BR112019015834A2

BR112019015834A2 - Compostos, composição farmacêutica, kit e uso de um composto ou uma composição

Info

Publication number: BR112019015834A2
Application number: BR112019015834-0A
Authority: BR
Inventors: Barbion Julien; Caravano Audrey; Chasset Sophie; Chevreuil Francis; Ledoussal Benoît; Le Strat Frédéric; Moreau François; Quernin Marie-Hélène; Waeckel Ludovic; Simon Christophe; Oliveira Chrystelle
Original assignee: Mutabilis
Priority date: 2017-02-06
Filing date: 2018-02-06
Publication date: 2020-03-31
Also published as: WO2018141991A1; CN110392684A; EP3577117A1; ZA201904998B; TW201831482A; AU2018216243A1; JP2020506198A; MX2019009362A; US20200017496A1; IL268362A; RU2019124705A; CA3051972A1; CL2019002203A1; KR20190115062A

Abstract

a presente invenção se refere ao composto de fórmula (i) e sua utilização no tratamento de infecções bacterianas

Description

“COMPOSTOS, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, KIT E USO DE UM COMPOSTO OU UMA COMPOSIÇÃO”

Campo da Invenção [001]A presente invenção se refere aos compostos heterocíclicos especialmente como compostos pró-droga, ao seu processo de preparação, às composições farmacêuticas que compreendem estes compostos e sua utilização, opcionalmente em combinação com outros agentes antibacterianos e/ou beta-lactamas, para a prevenção ou tratamento de infecções bacterianas. A presente invenção também se refere à utilização destes compostos como inibidores de beta-lactamase e/ou agente antibacteriano, de preferência, como inibidores de beta-lactamase.

Antecedentes da Invenção [002]Foi descrito que existe uma evolução contínua de resistência antibacteriana que podería conduzir a cepas bacterianas contra as quais os compostos antibacterianos conhecidos são ineficientes. Por conseguinte, existe a necessidade de fornecer os compostos e composições inovadores que possam superar a resistência antibiótica bacteriana.

[003]Também existe também a necessidade de fornecer os agentes antibacterianos e/ou inibidores de beta-lactamases com biodisponibilidade oral. A comunidade médica precisa urgentemente de drogas orais eficazes para o tratamento de UTIs sem complicações.

Descrição Resumida da Invenção [004]0 objeto da presente invenção é fornecer os novos compostos heterocíclicos e, especialmente, novas pró-drogas, que possam ser utilizados como agente antibacteriano e/ou inibidor de beta-lactamase.

[005]Um objeto da presente invenção também é fornecer os novos compostos heterocíclicos e, especialmente, novas pró-drogas, que possam ser utilizados para a prevenção ou tratamento de infecções bacterianas.

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2/134 [006]0utro objeto da presente invenção é fornecer os novos compostos que possam superar a resistência antibiótica bacteriana.

[007]Um objeto da presente invenção também é fornecer uma composição que compreende estes novos compostos heterocíclicos, opcionalmente em combinação com um ou mais outro agente antibacteriano, para a prevenção ou tratamento de infecções bacterianas e que possa superar a resistência antibiótica bacteriana.

[008]0utros objetos irão aparecer ao longo da seguinte descrição da presente invenção.

Descrição Detalhada da Invenção [009]A presente invenção se refere aos compostos de Fórmula (I) R\

- em que

- Y¹ representa o CHF ou CF2;

- Y² representa 0 H, alquila C1-C16, cicloalquila C3-C11, cicloalquenila C5-C11, heterociclo-alquila C4-C10 linear ou ramificada que compreendem de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, heteroarila C5-C10 que compreende de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, arila Ce-C-io, aralquila C7-C16, heteroaralquila C7-C16 que compreendem de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, um heterociclo-alquila Ci-Ce em que 0 heterociclo compreende de 4 a 5 átomos de carbono e de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, de preferência, 0 N e O; um grupo polietileno glicol (PEG), um grupo cetal ou um grupo acetal, em que a alquila, cicloalquila, cicloalquenila, heterociclo-alquila,

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3/134 heterociclo, heteroarila, arila, aralquila e heteroaralquila opcionalmente são substituídos;

- R¹ representa o CN, CH2OY⁵ ou C(=O)NH2;

- Y⁵ representa 0 H, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C11, arila C6-C10, heterociclo-alquila C4-C10 linear ou ramificada que compreendem de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, heteroarila C5-C10 que compreende de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, a alquila, cicloalquila, arila, heterociclo-alquila e heteroarila opcionalmente são substituídas por um ou mais de alquila C1-C10, OH, O-alquila C1-C6, NH2, NHalquila C1-C6, N[alquila Ci-Ce]2, C(=O)NH2, C(=O)NH-alquila C1-C6 ou C(=O)N[alquila Ci-Ce]2;

- com as condições que quando Y² for 0 H, por conseguinte, R¹ é 0 CN ou CH2OY⁵ e quando R¹ for 0 C(=O)NH2, por conseguinte, Y² não é 0 H ou alquila C1-C6 não substituída,

- qualquer átomo de carbono presente em um grupo selecionado a partir de alquila; cicloalquila; heterociclo pode ser oxidado para formar um grupo C(O);

- qualquer átomo de enxofre presente dentro de um heterociclo pode ser oxidado para formar um grupo S(O) ou um grupo S(O)2;

- qualquer átomo de nitrogênio presente em um grupo em que é trissubstituído (por conseguinte, formando uma amina terciária) ou dentro de um heterociclo ainda pode ser quaternizado por um grupo metila;

- e um sal farmaceuticamente aceitável, um zwiteríon, um isômero ótico, um racemato, um diastereoisômero, um enantiômero, um isômero geométrico ou um seu tautômero.

[010]A presença de, pelo menos, um átomo de flúor na molécula, e especificamente na posição 2 da função éster, torna esta molécula altamente

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4/134 hidrolisável e, por conseguinte, é muito difícil fornecer uma pró-droga suficientemente estável para o efeito desejado.

[011]A alquila, cicloalquila, cicloalquenila, heterociclo-alquila, heterociclo, heteroarila, arila, aralquila e heteroaralquila representando o Y²opcionalmente são substituídos por um ou mais grupos selecionados a partir de: halogênio, = O, Y³, OY³, OC(=O)Y³, SY³, NY³Y⁴, NY³C(=O)Y⁴, NY³S(=O)2Y⁴, C(=O)Y³, C(=O)OY³, C(=O)NY³Y⁴, S(=O)Y³, S(=O)2Y³ ou S(=O)2NY³Y⁴, em que Y³ e Y⁴, idênticos ou diferentes, representam o H, alquila C1-C10, cicloalquila C3C11, arila C6-C10, heterociclo-alquila C4-C10 linear ou ramificada que compreendem de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, heteroarila C5-C10 que compreende de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, ou formam em conjunto com 0 nitrogênio ao qual estão ligados uma heterociclo-alquila C4-C10 que compreende de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S; a alquila, cicloalquila, arila, heterociclo-alquila e heteroarila opcionalmente são substituídas por um ou mais de alquila C1-C10 linear ou ramificada, OH, O-alquila Ci-Ce, NH2, NH-alquila Ci-Ce, N[alquila CiC₆]₂, C(=O)NH₂, C(=O)NH-alquila Ci-C₆ ou C(=O)N[alquila Ci-C₆]₂.

[012]De preferência, nos compostos de Fórmula (I), Y² representa 0 H e R¹ representa 0 CN ou CH2OY⁵, Y⁵ é conforme definido acima, de preferência, R¹ representa 0 CN, CH2OH ou CH₂OMe.

[013]De preferência, nos compostos de Fórmula (I), de acordo com a presente invenção, Y² é diferente de H e R¹ representa 0 CONH₂ ou CN.

[014]De preferência, nos compostos de Fórmula (I), Y² representa uma alquila C1-C16, cicloalquila C3-C11, cicloalquenila C5-C11, heterociclo-alquila C4-C10 linear ou ramificada que compreende de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, heteroarila C5-C10 que compreende de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, arila C6-C10, aralquila C7-C16, heteroaralquila C7-C16 que compreende de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou

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S, um heterociclo-alquila Ci-Ce em que o heterociclo compreende de 4 a 5 átomos de carbono e de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, de preferência, N e O, um grupo PEG, um grupo cetal ou um grupo acetal, em que a alquila, cicloalquila, cicloalquenila, heterociclo-alquila, heterociclo, heteroarila, arila, aralquila e heteroaralquila opcionalmente são substituídos, de preferência, substituídos por um ou mais de alquila C1-C10 linear ou ramificada e R¹ é 0 C(O)NH₂.

[015]De preferência, nos compostos de Fórmula (I), de acordo com a presente invenção, Y² é a alquila C1-C16, cicloalquila C3-C11, cicloalquenila C5C11, heterociclo-alquila C4-C10 linear ou ramificada que compreendem de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, heteroarila C5-C10 que compreende de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, arila CeC10, aralquila C7-C16, heteroaralquila C7-C16 que compreende de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, um heterociclo-alquila Ci-Ce em que 0 heterociclo compreende de 4 a 5 átomos de carbono e de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, de preferência, N e O, um grupo PEG, um grupo cetal ou um grupo acetal, em que a alquila, cicloalquila, cicloalquenila, heterociclo-alquila, heterociclo, heteroarila, arila, aralquila e heteroaralquila opcionalmente são substituídos, de preferência, substituídos por um ou mais de alquila C1-C10 linear ou ramificada e R¹ é 0 CN ou CH2OY⁵, Y⁵ é conforme definido acima, de preferência, R¹ representa 0 CN, CH2OH ou CH₂OMe.

[016]De preferência, nos compostos de Fórmula (I), de acordo com a presente invenção, Y² representa uma alquila C2-C16, cicloalquila C3-C11, cicloalquenila C5-C11, heterociclo-alquila C4-C10 linear ou ramificada que compreende de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, um grupo PEG, um grupo aralquila C7-C16, heteroaralquila C7-C16 que compreende de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, um heterociclo-alquila Ci-Ce

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6/134 em que o heterociclo compreende de 4 a 5 átomos de carbono e de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, de preferência, o N e O; em que a alquila, cicloalquila, cicloalquenila, aralquila, heteroaralquila, heterociclo e heterociclo-alquila, de preferência, opcionalmente são substituídos, conforme mencionado acima, de preferência, substituídos por um ou mais de alquila CiCio linear ou ramificada.

[017]De preferência, nos compostos de Fórmula (I), de acordo com a presente invenção, R¹ representa o CONH2 e Y² representa uma alquila C2C16, cicloalquila C3-C11, cicloalquenila C5-C11, heterociclo-alquila C4-C10 linear ou ramificada que compreendem de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, um grupo PEG, um grupo arilalquila C7-C16, um heterociclo-alquila C1Οβ, em que 0 heterociclo compreende de 4 a 5 átomos de carbono e de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, de preferência, 0 N e O; em que a alquila, cicloalquila, cicloalquenila, aralquila, heterociclo-alquila e heterociclo-alquila, de preferência, opcionalmente são substituídos, conforme mencionado acima, de preferência, substituídos por um ou mais de alquila C1C10 linear ou ramificada.

[018]De preferência, nos compostos de Fórmula (I), de acordo com a presente invenção, R¹ representa 0 CONH2, Y¹ representa 0 CF2 e Y²representa uma alquila C2-C8, cicloalquila C3-C7 ou heterociclo-alquila C4-C10 linear ou ramificada que compreende de 1 a 2 de O; em que a alquila, cicloalquila e heterociclo-alquila opcionalmente são substituídas por um ou mais Y³ e OY³; em que Y³ é 0 H, alquila Ci-Cs linear ou ramificada, cicloalquila C3-C7 ou heterociclo-alquila C4-C10 que compreendem de 1 a 2 de O; em que a alquila, cicloalquila, heterociclo-alquila representando 0 Y³ opcionalmente são substituídos por um ou mais de alquila Ci-Ce linear ou ramificada, OH ou Oalquila Ci-Ce.

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7/134 [019]De preferência, nos compostos de Fórmula (I), de acordo com a presente invenção, Y² é selecionado a partir de:

[020]De preferência, os compostos de Fórmula (I), de acordo com a presente invenção, são selecionados a partir de:

2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-6il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de (2-metoxi-1,1 -dimetil-etil); e/ou

2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1 ]octan-6il]oxi]-2,2-difluoroacetato de (4-metiltetraidropiran-4-il); e/ou

2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-6il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de [2-metoxi-1-(metoximetil)etil]; e/ou

2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-6il]oxi]-2,2-difluoroacetato de [2-metoxi-1-(metoximetil)-1-metil-etil]; e/ou

2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-6il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de [4-(metoximetil)tetraidropiran-4-il], [021]De preferência, nos compostos de Fórmula (I), de acordo com a presente invenção, R¹ representa o CN e Y² representa o H ou um grupo aralquila C7-C10, de preferência, a benzila.

[022]De preferência, nos compostos de Fórmula (I), de acordo com a presente invenção, Y² representa uma alquila C3-C16 linear ou ramificada, uma cicloalquila Ce-Cw (por Exemplo, a adamantila ou cicloexila), uma benzila.

[023]De preferência, nos compostos de Fórmula (I), de acordo com a presente invenção, R¹ representa 0 CONH2 e Y² representa uma alquila C3-C16 linear ou ramificada, uma cicloalquila C6-C10, (por Exemplo, a adamantila ou cicloexila), uma benzila.

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8/134 [024]A presente invenção também se refere a uma realização de compostos de Fórmula (I):

- em que

- Y¹ representa o CHF ou CF2;

- Y² representa 0 CY³Y⁴Y⁶;

- R¹ representa 0 CN, CH2OY⁵ ou C(=O)NH2;

- Y⁵ representa 0 H, alquila Ci-Ce, cicloalquila C3-C11, arila Ce-C-io, heterociclo-alquila C4-C10 linear ou ramificada que compreendem de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, heteroarila C5-C10 que compreende de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, a alquila, cicloalquila, arila, heterociclo-alquila e heteroarila opcionalmente são substituídas por um ou mais de alquila C1-C10, OH, O-alquila Ci-Ce, NH2, NHalquila Ci-Ce, N[alquila Ci-Ce]2, C(=O)NH2, C(=O)NH-alquila Ci-Ce ou C(=O)N[alquila Ci-Ce]2;

- Y³, Y⁴ e Y⁶, idênticos ou diferentes, representam a alquila C1-C3, cicloalquila-Cs-Ce, heterociclo-alquila C4-C8 que compreendem de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N-Y⁷, O ou S, um grupo CH2-O-alquila C1C3, ou um grupo CH2-O-CH2)2-O-alquila C1-C3, em que a alquila, cicloalquila e heterociclo-alquila opcionalmente são substituídos por um ou mais de Y⁸; ou

- Y³ e Y⁴ podem formar, em conjunto com 0 átomo de carbono ao qual estão ligados, uma cicloalquila C3-C6 ou uma heterociclo-alquila C4-C8 que compreendem de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N-Y⁷, O ou S, em que a cicloalquila e heterociclo-alquila opcionalmente são substituídas por um ou mais de Y⁸;

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- Y⁷ representa a alquila Ci-Ce, cicloalquila-Cs-Ce, C(=O)-alquila

C1-C6 ou C(=O)-cicloalquila C3-C6;

- Y⁸ representa a alquila Ci-Ce, cicloalquila-Cs-Ce, O-alquila Ci-Ce ou O-cicloalquila C3-C6.

[025]De preferência, nesta realização:

- R¹ é 0 C(O)NH2, CN, CH2OH ou CFhOMe, de preferência, 0 C(O)NH₂; e/ou

- Y¹ representa 0 CF2; e/ou

- Y² é selecionado a partir de:

[026]De preferência, os compostos de Fórmula (I), de acordo com a presente invenção, são os compostos de Fórmula (Γ)

- em que R¹, Y¹ e Y² são conforme definidos acima.

[027]O termo alquila , conforme utilizado no presente, se refere a um grupo hidrocarboneto alifático que pode ser linear ou ramificado, contendo de 1 a 16 átomos de carbono na cadeia, em especial, de 1 a 8 ou de 1 a 6, a menos que especificado de outra maneira. Os Exemplos específicos de grupos alquila, lineares ou ramificados, incluem, mas não estão limitados à metila, etila, propila, butila, pentila, hexila, heptila, octila, nonila, decila, undecila, dodecila, tridecila, tetradecila, pentadecila, hexadecila. De preferência, 0 grupo alquila, linear ou ramificado, é a metila, etila, propila, butila, pentila, heptila, hexadecila.

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10/134 [028]O termo cicloalquila se refere a um anel hidrocarboneto não aromático monocíclico, policíclico ou espirocíclico saturado de 3 a 11 átomos de carbono, em especial, de 3 a 7 átomos de carbono. Os Exemplos específicos de grupos cicloalquila monocíclicos, policíclicos ou espirocíclicos incluem, mas não estão limitados à ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila, cicloeptila, ciclooctila, ciclononila, ciclodecila, cicloundecila, decalila, norbornila, isopinocanfila, norpinanila, adamantila, espiroexano, espiroeptano, espirooctano, espirononano, espirodecano, espiroundecano. De preferência, o grupo cicloalquila é a ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila.

[029]O termo cicloalquenila se refere a um anel hidrocarboneto não aromático monocíclico ou bicíclico saturado de 5 a 11 átomos de carbono e que compreende, pelo menos, uma insaturação. Os Exemplos específicos de grupos cicloalquenila incluem, mas não estão limitados à ciclopentenila, cicloexenila, cicloeptenila, ciclooctenila. De preferência, o grupo cicloalquenila é a cicloexenila.

[030]O termo heterociclo ou heterociclo-alquila, conforme utilizado no presente e sem definição contrária especificamente mencionada, isoladamente ou em combinação com outro radical, se refere a um radical hidrocarboneto monocíclico, bicíclico ou espirocíclico saturado ou parcialmente insaturado, de preferência, com 4 a 10 membros que compreende um ou dois heteroátomos, tais como o N, O, S, em especial, um ou dois O, e ligados à estrutura dos compostos por um átomo de carbono da heterociclo-alquila. A heterocicloalquila adequada também está descrita em Handbook of Chemistry and Physics, 76a Edição, CRC Press, Inc., 1995-1996, páginas 2-25 a 2-26. Os Exemplos específicos de grupos heterociclo-alquila incluem, mas não estão limitados à azetidinila, oxetanila, oxazolidinila, pirrolidinila, tetraidropiridinila, piperidinila, morfolinila, tiomorfolinila, dioxanila, pirrolidinila, imidazolidinila, piranila, tetraidrofuranila, dioxolanila, tetraidropiranila, tetraidroquinolinila,

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11/134 dihidrobenzoxazinila, oxepanila, azaspirooctanila, azaspirodecanila, oxaspirooctanila, oxaspirodecanila, tiaspirooctanila, tiaspirodecanila. De preferência, o grupo heterociclo-alquila é a piperidinila, piranila, oxepanila, morfolinila, tiomorfolinila.

[031 ]O termo heteroarila, conforme utilizado no presente e sem definição contrária especificamente mencionada, isoladamente ou em combinação com outro radical, se refere a um radical hidrocarboneto aromático monocíclico ou bicíclico, de preferência, com 5 a 10 membros, que compreende um, dois, três ou quatro heteroátomos, tal como o N, O, S. A heteroarila adequada também está descrita em Handbook of Chemistry and Physics, 76a Edição, CRC Press, Inc., 1995-1996, páginas 2-25 a 2-26. Os Exemplos específicos de grupos heteroarila incluem, mas não estão limitados à oxazolila, oxadiazolila, pirrolila, piridila, pirazolila, pirimidinila, pirazinila, tetrazolila, triazolila, tienila, tiazolila, furanila, tiadiazolila, isotiazolila, isoxazolil. De preferência, o grupo heteroarila é a piridinila, furanila, tiazolila, tienila, imidazolila.

[032]O termo arila, conforme utilizado no presente e sem definição contrária especificamente mencionada, isoladamente ou em combinação com outro radical, se refere a um radical hidrocarboneto aromático monocíclico ou bicíclico. Os Exemplos específicos de grupos arila incluem a fenila, naftila.

[033]O termo “aralquila”, conforme utilizado no presente e sem definição contrária especificamente mencionada, se refere a uma alquila substituída por uma arila, a alquila e arila sendo conforme definidas acima. Por aralquila C7-C16 deve ser entendido que 0 grupo aralquila compreende no total de 7 a 16 átomos de carbono. Os Exemplos específicos de grupos aralquila incluem, mas não estão limitados à benzila, feniletila, fenilpropila, fenilbutila, fenilpentila, fenilexila, fenileptila, feniloctila, fenilnonilfenildecila, naftiletila, naftilpropila, naftilbutila, naftilpentila, naftilexila.

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12/134 [034]O termo heteroaralquila, conforme utilizado no presente e sem definição contrária especificamente mencionada, se refere a uma alquila substituída por uma heteroarila, a alquila e heteroarila sendo conforme definidas acima. Por heteroaralquila C7-C16 deve ser entendido que 0 grupo heteroaralquila compreende no total de 7 a 16 átomos de carbono.

[035]O termo cetal, conforme utilizado no presente e sem definição contrária especificamente mencionada, se refere a um grupo que consiste em Y² de Fórmula

OR²

- e 0 átomo de oxigênio ao qual Y² está ligado, em que R²representa uma alquila C1-C6 linear ou ramificada ou C(=O)alquila C1-C6.

[036]O termo acetal, conforme utilizado no presente e sem definição contrária especificamente mencionada, se refere a um grupo que consiste em Y² de Fórmula

or²

- ou

- e 0 átomo de oxigênio ao qual Y² está ligado, em que R² representa uma alquila C1-C6 linear ou ramificada ou C(=O)alquila C1-C6.

[037]O termo “PEG” ou “polietileno glicol”, conforme utilizado no presente e sem definição contrária especificamente mencionada, se refere a um grupo Y² de Fórmula,

- em que m é um número inteiro de 1 a 10.

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13/134 [038]Além disso, alguns compostos de acordo com a presente invenção podem conter um grupo amino básico e, por conseguinte, podem formar um sal zwiteriônico interno (ou zwitterion) com o grupo acídico OCHFCO2H ou -OCF2CO2H em que Y² é 0 H e tais sais zwitteriônicos internos também estão incluídos na presente invenção.

[039]O termo “opcionalmente substituído” significa “não substituído ou substituído”.

[040]O termo racemato é empregado no presente para se referir a uma quantidade igual de dois enantiômeros específicos.

[041 ]O termo enantiômero é utilizado no presente para referir a um dos dois estereoisômeros específicos que é uma imagem no espelho não sobreponível com um outro, mas está relacionado um ao outro através de reflexão.

[042]Os compostos da presente invenção podem possuir um ou mais átomos de carbono assimétricos e, por conseguinte, são capazes de existir na forma de isômeros óticos, bem como na forma de misturas racêmicas ou não racêmicas dos mesmos. Os compostos da presente invenção podem ser utilizados na presente invenção como um único isômero ou como uma mistura de formas isoméricas estereoquímicas. Os diastereoisômeros, isto é, os isômeros estereoquímicos não sobreponíveis podem ser separados por meios convencionais tais como a cromatografia, destilação, cristalização ou sublimação. Os isômeros óticos (enantiômeros) podem ser obtidos utilizando os materiais de partida oticamente ativos, através da resolução das misturas racêmicas de acordo com processos convencionais, por Exemplo, através da formação de sais diastereoisoméricos através do tratamento com um ácido ou base oticamente ativo ou utilizando a coluna de cromatografia quiral.

[043]O termo farmaceuticamente aceitável é empregado no presente para se referir àqueles compostos, materiais, composições e/ou formas

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14/134 de dosagem que, no âmbito do julgamento médico adequado, são adequados para a utilização em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade, irritação, resposta alérgica excessivas ou outro problema ou complicação, proporcional a uma proporção benefício / risco razoável.

[044]Conforme utilizado no presente, o termo sais farmaceuticamente aceitáveis se refere aos derivados dos compostos descritos em que o composto parental é modificado produzindo os seus sais de ácido ou base. Os Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados aos sais de ácidos minerais ou orgânicos de resíduos básicos tais como as aminas; sais alcalinos ou orgânicos de resíduos acídicos, tais como os ácidos carboxílicos; e similar. Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir do composto parental que compreende uma porção básica ou acídica, através dos métodos químicos convencionais. Além disso, a expressão sal farmaceuticamente aceitável se refere aos sais de adição de ácido ou base inorgânicos e orgânicos relativamente não tóxicos dos compostos da presente invenção. Estes sais podem ser preparados in situ durante o isolamento e purificação final dos compostos. Em especial, os sais de adição de ácido podem ser preparados reagindo separadamente o composto purificado na sua forma purificada com um ácido orgânico ou inorgânico e isolando o sal formado dessa maneira. Entre os Exemplos de sais de adição de ácido estão o hidrobrometo, cloroidrato, hidroiodeto, sulfamato, sulfato, bissulfato, fosfato, nitrato, acetato, propionato, succinato, oxalato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, borato, benzoato, lactato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, tartarato, naftilato, mesilato, glucoeptanato, glucoronato, glutamato, lactobionato, malonato, salicilato, metilenebis-b-hidroxinaftafato, ácido gentísico, isetionato, di-ptoluiltartarato, etanossulfonato, benzenossulfonato, sulfamato de cicloexila, quinateslaurilsulfonato sais e similares. Os Exemplos de sais de adição de base

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15/134 incluem os sais de amônio tais como a trometamina, meglumina, epolamina, e similares, sais de metal tais como os sais de sódio, lítio, potássio, cálcio, zinco ou magnésio com as bases orgânicas tais como os sais de dicicloexilamina, Nmetil-D-glucamina. As listas de sais adequados podem ser encontradas em Flemington's Pharmaceutical Sciences, 17a ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, página 1.418, P.H. Stahl, C.G. Wermuth, Handbook of Pharmaceutical Salts - Properties, Selection and Use, Wiley-VCH, 2002 e S.M. Berge etal. Pharmaceutical Salts J. Pharm. Sci, 66: páginas1-19 (1977).

[045]Os compostos, de acordo com a presente invenção, também incluem os compostos marcados isotopicamente em que um ou mais átomos são substituídos por um átomo com o mesmo número atômico, mas uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa normalmente encontrado na natureza. Os Exemplos de isótopos adequados para inclusão nos compostos estão descritos acima e não estão limitados ao ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁹F, ¹⁸F, ¹⁵N, ¹³N, ³³S, ³⁴S, ³⁵S, ³⁶S, ¹⁷O ou ¹⁸O. Em uma realização, os compostos marcados isotopicamente são úteis em estudos de distribuição de tecido de droga e/ou substratos. Em outra realização, a substituição com os isótopos mais pesados, tais como o deutério (²H), fornece uma maior estabilidade metabólica (por Exemplo, a semivida in vivo aumentada ou requisitos de dosagem reduzidos). Os compostos marcados isotopicamente são preparados através de qualquer método adequado ou através de processos utilizando um reagente isotopicamente marcado adequado em vez do reagente não marcado, caso contrário empregado.

[046]Os compostos de Fórmula (I) ou (I*), de acordo com a presente invenção, com Y² diferentes de H, podem ser utilizados como uma droga de um composto de Fórmula (I’) ou (I’*)

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- em que R¹ e Y¹ são conforme definidos acima e Y² representa o

H ou um sal de adição de base, por Exemplo, selecionados a partir dos sais de amônio, tais como a trometamina, meglumina, epolamina; sais de metal tais como o sódio, lítio, potássio, cálcio, zinco, alumínio ou magnésio; sais com bases orgânicas tais como a metilamina, propilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamina, Ν,Ν-dimetiletanolamina, tris(hidroximetil)aminometano, etanolamina, piridina, picolina, dicicloexilamina, morfolina, benzilamina, procaína, N-metil-D-glucamina; sais com os amino ácidos tais como a arginina, lisina, ornitina e assim por diante; sais de fosfônio tais como o alquilfosfônio, arilfosfônio, alquilarilfosfônio e alcenilarilfosfônio; e sais com o amônio quaternário tal como o tetra-n-butilamônio. Uma lista de sais adequados pode ser encontrada em Remington’s Pharmaceutical Sciences, 17th ed. Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, página 1.418, P.H. Stahl, C.G. Wermuth, Handbook of Pharmaceutical Salts - Properties, Selection and Use, Wiley-VCH, 2002 e S.M. Berge et al. Pharmaceutical Salts J. Pharm. Sci, 66: páginas1-19 (1977).

[047]A presente invenção também se refere a uma composição farmacêutica que compreende, pelo menos, um composto de Fórmula (I) ou (I*), de acordo com a presente invenção.

[048]Esta composição farmacêutica ainda pode compreender, pelo menos, um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[049]O termo veículo farmaceuticamente aceitável ou excipiente farmaceuticamente aceitável é empregado para qualquer excipiente, solvente,

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17/134 meio de dispersão, retardador de absorção, diluente ou adjuvante, e similares, tais como os agentes conservantes ou antioxidantes, enchimentos, aglutinantes, agentes desintegrantes, agentes molhantes, agentes emulsionantes, agentes de suspensão, solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos, agentes isotópicos e retardadores da absorção e similares, que não produzem uma reação secundária, por Exemplo, uma reação alérgica, em humanos ou animais. Os Exemplos típicos não limitantes de excipientes incluem o manitol, lactose, estearato de magnésio, sacarídeo de sódio, talco, celulose, croscarmelose de sódio, glicose, gelatina, amido, lactose, fosfato de dicálco, sacarose, caulino, carbonato de magnésio, agentes molhantes, agentes emulsionantes, agentes solubilizantes, água esterilizada, solução salina, tampões de pH, tensoativos não iônicos, lubrificantes, agentes estabilizantes, agentes ligantes e óleos comestíveis tais como o óleo de amendoim, óleos de sésamo e similares. Além disso, diversos excipientes normalmente utilizados no estado da técnica podem ser incluídos. Os veículos ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos dos técnicos no assunto e incluem aqueles descritos em Flemington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company, Easton, EUA, 1985), Merck Index (Merck & Company, Rahway, N.J.), Gilman et. al (Eds. The pharmacological basis of therapeutics, 8^âEd., pergamon press., 1990). Exceto na medida em que qualquer meio convencional ou adjuvante é incompatível com o ingrediente ativo, de acordo com a presente invenção, a sua utilização nas composições terapêuticas é contemplada.

[050]A composição farmacêutica, de acordo com a presente invenção, ainda pode compreender, pelo menos, um composto selecionado a partir de um composto antibacteriano, de preferência, um composto de βlactama. Por conseguinte, a composição farmacêutica, de acordo com a presente invenção, pode compreender:

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- um único composto de Fórmula (I) ou (I*), de acordo com a presente invenção, ou

- pelo menos, um composto de Fórmula (I) ou (I*), de acordo com a presente invenção, e um ou mais compostos antibacterianos; ou

- pelo menos, um composto de Fórmula (I) ou (I*), de acordo com a presente invenção, e um ou mais compostos de β-lactama; ou

- pelo menos, um composto de Fórmula (I) ou (I*), de acordo com a presente invenção, um ou mais compostos antibacterianos e um ou mais compostos de β-lactama.

[051 ]O termo “beta-lactam a” ou “β-lactama” se refere aos compostos antibacterianos que compreende uma unidade β-lactama, isto é, um grupo.

[052]O termo agente antibacteriano, conforme utilizado no presente, se refere a qualquer substância, composto ou sua combinação capaz de inibir, reduzir ou impedir o crescimento de bactérias, inibir ou reduzir a capacidade de bactérias para produzir a infecção em um indivíduo, ou inibir ou reduzir a capacidade de bactérias para se multiplicar ou permanecer infecciosa no ambiente, ou diminuir a infectividade ou virulência das bactérias.

[053]O agente antibacteriano é selecionado a partir das seguintes famílias: os aminoglicosídeos, beta-lactamas, glicilciclinas, tetraciclinas, quinolonas, fluoroquinolonas, glicopeptídeos, lipopeptídeos, macrólidos, cetólidos, lincosamidas, estreptograminas, oxazolidinonas e polimixinas isoladamente ou em mistura.

[054] De preferência, o agente antibacteriano adicional é selecionado a partir das famílias de beta-lactama e, de maior preferência, entre a penicilina, cefalosporinas, penemas, carbapenemas e monobactama, isoladamente ou em mistura.

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19/134 [055]Entre a penicilina, o agente antibacteriano de preferência é selecionado a partir do grupo que consiste em amoxicilina, ampicilina, azlocilina, mezocilina, apalcilina, hetacilina, bacampicilina, carbenicilina, sulbenicilina, temocilina, ticarcilina, piperacilina, mecillinam, pivmecilinam, meticilina, ciclacilina, talampacilina, aspoxicilina, oxacilina, cloxacilina, dicloxacilina, flucloxacilina, nafcilina e pivampicilina, isoladamente ou em mistura.

[056]Entre as cefalosporinas, o agente antibacteriano de preferência, é selecionado a partir do grupo que consiste em cefatriazina, cefazolina, cefoxitina, cefalexina, cefradina, ceftizoxima, cefatetrila, cefbuperazona, cefprozila, ceftobiprol, medocarila de ceftobiprol, ceftarolina, ceftarolina fosaminila, cefalônio, cefminox, ceforanida, cefotetano, ceftibuteno, pivoxila de cefcapen, pivoxila de cefditoreno, cefroxadina de cefdaloxima, ceftolozano e S-649266, cefalotina, cefaloridina, cefaclor, cefadroxila, cefamandol, cefazolina, cefalexina, cefradina, ceftizoxima, cefacetrila, cefotiam, cefotaxima, cefsulodina, cefoperazona, cefmenoxima, cefmetazol, cefaloglicina, cefonicid, cefodizima, cefpiroma, ceftazidima, ceftriaxona, cefpiramida, cefbuperazona, cefozoprano, cefepima, cefoselis, cefluprenam, cefuzonam, cefpimizol, cefclidina, cefixima, ceftibuteno, cefdinir, axetila de cefpodoxima, proxetila de cefpodoxima, pivoxila de cefteram, pivoxila de cefetamet, pivoxila de cefcapeno, pivoxila de cefditoreno, cefuroxima, axetila de cefuroxima, loracarbef e latamoxef, isoladamente ou em mistura.

[057]Entre o carbapenem, o agente antibacteriano de preferência é selecionado a partir do grupo que consiste em imipenem, doripenem, meropenem, biapenem, ertapenem, tebipenem, sulopenem, SPR994 e panipenem, isoladamente ou em mistura.

[058]Entre o monobactam, o agente antibacteriano de preferência é selecionado a partir do grupo que consiste em aztreonam, tigemonam, carumonam, BAL30072 e nocardicina A, isoladamente ou em mistura.

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20/134 [059]De preferência, na composição farmacêutica, de acordo com a presente invenção:

- o composto antibacteriano é selecionado a partir de aminoglicosídeos, beta-lactamas, glicilciclinas, tetraciclinas, quinolonas, fluoroquinolonas, glicopeptídeos, lipopeptídeos, macrólidos, cetólidos, lincosamidas, estreptograminas, oxazolidinonas, polimixinas e suas misturas; ou

- o composto β-lactama é selecionado a partir de β-lactamas e suas misturas, de preferência, a penicilina, cefalosporinas, penemas, carbapenemas e monobactama.

[060]De preferência, na composição farmacêutica, de acordo com a presente invenção:

- o composto antibacteriano é selecionado a partir de aminoglicosídeos, beta-lactamas, glicilciclinas, tetraciclinas, quinolonas, fluoroquinolonas, glicopeptídeos, lipopeptídeos, macrólidos, cetólidos, lincosamidas, estreptograminas, oxazolidinonas, polimixinas e suas misturas oralmente biodisponíveis. ou

- o composto de β-lactama é selecionado a partir de β-lactamas ou pró-drogas orais disponíveis de β-lactamas, e suas misturas, de preferência, a penicilina, cefalosporinas, penemas, carbapenemas e monobactam.

[061]De preferência, na composição farmacêutica, de acordo com a presente invenção, a beta-lactama é selecionada a partir de amoxicilina, amoxicilin-clavulanato, axetila de sultamicilina cefuroxima, cefazolina, cefaclor, cefdinir, proxetila de cefpodoxima, cefprozil, cefalexina, loracarbef, cefetamet, ceftibuteno, pivoxila de tebipenem, sulopenem, SPR994, cefixima, de preferência, a partir de cefixima e proxetila de cefpodoxima.

[062]A presente invenção também se refere a um kit que compreende:

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- uma composição farmacêutica, de acordo com a presente invenção, e

- pelo menos, uma outra composição que compreende um ou mais agente(s) antibacteriano(s), de preferência, pelo menos, um destes agentes antibacterianos é uma beta-lactama, o agente antibacteriano sendo conforme definido acima.

[063]As duas composições podem ser preparadas separadamente, cada uma com um veículo farmaceuticamente aceitável específico, e podem ser misturadas especialmente de extemporaneidade.

[064]A presente invenção também se refere a um composto de Fórmula (I) ou (Γ), de acordo com a presente invenção, para a utilização como um medicamento.

[065]A presente invenção também se refere à utilização de um composto de Fórmula (I) ou (Γ), de acordo com a presente invenção, ou de uma composição, de acordo com a presente invenção, para a preparação de um medicamento.

[066]A presente invenção também fornece a utilização dos compostos de Fórmula (I) ou (Γ) no controle de bactérias. O composto, de acordo com a presente invenção, normalmente é utilizado em combinação com o excipiente farmaceuticamente aceitável.

[067]A presente invenção também se refere a um composto de Fórmula (I) ou (Γ), de acordo com a presente invenção, para a utilização como agente antibacteriano.

[068]A presente invenção também se refere a um composto de Fórmula (I) ou (Γ), de acordo com a presente invenção, para a utilização como inibidor de beta-lactamase.

[069]A presente invenção também se refere à utilização de um composto de Fórmula (I) ou (Γ), de acordo com a presente invenção, ou de uma

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22/134 composição, de acordo com a presente invenção, para a preparação de um medicamento de agente antibacteriano.

[070]A presente invenção também se refere à utilização de um composto de Fórmula (I) ou (I*), de acordo com a presente invenção, ou de uma composição, de acordo com a presente invenção, para a preparação de um inibidor de medicamento de beta-lactamase.

[071]A presente invenção também se refere à utilização de um composto de Fórmula (I) ou (I*), de acordo com a presente invenção, ou de uma composição, de acordo com a presente invenção, para a preparação de um agente antibacteriano e inibidor de medicamento de beta-lactamase.

[072]A presente invenção também se refere a um composto de Fórmula (I) ou (I*) ou a uma composição, de acordo com a presente invenção, ou a um kit, de acordo com a presente invenção, para a utilização no tratamento ou prevenção de infecções bacterianas.

[073]A presente invenção também se refere à utilização de um composto de Fórmula (I) ou (I*) ou uma composição, de acordo com a presente invenção, para a preparação de um medicamento para o tratamento ou prevenção de infecções bacterianas.

[074]Os termos “prevenção”, “prevenir” e “prevenindo”, conforme utilizados no presente, significam a administração de um composto ou composição, de acordo com a presente invenção, de maneira a prevenir a infecção por bactérias ou prevenir a ocorrência de infecção e/ou doenças relacionadas. Os termos “prevenção”, “prevenir” e “prevenindo” também abrangem a administração de um composto ou composição, de acordo com a presente invenção, para prevenir, pelo menos, uma infecção bacteriana, através da administração a um paciente suscetível de ser infectado, ou de outra maneira, em risco de infecção por esta bactéria.

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23/134 [075]Os termos tratamento, tratar e tratando, conforme utilizados no presente, pretendem significar, em especial, a administração de um tratamento que compreende um composto ou composição, de acordo com a presente invenção, a um paciente que já sofre de uma infecção. Os termos tratamento, tratar e tratando, conforme utilizados no presente, também se referem à administração de um composto ou composição, de acordo com a presente invenção, opcionalmente com um ou mais agentes antibacterianos, de maneira a:

- reduzir ou eliminar uma infecção bacteriana ou um ou mais sintomas associados à infecção bacteriana, ou

- retardar a progressão de uma infecção bacteriana ou de um ou mais sintomas associados à infecção bacteriana, ou

- reduzir a gravidade de uma infecção bacteriana ou de um ou mais sintomas associados à infecção bacteriana, ou

- suprimir a manifestação clínica de uma infecção bacteriana, ou

- suprimir a manifestação de sintomas adversos da infecção bacteriana.

[076]O termo infecção ou infecção bacteriana conforme utilizado no presente, inclui a presença de bactérias, em um indivíduo que, se o seu crescimento fosse inibido, iria resultar em um benefício para o indivíduo. Como tal, o termo “infecção” ou “infecção bacteriana”, além de se referir à presença de bactérias, também se refere à flora normal, o que não é desejado. O termo “infecção” inclui a infecção causada por bactérias. Os exemplares de tal infecção bacteriana são a infecção do trato urinário (UTI), infecções renais (pielonefrite), infecções ginecológicas e obstétricas, infecção do trato respiratório (RTI), exacerbação aguda de bronquite crônica (AECB), pneumonia adquirida na comunidade (CAP), pneumonia adquirida (HAP), pneumonia associada à ventilação mecânica (VAP), pneumonia intra-abdominal (IAl), otite média aguda,

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24/134 sinusite aguda, sepse, sepse relacionada ao cateter, cancroide, clamidia, infecções de pele, bacteremia.

[077]O termo “crescimento”, conforme utilizado no presente, se refere ao crescimento de um ou mais microrganismos e inclui a reprodução ou expansão populacional do microrganismo, tal como as bactérias. O termo também inclui a manutenção de processos metabólicos contínuos de um microrganismo, incluindo os processos que mantêm o microrganismo vivo.

[078]As bactérias são selecionadas a partir de bactérias grampositivas ou gram-negativas, de preferência, as bactérias gram-negativas.

[079]As bactérias também podem ser selecionadas a partir das bactérias que produzem a “beta-lactamase” ou “β-lactamase”. Estas bactérias são bem conhecidas pelos técnicos no assunto.

[080]O termo “beta-lactamase” ou “β-lactamases” conforme utilizado no presente, se refere a qualquer enzima ou proteína ou qualquer outra substância que seja capaz de romper um anel beta-lactâmico. O termo betalactamase ou β-lactamase inclui as enzimas que são produzidas por bactérias e que possuem a capacidade de hidrolisar, parcialmente ou completamente, o anel beta-lactâmico presente em um composto, tal como um agente antibacteriano.

[081]Entre as bactérias gram-positivas, a bactéria, de acordo com a presente invenção, de preferência, é selecionada a partir de espécies Staphylococcus, Streptococcus, Staphylococcus (incluindo Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis), espécies Streptococcus (incluindo Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiae), espécies Enterococcus (incluindo Enterococcus faecalise Enterococcus faecium).

[082]Entre as bactérias gram-negativas, a bactéria, de acordo com a presente invenção, de preferência, é selecionada a partir de espécies Acinetobacter (incluindo Acinetobacter baumannii), espécies Citrobacter,

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25/134 espécies Escherichia (incluindo Escherichia coli), Haemophilus influenza, Morganella morganii, espécies Klebsiella (incluindo Klebsiella pneumonia), Espécies de Enterobacter (incluindo Enterobacter cloacae), Neisseria gonorrhoeae, espécies de Burkholderia (incluindo Burkholderia cepacia), espécies de Proteus (incluindo Proteus mirabilis), espécies de Serratia (incluindo Serratia marcescens), espécies de Providencia, Pseudomonas aeruginosa.

[083]A presente invenção, por conseguinte, de preferência se refere a um composto de Fórmula (I) ou (Γ) ou a uma composição, de acordo com a presente invenção, ou a um kit, de acordo com a presente invenção, para a utilização no tratamento ou prevenção de infecção bacteriana, de preferência, causada por bactérias que produzem um ou mais beta-lactamase(s). De preferência, as bactérias são selecionadas a partir de bactérias gram-positivas ou gram-negativas, de preferência, as bactérias gram-negativas.

[084]A presente invenção também se refere utilização de um composto de Fórmula (I) ou (Γ) ou uma composição, de acordo com a presente invenção, para a preparação de um medicamento para o tratamento ou prevenção de infecção bacteriana, de preferência, causada por bactérias que produzem um ou mais beta-lactamase(s). De preferência, as bactérias são selecionadas a partir de bactérias gram-positivas ou gram-negativas, de preferência, as bactérias gram-negativas.

[085]A presente invenção também se refere ao kit, conforme definido acima, para uma administração simultânea, separada ou sequencial a um paciente necessitado da utilização no tratamento ou prevenção de infecções bacterianas, de preferência, causada por bactérias produtoras de uma ou mais beta-lactamase(s). De preferência, as bactérias são selecionadas a partir de bactérias gram-positivas ou gram-negativas, de preferência, as bactérias gramnegativas.

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26/134 [086]A presente invenção também se refere ao composto de Fórmula (I) ou (I*) para a utilização em combinação com um ou mais agentes antibacterianos adicionais, de preferência, pelo menos, um dos agentes antibacterianos adicionais é um beta-lactama, para o tratamento ou prevenção de bactérias infecções, de preferência, causadas por bactérias produtoras de uma ou mais beta-lactamase(s). De preferência, as bactérias são selecionadas a partir de bactérias gram-positivas ou gram-negativas, de preferência, as bactérias gram-negativas. Em que os compostos de Fórmula (I) ou (I*) e o agente antibacteriano adicional são administrados simultaneamente, separadamente ou sequencialmente.

[087]A presente invenção também se refere à utilização de um composto de Fórmula (I) ou (I*) ou uma composição, de acordo com a presente invenção, ou um kit, de acordo com a presente invenção, para a prevenção ou tratamento de infecções bacterianas, de preferência, a infecção bacteriana, de preferência, causada por bactérias que produzem uma ou mais betalactamase(s). De preferência, as bactérias são selecionadas a partir de bactérias gram-positivas ou gram-negativas, de preferência, as bactérias gram-negativas.

[088]A presente invenção também se refere a um método para o tratamento ou prevenção de infecções bacterianas, de preferência, causado por bactérias que produzem uma ou mais beta-lactamase(s) que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de composto de Fórmula (I) ou (I*), uma composição, de acordo com a presente invenção, ou um kit, de acordo com a presente invenção, a um paciente que dela necessite. De preferência, as bactérias são selecionadas a partir de bactérias gram-positivas ou gram-negativas, de preferência, as bactérias gram-negativas.

[089]O termo “paciente” significa uma pessoa ou um animal em risco de ser infectado por bactérias ou, uma pessoa ou um animal sendo infectado por bactérias, de preferência, por bactérias gram-positivas e/ou gram

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27/134 negativas. Conforme utilizado no presente, o termo paciente se refere a um animal de sangue quente, tal como um mamífero, de preferência, um ser humano ou uma criança humana que está afligido por, ou apresente o potencial para ser afligido por uma ou mais infecções e condições descritas no presente. A identificação dos indivíduos que necessitam de tratamento das doenças e condições descritas no presente está bem dentro da capacidade e conhecimento de um técnico no assunto. Um veterinário ou um médico facilmente pode identificar, através da utilização de testes clínicos, exame físico, histórico médico / familiar ou testes biológicos e de diagnóstico, aqueles indivíduos que necessitam desse tratamento.

[090]A expressão quantidade terapeuticamente eficaz ou quantidade farmaceuticamente eficaz, conforme utilizado no presente, se refere a uma quantidade de um composto, de acordo com a presente invenção, que, uma vez que administrado a um paciente que necessite da mesma, é suficiente para efetuar o tratamento para os estados, condições, ou distúrbios de doença para os quais o composto possui utilidade. Essa quantidade seria suficiente para provocar a resposta biológica ou médica de um sistema de tecido, ou paciente que é procurada por um pesquisador ou um clínico. A quantidade de um composto, de acordo com a presente invenção, que constitui uma quantidade terapeuticamente eficaz irá variar, de maneira notável, dependendo do próprio composto e da sua atividade biológica, a composição utilizada para a administração, o tempo de administração, a via de administração, a taxa de excreção do composto, duração do tratamento, tipo de estado da doença ou distúrbio a ser tratado e sua gravidade, drogas utilizadas em combinação ou coincidentemente com os compostos da presente invenção e a idade, peso corporal, saúde geral, sexo e dieta do paciente. Tal quantidade terapeuticamente eficaz pode ser determinada por um técnico no assunto tendo em conta o seu próprio conhecimento, e a presente invenção. De preferência, o

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28/134 composto, de acordo com a presente invenção, é administrado em uma quantidade compreendida entre 0,1 a 30 g por dia.

[091 ]Os compostos, de acordo com a presente invenção, podem ser fornecidos em uma solução tampão fisiológica aquosa para a administração parentérica.

[092]Os compostos da presente invenção também são capazes de serem administrados em formas de dose unitária, em que a expressão dose unitária significa uma dose única que é capaz de ser administrada a um paciente e que pode ser prontamente manuseada e embalada, permanecendo como uma dose unitária fisicamente e quimicamente estável que compreende o próprio composto ativo, ou como uma composição farmaceuticamente aceitável, conforme descrito a seguir. Os compostos fornecidos no presente podem ser formulados em composições farmacêuticas através da mistura com um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Tais composições de dose unitária podem ser preparadas para a utilização através da administração oral, especialmente na forma de comprimidos, cápsulas simples ou cápsulas de gel macio; ou intranasalmente, especialmente sob a forma de pós, gotas nasais ou aerossóis; ou dermalmente, por Exemplo, topicamente em pomadas, cremes, loções, géis ou pulverizações, ou por meio de emplastos trans-dérmicos.

[093]As composições convenientemente podem ser administradas na forma de dosagem unitária e pode ser preparada através de qualquer método bem conhecido no estado da técnica farmacêutica, por Exemplo, conforme descrito em Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20^â ed.; Gennaro, A. R. Ed.; Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, 2000.

[094]As formulações, de preferência, incluem as composições farmacêuticas em que um composto, de acordo com a presente invenção, é formulado para a administração oral ou parentérica.

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29/134 [095] Para a administração oral, os comprimidos, pílulas, pós, cápsulas, trociscos e similares podem conter um ou mais de qualquer dos seguintes ingredientes, ou compostos de natureza similar: um aglutinante tal como a celulose microcristalina ou goma de tragacanto; um diluente tal como o amido ou lactose; um desintegrante, tais como os derivados de amido e celulose; um lubrificante tal como o estearato de magnésio; um deslizante, tal como o dióxido de silicone coloidal; um agente edulcorante, tal como a sacarose ou sacarina; ou um agente aromatizante tal como a hortelã-pimenta ou salicilato de metila. As cápsulas podem estar na forma de uma cápsula dura ou cápsula macia, que em geral, são produzidas a partir de misturas de gelatina, opcionalmente misturadas com os plastificantes, bem como uma cápsula de amido. Além disso, as formas de dosagem unitária podem conter diversos outros materiais que modificam a forma física da unidade de dosagem, por Exemplo, os revestimentos de açúcar, goma laca ou agentes entéricos. Outras dosagens orais formam o xarope ou elixir que podem conter os agentes edulcorantes, conservantes, corantes, colorantes e aromatizantes. Além disso, os compostos ativos podem ser incorporados em preparações e formulações rapidamente dissolvidas, de liberação modificada ou de liberação prolongada, e em que tais formulações de liberação sustentada, de preferência, são bimodais. Os comprimidos, de preferência, contêm a lactose, amido de milho, silicato de magnésio, croscarmelose sódica, povidona, estearato de magnésio ou talco em qualquer combinação. Para a administração oral, os comprimidos, pílulas, pós, cápsulas, trociscos e similares podem ser revestidos ou podem compreender um composto ou composição que possibilite neutralizar o ácido gástrico para que os compostos, de acordo com a presente invenção, passem através do estômago sem nenhuma degradação.

[096]As preparações líquidas para a administração parentérica incluem as soluções, suspensões e emulsões aquosas ou não aquosas estéreis.

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As composições líquidas também podem incluir os aglutinantes, tampões, conservantes, agentes quelantes, agentes edulcorantes, aromatizantes e colorantes e similares. Os solventes não aquosos incluem os álcoois, propileno glicol, polietileno glicol, óleos vegetais tal como o azeite e ésteres orgânicos tais como o oleato de etila. Os veículos aquosos incluem as misturas de álcoois e água, meio tamponado e soro fisiológico. Em especial, o polímero latido biodegradável, copolímero latido biodegradável / glicólido ou copolímeros de polioxietileno-polioxipropileno podem ser excipientes úteis para controlar a liberação do composto ativo. Os veículos intravenosos podem incluir os reabastecedores de fluidos e nutrientes, reabastecedores de eletrólitos, tais como aqueles à base de dextrose de Ringer e outros. Outros sistemas de administração parentérica potencialmente úteis para o composto ativo incluem as partículas de copolímero de etileno-acetato de vinila, bombas osmóticas, sistemas de infusão implantáveis e lipossomas.

[097]As maneiras alternativas de administração incluem as formulações para a inalação, que incluem os meios tal como o pó seco, aerossol ou gotas. Podem ser soluções aquosas que compreendem, por Exemplo, o éter de polioxietileno-9-lauril, glicocolato e desoxicolato, ou soluções oleosas para a administração na forma de gotas nasais, ou como um gel a ser aplicado por via intranasal. As formulações para a administração bucal incluem, por Exemplo, os losangos ou pastilhas e também podem incluir uma base aromatizada, tal como a sacarose ou acácia, e outros excipientes tal como o glicocolato. As formulações adequadas para a administração retal, de preferência, são apresentadas como supositórios de dose unitária, com um veículo sólido e podem incluir um salicilato. As formulações para a aplicação tópica na pele, de preferência, assumem a forma de uma pomada, creme, loção, pasta, gel, pulverização, aerossol ou óleo. Os veículos que podem ser utilizados incluem a vaselina, lanolina, polietileno glicóis, álcoois ou suas combinações. As formulações

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31/134 adequadas para a administração transdérmica podem ser apresentadas como emplasmos discretos e podem ser emulsões lipofílicas ou soluções aquosas tamponadas, dissolvidas e/ou dispersas em um polímero ou um adesivo.

[098]A composição farmacêutica, de acordo com a presente invenção, também pode compreender qualquer composto ou excipiente para sustentar a liberação dos compostos ativos.

[099]A presente invenção também se refere ao processo para a preparação de compostos de Fórmula (I) e (Γ), conforme definido acima.

Preparação dos Compostos e Atividade Biológica [0100]Abreviações ou símbolos utilizados no presente incluem:

- ACHN: 1,1 '-azobis(cicloexanocarbonitrila)

- ACN: acetonitrila

- AcOH: ácido acético

- Bn: benzila

- Boc: íerc-butoxicarbonil

- B0C2O: anidrido de terc-butoxicarbonil

- BocON: [2-(íerc-butoxicarboniloxiimino)-2-fenilacetonitrila]

- bs: singleto largo

- Reagente de Burgess: A/-(trietilamonossulfonil)carbamato de metila

- Cbz: carboxibenzila

- CbzCI: cloroformato de benzila

- UFC: unidades formadoras de colônias

- CLSI: instituto de padrões laboratoriais clínicos

- d: dupleto

- DBU: 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-ene

- DCM: diclorometano

- DCE: 1,2-dicloroetano

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- dd: dupleto de dupleto

- ddd: dupleto de dupleto de dupleto

- ddt: dupleto de dupleto of tripleto

- dq: dupleto de quarteto

- dt: dupleto of tripleto

- DTA: di-terc-butilazodicarboxilato

- DEAD: azodicarboxilato de dietila

- Periodinano de Dess-Martin: 1,1,1 -tris(acetiloxi)-1,1 -diidro-1,2benziodoxol-3-(1 H)-ona

- DIAD: azodicarboxilato de diisopropila

- DIPEA: Λ/,ΛΖ-diisopropiletilamina

- DMAP: 4-dimetilaminopiridina

- DMF: A/,A/-dimetilformamida

- DMSO: dimetilssulfóxido

- EtOAc: acetato de etila

- Et2O: éter de dietila

- h: horas

- HATU: hexafluorofosfato de 1 -[bis(dimetilamino)metileno]-1 H1,2,3-triazolo[4,5-b]piridínio-3-óxido

- iPrOH: isopropanol

- m: multipleto

- min: minutos

- MeOH: metanol

- MeONa: metóxido de sódio

- MIC: concentração inibitória mínima

- MS: espectrometria de massa

- MsCI: cloreto de metanossulfonila

- NBS: /V-bromosuccinimida

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- NMR: espectroscopia de ressonância magnética nuclear

- Ns: nosila, nitrobenzenossulfonila

- OMs: metanossulfonato

- OTs: toluenossulfonato

- OTf: trifluorometanossulfonato

- Pd(Ph3)4: tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0)

- PG: grupo de proteção

- PhSH: tiofenol

- PMea: trimetilfosfina

- PPha: trifenilfosfina

- Ppm: partes por milhão

- q: quarteto

- rt: temperatura ambiente

- s: singulto

- SEM: [2-(trimetilsilil)etoxi]metila

-1: tripleto

- td: tripleto de dupleto

- TBAF: fluoreto de tetra-/?-butilamônio

- TBDMSOTf: éster de terc-butildimetilssilila de ácido trifluorometanossulfônico

- TBDMS: terc-butildimetilssilila

- TBDPS: terc-butildifenilssilila

- TBSOTf: trifluorometanossulfonato de trimetilssilila

- tBuOK: terc-butóxido de potássio

- TEA: trietilamina

- Tf: trifluorometanossulfonato

- TFA: ácido trifluoroacético

- THF: tetraidrofurano

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- THP: tetraidropiranila

- TLC: cromatografia em camada fina

- TMSI: iodotrimetilsilano

- Tr: tritil(trifenilmetil) [0101]Os compostos da presente invenção de Fórmula (I) e (Γ) podem ser preparados respectivamente pelos seguintes esquemas de reação de 1 a 8.

[0102] Deve ser entendido que os processos dos esquemas de 1 a 8 podem ser adaptados para preparar os compostos adicionais, de acordo com a presente invenção. Outros processos para a preparação de compostos, de acordo com a presente invenção, podem ser derivados dos processos dos esquemas de 1 a 8.

Esquema 1

- Preparação dos compostos (I) e (Γ) em que Y² + H, procedimento

- Legenda: “nucleophilic substitution” significa substituição nucleofílica.

[0103]A substituição nucleofílica pode ser realizada através da reação do éter adequado (II) com o intermediário adequado (III) em solvente tal como o DMSO, DMF, THF ou ACN, de preferência, o DMSO, na presença de uma base tal como o DBU, TEA, K2CO3 ou CS2CO3. de preferência, 0 DBU. Em alguns casos específicos, a preparação dos compostos (III) em que R¹ é 0 C(=O)NH2 e CN respectivamente estão descritos na publicação WO

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2003/063864 (intermediário 33a) e na publicação WO 2013/038330 (intermediário IX). A preparação de outros compostos de Fórmula (III) pode ser derivada pelo técnico no assunto a partir da publicação WO 2003/063864 e WO 2013/038330.

Esquema 2

- Preparação dos compostos (I) e (I*) em que Y² + H, procedimento

Nucleophilic Substitution

Ο

(IV)

Deprotection or Saponification

(VI)

Nucleophilic Substitution

- Legenda: “nucleophilic substitution” significa substituição nucleofílica; “deprotection or saponification” significa desproteção ou saponificação.

[0104] Os compostos de Fórmula (V) podem ser obtidos a partir de compostos de Fórmula (III) através da substituição nucleofílica com o éter adequado (IV), em que PG¹ é um grupo de proteção tal como a etila, alila ou benzila, em um solvente tal como o DMSO, DMF, THF ou ACN, de preferência, o DMSO e DMF, e na presença de uma base tal como o DBU, TEA, K2CO3 ou CS2CO3, de preferência,

DBU e K2CO3.

[0105] Os compostos de Fórmula (VI) podem ser obtidos a partir de compostos de Fórmula (V) através de hidrogenólise em um solvente tal como 0 THF,

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MeOH, EtOH, DCM, DMF, de preferência, o THF, na presença de uma quantidade catalítica de Pd / C e na presença ou não de uma base tal como o DIPEA ou TEA ou através de saponificação em um solvente tal como o THF, H2O, MeOH, dioxano, de preferência, 0 THF e H2O, na presença de uma base tal como 0 NaOH, LiOH ou KOH, de preferência, 0 LiOH.

[0106] Os compostos de Fórmula (I) e (I*) podem ser obtidos a partir de compostos de Fórmula (VI) através da substituição nucleofílica com os compostos adequados de Fórmula (VII), em que X um grupo de saída tal como 0 Cl, Br, I, OTf, OMs ou OTs, em um solvente tal como 0 DMSO, DMF, THF ou ACN, de preferência, 0 DMSO e DMF, e na presença de uma base tal como 0 DBU, TEA, K2CO3 ou CS2CO3, de preferência, 0 DBU e K2CO3.

Esquema3

- Preparação dos compostos (I) e (I*) em que Y² + H, procedimento C

Nucleophilic Substitution

[0107]0s compostos de Fórmula (IX) podem ser obtidos a partir de compostos de Fórmula (III) através da substituição nucleofílica com 0 éter adequado

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37/134 (VIII), em que M é o H, Li, Na ou K, em um solvente tal como o DMSO, DMF, THF ou

ACN., de preferência, o DMSO e DMF, e na presença de uma base tal como o DBU,

TEA, K2CO3 ou CS2CO3, de preferência, 0 DBU e K2CO3.

[0108] Os compostos de Fórmula (I) e (Γ) podem ser obtidos a partir de compostos de Fórmula (IX) através da substituição nucleofílica com os compostos adequados de Fórmula (VII), em que X um grupo de saída tal como 0 Cl, Br, I, OTf,

OMs ou OTs, em um solvente tal como 0 DMSO, DMF, THF ou ACN, de preferência,

DMSO e DMF, e na presença ou não de uma base tal como 0 DBU, TEA, K2CO3 ou CS2CO3, de preferência DBU e K2CO3.

Esquema4

- Preparação dos compostos (I) e (I*) em que Y² + H, procedimento D

Reduction

Ο

N

O O—PG

Deprotection of PG¹

Methylation

Nucleophilic Substitution

O (II) .1

Legenda: “nucleophilic substitution” significa substituição nucleofílica; “deprotection of PG” significa desproteção de PG; “reduction” significa redução; “methylation” significa metilação.

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38/134 [0109]0s compostos (I) e (Γ) podem ser obtidos a partir do composto comercialmente disponível (X) seguindo o procedimento D, em que PG¹ é um grupo de proteção, tal como a etila, alila ou benzila.

Esquema 5

Preparação dos compostos em que Y² + H, procedimento E

Reduction

Protection PG² (X)

Deprotection of PG¹

Nucleophilic Substitution o

O (II)

- Legenda: “nucleophilic substitution” significa substituição nucleofilica; “deprotection of PG” significa desproteção de PG; “reduction” significa redução; “protection” significa proteção.

[0110]Gs compostos (I) e (Γ) podem ser obtidos a partir do composto comercialmente disponível (IV) seguindo o procedimento E, em que PG¹ é definido como acima e PG²é um grupo de proteção tal como o TBDMS ou TBDPS.

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Esquema 6

- Preparação dos compostos (I) e (Γ) em que Y² = H

Deprotection

OH

- Legenda: “deprotection” significa desproteção.

[0111]Compostos (I) e (Γ) em que Y² = H pode ser obtido a partir dos compostos (I) e (I*) em que Y²^ H através de hidrogenólise em um solvente tal como o THF, MeOH, EtOH, DCM, DMF, de preferência, o THF, na presença de uma quantidade catalítica de Pd / C e na presença ou não de uma base tal como o DIPEA ou TEA, ou através de saponificação em um solvente tal como o THF, H2O, MeOH, dioxano, de preferência, 0 THF e H2O, em presença de uma base tal como 0 NaOH, LiOH ou KOH, de preferência, 0 LiOH.

Esquema 7

- Preparação do intermediário (II) em que Y² + H, Procedimento A ° , ° ________ HO^Z' Transesterification β_Γ (XI) (XII) (II)

- Legenda: “transesterification” significa transesterificação.

[0112]A transesterificação pode ser realizada através da reação do éster adequado (XI) com 0 álcool adequado (XII) puro ou em um solvente tal como 0 tolueno ou dioxano, na presença ou não de uma quantidade catalítica de ácido tal como 0 MeSOaH.

Esquema 8

- Preparação do intermediário (II) em que Y²# H, Procedimento B

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0 ^Y ^CI	ΗΟ^χΥ2	Acylation	0 Βι\ iJL Y 0
(xiii)	(XH)		(H)
	- Legenda: “acylation” significa acilação.

[0113] A acilação pode ser realizada através da reação do cloreto de acila adequado (XIII) com o álcool adequado (XII) em um solvente tal como o ACN ou Et20, na presença de uma base tal como piridina ou TEA.

Exemplos [0114] Os seguintes Exemplos 1,2,3,12,13,14 e 15 são fornecidos.

[0115] Os seguintes Exemplos 6, 7, 8, 9, 10, 11, 16 e 17 são especificamente fornecidos para o propósito de ilustrar a presente invenção e de nenhuma maneira devem ser interpretados como limitantes do âmbito da presente invenção.

[0116]A primeira parte representa a preparação dos compostos (intermediários e compostos finais) enquanto a segunda parte descreve a avaliação da atividade antibacteriana e biodisponibilidade dos compostos, de acordo com a presente invenção.

Exemplo 1

Síntese de 2-[[(2S,5fl)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1 ]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de cicloexila

Step 2

DBU/DMSO o

Example 1

- Legenda: “step” significa etapa; “example” significa Exemplo.

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Etapa 1

- preparação do intermediário 2-bromo-2,2-difluoro-acetato de cicloexila (1a) [0117] Em um frasco selado, uma solução de 2-bromo-2,2-difluoroacetato de etila (2 mL, 15,6 mmol) e cicloexanol (1,56 g, 15,6 mmol) foi aquecida a 120^s C durante 65 h. A mistura de reação foi ligeiramente concentrada. O produto bruto foi purificado através da cromatografia em gel de silica (heptano / DCM 100/0 a 50/50) para fornecer o intermediário (1 a) (1,03 g, 5,06 mmol, 32%).

[0118]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) de 1,30 a 1,46 (m, 3H), de 1,51 a 1,65 (m, 3H), de 1,74 a 1,82 (m, 2H), de 1,88 a 1,93 (m, 2H), 4,97 (tt, J = 3,8/8,5 Hz, 1H).

Etapa 2

- preparação do composto 2-[[(2S,5fí)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de cicloexila, Exemplo 1 [0119]À temperatura ambiente, o DBU (127, 0,85 mmol) foi lentamente adicionado a uma solução de (2S,5fí)-6-hidroxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (preparada de acordo ao procedimento descrito na publicação WO 2003063864 composto 33a, estado B) (150 mg, 0,81 mmol) e 2-bromo-2,2-difluoroacetato de cicloexila (1a) (416 mg, 1,62 mmol) em DMSO (1 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min e, em seguida, diluída com o AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / Acetona 9/1 a 4/6) para fornecer o Exemplo 1 (84 mg, 0,23 mmol, 28%).

[0120] MS m/z ([M+H]⁺) 362.

[0121]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) de 1,23 a 1,46 (m, 3H), de 1,49 a 1,64 (m, 4H), de 1,72 a 2,05 (m, 5H), de 2,11 a 2,20 (m, 1H), de 2,38 a 2,45 (m, 1H), 2,98 (d, J = 12,0 Hz, 1H), de 3,25 a 3,31 (m, 1H), de 3,95 a 3,98

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42/134 (m, 1H), 4,06 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 4,97 (td, J = 4,5 / 9,0 Hz, 1H), 5,49 (s largo, 1H), 6,50 (s largo, 1H).

[0122]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDCh): δ (ppm) -83,64 (d, J = 139 Hz, 1F), -83,57 (d, J = 139 Hz, 1F).

Exemplo 2 síntese de 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1 ]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de 4-heptanila

Step 1

Step 2

DBU/DMSO

O

Example 2

- Legenda: “step” significa etapa; “example” significa Exemplo.

Etapa 1

- preparação do intermediário 2-bromo-2,2-difluoro-acetato de 4heptanila (2a) [0123] Em um frasco selado, uma solução de 2-bromo-2,2difluoro-acetato de etila (1 mL, 7,8 mmol) e 4-heptanol (906 mg, 7,8 mmol) foi aquecida a 120^s C durante 60 h. A mistura de reação foi ligeiramente concentrada. O produto bruto foi purificado através da cromatografia em gel de silica (heptano / DCM 100/0 a 50/50) para fornecer o intermediário (2a) (510 mg, 1,86 mmol, 24%).

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43/134 [0124]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) 0,93 (t, J = 7,3 Hz, 6H), de 1,28 a 1,47 (m, 4H), de 1,54 a 1,75 (m, 4H), 5,07 (tt, J = 4,9 / 7,7 Hz, 1H).

Etapa 2

- preparação do composto 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de 4-heptanila, Exemplo 2 [0125]À temperatura ambiente, uma solução de DBU (103 μΙ, 0,69 mmol) em DMSO (200 μΙ_) foi lentamente adicionada a uma solução de (2S,5F?)-6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1 ]octano-2-carboxamida (preparada de acordo com 0 procedimento descrito na publicação WO 2003063864 composto 33a, estado B) (123 mg, 0,66 mmol) e intermediário (2a) (200 mg, 073 mmol) em DMSO (1 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min e, em seguida, diluída com 0 AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 9/1 a 4/6) para fornecer 0 Exemplo 2 (120 mg, 0,32 mmol, 48%).

[0126] MS m/z ([M+H]⁺) 378.

[0127]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) de 0,85 a 0,90 (m, 6H), de 1,20 a 1,34 (m, 4H), de 1,55 a 1,93 (m, 7H), de 2,04 a 2,14 (m, 1H), de 3,05 a 3,11 (m, 1H), 3,15 (d, J = 12,1 Hz, 1H), de 3,84 a 3,94 (m, 2H), de 5,01 a 5,10 (m, 1H), 7,38 (s largo, 1H), 7,54 (s largo, 1H).).

[0128]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDCh): δ (ppm) -82,31 (d, J = 137,4, 1F), -81,93 (d, J = 137,4, 1F).

Exemplo 3 síntese de 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1 ]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de 2-adamantila

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Step 1

ACN / Pyridine

0°C

F F

3a

Step 2

DMSO/DBU

Example 3

- Legenda: “step” significa etapa; “example” significa Exemplo; “pyridine” significa piridina.

Etapa 1

- preparação do intermediário 2-bromo-2,2-difluoro-acetato de 2-adamantila (3a) [0129]A 0^s C, foi adicionada a piridina (167, 2,06 mmol), gota a gota, a uma suspensão de 2-adamantanol (174 mg, 1,03 mmol) e cloreto de 2-bromo-2,2-difluoro-acetila (230 mg, 1,13 mmol). em ACN (1 mL). A mistura, em seguida, foi aquecida para a temperatura ambiente, agitada durante 1 h e concentrada. O resíduo foi triturado com o cicloexano e filtrado.

O filtrado foi concentrado para fornecer o (3a) como um óleo incolor (300 mg, 0,95 mmol, 94%).

[0130]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) de 1,58 a 1,67 (m, 2H), de 1,73 a 1,84 (m, 4H), de 1,85 a 1,96 (m, 4H), de 2,01 a 2,17 (m, 4H), 5,12 (t, J = 3,6 Hz, 1H).

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Etapa2 preparação de 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de 2-adamantila, Exemplo 3 [0131]À temperatura ambiente, foi lentamente adicionado o DBU (850 μΙ_, 5,67 mmol) a uma solução de (2S,5F?)-6-hidroxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (preparada de acordo ao procedimento descrito na publicação WO 2003/063864 composto 33a, estado B) (1 g, 5,4 mmol) e intermediário (3a) (1,97 g, 6,37 mmol) em DMSO (6 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 10 min e, em seguida, diluída com o AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 10/0 a 4/6) para fornecer o Exemplo 3 como um sólido branco (820 mg, 1,98 mmol, 37%).

[0132]MS m/z ([M+H]⁺ 414).

[0133]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) de 1,57 a 1,63 (m, 2H), de 1,72 a 2,21 (m, 13H), de 2,38 a 2,47 (m, 1H), 2,98 (d, J = 12,0 Hz, 1 H), de 3,25 a 3,31 (m, 1 H), de 3,96 a 3,99 (m, 1 H), 4,06 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), de 5,11 a 5,16 (m, 1H), 5,51 (s largo, 1 H), 6,51 (bs, 1 H).

[0134]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDC13): δ (ppm)-83,60 (d, J = 138,6 Hz, 1 F), -82,98 (d, J = 138,6 Hz, 1 F).

Exemplo 6 síntese de 2-[[(2S,5F?)-2-ciano-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de sódio

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Step 1

Neat I MeS03H 120°C

6a

Step 2

DMSO/DBU

Step 4

Acetone / Nal

6c

- Legenda: “step” significa etapa;

“example” significa Exemplo;

“neat” significa pura; “acetone” significa acetona.

Etapa 1

- preparação do intermediário 2-bromo-2,2-difluoro-acetato de benzila (6a) [0135] Uma solução de 2-bromo-2,2-difluoro-acetato de etila (5,68 g, mmol) e álcool de benzila (2,88 g, 26,7 mmol) com uma quantidade catalítica de ácido metanossulfônico (10 mg) foi aquecida a 120^s C durante 16 h. A mistura foi concentrada. O produto bruto foi purificado através da cromatografia em gel de silica (heptano / DCM 100/0 a 25/75) para fornecer o intermediário (6a) (3,9 g, 14,7 mmol, 55%).

[0136]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) 5,40 (s, 2H), 7,45 (s, 5H).

Etapa 2

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- preparação de intermediário 2-[[(2S,5fí)-2-ciano-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de benzila (6b) [0137]À temperatura ambiente, o DBU (65, 0,44 mmol) foi lentamente adicionado a uma solução de (2S,5fí)-6-hidroxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carbonitrila (preparado de acordo com o procedimento descrito na publicação WO 2013/038330 composto IX) (72 mg, 0,43 mmol) e intermediário (6a) (237 mg, 0,89 mmol) em DMSO (1 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 10 min e, em seguida, diluída com o AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 10/0 a 1/9) para fornecer o intermediário (6b) como um sólido branco (40 mg, 0,11 mmol, 26%).

[0138] MS m/z ([M+H]⁺ 352).

[0139]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) de 1,90 a 2,07 (m, 2H), de 2,17 a 2,39 (m, 2H), de 3,19 a 3,26 (m, 1H), 3,43 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 3,93 (s largo, 1H), 4,46 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 5,35 (s, 2H), de 7,37 a 7,42 (m, 5H).

[0140]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDC13): δ (ppm) -83,20 (d, J = 139,7 Hz, 1F), -82,64 (d, J = 139,7 Hz, 1F).

Etapa 3

- preparação do intermediário 2-[[(2S,5F?)-2-ciano-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1 ]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoreto-acetato de diisopropiletilamôn io (6c) [0141 ]À temperatura ambiente, uma solução de intermediário (6b) (40 mg, 0,11 mmol) e DIPEA (57, 0,33 mmol) em THF (2 mL) foi purgada com 0 nitrogênio. O catalisador Pd-C a 10% (10 mg) foi adicionado. A mistura foi purgada com 0 hidrogênio, agitada durante 30 min, filtrada e 0 filtrado foi concentrado. O resíduo foi diluído com 0 tolueno e concentrado duas vezes para fornecer 0 intermediário (6c) que foi utilizado na etapa seguinte sem a purificação adicional.

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Etapa 4 preparação de 2-[[(2S,5fí)-2-ciano-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de sódio Exemplo 6 [0142] Uma solução de iodeto de sódio (120 mg, 0,8 mmol) em acetona (2 mL) foi adicionada a uma solução do intermediário (6c) da etapa 3 em acetona (3 mL). A mistura foi vigorosamente agitada durante 16 he, em seguida, filtrada. O precipitado foi lavado com a acetona e seco sob vácuo para fornecer o Exemplo 6 como um sólido branco (11 mg, 0,039 mmol, 35%).

[0143] MS m/z ([M+H]⁺ 262).

[0144] MS m/z ([M-H]’ 260).

[0145]NMR ¹H (300 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) de 1,87 a 2,05 (m, 4H), 3,29 (s Ig, 2H), 3,97 (s largo, 1H), de 4,67 a 4,69 (m, 1H).

[0146]NMR ¹⁹F (282 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) -82,04 (d, J = 131,0 Hz, 1F), -81,42 (d, J = 131,0 Hz, 1F).

Exemplo 7

- síntese de (2-metoxi-1,1-dimetil-etil)2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1 ]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato

Step 1

ACN/ Pyridine

F F

Step 2

DMSO/K₂CO₃ o

Example 7

- Legenda: “step” significa etapa; “example” significa Exemplo;

“pyridine” significa piridina.

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Etapa 1

- preparação do intermediário (2-metoxi-1,1-dimetil-etil)2-bromo-

2,2-difluoro-acetato (7a) [0147]A 0^s C, foi adicionada, gota a gota, a piridina (1,81 mL, 22,5 mmol) a uma suspensão de 1-metoxi-2-metil-2-propanol (1,71 mL, 15 mmol) e cloreto de 2-bromo-2,2-difluoro-acetila (3,3 g, 17 mmol) em ACN (13 mL). A mistura, em seguida, foi aquecida até à temperatura ambiente, agitada durante 30 minutos e concentrada. O resíduo foi triturado com o heptano e filtrado. O filtrado foi concentrado para fornecer o (7a) como um óleo incolor (1,83 g, 7 mmol, 47%).

Etapa 2

- preparação do composto ((2-metoxi-1,1 -dimetil-etil)2-[[(2S,5fí)-2carbamoil-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octano-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato, Exemplo 7 [0148]À temperatura ambiente, foi adicionado o K2CO3 (519 mg, 3,75 mmol) a uma solução de (2S,5fí)-6-hidroxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (preparada de acordo com 0 procedimento descrito na publicação WO 2003/063864 composto 33a, estado B) (632 mg, 3 mmol) e intermediário (7a) (1,7 g, 6 mmol) em DMSO (3 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2ha0 e, em seguida, diluída com 0 AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 8/2 a 5/5) para fornecer 0 Exemplo 7 (620 mg, 1,62 mmol, 50%).

[0149] MS m/z ([M+H]⁺) 366.

[0150]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) 1,57 (d, J = 4,3 Hz, 6H), de 1,77 a 1,91 (m, 1H), 2,01 (M, 1H), 2,15 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 2,44 (m, 1H), 3,02

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50/134 (d, J = 11,9 Hz, 1H), de 3,28 a 3,33 (m, 1H), 3,43 (s, 3H), 3,59 (d, J = 1,1 Hz, 2H), 4,02 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 5,74 (s, 1H), 6,58 (s, 1H).

[0151]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDCh): δ (ppm)-83,60 (d, J = 139,2 Hz,

1F), -83,09 (d, J = 139,2 Hz, 1F).

Exemplo 8

- síntese de (4-metiltetraidropiran-4-il)-2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato

Step 1

ACN/ Pyridine

Step 2

DMSO/K₉COo £ o

Example 8

- Legenda: “step” significa etapa; “example” significa Exemplo;

“pyridine” significa piridina.

Etapa 1

- preparação do intermediário (4-metiltetraidropiran-4-il)-2-bromo-

2,2-difluoro-acetato (8a) [0152]A 0^s C, foi adicionada, gota a gota, a piridina (1,81 mL, 22,5 mmol) a uma suspensão de 4-metiltetraidropiran-4-ol (1,74 g, 15 mmol) e cloreto

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51/134 de 2-bromo-2,2-difluoro-acetila (3,3 g, 17 mmol) em ACN (13 mL). A mistura, em seguida, foi aquecida até à temperatura ambiente, agitada durante 30 minutos e concentrada. O resíduo foi triturado com heptano e filtrado. O filtrado foi concentrado para fornecer o (8a) como um óleo amarelo (1,9 g, 7 mmol, 45%).

Etapa 2

- preparação do composto (4-metiltetraidropiran-4-il)-2-[[(2S,5fí)-2carbamoil-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato, Exemplo 8 [0153]À temperatura ambiente, foi adicionado o K2CO3 (425 mg, 3,08 mmol) a uma solução de (2S,5fí)-6-hidroxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (preparada de acordo com a 0 procedimento descrito na publicação WO 2003/063864 composto 33a, estado B) (536 mg, 2,8 mmol) e intermediário (8a) (1,52 g, 5,5 mmol) em DMSO (3 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h 30 e, em seguida, diluída com 0 AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 9/1 a 5/5) para fornecer 0 Exemplo 8 (680 mg, 1,8 mmol, 62%).

[0154] MS m/z ([M+H]⁺) 378.

[0155]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) 1,67 (s, 3H), de 1,77 a 2,09 (m, 4H), de 2,13 a 2,34 (m, 3H), 2,46 (dd, J = 15,0, 7,0 Hz, 1H), 3,04 (d, J = 12,0 Hz, 1H), de 3,26 a 3,37 (m, 1H), de 3,64 a 3,86 (m, 4H), 4,01 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 5,72 (s, 1H), 6,57 (s, 1H).

[0156]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDCh): δ (ppm) -83,14 (d, J = 137,2 Hz, 1F), -83,68 (d, J = 137,2 Hz, 1F).

Exemplo 9

- síntese de [2-metoxi-1-(metoximetil)etil] 2-[[(2S,5fí)-2-carbamoil7-OXO-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-6-ilo]oxi]-2,2-difluoro-acetato

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Step 1

Et₂O / Pyridine

Step 2

DMSO/DBU

Example 9

- Legenda: “step” significa etapa; “example” significa Exemplo;

“pyridine” significa piridina.

Etapa 1

- preparação de [2-(2-metoxietoxi)-1,1-dimetil-etil]-2-bromo-

2,2- difluoro-acetato (9a) [0157]A 0^s C, foi adicionada, gota a gota, a piridina (1,94 mL, 24 mmol) a uma suspensão de 1 -(2-metoxietoxi)-2-metil-propan-2-ol (2,4 g, 16 mmol) e cloreto de 2-bromo-2,2-difluoro-acetila (3,60 g, 18 mmol) em Et20 (32 mL). A mistura, em seguida, foi aquecida para a temperatura ambiente, agitada durante 1 h, diluída com o Et20, lavada com o ácido cítrico (2 x 30 mL). A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer o (9a) como um óleo incolor (4,8 g, 16 mmol, 100%).

[0158]NMR ¹H (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 1,56 (s, 6H), 3,38 (s, 3H), de 3,52 a 3,56 (m, 2H), de 3,65 a 3,70 (m, 4H).

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Etapa 2

- preparação de [2-metoxi-1-(metoximetil)etil]2-[[(2S,5fí)-2carbamoil-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-6-ilo]oxi]-2,2-difluoro-acetato (Exemplo 9) [0159]À temperatura ambiente, o DBU (199 mg, 1,44 mmol) foi lentamente adicionado a uma solução de (2S,5F?)-6-hidroxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (preparada de acordo com o procedimento descrito na publicação WO 2003/063864 composto 33a, estado B) (1 g, 4,59 mmol) e intermediário (9a) (2,38 g, 7,81 mmol) em DMSO (4,6 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h e, em seguida, diluída com o AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 100/0 a 40/60) para fornecer o Exemplo 9 como um óleo incolor (1,21 g, 2,95 mmol, 65%).

[0160]MS m/z ([M+H]⁺ 410 [0161]NMR ¹H (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 1,54 (s, 3H), 1,55 (s, 3H), de 1,75 a 1,86 (m, 1H), de 1,90 a 2,03 (m, 1H), de 2,09 a 2,18 (m, 1H), 2,39 (dd, J = 15,2, 7,1 Hz, 1H), 2,97 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,26 (dt, J = 12,1, 3,2 Hz, 1H), 3,36 (s, 3H)., de 3,49 a 3,55 (m, 2H), de 3,63 a 3,71 (m, 4H), 3,97 (q, J = 3,0 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 7,7 Hz, 1H), de 5,58 a 5,80 (m, 1H), 6,54 (s, 1H).

[0162]NMR ¹⁹F (377 MHz, CDCh): δ (ppm)-83,60 (d, J = 138,9 Hz, 1F), -83,19 (d, J = 138,9 Hz, 1 F).

Exemplo 10

- síntese de [2-metoxi-1-(metoximetil)-1-metil-etil] 2-[[(2S,5F?)2-carbamoil-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato

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Step 1

Et₂O/ Pyridine

Step 2

DMSO/DBU

Etapa 1

- preparação do intermediário [2-metoxi-1-(metoximetil)-1metil-etil]-2-bromo-2,2-difluoro-acetato (1 Oa) [0163]A 0^s C, foi adicionada, gota a gota, a piridina (1,8 mL, 22,35 mmol) a uma suspensão de 1 -metoxi-2-(metoximetil)propan-2-ol (2 g, 14,9 mmol) e cloreto de 2-bromo-2,2-difluoro-acetila (3,28 g, 17 mmol) em Et2O (40 mL). A mistura, em seguida, foi aquecida até à temperatura ambiente, agitada durante 30 minutos e, em seguida, diluída com o Et20. A camada orgânica foi lavada 3 vezes com o ácido cítrico a 5% (15 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer o (10a) como um óleo incolor (3,89 g, 13,3 mmol, 90%).

[0164]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) 1,46 (s, 3H), 3,31 (s, 6H), 3,52 (d, J = 10,1 Hz, 2H), 3,67 (d, J = 10,1 Hz, 2H).

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 304/390

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Etapa 2

- preparação do composto 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1 ]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de [2-metoxi-1 (metoximetil)-l -metil-etil], Exemplo 10 [0165]À temperatura ambiente, o DBU (0,97 mL, 6,51 mmol) foi lentamente adicionado a uma solução de (2S,5F?)-6-hidroxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (preparada de acordo ao procedimento descrito na publicação WO 2003/063864 composto 33a, estado B) (1,15 g, 6,2 mmol) e intermediário (10a) (1,15 g, 6,2 mmol) em DMSO (5,5 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h 30 e, em seguida, diluída com o AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 9/1 a 5/5) para fornecer o Exemplo 10 (1,3 g, 3,29 mmol, 47%).

[0166]MS mz ([M+H]⁺) 396 [0167]NMR ¹H (400 MHz, CDCh): δ (ppm) 1,52 (s, 3H), de 1,76 a 1,87 (m, 1H), 1,98 (m, 1H), de 2,11 a 2,16 (m, 1H), 2,39 (m, 1H)), 3,00 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 3,26 (dt, J = 12,1, 3,1 Hz, 1H), 3,37 (s, 6H), 3,58 (dd, J = 10,1, 7,5 Hz, 2H), 3,75 (dd, J = 10,1, 3,3 Hz, 2H), 3,99 (t, J = 3,1 Hz, 1H), 4,06 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 5,98 (s, 1 H), 6,61 (s, 1 H).

[0168]NMR ¹⁹F (377 MHz, CDCh): δ (ppm)-83,11 (s, 2F).

Exemplo 11 síntese de 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-ilo]oxi]-2,2-difluoro-acetato de [4(metoximetil)tetraidropiran-4-il]

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Example 11

Etapa 1

- preparação do intermediário [4-(metoximetil)tetraidropiran-4-il]-2bromo-2,2-difluoro-acetato (11a) [0169]A 0^s C, foi adicionada, gota a gota, a piridina (1,8 mL, 22,35 mmol) a uma solução de 4-(metoximetil)tetraidropiran-4-ol (2 g, 13,7 mmol) e cloreto de 2-bromo-2,2-difluoroacetila (3,04 g, 15,73 mmol) em Et₂O (40 mL). A mistura, em seguida, foi aquecida até à temperatura ambiente, agitada durante 30 minutos e, em seguida, diluída com o Et₂O. A camada orgânica foi lavada 3 vezes com o ácido cítrico a 5% (15 mL), seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer o (11a) como um óleo amarelo (3,9 g, 12,87 mmol, 94%).

[0170]NMR ¹H (400 MHz, CDCh): δ (ppm) de 1,79 a 1,87 (m, 2H), 2,21 (dd, J = 2,4, 14,7 Hz, 2H), 3,34 (s, 3H), 3,67 (td, J = 2,2, 11,7 Hz, 2H), 3,72 (s, 2H), de 3,79 a 3,84 (m, 2H).

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 306/390

57/134 [0171 ]NMR ¹⁹F (377 MHz, CDCI3) δ -60,66 (s, 2F).

Etapa 2

- preparação do composto 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1 ]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de[4(metoximetil)tetraidropiran-4-il], Exemplo 11 [0172]À temperatura ambiente, foi lentamente adicionado 0 DBU (0,85 mL, 5,67 mmol) a uma solução de (2S,5F?)-6-hidroxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (preparada de acordo ao procedimento descrito na publicação WO 2003/063864 composto 33a, estado B) (1 g, 5,4 mmol) e intermediário (11a) (2,45 g, 8,1 mmol) em DMSO (4 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 minutos e, em seguida, diluída com 0 AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 9/1 a 0/10) para fornecer 0 Exemplo 11 (1,2 g, 2,94 mmol, 54%) como um pó branco.

[0173] MS mz ([M+H]⁺) 408 [0174]NMR ¹H (400 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) de 1,67 a 1,93 (m, 5H), de 1,99 a 2,12 (m, 3H), 3,10 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 3,5 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 3,28 (s, 3H), de 3,45 a 3,52 (m, 2H), 3,70 a 3,75 (m, 3H), 3,78 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 3,88 (d, J = 6,5 Hz, 1H), de 3,94 a 3,98 (m, 1H), 7,36 (s largo, 1H), 7,52 (s largo, 1H).

[0175]NMR ¹⁹F (282 MHz, DMSO-d₆): δ (ppm) -82,2 (d, J = 137,8 Hz, 1F), -81,75 (d, J = 137,8 Hz, 1F).

Exemplo 12 síntese de 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1 ]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de tetraidropiran-4-il

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Step 1

ACN / Pyridine

F F

Step 2

DMSO/K₉COo

12a

Example 12

- Legenda: “step” significa etapa; “example” significa Exemplo;

“pyridine” significa piridina.

Etapa 1

- preparação do intermediário tetraidropiran-4-ilo 2-bromo-2,2difluoro-acetato (12a) [0176]A 0^s C, foi adicionada a piridina (1,4 mL, 16,5 mmol), gota a gota, a uma suspensão de tetraidropiran-4-ol (1,2 g, 11 mmol) e cloreto de 2-bromo-2,2-difluoro-acetila (2,58 g, 15 mmol) em ACN (10 mL). A mistura, em seguida, foi aquecida até à temperatura ambiente, agitada durante 30 minutos e concentrada. O resíduo foi triturado com heptano e filtrado. O filtrado foi concentrado para fornecer o intermediário (12a) como um óleo incolor (1,8 g, 7 mmol, 60%).

[0177]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) de 1,79 a 1,94 (m, 2H), de 1,99 a 2,16 (m, 2H), de 3,60 a 3,68 (m, 2H), de 3,91 a 4,02 (m, 2H), de 5,16 a 5,24 (m, 1H).

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 308/390

59/134 [0178]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDCh): δ (ppm) -61,05 (s, 2F).

Etapa 2

- preparação do composto 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de tetraidropiran-4-il, Exemplo 12 [0179]A (2S,5F?)-6-hidroxi-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1 ]octano2-carboxamida (preparada de acordo com o procedimento descrito na publicação WO 2003/063864 composto 33a, estado B) (859 mg, 3,91 mmol) foi adicionada a uma suspensão de K2CO3 (545 mg, 3,95 mmol) e intermediário (12a) (1,8 g, 6,9 mmol) em DMSO (3 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambientedurante 2,5 horas e, em seguida, diluída com 0 AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 9/1 a 7/3) para fornecer 0 Exemplo 12 (107,9 mg, 0,29 mmol, 8%).

[0180]MS m/z ([M+H]⁺) 364.

[0181]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) de 1,67 a 2,01 (m, 6H), de 2,04 a 2,14 (m, 1H), de 2,27 a 2,42 (m, 1H), 2,94 (d, J = 12,0 Hz, 1H), de 3,18 a 3,25 (m, 1H), de 3,47 a 3,55 (m, 2H), de 3,81 a 3,94 (m, 3H), 3,99 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), de 5,04 a 5,13 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 6,5 (s, 1 H).

[0182]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDCh): δ (ppm) -83,58 (d, J = 141,17 Hz, 1 F), -83,68 (d, J = 140,29 Hz, 1 F).

Exemplo 13 síntese de 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-ilo]oxi]-2,2-difluoro-acetato de[2-metoxi-1 (metoximetil)etil]

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Step 1

ACN/Pyridine

Step 2

DMSO/K_?COo

Example 13

- Legenda: “step” significa etapa; “example” significa Exemplo;

“pyridine” significa piridina.

Etapa 1

- preparação de intermediário [2-metoxi-1-(metoximetil)etil]-2bromo-2,2-difluoro-acetato (13a) [0183]A 0^s C, a piridina (0,50 mL, 6,25 mmol) foi adicionada gota a gota a uma suspensão de 1,3-dimetoxipropan-2-ol (350 mg, 2,91 mmol) e cloreto de 2-bromo-2,2-difluoro-acetila (650 mg, 3,35 mmol) em ACN (2,9 mL). A mistura, em seguida, foi aquecida para a temperatura ambiente, agitada durante 1 h e concentrada. O resíduo foi triturado com heptano e filtrado. O filtrado foi concentrado para fornecer o intermediário (13a) como um óleo incolor (620 mg, 2,25 mmol, 78%).

[0184]NMR ¹H (400 MHz, CDCh) δ 3,38 (s, 6H), 3,61 (d, J = 5,2 Hz, 4H), 5,29 (p, J = 5,1 Hz, 1H).

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Etapa 2 preparação de 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-ilo]oxi]-2,2-difluoro-acetato de [2-metoxi-1 (metoximetil)etil] (Exemplo 13) [0185]À temperatura ambiente, o K2CO3 (199 mg, 1,44 mmol) foi lentamente adicionado a uma solução de (2S,5F?)-6-hidroxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (preparada de acordo ao procedimento descrito na publicação WO 2003/063864 composto 33a, estado B) (310 mg, 1,31 mmol) e intermediário (13a) (620 mg, 2,24 mmol) em DMSO (1,3 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h e, em seguida, diluída com 0 AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 100/0 a 50/50) para fornecer 0 Exemplo 13 como goma (102 mg, 0,27 mmol, 21 %).

[0186]MS m/z ([M+H]⁺ 382 [0187]NMR ¹H (300 MHz, CDCh) δ de 1,72 a 1,88 (m, 1H), de 1,88 a 2,05 (m, 1H), de 2,06 a 2,24 (m, 1H), 2,40 (dd, J = 15,1, 6,9 Hz, 1H), 2,97 (d, J = 11,9 Hz, 1 H), de 3,21 a 3,30 (m, 1 H), 3,36 (s, 3H), 3,37 (s, 3H), de 3,53 a 3,66 (m, 4H), de 3,94 a 4,01 (m, 1 H), 4,06 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 5,31 (p, J = 5,2 Hz, 1H), 5,69 (s, 1H), 6,53 (s, 1H).

[0188]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDCI3) δ (Ppm)-82,84 (d, J = 1,8 Hz, 2F).

Exemplo 14 síntese de 2-[[(2S,5F?)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de (4-metoxi-1,1dimetil-butil)

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Step 1

ACN/Pyridine

Step 2

DMSO/KpCCL

Í- O

Example 14

- Legenda: “step” significa etapa; “example” significa Exemplo;

“pyridine” significa piridina.

Etapa 1

- preparação de intermediário (4-metoxi-1,1-dimetil-butil)2bromo-2,2-difluoro-acetato (14a) [0189]A 0^s C, foi adicionada, gota a gota, a piridina (1,09 mL, 13,5 mmol) a uma suspensão de 5-metoxi-2- metil-pentan-2-ol (1,20 g, 9 mmol) e cloreto de 2-bromo-2,2-difluoro-acetila (2 g, 10 mmol) em ACN (8 mL). A mistura, em seguida, foi aquecida até à temperatura ambiente, agitada durante 30 minutos e concentrada. O resíduo foi triturado com heptano e filtrado. O filtrado foi concentrado para fornecer intermediário (14a) como um óleo incolor (1,8 g, 6 mmol, 69%).

[0190]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) 1,77 (s, 6H), de 1,81 a 1,95 (m, 2H), de 2,06 a 2,17 (m, 2H), 3,55 (s, 3H), 3,61 (t, J = 6,3 Hz, 2H).

[0191]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDCh): δ (ppm) -60,70 (s, 2F).

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Etapa 2

- preparação do composto 2-[[(2S,5fí)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de (4-metoxi-1,1dimetil-butil) (Exemplo 14) [0192]À temperatura ambiente, foi adicionado o K2CO3 (483 mg, 3,5 mmol) a uma solução de (2S,5fí)-6-hidroxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (preparada de acordo com a 0 procedimento descrito na publicação WO 2003/063864 composto 33a, estado B) (555 mg, 3 mmol) e intermediário (14a) (1,8 g, 6 mmol) em DMSO (3 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h 30 e, em seguida, diluída com 0 AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 9/1 a 5/5) para fornecer 0 Exemplo 14 (410 mg, 1,04 mmol, 35%).

[0193]MS m/z ([M+H]⁺) 394.

[0194]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) 1,59 (d, J = 1,7 Hz, 6H), de 1,63 a 1,70 (m, 2H), de 1,80 a 1,95 (m, 3H), de 1,97 a 2,08 (m, 1 H), de 2,13 a 2,25 (m, 1H), 2,45 (dd, J = 15,1,7,1 Hz, 1H), 3,02 (d, J = 12,0 Hz, 1 H), de 3,29 a 3,33 (m, 1 H), 3,36 (s, 3H), 3,43 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 3,99 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,64 (s, 1H), 6,57 (s, 1H).

[0195]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDCh) δ (ppm) -83,96 e -83,47 (2s, 1F), -83,41 e -82,92 (2S, 1F).

Exemplo 15 síntese de 2-[[(2S,5fí)-2-carbamoil-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de[4(dipropilamino)cicloexil]

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Step 1

Imidazole TBDMSCI

Step 2

K₂CO₃ / Nal

DCM

15b

Step 3

HCI4N in dioxane

Step 4

ACN

- Legenda: “step” significa

Example 15 etapa; “example” significa

Exemplo;

“imidazole” significa imidazol; “in dioxane” significa em dioxano.

Etapa 1

Preparação do intermediário 4-[tercbutil(dimetil)silil]oxicicloexanamina (15a) [0196]À temperatura ambiente, uma solução de trans-4aminocicloexanol (1 g, 8,7 mmol), imidazol (3 g, 44,5 mmol) e cloreto de tercbutildimetilssilila (3,93 g, 26,1 mmol) foi agitada durante 24 horas. A mistura de reação foi concentrada e o produto bruto foi diluído em AcOEt. O extrato orgânico foi lavado com a água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seco sobre sulfato de sódio, filtrado e concentrado para fornecer o intermediário (15a) como um líquido amarelo sem a purificação adicional (2,37 g, rendimento quantitativo).

[0197] MS m/z ([M+H]⁺) 230.

[0198]NMR ¹H (300 MHz, CDC13): δ (ppm) 0,09 (s, 6H), 0,91 (s, 9H), de 1,06 a 1,45 (m, 4H), 1,83 (d, J = 11,3 Hz, 4H), 2,69 (tt, J = 10,7, 3,6 Hz, 1H), 3,55 (tt, J = 10,4, 3,9 Hz, 1H).

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Etapa 2

- Preparação do intermediário 4-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-N,Ndipropil-cicloexanamina (15b) [0199] Uma solução de intermediário (15a) (1,6 g, 6,97 mmol), 1 bromopropano (12,56 mL, 139 mmol), K2CO3 (2,5 g, 18,1 mmol) e iodeto de sódio (1,03 g, 6,92 mmol) foi agitada a 85^s C durante 16 horas. A mistura de reação foi diluída com 0 AcOEt e, em seguida, lavada com a água e salmoura. O extrato orgânico foi seco sobre sulfato de sódio, filtrado e concentrado. O produto bruto foi purificado através da cromatografia em coluna em gel de silica (heptano / AcOEt 7/3 a 5/5) para fornecer 0 intermediário (15b) como um líquido marrom (680 mg, 2,17 mmol, 32%).

[0200] MS m/z ([M+H]⁺) 314.

Etapa 3

- Preparação do intermediário 4-(dipropilamino)cicloexanol (15c) [0201]A 0^s C, uma solução de HCI a 4 N em dioxano (2,71 mL) foi adicionada a uma solução do intermediário (15b) (680 mg, 2,17 mmol) em dioxano (3 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos, diluída com 0 AcOEt e, em seguida, resfriada a 0^s C. A mistura de reação foi basificada com NaOH 2N até pH 7 e, em seguida, extraída duas vezes com 0 AcOEt. Os extratos orgânicos foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados. O produto bruto foi purificado através da cromatografia em coluna em gel de silica (DCM / MeOH 9/1 a 8/2) para fornecer 0 intermediário (15c) como um líquido marrom (270 mg, 1,35 mmol, 62%).

[0202] MS mz ([M+H]⁺) 200.

[0203]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) 0,88 (t, J = 7,3 Hz, 6H), 1,28 (q, J = 10,9 Hz, 9H), 1,87 (s, 2H), 2,03 (d, J = 10,6 Hz, 2H), 2,47 (s, 4H), 3,57 (s, 1H).

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Etapa 4

- Preparação de intermediário [4-(dipropilamino)cicloexil]-2-bromo2,2-difluoro-acetato (15d) [0204]A 0^s C, o intermediário (15c) (270 mg, 1,35 mmol) foi adicionado a uma solução de (2-bromo-2,2-difluoro-acetil)2-bromo-2,2-difluoroacetato (511 mg, 1,54 mmol) em ACN (2 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos e, em seguida, concentrada para fornecer o intermediário (15d) que foi utilizado na etapa seguinte como bruto sem a purificação adicional.

Etapa 5

- Preparação do composto 2-[[(2S,5fí)-2-carbamoil-7-oxo-1,6- diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-2,2-difluoro-acetato de [4(dipropilamino)cicloexil] (Exemplo 15) [0205]À temperatura ambiente, foi adicionado o K2CO3 (745 mg, 5,4 mmol) a uma solução de (2S,5fí)-6-hidroxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxamida (preparada de acordo com a 0 procedimento descrito na publicação WO 2003/063864 composto 33a, estado B) (250 mg, 1,35 mmol) e intermediário (15d) da etapa 4, em DMSO (2,5 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambientedurante 2 h e, em seguida, diluída com 0 AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O produto bruto foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 7/3 a 0/10) para fornecer 0 Exemplo 15 (120 mg, 0,26 mmol, 20%).

[0206] MS m/z ([M+H]⁺) 461.

[0207]NMR ¹H (300 MHz, CDCh): δ (ppm) 0,83 (t, J = 7,3 Hz, 6H), de 1,30 a 1,56 (m, 8H), de 1,73 a 2,01 (m, 4H), de 2,03 a 2,15 (m, 3H), de 2,32 a 2,42 (m, 5H), de 2,47 a 2,58 (m, 1H), 2,98 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,24 (d, J =

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12,1 Hz, 1 Η), 3,93 (q, J = 2,9 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 7,5 Hz, 1H), de 4,72 a 4,87 (m, 1H), 6,06 (s, 1H), 6,58 (s, 1H).

[0208]NMR ¹⁹F (282 MHz, CDCh) δ (ppm) -83,85 e -83,36 (2s, 1F), -83,32 e -82,82 (2S, 1F).

Exemplo 16

2,2-difluoro-2-[[(2S,5F?)-2-(metoximetil)-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1 ]octano- 6-il]oxi]acetato de(4-metiltetraidropiran-4-il)

Step 1

a) THF / NMM /-78°C isobutyl chloroformate

b) MeOH I NaBH4 -78°C to RT

Step 3

H21 Pd-C

Acetone

0°C

16a

Step 2

DMF/NaH

Mel

16b

Bn

RT

16c

Step 4

DMSO/DBU

10°C

8a

F F

Example 16

- Legenda: “step” significa etapa;

“example” significa Exemplo;

“isobutyl chloroform ate” significa cloroformato de isobutila; “acetone” significa acetona.

Etapa 1

- Preparação do intermediário (2S,5F?)-6-benziloxi-2-(hidroximetil)-

1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona (16a) [0209]A -78^s C, o cloroformato de isobutila (1,13 mL, 8,69 mmol) foi adicionado lentamente a uma solução de ácido (2S,5F?)-6-benziloxi-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxílico (2 g, 7,24 mmol) e /V-metilmorfolina (875, 7,96 mmol) em THF (50 mL). A mistura foi agitada a -78^s C durante 15 minutos e, em seguida, foi adicionado o metanol (17 mL). O boro-hidreto de sódio (575 mg, 15,2 mmol) foi adicionado em porção a -78^s C. A mistura foi lentamente

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68/134 aquecida até à temperatura ambiente até à conversão completa no produto desejado. Após 2 horas, o DCM (100 mL) e HCI 1 N (40 mL) foram adicionados sucessivamente à mistura que, em seguida, foi extraída com o DCM. Os extratos orgânicos foram combinados e sucessivamente lavados com o NaHCOs saturado (50 mL) e salmoura. O extrato orgânico foi seco sobre Na2ÔO4, filtrado e concentrado para fornecer um produto bruto. O produto bruto foi purificado através da cromatografia em coluna em S1O2 (gradiente de DCM / acetona 95/5 a 50/50) para fornecer 0 intermediário 16a (1,06 g, 4,04 mmol, 56%).

[0210] MS m/z ([M+H]⁺) 263.

[0211]¹H-NMR (400 MHz, CDCh) δ de 1,33 a 1,40 (m, 1H), de 1,52 a 1,60 (m, 1H), de 1,91 a 2,06 (m, 3H), de 2,88 a 2,93 (m, 1H), 3,00 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,33 (q, J = 3,0 Hz, 1H), de 3,52 a 3,61 (m, 2H), de 3,68 a 3,75 (m, 1H), 4,90 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 5,05 (d, J = 11,5 Hz, 1H), de 7,32 a 7,44 (m, 5H).

Etapa 2

- preparação do intermediário (2S,5F?)-6-benziloxi-2-(metoximetil)-

1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona (16b) [0212]A 0^s C, foi adicionado 0 hidreto de sódio a 60% (37 mg, 0,915 mmol) em porção a uma solução de intermediário (16a) (200 mg, 0,762 mmol) e iodeto de metila (325, 2,29 mmol) em DMF (2 mL).). A mistura foi agitada a 0^s C durante 15 minutos. A mistura foi bruscamente resfriada a 0 com a água e extraída com 0 AcOEt. O extrato orgânico foi seco sobre Na2SCU, filtrado e concentrado. O produto bruto foi purificado através da cromatografia em coluna em S1O2 (gradiente de DCM / acetona 10/0 a 5/5) para fornecer 0 intermediário (16b) (80 mg, 0,29 mmol, 38%).

[0213] MS m/z ([M+H]⁺)277.

[0214]NMR ¹H (400 MHz, CDCh) δ de 1,54 a 1,66 (m, 2H), de 1,93 a 2,05 (m, 2H), de 2,90 a 2,94 (m, 1H), 3,15 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,30 (q, J = 2,7

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Hz, 1 Η), 3,36 (s, 3H), de 3,52 a 3,59 (m, 3H), 4,89 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 5,05 (d, J = 11,4 Hz, 1H) de 7,33 a 7,44 (m, 5H).

Etapa 3

- preparação do intermediário (2S,5F?)-6-hidroxi-2-(metoximetil)-

1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-7-ona (16c) [0215] Uma solução do intermediário (16b) (80 mg, 0,29 mmol) em acetona (4 mL) foi purgada duas vezes com o nitrogênio. Foi adicionado o catalisador de paládio sobre carvão ativado a 10% (16 mg) e a mistura foi purgada duas vezes com o hidrogênio. A mistura foi vigorosamente agitada sob atmosfera de hidrogênio (1 bar) durante 1 hora. A mistura foi filtrada. O filtrado foi concentrado para fornecer o intermediário (16c) como um sólido branco (50 mg, 0,27 mmol, 92%) que foi utilizado sem a purificação adicional.

[0216] MS m/z ([M+H]⁺) 187.

Etapa 4

- preparação do composto 2,2-difluoro-2-[[(2S,5F?)-2-(metoximetil)7-oxo-l ,6-diazabiciclo [3.2.1]] octan-6-il]oxi]acetato de (4-metiltetraidropiran-4-il) (Exemplo 16) [0217]À temperatura ambiente, o DBU (45, 0,3 mmol) foi lentamente adicionado a uma solução de intermediário (16c) (50 mg, 0,3 mmol) e intermediário (8a) (147 mg, 0,5 mmol) em DMSO (1,5 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 10 minutos e, em seguida, diluída com o AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 100/0 a 50/50) para fornecer o Exemplo 16 como um líquido incolor (62 mg, 0,16 mmol, 61%).

[0218] MS m/z ([M+H]⁺) 373.

[0219]NMR ¹H (400 MHz, CDCh) δ 1,61 (s, 3H), de 1,64 a 1,72 (m, 1H), de 1,73 a 1,89 (m, 3H), de 1,95 a 2,04 (m, 1H), de 2,08 a 2,15 (m, 1H), de

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2,16 a 2,22 (m, 1H), de 2,23 a 2,28 (m, 1H), 3,14 (dt, J = 2,8, 11,9 Hz, 1H), 3,39 (s, 3H), 3,43 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,60 (d, J = 5,5 Hz, 2H), de 3,62 a 3,78 (m, 5H), 3,93 (q, J = 2,8 Hz, 1H).

[0220]NMR ¹⁹F (377 MHz, CDCh) δ -83,56 e -83,19 (2s, 1F), -83,18 e -82,81 (2s, 1F).

Exemplo 17

-2,2-difluoro-2-[[(2S,5F?)-2-(metoximetil)-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]acetato de sódio

Step 1

DMSO/DBU

10°C

Step 2

1) nBu₄NOH.30H₂O acetone/ - 15°C

2) bn exchange Na+ o

Na

-< ⁰F F

N y o Na

Example 17

- Legenda: “step” significa etapa; “example” significa Exemplo; “acetone” significa acetona; “ion exchange” significa troca iônica.

Etapa 1

Preparação do intermediário 2,2-difluoro-2-[[(2S,5fí)-2(metoximetil)-7-oxo-1,6-diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]acetato de etila [0221 ]À temperatura ambiente, o DBU (280, 1,9 mmol) foi lentamente adicionado a uma solução de intermediário (16c) (317 mg, 1,7 mmol) e 2-bromo-2,2-difluoroacetato de etila (437, 3,4 mmol) em DMSO (2 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 10 minutos e, em seguida, diluída com o AcOEt. A camada orgânica foi lavada com a salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através da

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71/134 cromatografia em gel de silica (DCM / acetona 100/0 a 50/50) para fornecer o intermediário (17a) como líquido incolor (120 mg, 0,39 mmol, 23%).

[0222] MS m/z ([M+H]⁺) 309.

[0223]NMR ¹H (400 MHz, CDCh) δ 1,38 (t, J = 7,1 Hz, 3H), de 1,64 a 1,71 (m, 1H), de 1,80 a 1,88 (m, 1H), de 1,95 a 2,05 (m, 1H), de 2,09 a 2,16 (m, 1H), 3,15 (dt, J = 2,9, 11,9 Hz, 1H), 3,38 (s, 3H), 3,41 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 3,59 (d, J = 5,6 Hz, 2H), de 3,65 a 3,71 (m, 1H), 3,93 (q, J = 3,0 Hz, 1H), de 4,32 a 4,44 (m, 2H).

[0224]NMR ¹⁹F (377 MHz, CDCh) δ -83,52 e -83,15 (2s, 1F), -83,05 e -82,68 (2s, 1F).

Etapa 2

- Preparação de 2,2-difluoro-2-[[(2S,5R)-2-(metoximetil)-7-oxo-1,6diazabiciclo[3.2.1]octan-6-il]oxi]-acetato de sódio (Exemplo 17) [0225]A -15^s C, foi adicionado o hidrato de tetrabutilamônio 30hidrato (285 g) a uma solução de intermediário (17a) (110 mg) em acetona (2 mL). A mistura foi agitada a -15^s C durante 1 hora e, em seguida, concentrada sob vácuo (banho a 20^s C). O resíduo aquoso foi extraído três vezes com o DCM. Não foi adicionada mais água durante esta operação. O extrato orgânico foi seco sobre Na2SCU, filtrado e concentrado para fornecer um produto bruto que foi aplicado em uma coluna de forma de sódio Dowex (a forma de hidrogênio Dowex50WX8 foi armazenada com uma solução aquosa de NaOH a 2 N e lavada até o pH neutro com a H2O). As frações de interesse foram combinadas, congeladas e liofilizadas para fornecer 0 Exemplo 17 como sal de sódio (53 mg, 0,175 mmol, 17%).

[0226] MS m/z ([M+H]⁺) 281.

[0227] MS m/z ([M-H]+) 279.

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72/134 [0228]NMR ¹H (400 MHz, CDCh) δ de 1,43 a 1,58 (m, 1H), de 1,69 a 1,84 (m, 3H), 2,93 (d, J = 11,9 Hz, 1H), de 3,23 a 3,28 (m, 4H), de 3,37 a 3,40 (m, 1H), de 3,45 a 3,49 (m, 1H), de 3,54 a 3,58 (m, 1H), 3,83 (d, J = 3,7 Hz, 1H).

[0229]NMR ¹⁹F (377 MHz, CDCh) δ -81,76 (d, J = 131,7 Hz, 1F), 81,24 (d, J = 131,6 Hz, 1F).

Atividade Biológica [0230]0 composto AF1, descrito como o Exemplo 3 na publicação WO 2009/133442, é a forma ativa de compostos pró-droga de Fórmula (I) quando Y² é diferente de H como os Exemplos 1,2, 3 e 7 a 15.

[0231 ]O composto AF2, ou Exemplo 6, é a forma ativa do composto pró-droga de Fórmula (I) quando Y² é diferente de H.

Método 1

Atividade Inibidora da b-lactamase. Determinação de IC50 (Tabela 1) [0232]A atividade enzimática foi monitorada através de medições espectrofotométricas de hidrólise da nitrocefina (NCF - TOKU-E, N005) a 485 nm, à temperatura ambiente e em tampão de análise A: fosfato 100mM pH 7, glicerol a 2% e 0,1 mg/mL de albumina sérica bovina (Sigma, B4287). O tampão A foi suplementado com o NaHCCh 100 mM para diversas enzimas do tipo OXA (OXA-1, OXA-11, OXA-15 e OXA-163). As enzimas foram clonadas em vetor de expressão de E. coli, expressas e purificadas internamente utilizando procedimentos clássicos. A uma placa de poliestireno transparente (Corning, 3628) foram adicionados em cada cavidade 5μΙ_ de diluições de DMSO ou

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73/134 inibidor em DMSO e 80 μΙ_ de enzima em tampão A. As placas foram imediatamente lidas a 485 nm em um espectrofotômetro de microplacas (BioTek, Powerwave HT) para possibilitar a subtração do fundo. Após 30 minutos de préincubação à temperatura ambiente, foram finalmente adicionados 15 μΙ de NCF (final de 100 μΜ) em cada cavidade. As concentrações finais de enzima foram de 0,1 nM (TEM-1), 0,075 nM (SHV-1), 1,5 nM (SHV-12), 0,4 nM CTX-M-15), 1 nM (KPC-2), 5 nM (PCi S. aureus), 0,2 nM (P99 AmpC), 0,2 nM CMY-37), 0,8 nM (DHA-1), 0,4 nM (AmpC P. aeruginosa), 0,2 nM (OXA-1), 1,2 nM (OXA-11), 0,4 nM (OXA-15), 0,2 nM (OXA-23), 0,4 nM (OXA-40), 0,3 nM (OXA-48), 75 nM (OXA-51), 0,5 nM (OXA-58) e 0,15 nM (OXA-163). Após 20 min de incubação à temperatura ambiente, as placas foram novamente lidas a 485 nm. A atividade enzimática foi obtida subtraindo o fundo do sinal final e foi convertido em inibição enzimática utilizando cavidades não inibidas. As curvas ICsO foram ajustadas a um modelo clássico de equilíbrio de Langmuir com declive de Hill utilizando o XLFIT (IDBS).

Tabelai

- IC50 dos compostos AF1 e AF2 contra as beta-lactamases bacterianas

	ICsO (μΜ)
beta-lactamase	AFi	AF₂
TEM-1	0,00022	0,00096
SHV-1	0,00012	0,0014
SHV-12	0,0011	0,0011
CTX-M-15	0,00021	0,00016
KPC-2	0,040	0,012
SAU PCi	0,071	0,0031
P99 ampC	0,55	0,054
CMY-37	0,74	0,070
DHA-1	0,60	0,081
PAE ampC	0,66	0,14
OXA-1	1,1	0,011
OXA-11	1,0	0,013
OXA-15	0,071	0,0040
OXA-23	1,7	0,011

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	IC₅0 (μΜ)
beta-lactamase	AFi	AF₂
OXA-40	2,1	0,012
OXA-48	0,075	0,00070
OXA-51	1,7	0,051
OXA-58	0,40	0,0021
OXA-163	0,11	0,00032

[0233] Método 2: MIC de compostos isolados e combinados com os antibacterianos contra os isolados bacterianos.

[0234]Os compostos da presente invenção foram avaliados contra as cepas bacterianas genotipadas (Tabela 3,4) isoladamente ou em combinação com um antibacteriano (Tabela 2). Nas análises, os MICs de ditos compostos ou combinação de antibióticos com concentrações fixas de ditos compostos (4 ou 8 / mL) foram determinados através do método de microdiluição em caldo de acordo com o Clinical Laboratory Standards Institute CLSI-M7-A7). De maneira resumida, os compostos isoladamente, de acordo com a presente invenção, foram preparados em DMSO e manchados (2 ul cada) em placas de poliestireno estéreis Corning, 3788). As combinações de compostos e diluições de antibióticos foram preparadas em DMSO e manchadas (1 pL cada) em placas de poliestireno estéreis Corning, 3788). As suspensões bacterianas em fase log foram ajustadas para uma densidade final de 5,105 UFC / mL em caldo MuellerHinton ajustado para cátion (ca-MHB; Becton-Dickinson e Company) e adicionadas a cada cavidade (98). As microplacas foram incubadas durante 16 a 20 h a 35 em ar ambiente. A MIC dos compostos foi definida como a concentração mais baixa de ditos compostos que impediu o crescimento bacteriano conforme lido por inspeção visual. A MIC de ATB em cada concentração de composto foi definida como a menor concentração de ATB que impediu o crescimento bacteriano conforme lido por inspeção visual.

[0235]Os resultados são apresentados nas Tabelas 4, 5 e 6. Eles apresentam a vantagem de combinar os antibióticos incluindo a Cefixima e

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Cefpodoxime com as formas ativas AF1 ou AF2 das pró-drogas descritas no presente para combater os isolados resistentes.

Tabela 2

- Antibacterianos ou inibidores de beta-lactamases utilizados em estudos de MIC e combinação

Abreviações	Antibacterianos
ATB	Antibiótico
AMX	Amoxicilina
CAZ	Ceftazidima
CDR	Cefdinir
FIX	Cefixima
FUR	Cefuroxima
POD	Cefpodoxima
CLA	Ácido clavulânico

Tabela 3

- Espécies bacterianas utilizadas na determinação de CIM

Abreviações	Cepas
ECO	Escherichia coli
KPN	Klebsiella pneumoniae
ECL	Enterobacter cloacae
EAE	Enterobacter aerogenes
CFR	Citrobacter freundii
CKR	Citrobacter koseri
CMU	Citrobacter murliniae
MMO	Morganella morganii
PMI	Proteus mirabilis
PRE	Providencia rettgeri
PST	Providencia stuartii
KOX	Klebsiella oxytoca
SMA	Serratia marcescens
STY	Salmonella typhimurium

Tabela 4

- Lista dos isolados bacterianos, seu genótipo de resistência e a

MIC dos antibióticos ou combinações de referência.

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		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 pg/mL +
ID das Cepas	Genótipo de resistência	CA Z	Fl X	AM X	FU R	PO D	CD R	AM X	Fl X
ECO UFR86	ompC-, ompF-	2	2	16	64	4	2	8	2
ECO 260304	CTX-M-15	16	32	256	256	256	256	4	0,5
ECO 260096	CTX-M-132	12 8	12 8	256	256	256	256	4	1
KPN 270077	TEM-1, SHV-1, CTX-M-15	12 8	12 8	256	256	256	256	32	0,5
ECL 260508	TEM-1, CTX-M-15	64	12 8	256	256	256	256	128	32
ECO 190549	CTX-M-1	4	16	256	256	256	256	8	0,5
ECO 190314	CTX-M-1	8	16	256	256	256	256	8	2
o 8 8 LU CO Ί^-	TEM-1, CTX-M-15	64	12 8	256	256	256	256	16	2
ECO 200159	TEM-1, CTX-M-14	2	8	256	256	256	256	8	0,2 5

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		MIC (qg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 qg/mL +
ECO 200259	CTX-M-14	2	8	256	256	256	256	8	0,2 5
ECO 200344	CTX-M-1	8	32	256	256	256	256	16	0,5
KPN 700603	SHV-18, OXA-2	64	16	256	32	16	4	8	0,5
ECL UFR60	TEM-1, CTX-M-15, KPC-2	12 8	12 8	256	256	256	256	128	12 8
_ O O Jõ o cr LU LL =)	TEM-1, KPC-2	12 8	32	256	256	256	256	128	32
CM CD cr d O o LU	TEM-1, CTX-M-9, KPC-2	8	12 8	256	256	256	256	128	32
KPN UFR⁶⁵	TEM-1, SHV-11, KPC-2	12 8	12 8	256	256	256	256	128	12 8
KPN UFR⁶⁶	TEM-1, SHV-11, CTX-M-15, KPC-2	12 8	51 2	256	256	256	256	128	64

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		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 pg/mL +
KPN 260251	TEM-1, SHV-11, SHV-12, CTX-M-15, KPC-2	12 8	12 8	256	256	256	256	128	32
KPN BAA-1898	TEM-1, SHV-11, SHV-12, KPC-2	25 6	12 8	102 4	512	512	256	512	64
KPN 160143	TEM-1, SHV-1, CTX-M-15, KPC-2, OXA-1	64	12 8	256	256	256	256	128	2
KPN UFR⁶⁷	TEM-1, SHV-11, KPC-3	12 8	12 8	256	256	256	256	128	12 8
00 CD cr d ~z. CL kr	TEM-1, SHV-11, CTX-M-15, KPC-3	51 2	12 8	102 4	256	256	256	128	64
KPN 140513	TEM-1, SHV-11,	25 6	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8

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		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 pg/mL +
	CTX-M-15, KPC-3
KPN 260252	TEM-1, SHV-11, KPC-3	12 8	12 8	256	256	256	256	128	12 8
ECL 260253	TEM-1, KPC-3	12 8	12 8	256	256	256	256	128	64
ECL P99	AmpC	12 8	12 8	102 4	512	512	256	512	> 12 8
ECL 190310	AmpC	25 6	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
ECL 200138	AmpC	25 6	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
ECL 260323	AmpC	25 6	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
ECL 260033	AmpC	51 2	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8

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		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 pg/mL +
ECL NEM146383	AmpC	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
EAE 200261	TEM-x, AmpC	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
EAE 49469	AmpC	12 8	12 8	102 4	128	128	128	128	> 12 8
CFR UFR83	TEM-3, AmpC	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
ECL UFR84	TEM-1, AmpC, OXA-1	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
ECL UFR85	TEM-1, CTX-M-15, AmpC	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
KPN UFR76	TEM-155, SHV-11, ACT-1, OXA-2	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8

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		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
ECL UFR70	TEM-1, CTX-M-15, CMY-2, OXA-1, Porin loss	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
KPN UFR77	CMY-2	32	12 8	256	64	64	64	128	12 8
PMI UFR82	CMY-2	4	8	256	16	64	16	128	4
tr =) o o LU	SHV-1, DHA-1	64	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
KPN UFR79	DHA-1, OXA-1	16	12 8	256	256	32	256	128	> 12 8
KPN UFR80	SHV-11, DHA-1, OXA-1	0,5	0,2 5	256	32	2	1	128	0,5
KPN UFR78	TEM-1, SHV-1, CTX-M-15, CMY-2, OXA-1, OXA-48	25 6	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8

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		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
KPN UFR81	TEM-1, SHV-1, DHA-1, OXA-48	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
ECL UFR14	TEM-1, SHV-12, CTX-M-15, DHA-1, OXA-1, OXA-48	25 6	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
ECO UFR17	TEM-1, CTX-M-15, CMY-2, OXA-1, OXA-181	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
ECO UFR19	CTX-M-15, CMY-2, OXA-1, OXA-204	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
KPN 110376	TEM-1, SHV-1, CTX-M-15, OXA-1, OXA-48	12 8	12 8	256	256	256	256	128	12 8

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 332/390

83/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
CFR UFR10	OXA-48	12 8	12 8	256	256	256	256	128	32
CFR UFR11	TEM-1, OXA-1, OXA-48	8	32	256	256	256	256	128	32
ECL UFR12	CTX-M-9, OXA-48	2	16	256	256	128	256	128	8
ECL UFR13	TEM-1, SHV-12, CTX-M-9, OXA-48	25 6	12 8	256	256	256	256	128	12 8
ECO UFR15	TEM-1, OXA-48	0,5	1	256	16	2	256	128	1
ECO UFR16	TEM-1, CTX-M-15, OXA-1, OXA-48	64	12 8	256	256	256	256	128	4
ECO UFR18	CTX-M-15, OXA-204	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
ECO 131119	TEM-1, OXA-48	0,5	0,2 5	102 4	8	1	256	512	0,2 5

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 333/390

84/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
ECO UFR20	SHV-1, CTX-M-15, OXA-1, OXA-232	12 8	51 2	256	256	256	256	128	> 12 8
KOX UFR21	TEM-1, CTX-M-15, OXA-48	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
KPN UFR22JD	TEM-1, SHV-1, OXA-48	2	0,2 5	256	32	1	256	128	0,2 5
KPN UFR23	TEM-1, SHV-1, OXA-48	0,5	0,2 5	256	8	0,5	256	128	0,2 5
KPN UFR24	TEM-1, SHV-2, SHV-11, OXA-1, OXA-48, OXA-47	12 8	12 8	256	128	256	256	128	64
KPN UFR25	TEM-1, SHV-11, CTX-M-15, OXA-162	12 8	12 8	256	256	256	256	128	64

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 334/390

85/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
KPN UFR27	TEM-1, SHV-28, CTX-M-15, OXA-204	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8
KPN UFR28	TEM-1, SHV-1, CTX-M-15, OXA-1, OXA-232	64	25 6	256	256	256	256	128	64
SMA UFR30	OXA-405	8	1	256	256	32	256	128	1
CKO ROU	TEM-1, SHV-12, CTX-M-15, OXA-1, OXA-48	1	1	256	64	4	256	128	2
KPN LIB	SHV-11, OXA-48	0,2 5	0,2 5	256	16	1	256	512	0,2 5
ECL2185D	OXA-163	12 8	12 8	256	256	256	256	128	> 12 8

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 335/390

86/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
KPN ARA	TEM-1, SHV-11, CTX-M-15, OXA-1, OXA-48	12 8	12 8	256	256	256	256	128	12 8
KPN 6299	TEM-1, SHV-11, OXA-163	25 6	8	102 4	512	64	256	512	8
KPN 131119	TEM-1, SHV-11, CTX-M-15, OXA-1, OXA-48	12 8	12 8	256	256	256	256	512	> 12 8
ECO RGN238	OXA-1	0,5	0,2 5	102 4	16	2	0,5	128	0,2 5
STY S3371	OXA-1	0,5	0,2 5	256	32	4	0,5	128	0,2 5
ECO 5302	TEM-1, OXA-1	0,5	0,5	256	32	4	1	128	0,5
ECO 4133	TEM-30, OXA-1	0,5	0,5	256	16	2	0,5	128	0,5

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 336/390

87/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
ECO 190457	CTX-M-15, OXA-1	16	12 8	256	256	256	256	128	0,5
ECO 260508	TEM-1, CTX-M-15, OXA-1	12 8	12 8	256	256	256	256	64	0,5
KPN 190128	TEM-1, SHV-32, CTX-M-15, OXA-1	12 8	12 8	256	256	256	256	128	0,5
KPN 190270	TEM-1, SHV-76, CTX-M-15, OXA-1	12 8	12 8	256	256	256	256	128	1
KPN 200047	TEM-1, SHV-32, CTX-M-15, OXA-1	12 8	12 8	256	256	256	256	32	0,2 5
KPN 190551	TEM-1, SHV-1, CTX-M-15, OXA-1	64	12 8	256	256	256	256	128	0,2 5
KPN 190425	TEM-1, SHV-1,	12 8	12 8	256	256	256	256	128	0,2 5

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 337/390

88/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
	CTX-M-15, OXA-1
KPN 200327	TEM-1, SHV-1, CTX-M-15, OXA-1	32	64	256	256	256	256	32	0,2 5
ECO 190317	TEM-1, SHV-12, CTX-M-15, OXA-1	12 8	12 8	102 4	512	512	256	64	0,5
ECL 190408	TEM-1, CTX-M-15, OXA-1	12 8	51 2	256	256	256	256	128	12 8
ECL 200322	TEM-1, CTX-M-15, OXA-1	12 8	12 8	256	256	256	256	128	64
MMO 200321	TEM-1, CTX-M-15, OXA-1	16	12 8	256	256	256	256	128	32
KPN 260376	SHV-1, SHV-49, OXA-1	12 8	12 8	256	256	256	256	128	0,2 5
PST UFR94	CTX-M-14	1	0,5	128	256	32	64	128	2

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 338/390

89/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
PST UFR95	TEM-24	64	4	128	128	16	32	128	8
PMIUFR120	TEM-1, SHV-11, CTX-M-14	0,2 5	0,5	128	256	256	64	8	0,2 5
PMI UFR121	TEM-1, TEM-52	16	12 8	128	256	256	256	4	0,2 5
PMIUFR122	TEM-1, CTX-M-15	1	1	128	256	64	16	8	0,2 5
PMIUFR123	CTX-M-1	2	12 8	128	256	256	256	16	0,2 5
PMIUFR124	CTX-M-2	2	12 8	128	256	256	256	128	0,2 5
PMI UFR125	CTX-M-71	2	0,5	128	256	256	256	4	0,2 5
PMI UFR126	TEM-2, PER-1	12 8	10 24	128	256	256	256	16	0,2 5

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 339/390

90/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
PMIUFR127	VEB-1	12 8	12 8	128	256	128	256	32	0,2 5
PMIUFR129	TEM-1, VEB-6	12 8	12 8	128	256	256	256	2	0,2 5
SMA UFR134	TEM-1, BES-1	8	12 8	128	256	256	256	128	32
EAE UFR201	TEM-1, SHV-12, CTX-M-15	12 8	12 8	128	256	256	256	16	0,2 5
EAE UFR202	TEM-24	25 6	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
ECO UFR207	CTX-M-15	64	12 8	128	256	256	256	32	1
ECO UFR208	SHV-12	12 8	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
ECO UFR209	TEM-1, CTX-M-15	12 8	10 24	128	256	256	256	32	1

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 340/390

91/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
ECO UFR210	SHV-12	32	32	128	256	256	256	8	0,5
ECO UFR211	TEM-24	12 8	12 8	128	64	32	32	8	2
EAE UFR213	TEM-24	25 6	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
KPN UFR215	SHV-27, CTX-M-15	12 8	12 8	128	256	256	256	128	1
KPN UFR216	SHV-28, CTX-M-15	12 8	12 8	128	256	256	256	128	0,2 5
KPN UFR217	TEM-1, SHV-1, CTX-M-15	12 8	12 8	128	256	256	256	128	0,2 5
ECO UFR218	TEM-1, SHV-1, CTX-M-15	64	12 8	128	256	256	256	32	1
KPN UFR219	SHV-12, CTX-M-15	25 6	12 8	128	256	256	256	128	0,5

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 341/390

92/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 pg/mL +
KPN UFR227O	TEM-x, SHV-x, CTX-M-x	12 8	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
MMO UFR144	TEM-1, CTX-M-15	8	12 8	128	256	256	128	128	32
KOX UFR173	OXY²-2	8	16	128	256	256	256	128	4
PST UFR235	VEB-1	12 8	51 2	128	256	128	256	128	8
PMI UFR237	VEB-6	12 8	12 8	128	256	256	256	4	0,2 5
MMO UFR240	CTX-M-9	0,5	1	128	256	256	64	128	8
MMO UFR241	TEM-1, CTX-M-15	8	12 8	128	256	256	128	128	32
MMO UFR242	TEM-52	32	10 24	128	256	256	256	128	64
CFR UFR248	CTX-M-15	12 8	12 8	128	256	256	256	128	4

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 342/390

93/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
CFR UFR249	TEM-1, CTX-M-15	64	12 8	128	256	256	256	128	2
CFR UFR250	TEM-1, SHV-28, CTX-M-15	12 8	12 8	128	256	256	256	128	2
ECO UFR174	TEM-1, KPC-2, OXA-1	8	8	128	256	256	256	128	2
ECO UFR175	TEM-1, KPC-2, OXA-9	32	64	128	256	256	256	128	16
ECO UFR176	KPC-3, OXA-9*	25 6	64	128	256	256	256	128	32
SMA UFR135	TEM-1, KPC-2	32	64	128	256	256	256	128	32
SMA UFR136	TEM-1, SHV-12, KPC-2	25 6	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
CFR UFR146	TEM-1, KPC-2	32	64	128	256	256	256	128	64
EAE UFR199	TEM-1 b, SHV-12,	25 6	10 24	128	256	256	256	128	16

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 343/390

94/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
	KPC-2, OXA-9
ECL UFR200	TEM-1, SHV-12, KPC-2	25 6	12 8	128	256	256	256	128	16
SMA UFR137	SME-1	0,5	0,5	128	256	1	4	128	1
SMA UFR138	SME-1	0,2 5	0,5	128	256	2	8	128	0,5
SMA UFR139	SME-2	0,2 5	1	128	256	8	64	128	2
PMI UFR130	CMY-2	4	8	128	8	128	16	128	8
ECO UFR212	CMY-2	12 8	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
KPN UFR220	TEM-1, SHV-12, DHA-1	12 8	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
KPN UFR221	TEM-1, SHV-11,	16	64	128	256	256	128	128	12 8

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 344/390

95/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 pg/mL +
	CTX-M-14, DHA-1
KPN UFR222	DHA-2	25 6	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
SMA UFR239	ESAC	32	2	128	256	16	128	64	2
MMO UFR243	DHA-1	1	8	128	128	64	64	128	32
MMO UFR244	DHA-1	0,5	4	128	64	16	32	128	8
MMO UFR245	DHA-1	8	32	128	128	64	64	128	64
MMO UFR246	DHA-1	4	32	128	128	64	64	128	64
MMO UFR247	DHA-1	0,5	16	128	256	64	128	128	32
PRE UFR99	OXA-1, OXA-181	25 6	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
KOX UFR223	SHV-11, OXA-48	0,5	0,1 25	128	8	0,5	256	128	0,2 5

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 345/390

96/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 pg/mL +
κοχ UFR224	CTX-M-15, OXA-48	64	12 8	128	256	256	256	128	8
SMA UFR141	OXA-48	1	2	128	256	8	256	128	0,5
SMA UFR142	OXA-48	0,5	2	128	256	8	256	128	2
SMA UFR143	CTX-M-15, OXA-1, OXA-48	64	51 2	128	256	256	256	128	64
CKO UFR149	OXA-48	12 8	0,5	128	256	256	256	128	1
CKO UFR150	TEM-1, OXA-48	4	2	128	64	16	256	128	2
ECO UFR184	CTX-M-15, CMY-4, OXA-1, OXA-204	12 8	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
ECO UFR185	OXA-48	25 6	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 346/390

97/134

		MIC (pg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 gg/mL +
ECO UFR186	TEM-1, CTX-M-14, OXA-48	8	32	128	256	256	256	128	8
ECO UFR187	CTX-M-15, OXA-48	8	32	128	256	256	256	128	2
ECO UFR189	TEM-1, CTX-M-15, OXA-48	12 8	12 8	128	256	256	256	128	4
ECO UFR190	CTX-M-24, OXA-48	2	64	128	256	256	256	128	8
ECO UFR191	TEM-1, CTX-M-24, OXA-48	4	12 8	128	256	256	256	128	4
ECL UFR194	OXA-48	1	4	128	32	16	256	128	8
ECL UFR195	TEM-1, CTX-M-15, OXA-1, OXA-48	12 8	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
ECL UFR196	TEM-1, CTX-M-15, OXA-1, OXA-48	25 6	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 347/390

98/134

		MIC (qg/mL)
		ATB isolado	CLAa4 qg/mL +
ECL UFR197	TEM-1, CTX-M-15, OXA-1, OXA-48	12 8	12 8	128	256	256	256	128	12 8
ECL UFR198	TEM-1, SHV-12, CTX-M-15, DHA-1, OXA-1, OXA-48	25 6	12 8	128	256	256	256	128	> 12 8
PRE UFR236	TEM-1, OXA-48	32	32	128	64	64	256	128	32
CFR UFR253	TEM-1, SHV-12, OXA-48	12 8	12 8	128	32	32	256	128	> 12 8
CFR UFR254	VEB-1b, OXA-48, qnrA	12 8	32	128	32	32	256	128	16
SMA UFR238	OXA-48	0,5	1	128	256	8	256	128	2

Tabela 5

- MIC de AF1 isoladamente ou combinado com os antibacterianos.

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 348/390

99/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (pg/ mL)	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L
ID das Cepa s	EA1	CAZ	CAZ	FIX	FIX	AMX	FUR	POD	CDR
ECO UFR8 6	16	1	0,25	0,5	0,25	2	32	1	1
ECO 2603 04	32	0,25	0,25	0,25	0,25	<= 1	4	0,25	0,25
ECO 2600 96	16	0,25	0,25	0,25	0,25	<= 1	4	0,25	0,25
KPN 2700 77	>32	0,25	0,25	0,5	0,25	4	16	0,5	1
ECL 2605 08	>32	1	0,25	0,25	0,25	128	32	1	2
ECO 1905 49	16	0,25	0,25	0,25	0,25	<= 1	2	0,25	0,25

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 349/390

100/134

		MIC ATB (gg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
ECO 1903 14	>32	0,5	0,25	0,25	0,25	<= 1	4	0,25	0,25
ECO 1800 70	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	<= 1	4	0,25	0,25
ECO 2001 59	32	0,25	0,25	0,25	0,25	<= 1	2	0,25	0,25
ECO 2002 59	16	0,25	0,25	0,25	0,25	<= 1	2	0,25	0,25
ECO 2003 44	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	<= 1	4	0,25	0,25
KPN 7006 03	>32	1	0,25	0,25	0,25	4	16	0,5	0,5
ECL UFR6 0	32	16	4	4	4	512	64	1	8

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 350/390

101/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
ECO UFR6 10	32	2	0,5	0,25	0,125	64	8	0,5	0,25
ECO UFR6 2	16	0,25	0,25	0,25	0,25	16	8	0,5	0,5
KPN UFR6 5	>32	2	0,25	0,25	0,25	256	16	0,5	2
KPN UFR6 6	>32	8	0,25	1	0,25	256	32	2	2
KPN 2602 51	>32	1	0,25	0,25	0,5	128	8	0,25	0,5
KPN BAA- 1898	>32	1	0,25	0,25	0,25	256	4	0,5	0,5
KPN 1601 43	>32	1	0,25	0,25	0,25	128	4	0,25	0,25

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 351/390

102/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
KPN UFR6 7	>32	16	4	2	0,5	256	32	4	16
KPN UFR6 8	>32	4	1	1	0,25	256	8	1	2
KPN 1405 13	>32	16	2	4	0,5	>512	32	4	16
KPN 2602 52	>32	32	8	8	4	256	32	4	16
ECL 2602 53	>32	16	4	8	8	256	128	8	32
ECL P99	16	2	0,25	16	1	128	64	16	16
ECL 1903 10	32	4	2	64	32	128	> 128	64	64

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 352/390

103/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
ECL 2001 38	>32	8	2	64	16	256	128	32	64
ECL 2603 23	>32	128	32	64	32	256	> 128	32	64
ECL 2600 33	16	8	<0,25	> 128	2	256	> 128	128	> 128
ECL NEM 1463 83	32	2	2	32	16	128	128	16	32
EAE 2002 61	>32	2	0,5	32	4	128	64	4	8
EAE 4946 9	>32	8	2	32	16	128	64	8	16
CFR UFR⁸ 3	>32	32	8	> 128	128	>512	> 128	> 128	> 128

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 353/390

104/134

		MIC ATB (gg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
ECL UFR8 4	>32	4	1	64	16	512	> 128	32	64
ECL UFR8 5	>32	1	0,25	8	0,5	256	128	4	8
KPN UFR7 6	>32	16	16	> 128	> 128	>512	> 128	> 128	> 128
ECL UFR7 0	32	2	0,5	16	2	64	32	8	4
KPN UFR7 7	>32	4	2	16	8	64	32	4	8
PMI UFR8 2	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	8	4	1	0,5
ECO UFR7 4	>32	1	0,25	32	1	128	16	2	1

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 354/390

105/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L
KPN UFR7 9	>32	2	1	16	4	>512	32	4	16
KPN UFR8 0	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	128	16	0,5	1
KPN UFR7 8	>32	> 128	32	128	32	>512	> 128	128	128
KPN UFR8 1	>32	2	0,5	16	2	>512	32	4	16
ECL UFR1 4	>32	2	1	16	8	>512	> 128	8	32
ECO UFR1 7	16	16	2	> 128	16	>512	> 128	> 128	128
ECO UFR1 9	16	1	0,25	16	<0,25	64	16	4	2

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 355/390

106/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
KPN 1103 76	>32	0,25	0,25	0,125	0,125	128	4	0,25	0,5
CFR UFR1 0	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	128	8	0,25	0,25
CFR UFR1 1	16	8	0,5	8	4	>512	> 128	16	128
ECL UFR1 2	32	0,5	0,25	0,25	0,25	128	16	1	4
ECL UFR1 3	32	0,5	0,5	8	8	256	128	8	16
ECO UFR1 5	32	0,25	0,25	0,25	0,25	16	2	0,25	0,25
ECO UFR1 6	16	0,25	0,25	0,25	0,25	128	16	1	1

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 356/390

107/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
ECO UFR1 8	16	1	0,25	16	0,5	64	32	8	4
ECO 1311 19	32	0,25	0,25	0,25	0,25	16	4	0,25	0,25
ECO UFR2 0	64	1	1	1	1	512	64	4	16
KOX UFR2 1	>32	2	0,25	2	1	256	16	1	8
KPN UFR2 2_O	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	64	8	0,25	1
KPN UFR2 3	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	32	4	0,25	0,5
KPN UFR2 4	>32	1	0,5	0,5	0,5	64	16	1	4

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 357/390

108/134

		MIC ATB (gg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
KPN UFR2 5	>32	0,5	0,25	0,25	0,25	512	4	0,25	0,25
KPN UFR2 7	>32	4	0,5	16	2	128	32	4	8
KPN UFR2 8	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	128	4	0,25	1
SMA UFR3 0	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	256	64	0,5	1
CKO ROU	16	0,25	0,25	0,25	0,25	32	32	2	2
KPN LIB	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	16	8	0,25	1
ECL 2185 D	16	64	4	> 128	64	>512	> 128	> 128	> 128
KPN ARA	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	256	16	0,25	0,5

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 358/390

109/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (pg/ mL)	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L
KPN 6299	>32	0,5	0,25	0,25	0,25	256	16	0,25	0,25
KPN 1311 19	>32	0,5	0,25	0,25	0,25	256	8	0,25	1
ECO RGN 238	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	256	8	0,25	0,25
STY S337 1	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	128	4	0,25	0,25
ECO 5302	16	0,25	0,25	0,25	0,25	256	4	0,25	0,25
ECO 4133	16	0,25	0,25	0,25	0,25	128	4	0,25	0,25
ECO 1904 57	16	0,25	0,25	0,125	0,031	64	8	0,25	0,25
ECO 2605 08	16	0,25	0,25	0,25	0,25	64	2	0,25	0,25

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 359/390

110/134

		MIC ATB (gg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
KPN 1901 28	>32	0,5	0,25	0,5	0,25	128	16	0,5	1
KPN 1902 70	>32	0,5	0,25	0,5	0,25	16	16	0,5	1
KPN 2000 47	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	16	2	0,25	0,25
KPN 1905 51	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	64	4	0,25	0,25
KPN 1904 25	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	128	4	0,25	0,25
KPN 2003 27	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	32	2	0,25	0,25
ECO 1903 17	16	0,125	0,25	0,25	0,25	64	4	0,25	0,25

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 360/390

111/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
ECL 1904 08	128	0,25	<0,25	0,5	0,25	8	4	0,25	0,25
ECL 2003 22	16	0,5	0,5	0,5	0,25	128	32	1	4
MMO 2003 21	>32	0,25	0,5	4	4	256	128	2	4
KPN 2603 76	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	32	2	0,25	0,25
PST UFR9 4	>32	0,5	0,25	0,25	0,25	16	8	0,5	0,25
PST UFR9 5	>32	1	0,5	0,25	0,25	32	32	2	1
PMI UFR1 20	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	1	0,25	0,25

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 361/390

112/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (pg/ mL)	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L
PMI UFR1 21	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	2	0,25	0,25
PMI UFR1 22	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	1	0,25	0,25
PMI UFR1 23	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	1	0,25	0,25
PMI UFR1 24	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	1	0,25	0,25
PMI UFR1 25	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	1	0,25	0,25
PMI UFR1 26	>32	0,25	0,25	0,031	0,016	4	1	0,25	0,25
PMI UFR1 27	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	4	1	0,25	0,25

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 362/390

113/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
PMI UFR1 29	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	8	4	0,25	0,25
SMA UFR1 34	>32	0,5	0,25	1	1	128	64	2	4
EAE UFR2 01	>32	0,5	0,25	0,25	0,25	<= 1	2	0,25	0,25
EAE UFR2 02	>32	2	1	16	4	64	32	2	4
ECO UFR2 07	32	0,25	0,25	0,25	0,25	32	2	0,25	0,25
ECO UFR2 08	>32	4	2	64	32	256	> 128	64	128
ECO UFR2 09	16	0,25	0,25	0,125	0,063	4	4	0,25	0,25

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 363/390

114/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
ECO UFR2 10	16	0,25	0,25	0,25	0,25	<= 1	2	0,25	0,25
ECO UFR2 11	>32	0,5	0,25	0,25	0,25	<= 1	8	0,25	0,25
EAE UFR2 13	>32	0,5	0,5	1	0,5	32	8	1	4
KPN UFR2 15	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	64	16	0,5	0,5
KPN UFR2 16	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	32	4	0,25	0,25
KPN UFR2 17	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	64	2	0,25	0,25
ECO UFR2 18	16	0,25	<0,25	0,25	0,25	8	4	0,25	0,25

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 364/390

115/134

		MIC ATB (qg/mL) em combinação
	MIC (qg/ mL)	AF1 a 4 qg/m L	AF1 a 8 qg/m L	AF1 a 4 qg/m L	AF1 a 8 qg/m L	AF1 a 4 qg/m L	AF1 a 4 qg/m L	AF1 a 4 qg/m L	AF1 a 4 qg/m L
KPN UFR2 19	>32	0,5	0,25	0,25	0,25	128	8	0,25	0,25
KPN UFR2 270	>32	2	1	1	0,5	512	64	4	32
MMO UFR1 44	>32	0,25	0,25	2	2	128	32	2	4
KOX UFR1 73	>32	0,5	0,25	0,25	0,25	4	4	0,5	0,5
PST UFR2 35	16	1	0,25	0,125	0,063	32	8	2	2
PMI UFR2 37	>32	0,5	0,25	0,25	0,25	16	4	0,25	0,25
MMO UFR2 40	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	32	16	0,25	0,5

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 365/390

116/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (pg/ mL)	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L
MMO UFR2 41	>32	0,25	0,25	2	0,25	128	32	2	4
MMO UFR2 42	128	2	0,25	4	2	128	32	4	4
CFR UFR2 48	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	64	8	1	0,5
CFR UFR2 49	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	256	8	0,25	0,25
CFR UFR2 50	>32	0,5	0,25	0,25	0,25	32	8	0,5	0,25
ECO UFR¹ ⁷4	8	0,25	<0,25	0,25	<0,25	32	2	0,25	0,25
ECO UFR1 75	32	2	0,25	0,25	0,25	32	8	1	0,5

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 366/390

117/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L
ECO UFR1 76	32	2	0,25	0,25	0,25	32	4	0,25	0,25
SMA UFR1 35	>32	2	1	2	2	256	> 128	4	16
SMA UFR1 36	>32	2	1	4	2	256	> 128	8	16
CFR UFR1 46	64	4	2	1	1	256	16	1	0,5
EAE UFR1 99	128	1	0,5	1	0,25	64	8	1	1
ECL UFR2 00	>32	0,5	0,25	1	0,5	256	16	1	2
SMA UFR1 37	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	64	32	0,5	1

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 367/390

118/134

		MIC ATB (gg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
SMA UFR1 38	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	64	64	0,5	4
SMA UFR1 39	>32	0,25	0,25	0,5	0,25	64	64	2	4
PMI UFR1 30	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	8	4	0,5	0,25
ECO UFR2 12	16	4	0,25	64	0,25	64	128	32	32
KPN UFR2 20	>32	2	1	4	2	512	16	4	2
KPN UFR2 21	>32	0,5	0,25	2	0,25	256	4	1	2
KPN UFR2 22	>32	8	4	32	16	>512	64	8	16

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 368/390

119/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
SMA UFR2 39	>32	8	4	0,5	0,5	64	> 128	2	16
MMO UFR2 43	>32	0,25	0,25	0,5	0,25	64	32	4	4
MMO UFR2 44	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	64	16	0,25	2
MMO UFR2 45	>32	0,25	0,25	2	0,25	64	32	2	4
MMO UFR2 46	>32	0,25	0,25	2	1	64	64	4	2
MMO UFR2 47	64	0,125	0,125	0,5	0,25	32	16	1	1
PRE UFR9 9	32	> 128	> 128	> 128	> 128	>512	> 128	> 128	> 128

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 369/390

120/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (pg/ mL)	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 8 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L	AF1 a 4 pg/m L
κοχ UFR2 23	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	16	2	0,25	0,25
ΚΟΧ UFR2 24	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	64	2	0,25	0,25
SMA UFR1 41	>32	0,5	0,25	0,5	0,5	128	128	2	4
SMA UFR1 42	>32	0,5	0,5	2	1	128	64	1	8
SMA UFR1 43	64	0,5	0,5	0,25	0,25	256	32	1	2
CKO UFR1 49	16	0,5	0,25	0,5	0,25	512	128	8	32
CKO UFR1 50	>32	4	4	2	1	64	32	8	4

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 370/390

121/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
ECO UFR1 84	8	1	0,25	8	0,25	32	64	4	16
ECO UFR1 85	16	2	<0,25	4	<0,25	256	> 128	32	128
ECO UFR1 86	>32	0,25	0,25	0,25	0,25	16	16	1	1
ECO UFR1 87	>32	1	0,25	0,25	0,25	16	8	0,5	0,5
ECO UFR1 89	16	0,25	0,25	0,25	0,25	4	2	0,25	0,25
ECO UFR1 90	16	0,25	0,25	0,25	0,25	8	8	0,25	0,5
ECO UFR1 91	32	0,25	0,25	0,25	0,25	8	8	0,25	1

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 371/390

122/134

		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
ECL UFR1 94	>32	0,5	0,25	1	2	256	32	1	2
ECL UFR1 95	>32	1	0,5	4	0,25	256	32	1	4
ECL UFR1 96	>32	2	0,5	16	4	512	64	2	16
ECL UFR1 97	16	1	0,5	16	1	256	64	8	8
ECL UFR1 98	>32	4	4	64	64	>512	128	8	32
PRE UFR2 36	>32	1	0,5	1	0,5	512	8	1	2
CFR UFR2 53	32	4	2	32	16	4	4	0,25	0,25

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 372/390

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		MIC ATB (pg/mL) em combinação
	MIC (gg/ mL)	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 8 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L	AF1 a 4 gg/m L
CFR UFR2 54	32	0,5	0,25	0,5	0,25	4	2	0,25	0,25
SMA UFR2 38	>32	0,5	0,25	1	0,5	128	64	2	4

Tabela 6

- MIC de AF2 isoladamente ou combinado com a Cefixima.

	MIC (pg/mL)
	FIX	AF2	FIX + AF2 a 4 qg/mL
ECO 190317	> 128	>32	<= 0,25
ECO 190457	128	16	<= 0,25
ECO UFR16	> 128	>32	<= 0,25
ECO UFR20	512	>32	0,5
ECO UFR61O	32	>32	0,5
ECO UFR209	1.024	32	<= 0,25
EAE UFR199	> 1.024	>32	2
PMI UFR126	1.024	>32	<= 0,25
PMI UFR127	> 128	>32	<= 0,25
SMA UFR143	512	>32	0,5
PST UFR235	512	>32	<= 0,25
CFR UFR250	> 128	>32	<= 0,25
KPN 110376	> 128	>32	<= 0,25
KPN 131119	> 128	>32	0,5
KPN 190270	> 128	>32	0,5
KPN UFR25	> 128	>32	<= 0,25
KPN UFR66	512	>32	2
KPN UFR68	> 128	>32	0,5

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 373/390

124/134

Método 3

Determinação da Biodisponibilidade Intraduodenal do Rato (Tabela 7,11) [0236]Os ratos Sprague-Dawley (SD) cateterizados intravenosamente (jugular) ou intraduodenais (250-270 g) foram obtidos de Janvier Labs (Le Genest-Saint-lsle, França). Todos os ratos foram alojados em uma sala com uma temperatura (de 20 ± 2^s C) e umidade (de 55% ± 10%) com ciclo claro / escuro de 12 horas, e foram aclimatados durante, pelo menos, 4 dias antes da experimentação. Água e comida estavam disponíveis ad libitum durante todo o estudo. Todos os camundongos foram tratados de acordo com as diretrizes institucionais e nacionais para o cuidado e utilização de animais de laboratório.

[0237]Os camundongos foram distribuídos em dois grupos com base na via de administração: administração intravenosa ou intraduodenal (n = 3 / grupo).

[0238]No estudo de administração intravenosa, foram administradas as drogas (10 mg/kg em tampão de fosfato a 10 mM, pH 7,4) sob anestesia com isoflurano através do cateter colocado na veia jugular.

[0239]No estudo de administração intraduodenal, as drogas (20mg/kg em tampão fosfato a 10 mM, pH 5,0, de 30 a 35% hidroxil-propilbeta-ciclodextrina, DMSO de 0 a 10%) foram administradas sob anestesia com isoflurano através do cateter colocado no duodeno.

[0240] Para todos os grupos, as amostras de sangue (100 μΙ) foram retiradas da veia à taxa de fluxo aos 5, 10, 20, 30, 45, 60, 120 e 240 min após a administração da droga utilizando o Microvette de Heparina-Lítio (Sarstedt, França) e imediatamente colocadas em gelo. O sangue coletado foi centrifugado a 2.000 xg e 4^s C durante 5 min para obter o plasma. As amostras de plasma foram armazenadas a -80^s C até a bioanálise.

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125/134

Método 4 Determinação da Biodisponibilidade Oral do Rato (Tabela 8) [0241]A biodisponibilidade oral de uma combinação de CEFIXIME / Exemplo 3 foi determinada em Camundongo Masculino Suíço (25 g) obtido de Janvier Labs (Le Genest-Saint-lsle, França). Os camundongos foram alojados em uma sala controlada com uma temperatura (de 20 ± 2^s C) e umidade (de 55% ± 10%) com ciclo de 12 horas claro / escuro, e foram aclimatados durante, pelo menos, 4 dias antes da experimentação. Água e comida estavam disponíveis ad libitum durante todo o estudo. O camundongo foi tratado de acordo com as diretrizes institucionais e nacionais para o cuidado e utilização de animais de laboratório.

[0242]O CEFIXIME (10mg/kg) e o Exemplo 3 (20mg/kg) foram formulados em tampão de citrato 100mM pH 5,5, beta-ciclodextrina a 40% (Roquette, França) diluído em antiácido comercial Fosfalugel (1 volume de tampão citrato / 2 volumes de antiácido) de Astellas Pharma (Levallois Perret, França). As drogas foram administradas através de gavagem oral utilizando a agulha de alimentação. As amostras de sangue (1,3 mL) foram retiradas por punção cardíaca terminal a 5, 10, 20, 40, 60, 120, 240 e 420 minutos após a administração da droga utilizando o Microvette de Heparina-Lítio (Sarstedt, França) e imediatamente colocadas em gelo. O sangue coletado foi centrifugado a 2.000 xg e 4^s C durante 5 min para obter o plasma. As amostras de plasma foram armazenadas a -80^s C até a bioanálise.

Método 5

Bioanálise de Amostras de Plasma e Análise de Dados [0243]As amostras de plasma (20 μΙ) foram descongeladas a 0^s C. As amostras foram precipitadas com 3 a 25 vezes de acetonitrila, agitadas e centrifugadas durante 20 min a 15.000 χ g, diluídas com um volume variável de água deionizada e pipetadas para placas de 96 cavidades para aguardar a

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Análise LC-MS / MS. Foram preparadas as amostras padrão adicionando o plasma branco a concentrações de 10 a 5 000 ng/mL e tratadas de outra maneira como as amostras. A separação cromatográfica foi realizada com as colunas (T3 ou C18 Cortex of Waters) e fases móveis de acordo com a polaridade das drogas. A detecção por espectrometria de massa envolveu a ionização por eletropulverização no modo negativo seguida de monitoração de múltiplas reações das drogas e transições padrão internas. As concentrações reais de droga foram deduzidas a partir da interpolação da curva padrão. Os parâmetros farmacocinéticos foram calculados utilizando o software XLfit (IDBS) e Excel (Microsoft), utilizando os métodos n-compartimentais convencionais. A biodisponibilidade intraduodenal foi calculada dividindo a AUC obtida da administração intraduodenal pela AUC obtida a partir da administração intravenosa.

Tabela 7

- Biodisponibilidade intraduodenal de rato de AF1 e Exemplos 1 a

Animal	Rato
Composto administrado	AFi	AFi	Exemplo 1	Exemplo 2	Exemplo 3
Via de administração	Intra venosa	Intra duodenal	Intra duodenal	Intra duodenal	Intra duodenal
Dose (mg/kg)	10	20	20	20	20
Composto titulado em plasma	AFi	AFi	AFi	AFi	AFi
AUC o-- (h*ng/mL)	4.129	722	6.766	8.443	6.124
Biodisponibilidade (%)		8.7	82	102	74

[0244] Conforme mostrado na Tabela 7, a administração intraduodenal aos ratos das pró-drogas de Exemplos 1,2 e 3 conduz à detecção eficaz no plasma da sua forma hidrolisada AF1, com as biodisponibilidades intraduodenais sempre superiores a 70% enquanto apenas 8,7% é observado quando a própria AF1 é administrado por via intraduodenal. Os Exemplos 1,2,

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3, por conseguinte, são efetivamente absorvidos no trato gastrointestinal dos ratos e, em seguida, efetivamente hidrolisados na forma ativa AF1.

Tabela 8

- Biodisponibilidade oral de Cefixima no rato e Exemplo 3

Animal	Rato
Composto administrado	FIX	FIX	AFi	Exemplo 3
Via de administração	Intravenoso	Oral	Intravenoso	Oral
Dose (mg/kg)	10	10	30	20
Composto titulado em plasma	FIX	FIX	AFi	AFi
AUC o-- (ITng/mL)	37.222	16.786	11.239	5.777
Biodisponibilidade (%)		45		77

[0245]Conforme mostrado na Tabela 8, a administração oral aos camundongos da pró-droga do Exemplo 3 conduz à detecção eficaz no plasma da sua forma hidrolisada AF1, com uma elevada biodisponibilidade oral de 77%, enquanto que a cefixima co-administrada apresenta 45% de biodisponibilidade. Este conjunto de dados ilustra a possibilidade de tratar as infecções bacterianas por uma combinação oral de Cefixima com o Exemplo 3.

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Tabela 9

- Cinética da hidrólise em tampões e plasmas, e biodisponibil idade dos Exemplos 7 a 11

Hidrólise a 1 mg/mL em pH diferente a temperatura ambiente (10% / 50% das vezes de degradação

Hidrólise a 4 mg/mL em pH diferente a 37^sC (LC-MS) (50% das vezes de degradação

Citrat 0 10 mM pH 5,0

Fosfa to 10 mM pH 6,0

Fosfat 0 10 mM pH 7,4

Citr ato 10 mM pH 5,0

Fosf ato 10 mM pH 6,0

Fosf ato 10 mM pH 7,4

Hidrólise em plasma a 37^sC (meia vida em min)

Biodisponibilida de (%)

ID do composto

T1 0

T5 0

T1 0

T5 0

T1 0

T5 0

T50

Camund ongo

Ra to

Cacho rro

Huma no

ID do rat 0

P O do rat 0

PO do camund ongo

AF1

6

AF1-Et

9 mi n

1 h

< 1 min

Exemplo 7

3, 5 h

27 h

2 h

20 h

37 mi n

3, 2 h

109 min

23 min

< 1

4,0

7,0

76

85

141

Exemplo 8

6, 7 h

43 h

2, 7 h

21 h

40 mi n

4, 5 h

120 min

39 min

< 1

8,0

11

67

Exemplo 9

3, 2 h

20 h

2, 3 h

17 h

21 mi n

2, 6 h

Exemplo 10

3, 5 h

32 h

1, 5 h

16 h

12 mi n

1 h

Exemplo 11

6, 2 h

41 h

2 h

16 h

15 mi n

1, 3 h

[0246]Conforme mostrado na Tabela 9, os Exemplos 7 a 11 e especialmente os Exemplos 7 e 8 são muito mais estáveis à hidrólise química em pH 5 a 7,4 do que AF1-Et, para o qual a estrutura é fornecida

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129/134 abaixo, sendo este composto mencionado na publicação WO 2009/133442. Além disso, os Exemplos 7 e 8 (ésteres) são rapidamente convertidos no ácido correspondente biologicamente ativo AF1 em roedor, cão e, mais importante ainda, em plasma humano. Fornecem excelente biodisponibilidade intraduodenal ou oral de AF1 em ratos e camundongos quando administrados em um veículo tampão simples (citrato a 100 mM, pH 5,0).

AF1-Et

Método 6

Determinação da Biodisponibilidade Intraduodenal e Oral do Rato (Tabela 9) [0247]O protocolo é idêntico ao método 3, exceto pelos seguintes pontos:

- O veículo foi o tampão Citrate 100mM pHs.O

- Todas as administrações foram realizadas a 20 mg/kg (com base no ácido AF1), incluindo a administração intravenosa de referência de AF1 utilizada para calcular as biodisponibilidades.

[0248] Para as administrações orais, foram utilizados ratos macho Sprague-Dawley (SD) (250-270 g) da Janvier Labs (Le Genest-Saint-lsle, Fran).

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Método 7 Determinação da Biodisponibilidade Oral dos Ratos (Tabela 9) [0249]O protocolo é idêntico ao método 4, exceto que o veículo era o tampão de citrato a 100 mM pH 5,0.

Método 8

ClNÉTICA DA HlDRÓLISE EM TAMPÕES OU AMOSTRAS DE PLASMA A 37^SC, 4 uG / ML (Tabela 9) [0250]0s compostos de teste foram preparados em DMSO a 0,8 mg/mL (relativamente ao ácido AF1). Para obter uma concentração de 4 pg/mL, um microlitro de compostos de teste ou AF1 foi dissolvido em 199 pL de tampão ou plasma em branco. Para os compostos de teste, as amostras de plasma e/ou amostras de tampão foram mantidas a 37 durante 2 h e foram recolhidos 20 pL de mistura a 0 minutos (antes de aquecer a 37), 5 minutos, 10 minutos, 20 minutos, 30 minutos, 45 minutos, 60 minutos e 120 minutos. Para a AF1, foram recolhidos 20 pL de amostras de plasma e/ou amostras de tampão aos 0 minutos. Todas as amostras de plasma foram precipitadas com 3 a 25 vezes de acetonitrila, agitadas e centrifugadas durante 20 minutos a 15.000 x g, diluídas com um volume variável de água deionizada. Todas as amostras de tampão foram diluídas com um volume variável de água deionizada / acetonitrila. A formação de AF1 a partir de compostos de teste foi quantificada utilizando o LC-MS / MS.

Método 9

ClNÉTICA DA HlDRÓLISE EM TAMPÕES À TEMPERATURA AMBIENTE POR NMR ¹⁹F, 1 mg/mL (Tabela 9) [0251 ]As amostras foram preparadas solubilizando o composto de éter (1 mg) em 900 pL de D2O e 100 pL de tampão adequado (citrato a 100 mM, pH 5, fosfato 100 mM, pH 6 e fosfato, 100 mM, pH 7,4). Após uma sonicação curta para fixar a solubilização, a curva de hidrólise dos ésteres

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131/134 foi gerada medindo e comparando as integrações do sinal ¹⁹F-NMR de ambas as espécies (composto éster desaparecendo e a forma ácida AF1 aparecendo). T10 e T50, tempos para respectivamente 10% e 50% de hidrólise de ésteres, foram determinados através da interpolação das curvas de hidrólise.

Tabela 10

- Cinética da hidrólise em tampões e plasmas, e biodisponibilidade dos

Exemplos 7 a 15

Citrat 0 10 mM pH 5,0

Fosfa to 10 mM pH 6,0

Fosfa to 10 mM pH 7,4

Citr ato 10 mM pH 5,0

Fosf ato 10 mM pH 6,0

Fosf ato 10 mM pH 7,4

Hidrólise em plasma a 37^sC (meia vida em min)

Biodisponibilid ade (%)

Propor ção

ID do comp osto

T1 0

T5 0

T1 0

T5 0

T1 0

T5 0

T50

Camund ongo

Ra to

Cach orro

Hum ano

ID do rat 0

P O do rat 0

PO do camund ongo

Álcool terciári 0

Exem pio 14

5 mi n

27 mi n

25 mi n

2 h

7 mi n

34 mi n

<5 min

< 5 min

<5 min

11

Álcool secund ário

Exem pio 15

7 mi n

34 mi n

< 1 min

5

Álcool secund ário

Exem pio 13

8 mi n

56 mi n

< 1 min

11

Álcool primári 0

AF1Et

9 mi n

1 h

< 1 min

13

Álcool secund ário

Exem pio 12

15 mi n

1, 3 h

< 1 min

20

Álcool terciári 0

Exem pio 9

3, 2 h

20 h

2, 3 h

17 h

21 mi n

2, 6 h

55

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132/134

Citrat 0 10 mM pH 5,0

Fosfa to 10 mM pH 6,0

Fosfa to 10 mM pH 7,4

Citr ato 10 mM pH 5,0

Fosf ato 10 mM pH 6,0

Fosf ato 10 mM pH 7,4

Hidrólise em plasma a 37^sC (meia vida em min)

Biodisponibilid ade (%)

Propor ção

ID do comp osto

Τ1 0

T5 0

Τ1 0

T5 0

Τ1 0

T5 0

T50

Camund ongo

Ra to

Cach orro

Hum ano

ID do rat 0

P O do rat 0

PO do camund ongo

Álcool terciári 0

Exem pio 7

3, 5 h

27 h

2 h

20 h

37 mi n

3, 2 h

109 min

23 min

< 1

4,0

7,0

44

50

84

Álcool terciári 0

Exem pio 10

3, 5 h

32 h

1, 5 h

16 h

12 mi n

1 h

55

Álcool terciári 0

Exem pio 11

6, 2 h

41 h

2 h

16 h

15 mi n

1, 3 h

48

Álcool terciári 0

Exem pio 8

6, 7 h

43 h

2, 7 h

21 h

40 mi n

4, 5 h

120 min

39 min

< 1

8,0

11

52

110

[0252]Conforme mostrado na Tabela 10, os Exemplos 7 a 11 e especialmente os Exemplos 7 e 8 são muito mais estáveis à hidrólise química em pH 5 a 7,4 do que AF1-Et e Exemplos 12 a 15. A biodisponibilidade destes compostos é baixa para os compostos menos estáveis, em geral, em torno de

10%, e elevada para os mais estáveis, cerca de 50% em ratos (cerca de cinco vezes maior) e mais de 80% em camundongos.

Método 10

Determinação da Biodisponibilidade Intraduodenal e Oral do Rato (Tabela

10) [0253] O protocolo é idêntico ao método 6, exceto que os ratos estavam em jejum.

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 382/390

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Método 11

Determinação da Biodisponibilidade Oral do Rato (Tabela 10) [0254] O protocolo é idêntico ao método 7, exceto que os ratos estavam em jejum.

Tabela 11

- Biodisponibilidade intraduodenal de rato do Exemplo 1 como uma solução ou como uma suspensão, de acordo com o Método 3.

Animal	Rato
Composto administrado	AF1	Exemplo 1	Exemplo 1
Via de administração	Intravenoso	Intraduodenal	Intraduodenal
Veículo	Fosfato pH 7,4	CD40% pH 5,0	Citrate pH 5,0
Dose (mg/kg)	20	20	15
Aspecto físico	Solução	Solução	Solução
Composto titulado em plasma	AF1	AF1	AF1
AUC o- (h*ng/mL)	12.484	6.766	1.520
Biodisponibilidade (%)		54	16

[0255]Conforme mostrado na Tabela 11, uma biodisponibilidade significativa é obtida com o Exemplo 1 se completamente dissolvido em 40% de hidroxil-propil-beta-ciclodextrina. O Exemplo 1 é fracamente solúvel em tampões aquosos e, por conseguinte, se comporta como uma suspensão em tampão citrato, resultando em uma biodisponibilidade baixa.

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 383/390

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Método 12 SOLUBILIDADE AQUOSA [0256]A solubilidade aquosa dos compostos foi determinada por inspeção visual à temperatura ambiente através da adição de quantidade adequada de água até à completa solubilização de 5 mg de composto.

Tabela 12

- Solubilidade aquosa à temperatura ambiente para AF1-Et,

Exemplos 1,2, 3 e 7 a 15

Exemplo	Solubilidade Aquosa à temperatura ambiente em H2O (mg/mL)
AF1-Et	> 1
1	Solubilidade inferior
2	Solubilidade inferior
3	Solubilidade inferior
7	6
8	1
9	6,9
10	4,5
11	1,3
12	0,5-1,0
13	>1,0
15	>1,0
14	5,1

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Claims

Reivindicações

1. COMPOSTO, caracterizado por ser de Fórmula (I)

- em que

- Y¹ representa CHF ou CF2;

- Y² representa CY³Y⁴Y⁶;;

- R¹ representa CN, CH2OY⁵ ou C(=O)NH₂;

- Y⁵ representa H, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C11, arila C6-C10, heterociclo-alquila C4-C10 linear ou ramificada que compreendem de 1 a 2 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, heteroarila C5-C10 que compreende de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de N, O ou S, a alquila, cicloalquila, arila, heterociclo-alquila e heteroarila opcionalmente são substituídas com um ou mais alquila C1-C10, OH, O-alquila C1-C6, NH2, NHalquila C1-C6, N[alquila Ci-Ce]2, C(=O)NH2, C(=O)NH-alquila C1-C6 ou C(=O)N[alquila Ci-Ce]2;

Y³, Y⁴ e Y⁶, idênticos ou diferentes, representam alquila C1-C3, cicloalquila C3-C6, heterocicloalquila C4-C8 compreendendo de 1 a 2 heteroátomos escolhidos dentre N-Y⁷, O ou S, um grupo CH2-O-alquila C1-C3, ou um grupo CH2-O-(CH2)2-O-alquila C1-C3, em que a alquila, cicloalquila e heterocicloalquila é opcionalmente substituída com um ou mais Y⁸; ou

Y³ e Y⁴ podem formar juntos com 0 átomo de carbono que se ligam uma cicloalquila C3-C6 ou uma heterocicloalquila C4-C8 compreendendo de 1 a 2 heteroátomos escolhidos dentre N-Y⁷, O, ou S, em que a cicloalquila e a heterocicloalquila são opcionalmente substituídas com um ou mais Y⁸;

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 385/390
2/5

Y^{6 7} representa alquila Ci-Ce, cicloalquila C3-C6, C(=O)alquila Ci-Ce ou C(=0)-cicloalquila C3-C6;

Y⁸ representa alquila Ci-Ce, cicloalquila C3-C6, O-alquila Ci-Ce ou O-cicloalquila C3-C6;

- qualquer átomo de carbono presente em um grupo selecionado a partir de alquila; cicloalquila; heterociclo pode ser oxidado para formar um grupo C(O);

- qualquer átomo de enxofre presente dentro de um heterociclo pode ser oxidado para formar um grupo S(O) ou um grupo S(O)2;

- qualquer átomo de nitrogênio presente em um grupo em que é trissubstituído (por conseguinte, formando uma amina terciária) ou dentro de um heterociclo ainda pode ser quaternizado por um grupo metila;

- e um sal farmaceuticamente aceitável, um zwiteríon, um isômero ótico, um racemato, um diastereoisômero, um enantiômero, um isômero geométrico ou um seu tautômero.

2. COMPOSTOS, de acordo com a reivindicação 1, caracterizados por R¹ ser C(O)NH₂, CN, CH2OH ou CH₂OMe.
3. COMPOSTOS, de acordo com a reivindicação 1, caracterizados por R¹ serC(O)NH₂.
4. COMPOSTOS, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizados por Y¹ representar CF2.
5. COMPOSTOS, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizados por Y² ser selecionado a partir de:
6. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações

1 a 5, caracterizados por serem de Fórmula (Γ)

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 386/390

3/5
7. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações

1 a 5, caracterizados por serem para a utilização como pró-droga de um composto de Fórmula (I’)

(Γ)

- em que R¹ e Y¹ são conforme definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 5 e Y² representa o H ou um sais de adição de base, por exemplo, selecionados a partir dos sais de amônio, tais como a trometamina, meglumina, epolamina; sais de metal tais como o sódio, lítio, potássio, cálcio, zinco, alumínio ou magnésio; sais com bases orgânicas tais como a metilamina, propilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamina, N,N-dimetiletanolamina, tris(hidroximetil)aminometano, etanolamina, piridina, picolina, dicicloexilamina, morfolina, benzilamina, procaína, N-metil-D-glucamina; sais com os aminoácidos tais como a arginina, lisina, ornitina e, assim por diante; sais de fosfônio tais como o alquilfosfônio, arilfosfônio, alquilarilfosfônio e alcenilarilfosfônio; e sais com o amônio quaternário tal como o tetra-n-butilamônio.
8. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, caracterizada por compreender, pelo menos, um composto de Fórmula (I), conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, e opcionalmente um excipiente farmaceuticamente aceitável.

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 387/390

4/5
9. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada por compreender adicionalmente, pelo menos, um composto selecionado a partir de um composto antibacteriano, de preferência um composto de β-lactama.
10. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 9, caracterizada por compreender

- um composto único, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6; ou

- pelo menos, um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, e um ou mais compostos antibacterianos; ou

- pelo menos, um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, e um ou mais compostos de β-lactama; ou

- pelo menos, um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, um ou mais compostos antibacterianos e um ou mais compostos de β-lactama.
11. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 9 a 10, caracterizada por

- o composto antibacteriano ser selecionado a partir de aminoglicosídeos, β-lactamas, glicilciclinas, tetraciclinas, quinolonas, fluoroquinolonas, glicopeptídeos, lipopeptídeos, macrólidos, cetólidos, lincosamidas, estreptograminas, oxazolidinonas, polimixinas e suas misturas; ou

- o composto de β-lactama ser selecionado a partir de de βlactamas e suas misturas, de preferência, a penicilina, cefalosporinas, penemas, carbapenemas e monobactamas.
12. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 9 a 11, caracterizada pela β-lactama ser selecionada a partir de amoxicilina, amoxicilina-clavulanato, sultamicilina, cefuroxima axetil, cefazolina, cefaclor, cefdinir, proxetila de cefpodoxima, cefprozil, cefalexina, loracarbef,

Petição 870190073441, de 31/07/2019, pág. 388/390

5/5 cefetamet, ceftibuteno, pivoxil de tepipenem, sulopenem, SPR994, cefixima, preferivelmente, a partir de cefixima e proxetila de cefpodoxima.
13. KIT, caracterizado por compreender uma composição farmacêutica, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 8 a 12 e, pelo menos, uma segunda composição, conforme definida em qualquer uma das reivindicações de 8 a 12.
14. USO DE UM COMPOSTO OU UMA COMPOSIÇÃO, conforme definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 6 e 8 a 12, caracterizados por serem para a fabricação de um medicamento ou para a fabricação de um medicamento no tratamento ou prevenção de uma infecção bacteriana.
15. USO, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado por ser para o tratamento ou prevenção de uma infecção bacteriana causada por bactérias que produzem uma ou mais β-lactamase.
16. USO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 14 a 15, caracterizado por ser para o tratamento ou prevenção de uma infecção bacteriana causada por uma bactéria gram-positiva ou por bactérias gramnegativas, de preferência, uma infecção bacteriana causada por bactérias gramnegativas.
17. KIT, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por ser para o tratamento ou prevenção de infecções bacterianas por sua administração simultânea, separada ou sequencial a um paciente necessitado.