BE885283A - NEW BIOLOGICALLY ACTIVE PEPTIDES AND THEIR USE AS DRUGS - Google Patents

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BE885283A
BE885283A BE0/202142A BE202142A BE885283A BE 885283 A BE885283 A BE 885283A BE 0/202142 A BE0/202142 A BE 0/202142A BE 202142 A BE202142 A BE 202142A BE 885283 A BE885283 A BE 885283A
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BE
Belgium
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emi
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acid
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tyr
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BE0/202142A
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R De Castiglione
F Faoro
G Perseo
S Piani
F Santangelo
Original Assignee
Erba Farmitalia
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    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Description

       

  "Nouveaux peptides biologiquement actifs et leur emploi comme médicaments" L'invention a pour objet de nouveaux peptides biologiquement actifs, leurs sels pharmaceutiquement acceptables , leur emploi comme agents thérapeutiques.

  
Elle se rapporte plus particulièrement à des peptides ayant la formule générale suivante :

  

 <EMI ID=1.1> 


  
dans laquelle :

  
 <EMI ID=2.1> 

  
nal choisi dans le groupe composé des groupes de protection de type acyle, des groupes de protection de type

  
 <EMI ID=3.1> 

  
alkyle, des groupes de protection de type uréthane aliphatique, ou, en variante, un résidu d'un L-amino acide naturel ou un dipeptide provenant de deux L-amino acides naturels . dans lesquels le groupe amino libre peut être remplacé par l'un quelconque des groupes de protection de N-terminal cités ci-dessus ;

  
Y est un atome d'hydrogène, ou un groupe de protection du

  
groupe hydroxyle phénolique de la tyrosine choisi dans le groupe comprenant les corps suivants : tétrahydropyranyle, méthyle, tert-butyle, trityle, benzyle, 2,4-dichlorobenzyle, benzyloxycarbonyle, 2-bromobenzyloxycarbonyle, tert-butyl-oxycarbonyle, ou un acyle inférieur, avantageu-

  
 <EMI ID=4.1> 

  
benzoyle, propionyle ;

  
A est un résidu de D-amino acide avec une chaîne latérale

  
constituée par un alkyle inférieur ou un groupe thioalkyle inférieur ;

  
B est un résidu de L-amino acide neutre, de préférence choisi

  
dans le groupe composé des corps suivants: acide oc-arnino-

  
 <EMI ID=5.1> 

  
nine et la L-N-méthyl-phënylalanine;

  
C peut être présent ou absent et, quand il est présent, il

  
est constitué par un résidu d'un amino acide ou un résidu d'un di- ou tripeptide,  <EMI ID=6.1> 
- par exemple d'un élimine acide, avantageusement choisi dans le groupe composé des corps suivants : Pro, 3-hydroxyproline, 4-hydroxyproline, acide pipécolique, acide 2-azétidinecarhoxylique, acide 4-thiazolidine carboxylique, <EMI ID=7.1> 
- par exemple d'un N-méthyl amino acide, avantageusement choisi dans le groupe composé des corps suivants : Sar,

  
 <EMI ID=8.1> 

  
tous ces corps étant de configuration L ou D, à condition qu'il ne soit pas basique ou acide ,
- par exemple d'un dipeptide qui peut être avantageusement choisi parmi les dipeptides qui résultent de la condensa-

  
 <EMI ID=9.1> 

  
qui ont été définis ci-dessus, à condition que les deux amino acides ne soient pas les mêmes ;
- par exemple d'un tripeptide qui peut être avantageusement choisi parmi les tripeptides J-L-M dans lesquels J est Tyr, Trp, Phe, Phg, hexahydro-Phe, Gly, Val et Phe substitué en para, le substituant étant choisi dans le groupe composé du chlore, du brome, du fluor, des groupements amino et nitro,

  
L est Val, Leu, Ile, Gly, Ala, Nva, Sar, MePhe, MeAla, et

  
 <EMI ID=10.1> 

  
ci-dessus, M est Ser, Hse, Thr, Abu, Gly à condition que

  
J soit différent de L et que L soit différent de M.

  
Les hydroxy amino acides ne sont pas protégés

  
ou sont protégés par un groupe de protection de la fonction hydroxy. Comme groupes protecteurs convenables on peut citer: 

  
méthyle, tert-butyle, trityle, benzyle, 2,4-dichlorobenzyle,

  
 <EMI ID=11.1> 

  
R est :
- un alkyle C(l-10) linéaire ou ramifié, substitué ou non substitué, avantageusement un des suivants : méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, sec-butyle, iso-butyle, 2,2,2-trifluoroéthyle, 
- un cycloalkyle C(1-10), avantageusement choisi entre cyclohexyle et adamantyle,
- un aralkyle C(6-8), avantageusement choisi entre le phényle, le benzyle, le phényléthyle, et R' est 
- un atome d'hydrogène, 
- un alkyle C(l-lO) linéaire ou ramifié, un cycloalkyle ou <EMI ID=12.1>  <EMI ID=13.1> 
- un groupe alkényle ayant de 2 à 8 atomes de carbone, de préférence allyle,
- un groupe de type acyle linéaire, ramifié ou cyclique aliphatique ayant de 1 à 16 atomes de carbone, avantageusement choisi parmi les suivants :

   formyle, acétyle, propionyle, butyryle, lauryle, 1-adamantancarbonyle, non substitués ou substitués par hydroxy, amino, un alcoxy C(l-4) ou un atome d'halogène, un bon exemple de

  
 <EMI ID=14.1> 

  
trifluoroacétyle,
- un groupe de type acyle aromatique comme un des suivants:
benzoyle, phénylacétyle et un résidu de cinnamyle, non substitué ou substitué par un des corps suivants :
hydroxy, amino, un atome d'halogène ou alcoxy C(l-4),
- un groupe de type uréthane aliphatique linéaire, ramifié ou cyclique C(3-ll), avantageusement tel que défini ci-
-dessous pour X,
- un groupe de type uréthane aromatique avantageusement tel que défini ci-dessous pour X.  Quand X est un groupe de protection de type acyle, il est de préférence l'un des suivants : formyle, acétyle, trifluoroacétyle, propionyle, benzoyle; quand X est un groupe de protection du type uréthane aromatique, il est avantageusement un des suivants : benzyloxycarbonyle, 2,4-dichlorobenzyloxycarbonyle, 2-bromobenzyloxycarbonyle, 4-nitro- <EMI ID=15.1>  <EMI ID=16.1> 

  
est avantageusement l'un des suivants : text-butyloxycarbonyle,

  
1-méthylcyclobutyloxycarbonyle, adamantyloxycarbonyle et isobornyloxycarbonyle; quand X est un groupe de protection du'type alkyle, il est avantageusement un des suivants :
trityle, benzyle, méthyle, éthyle, isopropyle; quand X est un reste de L-amino acide naturel, il est de préférence choisi dans le groupe comprenant les suivants : Gly, Ala, Leu, Met, Lys, Arg, His, Phe, Trp, Ser, Thr; quand X est un dipeptide provenant de deux L-amino acides naturels

  
il provient de préférence de deux L-amino acides choisis

  
 <EMI ID=17.1> 

  
suivants : Arg-Arg, Arg-Lys, Lys-Arg, Lys-lys, Leu-His, His-Leu, Leu-Leu, Leu-Met, Met-Leu, Leu-Trp, Trp-Leu, Thr-Ala, Ala-Thr, Ser-Ala, Ala-Ser.

  
A est de préférence un reste de D-amino acide

  
 <EMI ID=18.1> 

  
leu, pro, ser, thr, met, met-sulfoxyde, S -éthyle-homocystéine.

  
Les lettres minuscules indiquent des restes de D-amino acides.

  
Les sels des composés répondant à la formule

  
 <EMI ID=19.1> 

  
fluorhydrique, l'acide acétique, l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, ainsi que d'autres sels pharmaceutiquement acceptables des composés de cette même formule générale (I) doivent être considérés comme entrant tous dans le cadre de l'invention.

  
La synthèse des peptides de l'invention peut être accomplie soit par les méthodes classiques en solu-

  
 <EMI ID=20.1> 

  
_/ On donnera ci-dessous des exemples des deux méthodes. La synthèse selon la méthode classique en solution consiste essen-

  
 <EMI ID=21.1> 

  
des amino acides protégés ou peptides. La condensation est effectuée de façon que les peptides obtenus possèdent la séquence désirée des restes 4-7 amino acides. Dans les amino acides et peptides qui sont condensés selon la méthode connue en soi dans la chimie des polypeptides, les groupes amino et carboxyle qui ne sont pas impliqués dans la formation de la liaison peptidique sont bloqués par un groupe de protection convenable.

  
Les fonctions hydroxyle des amino acides hydroxylës peuvent être protégées par des groupes de protection appropriés (pendant toute la durée de la synthèse ou pendant certaines opérations seulement) ou elles peuvent être laissées sans protection. Les groupes protégés sont susceptibles d'être éliminés par acidolyse, saponification ou hydrogénolyse.

  
Ppur la protection des groupes amino on peut utiliser, par exemple, les groupes de protection suivante :  benzyloxycarbonyle (Z), t-butyloxycarbonyle (Boc), trityle, formyle, trifluoroacétyle, o-nitrophénylsulphényle.

  
Pour la protection des groupes carboxyle , on peut utiliser, par exemple, les groupes de protection suivants : méthyle, éthyle, tert-butyle, benzyle,

  
 <EMI ID=22.1> 

  
Pour la protection des groupes hydroxy on peut utiliser, par exemple, les groupes de protection suivants :
acétyle, tert-butyloxycarbonyle, benzyloxycarbonyle,  2-bromo-benzyloxycarbonyle, tétra-hydropyranyle, tert-butyle, trityle, benzyle, 2,4-dichlorobenzyle, méthyle.

  
La condensation entre un groupe amino d'une molécule et un groupe carboxyle d'une autre molécule pour donner une liaison peptidique peut se faire à travers un dérivé acyle activé comme un anhydride mixte, un azide, un, ester activé, etc., ou par condensation directe entre un groupe amino libre et un groupe carboxyle libre, en présence d'un agent de condensation comme la dicyclo-hexyl-carbodimide,

  
 <EMI ID=23.1>  

  
comme les suivants : N-hydroxysuccinimide, 1-hydroxybenzotriazole.

  
La condensation peut s'effectuer dans un solvant tel que l'un des suivants : diméthylformamide, pyridine, acëtonitrile, tétrahydrofuranne, etc.

  
La température de réaction peut s'étendre entre
-30[deg.]C et la température ambiante.

  
La durée de la réaction va généralement de

  
1 heure à 120 heures. 

  
Le schéma de la synthèse, les groupes de protection, les agents de condensation, doivent être tous choisis de manière à éviter le risque de la racémisation.

  
Les réactions de dé-protection sont exécutées conformément à des méthodes connues en soi dans la chimie des polypeptides.

  
Les peptides dans lesquels W est OR sont préparés, par exemple, à partir d'amino acide à C-terminal estérifié par un alcool approprié. Les peptides dans lesquels W=OH peuvent être préparés, par exemple, au moyen d'une hydrolyse

  
 <EMI ID=24.1> 

  
Les peptides dans lesquels W=NH2, NHR et NR2 peuvent être préparés au moyen d'une ammonolyse des esters correspondants.

  
Dans la méthode en phase solide on utilise un support polymère. Le polymère est de préférence un copolymère de styrène avec 1 à 2 % en poids de divinylbenzêne comme agent de réticulation qui fait que le polymère de polystyrène devient complètement insoluble dans la plupart des solvants organiques.

  
 <EMI ID=25.1> 

  
C-terminal du peptide, par fixation de l'amino acide nécessaire à une résine chlorométhylée, une résine hydroxyméthyle, une résine benzhydrylamine.

  
Les groupes de protection du groupe amino et de la chaîne latérale sont ceux décrits à propos de la synthèse classique en solution.

  
Pendant la préparation des composés de l'inven-

  
 <EMI ID=26.1> 

  
résine chlorométhylée à l'aide, par exemple, d'un catalyseur

  
il de bicarbonate de césium ou à un groupe hydroxymêthyle ou une résine benzhydrylamine à l'aide d'un agent de condensation comme la dicyclo-hexylcarbodiimide.

  
Après le couplage initial, le groupe protégeant le groupe amino est éliminé par un choix de réactifs comprenant des solutions d'acide trifluoroacétique ou d'acide chlorhydrique dans des solvants organiques à la température ambiante. Après élimination de ce groupe protégeant le groupe amino, les amino acides protégés restants sont couplés opération par opérations dans l'ordre désiré jusqu'à obtention du peptide voulu.

  
Chaque amino acide protégé est, en général, mis à réagir dans un excès au coefficient 3 d'un activateur approprié à groupe carboxyle comme le dicyclo-hexylcarbodiimide en solution, par exemple dans des mélanges chlorure de méthylène- <EMI ID=27.1> 

  
Quand la séquence désirée de l'amino acide a été

  
 <EMI ID=28.1> 

  
de support par un traitement à l'aide d'un réactif comme l'acide fluorhydrique, qui non seulement sépare les peptides de la résine mais, aussi, sépare la plupart des groupes de protection restants des chaînes latérales. Quand on utilise une résine chlorométhylée ou hydroxyméthylée, le traitement

  
à l'acide fluorhydrique se traduit par la formation du peptide acide libre (W = OH). Quand on utilise une résine benzhydrylamine, le traitement à l'acide fluorhydrique conduit directement au peptide amide libre (W=NH2). En variante, quand on se sert de la résine chlorométhylée ou hydroxyméthylée, le peptide à chaîne latérale protégée peut être détaché par le traitement de la résine supportant le peptide à l'aide d'ammoniac ou d'un alkyle ou d'une dialkylamine donnant l'amide désiré à chaîne latérale protégée, une alkylamide ou une dialkylamide (W = NH2, NHR, NR2). La protection de la chaîne latérale peut être éliminée par l'une quelconque des méthodes connues dans ce domaine.

  
Pour préparer les esters selon l'invention (W=OR), on se sert des résines utilisées pour préparer l'acide (W=OH) et on sépare le peptide à chaîne latérale protégée à l'aide d'une base et de l'alcool approprié. La protection de la

  
_ chaîne latérale est éliminée ensuite de la manière habituelle.

  
En variante, les peptides acides et amides peuvent être obtenus à partir des esters par saponification ou ammonolyse.

  
Les dérives hydrazido ou hydrazido substitués, conformes à l'invention, sont préparés par condensation du peptide à N-protégé ou d'un amino acide avec une hydrazine convenablement substituée, comme par exemple : benzylcarbazate, t-butylcarbazate, adamantylscarbazate, phénylhydrazine ou adamantylhydrazine, ou par réaction du peptide à N-protégé ou de l'hydrazide de l'amino acide avec un agent convenable d'alkylation comme un chlorure d'alkyle ou avec un agent

  
 <EMI ID=29.1> 

  
le t-butylchloroformate, le fluoroformate d'adamantyle.

  
Les symboles utilisés ici sont ceux qui sont communément employés dans la chimie des peptides. Dans les exemples qui vont suivre, les résidus de D-amino acide sont désignés par des lettres minuscules, par exemple: ala =D-Ala.

  
Les valeurs de Rf ont été déterminées sur des

  
 <EMI ID=30.1> 

  
une épaisseur de couche de 0,25 mm, la longueur de la plaque étant de 20 cm, à l'aide des milieux de développement suivants :

  
Milieu A : benzène-acétate d'éthyle-acide acétique-eau

  
(10:10:2:1) (phase supérieure)

  
Milieu B : benzène-acétate d'éthyle-acide acétique-eau

  
(100:100:40:15) (phase supérieure)

  
Milieu C : alcool n-butylique-acide acétique-eau

  
(4:1:1)

  
Milieu D : chloroforme-alcool méthylique - hydroxyde

  
d'ammonium à 32% (65:45:20)

  
Milieu E : chloroforme-alcool méthylique (8:2).

  
Les analyses en chromatographie sur couche mince ont été effectuées selon les conditions normalisées de la déposante. Des valeurs de Rf peuvent changer par conséquent, en particulier à des températures différentes. Les points de fusion ont été déterminés par la méthode à capillaire ouvert et ne sont pas corrigés. La plupart des dérivés se ramollissent

  
i et se décomposent (dec.) avant fusion. Les solvants utilisés pour la cristallisation, la précipitation ou le broyage sont indiqués entre crochets.

  
L'électrophorèse à haute tension sur papier a été

  
 <EMI ID=31.1> 

  
 <EMI ID=32.1> 

  
 <EMI ID=33.1> 
-eau 123:100:777). Les mobilités électrophorétiques (E 1,2) sont données par rapport à celles de l'acide glutamique.

  
Les composés de formule générale (I) ont montré des activités pharmacologiques intéressantes dans des essais effectués sur des aninaux de laboratoire. Plus particulièrement, les composés de formule générale (I) ont montré une activité sur le système nerveux central cornue analgésiques, antipsychotiques et agents utilisables en neuroendocrinologie.

  
Cette activité analgésique a été évaluée sur la souris par l'essai du pincement de queue, comme décrit par

  
 <EMI ID=34.1> 

  
Les substances essayées ont été administrées par voie intraveineuse, sous-cutanée, intrapéritonéale ou orale. Quand ils ont été administrés par voie intraveineuse ou sous-cutanée, les produits essayés ont montré un effet analgésique à des doses allant, en général, de 0,2 à 50 mg /kg.

  
Les composés de formule générale (I) montrent des affinités réceptrices vis-à-vis des médicaments d'analgésie centrale quand ils sont essayés in vitro sur le cerveau du rat conformément au processus décrit par PERT and SNYDER dans Molec.Pharmacol., 10, 878, 1974. D'après ces propriétés, les composés de formule générale (I) peuvent trouver une application thérapeutique pour le traitement des douleurs.

  
Les composés de formule générale (I) présentent aussi une activité sur le système nerveux central avec les propriétés caractéristiques des médicaments antipsychotiques, comme l'ont montré des essais effectués sur des rats selon le processus décrit par JANSSEN, JAGENEAU and SCHELLEKENS dans Psychopharmacologia (Berl.), 1, 389. 1960. Les doses actives sont généralement comprises entre 0,2 et 60 mg/kg. En raison de cette activité, les composés de formule générale

  
9<1> (I) peuvent trouver une application thérapeutique comme médicaments antipsychntigues.

  
Les composés de formule générale (I) stimulent, entre autre, la libération de l'hormone de croissance et de la prolactine comme l'ont montré des épreuves de radio-immunisation chez le rat, qui ont été effectuées conformément au processus décrit par NISWENDER, CHEN, MIDGLEY, METTES, ELLIS, Proc.Soc.Exp.Biol.Med., 130, 793, 1968. Les doses actives sont généralement comprises entre 0,01 et 10 mg/kg. En raison de cette activité, les composés de formule générale (I) peuvent trouver une application thérapeutique pour la stimulation de la libération de l'hormone de croissance et

  
 <EMI ID=35.1> 

  
Par conséquent, l'usage en tant que médicaments des composés de formule générale (I) est également compris dans le cadre de l'invention. Aux fins thérapeutiques, les composés de formule générale (I) et leurs sels sont administrés avec des véhicules ou des diluants classiques pharmaceutiquement acceptables.

  
Les composés préférés réalisés conformément à l'invention sont les suivants :

  
r-.i 
 <EMI ID=36.1> 
 
 <EMI ID=37.1> 
 
 <EMI ID=38.1> 
 
 <EMI ID=39.1> 
 J-3

  
dans lesquels :

  
Me = CH3

  
Et = CH2CH3

  
Z = benzyloxycarbonyle

  
Lrl = lauryle

  
Bnl = benzoyle

  
 <EMI ID=40.1> 

  
Ad = adamantyle

  
 <EMI ID=41.1> 

  
MePhe = N-néthylphénylalanine

  
Ppa = acide pipécolique

  
Aze = acide 2-azétidine carboxylique

  
Tia = acide 4-tiazolidine carboxylique

  

 <EMI ID=42.1> 


  
Phe(N02) = p-nitro-phénylalanine

  
 <EMI ID=43.1> 

  
Tyr(Bzl) = tyrosine O-benzyl-éther

  
Ser(Bzl) = serine 0-benzyl-éther

  
Cha = hexahydrophénylalanine

  
Phg = phénylglycine

  
Phe(F) = p-fluorophénylalanine

  
&#65533;Ala = &#65533;-alanine

  
allô Hyp = 4-allohydroxyproline

  
3Hyp = soit 3-hydroxyproline, soit 3-allohydroxyproline Nva = valine normale

  
 <EMI ID=44.1> 

  
On donnera maintenant, uniquement à titre d'illustration et sans aucune intention limitative, la description de la préparation de plusieurs composés de l'invention.

Exemple 1

  
Préparation de H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2.CF3 COOH A une solution de 1 g (4,65 mmoles) de Boc-Pro-OH dans 10 ml de tétrahydrofuranne anhydre, on a ajouté successivement à une température de -12[deg.]C 0,52 ml (4,65 mmoles)

  
de N-méthyl-morpholine et 0,45 ml (4,65 mmoles) de chloroformate d'éthyle. Après agitation à cette température pendant 2 minutes, on a ajouté une solution froide de 0,48 g (4,65

  
 <EMI ID=45.1> 

  
mélange en réaction à -10[deg.]C pendant 3 heures et à 20[deg.]C pendant 1 heure, puis on a filtré pour séparer les sels et on a soumis à évaporation sous vide. On a repris le résidu

  
avec du tétrahydrofuranne, on a filtré et on a fait évaporer

  
 <EMI ID=46.1> 

  
 <EMI ID=47.1> 

  
 <EMI ID=48.1> 

  
 <EMI ID=49.1> 

  
 <EMI ID=50.1> 

  
vide la solution, on l'a diluée avec du méthanol et on l'a soumise à nouveau à évaporation sous vide. On a isolé le produit (II) à partir du milieu diéthyléther-éther de pétrole;

  
 <EMI ID=51.1> 

  
Opération 3. Boc-Tyr (Bzl)-Pro-Ser-NH2 (III)

  
On a refroidi à 0[deg.]C une solution de 1 g (3,2 mmoles) de H-Pro-Ser-NH2.CF3COOH (II) dans 35 ml de diméthylformamide puis on a ajouté 0,36 ml (3,2 mmoles) de N-méthyl-morpholine suivis de 1,2 g (3,2 mmoles) de Boc-Tyr
(Bzl)-OH, de 0,43 g (3,2 mmoles) de 1-hydroxybenzotriazole, et de 0,73 g (3,52 mmoles) de dicyclohexylcarbodiimide. On a agité le mélange en réaction pendant 1 heure à 0[deg.]C puis

  
à la température de la pièce pendant une nuit, ensuite on l'a filtré et on l'a soumis à évaporation sous vide. On a fait dissoudre le résidu dans de l'acétate d'éthyle, on a lavé la solution successivement avec des solutions saturées en NaCl d'acide citrique 1 M, de NaHC03 1 M et d'eau. On a

  
n/  <EMI ID=52.1> 

  
éliminé le solvant sous vide. On a obtenu le produit (III) par cristallisation à partir du milieu acétate d'éthyle -
-éther de pétrole ; poids 1,4 g, point de fusion 115[deg.]C ;

  
 <EMI ID=53.1> 

(IV)

  
En opérant comme à l'opération 2, à partir de 1 g (1,8 mmoles) de Boc-Tyr (Bzl)-Pro-Ser-NH2 (III) on

  
 <EMI ID=54.1> 

Opération 5. Boc-Phe-Gly-NH-NH-Z (V)

  
On a ajouté successivement à -12[deg.]C 0,42 ml
(3,8 mmoles) de N-méthylmorpholine et 0,3 ml (3,8 mmoles) de chloroformate d'éthyle à une solution de 1 g (3,8 mmoles) de Boc-Phe-OH dans 10 ml de tétrahydrofuranne anhydre. Après agitation à cette température pendant 2 minutes, on a ajouté une solution froide de 0,95 g

  
 <EMI ID=55.1> 

  
J.Amer.Chem.Soc. 94, 6171, 1972) et 0,4 ml (3,7 mmoles)

  
de N-méthylmorpholine dans 15 ml de diméthylformamide.

  
On a agité le mélange en réaction à -10[deg.]C pendant 3 heures et à 20[deg.]C pendant 1 heure, puis on a filtre pour séparer les sels et on l'a soumis à évaporation sous vide. On a fait dissoudre le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on l'a lavé plusieurs fois successivement avec des solutions saturées en NaCl d'acide citrique 1 M, de NaHCO- 1 M et d'eau. On a fait sécher la couche organique sur Na2S04 anhydre et on a éliminé le solvant sous vide. On a récupéré le produit (V) (1,4 g) à partir du milieu méthanol- <EMI ID=56.1> 

  
On a traité pendant 30 minutes à la température ambiante 1 g (2,1 mmoles) de Boc-Phe-Gly-NH-NH-Z (V) avec
10 ml d'une solution 1,3 N d'acide chlorhydrique dans de l'acide acétique glacial. L'élimination du solvant sous

  
a vide à 30[deg.]C et le broyage du résidu avec de l'éther diéthylique a donné 0,89 g du produit (VI); point de fusion 178[deg.]C;

  
 <EMI ID=57.1> 

  
En partant de 1 g (5,3 mmoles) de Boc-ala-OH et de 2,09 g (5,1 mmoles) de H-Phe-Gly-NH-NH-Z.HCl (VI) , et en

  
procédant comme à l'opération 5, on a obtenu le composé
(VII) (2,5 g) à partir du milieu méthanol-éther diiso-

  
 <EMI ID=58.1> 

  
Opération 9. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (IX) En partant de 1 g (3,5 mmoles) de Boc-Tyr-OH et

  
 <EMI ID=59.1> 

  
et en procédant comme à l'opération 5, on a obtenu 2,24 g du produit (IX) (cristallisation à partir du milieu méthanol-éther diisopropylique); point de fusion 148[deg.]C;

  
 <EMI ID=60.1> 

  
Opération 10. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (X) On a hydrogéné à la température ambiante en présence de 0,27 g d'un catalyseur 10% Pd/C une quantité de 1 g (1,4 mmoles) de Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (IX) dans 10 ml de méthanol. On a éliminé le catalyseur par filtration et on a concentré la solution sous vide. Par dilution avec de l'acétate d'éthyle on a obtenu 0,64 g du

  
 <EMI ID=61.1> 

  
(c=l, MeOH) ; RfB = 0,34.

  
Opération 11. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr

  
 <EMI ID=62.1> 

  
Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (X) dans 20 ml de diméthylformamide anhydre, on a ajouté successivement à une température de -30[deg.]C 2,18 ml (8,75 mmoles) d'acide chlorhydrique 4 N dans du tétrahydrofuranne anhydre et 0,45 ml (3,85 mmole&#65533; de nitrite de n-butyle. Après agitation à cette température pendant 30 minutes, on a ajouté 1 ml (8,75 mmoles) de

  
 <EMI ID=63.1> 
-9 [deg.]C pendant trois jours puis on a filtré pour éliminer les sels, on a éliminé le solvant sous vide et on a fait précipiter le produit à partir du milieu méthanol-acétate d'éthyl-éther diéthylique. Le produit brut obtenu a été purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice
(Merck) , 70-230 niesh, (0,.197 à 0,066 mm), en éluant avec le mélange acétate d'éthyl-méthanol (8:2), on a obtenu 2 g du composé (XI) à partir du milieu méthanol- <EMI ID=64.1> 

  
Opération 12. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-
-Ser-NH&#65533; (XII)

  
On a hydrogéné à 35[deg.]C en présence d'un catalyseur,0,30 g de 10% Pd/C,une quantité de 1,'3 g (1,3 mmoles) de Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr (Bzl)-Pro-Ser-NH2 (XI) en solution dans 20 ml de méthanol. On a éliminé le catalyseur par filtration et on a concentré la solution sous vide. Par dilution avec de l'éther diéthylique, on a obtenu 1,1 g

  
 <EMI ID=65.1>  l'aide de 10 ml d'acide trifluoroacétique. On a éliminé le solvant sous vide et on a broyé le résidu avec de l'éther diéthylique, ce qui a donné 0,90 g du composé

  
 <EMI ID=66.1>  

Exemple 2

  
 <EMI ID=67.1> 

  
mide anhydre et on a refroidi à -30[deg.]C. On a ajouté successivement 2 ml (12 mmoles) d'acide chlorhydrique 6 N dans du tétrahydrofuranne anhydre ,et 0,63 ml (5,28 mmoles) de nitrite de n-butyle et on a agité le mélange en réaction pendant 30 minutes à -30[deg.]C. On a ajouté 1,34 ml (12 mmoles) de N-méthyl-morpholine à -40[deg.]C, suivis d'une solution

  
 <EMI ID=68.1> 

  
(K.Blau and S.G. Waley, Biochem.J., 57, 538, 1954) et 0,456 ml (4 mmoles) de N-méthyl-morpholine dans 50 ml de diméthylformamide. On a laissé le mélange réagir pendant 7 jours à -10[deg.]C, puis on l'a concentré jusqu'à un faible volume, on a filtré pour éliminer les sels et on a fait précipiter le produit par dilution avec du chloroforme. Par cristallisation à partir du milieu alcool méthylique-
-chloroforme, on a obtenu 2 g du composé (XIV); point de

  
 <EMI ID=69.1> 

(XV)

  
On a fait réagir 1 g (1,4 mmoles) de Boc-Tyr-
-ala-Phe-Gly-Tyr-NH2 (XIV) avec 12 ml d'acide trifluoro- <EMI ID=70.1> 

  
isopropylique-êther diisopropylique, on a obtenu 0,94 g du

  
 <EMI ID=71.1> 

  
Synthèse en phase solide. La synthèse sur un support polymère peut être effectuée, par exemple, selon l'un quelconque des procédés suivants :

  
 <EMI ID=72.1> 

  
De la résine polystyrène chlorométhylée a été  <EMI ID=73.1> 

  
les indications de Gisin, Helv. Chim.Acta, 56, 1476 (1973).

  
L'ester de polystyrène a été traité conformément aux opérations portées sur le tableau A qui suit pour l'incorpo-

  
 <EMI ID=74.1> 

  
la résine indiquée en titre. ' 

  
Tableau A

  
 <EMI ID=75.1> 

  
2. Traitement avec TFA-CH2Cl2 (1:1) deux fois

  
pendant 1 minute ;

  
 <EMI ID=76.1> 

  
5. Traitement avec 10% TEA dans CH2C12 deux fois

  
pendant 1 minute ;

  
 <EMI ID=77.1> 

  
7. Lavage avec CH2C12 x 3 ; 

  
8. Lavage avec DMF x 3. ;

  
9. Lavage avec CH2C12 x 3 ;

  
10. Adjonction de 2 ou 3 équivalents de l'anhydride symétrique du dérivé de l'amine acide correspondant, préparé comme décrit par Hagenmayer and Frank, Hoppe-
-Seyler's Z.Physiol.Chem., 353, 1973 (1972), en solution dans CH2C12. Durée de la réaction 1 à 2 heures.

  
 <EMI ID=78.1> 

  
12. Lavage avec de l'alcool isopropylique x 3 ;

  
13. Lavage avec CH2C12 x 3 ; 

  
 <EMI ID=79.1> 

  
En cas de réaction incomplète répétition du processus 4 à 14 comme ci-dessus.

  
Les abréviations utilisées pour désigner les solvants et les réactifs mentionnés sur le tableau A sont les suivantes :

  
 <EMI ID=80.1>  

  
 <EMI ID=81.1> 

  
Après adjonction du. dernier dérivé d'amino acide selon le tableau A (procédé A), lavage de la résine 3 fois à l'aide d'acide acétique, répétition des opérations 1 à 9

  
et lavage 4 fois à l'aide d'alcool isopropylique.

  
 <EMI ID=82.1> 

  
benzhydrylamine par l'intermédiaire de la dicyclohexylcarbodiimide, comme décrit par Pietta et al, J.Org.Chem.,
39, 44 (1974). Les groupes amino qui n'ont pas réagi ont été acétylés avec le mélange anhydride acétique/pyridine/ /CH2C12 (2:1:10). Le polystyrène amide a été traité conformément au tableau A (procédé A) pour l'incorporation des autres résidus d'amino.acide afin de parvenir à la résine indiquée en titre.

  
 <EMI ID=83.1> 

  
On a opéré conformément au procédé B en partant de la résine peptide du procédé C.

Exemple 3

  
 <EMI ID=84.1> 

  
1 g de résine peptide du procédé B ayant la séquence voulue des résidus d'amino acide (introduite sous forme de Boc-Gly-OH, Boc-Phe-OH, Boc-ala-OH.et Boc-Tyr-OH, dans cet ordre) a été mis en suspension dans 25 ml d'alcool méthylique et 2 ml de triéthylamine pendant 3 jours à la température ambiante. On a éliminé la résine par filtration,

  
 <EMI ID=85.1> 

  
rer le solvant sous vide. Par cristallisation du résidu à partir d'alcool isopropylique, on a obtenu 0,16 g du composé indiqué en titre (XVI), point de fusion 216[deg.]-218[deg.]C;

  
 <EMI ID=86.1> 

  
acides : Gly 1,04; ala 1,06; Tyr 0,99; Phe 1.

Exemple 4

  
 <EMI ID=87.1> 

  
d (i) 1 g de la même résine peptide que celle de l'exemple 3 a été traité pendant 45 minutes à 0[deg.]C à l'aide de
10 ml de HF anhydre (distillé sur CoF3) contenant 1 ml d'anisole. On a fait évaporer l'acide fluorhydrique sous une pression réduite et on a éliminé l'anisole par lavage à l'éther diisopropylique. Le peptide brut a été extrait de la résine à l'aide d'acide acétique à 50%, purifié par chromatographie sur une colonne de Sephadex G-15 par élution à l'aide d'acide acétique 0,5 N et finalement transformé en

  
 <EMI ID=88.1> 

  
(ii) En variante, on a mis en suspension 0,10 g de l'ester du peptide (XVI) dans 5 ml d'eau et 3 ml d'alcool méthylique et on a saponifié à l'aide de 0,32 ml NaOH 1 N pendant 90 minutes à la température ambiante. On a ajouté 0,32 ml HC1 1 N et on a concentré la solution sous vide. En diluant à l'aide d'éthanol à 95% on a obtenu 0,08 g du composé indiqué en titre (XVII); point de fusion 250[deg.]-252[deg.]C

  
 <EMI ID=89.1> 

  
amino acides : Gly 1,04; ala 0,94; Tyr 1 ; Phe 1,05.

Exemple 5

  
 <EMI ID=90.1> 

  
(i) On a mis en suspension 1 g de la même résine peptide que celle de l'exemple 3 dans 10 ml d'un mélange

  
 <EMI ID=91.1> 

  
0[deg.]C avec de l'ammoniac. On a agité le mélange en réaction pendant 3 jours à la température ambiante, puis on a filtré pour enlever la résine, on a lavé à l'aide de diméthylformamide, et on a fait évaporer les solvants sous vide. On a traité le résidu par une solution d'acide chlorhydrique dans du tétrahydrofuranne anhydre et on a récupéré le produit sous forme de chlorhydrate à partir d'alcool isopropylique. On a obtenu 0,09 g du composé indiqué en

  
 <EMI ID=92.1> 

  
ala 1 ; Tyr 0,91; Phe 1,03.

  
(ii) En variante, on peut obtenir le même peptide
(XIX) à partir de la résine peptide du procédé D (avec la séquence voulue des résidus d'aminoacides) en opérant de la même façon que celle décrite à l'exemple 4(i).

  
.1 

Exemple 6

  
 <EMI ID=93.1> 

(XIV' )

  
 <EMI ID=94.1> 

  
A une solution de 1 g (4,87 mmoles) de Boc-Ser-OH dans 20 ml de tétrahydrcfuranne anhydre, on a ajouté successivement 0,55 ml (4,87 mmoles) de N-méthyl-morpholine et

  
 <EMI ID=95.1> 

  
rature de-12[deg.]C. Après agitation à cette température pendant

  
2 minutes, on a ajouté une solution froide de 1 g (4,87 mmoles) de H2N-NH-Z.HCl et 0,55 ml (4,87 mmoles) de N-méthyl- <EMI ID=96.1> 

  
dant 3 heures et à 20[deg.]C pendant 1 heure, puis on a filtré pour éliminer les sels et on a soumis à évaporation sous vide.

  
On a fait dissoudre le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on a lavé plusieurs fois successivement avec une solution saturée en NaCl d'acide citrique 1 M, NaHC03

  
1 M et de l'eau. La couche organique a été séchée sur Na2S04 anhydre et on a éliminé le solvant sous vide. On a purifié le produit par chromatographie sur colonne de gel de silice,éluée avec CHCl,:MeOH = 98:2. Les fractions homogènes à la chromatographie sur couches minces ont été recueillies et le solvant éliminé sous vide.

  
Par broyage avec le mélange éther diéthylique- <EMI ID=97.1> 

  
RfA = 0,52.

  
 <EMI ID=98.1> 

  
On a fait dissoudre 1 g (2,83 mmoles) de Boc-Ser-NH-NH-Z (Il) dans 10 ml d'une solution 4 N d'acide chlorhydrique dans du tétrahydrofuranne anhydre, à la température ambiante. Après 30 minutes à cette même température, on a ajouté de l'éther diéthylique et le précipité a été recueilli par filtration.

  
Le'produit brut a été recristallisé à partir du mélange éthanol absolu-éther diëthylique; on a obtenu

  
 <EMI ID=99.1>   <EMI ID=100.1> 

Opération 3. Boc-Tyr-Pro-OH (III')

  
On a fait dissoudre 1 g (8,7 mmoles) de H-Pro-OH à la température ambiante dans 4,35 ml de NaOH 2 N. On a refroidi la solution à 0[deg.]C, on l'a diluée avec 10 ml de diméthylformamide et on a évacué les solvants sous vide à

  
 <EMI ID=101.1> 

  
1

  
Bcc-Tyr-ONp.

  
On a agité le mélange en réaction pendant 1 heure

  
 <EMI ID=102.1> 

  
sous vide.

  
On a fait dissoudre le résidu dans de l'eau et on l'a lavé plusieurs fois à l'aide d'acétate d'éthyle.

  
 <EMI ID=103.1> 

  
acidifiée avec une solution aqueuse 5 N d'acide chlorhydrique, jusqu'au pH 2, puis on l'a soumise à extraction à l'aide d'acétate d'éthyle.

  
On a lavé la couche organique jusqu'à neutralité avec une solution aqueuse saturée en NaCl, on l'a fait sécher sur Na2SO4 anhydre et, après élimination du solvant

  
à 30[deg.]C, on a obtenu 3,7 g du composé (III'); point de fusion

  
 <EMI ID=104.1> 

  
Bzl Une quantité de 1 g (2,13 mmoles) de Boc-Tyr-Pro-
-OH (III') dans 15 ml de méthanol a été hydrogénée à 30[deg.]C en présence d'un catalyseur 0,27 g 10% Pd/C. On a éliminé ce dernier par filtration, on a dilué la solution à l'aide d'acétate d'éthyle et on l'a concentrée sous vide jusqu'à précipitation. On a obtenu 0,7 g du composé (IV'); point de

  
 <EMI ID=105.1> 

Opération 5. Boc-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z (V')

  
En partant de 1 g (2,65 mmoles) de Boc-Tyr-Pro-OH
(IV') et de 0,77 g (2,65 mmoles) de H-Ser-NH-NH-Z . HC1 (Il')  <EMI ID=106.1> 

  
 <EMI ID=107.1> 

  
Opération 6. H-Tyr.Pro-Ser-NH-NH-Z . HC1 (VI') En partant de 1 g (1,63 mmoles) de Boc-Tyr-
-Pro-Ser-NH-NH-Z (V') et en procédant comme à l'opération 2, on a obtenu 0,78 g du composé (VI') à partir. d'éther

  
 <EMI ID=108.1> 

  
Opération 7. Boc-Phe-Gly-NH-NH-Z (VII')

  
En partant de 1 g (3,8 mmoles) de Boc-Phe-OH

  
 <EMI ID=109.1> 

  
(K. Hofmann et al., J. Am. Chem. Soc. 94, 6171, 1972) et en procédant comme à l'opération 1, on a récupéré à partir du mélange méthanol-éther diisopropylique le composé (VII')

  
 <EMI ID=110.1> 

  
 <EMI ID=111.1> 

  
 <EMI ID=112.1> 

  
On a traité 1 g (2,1 mmoles) de Boc-Phe-Gly-NH-
-NH-Z (VII') pendant 30 minutes à la température ambiante

  
à l'aide de 10 ml d'une solution 1,3 N d'acide chlorhydrique dans de l'acide acétique glacial. L'élimination du solvant sous vide à 30[deg.]C et le broyage du résidu avec de l'éther diéthylique a donné 0,89 g du composé (VIII'); point de

  
 <EMI ID=113.1> 

  
E1 2 = 0,88.

  
Opération 9. Boc-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (IX') En partant de 1 g (5,3 mmoles) de Boc-ala-OH et de 2,09 g (5,1 mmoles) de H-Phe-Gly-NH-NH-Z . HC1 (VIII'), et en procédant comme à l'opération 5, on a obtenu du mélange méthanol-éther diisopropylique le composé (IX')

  
 <EMI ID=114.1> 

  
En partant de 1 g (1,8 mmoles) de Boc-ala-Phe-
-Gly-NH-NH-Z (IX') et en procédant comme à l'opération 6,

  
 <EMI ID=115.1> 

  
 <EMI ID=116.1> 

  
1 Opération 11. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (XI') En partant de 1 g (3,5 mmoles) de Boc-Tyr-OH et

  
 <EMI ID=117.1> 

  
et en procédant comme à l'opération 5, on a obtenu 2,24 g du composé (XI) (cristallisation à partir du mélange méthanol- <EMI ID=118.1>  <EMI ID=119.1> 

  
Une quantité de 1 g (1,4 mmoles) de Boc-Tyr-ala-
-Phe-Gly-NH-NH-Z (XI') dans 10 ml de méthanol a été hydrogénée à la température ambiante en présence de 0,27 g d'un catalyseur 10% Pd/C. En procédant comme à l'opération 4, on a obtenu 0,64 g du composé (XII'); point de fusion 148[deg.]C;

  
 <EMI ID=120.1> 

  
Opération 13. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-
-Ser-NH-NH-Z (XIII')

  
 <EMI ID=121.1> 
-30[deg.]C 1,1 ml (4,38 mmoles) d'acide chlorhydrique 4 N dans du tétrahydrofuranne anhydre et 0,2 ml (1,93 mmoles) de nitrite de n-butyle. Après- agitation à la température de <EMI ID=122.1>  de N-méthylmorpholine, suivis d'une solution froide (-30[deg.]C) de 0,803 g (1,46 mmoles) de H-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z . HCl
(VI') et 0,16 ml (1,46 .mincies) de N-méthyl-morpholine dans
15 ml de diméthylformamide anhydre.

  
 <EMI ID=123.1> 

  
jours, puis on a éliminé les sels par filtration, on a éliminé le solvant sous vide et on a versé le produit dans une

  
 <EMI ID=124.1> 

  
le précipité par filtration, on a lavé jusqu'à neutralité avec de l'eau et on a séché sous vide. Le produit a été recristallisé à partir du mélange acétate d'éthyle-éther

  
 <EMI ID=125.1>  Opération 14. H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-
-NH-NH-Z . HC1 (XIV')

  
En partant de 1 g (0,95 mmoles) de Boc-Tyr-ala-
-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z (XIII') et en procédant comme à l'opération 2, on a obtenu 0,89 g du composé (XIV') à <EMI ID=126.1> 

Opération 1. Boc-Tyr-NH-NH-Z (XV')

  
A une solution de 1 g (3,55 mmoles) de Boc-Tyr-
-OH dans 20 ml de tétrahydrofuranne anhydre, on a ajouté

  
 <EMI ID=127.1> 

  
de N-méthyl-morpholine et 0,48 ml (3,55 mmoles) de chloroformate d'iso-butyle. Après agitation à la température de <EMI ID=128.1>  agité le mélange en réaction à une température de -10"C pendant 90 minutes, puis on a filtré pour séparer les sels et on a soumis à évaporation sous vide. On a fait dissoudre le résidu dans l'acétate d'éthyle et on a lavé plusieurs fois successivement avec une solution aqueuse d'acide 

  
 <EMI ID=129.1> 

  
 <EMI ID=130.1> 

  
On a fait dissoudre 1 g (2,33 mmoles) de Boc-
-Tyr-NH-NH-Z (XV') dans 10 ml d'une solution 4 N d'acide

  
 <EMI ID=131.1> 

  
température ambiante. Après 30 minutes à cette même température, on a fait évaporer le solvant sous vide et on a fait précipiter le produit à partir du mélange alcool isopropyli-

  
 <EMI ID=132.1> 

  
_1  <EMI ID=133.1> 

  
Opération 3. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH-NH-Z

  
 <EMI ID=134.1> 

  
A une solution de 1 g (1,75 mmoles) de Boc-Tyr-
-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (XII') dans 15 ml de diméthylformamide anhydre, on a ajouté successivement à une température de
-30[deg.]C 1,1 ml (4,38 mmoles) d'acide chlorhydrique 4 N dans du tétrahydrofuranne'anhydre et 0,2 ml (1,93 mmoles) de nitrite de n-butyle. Après agitation à cette température de
-30[deg.]C pendant 30 minutes, on a ajouté 0,5 ml (4,38 mmoles) de N-méthylmorpholine, suivis d'une solution froide (-30[deg.]C) de 0,535 g (1,46 mmoles) de H-Tyr-NH-NH-Z . HC1 (XVI') et <EMI ID=135.1> 

  
diméthylformamide anhydre. On a laissé le mélange réagir

  
 <EMI ID=136.1> 

  
les sels, on a évacué le solvant sous vide et on a versé le produit dans une solution aqueuse d'acide citrique à 10%

  
 <EMI ID=137.1> 

  
on a lavé jusqu'à neutralité avec de l'eau et on a séché

  
 <EMI ID=138.1> 

  
Le produit a été recristallisé à partir du mélange alcool isopropylique-éther diëthylique; on a obtenu

  
 <EMI ID=139.1> 

  
Opération 4. H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH-NH-Z .

  
. HC1 (XVIII')

  
En partant de 1 g (1,15 mmoles) de Boc-Tyr-ala-
-Phe-Gly-NH-NH-Z (XVII') et en procédant comme à l'opération

  
 <EMI ID=140.1> 

Exemple 8

  
 <EMI ID=141.1> 

  
 <EMI ID=142.1> 
-Gly-NH-NH-Z (XI'), et en procédant comme à l'opération 8 de l'exemple 6, on a obtenu &#65533; partir d'acétate d'éthyle <EMI ID=143.1>  

Exemple 9 

  
 <EMI ID=144.1> 

En partant de 0,12 ml (1,3 mmoles) d'acide buty-rique et de 0,742 g (1,3 mmoles) de Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-

  
-NH2 (XII'), et en procédant comme à l'opération 1 de l'exemple 6, on a obtenu à partir d'acétate d'éthyle 0,8 g du <EMI ID=145.1> 

  
 <EMI ID=146.1> 
-Phe-Gly-NH-NH-CO-CH2-CH2-CH3 (XX'), et en procédant comme à l'opération 2 de l'exemple 6, après purification sur une colonne de chromatographie de gel de silice et en éluant avec le mélange chloroforme-méthanol = 9:1, on a obtenu 0,58 g du composé (XXI') à partir du mélange alcool isopropylique-éther diéthylique; point de fusion 215[deg.]-218[deg.]C <EMI ID=147.1> 

Exemple 10 

  
Préparation de H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-&#65533;
 <EMI ID=148.1> 
 <EMI ID=149.1> 

  
Opération 1. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-tyr-
-Boc (XXII')

  
 <EMI ID=150.1> 

  
et de 2,03 'g (3,55 mmoles) de Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2
(XII') et en procédant comme à l'opération 1 de l'exemple 6, on a obtenu à partir d'acétate d'éthyle 2,3 g du

  
 <EMI ID=151.1> 

  
Opération 2. H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-tyr-H .

  
 <EMI ID=152.1> 

  
En partant de 1 g (1,2 mmoles) de Boc-Tyr-ala-

  
i -Phe-Gly-NH-NH-tyr-Boc (XXII'), et en procédant comme à l'opération 2 de l'exemple 1, on a obtenu à partir d'éther diéthylique 0,760 g du composé (XXIII'); point de fusion <EMI ID=153.1> 

  
 <EMI ID=154.1> 

  
En utilisant la méthode classique en solution, on a synthétisé aussi les autres dérives suivants :
XX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2.2 HCl

  
 <EMI ID=155.1> 

  
XXII) H-Tyr-ala-Phe-Sar-NH-NH-Z.HCl

  
p.f. 150[deg.]-155[deg.]C (dec.) (acétate d'éthyle);

  
 <EMI ID=156.1> 

  
p.f. 110[deg.]-115[deg.]C (dec.) (acétate d'éthyle-éther dié-

  
 <EMI ID=157.1> 

  
 <EMI ID=158.1> 

  
p.f. 180[deg.]-183[deg.]C (dec.) (acétate d'éthyle);

  
 <EMI ID=159.1> 

  
 <EMI ID=160.1> 

  
XXVIII) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr (Bzl) -Pro-NH2

  
p.f. 143[deg.]C (éther diéthylique) ; RfB 0,47.

  
 <EMI ID=161.1>  

  
 <EMI ID=162.1> 

  
XXXIII) Boc-Tyr-ala--Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2 

  
p.f. 156[deg.]-160[deg.]C (dec.) (acétate d'éthyle-éther

  
 <EMI ID=163.1> 

  
p.f. 203[deg.]-206[deg.]C (dec.) (éther diëthylique);

  
 <EMI ID=164.1> 

  
p.f. 230[deg.]C (dec.) (éther diisopropylique) ;

  
RfE 0,47.

  
 <EMI ID=165.1> 

  
p.f. 245[deg.]-250[deg.]C (dec.) (éther diéthylique-éther

  
 <EMI ID=166.1> 

  
p.f. 190[deg.]-195[deg.]C (dec.) (alcool méthylique-éther

  
 <EMI ID=167.1> 

  
XL) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Phe-Pro-Ser-NH2

  
p.f. 155[deg.]-160[deg.]C (dec.) (alcool méthylique-acétate

  
 <EMI ID=168.1>   <EMI ID=169.1> 

  
XLVI) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Trp-Pro-Ser-NH2

  
p.f. 175[deg.]-180[deg.]C (dec.) (alcool méthylique-acétate

  
 <EMI ID=170.1> 

  
 <EMI ID=171.1> 

  
p.f. 140[deg.]-145[deg.]C (éther diéthylique);

  
 <EMI ID=172.1> 

  
L) H - Tyr - ala - Phe - Gly - Leu - NH2 . HCl

  
p.f. 143[deg.]-147[deg.]C (alcool isopropylique-éther

  
 <EMI ID=173.1> 

  
LII) H - Tyr - ala - Phe - Sar - Tyr - Pro - Ser - NH2 .HCl

  
p.f. 195[deg.]-200[deg.]C (dec.) (éther diéthylique);

  
10  <EMI ID=174.1>  <EMI ID=175.1> 

  
 <EMI ID=176.1> 

  
LIV) H - Tyr - ala - Phe - Gly - Tyr - Pro - Ser - NHMe.HCl

  
p.f. 240[deg.]C (dec.) (éther diéthylique);

  
 <EMI ID=177.1>  <EMI ID=178.1> 

  
LV) H - Tyr - ala - Phe - Gly - Tyr - Prc - Ser-NHEt.HCl

  
 <EMI ID=179.1> 

  
 <EMI ID=180.1> 

  
LVI) H - Tyr - ala - Phe - Gly - Tyr - Pro - Ser - OMe.HCl

  
p.f. 240[deg.] (dec.) (éther diéthylique); <EMI ID=181.1> 

  
LXI) H - Tyr - ala - Phe - Gly - NHNH Adoc

  
p.f. 142[deg.]-144[deg.]C (dec.) (alcool isopropylique/éther

  
 <EMI ID=182.1> 

  
LXII) H - Tyr - ala - Phe - Gly - NHNHBoc

  
 <EMI ID=183.1> 

  
 <EMI ID=184.1> 

  
 <EMI ID=185.1>  

  

 <EMI ID=186.1> 
 

  

 <EMI ID=187.1> 




  "New biologically active peptides and their use as medicaments" The invention relates to new biologically active peptides, their pharmaceutically acceptable salts, their use as therapeutic agents.

  
It relates more particularly to peptides having the following general formula:

  

  <EMI ID = 1.1>


  
in which :

  
  <EMI ID = 2.1>

  
nal selected from the group consisting of acyl-type protecting groups, type-protecting groups

  
  <EMI ID = 3.1>

  
alkyl, aliphatic urethane-type protecting groups, or, alternatively, a residue of a natural L-amino acid or a dipeptide from two natural L-amino acids. in which the free amino group can be replaced by any of the N-terminal protecting groups mentioned above;

  
Y is a hydrogen atom, or a protecting group for

  
tyrosine phenolic hydroxyl group chosen from the group comprising the following bodies: tetrahydropyranyl, methyl, tert-butyl, trityl, benzyl, 2,4-dichlorobenzyl, benzyloxycarbonyl, 2-bromobenzyloxycarbonyl, tert-butyl-oxycarbonyl, or a lower acyl, advantageous

  
  <EMI ID = 4.1>

  
benzoyl, propionyl;

  
A is a D-amino acid residue with a side chain

  
consisting of lower alkyl or a lower thioalkyl group;

  
B is a neutral L-amino acid residue, preferably chosen

  
in the group consisting of the following bodies: oc-arnino acid

  
  <EMI ID = 5.1>

  
nine and L-N-methyl-phenylalanine;

  
C may be present or absent and, when present, it

  
consists of a residue of an amino acid or a residue of a di- or tripeptide, <EMI ID = 6.1>
for example of an acid eliminator, advantageously chosen from the group composed of the following bodies: Pro, 3-hydroxyproline, 4-hydroxyproline, pipecolic acid, 2-azetidinecarhoxylic acid, 4-thiazolidine carboxylic acid, <EMI ID = 7.1>
for example of an N-methyl amino acid, advantageously chosen from the group composed of the following bodies: Sar,

  
  <EMI ID = 8.1>

  
all these bodies being of configuration L or D, provided that it is not basic or acid,
- For example of a dipeptide which can be advantageously chosen from the dipeptides which result from the condensa-

  
  <EMI ID = 9.1>

  
which have been defined above, provided that the two amino acids are not the same;
- For example of a tripeptide which can be advantageously chosen from the tripeptides JLM in which J is Tyr, Trp, Phe, Phg, hexahydro-Phe, Gly, Val and Phe substituted in para, the substituent being chosen from the group consisting of chlorine, bromine, fluorine, amino and nitro groups,

  
L is Val, Leu, Ile, Gly, Ala, Nva, Sar, MePhe, MeAla, and

  
  <EMI ID = 10.1>

  
above, M is Ser, Hse, Thr, Abu, Gly provided that

  
J is different from L and L is different from M.

  
Hydroxy amino acids are unprotected

  
or are protected by a hydroxy function protection group. As suitable protecting groups there may be mentioned:

  
methyl, tert-butyl, trityl, benzyl, 2,4-dichlorobenzyl,

  
  <EMI ID = 11.1>

  
R is:
- a linear or branched, substituted or unsubstituted C (1-10) alkyl, advantageously one of the following: methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sec-butyl, iso-butyl, 2,2,2 -trifluoroethyl,
a C (1-10) cycloalkyl, advantageously chosen between cyclohexyl and adamantyl,
- a C (6-8) aralkyl, advantageously chosen from phenyl, benzyl, phenylethyl, and R 'is
- a hydrogen atom,
- a linear or branched C (1-10) alkyl, a cycloalkyl or <EMI ID = 12.1> <EMI ID = 13.1>
an alkenyl group having from 2 to 8 carbon atoms, preferably allyl,
a group of linear, branched or cyclic aliphatic acyl type having from 1 to 16 carbon atoms, advantageously chosen from the following:

   formyl, acetyl, propionyl, butyryl, lauryl, 1-adamantancarbonyl, unsubstituted or substituted by hydroxy, amino, a C (1-4) alkoxy or a halogen atom, a good example of

  
  <EMI ID = 14.1>

  
trifluoroacetyl,
- a group of aromatic acyl type such as one of the following:
benzoyl, phenylacetyl and a cinnamyl residue, unsubstituted or substituted by one of the following:
hydroxy, amino, a halogen atom or alkoxy C (1-4),
a group of linear, branched or cyclic aliphatic urethane type C (3-ll), advantageously as defined above
below for X,
- a group of aromatic urethane type advantageously as defined below for X. When X is a protection group of acyl type, it is preferably one of the following: formyl, acetyl, trifluoroacetyl, propionyl, benzoyl; when X is a protective group of the aromatic urethane type, it is advantageously one of the following: benzyloxycarbonyl, 2,4-dichlorobenzyloxycarbonyl, 2-bromobenzyloxycarbonyl, 4-nitro- <EMI ID = 15.1> <EMI ID = 16.1>

  
is advantageously one of the following: text-butyloxycarbonyl,

  
1-methylcyclobutyloxycarbonyl, adamantyloxycarbonyl and isobornyloxycarbonyl; when X is an alkyl type protection group, it is advantageously one of the following:
trityl, benzyl, methyl, ethyl, isopropyl; when X is a residue of natural L-amino acid, it is preferably chosen from the group comprising the following: Gly, Ala, Leu, Met, Lys, Arg, His, Phe, Trp, Ser, Thr; when X is a dipeptide from two natural L-amino acids

  
it preferably comes from two selected L-amino acids

  
  <EMI ID = 17.1>

  
following: Arg-Arg, Arg-Lys, Lys-Arg, Lys-lys, Leu-His, His-Leu, Leu-Leu, Leu-Met, Met-Leu, Leu-Trp, Trp-Leu, Thr-Ala, Ala-Thr, Ser-Ala, Ala-Ser.

  
A is preferably a residue of D-amino acid

  
  <EMI ID = 18.1>

  
leu, pro, ser, thr, met, met-sulfoxide, S -ethyl-homocysteine.

  
Lowercase letters indicate residues of D-amino acids.

  
The salts of the compounds corresponding to the formula

  
  <EMI ID = 19.1>

  
hydrofluoric, acetic acid, hydrochloric acid, hydrobromic acid, as well as other pharmaceutically acceptable salts of the compounds of this same general formula (I) should be considered as all falling within the scope of the invention.

  
The synthesis of the peptides of the invention can be accomplished either by conventional methods in solu-

  
  <EMI ID = 20.1>

  
_ / We give below examples of the two methods. The synthesis according to the conventional solution method consists essentially of

  
  <EMI ID = 21.1>

  
protected amino acids or peptides. The condensation is carried out so that the peptides obtained have the desired sequence of 4-7 amino acid residues. In amino acids and peptides which are condensed according to the method known per se in polypeptide chemistry, the amino and carboxyl groups which are not involved in the formation of the peptide bond are blocked by a suitable protecting group.

  
The hydroxyl functions of the hydroxylated amino acids can be protected by appropriate protection groups (during the entire duration of the synthesis or during certain operations only) or they can be left without protection. Protected groups can be eliminated by acidolysis, saponification or hydrogenolysis.

  
For the protection of amino groups, the following protective groups can be used, for example: benzyloxycarbonyl (Z), t-butyloxycarbonyl (Boc), trityl, formyl, trifluoroacetyl, o-nitrophenylsulphenyl.

  
For the protection of the carboxyl groups, the following protective groups can be used, for example: methyl, ethyl, tert-butyl, benzyl,

  
  <EMI ID = 22.1>

  
For the protection of hydroxy groups, the following protection groups can be used, for example:
acetyl, tert-butyloxycarbonyl, benzyloxycarbonyl, 2-bromo-benzyloxycarbonyl, tetra-hydropyranyl, tert-butyl, trityl, benzyl, 2,4-dichlorobenzyl, methyl.

  
Condensation between an amino group of one molecule and a carboxyl group of another molecule to give a peptide bond can take place through an activated acyl derivative such as a mixed anhydride, an azide, an, activated ester, etc., or by direct condensation between a free amino group and a free carboxyl group, in the presence of a condensing agent such as dicyclo-hexyl-carbodimide,

  
  <EMI ID = 23.1>

  
like the following: N-hydroxysuccinimide, 1-hydroxybenzotriazole.

  
The condensation can be carried out in a solvent such as one of the following: dimethylformamide, pyridine, acetonitrile, tetrahydrofuran, etc.

  
The reaction temperature can range between
-30 [deg.] C and room temperature.

  
The reaction time generally ranges from

  
1 hour to 120 hours.

  
The synthesis scheme, the protection groups, the condensing agents, must all be chosen so as to avoid the risk of racemization.

  
De-protection reactions are carried out according to methods known per se in the chemistry of polypeptides.

  
Peptides in which W is OR are prepared, for example, from C-terminal amino acid esterified with a suitable alcohol. Peptides in which W = OH can be prepared, for example, by means of hydrolysis

  
  <EMI ID = 24.1>

  
The peptides in which W = NH2, NHR and NR2 can be prepared by means of ammonolysis of the corresponding esters.

  
In the solid phase method a polymeric support is used. The polymer is preferably a copolymer of styrene with 1 to 2% by weight of divinylbenzene as a crosslinking agent which causes the polystyrene polymer to become completely insoluble in most organic solvents.

  
  <EMI ID = 25.1>

  
C-terminal of the peptide, by fixing the amino acid necessary for a chloromethylated resin, a hydroxymethyl resin, a benzhydrylamine resin.

  
The amino group and side chain protecting groups are those described in connection with conventional solution synthesis.

  
During the preparation of the compounds of the invention

  
  <EMI ID = 26.1>

  
chloromethylated resin using, for example, a catalyst

  
it from cesium bicarbonate or to a hydroxymethyl group or a benzhydrylamine resin using a condensing agent such as dicyclohexylcarbodiimide.

  
After the initial coupling, the group protecting the amino group is removed by a choice of reagents comprising solutions of trifluoroacetic acid or hydrochloric acid in organic solvents at room temperature. After removal of this group protecting the amino group, the remaining protected amino acids are coupled operation by operation in the desired order until the desired peptide is obtained.

  
Each protected amino acid is, in general, reacted in an excess of the coefficient 3 of an appropriate activator with a carboxyl group such as dicyclohexylcarbodiimide in solution, for example in methylene chloride mixtures. <EMI ID = 27.1>

  
When the desired amino acid sequence has been

  
  <EMI ID = 28.1>

  
support by treatment with a reagent such as hydrofluoric acid, which not only separates the peptides from the resin but also separates most of the remaining protecting groups from the side chains. When using a chloromethylated or hydroxymethylated resin, the treatment

  
hydrofluoric acid results in the formation of the free acid peptide (W = OH). When a benzhydrylamine resin is used, the treatment with hydrofluoric acid leads directly to the free amide peptide (W = NH2). As a variant, when the chloromethylated or hydroxymethylated resin is used, the protected side chain peptide can be detached by treating the resin supporting the peptide with ammonia or an alkyl or a dialkylamine giving the desired amide with a protected side chain, an alkylamide or a dialkylamide (W = NH2, NHR, NR2). The protection of the side chain can be eliminated by any of the methods known in this field.

  
To prepare the esters according to the invention (W = OR), use is made of the resins used to prepare the acid (W = OH) and the peptide with protected side chain is separated using a base and l 'appropriate alcohol. Protecting the

  
_ side chain is then removed in the usual manner.

  
Alternatively, the acid and amide peptides can be obtained from the esters by saponification or ammonolysis.

  
The hydrazido or substituted hydrazido derivatives, in accordance with the invention, are prepared by condensation of the N-protected peptide or of an amino acid with a suitably substituted hydrazine, such as for example: benzylcarbazate, t-butylcarbazate, adamantylscarbazate, phenylhydrazine or adamantylhydrazine , or by reacting the N-protected peptide or the amino acid hydrazide with a suitable alkylating agent such as an alkyl chloride or with an agent

  
  <EMI ID = 29.1>

  
t-butylchloroformate, adamantyl fluoroformate.

  
The symbols used here are those commonly used in peptide chemistry. In the examples which follow, the residues of D-amino acid are designated by lowercase letters, for example: ala = D-Ala.

  
The values of Rf were determined on

  
  <EMI ID = 30.1>

  
a layer thickness of 0.25 mm, the length of the plate being 20 cm, using the following development media:

  
Medium A: benzene-ethyl acetate-acetic acid-water

  
(10: 10: 2: 1) (upper phase)

  
Medium B: benzene-ethyl acetate-acetic acid-water

  
(100: 100: 40: 15) (upper phase)

  
Medium C: n-butyl alcohol-acetic acid-water

  
(4: 1: 1)

  
Medium D: chloroform-methyl alcohol - hydroxide

  
32% ammonium (65:45:20)

  
Medium E: chloroform-methyl alcohol (8: 2).

  
The analyzes by thin layer chromatography were carried out according to the standard conditions of the applicant. Rf values can therefore change, especially at different temperatures. The melting points were determined by the open capillary method and are not corrected. Most derivatives soften

  
i and decompose (dec.) before fusion. The solvents used for crystallization, precipitation or grinding are indicated in square brackets.

  
High voltage electrophoresis on paper has been

  
  <EMI ID = 31.1>

  
  <EMI ID = 32.1>

  
  <EMI ID = 33.1>
-water 123: 100: 777). The electrophoretic mobilities (E 1.2) are given relative to those of glutamic acid.

  
The compounds of general formula (I) have shown interesting pharmacological activities in tests carried out on laboratory animals. More particularly, the compounds of general formula (I) have shown activity on the central nervous system with analgesics, antipsychotics and agents usable in neuroendocrinology.

  
This analgesic activity was evaluated on the mouse by the tail pinch test, as described by

  
  <EMI ID = 34.1>

  
The substances tested were administered intravenously, subcutaneously, intraperitoneally or orally. When administered intravenously or subcutaneously, the products tested showed an analgesic effect in doses ranging, in general, from 0.2 to 50 mg / kg.

  
The compounds of general formula (I) show receptor affinities with central analgesia drugs when they are tested in vitro on the rat brain according to the process described by PERT and SNYDER in Molec.Pharmacol., 10, 878, 1974. According to these properties, the compounds of general formula (I) can find a therapeutic application for the treatment of pain.

  
The compounds of general formula (I) also have an activity on the central nervous system with the characteristic properties of antipsychotic drugs, as shown by tests carried out on rats according to the process described by JANSSEN, JAGENEAU and SCHELLEKENS in Psychopharmacologia (Berl .), 1, 389. 1960. The active doses are generally between 0.2 and 60 mg / kg. Due to this activity, the compounds of general formula

  
9 <1> (I) can find a therapeutic application as anti-psychotic drugs.

  
The compounds of general formula (I) stimulate, inter alia, the release of growth hormone and prolactin as shown in radio immunization tests in rats, which were carried out according to the process described by NISWENDER , CHEN, MIDGLEY, METTES, ELLIS, Proc.Soc.Exp.Biol.Med., 130, 793, 1968. Active doses are generally between 0.01 and 10 mg / kg. Due to this activity, the compounds of general formula (I) can find a therapeutic application for stimulating the release of growth hormone and

  
  <EMI ID = 35.1>

  
Consequently, the use as medicaments of the compounds of general formula (I) is also included within the scope of the invention. For therapeutic purposes, the compounds of general formula (I) and their salts are administered with conventional pharmaceutically acceptable vehicles or diluents.

  
The preferred compounds produced in accordance with the invention are the following:

  
r-.i
  <EMI ID = 36.1>
 
  <EMI ID = 37.1>
 
  <EMI ID = 38.1>
 
  <EMI ID = 39.1>
 D-3

  
wherein :

  
Me = CH3

  
Et = CH2CH3

  
Z = benzyloxycarbonyl

  
Lrl = lauryle

  
Bnl = benzoyl

  
  <EMI ID = 40.1>

  
Ad = adamantyle

  
  <EMI ID = 41.1>

  
MePhe = N-nethylphenylalanine

  
Ppa = pipecolic acid

  
Aze = 2-azetidine carboxylic acid

  
Tia = 4-tiazolidine carboxylic acid

  

  <EMI ID = 42.1>


  
Phe (N02) = p-nitro-phenylalanine

  
  <EMI ID = 43.1>

  
Tyr (Bzl) = O-benzyl ether tyrosine

  
Ser (Bzl) = serine 0-benzyl-ether

  
Cha = hexahydrophenylalanine

  
Phg = phenylglycine

  
Phe (F) = p-fluorophenylalanine

  
&#65533; Ala = &#65533; -alanine

  
Hello Hyp = 4-allohydroxyproline

  
3Hyp = either 3-hydroxyproline or 3-allohydroxyproline Nva = normal valine

  
  <EMI ID = 44.1>

  
The description of the preparation of several compounds of the invention will now be given, by way of illustration only and without any limiting intention.

Example 1

  
Preparation of H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2.CF3 COOH To a solution of 1 g (4.65 mmol) of Boc-Pro-OH in 10 ml of anhydrous tetrahydrofuran, we added successively at a temperature of -12 [deg.] C 0.52 ml (4.65 mmol)

  
of N-methyl-morpholine and 0.45 ml (4.65 mmol) of ethyl chloroformate. After stirring at this temperature for 2 minutes, a cold solution of 0.48 g (4.65) was added

  
  <EMI ID = 45.1>

  
reaction mixture at -10 [deg.] C for 3 hours and at 20 [deg.] C for 1 hour, then filtered to separate the salts and evaporated in vacuo. We took over the residue

  
with tetrahydrofuran, it was filtered and evaporated

  
  <EMI ID = 46.1>

  
  <EMI ID = 47.1>

  
  <EMI ID = 48.1>

  
  <EMI ID = 49.1>

  
  <EMI ID = 50.1>

  
vacuum the solution, dilute it with methanol and re-evaporate in vacuo. The product (II) was isolated from the diethyl ether-petroleum ether medium;

  
  <EMI ID = 51.1>

  
Operation 3. Boc-Tyr (Bzl) -Pro-Ser-NH2 (III)

  
A solution of 1 g (3.2 mmol) of H-Pro-Ser-NH2.CF3COOH (II) in 35 ml of dimethylformamide was cooled to 0 [deg.] C and then 0.36 ml was added (3, 2 mmol) of N-methyl-morpholine followed by 1.2 g (3.2 mmol) of Boc-Tyr
(Bzl) -OH, 0.43 g (3.2 mmol) of 1-hydroxybenzotriazole, and 0.73 g (3.52 mmol) of dicyclohexylcarbodiimide. The reaction mixture was stirred for 1 hour at 0 [deg.] C and then

  
at room temperature overnight, then it was filtered and evaporated in vacuo. The residue was dissolved in ethyl acetate, the solution was washed successively with saturated NaCl solutions 1 M citric acid, 1 M NaHCO 3 and water. We have

  
not/ <EMI ID = 52.1>

  
removed the solvent under vacuum. The product (III) was obtained by crystallization from ethyl acetate medium -
- petroleum ether; weight 1.4 g, melting point 115 [deg.] C;

  
  <EMI ID = 53.1>

(IV)

  
By operating as in operation 2, starting with 1 g (1.8 mmol) of Boc-Tyr (Bzl) -Pro-Ser-NH2 (III) we

  
  <EMI ID = 54.1>

Operation 5. Boc-Phe-Gly-NH-NH-Z (V)

  
Was added successively at -12 [deg.] C 0.42 ml
(3.8 mmol) of N-methylmorpholine and 0.3 ml (3.8 mmol) of ethyl chloroformate to a solution of 1 g (3.8 mmol) of Boc-Phe-OH in 10 ml of anhydrous tetrahydrofuran . After stirring at this temperature for 2 minutes, a cold solution of 0.95 g was added

  
  <EMI ID = 55.1>

  
J.Amer.Chem.Soc. 94, 6171, 1972) and 0.4 ml (3.7 mmol)

  
of N-methylmorpholine in 15 ml of dimethylformamide.

  
The reaction mixture was stirred at -10 [deg.] C for 3 hours and at 20 [deg.] C for 1 hour, then filtered to separate the salts and evaporated in vacuo. The residue was dissolved in ethyl acetate and washed several times successively with saturated NaCl solutions of 1 M citric acid, 1 M NaHCO 2 and water. The organic layer was dried over anhydrous Na2SO4 and the solvent was removed in vacuo. The product (V) (1.4 g) was recovered from the methanol- <EMI ID = 56.1>

  
1 g (2.1 mmol) of Boc-Phe-Gly-NH-NH-Z (V) was treated for 30 minutes at room temperature with
10 ml of a 1.3 N solution of hydrochloric acid in glacial acetic acid. Removal of the solvent under

  
vacuum at 30 [deg.] C and milling the residue with diethyl ether gave 0.89 g of the product (VI); melting point 178 [deg.] C;

  
  <EMI ID = 57.1>

  
Starting with 1 g (5.3 mmol) of Boc-ala-OH and 2.09 g (5.1 mmol) of H-Phe-Gly-NH-NH-Z.HCl (VI), and

  
proceeding as in operation 5, the compound was obtained
(VII) (2.5 g) from the methanol-diisether ether medium

  
  <EMI ID = 58.1>

  
Operation 9. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (IX) Starting from 1 g (3.5 mmol) of Boc-Tyr-OH and

  
  <EMI ID = 59.1>

  
and by proceeding as in operation 5, 2.24 g of product (IX) were obtained (crystallization from methanol-diisopropyl ether medium); melting point 148 [deg.] C;

  
  <EMI ID = 60.1>

  
Operation 10. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (X) One hydrogenated at room temperature in the presence of 0.27 g of a 10% Pd / C catalyst an amount of 1 g (1, 4 mmol) of Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (IX) in 10 ml of methanol. The catalyst was removed by filtration and the solution was concentrated in vacuo. By dilution with ethyl acetate, 0.64 g of

  
  <EMI ID = 61.1>

  
(c = 1, MeOH); RfB = 0.34.

  
Operation 11. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr

  
  <EMI ID = 62.1>

  
Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (X) in 20 ml of anhydrous dimethylformamide, was successively added at a temperature of -30 [deg.] C 2.18 ml (8.75 mmol) of 4 N hydrochloric acid in anhydrous tetrahydrofuran and 0.45 ml (3.85 mmol, n-butyl nitrite. After stirring at this temperature for 30 minutes, 1 ml (8.75 mmol) was added.

  
  <EMI ID = 63.1>
-9 [deg.] C for three days then filtered to remove the salts, the solvent was removed in vacuo and the product was precipitated from the medium methanol-ethyl acetate-diethyl ether. The crude product obtained was purified by chromatography on a column of silica gel
(Merck), 70-230 niesh, (0.197 to 0.066 mm), eluting with ethyl acetate-methanol mixture (8: 2), 2 g of compound (XI) were obtained from the medium methanol- <EMI ID = 64.1>

  
Operation 12. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-
-Ser-NH &#65533; (XII)

  
Hydrogenated at 35 [deg.] C in the presence of a catalyst, 0.30 g of 10% Pd / C, an amount of 1.3 g (1.3 mmol) of Boc-Tyr-ala-Phe -Gly-Tyr (Bzl) -Pro-Ser-NH2 (XI) in solution in 20 ml of methanol. The catalyst was removed by filtration and the solution was concentrated in vacuo. By dilution with diethyl ether, 1.1 g was obtained

  
  <EMI ID = 65.1> using 10 ml of trifluoroacetic acid. The solvent was removed in vacuo and the residue was ground with diethyl ether to give 0.90 g of the compound

  
  <EMI ID = 66.1>

Example 2

  
  <EMI ID = 67.1>

  
anhydrous mide and cooled to -30 [deg.] C. 2 ml (12 mmol) of 6N hydrochloric acid in anhydrous tetrahydrofuran were added successively and 0.63 ml (5.28 mmol) of n-butyl nitrite and the reaction mixture was stirred for 30 minutes at -30 [deg.] C. 1.34 ml (12 mmol) of N-methyl-morpholine was added at -40 [deg.] C, followed by a solution

  
  <EMI ID = 68.1>

  
(K. Blau and S.G. Waley, Biochem. J., 57, 538, 1954) and 0.456 ml (4 mmol) of N-methyl-morpholine in 50 ml of dimethylformamide. The mixture was allowed to react for 7 days at -10 [deg.] C, then concentrated to a small volume, filtered to remove the salts and the product was precipitated by dilution with chloroform . By crystallization from methyl alcohol medium-
-chloroform, 2 g of compound (XIV) were obtained; point of

  
  <EMI ID = 69.1>

(XV)

  
1 g (1.4 mmol) of Boc-Tyr- was reacted
-ala-Phe-Gly-Tyr-NH2 (XIV) with 12 ml of trifluoro- acid <EMI ID = 70.1>

  
isopropyl-diisopropyl ether, 0.94 g of

  
  <EMI ID = 71.1>

  
Solid phase synthesis. The synthesis on a polymeric support can be carried out, for example, according to any one of the following methods:

  
  <EMI ID = 72.1>

  
Chloromethylated polystyrene resin was <EMI ID = 73.1>

  
directions from Gisin, Helv. Chim. Acta, 56, 1476 (1973).

  
The polystyrene ester was treated in accordance with the operations given in Table A below for the incorporation

  
  <EMI ID = 74.1>

  
the resin indicated in title. ''

  
Table A

  
  <EMI ID = 75.1>

  
2. Treatment with TFA-CH2Cl2 (1: 1) twice

  
for 1 minute;

  
  <EMI ID = 76.1>

  
5. Treatment with 10% TEA in CH2C12 twice

  
for 1 minute;

  
  <EMI ID = 77.1>

  
7. Washing with CH2C12 x 3;

  
8. Washing with DMF x 3.;

  
9. Washing with CH2C12 x 3;

  
10. Addition of 2 or 3 equivalents of the symmetrical anhydride of the corresponding acid amine derivative, prepared as described by Hagenmayer and Frank, Hoppe-
-Seyler's Z.Physiol.Chem., 353, 1973 (1972), in solution in CH2C12. Duration of the reaction 1 to 2 hours.

  
  <EMI ID = 78.1>

  
12. Wash with isopropyl alcohol x 3;

  
13. Washing with CH2C12 x 3;

  
  <EMI ID = 79.1>

  
In case of incomplete reaction repeat process 4 to 14 as above.

  
The abbreviations used to designate the solvents and reagents mentioned in Table A are the following:

  
  <EMI ID = 80.1>

  
  <EMI ID = 81.1>

  
After adding the. last amino acid derivative according to table A (process A), washing the resin 3 times with acetic acid, repeating operations 1 to 9

  
and washing 4 times with isopropyl alcohol.

  
  <EMI ID = 82.1>

  
benzhydrylamine via dicyclohexylcarbodiimide, as described by Pietta et al, J.Org.Chem.,
39, 44 (1974). Unreacted amino groups were acetylated with acetic anhydride / pyridine / / CH2Cl2 mixture (2: 1: 10). The polystyrene amide was treated in accordance with Table A (method A) for the incorporation of the other amino acid residues to arrive at the title resin.

  
  <EMI ID = 83.1>

  
We operated according to method B starting from the peptide resin of method C.

Example 3

  
  <EMI ID = 84.1>

  
1 g of peptide resin of method B having the desired amino acid residue sequence (introduced in the form of Boc-Gly-OH, Boc-Phe-OH, Boc-ala-OH. And Boc-Tyr-OH, in this order) was suspended in 25 ml of methyl alcohol and 2 ml of triethylamine for 3 days at room temperature. The resin was removed by filtration,

  
  <EMI ID = 85.1>

  
remove the solvent in vacuo. By crystallization of the residue from isopropyl alcohol, 0.16 g of the title compound (XVI) was obtained, melting point 216 [deg.] - 218 [deg.] C;

  
  <EMI ID = 86.1>

  
acids: Gly 1.04; ala 1.06; Tyr 0.99; Phe 1.

Example 4

  
  <EMI ID = 87.1>

  
d (i) 1 g of the same peptide resin as that of Example 3 was treated for 45 minutes at 0 [deg.] C using
10 ml of anhydrous HF (distilled on CoF3) containing 1 ml of anisole. The hydrofluoric acid was evaporated under reduced pressure and the anisole was removed by washing with diisopropyl ether. The crude peptide was extracted from the resin using 50% acetic acid, purified by chromatography on a column of Sephadex G-15 by elution using 0.5 N acetic acid and finally transformed into

  
  <EMI ID = 88.1>

  
(ii) Alternatively, 0.10 g of the peptide ester (XVI) was suspended in 5 ml of water and 3 ml of methyl alcohol and saponified using 0.32 ml 1 N NaOH for 90 minutes at room temperature. 0.32 ml 1 N HCl was added and the solution was concentrated in vacuo. Diluting with 95% ethanol, 0.08 g of the title compound (XVII) was obtained; melting point 250 [deg.] - 252 [deg.] C

  
  <EMI ID = 89.1>

  
amino acids: Gly 1.04; ala 0.94; Tyr 1; Phe 1.05.

Example 5

  
  <EMI ID = 90.1>

  
(i) 1 g of the same peptide resin as that of Example 3 was suspended in 10 ml of a mixture

  
  <EMI ID = 91.1>

  
0 [deg.] C with ammonia. The reaction mixture was stirred for 3 days at room temperature, then filtered to remove the resin, washed with dimethylformamide, and the solvents were evaporated in vacuo. The residue was treated with a solution of hydrochloric acid in anhydrous tetrahydrofuran and the product was recovered as the hydrochloride from isopropyl alcohol. 0.09 g of the compound indicated in

  
  <EMI ID = 92.1>

  
ala 1; Tyr 0.91; Phe 1.03.

  
(ii) As a variant, the same peptide can be obtained
(XIX) from the peptide resin of method D (with the desired sequence of amino acid residues) by operating in the same way as that described in Example 4 (i).

  
.1

Example 6

  
  <EMI ID = 93.1>

(XIV ')

  
  <EMI ID = 94.1>

  
To a solution of 1 g (4.87 mmol) of Boc-Ser-OH in 20 ml of anhydrous tetrahydrofuran, 0.55 ml (4.87 mmol) of N-methyl-morpholine was successively added and

  
  <EMI ID = 95.1>

  
erasure of -12 [deg.] C. After stirring at this temperature for

  
2 minutes, a cold solution of 1 g (4.87 mmol) of H2N-NH-Z.HCl and 0.55 ml (4.87 mmol) of N-methyl was added. <EMI ID = 96.1>

  
for 3 hours and at 20 [deg.] C for 1 hour, then filtered to remove the salts and subjected to vacuum evaporation.

  
The residue was dissolved in ethyl acetate and washed several times successively with a saturated NaCl solution of 1 M citric acid, NaHCO3.

  
1 M and water. The organic layer was dried over anhydrous Na2SO4 and the solvent was removed in vacuo. The product was purified by chromatography on a column of silica gel, eluted with CHCl 3: MeOH = 98: 2. The homogeneous fractions on thin layer chromatography were collected and the solvent removed in vacuo.

  
By grinding with the diethyl ether mixture- <EMI ID = 97.1>

  
RfA = 0.52.

  
  <EMI ID = 98.1>

  
1 g (2.83 mmol) of Boc-Ser-NH-NH-Z (II) was dissolved in 10 ml of a 4 N solution of hydrochloric acid in anhydrous tetrahydrofuran, at room temperature. After 30 minutes at this same temperature, diethyl ether was added and the precipitate was collected by filtration.

  
The crude product was recrystallized from the absolute ethanol-diethyl ether mixture; we got

  
  <EMI ID = 99.1> <EMI ID = 100.1>

Operation 3. Boc-Tyr-Pro-OH (III ')

  
1 g (8.7 mmol) of H-Pro-OH was dissolved at room temperature in 4.35 ml of 2N NaOH. The solution was cooled to 0 [deg.] C, diluted with 10 ml of dimethylformamide and the solvents were removed under vacuum at

  
  <EMI ID = 101.1>

  
1

  
Bcc-Tyr-ONp.

  
The reaction mixture was stirred for 1 hour

  
  <EMI ID = 102.1>

  
under vacuum.

  
The residue was dissolved in water and washed several times with ethyl acetate.

  
  <EMI ID = 103.1>

  
acidified with a 5N aqueous solution of hydrochloric acid, up to pH 2, then it was extracted with ethyl acetate.

  
The organic layer was washed until neutral with a saturated aqueous NaCl solution, it was dried over anhydrous Na2SO4 and, after removal of the solvent

  
at 30 [deg.] C, 3.7 g of the compound (III ') were obtained; Fusion point

  
  <EMI ID = 104.1>

  
Bzl An amount of 1 g (2.13 mmol) of Boc-Tyr-Pro-
-OH (III ') in 15 ml of methanol was hydrogenated at 30 [deg.] C in the presence of a 0.27 g 10% Pd / C catalyst. The latter was removed by filtration, the solution was diluted with ethyl acetate and concentrated in vacuo until precipitation. 0.7 g of compound (IV ') were obtained; point of

  
  <EMI ID = 105.1>

Operation 5. Boc-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z (V ')

  
Starting from 1 g (2.65 mmol) of Boc-Tyr-Pro-OH
(IV ') and 0.77 g (2.65 mmol) of H-Ser-NH-NH-Z. HC1 (It ') <EMI ID = 106.1>

  
  <EMI ID = 107.1>

  
Operation 6. H-Tyr.Pro-Ser-NH-NH-Z. HC1 (VI ') Starting from 1 g (1.63 mmol) of Boc-Tyr-
-Pro-Ser-NH-NH-Z (V ') and proceeding as in operation 2, 0.78 g of the compound (VI') was obtained from. ether

  
  <EMI ID = 108.1>

  
Operation 7. Boc-Phe-Gly-NH-NH-Z (VII ')

  
Starting from 1 g (3.8 mmol) of Boc-Phe-OH

  
  <EMI ID = 109.1>

  
(K. Hofmann et al., J. Am. Chem. Soc. 94, 6171, 1972) and by proceeding as in operation 1, the compound (VII ′) was recovered from the methanol-diisopropyl ether mixture.

  
  <EMI ID = 110.1>

  
  <EMI ID = 111.1>

  
  <EMI ID = 112.1>

  
1 g (2.1 mmol) of Boc-Phe-Gly-NH- was treated
-NH-Z (VII ') for 30 minutes at room temperature

  
using 10 ml of a 1.3 N solution of hydrochloric acid in glacial acetic acid. Removal of the solvent in vacuo at 30 [deg.] C and milling the residue with diethyl ether gave 0.89 g of the compound (VIII '); point of

  
  <EMI ID = 113.1>

  
E1 2 = 0.88.

  
Operation 9. Boc-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (IX ') Starting with 1 g (5.3 mmol) of Boc-ala-OH and 2.09 g (5.1 mmol) of H-Phe-Gly-NH-NH-Z. HC1 (VIII '), and by proceeding as in operation 5, the compound (IX') was obtained from the methanol-diisopropyl ether mixture

  
  <EMI ID = 114.1>

  
Starting from 1 g (1.8 mmol) of Boc-ala-Phe-
-Gly-NH-NH-Z (IX ') and by proceeding as in operation 6,

  
  <EMI ID = 115.1>

  
  <EMI ID = 116.1>

  
1 Operation 11. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (XI ') Starting from 1 g (3.5 mmol) of Boc-Tyr-OH and

  
  <EMI ID = 117.1>

  
and by proceeding as in operation 5, 2.24 g of compound (XI) were obtained (crystallization from the methanol- <EMI ID = 118.1> <EMI ID = 119.1>

  
1 g (1.4 mmol) of Boc-Tyr-ala-
-Phe-Gly-NH-NH-Z (XI ') in 10 ml of methanol was hydrogenated at room temperature in the presence of 0.27 g of a 10% Pd / C catalyst. By proceeding as in operation 4, 0.64 g of the compound (XII ′) was obtained; melting point 148 [deg.] C;

  
  <EMI ID = 120.1>

  
Operation 13. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-
-Ser-NH-NH-Z (XIII ')

  
  <EMI ID = 121.1>
-30 [deg.] C 1.1 ml (4.38 mmol) of 4N hydrochloric acid in anhydrous tetrahydrofuran and 0.2 ml (1.93 mmol) of n-butyl nitrite. After stirring at the temperature of <EMI ID = 122.1> of N-methylmorpholine, followed by a cold solution (-30 [deg.] C) of 0.803 g (1.46 mmol) of H-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z. HCl
(VI ') and 0.16 ml (1.46 min.) Of N-methyl-morpholine in
15 ml of anhydrous dimethylformamide.

  
  <EMI ID = 123.1>

  
days, then the salts were removed by filtration, the solvent was removed in vacuo and the product was poured into a

  
  <EMI ID = 124.1>

  
the precipitate by filtration, washed until neutral with water and dried under vacuum. The product was recrystallized from the ethyl acetate-ether mixture

  
  <EMI ID = 125.1> Operation 14. H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-
-NH-NH-Z. HC1 (XIV ')

  
Starting from 1 g (0.95 mmol) of Boc-Tyr-ala-
-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z (XIII ') and by proceeding as in operation 2, 0.89 g of the compound (XIV') was obtained. <EMI ID = 126.1>

Operation 1. Boc-Tyr-NH-NH-Z (XV ')

  
To a solution of 1 g (3.55 mmol) of Boc-Tyr-
-OH in 20 ml of anhydrous tetrahydrofuran, was added

  
  <EMI ID = 127.1>

  
of N-methyl-morpholine and 0.48 ml (3.55 mmol) of iso-butyl chloroformate. After stirring at the temperature of <EMI ID = 128.1> the reaction mixture was stirred at -10 "C for 90 minutes, then filtered to separate the salts and evaporated in vacuo. The residue was dissolved in acetate of ethyl and washed several times successively with an aqueous acid solution

  
  <EMI ID = 129.1>

  
  <EMI ID = 130.1>

  
1 g (2.33 mmol) of Boc was dissolved
-Tyr-NH-NH-Z (XV ') in 10 ml of a 4 N acid solution

  
  <EMI ID = 131.1>

  
ambient temperature. After 30 minutes at this same temperature, the solvent was evaporated in vacuo and the product was precipitated from the isopropyl alcohol mixture.

  
  <EMI ID = 132.1>

  
_1 <EMI ID = 133.1>

  
Operation 3. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH-NH-Z

  
  <EMI ID = 134.1>

  
To a solution of 1 g (1.75 mmol) of Boc-Tyr-
-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (XII ') in 15 ml of anhydrous dimethylformamide, was successively added at a temperature of
-30 [deg.] C 1.1 ml (4.38 mmol) of 4N hydrochloric acid in anhydrous tetrahydrofuran and 0.2 ml (1.93 mmol) of n-butyl nitrite. After stirring at this temperature of
-30 [deg.] C for 30 minutes, 0.5 ml (4.38 mmol) of N-methylmorpholine was added, followed by a cold solution (-30 [deg.] C) of 0.535 g (1, 46 mmol) of H-Tyr-NH-NH-Z. HC1 (XVI ') and <EMI ID = 135.1>

  
anhydrous dimethylformamide. We let the mixture react

  
  <EMI ID = 136.1>

  
the salts, the solvent was removed in vacuo and the product was poured into a 10% aqueous citric acid solution

  
  <EMI ID = 137.1>

  
washed until neutral with water and dried

  
  <EMI ID = 138.1>

  
The product was recrystallized from the isopropyl alcohol-diethyl ether mixture; we got

  
  <EMI ID = 139.1>

  
Operation 4. H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH-NH-Z.

  
. HC1 (XVIII ')

  
Starting from 1 g (1.15 mmol) of Boc-Tyr-ala-
-Phe-Gly-NH-NH-Z (XVII ') and proceeding as in the operation

  
  <EMI ID = 140.1>

Example 8

  
  <EMI ID = 141.1>

  
  <EMI ID = 142.1>
-Gly-NH-NH-Z (XI '), and by proceeding as in operation 8 of Example 6, we obtained &#65533; from ethyl acetate <EMI ID = 143.1>

Example 9

  
  <EMI ID = 144.1>

Starting from 0.12 ml (1.3 mmol) of buty-ric acid and 0.742 g (1.3 mmol) of Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-

  
-NH2 (XII '), and by proceeding as in operation 1 of Example 6, 0.8 g of ethyl acetate was obtained. <EMI ID = 145.1>

  
  <EMI ID = 146.1>
-Phe-Gly-NH-NH-CO-CH2-CH2-CH3 (XX '), and proceeding as in operation 2 of Example 6, after purification on a silica gel chromatography column and eluting with the chloroform-methanol mixture = 9: 1, 0.58 g of the compound (XXI ') was obtained from the isopropyl alcohol-diethyl ether mixture; melting point 215 [deg.] - 218 [deg.] C <EMI ID = 147.1>

Example 10

  
Preparation of H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH - &#65533;
  <EMI ID = 148.1>
  <EMI ID = 149.1>

  
Operation 1. Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-tyr-
-Boc (XXII ')

  
  <EMI ID = 150.1>

  
and 2.03 µg (3.55 mmol) of Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2
(XII ') and by proceeding as in operation 1 of Example 6, 2.3 g of ethyl acetate were obtained.

  
  <EMI ID = 151.1>

  
Operation 2. H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-tyr-H.

  
  <EMI ID = 152.1>

  
Starting with 1 g (1.2 mmol) of Boc-Tyr-ala-

  
i -Phe-Gly-NH-NH-tyr-Boc (XXII '), and by proceeding as in operation 2 of Example 1, 0.760 g of compound (XXIII') was obtained from diethyl ether ; Fusion point <EMI ID = 153.1>

  
  <EMI ID = 154.1>

  
Using the classical solution method, the following other drifts were also synthesized:
XX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2.2 HCl

  
  <EMI ID = 155.1>

  
XXII) H-Tyr-ala-Phe-Sar-NH-NH-Z.HCl

  
m.p. 150 [deg.] - 155 [deg.] C (dec.) (Ethyl acetate);

  
  <EMI ID = 156.1>

  
m.p. 110 [deg.] - 115 [deg.] C (dec.) (Ethyl acetate-diether ether

  
  <EMI ID = 157.1>

  
  <EMI ID = 158.1>

  
m.p. 180 [deg.] - 183 [deg.] C (dec.) (Ethyl acetate);

  
  <EMI ID = 159.1>

  
  <EMI ID = 160.1>

  
XXVIII) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr (Bzl) -Pro-NH2

  
m.p. 143 [deg.] C (diethyl ether); RfB 0.47.

  
  <EMI ID = 161.1>

  
  <EMI ID = 162.1>

  
XXXIII) Boc-Tyr-ala - Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2

  
m.p. 156 [deg.] - 160 [deg.] C (dec.) (Ethyl acetate-ether

  
  <EMI ID = 163.1>

  
m.p. 203 [deg.] - 206 [deg.] C (dec.) (Diethyl ether);

  
  <EMI ID = 164.1>

  
m.p. 230 [deg.] C (dec.) (Diisopropyl ether);

  
RfE 0.47.

  
  <EMI ID = 165.1>

  
m.p. 245 [deg.] - 250 [deg.] C (dec.) (Diethyl ether-ether

  
  <EMI ID = 166.1>

  
m.p. 190 [deg.] - 195 [deg.] C (dec.) (Methyl alcohol-ether

  
  <EMI ID = 167.1>

  
XL) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Phe-Pro-Ser-NH2

  
m.p. 155 [deg.] - 160 [deg.] C (dec.) (Methyl alcohol-acetate

  
  <EMI ID = 168.1> <EMI ID = 169.1>

  
XLVI) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Trp-Pro-Ser-NH2

  
m.p. 175 [deg.] - 180 [deg.] C (dec.) (Methyl alcohol-acetate

  
  <EMI ID = 170.1>

  
  <EMI ID = 171.1>

  
m.p. 140 [deg.] - 145 [deg.] C (diethyl ether);

  
  <EMI ID = 172.1>

  
L) H - Tyr - ala - Phe - Gly - Leu - NH2. HCl

  
m.p. 143 [deg.] - 147 [deg.] C (isopropyl alcohol-ether

  
  <EMI ID = 173.1>

  
LII) H - Tyr - ala - Phe - Sar - Tyr - Pro - Ser - NH2 .HCl

  
m.p. 195 [deg.] - 200 [deg.] C (dec.) (Diethyl ether);

  
10 <EMI ID = 174.1> <EMI ID = 175.1>

  
  <EMI ID = 176.1>

  
LIV) H - Tyr - ala - Phe - Gly - Tyr - Pro - Ser - NHMe.HCl

  
m.p. 240 [deg.] C (dec.) (Diethyl ether);

  
  <EMI ID = 177.1> <EMI ID = 178.1>

  
LV) H - Tyr - ala - Phe - Gly - Tyr - Prc - Ser-NHEt.HCl

  
  <EMI ID = 179.1>

  
  <EMI ID = 180.1>

  
LVI) H - Tyr - ala - Phe - Gly - Tyr - Pro - Ser - OMe.HCl

  
m.p. 240 [deg.] (Dec.) (Diethyl ether); <EMI ID = 181.1>

  
LXI) H - Tyr - ala - Phe - Gly - NHNH Adoc

  
m.p. 142 [deg.] - 144 [deg.] C (dec.) (Isopropyl alcohol / ether

  
  <EMI ID = 182.1>

  
LXII) H - Tyr - ala - Phe - Gly - NHNHBoc

  
  <EMI ID = 183.1>

  
  <EMI ID = 184.1>

  
  <EMI ID = 185.1>

  

  <EMI ID = 186.1>
 

  

  <EMI ID = 187.1>

Claims (1)

<EMI ID=188.1> <EMI ID=189.1>  <EMI ID = 188.1> <EMI ID = 189.1> <EMI ID=190.1>  <EMI ID = 190.1> dans laquelle : in which : X est un atome d'hydrogène, un groupe protecteur de N- -terminal choisi dans le groupe comprenant des groupes de protection de type acyle, des groupes de protection de type uréthane aromatique, des groupes de protection de type alkyle, des groupes de protection de type uréthane aliphatique, ou, de manière équivalente, un résidu d'un L-amino acide naturel ou un dipeptide provenant de deux L-amino acides naturels dans lesquels le groupe amino libre peut être remplacé par l'un quelconque des groupes protecteurs de N-terminal cités ci-dessus, X is a hydrogen atom, a protecting group for N- -terminal selected from the group comprising acyl-type protection groups, aromatic urethane-type protection groups, alkyl-type protection groups, aliphatic urethane-type protection groups, or, equivalently, a residue of 'a natural L-amino acid or a dipeptide originating from two natural L-amino acids in which the free amino group can be replaced by any of the N-terminal protecting groups mentioned above, Y est un atome d'hydrogène ou un groupe de protection du Y is a hydrogen atom or a protecting group for groupe hydroxyle phénolique de tyrosine choisi dans le groupe comprenant les corps suivants : tétrahydropyranyle, tyrosine phenolic hydroxyl group chosen from the group comprising the following substances: tetrahydropyranyl, <EMI ID=191.1>  <EMI ID = 191.1> benzyle, benzyloxycarbonyle, 2-bromo-benzyloxycarbonyle, tert-butyloxycarbonyle, ou un acyle inférieur; benzyl, benzyloxycarbonyl, 2-bromo-benzyloxycarbonyl, tert-butyloxycarbonyl, or lower acyl; <EMI ID=192.1>  <EMI ID = 192.1> constituée par un alkylë inférieur ou un groupe thioalkyle inférieur ; consisting of lower alkyl or lower thioalkyl; B est un résidu de L-amino acide neutre, un résidu de B is a residue of neutral L-amino acid, a residue of glycine, ou un résidu d'un N-méthyl-amino acide ; glycine, or a residue of an N-methyl-amino acid; C est présent ou absent et, quand il est présent, il est It is present or absent and, when it is present, it is constitué par un résidu d'un amino acide, ce dernier étant consisting of a residue of an amino acid, the latter being <EMI ID=193.1>  <EMI ID = 193.1> acide, de l'une ou l'autre configuration L ou D, à condition qu'il ne soit pas basique ou acide, et à condition encore que dans le cas d'hydroxy-amino acides, le groupe hydroxy soit libre ou protégé par l'un des groupes de protection définis ci-dessus en Y, ou il peut être un résidu de di- ou tri-peptide, ce di- ou tri-peptide étant acid, of either L or D configuration, provided it is not basic or acid, and provided that in the case of hydroxy amino acids, the hydroxy group is free or protected by one of the protective groups defined above in Y, or it may be a residue of di- or tri-peptide, this di- or tri-peptide being <EMI ID=194.1> <EMI ID=195.1>  <EMI ID = 194.1> <EMI ID = 195.1> substitué, <EMI ID=196.1> - un aralkyle C(6-8), avantageusement un phényle, benzyle, phényléthyle ; substituted, <EMI ID = 196.1> - a C (6-8) aralkyl, advantageously a phenyl, benzyl, phenylethyl; <EMI ID=197.1>  <EMI ID = 197.1> - un atome d'hydrogène, - un alkyle C(1-10) linéaire ou ramifié, un cycloalkyle ou un aralkyle C(6-8), <EMI ID=198.1> - un groupe de type acyle linéaire, ramifié ou cyclique aliphatique ayant de 1 à 16 atomes de carbone, non substitue ou substitué par un groupement hydroxy, amino, alcoxy C(l-4) ou un atome d'halogène, - un groupe de type acyle aromatique, non substitué ou substitué par un groupement hydroxy, amino, un atome <EMI ID=199.1> - un groupe de type uréthane aromatique, les' sels pharmaceutiquement acceptables des substances que l'on vient de mentionner. - a hydrogen atom, - a linear or branched C (1-10) alkyl, a C (6-8) cycloalkyl or aralkyl, <EMI ID = 198.1> a group of linear, branched or cyclic aliphatic acyl type having from 1 to 16 carbon atoms, unsubstituted or substituted by a hydroxy, amino, C (1-4) alkoxy group or a halogen atom, - a group of aromatic acyl type, unsubstituted or substituted by a hydroxy or amino group, an atom <EMI ID = 199.1> - A group of aromatic urethane type, the 'pharmaceutically acceptable salts of the substances which have just been mentioned. Composé selon la revendication 1 dans lequel A est un résidu de D-amino acide choisi dans le groupe composé des corps suivants : ala, val, ile, leu, pro, ser, Compound according to Claim 1, in which A is a D-amino acid residue chosen from the group consisting of the following bodies: ala, val, ile, leu, pro, ser, <EMI ID=200.1>  <EMI ID = 200.1> 3[deg.]/ Composé selon l'une quelconque des revendications 1, 2 dans lequel B est un résidu d'un L-amino acide neutre choisi dans le groupe composé des corps suivants : 3 [deg.] / Compound according to any one of claims 1, 2 in which B is a residue of a neutral L-amino acid chosen from the group consisting of the following bodies: <EMI ID=201.1>  <EMI ID = 201.1> <EMI ID=202.1>  <EMI ID = 202.1> tions 1 à 3 dans lequel C est présent ou absent et, quand il est présent, il est constitué par un résidu : <EMI ID=203.1> 1 to 3 in which C is present or absent and, when it is present, it consists of a residue: <EMI ID = 203.1> <EMI ID=204.1>   <EMI ID = 204.1> substitué en para , le substituant étant choisi dans le groupe comprenant le chlore, le brome, le fluor, un groupement amino, un groupement nitro, substituted in para, the substituent being chosen from the group comprising chlorine, bromine, fluorine, an amino group, a nitro group, - d'un oc-imino acide choisi dans le groupe comprenant les corps suivants : Pro, 3-hydroxyproline, 4-hydroxyproline, acide pipécolique, acide 2-azëtidinecarboxylique, acide <EMI ID=205.1> propionique, acide &#65533;-aminobutyrique, - d'un N-méthyl amino acide choisi dans le groupe comprenant <EMI ID=206.1> - an oc-imino acid chosen from the group comprising the following bodies: Pro, 3-hydroxyproline, 4-hydroxyproline, pipecolic acid, 2-azetidinecarboxylic acid, acid <EMI ID = 205.1> propionic, acid & - 65533; - aminobutyric, - an N-methyl amino acid chosen from the group comprising <EMI ID = 206.1> N-méthyl-alanine, N-methyl-alanine, tous de configuration L ou D, all of L or D configuration, - d'un dipeptide choisi parmi les dipeptides résultant de <EMI ID=207.1> - a dipeptide chosen from the dipeptides resulting from <EMI ID = 207.1> amino acide qui sont définis ci-dessus, à condition que ces deux amino acides ne soient pas les mêmes, amino acids which are defined above, provided that these two amino acids are not the same, - d'un tripeptide choisi parmi les tripeptides J-L-M dans lesquels J est Tyr, Trp, Phe, Phg, hexahydro-Phe, Gly, Val et Phe substitué en para , le substituant étant choisi dans le groupe composé du chlore, du brome, du fluor, des groupements amino et nitro, - a tripeptide chosen from the tripeptides JLM in which J is Tyr, Trp, Phe, Phg, hexahydro-Phe, Gly, Val and Phe substituted in para, the substituent being chosen from the group consisting of chlorine, bromine, fluorine, amino and nitro groups, L est Val, Leu, Ile, Gly, Ala, Nva, Sar, MePhe, MeAla, un L is Val, Leu, Ile, Gly, Ala, Nva, Sar, MePhe, MeAla, un <EMI ID=208.1>  <EMI ID = 208.1> M est Ser, Hse, Thr, Abu, Gly pourvu que J soit différent de L et que L soit différent de M. M is Ser, Hse, Thr, Abu, Gly as long as J is different from L and L is different from M. 5[deg.]/ Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient comme ingrédient actif un composé de formule (I) tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4, avec un diluant ou un véhicule approprié. 5 [deg.] / Pharmaceutical composition characterized in that it contains as active ingredient a compound of formula (I) as defined in any one of claims 1 to 4, with a diluent or a suitable vehicle.
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