BR112014018284B1 - PEPTIDE ANTAGONIST RELATED TO THE CALCITONIN GENE, PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS AND USE THEREOF - Google Patents

Abstract

ANTAGONISTAS DO PEPTÍDEO RELACIONADO AO GENE MODIFICADO DA CALCITONINA, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, MÉTODOS PARA TRATAR CEFALEIA E CONDIÇÃO ASSOCIADA A NÍVEIS ANORMAIS DO CGRP E USOS DE ANTAGONISTA DO PEPTÍDEO RELACIONADO AO GENE MODIFICADO DA CALCITONINA E DE COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA. As concretizações proporcionam um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado que inclui um fragmento de N-terminal do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado ou de um membro da família protéica relacionada onde ao menos dois resíduos do fragmento de N-terminal são cisteina (Cis) e ao menos um aminoácido compreende uma substituição não treonina de um resíduo de treonina (Tre); um núcleo central, o qual compreende uma hélice a; e um fragmento de C-terminal do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado ou de um membro da família proteica relacionada que compreende uma amida C-terminal e onde ao menos um aminoácido do fragmento de C-terminal é fenilalanina (Fen), prolina (Pro), tirosina (Tir) ou hidroxiprolina (Hip), ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, bem como composições, inclusive composições farmacêuticas, que compreendem um peptídeo em questão. As concretizações proporcionam ainda métodos de tratamento, inclusive métodos para tratar da enxaqueca, os métodos geralmente envolvendo administrar a um (...).ANTAGONISTS OF THE PEPTIDE RELATED TO THE MODIFIED CALCITONIN GENE, PHARMACEUTICAL COMPOSITION, METHODS FOR TREATING HEADACHE AND CONDITIONS ASSOCIATED WITH ABNORMAL LEVELS OF CGRP AND USES OF THE ANTAGONIST OF THE PEPTIDE RELATED TO THE MODIFIED CALCITONIN GENE AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION. Embodiments provide a modified calcitonin gene-related peptide antagonist that includes an N-terminal fragment of the modified calcitonin gene-related peptide or a member of the related protein family wherein at least two residues of the N-terminal fragment are cysteine. (Cis) and at least one amino acid comprises a non-threonine substitution of a threonine residue (Tre); a central core, which comprises an α-helix; and a C-terminal fragment of the modified calcitonin gene-related peptide or a member of the related protein family comprising a C-terminal amide and wherein at least one amino acid of the C-terminal fragment is phenylalanine (Phen), proline ( Pro), tyrosine (Tyr) or hydroxyproline (Hip), or a pharmaceutically acceptable salt thereof, as well as compositions, including pharmaceutical compositions, which comprise a peptide in question. The embodiments further provide methods of treatment, including methods for treating migraine, the methods generally involving administering to a (...).

Description

REFERÊNCIA REMISSIVA A PEDIDOS CORRELATOSREFERENCE TO RELATED REQUESTS

[001] O presente Pedido reivindica prioridade ao Pedido de Patente Provisório dos EUA 61/591.236, depositado no dia 26 de janeiro de 2012 e intitulado “PEPTIDE ANTAGONISTS OF THE CALCITONIN CGRP FAMILY OF PEPTIDE HORMONES AND THEIR USE”, cujo conteúdo incorpora-se ao presente documento na íntegra por referência.[001] This Application claims priority to US Provisional Patent Application 61/591,236, filed on January 26, 2012 and entitled “PEPTIDE ANTAGONISTS OF THE CALCITONIN CGRP FAMILY OF PEPTIDE HORMONES AND THEIR USE”, the content of which is incorporated this document in full by reference.

LISTAGEM DE SEQUÊNCIASSEQUENCE LISTING

[002] O presente pedido está sendo depositado junto com uma listagem de sequências em formato eletrônico. A Listagem de Sequências está sendo fornecida na forma de um arquivo intitulado CSOAROOIWOSEQLIST.TXT, criado no dia 24 de janeiro de 2012, com cerca de 17 kb de tamanho. As informações no formato eletrônico da listagem de sequências incorporam-se ao presente documento na íntegra por referência.[002] The present application is being filed together with a list of sequences in electronic format. The Sequence Listing is being provided in the form of a file entitled CSOAROOIWOSEQLIST.TXT, created on January 24, 2012, with approximately 17 kb in size. The information in the electronic format of the sequence listing is incorporated into this document in its entirety by reference.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃOBASICS OF THE INVENTION Campo da InvençãoField of Invention

[003] A presente invenção refere-se a antagonistas peptídicos da família de hormônios peptídicos calcitonina/peptídeos relacionados ao gene da calcitonina (CT/CGRP) e a usos terapêuticos destes.[003] The present invention relates to peptide antagonists of the calcitonin/calcitonin gene-related peptide (CT/CGRP) family of peptide hormones and their therapeutic uses.

Descrição do Estado da TécnicaDescription of the State of the Art

[004] A família de peptídeos CT/CGRP inclui o peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP), a adrenomedulina (ADM), a intermedina (IM), a calcitonina (CT) e a amilina. As ações biológicas desses peptídeos são mediadas pela ligação com dois receptores acoplados à proteína G do tipo II intimamente relacionados, o receptor da calcitonina (CTR) e o receptor semelhante ao receptor da calcitonina (CRLR) (Christopoulos et al., 1999, Mol. Pharmacol., 56: 235 a 242; Poyner et al., 2002, Pharmacol. Rev., 54: 233 a 246). Embora o receptor da calcitonina seja o principal mediador para a ação da calcitonina, ele preferencialmente liga-se à amilina quando é associado a uma proteína modificadora da atividade de receptores (RAMP) (vide, por exemplo, Tilikaratne et al., 2000, J. Pharmacol. Exp. Ther., 294(l): 61 a 72). Estudos sobre clonagem e estudos funcionais demonstraram que o CGRP, a ADM, a IM e, em menor grau, também a amilina interagem com diferentes combinações do CRLR e das três proteínas modificadoras da atividade de receptores (RAMP-1, RAMP-2 e RAMP-3); vide, por exemplo, McLatchie et al., 1998, Nature, 393: 333 a 339, e Roh et al., 2004, JBC, 279(8): 7.264 a 7.274). Na verdade, a coexpressão do receptor semelhante ao receptor da calcitonina (CRLR) e de proteínas modificadoras da atividade de receptores (RAMPs) é necessária para gerar receptores funcionais para o peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP), a adrenomedulina (ADM) e a intermedina (IM). A formação de heterodímeros entre RAMPs e o CRLR é essencial para o direcionamento correto à superfície celular e para as características farmacológicas de receptores do CGRP, da ADM e da IM. A coexpressão da RAMP-1 com o CRLR acarreta na formação de um receptor do CGRP, ao passo que a coexpressão da RAMP-2 e da RAMP-3 com o CRLR forma receptores da ADM e da IM, respectivamente (Miret et al., 2002, JBC, 277(9): 6.881 a 6.887). A IM demonstrou ser um agonista não seletivo para todos os correceptores da RAMP/CRLR.[004] The CT/CGRP family of peptides includes calcitonin gene-related peptide (CGRP), adrenomedullin (ADM), intermedin (IM), calcitonin (CT) and amylin. The biological actions of these peptides are mediated by binding to two closely related type II G-protein-coupled receptors, the calcitonin receptor (CTR) and the calcitonin receptor-like receptor (CRLR) (Christopoulos et al., 1999, Mol. Pharmacol., 56: 235 to 242; Poyner et al., 2002, Pharmacol. Rev., 54: 233 to 246). Although the calcitonin receptor is the main mediator for calcitonin action, it preferentially binds to amylin when it is associated with a receptor activity modifying protein (RAMP) (see, for example, Tilikaratne et al., 2000, J Pharmacol. Exp. Ther., 294(l): 61 to 72). Cloning and functional studies have demonstrated that CGRP, ADM, IM and, to a lesser extent, also amylin interact with different combinations of CRLR and the three receptor activity-modifying proteins (RAMP-1, RAMP-2 and RAMP -3); see, for example, McLatchie et al., 1998, Nature, 393: 333 to 339, and Roh et al., 2004, JBC, 279(8): 7,264 to 7,274). Indeed, coexpression of calcitonin receptor-like receptor (CRLR) and receptor activity-modifying proteins (RAMPs) is required to generate functional receptors for calcitonin gene-related peptide (CGRP), adrenomedullin (ADM), and the intermedine (IM). The formation of heterodimers between RAMPs and CRLR is essential for correct targeting to the cell surface and for the pharmacological characteristics of CGRP, ADM and IM receptors. Coexpression of RAMP-1 with CRLR leads to the formation of a CGRP receptor, whereas coexpression of RAMP-2 and RAMP-3 with CRLR forms ADM and IM receptors, respectively (Miret et al., 2002, JBC, 277(9): 6,881 to 6,887). IM has been shown to be a non-selective agonist for all RAMP/CRLR coreceptors.

[005] As funções fisiológicas dos peptídeos hormonais na família CT/CGRP são determinadas pela especificidade das ligações com os receptores e pelos perfis de expressão no tecido de ligantes individuais e de seus respectivos receptores e demonstraram envolvimento na morfogênese cardiovascular, na neurotransmissão sensorial, em reações inflamatórias, no comportamento nociceptivo e na homeostase da glicose (vide, por exemplo, Hay et al., 2001, Trends Pharmacol. Sci., 22: 57 a 59; Shindo et al. 2001, Circulation, 104: 1.964 a 1.971; Zhang et al., 2001, Pain, 89: 265 a 273; Salmon et al., 1999, Neuroreport, 10: 849 a 854; Salmon et al., 2001, Nat. Neurosci., 4: 357 a 358; e Mulder et al., 2000, Am. J. Physiol., 278: E684 a E691).[005] The physiological functions of hormonal peptides in the CT/CGRP family are determined by the specificity of receptor binding and tissue expression profiles of individual ligands and their respective receptors and have demonstrated involvement in cardiovascular morphogenesis, sensory neurotransmission, in inflammatory reactions, nociceptive behavior and glucose homeostasis (see, for example, Hay et al., 2001, Trends Pharmacol. Sci., 22: 57 to 59; Shindo et al. 2001, Circulation, 104: 1964 to 1971); Zhang et al., 2001, Pain, 89: 265 to 273; Salmon et al., 1999, Neuroreport, 10: 849 to 854; Salmon et al., 2001, Nat. Neurosci., 4: 357 to 358; and Mulder et al., 2000, Am. J. Physiol., 278: E684 to E691).

[006] O CGRP (peptídeo relacionado ao gene da calcitonina), um peptídeo bastante estudado na família dos hormônios peptídicos CT/CGRP, é um neuropeptídeo sensorial com forte ação vasodilatória e cardiotônica, conforme descreve a Patente dos EUA no 4.530.838, em nome de Evans et al. O CGRP se faz presente no sistema nervoso central e no sistema nervoso periférico e concentra-se nessas áreas do corpo recebendo sinais sensoriais advindos do corno dorsal com quantidades limitadas associadas a sinais autonômicos. No cérebro, o peptídeo se faz presente nos núcleos de nervos craniais sensoriais e motores e em corpos celulares no hipotálamo, na área preóptica, no tálamo ventromedial, no hipocampo e em seus semelhantes (Poyner, D. 1992, Pharmac. Ther. 56: 23 a 51).[006] CGRP (calcitonin gene-related peptide), a widely studied peptide in the CT/CGRP family of peptide hormones, is a sensory neuropeptide with strong vasodilatory and cardiotonic action, as described in US Patent No. 4,530,838, in name of Evans et al. CGRP is present in the central nervous system and peripheral nervous system and is concentrated in these areas of the body, receiving sensory signals from the dorsal horn with limited amounts associated with autonomic signals. In the brain, the peptide is present in the nuclei of sensory and motor cranial nerves and in cell bodies in the hypothalamus, preoptic area, ventromedial thalamus, hippocampus and the like (Poyner, D. 1992, Pharmac. Ther. 56: 23 to 51).

[007] Pressupõe-se que inibidores no nível receptor para o CGRP são úteis em condições patofisiológicas nas quais ocorre a ativação excessiva do receptor do CGRP. Algumas dessas condições incluem vasodilatação neurogênica, inflamação neurogênica, enxaqueca, cefaleia em salvas e outras cefaleias, lesões térmicas, choque circulatório, fluxo da menopausa e asma. A ativação do receptor do CGRP foi particularmente associada à patogênese da enxaqueca (Edvinsson L., 2001, CNS Drugs, 15(10): 745 a 53; Williamson, D. J., 2001, Microsc. Res. Tech., 53: 167 a 178.; Grant, A. D., 2002, Brit. J Pharmacol., 135: 356 a 362). As enxaquecas são reconhecidas pela força da cefaleia que decorre dessa patologia. Acredita-se que a cefaleia associada às enxaquecas resulta da profunda vasodilatação cerebral associada a eventos de enxaqueca. Fibras nervosas que contêm o CGRP inervam em vasos cerebrais e durais, onde acredita-se que o CGRP prolongue a vasodilatação (Moskowitz, 1992, Trends Pharmacol. Sci., 13: 307 a 311). Além disso, os níveis séricos do CGRP são elevados durante a enxaqueca (Goadsby et al., 1990, Ann. Neurol., 28: 183 a 187), e o tratamento com fármacos antienxaqueca devolve os níveis do CGRP ao normal, coincidindo com o alívio da cefaleia (Gallai et al., 1995, Cephalalgia, 15: 384 a 390). Quem sofre de enxaqueca apresenta níveis básicos do CGRP elevados em comparação a grupos de controle (Ashina et al., 2000, Pain, 86(1 a 2): 133 a 138). A infusão intravenosa do CGRP produz cefaleia duradoura em quem sofre de enxaqueca (Lassen et al., 2002, Cephalalgia, 22(1): 54 a 61). Sendo assim, antagonistas do CGRP são o foco de pesquisas recentes como método para bloquear os receptores cerebrovasculares do CGRP e, assim, impedir a vasodilatação que causa a enxaqueca.[007] It is assumed that inhibitors at the receptor level for CGRP are useful in pathophysiological conditions in which excessive activation of the CGRP receptor occurs. Some of these conditions include neurogenic vasodilation, neurogenic inflammation, migraine, cluster headache and other headaches, thermal injuries, circulatory shock, menopausal flux, and asthma. CGRP receptor activation has been particularly associated with the pathogenesis of migraine (Edvinsson L., 2001, CNS Drugs, 15(10): 745 to 53; Williamson, D. J., 2001, Microsc. Res. Tech., 53: 167 to 178 .; Grant, A. D., 2002, Brit. J Pharmacol., 135: 356 to 362). Migraines are recognized by the strength of the headache that results from this pathology. The headache associated with migraines is believed to result from the profound cerebral vasodilation associated with migraine events. Nerve fibers containing CGRP innervate cerebral and dural vessels, where CGRP is believed to prolong vasodilation (Moskowitz, 1992, Trends Pharmacol. Sci., 13: 307 to 311). Furthermore, serum CGRP levels are elevated during migraine (Goadsby et al., 1990, Ann. Neurol., 28: 183 to 187), and treatment with antimigraine drugs returns CGRP levels to normal, coinciding with the headache relief (Gallai et al., 1995, Cephalalgia, 15: 384 to 390). Migraine sufferers have elevated baseline CGRP levels compared to control groups (Ashina et al., 2000, Pain, 86(1 to 2): 133 to 138). Intravenous infusion of CGRP produces long-lasting headaches in migraine sufferers (Lassen et al., 2002, Cephalalgia, 22(1): 54 to 61). Therefore, CGRP antagonists are the focus of recent research as a method to block cerebrovascular CGRP receptors and thus prevent the vasodilation that causes migraines.

[008] Antagonistas em pequenas moléculas e antagonistas peptídicos do receptor do CGRP são conhecidos. Eles incluem, por exemplo, o olcegepanto (BIBN4096 BS) e o telcagepanto (MK-0974), produzidos pela Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals e pela Merck & Co., Inc., respectivamente. Esses dois antagonistas em pequenas moléculas do CGRP provaram-se seguros, eficientes e bem tolerados nos ensaios clínicos iniciais para o tratamento agudo contra enxaquecas. (Vide, por exemplo, Tepper e Stillman, 2008, Headache, 48(8): 1.259 a 1.268; e Durham e Vause, 2010, CNS Drugs, 24(7): 539 a 548.) No entanto, recentemente uma investigação de Fase II sobre o uso do antagonista em pequena molécula do CGRP, MK-3207, para evitar enxaquecas foi descontinuada pela Merck & Co., Inc., devido à observação de anomalias assintomáticas no fígado em alguns pacientes em um estudo farmacológico prolongado da Fase I (“Merck Updates Status of Clinical Development Programs for Investigational CGRP Receptor Antagonist Treatments for Acute Migraine; MK-3207 Clinical Development Discontinued”, 10 de setembro de 2009, Merck & Co., Inc., Web, 1° de junho de 2011).[008] Small molecule antagonists and peptide antagonists of the CGRP receptor are known. They include, for example, olcegepant (BIBN4096 BS) and telcagepant (MK-0974), produced by Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals and Merck & Co., Inc., respectively. These two small molecule CGRP antagonists have proven to be safe, efficient and well tolerated in initial clinical trials for acute treatment of migraines. (See, for example, Tepper and Stillman, 2008, Headache, 48(8): 1259 to 1268; and Durham and Vause, 2010, CNS Drugs, 24(7): 539 to 548.) However, recently an investigation of Phase II study of the use of the small molecule CGRP antagonist, MK-3207, to prevent migraines has been discontinued by Merck & Co., Inc., due to the observation of asymptomatic liver abnormalities in some patients in an extended Phase I pharmacology study (“Merck Updates Status of Clinical Development Programs for Investigational CGRP Receptor Antagonist Treatments for Acute Migraine; MK-3207 Clinical Development Discontinued”, September 10, 2009, Merck & Co., Inc., Web, June 1, 2011) .

[009] Outras moléculas conhecidas por rivalizar com o receptor do CGRP são peptídeos que compreendem a sequência do CGRP mas carecem ao menos dos sete primeiros aminoácidos da sequência de aminoácidos do CGRP, incluindo, por exemplo, entre outros, o CGRP (8-37), o CGRP (28-37), o [Tir°]CGRP (28-37) e o CGRP (12-37). Outros antagonistas do CGRP incluem o h-a-CGRP (9-37), o h- a-CGRP (10-37), o h-a-CGRP (11-37) (Mimeault, M. et al., 1992, J. Med. Chem., 35: 2.163 a 2.168). Ainda outros antagonistas do CGRP incluem o [Ala 9]-h-a-CGRP (8-37), o [Ala 10]-h-a-CGRP (8-37), o [Ala 11]-h-a- CGRP (8-37) e o [Ala 12]-h-a-CGRP (8-37), id. Antagonistas adicionais do CGRP incluem o h-a-CGRP (19-37), o h-a-CGRP (23-37) e o acetil-h-a- CGRP (19-37) (Rovero, P. et al., 1992, Peptides, 13: 1.025 a 1.027).[009] Other molecules known to rival the CGRP receptor are peptides that comprise the CGRP sequence but lack at least the first seven amino acids of the CGRP amino acid sequence, including, for example, among others, CGRP (8-37 ), CGRP (28-37), [Tyr°]CGRP (28-37) and CGRP (12-37). Other CGRP antagonists include h-a-CGRP(9-37), h-a-CGRP(10-37), h-a-CGRP(11-37) (Mimeault, M. et al., 1992, J. Med Chem., 35: 2163 to 2168). Still other CGRP antagonists include [Ala 9]-h-a-CGRP (8-37), [Ala 10]-h-a-CGRP (8-37), [Ala 11]-h-a-CGRP (8-37) and [Ala 12]-h-a-CGRP (8-37), id. Additional CGRP antagonists include h-a-CGRP(19-37), h-a-CGRP(23-37), and acetyl-h-a-CGRP(19-37) (Rovero, P. et al., 1992, Peptides, 13 : 1.025 to 1.027).

[010] Embora vários antagonistas peptídicos do receptor do CGRP tenham provado rivalizar com o CGRP in vitro, esses antagonistas não atuaram tão bem em modelos in vivo de patologias semelhantes à enxaqueca.[010] Although several CGRP receptor peptide antagonists have proven to rival CGRP in vitro, these antagonists have not performed as well in in vivo models of migraine-like pathologies.

SUMÁRIO DA INVENÇÃOSUMMARY OF THE INVENTION

[011] Para a surpresa de todos, descobriu-se que certos aminoácidos selecionados na região N-terminal do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina, conforme revelado e descrito neste documento, são responsáveis pela atividade agonística do peptídeo. Além disso, ao substituir certos aminoácidos na região N-terminal do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina, é possível ajustar a atividade de agonista para antagonista. Ademais, descobriu-se que substituições ou modificações adicionais podem proporcionar características desejáveis adicionais aos antagonistas da presente invenção.[011] To everyone's surprise, it was discovered that certain amino acids selected in the N-terminal region of the peptide related to the calcitonin gene, as revealed and described in this document, are responsible for the agonistic activity of the peptide. Furthermore, by replacing certain amino acids in the N-terminal region of the calcitonin gene-related peptide, it is possible to adjust the activity from agonist to antagonist. Furthermore, it has been discovered that additional substitutions or modifications can provide additional desirable characteristics to the antagonists of the present invention.

[012] Algumas concretizações propõem um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, o referido antagonista tendo a estrutura da Fórmula I: onde: X1 é um fragmento de N-terminal de um peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado ou de outro membro da família peptídica CT/CGRP que compreende ao menos cinco a sete resíduos de aminoácidos, onde dois resíduos de aminoácidos do fragmento de N-terminal são Cys, onde o resíduo final é Cys e onde o resíduo imediatamente precedente ao resíduo final Cys é uma substituição não treonina de um resíduo de Thr; Y1 é um núcleo central que compreende 15 a mais de 24, 15 a 24, 15 a 22, 18 a 22 ou 19 a 20 resíduos, onde ao menos alguns dos resíduos do núcleo central são capazes de formar uma hélice a em condições fisiológicas, onde ao menos um aminoácido do núcleo central é arginina (Arg) ou Lys e o núcleo central compreende uma hélice a; e Z1 é um fragmento de C-terminal do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado ou de outro membro da família peptídica CT/CGRP que compreende de cinco a sete resíduos de aminoácidos com uma amina de C-terminal, onde ao menos um resíduo de aminoácido do fragmento de C-terminal é fenilamina (Fe), Tyr, prolina (Pro) ou Hyp; ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.[012] Some embodiments propose an antagonist of the peptide related to the modified calcitonin gene, said antagonist having the structure of Formula I: where: terminal are Cys, where the final residue is Cys and where the residue immediately preceding the final Cys residue is a non-threonine substitution of a Thr residue; Y1 is a central core comprising 15 to more than 24, 15 to 24, 15 to 22, 18 to 22 or 19 to 20 residues, where at least some of the residues of the central core are capable of forming an α-helix under physiological conditions, wherein at least one amino acid of the central core is arginine (Arg) or Lys and the central core comprises an α-helix; and Z1 is a C-terminal fragment of the modified calcitonin gene-related peptide or another member of the CT/CGRP peptide family comprising five to seven amino acid residues with a C-terminal amine, where at least one residue of amino acid of the C-terminal fragment is phenylamine (Fe), Tyr, proline (Pro) or Hyp; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

[013] Algumas concretizações propõem um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado que compreende: uma sequência de aminoácidos com ao menos 80% de identidade de sequência com uma das sequências de aminoácidos de SEQ ID No 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou 15, em que o referido peptídeo retém atividade antagonista.[013] Some embodiments propose a modified calcitonin gene-related peptide antagonist that comprises: an amino acid sequence with at least 80% sequence identity with one of the amino acid sequences of SEQ ID No. 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 or 15, wherein said peptide retains antagonistic activity.

[014] Algumas concretizações propõem uma composição farmacêutica que compreende um excipiente farmaceuticamente aceitável e um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelado e descrito neste documento.[014] Some embodiments propose a pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable excipient and a modified calcitonin gene-related peptide antagonist, as disclosed and described herein.

[015] Algumas concretizações propõem um método para tratar uma condição associada a níveis anormais do CGRP que compreende a administração de um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelado e descrito neste documento, a um indivíduo, o método compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade efetiva do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelado e descrito neste documento.[015] Some embodiments propose a method for treating a condition associated with abnormal levels of CGRP that comprises administering a modified calcitonin gene-related peptide antagonist, as disclosed and described herein, to an individual, the method comprising administering to the individual an effective amount of the modified calcitonin gene-related peptide antagonist as disclosed and described herein.

[016] Algumas concretizações propõem um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura selecionada dentre as sequências de peptídeos a seguir listadas na Tabela 1. Tabela 1 [016] Some embodiments propose a modified calcitonin gene-related peptide antagonist with the structure selected from the following peptide sequences listed in Table 1. Table 1

[017] Algumas concretizações propõem um método para administrar um agente terapêutico a uma célula. O agente terapêutico liga-se a um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelado e descrito neste documento, que seletivamente liga-se ao membro da família do receptor do CGRP.[017] Some embodiments propose a method for administering a therapeutic agent to a cell. The therapeutic agent binds to a modified calcitonin gene-related peptide antagonist, as disclosed and described herein, which selectively binds to the CGRP receptor family member.

[018] Algumas concretizações propõem uma combinação que compreende um agente terapêutico ligado a um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelado e descrito neste documento, que seletivamente liga-se ao membro da família do receptor do CGRP. Algumas concretizações propõem um método para identificar um ligante de ligação com o receptor do CGRP provendo um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado ligado a um receptor do CGRP, obter um composto de teste ou uma biblioteca de compostos de teste e identificar compostos que sejam capazes de dissociar o peptídeo relacionado ao gene da calcitonina antagonista do receptor do CGRP. Os compostos identificados por este método podem ser adicionalmente avaliados contra outros receptores do CGRP e agentes de ligação com o receptor do CGRP para identificar ligantes de ligação com o receptor CGRP selecionados.[018] Some embodiments propose a combination comprising a therapeutic agent linked to a modified calcitonin gene-related peptide antagonist, as disclosed and described herein, which selectively binds to the CGRP receptor family member. Some embodiments propose a method for identifying a CGRP receptor binding ligand by providing a modified calcitonin gene-related peptide antagonist bound to a CGRP receptor, obtaining a test compound or a library of test compounds, and identifying compounds that are capable of dissociating the peptide related to the CGRP receptor antagonist calcitonin gene. Compounds identified by this method can be further screened against other CGRP receptors and CGRP receptor binding agents to identify selected CGRP receptor binding ligands.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA CONCRETIZAÇÃO PREFERIDADETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENT

[019] Algumas concretizações propõem um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, o referido antagonista tendo a estrutura da Fórmula I: onde: X1 é um fragmento de N-terminal modificado do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina ou de outro membro da família peptídica CT/CGRP que compreende de cinco a sete resíduos de aminoácidos, onde dois resíduos de aminoácidos do fragmento de N- terminal são Cys, onde o resíduo de C-terminal do fragmento é Cys e onde o resíduo imediatamente precedente ao resíduo de Cys no C- terminal do fragmento é uma substituição não treonina de um resíduo de Thr; Y1 é um núcleo central onde ao menos um aminoácido do núcleo central é arginina (Arg) ou Lys e o núcleo central compreende uma hélice a; e Z1 é um fragmento de C-terminal modificado do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina ou de outro membro da família peptídica CT/CGRP que compreende de cinco a sete resíduos de aminoácidos com uma amina de C-terminal, onde ao menos um aminoácido do fragmento de C-terminal é fenilamina (Fe), Tyr, prolina (Pro) ou Hyp, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.[019] Some embodiments propose an antagonist of the peptide related to the modified calcitonin gene, said antagonist having the structure of Formula I: where: Cys, where the C-terminal residue of the fragment is Cys and where the residue immediately preceding the Cys residue at the C-terminus of the fragment is a non-threonine substitution of a Thr residue; Y1 is a central core where at least one amino acid of the central core is arginine (Arg) or Lys and the central core comprises an a-helix; and Z1 is a modified C-terminal fragment of the peptide related to the calcitonin gene or another member of the CT/CGRP peptide family comprising five to seven amino acid residues with a C-terminal amine, where at least one amino acid of the C-terminal fragment is phenylamine (Fe), Tyr, proline (Pro) or Hyp, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

[020] Em algumas concretizações, X1 tem as características de que um resíduo que precede a Cisteína no C-terminal em quatro, cinco ou seis posições de aminoácidos também é uma Cisteína, de modo que as duas Cisteínas supramencionadas formem uma ligação de dissulfeto. Resíduos entre os dois resíduos Cys envolvidos na ligação de dissulfeto são livres na sequência, salvo que o resíduo que precede o resíduo Cys no C-terminal do fragmento não deve ser uma Thr, conforme mencionado acima, e que não pode haver mais de duas cisteínas nos 7 resíduos no C-terminal do fragmento X1. A ligação de dissulfeto supramencionada estabiliza a estrutura de X1, facilitando tanto a formação da hélice a em Y1, abaixo, quanto a ligação de X1 ao componente transmembrana de um receptor-alvo em competição com o CGRP.[020] In some embodiments, X1 has the characteristics that a residue preceding Cysteine at the C-terminus by four, five or six amino acid positions is also a Cysteine, so that the two aforementioned Cysteines form a disulfide bond. Residues between the two Cys residues involved in the disulfide bond are free in the sequence, except that the residue preceding the Cys residue at the C-terminus of the fragment must not be a Thr, as mentioned above, and that there cannot be more than two cysteines in the 7 residues at the C-terminus of the X1 fragment. The aforementioned disulfide bond stabilizes the structure of X1, facilitating both the formation of the α helix in Y1 below and the binding of X1 to the transmembrane component of a target receptor in competition with CGRP.

[021] A introdução de um resíduo diferente de Thr na posição imediatamente N-terminal à segunda cisteína no fragmento X1 acima resulta em perda da atividade de ativação da molécula em interações com um receptor do CGRP ou com um membro da família de receptores CT/CGRP em comparação à molécula do tipo selvagem com uma Thr na referida posição, mas não pode afetar a ligação com o receptor. Como resultado, essas substituições produzem uma molécula que pode ocupar o receptor, mas que antagoniza em vez de ativar a via de transdução de sinais ao indisponibilizar o receptor para a ligação com transdutores de sinais agonistas.[021] The introduction of a residue other than Thr in the position immediately N-terminal to the second cysteine in the X1 fragment above results in loss of the molecule's activating activity in interactions with a CGRP receptor or with a member of the CT/receptor family. CGRP compared to the wild-type molecule with a Thr at that position, but cannot affect receptor binding. As a result, these substitutions produce a molecule that can occupy the receptor, but which antagonizes rather than activates the signal transduction pathway by making the receptor unavailable for binding to agonist signal transducers.

[022] A adição de resíduos de N-terminal a X1 pode não influir na atividade do antagonista em algumas concretizações. Em algumas concretizações, a adição de resíduos de N-terminal a X1, por exemplo, de uma sequência XTENS de 864 resíduos com Ala, Glu, Gly, Pro, Ser e Thr, pode afetar a estabilidade do fármaco (Schellenberger et al., 2009, Nature Biotechnology, 27 (12): 1.186 a 1.192). Em algumas concretizações, a adição de resíduos de N-terminal pode aumentar a meia vida de um fármaco administrado. Essas mudanças são contempladas neste documento; os versados na técnica saberão como elas podem ser realizadas.[022] The addition of N-terminal residues to X1 may not influence the activity of the antagonist in some embodiments. In some embodiments, the addition of N-terminal residues to 2009, Nature Biotechnology, 27 (12): 1186 to 1192). In some embodiments, the addition of N-terminal residues can increase the half-life of an administered drug. These changes are covered in this document; Those skilled in the art will know how they can be accomplished.

[023] Em algumas concretizações, o antagonista, conforme revelado neste documento, compreende um núcleo central Y1 com 15 a 22 resíduos. Em algumas concretizações, o antagonista, conforme revelado neste documento, compreende um núcleo central Y1 com mais de 24, 15 a 24, 15 a 22, 18 a 22 ou 19 a 20 resíduos, onde ao menos alguns dos resíduos do núcleo central são capazes de formar uma hélice a em condições fisiológicas. O quarto resíduo do N-terminal desse núcleo central é, com frequência, um resíduo de carga positiva, ou uma Arginina (Arg) ou uma Lys. O décimo oitavo resíduo é, com frequência, Arginina. A extensão do núcleo central é limitada não pelo número de resíduos em si, mas pelas considerações estéricas que exigem que X1 e Z1 sejam posicionados de modo que possam interagir com um receptor- alvo na superfície da membrana celular e em um domínio extracelular, respectivamente, em competição com o CGRP.[023] In some embodiments, the antagonist, as disclosed herein, comprises a Y1 central core with 15 to 22 residues. In some embodiments, the antagonist as disclosed herein comprises a Y1 central core of more than 24, 15 to 24, 15 to 22, 18 to 22, or 19 to 20 residues, where at least some of the central core residues are capable of to form an a-helix under physiological conditions. The fourth N-terminal residue of this central core is often a positively charged residue, either an Arginine (Arg) or a Lys. The eighteenth residue is often Arginine. The extent of the central core is limited not by the number of residues per se, but by steric considerations that require that X1 and Z1 be positioned so that they can interact with a target receptor on the surface of the cell membrane and in an extracellular domain, respectively. in competition with CGRP.

[024] Z1 é um fragmento de C-terminal modificado de um peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado ou de outro membro da família peptídica CT/CGRP que compreende de cinco a sete resíduos de aminoácidos ou mais, com uma amina de C-terminal, onde ao menos um aminoácido do fragmento de C-terminal pode ser fenilamina (Fe), Tyr, prolina (Pro) ou Hyp; Assim como Y1 acima, Z1 é limitado não por sua sequência, mas por uma necessidade funcional. No caso de Z1, essa necessidade é que ele interaja com um receptor-alvo em um sítio em seu domínio extracelular de modo que, quando o antagonista ligar-se ao receptor do CGRP, em competição com o CGRP, X1 esteja posicionado para interagir com o receptor na superfície celular e Z1 interaja com uma parte RAMP do receptor.[024] Z1 is a modified C-terminal fragment of a modified calcitonin gene-related peptide or other member of the CT/CGRP peptide family that comprises five to seven amino acid residues or more, with a C-terminal amine , where at least one amino acid of the C-terminal fragment can be phenylamine (Fe), Tyr, proline (Pro) or Hyp; Just like Y1 above, Z1 is limited not by its sequence but by functional necessity. In the case of Z1, this need is for it to interact with a target receptor at a site in its extracellular domain so that, when the antagonist binds to the CGRP receptor, in competition with CGRP, X1 is positioned to interact with the receptor on the cell surface and Z1 interacts with a RAMP part of the receptor.

[025] O peptídeo completo pode ser administrado à parte ou na forma de um sal farmaceuticamente aceitável dele.[025] The complete peptide can be administered separately or in the form of a pharmaceutically acceptable salt thereof.

[026] Algumas concretizações propõem um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina que compreende: uma sequência de aminoácidos com ao menos 80% de identidade de sequência com uma das sequências de aminoácidos de SEQ ID No 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou 15, em que o referido peptídeo retém atividade antagonista.[026] Some embodiments propose a calcitonin gene-related peptide antagonist that comprises: an amino acid sequence with at least 80% sequence identity with one of the amino acid sequences of SEQ ID No. 1, 2, 3, 4, 5 , 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 or 15, wherein said peptide retains antagonistic activity.

[027] Algumas concretizações compreendem um antagonista com uma região central com 18 a 22 resíduos.[027] Some embodiments comprise an antagonist with a central region of 18 to 22 residues.

[028] Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, o fragmento de N-terminal compreende:, onde: X11 pode ser selecionado dentre o grupo composto por alanina (Ala), Cys, Gly, isoleucina (Ile), leucina (Leu), metionina (Met), Phe, prolina (Pro), Trp e valina (Val); X12 pode ser selecionado dentre o grupo composto por Cys, serina (Ser) e Tyr; X13 pode ser selecionado dentre o grupo composto por arginina (Arg), asparagina (Asn), ácido aspártico (Asp), Cys, ácido glutâmico (Glu), Gln, histidina (His), Lys, serina (Ser), Thr, Tyr e valina (Val); X14 pode ser selecionado dentre o grupo composto por arginina (Arg), asparagina (Asn), ácido aspártico (Asp), ácido glutâmico (Glu), Gln, histidina (His), leucina (Leu), Lys, Phe, serina (Ser), Thr, Tyr e valina (Val); X15 pode ser selecionado dentre o grupo composto por alanina (Ala), Gly, isoleucina (Ile), leucina (Leu), metionina (Met), Phe, serina (Ser), triptofano (Trp) e valina (Val); X16 pode ser selecionado dentre o grupo composto por alanina (Ala), Gly, isoleucina (Ile), leucina (Leu), metionina (Met), Phe, serina (Ser), triptofano (Trp) e valina (Val); e X17 é Cys e é capaz de formar uma ponte de dissulfeto com um resíduo de cisteína em X11, X12 ou X13; e com a limitação adicional de que somente dois resíduos de X1 (ou seja, X17 e somente um dentre X11, X12 e X13 ) são resíduos de cisteína.[028] In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, the N-terminal fragment comprises: , where: X12 can be selected from the group consisting of Cys, serine (Ser) and Tyr; The and valine (Val); The ), Thr, Tyr and valine (Val); X15 can be selected from the group consisting of Alanine (wing), Gly, Isoleucine (ile), leucine (Leu), methionine (MET), PHE, Serine (SER), Tryptophan (TRP) and Valine (VAL); X16 can be selected from the group consisting of Alanine (wing), gly, isoleucine (ile), leucine (leu), methionine (met), phe, serin (ser), tryptophan (TRP) and valine (VAL); and X17 is Cys and is capable of forming a disulfide bridge with a cysteine residue at X11, X12 or X13; and with the additional limitation that only two residues of X1 (i.e., X17 and only one of X11, X12 and X13) are cysteine residues.

[029] Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, X11 é selecionado dentre o grupo composto por Ala, Cys e Gly. Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, X12 é selecionado dentre o grupo composto por Cys e Ser, contanto que somente um dentre X11 e X12 possa ser Cys. Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, X13 é selecionado dentre o grupo composto por Arg, Asn, Asp e Val. Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, X14 é selecionado dentre o grupo composto por Leu, Phe e Thr. Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, X15 é selecionado dentre o grupo composto por Ala, Gly e Ser. Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, X15 é selecionado dentre o grupo composto por Ala, Ile, Leu, Ser e Val.[029] In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, X11 is selected from the group consisting of Ala, Cys and Gly. In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, X12 is selected from the group consisting of Cys and Ser, provided that only one of X11 and X12 can be Cys. In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, X13 is selected from the group consisting of Arg, Asn, Asp and Val. In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, X14 is selected from the group consisting of Leu, Phe and Thr. In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, X15 is selected from the group consisting of Ala, Gly and Ser. In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, X15 is selected from the group consisting of Ala, Ile, Leu, Ser and Val.

[030] Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, é selecionado dentre o grupo composto por NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys (SEQ ID No: 17), NH2- Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ser-Cys (SEQ ID No: 18), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr- Ala-Val-Cys (SEQ ID No: 19), NH2-Ala-Cys-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys (SEQ ID No: 20), NH2-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys (SEQ ID No: 21), NH2-Ala- Cys-Arg-Phe-Gly-Ala-Cys (SEQ ID No: 22), NH2-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser- Ala-Cys (SEQ ID No: 23), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys (SEQ ID No: 24), NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys (SEQ ID No: 25), NH2-Ala-Cys- Asp-Thr-Ala-Leu-Cys (SEQ ID No: 26), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys (SEQ ID No: 27), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys (SEQ ID No: 28), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys (SEQ ID No: 29), NH2-Ala-Cys-Asp- Leu-Ser-Val-Cys (SEQ ID No: 30), NH2-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser-Val-Cys (SEQ ID No: 31), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys (SEQ ID No: 32), e NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Val-Cys (SEQ ID No: 33).[030] In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, is selected from the group consisting of NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys (SEQ ID No: 17), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ser-Cys (SEQ ID No: 18), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Val-Cys (SEQ ID No: 19), NH2-Ala-Cys-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys (SEQ ID No: 20), NH2 -Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys (SEQ ID No: 21), NH2-Ala- Cys-Arg-Phe-Gly-Ala-Cys (SEQ ID No: 22), NH2-Ala-Cys -Asp-Leu-Ser- Ala-Cys (SEQ ID No: 23), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys (SEQ ID No: 24), NH2-Cys-Ser-Asn-Thr -Ala-Ala-Cys (SEQ ID No: 25), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys (SEQ ID No: 26), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile -Cys (SEQ ID No: 27), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys (SEQ ID No: 28), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys (SEQ ID No: 29), NH2-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser-Val-Cys (SEQ ID No: 30), NH2-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser-Val-Cys (SEQ ID No: 31 ), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys (SEQ ID No: 32), and NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Val-Cys (SEQ ID No: 33).

[031] Em algumas concretizações, um ou mais resíduos são fundidos N-terminalmente a X11, gerando assim um polipeptídeo com uma extensão N-terminal de resíduos em relação a X1. Em algumas concretizações, essa extensão afeta a estabilidade do antagonista após a administração.[031] In some embodiments, one or more residues are fused N-terminally to X11, thus generating a polypeptide with an N-terminal extension of residues relative to X1. In some embodiments, this extension affects the stability of the antagonist after administration.

[032] Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, o núcleo central compreende um fragmento de calcitonina humana ou de salmão. Em algumas concretizações, o fragmento de calcitonina humana ou de salmão compreende de 18 a 21 aminoácidos. Em algumas concretizações, o fragmento de calcitonina humana ou de salmão compreende de 18 a 20 aminoácidos. Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, Y1 compreende de 19 a 20 aminoácidos. Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, Y1 é -Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 34) ou -Val-Leu-Gly-Lys-Leu- Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 35). Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, Y1 tem 95% de identidade de sequência com -Val-Leu-Gly- Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 34) ou -Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 35).[032] In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, the central core comprises a fragment of human or salmon calcitonin. In some embodiments, the human or salmon calcitonin fragment comprises 18 to 21 amino acids. In some embodiments, the human or salmon calcitonin fragment comprises 18 to 20 amino acids. In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, Y1 comprises 19 to 20 amino acids. In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, Y1 is -Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr -Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 34) or -Val-Leu-Gly-Lys-Leu- Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr- Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 35). In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, Y1 has 95% sequence identity with -Val-Leu-Gly- Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His- Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 34) or -Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu - Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 35).

[033] Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, o núcleo central compreende um fragmento de calcitonina de qualquer uma de várias espécies. Em algumas concretizações, Y1 pode ter 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% ou 95% de identidade de sequência com Y1 da SEQ ID No 34 (Val-Leu-Gly- Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-). Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina com a estrutura da Fórmula I, Y1 pode ser -Val- Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg- Thr-Asn- (SEQ ID No: 35) ou -Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu- His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asp- (SEQ ID No: 36) ou - Val- Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Phe-Pro-Arg- Thr-Asn- (SEQ ID No: 37) ou -Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Asp-Ile-His- Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 38) ou -Val-Leu-Gly- Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Met-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asp- (SEQ ID No: 39) ou -Leu-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Thr-Arg-Thr-Asp- (SEQ ID No: 40) ou -Val-Leu-Gly-Lys-Leu- Ser-Gln-Asp-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Phe-Pro-Arg-Thr-Asp- (SEQ ID No: 41) ou -Met-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Asp-Leu-His-Lys-Leu-Gln- Thr-Phe-Pro-Arg-Thr-Asp- (SEQ ID No: 42) ou -Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser- Gln-Asp-Ile-His-Lys-Leu-Gln-Thr-His-Pro-Arg-Thr-Asp- (SEQ ID No: 43). Em algumas concretizações, Y1 pode ter 60% ou mais de identidade de sequência com qualquer Y1 das sequências imediatamente acima.[033] In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, the central core comprises a fragment of calcitonin from any one of several species. In some embodiments, Y1 may have 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% or 95% sequence identity with Y1 of SEQ ID No. 34 (Val-Leu-Gly-Arg- Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-). In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist with the structure of Formula I, Y1 may be -Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr -Tyr-Pro-Arg- Thr-Asn- (SEQ ID No: 35) or -Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu- His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr- Pro-Arg-Thr-Asp- (SEQ ID No: 36) or - Val- Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Phe-Pro-Arg - Thr-Asn- (SEQ ID No: 37) or -Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Asp-Ile-His- Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr- Asn- (SEQ ID No: 38) or -Val-Leu-Gly- Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Met-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asp- ( SEQ ID No: 39) or -Leu-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Thr-Arg-Thr-Asp- (SEQ ID No :40) or -Val-Leu-Gly-Lys-Leu- Ser-Gln-Asp-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Phe-Pro-Arg-Thr-Asp- (SEQ ID No: 41) or -Met-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Asp-Leu-His-Lys-Leu-Gln- Thr-Phe-Pro-Arg-Thr-Asp- (SEQ ID No: 42) or -Val -Leu-Gly-Lys-Leu-Ser- Gln-Asp-Ile-His-Lys-Leu-Gln-Thr-His-Pro-Arg-Thr-Asp- (SEQ ID No: 43). In some embodiments, Y1 may have 60% or more sequence identity with any Y1 of the immediately above sequences.

[034] Algumas concretizações propõem polipeptídeos Y1 com ao menos cerca de 60% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa, ao menos cerca de 61% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 62% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 63% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 64% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 65% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 66% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 67% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 68% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 69% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 70% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 71% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 72% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 73% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 74% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 75% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 76% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 77% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 78% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 79% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 80% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 81% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 82% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 83% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 84% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 85% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 86% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 87% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 88% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 89% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 90% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 91% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 92% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 93% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 94% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 95% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 96% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 97% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 98% de identidade de sequência de aminoácidos e como alternativa ao menos cerca de 99% de identidade de sequência de aminoácidos com o fragmento de polipeptídeo Y1 listado acima.[034] Some embodiments propose Y1 polypeptides with at least about 60% amino acid sequence identity, alternatively at least about 61% amino acid sequence identity, alternatively at least about 62% sequence identity of amino acids, alternatively at least about 63% amino acid sequence identity, alternatively at least about 64% amino acid sequence identity, alternatively at least about 65% amino acid sequence identity, alternatively at least about 66% amino acid sequence identity, alternatively at least about 67% amino acid sequence identity, alternatively at least about 68% amino acid sequence identity, alternatively at least about 69 % amino acid sequence identity, alternatively at least about 70% amino acid sequence identity, alternatively at least about 71% amino acid sequence identity, alternatively at least about 72% sequence identity of amino acids, alternatively at least about 73% amino acid sequence identity, alternatively at least about 74% amino acid sequence identity, alternatively at least about 75% amino acid sequence identity, alternatively at least about 76% amino acid sequence identity, alternatively at least about 77% amino acid sequence identity, alternatively at least about 78% amino acid sequence identity, alternatively at least about 79 % amino acid sequence identity, alternatively at least about 80% amino acid sequence identity, alternatively at least about 81% amino acid sequence identity, alternatively at least about 82% sequence identity of amino acids, alternatively at least about 83% amino acid sequence identity, alternatively at least about 84% amino acid sequence identity, alternatively at least about 85% amino acid sequence identity, alternatively at least about 86% amino acid sequence identity, alternatively at least about 87% amino acid sequence identity, alternatively at least about 88% amino acid sequence identity, alternatively at least about 89 % amino acid sequence identity, alternatively at least about 90% amino acid sequence identity, alternatively at least about 91% amino acid sequence identity, alternatively at least about 92% sequence identity of amino acids, alternatively at least about 93% amino acid sequence identity, alternatively at least about 94% amino acid sequence identity, alternatively at least about 95% amino acid sequence identity, alternatively at least about 96% amino acid sequence identity, alternatively at least about 97% amino acid sequence identity, alternatively at least about 98% amino acid sequence identity, and alternatively at least about 99 % amino acid sequence identity with the Y1 polypeptide fragment listed above.

[035] Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, Z1 compreende (SEQ ID No: 45), onde: Z11 é selecionado dentre o grupo composto por Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp e Val; Z12 é selecionado dentre o grupo composto por Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp e Val; Z13 é selecionado dentre o grupo composto por serina (Ser) e Tyr; Z14 é selecionado dentre o grupo composto por Arg, Asn, Asp, Glu, Gln, His, Lys, Ser, Thr e Tyr; Z15 é selecionado dentre o grupo composto por Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp e Val; e Z16 é selecionado dentre o grupo composto por Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp e Val. Em algumas concretizações, Z11 é Val. Em algumas concretizações, Z12 é Gly. Em algumas concretizações, Z13 é Ser. Em algumas concretizações, Z14 é Lys. Em algumas concretizações, Z15 é Ala. Em algumas concretizações, Z16 é Phe. Em algumas concretizações, é -Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe, de modo que o C-terminal do polipeptídeo seja um grupo funcional carbóxi (SEQ ID No: 46), ou -Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2, de modo que o C- terminal do polipeptídeo seja um grupo funcional carboxamida (SEQ ID No: 47).[035] In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, Z1 comprises (SEQ ID No: 45), where: Z11 is selected from the group consisting of Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp and Val; Z12 is selected from the group consisting of Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp and Val; Z13 is selected from the group consisting of serine (Ser) and Tyr; Z14 is selected from the group consisting of Arg, Asn, Asp, Glu, Gln, His, Lys, Ser, Thr and Tyr; Z15 is selected from the group consisting of Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp and Val; and Z16 is selected from the group consisting of Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Trp and Val. In some embodiments, Z11 is Val. In some embodiments, Z12 is Gly. In some embodiments, Z13 is Ser. In some embodiments, Z14 is Lys. In some embodiments, Z15 is Ala. In some embodiments, Z16 is Phe. In some embodiments, is -Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe, such that the C-terminus of the polypeptide is a carboxy functional group (SEQ ID No: 46), or -Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe- NH2, so that the C-terminus of the polypeptide is a carboxamide functional group (SEQ ID No: 47).

[036] Em algumas concretizações, o resíduo de C-terminal de Z1 é Fenilalanina, Prolina ou Hidroxiprolina. Em algumas concretizações, o resíduo de C-terminal de Z1 é Fenilalanina.[036] In some embodiments, the C-terminal residue of Z1 is Phenylalanine, Proline or Hydroxyproline. In some embodiments, the C-terminal residue of Z1 is Phenylalanine.

[037] Em algumas concretizações, Z1 compreende ao menos um resíduo de Phe.[037] In some embodiments, Z1 comprises at least one Phe residue.

[038] Em algumas concretizações, o C-terminal de Z1 é modificado para que seja ligado por um grupo funcional carbóxi amidado (-C(=O)NH2).[038] In some embodiments, the C-terminus of Z1 is modified so that it is linked by an amidated carboxy functional group (-C(=O)NH2).

[039] Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, X1 é selecionado dentre o grupo composto por NH2-Ala- Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys- (SEQ ID No: 17), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala- Ser-Cys- (SEQ ID No: 18), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Val-Cys- (SEQ ID No: 19), NH2-Ala-Cys-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys- (SEQ ID No: 20), NH2-Ala- Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-, NH2-Ala-Cys-Arg-Phe-Gly-Ala-Cys- (SEQ ID No: 21), NH2-Ala-Cys-Arg-Phe-Gly-Ala-Cys- (SEQ ID No: 22), NH2-Ala- Cys-Asp-Leu-Ser-Ala-Cys- (SEQ ID No: 23), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser- Ala-Cys- (SEQ ID No: 24), Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys- (SEQ ID No: 25), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys- (SEQ ID No: 26), NH2-Ala-Cys- Asp-Thr-Ala-Ile-Cys- (SEQ ID No: 27), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu- Cys- (SEQ ID No: 28), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys- (SEQ ID No: 29), NH2-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser-Val-Cys- (SEQ ID No: 30), NH2-Ala-Cys- Asp-Leu-Ser-Val-Cys- (SEQ ID No: 31), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val- Cys (SEQ ID No: 32), e NH2- Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Val-Cys- (SEQ ID No: 33); Y1 pode ser -Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 34) ou -Val-Leu-Gly-Lys-Leu- Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 35); e Z1 pode ser -Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe com um carbóxi- terminal (SEQ ID No: 46) ou -Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 47).[039] In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, X1 is selected from the group composed of NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys- (SEQ ID No: 17), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala- Ser-Cys- (SEQ ID No: 18), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Val-Cys- (SEQ ID No: 19), NH2-Ala-Cys-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys- (SEQ ID No: 20), NH2-Ala- Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-, NH2-Ala-Cys- Arg-Phe-Gly-Ala-Cys- (SEQ ID No: 21), NH2-Ala-Cys-Arg-Phe-Gly-Ala-Cys- (SEQ ID No: 22), NH2-Ala- Cys-Asp- Leu-Ser-Ala-Cys- (SEQ ID No: 23), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser- Ala-Cys- (SEQ ID No: 24), Cys-Ser-Asn-Thr-Ala- Ala-Cys- (SEQ ID No: 25), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys- (SEQ ID No: 26), NH2-Ala-Cys- Asp-Thr-Ala-Ile- Cys- (SEQ ID No: 27), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu- Cys- (SEQ ID No: 28), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys- (SEQ ID No: 29), NH2-Ala-Cys-Asp-Leu-Ser-Val-Cys- (SEQ ID No: 30), NH2-Ala-Cys- Asp-Leu-Ser-Val-Cys- (SEQ ID No: 31), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys (SEQ ID No: 32), and NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Val-Cys- (SEQ ID No : 33); Y1 can be -Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 34) or -Val-Leu-Gly-Lys-Leu- Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- (SEQ ID No: 35); and Z1 can be -Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe with a carboxy terminus (SEQ ID No: 46) or -Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 47) .

[040] Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, o antagonista compreende de 28 a 35 resíduos de aminoácidos, de 31 a 37 resíduos de aminoácidos, de 31 a 33 resíduo de aminoácidos ou 32 resíduos de aminoácidos.[040] In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, the antagonist comprises from 28 to 35 amino acid residues, from 31 to 37 amino acid residues, from 31 to 33 amino acid residues or 32 amino acid residues.

[041] Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, o antagonista compreende um motivo -Ala-Cys-Asp-Thr- Ala-X16-Cys- (SEQ ID No: 49), onde X16 é qualquer resíduo de aminoácido diferente de Thr.[041] In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, the antagonist comprises an -Ala-Cys-Asp-Thr- Ala-X16-Cys- motif (SEQ ID No: 49) , where X16 is any amino acid residue other than Thr.

[042] Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, o antagonista compreende um primeiro fragmento peptídico com sete resíduos de aminoácidos ou menos, em que o referido primeiro fragmento peptídico possui uma sequência do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado. Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, o antagonista compreende um segundo fragmento peptídico com sete resíduos de aminoácidos ou menos, em que os referidos fragmentos peptídicos primeiro e segundo não são contíguos e cada um possui, independentemente, uma sequência que pode ser modificada a partir do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado. Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, o antagonista compreende um terceiro fragmento peptídico com 20 resíduos de aminoácidos ou menos, em que o referido terceiro fragmento peptídico possui uma sequência da calcitonina de salmão. Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, o segundo fragmento peptídico e o terceiro fragmento peptídico são contíguos.[042] In some embodiments of the modified calcitonin gene-related peptide antagonist with the structure of Formula I, the antagonist comprises a first peptide fragment of seven amino acid residues or less, wherein said first peptide fragment has a peptide sequence related to the modified calcitonin gene. In some embodiments of the modified calcitonin gene-related peptide antagonist of the structure of Formula I, the antagonist comprises a second peptide fragment of seven amino acid residues or less, wherein said first and second peptide fragments are not contiguous and each independently has a sequence that can be modified from the peptide related to the modified calcitonin gene. In some embodiments of the modified calcitonin gene-related peptide antagonist of the structure of Formula I, the antagonist comprises a third peptide fragment of 20 amino acid residues or less, wherein said third peptide fragment has a salmon calcitonin sequence. In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, the second peptide fragment and the third peptide fragment are contiguous.

[043] Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura selecionada dentre a lista de estruturas composta por NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 1), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ser-Cys-Val-Leu-Gly- Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 2), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala- Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr- Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 3), NH2- Ala-Cys-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu- His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 4), NH2-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu- Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly- Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 5), NH2-Ala-Cys-Arg-Phe-Gly-Ala-Cys— Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro- Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 6), NH2-Ala-Cys- Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg- Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 7), NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln- Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys- Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 8), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys-Val-Leu- Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr- Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 9), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr- Ala-Ile-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr- Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 10), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 11), NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Val-Cys-Val-Leu- Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr- Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 12), ou NH2-Ala-Cys-Asn- Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2 (SEQ ID No: 13), Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu- His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Val-Asp-Pro-Ser-Ser-Pro-His-Ser-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 14), ou Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Thr-His-Arg-Leu- Ala-Gly-Leu-Leu-Ser-Arg-Ser-Gly-Gly-Val-Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro- Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 15) ou um sal farmaceuticamente aceitável destas. O presente antagonista pode ser um composto simples da lista acima.[043] In some embodiments, the antagonist has a structure selected from the list of structures composed of NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln- Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 1), NH2-Ala-Cys -Asp-Thr-Ala-Ser-Cys-Val-Leu-Gly- Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn- Val -Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 2), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala- Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln- Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr- Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 3), NH2- Ala-Cys -Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu- His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val -Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 4), NH2-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln- Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly- Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 5), NH2-Ala-Cys -Arg-Phe-Gly-Ala-Cys— Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro- Arg-Thr-Asn-Val -Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 6), NH2-Ala-Cys- Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln- Glu-Leu-His-Arg- Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 7), NH2-Cys-Ser -Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln- Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val -Gly-Ser-Lys- Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 8), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys-Val-Leu- Gly-Arg-Leu-Ser-Gln- Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 9), NH2-Ala-Cys -Asp-Thr- Ala-Ile-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr- Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val -Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 10), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln- Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 11), NH2-Cys-Ser -Asn-Thr-Ala-Val-Cys-Val-Leu- Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr- Asn-Val -Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 12), or NH2-Ala-Cys-Asn- Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln -Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2 (SEQ ID No: 13), Ala-Cys-Val- Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu- His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Val-Asp-Pro-Ser-Ser- Pro-His-Ser-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 14), or Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Thr-His-Arg-Leu- Ala-Gly-Leu-Leu- Ser-Arg-Ser-Gly-Gly-Val-Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 15) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The present antagonist may be a simple compound from the above list.

[044] Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura selecionada dentre a lista de estruturas composta por NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 1) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ser-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 2) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 3) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Ala-Cys-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 4) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 5) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Ala-Cys-Arg-Phe-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 6) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 7) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 8) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 9) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 10) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 11) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID No: 12) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro- NH2 (SEQ ID No: 13) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de Ala- Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His- Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Val-Asp-Pro-Ser-Ser-Pro-His-Ser-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 14) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. Em algumas concretizações, o antagonista possui uma estrutura de Ala- Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Thr-His-Arg-Leu-Ala-Gly-Leu-Leu-Ser- Arg-Ser-Gly-Gly-Val-Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser- Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 15) ou um sal farmaceuticamente aceitável desta. O antagonista da presente invenção também pode ser uma composição farmacêutica que compreende um dos compostos acima. A composição farmacêutica pode ser usada em um método para tratar cefaleias em um indivíduo, o método compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade efetiva de um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado.[044] In some embodiments, the antagonist has a structure selected from the list of structures composed of NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln- Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 1) or a pharmaceutically acceptable salt thereof . In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ser-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 2) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 3) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Ala-Cys-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 4) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 5) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Ala-Cys-Arg-Phe-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 6) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 7) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 8) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 9) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 10) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 11) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 12) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu- Gln-Thr-Tyr-Pro-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2 (SEQ ID No: 13) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln- Thr-Tyr-Pro-Val-Asp-Pro-Ser-Ser-Pro-His-Ser-Tyr-NH2 (SEQ ID No: 14) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In some embodiments, the antagonist has a structure of Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Thr-His-Arg-Leu-Ala-Gly-Leu-Leu-Ser-Arg-Ser-Gly- Gly-Val-Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID No: 15) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The antagonist of the present invention may also be a pharmaceutical composition comprising one of the above compounds. The pharmaceutical composition may be used in a method of treating headaches in a subject, the method comprising administering to the subject an effective amount of a modified calcitonin gene-related peptide antagonist.

[045] Em algumas concretizações do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura da Fórmula I, Y1 inclui -Ala-Glu-Ala-Ala-Ala-Lys-Glu-Ala-Ala-Ala-Lys- Glu-Ala-Ala-Ala-Lys-Ala- (SEQ ID No: 50), -Ala-Lys-Ala-Ala-Ala-Glu-Lys- Ala-Ala-Ala-Glu-Lys-Ala-Ala-Ala-Glu-Ala- (SEQ ID No: 51), -Ala-Glu-Ala- Ala-Lys-Ala-Glu-Ala-Ala-Lys-Ala-Glu-Ala-Ala-Lys-Ala- (SEQ ID No: 52) ou -Ala-Lys-Ala-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Ala-Glu-Ala- (SEQ ID No: 53).[045] In some embodiments of the calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of Formula I, Y1 includes -Ala-Glu-Ala-Ala-Ala-Lys-Glu-Ala-Ala-Ala-Lys-Glu- Ala-Ala-Ala-Lys-Ala- (SEQ ID No: 50), -Ala-Lys-Ala-Ala-Ala-Glu-Lys- Ala-Ala-Ala-Glu-Lys-Ala-Ala-Ala-Glu -Ala- (SEQ ID No: 51), -Ala-Glu-Ala- Ala-Lys-Ala-Glu-Ala-Ala-Lys-Ala-Glu-Ala-Ala-Lys-Ala- (SEQ ID No: 52 ) or -Ala-Lys-Ala-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Ala-Glu-Ala-Lys-Ala-Ala-Glu-Ala- (SEQ ID No: 53).

[046] Algumas concretizações propõem um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado com a estrutura de uma sequência de peptídeo da Tabela 1.[046] Some embodiments propose a calcitonin gene-related peptide antagonist modified with the structure of a peptide sequence from Table 1.

[047] Algumas concretizações propõem um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado que compreende uma sequência de aminoácidos com ao menos 80% de identidade de sequência com uma das sequências de aminoácidos de SEQ ID No: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou 15, em que o referido peptídeo retém atividade antagonista. Em algumas concretizações, a sequência de aminoácidos tem ao menos 90% de identidade de sequência com uma das sequências de aminoácidos de SEQ ID No 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou 15, em que o referido peptídeo retém atividade antagonista. Em algumas concretizações, a sequência de aminoácidos tem ao menos 95% de identidade de sequência com uma das sequências de aminoácidos de SEQ ID No 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou 15, em que o referido peptídeo retém atividade antagonista. Em algumas concretizações, a sequência de aminoácidos tem ao menos 97% de identidade de sequência com uma das sequências de aminoácidos de SEQ ID No 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou 15, em que o referido peptídeo retém atividade antagonista.[047] Some embodiments propose a modified calcitonin gene-related peptide antagonist that comprises an amino acid sequence with at least 80% sequence identity with one of the amino acid sequences of SEQ ID No: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 or 15, wherein said peptide retains antagonistic activity. In some embodiments, the amino acid sequence has at least 90% sequence identity with one of the amino acid sequences of SEQ ID NOs 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 , 13, 14 or 15, wherein said peptide retains antagonistic activity. In some embodiments, the amino acid sequence has at least 95% sequence identity with one of the amino acid sequences of SEQ ID NOs 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 , 13, 14 or 15, wherein said peptide retains antagonistic activity. In some embodiments, the amino acid sequence has at least 97% sequence identity with one of the amino acid sequences of SEQ ID NOs 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 , 13, 14 or 15, wherein said peptide retains antagonistic activity.

[048] Algumas concretizações propõem uma composição farmacêutica que compreende um excipiente farmaceuticamente aceitável e o presente antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelado e descrito neste documento.[048] Some embodiments propose a pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable excipient and the present modified calcitonin gene-related peptide antagonist, as disclosed and described herein.

[049] Algumas concretizações propõem um método para tratar cefaleias em um indivíduo, o método compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade efetiva do presente antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelado e descrito neste documento. Em algumas concretizações, o método compreende ainda identificar um paciente que sofre de cefaleias. Em algumas concretizações, a cefaleia é a enxaqueca.[049] Some embodiments propose a method for treating headaches in an individual, the method comprising administering to the individual an effective amount of the present modified calcitonin gene-related peptide antagonist, as disclosed and described herein. In some embodiments, the method further comprises identifying a patient suffering from headaches. In some embodiments, the headache is a migraine.

[050] Algumas concretizações propõem um método para tratar uma condição associada a níveis anormais do CGRP que compreende a administração do presente antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelado e descrito neste documento, a um indivíduo, o método compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade efetiva de um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelado e descrito neste documento. Em algumas concretizações, a condição é a enxaqueca.[050] Some embodiments propose a method for treating a condition associated with abnormal levels of CGRP that comprises administering the present modified calcitonin gene-related peptide antagonist, as disclosed and described herein, to an individual, the method comprising administering to the individual an effective amount of a modified calcitonin gene-related peptide antagonist as disclosed and described herein. In some embodiments, the condition is migraine.

[051] Algumas concretizações propõem uma combinação que compreende um agente terapêutico ligado ao presente antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelado e descrito neste documento, que seletivamente liga-se a um membro da família do receptor do CGRP. Em algumas concretizações, o agente terapêutico é um agente de imagem.[051] Some embodiments propose a combination comprising a therapeutic agent linked to the present modified calcitonin gene-related peptide antagonist, as disclosed and described herein, which selectively binds to a member of the CGRP receptor family. In some embodiments, the therapeutic agent is an imaging agent.

[052] Algumas concretizações propõem um método para identificar um ligante de ligação com o receptor do CGRP provendo o presente antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado ligado a um receptor do CGRP, obter um composto de teste ou uma biblioteca de compostos de teste e identificar compostos que sejam capazes de dissociar o antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado do receptor do CGRP. Os compostos identificados por este método podem ser adicionalmente avaliados contra outros receptores do CGRP e agentes de ligação com o receptor do CGRP para identificar ligantes de ligação com o receptor CGRP selecionados.[052] Some embodiments propose a method for identifying a CGRP receptor binding ligand by providing the present modified calcitonin gene-related peptide antagonist bound to a CGRP receptor, obtaining a test compound or a library of test compounds and identify compounds that are capable of dissociating the modified calcitonin gene-related peptide antagonist from the CGRP receptor. Compounds identified by this method can be further screened against other CGRP receptors and CGRP receptor binding agents to identify selected CGRP receptor binding ligands.

[053] Em algumas concretizações neste documento, descreve-se um antagonista do CGRP modificado que mantém a sequência de um agonista que inclui X1, a região N-terminal que se liga ao receptor do CGRP na membrana celular e, em seu C-terminal, inicia e estabiliza a hélice através de uma ligação de dissulfeto, Y1, o motivo estrutural da hélice; e Z1, a região de ligação com o C-terminal, mas que difere em apenas um resíduo da sequência agonística. Em uma concretização preferida, a hélice derivada da calcitonina de salmão faz parte da estrutura usada para aumentar a eficácia do presente antagonista.[053] In some embodiments in this document, a modified CGRP antagonist is described that maintains the sequence of an agonist that includes X1, the N-terminal region that binds to the CGRP receptor on the cell membrane and, at its C-terminus , initiates and stabilizes the helix through a disulfide bond, Y1, the structural motif of the helix; and Z1, the binding region with the C-terminus, but which differs in only one residue from the agonistic sequence. In a preferred embodiment, the helix derived from salmon calcitonin is part of the structure used to increase the effectiveness of the present antagonist.

DefiniçõesDefinitions

[054] As definições a seguir são estabelecidas para elucidar e definir o significado e o âmbito dos vários termos usados para descrever as concretizações.[054] The following definitions are established to elucidate and define the meaning and scope of the various terms used to describe embodiments.

[055] Conforme usado neste documento, “modificado” refere-se a um polipeptídeo que mantém a estrutura geral de um polipeptídeo relacionado, mas difere quanto a ao menos um resíduo em relação a esse polipeptídeo relacionado. Conforme usado neste documento, um “C-terminal modificado” é um C terminal de um polipeptídeo com uma estrutura química diferente de um grupo carbóxi peptídico padrão, um exemplo disso é um C-terminal modificado que é uma carboxamida C-terminal.[055] As used herein, “modified” refers to a polypeptide that maintains the general structure of a related polypeptide, but differs in at least one residue in relation to that related polypeptide. As used herein, a “modified C-terminus” is a C terminus of a polypeptide with a chemical structure different from a standard peptide carboxy group, an example of which is a modified C-terminus that is a C-terminal carboxamide.

[056] Conforme usado neste documento, “agonista” refere- se a um ligante biologicamente ativo que se liga a seu receptor biologicamente ativo complementar e ativa-o ou para causar uma resposta biológica no receptor ou para intensificar uma atividade biológica pré-existentes do receptor.[056] As used herein, “agonist” refers to a biologically active ligand that binds to its complementary biologically active receptor and activates it either to cause a biological response in the receptor or to enhance a pre-existing biological activity of the receptor. receiver.

[057] Conforme usado neste documento, “antagonista” refere-se a um ligante biologicamente ativo que se liga a seu receptor biologicamente ativo complementar e inibe a resposta biológica do receptor.[057] As used herein, “antagonist” refers to a biologically active ligand that binds to its complementary biologically active receptor and inhibits the biological response of the receptor.

[058] Conforme usado neste documento, “sal farmaceuticamente ativo” refere-se a sais não tóxicos de metais alcalinos, de metais alcalinoterrosos e de amônio comumente usados na indústria farmacêutica, incluindo os sais de sódio, potássio, lítio, cálcio, magnésio, bário, amônio e protamina, que são preparados por métodos bem conhecidos na técnica. O termo também inclui sais de adição de ácido atóxicos, que são geralmente preparados reagindo os antagonistas do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelado neste documento, com um ácido orgânico ou inorgânico adequado. Sais representativos incluem cloridrato, bromato, sulfato, bissulfato, acetato, oxalato, valerato, oleato, laurato, borato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartrato, napsilato e seus semelhantes. Sendo assim, o termo refere-se aos sais que mantêm a efetividade e as propriedades biológicas das bases livres e que não são biologicamente indesejados ou de alguma outra forma indesejados formados com ácidos inorgânicos, tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e seus semelhantes, e ácidos orgânicos, tais como ácido acético, ácido propiônico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido málico, ácido malônico, ácido succínico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido p-toluenossulfô-nico, ácido salicílico e seus semelhantes. Para uma descrição de sais farmaceuticamente aceitáveis como pró-fármacos, vide Bundgaard, H. ed., 1985, Design of Prodrugs, Elsevier Science Publishers, Amsterdã.[058] As used herein, “pharmaceutically active salt” refers to non-toxic salts of alkali metals, alkaline earth metals and ammonium commonly used in the pharmaceutical industry, including salts of sodium, potassium, lithium, calcium, magnesium, barium, ammonium and protamine, which are prepared by methods well known in the art. The term also includes non-toxic acid addition salts, which are generally prepared by reacting modified calcitonin gene-related peptide antagonists as disclosed herein with a suitable organic or inorganic acid. Representative salts include hydrochloride, bromate, sulfate, bisulfate, acetate, oxalate, valerate, oleate, laurate, borate, benzoate, lactate, phosphate, tosylate, citrate, maleate, fumarate, succinate, tartrate, napsilate and the like. Therefore, the term refers to salts that maintain the effectiveness and biological properties of free bases and that are not biologically unwanted or otherwise undesirable formed with inorganic acids, such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid and the like, and organic acids such as acetic acid, propionic acid, glycolic acid, pyruvic acid, oxalic acid, malic acid, malonic acid, succinic acid, maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, citric acid, benzoic acid, cinnamic acid, mandelic acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, salicylic acid and the like. For a description of pharmaceutically acceptable salts as prodrugs, see Bundgaard, H. ed., 1985, Design of Prodrugs, Elsevier Science Publishers, Amsterdam.

[059] Conforme usado neste documento, “éster farmaceuticamente aceitável” refere-se aos ésteres que mantêm, quando da hidrólise da ligação de éster, a eficiência e as propriedades biológicas do ácido carboxílico ou do álcool e não são biologicamente indesejados ou de alguma outra forma indesejados. Para uma descrição de ésteres farmaceuticamente aceitáveis como pró-fármacos, vide Bundgaard, H. ed., 1985, Design of Prodrugs, Elsevier Science Publishers, Amsterdã. Normalmente, esses ésteres são formados a partir do ácido carboxílico correspondente e de um álcool. Em geral, a formação dos ésteres pode ser realizada por meio de técnicas sintéticas convencionais. Vide, por exemplo, março de 1992, Advanced Organic Chemistry, 4a Ed., John Wiley & Sons, Nova York, p.p. 393 a 396, e referências citadas nesse documento, e Mark et al., 1980, Encyclopedia of Chemical Technology, John Wiley & Sons, Nova York. O componente álcool do éster geralmente compreenderá (i) um álcool alifático C2-C12 que pode ou não conter uma ou mais ligações duplas e pode ou não conter carbonos ramificados ou (ii) um álcool aromático ou heteroaromático C7 -C12.[059] As used herein, “pharmaceutically acceptable ester” refers to esters that maintain, upon hydrolysis of the ester bond, the efficiency and biological properties of the carboxylic acid or alcohol and are not biologically or otherwise undesirable. unwanted form. For a description of pharmaceutically acceptable esters as prodrugs, see Bundgaard, H. ed., 1985, Design of Prodrugs, Elsevier Science Publishers, Amsterdam. Typically, these esters are formed from the corresponding carboxylic acid and an alcohol. In general, the formation of esters can be carried out using conventional synthetic techniques. See, for example, March 1992, Advanced Organic Chemistry, 4th Ed., John Wiley & Sons, New York, pp. 393 to 396, and references cited therein, and Mark et al., 1980, Encyclopedia of Chemical Technology, John Wiley & Sons, New York. The alcohol component of the ester will generally comprise (i) a C2-C12 aliphatic alcohol which may or may not contain one or more double bonds and may or may not contain branched carbons or (ii) a C7-C12 aromatic or heteroaromatic alcohol.

[060] Conforme usado neste documento, “amida C- terminal” refere-se a um grupo funcional amida que substitui o grupo funcional hidroxila C-terminal tipicamente presente no carbóxi-terminal de um polipeptídeo, de modo que o polipeptídeo termine com uma carboxamida (isto é, em vez de um grupo funcional carbóxi C-terminal (i.e. C(=O)-OH). Para uma descrição de amidas farmaceuticamente aceitáveis como pró-fármacos, vide Bundgaard, H. ed., 1985, Design of Prodrugs, Elsevier Science Publishers, Amsterdã. Normalmente, essas amidas são formadas a partir do ácido carboxílico correspondente e de uma amida. Em geral, a formação das amidas pode ser realizada por meio de técnicas sintéticas convencionais. Vide, por exemplo, março de 1992, Advanced Organic Chemistry, 4a Ed., John Wiley & Sons, Nova York, p.p. 393, e Mark et al., 1980, Encyclopedia of Chemical Technology, John Wiley & Sons, Nova York.[060] As used herein, “C-terminal amide” refers to an amide functional group that replaces the C-terminal hydroxyl functional group typically present at the carboxy terminus of a polypeptide, such that the polypeptide ends with a carboxamide (that is, instead of a C-terminal carboxy functional group (ie C(=O)-OH). For a description of pharmaceutically acceptable amides as prodrugs, see Bundgaard, H. ed., 1985, Design of Prodrugs, Elsevier Science Publishers, Amsterdam. Typically, these amides are formed from the corresponding carboxylic acid and an amide. In general, the formation of amides can be carried out using conventional synthetic techniques. See, for example, March 1992, Advanced Organic Chemistry, 4th Ed., John Wiley & Sons, New York, pp 393, and Mark et al., 1980, Encyclopedia of Chemical Technology, John Wiley & Sons, New York.

[061] Conforme usado neste documento, “veículo farmaceuticamente aceitável” refere-se a um veículo que não interfere na eficiência da atividade biológica dos ingredientes ativos e que não é tóxico ao hospedeiro ou paciente.[061] As used in this document, “pharmaceutically acceptable carrier” refers to a carrier that does not interfere with the efficiency of the biological activity of the active ingredients and that is not toxic to the host or patient.

[062] Conforme usado neste documento, “estereoisômero” refere-se a uma entidade com o mesmo peso molecular, composição química e sequência de ligação que outra, mas com seus átomos agrupados de maneira diferente no espaço em torno de um ou mais centros quirais. Ou seja, estereoisômeros da mesma fórmula química conterão grupo funcionais químicos idênticos localizados em diferentes orientações espaciais em torno de ao menos um centro quiral. Quando puros, os esteroisômeros têm a capacidade de girar a luz polarizada em linha. Alguns esteroisômeros puros, contudo, podem ter uma rotação óptica tão débil que não são detectáveis com os instrumentos atuais. Os antagonistas do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado, conforme revelados neste documento, podem ter um ou mais átomos de carbono assimétricos e, portanto, incluir vários esteroisômeros. Todos os esteroisômeros enquadram-se no âmbito das concretizações.[062] As used herein, “stereoisomer” refers to an entity with the same molecular weight, chemical composition and bonding sequence as another, but with its atoms grouped differently in space around one or more chiral centers . That is, stereoisomers of the same chemical formula will contain identical chemical functional groups located in different spatial orientations around at least one chiral center. When pure, stereoisomers have the ability to rotate polarized light into a line. Some pure stereoisomers, however, may have such weak optical rotation that they are not detectable with current instruments. Modified calcitonin gene-related peptide antagonists as disclosed herein may have one or more asymmetric carbon atoms and therefore include various stereoisomers. All stereoisomers fall within the scope of embodiments.

[063] Conforme usado neste documento, “quantidade terapeuticamente/farmaceuticamente efetiva”, quando aplicado às composições conforme reveladas neste documento, refere-se a uma quantidade da composição suficiente para ocasionar um resultado biológico desejado. Esse resultado pode ser alívio das manifestações, sintomas ou causas de uma doença, ou qualquer outra alteração desejada de um sistema biológico.[063] As used herein, “therapeutically/pharmaceutically effective amount”, when applied to the compositions as disclosed herein, refers to an amount of the composition sufficient to bring about a desired biological result. This result may be relief from the manifestations, symptoms, or causes of a disease, or any other desired change in a biological system.

[064] Conforme usados neste documento, os termos “resíduo de peptídeo” e “estrutura de peptídeo” tencionam incluir peptídeos compostos por L-aminoácidos de ocorrência natural e os D- aminoácidos correspondentes, bem como derivados peptídicos, análogos peptídicos e peptidomiméticos das estruturas de L-aminoácidos de ocorrência natural. Abordagens para desenvolver análogos, derivados e miméticos peptídicos são conhecidas na técnica. Por exemplo, vide Farmer, P.S., em: Drug Design E.J. Ariens, ed. Academic Press, Nova York, 1980, vol. 10, pp. 119 a 143; Ball J.B. & Alewood, P.F., 1990, J. Mol. Recognition, 3: 55; Morgan, B.A. & Gainor, J.A., 1989, Ann. Rep. Med. Chem., 24: 243; e Freidinger, R.M., 1989, Trends Pharmacol. Sci., 10: 270; Luthman et al., 1996, A Textbook of Drug Design and Development, 14: 386 a 406, 2a Ed., Harwood Academic Publishers; Joachim Grante, Angew, 1994, Chem. Int. Ed. Engl., 33: 1.699 a 1.720; Fauchere, J., 1986, Adv. Drug Res., 15: 29; Veber e Freidinger, 1985, TINS, p. 392; Evans et al., 1987, J. Med. Chem., 30: 229, todos os quais incorporam-se ao presente documento na íntegra por referência. Peptidomiméticos que sejam estruturalmente semelhantes a peptídeos terapeuticamente úteis podem ser usados para produzir um efeito terapêutico ou profilático equivalente ou intensificado por meio de métodos conhecidos na técnica e descritos adicionalmente nas referências a seguir: Spatola, A.F., 1983, em: Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides, and Proteins, B. Weinstein, eds., Marcel Dekker, Nova York, p. 267; Spatola, A.F., 1983, Vega Data, Vol. 1, Edição 3, Peptide Backbone Modifications (análise geral); Morley, 1980, Trends. Pharm. Sci., pp. 463 a 468, (análise geral); Hudson et al., 1979, Int. J. Pept. Prot. Res., 14: 177 a 185 (-CH2NH-, CH2CH2-); Spatola et al., 1986, Life Sci., 38: 1.243 a 1.249 (-CH2-S); Hann, 1982, J. Chem. Soc. Perkin. Trans. 1, 307 a 314 (-CH-CH-, cis e trans); Almquist et al., 1980, J. Med. Chem., 23: 1.392 a 1.398, (-COCH2-); Jennings-White et al., 1982, Tetrahedron Lett., 23: 2.533 (-COCH2-); Szelke et al., 1982, Pedido Europeu EP 45.665 (-CH(OH)CH2—); Holladay et al., 1983, Tetrahedron Lett., 24: 4.401 a 4.404 (-C(OH)CH2—); e Hruby, 1982, Life Sci., 31: 189 a 199 (-CH2-S-); cada um dos quais incorpora-se ao presente documento na íntegra por referência.[064] As used herein, the terms “peptide residue” and “peptide structure” are intended to include peptides composed of naturally occurring L-amino acids and the corresponding D-amino acids, as well as peptide derivatives, peptide analogues and peptidomimetic structures. of naturally occurring L-amino acids. Approaches to developing peptide analogs, derivatives and mimetics are known in the art. For example, see Farmer, P.S., in: Drug Design E.J. Ariens, ed. Academic Press, New York, 1980, vol. 10, pp. 119 to 143; Ball J.B. & Alewood, P.F., 1990, J. Mol. Recognition, 3: 55; Morgan, B. A. & Gainor, J. A., 1989, Ann. Rep. Med. Chem., 24: 243; and Freidinger, R.M., 1989, Trends Pharmacol. Sci., 10: 270; Luthman et al., 1996, A Textbook of Drug Design and Development, 14: 386 to 406, 2nd Ed., Harwood Academic Publishers; Joachim Grante, Angew, 1994, Chem. Int. Ed. Engl., 33: 1699 to 1720; Fauchere, J., 1986, Adv. Drug Res., 15: 29; Veber and Freidinger, 1985, TINS, p. 392; Evans et al., 1987, J. Med. Chem., 30: 229, all of which are incorporated herein in full by reference. Peptidomimetics that are structurally similar to therapeutically useful peptides can be used to produce an equivalent or enhanced therapeutic or prophylactic effect by methods known in the art and further described in the following references: Spatola, A.F., 1983, in: Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides, and Proteins, B. Weinstein, eds., Marcel Dekker, New York, p. 267; Spatola, A.F., 1983, Vega Data, Vol. 1, Issue 3, Peptide Backbone Modifications (general review); Morley, 1980, Trends. Pharm. Sci., pp. 463 to 468, (general analysis); Hudson et al., 1979, Int. J. Pept. Prot. Res., 14: 177 to 185 (-CH2NH-, CH2CH2-); Spatola et al., 1986, Life Sci., 38: 1243 to 1249 (-CH2-S); Hann, 1982, J. Chem. Soc.Perkin. Trans. 1, 307 to 314 (-CH-CH-, cis and trans); Almquist et al., 1980, J. Med. Chem., 23: 1392 to 1398, (-COCH2-); Jennings-White et al., 1982, Tetrahedron Lett., 23: 2,533 (-COCH2-); Szelke et al., 1982, European Application EP 45,665 (-CH(OH)CH2—); Holladay et al., 1983, Tetrahedron Lett., 24: 4,401 to 4,404 (-C(OH)CH2—); and Hruby, 1982, Life Sci., 31: 189 to 199 (-CH2-S-); each of which is incorporated herein in its entirety by reference.

[065] A substituição sistemática de um ou mais aminoácidos de uma sequência consenso por um D-aminoácido do mesmo tipo (por exemplo, D-lisina em vez de L-lisina) pode ser usada para gerar mais peptídeos estáveis. Além disso, peptídeos limitados com uma sequência consenso ou uma variação da sequência consenso substancialmente idêntica podem ser gerados por meio de métodos conhecidos na técnica (Rizo et al., 1992, Ann. Rev. Biochem., 61: 387, incorporado ao presente documento na íntegra por referência); por exemplo, a adição de resíduos de cisteína internos capazes de formar pontes de dissulfeto intramoleculares que ciclizam o peptídeo ou o uso de resíduos de ácido aminoisobutírico (Aib) para estabilizar a hélice.[065] The systematic replacement of one or more amino acids from a consensus sequence with a D-amino acid of the same type (e.g., D-lysine instead of L-lysine) can be used to generate more stable peptides. Furthermore, limited peptides with a consensus sequence or a substantially identical consensus sequence variation can be generated by methods known in the art (Rizo et al., 1992, Ann. Rev. Biochem., 61: 387, incorporated herein in full by reference); for example, the addition of internal cysteine residues capable of forming intramolecular disulfide bridges that cyclize the peptide or the use of aminoisobutyric acid (Aib) residues to stabilize the helix.

[066] Aminoácidos sintéticos ou de ocorrência não natural referem-se a aminoácidos que não ocorrem naturalmente in vivo, mas que, todavia, podem ser incorporados às estruturas de peptídeo descritas neste documento.[066] Synthetic or non-naturally occurring amino acids refer to amino acids that do not occur naturally in vivo, but which, nevertheless, can be incorporated into the peptide structures described herein.

[067] Conforme usado neste documento, um “derivado” de um composto, por exemplo, de um peptídeo ou aminoácido, refere-se a uma forma desse composto na qual um ou mais grupos reativos no composto foram derivatizados com um grupo substituinte. Exemplos de derivados de peptídeos incluem peptídeos nos quais uma cadeia lateral de um aminoácido, o núcleo do peptídeo ou o amino-terminal ou carbóxi-terminal foi derivatizado (por exemplo, compostos peptídicos com ligações de amida metilada ou aminoácidos ou resíduos de aminoácidos hidroxilados).[067] As used herein, a “derivative” of a compound, for example, of a peptide or amino acid, refers to a form of that compound in which one or more reactive groups in the compound have been derivatized with a substituent group. Examples of peptide derivatives include peptides in which an amino acid side chain, the peptide core, or the amino terminus or carboxy terminus has been derivatized (e.g., peptide compounds with methylated amide bonds or hydroxylated amino acids or amino acid residues) .

[068] Conforme usado neste documento, um “análogo” de um composto refere-se a um composto que mantém as estruturas químicas do composto de referência necessárias para sua atividade funcional e que, além disso, contém também certas estruturas químicas que diferem do composto de referência. Um exemplo de um análogo de um peptídeo de ocorrência natural é um peptídeo com um ou mais aminoácidos de ocorrência não natural ou substituições por aminoácidos conservadores, como, por exemplo, uma substituição indicada na Tabela 3 abaixo. Conforme usado neste documento, um “mimético” de um composto refere-se a um composto no qual as estruturas químicas do composto de referência necessárias para sua atividade funcional foram substituídas por outras estruturas químicas que imitam a estrutura do composto de referência. Exemplos de peptidomiméticos incluem compostos peptídicos nos quais o núcleo peptídico é substituído por uma ou mais moléculas de benzodiazepina (vide, por exemplo, James, G.L., et al., 1993, Science, 260: 1.937 a 1.942, que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência), peptídeos nos quais todos os L-aminoácidos são substituídos por D-aminoácidos correspondentes, e peptídeos “retro- inverso” (vide a Patente dos EUA no 4.522.752, em nome de Sisto, a qual se incorpora ao presente documento na íntegra por referência), descritos em detalhes abaixo, James, G.L., et al., 1993 Science, 260: 1.937 a 1.942, e Goodman et al., 1981, Perspectives in Peptide Chemistry, pp. 283 a 294, que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência. Vide também a Patente dos EUA no 4.522.752 em nome de Sisto, que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência, para uma descrição mais minuciosa sobre peptídeos “retro- inverso”. Outros derivados incluem derivados da hidroximetila C- terminal, derivados modificados com O (por exemplo, hidroximetil- benzil-éter C-terminal) e derivados modificados no N-terminal que incluem amidas substituídas, tais como alquilamidas e hidrazidas.[068] As used herein, an “analog” of a compound refers to a compound that maintains the chemical structures of the reference compound necessary for its functional activity and that, in addition, also contains certain chemical structures that differ from the compound of reference. An example of an analogue of a naturally occurring peptide is a peptide with one or more non-naturally occurring amino acids or conservative amino acid substitutions, such as, for example, a substitution indicated in Table 3 below. As used herein, a “mimetic” of a compound refers to a compound in which the chemical structures of the reference compound necessary for its functional activity have been replaced by other chemical structures that mimic the structure of the reference compound. Examples of peptidomimetics include peptide compounds in which the peptide core is replaced by one or more benzodiazepine molecules (see, e.g., James, G.L., et al., 1993, Science, 260:1937-1942, which is incorporated herein in full by reference), peptides in which all L-amino acids are replaced by corresponding D-amino acids, and “retro-inverse” peptides (see U.S. Patent No. 4,522,752, in the name of Sisto, which is incorporated into the this document in full by reference), described in detail below, James, G.L., et al., 1993 Science, 260: 1937 to 1942, and Goodman et al., 1981, Perspectives in Peptide Chemistry, pp. 283 to 294, which is incorporated into this document in full by reference. See also US Patent No. 4,522,752 in the name of Sisto, which is incorporated herein in its entirety by reference, for a more detailed description of “retro-inverse” peptides. Other derivatives include C-terminal hydroxymethyl derivatives, O-modified derivatives (e.g., C-terminal hydroxymethylbenzyl ether), and N-terminal modified derivatives that include substituted amides, such as alkylamides and hydrazides.

[069] Conforme usado neste documento, o termo “estrutura de aminoácido” (tal como uma “estrutura da leucina”, uma “estrutura da fenilalanina” ou uma “estrutura da glutamina”) tenciona a incluir o aminoácido, bem como análogos, derivados e miméticos do aminoácido que mantenham a atividade funcional do composto. Por exemplo, o termo “estrutura da fenilalanina” tenciona incluir a fenilalanina, bem como a piridilalanina e a homofenilalanina. O termo “estrutura da leucina” tenciona incluir a leucina, bem como uma substituição com valina, isoleucina ou outro aminoácido natural ou não com uma cadeia lateral alifática, tal como a norleucina.[069] As used herein, the term “amino acid structure” (such as a “leucine structure”, a “phenylalanine structure” or a “glutamine structure”) is intended to include the amino acid, as well as analogues, derivatives and amino acid mimetics that maintain the functional activity of the compound. For example, the term “phenylalanine structure” is intended to include phenylalanine, as well as pyridylalanine and homophenylalanine. The term "leucine structure" is intended to include leucine, as well as a substitution with valine, isoleucine or other natural or non-natural amino acid with an aliphatic side chain, such as norleucine.

[070] O amino-terminal e/ou carbóxi-terminal dos compostos peptídicos modificados revelados neste documento podem ser amino-terminais e carbóxi-terminais padrão conforme vistos na maioria das proteínas. Como alternativa, o amino-terminal e/ou carbóxi-terminal do composto peptídico pode ser alterado quimicamente pela adição ou substituição de um grupo derivado. Grupos derivados de amino que podem se fazer presentes no N-terminal de um composto peptídico (isto é, podem ser Y1) incluem grupos acetila, arila, aralquila, acila, epoxissucinila e colesterila. Grupos derivados de carbóxi que podem se fazer presentes no C-terminal de um composto peptídico (isto é, podem ser Y2) incluem álcool, aldeído, epoxissucinato, haleto ácido, carbonila, halometano, grupos diazometano e carboxamida. A carboxamida é preferida.[070] The amino-terminal and/or carboxy-terminal of the modified peptide compounds disclosed herein can be standard amino-terminal and carboxy-terminal as seen in most proteins. Alternatively, the amino-terminal and/or carboxy-terminal of the peptide compound can be chemically altered by the addition or substitution of a derivative group. Amino-derived groups that may be present at the N-terminus of a peptide compound (i.e., may be Y1) include acetyl, aryl, aralkyl, acyl, epoxysuccinyl and cholesteryl groups. Carboxy-derived groups that may be present at the C-terminus of a peptide compound (i.e., may be Y2) include alcohol, aldehyde, epoxysuccinate, acid halide, carbonyl, halomethane, diazomethane and carboxamide groups. Carboxamide is preferred.

[071] Conforme usado neste documento, “marcação detectável” ou “agente de imagem” referem-se a materiais que, quando ligados covalentemente a um composto, permitem detectá-lo, incluindo, entre outras, detecção in vivo em um paciente a quem foi administrado um antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado. Marcações detectáveis adequadas são bem conhecidas na técnica e incluem, à guisa de exemplo, radioisótopos, marcações fluorescentes (por exemplo, fluoresceína) e seus semelhantes. A marcação detectável específica usada não é essencial e é selecionada com base na quantidade de marcação que será usada, bem como na toxicidade da marcação à quantidade de marcação usada. A seleção da marcação com base nesses fatores está dentro da capacidade dos versados na técnica.[071] As used herein, “detectable label” or “imaging agent” refers to materials that, when covalently linked to a compound, allow it to be detected, including, but not limited to, in vivo detection in a patient to whom an antagonist of the peptide related to the modified calcitonin gene was administered. Suitable detectable labels are well known in the art and include, by way of example, radioisotopes, fluorescent labels (e.g., fluorescein) and the like. The specific detectable label used is not essential and is selected based on the amount of label that will be used, as well as the toxicity of the label to the amount of label used. Selection of marking based on these factors is within the ability of those skilled in the art.

[072] A ligação covalente da marcação detectável com o peptídeo ou peptidomimético é realizada por métodos convencionais bem conhecidos na técnica. Por exemplo, quando o radioisótopo 125I é usada como marcação detectável, a ligação covalente de 125I ao peptídeo ou peptidomimético pode ser obtida incorporando-se o aminoácido tirosina ao peptídeo ou peptidomimético e, então, iodando o peptídeo (vide, por exemplo, Weaner et al., 1994, Synthesis and Applications of Isotopically Labelled Compounds, pp. 137 a 140). Se a tirosina não se fizer presente no peptídeo ou peptidomimético, a incorporação da tirosina ao N-terminal ou C-terminal do peptídeo ou peptidomimético pode ser obtida por química bem conhecida. À semelhança, 32P pode ser incorporado ao peptídeo ou peptidomimético como grupo funcional fosfato através, por exemplo, de um grupo hidroxila no peptídeo ou peptidomimético usando química convencional.[072] The covalent linkage of the detectable label with the peptide or peptidomimetic is carried out by conventional methods well known in the art. For example, when the radioisotope 125I is used as a detectable label, covalent attachment of 125I to the peptide or peptidomimetic can be achieved by incorporating the amino acid tyrosine into the peptide or peptidomimetic and then iodinating the peptide (see, for example, Weaner et al. al., 1994, Synthesis and Applications of Isotopically Labeled Compounds, pp. 137 to 140). If tyrosine is not present in the peptide or peptidomimetic, incorporation of tyrosine into the N-terminus or C-terminus of the peptide or peptidomimetic can be achieved by well-known chemistry. Similarly, 32P can be incorporated into the peptide or peptidomimetic as a phosphate functional group through, for example, a hydroxyl group in the peptide or peptidomimetic using conventional chemistry.

[073] Conforme usado neste documento, o termo “agente terapêutico” significa um agente capaz de exercer um efeito terapêutico desejado para uma manifestação de doença específica, incluindo, entre outros, um agente de redução da enxaqueca ou da dor.[073] As used herein, the term “therapeutic agent” means an agent capable of exerting a desired therapeutic effect for a specific disease manifestation, including, but not limited to, a migraine or pain reducing agent.

[074] Conforme usado neste documento, o termo “hélice a” significa um componente estrutural que forma uma estrutura proteica hélice a ou qualquer outro análogo estrutural que resulta em um posicionamento semelhante dos domínios X1 e Z1 em um receptor.[074] As used herein, the term “a-helix” means a structural component that forms an a-helical protein structure or any other structural analogue that results in a similar positioning of the X1 and Z1 domains in a receptor.

Preparação de Peptídeos e PeptidomiméticosPreparation of Peptides and Peptidomimetics 1. Síntese da Fase Sólida1. Solid Phase Synthesis

[075] Os antagonistas do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado descritos neste documento podem ser preparados por métodos clássicos conhecidos na técnica, por exemplo, usando técnicas de fase sólida padrão. Vide, por exemplo, Merrifield, 1963, J. Am. Chem. Soc., 85: 2.149, que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência.[075] The modified calcitonin gene-related peptide antagonists described herein can be prepared by classical methods known in the art, for example, using standard solid phase techniques. See, for example, Merrifield, 1963, J. Am. Chem. Soc., 85: 2,149, which is incorporated herein in its entirety by reference.

[076] Esses procedimentos de síntese de peptídeos em fase sólida são bem conhecidos na técnica e descritos mais minuciosamente em J.M. Stewart e J.D. Young, 1984, Solid Phase Peptide Syntheses, 2a Ed., Pierce Chemical Company.[076] These solid phase peptide synthesis procedures are well known in the art and described in more detail in J.M. Stewart and J.D. Young, 1984, Solid Phase Peptide Syntheses, 2nd Ed., Pierce Chemical Company.

2. Aminoácidos Sintéticos2. Synthetic Amino Acids

[077] Esses procedimentos também podem ser usados para sintetizar peptídeos em que aminoácidos diferentes dos 20 aminoácidos codificados geneticamente de ocorrência natural são substituídos em uma, duas ou mais posições de quaisquer antagonistas do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado conforme revelados neste documento. Por exemplo, a naftilalanina pode ser substituída por triptofano, facilitando assim a síntese. Outros aminoácidos sintéticos que podem ser substituídos nos peptídeos das presentes concretizações incluem L-hidroxipropila, L-3, 4-dihidróxi- fenilalanila, d-aminoácidos, tais como L-d-hidroxilisila e D-d- metilalanila, L-a-metilalanila, e—aminoácidos e isoquinolila. D- aminoácidos e aminoácidos sintéticos de ocorrência não natural também podem ser incorporados aos peptídeos das presentes concretizações (vide, por exemplo, Roberts et al., 1983, Unusual Amino/Acids in Peptide Synthesis, 5: 341 a 449).[077] These procedures can also be used to synthesize peptides in which amino acids other than the 20 naturally occurring genetically encoded amino acids are substituted at one, two or more positions of any modified calcitonin gene-related peptide antagonists as disclosed herein. For example, naphthylalanine can be replaced by tryptophan, thus facilitating synthesis. Other synthetic amino acids that may be substituted in the peptides of the present embodiments include L-hydroxypropyl, L-3,4-dihydroxyphenylalanyl, d-amino acids, such as L-d-hydroxylysyl and D-d-methylalanyl, L-a-methylalanyl, e-amino acids and isoquinolyl . D-amino acids and non-naturally occurring synthetic amino acids can also be incorporated into the peptides of the present embodiments (see, for example, Roberts et al., 1983, Unusual Amino/Acids in Peptide Synthesis, 5: 341 to 449).

[078] Em algumas concretizações, as cadeias laterais de ocorrência natural dos 20 aminoácidos codificados geneticamente, ou qualquer outra cadeia lateral conforme revelada neste documento, podem ser transpostas ao nitrogênio do aminoácido, em vez do a- carbono, como se encontra tipicamente nos peptídeos.[078] In some embodiments, the naturally occurring side chains of the 20 genetically encoded amino acids, or any other side chain as disclosed herein, can be transposed to the nitrogen of the amino acid, rather than the a-carbon, as typically found in peptides. .

[079] Tabela 2: Abreviações de uma letra para os aminoácidos canônicos. Abreviações em três letras entre parênteses. TABELA 2 [079] Table 2: One-letter abbreviations for canonical amino acids. Three-letter abbreviations in parentheses. TABLE 2

[080] A Nomenclatura e o Simbolismo para Aminoácidos e Peptídeos de acordo com a Comissão Conjunta UPAC-IUB sobre Nomenclatura Bioquímica (JCBN) foram publicados nos documentos a seguir: Biochem. J., 1984, 219, 345 a 373; Eur. J. Biochem., 1984, 138, 9 a 5 37; 1985, 152, I; 1993, 213, 2; Internat. J. Pept. Prot. Res., 1984, 24, depois da p. 84; J. Biol. Chem., 1985, 260, 14 a 42; Pure Appl. Chem., 1984, 56, 595 a 624; Amino Acids and Peptides, 1985, 16, 387 a 410; Biochemical Nomenclature and Related Documents, 2a edição, Portland Press, 1992, páginas 39 a 69.[080] The Nomenclature and Symbolism for Amino Acids and Peptides according to the Joint UPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature (JCBN) were published in the following documents: Biochem. J., 1984, 219, 345 to 373; Eur. J. Biochem., 1984, 138, 9 to 5 37; 1985, 152, I; 1993, 213, 2; Intern. J. Pept. Prot. Res., 1984, 24, after p. 84; J. Biol. Chem., 1985, 260, 14 to 42; Pure Appl. Chem., 1984, 56, 595 to 624; Amino Acids and Peptides, 1985, 16, 387 to 410; Biochemical Nomenclature and Related Documents, 2nd edition, Portland Press, 1992, pages 39 to 69.

[081] Em algumas concretizações, a sequência de aminoácidos do presente antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado pode ser modificada em relação às sequências de SEQ ID No: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou 15 para que a modificação diminua a suscetibilidade à proteólise enzimática por parte do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado. Em algumas concretizações, essa modificação pode compreender a adição do N-terminal de uma sequência que compreende todo ou parte do polipeptídeo XTENS com 864 resíduos, um polipeptídeo que demonstrou aumentar a estabilidade proteica após a administração em um paciente. Vide, por exemplo, Schellenberger et al., 2009, Nature Biotechnology, 27(12): 1.186 a 1.192, que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência.[081] In some embodiments, the amino acid sequence of the present modified calcitonin gene-related peptide antagonist may be modified relative to the sequences of SEQ ID No: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 or 15 so that the modification decreases the susceptibility to enzymatic proteolysis by the modified calcitonin gene-related peptide antagonist. In some embodiments, this modification may comprise the addition of the N-terminus of a sequence comprising all or part of the 864-residue XTENS polypeptide, a polypeptide that has been shown to increase protein stability after administration to a patient. See, for example, Schellenberger et al., 2009, Nature Biotechnology, 27(12): 1,186 to 1,192, which is incorporated into this document in full by reference.

[082] Em algumas concretizações, o presente antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado pode incluir um ou mais resíduos de D-aminoácidos. Em algumas concretizações, a sequência de aminoácidos do presente antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado pode ser modificada em relação às sequências de SEQ ID No: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou 15 de modo que a modificação inclua a substituição de um ou mais resíduos de L-aminoácidos por resíduos de D-aminoácidos correspondentes.[082] In some embodiments, the present modified calcitonin gene-related peptide antagonist may include one or more D-amino acid residues. In some embodiments, the amino acid sequence of the present modified calcitonin gene-related peptide antagonist may be modified relative to the sequences of SEQ ID No: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 , 11, 12, 13, 14 or 15 so that the modification includes the replacement of one or more L-amino acid residues with corresponding D-amino acid residues.

[083] Em algumas concretizações, a sequência de aminoácidos do presente antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado pode ser modificada em relação às sequências de SEQ ID No: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou 15 de modo que a modificação inclua a substituição por um aminoácido conservador.[083] In some embodiments, the amino acid sequence of the present modified calcitonin gene-related peptide antagonist may be modified relative to the sequences of SEQ ID No: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 or 15 so that the modification includes replacement with a conservative amino acid.

[084] Os resíduos de ocorrência natural podem ser divididos em classes com base nas propriedades das cadeias laterais em comum: hidrófobo: norleucina (Nor), Met, Ala, Val, Leu, Ile; hidrófilo: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln; ácido: Asp, Glu; básico: His, Lys, Arg; resíduos que influenciam na orientação das cadeias: Gly, Pro; e aromático: Trp, Tyr, Phe.[084] Naturally occurring residues can be divided into classes based on the properties of the side chains in common: hydrophobic: norleucine (Nor), Met, Ala, Val, Leu, Ile; hydrophilic: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln; acid: Asp, Glu; basic: His, Lys, Arg; residues that influence the orientation of the chains: Gly, Pro; and aromatic: Trp, Tyr, Phe.

[085] As substituições por aminoácidos conservadores podem envolver a troca de um membro de uma classe por outro membro da mesma classe. As substituições por aminoácidos conservadores podem abranger resíduos de aminoácidos de ocorrência não natural, que são tipicamente incorporados pela síntese química de peptídeos em vez de pela síntese em sistemas biológicos. Esses incluem peptidomiméticos e outras formas invertidas ou inversas de aminoácidos.[085] Conservative amino acid substitutions may involve exchanging one member of a class for another member of the same class. Conservative amino acid substitutions can encompass non-naturally occurring amino acid residues, which are typically incorporated by chemical peptide synthesis rather than by synthesis in biological systems. These include peptidomimetics and other inverted or reversed forms of amino acids.

[086] Em algumas concretizações, as substituições por aminoácidos conservadores podem incluir a substituição de um resíduo de aminoácido não polar (hidrófobo), tal como isoleucina, valina, leucina, norleucina, alanina ou metionina, por outro, a substituição de um resíduo de aminoácido polar (hidrófilo) por outro, tal como entre arginina e lisina, entre glutamina e asparagina, entre treonina e serina, a substituição de um resíduo de aminoácido básico, tal como lisina, arginina ou histidina, por outro, ou a substituição de um resíduo ácido, tal como ácido aspártico ou ácido glutâmico, por outro. O sintagma “substituição por aminoácido conservador” também inclui o uso de um resíduo quimicamente derivatizado em vez de um resíduo não derivatizado, contanto que o referido polipeptídeo apresente a atividade antagonista exigida.[086] In some embodiments, conservative amino acid substitutions may include the replacement of a non-polar (hydrophobic) amino acid residue, such as isoleucine, valine, leucine, norleucine, alanine or methionine, with another, the replacement of a polar (hydrophilic) amino acid with another, such as between arginine and lysine, between glutamine and asparagine, between threonine and serine, the substitution of a basic amino acid residue, such as lysine, arginine or histidine, for another, or the substitution of a acidic residue, such as aspartic acid or glutamic acid, on the other. The phrase “conservative amino acid substitution” also includes the use of a chemically derivatized residue instead of a non-derivatized residue, provided that said polypeptide presents the required antagonistic activity.

[087] A Tabela 3 traz exemplos de substituições por resíduos de aminoácidos que podem ser usadas de acordo com as presentes concretizações. TABELA 3 [087] Table 3 provides examples of substitutions for amino acid residues that can be used according to the present embodiments. TABLE 3

[088] Em algumas concretizações, um grupo funcional básico de um aminoácido conforme revelado neste documento, tal como a guanidina da Arg, pode ser substituído por um bioisóstero de base.[088] In some embodiments, a basic functional group of an amino acid as disclosed herein, such as the guanidine of Arg, can be replaced by a base bioisostere.

[089] “Hidroxiprolina” refere-se a todos e quaisquer parentes de hidroxilação da prolina ou como aminoácidos livres ou incorporados a um peptídeo. Eles incluem a (2S,4R)-4-hidroxiprolina, bem como resíduos de prolina com estereoquímicas ou carbonos hidroxilados diferentes.[089] “Hydroxyproline” refers to any and all hydroxylation relatives of proline either as free amino acids or incorporated into a peptide. They include (2S,4R)-4-hydroxyproline as well as proline residues with different stereochemistry or hydroxylated carbons.

[090] Um grupo “O-carbóxi” refere-se a um grupo “RC(=O))-” onde R pode ser hidrogênio, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, cicloalquenila, cicloalquinila, arila, heteroarila, heteroaliciclila, aralquila ou (heteroaliciclil)alquila, conforme definidas acima. Um O-carbóxi pode ser substituído ou não.[090] An “O-carboxy” group refers to a group “RC(=O))-” where R can be hydrogen, alkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, cycloalkenyl, cycloalkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclyl, aralkyl or (heteroalicyclyl)alkyl, as defined above. An O-carboxy can be substituted or not.

[091] Um grupo “C-carbóxi” refere-se a um grupo “- C(=O)OR” onde R pode ser o mesmo definido para O-carbóxi. Um C- carbóxi pode ser substituído ou não.[091] A “C-carboxy” group refers to a “- C(=O)OR” group where R can be the same as that defined for O-carboxy. A C-carboxy can be substituted or not.

[092] Um grupo “C-amido” refere-se a um grupo “- C(=O)NRARB” onde RA e RB podem ser ou não iguais e podem ser definidos como R é definido para O-carbóxi. Um C-amido pode ser substituído ou não.[092] A “C-amido” group refers to a group “- C(=O)NRARB” where RA and RB may or may not be the same and can be defined as R is defined for O-carboxy. A C-starch can be substituted or not.

[093] Um grupo “N-amido” refere-se a um grupo “RC(=O)NRA-” onde R e RA podem ser ou não iguais e podem ser definidos como R é definido para O-carbóxi. Um N-amido pode ser substituído ou não.[093] An “N-amido” group refers to a “RC(=O)NRA-” group where R and RA may or may not be the same and can be defined as R is defined for O-carboxy. An N-starch can be substituted or not.

[094] Conforme usado neste documento, uma “amida” refere-se a um grupo “-C(=O)NRARB” onde RA e RB podem ser ou não iguais e podem ser definidos como R é definido para O-carbóxi. RA e RB podem ser Hidrogênio em algumas concretizações.[094] As used in this document, an “amide” refers to a group “-C(=O)NRARB” where RA and RB may or may not be the same and may be defined as R is defined for O-carboxy. RA and RB can be Hydrogen in some embodiments.

[095] Conforme usado neste documento, uma “amina” refere-se a um grupo “-NRARB” onde RA e RB podem ser ou não iguais e podem ser definidos como R é definido para O-carbóxi.[095] As used herein, an “amine” refers to a “-NRARB” group where RA and RB may or may not be the same and may be defined as R is defined for O-carboxy.

[096] Conforme usado neste documento, uma “ureia” refere-se a -NRAC(=O)NRB2 onde cada RA e RB é definido individualmente como R é definido para O-carbóxi.[096] As used herein, a “urea” refers to -NRAC(=O)NRB2 where each RA and RB is defined individually as R is defined for O-carboxy.

[097] É possível modificar prontamente os peptídeos das presentes concretizações por fosforilação (vide, por exemplo, W. Bannwarth et al., 1996 Biorganic and Medicinal Chemistry Letters, 6: 2.141 a 2.146), e outros métodos para produzir derivados peptídicos dos compostos das presentes concretizações são descritos em Hruby et al., 1990, Biochem. J. 268: 249 a 262. Sendo assim, os peptídeos conforme revelados neste documento também servem de base para preparar peptidomiméticos com atividade biológica semelhante.[097] It is possible to readily modify the peptides of the present embodiments by phosphorylation (see, for example, W. Bannwarth et al., 1996 Biorganic and Medicinal Chemistry Letters, 6: 2,141 to 2,146), and other methods to produce peptide derivatives of the compounds of the present embodiments are described in Hruby et al., 1990, Biochem. J. 268: 249 to 262. Therefore, the peptides as disclosed herein also serve as a basis for preparing peptidomimetics with similar biological activity.

3. Modificações Terminais3. Terminal Modifications

[098] Os versados na técnica perceberão que várias técnicas estão ao dispor para construir peptidomiméticos com a mesma atividade biológica desejada ou semelhante à do antagonista do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado correspondente, mas com atividade mais favorável do que o peptídeo de referência no que diz respeito à solubilidade, à estabilidade e à suscetibilidade à hidrólise ou proteólise. Vide, por exemplo, Morgan et al., 1989, Ann. Rep. Med. Chem., 24: 243 a 252. A seguir, descrevem-se métodos para preparar peptidomiméticos modificados no grupo amino N-terminal, no grupo carboxila C-terminal e/ou modificar uma ou mais das ligações de amido no peptídeo para uma ligação não amido. Deve-se ter em mente que duas ou mais dessas modificações podem ser acopladas em uma estrutura peptídica (por exemplo, modificação no grupo carboxila C- terminal e inclusão de uma ligação -CH2-carbamato entre dois aminoácidos no peptídeo). 1) . Modificações ao N-terminal[098] Those skilled in the art will appreciate that several techniques are available to construct peptidomimetics with the same or similar desired biological activity as the corresponding modified calcitonin gene-related peptide antagonist, but with more favorable activity than the reference peptide in the which concerns solubility, stability and susceptibility to hydrolysis or proteolysis. See, for example, Morgan et al., 1989, Ann. Rep. Med. Chem., 24: 243 to 252. The following describes methods for preparing peptidomimetics modified at the N-terminal amino group, the C-terminal carboxyl group and/or modifying one or more of the amide bonds in the peptide for a non-starch bond. It should be kept in mind that two or more of these modifications can be coupled into a peptide structure (e.g., modification of the C-terminal carboxyl group and inclusion of a -CH2-carbamate bond between two amino acids in the peptide). 1) . Modifications to the N-terminus

[099] Os peptídeos normalmente são sintetizados como o ácido livre, mas, conforme mencionado acima, podem ser prontamente preparados como a amida ou o éster. Também é possível modificar o amino-terminal e/ou o carbóxi-terminal dos compostos peptídicos para produzir outros compostos proveitosos. As modificações ao aminoterminal incluem metilação (isto é., -NHCH3 ou -NH(CH3)2), acetilação, adicionar um grupo benziloxicarbonila, ou bloquear o amino-terminal com qualquer grupo bloqueador que contenha uma função carboxilato definida por RCOO-, onde R é selecionado dentre o grupo composto por naftila, acridinila, esteroidila e grupos semelhantes.[099] Peptides are normally synthesized as the free acid, but, as mentioned above, they can be readily prepared as the amide or ester. It is also possible to modify the amino-terminal and/or carboxy-terminal of peptide compounds to produce other useful compounds. Modifications to the amino terminus include methylation (i.e., -NHCH3 or -NH(CH3)2), acetylation, adding a benzyloxycarbonyl group, or blocking the amino terminus with any blocking group that contains a carboxylate function defined by RCOO-, where R is selected from the group consisting of naphthyl, acridinyl, steroidyl and similar groups.

[100] As modificações ao amino-terminal são conforme ditadas acima e incluem alquilar, acetilar, adicionar um grupo carbobenzoíla, formar um grupo succinimida etc. (vide, por exemplo, Murray et al., 1995, Burger’s Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5a ed., Vol. 1, Manfred E. Wolf, ed., John Wiley and Sons, Inc., que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência).[100] Modifications to the amino terminus are as dictated above and include alkylation, acetylation, adding a carbobenzoyl group, forming a succinimide group, etc. (see, for example, Murray et al., 1995, Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5th ed., Vol. 1, Manfred E. Wolf, ed., John Wiley and Sons, Inc., which is incorporated herein in full by reference).

[101] O N-terminal também pode ser modificado pela adição de ao menos um resíduo de N-terminal ao fragmento X1. Técnicas para avaliar o impacto de extensões N-terminal em peptídeos são conhecidas na técnica, por exemplo, em Schellenberger, et al., 2009, Nature Biotechnology, 27(12): 1.186 a 1.192, que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência.[101] The N-terminus can also be modified by adding at least one N-terminal residue to the X1 fragment. Techniques for evaluating the impact of N-terminal extensions on peptides are known in the art, for example, in Schellenberger, et al., 2009, Nature Biotechnology, 27(12): 1,186 to 1,192, which is incorporated herein in its entirety by reference.

2) . Modificações ao C-terminaltwo) . Modifications to the C-terminus

[102] Modificações ao carbóxi-terminal incluem substituir o ácido livre por um grupo carboxamida ou formar um lactamo cíclico no carbóxi-terminal para introduzir restrições estruturais. Ao preparar peptidomiméticos cujo grupo carboxila C-terminal é substituído pela amida -C(O)NR3R4, utiliza-se uma resina benzidrilamina como suporte sólido para a síntese peptídica. Ao concluir a síntese, o tratamento com fluoreto de hidrogênio para liberar o peptídeo do suporte resulta diretamente na amida peptídica livre (isto é, o C-terminal é -C(O)NH2). Como alternativa, o uso da resina clorometilatada durante a síntese peptídica junto com a reação com amônia para clivar o peptídeo protegido nas cadeias laterais contra o suporte produz a amida peptídica livre, e a reação com uma alquilamina ou uma dialquilamina produz uma alquilamida ou dialquilamida protegida nas cadeias laterais (isto é, o C-terminal é -C(O)NRR1, onde R e R1 são definidos conforme acima). A proteção nas cadeias laterais é, então, removida do jeito típico por tratamento com fluoreto de hidrogênio para obter as amidas, alquilamidas ou dialquilamidas livres.[102] Modifications to the carboxy terminus include replacing the free acid with a carboxamide group or forming a cyclic lactam at the carboxy terminus to introduce structural restrictions. When preparing peptidomimetics whose C-terminal carboxyl group is replaced by the amide -C(O)NR3R4, a benzhydrylamine resin is used as a solid support for peptide synthesis. Upon completion of the synthesis, treatment with hydrogen fluoride to release the peptide from the support directly results in the free peptide amide (i.e., the C-terminus is -C(O)NH2). Alternatively, use of the chloromethylated resin during peptide synthesis along with the reaction with ammonia to cleave the peptide protected in the side chains against the support produces the free peptide amide, and the reaction with an alkylamine or a dialkylamine produces a protected alkylamide or dialkyl amide. on the side chains (i.e., the C-terminus is -C(O)NRR1, where R and R1 are defined as above). The protection on the side chains is then removed in the typical fashion by treatment with hydrogen fluoride to obtain the free amides, alkylamides or dialkyl amides.

[103] Além das modificações ao N-terminal supramencionadas, os antagonistas peptídicos modificados descritos neste documento, incluindo peptidomiméticos, podem ser vantajosamente modificados por um ou mais de vários polímeros hidrófilos ou ligados covalentemente a estes. Descobriu-se que, quando os compostos peptídicos são derivatizados com um polímero hidrófilo, suas meias vidas de solubilidade e circulação aumentam e sua imunogenicidade é mascarada. Para surpresa geral, o supracitado pode ser obtido com pouca, se alguma, diminuição em sua atividade de ligação. Em algumas concretizações, os antagonistas do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado conforme revelados e descritos neste documento podem ser derivatizados com esses polímeros, ou acoplados a estes, usando qualquer um dos métodos definidos em Zallipsky, S., 1995, Bioconjugate Chem, 6: 150 a 165; Monfardini, C, et al., 1995, Bioconjugate Chem, 6: 62 a 69; Patentes dos EUA no 4.640.835, 4.496.689, 4.301.144, 4.670.417, 4.791.192, 4.179.337 ou WO 95/34326, todos os quais incorporam-se ao presente documento na íntegra por referência.[103] In addition to the aforementioned N-terminal modifications, the modified peptide antagonists described herein, including peptidomimetics, can be advantageously modified by one or more of several hydrophilic polymers or covalently linked thereto. It has been found that when peptide compounds are derivatized with a hydrophilic polymer, their solubility and circulation half-lives increase and their immunogenicity is masked. To everyone's surprise, the aforementioned can be obtained with little, if any, decrease in its binding activity. In some embodiments, modified calcitonin gene-related peptide antagonists as disclosed and described herein can be derivatized with, or coupled to, these polymers using any of the methods defined in Zallipsky, S., 1995, Bioconjugate Chem, 6 : 150 to 165; Monfardini, C, et al., 1995, Bioconjugate Chem, 6: 62 to 69; US Patent Nos. 4,640,835, 4,496,689, 4,301,144, 4,670,417, 4,791,192, 4,179,337 or WO 95/34326, all of which are incorporated herein in full by reference.

4. Modificações do Esqueleto4. Skeleton Modifications

[104] Outros métodos para produzir derivados peptídicos dos compostos são descritos em Hruby et al., 1990, Biochem. J., 268(2): 249 a 262, que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência. Sendo assim, os compostos peptídicos também servem como modelos estruturais para compostos não peptídicos com atividade biológica semelhante. Os versados na técnica perceberão que várias técnicas estão ao dispor para construir compostos com a mesma atividade biológica desejada ou semelhante à do composto peptídico de referência, mas com atividade mais favorável do que o peptídeo de referência no que diz respeito à solubilidade, à estabilidade e à suscetibilidade à hidrólise ou proteólise. Vide Morgan et al., 1989, Ann. Rep. Med. Chem., 24: 243 a 252, que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência.[104] Other methods for producing peptide derivatives of the compounds are described in Hruby et al., 1990, Biochem. J., 268(2): 249 to 262, which is incorporated into this document in full by reference. Therefore, peptide compounds also serve as structural models for non-peptide compounds with similar biological activity. Those skilled in the art will appreciate that several techniques are available to construct compounds with the same or similar desired biological activity as the reference peptide compound, but with more favorable activity than the reference peptide with respect to solubility, stability and susceptibility to hydrolysis or proteolysis. See Morgan et al., 1989, Ann. Rep. Med. Chem., 24: 243 to 252, which is incorporated into this document in its entirety by reference.

5. Formação da Ligação de Dissulfeto5. Disulfide Bond Formation

[105] Os compostos podem existir em forma ciclizada com uma ligação de dissulfeto intramolecular entre os grupos tiol das cisteínas.[105] The compounds can exist in cyclized form with an intramolecular disulfide bond between the thiol groups of the cysteines.

[106] Outras concretizações incluem análogos desses derivados de dissulfeto em que um dos enxofres foi substituído por um grupo CH2 ou outro isóstero por enxofre. Esses análogos podem ser produzidos por meio de uma substituição intramolecular ou intermolecular usando métodos conhecidos na técnica.[106] Other embodiments include analogues of these disulfide derivatives in which one of the sulfurs has been replaced by a CH2 group or another sulfur isostere. Such analogs can be produced through intramolecular or intermolecular substitution using methods known in the art.

[107] Como alternativa, o amino-terminal do peptídeo pode ser encapsulado com um ácido acético a-substituído, em que o substituinte a é um grupo de saída, tal como um ácido a-haloacético, por exemplo, ácido a-cloroacético, ácido a-bromoacético ou ácido a- iodoacético. Os peptídeos das presentes concretizações podem ser ciclizados ou dimerizados por substituição do grupo de saída pelo enxofre do resíduo de cisteína ou homocisteína. Vide, por exemplo, Andreu et al., 1994, Meth. Mol. Bio., 35(7): 91 a 169; Barker et al., 1992, J. Med. Chem., 35: 2.040 a 2.048; e Or et al., 1991, J. Org. Chem., 56: 3.146 a 3.149, cada um dos quais incorpora-se ao presente documento na íntegra por referência.[107] Alternatively, the amino-terminus of the peptide can be encapsulated with an a-substituted acetic acid, wherein the a-substituent is a leaving group, such as an a-haloacetic acid, e.g., a-chloroacetic acid, a-bromoacetic acid or a-iodoacetic acid. The peptides of the present embodiments can be cyclized or dimerized by replacing the leaving group with the sulfur of the cysteine or homocysteine residue. See, for example, Andreu et al., 1994, Meth. Mol. Bio., 35(7): 91 to 169; Barker et al., 1992, J. Med. Chem., 35: 2040 to 2048; and Or et al., 1991, J. Org. Chem., 56: 3146 to 3149, each of which is incorporated herein in its entirety by reference.

[108] Em algumas concretizações, os antagonistas do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina modificado conforme revelados e descritos neste documento também podem ser preparados por técnicas com DNA recombinante bem conhecidas na indústria.[108] In some embodiments, modified calcitonin gene-related peptide antagonists as disclosed and described herein can also be prepared by recombinant DNA techniques well known in the industry.

[109] Algumas concretizações incluem composições farmacêuticas que compreendem, como ingrediente ativo, ao menos um dos presentes peptídeos modificados ou peptidomiméticos revelados neste documento associado a um veículo farmacêutico ou diluente. Essas composições farmacêuticas podem ser administradas por qualquer meio, como é de conhecimento dos versados na técnica, incluindo, entre outros, vias de administração oral, pulmonar, parenteral (injeção intramuscular, intraperitoneal, intravenosa ou subcutânea), inalacional (por meio de uma fórmula em pó fino ou aerossol), transdérmica, intranasal ou sublingual, e podem ser formuladas em formas de dosagem adequadas para cada via de administração. Vide, por exemplo, Bernstein et al., Publicação de Patente PCT no WO 93/25221, publicada no dia 23 de dezembro de 1993; Pitt et al., Publicação de Patente PCT no WO 94/17784, publicada no dia 18 de agosto de 1994; e Pitt et al., Pedido de Patente Europeu 613.683, publicado no dia 7 de setembro de 1994, cada um dos quais incorpora-se ao presente documento na íntegra por referência. Os compostos também podem ser administrados em formas de dosagem com liberação sustentada ou controlada, incluindo, entre outras, injeções de depósito, bombas osmóticas, adesivos transdérmicos (incluindo eletrotransporte) e seus semelhantes, para a administração prolongada e/ou temporizada realizada a uma velocidade predeterminada.[109] Some embodiments include pharmaceutical compositions that comprise, as an active ingredient, at least one of the present modified peptides or peptidomimetics disclosed in this document associated with a pharmaceutical carrier or diluent. These pharmaceutical compositions can be administered by any means, as is known to those skilled in the art, including, among others, oral, pulmonary, parenteral (intramuscular, intraperitoneal, intravenous or subcutaneous injection), inhalational (through a formula in fine powder or aerosol), transdermal, intranasal or sublingual, and can be formulated in dosage forms suitable for each route of administration. See, for example, Bernstein et al., PCT Patent Publication No. WO 93/25221, published December 23, 1993; Pitt et al., PCT Patent Publication No. WO 94/17784, published August 18, 1994; and Pitt et al., European Patent Application 613,683, published September 7, 1994, each of which is incorporated herein in its entirety by reference. The compounds may also be administered in sustained or controlled release dosage forms, including, but not limited to, depot injections, osmotic pumps, transdermal patches (including electrotransport) and the like, for prolonged and/or timed administration carried out at a rate predetermined.

[110] As composições farmacêuticas das presentes concretizações podem ser fabricadas de uma maneira conhecida em si, por exemplo, por meio de processos convencionais de mistura, dissolução, granulação, produção de drágeas, levigação, emulsificação, encapsulação ou produção de comprimidos.[110] The pharmaceutical compositions of the present embodiments can be manufactured in a manner known per se, for example, by means of conventional mixing, dissolving, granulating, tableting, levigation, emulsification, encapsulation or tableting processes.

[111] As composições farmacêuticas para uso de acordo com as presentes concretizações, portanto, podem ser formuladas de maneira convencional usando um ou mais veículos fisiologicamente aceitáveis com excipientes e auxiliares que facilitem o processamento dos compostos ativos em preparados que possam ser usados farmaceuticamente. A fórmula adequada depende da via de administração escolhida. Qualquer uma das técnicas, veículos e excipicentes familiares podem ser usados conforme adequado e conforme entendido na técnica; por exemplo, em Remington’s Pharmaceutical Sciences, acima.[111] The pharmaceutical compositions for use according to the present embodiments, therefore, can be formulated in a conventional manner using one or more physiologically acceptable carriers with excipients and auxiliaries that facilitate the processing of the active compounds into preparations that can be used pharmaceutically. The appropriate formula depends on the chosen route of administration. Any of the familiar techniques, vehicles and excipients may be used as appropriate and as understood in the art; for example, in Remington’s Pharmaceutical Sciences, above.

[112] Os injetáveis podem ser preparados em formas convencionais, sejam elas soluções líquidas ou suspensões, formas sólidas adequadas para a solução ou suspensão em líquido antes da injeção ou na forma de emulsões. Excipientes adequados incluem, por exemplo, água, solução salina, dextrose, manitol, lactose, lectina, albumina, glutamato de sólido, cloridrato de cisteína e seus semelhantes. Além disso, se desejado, as composições farmacêuticas injetáveis podem conter quantidades mínimas de substâncias auxiliares atóxicas, como agentes umectantes, tamponadores de pH e seus semelhantes. Tampões fisiologicamente compatíveis incluem, entre outros, solução de Hanks, solução de Ringer ou tampão de soro fisiológico. Se desejado, é possível usar preparados que intensifiquem a absorção (por exemplo, lipossomos).[112] Injectables can be prepared in conventional forms, whether liquid solutions or suspensions, solid forms suitable for solution or suspension in liquid before injection, or in the form of emulsions. Suitable excipients include, for example, water, saline, dextrose, mannitol, lactose, lectin, albumin, solid glutamate, cysteine hydrochloride and the like. Furthermore, if desired, injectable pharmaceutical compositions may contain minimal amounts of non-toxic auxiliary substances, such as wetting agents, pH buffers and the like. Physiologically compatible buffers include, but are not limited to, Hanks' solution, Ringer's solution, or saline buffer. If desired, it is possible to use preparations that enhance absorption (e.g. liposomes).

[113] No caso da administração transmucosa, penetrantes adequados à barreira que será penetrada podem ser usados na fórmula.[113] In the case of transmucosal administration, penetrants suitable for the barrier that will be penetrated can be used in the formula.

[114] As fórmulas farmacêuticas para a administração parenteral, por exemplo, por injeção de bolo ou infusão contínua, incluem soluções aquosas dos compostos ativos em forma solúvel em água. Além disso, as suspensões dos compostos ativos podem ser preparadas como suspensões de injeção oleosas adequadas. Solventes ou veículos lipofílicos adequados incluem óleos graxos, tais como óleo de gergelim, outros óleos orgânicos, tais como óleo de soja, uva ou amêndoas, ou ésteres de ácidos graxos sintéticos, tais como oleato de etila ou trigicerídeos, ou lipossomos. As suspensões de injeção aquosas podem conter substâncias que aumentem a viscosidade da suspensão, tais como carboximetil celulose sódica, sorbitol e/ou dextrano. Como opção, a suspensão também pode conter estabilizantes ou agentes adequados que aumentem a solubilidade dos presentes compostos a fim de permitir o preparo de soluções altamente concentradas. As fórmulas para injeção podem ser fornecidas em formas de dosagem simples, por exemplo, em ampolas, ou em recipientes multidosagem, com um conservante adicionado. As composições podem assumir a forma de suspensões, soluções ou emulsões em veículos oleosos ou aquosos e podem conter agentes formulatórios, tais como agentes de suspensão, agentes estabilizantes e/ou agentes dispersantes. Como alternativa, o ingrediente ativo pode ser em pó para a mistura com um veículo adequado, por exemplo, água estéril sem pirogênio, antes do uso.[114] Pharmaceutical formulas for parenteral administration, for example, by bolus injection or continuous infusion, include aqueous solutions of the active compounds in water-soluble form. Furthermore, suspensions of the active compounds can be prepared as suitable oily injection suspensions. Suitable lipophilic solvents or vehicles include fatty oils such as sesame oil, other organic oils such as soybean, grape or almond oil, or synthetic fatty acid esters such as ethyl oleate or triglycerides, or liposomes. Aqueous injection suspensions may contain substances that increase the viscosity of the suspension, such as sodium carboxymethyl cellulose, sorbitol and/or dextran. As an option, the suspension may also contain suitable stabilizers or agents that increase the solubility of the present compounds to allow the preparation of highly concentrated solutions. Injection formulas may be supplied in single dosage forms, for example, in ampoules, or in multi-dose containers, with an added preservative. The compositions may take the form of suspensions, solutions or emulsions in oily or aqueous vehicles and may contain formulatory agents, such as suspending agents, stabilizing agents and/or dispersing agents. Alternatively, the active ingredient may be in powder form for mixing with a suitable vehicle, e.g. sterile pyrogen-free water, before use.

[115] Para a administração oral, os presentes compostos podem ser formulados combinando os compostos ativos a veículos farmaceuticamente aceitáveis, tais como os revelados em D. J. Sarubbi, Oral GLP-1 Formulations, Pedido de Patente dos EUA no 2010/0016229 A1, publicado em 21 de janeiro 2010, o qual se incorpora ao presente documento na íntegra por referência. Conforme discutido neste documento, as administrações orais podem assumir a forma de comprimidos ou cápsulas de veículos farmaceuticamente aceitáveis misturados ao fármaco. Agentes de administração adequados adicionais ensinados em Goldberg, 2009, Compositions for Delivering Parathyroid Hormone and Calcitonin, Pedido de Patente dos EUA no 2009/0264368 A1, publicado no dia 22 de outubro 2009 (o qual se incorpora ao presente documento na íntegra por referência), incluem qualquer forma de dosagem líquida ou sólida conhecida.[115] For oral administration, the present compounds can be formulated by combining the active compounds with pharmaceutically acceptable carriers, such as those disclosed in D. J. Sarubbi, Oral GLP-1 Formulations, US Patent Application No. 2010/0016229 A1, published in January 21, 2010, which is incorporated into this document in full by reference. As discussed herein, oral administrations may take the form of tablets or capsules of pharmaceutically acceptable carriers admixed with the drug. Additional suitable delivery agents taught in Goldberg, 2009, Compositions for Delivering Parathyroid Hormone and Calcitonin, US Patent Application No. 2009/0264368 A1, published October 22, 2009 (which is incorporated herein in its entirety by reference) , include any known liquid or solid dosage form.

[116] Para a administração por inalação, os presentes compostos para uso de acordo com as presentes concretizações são convenientemente administrados na forma de pulverização por aerossol a partir de embalagens pressurizadas ou de um nebulizador, com o uso de um propelente adequado, por exemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono ou outro gás adequado. No caso de um aerossol pressurizado, a unidade de dosagem pode ser determinada produzindo-se uma válvula para administrar uma quantidade sob medida. É possível formular cápsulas ou cartuchos, por exemplo, de gelatina para uso em um inalador ou insuflador, que contenham uma mistura em pó do composto e uma base em pó adequada, tal como lactose ou amido. Por exemplo, preparados para a administração por inalação podem ser preparados de acordo com os ensinamentos de Quay et al., Patente dos EUA no. 7.812.120 B2, depositada no dia 12 de outubro de 2010, que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência.[116] For administration by inhalation, the present compounds for use in accordance with the present embodiments are conveniently administered in the form of an aerosol spray from pressurized packages or from a nebulizer, with the use of a suitable propellant, e.g. dichlorodifluoromethane, trichlorofluoromethane, dichlorotetrafluoroethane, carbon dioxide or other suitable gas. In the case of a pressurized aerosol, the dosage unit can be determined by producing a valve to deliver a tailored amount. It is possible to formulate capsules or cartridges, for example, of gelatin for use in an inhaler or insufflator, which contain a powder mixture of the compound and a suitable powder base, such as lactose or starch. For example, preparations for administration by inhalation can be prepared in accordance with the teachings of Quay et al., US Patent no. 7,812,120 B2, filed on October 12, 2010, which is incorporated into this document in full by reference.

[117] Também são revelados neste documento várias composições farmacêuticas familiares na indústria farmacêutica que incluem administração intraocular, intranasal e intra-auricular. Penetrantes adequados para esses usos são amplamente conhecidos na técnica. Composições farmacêuticas para a administração introcular incluem soluções oftálmicas aquosas dos compostos ativos em forma solúvel em água, tais como colírios, ou em goma gelana (Shedden et al., 2001, Clin. Ther., 23(3): 440 a 450) ou hidrogéis (Mayer et al., 1996, Ophthalmologica, 210(2): 101 a 103); pomadas oftálmicas; suspensões oftálmicas, tais como microparticulados, partículas poliméricas pequenas contendo fármaco suspensas em um veículo líquido (Joshi, A., J. Ocul. Pharmacol., 1994, 10(1): 29 a 45), fórmulas solúveis em lipídios (Aim et al., 1989, Prog. Clin. Biol. Res., 312: 447 a 458), e microesferas (Mordenti, 1999, Toxicol. Sci., 52(1): 101 a 106); e insertos oculares. Todas as referências supramencionadas incorporam-se ao presente documento na íntegra por referência. Essas fórmulas farmacêuticas são mais geral e preferivelmente formuladas para ser estéreis, isotônicas e tamponadas para maior estabilidade e conforto. Composições farmacêuticas para a administração intranasal também podem incluir gotas e pulverizações geralmente preparadas para simular, em muitos aspectos, secreções nasais a fim de garantir a manutenção da ação ciliar normal; essas composições incluem, por exemplo, entre outras, as soluções nasais reveladas por Azria et al., na Patente dos EUA no 5.733.569, depositada no dia 31 de março de 1998, a qual se incorpora ao presente documento na íntegra por referência. Conforme revelado em Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990), que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência, e bem conhecido pelos versados na técnica, fórmulas adequadas são mais geral e preferivelmente isotônicas, levemente tamponadas para manter um pH de 5,5 a 6,5 e mais geral e preferivelmente incluem conservantes antimicrobianos e estabilizantes de fármaco adequados. As fórmulas farmacêuticas para administração intra-auricular incluem suspensões e pomadas para aplicação tópica na orelha. Solventes comuns para essas fórmulas auriculares incluem glicerina e água.[117] Also disclosed herein are various pharmaceutical compositions familiar in the pharmaceutical industry that include intraocular, intranasal and intra-auricular administration. Penetrants suitable for these uses are widely known in the art. Pharmaceutical compositions for introcular administration include aqueous ophthalmic solutions of the active compounds in water-soluble form, such as eye drops, or in gellan gum (Shedden et al., 2001, Clin. Ther., 23(3): 440 to 450) or hydrogels (Mayer et al., 1996, Ophthalmologica, 210(2): 101 to 103); ophthalmic ointments; ophthalmic suspensions, such as microparticulates, small polymeric particles containing drug suspended in a liquid vehicle (Joshi, A., J. Ocul. Pharmacol., 1994, 10(1): 29 to 45), lipid-soluble formulas (Aim et al ., 1989, Prog. Clin. Biol. Res., 312: 447 to 458), and microspheres (Mordenti, 1999, Toxicol. Sci., 52(1): 101 to 106); and eyepiece inserts. All aforementioned references are incorporated into this document in full by reference. These pharmaceutical formulas are most generally and preferably formulated to be sterile, isotonic and buffered for greater stability and comfort. Pharmaceutical compositions for intranasal administration may also include drops and sprays generally prepared to simulate, in many respects, nasal secretions to ensure maintenance of normal ciliary action; such compositions include, for example, among others, the nasal solutions disclosed by Azria et al., in US Patent No. 5,733,569, filed March 31, 1998, which is incorporated herein in its entirety by reference. As disclosed in Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990), which is incorporated herein in its entirety by reference, and is well known to those skilled in the art, suitable formulas are most generally and preferably isotonic. , lightly buffered to maintain a pH of 5.5 to 6.5 and more generally and preferably include suitable antimicrobial preservatives and drug stabilizers. Pharmaceutical formulas for intra-auricular administration include suspensions and ointments for topical application to the ear. Common solvents for these ear formulas include glycerin and water.

[118] Além das fórmulas descritas previamente, os presentes compostos também podem ser formulados como um preparado de depósito. Essas fórmulas de ação prolongada podem ser administradas por implante (por exemplo, subcutânea ou intramuscularmente) ou por injeção intramuscular. Sendo assim, por exemplo, os compostos podem ser formulados com materiais poliméricos ou hidrófobos adequados (por exemplo, na forma de uma emulsão em um óleo aceitável) ou com resinas de troca iônica, ou na forma de derivados moderadamente solúveis, por exemplo, na forma de um sal moderadamente solúvel.[118] In addition to the previously described formulas, the present compounds can also be formulated as a depot preparation. These long-acting formulas can be administered by implant (e.g., subcutaneously or intramuscularly) or by intramuscular injection. Thus, for example, the compounds may be formulated with suitable polymeric or hydrophobic materials (for example, in the form of an emulsion in an acceptable oil) or with ion exchange resins, or in the form of sparingly soluble derivatives, for example, in form a moderately soluble salt.

[119] Dependendo da natureza química e da estabilidade biológica do reagente terapêutico, é possível adotar outras estratégias para a estabilização de peptídeos.[119] Depending on the chemical nature and biological stability of the therapeutic reagent, it is possible to adopt other strategies for stabilizing peptides.

[120] Outros agentes terapêuticos ou diagnósticos podem ser incorporados às composições farmacêuticas. Como alternativa, ou em aditamento, as composições farmacêuticas podem ser combinadas a outras composições que contenham outros agentes terapêuticos ou diagnósticos.[120] Other therapeutic or diagnostic agents can be incorporated into pharmaceutical compositions. Alternatively, or in addition, the pharmaceutical compositions can be combined with other compositions that contain other therapeutic or diagnostic agents.

[121] Exemplos não limitantes de métodos para a administração incluem entre outros: (a) administração por vias orais, como as descritas em M. Goldberg, Publicação no US 2009/0264368 A1, publicada no dia 2 de outubro de 2009, a qual se incorpora ao presente documento na íntegra por referência, e em D. Sarubbi, Publicação no US 2010/0016229 A1, publicada no dia 21 de janeiro de 2010, a qual se incorpora ao presente documento na íntegra por referência; (b) a administração também pode ser por vias não orais, tais como intraocular, intranasal ou intra- auricular, administração essa que inclui a administração na forma de uma suspensão aquosa, de um preparado oleoso ou seus semelhantes, ou na forma de um colírio, spray, unguento, pomada ou seus semelhantes; (c) administração por injeção, por via subcutânea, intraperitoneal, intravenosa, intramuscular, intradérmica, intraorbital ou seus semelhantes, incluindo administração por bomba de infusão; (d) administração local, tal como por injeção por via diretamente intracranial, por exemplo, implante de depósito; bem como (e) administração por via tópica; de acordo com o que os versados na técnica considerarem adequado para colocar o peptídeo das presentes concretizações em contato com o tecido vivo. Um exemplo representativo não limitante de aplicação nasal é descrito em Quay et al., Patente dos EUA no 7.812.120 B2, depositada no dia 12 de outubro de 2010, a qual se incorpora ao presente documento na íntegra por referência.[121] Non-limiting examples of methods for administration include but are not limited to: (a) oral administration, such as those described in M. Goldberg, Publication No. 2009/0264368 A1, published on October 2, 2009, which is incorporated into this document in its entirety by reference, and in D. Sarubbi, Publication No. 2010/0016229 A1, published on January 21, 2010, which is incorporated into this document in its entirety by reference; (b) administration may also be by non-oral routes, such as intraocular, intranasal or intra-auricular, which administration includes administration in the form of an aqueous suspension, an oily preparation or the like, or in the form of an eye drop. , spray, ointment, ointment or the like; (c) administration by injection, subcutaneously, intraperitoneally, intravenously, intramuscularly, intradermally, intraorbitally or similar, including administration by infusion pump; (d) local administration, such as by injection directly intracranially, e.g., depot implant; as well as (e) topical administration; as those skilled in the art deem appropriate to place the peptide of the present embodiments in contact with living tissue. A representative non-limiting example of nasal application is described in Quay et al., US Patent No. 7,812,120 B2, filed October 12, 2010, which is incorporated herein in its entirety by reference.

[122] A fórmula, via de administração e dosagem exatas das composições farmacêuticas das presentes concretizações podem ser escolhidas pelo médico do indivíduo em vista à condição do paciente (vide, por exemplo, Fingl et al., 1975, em “The Pharmacological Basis of Therapeutics”, que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência, com particular referência ao Cap. 1, p. 1). Normalmente, a faixa de dosagem da composição administrada ao paciente pode ser de cerca de 0,000001 a 100 mg/kg do peso corporal do paciente. A dosagem pode ser única ou uma série de duas ou mais aplicadas no curso de um ou mais dias, de acordo com a necessidade do paciente. Quando dosagens humanas para os compostos forem estabelecidas para ao menos alguma condição, as presentes concretizações utilizarão essas dosagens ou dosagens entre cerca de 0,1% e 500%, mais preferencialmente entre 25% e 250%, da dosagem humana estabelecida. Quando nenhuma dosagem humana for estabelecida, como será o caso para compostos farmacêuticos recém-descobertos, uma dosagem humana adequada pode ser deduzida dos valores de ED50 ou ID50, ou de outros valores adequados derivados de estudos in vitro ou in vivo, conforme classificados por estudos de toxicidade e estudos de eficácia em animais.[122] The exact formula, route of administration and dosage of the pharmaceutical compositions of the present embodiments can be chosen by the individual's physician in view of the patient's condition (see, for example, Fingl et al., 1975, in “The Pharmacological Basis of Therapeutics”, which is incorporated into this document in its entirety by reference, with particular reference to Chapter 1, p. 1). Typically, the dosage range of the composition administered to the patient may be about 0.000001 to 100 mg/kg of the patient's body weight. The dosage can be single or a series of two or more applied over the course of one or more days, according to the patient's needs. When human dosages for the compounds are established for at least some condition, the present embodiments will utilize such dosages or dosages between about 0.1% and 500%, more preferably between 25% and 250%, of the established human dosage. When no human dosage has been established, as will be the case for newly discovered pharmaceutical compounds, a suitable human dosage may be deduced from the ED50 or ID50 values, or from other suitable values derived from in vitro or in vivo studies, as classified by studies. toxicity and efficacy studies in animals.

[123] Deve-se ter em mente que o médico encarregado saberia como e quando suspender, interromper ou ajustar a administração devido a toxicidade ou disfunção dos órgãos. Por outro lado, o médico encarregado também saberia ajustar o tratamento para níveis mais altos se a resposta clínica não fosse adequada (excluindo a toxicidade). A grandeza de uma dose de administração no controle do distúrbio de interesse há de variar de acordo com a gravidade da condição que será tratada e com a via de administração. A gravidade da condição pode, por exemplo, ser avaliada, em parte, por métodos de avaliação prognóstica padrão. Ademais, a dose e, quiçá, a frequência da dose também hão de variar de acordo com a idade, a massa corporal e a resposta do paciente em questão. Um programa comparável ao discutido acima pode ser usado na medicina veterinária.[123] It should be borne in mind that the treating physician would know how and when to withhold, interrupt, or adjust administration due to toxicity or organ dysfunction. On the other hand, the doctor in charge would also know to adjust the treatment to higher levels if the clinical response was not adequate (excluding toxicity). The magnitude of an administration dose to control the disorder of interest will vary according to the severity of the condition to be treated and the route of administration. The severity of the condition can, for example, be assessed, in part, by standard prognostic assessment methods. Furthermore, the dose and, perhaps, the dose frequency will also vary according to the age, body mass and response of the patient in question. A program comparable to the one discussed above can be used in veterinary medicine.

[124] Embora a dosagem exata seja determinada de fármaco para fármaco, na maioria dos casos, podem ser feitas algumas generalizações quanto à dosagem. O regime de dosagem diária para um paciente humano adulto pode ser, por exemplo, uma dose intravenosa, subcutânea ou intramuscular de cada ingrediente ativo em uma faixa exemplificativa entre 0,001 mg e 100 mg, ou uma faixa exemplificativa entre 0,005 mg e 5 mg. Nos casos de administração de um sal farmaceuticamente aceitável, as dosagens podem ser calculadas como a base livre. Em algumas concretizações, a composição é administrada de 1 a 4 vezes ao dia ou como uma dose aguda simples, por exemplo, para aliviar a dor, tal como a dor associada à enxaqueca. Como alternativa, as composições conforme descritas neste documento podem ser administradas por infusão intravenosa contínua, de preferência a uma dose de cada ingrediente ativo de até 1.000 mg ao dia. Conforme os versados na técnica perceberão, em certas situações, pode ser necessário administrar os peptídeos revelados neste documento em quantidades que ultrapassem, ou mesmo ultrapassem de longe, a faixa de dosagem supramencionada e exemplificativa a fim de tratar enfermidades ou infecções particularmente agressivas de maneira efetiva e agressiva. Em algumas concretizações, os peptídeos serão administrados por um período de terapia contínuo, por exemplo, durante uma semana ou mais, ou durante meses ou anos.[124] Although the exact dosage is determined from drug to drug, in most cases, some generalizations regarding dosage can be made. The daily dosage regimen for an adult human patient may be, for example, an intravenous, subcutaneous or intramuscular dose of each active ingredient in an exemplary range between 0.001 mg and 100 mg, or an exemplary range between 0.005 mg and 5 mg. In cases of administration of a pharmaceutically acceptable salt, dosages may be calculated as the free base. In some embodiments, the composition is administered 1 to 4 times daily or as a single acute dose, for example, to relieve pain, such as pain associated with migraine. Alternatively, the compositions as described herein may be administered by continuous intravenous infusion, preferably at a dose of each active ingredient of up to 1,000 mg per day. As those skilled in the art will appreciate, in certain situations, it may be necessary to administer the peptides disclosed herein in amounts that exceed, or even far exceed, the aforementioned and exemplary dosage range in order to effectively treat particularly aggressive illnesses or infections. and aggressive. In some embodiments, the peptides will be administered for a continuous period of therapy, for example, for a week or more, or for months or years.

[125] A quantidade de dosagem e o intervalo de dosagem podem ser ajustados individualmente para produzir níveis plasmáticos do grupo funcional ativo que sejam suficientes para manter os efeitos de modulação ou a concentração mínima efetiva (MEC). A MEC há de variar de composto para composto, mas pode ser estimada a partir de dados in vitro. As dosagens necessárias para chegar à MEC dependerão de características individuais e da via de administração. No entanto, ensaios HPLC ou bioensaios podem ser usados para determinar concentrações plasmáticas.[125] The dosage amount and dosage interval can be individually adjusted to produce plasma levels of the active functional group that are sufficient to maintain the modulating effects or minimum effective concentration (MEC). The ECM will vary from compound to compound, but can be estimated from in vitro data. The dosages necessary to reach the ECM will depend on individual characteristics and the route of administration. However, HPLC assays or bioassays can be used to determine plasma concentrations.

[126] Intervalos de dosagem também podem ser determinados usando o valor MEC. As composições devem ser administradas usando um regime que mantenha os níveis plasmáticos acima da MEC durante 10% a 90% do tempo, de preferência entre 30% e 90% e, mais preferencialmente, entre 50% e 90%.[126] Dosing intervals can also be determined using the MEC value. The compositions should be administered using a regimen that maintains plasma levels above the MEC for 10% to 90% of the time, preferably between 30% and 90%, and most preferably between 50% and 90%.

[127] Nos casos de administração local ou absorção seletiva, a concentração local efetiva do fármaco pode não estar relacionada à concentração plasmática.[127] In cases of local administration or selective absorption, the effective local concentration of the drug may not be related to the plasma concentration.

[128] A quantidade de administração da presente composição pode depender do paciente em tratamento, do peso do paciente, da gravidade da aflição, do modo de administração e do julgamento do médico encarregado.[128] The amount of administration of the present composition may depend on the patient being treated, the patient's weight, the severity of the affliction, the mode of administration and the judgment of the physician in charge.

[129] Os compostos revelados neste documento podem ser avaliados quanto à eficácia e à toxidade usando métodos conhecidos. Por exemplo, a toxicologia de um composto específico ou de um subconjunto de compostos que compartilham certos grupos funcionais químicos pode ser estabelecida determinando a toxicidade in vitro rumo a uma linha celular, tal como uma linha celular mamífera e, de preferência, humana. Os resultados desses estudos geralmente predizem a toxicidade em animais, tais como mamíferos, ou, mais especificamente, em seres humanos. Como alternativa, a toxicidade de compostos específicos em um modelo animal, tais como camundongos, ratos, coelhos ou macacos, pode ser determinada usando métodos conhecidos. A eficácia de um composto específico pode ser estabelecida usando vários métodos reconhecidos, como métodos in vitro, modelos animais ou ensaios clínicos com pessoas. Modelos in vitro reconhecidos existem para praticamente toda classe de condição, incluindo, entre outras, câncer, doença cardiovascular e várias disfunções imunológicas. À semelhança, modelos animais aceitáveis podem ser usados para estabelecer a eficácia de produtos químicos para tratar dessas condições. Ao selecionar um modelo para determinar a eficácia, o versado na técnica pode ser orientado pelo estado da técnica a optar por um modelo, dose, e via de administração e regime adequados. Decerto, ensaios clínicos humanos também podem ser usados para determinar a eficácia de um composto em seres humanos.[129] The compounds disclosed herein can be evaluated for efficacy and toxicity using known methods. For example, the toxicology of a specific compound or a subset of compounds that share certain chemical functional groups can be established by determining in vitro toxicity toward a cell line, such as a mammalian and, preferably, human cell line. The results of these studies generally predict toxicity in animals, such as mammals, or, more specifically, in humans. Alternatively, the toxicity of specific compounds in an animal model, such as mice, rats, rabbits, or monkeys, can be determined using known methods. The effectiveness of a specific compound can be established using several recognized methods, such as in vitro methods, animal models, or clinical trials in people. Recognized in vitro models exist for virtually every class of condition, including, but not limited to, cancer, cardiovascular disease, and various immunological dysfunctions. Similarly, acceptable animal models can be used to establish the effectiveness of chemicals to treat these conditions. When selecting a model to determine efficacy, one skilled in the art can be guided by the prior art to choose a suitable model, dose, and route of administration and regimen. Of course, human clinical trials can also be used to determine the effectiveness of a compound in humans.

[130] As presentes composições podem se fazer presentes, se desejado, em uma embalagem ou dispositivo dispensador que contenha uma ou mais formas de dosagem simples contendo o ingrediente ativo.[130] The present compositions may be present, if desired, in a package or dispensing device that contains one or more simple dosage forms containing the active ingredient.

[131] Ao longo do Relatório Descritivo, qualquer menção a um composto específico deve ser entendida de modo a abranger esse composto e qualquer sal farmaceuticamente aceitável deste.[131] Throughout the Descriptive Report, any mention of a specific compound should be understood to encompass that compound and any pharmaceutically acceptable salt thereof.

[132] As presentes composições que contêm os compostos podem ser administradas por tratamentos profiláticos e/ou terapêuticos. Em aplicações terapêuticas, as composições são administradas a um paciente que já sofre de uma enfermidade, conforme descrito acima, em quantidade suficiente para curar ou controlar ao menos em parte os sintomas da enfermidade e de suas complicações. Uma quantidade adequada para tanto é definida como “dose terapeuticamente efetiva”. Quantidades efetivas para esse uso dependerão da gravidade da doença e do peso e da condição geral do paciente.[132] The present compositions containing the compounds can be administered by prophylactic and/or therapeutic treatments. In therapeutic applications, the compositions are administered to a patient already suffering from a disease, as described above, in an amount sufficient to cure or at least partially control the symptoms of the disease and its complications. An adequate amount for this purpose is defined as a “therapeutically effective dose”. Effective amounts for this use will depend on the severity of the disease and the weight and general condition of the patient.

[133] As composições descritas neste documento também podem ser micro-encapsuladas, por exemplo, pelo método de Tice e Bibi (em: Treatise on Controlled Drug Delivery, ed. A. Kydonieus, Marcel Dekker, N.Y., 1992, pp. 315 a 339), que se incorpora ao presente documento na íntegra por referência.[133] The compositions described in this document can also be micro-encapsulated, for example, by the method of Tice and Bibi (in: Treatise on Controlled Drug Delivery, ed. A. Kydonieus, Marcel Dekker, N.Y., 1992, pp. 315 a 339), which is incorporated into this document in full by reference.

[134] Em aplicações profiláticas, administram-se composições com os compostos revelados neste documento a um paciente suscetível ou de alguma outra forma em risco de uma doença específica. Essa quantidade é definida como uma “dose profilaticamente efetiva”. Neste uso, as quantidades precisas dependem novamente do estado de saúde e do peso do paciente e podem ser determinadas prontamente pelos versados na técnica.[134] In prophylactic applications, compositions with the compounds disclosed herein are administered to a patient susceptible to or otherwise at risk for a specific disease. This amount is defined as a “prophylactically effective dose”. In this use, precise amounts again depend on the health status and weight of the patient and can be readily determined by those skilled in the art.

[135] As quantidades do presente antagonista necessárias para uma terapia efetiva dependerão de muitos fatores diferentes, incluindo vias de administração, sítio almejado, condição fisiológica do paciente e outros medicamentos administrados. Sendo assim, as dosagens de tratamento devem ser tituladas para otimizar a segurança e a eficácia. Tipicamente, as dosagens usadas in vitro podem oferecer orientação útil quanto a quantidades úteis para a administração in situ desses reagentes. Testes de doses efetivas para o tratamento de distúrbios específicos em animais oferecerão nova indicação preditiva da dosagem humana. Várias considerações são descritas, por exemplo, em: Gilman et al. (eds.), 1990, Goodman and Gilman’s: The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8a ed., Pergamon Press; e Remington’s Pharmaceutical Sciences, 7a Ed., Mack Publishing Co., Easton, Pa. (1985), cada um dos quais se incorpora ao presente documento na íntegra por referência. Em particular, a dosagem deve ser ajustada para acomodar métodos de administração como injeção intramuscular, injeção subcutânea, administração oral ou introdução subcutânea sem agulha do antagonista.[135] The amounts of the present antagonist required for effective therapy will depend on many different factors, including routes of administration, targeted site, physiological condition of the patient and other medications administered. Therefore, treatment dosages must be titrated to optimize safety and efficacy. Typically, dosages used in vitro can provide useful guidance as to useful amounts for in situ administration of these reagents. Testing effective doses for the treatment of specific disorders in animals will offer a new predictive indication of human dosage. Various considerations are described, for example, in: Gilman et al. (eds.), 1990, Goodman and Gilman’s: The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th ed., Pergamon Press; and Remington’s Pharmaceutical Sciences, 7th Ed., Mack Publishing Co., Easton, Pa. (1985), each of which is incorporated herein in its entirety by reference. In particular, the dosage must be adjusted to accommodate methods of administration such as intramuscular injection, subcutaneous injection, oral administration, or needleless subcutaneous introduction of the antagonist.

[136] Os peptídeos e peptidomiméticos antagonistas descritos neste documento são efetivos para tratar condições mediadas pelo receptor do CGRP quando administrados em uma faixa de dosagem exemplificativa, por exemplo, de cerca de 0,01 µg a cerca de 50 mg/kg do peso corporal ao dia. A dose específica empregada é regulada pela condição em tratamento específica, pela via de administração, bem como pelo julgamento do médico encarregado dependendo de fatores como gravidade da condição, idade e estado geral do paciente, e seus semelhantes. Essas doses podem ser determinadas prontamente pelos versados na técnica.[136] The antagonistic peptides and peptidomimetics described herein are effective for treating CGRP receptor-mediated conditions when administered in an exemplary dosage range, for example, from about 0.01 µg to about 50 mg/kg of body weight per day. The specific dose used is regulated by the specific condition being treated, the route of administration, as well as the judgment of the physician in charge depending on factors such as the severity of the condition, age and general condition of the patient, and the like. Such doses can be readily determined by those skilled in the art.

[137] Para a administração parenteral, os peptídeos podem ser, por exemplo, formulados na forma de uma solução, suspensão, emulsão ou pó liofilizado em associação a um veículo parenteral farmaceuticamente aceitável. Exemplos desses veículos incluem água, solução salina, solução de Ringer, solução de dextrose e soroalbumina humana a 5%. Lipossomos e veículos não aquosos, tais como óleos fixos, também podem ser usados. O veículo ou pó liofilizado pode conter aditivos que mantenham a isotonicidade (por exemplo, cloreto de sódio, manitol) e a estabilidade química (por exemplo, tampões e conservantes). A fórmula é esterilizada por técnicas comumente usadas. Por exemplo, uma composição parenteral adequada à administração por injeção é preparada dissolvendo 1,5% em peso do ingrediente ativo em solução de cloreto de sódio a 0,9%.[137] For parenteral administration, peptides can be, for example, formulated in the form of a solution, suspension, emulsion or lyophilized powder in association with a pharmaceutically acceptable parenteral vehicle. Examples of such vehicles include water, saline, Ringer's solution, dextrose solution, and 5% human serum albumin. Liposomes and non-aqueous vehicles, such as fixed oils, can also be used. The lyophilized carrier or powder may contain additives that maintain isotonicity (e.g., sodium chloride, mannitol) and chemical stability (e.g., buffers and preservatives). The formula is sterilized by commonly used techniques. For example, a parenteral composition suitable for administration by injection is prepared by dissolving 1.5% by weight of the active ingredient in 0.9% sodium chloride solution.

[138] As composições farmacêuticas descritas neste documento podem ser administradas em dose única ou em várias doses; administradas como agentes terapêuticos individuais ou junto com outros agentes terapêuticos; e combinadas a terapias convencionais, que podem ser administradas em sequência ou ao mesmo tempo.[138] The pharmaceutical compositions described in this document can be administered in a single dose or in multiple doses; administered as individual therapeutic agents or together with other therapeutic agents; and combined with conventional therapies, which can be administered sequentially or at the same time.

[139] Os compostos podem ser administrados em uma fórmula de liberação com tempo, por exemplo, em uma composição com um polímero de liberação lenta. Os compostos ativos podem ser preparados com veículos que protegerão o composto contra a liberação rápida, tal como uma fórmula de liberação controlada, incluindo implantes e sistemas de administração microencapsulados. É possível usar polímeros biodegradáveis e biocompatíveis, tais como acetato de vinil etileno, polianidridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres, ácido polilático e copolímeros poliglicólicos (PLG) polilácticos. Muitos métodos para o preparo dessas fórmulas são amplamente conhecidos pelos versados na técnica.[139] The compounds can be administered in a time-release formula, for example, in a composition with a slow-release polymer. Active compounds can be prepared with carriers that will protect the compound against rapid release, such as a controlled release formula, including implants and microencapsulated delivery systems. It is possible to use biodegradable and biocompatible polymers, such as ethylene vinyl acetate, polyanhydrides, polyglycolic acid, collagen, polyorthoesters, polylactic acid and polylactic polyglycolic copolymers (PLG). Many methods for preparing such formulas are widely known to those skilled in the art.

[140] Os compostos descritos neste documento podem ser formulados em uma composição farmacêutica cujo composto é o único ingrediente ativo nela. Como alternativa, a composição farmacêutica pode conter outros agentes ativos. Ademais, o composto peptídico pode ser combinado a um ou mais outros agentes com efeitos modulatórios sobre a atividade do receptor do CGRP. Outra Utilidade[140] The compounds described herein can be formulated into a pharmaceutical composition whose compound is the only active ingredient therein. Alternatively, the pharmaceutical composition may contain other active agents. Furthermore, the peptide compound can be combined with one or more other agents with modulatory effects on the activity of the CGRP receptor. Other Utility

[141] Os compostos descritos neste documento são utilizáveis in vitro como ferramentas excepcionais para entender a função biológica dos receptores do CGRP, incluindo a avaliação dos muitos fatores que, acredita-se, influenciam na produção de ligantes de efrina e no processo de ligação dos receptores e são influenciados por estes. Os presentes compostos também são úteis no desenvolvimento de outros compostos que se ligam a receptores do CGRP e os ativam, porque os presentes compostos oferecem informações importantes sobre a relação entre a estrutura e a atividade que facilitam esse desenvolvimento.[141] The compounds described herein are usable in vitro as exceptional tools for understanding the biological function of CGRP receptors, including assessment of the many factors believed to influence the production of ephrin ligands and the binding process of receptors and are influenced by them. The present compounds are also useful in the development of other compounds that bind to and activate CGRP receptors, because the present compounds provide important information about the relationship between structure and activity that facilitates this development.

[142] Os compostos também são úteis como aglutinantes competitivos em ensaios para triar novos antagonistas do receptor CGRP. Nessas concretizações de ensaio, os compostos descritos neste documento podem ser usados sem modificação ou podem ser modificados de várias maneiras; por exemplo, por marcação, tal como ligando covalente ou não covalentemente um grupo funcional que direta ou indiretamente proporciona um sinal detectável. Em qualquer um desses ensaios, os materiais ligados podem ser marcados direta ou indiretamente. Possibilidades para a marcação direta incluem grupos de marcação como: radiomarcadores, tais como 125I, enzimas (Patente dos EUA no 3.645.090), tais como peroxidase e fosfatase alcalina, e marcadores fluorescentes (Patente dos EUA no 3.940.475) capazes de monitorar mudanças na intensidade da fluorescência, mudanças no comprimento de onda e a polarização da fluorescência. Possibilidades para a marcação indireta incluem a biotinilação de um constituinte seguida pela ligação com a avidina acoplada a um dos grupos de marcação acima. Os compostos também podem incluir espaçadores ou ligantes quando forem ligados a um suporte sólido.[142] The compounds are also useful as competitive binders in assays to screen new CGRP receptor antagonists. In these test embodiments, the compounds described herein can be used without modification or can be modified in various ways; for example, by labeling, such as covalently or non-covalently liganding a functional group that directly or indirectly provides a detectable signal. In any of these tests, the bound materials can be marked directly or indirectly. Possibilities for direct labeling include labeling groups such as: radiolabels such as 125I, enzymes (US Patent No. 3,645,090) such as peroxidase and alkaline phosphatase, and fluorescent labels (US Patent No. 3,940,475) capable of monitoring changes in fluorescence intensity, changes in wavelength and the polarization of fluorescence. Possibilities for indirect labeling include biotinylation of a constituent followed by binding to avidin coupled to one of the above labeling groups. Compounds may also include spacers or linkers when attached to a solid support.

[143] A espectroscopia por ressonância magnética nuclear (RMN) é reconhecida por sua capacidade de caracterizar estruturas macromoleculares e é uma técnica para investigar características tanto estáticas quanto transientes de ligantes ligados a uma molécula-alvo (Pellecchia et al.,2002, Nature Rev Drug Disc, 1: 211). A espectroscopia por RMN é uma ferramenta útil para determinar a ligação de ligantes com moléculas-alvo e tem a vantagem de ser capaz de detectar e quantificar interações com alta sensibilidade sem exigir conhecimento prévio sobre funções proteicas. Ademais, a espectroscopia por RMN pode oferecer informações estruturais sobre o alvo e o ligante para ajudar na otimização subsequente de ligações fraca com ligados de alta afinidade.[143] Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy is recognized for its ability to characterize macromolecular structures and is a technique for investigating both static and transient characteristics of ligands bound to a target molecule (Pellecchia et al., 2002, Nature Rev Drug Disc, 1: 211). NMR spectroscopy is a useful tool for determining the binding of ligands to target molecules and has the advantage of being able to detect and quantify interactions with high sensitivity without requiring prior knowledge about protein functions. Furthermore, NMR spectroscopy can provide structural information about the target and ligand to aid in the subsequent optimization of weak binding with high-affinity ligands.

[144] Métodos para detectar a ligação de um composto ligante com uma biomolécula-alvo gerando espectros de correlação por ressonância magnética nuclear primeiro e segundo a partir de biomoléculas-alvo que foram uniformemente marcadas são relatados nas Patentes dos EUA no 5.698.401 e 5.804.390. O primeiro espectro é gerado a partir de dados coletados na substância-alvo na ausência de ligantes e o segundo na presença de um ou mais ligantes. Uma comparação dos dois espectros permite determinar quais compostos na mistura de ligantes putativos ligam-se à biomolécula-alvo.[144] Methods for detecting the binding of a ligand compound to a target biomolecule by generating first and second nuclear magnetic resonance correlation spectra from target biomolecules that have been uniformly labeled are reported in U.S. Patent Nos. 5,698,401 and 5,804 .390. The first spectrum is generated from data collected on the target substance in the absence of ligands and the second in the presence of one or more ligands. A comparison of the two spectra allows one to determine which compounds in the putative ligand mixture bind to the target biomolecule.

[145] Ademais, com base em sua capacidade de ligar-se seletivamente a receptores do CGRP, os peptídeos descritos neste documento podem ser usados como reagentes para detectar seletivamente os receptores do CGRP em células vivas, em células fixas, em fluidos biolóticos, em homogenatos de tecido, em materiais biolóticos purificados e naturais etc.[145] Furthermore, based on their ability to selectively bind to CGRP receptors, the peptides described herein can be used as reagents to selectively detect CGRP receptors in living cells, in fixed cells, in biological fluids, in tissue homogenates, in purified and natural biolotic materials, etc.

[146] Algumas concretizações propõem antagonistas do peptídeo modificado com ao menos cerca de 60% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa, ao menos cerca de 61% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 62% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 63% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 64% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 65% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 66% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 67% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 68% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 69% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 70% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 71% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 72% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 73% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 74% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 75% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 76% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 77% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 78% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 79% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 80% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 81% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 82% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 83% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 84% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 85% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 86% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 87% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 88% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 89% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 90% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 91% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 92% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 93% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 94% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 95% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 96% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 97% de identidade de sequência de aminoácidos, como alternativa ao menos cerca de 98% de identidade de sequência de aminoácidos e como alternativa ao menos cerca de 99% de identidade de sequência de aminoácidos com uma sequência polipeptídica completa conforme revelada neste documento (por exemplo, SEQ ID Nos: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou 15) ou qualquer outro fragmento especificamente definido de uma sequência polipeptídica completa conforme revelado neste documento.[146] Some embodiments propose modified peptide antagonists with at least about 60% amino acid sequence identity, alternatively at least about 61% amino acid sequence identity, alternatively at least about 62% identity of amino acid sequence, alternatively at least about 63% amino acid sequence identity, alternatively at least about 64% amino acid sequence identity, alternatively at least about 65% amino acid sequence identity, alternatively at least about 66% amino acid sequence identity, alternatively at least about 67% amino acid sequence identity, alternatively at least about 68% amino acid sequence identity, alternatively at least about of 69% amino acid sequence identity, alternatively at least about 70% amino acid sequence identity, alternatively at least about 71% amino acid sequence identity, alternatively at least about 72% identity of amino acid sequence, alternatively at least about 73% amino acid sequence identity, alternatively at least about 74% amino acid sequence identity, alternatively at least about 75% amino acid sequence identity, alternatively at least about 76% amino acid sequence identity, alternatively at least about 77% amino acid sequence identity, alternatively at least about 78% amino acid sequence identity, alternatively at least about of 79% amino acid sequence identity, alternatively at least about 80% amino acid sequence identity, alternatively at least about 81% amino acid sequence identity, alternatively at least about 82% identity of amino acid sequence, alternatively at least about 83% amino acid sequence identity, alternatively at least about 84% amino acid sequence identity, alternatively at least about 85% amino acid sequence identity, alternatively at least about 86% amino acid sequence identity, alternatively at least about 87% amino acid sequence identity, alternatively at least about 88% amino acid sequence identity, alternatively at least about of 89% amino acid sequence identity, alternatively at least about 90% amino acid sequence identity, alternatively at least about 91% amino acid sequence identity, alternatively at least about 92% identity of amino acid sequence, alternatively at least about 93% amino acid sequence identity, alternatively at least about 94% amino acid sequence identity, alternatively at least about 95% amino acid sequence identity, alternatively at least about 96% amino acid sequence identity, alternatively at least about 97% amino acid sequence identity, alternatively at least about 98% amino acid sequence identity, and alternatively at least about of 99% amino acid sequence identity with a complete polypeptide sequence as disclosed herein (e.g., SEQ ID Nos: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 or 15) or any other specifically defined fragment of a complete polypeptide sequence as disclosed herein.

[147] A “porcentagem (%) de identidade de sequência de aminoácidos” com uma das sequências polipeptídicas identificadas neste documento é definida como a porcentagem de resíduos de aminoácidos em uma sequência candidata que são idênticos aos resíduos de aminoácidos na sequência polipeptídica, depois de alinhar as sequências e introduzir lacunas, se necessário, para obter a identidade de sequência percentual máxima, e sem considerar nenhuma substituição conservadora como parte da identidade de sequência. O alinhamento com a finalidade de determinar o percentual de identidade de sequência de aminoácidos pode ser obtido de várias maneiras conhecidas pelos versados na técnica, por exemplo, usando um software de computador disponibilizado para o público como o BLAST, o BLAST-2, o ALIGN ou o Megalign (DNASTAR). Os versados na técnica podem determinar parâmetros adequados para mensurar o alinhamento, incluindo quaisquer algoritmos necessários para obter o alinhamento máximo sobre o comprimento total das sequências sendo comparadas. Para os fins deste documento, contudo, os valores de % de identidade de sequência de aminoácidos são gerados usando o programa de computador para comparação de sequências ALIGN-2, cujo código fonte completo é disponibilizado conforme descrito neste documento. O programa de computador para comparação de sequências ALIGN-2 foi autorizado pela Genentech, Inc. e o código fonte foi depositado com a documentação do usuário no Escritório de Direitos Autorais dos EUA, Washington D.C., 20559, onde está registrado sob o Número de Registro de Direitos Autorais dos EUA TXU510087. O programa ALIGN-2 é disponibilizado ao público pela Genentech, Inc., Sul de São Francisco, Califórnia, ou pode ser compilado a partir do código fonte fornecido na Tabela 4 abaixo. O programa ALIGN-2 deve ser compilado para uso em um sistema operacional UNIX, de preferência o UNIX V4.0D digital. Todos os parâmetros de comparação de sequências são definidos pelo programa ALIGN-2 e não variam.[147] The “percent (%) amino acid sequence identity” with one of the polypeptide sequences identified herein is defined as the percentage of amino acid residues in a candidate sequence that are identical to the amino acid residues in the polypeptide sequence, after align the sequences and introduce gaps if necessary to obtain maximum percent sequence identity, and without considering any conservative substitutions as part of the sequence identity. Alignment for the purpose of determining percent amino acid sequence identity can be achieved in a variety of ways known to those skilled in the art, for example, using publicly available computer software such as BLAST, BLAST-2, ALIGN or Megaalign (DNASTAR). Those skilled in the art can determine suitable parameters for measuring alignment, including any algorithms necessary to obtain maximum alignment over the total length of the sequences being compared. For the purposes of this document, however, % amino acid sequence identity values are generated using the ALIGN-2 sequence comparison computer program, the complete source code of which is made available as described in this document. The ALIGN-2 sequence comparison computer program has been authorized by Genentech, Inc. and the source code has been deposited with user documentation in the U.S. Copyright Office, Washington D.C., 20559, where it is registered under Registration Number US Copyright TXU510087. The ALIGN-2 program is publicly available from Genentech, Inc., South San Francisco, California, or may be compiled from the source code provided in Table 4 below. The ALIGN-2 program must be compiled for use on a UNIX operating system, preferably digital UNIX V4.0D. All sequence comparison parameters are defined by the ALIGN-2 program and do not vary.

[148] Em situações nas quais o ALIGN-2 é usado para comprar sequências de aminoácidos, a % de identidade de sequência de aminoácidos de dada sequência de aminoácidos A com ou para dada sequência de aminoácidos B (que pode ser, como alternativa, parafraseada como uma dada sequência de aminoácidos A com ou para certa % de identidade da sequência de aminoácidos com dada sequência de aminoácidos B) é calculada conforme o seguinte: 100 vezes a fração X/Y, onde X é o número de resíduos de aminoácidos marcados como correspondências idênticas pelo programa de alinhamento de sequências ALIGN-2 no alinhamento entre A e B desse programa, e onde Y é o número total de resíduos de aminoácidos em B. Perceber-se-á que, quando o comprimento da sequência de aminoácidos A não é igual ao comprimento da sequência de aminoácidos B, a % de identidade de sequência de aminoácidos de A para B não será igual à % de identidade de sequência de aminoácidos de B para A. Como exemplo de cálculos da % de sequência de aminoácidos usando esse método, demonstra-se neste documento um método para calcular a % de identidade de sequência de aminoácidos da sequência de aminoácidos indicada. “Peptídeo de comparação” representa a sequência de aminoácidos de um polipeptídeo ao qual o polipeptídeo de interesse está sendo comparado, e “X, “Y” e “Z” representam, cada um, diferentes resíduos de aminoácidos hipotéticos.[148] In situations in which ALIGN-2 is used to purchase amino acid sequences, the % amino acid sequence identity of given amino acid sequence A with or to given amino acid sequence B (which may alternatively be paraphrased as a given amino acid sequence A with or for a certain % amino acid sequence identity with a given amino acid sequence B) is calculated as follows: 100 times the fraction X/Y, where X is the number of amino acid residues marked as identical matches by the ALIGN-2 sequence alignment program in the alignment between A and B of that program, and where Y is the total number of amino acid residues in B. It will be appreciated that when the length of the amino acid sequence A does not is equal to the length of amino acid sequence B, the % amino acid sequence identity from A to B will not be equal to the % amino acid sequence identity from B to A. As an example of % amino acid sequence calculations using this method, a method for calculating the % amino acid sequence identity of the indicated amino acid sequence is demonstrated herein. “Comparison peptide” represents the amino acid sequence of a polypeptide to which the polypeptide of interest is being compared, and “X, “Y” and “Z” each represent different hypothetical amino acid residues.

[149] Salvo menção especificamente em contrário, todos os valores de % de sequência de aminoácidos usados neste documento são obtidos conforme descrito no parágrafo imediatamente anterior usando o programa de computador ALIGN-2. No entanto, os valores de % de identidade de sequência de aminoácidos também podem ser obtidos conforme descrito abaixo usando o programa de computador WU-BLAST-2 (Altschul et al., 1996, Methods in Enzymology, 266: 460 a 480). A maioria dos parâmetros de busca do WU-BLAST-2 são definidos em valores padrão. Os valores não definidos em valores padrão, isto é, os parâmetros ajustáveis, são definidos com os valores a seguir: overlap = 1, overlap fraction = 0.125, word threshold (T) = 11 e scoring matrix = BLOSUM62. Quando o WU-BLAST-2 é usado, determina-se um valor de % de identidade de sequência de aminoácidos dividindo (a) o número de resíduos de aminoácidos correspondentes idênticos entre a sequência de aminoácidos do polipeptídeo de interesse com uma sequência derivada do polipeptídeo e a sequência de aminoácidos de comparação de interesse conforme determinado pela WU-BLAST-2 pelo (b) número total de resíduos de aminoácidos do polipeptídeo de interesse. Por exemplo, quando se diz que um polipeptídeo com a sequência de aminoácidos A possui ao menos 80% de identidade de sequência de aminoácidos com a sequência de aminoácidos B, a sequência de aminoácidos A é a sequência de aminoácidos de comparação de interesse e a sequência de aminoácidos B é a sequência de aminoácidos do peptídeo de interesse.[149] Unless specifically mentioned otherwise, all % amino acid sequence values used in this document are obtained as described in the immediately preceding paragraph using the ALIGN-2 computer program. However, % amino acid sequence identity values can also be obtained as described below using the WU-BLAST-2 computer program (Altschul et al., 1996, Methods in Enzymology, 266: 460 to 480). Most WU-BLAST-2 search parameters are set to default values. Values not defined in default values, that is, adjustable parameters, are defined with the following values: overlap = 1, overlap fraction = 0.125, word threshold (T) = 11 and scoring matrix = BLOSUM62. When WU-BLAST-2 is used, a % amino acid sequence identity value is determined by dividing (a) the number of identical corresponding amino acid residues between the amino acid sequence of the polypeptide of interest with a sequence derived from the polypeptide. and the comparison amino acid sequence of interest as determined by WU-BLAST-2 by (b) total number of amino acid residues of the polypeptide of interest. For example, when a polypeptide with amino acid sequence A is said to have at least 80% amino acid sequence identity with amino acid sequence B, amino acid sequence A is the comparison amino acid sequence of interest and the sequence amino acid sequence B is the amino acid sequence of the peptide of interest.

[150] A porcentagem de identidade de sequência de aminoácidos também pode ser determinada usando o programa de comparação de sequências NCBI-BLAST2 (Altschul et al., 1997, Nucleic Acids Res., 25: 3.389 a 3.402). O programa de comparação de sequências NCBI-BLAST2 pode ser baixado ou obtido de alguma outra forma pelo National Institute of Health, Bethesda, MD. O NCBI-BLAST2 utiliza vários parâmetros de busca, onde todos esses parâmetros de busca são definidos em valores padrão, incluindo, por exemplo, unmask = yes, strand = all, expected occurrences = 10, minimum low complexity length = 15/5, multi-pass e-value = 0.01, constant for multi-pass = 25, dropoff for final gapped alignment = 25 e scoring matrix = BLOSUM62.[150] The percentage of amino acid sequence identity can also be determined using the NCBI-BLAST2 sequence comparison program (Altschul et al., 1997, Nucleic Acids Res., 25: 3389 to 3402). The NCBI-BLAST2 sequence comparison program can be downloaded or otherwise obtained from the National Institute of Health, Bethesda, MD. NCBI-BLAST2 uses multiple search parameters, where all of these search parameters are set to default values, including, for example, unmask = yes, strand = all, expected occurrences = 10, minimum low complexity length = 15/5, multi -pass e-value = 0.01, constant for multi-pass = 25, dropoff for final gapped alignment = 25 and scoring matrix = BLOSUM62.

[151] Em situações nas quais o NCBI-BLAST2 é usado para comprar sequências de aminoácidos, a % de identidade de sequência de aminoácidos de dada sequência de aminoácidos A com ou para dada sequência de aminoácidos B (que pode ser, como alternativa, parafraseada como uma dada sequência de aminoácidos A com ou para certa % de identidade da sequência de aminoácidos com dada sequência de aminoácidos B) é calculada conforme o seguinte: 100 vezes a fração X/Y[151] In situations in which NCBI-BLAST2 is used to purchase amino acid sequences, the % amino acid sequence identity of given amino acid sequence A with or to given amino acid sequence B (which may alternatively be paraphrased as a given amino acid sequence A with or for a certain % amino acid sequence identity with a given amino acid sequence B) is calculated as follows: 100 times the fraction X/Y

[152] onde X é o número de resíduos de aminoácidos marcados como correspondências idênticas pelo programa de alinhamento de sequências NCBI-BLAST2 no alinhamento entre A e B desse programa, e onde Y é o número total de resíduos de aminoácidos em B. Perceber-se-á que, quando o comprimento da sequência de aminoácidos A não é igual ao comprimento da sequência de aminoácidos B, a % de identidade de sequência de aminoácidos de A para B não será igual à % de identidade de sequência de aminoácidos de B para A.[152] where It will follow that when the length of amino acid sequence A is not equal to the length of amino acid sequence B, the % amino acid sequence identity from A to B will not be equal to the % amino acid sequence identity from B to A.

[153] É possível fazer variações à sequência dos peptídeos antagonistas descritas neste documento, por exemplo, usando qualquer uma das técnicas e diretrizes para mutações conservadoras e não conservadoras estabelecidas, por exemplo, na Patente dos EUA no 5.364.934 (Drayna et al., depositada no dia 15 de novembro de 1994), a qual se incorpora por referência ao presente documento na íntegra. Essas variações podem incluir a substituição, deleção ou introdução de um ou mais códons que codificam os peptídeos antagonistas resultando em uma mudança na sequência de aminoácidos dos peptídeos antagonistas em comparação aos peptídeos antagonistas da sequência de referência. As variações podem ser de acordo com a Tabela 3 acima.[153] It is possible to make variations to the sequence of the antagonist peptides described herein, for example, using any of the techniques and guidelines for conservative and non-conservative mutations set forth, for example, in US Patent No. 5,364,934 (Drayna et al. , deposited on November 15, 1994), which is incorporated by reference into this document in its entirety. These variations may include the substitution, deletion or introduction of one or more codons encoding the antagonist peptides resulting in a change in the amino acid sequence of the antagonist peptides compared to the reference sequence antagonist peptides. Variations may be as per Table 3 above.

EXEMPLOSEXAMPLES

[154] Os exemplos a seguir são dados para melhor elucidar as presentes concretizações. Eles são dados sem a intenção de limitar o âmbito das concretizações.[154] The following examples are given to better elucidate the present embodiments. They are given without the intention of limiting the scope of achievements.

EXEMPLO 1EXAMPLE 1

[155] Usando um ensaio de fluxo de cálcio, determinou-se a resposta inibitória dependente da dose de antagonistas peptídicos da presente invenção em um receptor da amilina, AMY1, um receptor da CT (calcitonina)/RAMP1 (proteína modificadora da atividade de receptores). A linhagem celular recombinante CHO-K1/AMY1/Ga15 (GenScript, Piscataway, NJ, Catálogo no M00475) foi usada no ensaio. As atividades antagonistas do peptídeo foram testadas, em duplicata, a cinco concentrações diferentes, a começar por 1 µM e serialmente diluídas cinco vezes em DMSO. O AC187 (SEQ ID No: 55), um antagonista do receptor da amilina conhecido (disponibilizado, por exemplo, pela Tocris Bioscience, Minneapolis, MN, no de catálogo 3419), foi usado como controle positivo nos ensaios, e o a-CGRP humano, um agonista do receptor da amilina conhecido (SEQ ID No:56) (disponibilizado, por exemplo, pela Tocris Bioscience, Minneapolis, MN, no de catálogo 3012), foi usado como controle positivo nos ensaios. O Kit de Ensaio FLIPR® Calcium 4 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA) foi usado.[155] Using a calcium flux assay, the dose-dependent inhibitory response of peptide antagonists of the present invention was determined on an amylin receptor, AMY1, a CT (calcitonin) receptor/RAMP1 (receptor activity modifying protein). ). The recombinant cell line CHO-K1/AMY1/Ga15 (GenScript, Piscataway, NJ, Catalog no. M00475) was used in the assay. The antagonistic activities of the peptide were tested, in duplicate, at five different concentrations, starting at 1 µM and serially diluted five times in DMSO. AC187 (SEQ ID No: 55), a known amylin receptor antagonist (available, for example, from Tocris Bioscience, Minneapolis, MN, catalog no. 3419), was used as a positive control in the assays, and a-CGRP human, a known amylin receptor agonist (SEQ ID No:56) (available, for example, from Tocris Bioscience, Minneapolis, MN, catalog no. 3012), was used as a positive control in the assays. The FLIPR® Calcium 4 Assay Kit (Molecular Devices, Sunnyvale, CA) was used.

Reagentes de ControleControl Reagents

[156] O a-CGRP com a sequência de aminoácidos NH2- ACDTATCVTHRLAGLLSRSGGVVKNNFVPTNVGSKAF-NH2 (SEQ ID No: 56) e o AC187 com a sequência de aminoácidos VLGKLSQELHKLQTYPRTNTGSNTY (SEQ ID No: 55) foram usados como controles negativo e positivo, respectivamente. Soluções-estoque foram adicionalmente diluídas em tampão de HBSS-HEPES para produzir 5 vezes a solução final. Tabela 4: Reagentes de Controle [156] a-CGRP with the amino acid sequence NH2- ACDTATCVTHRLAGLLSRSGGVVKNNFVPTNVGSKAF-NH2 (SEQ ID No: 56) and AC187 with the amino acid sequence VLGKLSQELHKLQTYPRTNTGSNTY (SEQ ID No: 55) were used as negative and positive controls, respectively. Stock solutions were further diluted in HBSS-HEPES buffer to yield 5 times the final solution. Table 4: Control Reagents

Outros reagentesOther reagents

[157] Materiais adicionais usados no ensaio são dados na Tabela 5. Tabela 5: Reagentes [157] Additional materials used in the assay are given in Table 5. Table 5: Reagents

Preparo de Culturas CelularesPreparation of Cell Cultures

[158] Células CHO-K1/AMY1/Ga15 foram semeadas em uma placa de fundo limpo e parede escura com 384 cavidades a uma densidade de 20.000 células/cavidade em 20 µl de meio de crescimento 20 horas antes do dia do experimento e mantidas a 37° C/CO2 a 5%.[158] CHO-K1/AMY1/Ga15 cells were seeded in a clean-bottom, dark-walled 384-well plate at a density of 20,000 cells/well in 20 µl of growth medium 20 hours before the day of the experiment and maintained at 37° C/CO2 at 5%.

Protocolo do ensaioTrial protocol

[159] De acordo com o protocolo do kit de ensaio, adicionou-se solução de carregamento de tintura (a 2x a concentração final) à placa do ensaio, 20 µL por cavidade. Adicionou-se a solução do composto (a 5x a concentração final) à placa de ensaio, 10 uL por cavidade. A placa de ensaio foi disposta em uma incubadora a 37° C durante 1 hora e, então, deixada por 15 min em temperatura ambiente. A placa agonística (a 5x a concentração EC90) foi disposta na Fonte 2. O tempo de leitura total foi de 120 segundos. Adicionou-se o agonista após 20 segundos de leitura dos parâmetros e capturou-se o sinal de fluorescência por mais 100 segundos (21s a 120 s).[159] According to the assay kit protocol, dye loading solution (at 2x final concentration) was added to the assay plate, 20 µL per well. The compound solution (at 5x final concentration) was added to the assay plate, 10 uL per well. The assay plate was placed in an incubator at 37°C for 1 hour and then left for 15 min at room temperature. The agonistic plate (at 5x EC90 concentration) was placed in Source 2. The total reading time was 120 seconds. The agonist was added after 20 seconds of reading the parameters and the fluorescence signal was captured for another 100 seconds (21s to 120s).

[160] Na triagem, as células estimuladas com o tampão do ensaio foram escolhidas como plano de fundo; as células estimuladas com agonista (à concentração EC90) foram escolhidas como controle negativo.[160] In screening, cells stimulated with assay buffer were chosen as the background; cells stimulated with agonist (at EC90 concentration) were chosen as a negative control.

Análise dos dadosData analysis

[161] Os dados foram gravados no ScreenWorks (versão 3.1) na forma de arquivos FMD e armazenados na rede de computador GenScript para análise offline. A aquisição e a análise dos dados foram realizadas usando o programa ScreenWorks (versão 3.1) e exportadas para Excel. O valor médio de 20 (1 s a 20 s) segundos de leitura foi calculado como o parâmetro de leitura e os valores de intensidade das unidades fluorescentes relativas (ARFU) foram calculados com as unidades fluorescentes máximas (21 s a 120 s) subtraindo o valor médio da leitura de parâmetro.[161] Data were recorded in ScreenWorks (version 3.1) in the form of FMD files and stored on the GenScript computer network for offline analysis. Data acquisition and analysis were performed using the ScreenWorks program (version 3.1) and exported to Excel. The average value of 20 (1 s to 20 s) seconds of reading was calculated as the reading parameter and the relative fluorescent units (ARFU) intensity values were calculated with the maximum fluorescent units (21 s to 120 s) subtracting the average value of the parameter reading.

[162] O valor IC50 de AC187 foi de 8 uM. A atividade inibitória dos antagonistas peptídicos testados foi normalizada com o controle negativo (AC 187) e divulgada como % de Inibição, calculada de acordo com a equação a seguir: % de Inibição = (?RFUComposto - ?RFUPlano de fundo)/(?RFUControle negativo - ?RFUPlano de fundo) * 100 % A inibição foi, então, representada graficamente ao longo do eixo Y, com as concentrações do teste conforme indicadas no eixo X. Os peptídeos usados são listados na Tabela 1, acima. Os resultados desses experimentos são apresentados na Tabela 6, com os valores de controle listados na Tabela 7, abaixo. Os peptídeos foram testados às concentrações indicadas e estimulados com 32 nM (EC50) de a-CGRP (Média +/- SD, n = 2). Os resultados demonstram a potência surpreendentemente alta dos peptídeos selecionados; por exemplo, muitos têm concentrações IC50 na faixa nanomolecular baixa em comparação à concentração IC50 na faixa micromolecular baixa do controle positivo, AC 187. Tabela 6: Resultados Tabela 7: Controle Positivo do Ensaio [162] The IC50 value of AC187 was 8 uM. The inhibitory activity of the peptide antagonists tested was normalized with the negative control (AC 187) and disclosed as % Inhibition, calculated according to the following equation: % Inhibition = (?RFUCompound - ?RFUBackground)/(?RFUControl negative - ?RFUPbackground) * 100% Inhibition was then plotted along the Y-axis, with test concentrations as indicated on the X-axis. The peptides used are listed in Table 1, above. The results of these experiments are presented in Table 6, with control values listed in Table 7, below. Peptides were tested at the indicated concentrations and stimulated with 32 nM (EC50) a-CGRP (Mean +/- SD, n = 2). The results demonstrate the surprisingly high potency of the selected peptides; for example, many have IC50 concentrations in the low nanomolecular range compared to the IC50 concentration in the low micromolecular range of the positive control, AC 187. Table 6: Results Table 7: Positive Assay Control

[163] Embora as modalidades presentes tenham sido descritas em alguns detalhes para fins de clareza e compreensão, os versados na técnica perceberão que várias mudanças à forma e aos detalhes podem ser feitas sem divergir do âmbito das concretizações. Todas as Figuras, tabelas e anexos, bem como patentes, pedidos e publicações citados acima, incorporam-se ao presente documento na íntegra por referência.[163] Although the present embodiments have been described in some detail for purposes of clarity and understanding, those skilled in the art will appreciate that various changes to the form and details can be made without departing from the scope of the embodiments. All Figures, tables and annexes, as well as patents, applications and publications cited above, are incorporated into this document in full by reference.

Claims (6)

1. Antagonista de Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina, caracterizado por que compreende uma sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo de SEQ ID NOs: 1-15.1. Calcitonin Gene-Related Peptide Antagonist, characterized in that it comprises an amino acid sequence selected from the group of SEQ ID NOs: 1-15. 2. Antagonista de Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina, de acordo com a Reivindicação 1, caracterizado por que possui a estrutura: NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-ArgLeu-Ser- Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-ProArg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys- Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 1), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ser-Cys-Val- Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-ThrTyr-Pro-Arg-Thr- Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 2), NH2-Ala-Cys-Asp- Thr-Ala-Val-CysVal-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln- Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 3), NH2-Ala-Cys-Asn-Thr-AlaAla-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-HisArg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe- NH2 (SEQ ID NO: 4), NH2-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly- Arg-Leu-Ser-Gln-GluLeu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val- Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 5), NH2-Ala-Cys-Arg-Phe-Gly-Ala- Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr- Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 6), NH2-Ala- Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His- Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 7), NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg- Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val- Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 8), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala- Leu-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr- Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 9), NH2- Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His- Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 10), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg- Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val- Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 11), NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala- Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr- Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 12) ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma.2. Calcitonin Gene-Related Peptide Antagonist, according to Claim 1, characterized in that it has the structure: NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-ArgLeu-Ser - Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-ProArg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys- Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 1), NH2-Ala- Cys-Asp-Thr-Ala-Ser-Cys-Val- Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-ThrTyr-Pro-Arg-Thr- Asn-Val- Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 2), NH2-Ala-Cys-Asp- Thr-Ala-Val-CysVal-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu -His-Arg-Leu-Gln- Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 3), NH2-Ala-Cys-Asn- Thr-AlaAla-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu- Leu-HisArg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys- Ala-Phe- NH2 (SEQ ID NO: 4), NH2-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Ala-Cys-Val-Leu-Gly- Arg-Leu-Ser-Gln-GluLeu-His-Arg-Leu -Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val- Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 5), NH2-Ala-Cys-Arg-Phe-Gly-Ala- Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr- Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID NO: 6), NH2-Ala- Cys-Asn-Leu-Ser-Ala-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His- Arg-Leu -Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 7), NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala-Ala- Cys-Val-Leu-Gly-Arg- Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val- Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID NO: 8), NH2-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Leu-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu -Gln-Thr- Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 9), NH2- Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Ile- Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His- Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID NO: 10), NH2-Ala-Cys-Asn-Leu-Ser-Val-Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu -Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val- Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (SEQ ID NO: 11), NH2-Cys-Ser-Asn-Thr-Ala- Val- Cys-Val-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr- Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala- Phe-NH2 (SEQ ID NO: 12) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 3. Composição Farmacêutica, caracterizada por que compreende um excipiente farmaceuticamente aceitável e um antagonista de peptídeo relacionado ao gene da calcitonina, o referido antagonista compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada a partir do grupo que consiste na sequência de aminoácido de SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14 ou SEQ ID NO: 15.3. Pharmaceutical composition, characterized in that it comprises a pharmaceutically acceptable excipient and a peptide antagonist related to the calcitonin gene, said antagonist comprising an amino acid sequence selected from the group consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14 or SEQ ID NO: 15. 4. Composição Farmacêutica, caracterizada por que compreende um excipiente farmaceuticamente aceitável e um antagonista de peptídeo relacionado ao gene da calcitonina conforme definidos na Reivindicação 1.4. Pharmaceutical composition, characterized in that it comprises a pharmaceutically acceptable excipient and a peptide antagonist related to the calcitonin gene as defined in Claim 1. 5. Uso de Antagonista de Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina, conforme definido na Reivindicação 1, caracterizado por que é para o fabrico de um medicamento para o tratamento da dor de cabeça e/ou uma condição associada com níveis aberrantes de CGRP, incluindo a enxaqueca.5. Use of a Calcitonin Gene-Related Peptide Antagonist, as defined in Claim 1, characterized in that it is for the manufacture of a medicine for the treatment of headache and/or a condition associated with aberrant levels of CGRP, including migraine. 6. Uso de Composições Farmacêuticas, conforme definidas em qualquer uma das Reivindicações 3 e/ou 4, caracterizado por que é para o fabrico de um medicamento para o tratamento da dor de cabeça e/ou uma condição associada com níveis aberrantes de CGRP, incluindo a enxaqueca.6. Use of Pharmaceutical Compositions, as defined in any of Claims 3 and/or 4, characterized in that it is for the manufacture of a medicament for the treatment of headache and/or a condition associated with aberrant levels of CGRP, including the migraine.