CH2NHCOCH3, chacun de ces groupements ayant un mode de déprotection qui lui est propre tel que décrit dans la référence précédemment citée.
La présente invention concerne également un procédé de préparation des composés de formule (fa) comprenant les étapes suivantes :
(i) réaction d'un équivalent d'acide nitrilotriacétique (NTA) avec trois équivalents d'un dérivé de la cystéine de formule :
____________________________________ S-(groupe protecteur) I-12N __________________________ en présence d'un solvant polaire, tel que le diméthylformamide, le dichlorométhane, le chloroforme, le méthanol et l'éthanol, de préférence à une température comprise entre -10 C et 30 C pendant une durée comprise typiquement entre 12 et 48 heures, (ii) de façon optionnelle, hydrolyse de la fonction -COR2 du produit obtenu lors de l'étape (i) en fonction acide par addition d'une base forte, telle que l'hydroxyde de lithium (Li0H), la soude (NaOH), la potasse (KOH), la quantité de base forte ajoutée étant de préférence égale à quatre équivalents, (iii) déprotection de la fonction -S-(groupe protecteur) en fonction thiol -SH, ladite déprotection pouvant être réalisée par addition d'un acide fort en large excès, tel que l'acide trifluoroacétique lorsque le groupe protecteur est le triphénylméthane C(C6H5)3, de préférence à une température comprise entre 20 C et 40 C pendant une durée comprise typiquement entre 15 minutes et 1 heure.
Lorsque le groupement A des composés de formule (I) représente un cycle dérivé
du triazacyclononane, c'est-à-dire lorsque les composés de formule (I) de l'invention sont dérivés du NOTA, ils peuvent être représentés par une structure de formule (lb) spécifique :

¨ d SH
_..____Z:t2 HN

RZ
N"--------\ Ri N-----rNH
N os o.------\H
-- '2 Rn2 / \R"i R
NH
HS
(lb) Lorsque les composés de l'invention répondent à la structure (Ib), les radicaux R2, R'2 et R"2 peuvent avantageusement être des groupements -NH2, -OH ou des groupements -OR
5 dans lesquels R représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué ayant 1 à 12 atomes de carbone. De manière encore plus préférée, R
est un groupement éthyle.
Le procédé de préparation des composés de formule (Lb) de l'invention peut alors être généralisé selon le schéma réactionnel suivant (lorsque R1 = R'1 = R"1) :
Ri 0 Ri 0 ________ S-(groupe protecteur) > l< S-(groupe protecteur) ./ + H2N
Formation d'amide Rb NH¨
Rb Ra COR2 ________________ y où:
- Ra est sélectionné parmi les atomes d'halogène, de préférence les atomes de chlore ou de brome, les groupements hydroxyles -OH, -000Ra, dans lesquels Ra, représente un groupement alkyle ayant 1 à 12 atomes de carbone, Ra, étant de préférence un groupement méthyle ou éthyle, ¨ Rb est un groupe partant sélectionné parmi les atomes d'halogène, de préférence les atomes de chlore ou de brome, les groupements tosylates tels que le paratoluènesulfonate, et les groupements mésylates tels que le méthanesulfonate et le trifluorométhanesulfonate.

-1 __ <
Rb NH S-(groupe protecteur) R.1 0 , 1 Rb __ NH S-(groupe protecteur) NH-------\ IR1 0 (s, NH 1 _< S-(groupe protecteur) Ni + Rb . NH
COR"2 H
Substitution nucléophile r S-(groupe protecteur) HN
12T¨
Nr-----\ R'1 (N N------NH
N___) S-(groupe protecteur) Ru2 NH R"I
(groupe protecteur)-S
Déprotection du soufre y SH

HN
¨r Ri N-------\ R'1 (s, ¶--V

0 ----- \SH
R"2 NH R"1 i.-- R'2 HS
La présente invention concerne également un procédé de préparation des composés de formule (lb) comprenant les étapes suivantes :

(i) réaction d'un équivalent d'une molécule RbCHR1C(0)Ra, RbCHR'iC(0)Ra et RbCHR"iC(0)Ra (R1, R'1, R"1, R. et Rb étant tels que définis ci-dessus) avec un équivalent d'un dérivé de la cystéine de formule :
_____________________________ S-(groupe protecteur) I-12N __________________ , un équivalent d'un dérivé de la cystéine de formule:
_____________________________ S-(groupe protecteur) H2N ____________________ COR' 2 et un équivalent d'un dérivé de la cystéine de formule:
_____________________________ S-(groupe protecteur) COR" 2 dans lesquels R2, R'2 et R"2 sont tels que définis ci-dessus, en présence d'une base faible, telle que l'hydrogénocarbonate de potassium (KHCO3), l'hydrogénocarbonate de sodium (Na2CO3), le carbonate de potassium (K2CO3), le carbonate de sodium (Na2CO3) et les amines tertiaires comme la diisopropyléthylamine MCI-13)2HC)2-N-CH2CH3) ou la triéthylamine (N(CH2CI-13)3), et en milieu solvant, ledit solvant étant choisi parmi les solvants polaires tels que le dichlorométhane, le chloroforme, l'acétate d'éthyle, l'acétonitrile, le diméthylformamide et l'eau, de préférence à une température comprise entre -10 C et 10 C pendant une durée comprise typiquement entre 30 minutes et 2 heures, (ii) réaction d'un équivalent de 1,4,7-triazacyclononane (TON) avec un équivalent d'un dérivé bromo-acétamide obtenu lors de l'étape (i), de formule :

> ___________________ ,/< _____ S-(groupe protecteur) Rb NH--<

, 12a un équivalent d'un dérivé bromo-acétamide obtenu lors de l'étape (i), de formule :
R'1 0 Rb N
./<H-- __________ S-(groupe protecteur) COR' 2 ,et un équivalent d'un dérivé bromo-acétamide obtenu lors de l'étape (i), de formule :
R"1 0 _________________________________________________________ S-(groupe protecteur) Rb NH--COR" 2 dans lesquelles Rb est un atome de brome, en présence d'une base faible, telle que l'hydrogénocarbonate de potassium (KHCO3), l'hydrogénocarbonate de sodium (Na2CO3), le carbonate de potassium (K2003), le carbonate de sodium (Na2003) et les amines tertiaires comme la diisopropyléthylamine (((CH3)2HC)2-N-CH2CH3) ou la triéthylamine (N(CH2CH3)3), et en milieu solvant, ledit solvant étant choisi parmi le dichlorométhane, le chloroforme, l'acétate d'éthyle, l'acétonitrile et le diméthylformamide, (iii) déprotection de la fonction -S-(groupe protecteur) en fonction thiol -SH, ladite déprotection étant réalisée par addition d'un acide fort en large excès, tel que l'acide trifluoroacétique lorsque le groupe protecteur est le triphénylméthane C(C6H5)3, de préférence à une température comprise entre 20 C et 40 C pendant une durée comprise typiquement entre 15 minutes et 1 heure.
Un autre objet de l'invention concerne l'utilisation des composés de formule (I) de l'invention comme agents chélatants des ions métalliques de la classification périodique de Mendeleiev, plus préférentiellement comme agents chélatants des ions mous et intermédiaires tels que définis dans R. G. Pearson, J. Am. Chem.
Soc., 1963, vol. 85, pp. 3533-3539, et encore plus préférentiellement comme agents chélatants des ions Ag(I), Cd(II), Co(11), Cu(I), Hg(11), Ni(II), Au(I), Pb(II) et Zn(II), et plus particulièrement des ions cuivre Cu(I) intracellulaires.
Une autre utilisation possible des composés de formule (I) de l'invention est leur utilisation comme agents dépolluants pour dépolluer les eaux contaminées par des métaux.
Lorsque les composés de formule (I) de l'invention sont utilisés comme agents dépolluants, la dépollution est alors de préférence réalisée en milieu réducteur. La valeur du pH limite du milieu dépend de l'ion métallique à complexer. Ainsi, pour les ions Hg(II) et Cu(I) le pH du milieu réducteur est de préférence supérieur ou égal à I, et pour les ions Zn(II), Pb(II) et Cd(II) le pH du milieu réducteur est de préférence supérieur ou égal à 4 ou 6.
La présente invention concerne également des composés susceptibles d'être utilisés comme agents précurseurs des composés de formule (I), répondant à la formule (II) suivante :
S ¨R3 R'i R"2 _____ ( NH

\
R"3¨S 0 S ¨R'3 R'2 (Il) dans lesquels le groupement A, les radicaux Ri, R'1, R"1, R2, R'2 et R"2 ont la même signification que ci-dessus, et dans lesquels :
les radicaux R3, R'3 et R"3, identiques ou différents, permettent de protéger les agents précurseurs tout en présentant des propriétés de complexation masquées, et représentent un groupement -S-W ou -S-E-L, où:
S est un atome de soufre, W est un radical alkyle éventuellement substitué ayant 1 à 12 atomes de carbone, E est un bras espaceur pouvant être sélectionné parmi les groupements alkyles éventuellement substitués ayant I à 12 atomes de carbone, et les I

polyols tels que le polyéthylène glycol ayant de préférence 1 à 8 motifs oxyéthylène 0E, ,/ L est un ligand biologique, et de préférence un ligand de cellules hépatiques ou neuronales, sélectionné parmi les sucres tels que le glucose, le galactose et le N-acétylgalactose.
Ainsi, les composés de formule (H) de l'invention utilisés comme agents précurseurs peuvent également être assimilés à des prodrugs présentant des propriétés de complexation masquées via leurs fonctions thiols masquées.
Le procédé de préparation des composés de formule (H) de l'invention peut être généralisé selon le schéma réactionnel suivant :
S-H S-S-E-L

Ri --= R'i Ri Ri 0 0 A -1.- 0 0 A
R"2 , __ (FV NH
NH
NH 1 0 R \
0 S H R"2- , __ ( NH
R'i 0 S-H R'2 S-E-L R'2 (II) OU
S-V S-S-E-L

H$<
HN __ 0 R _________________________________________________________ 0 Ri R'i Ri-- Ri 0 0 A * HS--L --- -R"2 ________ '' _ , ___ ( ---Sr-NH -V-E ________________ R"2 \S
1 , __ K __ S7 NH
NH R*1 0 NH Rui 0 E-L
OR \S
S-E-L R'2 S-V R'2 (Il) OU V est un groupement activateur de la formation de ponts disulfures S-S
choisi parmi les groupements tosyle, phényle, et en particulier les groupements orthonitrophényle, tolyle, et en particulier les groupements paratolyle, 2-pyridinesulfonyle, et en particulier le groupement 3-nitro-2-pyridinesulfonyle (Npys), et tout autre groupement aromatique similaire éventuellement substitué.
i Les composés de formule (II) de l'invention sont transformés en milieu réducteur en composés de formule (I), selon la réaction suivante :
s¨R3 SH

__________________ 0 milieu réducteur0 ________________________________________ > R3-H
+ R3-H + R"3-H
R'1 R'1 R"2 R"2 NH
/ ________________________________________________________ R"1 0 \ NH R'1 0 0 S¨R'3 HS 0 S¨R3 R'2 R.2 (I1) (0.

ladite réaction permettant la libération des fonctions thiols, et par conséquent la libération des agents chélatants dans l'organisme, et plus particulièrement dans les cellules ciblées.
L'agent réducteur permettant l'obtention des composés de formule (I) peut être une 9 The protecting groups of the thiol functions are well known to the man of the job, and can be chosen from those mentioned in the reference work Protective groups in Organic Synthesis by TW Greene and PGM Wuts, 3rd edition, Wiley, 1999. The most preferred protecting groups are selected from groups triphenylmethane -C (C6H5) 3, terbutyl -C (CH3) 3, thio-terbutyl -SC (CH3) 3, 3-nitro-2-pyridinesulfonyl (Npys) and acetamidomethyl -CH2NHCOCH3, each of these groups having a deprotection of its own as described in the reference cited.
The present invention also relates to a process for the preparation of composed of formula (fa) comprising the following steps:
(i) reaction nitrilotriacetic acid (NTA) equivalent with three equivalents of one derivative of cysteine of formula:
____________________________________ S- (protecting group) I-12N __________________________ in the presence of a polar solvent, such as dimethylformamide, dichloromethane chloroform, methanol and ethanol, preferably at a temperature range between -10 C and 30 C for a period typically between 12 and 48 hours (ii) optionally, hydrolyzing the -COR 2 function of the product obtained during step (i) in acidic function by addition of a strong base, such as hydroxide lithium (Li0H), soda (NaOH), potash (KOH), the amount of strong base added being preferably equal to four equivalents, (iii) deprotection of the function -S- (protecting group) in thiol function -SH, said deprotection can be achieved by adding a strong acid broadly excess, as trifluoroacetic acid when the protecting group is triphenylmethane C (C6H5) 3, preferably at a temperature between 20 C and 40 C during a typically between 15 minutes and 1 hour.
When the group A of the compounds of formula (I) represents a derived cycle of triazacyclononane, that is to say when the compounds of formula (I) of the invention are Derived from the NOTE, they can be represented by a structure of formula (lb) specific:

¨ d SH
_..____ Z: t2 HN

RZ
N "-------- \ Ri N ----- RNH
N o o .------ \ H
- '2 Rn2 / \ R "i R
NH
HS
(Ib) When the compounds of the invention correspond to structure (Ib), the radicals R2, R'2 and R "2 may advantageously be -NH 2, -OH groups or -OR groupings 5 in which R represents a hydrogen atom or an optionally alkyl radical substituted having 1 to 12 carbon atoms. Even more preferably, R
is a ethyl group.
The process for preparing the compounds of formula (Lb) of the invention may then to be generalized according to the following reaction scheme (when R1 = R'1 = R "1):
Ri 0 Ri 0 ________ S- (protecting group) > l <S-(protecting group) ./ + H2N
Amide Rb NH¨ formation Rb Ra COR2 ________________ y or:
- Ra is selected from halogen atoms, preferably chlorine or bromine, the hydroxyl groups -OH, -000Ra, in which Ra represents an alkyl group having 1 to 12 carbon atoms carbon, Ra, preferably being a methyl or ethyl group, Rb is a leaving group selected from halogen atoms, preferably the chlorine or bromine atoms, the tosylate groups such as than para-toluenesulfonate, and mesylate groups such as methanesulfonate and trifluoromethanesulfonate.

-1 __ <
Rb NH S- (protecting group) R.1 0 , 1 Rb NH NH S- (protecting group) NH ------- \ IR1 0 (s, NH 1 _ <S- (protecting group) Ni + Rb . NH
COR "2 H
Nucleophilic substitution r S- (protecting group) HN
12t Nr ----- \ R'1 (N N ------ NH
N___) S- (protecting group) Ru2 NH R "I
(protecting group) -S
Deprotection of sulfur there SH

HN
R
Ri N ------- \ R'1 (S, ¶ - V

0 ----- \ SH
R "2 NH R" 1 i .-- R'2 HS
The present invention also relates to a process for the preparation of compounds of formula (Ib) comprising the following steps:

(i) reaction of one equivalent of a molecule RbCHR1C (O) Ra, RbCHR'iC (O) Ra and RbCHR "iC (O) Ra (R1, R'1, R" 1, R1 and Rb being as defined above) with an equivalent of a cysteine derivative of formula:
_____________________________ S- (protecting group) I-12N __________________ , an equivalent of a cysteine derivative of formula:
_____________________________ S- (protecting group) H2N ____________________ COR '2 and an equivalent of a cysteine derivative of formula:
_____________________________ S- (protecting group) COR "2 in which R2, R'2 and R "2 are as defined above, in the presence a weak base, such as potassium hydrogencarbonate (KHCO3), sodium hydrogencarbonate (Na2CO3), potassium carbonate (K2CO3), sodium carbonate (Na2CO3) and tertiary amines such as diisopropylethylamine MCI-13) 2HC) 2-N-CH 2 CH 3) or triethylamine (N (CH 2 Cl-13) 3), and in a solvent medium, said solvent being chosen from polar solvents such as dichloromethane, chloroform, acetate ethyl acetate, acetonitrile, dimethylformamide and water, preferably at a temperature between -10 C and 10 C for a period of time typically between 30 minutes and 2 hours, (ii) reaction of an equivalent of 1,4,7-triazacyclononane (TON) with a equivalent of a bromoacetamide derivative obtained during step (i), formula :

> ___________________, / <_____ S- (protecting group) Rb NH - <

, 12a an equivalent of a bromoacetamide derivative obtained in step (i), of formula:
R'1 0 Rb N
./<H-- __________ S- (protecting group) COR '2, and an equivalent of a bromoacetamide derivative obtained in step (i), of formula:
R "1 0 _________________________________________________________ S- (group protective) Rb NH--COR "2 in which Rb is a bromine atom, in the presence of a weak base, such as hydrogen carbonate potassium (KHCO3), sodium hydrogencarbonate (Na2CO3), potassium carbonate (K2003), sodium carbonate (Na2003) and tertiary amines as diisopropylethylamine (((CH3) 2HC) 2-N-CH2CH3) or triethylamine (N (CH 2 CH 3) 3), and in a solvent medium, said solvent being chosen from dichloromethane, chloroform, ethyl acetate, acetonitrile and dimethylformamide, (iii) deprotection of the function -S- (protecting group) in thiol function -SH, said deprotection being carried out by adding a strong acid broadly excess, such as trifluoroacetic acid when the protecting group is the triphenylmethane C (C6H5) 3, preferably at a temperature of between 20 C and 40 C for a duration typically between 15 minutes and 1 hour.
Another subject of the invention relates to the use of compounds of formula (I) of the invention as chelating agents of the metal ions of the classification Mendeleyev periodical, more preferably as chelating agents of soft and intermediate ions as defined in RG Pearson, J. Am. Chem.
Soc., 1963, vol. 85, pp. 3533-3539, and more preferably as chelating agents Ag (I), Cd (II) ions, Co (11), Cu (I), Hg (11), Ni (II), Au (I), Pb (II) and Zn (II), and more particularly ions copper Cu (I) intracellular.
Another possible use of the compounds of formula (I) of the invention is their use as depolluting agents to clean water contaminated by metals.
When the compounds of formula (I) of the invention are used as agents depolluting agents, the depollution is then preferably carried out in a reducing medium. The value of pH limit of medium depends on the metal ion to be complexed. Thus, for the Hg (II) ions and Cu (I) the pH of reducing medium is preferably greater than or equal to I, and for the ions Zn (II), Pb (II) and Cd (II) the pH of the reducing medium is preferably greater than or equal to 4 or 6.
The present invention also relates to compounds capable of being used as precursor agents of the compounds of formula (I), corresponding to the formula (II) following:
S ¨R3 R ' R "2 _____ (NH

\
R "3¨S 0 S ¨R'3 R'2 (He) in which the group A, the radicals R 1, R '1, R "1, R 2, R' 2 and R" 2 have the same meaning as above, and in which:
the radicals R3, R'3 and R "3, which are identical or different, make it possible to protect the precursor agents while having complexation properties masked, and represent a grouping -SW or -SEL, where:
S is a sulfur atom, W is an optionally substituted alkyl radical having 1 to 12 carbon atoms carbon, E is a spacer arm that can be selected from the groupings optionally substituted alkyls having 1 to 12 carbon atoms, and I

polyols such as polyethylene glycol preferably having 1 to 8 units oxyethylene 0E, , / L is a biological ligand, and preferably a ligand of cells hepatic or neuronal, selected from sugars such as glucose, galactose and N-acetylgalactose.
Thus, the compounds of formula (II) of the invention used as agents precursors can also be treated as prodrugs with properties of masked complexation via their masked thiol functions.
The process for preparing the compounds of formula (II) of the invention may be generalized according to the following reaction scheme:
SH SSEL

Ri - = R'i Ri Ri 0 0 A -1.- 0 0 A
R "2, __ (FV NH
NH

0 SHR "2-, __ (NH
R'i 0 SH R'2 SEL R'2 (II) OR
SV SSEL

$ H <
HN __ 0 R _________________________________________________________ 0 Ri R'i R-- Ri 0 0 A * HS - L --- -R "2 ___________, ___ (--- Sr-NH -VE ________________ R" 2 \ S
1, __ K __ S7 NH
NH R * 1 0 NH Rui 0 EL
OR \ S
SEL R'2 SV R'2 (He) OR V is an activating group for the formation of SS disulfide bridges selected among the tosyl, phenyl groups, and in particular the groups orthonitrophenyl, tolyl, and in particular paratolyl, 2-pyridinesulfonyl, and especially the 3-nitro-2-pyridinesulfonyl group (Npys), and any other groups aromatic similarly substituted.
i The compounds of formula (II) of the invention are converted into medium reducer compounds of formula (I), according to the following reaction:
s¨R3 SH

__________________ 0 reducing medium0 ________________________________________> R3-H
+ R3-H + R "3-H
R'1 R'1 R "2 R "2 NH
/ ________________________________________________________ R "1 0 \ NH R'1 0 0 S¨R'3 HS 0 S¨R3 R'2 A.2 (I1) (0.

said reaction allowing the liberation of the thiol functions, and by therefore the release of chelating agents in the body, and more particularly in the cells targeted.
The reducing agent which makes it possible to obtain the compounds of formula (I) can be a

10 molécule porteuse d'une fonction thiol, telle que l'éthanedithiol (EDT), le glutathion (GSH) et le dithiotréitol (DTT), l'acide ascorbique ou un de ses sels, ou une molécule porteuse d'une fonction phosphine telle que le tris(2-carboxyéthyl)phosphine (TCEP).
Ainsi, la libération des agents chélatants se fait par réduction in vivo dans l'organisme, par exemple dans les cellules hépatiques où le glutathion, qui est présent à
environ 1 mM, 15 peut jouer le rôle de réducteur, ou par exemple dans le cerveau où
l'ascorbate, qui est présent à environ 200-400 M, peut également jouer le rôle de réducteur.
La présente invention a également pour objet des composés marqués répondant à
la formule (III) suivante :

' HN

X' 0 0 A' R"2 NH X" 0 R'2 S-R"3 S-R'3 (III) dans lesquels le groupement A' représente :
= soit un atome d'azote, = soit un cycle répondant à la formule ci-dessous, et dans lequel la substitution se fait sur les atomes d'azote :
Y Z
\ N"------\
N¨

Z"
mye Z' dans lesquels les radicaux R2, R'2 et R"2 ont la même signification que ci-dessus, et dans lesquels :
- les radicaux R3, R'3 et R"3, identiques ou différents, représentent un groupement -S-W ou -S-E-L, où:
,/ S est un atome de soufre, =.( W est un radical alkyle éventuellement substitué ayant 1 à 12 atomes de carbone, ,.( E est un bras espaceur pouvant être sélectionné parmi les groupements alkyles éventuellement substitués ayant 1 à 12 atomes de carbone, et les polyols tels que le polyéthylène glycol ayant de préférence 1 à 8 motifs oxyéthylène 0E, i L est un ligand biologique, et de préférence un ligand de cellules hépatiques ou neuronales, sélectionné parmi les sucres tels que le glucose, le galactose et le N-acétylgalactose, -les groupements X, X', X", Y, Y', Y", Z, Z' et Z", identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un marqueur, à condition qu'au moins un desdits groupements X, X', X", Y, Y', Y", Z, Z' ou Z" soit un marqueur.
On entend par marqueur toute entité susceptible d'être détectée par des moyens appropriés, les marqueurs utilisés dans le cadre de l'invention correspondant typiquement aux marqueurs utilisés par l'homme de l'art dans le domaine de la biologie pour marquer des molécules d'intérêt biologiques, notamment dans le cadre de la réalisation de diagnostic, d'études galéniques, ou encore de suivi de la métabolisation de composés actifs. Le marquage peut être de nature directe, et dans ce cas le marqueur est qualifié de marqueur direct et présente au moins une propriété physique détectable, ou le marquage peut être de nature indirecte, et dans ce cas le marqueur est qualifié de marqueur indirect et est susceptible de réagir sélectivement avec une entité tierce, cette dernière pouvant soit présenter au moins une propriété physique détectable, comme par exemple un anticorps présentant une activité
fluorescente, soit être investie dans un processus réactionnel à l'issu duquel une propriété
physique pourra être détectée, comme par exemple lorsque le produit de dégradation de l'entité peut présenter au moins une propriété physique détectable telle que de la fluorescence.
Le marquage indirect est souvent réalisé à l'aide d'anticorps ou de nanoparticules possédant une activité fluorescente. Dans ce cas, le marqueur indirect des composés de formule (III) possède une affinité pour l'entité tierce.
Ainsi, le marqueur de l'invention peut être soit une entité chimique de nature organique, soit une entité chimique de nature inorganique, telle qu'un complexe ou un cristal, ce dernier pouvant éventuellement être enrobé d'une couche organique, cette entité chimique de nature inorganique étant généralement de taille suffisamment faible, typiquement à
l'échelle nanométrique, pour ne pas perturber le système biologique dans lequel elle est introduite.
La propriété physique détectable, directement ou indirectement, peut être une réactivité spécifique vis-à-vis d'une source électromagnétique telle qu'un champ magnétique, comme par exemple par imagerie par résonance magnétique, ou vis-à-vis d'un rayonnement lumineux pouvant être focalisé, comme par exemple par imagerie par fluorescence avec les fluorophores, ou encore vis-à-vis d'un rayonnement nucléaire, comme par exemple à l'aide d'isotopes.
Les marqueurs les plus préférés sont les marqueurs directs, et plus particulièrement les fluorophores. Typiquement, il s'agit de fluorophores organiques ou de nanoparticules.
Les fluorophores utilisés dans le cadre de l'invention peuvent être des composés fluorescents aromatiques dont les transitions Tr-it sont caractérisées par des coefficients d'absorption molaires et des rendements quantiques de fluorescence élevées, lesdits fluorophores pouvant être choisis parmi la rhodamine, la fluorescéïne, la pyronine, la coumarine, la benzophénone, Panthrone, la fluorénone, la pyridine, la quinoléine, l'acridine, le naphtalène, l'anthracène, la naphtacène, la pentacène, le xanthène et leurs dérivés.
Les différentes familles de marqueurs et les différentes techniques de détection associées sont connues de l'homme de l'art et décrites dans l'ouvrage Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry, 2008, 8, 497-522. Plus spécifiquement, il est possible de se référer aux fluorophores cités dans Cytometty Part A 69A : 863-871 (2006) et aux nanoparticules mentionnées dans le document Anal. Bioanal. Chem., 384: 620-630 (2006).
Ainsi, les composés marqués de formule (III) de l'invention peuvent être utilisés pour visualiser le cheminement desdits composés dans l'organisme, par luminescence.
Un autre objet de l'invention concerne l'utilisation des composés de formule (I), (Il) ou (III) de l'invention pour leur application en tant que médicament, et notamment pour leur application en tant que médicament pour le diagnostic, la prévention et le traitement de maladies neurodégénératives, telles que les maladies de Wilson et d'Alzheimer.
Un objet supplémentaire de la présente invention concerne l'utilisation des composés de formule (1), (Il) ou (III) de l'invention pour leur application en tant que médicament pour le diagnostic, la prévention et le traitement d'intoxications avec des ions métalliques tels que les ions argent, cadmium, cobalt, cuivre, mercure, nickel, or, plomb et zinc, et encore plus préférentiellement avec les ions cuivre Cu(I) intracellulaires, les intoxications par de tels ions conduisant généralement à des inflammations sévères, des déficiences rénales, des hémorragies, des troubles neurologiques sévères du système nerveux central ;
on parle alors de saturnisme dans le cas d'intoxications par le plomb ou d'hydrargie (ou d'hydrargyrisme) dans le cas d'intoxications par le mercure.
Enfin, la présente invention a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant en tant que principe actif au moins un composé (I), (II) ou (III) tel que défini précédemment et au moins un véhicule pharmaceutiquement acceptable.

Lesdites compositions pharmaceutiques incluent aussi bien les compositions sous forme solide (comprimés, gélules, capsules, etc...), que les compositions sous forme liquide (solutions, suspensions ou émulsions) et incluent les excipients adaptés à une administration orale, topique ou parentérale.
L'administration des composés ou des compositions selon l'invention est effectuée de préférence par voie orale ou par voie parentérale (intraveineuse en perfusion ou injection, notamment).
Les doses de Composés sont de préférence inférieures à 2 g de produit par jour, et varient selon la formulation sélectionnée, le mode d'administration et l'intoxication ou la maladie à traiter. D'autres facteurs tels que l'âge, le poids, la taille, le sexe ainsi que certains paramètres biologiques (taux d'excrétion, association avec d'autres médicaments, allergies...) sont également à prendre en compte.
Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions qui ressortiront du complément de description qui suit, qui se rapporte à des exemples mettant en évidence les propriétés complexantes des composés de l'invention, ainsi qu'au dessin annexé dans lequel :
la figure 1 représente le dosage UV du NTA(Cys0C2H5)3 (composé 4) par du Cu(CH3CN)PF6 dans une solution tampon phosphate à 20 mM, de pH
7,4, à une température de 298 K.

Matières premières :
Tableau 1:
Composé Fournisseur Acide nitriloacétique (NTA) Sigma-Aldrich N-éthyl-N'-(3- Sigma-Aldrich diméthylaminopropyl)carbodiimide Hydrate de 1-hydroxybenzotriazole Sigma-Aldrich Bromure de bromoacétyle Sigma-Aldrich Trihydrochlorure de 1,4,7-triazacyclononane CheMatech Disulfonate bathocuproïne (BCS) Sigma-Aldrich Acide 5,5'-dithiobis-2-nitrobenzoïque Acros (DNTB) Diméthylformamide (DMF) Sigma-Aldrich Acétate d'éthyle (CH3C00C2H5) Riedel de Han Hydrogénocarbonate de sodium (NaHCO3) Prolabo Sulfate de sodium (Na2SO4) Carlo Erba Ethanol Carlo Erba Hydroxyde de lithium (L'OH) Sigma-Aldrich Acide chlorhydrique (HCI) Sigma-Aldrich Acide trifluoroacétique (TFA) Riedel de Han Triéthylsilane (HS1C2H5)3 Sigma-Aldrich Dichlorornéthane (CH2C12) Sigma-Aldrich Bicarbonate de potassium (KHCO3) Sigma-Aldrich Carbonate de potassium (K2CO3) Sigma-Aldrich Acétonitrile anhydre (CH3CN) Sigma-Aldrich Ethylène-diamine-tétraacétique (EDTA) Fischer Chemicals Les matières premières ont été utilisées sans purification supplémentaire.
5 Les solutions aqueuses ont été préparées à partir d'une eau ultra-pure, obtenue par filtration et purification par osmose inverse en utilisant une cartouche Millipore Milli-Q
(résistivité 18 MS-2.cm).

Méthodes de caractérisation :
1/ Chromatographie sur couche mince (CCM) La CCM est réalisée sur un gel de silice 60 F254 (fournisseur : Merck).
2/ Chromatographie-flash La chromatographie-flash est réalisée sur un gel de silice 60 d'épaisseur 40-63 pm (fournisseur : Merck).
3/ Chromatographie en phase liquide à haute performance (HPLC) La chromatographie HPLC est réalisée sur un système VWR muni de colonnes RP18 (L = 250 mm, 0 = 4,6 mm et p = 5 pm pour la colonne analytique ; L = 250 mm, 0 = 50 mm et p = 10 pm pour la colonne préparatoire).
Les débits utilisés sont de 1 mL/min pour la colonne analytique et de 75 mL/min pour la colonne préparatoire, avec une détection UV à 214 nm.
Les conditions d'élution sont les suivantes :
- solvant A: mélange eau/acide trifluoroacétique (TFA) (99,925/0,075), - solvant B = CH3CN/eau/acide trifluoroacétique (TFA) (90/10/0,1).
4/ Analyses RMN
Les spectres RMN 1H et 13C ont été enregistrés sur un spectromètre Mercury Varianmc 400 et sur un spectromètre Bruker Avancemc 500.
Les déplacements chimiques sont indiqués en ppm avec le solvant comme référence interne.
5/ Spectres de masse Les spectres de masse ont été réalisés sur un appareil Finnigan LCec-ion trap, équipé d'une source d'électrons.

21a Les analyses élémentaires ont été effectuées par le Service Central d'Analyse (Solaize, France).
6/ Spectroscopie UV-visible Les spectres UV-visible ont été réalisés sur un spectrophotomètre Varian Carymc 50.
71 Dichroïsme circulaire Les spectres de dichroïsme circulaire ont été réalisés avec un spectrophotomètre Chirascan __ (Applied Photophysice).

1/ Synthèses Synthèse de la molécule HCysC(C6H5)30C2H5:
La molécule HCysC(C6H5)30C2H5 a été synthétisée à partir de L-cystéine selon le mode opératoire décrit dans la publication Bolzati et al., Bioconjugate chem., 2003, 14, 1231.
Exemple 1: Synthèse du composé 1 : NTA(CysC(C6H5)30C2F15)3 De l'acide nitriloacétique (0,196 g, 1,03 mmol) est ajouté à une solution de HCysC(C6H5)30C2H5 (1,200 g, 3,06 mmol) dans 20 mL de diméthylformamide (DMF).
Le mélange est ensuite refroidi à une température de 0 C, et du N-éthyl-N'-(3-diméthylaminopropyl)carbodiimide (0,587 g, 3,06 mmol) et de l'hydrate de 1-hydroxybenzotriazole (0,414 g, 3,06 mmol) sont ajoutés successivement. Le mélange réactionnel est ensuite mélangé à température ambiante pendant 24 h sous argon.
Après évaporation du solvant, le résidu est ensuite dissout dans 100 mL
d'acétate d'éthyle. La phase organique est alors lavée avec 2 x 50 mL d'eau, puis 50 mL d'une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium (NaHCO3) et 2 x 50 mL d'une solution saturée de chlorure de sodium (NaC1).
La phase organique est ensuite séchée avec du sulfate de sodium (Na2SO4), puis concentrée sous pression réduite (20 mbars).
Le produit résultant (1,391 g) est purifié par chromatographie sur gel de silice (100 mL, éluant : CH2Cl2/acétate d'éthyle 80/20), pour donner le composé 1 (1,103 g, rendement 82%) sous forme de poudre blanche.
RMN 111 (CD3CN, 400 MHz, 298 K) : 6 = 1,05 (t, J= 7,0 Hz, 9H, CH3) ; 2,39 et 2,68 (ABX, fax --- 4,1 Hz, JAx = 8,0 Hz, JAB = 12,7 Hz, 6H, C1-1_2S) ; 3,17 et 3,29 (AB, JAB = 15,0 Hz, 6H, CH2C0) ; 3,84 et 3,96 (ABX3, fAX = 7,0 Hz, J-Bx = 7,0 Hz, JAB = 10,9 Hz, 6H, CLCH3) ;
4,34 (td, J4,0 et 8,2 Hz, 3H, CH) ; 7,13-7,17 (in, 30H, SC(C61-11)3) ; 7,22 (d, J = 7,4 Hz, 15H, SC(C61-15)3) ; 7,56 (d, J = 8,6 Hz, 3H, N1-1).
RMN 13C (CD3CN, 100 MHz, 298 K) : 6 = 14,39 (CH3) ; 33,69 (CH2S) ; 52,11 (CH) ; 57,97 (CH2C0) ; 62,21 (CH2C1-13) ; 129,90-127,16 (LÇ6F15)3) ; 144,70 (C(C6H5)3) ;
171,66 et 170,70 (2*C0).
ES-MS (m/z) : [M + = 1310,8 et [M + TEAH] = 1411,8, la valeur ES-MS
correspondant à la masse sur la charge de l'ion détecté.

Analyse élémentaire calculée (en %) pour C78H78N409S2, 2H20 (1347,70 g/mol) :
C, 69,51 ;
1-1, 6,13 ; N, 4,16; trouvée : C, 69,42 ; 1-1, 6,05 ; N, 3,9.
Exemple 2 : Synthèse du composé 2 : NTA(CysC(C6H5)30H)3 Le composé 1(0,310 g, 0,236 mmol) est dissout dans 6 mL d'éthanol, et de l'hydroxyde de lithium (Li0H) est ajouté (0,95 mL, 0,95 mmol). Le mélange réactionnel est ensuite agité
pendant 1 h à température ambiante, puis évaporé. Le résidu obtenu est alors dissout dans 6 mL d'eau, et de l'acide chlorhydrique (HC1) à 1 mol/L est additionné jusqu'à
pH = 4-5.
La phase aqueuse est ensuite extraite avec 15 mL d'acétate d'éthyle.
Le produit résultant (0,242 g, rendement = 83%) est ensuite utilisé sans purification supplémentaire.
RMN (DMSO-d6, 400 MHz, 298 K) : 2,37-2,46 (m, 6H, CH2SC) ; 3,32 (s, 6H, CH2C0) ;
4,17-4,21 (m, 31-1, CH) ; 7,20-7,37 (m, 45H, C(C6H5)3) ; 8,46 (d, J = 7,4 Hz, 3H, NH).
RMN 13C (DMSO-d6, 100 MHz, 298 K) : = 34,03 (CH2S) ; 52,34 (CH) ; 60,68 (CH2C0) ;
130,00-127,67 (We_1-15)3) ; 145,16 (C(C6H5)3) ; 172,02 et 171,61 (2*C0).
ES-MS (m/z) : [M + Na]= 1249,2.
Exemple 3: Synthèse du composé 3 : NTA(Cys0H)3 De l'acide trifluoroacétique (1,77 mL, 23,8 mmol) et du triéthylsilane (0,456 mL, 2,85 mmol) sont successivement additionnés au composé 2 (0,584 g, 0,476 mmol) dans 21 mL
de dichlorométhane (CH2Cl2), sous argon.
Après 30 minutes d'agitation à température ambiante, le mélange est évaporé.
Le produit résultant (744,5 mg) est ensuite purifié par HPLC : tR = 13,75 minutes (gradient linéaire 95/5 à 0/100, A/B en 15 minutes).
Le composé 3 obtenu est une poudre blanche (0,209 g, rendement = 88%).
RMN 'l-1 (D20, 400 MHz, 298 K) : 8 = 3,07 et 3,01 (ABX, fAX = 4,3 Hz, JBx =
6,8Hz, JAB =-14,5 Hz, 6H, CH2SH) ; 3,81-3,90 (m, 6H, CI-j2C0) ; 4,72 (t, J = 5,9 Hz, 3H, CH).
RMN 13C (D20, 100 MHz, 298 K) : = 27,86 (CH2SH) ; 57,38 (CH) ; 60,07 (CH2C0) ;

173,46 (COOH) ; 175,77 (NHCO).
ES-MS (m/z): [M - Hf = 499,0.

Exemple 4 : Synthèse du composé 4 : NTA(Cys0C21-15)3 De l'acide trifluoroacétique (1,81 mL, 24,4 mmol) et du triéthylsilane (0,47 mL, 2,9 mmol) sont successivement additionnés au composé 1 (0,640 g, 0,49 mmol) dans 15 mL
de dichlorométhane (CH2Cl2), sous argon.
Après 30 minutes d'agitation à température ambiante, le mélange est évaporé.
Le produit résultant (0,627 g) est ensuite purifié par HPLC : tR = 12,7 minutes (gradient linéaire 50/50 à 0/100, AJB en 15 minutes).
Le composé 4 obtenu est un solide blanc huileux (0,110 g, rendement = 49%).
RMN 1H (CD3CN, 500 MHz, 298 K) : 8 = 1,25 (t, J= 7,1 Hz, 9H, CH); 1,97 (t, .1=
8,8 Hz, 3H, SH) ; 2,95 et 3,00 (ABXY, JAx = 4,6 Hz, Jim, = 6,1 Hz, JBy = 9,0, JA = 9,3 Hz, JAB= 14,0 Hz, 6H, CII2SH) ; 3,48 et 3,52 (AB, JAB = 16,3 Hz, 6H, CH2C0) ; 4,18 et 4,22 (ABX3; fAX =-7,1 Hz, ./Bx = 7,1 Hz, JAB = 10,8 Hz, 6H, CI-12-CH3) ; 4,70 (ddd, J= 4,7, 6,2 et 8,0 Hz, 3H, CH); 7,71 (d, J = 8,0 Hz, 3H, NH).
RMN 13C (CD3CN, 100 MHz, 298 K) : S = 14,97 (CH3) ; 27,40 (CH2SH) ; 55,81 (CH) ; 59,75 (CH2C0) ; 63,02 (CH2CH3) ; 171,61 et 172,02 (2*C0).
ES-MS (m/z): [M + Hl+ = 585,0 et [M + Na]+= 607,3.
Exemple 5 Synthèse du composé 5 : NTA(CysC(C6H5)3NE12)3 De l'acide nitriloacétique (0,068 g, 0,357 mmol) est ajouté à une solution de CysC(C6H5)3(N1-12) (0,401 g, 1,10 mmol) dans 10 mL de diméthylformamide (DMF).
Le mélange est ensuite refroidi à une température de 0 C, et du N-éthyl-N'-(3-diméthylaminopropyl)carbodihnide (0,212 g, 1,10 mmol) et de l'hydrate de 1-hydroxybenzotriazole (0,150 g, 1,11 mmol) sont ajoutés successivement. Le mélange réactionnel est ensuite mélangé à température ambiante pendant 24 h sous argon.
Après évaporation du solvant, le résidu est ensuite lavé avec 25 mL d'eau, puis filtré. Le solide est ensuite dissout dans 100 mL de dichlorométhane (CH2C12). La phase organique est alors lavée avec 3 x 50 mL d'eau et 1 x 50 mL d'une solution saturée de chlorure de sodium (NaC1).
La phase organique est ensuite séchée avec du sulfate de sodium (Na2SO4), puis concentrée sous pression réduite (20 mbars) pour donner du NTA(CysC(C6H5)3(NH2)3) (0,404 g, rendement 92%) sous forme de poudre blanche.

RMN 1H (CD3CN, 400 MHz, 298 K) : 8 = 2,37-2,44 (m, 6H, CH2S) ; 3,14 et 3,19 (AB, JAB =
16,4, 6H, CH2C0) ; 4,00-4,06 (m, 3H, CH) ; 5,70 (s, 3H, NH2) ; 6,24 (s, 3H, NH2) ; 7,16-7,32 (m, 45H, SC(C6%3) ; 7,85 (d, J = 7,2 Hz, 3H, NH).
RMN 13C (CD3CN, 100 MHz, 298 K) : 8 = 38,89 (CH2S) ; 57,78 (CH) ; 63,18 (CH2C0), 5 132,37-134,89 (LÇ6F15)3) ; 150,03 (C(C6H5)3) ; 176,15 et 178,074 (2*C0).
ES-MS (m/z) : [M + Nal+ = 1246,2 et [M + K]+ = 1262,2.
Analyse élémentaire calculée (en %) pour C72H69N706S3, H20 (1242,57 g/mol) :
C, 69,60; H, 5,76 ; N, 7,89 ; 0, 9,01 ; S, 7,74 ; trouvée : C, 69,60 ; H, 5,72 ; N, 7,95 ;
0, 8,65 ; S, 7,83.
10 Exemple 6: Synthèse du composé 6 : NTA(CysNH2)3 De l'acide trifluoroacétique (1,4 mL, 17,84 mmol) et du triéthylsilane (0,54 mL, 2,14 mmol) sont successivement additionnés au composé 5 (0,437 g, 0,357 mmol) dans 15 mL
de dichlorométhane (CH2C12), sous argon.
Après 30 minutes d'agitation à température ambiante, le mélange est évaporé.
15 Le produit résultant (0,6 g) est ensuite purifié par HPLC : tR = 18,9 minutes (gradient linéaire 95/5 à 65/35, A/B en 25 minutes).
Le composé 6 obtenu est un solide blanc (0,065 g, rendement = 37%).
RMN 1H (D20, 500 MHz, 298 K) : 8 = 2,87 (ABX, JAx = 4,9 Hz, JBX = 7,5 Hz, JAB
= 14,2, 6H, CH2SH) ; 3,55 (s, 6H, CH2C0) ; 4,45 (dd, J = 7,5, 3H, CH).
20 RMN 13C (D20, 100 MHz, 298 K) : = 28,18 (CH2SH) ; 57,93 (CH) ; 60,85 (CH2C0) ;
175,98 et 177,04 (2*C0).
ES-MS (m/z): [M + H]+ = 498,1.
Exemple 7 : Synthèse du composé 7 : 2-(2-bromoacétamido)-3-(triétylthio)propanoate 25 d'éthyle Le composé 7 est synthétisé suivant la procédure décrite dans la littérature (Synthesis, 2003 A molecule carrying a thiol function, such as ethanedithiol (EDT), glutathione (GSH) and dithiotreitol (DTT), ascorbic acid or a salt thereof, or a molecule carrier of a phosphine function such as tris (2-carboxyethyl) phosphine (TCEP).
Thus, the release of the chelating agents is by in vivo reduction in the body, for example in liver cells where glutathione, which is present at about 1 mM, 15 can play the role of reducer, or for example in the brain where ascorbate, which is present at about 200-400 M, can also play the role of reducer.
The subject of the present invention is also marked compounds corresponding to the following formula (III):

' HN

X ' 0 0 A ' R "2 NH X "0 R'2 SR "3 S-R'3 (III) in which the group A 'represents:
= either a nitrogen atom, = either a cycle with the formula below, and in which the substitution is done on nitrogen atoms:
YZ
\ NOT"------\
NOT

Z "
clam Z ' in which the radicals R2, R'2 and R "2 have the same meaning as above.
above, and wherein :
the radicals R3, R'3 and R "3, which are identical or different, represent a grouping -SW or -SEL, where:
, / S is a sulfur atom, = W is an optionally substituted alkyl radical having 1 to 12 carbon atoms carbon, (E is a spacer arm that can be selected from the groupings optionally substituted alkyls having 1 to 12 carbon atoms, and polyols such as polyethylene glycol preferably having 1 to 8 units oxyethylene 0E, i L is a biological ligand, and preferably a cell ligand hepatic or neuronal, selected from sugars such as glucose, galactose and N-acetylgalactose, -the groups X, X ', X ", Y, Y', Y", Z, Z 'and Z ", which may be identical or different, represent a hydrogen atom or a marker, provided that at least one of said groups X, X ', X ", Y, Y', Y", Z, Z 'or Z "is a marker.
Marker means any entity likely to be detected by means markers used in the context of the corresponding invention.
typically to markers used by those skilled in the art in the field of biology for to mark molecules of biological interest, particularly in the context of the production of diagnostic, galenic studies, or to monitor the metabolism of compounds assets. Marking may be of a direct nature, and in this case the marker is qualified as direct marker and has at least one detectable physical property, or the marking may be of nature indirect, and in this case the marker is referred to as an indirect marker and is likely to selectively react with a third-party entity, the latter being able to present at least one detectable physical property, such as an antibody with activity fluorescent, or be invested in a reaction process at the end of which a property may be detected, for example when the product of degradation of the entity may have at least one detectable physical property such that fluorescence.
Indirect labeling is often achieved using antibodies or nanoparticles possessing fluorescent activity. In this case, the indirect marker of the compounds of formula (III) has an affinity for the third-party entity.
Thus, the marker of the invention can be either a chemical entity of a nature organic, a chemical entity of inorganic nature, such as a complex or a crystal, the latter possibly being coated with an organic layer, this chemical entity of inorganic nature being generally of sufficiently small size, typically to the nanoscale, so as not to disturb the biological system in which she is introduced.
The detectable physical property, directly or indirectly, may be a specific responsiveness to an electromagnetic source such as a magnetic field, as for example by magnetic resonance imaging, or vis-à-vis a influence which can be focused, such as for example by fluorescence with the fluorophores, or with respect to nuclear radiation, as example using isotopes.
The most preferred markers are direct markers, and more especially fluorophores. Typically, it is organic fluorophores or nanoparticles.
The fluorophores used in the context of the invention may be compounds aromatic fluorescents whose Tr-it transitions are characterized by coefficients molar absorption and high quantum fluorescence yields, said fluorophores which may be chosen from rhodamine, fluorescein, pyronine, the coumarin, benzophenone, Panthrone, fluorenone, pyridine, quinoline, acridine, naphthalene, anthracene, naphthacene, pentacene, xanthene and their derivatives.
The different families of markers and the different techniques of detection associated with it are known to those skilled in the art and described in the book Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry, 2008, 8, 497-522. More specifically, it is possible to refer to fluorophores cited in Cytometty Part A 69A: 863-871 (2006) and nanoparticles mentioned in the Anal document. Bioanal. Chem., 384: 620-630 (2006).
Thus, the labeled compounds of formula (III) of the invention may be used for visualize the path of said compounds in the body, by luminescence.
Another subject of the invention relates to the use of compounds of formula (I), (II) or (III) of the invention for their application as a medicament, and especially for their application as a medicine for the diagnosis, prevention and control of Treatment of neurodegenerative diseases, such as Wilson's and Alzheimer's diseases.
A further object of the present invention is the use of compounds of formula (1), (II) or (III) of the invention for their application as drug for diagnosis, prevention and treatment of poisoning with ions Metals such as silver ions, cadmium, cobalt, copper, mercury, nickel, gold, lead and zinc, and even more preferentially with intracellular Cu (I) copper ions, poisoning by such ions usually leading to severe inflammation, kidney failure, of the haemorrhage, severe neurological disorders of the central nervous system;
we speak then lead poisoning or hydrargia (or of mercury poisoning) in the case of mercury poisoning.
Finally, the present invention also relates to a composition pharmaceutical comprising as active ingredient at least one compound (I), (II) or (III) as defined previously and at least one pharmaceutically acceptable carrier.

Said pharmaceutical compositions include both the compositions under solid form (tablets, capsules, capsules, etc ...), that the compositions under liquid form (solutions, suspensions or emulsions) and include excipients suitable for administration oral, topical or parenteral.
The administration of the compounds or compositions according to the invention is performed from preferably orally or parenterally (intravenous infusion or injection, especially).
The doses of Compounds are preferably less than 2 g of product per day, and vary depending on the formulation selected, the method of administration and intoxication or disease to treat. Other factors such as age, weight, height, sex as well as some biological parameters (excretion rate, association with other medications, allergies ...) are also to be taken into account.
In addition to the foregoing, the invention also includes other provisions which will emerge from the following additional description, which relates to examples highlighting the complexing properties of the compounds of the invention as well than in the attached drawing in which:
FIG. 1 represents the UV determination of NTA (CysO C 2 H 5) 3 (compound 4) by Cu (CH3CN) PF6 in 20 mM phosphate buffer solution, pH
7.4, at a temperature of 298 K.

Raw materials :
Table 1:
Supplier Compound Nitriloacetic acid (NTA) Sigma-Aldrich N-ethyl-N '- (3- Sigma-Aldrich dimethylaminopropyl) carbodiimide Sigma-Aldrich 1-hydroxybenzotriazole hydrate Sigma-Aldrich bromoacetyl bromide CheMatech 1,4,7-triazacyclononane trihydrochloride Disulfonate bathocuproin (BCS) Sigma-Aldrich Acros 5,5'-dithiobis-2-nitrobenzoic acid (DTNB) Dimethylformamide (DMF) Sigma-Aldrich Ethyl acetate (CH3C00C2H5) Riedel from Han Sodium hydrogen carbonate (NaHCO3) Prolabo Sulfate sodium (Na2SO4) Carlo Erba Ethanol Carlo Erba Lithium Hydroxide (OH) Sigma-Aldrich Hydrochloric acid (HCI) Sigma-Aldrich Trifluoroacetic acid (TFA) Riedel from Han Triethylsilane (HS1C2H5) 3 Sigma-Aldrich Dichloromethane (CH2Cl2) Sigma-Aldrich Potassium bicarbonate (KHCO3) Sigma-Aldrich Potassium carbonate (K2CO3) Sigma-Aldrich Anhydrous Acetonitrile (CH3CN) Sigma-Aldrich Ethylene-diamine-tetraacetic (EDTA) Fischer Chemicals The raw materials were used without further purification.
The aqueous solutions were prepared from ultra-violet water.
pure, obtained by reverse osmosis filtration and purification using a cartridge Millipore Milli-Q
(resistivity 18 MS-2 cm).

Characterization methods:
1 / Thin layer chromatography (TLC) TLC is performed on silica gel 60 F254 (supplier: Merck).
2 / flash chromatography The flash chromatography is carried out on a 60 silica gel 40-63 pm (supplier: Merck).
3 / High Performance Liquid Chromatography (HPLC) HPLC is performed on a VWR system with RP18 columns (L = 250 mm, 0 = 4.6 mm and p = 5 pm for the analytical column, L = 250 mm, 0 = 50 mm and p = 10 pm for the preparatory column).
The flow rates used are 1 mL / min for the analytical column and 75 mL / min for the preparatory column, with UV detection at 214 nm.
The elution conditions are as follows:
solvent A: water / trifluoroacetic acid (TFA) mixture (99.925 / 0.075), solvent B = CH3CN / water / trifluoroacetic acid (TFA) (90/10 / 0.1).
4 / NMR analyzes 1H and 13C NMR spectra were recorded on a Mercury spectrometer Varianmc 400 and on a Bruker Avancemc 500 spectrometer.
The chemical shifts are indicated in ppm with the solvent as reference internal.
5 / Mass spectrums The mass spectra were made on a Finnigan LCec-ion trap apparatus, equipped with an electron source.

21a The elementary analyzes were carried out by the Central Analysis Service (Solaize France).
6 / UV-visible spectroscopy UV-visible spectra were made on a Varian spectrophotometer Carymc 50.
71 Circular Dichroism The spectra of circular dichroism were made with a spectrophotometer Chirascan __ (Applied Photophysice).

1 / Summaries Synthesis of the molecule HCysC (C6H5) 30C2H5:
The molecule HCysC (C6H5) 30C2H5 was synthesized from L-cysteine according to The mode described in the publication Bolzati et al., Bioconjugate chem., 2003, 14, 1231.
Example 1 Synthesis of Compound 1: NTA (CysC (C6H5) 30C2F15) Nitriloacetic acid (0.196 g, 1.03 mmol) is added to a solution of HCysC (C6H5) 30C2H5 (1,200 g, 3.06 mmol) in 20 mL of dimethylformamide (DMF).
The mixture is then cooled to 0 ° C, and N-ethyl-N '- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (0.587 g, 3.06 mmol) and 1- hydrate Hydroxybenzotriazole (0.414 g, 3.06 mmol) is added successively. The mixed The reaction mixture is then mixed at room temperature for 24 hours under argon.
After evaporation of the solvent, the residue is then dissolved in 100 ml of ethyl acetate. The The organic phase is then washed with 2 × 50 ml of water and then 50 ml of saturated solution sodium hydrogen carbonate (NaHCO3) and 2 x 50 mL of a saturated solution of chloride sodium (NaCl).
The organic phase is then dried with sodium sulphate (Na 2 SO 4) and then concentrated under reduced pressure (20 mbar).
The resulting product (1.391 g) is purified by gel chromatography.
silica (100 mL, eluent: CH 2 Cl 2 / ethyl acetate 80/20), to give compound 1 (1.103 g, yield 82%) as a white powder.
111 NMR (CD3CN, 400 MHz, 298 K): δ = 1.05 (t, J = 7.0 Hz, 9H, CH3); 2.39 and 2.68 (ABX, fax --- 4.1 Hz, JAx = 8.0 Hz, JAB = 12.7 Hz, 6H, C1-1_2S); 3.17 and 3.29 (AB, JAB = 15.0 Hz, 6H, CH2C0); 3.84 and 3.96 (ABX3, fAX = 7.0 Hz, J-Bx = 7.0 Hz, JAB = 10.9 Hz, 6H, CLCH3);
4.34 (td, J4.0 and 8.2 Hz, 3H, CH); 7.13-7.17 (in, 30H, SC (C 61-11) 3); 7.22 (d, J = 7.4 Hz, 15H, SC (C61-15) 3); 7.56 (d, J = 8.6 Hz, 3H, N1-1).
13 C NMR (CD3CN, 100 MHz, 298 K): δ = 14.39 (CH3); 33.69 (CH2S); 52.11 (CH) ; 57.97 (CH 2 CO); 62.21 (CH2Cl1-13); 129.90-127.16 (L6F15) 3); 144.70 (C (C6H5) 3);
171.66 and 170.70 (2 * C0).
ES-MS (m / z): [M + = 1310.8 and [M + TEAH] = 1411.8, the ES-MS value corresponding to the mass on the charge of the detected ion.

Calculated Elemental Analysis (%) for C78H78N409S2, 2H20 (1347.70 g / mol):
C, 69.51;
1-1, 6, 13; N, 4.16; found: C, 69.42; 1-1, 6.05; N, 3.9.
Example 2 Synthesis of Compound 2: NTA (CysC (C6H5) 30H) 3 Compound 1 (0.310 g, 0.236 mmol) is dissolved in 6 mL of ethanol, and hydroxide lithium (LiOH) is added (0.95 mL, 0.95 mmol). The reaction mixture is then agitated for 1 h at room temperature, then evaporated. The residue obtained is then dissolved in 6 mL of water, and 1 mol / L hydrochloric acid (HC1) is added up to pH = 4-5.
The aqueous phase is then extracted with 15 ml of ethyl acetate.
The resulting product (0.242 g, yield = 83%) is then used without purification additional.
NMR (DMSO-d 6, 400 MHz, 298 K): 2.37-2.46 (m, 6H, CH 2 CS); 3.32 (s, 6H, CH 2 CO);
4.17-4.21 (m, 31-1, CH); 7.20-7.37 (m, 45H, C (C 6 H 5) 3); 8.46 (d, J = 7.4 Hz, 3H, NH).
13 C NMR (DMSO-d 6, 100 MHz, 298 K): = 34.03 (CH 2 S); 52.34 (CH); 60.68 (CH 2 CO);
130.00-127.67 (We_1-15) 3); 145.16 (C (C6H5) 3); 172.02 and 171.61 (2 * C0).
ES-MS (m / z): [M + Na] = 1249.2.
Example 3 Synthesis of Compound 3: NTA (CysOH) 3 Trifluoroacetic acid (1.77 mL, 23.8 mmol) and triethylsilane (0.456 mL, 2.85 mmol) are successively added to compound 2 (0.584 g, 0.476 mmol) in 21 ml of dichloromethane (CH 2 Cl 2) under argon.
After stirring for 30 minutes at room temperature, the mixture is evaporated.
The resulting product (744.5 mg) is then purified by HPLC: tR = 13.75 minutes (gradient linear 95/5 to 0/100, A / B in 15 minutes).
The compound 3 obtained is a white powder (0.209 g, yield = 88%).
1H NMR (D 2 O, 400 MHz, 298 K): δ = 3.07 and 3.01 (ABX, fAX = 4.3 Hz, JB x =
6.8 Hz, JAB = -14.5 Hz, 6H, CH 2 SH); 3.81-3.90 (m, 6H, Cl 2 CO); 4.72 (t, J = 5.9 Hz, 3H, CH).
13 C NMR (D 2 O, 100 MHz, 298 K): = 27.86 (CH 2 SH); 57.38 (CH); 60.07 (CH 2 CO);

173.46 (COOH); 175.77 (NHCO).
ES-MS (m / z): [M-H f = 499.0.

Example 4 Synthesis of Compound 4: NTA (CysOCII-15) Trifluoroacetic acid (1.81 mL, 24.4 mmol) and triethylsilane (0.47 mL, 2.9 mmol) are successively added to compound 1 (0.640 g, 0.49 mmol) in 15 mL
of dichloromethane (CH 2 Cl 2) under argon.
After stirring for 30 minutes at room temperature, the mixture is evaporated.
The resulting product (0.627 g) is then purified by HPLC: tR = 12.7 minutes (gradient linear 50/50 to 0/100, AJB in 15 minutes).
The compound 4 obtained is an oily white solid (0.110 g, yield = 49%).
1 H NMR (CD3CN, 500 MHz, 298 K): δ = 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 9H, CH); 1.97 (t, .1 =
8.8 Hz, 3H, SH); 2.95 and 3.00 (ABXY, JAx = 4.6 Hz, Jim, = 6.1 Hz, JBy = 9.0, JA = 9.3 Hz, JAB = 14.0 Hz, 6H, CII2SH); 3.48 and 3.52 (AB, JAB = 16.3 Hz, 6H, CH 2 CO); 4.18 and 4.22 (ABX3; fAX = -7.1 Hz, ./Bx = 7.1 Hz, JAB = 10.8 Hz, 6H, CI-12-CH3); 4.70 (ddd, J = 4.7, 6.2 and 8.0 Hz, 3H, CH); 7.71 (d, J = 8.0 Hz, 3H, NH).
13 C NMR (CD3CN, 100 MHz, 298 K): S = 14.97 (CH3); 27.40 (CH 2 SH); 55.81 (CH) ; 59.75 (CH 2 CO); 63.02 (CH 2 CH 3); 171.61 and 172.02 (2 ° C).
ES-MS (m / z): [M + H + + = 585.0 and [M + Na] + = 607.3.
Example 5 Synthesis of Compound 5: NTA (CysC (C6H5) 3NE12) 3 Nitriloacetic acid (0.068 g, 0.357 mmol) is added to a solution of CysC (C6H5) 3 (N1-12) (0.401 g, 1.10 mmol) in 10 mL of dimethylformamide (DMF).
The mixture is then cooled to 0 ° C, and N-ethyl-N '- (3-dimethylaminopropyl) carbodihnide (0.212 g, 1.10 mmol) and hydrate of Hydroxybenzotriazole (0.150 g, 1.11 mmol) is added successively. The mixed The reaction mixture is then mixed at room temperature for 24 hours under argon.
After evaporation of the solvent, the residue is then washed with 25 ml of water, then filtered. The The solid is then dissolved in 100 mL of dichloromethane (CH 2 Cl 2). The sentence organic is then washed with 3 x 50 mL of water and 1 x 50 mL of a saturated solution of sodium chloride (NaC1).
The organic phase is then dried with sodium sulphate (Na 2 SO 4) and then concentrated under reduced pressure (20 mbar) to give NTA (CysC (C6H5) 3 (NH2) 3) (0.404 boy Wut, yield 92%) as a white powder.

1 H NMR (CD 3 CN, 400 MHz, 298 K): δ = 2.37-2.44 (m, 6H, CH 2 S); 3.14 and 3.19 (AB, JAB =
16.4, 6H, CH 2 CO); 4.00-4.06 (m, 3H, CH); 5.70 (s, 3H, NH 2); 6.24 (s, 3H, NH2); 7.16 to 7.32 (m, 45H, SC (C6% 3), 7.85 (d, J = 7.2 Hz, 3H, NH).
13 C NMR (CD 3 CN, 100 MHz, 298 K): δ = 38.89 (CH 2 S); 57.78 (CH); 63.18 (CH2C0) 132.37-134.89 (L6F15) 3); 150.03 (C (C6H5) 3); 176.15 and 178.074 (2 * C0).
ES-MS (m / z): [M + Nal + = 1246.2 and [M + K] + = 1262.2.
Calculated Elemental Analysis (%) for C72H69N706S3, H20 (1242.57 g / mol):
C, 69.60; H
5.76; N, 7.89; 0, 9.01; S, 7.74; found: C, 69.60; H, 5.72; N, 7.95;
0, 8.65; S, 7.83.
Example 6: Synthesis of Compound 6: NTA (CysNH 2) 3 Trifluoroacetic acid (1.4 mL, 17.84 mmol) and triethylsilane (0.54 mL, 2.14 mmol) are successively added to compound 5 (0.437 g, 0.357 mmol) in 15 mL
of dichloromethane (CH 2 Cl 2) under argon.
After stirring for 30 minutes at room temperature, the mixture is evaporated.
The resulting product (0.6 g) is then purified by HPLC: tR = 18.9 minutes (linear gradient 95/5 to 65/35, A / B in 25 minutes).
The compound 6 obtained is a white solid (0.065 g, yield = 37%).
1 H NMR (D 2 O, 500 MHz, 298 K): δ = 2.87 (ABX, JA x = 4.9 Hz, JBX = 7.5 Hz, JAB
= 14.2, 6H, CH 2 SH); 3.55 (s, 6H, CH 2 CO); 4.45 (dd, J = 7.5, 3H, CH).
13C NMR (D 2 O, 100 MHz, 298 K): = 28.18 (CH 2 SH); 57.93 (CH); 60.85 (CH 2 CO);
175.98 and 177.04 (2 * C0).
ES-MS (m / z): [M + H] + = 498.1.
Example 7 Synthesis of compound 7: 2- (2-bromoacetamido) -3-(Triétylthio) propanoate 25 of ethyl Compound 7 is synthesized according to the procedure described in the literature (Synthesis, 2003

(11), 1699-1704).
A une température de 0 C, une solution de bromure de bromoacétyle (0,235 mL, 2,69 mmol) dans 1 mL de dichlorométhane (CH2C12) est additionnée à un mélange de HCysC(C6H5)30C2H5 (0,996 g, 2,54 mmol) dans 10 mL de dichlorométhane (CH2C12) et 10 mL d'une solution aqueuse à 10% de bicarbonate de potassium (K1-IC03).
Le mélange réactionnel est ensuite agité pendant 1 h à une température de 0 C.

Après décantation, la phase aqueuse est extraite avec 3 x 16 mL de dichlorométhane (CH2Cl2).
La phase organique est séchée avec du sulfate de sodium (Na2SO4), puis concentrée sous vide.
Le composé 7 (1,29 g, rendement = 99%), de couleur jaune, est ensuite utilisé
sans purification supplémentaire.
. RMN 1H (CD3CN, 400 MHz, 298 K) : 5 = 1,29 (t, J= 3,6 Hz, 3H, CHI) ; 2,62 et 2,74 (ABX, JA X = 4,8 Hz, JBx -= 6,0 Hz, JAB = 12,4 Hz, 21-1, CH2SC(C6H5)3) ; 3,86 (s, 2H, BrCE2C0) ;
4,23 (q, J= 7,0 Hz, 2H, CH2CH3) ; 4,56 (td, J= 2,4 et 7,2 Hz, 1H, CH) ; 6,95 (d, J 8,0 Hz, 1H, N1-1) ; 7,24-7,35 (in, 10H, SC(C6H5)3) ; 7,43 (d, J= 7,6 Hz, 5H, SC(C6H5)3).
Exemple 8: Synthèse du composé 8 : NOTA(CysC(C6H5)30C2H5)3 Du trihydrochlorure de 1,4,7-triazacyclononane (0,423 g, 1,77 mmol) et du carbonate de potassium (K2CO3) (1,56 g, 11,31 mmol) sont ajoutés successivement à une solution du composé 7 (2,90 g, 5,66 mmol) dans 60 mL d'acétonitrile anhydre (CH3CN).
Le mélange réactionnel est ensuite agité pendant 16 h à température ambiante, sous argon.
Après évaporation du solvant, le résidu est dissout dans un mélange de 180 mL
d'acétate d'éthyle (CH3C00C2H5) et 100 mL d'eau.
La phase organique est lavée avec 2 x 70 mL d'eau et 70 mL d'une solution saturée de chlorure de sodium (NaCI), séchée avec du sulfate de sodium (Na2SO4), puis concentrée sous pression réduite (20 mbars).
Le produit résultant (2,66 g) est purifié par chromatographie sur gel de silice (40 mL, éluant :
CH2C12/éthanol gradient allant de 100/0 à 96/4), pour donner un composé 8 (1,99 g, rendement 77%) sous forme de poudre blanche.
RMN (CD3CN, 400 MHz, 298 K) : = 1,21 (t, J= 7,0 Hz, 19H, Ci-k) ; 2,58 et 2,67 (ABX, Jiu= 4,9 Hz, Jgx= 5,5 Hz, JAB = 12,1 Hz, 6H, CLI2S) ; 2,82 (s, 12H, N-C112-C1-1_2-N) ; 3,11 (s, 6H, CH2C0) ; 4,14 (q, J = 7,0 Hz, 6H, CIL12-CH3) ;4,32-4,37 (m, 31-1, CH), 7,17-7,27 (m, 30H, SC(C6H5)3) ; 7,33 (d, J= 7,4 Hz, I5H, SC(C6H1)3) ; 7,50 (d, J = 8,2 Hz, 3H, NI-1).
RMN I3C (CD3CN, 100 MHz, 298 K) : 3 = 14,41 (CH3) ; 34,20 (CH9SC) ; 51,10 (CH) ; 57,12 et 61,98 (N-CH2-CH2-N) ; 63,01 (CH2CH3) ; 66,93 (CH2C0), 128,25-129,71 ((Ç6-15)3) ;
144,53 (C(C6H5)3) ; 171,08 et 170,57 (2*C0).
ES-MS : m/z : [M + H1+ = 1423,42 et [M + CIT = 1457,08.
Analyse élémentaire calculée (%) pour C84H901\1609S3, H20 (1441,85 g/mol) : C, 69,97 ; H, 6,43 ; N, 5,83 ; S, 6,67 ; trouvée : C, 69,75 ; H, 6,36 ; N, 5,77 ; S, 7,02.

Exemple 9 : Synthèse du composé 9 : NOTA(Cys0C2H5)3 De l'acide trifluoroacétique (1,25 mL, 16,85 mmol) et du triéthylsilane (0,325 mL, 2,02 mmol) sont successivement additionnés au composé 8 (0,480 g, 0,337 mmol) dans 17 mL de dichlorométhane (CH2a2), sous argon.
Après 30 minutes d'agitation à température ambiante, le mélange est évaporé.
Le produit résultant (703 mg) est ensuite purifié par HPLC (tR = 15,6 minutes (gradient linéaire 80/20 à 0/100, A/B en 15 minutes)).
Le composé 9 obtenu est un solide huileux (0,199 g, rendement = 84%).
RMN 1H (CD3CN, 400 MHz, 298 K) : 5 = 1,26 (t, J= 7,3 Hz, 9H, CH3) ; 2,85-3,06 (m, 18H, CL12SH et N-CE12-012-N) ; 3,68 (s, 6H, CF12C0) ; 4,13-4,24 (m, 6H, C-CH3) ;
4,67 (td, J
4,4 et 7,3 Hz, 3H, CH) ; 7,45 (d, J = 8,1 Hz, 3H, NH).
RMN 13C (CD3CN, 100 MHz, 298 K) :6 = 14,99 (CH3) ; 27,31 (CH2SH) ; 50,41 et 51,33 (N-CH2-CH2-N) ; 56,29 (CH) ; 58,93 (CH2C0) ; 63,13 (CH2CH3) ; 170,49 et 171,38 (2*C0).
ES-MS (m/z) : [M + H] = 697,6.
2/ Caractérisation des complexes du cuivre Cu(I) 2/1- Spectroscopie UV-visible et dichroïsme circulaire La formation des complexes du Cu(I) a été suivie par spectroscopie UV. La bande de transfert de charge thiolate Cu(I) apparait clairement autour de 260 nm. Cette bande croît jusqu'à 2 équivalents pour les quatre composés NTA(Cys0C2H5)3, NTA(CysNH2)3, NTA(Cys0H)3 et NOTA(Cys0C2H5)3. Les complexes du Cu(I) obtenus ont donc une stoechiométrie globale de 2:1 (Cu:L) pour ces ligands (L) comportant trois cystéines.
La figure 1 donne un exemple de dosage UV du NTA(Cy50C2H5)3 (composé 4) par du Cu(CH3CN)PF6 (Cu(I)) en tampon phosphate à un pH de 7,4.
Le même type de dosage suivi par dichroïsme circulaire montre la formation successive de deux complexes entre 0 et 2 équivalents de Cu(I). Pour le NTA(Cys0C2H5)3, le premier complexe formé ne possède pas de bande caractéristique de l'interaction Cu-Cu (au-delà de 300 nm), ce premier complexe est donc un composé mononucléaire. Le second complexe formé entre 1 et 2 équivalents possède une bande à 340 nm et est donc un composé
polynucléaire du cuivre Cu(l).
Pour le NOTA(Cys0C2H5)3, uniquement des complexes polynucléaires sont mis en évidence.

Mode opératoire :
Les fonctions thiols -SH des agents chélatants étant susceptibles de s'oxyder à l'air, toutes les solutions ont été préparées dans une boîte à gants sous atmosphère d'argon.
Des solutions de ligands ont ensuite été préparées, avant chaque expérience, en utilisant une eau désoxygénée et purifiée par un système Millipore MilIi-Q
contenant 20 mM d'une solution de tampon phosphate (pH = 7,4) et d'acétonitrile (v/v :
9/1).
La concentration finale de la solution de ligand a été déterminée par mesure de la concentration des fonctions thiols libres dans le ligand, suivant la procédure d'Ellman décrite dans P. W. Riddles, R. L. Blakeley, B. Zerner, Methods Enzymol., 1983, 91, pp.
49-60. Cette méthode utilise de l'acide 5,5'-dithiobis-2-nitrobenzoïque (DNTB) comme indicateur, chaque groupement thiol libre présent dans le ligand conduisant à

équivalent de TNB2- (E412 nm (rNB2-) =. 14 150 c412 nm étant le coefficient d'extinction molaire du TNB2- à 412 nm). Les concentrations de la solution de ligand sont comprises entre 30 et 100 pM.
Les solution de cuivre Cu(I) ont été préparées en dissolvant une quantité
appropriée de Cu(CH3CN).41DF6 dans de l'acétonitrile désoxygénée. La concentration finale est déterminée par ajout d'un excès de disulfonate bathocuproïne de sodium (Na2BCS) et par mesure de l'absorbance du Cu(BCS) /23- ( -max = 483 nm, E = 13 300 M-1.cm-1).
Les spectres UV-visible ont été enregistrés avec un spectrophotomètre Varian Carymc 50, et les titrages par dichroïsme circulaire avec un spectromètre Chirascanmc (Applied Photophysicse). 2,5 mL de la solution de ligand préparée est transférée dans une cellule UV de 1 cm de longueur fermé par un bouchon septum étanche. Des aliquotes correspondant à 0,1 équivalent de Cu(I) en solution dans de l'acétonitrile sont ajoutés dans la cellule UV via une seringue hermétique (Hamiltonmc), pour éviter une oxydation des fonctions thiols.
2/ 2- Molécularité des complexes : coefficients de diffusion La formation des complexes a également été suivie par RMN 1H à 500 MHz.

Pour le composé 4 NTA(Cy50C2H5)3 (noté ligand L), il apparait clairement que les complexes suivants sont formés :
= un complexe mononucléaire : L +
Cu(I) CuL2-= un complexe polynucléaire : CuL2- + Cu(I) - (Cu2L-) n Les coefficients de diffusion de ces complexes ont également été mesurés (cf.
Tableau Il). Ces coefficients de diffusion translationnels sont reliés à la masse moléculaire des composés et permettent d'évaluer la molécularité des complexes (P. Rousselot-Pailley, O. Sénèque, C. Lebrun, S. Crouzy, D. Boturyn, P. Dumy, M. Ferrand, P.
Delangle, Inorg. Chem., 2006, 45, pp. 5510-5520). Ils indiquent que les complexes formés avec le composé 4 NTA(Cys0C2H5)3 sont bien le CuL puis le Cu6L3, tandis que l'espèce polymoléculaire Cu8L4 est observée pour le composé 9 NOTA(Cys0C2H5)3.
Tableau ll : Coefficients de diffusion D des complexes Cu(l)-composé 4 NTA(Cys0C2H5)3 et Cu(l)-composé 9 NOTA(Cys0C2H5)3 D (m2s-1) x 1010 L CuL (Cu21--)n Composé 4 3,2 3,0 2,0 ¨> n = 3 NTA(Cys0C21-15)3 Composé 9 3,0 - 1,8 ¨> n = 4 NOTA(Cys0C2H5)3 Mode opératoire :
Les spectres RMN ont été enregistrés sur un spectromètre Bruker Avancemc sur MHz, équipé d'une sonde indirecte proton de 5 mm munie de gradients 3 axes.
Les mesures du coefficient de diffusion ont été réalisées en utilisant une séquence bipolaire (bipolar stimulated spin echo sequence) (A. Jershow, N. Müller, J. Magn.
Reson., 1997, 125, pp. 372-375).

29a Les coefficients de diffusion ont été obtenus en utilisant la relation :
I (,5, ,,, g) = 10 expuy2g262(3)D1 dans laquelle :
- I (O, A, g) est l'intensité obtenue en présence des impulsions de gradient de force g, - lo est l'intensité obtenue en l'absence des impulsions de pulsation, - O est la longueur de l'impulsion de gradient, - L est le temps de diffusion, et - y est le ratio gyromagnétique (pour les protons, y = 26,7520 x 107 rad.1-1.s-1).
Les valeurs A et O utilisées pour les mesures du coefficient de diffusion étaient respectivement de 100 ms et de 2 ms.
Dans les expériences, g a été incrémenté de 2,95 à 41,2 G.cm-1.
Les échantillons de ligands ont été préparés dans une solution tampon phosphate à 20 mM de pH = 7,4, préparés dans une solution de D20 et de CD3CN (v/v : 9/1), à
une concentration de ¨1 mM. Les aliquotes d'une solution de Cu(CH3CN)413F6 dans du CD3CN ont ensuite été
ajoutés à l'échantillon de ligand.
2/ 3- Constantes d'affinité
5 L'affinité des agents chélatants synthétisés pour le Cu(I) est une donnée importante puisqu'elle permet de quantifier la capacité des agents chélatants à complexer cet ion.
Les constantes d'affinité ont été mesurées grâce à un compétiteur connu ayant une forte affinité pour le Cu(I), le disulfonate bathocuprene (BCS), qui forment des complexes de Cu(I) de stabilité connue selon la réaction ci-dessous :
10 Cu(I) + 2 BCS = Cu(BCS)2 K ¨ [Cu(BCS)2] = 101"
[Cul[BCSr (P. Rousselot-Pailley, O. Sénèque, C. Lebrun, S. Crouzy, D. Boturyn, P. Dumy, M. Ferrand, P. Delangle, Inorg. Chem., 2006, 45, pp. 5510-5520 ; Z. Xiao, F. Loughlin, G.
N. George, G.
J. Howlett, A. G. Wedd, J. Am. Chem. Soc., 2004, 126, pp. 3081-3090).
La quantité de disulfonate bathocuproibe (BCS) ajoutée nécessaire pour déplacer 50% du 15 Cu(1) complexé par ces ligands est une première indication de l'affinité
pour le Cu(1). Plus ce pourcentage est élevé, plus l'affinité du ligand soufré pour le Cu(I) est forte. Ces données montrent immédiatement que les trois ligands étudiés peuvent être classés selon leur affinité
croissante pour le Cu(I) :
Composé 3 NTA(Cys0H)3 <Composé 9 NOTA(Cys0C2H5)3 <Composé 4 20 NTA(Cys0C2H5)3 ¨ Composé 6 NTA(CysNH2)3 Ces expériences de compétition ont permis de quantifier l'affinité de ces nouveaux agents chélatants pour le Cu(I) : les constantes apparentes de complexation du Cu(I) à pH = 7,4 dans un tampon phosphate à 20 mM, telles que définies ci-dessous, sont données au Tableau III.
[Cu omplexé
Kõ rcu ri ihbre 1.-L libre Tableau III : Résultats des expériences de compétition pour les différents ligands, dans une solution tampon phosphate à 20 mM de pH 7,4, à une température de 298 K
Composé 3 Composé 4 Composé 6 Composé 9 NTA(Cys0H)3 NTA(Cys0C2H5)3 NTA(CysNH2)3 NOTA(Cys0C2H5)3 Equivalents 3,5 57 50 12 BCS*
logKapp 16 19 19 17,5 * Nombre d'équivalents de BCS par rapport au Cu, nécessaire pour déplacer 50%
du cuivre complexé par un ligand en partant des concentrations [Cub = 0,9[1]0, dans un tampon phosphate à 20 mM de pH 7,4, à une température de 298 K.
Il apparait clairement que :
le composé 4 NTA(CysC2H5)3 et le composé 6 NTA(CysNH2)3 ont une affinité
pour le Cu(I) extrêmement élevée (Kapp = 1019), l'affinité est moins forte pour le composé comportant des fonctions acides, le composé 3 NTA(Cys0H)3, par rapport au ligand neutre similaire représenté par le composé 4 NTA(Cys0C2H5)3.
Mode opératoire :
Les complexes du cuivre Cu(I) avec les ligands sont dosés par le disulfonate bathocuproïne (BCS) dans le but de mesurer leurs constantes d'affinité. Le complexe est préparé en ajoutant une solution d'acétonitrile (CH3CN) contenant 0,5, 0,9 ou 1,8 équivalents de cuivre Cu(I) à la solution de ligand, dans une solution tampon phosphate de 20 mM de pH = 7,4 /
acétonitrile (v/v : 9/1). La formation du complexe est ensuite réalisée par agitation du mélange pendant 10 minutes sous argon.
Des aliquotes d'une solution de disulfonate bathocuproïne (BCS) dans la même solution tampon sont ensuite ajoutés au complexe ligand-cuivre.
Les spectres UV-visible sont ensuite enregistrés, et la stabilité de l'absorbance est contrôlée avant l'addition des autres aliquotes.

=
3/ Caractérisation des complexes d'autres ions métalliques D'une manière générale, la formation d'un complexe à partir d'un métal M et de n ligand L
s'écrit :
M + nL1-=) [M(L)]
A cette réaction est associée une constante de complexation apparente log Kapp, OU
Kapp [ML]/[M][L]tot dans laquelle :
- [ML] est la concentration en complexe, [M] est la concentration en métal, et - [L]tot est la concentration en ligand libre (quelle que soit sa forme protonée).
Cette constante s'exprime de façon approximative en faisant apparaître les concentrations au lieu des activités des ions présents à l'équilibre, sans jamais faire apparaître les solides ni le solvant.
Les constantes de complexation apparentes de certains des agents chélatants connus sont reportées dans le tableau IV ci-dessous :
Tableau IV:
Log Kapp EDTA Trien Pen BAL
à T = 298 K
(à pH = 7,4) Ca(II) 7,8 Cu(I) 8,3 Cu(II) 16,0 16,0 Zn(11) 13,7 7,9 5,8 9,0 Cd(II) 13,7 6,6 7,6 Hg(II) 18,7 20,6 14,9 21,2 Pb(II) 15,2 6,3 9,2 Sélectivité Cu/Zn 2,3 8,1 2,5 Sélectivité Hg/Zn 5 12,7 9,1 12,2 La sélectivité entre deux métaux M/M' correspond à la sélectivité du ligand pour le métal M
par rapport à celle du métal M', cette sélectivité étant égale à:
log (Kapp(M)/Kapp(M')) = log Kapp(M) - log Kapp(M') Les agents chélatants présentés peuvent également avoir un intérêt pour la complexation de certains ions toxiques comme Hg(II), Cd(II) et Pb(II). Une étude approfondie a été réalisée dans le cas du composé 4 NTA(Cys0C2H5)3 qui s'avère être le chélateur du Cu(I) le plus puissant. Quelques données disponibles pour le composé
9 NOTA(Cys0C2H5)3 sont également présentées ci-dessous.
3/1- Etude réalisée sur le composé 4 NTA(Cys0C2F15)3 Des dosages par UV visant à suivre l'apparition de la bande à transfert de charge S-M ont permis de montrer que les stoechiométries des complexes étaient 1:1 (M:L) pour Zn(II), Pb(II) et Hg(II). Seul le complexe de Hg(II) évolue ensuite vers un autre complexe impliquant vraisemblablement plusieurs ions métalliques (Hg3I-2).
Les constantes d'affinité avec Pb(II) ont été déterminées par analyse des dosages des ligands par Pb(II) dans une solution tampon de Bis-Tris (2-bis(2-hydroxyéthyl)amino-2-(hydroxyméthyl)-1,3 propanediol) à 20 mM et à pH = 7, grâce au programme SPECFITmc, qui utilise un algorithme de décomposition en valeur singulière et affine les données selon une analyse des moindre carrés, et suivant la procédure décrite dans l'article P. Rousselot-Pailley, O. Sénèque, C. Lebrun, S. Crouzy, D. Boturyn, P. Dumy, M. Ferrand, P. Delangle, lnorg. Chem., 2006, 45, pp. 5510-5520, en tenant compte de l'affinité du tampon pour Pb(II).
Les constantes d'affinité avec les ions Cd(II), Zn(II) et Ca(II) ont ensuite été
déterminées en titrant le complexe de Pb(II) par un deuxième ion métallique suivant la réaction de compétition suivante :
PbL + M Pb + ML
Pour Hg(II), qui a une très forte affinité pour les ligands thiolates, nous avons réalisé
une compétition avec l'EDTA de constante d'affinité connue (cf. Tableau IV) selon la réaction suivante :
HgL + EDTA L + HgEDTA

Tableau V : Constantes de stabilité apparentes des complexes M.NTA(Cys0C2H5)3"
à pH =
7, à une température de 298 K
log Kapp (à pH = 7) Xmax (nm) c (cm-1M-1) Ca(II) <3 Zn(II) 9,1 220 15 800 Cd(Il) 10,6 250 20 000 Hg(I I) > 22,5 237 15 000 Pb(II) 8,9 349 5 500 Mode opératoire :
La procédure est la même que celle suivie ci-dessus au paragraphe 2/1-.
Les solutions métalliques sont préparées à partir du sel correspondant (CaCl2, CdC12, PbCl2 ou ZnCl2) dans une solution tampon Bis-Tris à 20 mM de pH = 7, et titrées avec une solution d'EDTA à 5 mM en présence d'un indicateur colorimétrique.
Pour les titrages, les aliquotes des solutions de Ca(II), Cd(II) ou Zn (II) sont ajoutées à la cellule UV contenant un complexe peptide/plomb dans une solution tampon de Bis-Tris à 20 mM de pH = 7, obtenu à partir d' 1 équivalent de ligand et de 3 équivalents de Pb(11).
L'expérience est réalisée jusqu'à la disparition du signal correspondant au complexe peptide/plomb, ou jusqu'à ce que le signal du complexe peptide/plomb soit inférieur à 10%.
Pour Ca(II), aucune évolution du spectre du complexe du plomb n'a été observée même pour 1000 équivalents de Ca(II) ajoutés par rapport au ligand.
Les spectres ont été analysés en utilisant le programme SPECFIT, comme précédemment.
La solution tampon Bis-Tris a été choisie parce qu'elle forme un complexe stable et soluble avec le Pb(II), empêchant ainsi la formation et la précipitation de Pb(OH)2 (J. C. Payne, M. A.
terHorst, H. A. Godwin, J. Am. Chem. Soc, 1999, 121, pp. 6850-6855).
L'affinité des ions métalliques pour la solution tampon de Bis-Tris étant par ailleurs connue, elle a été inclue en tant que paramètre dans l'ajustement (1001 = 2,25 pour le Ca(II), 2,47 pour le Cd(II), 2,38 pour le Zn(II) et 4,32 pour le Pb(II) (K. H. Scheller, T. H. Abel, P. E.
Polanyi, P. K. Wenk, B.
E. Fischer, H. Sigel, Eur. J. Biochern., 1980, 107, pp. 455-466).
Pour le titrage avec Ca(II), aucune évolution de la bande LMCT du complexe Pb(II) n'a été
mise en évidence, ainsi les données ont été simulées avec moins de 1% de Pb(II), ce qui a permis d'obtenir une limite supérieure pour la constante d'affinité apparente 10gBCaNTACys(0C2115)3 <3.

Une solution de mercure est préparée par dissolution de HgCl2 dans l'eau. Un complexe HgL
est formé par addition d'aliquotes de cette solution de mercure à une solution de ligand dans une solution tampon phosphate de 20 mM à pH = 7,4 jusqu'à 0,9 équivalent.
L'évolution de la bande LMCT de Hg(II) à 290 nm est ensuite suivie par titrage avec une solution de 5 Na2EDTA à 5 mM. Aucune évolution de cette bande n'est observée jusqu'à 63 équivalents d'EDTA ajoutés. Ces données ont été simulées avec moins de 5% de Hg(II) déplacé par l'EDTA, ce qui conduit à une constante d'affinité apparente 10gBligNTACys(0C2145)3 > 22,5.
3/ 2- Etude réalisée sur le composé 9 NOTA(Cys0C2H5)3 10 La même procédure que pour le composé 4 nous a permis d'évaluer les affinités suivantes :
Tableau VI: Constantes de stabilité apparentes des complexes M.NOTA(Cys0C2H5)3-à pH
= = 7, à une température de 298 K
log Kapp (à pH =- 7) Xmax (nm) s = Ca(II) Zn(II) 8-10 Cd(II) 8-10 Hg(II) 240 14 000 Pb(II) 10 342 3 700 Avantages des agents chélatants de l'invention en comparaison à d'autres agents 15 chélatants connus :
Le Tableau VII rassemble les constantes d'affinité mesurées avec les agents chélatants de l'invention. Les valeurs mesurées avec un peptide modèle (PC) de la boucle de liaison du cuivre Cu(I) d'une métallochaperonne Atxl (protéine impliquée dans le transport du cuivre Cu(I)), sont également données, pour comparaison avec les protéines chélatant le Cu(I) 20 naturellement dans les cellules.
Le ligand Pc lie les ions métalliques grâce à deux fonctions thiolates de deux cystéines insérées dans une séquence d'acides aminés MxCxxC. L'introduction de trois cystéines dans le composé 4 NTA(Cys0C2H5)3, le composé 6 NTA(CysNH2)3 et le composé 9 NOTA(Cys0C2H5)3 a permis d'obtenir des complexes stables et de très forte sélectivité par 25 rapport aux ions essentiels potentiellement compétiteurs, Ca(II) et Zn(II).

Tableau VII: Bilan des constantes d'affinité avec les chélateurs cystéines log Kõpp pC Composé 4 Composé 9 NTA(Cys0C2H5)3 NOTA(Cys0C2115)3 Ca(l1) <3 Cu(I) 16,5 19 17,5 Cu(II) Zn(II) 6,8 9,1 8-10 Cd(II) 9,2 10,6 8-10 Hg(II) > 18,6 > 22,5 Pb(II) 8,0 = 8,9 10 Sél. Cu/Zn 9,7 9,9 7,5-9,5 Sél. Cu/Ca > 16 Sél. Hg/Zn > 11,8 > 13,4 Sél. Hg/Ca > 19,5 Afin de montrer l'intérêt des agents chélatants de l'invention, nous avons comparé les données obtenues, répertoriées dans le Tableau VII, avec celles connues d'agents chélatants commerciaux connus répertoriées (cf. Tableau IV).
Pour le composé 4 NTA(Cys0C2H5)3 L'affinité du composé 4 NTA(Cys0C2H5)3 pour les ions Cu(I) et Hg(II) est très élevée. Ce ligand complexe mieux le cuivre que l'EDTA et le Trien, et est un complexant très efficace de Hg(II), d'affinité plus forte que les autres- chélateurs tabulés.
Un point important pour l'utilisation d'agents chélatants in vivo est leur sélectivité vis-à-vis des ions essentiels tels que Ca(II) et Zn(II). Là encore, les sélectivités mesurées pour le composé 4 NTA(Cys0C2H5)3 sont nettement supérieures à celles des agents chélatants connus.
Pour le composé 9 NOTA(Cys0C,H5)3 :
Moins de données ont été mesurées avec ce ligand. On peut néanmoins noter une forte affinité
entre le composé 9 NOTA(Cys0C21-15)3 et le Cu(I), ainsi qu'une sélectivité
intéressante pour le cuivre par rapport au zinc. Ses propriétés sont donc très intéressantes en comparaison de l'EDTA et du Trien.

Les composés de l'invention présentent des affinités et sélectivités qui les rendent très prometteurs pour la complexation sélective du Cu(I), ayant un degré
d'oxydation favorisé
dans le Milieu intracellulaire, et qui peut être ciblé pour les maladies de type Wilson ou Alzheimer. Ces composés peuvent égaie¨ment être candidats pour la complexation sélective du mercure lors d'intoxications par ce métal.
= (11), 1699-1704).
At a temperature of 0 ° C., a solution of bromoacetyl bromide (0.235 ml, 2.69 mmol) in 1 mL of dichloromethane (CH 2 Cl 2) is added to a mixture of HCysC (C6H5) 30C2H5 (0.996 g, 2.54 mmol) in 10 mL of dichloromethane (CH2Cl2) and 10 mL of a 10% aqueous solution of potassium bicarbonate (K1-IC03).
The reaction mixture is then stirred for 1 hour at a temperature of 0 C.

After decantation, the aqueous phase is extracted with 3 x 16 mL of dichloromethane (CH2Cl2).
The organic phase is dried with sodium sulphate (Na 2 SO 4) and then concentrated under vacuum.
Compound 7 (1.29 g, yield = 99%), yellow in color, is then used without additional purification.
. 1H NMR (CD3CN, 400MHz, 298K): δ = 1.29 (t, J = 3.6Hz, 3H, CHI); 2.62 and 2.74 (ABX, JA X = 4.8 Hz, JBx - = 6.0 Hz, JAB = 12.4 Hz, 21-1, CH2SC (C6H5) 3); 3.86 (s, 2H, BrCE2CO);
4.23 (q, J = 7.0 Hz, 2H, CH 2 CH 3); 4.56 (td, J = 2.4 and 7.2 Hz, 1H, CH); 6.95 (d, J 8.0 Hz, 1H, N1-1); 7.24-7.35 (in, 10H, SC (C6H5) 3); 7.43 (d, J = 7.6 Hz, 5H, SC (C6H5) 3).
Example 8 Synthesis of compound 8: NOTE (CysC (C6H5) 30C2H5) 3 1,4,7-Triazacyclononane trihydrochloride (0.423 g, 1.77 mmol) and carbonate of potassium (K2CO3) (1.56 g, 11.31 mmol) are added successively to a solution of compound 7 (2.90 g, 5.66 mmol) in 60 mL of anhydrous acetonitrile (CH3CN).
The reaction mixture is then stirred for 16 hours at room temperature, under argon.
After evaporation of the solvent, the residue is dissolved in a 180 ml mixture acetate of ethyl (CH3C00C2H5) and 100 mL of water.
The organic phase is washed with 2 x 70 mL of water and 70 mL of a solution saturated with sodium chloride (NaCl), dried with sodium sulphate (Na2SO4), and concentrated under reduced pressure (20 mbar).
The resulting product (2.66 g) is purified by gel chromatography.
silica (40 mL, eluent:
CH2Cl2 / ethanol gradient ranging from 100/0 to 96/4), to give a compound 8 (1.99 g, yield 77%) as a white powder.
NMR (CD3CN, 400 MHz, 298 K): = 1.21 (t, J = 7.0 Hz, 19H, Cl-k); 2.58 and 2.67 (ABX, Jiu = 4.9 Hz, Jgx = 5.5 Hz, JAB = 12.1 Hz, 6H, CLI2S); 2.82 (s, 12H, N-C112-Cl-1_2-N); 3.11 (s, 6H, CH 2 CO); 4.14 (q, J = 7.0Hz, 6H, CIL12-CH3), 4.32-4.37 (m, 31-1, CH), 7.17-7.27 (m, 30H, SC (C6H5) 3); 7.33 (d, J = 7.4Hz, 15H, SC (C6H1) 3); 7.50 (d, J = 8.2 Hz, 3H, NI-1).
13 C NMR (CD3CN, 100 MHz, 298 K): δ = 14.41 (CH3); 34.20 (CH9SC); 51.10 (CH) ; 57.12 and 61.98 (N-CH2-CH2-N); 63.01 (CH 2 CH 3); 66.93 (CH2C0), 128.25-129.71 ((Ç6-15) 3);
144.53 (C (C6H5) 3); 171.08 and 170.57 (2 * C0).
ES-MS: m / z: [M + H + + = 1423.42 and [M + CIT = 1457.08.
Calculated Elemental Analysis (%) for C84H901.1609S3, H20 (1441.85 g / mol): C, 69.97; H
6.43; N, 5.83; S, 6.67; found: C, 69.75; H, 6.36; N, 5.77; S, 7.02.

Example 9 Synthesis of Compound 9: NOTE (CysOC2H5) 3 Trifluoroacetic acid (1.25 mL, 16.85 mmol) and triethylsilane (0.325 mL, 2.02 mmol) are successively added to compound 8 (0.480 g, 0.337 mmol) in 17 mL of dichloromethane (CH2a2) under argon.
After stirring for 30 minutes at room temperature, the mixture is evaporated.
The resulting product (703 mg) is then purified by HPLC (tR = 15.6 minutes).
(gradient linear 80/20 at 0/100, A / B in 15 minutes)).
The compound 9 obtained is an oily solid (0.199 g, yield = 84%).
1H NMR (CD3CN, 400MHz, 298K): δ = 1.26 (t, J = 7.3Hz, 9H, CH3); 2.85 to 3.06 (m, 18H, CL12SH and N-CE12-012-N); 3.68 (s, 6H, CF12CO); 4.13-4.24 (m, 6H, C-CH 3);
4.67 (td, J
4.4 and 7.3 Hz, 3H, CH); 7.45 (d, J = 8.1 Hz, 3H, NH).
13 C NMR (CD3CN, 100 MHz, 298 K): δ = 14.99 (CH3); 27.31 (CH 2 SH); 50.41 and 51.33 (N-CH2-CH2-N); 56.29 (CH); 58.93 (CH 2 CO); 63.13 (CH 2 CH 3); 170.49 and 171.38 (2 * C0).
ES-MS (m / z): [M + H] = 697.6.
2 / Characterization of Copper Cu (I) Complexes 2 / 1- UV-visible spectroscopy and circular dichroism The formation of Cu (I) complexes was followed by UV spectroscopy. The transfer tape Cu (I) thiolate charge appears clearly around 260 nm. This band grows up to 2 equivalents for the four compounds NTA (CysOC2H5) 3, NTA (CysNH2) 3, NTA (Cys0H) 3 and NOTE (Cys0C2H5) 3. The Cu (I) complexes obtained thus have a stoichiometry global 2: 1 (Cu: L) for these ligands (L) having three cysteines.
Figure 1 gives an example of UV dosage of NTA (Cy50C2H5) 3 (compound 4) by Cu (CH3CN) PF6 (Cu (I)) in phosphate buffer at pH 7.4.
The same type of dosage followed by circular dichroism shows the formation successive two complexes between 0 and 2 equivalents of Cu (I). For the NTA (Cys0C2H5) 3, the first formed complex does not have a characteristic band of the Cu-Cu interaction (Beyond 300 nm), this first complex is therefore a mononuclear compound. The second complex formed between 1 and 2 equivalents has a band at 340 nm and is therefore a compound polynuclear copper Cu (1).
For NOTE (Cys0C2H5) 3, only polynuclear complexes are evidence.

Operating mode:
The thiols -SH functions of the chelating agents being liable to oxidize in the air, all solutions were prepared in a glove box under atmosphere argon.
Solutions of ligands were then prepared before each experiment, in using deoxygenated water and purified by a Millipore MilIi-Q system containing 20 mM of a solution of phosphate buffer (pH = 7.4) and acetonitrile (v / v:
9/1).
The final concentration of the ligand solution was determined by measurement of the concentration of free thiol functions in the ligand, following the procedure Ellman described in PW Riddles, RL Blakeley, B. Zerner, Methods Enzymol., 1983, 91, pp.
49-60. This method uses 5,5'-dithiobis-2-nitrobenzoic acid (DNTB) as indicator, each free thiol group present in the ligand leading to equivalent of TNB2- (E412 nm (rNB2-) = 14 150 c412 nm being the coefficient molar extinction of TNB2- at 412 nm). The concentrations of the solution of ligand are between 30 and 100 μM.
Cu (I) copper solutions were prepared by dissolving a quantity appropriate Cu (CH3CN) .41DF6 in deoxygenated acetonitrile. The final concentration is determined by adding an excess of sodium bathocuproin disulfonate (Na2BCS) and by measuring the absorbance of Cu (BCS) 23 (-max = 483 nm, E = 13,300 M-1.cm-1).
UV-visible spectra were recorded with a Varian spectrophotometer Carymc 50, and titrations by circular dichroism with a Chirascan ™ spectrometer (Applied Photophysicse). 2.5 ml of the prepared ligand solution is transferred to a UV cell 1 cm long closed by a waterproof septum cap. of the aliquots corresponding to 0.1 equivalent of Cu (I) in solution in acetonitrile are added in the UV cell via an airtight syringe (Hamilton ™), to avoid oxidation thiol functions.
2 / 2- Molecularity of the complexes: diffusion coefficients Complex formation was also monitored by 1H NMR at 500 MHz.

For compound 4 NTA (Cy50C2H5) 3 (denoted ligand L), it is clear that the following complexes are formed:
= a mononuclear complex: L +
Cu (I) CuL2-= a polynuclear complex: CuL2- + Cu (I) - (Cu2L-) n The diffusion coefficients of these complexes were also measured (cf.
Board He). These translational diffusion coefficients are connected to the mass Molecular compounds and make it possible to evaluate the molecular nature of the complexes (P. Rousselot-Pailley, O. Seneca, C. Lebrun, S. Crouzy, D. Boturyn, P. Dumy, M. Ferrand, P.
Delangle Inorg. Chem., 2006, 45, pp. 5510-5520). They indicate that the complexes formed with the compound 4 NTA (Cys0C2H5) 3 are the CuL then the Cu6L3, while the species Polymolecular Cu8L4 is observed for compound 9 NOTE (Cys0C2H5) 3.
Table 11: Diffusion Coefficients D of Cu (l) -composed 4 NTA (CysOC2H5) 3 and Cu (1) -composition 9 NOTE (Cys0C2H5) 3 D (m2s-1) x 1010 L CuL (Cu21 -) n Compound 4 3.2 3.0 2.0 ¨> n = 3 NTA (Cys0C21-15) 3 Compound 9 3.0 - 1.8 ¨> n = 4 NOTE (Cys0C2H5) 3 Operating mode:
NMR spectra were recorded on a Bruker Avancemc spectrometer on MHz, equipped with an indirect proton probe of 5 mm provided with 3-axis gradients.
The measurements of the diffusion coefficient were performed using a bipolar sequence (Bipolar stimulated spin echo sequence) (A. Jershow, N. Müller, J. Magn.
Reson., 1997, 125, pp. 372-375).

29a The diffusion coefficients were obtained using the relation:
I (, 5, ,,, g) = 10 expuy2g262 (3) D1 in which :
I (O, A, g) is the intensity obtained in the presence of the pulses of force gradient g, - lo is the intensity obtained in the absence of the pulses of pulsation, - O is the length of the gradient pulse, L is the diffusion time, and - y is the gyromagnetic ratio (for protons, y = 26.7520 x 107 rad.1-1.s-1).
A and O values used for diffusion coefficient measurements were respectively 100 ms and 2 ms.
In experiments, g was incremented from 2.95 to 41.2 G.cm-1.
Ligand samples were prepared in a buffer solution phosphate 20 mM pH = 7.4, prepared in a solution of D20 and CD3CN (v / v: 9/1), a concentration of ¨1 mM. Aliquots of a solution of Cu (CH3CN) 413F6 in CD3CN were then summer added to the ligand sample.
2 / 3- Constants of affinity The affinity of the chelating agents synthesized for Cu (I) is a given important since it makes it possible to quantify the capacity of the chelating agents to complex this ion.
The affinity constants were measured by a known competitor having a strong affinity for Cu (I), disulfonate bathocuprene (BCS), which form complexes of Cu (I) of known stability according to the reaction below:
Cu (I) + 2 BCS = Cu (BCS) 2 K ¨ [Cu (BCS) 2] = 101 °
[Ass [BCSR
(P. Rousselot-Pailley, O. Seneca, C. Lebrun, S. Crouzy, D. Boturyn, P. Dumy, Mr. Ferrand, P. Delangle, Inorg. Chem., 2006, 45, pp. 5510-5520; Z. Xiao, F. Loughlin, G.
N. George, G.
J. Howlett, AG Wedd, J. Am. Chem. Soc., 2004, 126, pp. 3081-3090).
The amount of bathocuproibe disulfonate (BCS) added move 50% of Cu (1) complexed by these ligands is a first indication of affinity for Cu (1). More percentage is higher, the higher the affinity of the sulfur ligand for Cu (I) is strong. Those data immediately show that the three studied ligands can be classified according to their affinity growing for Cu (I):
Compound 3 NTA (Cys0H) 3 <Compound 9 NOTE (CysOC2H5) 3 <Compound 4 NTA (CysOC2H5) 3 ¨ Compound 6 NTA (CysNH2) 3 These competitive experiments have made it possible to quantify the affinity of these new agents chelating agents for Cu (I): the apparent complexing constants of Cu (I) at pH = 7.4 in 20 mM phosphate buffer, as defined below, are given in FIG.
Table III.
[Cu complexed Kõ rcu ri free 1.-L free Table III: Results of competition experiences for different ligands, in a 20 mM phosphate buffer solution of pH 7.4, at a Compound 3 Compound 4 Compound 6 Compound 9 NTA (CysOH) 3 NTA (CysOC2H5) 3 NTA (CysNH2) 3 NOTE (CysOC2H5) 3 Equivalents 3.5 57 50 12 BCS *
logKapp 16 19 19 17.5 * Number of BCS equivalents to Cu, needed to move 50%
of copper complexed with a ligand starting from the concentrations [Cub = 0.9 [1] 0, in one 20 mM phosphate buffer pH 7.4, at a temperature of 298 K.
It is clear that:
compound 4 NTA (CysC2H5) 3 and compound 6 NTA (CysNH2) 3 have an affinity for the extremely high Cu (I) (Kapp = 1019), the affinity is less strong for the compound having acid functions, the compound 3 NTA (CysOH) 3, relative to the similar neutral ligand represented by compound 4 NTA (Cys0C2H5) 3.
Operating mode:
Copper Cu (I) complexes with ligands are assayed by disulfonate bathocuproine (BCS) in order to measure their affinity constants. The complex is prepared by adding a solution of acetonitrile (CH3CN) containing 0.5, 0.9 or 1.8 equivalents of Copper Cu (I) at the ligand solution, in a 20 mM phosphate buffer solution of pH = 7.4 /
acetonitrile (v / v: 9/1). The formation of the complex is then carried out by stirring the mix for 10 minutes under argon.
Aliquots of bathocuproin disulfonate solution (BCS) in the same solution buffer are then added to the ligand-copper complex.
The UV-visible spectra are then recorded, and the stability of the absorbance is controlled before the addition of the other aliquots.

=
3 / Characterization of complexes of other metal ions In general, the formation of a complex from a metal M and n ligand L
is written:
M + nL1- =) [M (L)]
This reaction is associated with an apparent complexation constant log Kapp, OR
Kapp [ML] / [M] [L] tot in which :
- [ML] is the concentration in complex, [M] is the metal concentration, and - [L] tot is the concentration of free ligand (whatever its form protonated).
This constant is expressed roughly by showing the concentrations at place of activities ions present at equilibrium, without ever doing appear solids nor the solvent.
The apparent complexation constants of some of the chelating agents known are reported in Table IV below:
Table IV:
Log Kapp EDTA Trien Pen BAL
at T = 298 K
(at pH = 7.4) Ca (II) 7.8 Cu (I) 8.3 Cu (II) 16.0 16.0 Zn (11) 13.7 7.9 5.8 9.0 Cd (II) 13.7 6.6 7.6 Hg (II) 18.7 20.6 14.9 21.2 Pb (II) 15.2 6.3 9.2 Selectivity Cu / Zn 2.3 8.1 2.5 Selectivity Hg / Zn 5 12.7 9.1 12.2 The selectivity between two metals M / M 'corresponds to the selectivity of the ligand for metal M
relative to that of the metal M ', this selectivity being equal to:
log (Kapp (M) / Kapp (M ')) = log Kapp (M) - log Kapp (M') The chelating agents presented may also have an interest in the complexation of certain toxic ions such as Hg (II), Cd (II) and Pb (II). A
study in the case of the compound 4 NTA (Cys0C2H5) 3 which proves to be to be the most powerful Cu (I) chelator. Some data available for the compound 9 NOTE (Cys0C2H5) 3 are also presented below.
3 / 1- Study carried out on the compound 4 NTA (CysOC2F15) 3 UV assays to monitor the appearance of the UV transfer band charge S-M showed that the stoichiometries of the complexes were 1: 1 (M: L) for Zn (II), Pb (II) and Hg (II). Only the Hg (II) complex then evolves towards a other complex probably involving several metal ions (Hg3I-2).
The affinity constants with Pb (II) were determined by analysis of the dosages of ligands by Pb (II) in a buffer solution of Bis-Tris (2-bis (2-hydroxyethyl) amino-2-(hydroxymethyl) -1,3 propanediol) at 20 mM and pH = 7, thanks to the program SPECFIT ™, which uses a singular value decomposition algorithm and refines them data according to a least squares analysis, and following the procedure described in P. Rousselot-Pailley, O. Seneca, C. Lebrun, S. Crouzy, D. Boturyn, P. Dumy, M. Ferrand, P. Delangle, lnorg. Chem., 2006, 45, pp. 5510-5520, taking count of the affinity of the buffer for Pb (II).
The affinity constants with the Cd (II), Zn (II) and Ca (II) ions were then summer determined by titrating the Pb (II) complex with a second metal ion following the following competition reaction:
PbL + M Pb + ML
For Hg (II), which has a very strong affinity for thiolate ligands, we realized a competition with EDTA of known affinity constant (see Table IV) according to following reaction:
HgL + EDTA L + HgEDTA

Table V: Apparent stability constants of M.NTA complexes (CysO C 2 H 5) 3 "
at pH =
7, at a temperature of 298 K
log Kapp (at pH = 7) Xmax (nm) c (cm-1M-1) Ca (II) <3 Zn (II) 9.1 220 15 800 Cd (It) 10.6 250 20 000 Hg (II)> 22.5 237 15,000 Pb (II) 8.9 349 5 500 Operating mode:
The procedure is the same as that followed in paragraph 2 / 1- above.
The metal solutions are prepared from the corresponding salt (CaCl 2, CdC12, PbCl2 or ZnCl2) in a 20 mM Bis-Tris buffer solution of pH = 7, and titrated with a solution EDTA at 5 mM in the presence of a colorimetric indicator.
For titrations, aliquots of Ca (II), Cd (II) or Zn (II) solutions are added to the UV cell containing a peptide / lead complex in a Bis buffer solution Tris at 20 mM pH = 7, obtained from 1 equivalent of ligand and 3 equivalents of Bp (11).
The experiment is carried out until the disappearance of the signal corresponding to complex peptide / lead, or until the signal from the peptide / lead complex is less than 10%.
For Ca (II), no evolution of the lead complex spectrum was observed even for 1000 equivalents of Ca (II) added relative to the ligand.
The spectra were analyzed using the SPECFIT program, as previously.
Bis-Tris buffer solution was chosen because it forms a complex stable and soluble with Pb (II), thus preventing the formation and precipitation of Pb (OH) 2 (JC Payne, MA
terHorst, HA Godwin, J. Am. Chem. Soc., 1999, 121, pp. 6850-6855).
The affinity of the ions metal for the Bis-Tris buffer solution being otherwise known, she was included in as a parameter in the fit (1001 = 2.25 for Ca (II), 2.47 for the Cd (II), 2.38 for Zn (II) and 4.32 for Pb (II) (KH Scheller, TH Abel, PE
Polanyi, PK Wenk, B.
E. Fischer, H. Sigel, Eur. J. Biochern., 1980, 107, pp. 455-466).
For the titration with Ca (II), no evolution of the LMCT band of the complex Pb (II) was not highlighting, so the data was simulated with less than 1% of Pb (II), which has allowed to obtain an upper bound for the apparent affinity constant 10gBCaNTACys (0C2115) 3 <3.

A mercury solution is prepared by dissolving HgCl 2 in water. A
HgL complex is formed by adding aliquots of this mercury solution to a solution of ligand in a 20 mM phosphate buffer solution at pH = 7.4 to 0.9 equivalents.
The evolution of the LMCT band of Hg (II) at 290 nm is then followed by titration with a solution of Na2EDTA at 5 mM. No evolution of this band is observed up to 63 equivalent EDTA added. These data were simulated with less than 5% Hg (II) moved by EDTA, which leads to a constant apparent affinity 10gBligNTACys (0C2145) 3> 22.5.
3 / 2- Study carried out on compound 9 NOTE (Cys0C2H5) 3 The same procedure as for compound 4 allowed us to evaluate the following affinities:
Table VI: Apparent stability constants of M.NOTA complexes (CysOC2H5) 3-at pH
= = 7, at a temperature of 298 K
log Kapp (at pH = -7) Xmax (nm) s = Ca (II) Zn (II) 8-10 Cd (II) 8-10 Hg (II) 240 14,000 Pb (II) 10,342 3,700 Advantages of the chelating agents of the invention compared to other agents 15 known chelating agents:
Table VII gathers the affinity constants measured with the agents chelating the invention. The values measured with a model peptide (PC) of the link from Copper Cu (I) of a metallochaperone Atxl (protein involved in the copper transportation Cu (I)), are also given, for comparison with chelating proteins Cu (I) Naturally in the cells.
The Pc ligand binds the metal ions through two thiolate functions of two cysteines inserted into an amino acid sequence MxCxxC. The introduction of three cysteines in compound 4 NTA (CysOC2H5) 3, compound 6 NTA (CysNH2) 3 and compound 9 NOTE (Cys0C2H5) 3 resulted in stable and very strong complexes selectivity by Compared to potentially competing essential ions, Ca (II) and Zn (II).

Table VII: Comparison of affinity constants with cysteine chelators log Kõpp pC Compound 4 Compound 9 NTA (Cys0C2H5) 3 NOTE (Cys0C2115) 3 Ca (l1) <3 Cu (I) 16.5 19 17.5 Cu (II) Zn (II) 6.8-9.1 8-10 Cd (II) 9.2 10.6 8-10 Hg (II)>18.6> 22.5 Pb (II) 8.0 = 8.9 Salt. Cu / Zn 9.7 9.9 7.5-9.5 Salt. Cu / Ca> 16 Salt. Hg / Zn>11.8> 13.4 Salt. Hg / Ca> 19.5 In order to show the interest of the chelating agents of the invention, we have compared data obtained, listed in Table VII, with those known chelating agents listed known commercial enterprises (see Table IV).
For the compound 4 NTA (CysOC2H5) 3 The affinity of the compound 4 NTA (CysO C 2 H 5) 3 for the Cu (I) and Hg (II) ions is very high. This complex ligand better copper than EDTA and Trien, and is a complexing very effective of Hg (II), stronger affinity than other tabulated chelators.
An important point for the use of chelating agents in vivo is their selectivity vis-à-vis essential ions such as Ca (II) and Zn (II). Here again, the selectivities measured for the compound 4 NTA (CysOC2H5) 3 are clearly superior to those of the agents chelating known.
For the compound 9 NOTE (CysOC, H5) 3:
Fewer data were measured with this ligand. We can nevertheless note a strong affinity between compound 9 NOTA (CysOC21-15) 3 and Cu (I), as well as selectivity interesting for copper versus zinc. Its properties are therefore very interesting in comparison of EDTA and Trien.

The compounds of the invention have affinities and selectivities which make very promising for the selective complexation of Cu (I), having a degree favored oxidation in the intracellular environment, and that can be targeted for diseases of Wilson type or Alzheimer. These compounds may also be candidates for complexation selective mercury during poisoning by this metal.
=

Claims (16)

REVENDICATIONS 38 1. Composés de formule (l) suivante :
dans lesquels le groupement A représente :
~ soit un atome d'azote, ~ soit un cycle répondant à la formule ci-dessous, et dans lequel la substitution se fait sur les atomes d'azote :
et dans lesquels :
- les radicaux R1, R'1 et R"1 représentent un atome d'hydrogène, - les radicaux R2, R'2 et R"2, identiques ou différents, sont choisis dans le groupe constitué par les groupements -NH2, -OH et -OR, dans lesquels R
représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué ayant 1 à 12 atomes de carbone. 1. Compounds of formula (I) below:
in which the group A represents:
~ either a nitrogen atom, ~ a cycle corresponding to the formula below, and in which the substitution is done on the nitrogen atoms:
and in which:
the radicals R1, R'1 and R "1 represent a hydrogen atom, the radicals R2, R'2 and R "2, which are identical or different, are chosen from the group consisting of the groups -NH2, -OH and -OR, in which R
represents a hydrogen atom or an optionally alkyl radical substituted having 1 to 12 carbon atoms. 2. Composés de formule (l) selon la revendication 1, dans lesquels les radicaux R2, R'2 et R"2 sont des groupements -OR dans lesquels R est un radical éthyle. 2. Compounds of formula (I) according to claim 1, wherein the radicals R2, R'2 and R "2 are -OR groups in which R is an ethyl radical. 3. Composés de formule (l) selon la revendication 1 ou 2, ledit composé
répondant à la formule spécifique (l a) suivante :
3. Compounds of formula (I) according to claim 1 or 2, said compound responding to the following specific formula:
4. Composés de formule (l) selon la revendication 1 ou 2, répondant à la formule spécifique (l b) suivante :

4. Compounds of formula (I) according to claim 1 or 2, corresponding to the specific formula (lb) below:

5. Procédé de préparation des composés de formule (l a) tels que définis à la revendication 3, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes :
(i) réaction d'un équivalent d'acide nitrilotriacétique de formule :
dans laquelle R1, R'1 et R"1 sont tels que définis à la revendication 1, avec un équivalent d'un dérivé de la cystéine de formule :

un équivalent d'un dérivé de la cystéine de formule :
un équivalent d'un dérivé de la cystéine de formule :
dans lesquels R2, R'2 et R"2 sont tels que définis à la revendication 1 ou 2, en présence d'un solvant polaire, (ii) de façon optionnelle, hydrolyse des fonctions -COR2, -COR'2 et ¨COR"2 du produit obtenu lors de l'étape (i) en fonction acide par addition d'une base forte, et (iii) déprotection de la fonction -S-(groupe protecteur) en fonction thiol -SH, ladite déprotection étant réalisée par addition d'un acide fort en large excès. 5. Process for preparing compounds of formula (Ia) as defined to the claim 3, characterized in that it comprises the following steps:
(i) reaction of an equivalent of nitrilotriacetic acid of formula:
in which R1, R'1 and R "1 are as defined in claim 1, with an equivalent of a cysteine derivative of formula:

an equivalent of a cysteine derivative of formula:
an equivalent of a cysteine derivative of formula:
wherein R2, R'2 and R "2 are as defined in claim 1 or 2, in the presence of a polar solvent, (ii) optionally, hydrolysis of the -COR2, -COR'2 and ¨COR "2 functions of the product obtained in step (i) in acid function by addition of a strong base, and (iii) deprotection of the function -S- (protecting group) in thiol function -SH, said deprotection being carried out by adding a strong acid broadly excess. 6.
Procédé de préparation des composés de formule (l b) tels que définis à la revendication 4, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes:
(i) réaction d'un équivalent d'une molécule R b CHR1C(O)R a, R b CHR'1C(O)R a et R b CHR"1C(O)R a, où :
- R1, R'1 et R"1 sont tels que définis à la revendication 1, - R a est sélectionné parmi les atomes d'halogène, les groupements hydroxyles et -OCOR a' dans lesquels R a' représente un groupement alkyle non-substitué ou substitué et ayant 1 à 12 atomes de carbone, - R b est un atome de brome, avec un équivalent d'un dérivé de la cystéine de formule :
un équivalent d'un dérivé de la cystéine de formule :
un équivalent d'un dérivé de la cystéine de formule :
dans lesquels R2, R'2 et R"2 sont tels que définis à la revendication 1 ou 2, en présence d'une base faible et en milieu solvant, (ii) réaction d'un équivalent de 1,4,7-triazacyclononane avec un équivalent d'un dérivé bromo-acétamide obtenu lors de l'étape (i), de formule :

un équivalent d'un dérivé bromo-acétamide obtenu lors de l'étape (i), de formule :
un équivalent d'un dérivé bromo-acétamide obtenu lors de l'étape (i), de formule :
en présence d'une base faible et en milieu solvant, et (iii) déprotection de la fonction -S-(groupe protecteur) en fonction thiol -SH, ladite déprotection étant réalisée par addition d'un acide fort en large excès. 6.
Process for the preparation of the compounds of formula (Ib) as defined in claim 4, characterized in that it comprises the following steps:
(i) reaction of one equivalent of a molecule R b CHR1C (O) R a, R b CHR'1C (O) R a and R b CHR "1C (O) R a, where:
R1, R'1 and R "1 are as defined in claim 1, - R a is selected from halogen atoms, groups hydroxyls and -OCOR a 'in which R a' represents a grouping unsubstituted or substituted alkyl and having 1 to 12 carbon, R b is a bromine atom, with an equivalent of a cysteine derivative of formula:
an equivalent of a cysteine derivative of formula:
an equivalent of a cysteine derivative of formula:
wherein R2, R'2 and R "2 are as defined in claim 1 or in the presence of a weak base and in a solvent medium, (ii) reaction of an equivalent of 1,4,7-triazacyclononane with an equivalent a bromoacetamide derivative obtained in step (i), of formula:

an equivalent of a bromoacetamide derivative obtained in step (i), formula :
an equivalent of a bromoacetamide derivative obtained in step (i), formula :
in the presence of a weak base and in a solvent medium, and (iii) deprotection of the function -S- (protecting group) in thiol function -SH, said deprotection being carried out by adding a strong acid to wide excess. 7. Utilisation des composés de formule (l) selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, comme agents chélatants des ions métalliques de la classification périodique de Mendeleiev. 7. Use of the compounds of formula (I) according to any one of Claims 1 to 4, as chelating agents for the metal ions of the classification periodical of Mendeleiev. 8. Utilisation des composés de formule (l) selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, comme agents dépolluants. 8. Use of the compounds of formula (I) according to any one of Claims 1 to 4 as depolluting agents. 9.
Composés utilisés comme agents précurseurs des composés de formule (I) tels que définis selon la revendication 1 et, répondant à la formule (II) suivante :
dans lesquels le groupement A représente :
~ soit un atome d'azote, ~ soit un cycle répondant à la formule ci-dessous, et dans lequel la substitution se fait sur les atomes d'azote :
et dans lesquels :
- les radicaux R1, R'1 et R"1 représentent un atome d'hydrogène, - les radicaux R2, R'2 et R"2, identiques ou différents, sont choisis dans le groupe constitué par les groupements -NH2, -OH et -OR, dans lesquels R
représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué ayant 1 à 12 atomes de carbone, - les radicaux R3, R'3 et R"3, identiques ou différents, représentent un groupement -S-W ou -S-E-L, où :
~ S est un atome de soufre, ~ W est un radical alkyle non-substitué ou substitué et ayant 1 à 12 atomes de carbone, ~ E est un bras espaceur, ~ L est un ligand d'une cellule cible. 9.
Compounds used as precursor agents of the compounds of formula (I) as defined in claim 1 and having the formula (II) next :
in which the group A represents:
~ either a nitrogen atom, ~ a cycle corresponding to the formula below, and in which the substitution is done on the nitrogen atoms:
and in which:
the radicals R1, R'1 and R "1 represent a hydrogen atom, the radicals R2, R'2 and R "2, which are identical or different, are chosen in the group consisting of the groups -NH2, -OH and -OR, in which R
represents a hydrogen atom or an optionally alkyl radical substituted having 1 to 12 carbon atoms, the radicals R3, R'3 and R "3, which are identical or different, represent a grouping -SW or -SEL, where:
~ S is a sulfur atom, ~ W is an unsubstituted or substituted alkyl radical and having 1 to 12 carbon atoms, ~ E is a spacer arm, ~ L is a ligand of a target cell. 10. Composés de formule (II) selon la revendication 9, dans lesquels les radicaux R2, R'2 et R"2 sont des groupements -OR dans lesquels R est un radical éthyle. 10. Compounds of formula (II) according to claim 9, wherein the radicals R2, R'2 and R "2 are -OR groups in which R is a radical ethyl. 11. Composés de formule (III) suivante :

dans lesquels le groupement A' représente :
.cndot. soit un atome d'azote, .cndot. soit un cycle répondant à la formule ci-dessous, et dans lequel la substitution se fait sur les atomes d'azote :
et dans lesquels :

- les radicaux R2, R'2 et R"2, identiques ou différents, sont choisis dans le groupe constitué par les groupements -NH2, -OH et -OR dans lesquels R
représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle éventuellement substitué ayant 1 à 1 2 atomes de carbone, - les radicaux R3, R'3 et R"3, identiques ou différents, représentent un groupement -S-W ou -S-E-L, où :
~ S est un atome de soufre, = W est un radical alkyle non substitué ou substitué et ayant 1 à 1 2 atomes de carbone, ~ E est un bras espaceur, ~ L est un ligand d'une cellule cible, - les groupements X, X', X", Y, Y', Y", Z, Z' et Z", identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un fluorophore, à condition qu'au moins un desdits groupements X, X', X", Y, Y', Y", Z, Z' ou Z" soit un fluorophore. 11. Compounds of formula (III) below:

in which the group A 'represents:
.cndot. either a nitrogen atom, .cndot. a cycle corresponding to the formula below, and in which the substitution is done on the nitrogen atoms:
and in which:

the radicals R2, R'2 and R "2, which are identical or different, are chosen in the group consisting of -NH2, -OH and -OR groups in which R
represents a hydrogen atom or an optionally alkyl radical substituted having 1 to 1 2 carbon atoms, the radicals R3, R'3 and R "3, which are identical or different, represent a grouping -SW or -SEL, where:
~ S is a sulfur atom, = W is an unsubstituted or substituted alkyl radical having 1 to 1 2 carbon atoms, ~ E is a spacer arm, ~ L is a ligand of a target cell, the groups X, X ', X ", Y, Y', Y", Z, Z 'and Z ", which are identical or different, represent a hydrogen atom or a fluorophore, provided that at least one of said groups X, X ', X ", Y, Y', Y", Z, Z 'or Z "is one fluorophore. 12. Composés de formule (III) selon la revendication 11 , dans lesquels les radicaux R2, R'2 et R"2 sont des groupements -OR dans lesquels R est un radical éthyle. Compounds of formula (III) according to claim 11, wherein the radicals R2, R'2 and R "2 are -OR groups in which R is a radical ethyl. 13. Utilisation des composés de formule (I) tels que définis selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, des composés de formule (II) tels que définis selon la revendication 9 ou 1 0, ou des composés de formule (III) tels que définis selon la revendication 11 ou 12, pour le diagnostic, la prévention et le traitement de maladies neurodégénératives. 13. Use of the compounds of formula (I) as defined according to one any of claims 1 to 4, compounds of formula (II) such as defined according to claim 9 or 10, or compounds of formula (III) such as defined according to claim 11 or 12 for diagnosis, prevention and treatment of diseases neurodegenerative. 14. Utilisation selon la revendication 13, caractérisée en ce que les maladies neurodégénératives sont les maladies de Wilson et d'Alzheimer. 14. Use according to claim 13, characterized in that the diseases neurodegenerative diseases are Wilson's and Alzheimer's. 15. Utilisation des composés de formule (I) tels que définis selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, des composés de formule (II) tels que définis selon la revendication 9 ou 1 0, ou des composés de formule (III) tels que définis selon la revendication 11 ou 12, pour leur application pour le diagnostic, la prévention et le traitement d'intoxications avec des ions métalliques. 15. Use of the compounds of formula (I) as defined according to one any of claims 1 to 4, compounds of formula (II) such as defined according to claim 9 or 10, or compounds of formula (III) such as defined according to claim 11 or 12, for their application for the diagnosis, the prevention and treatment of poisoning with metal ions. 16.
Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend en tant que principe actif au moins un composé de formule (I) tels que définis selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, des composés de formule (II) tels que définis selon la revendication 9 ou 10, ou des composés de formule (III) tels que définis selon la revendication 11 ou 12 et au moins un véhicule pharmaceutiquement acceptable. 16.
Pharmaceutical composition characterized in that it comprises as that active ingredient at least one compound of formula (I) as defined according to Moon any of claims 1 to 4, compounds of formula (II) such as defined according to claim 9 or 10, or compounds of formula (III) such as defined according to claim 11 or 12 and at least one pharmaceutically acceptable carrier acceptable.