BR112017026113B1 - Composição de inóculo microbiano agrícola com base em veículo, método para promover o crescimento de plantas, produtividade das plantas e/ ou qualidade do solo e kit de inóculo microbiano agrícola - Google Patents
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Abstract
COMPOSIÇÕES DE INÓCULO MICROBIANO E USOS DAS MESMAS EM AGRICULTURA. A presente revelação fornece composições de inóculo microbiano agrícola inovadoras para usos na promoção do crescimento vegetal, da produtividade das plantas e/ou da qualidade do solo. As composições de inóculo microbiano inovadoras compreendem uma ou mais espécies microbianas, um ou mais inibidores de urease e/ou um ou mais inibidores de nitrificação. A presente revelação também fornece composições fertilizantes compreendendo as ditas composições de inóculo microbiano
Description
[001]Este pedido reivindica prioridade ao pedido de patente provisório US n° 62/169.942, depositado em 2 de junho de 2015, o qual está aqui incorporado a título de referência, em sua totalidade.
[002]A presente revelação se refere a composições de inóculo microbiano agrícola inovadoras para usos na promoção do crescimento vegetal, da produtividade das plantas e/ou da qualidade do solo. As composições de inóculo microbiano inovadoras compreendem uma ou mais espécies microbianas, um ou mais inibidores de urease e/ou um ou mais inibidores de nitrificação. A presente revelação se refere, também, a composições fertilizantes compreendendo as ditas composições de inóculo microbiano, suas formulações e os usos das mesmas.
[003]O uso de fertilizantes para aprimorar a produção de plantas e culturas agrícolas e para superar a qualidade insatisfatória do solo é amplamente praticado. Os fertilizantes contendo nitrogênio comercialmente disponíveis de uso mais comum são fertilizantes químicos inorgânicos, como ureia. O uso estendido de ureia é frequentemente associado a consequências ambientais negativas, como contaminação por nitrato em águas de escoamento e águas subterrâneas, bem como emissão de amônia e óxido nitroso para a atmosfera. A atenção dada à aplicação de fertilizantes à base de nitrogênio passou do papel de promover a produção de culturas agrícolas ao alívio da poluição ambiental. Há uma variedade de novas práticas e tecnologias de manejo que podem promover o uso de nitrogênio com eficiência, e aliviar a poluição ambiental.
[004]Uma das tecnologias amplamente usadas é a aplicação de um inibidor de urease em combinação com o tratamento de ureia. O componente de ureia do fertilizante aplicado ao solo se torna uma fonte de amônia como um resultado da hidrólise da ureia catalisada pela urease, uma enzima produzida por numerosos fungos e bactérias que é bem conhecido pelos versados na técnica. Os inibidores de urease podem retardar a taxa de conversão da ureia em amônia, reduzindo assim significativamente a quantidade de ureia que teria, de outro modo, que ser aplicada ao solo, mediante a redução da quantidade de volatilização da amônia. Um dos inibidores de urease mais comuns é a triamida N-(n- butil)tiofosfórica (NBPT) (consulte, por exemplo, a patente US n° 5.698.003).
[005]Uma outra tecnologia amplamente usada consiste na aplicação de inibidores de nitrificação para reduzir significativamente a lixiviação de nitrato e as emissões de nitrogênio gasoso. A maior parte do nitrogênio fornecido como um fertilizante comercialmente disponível é, por fim, transformada em uma forma de nitrato do nitrogênio. Na presença de oxigênio adequado, temperaturas altas e alguma umidade, o N-amônio é convertido em N-nitrato através de um processo bioquímico conhecido como nitrificação, que requer duas formas de bactérias do solo. A primeira bactéria, Nitrosomonas, converte N-amônio em N-nitrito. A segunda bactéria, Nitrobacter, converte N-nitrito em N-nitrato. Os inibidores de nitrificação têm um modo principal de retardar o processo de nitrificação mediante a inibição das bactérias Nitrosomonas na área onde o amônio estará presente. Alguns inibidores de nitrificação amplamente usados que estão comercialmente disponíveis incluem 2-cloro-6- (triclorometil)-piridina (Nitrapirina) e dicianodiamida (DCD).
[006] Em adição à aplicação de inibidores químicos de enzimas, como o inibidor de urease triamida N-(n-butil)tiofosfórica (NBPT) e inibidores de nitrificação como dicianodiamida (DCD), as composições fertilizantes compreendendo micro-organismos (chamadas de "biofertilizantes" ou "bioestimulantes") são cada vez mais consideradas como alternativas aos fertilizantes químicos convencionais. A capacidade de espécies bacterianas específicas para promover o crescimento vegetal foi reconhecida há muito tempo. Por exemplo, as bactérias fixadoras de nitrogênio, como a espécie Rhizobium, fornecem às plantas compostos nitrogenosos essenciais. Foi mostrado, também, que as espécies de Azotobacter e Azospirillum promovem o crescimento vegetal e aumentam a produtividade da cultura agrícola, promovendo o acúmulo de nutrientes em plantas. Entretanto, as bactérias desses gêneros são frequentemente incapazes de competir de maneira eficaz com a flora nativa do solo e das plantas, exigindo assim a aplicação de volumes impraticavelmente grandes de inóculos.
[007] Até a presente data, os inibidores de urease e os inibidores de nitrificação tiveram sucesso em graus variados, enquanto biofertilizantes tipicamente tiveram sucesso limitado. Dessa forma, existe uma necessidade por fertilizantes ou aditivos de fertilizante aprimorados, e por métodos que sejam eficazes no fornecimento de nutrientes para crescimento vegetal e que sejam ambientalmente seguros e não perigosos. Uma solução consiste em fornecer uma combinação de inibidores de urease e/ou inibidores de nitrificação com biofertilizantes. No entanto, a combinação de inibidores de urease e/ou inibidores de nitrificação com biofertilizantes não é algo simples. Primeiro, os inibidores de urease e/ou os inibidores de nitrificação podem enfraquecer ou matar os biofertilizantes, quando combinados. Segundo, os inibidores de urease e/ou os inibidores de nitrificação são tipicamente dispensados em um sistema solvente (por exemplo glicol, aminas complexas, álcoois arílicos), o que também pode enfraquecer ou matar os biofertilizantes.
[008] No documento WO 2015/104698 A2 foi revelada a combinação de um inibidor de urease com muitos pesticidas microbianos. Entretanto, o documento não revelou qualquer sistema solvente que pudesse proporcionar uma viabilidade razoável para os pesticidas microbianos mencionados. Além disso, o documento não identificou quaisquer bactérias tolerantes a solvente.
[009] As bactérias tolerantes a solvente são potencialmente úteis em muitas aplicações de transformação microbiana para remediação ambiental, bem como em processos biotecnológicos. A tolerância a solvente orgânico pode ser uma propriedade específica de uma espécie, e pode não ser facilmente previsível. Consulte, por exemplo, "Association of organic solvent tolerance and fluoroquinolone resistance in clinical isolates of Escherichia coli", Anbu, P., Journal of Antimicrobial Chemotherapy, (1998) 41, 111-114. A maioria das bactérias tolerantes a solvente relatadas e bem estudadas são bactérias gram-negativas. As bactérias gram-negativas têm a vantagem de ter uma membrana externa adicional que protege a membrana citoplasmática mediante a redução das concentrações periplasmáticas de solventes nocivos para níveis aceitáveis. Devido à inerente desvantagem de não ter uma membrana externa, somente alguns organismos gram-positivos foram relatados como exibindo tolerância a solventes. Consulte, por exemplo, "Isolation and characterization of a novel organic solvent-tolerant Anoxybacillus sp. PGDY12, a thermophilic Gram-positive bacterium", Gao, Y., Journal of Applied Microbiology, 110, 472-478.
[010] Surpreendentemente, em extensos esforços para identificar bactérias tolerantes a solvente para promover a saúde das plantas, a nutrição das plantas e/ou a saúde do solo, alguns organismos gram-positivos agricolamente benéficos foram identificados como sendo viáveis em alguns solventes orgânicos selecionados, enquanto alguns organismos gram-negativos não são viáveis nos mesmos solventes orgânicos. Por exemplo, as espécies testadas de organismos gram-positivos Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis e Bacillus pumilis demonstraram uma faixa de tempo de viabilidade de pelo menos 2 horas a pelo menos 21 dias em uma solução com ao menos um dentre os solventes orgânicos propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol e sulfóxido de dimetila (DMSO). Entretanto, nenhuma das espécies gram-negativas agricolamente benéficas de Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas putida e Pseudomonas chlororaphis testadas demonstrou viabilidade nos solventes orgânicos testados.
[011] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola compreendendo ao menos uma cepa microbiana proveniente de uma ou mais espécies microbianas, e ao menos um agente ativo, sendo que o agente ativo é um inibidor de urease, ou um inibidor de nitrificação, ou uma combinação dos mesmos, e sendo adicionalmente que a pelo menos uma cepa microbiana está presente em uma quantidade eficaz para promover a saúde da planta, a nutrição da planta e/ou a saúde do solo na presença do agente ativo.
[012] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola que compreende: i. ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilis e qualquer combinação dos mesmos; e ii. ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos.
[013] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola que compreende: i. ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilis e qualquer combinação dos mesmos; ii. ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e iii. um inibidor de urease selecionado do grupo que consiste em triamida N-(n- butil)tiofosfórica (NBPT), triamida N-(n-butil)fosfórica, tiofosforil triamida, fosforodiamidato de fenila, triamida N-cicloexil fosfórica, triamida N-cicloexil tiofosfórica, triamida fosfórica, hidroquinona, p-benzoquinona, hexamidociclotrifosfazeno, tiopiridinas, tiopirimidinas, tiopiridina-N-óxidos, N,N-di-halo-2-imidazolidinona, N-halo-2-oxazolidinona, triamida N-(2- nitrofenil)tiofosfórica, triamida N-(2-nitrofenil)fosfórica e qualquer combinação dos mesmos.
[014] Em uma modalidade, a presente revelação fornece um kit de inóculo microbiano agrícola que compreende: Parte A, sendo que a Parte A compreende um inibidor de urease e ao menos um solvente orgânico, sendo que o dito inibidor de urease é selecionado do grupo consistindo em N-triamida N-(n-butil)tiofosfórica (NBPT), triamida N-(n-butil)fosfórica, tiofosforil triamida, fosforodiamidato de fenila, triamida N-cicloexil fosfórica, triamida N- cicloexil tiofosfórica, triamida fosfórica, hidroquinona, p-benzoquinona, hexamidociclotrifosfazeno, tiopiridinas, tiopirimidinas, tiopiridina-N-óxidos, N,N-di-halo- 2-imidazolidinona, N-halo-2-oxazolidinona, triamida N-(2-nitrofenil)tiofosfórica, triamida N-(2-nitrofenil)fosfórica e qualquer combinação dos mesmos; e sendo que o dito solvente orgânico é selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N- metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e Parte B, sendo que a Parte B compreende ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilis e qualquer combinação dos mesmos, sendo que cada Parte A e cada Parte B está contida em um recipiente separado.
[015] Em uma modalidade, a presente revelação fornece um kit de inóculo microbiano agrícola que compreende: Parte A, sendo que a Parte A compreende ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e Parte B, sendo que a Parte B compreende ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilis e qualquer combinação dos mesmos, sendo que cada Parte A e cada Parte B está contida em um recipiente separado.
[016] Em uma outra modalidade, a presente revelação fornece um método para acentuação de um traço de produtividade em uma planta de interesse, em comparação com o traço de produtividade de uma planta de referência ou controle, sendo que o método compreende colocar uma planta, uma parte de planta ou uma semente de planta de interesse, ou o solo circundante, em contato com uma quantidade eficaz de uma composição de inóculo microbiano da presente revelação.
[017] O inibidor de urease ou o inibidor de nitrificação pode mitigar a contaminação por nitrato em águas de escoamento e águas subterrâneas, bem como a emissão de uma grande quantidade de amônia e óxido nitroso para a atmosfera. As espécies microbianas podem adicionalmente promover a saúde da planta, a nutrição da planta e a saúde do solo. A combinação tanto de inibidores químicos de enzimas como de espécies microbianas em composições e formulações adequadas pode servir como uma melhor abordagem para aprimorar a eficiência do uso de fertilizante à base de nitrogênio, mediante a otimização da produtividade da planta, da qualidade do solo e da sustentabilidade ambiental geral.
[018] Exceto onde definido em contrário, todos os termos técnicos e científicos usados no presente documento têm o mesmo significado comumente entendido pelos versados na técnica.
[019] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola compreendendo ao menos uma cepa microbiana proveniente de uma ou mais espécies microbianas, e ao menos um agente ativo, sendo que o agente ativo é um inibidor de urease, ou um inibidor de nitrificação, ou uma combinação dos mesmos, e sendo adicionalmente que a pelo menos uma cepa microbiana promove a saúde da planta, a nutrição da planta e/ou a saúde do solo na presença do agente ativo.
[020] Em uma outra modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola compreendendo ao menos uma cepa microbiana proveniente de uma ou mais espécies microbianas e ao menos um agente ativo, sendo que o agente ativo é um inibidor de urease, ou um inibidor de nitrificação, ou uma combinação dos mesmos, sendo adicionalmente que a pelo menos uma cepa microbiana promove a saúde da planta, a nutrição da planta e/ou a saúde do solo na presença do agente ativo, sendo que uma ou mais espécies microbianas são selecionadas dos seguintes grupos: (1) Espécies de bactérias formadoras de esporos; (2) Espécies de fungos formadores de esporos; (3) Organismos micorrízicos, inclusive espécies de Laccaria bicolor, Glomus intraradices e Amanita; (4) espécies de Actinomyces e suas cepas, inclusive Streptomyces lydicus, Streptomyces griseoviridis, Streptomyces griseoviridis K61 (Mycostop, AgBio Development) e Streptomyces microflavus AQ 6121; (5) espécies de bacilo e suas cepas, inclusive: Bacillus itcheniformis, Bacillus megaterium, Bacillus pumilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus oleronius, Bacillus megaterium, Bacillus mojavensis, Bacillus pumilus, Bacillus subtilis, Bacillus circulans, Bacillus globisporus, Bacillus firmus, Bacillus thuringiensis, Bacillus cereus, cepa de Bacillus amyloliquefaciens D747 (Double Nickel, Certis), cepa de Bacillus firmus I-1582 (Votivo e Nortica, Bayer), Bacillus licheniformis, cepa de Bacillus licheniformis SB3086 (EcoGuard, Novozymes), cepa de Bacillus pumilus GB34 (YieldShield, Bayer), QST2808 (Sonata, Bayer), cepa de Bacillus subtilis GB03 (Kodiak, Bayer), MBI 600 (Subtilex, Becker Underwood) & QST 713 (Serenade, Bayer), cepa de Bacillus subtilis GB122 com cepa de Bacillus amyloliquefaciens GB99 (BioYield, Bayer), cepa de Bacillus pumilus BU F-33, cepa de Bacillus thuringiensis galleriae SDS-502, Bacillus thuringiensis kurstaki, VBTS 2546, Bacillus cereus BP01, cepa de Bacillus subtilis EB120, cepa de Bacillus subtilis J-P13, Bacillus subtilis FB17, cepas de Bacillus subtilis QST30002 e QST3004 (NRRL B-50421 e NRRLB-50455), cepas de Bacillus subtilis QST30002 e QST3004 (NRRL B-50421 e NRRLB-50455) mutantes "sandpaper", mutantes quádruplos deficientes em enterotoxina de cepa de subespécie kurstaki de Bacillus thuringiensis VBTS 2477, cepas de Bacillus simplex 03WN13, 03WN23 e 03WN25, cepa de Bacillus subtilis QST 713, isolado de Bacillus mycoides BmJ NRRL B-30890, cepa de Bacillus subtilis DSM 17231 e cepa de B. licheniformis DSM17236, Bacillus aryabhattai, B. flexus, B. nealsonii, Bacillus sphaericus, Bacillus megaterium, B. vallismortis, Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 23842), Bacillus licheniformis (ATCC 14580), Bacillus licheniformis (B-642), Bacillus licheniformis (B-14368), Bacillus thuringiensis (ATCC 10792), Bacillus thuringiensis (HD-17), Bacillus thuringiensis (HD-1), e Bacillus pumilis (NRS-272); (6) espécies de rizobactérias promotoras de crescimento vegetal (RPCVs) e suas cepas, inclusive espécies relatadas como sendo capazes de fixar nitrogênio, por exemplo espécies de Gluconacetobacter (por exemplo Gluconacetobacter diazotrophicus aka Acetobacter diazotrophicus), espécies de Spirillum (por exemplo Spirillum lipoferum), espécies de Azospirillum, Herbaspirillum seropedicae, espécies de Azoarcus, espécies de Azotobacter, espécies de Burkholderia, Burkholderia sp. A396 e Paenibacillus polymyxa; (7) espécies bacterianas fixadoras de nitrogênio e suas cepas, inclusive espécies de Rhizobium (por exemplo espécies de Bradyrhizobium, como Bradyrhizobium japonicum e Rhizobium meliloti); (8) espécies microbianas e suas cepas que são conhecidas por aprimorar a eficiência de uso de nutrientes, inclusive espécies de Penicillium (por exemplo Penicillium bilaii, Penicillium bilaji) e Mesorhizobium cicero; (9) espécies microbianas e suas cepas que são conhecidas por ter efeitos inseticidas ou repelentes de insetos, inclusive Telenomus podisi, Baculovirus anticarsia, Trichogramma pretiosum, Trichogramma galloi, Chromobacterium subtsugae, Trichoderma fertile JM41R, Beauveria bassiana, cepa de Beauveria bassiana NRRL 30976, cepa de Beauveria bassiana ATP02, DSM 24665, Paecilomyces fumosoroseus, Trichoderma harzianum, Verticillium lecanii, Isaria Petição 870190134244, de 16/12/2019, pág. 15/48 fumosorosea CCM 8367 (CCEFO.011.PFR), Lecanicillium muscarium, Streptomyces microflavus e Muscodor albus; (10) espécies microbianas e suas cepas que são conhecidas por terem efeitos nematicidas, por exemplo Myrothecium verrucaria, espécies de Pasteuria e suas cepas, inclusive Pasteuria nishizawae, Pasteuria cepa de Pasteuria reneformis Pr-3, Paecilomyces lilacinus, Chromobacterium subtsugae, cepa de Pasteuria ATCC SD-5832, espécies de Metarhizium e espécies de Flavobacterium; (11) espécies microbianas e suas cepas que são conhecidas por ter efeitos antifúngicos, antimicrobianos e/ou promotores de crescimento vegetal, por exemplo espécies de Gliocladium, espécies de Pseudomonas (por exemplo Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas fluorescens D7, P. putida e P. chlororaphis), cepa de Pseudomonas fluorescens NRRL B-21133, NRRL B-21053 ou NRRL B-21102, Pseudomonas fluorescens VP5, Pseudomonas synxantha, Pseudomonas diazotrophicus, cepa de Enterobacter cloacae NRRL B-21050, espécies de Trichoderma, Trichoderma virens, cepa de Trichoderma atroviride, Coniothyrium minitans, espécies de Gliocladium, Gliocladium virens, cepa de Gliocladium roseum 321U, espécies de Trichoderma harzianum, Trichoderma harzianum Rifai, cepa de Clonostachys rosea 88-710, Pseudomonas rhodesiae FERM BP-10912, Serratia plymuthica CCGG2742, cepa de Cryptococcus lavescens OH 182.9, Serratia plymuthica, Cladosporium cladosporioides, espécies de Mitsuaria, Coprinus curtus, Virgibacillus halophilus, espécies de Saccharomyces, Metschnikovia fruticola, Candida oleophila, espécies de Acremonium, Pseudozyma aphidis, Pythium oligandrum, cepa de Phoma spp I-4278, espécies de Achromobacter, espécies de Geomyces, cepa de Pseudomonas azotoformans, cepa F30A, cepa de Brevibacillus parabrevis No 4; cepas não toxigênicas de Aspergillus NRRL 50427, NRRL 50428, NRRL 50429, NRRL 50430 e NRRL 50431, cepas de Sphaerodes mycoparasitica IDAC 301008-01, 02 ou 03, cepa de Muscodor albus NRRL 30547 ou NRRL30548, Serratia plymuthica CCGG2742, cepa de Pseudomonas koreensis 10IL21, cepa de P. lini 13IL01, cepa de Pantoea agglomerans 10IL31, cepa de Streptomyces scopuliridis RB72, endófitos como Acremonium spp, cepa de Streptomyces spp BG76, Paracoccus kondratievae, Enterobacter cloacae, Cryptococcus flavescens, Lactobacillus parafarraginis, Lactobacillus buchneri, Lactobacillus rapi ou Lactobacillus zeae, Paenibacillus polymyxa, Serratia plymuthica, espécies de Phoma, Pythium oligandrum, espécies de Mycosphaerella e espécies de Variovorax; (12) espécies bacterianas e suas cepas provenientes do grupo denominado bactérias metilotróficas facultativas pigmentadas de rosa (PPFMs, "Pink-Pigmented Facultative Methylotrophs") - Metilotrofos Facultativos de Pigmentação Rosa) inclusive espécies de Methylobacterium; e (13) espécies microbianas e suas cepas que são conhecidas por ter efeito herbicida, por exemplo Pyrenophora semeniperda; sendo que o inibidor de urease é selecionado do grupo que consiste em triamida N-(n- butil)tiofosfórica (NBPT), triamida N-(n-butil)fosfórica, tiofosforil triamida, fosforodiamidato de fenila, triamida N-cicloexil fosfórica, triamida N-cicloexil tiofosfórica, triamida fosfórica, hidroquinona, p-benzoquinona, hexamidociclotrifosfazeno, tiopiridinas, tiopirimidinas, tiopiridina-N-óxidos, N,N-di-halo- 2-imidazolidinona, N-halo-2-oxazolidinona, triamida N-(2-nitrofenil)tiofosfórica, triamida N-(2-nitrofenil)fosfórica, derivados dos mesmos e qualquer combinação dos mesmos; e sendo que o inibidor de nitrificação é selecionado do grupo consistindo em 2-cloro-6- triclorometilpiridina, 5-etoxi-3-triclorometil-1,2,4-tiadiazol, dicianodiamida, 2-amino-4- cloro-6-metil-pirimidina, 1,3-benzotiazol-2-tiol, 4-amino-N-1,3-tiazol-2-ilbenzeno sulfonamida, tioureia, guanidina, fosfato de 3,4-dimetilpirazol, 2,4-diamino-6- triclorometil-5-triazina, poliéter ionóforos, 4-amino-1,2,4-triazol, 3-mercapto-1,2,4- triazol, azida de potássio, bissulfeto de carbono, tritiocarbonato de sódio, ditiocarbamato de amônio, metilcarbamato de 2,3,-di-hidro-2,2-dimetil-7-benzofuranol, éster metílico de N-(2,6-dimetilfenil)-N-(metoxiacetil)-alanina, tiossulfato de amônio, 1- hidroxipirazol, 3-metilpirazol-1-carboxamida, 3-metilpirazol, 3,5-dimetilpirazol, 1,2,4- triazol, inibidor de nitrificação G77 (registro CAS n° 1373256-33-7), derivados dos mesmos e qualquer combinação dos mesmos.
[021] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma formulação à base de veículo sólido para qualquer composição de inóculo microbiano da presente revelação, sendo que o veículo sólido é selecionado dentre terras minerais, por exemplo silicatos, géis de sílica, talco, caulins, calcário, cal, giz, argilas, dolomita, terra diatomácea, bentonita, montmorilonitas; sais inorgânicos, por exemplo sulfato de alumínio, sulfato de cálcio, sulfato de cobre, sulfato de ferro, sulfato de magnésio, sulfato de silício, óxido de magnésio; polissacarídeos, por exemplo celulose, amido; fertilizantes, por exemplo sulfato de amônio, fosfato de amônio, nitrato de amônio; produtos de origem vegetal, por exemplo farinha de cereais, farinha de casca de árvore, farinha de madeira, farinha de casca de noz; farinhas de grão adequadas ao uso na presente revelação, por exemplo farinhas provenientes de milho, arroz, trigo, cevada, sorgo, milheto, aveia, triticale, centeio, trigo sarraceno, fonio e quinoa, e misturas dos mesmos.
[022] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma formulação à base de solvente para qualquer composição de inóculo microbiano agrícola da presente revelação, sendo que o solvente é selecionado dentre alcanolaminas, como trietanolamina, dietanolamina, monoetanolamina; alquil dietanolaminas, dialquil monoetanolaminas, sendo que o grupo alquila é uma cadeia de alquila C1-C24 ramificada ou não ramificada; sulfóxido de metila (DMSO); alquilsulfonas, como sulfolano (2,3,4,5- tetra-hidrotiofeno-1,1-dioxida); alquilamidas, como N-metil pirrolidona, N-etil pirrolidona, ou dimetilformamida; monoalcoóis, como metanol, etanol, propanol, isopropanol ou álcool benzílico; glicóis, como etilenoglicol, propilenoglicol, dietilenoglicol, ou dipropilenoglicol; derivados de glicol e glicóis protegidos, como éter monobutílico de trietileno glicol; glicerol e derivados de glicerol (triálcoois) inclusive gliceróis protegidos, como isopropilideno glicerol; ésteres dibásicos e derivados dos mesmos; carbonatos de alquileno, como carbonato de etileno ou carbonato de propileno; ésteres monobásicos, como lactato de etila ou acetato de etila; polímeros de ácidos carboxílicos, como ácido maleico, ácido oleico, ácido itacônico, ácido acrílico ou ácido metacrílico; éteres monoalquilglicólicos e éteres dialquilglicólicos; ésteres glicólicos; tensoativos, como alquilbenzenossulfonatos, sulfonatos de lignina, etoxilatos de alquilfenol ou aminas polietoxiladas.
[023] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma formulação encapsulada para qualquer composição de inóculo microbiano agrícola da presente revelação. No ambiente do solo, as espécies microbianas inoculadas podem ter dificuldades de sobrevivência entre organismos concorrentes e predadores de ocorrência natural. Para ajudar na sobrevivência dos micro-organismos presentes em inóculos microbianos e composições fertilizantes da presente revelação após a aplicação ao ambiente, uma ou mais das cepas de espécies microbianas podem ser encapsuladas em, por exemplo, uma matriz polimérica adequada. Em um exemplo, a encapsulação pode compreender microesferas de alginato, conforme foi descrito por Young et al, 2006, "Encapsulation of plant growth-promoting bacteria in alginate beads enriched with humid acid", Biotechnology and Bioengineering 95:76-83. Os versados na técnica entenderão que se pode usar qualquer matriz ou material de encapsulação adequado. A encapsulação pode ser obtida mediante o uso de métodos e técnicas conhecidas pelos versados na técnica. A encapsulação dos micro-organismos pode incluir nutrientes ou outros componentes da composição de inóculo ou fertilizante, em adição aos micro-organismos.
[024] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola que compreende: i. ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilis e qualquer combinação dos mesmos; e ii. ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos.
[025] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola que compreende: i. ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilis e qualquer combinação dos mesmos; ii. ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e iii. um inibidor de urease selecionado do grupo que consiste em triamida N-(n- butil)tiofosfórica (NBPT), triamida N-(n-butil)fosfórica, tiofosforil triamida, fosforodiamidato de fenila, triamida N-cicloexil fosfórica, triamida N-cicloexil tiofosfórica, triamida fosfórica, hidroquinona, p-benzoquinona, hexamidociclotrifosfazeno, tiopiridinas, tiopirimidinas, tiopiridina-N-óxidos, N,N-di-halo-2-imidazolidinona, N-halo-2-oxazolidinona, triamida N-(2- nitrofenil)tiofosfórica, triamida N-(2-nitrofenil)fosfórica e qualquer combinação dos mesmos.
[026] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola que compreende: i. ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilis e qualquer combinação dos mesmos; ii. ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e iii. um inibidor de nitrificação selecionado do grupo consistindo em 2-cloro-6- triclorometilpiridina, 5-etoxi-3-triclorometil-1,2,4-tiadiazol, dicianodiamida, 2-amino-4- cloro-6-metil-pirimidina, 1,3-benzotiazol-2-tiol, 4-amino-N-1,3-tiazol-2-ilbenzeno sulfonamida, tioureia, guanidina, fosfato de 3,4-dimetilpirazol, 2,4-diamino-6-triclorometil- 5-triazina, poliéter ionóforos, 4-amino-1,2,4-triazol, 3-mercapto-1,2,4-triazol, azida de potássio, bissulfeto de carbono, tritiocarbonato de sódio, ditiocarbamato de amônio, metilcarbamato de 2,3,-di-hidro-2,2-dimetil-7-benzofuranol, éster metílico de N-(2,6- dimetilfenil)-N-(metoxiacetil)-alanina, tiossulfato de amônio, 1-hidroxipirazol, 3- metilpirazol-1-carboxamida, 3-metilpirazol, 3,5-dimetilpirazol, 1,2,4-triazol, inibidor de nitrificação G77 (registro CAS n° 1373256-33-7) e qualquer combinação dos mesmos.
[027] Em uma modalidade, a presente revelação fornece um kit de inóculo microbiano agrícola que compreende: Parte A, sendo que a Parte A compreende um inibidor de urease e ao menos um solvente orgânico, sendo que o dito inibidor de urease é selecionado do grupo consistindo em N-triamida N-(n-butil)tiofosfórica (NBPT), triamida N-(n-butil)fosfórica, tiofosforil triamida, fosforodiamidato de fenila, triamida N-cicloexil fosfórica, triamida N- cicloexil tiofosfórica, triamida fosfórica, hidroquinona, p-benzoquinona, hexamidociclotrifosfazeno, tiopiridinas, tiopirimidinas, tiopiridina-N-óxidos, N,N-di-halo- 2-imidazolidinona, N-halo-2-oxazolidinona, triamida N-(2-nitrofenil)tiofosfórica, triamida N-(2-nitrofenil)fosfórica e qualquer combinação dos mesmos; e sendo que o dito solvente orgânico é selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N- metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e Parte B, sendo que a Parte B compreende ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilis e qualquer combinação dos mesmos,sendo que cada Parte A e cada Parte B está contida em um recipiente separado.
[028] Em uma modalidade, a presente revelação fornece um kit de inóculo microbiano agrícola que compreende: Parte A, sendo que a Parte A compreende ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e Parte B, sendo que a Parte B compreende ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilis e qualquer combinação dos mesmos,sendo que cada Parte A e cada Parte B está contida em um recipiente separado.
[029] Em uma modalidade, ao menos uma espécie agricolamente benéfica de bacilo, em uma composição ou um kit de inóculo microbiano agrícola, é selecionada do grupo consistindo em Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis e qualquer combinação dos mesmos.
[030] Em uma modalidade, a espécie de bacilo agricolamente benéfica em uma composição ou um kit de inóculo microbiano agrícola compreende uma cepa de bacilo selecionada do grupo que consiste em Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 23842), Bacillus licheniformis (ATCC 14580), Bacillus licheniformis (B-642), Bacillus licheniformis (B-14368), Bacillus thuringiensis (ATCC 10792), Bacillus thuringiensis (HD-17), Bacillus thuringiensis (HD-1), Bacillus pumilis (NRS-272) e qualquer combinação dos mesmos.
[031] Em uma modalidade, o inibidor de urease em uma composição ou um kit de inóculo microbiano agrícola, quando presente, é triamida N-(n-butil)tiofosfórica (NBPT).
[032] Em uma modalidade, o inibidor de nitrificação em uma composição ou um kit de inóculo microbiano agrícola, quando presente, é dicianodiamida, inibidor de nitrificação G77 (registro CAS n° 1373256-33-7), ou uma combinação dos mesmos.
[033] Em uma modalidade, o solvente em uma composição ou em um kit de inóculo microbiano agrícola compreende propilenoglicol e N-metil-2-pirrolidona.
[034] Em uma modalidade, o solvente em uma composição ou em um kit de inóculo microbiano agrícola compreende propilenoglicol, N-metil-2-pirrolidona e éter monobutílico de trietileno glicol.
[035] Em uma modalidade, uma composição de inóculo microbiano agrícola compreende adicionalmente água, glicerol ou uma combinação dos mesmos.
[036] Em uma modalidade, a Parte B de um kit de inóculo microbiano agrícola compreende adicionalmente água, glicerol ou uma combinação dos mesmos.
[037] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola que compreende: i. ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis e qualquer combinação dos mesmos; e ii. ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos.
[038] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola que compreende: i. ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis e qualquer combinação dos mesmos; ii. ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e iii. triamida N-(n-butil)tiofosfórica (NBPT).
[039] Em uma modalidade, a presente revelação fornece um kit de inóculo microbiano agrícola que compreende: Parte A, sendo que a Parte A compreende triamida N-(n-butil)tiofosfórica (NBPT) ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e Parte B, sendo que a Parte B compreende ao menos uma espécie de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo consistindo em Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis e qualquer combinação dos mesmos,sendo que cada Parte A e cada Parte B está contida em um recipiente separado.
[040] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola que compreende: i. ao menos uma cepa de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo que consiste em Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 23842), Bacillus licheniformis (ATCC 14580), Bacillus licheniformis (B-642), Bacillus licheniformis (B-14368), Bacillus thuringiensis (ATCC 10792), Bacillus thuringiensis (HD-17), Bacillus thuringiensis (HD- 1), Bacillus pumilis (NRS-272) e qualquer combinação dos mesmos; e ii. ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos.
[041] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola que compreende: i. ao menos uma cepa de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo que consiste em Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 23842), Bacillus licheniformis (ATCC 14580), Bacillus licheniformis (B-642), Bacillus licheniformis (B-14368), Bacillus thuringiensis (ATCC 10792), Bacillus thuringiensis (HD-17), Bacillus thuringiensis (HD- 1), Bacillus pumilis (NRS-272) e qualquer combinação dos mesmos; ii. ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e iii. triamida N-(n-butil)tiofosfórica (NBPT).
[042] Em uma modalidade, a presente revelação fornece uma composição de inóculo microbiano agrícola que compreende: i. ao menos uma cepa de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo que consiste em Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 23842), Bacillus licheniformis (ATCC 14580), Bacillus licheniformis (B-642), Bacillus licheniformis (B-14368), Bacillus thuringiensis (ATCC 10792), Bacillus thuringiensis (HD-17), Bacillus thuringiensis (HD- 1), Bacillus pumilis (NRS-272) e qualquer combinação dos mesmos; ii. ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e iii. dicianodiamida, inibidor de nitrificação G77 (registro CAS n° 1373256-33-7), ou uma combinação dos mesmos.
[043] Em uma modalidade, a presente revelação fornece um kit de inóculo microbiano agrícola que compreende: Parte A, sendo que a Parte A compreende triamida N-(n-butil)tiofosfórica (NBPT) ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e Parte B, sendo que a Parte B compreende ao menos uma cepa de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo que consiste em Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 23842), Bacillus licheniformis (ATCC 14580), Bacillus licheniformis (B-642), Bacillus licheniformis (B-14368), Bacillus thuringiensis (ATCC 10792), Bacillus thuringiensis (HD-17), Bacillus thuringiensis (HD-1), Bacillus pumilis (NRS-272) e qualquer combinação dos mesmos;sendo que cada Parte A e cada Parte B está contida em um recipiente separado.
[044] Em uma modalidade, a presente revelação fornece um kit de inóculo microbiano agrícola que compreende: Parte A, sendo que a Parte A compreende ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) e qualquer combinação dos mesmos; e Parte B, sendo que a Parte B compreende ao menos uma cepa de bacilo agricolamente benéfica, selecionada do grupo que consiste em Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 23842), Bacillus licheniformis (ATCC 14580), Bacillus licheniformis (B-642), Bacillus licheniformis (B-14368), Bacillus thuringiensis (ATCC 10792), Bacillus thuringiensis (HD-17), Bacillus thuringiensis (HD-1), Bacillus pumilis (NRS-272) e qualquer combinação dos mesmos;sendo que cada Parte A e cada Parte B está contida em um recipiente separado.
[045] A porcentagem em peso de um inibidor de urease como NBPT em qualquer modalidade de uma composição ou um kit de inóculo microbiano agrícola da presente revelação, quando presente, está na faixa de 0,02% a 80%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 0,02% a 70%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 0,02% a 60%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 0,02% a 50%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 0,02% a 40%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 0,02% a 30%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 0,02% a 20%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 0,02% a 10%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 0,02% a 5%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 5% a 60%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 5% a 50%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 5% a 40%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 5% a 30%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 10% a 60%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 10% a 50%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 10% a 40%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 10% a 30%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 15% a 60%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 15% a 50%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 15% a 40%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 15% a 30%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 30% a 60%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 30% a 50%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 40% a 60%. A porcentagem em peso tem por base a totalidade da composição de inóculo microbiano.
[046] A porcentagem em peso de um inibidor de nitrificação como DCD, quando presente, em qualquer modalidade de uma composição ou um kit de inóculo microbiano agrícola da presente revelação, está na faixa de 1% a 80%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 1% a 70%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 1% a 60%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 1% a 50%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 1% a 40%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 1% a 30%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 1% a 20%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 1% a 10%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 1% a 5%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 10% a 80%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 10% a 70%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 10% a 60%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 10% a 50%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 10% a 40%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 10% a 30%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 20% a 80%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 20% a 70%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 20% a 60%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 20% a 50%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 20% a 40%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 20% a 30%. A porcentagem em peso tem por base a totalidade da composição de inóculo microbiano.
[047] A porcentagem em peso de um solvente orgânico como propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO) ou qualquer combinação dos mesmos em qualquer modalidade de uma composição ou um kit de inóculo microbiano agrícola da presente revelação está na faixa de 20% a 99%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 20% a 90%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 20% a 80%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 20% a 70%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 20% a 60%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 20% a 50%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 30% a 99%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 30% a 90%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 30% a 80%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 30% a 70%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 30% a 60%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 30% a 50%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 40% a 99%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 40% a 80%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 40% a 70%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso está na faixa de 40% a 60%. A porcentagem em peso tem por base a totalidade da composição de inóculo microbiano.
[048] Em uma modalidade, uma composição ou um kit de inóculo microbiano agrícola da presente revelação compreende propilenoglicol com a porcentagem em peso na faixa de 40% a 70%, N-metil-2-pirrolidona com a porcentagem em peso na faixa de 15% a 40%, NBPT com a porcentagem em peso na faixa de 10% a 30% e, opcionalmente, um corante com a porcentagem em peso na faixa de 0,1% a 5%. A porcentagem em peso tem por base a totalidade da composição de inóculo microbiano.
[049] Em uma modalidade, uma composição ou um kit de inóculo microbiano agrícola da presente revelação compreende propilenoglicol com a porcentagem em peso na faixa de 10% a 30%, N-metil-2-pirrolidona com a porcentagem em peso na faixa de 30% a 60%, NBPT com a porcentagem em peso na faixa de 15% a 40%, éter monobutílico de trietileno glicol com a porcentagem em peso na faixa de 1% a 5% e, opcionalmente, um corante com a porcentagem em peso na faixa de 0% a 1%. A porcentagem em peso tem por base a totalidade da composição de inóculo microbiano.
[050] Em uma modalidade, a concentração da espécie de bacilo na composição de inóculo microbiano da presente revelação é de ao menos 1,0 x 102 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração é de ao menos 1,0 x 103 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração é de ao menos 1,0 x 104 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração é de ao menos 1,0 x 105 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração é de ao menos 1,0 x 106 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração é de ao menos 1,0 x 107 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração é de ao menos 1,0 x 108 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração é de ao menos 1,0 x 109 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração é de ao menos 1,0 x 1010 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração é de ao menos 1,0 x 1011 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração é de ao menos 1,0 x 1012 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração está na faixa de 1,0 x 102 a 1,0 x 1012 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração está na faixa de 1,0 x 103 a 1,0 x 1012 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração está na faixa de 1,0 x 104 a 1,0 x 1012 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração está na faixa de 1,0 x 105 a 1,0 x 1012 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração está na faixa de 1,0 x 106 a 1,0 x 1012 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração está na faixa de 1,0 x 107 a 1,0 x 1012 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração está na faixa de 1,0 x 108 a 1,0 x 1012 esporos/ml. Em uma modalidade, a concentração está na faixa de 1,0 x 109 a 1,0 x 1012 esporos/ml.
[051] Em uma modalidade da presente revelação, a composição de inóculo microbiano agrícola pode servir como um fertilizante por si só.
[052] Um corante também pode estar incluído na composição de inóculo microbiano agrícola da presente revelação. Qualquer corante comumente usado, inclusive corantes alimentícios, pode ser usado para fornecer evidência visual da uniformidade da composição de inóculo microbiano. A porcentagem em peso de um corante no total da composição de inóculo microbiano é de 0 a 10%. Em uma modalidade, a porcentagem em peso é de 0,1% a 5%.
[053] Exemplos de corantes adequados na presente revelação incluem, mas não se limitam a, Azul FD&C n° 1, Verde FD&C n° 3, Amarelo FD&C n° 5, Vermelho FD&C n° 3, Vermelho FD&C n° 40, Amarelo FD&C n° 6 e corante verde AGROTAIN® ULTRA ou uma combinação dos mesmos.
[054] Em uma outra modalidade, a presente revelação fornece uma composição fertilizante compreendendo qualquer composição de inóculo microbiano agrícola em qualquer modalidade da presente revelação, sendo que o fertilizante pode ser um fertilizante granulado, como ureia granulada, um fertilizante líquido, como ureia- nitrato de amônio (UAN), uma solução aquosa de ureia e nitrato de amônia, ou amônia anidra (NH3).
[055] Em uma outra modalidade, a presente revelação fornece um método para acentuação de um traço de produtividade em uma planta de interesse, em comparação com o traço de produtividade de uma planta de referência ou controle, sendo que o método compreende colocar uma planta, uma parte de planta ou uma semente de planta de interesse, ou o solo circundante, em contato com uma quantidade eficaz de uma composição de inóculo microbiano agrícola da presente revelação, sendo que a composição de inóculo microbiano compreende:. i. ao menos uma cepa microbiana agrícola proveniente de uma ou mais espécies microbianas, e ii. ao menos um agente ativo, sendo que o agente ativo é um inibidor de urease, um inibidor de nitrificação, ou uma combinação dos mesmos, sendo que a composição de inóculo microbiano agrícola na quantidade eficaz é eficaz na acentuação do traço de produtividade na planta de interesse, em relação ao traço de produtividade na planta de referência ou de controle, quando a planta de interesse é colocada em contato com a quantidade eficaz.
[056] Em uma outra modalidade, a presente revelação fornece um método para acentuar um traço de produtividade na planta, como aumentar o crescimento vegetal e/ou a produtividade, sendo que o método compreende aplicar à planta, à parte de planta, às sementes de planta ou ao solo no qual é cultivada a planta ou a semente de planta, uma quantidade eficaz de uma composição de inóculo microbiano agrícola de qualquer modalidade da presente revelação.
[057] Em uma outra modalidade, a presente revelação fornece um método para aprimorar a qualidade do solo, sendo que o método compreende aplicar ao solo, ou às plantas ou sementes de plantas no dito solo, uma quantidade eficaz de uma composição de inóculo microbiano agrícola conforme revelada em qualquer modalidade da presente revelação.
[058] Em qualquer modalidade da revelação, as concentrações de cada cepa microbiana agrícola a ser adicionada às composições de inóculos microbianos e fertilizantes conforme aqui reveladas dependerão de uma variedade de fatores, incluindo a identidade e o número de cepas individuais empregadas, a espécie de planta sendo tratada, a natureza e as condições do solo a ser tratado, a natureza exata da composição de inóculo microbiano ou fertilizante a ser aplicada, o tipo e a forma do agente ativo, a forma na qual o inóculo ou fertilizante é aplicado e os meios pelos quais é aplicado, e o estágio da estação de crescimento da planta durante o qual ocorre a aplicação. Para qualquer desses casos, as concentrações adequadas precisam ser eficazes na acentuação do traço de produtividade na presença do agente ativo e podem ser determinadas pelo versado na técnica usando apenas experimentos de rotina. Somente a título de exemplo, a concentração de cada cepa presente na composição de inóculo ou fertilizante pode ser de cerca de 1,0 x 102 unidades formadoras de colônia (UFC)/ml a cerca de 5,0 x 1012 UFC/ml por acre, de cerca de 1,0 x 102 UFC/ml a cerca de 5,0 x 1010 UFC/ml por acre, de cerca de 1,0 x 102 UFC/ml a cerca de 5,0 x 108 UFC/ml por acre, de cerca de 1,0 x 102 UFC/ml a cerca de 5,0 x 106 UFC/ml por acre, ou de cerca de 1,0 x 102 UFC/ml a cerca de 5,0 x 104 UFC/ml por acre.
[059] Em uma modalidade da presente revelação, uma fonte alimentar microbiana, como cinzas de algas ou glicerol, pode estar incluída em qualquer modalidade da presente revelação.
[060] O termo "espécies microbianas" refere-se a variantes ou mutantes, de ocorrência natural ou especificamente desenvolvidas, de espécies microbianas como bactérias e fungos, conforme aqui revelado. Variantes ou mutantes podem ou não ter as mesmas características biológicas identificadoras das cepas específicas aqui exemplificadas, desde que compartilhem propriedades vantajosas similares em termos de promoção do crescimento vegetal e fornecimento de nutrientes para o crescimento da planta no solo. As variantes de certas cepas microbianas podem incluir, mas não se limitam a, aquelas desenvolvidas por meio de técnicas de integração gênica, como aquelas mediadas por elementos insercionais ou transpósons, ou por recombinação homóloga, outras técnicas de DNA recombinante para modificar, inserir, deletar, ativar ou silenciar genes, fusão de protoplastos intraespecífica, mutagênese por irradiação com luz ultravioleta ou raios X, ou mediante tratamento com um mutágeno químico como nitrosoguanidina, sulfonato de metilmetano, mostarda de nitrogênio e similares, bem como transdução mediada por bacteriófago. Os métodos adequados e aplicáveis são bem conhecidos na técnica e são descritos, por exemplo, em J. H. Miller, Experiments in Molecular Genetics, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, EUA (1972); J. H. Miller, A Short Course in Bacterial Genetics, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, EUA (1992); e J. Sambrook, D. Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3a. Edição, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, EUA (200l).
[061] O termo "produtividade da planta" ou "traço de produtividade", como usado aqui, refere-se a qualquer aspecto do crescimento ou desenvolvimento de uma planta que é uma razão pela qual a planta é cultivada. Dessa forma, para os propósitos da presente descrição, a "produtividade da planta" aprimorada ou aumentada, ou o "traço de produtividade acentuado" se refere amplamente a aprimoramentos na biomassa ou na produtividade de folhas, caules, grãos, frutos, vegetais, flores ou outras partes da planta que são colhidas ou usadas para vários propósitos, e aprimoramentos no crescimento de partes da planta, inclusive caules, folhas e raízes.
[062] O termo "aprimorar a qualidade do solo" se refere a aumentar a quantidade e/ou a disponibilidade de nutrientes exigidos por, ou benéficos a, plantas, para crescimento. Somente como exemplo, esses nutrientes incluem nitrogênio, fósforo, potássio, cobre, zinco, boro e molibdênio. Também abrangida pelo termo "aprimorar a qualidade do solo" é a redução ou minimização da quantidade de um elemento que pode ser prejudicial ao crescimento ou desenvolvimento vegetal como, por exemplo, ferro e manganês. Dessa forma, aprimorar a qualidade do solo mediante o uso de inóculos microbianos e composições fertilizantes da presente revelação ajuda e promove, assim, o crescimento de plantas no solo.
[063] O termo "quantidade eficaz" se refere a uma quantidade de composição de inóculo microbiano ou fertilizante aplicado a uma dada área de solo ou vegetação que é suficiente para promover um ou mais resultados benéficos ou desejados, por exemplo em termos de taxas de crescimento vegetal, produtividade da cultura agrícola, ou disponibilidade de nutrientes no solo. Uma "quantidade eficaz" pode ser fornecida em uma ou mais administrações. A quantidade exata necessária irá variar dependendo de fatores como a identidade e o número de cepas individuais empregadas, a espécie de planta sendo tratada, a natureza e as condições do solo a ser tratado, a natureza exata da composição de inóculo microbiano ou fertilizante a ser aplicada, a forma na qual o inóculo ou fertilizante é aplicado e os meios pelos quais é aplicado, e o estágio da estação de crescimento da planta durante o qual ocorre a aplicação. Para qualquer desses casos, uma "quantidade eficaz" adequada pode ser determinada pelo versado na técnica, usando apenas experimentos de rotina.
[064] O termo "viabilidade" na presente revelação se refere à capacidade de divisão repetida de uma célula microbiana sobre uma superfície de ágar para produzir uma colônia visível. A temperatura para a avaliação de viabilidade é de cerca de 37 °C na presente revelação. O tempo de viabilidade é contado a partir do momento em que uma cultura microbiana recém preparada em um caldo nutriente é adicionada a um solvente orgânico, ou a uma mistura de mais de um solvente orgânico. Após a cultura microbiana em um caldo nutriente ser adicionada ao solvente orgânico, ou à mistura de mais de um solvente, uma pequena quantidade da mistura é removida a um certo tempo, para incubação a cerca de 37 °C. O período de tempo entre o momento em que a cultura microbiana em um caldo nutriente é adicionada a um solvente orgânico e o momento em que a mistura é removida para incubação é definido como o tempo de viabilidade para o propósito de avaliação de viabilidade.
[065] O propósito do teste de viabilidade de bactérias consiste em avaliar a viabilidade de espécies de bactérias agricolamente benéficas em soluções com solventes orgânicos.
[066] Espécies de bactérias agricolamente benéficas, tanto gram-negativas como gram-positivas são usadas para o teste.
[067] As espécies de bactérias agricolamente benéficas foram obtidas junto à American Type Culture Collection (ATCC), ou à Agricultural Research Service Culture Collection. As espécies de bactérias foram cultivadas em meio adequado, caldo LB, caldo nutriente, e verificadas microscopicamente quanto à pureza com coloração Gram e em placas de Petri. As espécies de bactérias são puras, isto é, não foi observada qualquer colônia incomum.
[068] Todas as amostras para teste são preparadas por meio de um método em duas etapas.
[069] Primeiro, as bactérias agricolamente benéficas selecionadas foram cultivadas de um dia para o outro em meio Luria-Bertani (LB) a 37 °C com agitação. A proliferação foi medida com um espectrofotômetro Bausch and Lomb Spectronic a 600 nm (OD600) para fornecer amostras com densidade óptica celular a 600 nm (OD600) entre 1,2 e 1,5. As culturas de um dia para o outro tipicamente contém de 1,6 x 108 a 3,4 x 108 unidades formadoras de colônia por ml (UFC/ml).
[070] Segundo, 0,5 ml da amostra preparada da espécie de bactéria em meio LB foi adicionada a um solvente orgânico ou a uma mistura de solventes orgânicos (4,5 ml).
[071] Uma amostra de 10 μl da solução de solvente orgânico com a espécie de bactéria é removida imediatamente para avaliação de viabilidade das bactérias (T = 0).
[072] A parte restante da solução de solvente orgânico com a espécie de bactéria é incubada a 37 °C para futuro teste. Um volume de 10 μl de amostra foi removido da solução de solvente orgânico incubada com a espécie de bactéria a T=2 horas, 4 horas, 1 dia, 2 dias, 5 dias, 7 dias, 9 dias, 12 dias, 15 dias, 18 dias e 21 dias para avaliação da viabilidade das bactérias.
[073] A cada vez, a amostra (10 μl) que foi removida para avaliação de viabilidade foi colocada sobre placas de ágar, o que foi incubado de um dia para o outro a 37 °C. As colônias de bactérias presentes nas placas indicam que as bactérias toleraram o solvente e são, portanto, viáveis. Se não houver proliferação de colônias de bactérias, as bactérias não demonstraram tolerância ao solvente.
[074] As bactérias agricolamente benéficas que são viáveis por ao menos duas horas a partir do momento em que a amostra de bactérias é adicionada a um solvente orgânico são consideradas como sendo viáveis na solução de solvente orgânico da presente invenção.
[075] O Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 23842) proporcionou ao menos duas horas de viabilidade em NMP e ao menos 5 dias de viabilidade em glicerol.
[076] O Bacillus licheniformis (ATCC 14580) proporcionou ao menos um dia de viabilidade em éter monobutílico de trietileno glicol, ao menos 5 dias de viabilidade em PG, ao menos 5 dias de viabilidade em NMP, ao menos 21 dias de viabilidade em glicerol e ao menos 21 dias de viabilidade em DMSO.
[077] Cada um dentre o Bacillus licheniformis (B-642) e o Bacillus licheniformis (B-14368) proporcionou ao menos 21 dias de viabilidade em PG, ao menos 21 dias de viabilidade em NMP, ao menos 21 dias de viabilidade em éter monobutílico de trietileno glicol, ao menos 21 dias de viabilidade em glicerol e ao menos 21 dias de viabilidade em DMSO.
[078] O Bacillus thuringiensis (ATCC 10792) proporcionou ao menos 2 horas de viabilidade em PG, ao menos 2 horas de viabilidade em NMP, ao menos 2 horas de viabilidade em éter monobutílico de trietileno glicol, ao menos 21 dias de viabilidade em glicerol e ao menos 21 dias de viabilidade em DMSO.
[079] Cada um dentre o Bacillus thuringiensis (HD-17) e o Bacillus thuringiensis (HD-1) proporcionou ao menos 21 dias de viabilidade em PG, ao menos 21 dias de viabilidade em NMP, ao menos 21 dias de viabilidade em éter monobutílico de trietileno glicol, ao menos 21 dias de viabilidade em glicerol e ao menos 21 dias de viabilidade em DMSO.
[080] O Bacillus pumilis (NRS-272) proporcionou ao menos 21 dias de viabilidade em PG, ao menos 21 dias de viabilidade em éter monobutílico de trietileno glicol, ao menos 21 dias de viabilidade em glicerol e ao menos 21 dias de viabilidade em DMSO.
[081] Surpreendentemente, todas as três espécies Gram-negativas agricolamente benéficas de Pseudomonas fluorescens (ATCC 53958), Pseudomonas putida (ATCC 49128) e Pseudomonas chlororaphis (ATCC 55670) selecionadas, das quais se esperava que tivessem melhor tolerância a solvente, perderam quase instantaneamente a viabilidade quando as amostras de bactérias preparadas com OD600 entre 1,3 e 1,5 em caldo nutriente foram adicionadas a todos os solventes orgânicos testados, exceto glicerol.
[082] O teste de viabilidade de bactérias em soluções com solventes orgânicos na presente revelação demonstrou que todos os exemplos de Bacillus licheniformis e Bacillus licheniformis apresentaram viabilidade com um intervalo de tempo de pelo menos 2 horas a pelo menos 21 dias em uma solução com ao menos um dentre os solventes orgânicos PG, NMP, éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol e DMSO.
[083] O teste de viabilidade de bactérias em soluções com solventes orgânicos na presente revelação demonstrou que cada um dentre os bacilos das cepas Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 23842), Bacillus licheniformis (ATCC 14580), Bacillus licheniformis (B-642), Bacillus licheniformis (B-14368), Bacillus thuringiensis (ATCC 10792), Bacillus thuringiensis (HD-17), Bacillus thuringiensis (HD-1) e Bacillus pumilis (NRS-272) apresentou viabilidade com um intervalo de tempo de pelo menos 2 horas a pelo menos 21 dias em uma solução com ao menos um dentre os solventes orgânicos PG, NMP, éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol e DMSO. Exemplos Tabela 1: Exemplos com viabilidade de ao menos 2 horas em ao menos um dentre os solventes orgânicos PG, NMP, éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol ou DMSO
Claims (28)
1. Composição de inóculo microbiano agrícola com base em veículo, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende: i. ao menos uma espécie de Bacillus agricolamente benéfica selecionada do grupo consistindo em Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilis, e qualquer combinação dos mesmos; ii. ao menos um solvente orgânico selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO), e qualquer combinação dos mesmos, em que o ao menos um solvente orgânico está presente em uma quantidade de 20 a 99 por cento em peso, com base no peso total da composição de inóculo microbiano; e iii. um inibidor de urease selecionado do grupo consistindo em triamida N-(n- butil)tiofosfórica (NBPT), triamida N-(n-butil)fosfórica, tiofosforil triamida, fosforodiamidato de fenila, triamida N-cicloexil fosfórica, triamida N-cicloexil tiofosfórica, triamida fosfórica, hidroquinona, p-benzoquinona, hexamidociclotrifosfazeno, tiopiridinas, tiopirimidinas, tiopiridina-N-óxidos, N,N-di-halo-2-imidazolidinona, N-halo-2-oxazolidinona, triamida N-(2- nitrofenil)tiofosfórica, triamida N-(2-nitrofenil)fosfórica, e qualquer combinação dos mesmos.
2. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que a espécie de Bacillus agricolamente benéfica é selecionada do grupo consistindo em Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, e qualquer combinação dos mesmos;
3. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que a espécie de Bacillus agricolamente benéfica é selecionada do grupo de cepas que consiste em Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 23842), Bacillus licheniformis (ATCC 14580), Bacillus licheniformis (B-642), Bacillus licheniformis (B-14368), Bacillus thuringiensis (ATCC 10792), Bacillus thuringiensis (HD- 17), Bacillus thuringiensis (HD-1), Bacillus pumilis (NRS-272), e qualquer combinação dos mesmos.
4. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que o inibidor de urease é triamida N-(n- butil)tiofosfórica (NBPT).
5. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende adicionalmente um inibidor de nitrificação selecionado do grupo consistindo em 2-cloro-6-triclorometilpiridina, 5-etoxi- 3-triclorometil-1,2,4-tiadiazol, dicianodiamida, 2-amino-4-cloro-6-metil-pirimidina, 1,3- benzotiazol-2-tiol, 4-amino-N-1,3-tiazol-2-ilbenzeno sulfonamida, tioureia, guanidina, fosfato de 3,4-dimetilpirazol, 2,4-diamino-6-triclorometil-5-triazina, poliéter ionóforos, 4- amino-1,2,4-triazol, 3-mercapto-1,2,4-triazol, azida de potássio, bissulfeto de carbono, tritiocarbonato de sódio, ditiocarbamato de amônio, metilcarbamato de 2,3,-di-hidro- 2,2-dimetil-7-benzofuranol, éster metílico de N-(2,6-dimetilfenil)-N-(metoxiacetil)- alanina, tiossulfato de amônio, 1-hidroxipirazol, 3-metilpirazol-1-carboxamida, 3- metilpirazol, 3,5-dimetilpirazol, 1,2,4-triazol, inibidor de nitrificação G77 (registro CAS n° 1373256-33-7), e qualquer combinação dos mesmos.
6. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADA pelo fato de que o inibidor de nitrificação é dicianodiamida, inibidor de nitrificação G77 (registro CAS n° 1373256-33-7) ou uma combinação dos mesmos.
7. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que a porcentagem em peso do inibidor de urease está na faixa de 0,02% a 80%, com base no peso total da composição de inóculo microbiano agrícola.
8. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 7, CARACTERIZADA pelo fato de que a porcentagem em peso do inibidor de urease está na faixa de 10% a 60%.
9. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que a espécie de Bacillus agricolamente benéfica tem ao menos 2 horas de viabilidade a partir do momento em que a dita espécie de Bacillus agricolamente benéfica entra em contato com o dito solvente orgânico.
10. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que a concentração da espécie de Bacillus agricolamente benéfica está na faixa de 1,0 x 102 a 1,0 x 1012 esporos/ml.
11. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende adicionalmente um corante.
12. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende propilenoglicol e N-metil-2-pirrolidona.
13. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 12, CARACTERIZADA pelo fato de que a porcentagem em peso de propilenoglicol está na faixa de 40% a 70%, com base no peso total da composição de inóculo microbiano agrícola, a porcentagem em peso de N-metil-2-pirrolidona está na faixa de 15% a 40%, com base no peso total da composição de inóculo microbiano agrícola, o inibidor de urease é NBPT, e a porcentagem em peso de NBPT está na faixa de 10% a 30%, com base no peso total da composição de inóculo microbiano.
14. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende propilenoglicol, N-metil-2- pirrolidona, e éter monobutílico de trietileno glicol.
15. Composição de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 14, CARACTERIZADA pelo fato de que a porcentagem em peso de propilenoglicol está na faixa de 10% a 30%, com base no peso total da composição de inóculo microbiano agrícola, a porcentagem em peso de N-metil-2-pirrolidona está na faixa de 30% a 60%, com base no peso total da composição de inóculo microbiano agrícola, a porcentagem em peso de éter monobutílico de trietileno glicol está na faixa de 1% a 5%, com base no peso total da composição de inóculo microbiano agrícola, o inibidor de urease é NBPT, e a porcentagem em peso de NBPT está na faixa de 15% a 40%, com base no peso total da composição de inóculo microbiano agrícola.
16. Composição fertilizante, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende a composição de inóculo microbiano agrícola como definida na reivindicação 1.
17. Método para promover o crescimento de plantas, a produtividade de plantas e/ou a qualidade do solo, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende a aplicação de uma quantidade eficaz, a uma planta, a uma parte de planta, a uma semente de planta ou solo, da composição de inóculo microbiano agrícola como definida na reivindicação 1
18. Kit de inóculo microbiano agrícola, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende: Parte A, em que a Parte A compreende um inibidor de urease e ao menos um solvente orgânico, em que o dito inibidor de urease é selecionado do grupo consistindo em triamida N-(n-butil)tiofosfórica (NBPT), triamida N-(n-butil)fosfórica, tiofosforil triamida, fosforodiamidato de fenila, triamida N-cicloexil fosfórica, triamida N-cicloexil tiofosfórica, triamida fosfórica, hidroquinona, p-benzoquinona, hexamidociclotrifosfazeno, tiopiridinas, tiopirimidinas, tiopiridina-N-óxidos, N,N-di-halo- 2-imidazolidinona, N-halo-2-oxazolidinona, triamida N-(2-nitrofenil)tiofosfórica, triamida N-(2-nitrofenil)fosfórica, e qualquer combinação dos mesmos; e em que o dito solvente orgânico é selecionado do grupo que consiste em propilenoglicol (PG), N-metil-2-pirrolidona (NMP), éter monobutílico de trietileno glicol, glicerol, sulfóxido de dimetila (DMSO), e qualquer combinação dos mesmos; e Parte B, em que a Parte B compreende ao menos uma espécie de Bacillus agricolamente benéfica selecionada do grupo consistindo em Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilis, e qualquer combinação dos mesmos, em que cada de Parte A e Parte B está contida em um recipiente separado, e em que o ao menos um solvente orgânico está presente em uma quantidade de 20 a 99 por cento em peso, com base no peso combinado de Parte A e Parte B.
19. Kit de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 18, CARACTERIZADO pelo fato de que a Parte B compreende ao menos uma espécie de Bacillus selecionada do grupo consistindo em Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, e qualquer combinação dos mesmos.
20. Kit de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 18, CARACTERIZADO pelo fato de que a Parte B compreende ao menos uma cepa de Bacillus agricolamente benéfica, selecionada do grupo que consiste em Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 23842), Bacillus licheniformis (ATCC 14580), Bacillus licheniformis (B-642), Bacillus licheniformis (B-14368), Bacillus thuringiensis (ATCC 10792), Bacillus thuringiensis (HD-17), Bacillus thuringiensis (HD-1), Bacillus pumilis (NRS-272), e qualquer combinação dos mesmos.
21. Kit de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 18, CARACTERIZADO pelo fato de que o inibidor de urease é triamida N-(n- butil)tiofosfórica (NBPT).
22. Kit de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 21, CARACTERIZADO pelo fato de que a Parte A compreende propilenoglicol e N-metil- 2-pirrolidona.
23. Kit de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 22, CARACTERIZADO pelo fato de que a porcentagem em peso de propilenoglicol está na faixa de 40% a 70%, com base no peso total da Parte A, a porcentagem em peso de N-metil-2-pirrolidona está na faixa de 15% a 40%, com base no peso total da Parte A, e a porcentagem em peso de NBPT está na faixa de 10% a 30%, com base no peso total da Parte A.
24. Kit de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 21, CARACTERIZADO pelo fato de que a Parte A compreende propilenoglicol, N-metil-2- pirrolidona, e éter monobutílico de trietileno glicol.
25. Kit de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 24, CARACTERIZADO pelo fato de que a porcentagem em peso de propilenoglicol está na faixa de 10% a 30%, com base no peso total da Parte A, a porcentagem em peso de N- metil-2-pirrolidona está na faixa de 30% a 60%, com base no peso total da Parte A, a porcentagem em peso de éter monobutílico de trietileno glicol está na faixa de 1% a 5%, com base no peso total da Parte A, e a porcentagem em peso de NBPT está na faixa de 15% a 40%, com base no peso total da Parte A.
26. Kit de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 18, CARACTERIZADO pelo fato de que a espécie de Bacillus agricolamente benéfica tem ao menos 2 horas de viabilidade a partir do momento em que a dita espécie de Bacillus agricolamente benéfica na Parte A entra em contato com o dito solvente orgânico na Parte B.
27. Kit de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 18, CARACTERIZADO pelo fato de que a porcentagem em peso do inibidor de urease está na faixa de 0,02% a 80%, com base no peso total da Parte A.
28. Kit de inóculo microbiano agrícola, de acordo com a reivindicação 18, CARACTERIZADO pelo fato de que a concentração da espécie de Bacillus agricolamente benéfica está na faixa de 1,0 x 102 a 1,0 x 1012 esporos/ml, após a Parte A ser misturada com a Parte B.
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