BR102020022556A2 - Fungal composition, process for obtaining it, use of the fungal composition, process of bleaching and detoxification of textile dyes and process of evaluating the detoxification of textile dyes - Google Patents

Abstract

A presente invenção compreende uma composição fúngica, seu processo de obtenção e sua utilização no processo de descoloração e de detoxificação de corantes reativos do tipo azo, preferencialmente Azul Reativo 235 (RB 235) e Vermelho Reativo 241 (RR 241), destinada ao setor de tratamento de efluentes, águas residuais industriais e de corantes têxteis. Dessa forma, a presente invenção pode proporcionar o tratamento eficiente de efluentes de indústrias têxteis ou de águas residuais coloridas sem apresentar toxicidade residual, não causando danos para o meio ambiente e para a saúde pública.

The present invention comprises a fungal composition, its process of obtaining and its use in the decolorization and detoxification process of reactive azo dyes, preferably Blue Reativo 235 (RB 235) and Red Reativo 241 (RR 241), intended for the sector of effluent treatment, industrial waste water and textile dyes. In this way, the present invention can provide the efficient treatment of effluents from textile industries or colored wastewater without showing residual toxicity, causing no damage to the environment and public health.

Description

COMPOSIÇÃO FÚNGICA, PROCESSO PARA SUA OBTENÇÃO, USO DA COMPOSIÇÃO FÚNGICA, PROCESSO DE DESCOLORAÇÃO E DETOXIFICAÇÃO DE CORANTES TÊXTEIS E PROCESSO DE AVALIAÇÃO DA DETOXIFICAÇÃO DE CORANTES TÊXTEISFUNGAL COMPOSITION, PROCESS FOR ITS OBTAINING, USE OF THE FUNGAL COMPOSITION, BLEACHING AND DETOXIFICATION PROCESS OF TEXTILE DYE AND EVALUATION PROCESS OF THE DETOXIFICATION OF TEXTILE DYE CAMPO DA INVENÇÃOFIELD OF THE INVENTION

[001] A presente invenção se situa no campo da Microbiologia e da Biotecnologia. A presente invenção compreende uma composição fúngica, seu processo de obtenção e seu uso no processo de descoloração e de detoxificação de corantes reativos do tipo azo, preferencialmente Azul Reativo 235 (RB 235) e Vermelho Reativo 241 (RR 241), destinada ao setor de tratamento de efluentes, águas residuais industriais e de corantes têxteis.[001] The present invention is located in the field of Microbiology and Biotechnology. The present invention comprises a fungal composition, its process of obtaining and its use in the bleaching and detoxification process of reactive azo dyes, preferably Blue Reativo 235 (RB 235) and Red Reativo 241 (RR 241), intended for the sector of effluent treatment, industrial waste water and textile dyes.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃOFUNDAMENTALS OF THE INVENTION

[002] Os efluentes têxteis são responsáveis por grande parte da poluição fluvial. Isso se deve pela presença de corantes nas águas residuais da indústria têxtil, provindos das etapas de coloração de malharias. A descarga de efluentes contendo corantes têxteis no ambiente é indesejável não só pela mudança de coloração de águas naturais, mas também devido ao fato de que muitos desses compostos são tóxicos para diversas formas de vida.[002] Textile effluents are responsible for much of the river pollution. This is due to the presence of dyes in wastewater from the textile industry, coming from the coloring stages of knitwear. Discharge of effluents containing textile dyes into the environment is undesirable not only because of the color change of natural waters, but also due to the fact that many of these compounds are toxic to various forms of life.

[003] Os corantes têxteis são moléculas sintéticas de estrutura complexa e de difícil degradação sendo consideradas moléculas recalcitrantes, ou seja, moléculas que não são encontradas na natureza. Características como estabilidade à luz e processos de lavagem, bem como fixação uniforme às fibras do substrato são atributos essenciais que foram adquiridos com o desenvolvimento dos corantes sintéticos. Tais características aumentam o interesse das indústrias assim como dos consumidores finais pelo uso de novos corantes sintéticos, já que melhoram também a qualidade dos produtos têxteis. No entanto, tais propriedades também tornam a molécula de corante menos biodegradável, sendo acumulada principalmente nos rios onde tais efluentes são despejados.[003] Textile dyes are synthetic molecules with a complex structure and difficult to degrade, being considered recalcitrant molecules, that is, molecules that are not found in nature. Features such as light stability and washing processes, as well as uniform attachment to the substrate fibers are essential attributes that were acquired with the development of synthetic dyes. Such characteristics increase the interest of industries as well as end consumers in the use of new synthetic dyes, as they also improve the quality of textile products. However, such properties also make the dye molecule less biodegradable, being mainly accumulated in the rivers where such effluents are discharged.

[004] Dentre os mais diversos grupos de corantes registrados no Colour Índex estão os corantes reativos do tipo azo. Esses corantes são caracterizados por possuírem um ou mais grupos azo, ou seja, possuem pelo menos uma ligação dupla entre nitrogênios (-N=N-). Devido as suas características favoráveis à demanda industrial, esse grupo de corantes representa cerca de 60% da utilização mundial (MIQUELANTE, 2011).[004] Among the most diverse groups of dyes registered in the Color Index are the reactive dyes of the azo type. These dyes are characterized by having one or more azo groups, that is, they have at least one double bond between nitrogens (-N=N-). Due to its characteristics favorable to industrial demand, this group of dyes represents about 60% of worldwide use (MIQUELANTE, 2011).

[005] Os tratamentos mais utilizados para as águas residuais das indústrias têxteis são tratamentos convencionais que incluem métodos físico-químicos como flotação, coagulação, filtração, adsorção, entre outros. Tais metodologias não são completamente eficientes, já que possuem problemas de descarte de um lodo colorido e ainda mais concentrado. Essas indústrias podem ainda lançar mão de tecnologias mais robustas que possuem um nível de depuração mais elevado da coloração dos efluentes, como irradiação e ozonização, porém são opções de alto custo ou que apresentam problemas de toxicidade do produto final (BANNAT et al., 1996). Logo, o desenvolvimento de uma solução sustentável e de baixo custo ainda é um problema enfrentado no tratamento de efluente dessas indústrias.[005] The most used treatments for wastewater from textile industries are conventional treatments that include physicochemical methods such as flotation, coagulation, filtration, adsorption, among others. Such methodologies are not completely efficient, since they have problems of disposing of a colored and even more concentrated sludge. These industries can still make use of more robust technologies that have a higher level of purification of effluent coloration, such as irradiation and ozonation, but these are high-cost options or that present problems of toxicity of the final product (BANNAT et al., 1996). ). Therefore, the development of a sustainable and low-cost solution is still a problem faced in the treatment of effluent from these industries.

[006] A remoção da cor é essencial para a aplicação de metodologias para descoloração de corantes têxteis em estações de tratamento de águas residuais. No entanto, outro fator muito importante a ser avaliado é a toxicidade dos subprodutos gerados após a degradação dos mesmos, o que ainda é pouco estimado no âmbito dos trabalhos na área de degradação de xenobiontes. Assim, é fundamental salientar a necessidade de se realizar testes ecotoxicológicos já que diversos estudos apontam que não há correlação direta entre descoloração e detoxificação (BERGSTEN-TORRALBA et al., 2009; SAGGIORO et al. 2015; NASCIMENTO et al. 2011).[006] Color removal is essential for the application of methodologies for bleaching textile dyes in wastewater treatment plants. However, another very important factor to be evaluated is the toxicity of the by-products generated after their degradation, which is still poorly estimated in the scope of works in the area of xenobiont degradation. Thus, it is essential to emphasize the need to carry out ecotoxicological tests since several studies indicate that there is no direct correlation between discoloration and detoxification (BERGSTEN-TORRALBA et al., 2009; SAGGIORO et al. 2015; NASCIMENTO et al. 2011).

[007] Além de causarem problemas ambientais, corantes têxteis apresentam toxicidade tanto para biota quanto para a flora local. Plantas que margeiam rios onde efluentes têxteis não tratados são lançados podem incorporar corantes em sua biomassa, os quais acabam sendo passados para outros animais através do acúmulo na teia trófica. Diversos estudos científicos verificaram que diferentes espécies de plantas que entram em contato com corantes têxteis em seu estágio inicial de vida apresentam coloração das raízes e inibição do crescimento radicular, além de adicional inibição do crescimento de outras partes essenciais da planta (KALYANI et al., 2009; KALPANA et al., 2012; BEDEKAR et al., 2014; MA et al., 2014). Dessa forma, plantas vêm sendo utilizadas como bioindicadores de toxicidade em trabalhos científicos.[007] In addition to causing environmental problems, textile dyes are toxic to both biota and local flora. Plants that border rivers where untreated textile effluents are released may incorporate dyes into their biomass, which are eventually passed on to other animals through accumulation in the food web. Several scientific studies have verified that different plant species that come into contact with textile dyes in their early stages of life exhibit root coloration and root growth inhibition, in addition to additional growth inhibition of other essential parts of the plant (KALYANI et al., 2009; KALPANA et al., 2012; BEDEKAR et al., 2014; MA et al., 2014). Thus, plants have been used as bioindicators of toxicity in scientific works.

[008] Outros bioindicadores importantes que vêm sendo utilizado como parâmetro de boa qualidade da água, não só no meio acadêmico como também por órgãos fiscalizadores no Brasil, são os microcrustáceos Daphnia pulex e Daphnia similis. Esses organismos são considerados como um modelo de toxicidade para organismos aquáticos, já que são consumidores primários na cadeia trófica aquática. Sendo assim, como forma de padronização da metodologia, existem normativas da Associação Brasileira de Normas Técnicas (ABNT) para a utilização desses organismos em testes ecotoxicológicos (ABNT, 2009). Diversos estudos acadêmicos vêm lançando mão dessa metodologia para avaliar a toxicidade de soluções após a degradação de corantes têxteis e outros xenobiontes.[008] Other important bioindicators that have been used as a parameter of good water quality, not only in academia but also by regulatory agencies in Brazil, are the microcrustaceans Daphnia pullex and Daphnia similis. These organisms are considered a model of toxicity for aquatic organisms, as they are primary consumers in the aquatic food chain. Therefore, as a way of standardizing the methodology, there are regulations from the Brazilian Association of Technical Norms (ABNT) for the use of these organisms in ecotoxicological tests (ABNT, 2009). Several academic studies have been using this methodology to evaluate the toxicity of solutions after the degradation of textile dyes and other xenobionts.

[009] O uso de microrganismos na biotecnologia está sendo cada vez mais considerado. Devido a sua natureza decompositora, os fungos são amplamente utilizados para degradação de diversos xenobiontes, inclusive corantes têxteis. Estudos atribuem essa capacidade degradadora às suas enzimas extracelulares e a sua elevada capacidade em mineralizar compostos de estrutura molecular complexa (RAGHUKUMAR, 2008; BERGSTEN-TORRALBA et al., 2009; KALPANA et al., 2012; SILVA et al., 2013; BEDEKAR, 2014; MA et al., 2014). Fungos do gênero Cladosporium sp. demonstraram ser eficazes na descoloração de diferentes corantes (VIJAYKUMAR et al., 2006; FAN et al., 2012; DINIZ et al., 2016; PATIL et al. 2016). Dessa forma, a produção de uma composição fúngica que desempenhe o papel não apenas de degradar corantes têxteis do tipo azo, mas também de detoxificá-los é de extrema relevância ambiental.[009] The use of microorganisms in biotechnology is being increasingly considered. Due to their decomposing nature, fungi are widely used for the degradation of various xenobionts, including textile dyes. Studies attribute this degrading capacity to its extracellular enzymes and its high capacity to mineralize compounds of complex molecular structure (RAGHUKUMAR, 2008; BERGSTEN-TORRALBA et al., 2009; KALPANA et al., 2012; SILVA et al., 2013; BEDEKAR. , 2014; MA et al., 2014). Fungi of the genus Cladosporium sp. demonstrated to be effective in discoloration of different dyes (VIJAYKUMAR et al., 2006; FAN et al., 2012; DINIZ et al., 2016; PATIL et al. 2016). Thus, the production of a fungal composition that plays the role not only of degrading azo-type textile dyes, but also of detoxifying them is of extreme environmental relevance.

ESTADO DA TÉCNICASTATUS OF THE TECHNIQUE

[0010] Uma busca na literatura patentária mostra documentos interessantes do ponto de vista da remoção de cor, porém poucas tecnologias vêm sendo produzidas e disponibilizadas não apenas com a preocupação de remoção da cor, mas também da toxicidade residual da degradação.[0010] A search in the patent literature shows interesting documents from the point of view of color removal, but few technologies have been produced and made available not only with the concern of color removal, but also the residual toxicity of the degradation.

[0011] O documento JPH08261A refere-se a um método para eliminar ou reduzir a coloração de águas residuais que contenham um corante azo ou semelhante, e a um agente para eliminar ou reduzir tal coloração. O referido documento reivindica o método que compreende o contato do efluente que contém o corante azo com o agente eliminador/redutor, no caso bactérias pertencente aos gêneros Bacillus, Xanthomonas e Achromobacter. O documento em si não faz nenhuma revelação sobre a composição fúngica objeto de interesse da presente invenção, muito menos sobre o processo de preparação da referida composição. Além disso, não é observada nenhuma alusão a ensaios que permitam comprovar a não toxicidade dos produtos gerados. Dessa forma, por não reivindicar microrganismos de outros gêneros, distancia-se do revelado pela presente invenção.[0011] Document JPH08261A relates to a method for eliminating or reducing staining of wastewater containing an azo dye or the like, and an agent for eliminating or reducing such staining. Said document claims the method comprising contacting the effluent containing the azo dye with the scavenger/reducing agent, in this case bacteria belonging to the genera Bacillus, Xanthomonas and Achromobacter. The document itself makes no disclosure about the fungal composition object of interest of the present invention, much less about the process of preparing said composition. In addition, there is no allusion to tests that make it possible to prove the non-toxicity of the products generated. Thus, as it does not claim microorganisms of other genera, it distances itself from what is revealed by the present invention.

[0012] O documento US6613559B1 refere-se a um processo de remoção de cor e de toxicidade em efluentes contendo água de lavagem de melaço através da utilização de uma linhagem fúngica de Flavodon flavus. Apesar de no decorrer do documento os autores indicarem que tal fungo é capaz de detoxificar águas residuais com corantes, no quadro reivindicatório é pleiteado somente o processo para descoloração e detoxificação de efluentes contendo glicose, bagaço de cana e melaço como fontes de carbono. Além disso, assim como no documento citado acima, não faz nenhuma revelação sobre a composição fúngica da presente invenção, muito menos sobre o processo de preparação da mesma.[0012] US6613559B1 relates to a process of removing color and toxicity in effluents containing molasses wash water through the use of a fungal strain of Flavodon flavus. Although throughout the document the authors indicate that this fungus is capable of detoxifying wastewater with dyes, in the claim framework only the process for bleaching and detoxifying effluents containing glucose, sugarcane bagasse and molasses as carbon sources is claimed. Furthermore, as in the document cited above, it makes no disclosure about the fungal composition of the present invention, much less about the process of preparing the same.

[0013] O documento JP2010064065 relata um método para descoloração e detoxificação de efluentes coloridos através da utilização de microrganismos. O método de tratamento compreende um processo de descoloração de corante azo realizado por uma enzima azoredutase de um microrganismo degradador de corante sob condição anaeróbica e um processo de detoxificação para tratamento das aminas aromáticas produzidas após a decomposição do corante azo sob condição aeróbia. Sendo assim, o referido documento revela além de descoloração, a detoxificação dos corantes.[0013] The document JP2010064065 reports a method for decolorizing and detoxifying colored effluents through the use of microorganisms. The treatment method comprises an azo dye decolorization process carried out by an azoreductase enzyme of a dye degrading microorganism under anaerobic condition and a detoxification process for treating the aromatic amines produced after decomposition of the azo dye under aerobic condition. Therefore, the aforementioned document reveals, in addition to discoloration, the detoxification of dyes.

[0014] No entanto, o documento em si não faz nenhuma revelação sobre a composição fúngica da presente invenção, muito menos sobre o processo de preparação da referida composição. Além disso, não é observada nenhuma alusão a ensaios que permitam comprovar a não toxicidade dos produtos gerados. Dessa forma, o revelado por este documento distancia-se do revelado pela presente invenção. Vale ressaltar que a toxicidade de águas residuais contendo corantes não se dá apenas pela presença de aminas.[0014] However, the document itself makes no disclosure about the fungal composition of the present invention, much less about the process of preparing said composition. In addition, there is no allusion to tests that make it possible to prove the non-toxicity of the products generated. Thus, what is disclosed by this document is different from what is disclosed by the present invention. It is worth mentioning that the toxicity of wastewater containing dyes is not only due to the presence of amines.

[0015] O documento JP2003274929A refere-se a um novo microrganismo capaz de tratar substâncias persistentes, incluindo compostos coloridos, e um método para tratamento de esgoto e águas residuais usando o mesmo. O microrganismo a que se refere essa invenção é um fungo da espécie Cladosporium cladosporioides. Este documento revela o método de tratamento caracterizado por cultivar o referido microrganismo em um tanque de reação, no qual é introduzido o esgoto para que haja a decomposição das substâncias persistentes, incluindo os compostos coloridos.[0015] Document JP2003274929A refers to a new microorganism capable of treating persistent substances, including colored compounds, and a method for treating sewage and wastewater using the same. The microorganism to which this invention relates is a fungus of the species Cladosporium cladosporioides. This document reveals the treatment method characterized by cultivating the aforementioned microorganism in a reaction tank, into which sewage is introduced so that persistent substances can be decomposed, including colored compounds.

[0016] O documento, por sua vez, reivindica somente o uso de microrganismos da cepa Cladosporium cladosporioides DD618 (FERM P-18791), distanciando-se do revelado pela presente invenção. Além disso, não é observada nenhuma revelação sobre a composição fúngica revelada pela presente invenção, muito menos sobre o processo de preparação da referida composição, bem como a sua utilização em processos de descoloração e de detoxificação de corantes têxteis. Não há também alusão a ensaios que permitam comprovar a não toxicidade dos produtos gerados.[0016] The document, in turn, claims only the use of microorganisms of the Cladosporium cladosporioides strain DD618 (FERM P-18791), distancing itself from the disclosed by the present invention. Furthermore, no disclosure is observed about the fungal composition disclosed by the present invention, much less about the process of preparing said composition, as well as its use in bleaching and detoxification processes of textile dyes. There is also no mention of tests to prove the non-toxicity of the products generated.

[0017] O documento “Degradation and detoxification of reactive blue 235 dye by filamentous fungi” relata o uso das cepas fúngicas 66Jm e 78GJb, identificadas como Cladosporium cladosporioides e Cladosporium sphaerospermum para a degradação do corante Azul Reativo 235 nas concentrações de 10, 25, 50 e 100 mg/L. A degradação completa do corante nas concentrações de 10, 25 e 50 mg/L foi observada para ambas as cepas após uma incubação de 5 dias. Em um concentração de 100 mg/L, a degradação completa foi observada após 7 dias.[0017] The document “Degradation and detoxification of reactive blue 235 dye by filamentous fungi” reports the use of fungal strains 66Jm and 78GJb, identified as Cladosporium cladosporioides and Cladosporium sphaerospermum for the degradation of the Reactive Blue 235 dye at concentrations of 10, 25, 50 and 100 mg/L. Complete dye degradation at concentrations of 10, 25 and 50 mg/L was observed for both strains after a 5-day incubation. At a concentration of 100 mg/L, complete degradation was observed after 7 days.

[0018] O revelado por este documento diferencia-se da presente invenção, pois apenas revela o uso das cepas fúngicas 66Jm e 78GJb para a degradação do corante Azul Reativo 235, diferentemente da presente invenção que revela uma composição fúngica contendo a estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium. A presente invenção revela um produto formado pela estirpe fúngica, um veículo aceitável agriculturalmente e/ou farmaceuticamente aceitável e um agente diluente e não simplesmente o uso em si do microrganismo como é exposto neste documento.[0018] The disclosed by this document differs from the present invention, as it only reveals the use of the fungal strains 66Jm and 78GJb for the degradation of the Reactive Blue dye 235, unlike the present invention which reveals a fungal composition containing the fungal strain 79* Gm Cladosporium. The present invention discloses a product formed by the fungal strain, an agriculturally acceptable and/or pharmaceutically acceptable carrier and a diluting agent and not simply the use of the microorganism itself as set forth herein.

[0019] O documento em si não faz nenhuma revelação sobre a composição fúngica objeto da presente invenção, muito menos sobre o processo de preparação da referida composição, o processo de descoloração e o processo de detoxificação utilizando a referida composição. Desta maneira, resta claro que o revelado por este documento é substancialmente diferente do revelado pela presente invenção, que consiste em uma composição fúngica que compreende: (1) um veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável; (2) agentes diluentes e (3) a estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp.[0019] The document itself makes no disclosure about the fungal composition object of the present invention, much less about the process of preparing said composition, the discoloration process and the detoxification process using said composition. Thus, it is clear that what is disclosed by this document is substantially different from what is disclosed by the present invention, which consists of a fungal composition comprising: (1) an agricultural and/or pharmaceutically acceptable carrier; (2) thinning agents and (3) the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp.

[0020] O documento “Decolorization of 1:2 metal complex dye Acid blue 193 by a newly isolated fungus, Cladosporium cladosporioides” revela o uso do fungo Cladosporium cladosporioides isolado a partir de uma amostra de carvão na descoloração de cinco diferentes corantes do tipo Azo (Azul Ácido 193, Preto Ácido 210, violeta cristal, Preto reativo B(S) e Preto reativo BL/LPR) em meios de cultura sólidos ou líquidos.[0020] The document “Decolorization of 1:2 metal complex dye Acid blue 193 by a newly isolated fungus, Cladosporium cladosporioides” reveals the use of the fungus Cladosporium cladosporioides isolated from a coal sample in the decolorization of five different Azo-type dyes (Acid Blue 193, Acid Black 210, Crystal Violet, Reactive Black B(S) and Reactive Black BL/LPR) in solid or liquid culture media.

[0021] O revelado por este documento diferencia-se da presente invenção, visto que apenas revela o uso do fungo Cladosporium cladosporioides na descoloração de cinco diferentes corantes do tipo Azo (Azul Ácido 193, Preto Ácido 210, violeta cristal, Preto reativo B(S) e Preto reativo BL/LPR) em meios de cultura sólidos ou líquidos. O documento em si não faz nenhuma revelação sobre a composição fúngica da presente invenção, muito menos sobre o processo de preparação da referida composição, o processo de descoloração e o processo de detoxificação utilizando a referida composição. A composição fúngica da presente invenção compreende: (1) um veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável; (2) agentes diluentes e (3) a estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp. Isto é, a composição da presente invenção é um produto formado pela estirpe fúngica + veículo aceitável + agente diluente, bem como seu processo de produção e de utilização para descoloração e detoxificação, e não simplesmente o uso em si do microrganismo como é exposto neste documento.[0021] The disclosed by this document differs from the present invention, since it only reveals the use of the fungus Cladosporium cladosporioides in the decolorization of five different Azo-type dyes (Acid Blue 193, Acid Black 210, Crystal Violet, Reactive Black B( S) and Reactive Black BL/LPR) in solid or liquid culture media. The document itself makes no disclosure about the fungal composition of the present invention, much less about the process of preparing said composition, the bleaching process and the detoxification process using said composition. The fungal composition of the present invention comprises: (1) an agriculturally and/or pharmaceutically acceptable carrier; (2) thinning agents and (3) the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp. That is, the composition of the present invention is a product formed by the fungal strain + acceptable vehicle + diluting agent, as well as its production process and use for decolorization and detoxification, and not simply the use of the microorganism itself as explained in this document. .

[0022] Uma análise do estado da técnica permite afirmar que a presente invenção tem cunho inovador e de melhoramento de processos anteriormente revelados, já que possui tanto a capacidade de degradação dos corantes têxteis quanto à capacidade de detoxificação dos mesmos, comprovada pelo uso adicional de metodologias que certificam a redução e/ou eliminação da toxicidade dos corantes.[0022] An analysis of the state of the art allows us to state that the present invention has an innovative nature and improves previously revealed processes, since it has both the ability to degrade textile dyes and the ability to detoxify them, proven by the additional use of methodologies that certify the reduction and/or elimination of dye toxicity.

SUMÁRIO DA INVENÇÃOSUMMARY OF THE INVENTION

[0023] A presente invenção compreende uma composição fúngica, seu processo de obtenção e seu uso no processo de descoloração e de detoxificação de corantes reativos do tipo azo, preferencialmente Azul Reativo 235 (RB 235) e Vermelho Reativo 241 (RR 241), destinada ao setor de tratamento de efluentes, águas residuais industriais e de corantes têxteis. A referida composição fúngica compreende: um veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável; agentes diluentes e a estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp.[0023] The present invention comprises a fungal composition, its process of obtaining and its use in the process of discoloration and detoxification of reactive azo dyes, preferably Reactive Blue 235 (RB 235) and Reactive Red 241 (RR 241), intended for to the effluent treatment sector, industrial waste water and textile dyes. Said fungal composition comprises: an agriculturally and/or pharmaceutically acceptable carrier; thinning agents and the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp.

[0024] Outro objeto da invenção é o processo de preparação da referida composição fúngica.[0024] Another object of the invention is the process of preparing said fungal composition.

[0025] É também objeto da invenção o processo de descoloração de corantes têxteis do tipo azo, preferencialmente dos corantes Azul Reativo 235 e Vermelho Reativo 241, pela composição fúngica. O referido processo compreende em um processo sob agitação, com uma concentração ideal de 100 mg/L de corante e suplementado com fonte inicial de consumo para crescimento do microrganismo. Tal processo compreende sua aplicação em águas residuais industriais que necessitem a descoloração do efluente.[0025] It is also the object of the invention the process of bleaching textile dyes of the azo type, preferably of the dyes Reactive Blue 235 and Reactive Red 241, by the fungal composition. Said process comprises a process under agitation, with an ideal concentration of 100 mg/L of dye and supplemented with an initial source of consumption for the growth of the microorganism. Such a process comprises its application in industrial wastewater that require effluent discoloration.

[0026] É ainda um objeto da invenção o processo de detoxificação de corantes têxteis do tipo azo, preferencialmente Azul Reativo 235 e/ou Vermelho Reativo 241, pela referida composição fúngica. O processo de detoxificação compreende a degradação de tais compostos em compostos menos tóxicos ou não tóxicos para plantas e organismos aquáticos.[0026] It is still an object of the invention the detoxification process of azo-type textile dyes, preferably Reactive Blue 235 and/or Reactive Red 241, by said fungal composition. The detoxification process comprises the degradation of such compounds into less toxic or non-toxic compounds for plants and aquatic organisms.

[0027] A presente invenção é descrita em detalhes suficientes para sua reprodução na seção Descrição Detalhada da Invenção a seguir.[0027] The present invention is described in sufficient detail for reproduction in the Detailed Description of the Invention section below.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURASBRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES

[0028] A Figura 1 mostra o gráfico da cinética de descoloração (em porcentagem de descoloração - %) ao longo de 10 dias do corante Azul Reativo 235 (RB 235) em diferentes concentrações pela composição fúngica. As barras de erro indicam o desvio padrão, onde n=3.[0028] Figure 1 shows the graph of the discoloration kinetics (in percentage of discoloration - %) over 10 days of the dye Blue Reativo 235 (RB 235) at different concentrations by the fungal composition. Error bars indicate standard deviation, where n=3.

[0029] A Figura 2 mostra o gráfico da cinética de descoloração (em porcentagem de descoloração - %) ao longo de 10 dias do corante Vermelho Reativo 241 (RR 241) em diferentes concentrações pela composição fúngica. As barras de erro indicam o desvio padrão, onde n=3.[0029] Figure 2 shows the graph of the discoloration kinetics (in percentage of discoloration - %) over 10 days of the dye Reactive Red 241 (RR 241) at different concentrations by fungal composition. Error bars indicate standard deviation, where n=3.

[0030] A Figura 3 mostra a classificação qualitativa de toxicidade aguda de acordo com a concentração efetiva mediana (CE50), segundo Lobo et al.(2006).[0030] Figure 3 shows the qualitative classification of acute toxicity according to the median effective concentration (EC50), according to Lobo et al. (2006).

[0031] A Figura 4 demonstra o resultado do ensaio de toxicidade aguda usando o microcrustáceo Daphnia similis para os corantes têxteis antes e depois do tratamento pela composição fúngica.[0031] Figure 4 demonstrates the result of the acute toxicity test using the microcrustacean Daphnia similis for textile dyes before and after treatment by the fungal composition.

[0032] A Figura 5 demonstra os resultados dos ensaios de fitotoxicidade para o corante Azul Reativo 235 (RB 235) antes e depois do tratamento pela composição fúngica. Foram mensuradas as taxa de germinação e o índice de velocidade de germinação para as sementes de Setaria viridis e de Brassica juncea. Valores com a mesma letra não são significativamente diferentes segundo teste de Turkey, onde p < 0,05.[0032] Figure 5 demonstrates the results of phytotoxicity tests for the dye Blue Reativo 235 (RB 235) before and after treatment by the fungal composition. Germination rates and germination speed index were measured for Setaria viridis and Brassica juncea seeds. Values with the same letter are not significantly different according to Turkey's test, where p < 0.05.

[0033] A Figura 6 demonstra os resultados dos ensaios de fitotoxicidade para o corante Vermelho Reativo 241 (RR 241) antes e depois do tratamento pela composição fúngica. Foram mensuradas as taxa de germinação e o índice de velocidade de germinação para as sementes de Setaria viridis e de Brassica juncea. Valores com a mesma letra não são significativamente diferentes segundo teste de Turkey, onde p < 0,05.[0033] Figure 6 demonstrates the results of phytotoxicity tests for the dye Reactive Red 241 (RR 241) before and after treatment by the fungal composition. Germination rates and germination speed index were measured for Setaria viridis and Brassica juncea seeds. Values with the same letter are not significantly different according to Turkey's test, where p < 0.05.

[0034] A Figura 7 demonstra a viabilidade (taxa de sobrevivência) da composição fúngica a cada 30 dias e os valores da contagem de esporos/g da composição logo após sua produção e depois de 180 dias.[0034] Figure 7 demonstrates the viability (survival rate) of the fungal composition every 30 days and the spore count values/g of the composition soon after its production and after 180 days.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃODETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

[0035] A presente invenção revela uma composição fúngica com atividade de degradar e de detoxificar corantes têxteis reativos do tipo azo. Preferencialmente, os corantes têxteis do tipo azo são Azul Reativo 235 e/ou Vermelho Reativo 241.[0035] The present invention discloses a fungal composition with the activity of degrading and detoxifying azo-type reactive textile dyes. Preferably, the azo-type textile dyes are Reactive Blue 235 and/or Reactive Red 241.

[0036] A composição fúngica da presente invenção compreende: um veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável; um agente diluente e o microrganismo da estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp.[0036] The fungal composition of the present invention comprises: an agriculturally and/or pharmaceutically acceptable carrier; a diluting agent and the microorganism of the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp.

[0037] Preferencialmente, a composição fúngica da presente invenção compreende de 30 a 90 % em massa de um veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável.[0037] Preferably, the fungal composition of the present invention comprises from 30 to 90% by weight of an agricultural and/or pharmaceutically acceptable carrier.

[0038] Preferencialmente, a composição fúngica da presente invenção compreende de 10 a 50 % em massa de um agente diluente.[0038] Preferably, the fungal composition of the present invention comprises from 10 to 50% by weight of a diluting agent.

[0039] Preferencialmente, a composição fúngica da presente invenção compreende de 0,1 a 10 % em massa do microrganismo da estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp.[0039] Preferably, the fungal composition of the present invention comprises from 0.1 to 10% by weight of the microorganism of the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp.

[0040] Preferencialmente, a referida composição é liofilizada.[0040] Preferably, said composition is lyophilized.

[0041] Preferencialmente, o agente diluente é selecionado do grupo compreendendo água destilada, água estéril ou água tratada por osmose reversa, acrescida ou não de nutrientes para a manutenção das cepas de microrganismos.[0041] Preferably, the diluting agent is selected from the group comprising distilled water, sterile water or water treated by reverse osmosis, with or without nutrients for the maintenance of the strains of microorganisms.

[0042] Preferencialmente, o microrganismo da estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp. está na forma de uma suspensão de esporos.[0042] Preferably, the microorganism of the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp. is in the form of a spore suspension.

[0043] O veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende: polissacarídeos; água; aminoácidos; óleo vegetal e/ou combinações dos mesmos.[0043] The agriculturally and/or pharmaceutically acceptable carrier of the composition comprises: polysaccharides; Water; amino acids; vegetable oil and/or combinations thereof.

[0044] Preferencialmente, o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende de 25 a 70 % em massa de polissacarídeos[0044] Preferably, the agriculturally and/or pharmaceutically acceptable carrier of the composition comprises from 25 to 70% by mass of polysaccharides

[0045] Preferencialmente, o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende de 5 a 15 % em massa de água.[0045] Preferably, the agriculturally and/or pharmaceutically acceptable vehicle of the composition comprises from 5 to 15% by weight of water.

[0046] Preferencialmente, o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende de 4 a 12 % em massa de aminoácidos.[0046] Preferably, the agriculturally and/or pharmaceutically acceptable carrier of the composition comprises from 4 to 12% by weight of amino acids.

[0047] Preferencialmente, o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende de 1 a 4 % em massa de óleo vegetal.[0047] Preferably, the agriculturally and/or pharmaceutically acceptable vehicle of the composition comprises from 1 to 4% by weight of vegetable oil.

[0048] Preferencialmente, os polissacarídeos do veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição são amilose e amilopectina.[0048] Preferably, the polysaccharides of the agricultural and/or pharmaceutically acceptable carrier of the composition are amylose and amylopectin.

[0049] Preferencialmente, os aminoácidos do veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição são lisina, treonina, metionina e triptofano.[0049] Preferably, the amino acids of the agricultural and/or pharmaceutically acceptable carrier of the composition are lysine, threonine, methionine and tryptophan.

[0050] Preferencialmente, o óleo vegetal do veículo agriculturalmente e/ou farmaceuticamente aceitável da composição é selecionado do grupo compreendendo óleo de soja, óleo de canola, óleo de girassol, óleo de mamona, óleo de algodão e/ou combinações desses.[0050] Preferably, the vegetable oil of the agriculturally and/or pharmaceutically acceptable carrier of the composition is selected from the group comprising soybean oil, canola oil, sunflower oil, castor oil, cottonseed oil and/or combinations thereof.

[0051] Em uma modalidade preferencial, o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende a combinação de: amilose, amilopectina, lisina, treonina, metionina, triptofano, água e óleo vegetal.[0051] In a preferred embodiment, the agriculturally and/or pharmaceutically acceptable vehicle of the composition comprises the combination of: amylose, amylopectin, lysine, threonine, methionine, tryptophan, water and vegetable oil.

[0052] Em uma modalidade preferencial, o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende a combinação: de 7g a 21g de amilose, de 18g a 48g de amilopectina, de 1,2g a 3,6g de lisina, de 1,2g a 3,6g de treonina, de 1,2g a 3,6g de metionina, até 1,8g de triptofano, de 7 a 9g de água e de 1 a 3g de óleo vegetal.[0052] In a preferred embodiment, the agriculturally and/or pharmaceutically acceptable vehicle of the composition comprises the combination: from 7g to 21g of amylose, from 18g to 48g of amylopectin, from 1.2g to 3.6g of lysine, of 1, 2g to 3.6g of threonine, from 1.2g to 3.6g of methionine, up to 1.8g of tryptophan, from 7 to 9g of water and from 1 to 3g of vegetable oil.

[0053] Preferencialmente, o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição está na forma sólida ou liofilizada.[0053] Preferably, the agriculturally and/or pharmaceutically acceptable carrier of the composition is in solid or lyophilized form.

[0054] O processo de preparação da composição fúngica compreende as etapas de:

• a. Esterilizar o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável através de autoclavação a 121ºC (1 atm) durante 15 minutos;
• b. Adicionar ao referido veículo o microrganismo da estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp. juntamente com o agente diluente; e
• c. liofilizar a composição.

[0054] The process of preparing the fungal composition comprises the steps of:

• The. Sterilize the agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle by autoclaving at 121°C (1 atm) for 15 minutes;
• B. Add to said vehicle the microorganism of the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp. together with the thinning agent; and
• ç. freeze-dry the composition.

[0055] Em uma concretização o processo adicional compreende: o cultivo da estirpe 79*Gm Cladosporium sp. em meio de cultura e condições adequadas.[0055] In one embodiment the additional process comprises: culturing the 79*Gm Cladosporium sp. in culture medium and appropriate conditions.

[0056] A presente invenção também revela o uso da composição fúngica para a degradação de corantes têxteis em águas residuais industriais. Preferencialmente, os corantes têxteis são do tipo azo, preferencialmente Azul Reativo 235 e Vermelho Reativo 241.[0056] The present invention also discloses the use of the fungal composition for the degradation of textile dyes in industrial wastewater. Preferably, the textile dyes are of the azo type, preferably Reactive Blue 235 and Reactive Red 241.

[0057] O processo de descoloração e de detoxificação por aplicação da composição fúngica compreende adicionar 0,1g da composição em uma solução com até 100mg/L de corantes têxteis reativos por até 10 dias.[0057] The bleaching and detoxification process by applying the fungal composition comprises adding 0.1g of the composition in a solution with up to 100mg/L of reactive textile dyes for up to 10 days.

[0058] Preferencialmente, os referidos corantes têxteis reativos são do tipo azo, preferencialmente Azul Reativo 235 e/ou Vermelho Reativo 241.[0058] Preferably, said reactive textile dyes are of the azo type, preferably Reactive Blue 235 and/or Reactive Red 241.

[0059] O processo de avaliação da detoxificação de corantes têxteis por aplicação da composição fúngica compreende adicionar a solução de corante previamente degradada pela adição de 0,1g da composição fúngica por até 10 dias em sementes de plantas e microcrustáceos.[0059] The process of evaluating the detoxification of textile dyes by applying the fungal composition comprises adding the dye solution previously degraded by the addition of 0.1g of the fungal composition for up to 10 days in plant seeds and microcrustaceans.

[0060] Preferencialmente, os referidos corantes são o Azul Reativo 235 e/ou o Vermelho Reativo 241.[0060] Preferably, said dyes are Reactive Blue 235 and/or Reactive Red 241.

[0061] Preferencialmente, as sementes de plantas são sementes das plantas Setaria viridis e Brassica juncea e o microcrustáceo Daphnia similis.[0061] Preferably, the plant seeds are seeds of the plants Setaria viridis and Brassica juncea and the microcrustacean Daphnia similis.

[0062] Em uma concretização o processo compreende a aplicação da composição em águas residuais e/ou em efluentes industriais que tenham a necessidade de descoloração dos mesmos. A aplicação da composição proporciona os processos de degradação e de detoxificação de corantes têxteis reativos, podendo ser ou não corantes do tipo azo.[0062] In one embodiment, the process comprises the application of the composition in wastewater and/or industrial effluents that need to be decolorized. The application of the composition provides the processes of degradation and detoxification of reactive textile dyes, which may or may not be azo dyes.

Definição de alguns dos termos empregadosDefinition of some of the terms used Aminoácidosamino acids

[0063] Aminoácidos são monômeros constituídos de carbono (C), hidrogénio (H), oxigénio (O) e nitrogénio (N) e por vezes enxofre (S). No presente pedido de patente deve ser entendido como, por exemplo: ácido aspártico (Asp), ácido glutâmico (Glu), alanina (Ala), arginina (Arg), asparagina (Asn), cisteína (Cys), fenilalanina (Phe), glicina (Gly), glutamina (Gln), histidina (His), isoleucina (Ile), leucina (Leu), lisina (Lys), metionina (Met), pirrolisina (Pyl), prolina (Pro), serina (Ser), selenocisteína (Sec), tirosina (Tyr), treonina (Thr), triptofano (Trp) e valina (Val).[0063] Amino acids are monomers consisting of carbon (C), hydrogen (H), oxygen (O) and nitrogen (N) and sometimes sulfur (S). In the present patent application it should be understood as, for example: aspartic acid (Asp), glutamic acid (Glu), alanine (Ala), arginine (Arg), asparagine (Asn), cysteine (Cys), phenylalanine (Phe), glycine (Gly), glutamine (Gln), histidine (His), isoleucine (Ile), leucine (Leu), lysine (Lys), methionine (Met), pyrrolysine (Pyl), proline (Pro), serine (Ser), selenocysteine (Sec), tyrosine (Tyr), threonine (Thr), tryptophan (Trp) and valine (Val).

Óleo VegetalVegetable oil

[0064] Óleo vegetal compreende em qualquer tipo de óleo que tenha origem vegetal. Exemplos não limitantes de óleo vegetal compreendem óleo de soja, óleo de canola, óleo de girassol, óleo de mamona (castor oil), óleo de algodão, dentre outros óleos vegetais que podem ser utilizados como componente de veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável.[0064] Vegetable oil comprises any type of oil that has vegetable origin. Non-limiting examples of vegetable oil include soybean oil, canola oil, sunflower oil, castor oil, cottonseed oil, among other vegetable oils that can be used as a component of an agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle.

Polissacarídeospolysaccharides

[0065] Polissacarídeos são carboidratos unidos por ligações glicosídicas. No presente pedido de patente, deve ser entendido como qualquer tipo de polissacarídeo que possa ser empregado na formulação de excipientes agriculturalmente e/ou farmaceuticamente aceitáveis. Exemplos não limitantes de polissacarídeos incluem amilose e amilopectina.[0065] Polysaccharides are carbohydrates joined by glycosidic bonds. In the present patent application, it is to be understood as any type of polysaccharide that can be employed in the formulation of agriculturally and/or pharmaceutically acceptable excipients. Non-limiting examples of polysaccharides include amylose and amylopectin.

Estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp.Fungal strain 79*Gm Cladosporium sp.

[0066] A estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp. compreende a parte não-inerte da composição, ou seja, compreende em um microrganismo (material biológico).[0066] The fungal strain 79*Gm Cladosporium sp. comprises the non-inert part of the composition, ie it comprises a microorganism (biological material).

Exemplo 1 - Preparação da composição fúngicaExample 1 - Preparation of the fungal composition 1. Materiais e métodos empregados no desenvolvimento da composição1. Materials and methods used in the development of the composition 1.1.a. Preparação da composição1.1.a. Composition preparation

[0067] Para o desenvolvimento da presente invenção foi utilizada a estirpe de fungo filamentoso 79*Gm Cladosporium sp.[0067] For the development of the present invention, the filamentous fungus strain 79*Gm Cladosporium sp.

[0068] Inicialmente a estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp. foi inoculada em Meio Ágar Batata Dextrose (BDA: 200 g de batata, 20 g de dextrose, 15 g de ágar, 1000 mL de água destilada) e incubou-se a 25°C por cinco dias.[0068] Initially the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp. was inoculated in Potato Dextrose Agar Medium (PDA: 200 g potato, 20 g dextrose, 15 g agar, 1000 mL distilled water) and incubated at 25°C for five days.

[0069] Posteriormente, foi preparada uma suspensão de células a partir do crescimento fúngico. Para isso, foram adicionados 10 mL de solução salina 0,85% nas placas e a biomassa fúngicas raspada com o auxílio de uma espátula.[0069] Subsequently, a cell suspension was prepared from the fungal growth. For this, 10 mL of 0.85% saline solution were added to the plates and the fungal biomass was scraped off with the aid of a spatula.

[0070] A suspensão foi transferida para frascos contendo o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável utilizado para a produção do inoculante. Após 7 dias incubado à 25°C, a composição preferencialmente passa por um processo de liofilização.[0070] The suspension was transferred to vials containing the agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle used for the production of the inoculant. After 7 days incubated at 25°C, the composition preferably undergoes a lyophilization process.

1.1.b. Detalhes quantitativos e qualitativos dos componentes da composição fúngica1.1.b. Quantitative and qualitative details of the components of the fungal composition

[0071] Em relação aos componentes da composição fúngica, estão indicados na Tabela 1 a seguir os dados qualitativos e quantitativos dos componentes da composição:

[0071] Regarding the components of the fungal composition, the qualitative and quantitative data of the components of the composition are indicated in Table 1 below:

1.1.c. Avaliação da permanência da viabilidade da composição fúngica em temperatura ambiente (vida de prateleira)1.1.c. Evaluation of the permanence of the viability of the fungal composition at room temperature (shelf life)

[0072] A viabilidade da composição fúngica foi avaliada a cada 30 dias através da inoculação de 0,1 g da composição em placa de Petri contendo meio BDA e incubadas a 25°C por 5 dias. A Figura 7 demonstra a viabilidade (taxa de sobrevivência) da composição fúngica a cada 30 dias e valores da contagem de esporos/g da composição logo após sua produção e depois de 180 dias.[0072] The viability of the fungal composition was evaluated every 30 days by inoculating 0.1 g of the composition in a Petri dish containing PDA medium and incubated at 25°C for 5 days. Figure 7 demonstrates the viability (survival rate) of the fungal composition every 30 days and spore count values/g of the composition soon after its production and after 180 days.

[0073] Os esporos da composição fúngica foram contados em dois tempos: logo após a preparação da composição e ao final de 180 dias. A contagem de esporos foi realizada através da observação em microscópio óptico de câmara de Neubauer contendo solução a partir de diluições seriadas do inóculo.[0073] The spores of the fungal composition were counted at two times: right after the preparation of the composition and at the end of 180 days. The spore count was performed through observation under an optical microscope in a Neubauer chamber containing a solution from serial dilutions of the inoculum.

Exemplo 2. Processo de degradação de corantes têxteis reativos do tipo azoExample 2. Degradation process of azo-type reactive textile dyes 1.1.d. Experimento para avaliação da descoloração de corantes têxteis pelo inóculo1.1.d. Experiment to evaluate the discoloration of textile dyes by the inoculum

[0074] Para avaliar a capacidade de degradação de corantes têxteis do tipo azo pela referida composição fúngica o seguinte experimento foi realizado:[0074] To evaluate the degradation capacity of azo-type textile dyes by said fungal composition the following experiment was carried out:

[0075] Foi adicionado 0,1g da composição fúngica em Erlenmeyers de 250 mL contendo 100 mL de Extrato de Malte 2% e os corante Azul Reativo 235 (RB 235) e Vermelho Reativo 241 (RR 241) na concentração final de 10, 25, 50 e 100 mg/L. Os Erlenmeyers foram mantidos a 25°C ±3 e em agitação de 150 rpm.[0075] 0.1g of the fungal composition was added in 250 mL Erlenmeyers containing 100 mL of 2% Malt Extract and the dyes Reactive Blue 235 (RB 235) and Reactive Red 241 (RR 241) at a final concentration of 10.25 , 50 and 100 mg/L. Erlenmeyers were kept at 25°C ±3 and stirring at 150 rpm.

[0076] Meios sem inóculos foram utilizados como controle abiótico da descoloração e mantidos nas mesmas condições dos meios inoculados. Todos os experimentos foram realizados em triplicata.[0076] Media without inocula were used as abiotic control of discoloration and kept under the same conditions as the inoculated media. All experiments were performed in triplicate.

[0077] Diariamente, alíquotas foram transferidas para tubos Eppendorf® e centrifugadas a 10.000 rpm por 10 minutos. O sobrenadante livre de células foi observado em espectrofotômetro e a descoloração mensurada pela diminuição da absorbância máxima de cada corante.[0077] Daily, aliquots were transferred to Eppendorf® tubes and centrifuged at 10,000 rpm for 10 minutes. The cell-free supernatant was observed in a spectrophotometer and discoloration was measured by decreasing the maximum absorbance of each dye.

[0078] Para a quantificação da descoloração, o sobrenadante livre de células foi analisado pelo método espectrofotométrico. O Meio de Malte foi utilizado como branco do aparelho. O percentual da descoloração foi calculado utilizando a seguinte fórmula:
Descoloração (%) = 100 - (A0 x 100) / At
A0 – Valor da absorbância em 0 h
At - Valor da absorbância em t h[0078] For the quantification of discoloration, the cell-free supernatant was analyzed by the spectrophotometric method. Malt Medium was used as the blank of the apparatus. The percentage of discoloration was calculated using the following formula:
Discoloration (%) = 100 - (A0 x 100) / At
A0 – Absorbance value at 0 h
At - Absorbance value in th

Exemplo 3. Processo de detoxificação de corantes têxteis reativos do tipo azoExample 3. Process of detoxification of azo-type reactive textile dyes 1.1.e. Experimento para avaliação da toxicidade aguda dos produtos de degradação utilizando o microcrustáceo Daphnia similis1.1.e. Experiment to evaluate the acute toxicity of degradation products using the microcrustacean Daphnia similis

[0079] Para avaliar a capacidade da eliminação e/ou redução dos produtos de degradação dos corantes RB 235 e RR 241 utilizando a referida composição fúngica, foram realizados ensaios com os meios de cultura após os tratamentos pela composição. A toxicidade aguda dos produtos de degradação foi testada através da utilização do microcrustáceo Daphnia similis.[0079] To assess the ability to eliminate and/or reduce the degradation products of the RB 235 and RR 241 dyes using said fungal composition, tests were carried out with the culture media after treatments by the composition. The acute toxicity of the degradation products was tested using the microcrustacean Daphnia similis.

[0080] Para os ensaios foram utilizados os meios de cultura que possuíam inicialmente a maior concentração (100 mg/L) dos corantes RB 235 e RR 241 após a degradação pela composição. Para avaliação da toxicidade inicial dos corantes, os meios de cultura antes da degradação também foram utilizados no ensaio. Os meios foram centrifugados a 10.000 rpm por 10 minutos à 4°C e filtrados em membrana de celulose com poro 0,22 μm para evitar contaminação dos ensaios.[0080] For the tests, the culture media that initially had the highest concentration (100 mg/L) of the RB 235 and RR 241 dyes after degradation by the composition were used. To evaluate the initial toxicity of the dyes, the culture media before degradation were also used in the assay. The media were centrifuged at 10,000 rpm for 10 minutes at 4°C and filtered through a cellulose membrane with a pore size of 0.22 μm to avoid contamination of the assays.

[0081] Os ensaios seguiram a Norma ABNT NBR 12713/2009. Para isso, foram utilizados 20 neonatos com menos de 24 horas de nascidos, divididos em quatro réplicas de cinco indivíduos por concentração-teste. O tempo de exposição foi de 24 horas sob temperatura constante de 21°C e ao abrigo de luz. O método utilizado foi o estático, ou seja, não houve troca do meio de exposição durante as 24 horas. Os controles foram expostos somente a água de diluição.[0081] The tests followed the ABNT NBR 12713/2009 Standard. For this, 20 neonates with less than 24 hours of birth were used, divided into four replicates of five individuals per test concentration. The exposure time was 24 hours at a constant temperature of 21°C and protected from light. The method used was static, that is, there was no change of exposure medium during the 24 hours. Controls were exposed to dilution water only.

[0082] Parâmetros como pH e oxigênio dissolvido são essenciais para a sobrevivência desses organismos. A fim de minimizar os efeitos deste parâmetro e verificar os efeitos tóxicos das amostras, o pH inicial das amostras é ajustado para a faixa ótima de sobrevivência (6,0 – 9,0).[0082] Parameters such as pH and dissolved oxygen are essential for the survival of these organisms. In order to minimize the effects of this parameter and verify the toxic effects of the samples, the initial pH of the samples is adjusted to the optimal survival range (6.0 – 9.0).

1.1.f. Experimento para avaliação da fitotoxicidade dos produtos de degradação pelo inóculo1.1.f. Experiment to evaluate the phytotoxicity of degradation products by the inoculum

[0083] Os ensaios para avaliação da fitotoxicidade dos produtos de degradação dos corantes pela composição foram realizados através da utilização de sementes de Setaria viridis (modelo para o metabolismo C4) e Brassica juncea (modelo para o metabolismo C3).[0083] The tests to evaluate the phytotoxicity of the degradation products of the dyes by the composition were carried out using seeds of Setaria viridis (model for C4 metabolism) and Brassica juncea (model for C3 metabolism).

[0084] Foram utilizados os meios que possuíam inicialmente a maior concentração (100 mg/L) dos corantes RB 235 e RR 241 após a degradação pela composição, além do controle da respectiva concentração de cada corante. Os meios pós-tratamento foram centrifugados a 10.000 rpm por 10 minutos à 4°C e filtrados em membrana de celulose com poro 0,22 μm para evitar contaminação do ensaio. As soluções com pH abaixo de 6 foram ajustadas para próximo da neutralidade (6 – 8) para evitar resultados falso-negativos por conta de um fator que não seja a toxicidade do produto.[0084] The media that initially had the highest concentration (100 mg/L) of the RB 235 and RR 241 dyes after degradation by the composition were used, in addition to controlling the respective concentration of each dye. Post-treatment media were centrifuged at 10,000 rpm for 10 minutes at 4°C and filtered through a cellulose membrane with a pore size of 0.22 μm to avoid assay contamination. Solutions with a pH below 6 were adjusted to near neutrality (6 – 8) to avoid false negative results due to a factor other than the toxicity of the product.

[0085] Os ensaios foram realizados em placa de Petri forradas com papel filtro tipo Whatman Nº 3 embebidos com 2 mL da solução a ser testada, onde foram depositadas as sementes. As placas foram incubadas em casa de vegetação à 22°C com luminosidade apenas durante 18 horas por dia. Durante 7 dias foram determinadas a taxa de germinação e o índice de velocidade da germinação (IVG). Além disso, diariamente as sementes foram regadas com as respectivas soluções-testes de acordo com a necessidade de cada placa.[0085] The tests were performed in Petri dishes lined with Whatman No. 3 filter paper soaked with 2 mL of the solution to be tested, where the seeds were deposited. The plates were incubated in a greenhouse at 22°C with light only for 18 hours a day. During 7 days, germination rate and germination speed index (IVG) were determined. In addition, the seeds were watered daily with the respective test solutions according to the needs of each plate.

[0086] Para cada solução-teste foi realizada seis réplicas com 20 sementes de cada espécie, incubadas em placas separadamente. Como controle positivo da germinação e como comparação para o experimento foi utilizado placas de Petri com papel filtro embebido em água destilada (modificado de KALPANA et al., 2012; SILVA et al., 2013).[0086] For each test solution, six replicates were performed with 20 seeds of each species, incubated in separate plates. As a positive control for germination and as a comparison for the experiment, Petri dishes with filter paper soaked in distilled water were used (modified from KALPANA et al., 2012; SILVA et al., 2013).

1.1.g. Análise estatística dos dados de ecotoxicidade1.1.g. Statistical analysis of ecotoxicity data

[0087] O resultado dos ensaios de ecotoxicidade pelos microcrustáceo Daphnia similis são apresentados na forma de concentração efetiva mediana (CE50) para 24 horas de exposição que foi estimada utilizando o teste estatístico Trimmed Spearman-Karber (HAMILTON, 1977). A CE50 expressa a concentração estimada onde 50% dos organismos não sobrevivem ou ficam imóveis.[0087] The results of ecotoxicity tests by the microcrustacean Daphnia similis are presented in the form of median effective concentration (EC50) for 24 hours of exposure, which was estimated using the Trimmed Spearman-Karber statistical test (HAMILTON, 1977). EC50 expresses the estimated concentration where 50% of organisms do not survive or remain immobile.

[0088] Nos ensaios de fitotoxicidade foram utilizados os seguintes parâmetros de comparação: Taxa de germinação, Índice de velocidade de germinação e as medidas da radícula, raiz secundário e hipocótilo. Para verificar se houve diferença significativa entre as médias dos meios após o tratamento pela composição e os corantes, foi realizado o teste estatístico Anova seguido do teste de Turkey. A homogeneidade das variâncias foi testada previamente pelo teste de Bartlett. O valor de p adotado nos testes estatísticos foram sempre p < 0,05 (ZAR, 1999).[0088] In the phytotoxicity tests the following parameters of comparison were used: germination rate, germination speed index and measures of the radicle, secondary root and hypocotyl. To verify if there was a significant difference between the means of the media after treatment by the composition and the dyes, the Anova statistical test was performed followed by the Turkey test. The homogeneity of variances was previously tested by Bartlett's test. The p value adopted in the statistical tests was always p < 0.05 (ZAR, 1999).

2. Resultados obtidos nesta concretização2. Results obtained in this implementation 2.1.a. Degradação dos corantes Azul Reativo 235 e Vermelho Reativo 241 pela composição2.1.a. Degradation of Reactive Blue 235 and Reactive Red 241 dyes by composition

[0089] A composição fúngica que compreende o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável adicionado do microrganismo 79*Gm Cladosporium sp. se mostrou eficiente na descoloração de RB 235. Após 4 dias de incubação, a composição foi capaz de degradar 100% do corante nas concentrações de 10 e 25 mg/L. Em 6 dias, 100% da concentração de 50 mg/L e 50% da concentração de 100 mg/L. Ao final de 8 dias já era observado a descoloração total do corante em todas as concentrações. Na Figura 1 é possível observar a cinética de degradação do corante RB 235 pela composição ao longo de 10 dias em todas as concentrações utilizadas.[0089] The fungal composition comprising the added agricultural and/or pharmaceutically acceptable carrier of the microorganism 79*Gm Cladosporium sp. proved to be efficient in the decolorization of RB 235. After 4 days of incubation, the composition was able to degrade 100% of the dye at concentrations of 10 and 25 mg/L. In 6 days, 100% of the 50 mg/L concentration and 50% of the 100 mg/L concentration. At the end of 8 days, the total discoloration of the dye was already observed in all concentrations. In Figure 1 it is possible to observe the kinetics of degradation of the dye RB 235 by the composition over 10 days at all concentrations used.

[0090] A composição também se mostrou bastante eficiente na degradação de RR 241, descolorindo os meios em todas as concentrações do corante. Após 4 dias de incubação, a composição foi capaz de degradar 100% do corante nas concentrações de 10, 25 e 50 mg/L e 86% na concentração de 100 mg/L. No quinto dia de incubação, todas as concentrações já tinham sido degradadas. A cinética de degradação do corante RR 241 pela composição pode ser observada na Figura 2.[0090] The composition also proved to be quite efficient in the degradation of RR 241, decolorizing the media at all concentrations of the dye. After 4 days of incubation, the composition was able to degrade 100% of the dye at concentrations of 10, 25 and 50 mg/L and 86% at a concentration of 100 mg/L. On the fifth day of incubation, all concentrations had already been degraded. The kinetics of degradation of the RR 241 dye by the composition can be seen in Figure 2.

2.1.b. Avaliação da toxicidade aguda dos corantes têxteis reativos do tipo azo e subprodutos de degradação utilizando o microcrustáceo Daphnia similis2.1.b. Assessment of acute toxicity of azo-type reactive textile dyes and degradation by-products using the microcrustacean Daphnia similis

[0091] Neste ensaio, foram testados o corante puro na concentração de 100 mg/L e os meios de cultura RB 235 100 mg/L + Malte 2% e RR 241 + Malte 2% antes e depois da degradação pela composição. A Figura 3 mostra a classificação qualitativa de toxicidade aguda de acordo com a concentração efetiva mediana (CE50), segundo Lobo et al. (2006), que foi utilizada para avaliação da toxicidade aguda dos corantes têxteis reativos do tipo azo e de seus subprodutos de degradação utilizando o microcrustáceo Daphnia similis.[0091] In this assay, the pure dye at a concentration of 100 mg/L and the culture media RB 235 100 mg/L + Malt 2% and RR 241 + Malt 2% were tested before and after degradation by the composition. Figure 3 shows the qualitative classification of acute toxicity according to the median effective concentration (EC50), according to Lobo et al. (2006), which was used to evaluate the acute toxicity of azo-type reactive textile dyes and their degradation by-products using the microcrustacean Daphnia similis.

[0092] Tanto os meios de cultura que continham RB235 quanto os que continham RR241 se mostraram tóxicos para os microcrustáceos Daphnia similis. Tais corantes apresentaram uma classificação toxicológica de soluções altamente tóxicas.[0092] Both the culture media that contained RB235 and those that contained RR241 were shown to be toxic to the microcrustaceans Daphnia similis. Such dyes showed a toxicological classification of highly toxic solutions.

[0093] A composição fúngica do referido pedido de patente foi capaz de detoxificar em 100% a solução contendo o corante RB235 produzindo compostos de degradação que se mostram pouco tóxicos para organismos aquáticos como o microcrustáceo Daphnia similis. Além disso, a composição deixou o pH da solução na faixa da neutralidade após a degradação de RB 235.[0093] The fungal composition of the aforementioned patent application was able to detoxify the solution containing the RB235 dye by 100%, producing degradation compounds that are not very toxic to aquatic organisms such as the microcrustacean Daphnia similis. In addition, the composition left the pH of the solution in the neutral range after the degradation of RB 235.

[0094] A composição fúngica também foi capaz de detoxificar 100% a solução contendo o corante RR241. Diferentemente da solução pós-degradação contendo corante RB235, a solução pós-degradação do corante RR241 teve seu pH ajustado para a faixa da neutralidade. No entanto, isso se deve ao pH inicial da solução ter sido muito baixo.[0094] The fungal composition was also able to detoxify 100% the solution containing the RR241 dye. Unlike the post-degradation solution containing RB235 dye, the post-degradation solution containing RR241 dye had its pH adjusted to the neutrality range. However, this is because the initial pH of the solution was too low.

[0095] Os resultados descritos acima estão dispostos na Figura 4, que demonstra o resultado da toxicidade aguda por Daphnia similis dos corantes têxteis antes e depois do tratamento pela composição fúngica, mostrando valores de pH das amostras, CE50 em 24 horas, a porcentagem de redução da toxicidade e a escala de toxicidade da amostra segundo Lobo et al. (2006). Os resultados comprovam a eficiência da composição na depuração de corantes têxteis em soluções concentradas.[0095] The results described above are shown in Figure 4, which demonstrates the result of acute toxicity by Daphnia similis of textile dyes before and after treatment by the fungal composition, showing pH values of the samples, EC50 in 24 hours, the percentage of reduction of toxicity and the scale of toxicity of the sample according to Lobo et al. (2006). The results prove the efficiency of the composition in the purification of textile dyes in concentrated solutions.

2.1.c. Fitotoxicidade dos corantes têxteis reativos do tipo azo e subprodutos de degradação pela composição2.1.c. Phytotoxicity of azo-type reactive textile dyes and degradation by-products by composition

[0096] A toxicidade dos meios contendo corante antes e depois do tratamento pela referida composição fúngica também foi avaliada através da fitotoxicidade. Para isso, foram realizados bioensaios com sementes de Setaria viris (S. viridis) e Brassica juncea (B. juncea) onde foram avaliados os efeitos fitotóxicos durante o processo de germinação das sementes (7 dias).[0096] The toxicity of dye-containing media before and after treatment by said fungal composition was also evaluated through phytotoxicity. For this, bioassays were carried out with Setaria viris (S. viridis) and Brassica juncea (B. juncea) seeds, where the phytotoxic effects during the seed germination process (7 days) were evaluated.

[0097] Esse ensaio é considerado uma avaliação de toxicidade aguda, porém com representantes dos produtores primários. Seus resultados são interpretados através de provas estatísticas entre as soluções testes e a germinação padrão com água. Para os ensaios de fitotoxicidade foram testados os meios antes da descoloração (Corante + Malte 2%) e os meios após a descoloração de cada corante pela composição fúngica.[0097] This test is considered an acute toxicity assessment, but with representatives of the primary producers. Its results are interpreted through statistical tests between the test solutions and the standard germination with water. For the phytotoxicity assays, the media were tested before bleaching (Dye + 2% Malt) and the media after bleaching each dye by the fungal composition.

[0098] A Figura 5 demonstra os resultados referentes à fitotoxicidade dos subprodutos de gradação do corante Azul Reativo 235 (RB 235) pela composição fúngica. Foram mensuradas as taxa de germinação e o índice de velocidade de germinação de sementes de Setaria viridis e de Brassica juncea. Os desvios padrões estão indicados logo após o valor de cada parâmetro, onde n = 6. As médias da taxa de germinação com a mesma letra não são significativamente diferentes segundo teste de Turkey, onde p < 0,05.[0098] Figure 5 demonstrates the results regarding the phytotoxicity of the by-products of gradation of the dye Blue Reativo 235 (RB 235) by the fungal composition. The germination rate and the germination speed index of Setaria viridis and Brassica juncea seeds were measured. The standard deviations are indicated right after the value of each parameter, where n = 6. The germination rate averages with the same letter are not significantly different according to Turkey's test, where p < 0.05.

[0099] A Figura 6 demonstra os resultados referentes à fitotoxicidade dos subprodutos de degradação do corante Vermelho Reativo 241 (RR 241) pela composição fúngica. Foram mensuradas as taxa de germinação e o índice de velocidade de germinação de sementes de Setaria viridis e de Brassica juncea. Os desvios padrões estão indicados logo após o valor de cada parâmetro, onde n = 6. As médias da taxa de germinação com a mesma letra não são significativamente diferentes segundo teste de Turkey, onde p < 0,05.[0099] Figure 6 demonstrates the results regarding the phytotoxicity of degradation by-products of the Reactive Red 241 dye (RR 241) by the fungal composition. The germination rate and the germination speed index of Setaria viridis and Brassica juncea seeds were measured. The standard deviations are indicated right after the value of each parameter, where n = 6. The germination rate averages with the same letter are not significantly different according to Turkey's test, where p < 0.05.

[00100] Conforme pode ser visto na Figura 5, 78,3% das sementes de Setaria viridis e 87,2% das sementes de Brassica juncea regadas durante 7 dias com água destilada germinaram. Já as sementes regadas com o corante RB 235 reduziram sua germeabilidade para 48,3% (S. viridis) e 32% (B. juncea). Segundo o teste estatístico ANOVA e o teste Turkey, essas médias são significativamente diferentes, o que indica toxicidade aguda do corante RB 235 tanto em plantas monocotilédones (S. viridis) quanto em dicotiledôneas (B. juncea).[00100] As can be seen in Figure 5, 78.3% of Setaria viridis seeds and 87.2% of Brassica juncea seeds watered for 7 days with distilled water germinated. The seeds irrigated with the dye RB 235 reduced their germinability to 48.3% (S. viridis) and 32% (B. juncea). According to the ANOVA statistical test and the Turkey test, these means are significantly different, which indicates acute toxicity of the RB 235 dye in both monocotyledonous (S. viridis) and dicotyledonous (B. juncea) plants.

[00101] Com relação aos subprodutos da degradação, as sementes de S. viridis regadas com a solução após o tratamento com a composição fúngica germinaram 66% e as de B. juncea germinaram 79,4%. A germinação das sementes de S. viridis e B. juncea regadas com os subprodutos da degradação do corante RB 235 após o tratamento com a composição não são significativamente diferentes da germinação com a água, o que indica que essa composição reduziu a fitotoxicidade do corante RB 235.[00101] Regarding the degradation by-products, the seeds of S. viridis watered with the solution after treatment with the fungal composition germinated 66% and those of B. juncea germinated 79.4%. The germination of S. viridis and B. juncea seeds irrigated with the degradation by-products of the RB 235 dye after treatment with the composition is not significantly different from the germination with water, which indicates that this composition reduced the phytotoxicity of the RB dye. 235.

[00102] O índice de velocidade de germinação (IVG) também foi medido durante 7 dias. Foi possível avaliar que as sementes de S. viridis e B. juncea regadas com o corante RB 235 tiveram a velocidade de germinação prejudicada, corroborando os dados apontados pela germeabilidade que indicam que o corante RB 235 possui toxicidade para plantas. Já as sementes regadas com soluções após tratamento pela composição fúngica, não apresentaram diferenças estatísticas significantes com relação ao IVG das sementes regadas com água e permitiram a germinação normal de ambas as sementes, não demonstrando, assim, toxicidade sub-letal. Tais informações podem ser melhor visualizadas na Figura 5.[00102] The germination speed index (GVI) was also measured for 7 days. It was possible to evaluate that the seeds of S. viridis and B. juncea irrigated with the RB 235 dye had the germination speed impaired, corroborating the data indicated by the germinability that indicate that the RB 235 dye has toxicity for plants. On the other hand, seeds irrigated with solutions after treatment by the fungal composition, did not present statistically significant differences in relation to the IVG of seeds irrigated with water and allowed normal germination of both seeds, thus not demonstrating sub-lethal toxicity. Such information can be better visualized in Figure 5.

[00103] O corante RR 241 não apresentou toxicidade aguda tanto em sementes de S. viridis, onde permitiu a germinação de 71,6% quanto em sementes de B. juncea, onde permitiu a germinação de 82,1% das sementes. Assim como o corante, a composição fúngica não produziu compostos que fossem tóxicos para ambas as sementes após a degradação do corante RR 241. 54,2 e 74,2% das sementes de S. viridis. e B. juncea, respectivamente, germinaram quando regadas com a solução tratada pela composição fúngica.[00103] The dye RR 241 did not present acute toxicity in both S. viridis seeds, where it allowed the germination of 71.6% and in B. juncea seeds, where it allowed the germination of 82.1% of the seeds. As with the dye, the fungal composition did not produce compounds that were toxic to both seeds after the degradation of the RR 241 dye. 54.2 and 74.2% of S. viridis seeds. and B. juncea, respectively, germinated when watered with the solution treated by the fungal composition.

[00104] As sementes de S. viridis regadas com o corante RR 241 não tiveram a velocidade de germinação alterada. No entanto, as sementes regadas com a solução tratada pela composição apresentaram redução na velocidade de germinação, apresentando uma média significativamente diferente da apresentada pela água. Com relação às sementes de B. juncea, nem o corante RR 241 nem a solução tratada composição fúngica apresentaram diferença na velocidade de germinação das sementes regadas com as respectivas soluções. Tais resultados estão dispostos na Figura 6.[00104] S. viridis seeds irrigated with the RR 241 dye did not have their germination speed altered. However, seeds watered with the solution treated by the composition showed a reduction in germination speed, presenting an average significantly different from that presented by water. Regarding the seeds of B. juncea, neither the dye RR 241 nor the solution treated with the fungal composition showed any difference in the germination speed of seeds irrigated with the respective solutions. Such results are displayed in Figure 6.

Claims (26)

Composição fúngica CARACTERIZADA por compreender: um veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável; um agente diluente e o microrganismo da estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp.Fungal composition CHARACTERIZED by comprising: an agriculturally and/or pharmaceutically acceptable carrier; a diluting agent and the microorganism of the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende de 30 a 90 % em massa de um veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável.Composition, according to claim 1, CHARACTERIZED in that it comprises from 30 to 90% by mass of an agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende de 10 a 50 % em massa de um agente diluente.Composition, according to claim 1, CHARACTERIZED in that it comprises from 10 to 50% by mass of a diluting agent. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende de 0,1% a 10% em massa do microrganismo da estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp.Composition, according to claim 1, CHARACTERIZED in that it comprises from 0.1% to 10% by mass of the microorganism of the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp. Composição, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que a composição fúngica é liofilizada.Composition, according to claim 1, CHARACTERIZED by the fact that the fungal composition is lyophilized. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 5, CARACTERIZADA pelo fato de que o agente diluente é selecionado do grupo contendo água destilada, água estéril ou água tratada por osmose reversa, acrescida ou não de nutrientes para a manutenção das cepas de microrganismos.Composition, according to any one of claims 1 to 5, CHARACTERIZED by the fact that the diluting agent is selected from the group containing distilled water, sterile water or water treated by reverse osmosis, with or without nutrients for the maintenance of the strains of microorganisms. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, CARACTERIZADA pelo fato de o microrganismo da estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp. está na forma de uma suspensão de esporos.Composition according to any one of claims 1 to 6, CHARACTERIZED in that the microorganism of the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp. is in the form of a spore suspension. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 7, CARACTERIZADA pelo veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável ser uma combinação de: polissacarídeos, aminoácidos, água, óleo vegetal e /ou combinações dos mesmos.Composition according to any one of claims 1 to 7, CHARACTERIZED by the agricultural and/or pharmaceutically acceptable carrier being a combination of: polysaccharides, amino acids, water, vegetable oil and/or combinations thereof. Composição, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADA pelo fato de que o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende de 25 a 70 % em massa de polissacarídeos.Composition, according to claim 8, CHARACTERIZED in that the agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle of the composition comprises from 25 to 70% by mass of polysaccharides. Composição, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADA pelo fato de que o veículo agriculturale/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende de 5 a 15 % em massa de água.Composition, according to claim 8, CHARACTERIZED in that the agriculturally and/or pharmaceutically acceptable vehicle of the composition comprises from 5 to 15% by weight of water. Composição, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADA pelo fato de que o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende de 4 a 12 % em massa de aminoácidos.Composition, according to claim 8, CHARACTERIZED in that the agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle of the composition comprises from 4 to 12% by mass of amino acids. Composição, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADA pelo fato de que o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende compreende de 1 a 4 % em massa de óleo vegetal.Composition, according to claim 8, CHARACTERIZED in that the agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle of the composition comprises from 1 to 4% by weight of vegetable oil. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 8 a 12, CARACTERIZADA pelo fato de que os polissacarídeos do veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição são amilose e amilopectina.Composition according to any one of claims 8 to 12, CHARACTERIZED in that the polysaccharides of the agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle of the composition are amylose and amylopectin. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 8 a 13, CARACTERIZADA pelo fato de que os aminoácidos do veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição são lisina treonina, metionina e triptofano.Composition according to any one of claims 8 to 13, CHARACTERIZED in that the amino acids of the agricultural and/or pharmaceutically acceptable carrier of the composition are lysine threonine, methionine and tryptophan. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 8 a 14, CARACTERIZADA pelo fato de que o óleo vegetal do veículo agriculturalmente e/ou farmaceuticamente aceitável da composição é selecionado do grupo compreendendo óleo de soja, óleo de canola, óleo de girassol, óleo de mamona, óleo de algodão e/ou combinações desses.Composition according to any one of claims 8 to 14, CHARACTERIZED in that the agriculturally and/or pharmaceutically acceptable carrier vegetable oil of the composition is selected from the group comprising soybean oil, canola oil, sunflower oil, castor oil, cottonseed oil and/or combinations thereof. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 8 a 15, CARACTERIZADA pelo veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável ser a combinação de: amilose, amilopectina, água, lisina, treonina, metionina, triptofano e óleo vegetal.Composition according to any one of claims 8 to 15, CHARACTERIZED by the agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle being the combination of: amylose, amylopectin, water, lysine, threonine, methionine, tryptophan and vegetable oil. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 8 a 16, CARACTERIZADA pelo fato de que o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição compreende a combinação: de 7g a 21g de amilose, de 18g a 48g de amilopectina, de 1,2g a 3,6g de lisina, de 1,2g a 3,6g de treonina, de 1,2g a 3,6g de metionina, de até 1,8g de triptofano, de 7 a 9g de água e de 1 a 3g de óleo vegetal.Composition according to any one of claims 8 to 16, CHARACTERIZED in that the agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle of the composition comprises the combination: from 7g to 21g of amylose, from 18g to 48g of amylopectin, from 1, 2g to 3.6g of lysine, from 1.2g to 3.6g of threonine, from 1.2g to 3.6g of methionine, up to 1.8g of tryptophan, from 7 to 9g of water and from 1 to 3g of vegetable oil. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 8 a 17, CARACTERIZADA pelo fato de que o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável da composição está na forma sólida ou liofilizada.Composition according to any one of claims 8 to 17, CHARACTERIZED in that the agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle of the composition is in solid or lyophilized form. Processo de preparação da composição fúngica conforme definida em qualquer uma das reivindicações de 1 a 18, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende as etapas de:

• a. Esterilizar o veículo agricultural e/ou farmaceuticamente aceitável através de autoclavação a 121ºC (1 atm) durante 15 minutos;
• b. Adicionar ao referido veículo o microrganismo da estirpe fúngica 79*Gm Cladosporium sp. juntamente com o agente diluente; e
• c. Liofilizar a composição.

Process of preparing the fungal composition as defined in any one of claims 1 to 18, CHARACTERIZED by the fact that it comprises the steps of:

• The. Sterilize the agricultural and/or pharmaceutically acceptable vehicle by autoclaving at 121°C (1 atm) for 15 minutes;
• B. Add to said vehicle the microorganism of the fungal strain 79*Gm Cladosporium sp. together with the thinning agent; and
• ç. Lyophilize the composition.

Uso da composição fúngica conforme definida em qualquer uma das reivindicações de 1 a 18, CARACTERIZADO por ser para a degradação e detoxificação de corantes têxteis reativos em águas residuais industriais.Use of the fungal composition as defined in any one of claims 1 to 18, CHARACTERIZED for being for the degradation and detoxification of reactive textile dyes in industrial wastewater. Uso, de acordo com a reivindicação 20, CARACTERIZADO pelo fato de que os corantes têxteis reativos podem ser corantes do tipo azo, preferencialmente, Azul Reativo 235 e Vermelho Reativo 241.Use, according to claim 20, CHARACTERIZED by the fact that the reactive textile dyes can be azo-type dyes, preferably Reactive Blue 235 and Reactive Red 241. Processo de descoloração e de detoxificação de corantes têxteis por aplicação da composição fúngica, conforme definida em qualquer uma das reivindicações de 1 a 18, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende adicionar 0,1g da composição em uma solução com até 100 mg/ L de corante têxteis reativos por até 10 dias.Process of bleaching and detoxifying textile dyes by applying the fungal composition, as defined in any one of claims 1 to 18, CHARACTERIZED by the fact that it comprises adding 0.1g of the composition in a solution with up to 100 mg/L of dye reactive textiles for up to 10 days. Processo de descoloração e de detoxificação de corantes têxteis por aplicação da composição fúngica, de acordo com a reivindicação 22, CARACTERIZADO pelo fato de que os corantes têxteis reativos são do tipo azo, preferencialmente Azul Reativo 235 e vermelho Reativo 241.Process of bleaching and detoxification of textile dyes by application of the fungal composition, according to claim 22, CHARACTERIZED by the fact that the reactive textile dyes are of the azo type, preferably Reactive Blue 235 and Reactive Red 241. Processo de avaliação da detoxificação de corantes têxteis por aplicação da composição fúngica, conforme definida em qualquer uma das reivindicações de 1 a 18, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende adicionar a solução de corante previamente degradada pela adição de 0,1g da composição fúngica por até 10 dias em sementes de plantas e microcrustáceos.Process of evaluating the detoxification of textile dyes by applying the fungal composition, as defined in any one of claims 1 to 18, CHARACTERIZED by the fact that it comprises adding the dye solution previously degraded by the addition of 0.1g of the fungal composition for up to 10 days in plant and microcrustacean seeds. Processo, de acordo com a reivindicação 24, CARACTERIZADO pelo fato de que os corantes têxteis reativos podem ser ou não do tipo azo, preferencialmente Azul Reativo 235 e vermelho Reativo 241.Process, according to claim 24, CHARACTERIZED by the fact that the reactive textile dyes may or may not be of the azo type, preferably Reactive Blue 235 and Reactive Red 241. Processo, de acordo com a reivindicação 24, CARACTERIZADO pelo fato de que as sementes de plantas são sementes das plantas Setaria viridis e Brassica juncea e os microcustáceos usados são da espécie Daphnia similis.Process, according to claim 24, CHARACTERIZED by the fact that the plant seeds are seeds of the plants Setaria viridis and Brassica juncea and the microcustaceous used are of the species Daphnia similis.

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