BR112013029661B1

BR112013029661B1 - Uso de uma macromolécula compreendendo um dendrímero para a preparação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de vaginose bacteriana

Info

Publication number: BR112013029661B1
Application number: BR112013029661-5A
Authority: BR
Inventors: Jeremy Robert Arthur Paull; Jacinth Kincaid Fairley; Clare Frances Price; Gareth Rhys Lewis
Original assignee: Starpharma Pty Ltd
Priority date: 2011-05-16
Filing date: 2011-07-14
Publication date: 2021-10-13
Also published as: ES2753531T3; AU2011368322B2; IL229439A0; PT2709633T; PL2709633T3; LT2709633T; CA2836168A1; KR20180126621A; MX2013013473A; HRP20191888T1; US9155760B2; CN107669698A; RU2632110C2; JP2016193945A; DK2709633T3; CN103687601A; KR20140040750A; EP2709633A4; KR102096114B1; JP6057987B2

Abstract

uso de uma macromolécula compreendendo um dendrímero para a preparação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de vaginose bacteriana a presente invenção refere-se aos métodos de tratamento ou profilaxia de vaginose bacteriana, prevenção da recorrência de vaginose bacteriana e alívio ou prevenção dos sintomas ou critérios de diagnóstico de vaginose bacteriana. os métodos que compreendem a administração de uma quantidade eficaz de uma macromolécula com-posta por um dendrímero de polilisina, poliamidoamina, poli (éter-hidroxiamina) ou poli (propilenimina) e uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas ao mesmo.

Description

Campo da invenção

A presente invenção refere-se a um método de tratamento ou profilaxia de vaginose bacteriana, ou alívio ou profilaxia de um ou mais sintomas de vaginose bacteriana.

Também são descritos métodos de profilaxia de recorrência de vaginose bacteriana.

Antecedentes da Invenção

A vaginose bacteriana (BV) é a infecção vaginal mais comum em todo o mundo e a causa mais comum de irritação vaginal, corrimento e mau odor.

Estima-se que a prevalência de BV é de cerca de 30% nos Estados Unidos, 44% na África subsaariana e cerca de 10% na Austrália.

BV está relacionada a problemas de saúde graves, tais como parto prematuro, infecção pós-operatória e aumento da susceptibilidade ao HIV, e outras doenças sexualmente transmissíveis.

Embora BV esteja sendo estudada há muitos anos, sua causa permanece desconhecida e os tratamentos disponíveis nem sempre são eficazes.

BV é caracterizada por um desequilíbrio na flora vaginal em que Lactobacillus spp produtores de peróxido normalmente abundantes são escassos, e outras bactérias anaeróbias, tais como Gardnerella vaginalis, Mobiluncus spp., Atopobium vaginae e Prevotella spp. são abundantes.

Os tratamentos atuais recomendados para o tratamento de BV incluem metronidazol, clindamicina e tinidazol.

No entanto, estes tratamentos estão se tornando menos eficazes por causa de bactérias resistentes e também apresentam efeitos colaterais significativos.

O metronidazol e o tinidazol possuem um potencial risco de carcinogenicidade e também causam náuseas, dores abdominais, vômito, dores de cabeça e rubor, se álcool for consumido durante o tratamento ou até três dias após o tratamento.

Há também uma alta incidência de infecção causada por fungos, como Candida albicans (candidiase), durante o tratamento de BV com antibióticos.

Além disso, cremes com clindamicina sâo formulados com óleos minerais inadequados para uso com preservativos de látex ou outros produtos de borracha, como diafragmas e, portanto, podem exigir a abstinência de relações sexuais durante o tratamento para evitar a gravidez e/ou infectar o parceiro sexual.

Há uma necessidade de tratamentos que não sejam absorvidos sistemicamente e também que minimizem os efeitos adversos locais ou sistêmicos, e que sejam compatíveis com dispositivos profiláticos, como preservativos.

Algumas dificuldades reconhecidas com o tratamento de BV são que o atual tratamento com antibiótico não faz distinção entre as bactérias normalmente presentes na flora vaginal saudável e as anaeróbias infectantes, e nem todas as anaeróbias presentes são necessariamente suscetíveis ao mesmo antibiótico.

Há uma necessidade de tratamento para BV que tenha certa seletividade para atividade contra bactérias indesejáveis e nenhuma ou baixa atividade contra a flora vaginal normal.

Em particular, há uma necessidade por um tratamento que reduz os níveis de bactérias Gram negativas nocivas sem inibir o restabelecimento de lactobacilos produtores de peróxido de hidrogênio.

Outra dificuldade é que, após o tratamento, BV é frequentemente recorrente.

Com base nos resultados de ensaios clínicos recentes, cerca de dois terços das pacientes sofrem de vários episódios de BV.

Uma vez que a prevalência de BV nos Estados Unidos é de cerca de 30%, isso significa que 20% das mulheres nos EUA têm BV recorrente.

Além disso, o tratamento recorrente com antibióticos leva a um aumento da incidência de bactérias resistentes a antibióticos, e a uma menor eficácia do tratamento.

Não há, no momento, um agente terapêutico recomendado aprovado pela EDA dos Estados Unidos para a profilaxia de recorrência de BV. Há, portanto, necessidade por uma terapia para a profilaxia da recorrência da BV.

Resumo da Invenção

A presente invenção é prevista, pelo menos em parte, na observação de que um agente microbicida dendrímero tem atividade antibacteriana seletiva contra bactérias anaeróbias, tais como G. vaginalis, ao mesmo tempo com ausência ou baixa atividade antibacteriana contra a flora de Lactobacillus vaginal normal.

Também foi observado que o agente microbicida dendrímero tem particular atividade quando administrado em uma quantidade de 40 a 100 mg/dia em uma dose única.

Em um primeiro aspecto, é fornecido um método de tratamento ou profilaxia de BV em um indivíduo, o dito método compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrímero de polilisina, poliamidoamina, poli(éter- hidroxilamina) ou poli(propilenimina) de 1 a 5 gerações, e uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos aminos de superfície da geração mais distante do dendrímero, em que a dita quantidade efetiva é de 40 a 100 mg de macromolécula por dia.

Em uma modalidade particular, a quantidade efetiva é de 40 a 60 mg por dia.

Em algumas modalidades, a macromolécula é administrada por administração vaginal.

Em outro aspecto da invenção, é fornecido um método de alivio ou profilaxia de um ou mais sintomas de BV e/ou um ou mais critérios de diagnóstico de BV em um individuo, o dito método compreendendo administrar ao individuo uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrímero de polilisina, poliamidoamina, poli(eter- hidroxilamina) ou poli(propilenimina) de 1 a 5 gerações, e uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos amino de superfície da geração mais distante do dendrímero, em que o um ou mais sintomas e critérios de diagnóstico são selecionados a partir de: i) escore de Nugent, ii) células-pista (clue cells), iii) teste de odor da secreção vaginal, iv) corrimento vaginal. , v) pH vaginal e vi) mau odor.

Em algumas modalidades, dois ou mais sintomas e/ou critérios de diagnóstico são aliviados.

Em algumas modalidades, três ou mais sintomas e/ou critérios de diagnóstico são aliviados.

Em ainda outro aspecto da invenção, é fornecido um método de profilaxia ou redução de reincidência de BV em um indivíduo, o dito método compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrimero de polilisina, poliamidoamina, poli(eter-hidroxilamina) ou poli(propilenimina) de 1 a 5 gerações, e uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos aminos de superfície da geração mais distante do dendrimero, em que a dita quantidade efetiva é administrada de 1 a 7 vezes por semana.

Em algumas modalidades, a administração é feita de 3 a 4 dias por semana, como em dias alternados.

Em algumas modalidades, a administração é continuada por um período prolongado, por exemplo, meses ou anos, como de até 25 anos.

Por exemplo, em algumas modalidades, a administração continuará durante 1, 5, 10, 15 ou 20 anos.

Em um aspecto adicional, é fornecido um método de redução da incidência de infecção causada por fungos ou outra infecção microbiana em um indivíduo durante ou após o tratamento de BV, compreendendo tratar a BV pela administração ao indivíduo de uma quantidade eficaz de uma macromolécula compreendendo um dendrimero de polilisina, poliamidoamina, poli(eter-hidroxilamina) ou poli (propilenimina) de 1 a 5 gerações, e uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos aminos de superfície da geração mais distante do dendrimero.

Em algumas modalidades, a incidência de afta (candidíase) observada com o uso de outros antibióticos é reduzida.

Em algumas modalidades, a quantidade eficaz é de 40 a 100 mg/dia em dose única.

Em ainda outro aspecto da invenção, é fornecido um uso de uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrímero de polilisina, poliamidoamina, poli(eter-hidroxilamina) ou poli(propilenimina) de 1 a 5 gerações, e uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos aminos de superfície da geração mais distante do dendrímero, na fabricação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de BV, em que a quantidade eficaz é de 40 mg a 100 mg de dendrímero.

Em outro aspecto da invenção, é fornecido um uso de uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrímero de polilisina, poliamidoamina, poli(eter- hidroxilamina) ou poli(propilenimina) de 1 a 5 gerações, e uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos aminos de superfície da geração mais distante do dendrímero, na fabricação de um medicamento para o alívio ou profilaxia de um ou mais sintomas e/ou um ou mais critérios de diagnóstico de BV selecionados a partir de: i) escore de Nugent, ii) células-pista, iii) teste de odor da secreção vaginal, iv) corrimento vaginal, v) pH vaginal e vi) mau odor.

Em ainda outro aspecto da invenção, é fornecido um uso de uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrímero de polilisina, poliamidoamina, poli(eter-hidroxilamina) ou poli(propilenimina) de 1 a 5 gerações, e uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos aminos de superfície da geração mais distante do dendrímero, na fabricação de um.

medicamento para profilaxia ou redução da recorrência de BV.

Em ainda outro aspecto da invenção, é fornecido um uso de uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrímero de polilisina, poliamidoamina, poli(eter-hidroxilamina) ou poli(propilenimina) de 1 a 5 gerações, e uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos aminos de superfície da geração mais distante do dendrímero, na fabricação de um medicamento para redução da incidência de infecção fúngica ou outra infecção microbiana durante ou após o tratamento de BV.

Descrição da Invenção

As formas singulares "um", "uma" e "o/a" incluem aspectos plurais, a menos que o contexto claramente especifique de outra forma.

Em todo este relatório descritivo e nas reivindicações a seguir, salvo quando o contexto indicar o contrário, a palavra "compreendem", e variações como "compreende" e "compreendendo" serão compreendidas como implicando na inclusão de um número inteiro ou etapa declarada ou grupo de números inteiros ou etapas, mas não a exclusão de qualquer outro número inteiro ou etapa ou grupo de números inteiros ou etapas.

Conforme usado neste documento, o termo "cerca de" refere-se a uma quantidade, nível, valor, dimensão, tamanho ou quantidade que varia em tanto quanto 20%, 15%, 10% ou 5% para uma quantidade de referência, nível, valor, dimensão, tamanho ou quantidade.

Em um aspecto, a presente invenção fornece um método de tratamento ou profilaxia de BV em um individuo, o dito método compreendendo administrar ao individuo uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrimero de polilisina, poliamidoamina, poli(eter- hidroxilamina )ou poli (propilenimina) de 1 a 5 gerações, e com uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos aminos de superfície da geração mais distante do dendrimero, em que a dita quantidade efetiva é de 40 a 100 mg de dendrimero por dia.

Em algumas modalidades, a quantidade eficaz está na faixa de 40 a 90 mg por dia, 40 a 80 mg por dia, 40 a 70 mg por dia, especialmente de 40 a 60 mg por dia e mais especialmente de cerca de 50 mg por dia.

Em uma modalidade particular, a macromolécula é formulada como um gel, especialmente um gel formulado com um pH entre 4,5 e 5,5, especialmente em pH 5.

Vantajosamente, esta formulação pode auxiliar na redução do pH vaginal até entre 4 e 5 ou na manutenção do pH vaginal entre 4 e 5.

Em algumas modalidades, a formulação do gel da macromolécula compreende um agente modificador de reologia, especialmente um polimero Carbopol®, como Carbopol® 971P.

O modificador de reologia pode estar presente em uma quantidade de 2 a 10%, especialmente de cerca de 5%.

A formulação de gel da macromolécula também pode incluir um agente quelante, como um ácido poliaminocarboxilico.

Um agente quelante particularmente útil é o ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) e seus sais.

Quantidades adequadas de agente quelante encontram-se na faixa de 0,001% a 2%, especialmente de 0,005% a 1%.

Em algumas modalidades, o agente quelante está presente em baixa quantidade, tal como de 0,001% a 0,1%, especialmente de cerca de 0,005%.

Outros ingredientes que podem ser incluídos na formulação de gel incluem conservantes como 5 parabenos, por exemplo, metilparabeno e propilparabeno, ou misturas dos mesmos, solventes como água, agentes de ajuste de pH, como hidróxido e emolientes e umectantes, como glicerina e propilenoglicol.

Em algumas modalidades, a macromolécula ou uma 10 formulação de macromolécula é administrada em doses múltiplas mais de uma vez por dia, por exemplo, de manhã e à noite.

Em outras modalidades, a macromolécula ou formulação compreendendo a macromolécula é administrada em dose única, uma vez por dia, por exemplo, à noite.

Em algumas modalidades, a macromolécula ou formulação compreendendo a macromolécula é administrada pela via vaginal.

Em algumas modalidades, a dosagem pode ser administrada em um volume de 3,5 a 5 gramas, especialmente de 4 a 5 gramas e, mais especialmente, de cerca de 5 20 gramas, particularmente quando administrada à noite ou imediatamente antes do individuo se deitar.

A posição horizontal não móvel e predominantemente horizontal assumida durante o sono auxilia na retenção da formulação da macromolécula na vagina, aumentando o tempo de 25 exposição.

Em algumas modalidades, a dosagem ocorre próximo da atividade sexual, como relação sexual, especialmente no período de 24 horas antes ou após a relação sexual, mais especialmente no intervalo de 3 horas antes ou após a 30 relação sexual.

Em algumas modalidades, a dosagem ocorre durante ou após a menstruação, especialmente no periodo de 24 horas do fim da menstruação, e mais especialmente a dosagem é administrada por 2, 3, 4 ou 5 dias após o fim da menstruação.

O termo "tratamento", como usado na presente invenção, refere-se a atingir pelo menos parcialmente um resultado terapêutico desejado.

O resultado terapêutico pode ser uma cura terapêutica no final do tratamento (EOT) ou em uma data posterior, após o término do tratamento (teste de cura, TOC) .

O resultado terapêutico pode ser uma cura clínica no EOT ou TOC.

O resultado terapêutico pode ser o alivio de um ou mais sintomas de BV, como o alívio do odor vaginal ou do corrimento vaginal, ou pode ser a redução ou normalização (ou manutenção) dos critérios de diagnóstico para BV, como pH vaginal, a presença de células-pista (clue cells) ou do teste de odor da secreção vaginal, conforme definido pelos critérios de Amsel ou através da obtenção de um escore de Nugent normal (cura de Nugent f 3).

O termo "profilaxia" refere-se à prevenção ou atraso do início da BV em um indivíduo em risco de contrair BV pela primeira vez, ou em risco de sofrer de episódios recorrentes de BV.

As pessoas em risco de BV incluem mulheres com múltiplos parceiros sexuais ou novos parceiros sexuais com uma alta frequência de relação sexual vaginal. No entanto, alguns estudos têm demonstrado que a atividade sexual não é necessária para o desenvolvimento de BV (Yen et al. , Obstet. Gynecol. 2003, 102: 927-933; Bump et al., Am. J. Obstet. Gynecol., 1988, 158: 935-939) e, portanto, BV não é necessariamente considerada uma infecção sexualmente transmissível. Alguns estudos também demonstraram uma alta prevalência de BV em mulheres que fazem sexo com mulheres (Marrazzo et al. , J. Infect. Dis., 2002, 185: 1307-1313).

Além disso, estudos mostram que 50% das mulheres que têm sintomas de BV e são tratadas com terapias existentes experimentam um episódio recorrente de BV no período de 6 meses (Marrazzo et al., Sex. Trans. Dis., 2010, 37(12):732-744) .

O termo "Fim do tratamento" (EOT), durante o tratamento agudo de um episódio de BV, refere-se a um período de 9 a 12 dias após a primeira dose de terapia ter sido administrada.

O termo "Teste de cura" (TOC), durante o tratamento agudo de um episódio de BV refere-se a um período de tempo após a última dose da terapia que foi administrada para avaliar se ocorreu recaída ou recorrência.

Um exemplo de teste de cura pode ser de 21 a 30 dias após a primeira dose de a terapia ter sido administrada.

O termo "Critérios de Amsel" refere-se aos critérios de diagnóstico utilizados para identificar BV.

Esses critérios incluem: • corrimento branco homogêneo que reveste suavemente a mucosa vaginal; • presença de células de pista (bactérias que aderem às células epiteliais vaginais, à 20% de células totais no esfregaço vaginal); • pH vaginal > 4,5; • teste de odor da secreção vaginal positivo (odor suspeito com adição de 10% hidróxido de potássio (KOH) ao fluido vaginal).

De acordo com o diagnóstico clínico de BV, três dos quatro critérios de Amsel devem estar presentes.

O termo "Escore de Nugent" refere-se a uma pontuação ponderada entre 0 e 10, que é derivada de uma análise microbiológica usando um esfregaço vaginal pigmentado pelo método Gram (Nugent et al. , 1991, J. Clin. Microbiol., 29(2): 297-301).

A pontuação do composto baseia-se em: Lactobacillus spp. morfotipos - 0 (abundante) - 4 (ausência) Gardnerella/Bacteroides spp.

morfotipos - 0 (ausência) - 4 (abundante) Hastes gram variáveis curvas - 0 (ausência) - 2 (abundante) Um escore de Nugent de 0 a 3 é considerado normal, enquanto que uma pontuação de 4 a 6 (intermediário) é indicativo de um microambiente vaginal rompido, e de 7 a 10 é definida como BV.

Para efeitos de avaliação de uma cura, a Food and Drug Administration Norte-Americana considera uma pontuação de 0 a 3 normal e de 4 a 10 anormal.

O termo "Cura de Escore de Nugent" ou "Cura de Nugent" refere-se a uma terapia resultando em um escore de Nugent de 0 a 3.

O termo "cura clínica", conforme usado na presente invenção, refere-se ao indivíduo sendo assintomático e à resolução de pelo menos três dos quatro critérios de Amsel, em EOT e/ou TOC.

Por exemplo, pelo menos três dentre retorno ao corrimento fisiológico normal, esfregaço vaginal salino negativo para células de pista, pH vaginal < 4,7 e teste de odor da secreção vaginal negativo ocorrem.

O termo "cura terapêutica" refere-se a alcançar tanto a cura clínica quanto a cura de Nugent após a terapia.

Conforme usado neste documento, o termo "Resolução Terapêutica" refere-se a alcançar a cura clinica e um escore de Nugent á 6.

Em alguns casos, uma cura clinica ou terapêutica não precisa ser alcançada, mas um ou mais dos sintomas ou critérios de diagnóstico aparentes no inicio do tratamento podem ser resolvidos.

Por exemplo, o corrimento vaginal inicial pode retornar ao normal, o mau odor associado com a BV pode ser resolvido, o teste de odor da secreção vaginal pode ser negativo, o pH vaginal pode retornar ao normal, as células de pista podem desaparecer ou o escore de Nugent pode tornar-se menor que 4, enquanto um ou mais dos sintomas permanecem presentes.

Por exemplo, a resolução terapêutica pode ser alcançada porque o corrimento, mau odor e pH vaginal podem ser resolvidos, mas as células de pista ainda estão presentes e o escore de Nugent anormal.

Em outro aspecto da invenção, é fornecido um método de alivio ou profilaxia de um ou mais sintomas de BV e/ou um ou mais critérios de diagnóstico de BV em um individuo, o dito método compreendendo administrar ao individuo uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrímero de polilisina, poliamidoamina, poli(eter- hidroxilamina) ou poli(propilenimina) de 1 a 5 gerações, e uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos amino de superfície da geração mais distante do dendrímero, em que o um ou mais sintomas e critérios de diagnóstico são selecionados a partir de: i) escore de Nugent, ii) células-pista, iii) teste de odor da secreção vaginal, iv) corrimento vaginal, v) pH vaginal e vi) mau odor.

Em algumas modalidades, o escore de Nugent retorna para a faixa normal (0 a 3) .

Em algumas modalidades, as células de pista desaparecem.

Em algumas modalidades, o mau odor desaparece.

Em algumas modalidades, o corrimento vaginal desaparece.

Em algumas modalidades, o pH vaginal retorna ao normal.

Em algumas modalidades, o teste de odor da secreção vaginal é negativo.

Em algumas modalidades, dois, três ou quatro dos sintomas ou critérios diagnósticos de BV são resolvidos, por exemplo, o escore de Nugent e mau odor. ; o escore de Nugent e o teste de odor da secreção vaginal; o escore de Nugent e as células de pista; o escore de Nugent e o corrimento vaginal; o escore de Nugent e o pH vaginal; as células de pista e o mau odor; as células de pista e o teste de odor da secreção vaginal; as células de pista e o corrimento vaginal; as células de pista e o pH vaginal; o mau odor e o teste de odor da secreção vaginal; o mau odor e o corrimento vaginal; o escore de Nugent, mau odor e o pH vaginal; o escore de Nugent, mau odor e o teste de odor da secreção vaginal; o escore de Nugent, células de pista e o corrimento vaginal; o escore de Nugent, as células de pista e o pH vaginal; o escore de Nugent, o corrimento vaginal e o pH vaginal; o escore de Nugent, o corrimento vaginal e o pH vaginal; o escore de Nugent, corrimento vaginal e o teste de odor da secreção vaginal; mau odor, corrimento vaginal e pH vaginal; mau odor, corrimento vaginal e teste de odor da secreção vaginal; escore de Nugent, células de pista, mau odor e pH vaginal; escore de Nugent, células de pista, mau odor e corrimento vaginal; escore de Nugent, mau odor, corrimento vaginal e pH vaginal; escore de Nugent, mau odor, teste de odor da secreção vaginal e corrimento 5 vaginal; escore de Nugent, mau odor, teste de odor da secreção vaginal e pH vaginal; escore de Nugent, células de pista, corrimento vaginal e pH vaginal; escore de Nugent, células de pista, teste de odor da secreção vaginal e corrimento vaginal; escore de Nugent, células de pista, 10 teste de odor da secreção vaginal e pH vaginal; células de pista, mau odor, teste de odor da secreção vaginal e pH vaginal; e células de pista, mau odor, corrimento vaginal e pH vaginal.

Em algumas modalidades, a quantidade eficaz está na 15 faixa de 15 a 1000 mg de macromolécula por dia, especialmente de 15 a 500 mg por dia, de 15 a 400 mg por dia, de 15 a 300 mg por dia, de 15 a 150 mg por dia, de 30 a 110 mg por dia, de 40 a 100 mg por dia, de 40 a 90 mg por dia, de 40 a 80 mg por dia, de 40 a 70 mg por dia, mais 20 especialmente de 40 a 60 mg por dia e mais especialmente de cerca de 50 mg por dia.

Em algumas modalidades, a macromolécula é formulada em uma composição.

Formas de dosagem adequadas incluem géis, unguentos, pessários, tampões, espumas, loções e cremes.

Em algumas modalidades, a macromolécula é formulada em um gel como descrito acima.

Em algumas modalidades, a macromolécula ou formulação de macromolécula é administrada em múltiplas doses mais de uma vez por dia, por exemplo, duas vezes por dia (como, por 30 exemplo, de manhã e à noite).

Em outras modalidades, o dendrímero é administrado em dose única, uma vez por dia, por exemplo, à noite.

Em algumas modalidades, a macromolécula ou formulação compreendendo a macromolécula é administrada pela via 5 vaginal.

Em algumas modalidades, a dosagem pode ser administrada em um volume de 3,5 a 5 gramas, especialmente de 4 a 5 gramas, mais especialmente de 5 gramas, particularmente quando administrada à noite ou imediatamente antes do indivíduo se deitar.

A posição 10 horizontal não móvel e predominantemente horizontal assumida durante o sono auxilia na retenção da formulação da macromolécula na vagina, aumentando o tempo de exposição.

Em algumas modalidades, a dosagem ocorre próximo da 15 atividade sexual, como relação sexual, especialmente no período de 24 horas antes ou após a relação sexual, mais especialmente no intervalo de 3 horas antes ou após a relação sexual.

Em algumas modalidades, a dosagem ocorre durante ou 20 após a menstruação, especialmente no período de 24 horas do fim da menstruação, e mais especialmente a dosagem é administrada por 2, 3, 4 ou 5 dias após o fim da menstruação.

Com as terapias atuais, a recorrência de BV é comum, 25 por exemplo, porque a terapia original não era completamente eficaz ou o indivíduo apresenta alto risco de reinfecção.

Em ainda outro aspecto da invenção, é fornecido um método de profilaxia ou redução de reincidência de vaginose 30 bacteriana em um indivíduo, o dito método compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrímero de polilísina, poliamidoamina, poli(eter-hidroxílamina) ou poli(propilenimina) de 1 a 5 gerações, e com uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos aminos de superfície da geração mais distante do dendrímero, em que a dita quantidade efetiva é administrada de 1 a 7 vezes por semana.

O termo "profilaxia ou redução da reincidência" inclui onde a frequência de recorrência da BV é reduzida e/ou onde a gravidade da infecção de BV em um episódio recorrente é reduzida ou onde a recorrência de infecção de BV é impedida de ocorrer.

Em algumas modalidades, a quantidade eficaz é administrada de 2 a 3 vezes por semana, por exemplo, a cada três dias.

Em outras modalidades, a quantidade eficaz é administrada de 3 a 4 vezes por semana, por exemplo, em dias alternados.

Em algumas modalidades, a quantidade eficaz é administrada todõs os dias.

Em modalidades particulares, a terapia é continuada por um período prolongado, como durante meses ou anos, por exemplo, até 2. anos, como durante 1, 5, 10, 15 ou 20 anos.

Em outras modalidades, a terapia é continuada durante 1 a 6 meses, especialmente de 2 a 5 meses ou de 3 a 4 meses, especialmente durante cerca de 4 meses ou 16 semanas.

Em algumas modalidades, a quantidade efetiva está na faixa de 0,1 a 1000 mg por dose, incluindo de 0,1 a 500 mg por dose, de 0,1 a 400 mg por dose, de 0,1 a 300 mg por dose, de 0,5 a 300 mg por dose, de 0,5 a 200 mg por dose, de 1 a 200 mg por dose, de 2,5 a 200 mg por dose, de 5 a 200 mg por dose, de 10 a 200 mg por dose, de 15 a 200 mg por dose, especialmente de 30 a 200 mg por dose, de 40 a 160 mg por dose, de 40 a 150 mg por dose, de 4 0 a 120 mg por dose, especialmente dosagens como de cerca de 50 mg por dose, 105 mg por dose e 150 mg por dose.

Em algumas modalidades, particularmente onde a terapia é continuado por um período prolongado, o valor eficaz pode ser na extremidade inferior do intervalo eficaz de doses.

Por exemplo, quando a terapia é continuada por um período de meses ou anos, a quantidade efetiva pode estar na faixa de 0,1 a 200 mg por dose, especialmente de 0,1 a 100 mg por dose, de 0,1 a 50 mg por dose, de 0,1 a 25 mg por dose ou de 0,1 a 15 mg por dose.

Em algumas modalidades, a administração é em uma dose única.

Em algumas modalidades, a administração é administração vaginal.

Composições de dosagem adequadas são géis, unguentos, tampões, pessários, espumas, cremes e loções, especialmente géis como as formulações de géis descritas acima.

A posição horizontal não móvel e predominantemente horizontal assumida durante o sono auxilia na retenção da formulação da macromolécula na vagina, aumentando o tempo de exposição Em algumas modalidades, a dosagem ocorre próximo da atividade sexual, como relação sexual, especialmente no período de 24 horas antes ou após a relação sexual, mais especialmente no intervalo de 3 horas antes ou após a 5 relação sexual.

Tal dosagem é vantajosa onde um parceiro sexual é ou é suspeito de ser a fonte de reinfecçao em BV recorrente.

Em algumas modalidades, a dosagem ocorre durante ou após a menstruação, especialmente no período de 24 horas do 10 fim da menstruação, e mais especialmente a dosagem é administrada por 2, 3, 4 ou õ dias após o fim da menstruação.

Tal dosagem é vantajosa, uma vez que a menstruação está associada à recorrência de BV.

Em um outro aspecto, é fornecido um método de redução 15 da incidência de infecção causada por fungos ou outra infecção microbiana em um indivíduo durante o tratamento de BV, compreendendo tratar a BV pela administração ao indivíduo de uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrímero de polilisina, poliamidoamina, 20 poli(eter-hidroxilamina) ou poli(propilenimina) de 1 a 5 gerações, e uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos aminos de superfície da geração mais distante do dendrímero.

Muitos tratamentos atuais para BV incluem a 25 administração de antibióticos como metronidazol, clindomicina e tinidazol.

Estes tratamentos são muitas vezes incapazes de distinguir entre os micróbios infectantes e as bactérias normalmente presentes na flora vaginal saudável, e resultam em uma redução na flora 30 normal.

Esta redução da flora normal permite que outros micróbios infectantes como fungos ou outros micróbios, tais como micróbios sexualmente transmissíveis e micróbios gastrintestinais floresçam, resultando em aumento da susceptibilidade a infecções fúngicas ou infecção microbiana, tais como doenças sexualmente transmissíveis.

Em algumas modalidades, o fungo é Cândida albicans (candidíase) ou Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes e Epidermophyton floccosum, especialmente C. albicans.

Em outras modalidades a infecção microbiana sexualmente transmissível é o vírus da imunodeficiência humana (HIV), vírus do papiloma humano (HPV), vírus herpes simplex (HSV), molusco contagioso, Neisseria gonorrhoeae (gonorreia), Chlamydia trachomatis (clamídia), Trichomonas vaginalis, cancroide (Haemophilus ducreyi), Klebsiella granulomatis (granuloma inguianale) ou Treponema pallidum (sífilis).

Em ainda outras modalidades, a infecção microbiana pode ser derivada da flora gastrintestinal, tais como de Escherichia spp. como E. Coli, Clostridial spp. como C. difficile, Fusobacterial spp., Saccharomyces spp. e Asperigillus spp. Em ainda outras modalidades, a infecção microbiana pode ser causada por Staphylococcus aureus.

Em algumas modalidades, a quantidade eficaz está na faixa de 15 a 1000 mg de macromolécula por dia, especialmente de 15 a 500 mg por dia, de 15 a 400 mg por dia, de 15 a 300 mg por dia, de 1 5 a 200 mg por dia, de 15 a 150 mg por dia, de 30 a 110 mg por dia, de 40 a 100 mg por dia, de 40 a 90 mg por dia, de 40 a 80 mg por dia, de 40 a 70 mg por dia, mais especialmente de 40 a 60 mg por dia e mais especialmente de cerca de 50 mg por dia.

Em algumas modalidades, a macromolécula ou formulação de macromolécula é administrada em múltiplas doses mais de uma vez por dia, por exemplo, duas vezes por dia (como, por exemplo, de manhã e à noite).

Em outras modalidades, a macromolécula ou formulação de macromolécula é administrada em dose única, uma vez por dia, por exemplo, à noite.

Em algumas modalidades, a macromolécula ou formulação de macromolécula é administrada pela via vaginal.

Composições de dosagem adequadas incluem géis, unguentos, tampões, pessários, tampões, espumas, cremes e loções, especialmente géis como aqueles descritos acima.

Os dendrimeros úteis na invenção são dendrimeros são polilisina, poliamidoamina (PAMAM), poli(eter- hidroxilamina) ou poli (propilenimida) (PPI) com de 1 a 5 gerações.

A macromolécula também compreende uma ou mais porções contendo ácido sulfônico fixadas a um ou mais grupos amino de superfície da geração mais distante do dendrimero.

Dendrimeros são macromoféculas poliméricas ramificadas compostas de vários monômeros ramificados, irradiando de uma porção do núcleo central.

O número de pontos de ramificação aumenta ao se deslocar do núcleo do dendrimero para a sua superfície e é definido por camadas sucessivas ou "gerações" de unidades monoméricas (ou de construção).

Cada geração de unidades de construção é numerada para indicar a distância do núcleo.

Por exemplo, a geração 1 (Gl) é a camada de unidades de construção ligadas ao núcleo, a geração 2 (G2) é a camada de unidades de construção ligadas à geração 1, a geração 3 (G3) é a camada de unidades de construção ligadas à geração 2, a geração 4 (G4) é a camada de unidades de construção ligadas à geração 3 e a geração 5 (G5) é a camada de unidades de construção ligadas à geração 4.

A geração mais externa das unidades de construção 5 fornece a superfície do dendrímero e apresenta grupos funcionais, no presente caso grupos amino, a que pelo menos uma porção contendo ácido sulfônico é covalentemente ligada.

O grupo contendo ácido sulfônico pode ser diretamente ligado ao grupo funcional amino de superfície, 10 ou pode ser ligado ao grupo funcional amino de superfície através de um ligante.

Os dendrímeros compreendem um tipo único de unidade monomérica (também referido neste documento como uma unidade de construção).

Cada "ramificação", estendendo-se 15 desde o núcleo da molécula do dendrímero tem, pelo menos uma camada ou geração de unidades de construção.

Conforme usado neste documento, o termo "ramificação" refere-se a pelo menos uma geração de unidades de construção que é ligada a um grupo funcional no núcleo.

Em certas 20 modalidades, cada ou qualquer ramificação ramo pode ter pelo menos duas camadas ou gerações de unidades de construção.

Em certas modalidades, cada ou qualquer ramificação pode ter pelo menos três ou quatro camadas ou gerações de unidades de construção.

Em ainda outras 25 modalidades, cada ou qualquer ramificação pode ter pelo menos cinco camadas ou gerações de unidades de construção.

Os dendrímeros contemplados na presente invenção podem ser preparados por métodos conhecidos na arte e podem ser preparados em uma maneira convergente (onde, efetivamente, 30 as ramificações são pré-formadas e, em seguida, ligadas ao núcleo) ou divergente (onde as camadas ou gerações são sucessivamente construidas para fora do núcleo).

Ambos estes métodos seria bem compreendidos para a pessoa versada na técnica.

Os dendrímeros podem ser compostos de qualquer núcleo adequado e de monômero de polilisina, poliamidoamina, poli(eter-hidroxilamina) ou poli(propilenimina), ou unidades de construção.

Conforme usado neste documento, "núcleo" refere-se à porção na qual camadas sucessivas ou gerações de monômeros ou unidades de construção são construidas (seja através de um processo divergente ou de um processo convergente), e pode ser qualquer porção com pelo menos um sitio reativo ou funcional do qual camadas sucessivas de unidades monomér icas ou de construção são geradas (ou a que uma "ramificação" pré-formada são ligadas).

Alguns núcleos apropriados exemplares contemplados neste documento incluem aqueles com 1, 2, 3 ou 4 grupos reativos selecionados independentemente de grupos amino, carboxila, tiol, alquila, alquinila, nitrila, halo, azido, hidroxilamina, carbonila, maleimida, acrilato ou hidroxila, ao qual as camadas ou gerações de unidades de construção ou monômeros podem ser ligados.

Uma porção de núcleo pode ser igual a uma unidade de construção ou pode ser diferente.

Núcleos exemplares incluem poliamino-hidrocarbonetos, poliaminas contendo dissulfeto, poli(éteres de glicidila) , aminoetanol, amónia, haletos de arilmetila, piperazina, aminoetilpiperazina, poli(etilenimina), ditióis de alquileno/arileno, ácido 4,4-ditiobutirico, mercaptoalquilaminas, alquilaminas de tioéter, isocianurato, heterociclicos, macrociclos, poliglicidilmetacrilato, fosfina, porfinas, oxiranos, tioranos, oxetanos, aziridinas, azetidinas, funcionalidades multi azido, siloxanos, oxazolinas, carbamatos ou 5 caprolactonas.

Alguns exemplos não limitantes das porções do núcleo contempladas na presente invenção incluem diaminoalcanos C2-C12, como etilenodiamina, 1,4-diaminobutano e 1,6- diamino-hexano.

No entanto, será percebido que o núcleo não 10 é necessariamente uma porção linear com um único grupo reativo em cada extremidade.

Porções de núcleo não lineares, cíclicas ou ramificadas também são contempladas pela presente invenção.

Por exemplo, arilmetilaminas como benzidrilamina (BHA) são núcleos adequados.

As unidades de construção dos dendrimeros são unidades de construção de lisina:

Unidades de construção de amidoamina:

Unidades de construção de éter-hidroxiamina;

unidades de construção de propilenimina:

Em uma modalidade particular, o dendrímero é um dendrímero de polilisina, especialmente um dendrímero de polilisina com um núcleo de benzidrilamina.

A porção contendo ácido sulfônico é uma porção que é capaz de apresentar o grupo de ácido sulfônico sobre a superfície do dendrímero.

Em algumas modalidades, a porção contendo ácido sulfônico tem um grupo de ácido sulfônico.

Em outras modalidades, a porção contendo ácido sulfônico tem mais de um grupo de ácido sulfônico, por exemplo, 2 ou 3 grupos de ácido sulfônico, especialmente 2 grupos de ácido sulfônico.

Em algumas modalidades, a porção contendo ácido sulfônico compreende um grupo arila, como um grupo fenila ou grupo naftila, especialmente um grupo naftila.

Exemplos de porções contendo ácido sulfônico adequadas incluem, mas não se limitam, a: -NH- (CH2)xiSO3-, -(CH2)nSO3-

em que n é 0 ou um número inteiro de 1 a 20, m é um número inteiro de 1 ou 2 e p é um número inteiro de 1 a 3.

Em algumas modalidades, a porção contendo ácido sulfônico é selecionada de:

especialmente.

Em algumas modalidades, a porção contendo ácido sulfônico é diretamente ligada ao grupo amino de superfície do dendrímero.

Em outras modalidades, a porção contendo ácido sulfônico é ligada ao grupo amino de superfície do dendrímero através de um grupo ligante.

Grupos ligantes adequados incluem grupos alquileno ou alquenileno, em que um ou mais átomos de carbono não adjacentes é/são opcionalmente substituído(s) por um átomo de oxigênio ou enxofre para fornecer um éter, tioéter, poliéter ou politioéter; ou um grupo -Xi-(CH2) q-X2, onde Xi e X2 são selecionados independentemente de -NH-, -C(O)~, - 0-, -S- e -C(S), e q é 0 ou um número inteiro de 1 a 10, e em que um ou mais grupos (CH2) não adjacentes pode(m) ser substituído(s) com -O- ou -S- para formar um éter, tioéter, poliéter ou politioéter.

Em uma modalidade particular, o ligante é #-O-CH2-C(0)em que # representa a ligação à porção contendo ácido sulfônico e * representa a ligação ao grupo amino de superfície do dendrímero.

Dendrímeros exemplares úteis na invenção incluem as fórmulas I (SPL-7013), II (SPL-7320) e III (SPL-7304):

em que o grupo R é representado por:

farmaceuticamente aceitável do mesmo.

A síntese das fórmulas I, II e III é descrita em WO 02/079299.

Sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem, mas não se limitam, aos sais de metal como os sais de alumínio, cálcio, lítio, magnésio, potássio, sódio e zinco, bem como os sais orgânicos feitos de aminas orgânicas como N,N'-dibenziletilenodiamina, cloroprocaína, dietanolamina, etilenodiamina, diciclo- hexilamina, meglumina (N-metilglicamina) e procaína, aminas quaternárias como colina e sais de sulfônio e fosfônio.

A presente invenção será agora descrita de modo mais completo com referência aos exemplos em anexo.

Deve ser entendido, no entanto, que a descrição a seguir é apenas ilustrativa e não deve ser considerada, de forma alguma, como uma restrição sobre a generalidade da invenção descrita acima.

Exemplo 1: Seletividade da Fórmula I em anaeróbios Artigos de Teste Os artigos de teste (Fórmula I, também referida como SPL-7013, pó e gel placebo) foram, armazenados em condições ambientais até o momento do ensaio.

Os ensaios foram realizados visando a concentração do pó de SPL-7013 de 1, 5, 10 e 30 mg/mL.

Para estes ensaios, o pó SPL-7013 foi dissolvido e diluído em água deionizada para alcançar as concentrações alvo finais nos vários meios 5 de ágar. O fármaco de comparação, imipeném, foi obtido a partir da Farmacopeia Norte-Americana (No. Cat. 1337809, No. Lat. H0E040) e armazenado a -20 °C em tampão em pH 7,2 e a uma concentração estoque de 320 pg/mL. Organismos Os organismos de teste para os ensaios foram isolados clínicos recentes ou cepas de referência adquiridas junto à Coleção Americana de Cultura de Células (ATCC; Manassas, VA) .

O organismo de controle de qualidade incluído no 15 ensaio foi Bacteroides fragilis 0123 (ATCC No. 25285).

Os meios de crescimento e de teste foram os recomendados pelo Instituto de Padrões Clínicos e Laboratoriais (CLSI; 1, 2, 3) para os testes de crescimento e de suscetibilidade aos anaeróbios.

Os organismos de teste 20 foram mantidos congelados a -80 °C.

Os isolados foram subcultivados em placas de ágar Brucella suplementado (SBA) (Teknova, Hollister, CA) para os anaeróbios.

As bactérias anaeróbias foram incubadas em uma câmara anaeróbica Bactron II a 35 °C durante 48 horas (atmosfera de 5% de hidrogênio, 25 5% de dióxido de carbono e 90% de nitrogênio).

Meio de Teste O meio utilizado para o ensaio MIC de diluição em ágar anaeróbico foi o ágar Brucella (Becton Dickinson, Sparks, MD #211086, Lote #7166673) suplementado com hemina (Strem 30 Chemicals, Lote #07. 0830), vitamina Kl (Pfaltz e Bauer, lote #9799) e sangue de carneiro lisado (Cleveland Scientific, Lote #S03582) .

Todo o meio foi preparado de acordo com as diretrizes do Instituto de Padrões Clinicos e Laboratoriais (CLSI) (1, 2, 3).

Para o ensaio de 5 microdi luição de caldo, o meio foi preparado em 105% de peso normal até o desvio da solução de fármaco de 5% (solução de fármaco 10 pL) nos painéis de microdiluição/placas de ágar finais.

O Procedimento do Ensaio de Concentração inibitória 10 Minima de Diluição de Agar (MIC) de bactérias anaeróbicas (anaeróbias) foi analisado usando um método de: diluição de ágar de referência anteriormente descrito (NCCLS.

Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria; Approved Standard - Sexta Edição. Documento NCCLS 15 M11-A6 [ISBN 1-56238517-8] . NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pensilvânia 19087-1898 EUA, 2004).

As diluições de fármaco e as placas de ágar suplementado com fármaco foram preparadas manualmente. Após a inoculação, as placas suplementadas com fármaco foram incubadas a 35 °C 20 durante 48 horas no ambiente anaeróbio de Bactron II.

A MIC foi lida de acordo com as diretrizes do CLSI (NCCLS acima referido).

Os dados de MIC do teste de susceptibilidade no qual o pó SPL-7013 foi testado nas concentrações de 1, 5, 10 ou 30 25 mg/mL são mostrados na Tabela 1 .

A Tabela 1 mostra que havia alguns patógenos anaeróbios que eram sensíveis a 30 mg/mL (B. ovatus, P. bivia) , 10 mg/mL (I. crispatus) ou 5 mg/mL (G. vaginalis) de SPL-7013.

Como pode ser observado a partir da Tabela 1, Gardnerella vaginalis, uma bactéria associada com BV, era sensivel à SPL-7013 a 5 mg/mL, enquanto que muitas das espécies de Lactobacillus que estão presentes na flora vaginal normal não foram afetadas por SPL-7013 ou foram afetadas em altas concentrações (Lactobacillus crispatus, 10 mg/mL).

Exemplo 2: Para avaliar as propriedades antimicrobianas de uma solução aquosa de SPL-7013, duas soluções aquosas foram preparadas, uma a 5% p/v e a segunda a 28% p/v.

Os testes de eficácia de conservante padrão (de acordo com a ÜSP <51> "Antimicrobial Effectiveness Test") foram realizados a fim de desafiar a capacidade de cada solução para limitar o crescimento microbiano durante um período de um mês.

Todas as amostras foram preparadas em frascos de tampa de rosca de HDPE, de 250 mL e não estéreis.

Solução a 5% p/p Uma amostra de SPL-7013 (7,5402 g) foi dissolvida em água (150 mL) com a amostra agitada para facilitar a dissolução.

A mistura resultante tinha uma concentração calculada como 5,0268% p/v.

Solução a 28% p/p Uma amostra de SPL-7013 (42,0012 g) foi dissolvida em água (150 mL) , com a amostra agitada para facilitar a dissolução.

A mistura resultante tinha uma concentração calculada como 28,0008% p/v.

Método de Teste As soluções de amostra de SPL-7013 foram usadas conforme preparadas e testadas de acordo com USP <51>, "Antimicrobial Effectiveness Test".

Neste, as soluções foram desafiadas com 5 organismos microbianos e a população de cada microrganismo é monitorizada em função do tempo.

Os microrganismos desafio foram os seguintes: 5 - Pseudomonas aeruginosa, ATCC 9027 - Staphylococcus aureus, ATCC 6538 - Candida albicans, ATCC 10231 - Aspergillus niger, ATCC 16404 - Escherichia coli, ATCC 8739 10 0 inóculo de teste é adicionado a cada amostra de modo que a concentração final após a inoculação é entre 1 x 105 e 1 x 10s UFC/mL de produto.

A concentração inicial de microrganismos viáveis em cada preparação de teste é estimada com base na concentração de microrganismos em cada 15 um do inóculo padronizado conforme determinado pelo método de contagem em placa.

Os recipientes inoculados são incubados a 22,5 ± 2,5 °C e amostrados após 14 e 28 dias.

Durante a amostragem, a concentração de cada microrganismo é determinada pelo método de contagem em placa.

Alterações 20 nas concentrações de microrganismo são expressas em termos de redução de log.

Nenhum aumento da concentração do microrganismo é definido como não mais do que um. valor de 0,5 log do que o valor anterior medido. Resultados e Discussão Tabela 2: solução a 5% p/v

Conforme mostrado na Tabela 2, a solução a 5% p/v de SPL-7013 agiu como um bacteriocida contra Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Escherichia coli durante urn periodo de 14 dias, sen subsequente aumento na concentração de microrganismos observada, A mesma solução de teste demonstrou um efeito bactericida reduzido em relação aos inóculos de Candida albicans e Aspergillus niger após 14 dias, com redução gradual na concentração do microrganismo (ou seja, diminuição > de 0,5 log de unidade) pelo ponto de tempo do dia 28. Tabela 3: solução a 28% p/v

Conforme mostrado na Tabela 3, a solução a 28% p/v de SPL-7013 agiu como um bactericida contra Pseudomonas aeruginosa,.

Staphylococcus aureus e Escherichia coli, ao longo de urn periodo de 14 dias, e também contra Candida albicans durante 28 dias.

A mesma solução teste evitou o crescimento do inóculo de Aspergillus niger ao longo da duração do teste.

As propriedades antibacterianas das duas soluções de teste (5% e 28% p/v de SPL-7013 em água), conforme 5 determinado pela USP <51> "Antimicrobial Effectiveness Test" indicam que ambas atendem aos critérios de aprovação do teste para preparações tópicas.

Exemplo 3: Um estudo clínico foi realizado, em que 66 mulheres 10 clinicamente diagnosticadas com BV foram randomizadas em quatro grupos. 1. 5 g de gel SPL-7013 a 3%, todas as noites durante 7 noites 2. 5 g de gel SPL-7013 a 1%, todas as noites durante 7 15 noites 3. 5 g de gel SPL-7013 a 0,5%, todas as noites durante 7 noites 4. 5 g de gel placebo HEC, todas as noites durante 7 noites 20 Os critérios para inclusão no estudo foram as mulheres de 18 a 45 anos de idade, com. diagnóstico clínico de BV de acordo com os critérios de Amsel e um escore de Nugent > 4.

Os indivíduos eram, de outra forma, saudáveis.

Os indivíduos foram excluídos caso tivessem infecções 25 sexualmente transmissíveis.

Cada indivíduo foi avaliado no dia 9-12, a partir do início do tratamento (Fim do Tratamento, EOT) e novamente entre os dias 21-30 (Teste de Cura, TOC).

Cada individuo foi avaliado quanto à Cura Clinica, Cura de Nugent, Cura Terapêutica e Resolução Terapêutica, em EOT e TOC.

Os resultados são mostrados na Tabela 4.

Mais resultados do ensaio em participantes adicionais 5 usando o mesmo protocolo de estudo clinico são mostrados na Tabela 5.

Os resultados na Tabela 4 mostram que uma Cura Clinica foi alcançada no EOT em 62,2% dos indivíduos tratados com gel de SPL-7013 e 27% dos indivíduos tratados com SPL-7013 no TOC.

Surpreendentemente, a formulação de gel a 1% de 5 SPL-7013 teve um desempenho significativamente melhor em EOT (83% de Cura Clinica) e TOC (55% de Cura Clinica) do que outras formulações de SPL-7013.

Os resultados na Tabela 4 mostram que o escore de Nugent foi reduzida até a normalidade no EOT em cerca de 10 25% dos indivíduos tratados com gel SPL-7013 3%, cerca de 33% dos indivíduos tratados com gel de SPL-7013 1% e 14% em indivíduos tratados com gel SPL-7013 0,5%.

O escore de Nugent foi reduzido até a normalidade no TOC em 0% dos indivíduos tratados com gel de SPL-7013 3%, 27% dos 15 indivíduos tratados com gel de SPL-7013 1% e cerca de 10% dos indivíduos tratados com gel de SPL-7013 0,5%.

Os resultados na Tabela 4 mostram que a Cura Terapêutica no EOT foi de cerca de 25% e no TOC foi de 27% dos indivíduos tratados com gel de SPL-7013 1%.

Esta é uma 20 taxa de cura maior do que a observada com outras doses de gel SPL-7013.

A Cura Terapêutica para os grupos do placebo no EOT e COT foi de 0%.

Igualmente, a Tabela 4 mostra que o gel de SPL-7013 1% teve um melhor desempenho também em relação à resolução dos 25 critérios de Amsel.

Em EOT, a resolução do corrimento vaginal foi de 100%, o teste de odor da secreção vaginal foi de 92%, o pH vaginal foi de 50% e as células de pista foi de 92% com gel de SPL-7013 1% em comparação com 82%, 64%, 55% e 64% respectivamente, para o gel de SPL-7013 3% e 30 86%, 57%, 29% e 64%, respectivamente para o gel de SPL-7013 0,5%.

Em TOC, a resolução do corrimento vaginal foi de 64%, o teste de odor da secreção vaginal foi de 64%, o pH vaginal foi de 50% e as células de pista 73% para gel de SPL-7013 1% em comparação com 20%, 20%, 10% e 20%, 5 respectivamente, para o gel de SPL-7013 3%, e 46%, 55%, 18% e 27%, respectivamente, para o gel de SPL-7013 0,5%.

Durante o estudo, nenhum participante que recebeu o gel SPL-7013 e dois participantes que receberam o gel placebo HEC experimentaram um evento adverso grave (AE) 10 durante o tratamento.

Apenas um participante experimentou um AE grave, mas isso foi antes da administração de qualquer produto do estudo.

Estes dados indicam um nivel muito baixo de AEs neste estudo. Tabela 5

Estes resultados são consistentes com os dados apresentados na Tabela 4 acima, em que a formulação de 1% tem melhor desempenho no tratamento de BV em EOT e TOC.

Exemplo 4 : Estudo clínico para Profilaxia de recorrência de BV Um estudo duplo-cego, mult. icêntrico, randomizado, controlado por placebo e de intervalo de dose para determinar a segurança e a eficácia do gel SPL-7013 administrado por via vaginal para a profilaxia da recorrência de BV é planejado.

O teste avaliará a eficácia clínica dos dois níveis de dose, escolhidos de 0,5%, 1% e 3% de gel SPL-7013 em comparação com o gel placebo, e irá determinar a eficácia microbiológica e global dos dois níveis de dose, escolhidos de 0,5%, 1% e 3% de gel SPL-7013, determinar a segurança e tolerabilidade e determinar a resolução dos sintomas percebidos pelo paciente.

Ponto de Término Primário 0 ponto de término principal será a presença ou ausência de BV no final do uso de 16 semanas do gel SPL- 7013.

Pontos de término Secundários • Presença ou ausência de BV na visita de acompanhamento de 8 semanas (Semana 24). • Tempo para a recorrência de BV do final do tratamento inicial com metronidazol. • Presença ou ausência de critérios individuais de BV, incluindo sintomas relatados pelo indivíduo, critérios de Amsel, critérios de Escore de Nugent e resultados do teste BV Blue®. • Aceitabilidade do tratamento avaliada utilizando o Questionário de Satisfação de Tratamento para a Medicação 5 (TSQM). • Incidência de infecções vaginais não BV. • Pontos de término de segurança irão incluir a incidência de AEs e as classificações normais dos sinais e sintomas de irritação genital.

População do Estudo Mulheres, com idade entre 18 e 45 anos inclusive, com um episódio atual de BV e um histórico de BV recorrente (definido como pelo menos 3 episódios documentados nos últimos 12 meses, incluindo o episódio atual).

Duração/Participante Duração total de cerca de 26 semanas compreendendo: até um período de triagem de 1 semana; um período de ensaio aberto de 7 dias de tratamento com metronidazol ("Fase Aguda do Tratamento"); um período de 16 semanas de 20 tratamento com gel SPL-7013 ou gel placebo HEC ("fase de tratamento duplo-cego") e um período de acompanhamento de 8 semanas ("fase de Acompanhamento").

Procedimentos de estudo Após a entrega do consentimento informado por escrito 25 e um período de triagem máximo de 1 semana, os participantes elegíveis receberão metronidazol durante um período de 7 dias por via oral (500 mg de BD).

Os participantes, em seguida, farão uma avaliação de sua BV no dia 4 +/-1 após a conclusão do tratamento de ensaio aberto 30 com metronidazol.

As mulheres que responderam ao tratamento (resolução definida como sem sintomas clínicos (assintomático) e não mais que 2 de 4 dos critérios de Amsel) e que atendem aos critérios de inclusão e exclusão de parte 2 serão elegíveis para ingressar na Fase de Tratamento Duplo-Cego.

As participantes elegíveis serão randomizadas em uma razão de 1:1:1 para receber dois níveis de dose, escolhidos de 0,5%, 1% e 3% de gel SPL-7013 ou gel de placebo HEC em uma dose de 5 g administrada por via vaginal à noite (antes de dormir) a cada dois dias durante 16 semanas consecutivas.

Durante a fase de tratamento duplo-cego de 16 semanas, os participantes visitarão a clínica a cada 4 semanas.

No final da semana 16, a visita de Fim do Tratamento (EOT) será realizada.

Os participantes em seguida continuarão na fase de acompanhamento, durante a qual as visitas clínica serão realizadas nas Semanas 20 e 24.

Detalhes dos procedimentos a serem realizados nas visitas de estudo são apresentados no Cronograma da Tabela 6 de Avaliações e Procedimentos de Estudo.

Os participantes do estudo que não respondem ao regime de tratamento de metronidazol de uma semana (conforme a definição do protocolo) serão designados como um "metronidazol não respondente" e serão descontinuados destas avaliações adicionais do estudo.

Aos participantes que experimentam uma recorrência de BV (conforme a definição de protocolo) durante ou após a fase de tratamento duplo-cego (ou seja, entre a visita 1 (linha de base)) será oferecidos terapia de resgate, que deve incluir apenas antibióticos oralmente administrados (por exemplo, metronidazol, clindamicina) de acordo com a prática local.

Os participantes que recebem a terapia de resgate cessarão tratamento adicional com o fármaco de estudo, irão completar os procedimentos de visita de término antecipadamente e serão descontinuados do estudo.

Parâmetros de Segurança Eventos adversos e sinais e sintomas de irritação genital observados por ou relatados para o investigador ou anotados nos cartões diário dos indivíduos serão avaliados.

Será também avaliada a incidência de infecções vaginais não BV, o uso concomitante de medicação e a conformidade com o regime de tratamento.

Parâmetros adicionais de segurança incluirão o exame de urina, exame físico e pélvico/ginecológico, o histórico médico e sexual, sinais vitais, teste de gravidez de urina e avaliação dos sintomas.

Análises estatísticas A análise preliminar será uma comparação das duas doses de gel SPL-7013 escolhidas (de 0,5% ou 1% ou 3%) vs. gel placebo HEC.

Supondo-se que a proporção de mulheres que não têm recaída pela visita da Semana 16 é entre 65-70% para o gel de SPL-7013 e de 40% para o gel HEC placebo, um tamanho de amostra de um mínimo de 54 indivíduos avaliáveis por ramo de tratamento fornecerá 80% de capacidade para detectar uma diferença de tratamento com um nível de: significância alfa de 0,05.

Ambos os cenários supõem uma taxa de falha do tratamento de metronidazol de 12% e uma taxa de abandono de participantes aos 4 meses de 12%.

Tabela 6: Cronograma das Avaliações do Estudo e Procedimentos

a: critérios de inclusão/exclusão da Parte 1 e da Parte 2 serão usados na triagem e na linha de base, respectivamente. b: um exame físico será realizado apenas a critério do investigador para avaliar uma condição estável pré-existente ou para 5 avaliar/diagnosticar uma AE emergente. c: exame de urina por imersão de tira será usado para medição de pH, glicose, proteína, sangue, bilirrubina, cetonas, úrobilinogênio, nitritos e leucócitos. Se indicado por um resultado de imersão de tira que é anormal e, na opinião do investigador, é clinicamente significativo, ensaios químicos, de microscopia, cultura e sensibilidade também podem ser realizados. d: exame de Papanicolau (Thin Prep ®) necessário se nenhum resultado recente (á 2 anos) estiver disponível. 5 e: após a triagem, amostras para o teste STI serão tomadas somente se for clinicamente indicado. f: os critérios de Amsel serão avaliados no local pelo investigador.

Claims

1. Uso de uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrímero de polilisina de 3 a 4 gerações, e apresenta uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos amino de superfície da geração mais distante do dendrímero, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um medicamento para o tratamento de vaginose bacteriana em um indivíduo, em que a macromolécula é administrada por via vaginal em uma quantidade de 40 mg a 100 mg por dia, e em que a porção contendo ácido sulfônico é selecionada de:

2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a macromolécula ser administrada em uma quantidade de 40 mg a 60 mg por dia.

3. Uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que a macromolécula reduz um sintoma de vaginose bacteriana no indivíduo selecionado de mau cheiro vaginal e/ou corrimento vaginal.

4. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que a macromolécula normaliza ou mantém um escore de Nugent <4 no indivíduo.

5. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por a macromolécula ser administrada na forma de gel com pH entre 4,5 e 5,5.

6. Uso de uma quantidade eficaz de uma macromolécula que compreende um dendrímero de polilisina de 3 a 4 gerações, e apresenta uma ou mais porções contendo ácido sulfônico ligadas a um ou mais grupos amino de superfície da geração mais distante do dendrímero, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um medicamento para profilaxia ou redução da recorrência de vaginose bacteriana em um indivíduo, em que a macromolécula será administrada por via vaginal 1 a 7 vezes por semana, e em que a porção contendo ácido sulfônico é selecionada a partir de:

7. Uso, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que a macromolécula é para ser administrada em uma quantidade de 30 mg a 200 mg por dose, ou 40 mg a 160 mg por dose.

8. Uso, de acordo com a reivindicação 6 ou 7, caracterizado pelo fato de que a macromolécula é para ser administrada 3 a 4 vezes por semana e/ou em dias alternados.

9. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 6 a 8, caracterizado pelo fato de que a macromolécula é para ser administrada nas proximidades da atividade sexual, ou durante ou após a menstruação.

10. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que a macromolécula não é inibidora contra Lactobacillus acidophilus.

11. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que a macromolécula é inibidora contra Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia e/ou B. ovatus.

12. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que a macromolécula possui atividade antibacteriana contra Gardnerella vaginalis e nenhuma atividade antibacteriana contra Lactobacil/us acidophilus.

13. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que a porção contendo ácido sulfônico é ligada ao grupo amino terminal do dendrímero por um ligante, em que o ligante é um grupo alquileno ou alquenileno, em que um ou mais átomos de carbono não adjacentes estão opcionalmente com um átomo de oxigênio ou de enxofre, ou um grupo -X1-(CH2)q-X2-, em que X1 e X2 são selecionados independentemente a partir de -NH-, -C(O)-, -O-, -S-, -C(S) e q é 0 ou um número inteiro de 1 a 10, e em que um ou mais grupos não adjacentes (CH2) podem ser substituídos com -O- ou -S-.

14. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o ligante é #-O-CH2-C(O)-*, em que # representa a ligação à porção contendo ácido sulfônico e * representa a ligação ao grupo amino terminal do dendrímero.

15. Uso de acordo com qualquer uma das reinvindicações 14, caracterizado pelo fato de que o dendrímero é:

em que R é