BE1028573B1 - Heterocyclic compounds used as a nitrification inhibitor - Google Patents

Description

Heterocyclische verbindingen gebruikt als nitrificatieremmer Beschrijving De onderhavige uitvinding heeft betrekking op het gebruik van een specifieke heterocy- clische verbinding als nitrificatieremmer of als stikstofstabilisator, op meststofmengsels die deze verbinding bevatten, op een procedé voor de bereiding ervan, en op de me- thode voor de bemesting van de bodem, met inbegrip van de toepassing ervan.Heterocyclic Compounds Used as Nitrification Inhibitor Description The present invention relates to the use of a specific heterocyclic compound as a nitrification inhibitor or as a nitrogen stabilizer, to fertilizer mixtures containing this compound, to a process for its preparation, and to the method for its soil fertilization, including its application.

Om planten in de land- of tuinbouw te voorzien van de stikstof die zij nodig hebben, worden vaak meststoffen gebruikt die ammoniumverbindingen bevatten.Fertilizers containing ammonium compounds are often used to provide plants in agriculture or horticulture with the nitrogen they need.

Met de uitvinding van het Haber-Bosch-proces in 1908 hebben meststoffen de Groene Revolutie in de jaren '50 en '60 gestimuleerd en bijgedragen tot de voeding van de ex- ponentieel groeiende wereldbevolking.With the invention of the Haber-Bosch process in 1908, fertilizers spurred the Green Revolution in the 1950s and 1960s and helped feed the exponentially growing world population.

Aangezien stikstof (N) een van de belangrijkste voedingsstoffen is voor planten om te groeien, verhoogde deze industriële synthese van ammoniak (NH3) de grenzen van de aarde om voedselgewassen te produceren.Since nitrogen (N) is one of the most important nutrients for plants to grow, this industrial synthesis of ammonia (NH3) pushed the Earth's limits to produce food crops.

De N- bronnen, voornamelijk ammonium (NH4+) en nitraat (NO3-), die voor de bemesting werden gebruikt, werden echter niet alleen door de planten gebruikt, maar lekten ook uit in het milieu of werden microbieel omgezet via de stikstofcyclus in ontoegankelijke N- vormen.However, the N sources, mainly ammonium (NH4+) and nitrate (NO3-), used for fertilization were not only used by the plants, but also leached into the environment or were microbially converted via the nitrogen cycle into inaccessible N - to shape.

Gemiddeld gaat er dus bijna 50% van de N-meststoffen verloren.On average, therefore, almost 50% of the N fertilizers are lost.

Bovendien leidt uitspoeling van N tot eutrofiëring van grondwater en vrij water en veroorzaakt het toxische algenbloei, verminderde waarde van recreatiewater of verontreiniging van drinkwater.In addition, leaching of N leads to eutrophication of groundwater and free water and causes toxic algal blooms, reduced value of recreational water or pollution of drinking water.

Microbiële omzetting in het broeikasgas N20 draagt sterk bij tot de opwar- ming van de aarde.Microbial conversion into the greenhouse gas N20 contributes strongly to global warming.

Met een wereldbevolking die tegen 2050 naar verwachting 9,7 mil- jard zal bedragen, verwacht de FAO echter dat de vraag naar meststoffen met 50% of meer zal toenemen.However, with the world population expected to reach 9.7 billion by 2050, the FAO expects demand for fertilizers to increase by 50% or more.

Daarom zijn mitigatiestrategieën belangrijk om de hoeveelheid N- uitstoot zo veel mogelijk te beperken.That is why mitigation strategies are important to limit the amount of N emissions as much as possible.

Eén aanpak is het remmen van de nitrificatie, d.w.z. de omzetting van NH4+ of NH3 in NO3-. In tegenstelling tot NO3- bindt het positief geladen NH4+ zich aan de negatief geladen bodemdeeltjes en zal het nauwelijks uit de bodem uitspoelen.One approach is to inhibit nitrification, i.e. the conversion of NH4+ or NH3 into NO3-. In contrast to NO3-, the positively charged NH4+ binds to the negatively charged soil particles and will hardly leach out of the soil.

Daarom heeft NH4+ de voorkeur als N-bron en moet het in de bodem beschikbaar worden gehouden voor op- name door planten.Therefore, NH4+ is the preferred N source and must be kept available in the soil for uptake by plants.

NH4+ kan echter worden omgezet in NO3- via nitrificatie, een mi- crobieel proces van de mondiale N-cyclus waarbij NH3, dat zich in een pH-afhankelijk evenwicht met NH4+ bevindt, door bodemmicro-organismen wordt omgezet in NO3- via nitriet (NO2-). Nitrificatie is dus een centrale stap die ervoor zorgt dat NH4+ in de N- cyclus terechtkomt en vervolgens wordt omgezet in ongewenste uitloogbare of vluchtige N-vormen. De eerste stap in de nitrificatie, de oxidatie van NH3, wordt in landbouwgronden en - substraten hoofdzakelijk uitgevoerd door ammonia-oxiderende bacteriën (AOB). Zij oxi- deren NH3 eerst tot hydroxylamine (NH2OH), wat wordt gekatalyseerd door het enzym ammonia-monooxygenase (AMO). Vervolgens katalyseert het enzym hydroxylamine oxidoreductase (HAO) de tweede stap: oxidatie van NH2OH tot nitriet (NO2-). In het verleden zijn verschillende organische en anorganische verbindingen geïdentifi- ceerd als nitrificatieremmers, maar slechts enkele daarvan worden momenteel in de handel gebracht, waaronder dicyaandiamide (DCD), nitrapyrine (2-chloor-6- (trichloormethyl)-pyridine) of 3,4-dimethylpyrazolfosfaat (DMPP). De doeltreffendheid van nitrificatieremmers kan echter variëren tussen verschillende stammen en geslach- ten. Daarom is het belangrijk het scala van toegepaste nitrificatieremmers uit te breiden.However, NH4+ can be converted to NO3- via nitrification, a microbial process of the global N cycle in which NH3, which is in a pH-dependent equilibrium with NH4+, is converted by soil microorganisms into NO3- via nitrite (NO2 -). Nitrification is thus a central step that ensures that NH4+ enters the N- cycle and is subsequently converted to undesirable leachable or volatile N-forms. The first step in nitrification, the oxidation of NH3, is mainly carried out in agricultural soils and substrates by ammonia-oxidizing bacteria (AOB). They first oxidize NH3 to hydroxylamine (NH2OH), which is catalyzed by the enzyme ammonia monooxygenase (AMO). Subsequently, the enzyme hydroxylamine oxidoreductase (HAO) catalyzes the second step: oxidation of NH2OH to nitrite (NO2-). Several organic and inorganic compounds have been identified in the past as nitrification inhibitors, but only a few of them are currently marketed, including dicyandiamide (DCD), nitrapyrine (2-chloro-6-(trichloromethyl)-pyridine) or 3,4 -dimethyl pyrazole phosphate (DMPP). However, the effectiveness of nitrification inhibitors may vary between different strains and genera. It is therefore important to expand the range of nitrification inhibitors used.

Een probleem bij het gebruik van pyrazoolverbindingen als nitrificatieremmers is hun hoge vluchtigheid. Wanneer meststofpreparaten die pyrazoolverbindingen bevatten worden opgeslagen, is er een voortdurend verlies van actieve stof als gevolg van ver- damping. Daarom moeten de pyrazoolverbindingen door middel van passende maatre- gelen in een niet-vluchtige vorm worden geformuleerd.A problem with the use of pyrazole compounds as nitrification inhibitors is their high volatility. When fertilizer preparations containing pyrazole compounds are stored, there is a constant loss of active substance due to evaporation. Therefore, the pyrazole compounds must be formulated in a non-volatile form by appropriate measures.

EP-B-1 120 388 beschrijft additiezouten in fosforzuur van 3,4-dimethylpyrazool en 4- chloor-3-methylpyrazool voor gebruik als nitrificatieremmer. Door de zoutvorm is het mogelijk de vluchtigheid aanzienlijk te verminderen.EP-B-1 120 388 describes addition salts in phosphoric acid of 3,4-dimethylpyrazole and 4-chloro-3-methylpyrazole for use as nitrification inhibitors. Due to the salt form it is possible to reduce the volatility considerably.

WO 96/24566 heeft betrekking op het gebruik van laag-volatiele pyrazoolderivaten met hydrofiele groepen als nitrificatieremmers. Als voorbeeld wordt 2-(N-3- methylpyrazool)barnsteenzuur (DMPSA) voorgesteld als nitrificatieremmer. Als geschik- te minerale meststoffen worden ammoniumhoudende nitraten, sulfaten of fosfaten ge- noemd.WO 96/24566 relates to the use of low volatility pyrazole derivatives with hydrophilic groups as nitrification inhibitors. As an example, 2-(N-3-methylpyrazole)succinic acid (DMPSA) is proposed as a nitrification inhibitor. Ammonium-containing nitrates, sulfates or phosphates are mentioned as suitable mineral fertilizers.

WO 2011/032904 en WO 2013/121384 beschrijven pyrazolderivaten als nitrificatierem- mers, waarvan DMPSA er een is.WO 2011/032904 and WO 2013/121384 describe pyrazole derivatives as nitrification inhibitors, of which DMPSA is one.

A. Saha et al. beschrijven in J. Heterocyclic. Chem, 47, 838 (2010) de groene synthese van 5-gesubstitueerde-1-3,4-thiadiazool-2-thiolen als nieuwe krachtige nitrificatierem- mers. De 1,3,4-thiaidazool-2-thiolen zijn 5-gesubstitueerd met alkyl- of arylresiduen. De verbindingen werden gescreend op hun in vitro nitrificatieremmende activiteit. Verbin- dingen die 5-gesubstitueerd zijn met heptyl, 2-chloorfenyl, 2,4-dichloorfenyl, 2- methylfenyl, 3-methylfenyl, 3,4-dimethoxyfenyl, 2-hydroxyfenyl, = 4-hydroxy-3- methoxyfenyl worden beschouwd als veelbelovende nitrificatieremmers.A. Saha et al. describe in J. Heterocyclic. Chem, 47, 838 (2010) the green synthesis of 5-substituted-1-3,4-thiadiazole-2-thiols as novel potent nitrification inhibitors. The 1,3,4-thiaidazole-2-thiols are 5-substituted with alkyl or aryl residues. The compounds were screened for their in vitro nitrification inhibitory activity. Compounds 5-substituted with heptyl, 2-chlorophenyl, 2,4-dichlorophenyl, 2-methylphenyl, 3-methylphenyl, 3,4-dimethoxyphenyl, 2-hydroxyphenyl, = 4-hydroxy-3-methoxyphenyl are considered to be promising nitrification inhibitors.

GMW. McCarty en J.M. Bremner beschrijven in Biol Fertil Soils (1989) 8:204-211, de remming van nitrificatie in de bodem door heterocyclische stikstofverbindingen. Pyra- zool, 1,2,4-triazool en benzotriazool worden beschreven als de meest effectieve nitrifi- catieremmers in de bodem. 1,3,4-thiadiazool-2-thiolen, 5-gesubstitueerd met NH2 of SH worden onthuld als structuren (41) en (42). Gesubstitueerde 1,3,4-thiadiazolen worden beschreven in de structuren (43), (44) en (45). De effecten van thiadiazolen op de nitri- ficatie van ammonium in de bodem zijn samengevat in tabel 7. De structuren (41) en (42) behoorden tot de actieve nitrificatieremmers, maar alleen 5-ethoxy-3- trichloormethyl-1,2,4-thiadiazool en 3,4-dichloor-1,2,5-thiadiazool werden als krachtige remmers beschouwd.GMW. McCarty and J.M. Bremner describe in Biol Fertil Soils (1989) 8:204-211, the inhibition of nitrification in soil by heterocyclic nitrogen compounds. Pyrazole, 1,2,4-triazole and benzotriazole are described as the most effective nitrification inhibitors in soil. 1,3,4-thiadiazole-2-thiols 5-substituted with NH2 or SH are revealed as structures (41) and (42). Substituted 1,3,4-thiadiazoles are described in structures (43), (44) and (45). The effects of thiadiazoles on ammonium nitrification in soil are summarized in Table 7. Structures (41) and (42) belonged to the active nitrification inhibitors, but only 5-ethoxy-3-trichloromethyl-1,2,4 -thiadiazole and 3,4-dichloro-1,2,5-thiadiazole were considered potent inhibitors.

WO 2005/007636 beschrijft 1,2,4-thiadiazool-thiolverbindingen als nitrificatieremmers. Er is een blijvende behoefte aan nieuwe nitrificatieremmers met een hoge nitrificatie- remmende werking, een lage toxiciteit en een lage vluchtigheid.WO 2005/007636 describes 1,2,4-thiadiazole thiol compounds as nitrification inhibitors. There is a continuing need for new nitrification inhibitors with high nitrification inhibition activity, low toxicity and low volatility.

Het doel van de onderhavige uitvinding is daarom nieuwe nitrificatieremmers te ver- schaffen die bij voorkeur een hoge nitrificatieremmende activiteit hebben.The object of the present invention is therefore to provide new nitrification inhibitors which preferably have a high nitrification inhibitory activity.

Een ander doel van de uitvinding is de ontwikkeling van een meststofmengsel dat een dergelijke nitrificatieremmer bevat, een methode voor de bereiding ervan en een me- thode voor de bemesting van de bodem met behulp van dit mengsel.Another object of the invention is the development of a fertilizer mixture containing such a nitrification inhibitor, a method for its preparation and a method for fertilizing the soil using this mixture.

De doelstellingen worden bereikt door het gebruik van een heterocyclische verbinding van de algemene formule (I)The objects are achieved by using a heterocyclic compound of the general formula (I)

NN + deNN + de

X (D met de volgende definities: XS of NRA, waarbij R4 H is of bij voorkeur c1-4-alkyl, R1 H of bij voorkeur C3-12-koolwaterstofresidu dat 1 tot 3 heteroatomen kan bevat- ten, gekozen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel, R2 Hof bij voorkeur C1-6-koolwaterstofresidu dat één heteroatoom kan bevatten, ge- kozen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel, of waarin R1 en R2 samen met het stikstofatoom dat hen verbindt, een verzadigde of on- verzadigde heterocyclische radicaal met vijf of zes leden vormen die naar keuze nog een of twee heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof en zwavel, en welke heterocyclische radicaal deel kan uitmaken van een C4- 20-koolwaterstofresidu dat naar keuze naast het stikstofatoom dat R1 en R2 verbindt, nog een tot vier heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stik- stof, zuurstof, zwavel en fluor, waarin R1 en R2 elk via een koolstofatoom verbonden zijn met het stikstofatoom in NR1R2 en waarin in R1 en R2 heteroatomen van hetzelfde chemische element niet naast elkaar liggen, R3H , c1-4alky, S-C1-4-alkyl, NR5R6 waarbij R5 en R6 onafhankelijk van elkaar H, c1-- alkyı, fenyl, fluorofenyl zijn, als nitrificatieremmer, bij voorkeur gericht tegen AOB en eventueel comammox.X (D with the following definitions: XS or NRA, where R4 is H or preferably C1-4 alkyl, R1 H or preferably C3-12 hydrocarbon residue which may contain 1 to 3 heteroatoms selected from the group nitrogen , oxygen and sulphur, R2 Hof preferably C1-6 hydrocarbon residue which may contain one heteroatom selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulphur, or wherein R1 and R2, together with the nitrogen atom connecting them, form a saturated or un- saturated five- or six-membered heterocyclic radical which may optionally contain one or two additional heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur and which heterocyclic radical may form part of a C4-20 hydrocarbon residue which may optionally be the nitrogen atom connecting R1 and R2 may contain another one to four heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen, sulfur and fluorine, wherein R1 and R2 are each linked through a carbon atom to the nitrogen atom in NR1R2 and wherein i n R1 and R2 heteroatoms of the same chemical element are not adjacent, R3H , c1-4alky, S-C1-4-alkyl, NR5R6 where R5 and R6 are independently H, c1-- alkyı, phenyl, fluorophenyl, as a nitrification inhibitor , preferably directed against AOB and possibly comammox.

Daarin fungeren de heterocyclische verbindingen van de algemene formule (I), met na- me de N-gesubstitueerde 3-(aminomethyl)-1,3,4-thiadiazool-2-ionverbindingen en N- gesubstitueerde 1-(aminomethyl})-1,2,4-triazool-5-ionverbindingen (of -3- ionverbindingen) als nitrificatieremmer op vaste of in vloeibare meststoffen. Zij onder- gaan geen tautomerisme vanwege de N-substituent in de ring. Bovendien fungeren ze ook als stikstofstabilisator in vloeibare meststoffen of mest. Meststoffen kunnen organi- sche en/of anorganische en/of organominerale meststoffen zijn.In it, the heterocyclic compounds of general formula (I), in particular the N-substituted 3-(aminomethyl)-1,3,4-thiadiazole-2-ion compounds and N-substituted 1-(aminomethyl})-1 ,2,4-triazole-5-ion compounds (or -3-ion compounds) as a nitrification inhibitor on solid or in liquid fertilizers. They do not undergo tautomerism due to the N substituent in the ring. In addition, they also act as a nitrogen stabilizer in liquid fertilizers or manure. Fertilizers can be organic and/or inorganic and/or organomineral fertilizers.

Het doel wordt verder bereikt door het gebruik van de heterocyclische verbinding van algemene formule (|) als additief of bekledingsmateriaal voor, bij voorkeur anorgani-The object is further achieved by using the heterocyclic compound of general formula (|) as an additive or coating material for, preferably inorganic

sche, meststoffen, bij voorkeur ammonium- en/of ureumhoudende stikstofhoudende meststoffen.chemical fertilizers, preferably ammonium and/or urea-containing nitrogen fertilizers.

Het doel wordt verder bereikt door het gebruik van de heterocyclische verbinding van algemene formule (I) voor het verminderen van de stikstof- of koolstofverliezen in anor- 5 ganische en/of organische en/of organinerale meststoffen of stikstof- of koolstofhou- dende verbindingen of materialen en ook op oogstafval en weidegrond of tijdens de op- slag van vloeibare mest, en voor het verminderen van de ammoniakbelasting in dieren- stallen.The object is further achieved by using the heterocyclic compound of general formula (I) for reducing the nitrogen or carbon losses in inorganic and/or organic and/or organineral fertilizers or nitrogen or carbon containing compounds or materials and also on harvest waste and pasture land or during the storage of liquid manure, and for reducing the ammonia load in animal stables.

Het kan voorts voordelig zijn om de heterocyclische verbinding van algemene formule (N) nitrificatieremmer te gebruiken in combinatie met een aanvullend agrochemisch mid- del, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit - ten minste één andere nitrificatieremmer, bij voorkeur gekozen uit de groep be- staande uit 2-(3,4-dimethyl-pyrazol-1-yl)-barnsteenzuur (DMPSA), 3,4-dimethylpyrazool (DMP), 3,4-dimethylpyrazoolfosfaat (DMPP) dicyaandiamide (DCD), 1H-1,2,4-triazool, 3-methylpyrazool (3-MP), 2-chloor-6-(trichloormethyl)-pyridine, 5-ethoxy-3- trichloormethyl-1,2,4-thiadiazol, 2-amino-4-chloor-6-methyl-pyrimidine, 2-mercapto- benzothiazool, 2-sulfanilamidothiazool, thioureum, natriumazide, kaliumazide, 1- hydroxypyrazool, 2-methylpyrazool-1-carboxamide, 4-amino-1,2,4-triazool, 3-mercapto- 1,2,4-triazool, 2,4-diamino-6-trichloormethyl-5-triazine, koolstofbisulfide, ammoniumthi- osulfaat, natriumtrithiocarbonaat, 2,3-dinydro-2,2-dimethyl-7- benzofuranolmethylcarbamaat en N-(2,6-dimethylfenyl)-N-(methoxyacetyl)-alanine- methylester, AOA- of comammoxremmers, - ten minste één ureaseremmer, bij voorkeur gekozen uit N- butylthiofosforzuurtriamide (NBTPT) en/of N-n-propylthiofosforzuurtriamide (NPTPT), - ten minste één gebruikelijke agrochemische hulpstof, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit waterige en/of organische oplosmiddelen, pH-regelaars, oppervlak- teactieve stoffen, bevochtigingsmiddelen, spreidingsmiddelen, adhesiebevorderaars, dragers, vulstoffen, viscositeitsregelaars, emulgatoren, dispergeermiddelen, se- questreermiddelen antizinkmiddelen, coalescentiemiddelen, reologiemodificatoren, anti- schuimmiddelen, fotobeschermingsmiddelen, antivriesmiddelen, biostimulanten, pesti- ciden, biociden, plantengroeiregulatoren, beschermstoffen, penetrerende middelen, an- tiklontermiddelen, minerale en/of plantaardige oliën en/of wassen, kleurstoffen en drift- werende middelen,It may furthermore be advantageous to use the heterocyclic compound of general formula (N) nitrification inhibitor in combination with an additional agrochemical, preferably selected from the group consisting of - at least one other nitrification inhibitor, preferably selected from the group be - consisting of 2-(3,4-dimethyl-pyrazol-1-yl)-succinic acid (DMPSA), 3,4-dimethylpyrazole (DMP), 3,4-dimethylpyrazole phosphate (DMPP) dicyandiamide (DCD), 1H-1, 2,4-triazole, 3-methylpyrazole (3-MP), 2-chloro-6-(trichloromethyl)-pyridine, 5-ethoxy-3-trichloromethyl-1,2,4-thiadiazole, 2-amino-4-chloro -6-methyl-pyrimidine, 2-mercapto-benzothiazole, 2-sulfanilamidothiazole, thiourea, sodium azide, potassium azide, 1-hydroxypyrazole, 2-methylpyrazole-1-carboxamide, 4-amino-1,2,4-triazole, 3-mercapto - 1,2,4-triazole, 2,4-diamino-6-trichloromethyl-5-triazine, carbon bisulfide, ammonium thiosulfate, sodium trithiocarbonate, 2,3-dinydro-2,2-dimethyl-7-benzofuranol methylcarbamate and N-( 2,6-dimethyl phenyl)-N-(methoxyacetyl)-alanine methyl ester, AOA or comammox inhibitors, - at least one urease inhibitor, preferably selected from N-butylthiophosphoric acid triamide (NBTPT) and/or N-n-propylthiophosphoric acid triamide (NPPTT), - at least one common agrochemical adjuvant, preferably selected from the group consisting of aqueous and/or organic solvents, pH regulators, surfactants, wetting agents, spreading agents, adhesion promoters, carriers, fillers, viscosity regulators, emulsifiers, dispersants, sequestering agents anti-zinc agents, coalescing agents, rheology modifiers , anti-foaming agents, photoprotectants, anti-freezing agents, biostimulants, pesticides, biocides, plant growth regulators, protective substances, penetrants, anti-caking agents, mineral and/or vegetable oils and/or waxes, dyes and anti-drift agents,

en mengsels daarvan.and mixtures thereof.

Wanneer de aanvullende nitrificatieremmer wordt gebruikt, is de gewichtsverhouding tussen de heterocyclische verbinding van algemene formule (I) en de aanvullende nitri- ficatieremmer bij voorkeur 0,1 tot 10 : 1, bij voorkeur 0,2 tot 5 : 1, en het meest bij voor- keur05tot2 1.When the additional nitrification inhibitor is used, the weight ratio between the heterocyclic compound of general formula (I) and the additional nitrification inhibitor is preferably 0.1 to 10:1, preferably 0.2 to 5:1, most preferably preference05to2 1.

Daarom kan de nitrificatieremmer volgens de onderhavige uitvinding voordelig worden gebruikt samen met of gecombineerd met of vermengd met andere nitrificatieremmers die bij voorkeur ammoniakoxiderende bacteriën (AOB) of archae (AOA) of volledige ammoniakoxidatiebacteriën (comammox) remmen.-* Voorts kan, vooral wanneer de anorganische meststof ureum bevat, de nitrificatierem- mer ook worden gebruikt samen met of in combinatie met een ureaseremmer, die bij voorkeur wordt gekozen uit N-n-butylthiofosfortriamide (NBTPT of NBPT) en/of N-n- propylthiofosfortriamide (NPTPT of NPPT).Therefore, the nitrification inhibitor of the present invention can be advantageously used together with or combined with or mixed with other nitrification inhibitors that preferentially inhibit ammonia oxidizing bacteria (AOB) or archae (AOA) or complete ammonia oxidation bacteria (comammox).-* Furthermore, especially when the inorganic fertilizer contains urea, the nitrification inhibitor may also be used together with or in combination with a urease inhibitor, which is preferably selected from N-n-butylthiophosphoric triamide (NBTPT or NBPT) and/or N-n-propylthiophosphoric triamide (NPTPT or NPPT).

Indien de heterocyclische verbinding van algemene formule (I) van de onderhavige uit- vinding gecombineerd wordt met N-n-butylthiofosfortriamide (NBTPT) en/of N-n- propylthiofosfortriamide (NPTPT), ligt de gewichtsverhouding tussen nitrificatierem- mer(s) en ureaseremmer bij voorkeur tussen 0,1 en 10 : 1, bij voorkeur tussen 0,5 en 8 : 1, en bij voorkeur tussen 1 en 6 : 1.If the heterocyclic compound of general formula (I) of the present invention is combined with N-n-butylthiophosphoric triamide (NBTPT) and/or N-n-propylthiophosphoric triamide (NPPTT), the weight ratio between nitrification inhibitor(s) and urease inhibitor is preferably between 0.1 and 10:1, preferably between 0.5 and 8:1, and preferably between 1 and 6:1.

Daarom heeft de uitvinding ook betrekking op een mengsel dat ten minste één hetero- cyclische verbinding van de algemene formule (I) bevatTherefore, the invention also relates to a mixture containing at least one heterocyclic compound of the general formula (I).

NN A peNN A pe

X (D met de volgende definities: XS of NR4, waarbij R4 c1-4-alky IS, R1C3-12-koolwaterstofresidu dat 1 tot 3 heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel,X (D with the following definitions: XS or NR4, where R4 is c1-4-alky, R1C3-12 hydrocarbon residue which may contain 1 to 3 heteroatoms selected from the group of nitrogen, oxygen and sulphur,

R2C1-6-koolwaterstofresidu dat één heteroatoom kan bevatten, gekozen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel, of waarin R1 en R2 samen met het stikstofatoom dat hen verbindt, een verzadigde of on- verzadigde heterocyclische radicaal met vijf of zes leden vormen die naar keuze nog een of twee heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof en zwavel, en welke heterocyclische radicaal deel kan uitmaken van een C4- 20-koolwaterstofresidu dat naar keuze naast het stikstofatoom dat R1 en R2 verbindt, nog een tot vier heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stik- stof, zuurstof, zwavel en fluor, waarin R1 en R2 elk via een koolstofatoom verbonden zijn met het stikstofatoom in NR1R2 en waarin in R1 en R2 heteroatomen van hetzelfde chemische element niet naast elkaar liggen, R3H , c1-4alky, S-C1-4-alkyl, NR5R6 waarbij R5 en R6 onafhankelijk van elkaar H, c1-- ally, fenyl, fluorofenyl zijn, en ten minste één aanvullend agrochemisch agens, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit - ten minste één andere nitrificatieremmer, bij voorkeur gekozen uit de groep be- staande uit 2-(3,4-dimethyl-pyrazol-1-yl)-barnsteenzuur (DMPSA), 3,4-dimethylpyrazool (DMP), 3,4-dimethylpyrazoolfosfaat (DMPP) dicyaandiamide (DCD), 1H-1,2,4-triazool, 3-methylpyrazool (3-MP), 2-chloor-6-(trichloormethyl)-pyridine, 5-ethoxy-3- trichloormethyl-1,2,4-thiadiazol, 2-amino-4-chloor-6-methyl-pyrimidine, 2-mercapto- benzothiazool, 2-sulfanilamidothiazool, thioureum, natriumazide, kaliumazide, 1- hydroxypyrazool, 2-methylpyrazool-1-carboxamide, 4-amino-1,2,4-triazool, 3-mercapto- 1,2,4-triazool, 2.,4-diamino-6-trichloormethyl-5-triazine, koolstofbisulfide, ammoniumthi- osulfaat, natriumtrithiocarbonaat, 2,3-dinydro-2,2-dimethyl-7- benzofuranolmethylcarbamaat en N-(2,6-dimethylfenyl)-N-(methoxyacetyl)-alanine- methylester, - ten minste één ureaseremmer, bij voorkeur gekozen uit N- butylthiofosforzuurtriamide (NBTPT) en/of N-n-propylthiofosforzuurtriamide (NPTPT), - ten minste één gebruikelijke agrochemische hulpstof, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit waterige en/of organische oplosmiddelen, pH-regelaars, oppervlak-R2C1-6 hydrocarbon residue which may contain one heteroatom selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulphur, or wherein R1 and R2, together with the nitrogen atom connecting them, form a five or six membered saturated or unsaturated heterocyclic radical which may optionally contain one or two further heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulphur, and which heterocyclic radical may form part of a C4-20 hydrocarbon residue which may optionally contain, in addition to the nitrogen atom linking R1 and R2, one further to may contain four heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen, sulfur and fluorine, in which R1 and R2 are each linked through a carbon atom to the nitrogen atom in NR1R2 and in which R1 and R2 contain heteroatoms of the same chemical element not adjacent to each other lie, R3H, c1-4alky, S-C1-4-alkyl, NR5R6 where R5 and R6 are independently H, c1--ally, phenyl, fluorophenyl, and at least one additional agrochemical agent, preferably selected from the group consisting of - at least one other nitrification inhibitor, preferably selected from the group consisting of 2-(3,4-dimethyl-pyrazol-1-yl)-succinic acid (DMPSA), 3,4- dimethylpyrazole (DMP), 3,4-dimethylpyrazole phosphate (DMPP) dicyandiamide (DCD), 1H-1,2,4-triazole, 3-methylpyrazole (3-MP), 2-chloro-6-(trichloromethyl)-pyridine, 5 -ethoxy-3-trichloromethyl-1,2,4-thiadiazole, 2-amino-4-chloro-6-methyl-pyrimidine, 2-mercaptobenzothiazole, 2-sulfanilamidothiazole, thiourea, sodium azide, potassium azide, 1-hydroxypyrazole, 2 -methylpyrazole-1-carboxamide, 4-amino-1,2,4-triazole, 3-mercapto-1,2,4-triazole, 2,4-diamino-6-trichloromethyl-5-triazine, carbon disulfide, ammonium thio- o sulfate, sodium trithiocarbonate, 2,3-dinydro-2,2-dimethyl-7-benzofuranol methylcarbamate and N-(2,6-dimethylphenyl)-N-(methoxyacetyl)-alanine methyl ester, - at least one urease inhibitor, preferably selected from N-butylthiophosphoric acid triamide (NBTPT) and/or N-n-propylthiophosphoric acid tr iamide (NPPTT), - at least one common agrochemical adjuvant, preferably selected from the group consisting of aqueous and/or organic solvents, pH regulators, surfactants

teactieve stoffen, bevochtigingsmiddelen, spreidingsmiddelen, adhesiebevorderaars, dragers, vulstoffen, viscositeitsregelaars, emulgatoren, dispergeermiddelen, se- questreermiddelen antizinkmiddelen, coalescentiemiddelen, reologiemodificatoren, anti- schuimmiddelen, fotobeschermingsmiddelen, antivriesmiddelen, biostimulanten, pesti- ciden, biociden, plantengroeiregulatoren, beschermstoffen, penetrerende middelen, an- tiklontermiddelen, minerale en/of plantaardige oliën en/of wassen, kleurstoffen en drift- werende middelen, en mengsels daarvan.surfactants, wetting agents, spreading agents, adhesion promoters, carriers, fillers, viscosity regulators, emulsifiers, dispersants, sequestering agents anti-zinc agents, coalescing agents, rheology modifiers, anti-foaming agents, photoprotectants, antifreezes, biostimulants, pesticides, biocides, plant growth regulators, safeners, penetrants , anti-caking agents, mineral and/or vegetable oils and/or waxes, dyes and anti-drift agents, and mixtures thereof.

Een combinatie met ten minste één andere nitrificatieremmer en/of ureaseremmer ver- dient de voorkeur.A combination with at least one other nitrification inhibitor and/or urease inhibitor is preferred.

Volgens de onderhavige uitvinding zijn de heterocyclische verbindingen van algemene formule (I) sterke nieuwe nitrificatieremmers, die gericht zijn tegen micro-organismen en bij voorkeur tegen ammoniak-oxiderende bacteriën (AOB) en mogelijk ook ammoniak- oxiderende archaea (AOA) en/of comammoxbacteriën. Zij kunnen worden gecombi- neerd met bekende nitrificatieremmers en/of ueaseremmers.According to the present invention, the heterocyclic compounds of general formula (I) are strong new nitrification inhibitors, which are directed against microorganisms and preferably against ammonia-oxidizing bacteria (AOB) and possibly also ammonia-oxidizing archaea (AOA) and/or comammox bacteria . They can be combined with known nitrification inhibitors and/or uease inhibitors.

Het nieuwe type nitrificatieremmers is in staat de nitrificatie vooral in de bodem te rem- men.The new type of nitrification inhibitors is able to inhibit nitrification, especially in the soil.

Volgens de onderhavige uitvinding kan een heterocyclische verbinding van algemene formule (I)According to the present invention, a heterocyclic compound of general formula (I)

NN A peNN A pe

X (D met de volgende definities: XS of NRA, waarbij R4 H is of bij voorkeur c1-4-alkyl, R1 H of bij voorkeur C3-12-koolwaterstofresidu dat 1 tot 3 heteroatomen kan bevat- ten, gekozen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel,X (D with the following definitions: XS or NRA, where R4 is H or preferably C1-4 alkyl, R1 H or preferably C3-12 hydrocarbon residue which may contain 1 to 3 heteroatoms selected from the group nitrogen , oxygen and sulfur,

R2 Hof bij voorkeur C1-6-koolwaterstofresidu dat één heteroatoom kan bevatten, ge- kozen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel, of waarin R1 en R2 samen met het stikstofatoom dat hen verbindt, een verzadigde of on- verzadigde heterocyclische radicaal met vijf of zes leden vormen die naar keuze nog een of twee heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof en zwavel, en welke heterocyclische radicaal deel kan uitmaken van een C4- 20-koolwaterstofresidu dat naar keuze naast het stikstofatoom dat R1 en R2 verbindt, nog een tot vier heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stik- stof, zuurstof, zwavel en fluor, waarin R1 en R2 elk via een koolstofatoom verbonden zijn met het stikstofatoom in NR1R2 en waarin in R1 en R2 heteroatomen van hetzelfde chemische element niet naast elkaar liggen, R3H , c1-4alky, S-C1-4-alkyl, NR5R6 waarbij R5 en R6 onafhankelijk van elkaar H, c1-- ally, fenyl, fluorofenyl zijn, wordt gebruikt als nitrificatieremmer, bij voorkeur in combinatie met een meststof, bij voorkeur een (ammonium)stikstofhoudende meststof, bijvoorbeeld een vaste of vloeiba- re anorganische, organische en/of organominerale meststof, of mest. De heterocycli- sche verbinding wordt bijvoorbeeld gebruikt als nitrificatieremmer op vaste meststoffen, of wordt gebruikt als nitrificatieremmer of als stikstofstabilisator in vloeibare organische of anorganische of organominerale meststoffen of mest.R2 Hof preferably C1-6 hydrocarbon residue which may contain one heteroatom selected from the group of nitrogen, oxygen and sulphur, or wherein R1 and R2, together with the nitrogen atom connecting them, form a saturated or unsaturated five-membered heterocyclic radical or six members which may optionally contain one or two additional heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulphur, and which heterocyclic radical may form part of a C4-20 hydrocarbon residue optionally adjacent to the nitrogen atom containing R1 and R2 may contain one to four additional heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen, sulfur and fluorine, wherein R1 and R2 are each linked through a carbon atom to the nitrogen atom in NR1R2 and wherein R1 and R2 contain heteroatoms of the same chemical element not adjacent, R3H, c1-4alky, S-C1-4-alkyl, NR5R6 where R5 and R6 are independently H, c1-- ally, phenyl, fluorophenyl, is used as nitrifics tie inhibitor, preferably in combination with a fertilizer, preferably a (ammonium) nitrogen-containing fertilizer, for example a solid or liquid inorganic, organic and/or organomineral fertilizer, or manure. For example, the heterocyclic compound is used as a nitrification inhibitor on solid fertilizers, or is used as a nitrification inhibitor or nitrogen stabilizer in liquid organic or inorganic or organomineral fertilizers or manure.

De heterocyclische verbindingen van de algemene formule (I) zijn meestal op zich be- kend en kunnen worden gesynthetiseerd volgens standaardtechnieken. Zij zijn gedeel- telijk commercieel verkrijgbare verbindingen en kunnen worden verkregen bij ENAMINE Ltd. UkrOrgSynthesis Ltd., of Vitas-M Laboratory, Ltd., of bij Merck Millipore, Burling- ton, MA, USA, of Merck KGaA.The heterocyclic compounds of general formula (I) are mostly known per se and can be synthesized according to standard techniques. They are partly commercially available compounds and can be obtained from ENAMINE Ltd. UkrOrgSynthesis Ltd., or Vitas-M Laboratory, Ltd., or from Merck Millipore, Burlington, MA, USA, or Merck KGaA.

In de algemene formule (I) is X S of NRA, waarbij R4 H of c1-4alky IS.In the general formula (I), X is S or NRA, where R4 IS H or c1-4alky.

Wanneer X S is, zijn de verbindingen N-gesubstitueerde 3-(aminomethyl)-1,3,4- thiadiazool-2-thionverbindingen. Wanneer X NR4 is, zijn de verbindingen van algemene formule (1) N-gesubstitueerde 1-(aminomethyl)-1,2,4-triazool-5-thionverbindingen (of -3- thionverbindingen). In deze verbindingen is de aminogroep van het aminomethylresidu N-gesubstitueerd, zoals blijkt uit algemene formule (I).When X is S, the compounds are N-substituted 3-(aminomethyl)-1,3,4-thiadiazole-2-thione compounds. When X is NR4, the compounds of general formula (1) are N-substituted 1-(aminomethyl)-1,2,4-triazole-5-thione compounds (or -3-thione compounds). In these compounds, the amino group of the aminomethyl residue is N-substituted as shown by general formula (I).

Beide soorten verbindingen zijn krachtige nitrificatieremmers. Aangezien de 1,3,4-thiadiazool-2-thionverbindingen een 3-aminomethylsubstituent be- vatten, kunnen zij geen tautomerisme van de thionfunctie ondergaan. Hetzelfde geldt voor de 1,2,4-triazool-5-thionverbinding. Daarom kan er geen thiol-thione tautomerisme optreden, in tegenstelling tot de verbindingen van formule (Il) van WO 2005/007636 A1. In de verbindingen van de algemene formule (I) zijn sommige van de residuen koolwa- terstofresiduen. Koolwaterstofresiduen zijn samengesteld uit waterstof- en koolstofato- men. Zij kunnen verzadigd, onverzadigd of aromatisch zijn. Bovendien kunnen zij de heteroatomen bevatten die hierboven zijn genoemd. De koolwaterstofresiduen kunnen lineair, vertakt of cyclisch zijn, of kunnen een lineair of vertakt residu en een cyclisch residu in dezelfde structuur bevatten.Both types of compounds are potent nitrification inhibitors. Since the 1,3,4-thiadiazole-2-thione compounds contain a 3-aminomethyl substituent, they cannot undergo tautomerism of the thion function. The same is true for the 1,2,4-triazole-5-thione compound. Therefore, thiol-thione tautomerism cannot occur, unlike the compounds of formula (II) of WO 2005/007636 A1. In the compounds of general formula (I), some of the residues are hydrocarbon residues. Hydrocarbon residues are composed of hydrogen and carbon atoms. They can be saturated, unsaturated or aromatic. In addition, they may contain the heteroatoms mentioned above. The hydrocarbon residues may be linear, branched or cyclic, or may contain a linear or branched residue and a cyclic residue in the same structure.

Als er meer dan één heteroatoom in de structuur aanwezig is, zijn heteroatomen van hetzelfde type niet direct covalent met elkaar verbonden. Bij voorkeur zijn de heteroa- tomen niet direct covalent verbonden met andere heteroatomen, maar doorsnijden Zij het koolwaterstofresidu. Daarom zijn de heteroatomen bij voorkeur niet-aangrenzend. Daarom liggen in R1 en R2 heteroatomen van hetzelfde chemische element niet naast elkaar. Bij voorkeur zijn in R1 en R2 de heteroatomen niet direct met elkaar verbonden. De verbinding van algemene formule (I) bevat bij voorkeur twee of drie cyclische struc- turen die bovendien al dan niet gecondenseerd kunnen zijn. De cyclische structuren zijn bij voorkeur vijf- of zesledig. De in algemene formule (I) afgebeelde cyclische structuur is een van de cyclische structuren die de verbinding van algemene formule (I) vormen. Gecondenseerde cyclische structuren zijn cyclische structuren waarbij twee cyclische structuren twee chemische elementen, bij voorkeur twee koolstofatomen, in hun respec- tieve ringstructuren gemeen hebben.If more than one heteroatom is present in the structure, heteroatoms of the same type are not directly covalently linked. Preferably, the heteroatoms are not directly covalently linked to other heteroatoms, but they intersect the hydrocarbon residue. Therefore, the heteroatoms are preferably non-adjacent. Therefore, in R1 and R2, heteroatoms of the same chemical element are not adjacent to each other. Preferably, the heteroatoms in R1 and R2 are not directly linked. The compound of general formula (I) preferably contains two or three cyclic structures which may additionally be condensed or not. The cyclic structures are preferably five- or six-membered. The cyclic structure depicted in general formula (I) is one of the cyclic structures constituting the compound of general formula (I). Condensed cyclic structures are cyclic structures in which two cyclic structures share two chemical elements, preferably two carbon atoms, in their respective ring structures.

De cyclische structuur weergegeven in algemene formule (I) kan niet worden gecon- denseerd met een andere cyclische structuur. Derhalve kunnen alleen indien naast de in algemene formule (|) weergegeven cyclische structuur twee cyclische structuren aanwezig zijn, deze twee extra cyclische structuren worden gecondenseerd. De aanvul- lende cyclische structuren kunnen verzadigd, onverzadigd of aromatisch zijn. Indien twee gecondenseerde cyclische structuren aanwezig zijn, is het mogelijk dat één cycli- sche structuur aromatisch is en de andere cyclische structuur niet-aromatisch is.The cyclic structure shown in general formula (I) cannot be condensed with any other cyclic structure. Therefore, only if two cyclic structures are present in addition to the cyclic structure shown in general formula (|), can these two additional cyclic structures be condensed. The additional cyclic structures may be saturated, unsaturated or aromatic. If two fused cyclic structures are present, it is possible for one cyclic structure to be aromatic and the other cyclic structure to be non-aromatic.

Als twee extra cyclische structuren niet gecondenseerd zijn, kunnen zij direct covalent met elkaar verbonden zijn. Als alternatief kunnen zij worden verbonden door een af- standsbus die koolstofatomen, heteroatomen of beide kan bevatten. De afstandsbus kan bijvoorbeeld een C1-6-alkyleengroep zijn, een heteroatoom gekozen uit de groep bestaande uit zuurstof, zwavel en stikstof, of de afstandsbus kan bijvoorbeeld een amidogroep -C(=0)-NH- zijn. Indien de cyclische groepen verbonden zijn door een stik- stofatoom, is dit stikstofatoom bij voorkeur -NH- of -NR- waarbij R c1-4alky is, en R bij voorkeur methyl of ethyl. Bij voorkeur zijn R1, R2 en R4 niet H.If two additional cyclic structures are not condensed, they can be directly covalently linked. Alternatively, they may be connected by a spacer which may contain carbon atoms, heteroatoms, or both. The spacer can be, for example, a C1-6 alkylene group, a heteroatom selected from the group consisting of oxygen, sulfur and nitrogen, or the spacer can be, for example, an amido group -C(=O)-NH-. If the cyclic groups are connected through a nitrogen atom, this nitrogen atom is preferably -NH- or -NR- where R is C 1-4 alkyl, and R is preferably methyl or ethyl. Preferably R1, R2 and R4 are not H.

Bij voorkeur is R4 c1-3-aiky1, bij voorkeur methyl of ethyl. Bij voorkeur is R3 H, c1-3-alky1 Of S- C1-3-alkyl. Meer bij voorkeur is R3 H, methyl, ethyl, S-CH3 of S-C2H5, meest bij voor- keur H of methyl.Preferably R4 is C1-3-alkyl, preferably methyl or ethyl. Preferably R3 is H, C1-3 alkyl or S-C1-3 alkyl. More preferably R3 is H, methyl, ethyl, S-CH3 or S-C2H5, most preferably H or methyl.

In NRSR6 is R5 bij voorkeur H of methyl. R6 is bij voorkeur c1-4-aiky1, fenyl of fluorfenyl. R1 is bij voorkeur een C4-10-koolwaterstofresidu dat één of twee heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel. Meer bij voorkeur is R1 een C4-8-koolwaterstofresidu met N en optioneel nog een heteroatoom, gekozen uit de groep stikstof en zwavel als heteroatomen.In NRSR6, R5 is preferably H or methyl. R6 is preferably C1-4 alkyl, phenyl or fluorophenyl. R1 is preferably a C4-10 hydrocarbon residue which may contain one or two heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur. More preferably, R1 is a C4-8 hydrocarbon residue containing N and optionally another heteroatom selected from the group consisting of nitrogen and sulfur as heteroatoms.

R2 is bij voorkeur c1-6-aikyi Of C3-6-cycloalkyl dat één heteroatoom kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof en zwavel. Meer bij voorkeur is R2 c1-4-alkyl dat één heteroatoom kan bevatten, gekozen uit S.R2 is preferably C1-6 alkyl or C3-6 cycloalkyl which may contain one heteroatom selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur. More preferably R2 is C1-4 alkyl which may contain one heteroatom selected from S.

In een bijkomende belichaming vormen R1 en R2 samen met een stikstofatoom dat hen verbindt een 5- of bij voorkeur 6-ledig verzadigd of onverzadigd heterocyclisch radicaal. In deze belichaming vormen R1 en R2 bij voorkeur samen met een stikstofatoom dat hen verbindt, een verzadigde of onverzadigde heterocyclische radicaal met 5 of bij voorkeur 6 leden die naar keuze ook een ander heteroatoom kan bevatten dat wordt gekozen uit de groep bestaande uit stikstof en zuurstof, en die deel kan uitmaken van een C4-20-koolwaterstofresidu dat zelf (in totaal) 1 tot 4 heteroatomen kan bevatten die worden gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof, zwavel en fluor, naast het stikstofatoom dat R1 en R2 verbindt.In an additional embodiment, R 1 and R 2 together with a nitrogen atom connecting them form a 5 or preferably 6 membered saturated or unsaturated heterocyclic radical. In this embodiment R1 and R2 preferably together with a nitrogen atom connecting them form a saturated or unsaturated heterocyclic radical with 5 or preferably 6 members which may optionally also contain another heteroatom selected from the group consisting of nitrogen and oxygen , and which may be part of a C4-20 hydrocarbon residue which may itself contain (in total) from 1 to 4 heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen, sulfur and fluorine, in addition to the nitrogen atom connecting R1 and R2.

Meer bij voorkeur vormen R1 en R2 samen met het stikstofatoom dat hen verbindt, het verzadigde of onverzadigde structuurelementMore preferably, R1 and R2, together with the nitrogen atom connecting them, form the saturated or unsaturated structural element

— N > me © me N or or die deel kunnen uitmaken van een C4-20-koolwaterstofresidu dat naast het stikstof- atoom dat R1 en R2 verbindt, 1 tot 4 heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof, zwavel en fluor. De afgebeelde structuren kunnen dus al dan niet C=C- of C=N-bindingen bevatten.— N > me © me N or or which may be part of a C4-20 hydrocarbon residue which, in addition to the nitrogen atom connecting R1 and R2, may contain from 1 to 4 heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen, sulfur and fluorine. Thus, the depicted structures may or may not contain C=C or C=N bonds.

Zij kunnen bij voorkeur deel uitmaken van een C4-15-koolwaterstofresidu, bij voorkeur C4-13-koolwaterstofresidu, bij voorkeur C7-13-koolwaterstofresidu. Dit koolwaterstofre- sidu kan 1 tot 3 heteroatomen bevatten, bij voorkeur 1 of 2 heteroatomen, gekozen uit de groep stikstof, zuurstof, zwavel en fluor, naast het stikstofatoom dat R1 en R2 ver- bindt.They may preferably form part of a C4-15 hydrocarbon residue, preferably C4-13 hydrocarbon residue, preferably C7-13 hydrocarbon residue. This hydrocarbon residue may contain 1 to 3 heteroatoms, preferably 1 or 2 heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen, sulfur and fluorine, in addition to the nitrogen atom connecting R1 and R2.

Verzadigde structuurelementen zoals hierboven afgebeeld genieten de voorkeur.Saturated texture elements as pictured above are preferred.

Volgens één belichaming van de uitvinding kan het structuurelement één of twee extra bindingen bevatten op het structuurelement aan koolstofatomen. Daarom kan het struc- tuurelement één of twee substituenten bevatten die via een koolstofatoom met het structuurelement verbonden zijn. Deze één of twee substituenten vormen samen met een structureel element het C4-20-koolwaterstofresidu, bij voorkeur C4-15- koolwaterstofresidu, meer bij voorkeur C4-13-koolwaterstofresidu, met name C7-13- koolwaterstofresidu.In one embodiment of the invention, the structural element may contain one or two additional bonds on the structural element to carbon atoms. Therefore, the structural element may contain one or two substituents attached to the structural element through a carbon atom. These one or two substituents, together with a structural element, form the C4-20 hydrocarbon residue, preferably C4-15 hydrocarbon residue, more preferably C4-13 hydrocarbon residue, especially C7-13 hydrocarbon residue.

Bij voorkeur bevat het hierboven afgebeelde structuurelement een of twee bindingen met andere koolstofatomen in de meta- of para-positie ten opzichte van de stikstof van de NR1R2-groep. Meer bij voorkeur bevat het structuurelement geen andere substitu- enten naast de een of twee verbindingen met andere koolstofatomen op de meta- of para-positie met de stikstof van de NR1R2-groep.Preferably, the structural element depicted above contains one or two bonds to other carbon atoms in the meta or para position relative to the nitrogen of the NR1R2 group. More preferably, the structural element contains no other substituents besides the one or two bonds of other carbon atoms in the meta or para position to the nitrogen of the NR1R2 group.

Met name moleculen zonder de methylzijdegroep op positie 5 van de thiadiazool zijn actief in de bodem. Daarom gaat de voorkeur vooral uit naar heterocyclische verbindin- gen waarbij R3 waterstof is.In particular, molecules without the methyl side group at position 5 of the thiadiazole are active in the soil. Therefore, particular preference is given to heterocyclic compounds in which R3 is hydrogen.

Bij voorkeur zijn R1 en R2 elk via een koolstofatoom verbonden met de N in NR1R2.Preferably, R1 and R2 are each linked through a carbon atom to the N in NR1R2.

In de voorbeelden worden specifieke residuen R1, R2, R3, X, R4, R5 en R6 genoemd.Specific residues R1, R2, R3, X, R4, R5 and R6 are mentioned in the examples.

Elk van deze residuen kan worden gebruikt om de verbindingen van algemene formuleAny of these residues can be used to obtain the compounds of general formula

(|) te beperken, ongeacht de andere residuen. Aldus kunnen de verbindingen van alge- mene formule (I) één of meer van de residuen R1, R2, R3, R4, R5, R6 en X bevatten zoals die in elk van de voorbeelden worden vermeld. In het bijzonder kan R2 methyl, ethyl, cyclopropyl of cyclopentyl zijn, waarbij één CH2- groep kan worden uitgewisseld en bij voorkeur wordt uitgewisseld door S. In een speci- fieke belichaming wordt één van deze vier betekenissen voor R2 gecombineerd met de betekenissen voor R1, zoals in de voorbeelden wordt getoond. Alkylresiduen kunnen lineair of vertakt zijn. Cyclische groepen in de residuen zijn bij voorkeur ringen met 5 of 6 leden die verza- digd, onverzadigd of aromatisch kunnen zijn. De ringen kunnen zuiver koolwaterstof- houdend zijn, b.v. fenylgroepen. Zij kunnen ook stikstof of zuurstof als heteroatoom be- vatten, bij voorkeur één stikstof- of zuurstofatoom. Voorbeelden van deze residuen wor- den in de onderstaande voorbeelden genoemd.(|) regardless of the other residues. Thus, the compounds of general formula (I) may contain one or more of the residues R1, R2, R3, R4, R5, R6 and X as set forth in each of the examples. In particular, R2 can be methyl, ethyl, cyclopropyl or cyclopentyl, where one CH2 group can be exchanged and is preferably exchanged for S. In a specific embodiment, one of these four values for R2 is combined with the values for R1 , as shown in the examples. Alkyl residues can be linear or branched. Cyclic groups in the residues are preferably 5 or 6 membered rings which may be saturated, unsaturated or aromatic. The rings may be purely hydrocarbonaceous, e.g. phenyl groups. They may also contain nitrogen or oxygen as a heteroatom, preferably one nitrogen or oxygen atom. Examples of these residues are mentioned in the examples below.

Bij voorkeur bevatten de verbindingen van de algemene formule (I) geen pyrazool of gesubstitueerde pyrazool structuurgroepen.Preferably, the compounds of general formula (I) do not contain pyrazole or substituted pyrazole structural groups.

De verbindingen van de algemene formule (1) zijn nitrificatieremmers die de ammoniak- oxiderende bacteriën (AOB) en mogelijk ook de ammoniak-oxiderende archaea (AOA), met name Nitrosomonas europaea en/of Nitrosospira multiformis, en mogelijk ook de comammoxbacteriën, remmen.The compounds of general formula (1) are nitrification inhibitors that inhibit the ammonia-oxidizing bacteria (AOB) and possibly also the ammonia-oxidizing archaea (AOA), in particular Nitrosomonas europaea and/or Nitrosospira multiformis, and possibly also the comammox bacteria.

De nitrificatieremmer van de onderhavige uitvinding valt met name op door het feit dat hij de nitrificatie van ammoniumstikstof in de bodem gedurende een lange periode ef- fectief remt.The nitrification inhibitor of the present invention is particularly notable for effectively inhibiting the nitrification of ammonium nitrogen in the soil for a long period of time.

Verwacht wordt dat de nitrificatieremmer van de onderhavige uitvinding gunstige toxico- logische eigenschappen bezit, een lage dampspanning heeft en goed in de bodem wordt gesorbeerd. Dientengevolge wordt de nitrificatieremmer niet in significante mate door sublimatie in de atmosfeer uitgestoten, noch wordt hij gemakkelijk door water uit- gespoeld. Hieruit vloeien in de eerste plaats economische voordelen voort, zoals een hoge rentabiliteit gezien de langduriger werking van het nitrificatieremmer, en milieu- voordelen, zoals een vermindering van de belasting van de lucht (klimaatgasreductie) en van het oppervlakte- en grondwater.The nitrification inhibitor of the present invention is expected to have favorable toxicological properties, low vapor pressure and good soil sorbability. As a result, the nitrification inhibitor is not expelled into the atmosphere by sublimation to a significant extent, nor is it easily washed out by water. This primarily results in economic benefits, such as high profitability given the longer-lasting effect of the nitrification inhibitor, and environmental benefits, such as a reduction in the pollution of the air (climate gas reduction) and of surface and ground water.

De nitrificatieremmers kunnen worden toegepast op bodems of substraten die worden bemest met een anorganische of organische of organominerale meststof. Gewoonlijk worden zij gebruikt in een meststofmengsel dat een (bij voorkeur anorganische) mest- stof en de heterocyclische verbinding van algemene formule (I) omvat.The nitrification inhibitors can be applied to soils or substrates fertilized with an inorganic or organic or organomineral fertilizer. Usually they are used in a fertilizer mixture comprising a (preferably inorganic) fertilizer and the heterocyclic compound of general formula (I).

Gewoonlijk wordt de heterocyclische verbinding van algemene formule (|) gebruikt in een hoeveel- heid van 10 tot 10000 ppm per gewicht, meer bij voorkeur 100 tot 10000 ppm per ge-Usually, the heterocyclic compound of general formula (|) is used in an amount of 10 to 10000 ppm by weight, more preferably 100 to 10000 ppm by weight.

wicht, gebaseerd op de (bij voorkeur anorganische) meststof zonder water.weight, based on the (preferably inorganic) fertilizer without water.

De gebruik- te hoeveelheid is gebaseerd op de droge meststof.The amount used is based on the dry fertilizer.

De nitrificatieremmer volgens de onderhavige uitvinding kan worden gebruikt in stof, in oplossing, dispersie of emulsie.The nitrification inhibitor of the present invention can be used in dust, solution, dispersion or emulsion.

Daarom heeft de uitvinding ook betrekking op een op- lossing, dispersie of emulsie die de heterocyclische verbinding van algemene formule (I) van de onderhavige uitvinding bevat, bij voorkeur in een hoeveelheid van 0,1 tot 50 wt%, bij voorkeur 0,5 tot 30 wt%, en bij voorkeur 1 tot 20 wt%. Bij voorkeur wordt volgens de onderhavige uitvinding een meststofmengsel gevormd, dat verbindingen A en B bevat A. een anorganische en/of organische en/of organominerale meststof en B. 10 tot 10000 gewichtsprocenten, bij voorkeur 100 tot 10000 gewichtsprocenten, op basis van de meststof, van de heterocyclische verbinding van algemene formule (I) zo- als hierboven gedefinieerd.Therefore, the invention also relates to a solution, dispersion or emulsion containing the heterocyclic compound of general formula (I) of the present invention, preferably in an amount of 0.1 to 50 wt%, preferably 0.5 to 30 wt%, and preferably 1 to 20 wt%. According to the present invention, a fertilizer mixture is preferably formed, which contains compounds A and B. A. an inorganic and/or organic and/or organomineral fertilizer and B. 10 to 10,000 weight percent, preferably 100 to 10,000 weight percent, based on the fertilizer , of the heterocyclic compound of general formula (I) as defined above.

De waterfractie in verbinding A en in het meststoffenmengsel bedraagt vaak niet meer dan 1,5 wt%, bij voorkeur niet meer dan 1,0 wt%, bij voorkeur niet meer dan 0,5 wt%, bij voorkeur niet meer dan 0,3 wt%, en is in de balans van de hoeveelheden dus verwaar- loosbaar.The water fraction in compound A and in the fertilizer mixture is often not more than 1.5 wt%, preferably not more than 1.0 wt%, preferably not more than 0.5 wt%, preferably not more than 0.3 wt%, and is therefore negligible in the balance of the quantities.

De bestanddelen A en B vormen bij voorkeur ten minste 95 gew%, bij voor- keur ten minste 98 gew% van het meststofmengsel.Components A and B preferably form at least 95% by weight, preferably at least 98% by weight of the fertilizer mixture.

Het stikstofgehalte van component A (zonder water) bedraagt vaak ten minste 12 wt%, bij voorkeur ten minste 20 wt%, en bij voorkeur ten minste 22 wt%. Het stikstofgehalte kan bijvoorbeeld 25 tot 29 wt% bedragen, in het bijzonder 26 tot 28 wt%. Het stikstofge- halte kan worden verdeeld over snel werkende nitraatstikstof en langzaam werkende ammoniumstikstof.The nitrogen content of component A (without water) is often at least 12 wt%, preferably at least 20 wt%, and preferably at least 22 wt%. The nitrogen content may be, for example, 25 to 29 wt%, in particular 26 to 28 wt%. The nitrogen content can be divided between fast-acting nitrate nitrogen and slow-acting ammonium nitrogen.

De anorganische meststoffen zijn bij voorkeur ammonium- en/of ureumhoudende mest- stoffen, bij voorkeur ammoniumhoudende meststoffen die bovendien ureum kunnen bevatten.The inorganic fertilizers are preferably ammonium and/or urea-containing fertilizers, preferably ammonium-containing fertilizers which may additionally contain urea.

Ureum bevattende meststoffen worden verder beschreven in WO 2016/207210.Fertilizers containing urea are further described in WO 2016/207210.

De meststoffen die volgens de onderhavige uitvinding worden gebruikt, kunnen van na- tuurlijke of synthetische oorsprong zijn en worden op de bodem of op plantweefsels aangebracht om een of meer plantenvoedingsstoffen te leveren die essentieel zijn voor de groei van planten. De meststoffen die volgens de onderhavige uitvinding worden ge- bruikt, moeten ten minste stikstof als nutriënt leveren. Andere nutriënten zijn bijvoor- beeld K en P. Multinutriëntenmeststoffen of complexe meststoffen leveren twee of meer nutriënten. Anorganische meststoffen bevatten geen koolstofhoudende stoffen, behalve ureum. Organische meststoffen zijn meestal van planten of dieren afkomstig materiaal. Organische minerale meststoffen (combinaties van anorganische en organische mest- stoffen) kunnen eveneens worden gebruikt.The fertilizers used in the present invention may be of natural or synthetic origin and are applied to the soil or plant tissues to provide one or more plant nutrients essential to plant growth. The fertilizers used according to the present invention must provide at least nitrogen as a nutrient. Other nutrients are, for example, K and P. Multinutrient fertilizers or complex fertilizers supply two or more nutrients. Inorganic fertilizers do not contain carbonaceous substances, except urea. Organic fertilizers are usually plant or animal derived material. Organic mineral fertilizers (combinations of inorganic and organic fertilizers) can also be used.

De belangrijkste enkelvoudige meststof op basis van stikstof is ammoniak of oplossin- gen daarvan. Ammoniaknitraat wordt ook veel gebruikt. Ureum is een andere populaire bron van stikstof, met het voordeel dat het vast en niet-explosief is. Een andere mest- stof op basis van stikstof is calciumammoniumnitraat.The most important nitrogen-based straight fertilizer is ammonia or solutions thereof. Ammonia nitrate is also widely used. Urea is another popular source of nitrogen, with the advantage of being solid and non-explosive. Another nitrogen-based fertilizer is calcium ammonium nitrate.

De belangrijkste enkelvoudige fosfaatmeststoffen zijn de superfosfaten, waaronder en- kelvoudig superfosfaat, fosfogips en drievoudig superfosfaat. De belangrijkste kalium- houdende enkelvoudige meststof is kaliummuriaat (MOP).The most important straight phosphate fertilizers are the superphosphates, including simple superphosphate, phosphogypsum and triple superphosphate. The most important potassium-containing straight fertilizer is potassium muriate (MOP).

De binaire meststoffen zijn bij voorkeur NP- of NK-meststoffen, die kunnen bestaan uit monoammoniumfosfaat (MAP) en diammoniumfosfaat (DAP).The binary fertilizers are preferably NP or NK fertilizers, which can consist of monoammonium phosphate (MAP) and diammonium phosphate (DAP).

NPK-meststoffen zijn drie-componenten-meststoffen die stikstof, fosfor en kalium leve- ren. NPK-meststoffen kunnen worden geproduceerd door het mengen van de bovenge- noemde enkelvoudige meststoffen in bulk of in korrels per stuk, zoals in Nitrophoska®. In sommige gevallen kunnen chemische reacties optreden tussen de twee of meer componenten.NPK fertilizers are three-component fertilizers that supply nitrogen, phosphorus and potassium. NPK fertilizers can be produced by mixing the above straight fertilizers in bulk or in granules per piece, as in Nitrophoska®. In some cases, chemical reactions can occur between the two or more components.

Naast de hoofdbestanddelen, zoals N, P en K, kunnen micronutriënten (sporenelemen- ten) in de meststoffen aanwezig zijn. De belangrijkste micronutriënten zijn molybdeen, zink, borium en koper. Deze elementen worden meestal als in water oplosbare zouten geleverd.In addition to the main components, such as N, P and K, micronutrients (trace elements) may be present in the fertilizers. The most important micronutrients are molybdenum, zinc, boron and copper. These elements are usually supplied as water-soluble salts.

De meststoffen die de voorkeur genieten, bevatten ammonium of ureum. Voorbeelden van ammoniumhoudende meststoffen die de voorkeur genieten zijn NPK-meststoffen, calciumammoniumnitraat, ammoniumsulfaatnitraat, ammoniumsulfaat en ammonium- fosfaat.The preferred fertilizers contain ammonium or urea. Examples of preferred ammonium-containing fertilizers are NPK fertilizers, calcium ammonium nitrate, ammonium sulfate nitrate, ammonium sulfate and ammonium phosphate.

Andere geprefereerde ingrediënten van de meststofsamenstellingen zijn bijvoorbeeld spoorelementen, andere mineralen, standaardisatoren en bindmiddelen.Other preferred ingredients of the fertilizer compositions are, for example, trace elements, other minerals, standardizers and binding agents.

Organische meststoffen zijn meststoffen met een organische of biologische oorsprong, d.w.z. meststoffen die afkomstig zijn van levende of voorheen levende materialen, zoals dieren, planten of algen.Organic fertilizers are fertilizers of organic or biological origin, i.e. fertilizers derived from living or formerly living materials, such as animals, plants or algae.

Meststoffen van biologische oorsprong zijn onder meer dierlijk afval, plantaardig afval, bijvoorbeeld van de voedselverwerking of de landbouw, com- post, en behandeld zuiveringsslib (biosolids). Dierlijke bronnen kunnen mest zijn, maar ook producten van het slachten van dieren, zoals bloedmeel, beendermeel, verenmeel, huiden, hoeven en hoorns.Fertilizers of biological origin include animal waste, vegetable waste, for example from food processing or agriculture, compost, and treated sewage sludge (biosolids). Animal sources can be manure, but also products from animal slaughter, such as blood meal, bone meal, feather meal, hides, hooves and horns.

Bodemverbeteraars, zoals turf of kokos, schors en zaagsel, kunnen ook worden toege- voegd.Soil improvers, such as peat or coconut, bark and sawdust, can also be added.

Meststoffen kunnen onder meer zijn: ammoniumsulfaat, ammoniumnitraat, ammonium- sulfaatnitraat, ammoniumchloride, ammoniumbisulfaat, ammoniumpolysulfide, ammoni- umthiosulfaat, waterige ammoniak, watervrije ammoniak, ammoniumpolyfosfaat, alumi- niumsulfaat, calciumnitraat, calciumammoniumnitraat, calciumsulfaat gebrand magne- siet, calcietkalksteen, calciumoxide, hampeen (gechelateerd ijzer), dolomietkalksteen, hydraatkalk, calciumcarbonaat, diammoniumfosfaat, monoammoniumfosfaat, kaliumni- traat, kaliumbicarbonaat, monopotassiumfosfaat, magnesiumnitraat, magnesiumsulfaat, kaliumsulfaat, kaliumchloride, natriumnitraten, magnesische kalksteen, magnesia, dina- — triumdihydromolybdaat, kobaltchloride-hexahydraat, nikkelchloride-hexahydraat, indool- boterzuur, L-tryptofaan, ureum, ureum-formaldehyden, ureum-ammoniumnitraat, ureum met zwavelcoating, ureum met polymeercoating, isobutylideendiureum, K2SO4- 2MgSO4, kainiet, sylviniet, kieseriet, Epsomzouten, elementaire zwavel, mergel, gema- len oesterschelpen, vismeel, oliekoeken, vismest, bloedmeel, rotsfosfaat, superfosfaten, slakken, beendermeel, houtas, biochar, algen, algenextracten, struviet, mest, vleer- muisguano, turfmolm, compost, groen zand, katoenzaadmeel, verenmeel, krabmeel, visemulsie of een combinatie daarvan.Fertilizers may include: ammonium sulfate, ammonium nitrate, ammonium sulfate nitrate, ammonium chloride, ammonium bisulfate, ammonium polysulfide, ammonium thiosulfate, aqueous ammonia, anhydrous ammonia, ammonium polyphosphate, aluminum sulfate, calcium nitrate, calcium ammonium nitrate, calcium sulfate, calcined magnesite, calcite limestone, calcium oxide, hampene (chelated iron), dolomite limestone, hydrated lime, calcium carbonate, diammonium phosphate, monoammonium phosphate, potassium nitrate, potassium bicarbonate, monopotassium phosphate, magnesium nitrate, magnesium sulfate, potassium sulfate, potassium chloride, sodium nitrates, magnesian limestone, magnesia, disodium dihydromolybdate, cobalt chloride hexahydrate, nickel chloride Hexahydrate, Indole Butyric Acid, L-Tryptophan, Urea, Urea Formaldehydes, Urea Ammonium Nitrate, Sulfur Coated Urea, Polymer Coated Urea, Isobutylidene Diurea, K2SO4-2MgSO4, Kainite, Sylvinite, Kieserite, Epsom Salts, Elemental Sulfur, Marl, Gemal and oyster shells, fish meal, oil cakes, fish manure, blood meal, rock phosphate, superphosphates, slag, bone meal, wood ash, biochar, algae, algae extracts, struvite, manure, bat guano, peat dust, compost, green sand, cottonseed meal, feather meal, crab meal, fish emulsion or a combination thereof.

Het micronutriëntenmeststofmateriaal kan boor- zuur, een boraat, een boorfrit, kopersulfaat, een kopersfrit, een koperchelaat, een natri- umtetraboraatdecahydraat, een ijzersulfaat, een ijzeroxide, ijzerammoniumsulfaat, een ijzersfrit, een ijzerchelaat, een mangaansulfaat, een mangaansulfaat, een ijzeroxide, een ijzeroxide, een ijzerchelaat of een combinatie daarvan bevatten, mangaansulfaat, mangaanoxide, mangaanchelaat, mangaanchloride, mangaanfrit, natriummolybdaat, molybdizuur, zinksulfaat, zinkoxide, zinkcarbonaat, zinkfrit, zinkfosfaat, zinkchelaat of een combinatie daarvan. In een bijzondere belichaming bevat genoemde meststof of meststofsamenstelling geen onoplosbaar selenium, seleniummineraal, oplosbaar sele- nium of zouten daarvan.The micronutrient fertilizer material may contain boric acid, a borate, a boron frit, copper sulfate, a copper frit, a copper chelate, a sodium tetraborate decahydrate, an iron sulfate, an iron oxide, iron ammonium sulfate, an iron sfrit, an iron chelate, a manganese sulfate, a manganese sulfate, an iron oxide, a iron oxide, an iron chelate or a combination thereof, manganese sulfate, manganese oxide, manganese chelate, manganese chloride, manganese frit, sodium molybdate, molybdioic acid, zinc sulfate, zinc oxide, zinc carbonate, zinc frit, zinc phosphate, zinc chelate or a combination thereof. In a particular embodiment, said fertilizer or fertilizer composition does not contain insoluble selenium, selenium mineral, soluble selenium or salts thereof.

De behandelde (anorganische, organische of organominerale) meststoffen volgens de uitvinding zijn bij voorkeur aanwezig in poedervorm, in prilvorm of in korrelvorm.The treated (inorganic, organic or organomineral) fertilizers according to the invention are preferably present in powder form, in prill form or in granular form.

Naast de heterocyclische verbinding van de algemene formule (1) kunnen formuleringen bestaande uit de verbinding en agronomische hulpstoffen worden gebruikt om de nitrifi- catieremmer in de meststof op te nemen. Agronomische hulpstoffen zijn bijvoorbeeld oplosmiddelen, dispergeermiddelen, pH-regelaars, vulstoffen, stabiliteitsverbeteraars, oppervlakte-actieve stoffen.In addition to the heterocyclic compound of the general formula (1), formulations consisting of the compound and agronomic aids can be used to incorporate the nitrification inhibitor into the fertilizer. Agronomic aids are, for example, solvents, dispersants, pH regulators, fillers, stability improvers, surfactants.

De nitrificatieremmer kan in het meststoffenmengsel worden opgenomen door het mengsel of de formulering die het bevat te mengen met een vaste of vloeibare meststof of meststofformulering. Bij voorkeur is het meststofmengsel in vaste vorm en wordt de nitrificatieremmer op het oppervlak van de (anorganische, organische of organinerale) meststof aangebracht.The nitrification inhibitor can be incorporated into the fertilizer mixture by mixing the mixture or formulation containing it with a solid or liquid fertilizer or fertilizer formulation. Preferably, the fertilizer mixture is in solid form and the nitrification inhibitor is applied to the surface of the (inorganic, organic or organineral) fertilizer.

In een proces voor de productie van het meststofmengsel van de onderhavige uitvin- ding kan de nitrificatieremmer of de formulering die deze bevat, worden ingebracht in de (anorganische, organische of organominerale) meststof en/of worden aangebracht op het oppervlak van de anorganische meststof.In a process for the production of the fertilizer mixture of the present invention, the nitrification inhibitor or the formulation containing it can be incorporated into the fertilizer (inorganic, organic or organomineral) and/or applied to the surface of the inorganic fertilizer.

Mestkorrels worden geïmpregneerd of bedekt met de nitrificatieremmer, bijvoorbeeld door ze te besproeien met een formulering zoals een oplossing of een dispersie van de nitrificatieremmer en ze vervolgens te drogen. De methode is bijvoorbeeld bekend uit DE-A-41 28 828. Het verzegelen van de geïmpregneerde korrels met bijvoorbeeld pa- raffinewas, een aanvullend voorstel in laatstgenoemd document, is mogelijk, maar in het algemeen niet nodig.Fertilizer granules are impregnated or coated with the nitrification inhibitor, for example by spraying them with a formulation such as a solution or a dispersion of the nitrification inhibitor and then drying them. The method is known, for example, from DE-A-41 28 828. Sealing the impregnated granules with, for example, paraffin wax, an additional proposal in the latter document, is possible, but generally not necessary.

Granulerende hulpstoffen die kunnen worden gebruikt voor de bereiding van vaste meststofsamenstellingen kunnen kalk, gips, siliciumdioxide of kaoliniet zijn.Granulating auxiliaries that can be used for the preparation of solid fertilizer compositions can be lime, gypsum, silica or kaolinite.

Een alternatief is de toevoeging van de nitrificatieremmer tijdens de eigenlijke productie van de meststof, bijvoorbeeld in de drijfmest.An alternative is the addition of the nitrification inhibitor during the actual production of the fertilizer, for example in the slurry.

In de regel worden nitrificatieremmers in de bodem toegepast in hoeveelheden van 100 g/ha tot 10 kg/ha. Bij voorkeur ligt de hoeveelheid tussen 300 g/ha en 5 kg/ha.As a rule, nitrification inhibitors are applied in the soil in quantities of 100 g/ha to 10 kg/ha. Preferably, the amount is between 300 g/ha and 5 kg/ha.

De toediening van de nitrificatieremmer in vloeibare meststofformuleringen kan bijvoor- beeld geschieden door fertigatie met of zonder overmaat water, zoals beschreven in DE-C-102 30 593. Het meststofmengsel kan ten minste één extra nitrificatieremmer bevatten.The application of the nitrification inhibitor in liquid fertilizer formulations can be effected, for example, by fertigation with or without excess water, as described in DE-C-102 30 593. The fertilizer mixture can contain at least one additional nitrification inhibitor.

Deze ten minste één verdere nitrificatieremmer remt bij voorkeur de ammoniakoxiderende bacte- rien (AOB) en wordt bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit 2-(3,4-dimethyl- pyrazol-1-yl)-barnsteenzuur, 3,4-dimethylpyrazool (DMP), 3,4-dimethylpyrazoolfosfaat (DMPP), dicyaandiamide (DCD), 1H-1,2,4-triazool, 3-methylpyrazool (3-MP), 2-chloor- 6-(trichloormethyl)-pyridine, 5-ethoxy-3-trichloormethyl-1,2,4-thiadiazol, 2-amino-4- chloor-6-methyl-pyrimidine, 2-mercapto-benzothiazool, 2-sulfanilamidothiazool, thiou- reum, natriumazide, kaliumazide, 1-hydroxypyrazool, 2-methylpyrazool-1-carboxamide, 4-amino-1,2,4-triazool, 3-mercapto-1,2,4-triazool, 2.,4-diamino-6-trichloormethyl-5- triazine, koolstofbisulfide, ammoniumthiosulfaat, natriumtriocarbonaat, 2,3-dihydro-2,2- dimethyl-7-benzofuranolmethylcarbamaat en N-(2,6-dimethylfenyl)-N-(methoxyacetyl)- alanine-methylester.This at least one further nitrification inhibitor preferably inhibits the ammonia oxidizing bacteria (AOB) and is preferably selected from the group consisting of 2-(3,4-dimethyl-pyrazol-1-yl)-succinic acid, 3,4-dimethylpyrazole (DMP), 3,4-dimethylpyrazole phosphate (DMPP), dicyandiamide (DCD), 1H-1,2,4-triazole, 3-methylpyrazole (3-MP), 2-chloro-6-(trichloromethyl)-pyridine, 5 -ethoxy-3-trichloromethyl-1,2,4-thiadiazole, 2-amino-4-chloro-6-methyl-pyrimidine, 2-mercapto-benzothiazole, 2-sulfanilamidothiazole, thiourea, sodium azide, potassium azide, 1-hydroxypyrazole , 2-methylpyrazole-1-carboxamide, 4-amino-1,2,4-triazole, 3-mercapto-1,2,4-triazole, 2,,4-diamino-6-trichloromethyl-5-triazine, carbon disulfide, ammonium thiosulfate, sodium tricarbonate, 2,3-dihydro-2,2-dimethyl-7-benzofuranol methylcarbamate and N-(2,6-dimethylphenyl)-N-(methoxyacetyl)-alanine methyl ester.

Ook nitrificatieremmers die ammoniakoxiderende archaea (AOA) remmen, kunnen samen met de heterocyclische verbinding van algemene formule (I) worden gebruikt.Also nitrification inhibitors inhibiting ammonia oxidizing archaea (AOA) can be used together with the heterocyclic compound of general formula (I).

Wanneer de aanvullende nitrificatieremmer wordt gebruikt, is de gewichtsverhouding tussen de heterocyclische verbinding van algemene formule (I) en de aanvullende nitri- ficatieremmer bij voorkeur 0,1 tot 10 : 1, bij voorkeur 0,2 tot 5 : 1, en het meest bij voor- keur 0,5 tot 2 : 1. Voorts kan het meststofmengsel ten minste één ureaseremmer bevatten, die bij voor- keur wordt gekozen uit N-n-butylthiofosforzuur-triamide (NBTPT) en/of N-n- propylthiofosforzuur-triamide (NPTPT). Een ureaseremmer wordt gewoonlijk toege- voegd wanneer de meststof ureum bevat.When the additional nitrification inhibitor is used, the weight ratio between the heterocyclic compound of general formula (I) and the additional nitrification inhibitor is preferably 0.1 to 10:1, preferably 0.2 to 5:1, most preferably preferably 0.5 to 2:1. Furthermore, the fertilizer mixture may contain at least one urease inhibitor, which is preferably selected from N-n-butylthiophosphoric acid triamide (NBTPT) and/or N-n-propylthiophosphoric acid triamide (NPPTT). A urease inhibitor is usually added when the fertilizer contains urea.

Stikstof uit ureum komt door de werking van urease vrij in de vorm van ammonium, en het ammonium kan nitrificatie ondergaan.Nitrogen from urea is released in the form of ammonium by the action of urease, and the ammonium can undergo nitrification.

Daarom kan het voordelig zijn om een ureaseremmer te combineren met de nitrificatie- remmer.Therefore, it may be advantageous to combine a urease inhibitor with the nitrification inhibitor.

Indien de heterocyclische verbinding van algemene formule (I) van de onderhavige uit- vinding gecombineerd wordt met N-n-butylthiofosfortriamide (NBTPT) en/of N-n- propylthiofosfortriamide (NPTPT), ligt de gewichtsverhouding tussen nitrificatierem- mer(s) en ureaseremmer bij voorkeur tussen 0,1 en 10 : 1, bij voorkeur tussen 0,5 en 8 : 1, en bij voorkeur tussen 1 en 6 : 1.If the heterocyclic compound of general formula (I) of the present invention is combined with N-n-butylthiophosphoric triamide (NBTPT) and/or N-n-propylthiophosphoric triamide (NPPTT), the weight ratio between nitrification inhibitor(s) and urease inhibitor is preferably between 0.1 and 10:1, preferably between 0.5 and 8:1, and preferably between 1 and 6:1.

Van thiofosfortriamiden is bekend dat zij betrekkelijk gemakkelijk worden omgezet in de overeenkomstige fosfortriamiden en thiofosfortdiamiden, alsmede in andere metabolie- ten. Aangezien vocht in het algemeen niet volledig kan worden uitgesloten, zijn thiofos- forhoudende triamiden en de overeenkomstige fosfornoudende triamiden vaak in een mengsel met elkaar aanwezig. In deze specificatie worden daarom met de term “(thio)fosforzuurtriamide" niet alleen de zuivere thiofosforzuurtriamiden, respectievelijk fosforzuurtriamiden aangeduid, maar ook mengsels daarvan. Volgens de onderhavige uitvinding kunnen ook mengsels van N-n- butyl)thiofosfortriamide en N-(n-)propylthiofosfortriamide worden gebruikt, zoals be- schreven in EP-A-1 820 788. De meststofmengsels kunnen andere ingrediënten bevatten, zoals coatings, bijvoor- beeld van anorganische of organische polyzuren, die worden beschreven in USThiophosphorus triamides are known to be converted relatively readily to the corresponding phosphorus triamides and thiophosphorus diamides, as well as to other metabolites. Since moisture cannot generally be completely excluded, thiophosphorus-containing triamides and the corresponding phosphorus-containing triamides are often present in a mixture with each other. In this specification, the term "(thio)phosphoric acid triamide" therefore refers not only to the pure thiophosphoric acid triamides or phosphoric acid triamides, respectively, but also to mixtures thereof. According to the present invention, mixtures of N-n-butyl)thiophosphoric triamide and N-(n-)propylthiophosphoric triamide can also be used. be used, as described in EP-A-1 820 788. The fertilizer mixtures may contain other ingredients, such as coatings, for example of inorganic or organic polyacids, which are described in US

6.139.596. Verder kunnen coatings van poeders, prils en granules worden gevormd van anorga- nisch materiaal, zoals coatings op zwavel- of mineraalbasis, of met een organisch po- lymeer. Respectieve coatings worden beschreven in WO 2013/121384 op pagina 23, regel 37 tot pagina 24, regel 16. Zoals hierboven vermeld, worden de agrochemische formuleringen die de verbindingen van formule (|) bevatten, gebruikt in "effectieve hoeveelheden". Dit betekent dat zij wor- den gebruikt in een hoeveelheid die het mogelijk maakt het gewenste effect te verkrij- gen, namelijk een (synergistische) verbetering van de gezondheid van een plant, maar die geen aanleiding geeft tot fytotoxische symptomen op de behandelde plant. Voor gebruik volgens de onderhavige uitvinding kunnen de agrochemische formulerin- gen die de verbindingen van formule (|) bevatten, worden omgezet in de gebruikelijke formuleringen, bijvoorbeeld oplossingen, emulsies, suspensies, stof, poeders, pasta's en korrels. De gebruiksvorm hangt af van het specifieke beoogde doel; in elk geval moet het zorgen voor een fijne en gelijkmatige verdeling van de agrochemische formu- leringen die de verbindingen van formule (I) bevatten volgens de huidige uitvinding. De formuleringen worden op een voor de vakman bekende wijze bereid. De agrochemische formuleringen kunnen ook hulpstoffen bevatten die gebruikelijk zijn in agrochemische formuleringen. Welke hulpstoffen worden gebruikt, hangt af van res- pectievelijk de specifieke toepassingsvorm en de werkzame stof. Voorbeelden van ge-6,139,596. Furthermore, coatings of powders, prills and granules can be formed from inorganic material, such as sulfur or mineral based coatings, or with an organic polymer. Respective coatings are described in WO 2013/121384 at page 23, line 37 to page 24, line 16. As mentioned above, the agrochemical formulations containing the compounds of formula (|) are used in "effective amounts". This means that they are used in an amount that makes it possible to obtain the desired effect, namely a (synergistic) improvement in the health of a plant, but which does not give rise to phytotoxic symptoms on the treated plant. For use in accordance with the present invention, the agrochemical formulations containing the compounds of formula (|) may be converted into conventional formulations, for example solutions, emulsions, suspensions, dusts, powders, pastes and granules. The form of use depends on the specific intended purpose; in any case, it should ensure a fine and uniform distribution of the agrochemical formulations containing the compounds of formula (I) according to the present invention. The formulations are prepared in a manner known to those skilled in the art. The agrochemical formulations may also contain excipients commonly used in agrochemical formulations. Which excipients are used depends on the specific application form and the active ingredient, respectively. Examples of

schikte hulpstoffen zijn oplosmiddelen, vaste dragers, dispergeermiddelen of emulgato- ren (zoals verdere oplosbaarheidsbevorderende stoffen, beschermende colloïden, op- pervlakteactieve stoffen en hechtmiddelen), organische en anorganische verdikkings- middelen, bactericiden, antivriesmiddelen, antischuimmiddelen, eventueel kleurstoffen en tackifieermiddelen of bindmiddelen (bijv. voor formuleringen voor zaadbehandeling). Geschikte oplosmiddelen zijn water, organische oplosmiddelen zoals minerale oliefrac- ties met een gemiddeld tot hoog kookpunt, zoals kerosine of dieselolie, voorts koolteer- olie en oliën van plantaardige of dierlijke oorsprong, alifatische, cyclische en aromati- sche koolwaterstoffen, bijv. tolueen, xyleen, paraffine, tetrahydronaftaleen, gealkyleerde naftalenen of derivaten daarvan, alcoholen zoals methanol, ethanol, propanol, butanol en cyclohexanol, glycolen, ketonen zoals cyclohexanon en gamma-butyrolacton, dime- thylamiden van vetzuren, vetzuren en esters van vetzuren en sterk polaire oplosmidde- len, bijvoorbeeld aminen zoals N-methylpyrrolidon.suitable excipients are solvents, solid carriers, dispersants or emulsifiers (such as other solubilizers, protective colloids, surfactants and adhesives), organic and inorganic thickeners, bactericides, antifreezes, antifoams, optionally colorants and tackifiers or binding agents ( e.g. for seed treatment formulations). Suitable solvents are water, organic solvents such as mineral oil fractions with a medium to high boiling point, such as kerosene or diesel oil, also coal tar oil and oils of vegetable or animal origin, aliphatic, cyclic and aromatic hydrocarbons, e.g. toluene, xylene , paraffin, tetrahydronaphthalene, alkylated naphthalenes or derivatives thereof, alcohols such as methanol, ethanol, propanol, butanol and cyclohexanol, glycols, ketones such as cyclohexanone and gamma-butyrolactone, dimethylamides of fatty acids, fatty acids and esters of fatty acids and highly polar solvents , for example amines such as N-methylpyrrolidone.

Vaste dragers zijn minerale aardmetalen zoals silicaten, silicagels, talk, kaolien, kalk- steen, krijt, keileem, löss, klei, dolomiet, diatomeeënaarde, calciumsulfaat, magnesium- sulfaat, magnesiumoxide, gemalen synthetische stoffen, meststoffen, zoals bv.ammoniumsulfaat, ammoniumfosfaat, ammoniumnitraat, ureum en producten van plantaardige oorsprong, zoals graanmeel, boomschorsmeel, houtmeel en notenscha- lenmeel, cellulosepoeders en andere vaste dragers.Solid carriers are mineral earth metals such as silicates, silica gels, talc, kaolin, limestone, chalk, boulder clay, loess, clay, dolomite, diatomaceous earth, calcium sulphate, magnesium sulphate, magnesium oxide, ground synthetic substances, fertilizers, such as e.g. ammonium sulphate, ammonium phosphate , ammonium nitrate, urea and products of vegetable origin, such as cereal flour, bark flour, wood flour and nut shell flour, cellulose powders and other solid carriers.

Geschikte oppervlakte-actieve stoffen (hulpstoffen, bevochtigers, tackifiers, disper- geermiddelen of emulgeermiddelen) zijn alkalimetaal-, aardalkalimetaal- en ammonium- zouten van aromatische sulfonzuren, zoals ligninesulfonzuur, fenolsulfonzuur, nafta- leensulfonzuur, dibutylnaftaleensulfonzuur en vetzuren alkylsulfonaten, alkyl- arylsulfonaten, alkylsulfaten, laurylether-sulfaten, vetalcoholsulfaten en gesulfateerde hexa-, hepta- en octadecanolaten, gesulfateerde vetalcoholglycolethers, voorts conden- saten van naftaleen of van naftaleensulfonzuur met fenol en formaldehyde polyoxy- ethyleen-octylfenylether, geëthoxyleerd isooctylfenol, octylfenol, nonylfenol, alkylfenyl- polyglycolethers, tributylfenylpolyglycolether, tristearylfenylpolyglycolether, alkylarylpo- lyetheralcoholen, alcohol- en vetalcohol/ethyleenoxidecondensaten, geëthoxyleerde — ricinusolie, polyoxyethyleenalkylethers, geëthoxyleerd polyoxypropyleen, laurylalcohol- polyglycoletheracetaal, sorbitolesters, lignine-sulfietafvalvloeistof en eiwitten, gedenatu- reerde eiwitten, polysacchariden (bijv.b.v. methylcellulose), hydrofoob gewijzigd zet- meel, polyvinylalcoholen, polycarboxylaten, polyalkoxylaten, polyvinylamines, polyvinyl-Suitable surfactants (auxiliaries, wetting agents, tackifiers, dispersants or emulsifiers) are alkali metal, alkaline earth metal and ammonium salts of aromatic sulfonic acids, such as lignin sulfonic acid, phenol sulfonic acid, naphthalene sulfonic acid, dibutylnaphthalene sulfonic acid and fatty acids alkyl sulfonates, alkylaryl sulfonates, alkyl sulfates, lauryl ether sulfates, fatty alcohol sulfates and sulfated hexa-, hepta- and octadecanolates, sulfated fatty alcohol glycol ethers, also condensates of naphthalene or of naphthalene sulphonic acid with phenol and formaldehyde polyoxyethylene octyl phenyl ether, ethoxylated isooctylphenol, octylphenol, nonylphenol, alkylphenyl polyglycol ethers, tributylphenyl polyglycol ether, tristearylphenyl polyglycol ether, alkylaryl polyether alcohols, alcohol and fatty alcohol/ethylene oxide condensates, ethoxylated castor oil, polyoxyethylene alkyl ethers, ethoxylated polyoxypropylene, lauryl alcohol polyglycol ether acetal, sorbitol esters, lignin sul cycle waste fluid and proteins, denatured proteins, polysaccharides (e.g. e.g. methylcellulose), hydrophobically modified starches, polyvinyl alcohols, polycarboxylates, polyalkoxylates, polyvinylamines, polyvinyl

pyrrolidon en de copolymeren daarvan. Voorbeelden van verdikkingsmiddelen (d.w.z. verbindingen die aan formuleringen een gewijzigde vloeibaarheid verlenen, d.w.z. een hoge viscositeit onder statische omstandigheden en een lage viscositeit bij agitatie) zijn polysacchariden en organische en anorganische kleisoorten zoals Xanthaangom.pyrrolidone and its copolymers. Examples of thickeners (i.e., compounds which impart modified fluidity to formulations, i.e., high viscosity under static conditions and low viscosity under agitation) include polysaccharides and organic and inorganic clays such as xanthan gum.

Een "pesticide" is iets dat een schadelijk organisme ("plaag") of een ziekte voorkomt, vernietigt of bestrijdt, of planten of plantaardige producten beschermt tijdens de produc- tie, de opslag en het vervoer.A "pesticide" is anything that prevents, destroys or controls a harmful organism ("pest") or disease, or protects plants or plant products during production, storage and transportation.

De term omvat onder meer: herbiciden, fungiciden, insecticiden, acariciden, nematici- den, molluskiciden, rodenticiden, groeiregulatoren, afweermiddelen, rodenticiden en biociden, alsmede gewasbeschermingsmiddelen. Gewasbeschermingsmiddelen zijn "pesticiden" die gewassen of gewenste of beoogde planten beschermen. Zij worden hoofdzakelijk gebruikt in de landbouwsector, maar ook in de bosbouw, de tuinbouw, in recreatiegebieden en in tuinen voor eigen gebruik. Zij bevatten ten minste één werkzame stof en hebben een van de volgende functies: - planten of plantaardige producten te beschermen tegen plagen/ziekten, vóór of na de oogst; - de levensprocessen van planten beïnvloeden (zoals stoffen die hun groei beïn- vloeden, met uitzondering van voedingsstoffen), - plantaardige producten te bewaren; - de groei van ongewenste planten of delen van planten te vernietigen of te voor- komen. Zij kunnen ook andere bestanddelen bevatten, waaronder beschermstoffen en synergis- tische middelen. Een werkzame stof is een chemische stof, een plantenextract, een feromoon of een micro-organisme (met inbegrip van virussen), die werkzaam is tegen "schadelijke orga- nismen" of op planten, delen van planten of plantaardige producten. Het meest gebruikelijke gebruik van pesticiden is in de vorm van gewasbeschermings- middelen (GBP's). De term "pesticide" wordt vaak door elkaar gebruikt met "gewasbeschermingsmiddel", maar pesticide is een bredere term die ook andere toepassingen dan planten/gewassen omvat, bijvoorbeeld biociden.The term includes, inter alia: herbicides, fungicides, insecticides, acaricides, nematicides, molluscicides, rodenticides, growth regulators, repellents, rodenticides and biocides, as well as plant protection products. Plant protection products are "pesticides" that protect crops or desired or intended plants. They are mainly used in the agricultural sector, but also in forestry, horticulture, in recreational areas and in private gardens. They contain at least one active substance and have one of the following functions: - to protect plants or plant products against pests/diseases, before or after harvest; - influence the life processes of plants (such as substances that influence their growth, with the exception of nutrients), - store plant products; - to destroy or prevent the growth of unwanted plants or parts of plants. They may also contain other ingredients, including safeners and synergists. An active substance is a chemical substance, a plant extract, a pheromone or a micro-organism (including viruses), which is active against "harmful organisms" or on plants, parts of plants or plant products. The most common use of pesticides is in the form of plant protection products (GBPs). The term "pesticide" is often used interchangeably with "plant protection product", but pesticide is a broader term that includes applications other than plants/crops, for example biocides.

Biociden, zoals herbiciden, bactericiden, mollusciciden, algiciden, fytotoxische stoffen, fungiciden, en mengsels daarvan kunnen worden toegevoegd. Ter conservering en stabilisering van de formulering kunnen bactericiden worden toe- gevoegd. Voorbeelden van geschikte bactericiden zijn die op basis van dichlorofeen en benzylalcohol hemi-formal (Proxel® van ICI of Acticide® RS van Thor Chemie en Ka- thon® MK van Rohm & Haas) en isothiazolinone-derivaten zoals alkylisothiazolinonen en benzisothiazolinonen (Acticide® M BS van Thor Chemie). Voorbeelden van geschik- te antivriesmiddelen zijn ethyleenglycol, propyleenglycol, ureum en glycerine. Voorbeel- den voor antischuimmiddelen zijn siliconenemulsies (zoals bijvoorbeeld Silikon® SRE, Wacker, Duitsland of Rhodorsil®, Rhodia, Frankrijk), lange ketenalcoholen, vetzuren, zouten van vetzuren, fluororganische verbindingen en agrochemische formuleringen die de verbindingen van formule (I) daarvan bevatten.Biocides, such as herbicides, bactericides, molluscicides, algicides, phytotoxic agents, fungicides, and mixtures thereof may be added. Bactericides may be added to preserve and stabilize the formulation. Examples of suitable bactericides are those based on dichlorophene and benzyl alcohol hemi-formal (Proxel® from ICI or Acticide® RS from Thor Chemie and Kathon® MK from Rohm & Haas) and isothiazolinone derivatives such as alkylisothiazolinones and benzisothiazolinones (Acticide® M BS from Thor Chemistry). Examples of suitable antifreezes are ethylene glycol, propylene glycol, urea and glycerin. Examples of anti-foaming agents are silicone emulsions (such as e.g. Silikon® SRE, Wacker, Germany or Rhodorsil®, Rhodia, France), long chain alcohols, fatty acids, salts of fatty acids, fluoroorganic compounds and agrochemical formulations containing the compounds of formula (I) thereof .

Geschikte kleurstoffen zijn pigmenten met een lage oplosbaarheid in water en in oplos- middelen oplosbare, bv. in water oplosbare, kleurstoffen.Suitable dyes are pigments with low water solubility and solvent soluble, e.g. water soluble, dyes.

Voorbeelden van adhesiepromotoren, zoals tackifiers of binders, zijn polyvinylpyrroli- dons, polyvinylacetaten, polyvinylalcoholen en cellulose-ethers (Tylose®, Shin-Etsu, Japan).Examples of adhesion promoters, such as tackifiers or binders, are polyvinyl pyrrolidones, polyvinyl acetates, polyvinyl alcohols and cellulose ethers (Tylose®, Shin-Etsu, Japan).

Granulaten, bijvoorbeeld gecoate granulaten, geïmpregneerde granulaten en homoge- ne granulaten, kunnen worden bereid door de werkzame stoffen aan vaste dragers te binden. Voorbeelden van vaste dragers zijn minerale aardes zoals silicagels, silicaten, talk, kaolien, attaclay, kalksteen, kalk, krijt, bole, löss, klei, dolomiet, diatomeeënaarde, calciumsulfaat, magnesiumsulfaat, magnesiumoxide, gemalen synthetische stoffen, meststoffen, zoals bijv, ammoniumsulfaat, ammoniumfosfaat, ammoniumnitraat, ureum, en producten van plantaardige oorsprong, zoals graanmeel, boomschorsmeel, hout- meelen notenschalenmeel, cellulosepoeders en andere vaste dragers. Antiklontermiddelen zoals oliën en/of wassen kunnen worden toegevoegd.Granulates, for example coated granules, impregnated granules and homogeneous granules, can be prepared by binding the active substances to solid carriers. Examples of solid carriers are mineral earths such as silica gels, silicates, talc, kaolin, attaclay, limestone, chalk, chalk, bole, loess, clay, dolomite, diatomaceous earth, calcium sulphate, magnesium sulphate, magnesium oxide, ground synthetic substances, fertilizers, such as, for example, ammonium sulphate , ammonium phosphate, ammonium nitrate, urea, and products of plant origin, such as grain flour, bark flour, wood flour, nutshell flour, cellulose powders, and other solid carriers. Anti-caking agents such as oils and/or waxes can be added.

De agrochemische formuleringen bevatten over het algemeen tussen 0,01 en 95%, bij voorkeur tussen 0,1 en 90%, en het meest bij voorkeur tussen 0,5 en 90%, in gewicht aan werkzame stoffen. De verbindingen van de agrochemische formuleringen die de verbindingen van formule (I) bevatten, worden gebruikt in een zuiverheid van 90% tot 100%, bij voorkeur van 95% tot 100% (volgens hun NMR-spectrum).The agrochemical formulations generally contain between 0.01 and 95%, preferably between 0.1 and 90%, and most preferably between 0.5 and 90%, by weight of active substances. The compounds of the agrochemical formulations containing the compounds of formula (I) are used in a purity of from 90% to 100%, preferably from 95% to 100% (according to their NMR spectrum).

De verbindingen van de agrochemische formuleringen die de verbindingen van formule (I) bevatten, kunnen als zodanig of in de vorm van hun landbouwkundige samenstellin- gen worden gebruikt, b.v. in de vorm van rechtstreeks vernevelbare oplossingen, poe- ders, suspensies, dispersies, emulsies, oliedispersies, pasta's, stuifbare producten, strooimiddelen of granulaten, door middel van verstuiven, verstuiven, verstuiven, uit- spreiden, borstelen, onderdompelen of gieten. De toepassingsvormen hangen volledig af van de beoogde doeleinden; het is de bedoeling om in elk geval te zorgen voor een zo goed mogelijke verdeling van de verbindingen die aanwezig zijn in de agrochemi- sche formuleringen die de verbindingen van formule (I) bevatten.The compounds of the agrochemical formulations containing the compounds of formula (I) can be used as such or in the form of their agricultural compositions, e.g. in the form of directly sprayable solutions, powders, suspensions, dispersions, emulsions, oil dispersions, pastes, dustable products, scattering agents or granules, by means of atomising, spraying, spraying, spreading, brushing, dipping or pouring. The forms of application depend entirely on the intended purposes; in any case, the intention is to ensure the best possible distribution of the compounds present in the agrochemical formulations containing the compounds of formula (I).

Waterige toepassingsvormen kunnen worden bereid uit emulsieconcentraten, pasta's of bevochtigbare poeders (verspuitbare poeders, oliedispersies) door toevoeging van wa- ter. Voor de bereiding van emulsies, pasta's of oliedispersies kunnen de stoffen, als zo- danig of opgelost in een olie of oplosmiddel, in water worden gehomogeniseerd met behulp van een bevochtiger, tackifieerder, dispergeermiddel of emulgator. Als alternatief kunnen concentraten worden bereid die bestaan uit een werkzame stof, een bevochti- gingsmiddel, een tackifieermiddel, een dispergeermiddel of een emulgator en eventueel een oplosmiddel of olie, en dergelijke concentraten zijn geschikt om met water te wor- den verdund.Aqueous application forms can be prepared from emulsion concentrates, pastes or wettable powders (sprayable powders, oil dispersions) by adding water. For the preparation of emulsions, pastes or oil dispersions, the substances, as such or dissolved in an oil or solvent, can be homogenized in water using a wetting agent, tackifier, dispersant or emulsifier. Alternatively, concentrates can be prepared consisting of an active substance, a wetting agent, a tackifier, a dispersant or an emulsifier and optionally a solvent or oil, and such concentrates are suitable for dilution with water.

De concentraties van de werkzame stoffen in de gebruiksklare preparaten kunnen bin- nen betrekkelijk ruime marges worden gevarieerd. In het algemeen liggen zij tussen 0,0001 en 10%, bij voorkeur tussen 0,001 en 1%, van het gewicht van de verbindingen van de agrochemische formuleringen die de verbindingen van formule (1) bevatten.The concentrations of the active substances in the ready-to-use preparations can be varied within relatively wide margins. In general, they are between 0.0001 and 10%, preferably between 0.001 and 1%, by weight of the compounds of the agrochemical formulations containing the compounds of formula (1).

De agrochemische formuleringen die de verbindingen van formule (I) bevatten, kunnen ook met succes worden gebruikt in het ultra-lage-volume-proces (ULV), waarbij het mo- gelijk is om composities toe te passen die meer dan 95 gewichtspercenten werkzame stof bevatten, of zelfs om de werkzame stof zonder additieven toe te passen. Verschillende soorten oliën, bevochtigers, hulpstoffen, herbiciden, fungiciden, andere pesticiden, of bactericiden kunnen aan de actieve verbindingen worden toegevoegd, eventueel pas vlak voor het gebruik (tankmix). Deze middelen kunnen worden ver- mengd met de verbindingen van de agrochemische formuleringen die de verbindingen van formule (|) bevatten in een gewichtsverhouding van 1:100 tot 100:1, bij voorkeur 1:10 tot 10:1.The agrochemical formulations containing the compounds of formula (I) can also be successfully used in the ultra-low volume process (ULV), where it is possible to use compositions containing more than 95% by weight of active substance or even to use the active substance without additives. Different types of oils, wetting agents, additives, herbicides, fungicides, other pesticides or bactericides can be added to the active compounds, possibly just before use (tank mix). These agents can be mixed with the compounds of the agrochemical formulations containing the compounds of formula (|) in a weight ratio of 1:100 to 100:1, preferably 1:10 to 10:1.

De samenstellingen van deze uitvinding kunnen ook meststoffen (zoals ammoniumni- traat, ureum, kalium en superfosfaat), fytotoxische stoffen en plantengroeiregulatoren (plant growth amendments) en beschermstoffen bevatten. Deze kunnen achtereenvol- gens of in combinatie met de hierboven beschreven samenstellingen worden gebruikt, eventueel ook pas vlak voor gebruik toegevoegd (tankmix). De plant(en) kan (kunnen) bijvoorbeeld met een samenstelling van deze uitvinding worden besproeid, hetzij vóór, hetzij na de behandeling met de meststoffen. In de agrochemische formuleringen die de verbindingen van formule (I) bevatten, hangt de gewichtsverhouding van de verbindingen in het algemeen af van de eigenschappen van de verbindingen van de agrochemische formuleringen die de verbindingen van for- mule (1) bevatten.The compositions of this invention may also contain fertilizers (such as ammonium nitrate, urea, potassium and superphosphate), phytotoxic agents and plant growth regulators (plant growth amendments) and safeners. These can be used sequentially or in combination with the compositions described above, possibly also added just before use (tank mix). For example, the plant(s) may be sprayed with a composition of this invention either before or after treatment with the fertilizers. In the agrochemical formulations containing the compounds of formula (I), the weight ratio of the compounds generally depends on the properties of the compounds of the agrochemical formulations containing the compounds of formula (1).

De agrochemische formuleringen die de verbindingen van formule (I) bevatten, kunnen afzonderlijk worden gebruikt of reeds geheel of gedeeltelijk met elkaar worden ver- mengd om de samenstelling volgens de uitvinding te bereiden. Zij kunnen ook worden verpakt en verder worden gebruikt als combinatiecompositie zoals een kit van onderde- len.The agrochemical formulations containing the compounds of formula (I) can be used individually or already wholly or partially mixed together to prepare the composition according to the invention. They can also be packaged and further used as a combination composition such as a kit of parts.

De gebruiker brengt de samenstelling volgens de uitvinding gewoonlijk aan vanuit een voordoseertoestel, een rugspuit, een spuittank of een sproeivliegtuig. Hierbij wordt de agrochemische samenstelling aangemaakt met water en/of buffer tot de gewenste toe- passingsconcentratie, waarbij eventueel nog andere hulpstoffen kunnen worden toege- voegd, en aldus wordt de gebruiksklare spuitvloeistof of de agrochemische samenstel- ling volgens de uitvinding verkregen. Gewoonlijk wordt 50 tot 500 liter gebruiksklare spuitvloeistof per hectare nuttig landbouwareaal toegediend, bij voorkeur 50 tot 400 Ii- ter.The user usually applies the composition of the invention from a pre-doser, a backpack sprayer, a spray tank or a sprayer. Here, the agrochemical composition is prepared with water and/or buffer to the desired application concentration, to which other additives may be added if necessary, and the ready-to-use spray liquid or the agrochemical composition according to the invention is thus obtained. Usually 50 to 500 liters of ready-to-use spray liquid are applied per hectare of useful agricultural area, preferably 50 to 400 liters.

In een bijzondere belichaming wordt de absolute hoeveelheid van de werkzame stoffen, vertegenwoordigd door formule (1), gebruikt tussen 1 mg/liter en 100 mg/liter, in het bij- zonder tussen 1 mg/liter en 20 mg/liter, in het bijzonder tussen 1 mg/liter en 25 mg/liter, in het bijzonder tussen 2 mg/liter en 200 mg/liter vooral tussen 2 mg/l en 100 mg/l, vooral tussen 2 mg/l en 50 mg/l, vooral tussen 2 mg/l en 25 mg/l, vooral tussen 4 mg/l en 40 mg/l, vooral tussen 4 mg/l en 20 mg/l, vooral tussen 4 mg/l en 16 mg/l, en vooral tussen 4 mg/l en 12 mg/l.In a particular embodiment, the absolute amount of the active substances represented by formula (1) used is between 1 mg/litre and 100 mg/litre, in particular between 1 mg/litre and 20 mg/litre, in particular in particular between 1 mg/litre and 25 mg/litre, in particular between 2 mg/litre and 200 mg/litre especially between 2 mg/l and 100 mg/l, in particular between 2 mg/l and 50 mg/l, in particular between 2 mg/l and 25 mg/l, especially between 4 mg/l and 40 mg/l, especially between 4 mg/l and 20 mg/l, especially between 4 mg/l and 16 mg/l, and especially between 4 mg/l and 12 mg/l.

Volgens één belichaming kunnen de afzonderlijke verbindingen van de agrochemische formuleringen die de verbindingen van formule (I) bevatten, geformuleerd als samen-In one embodiment, the individual compounds of the agrochemical formulations containing the compounds of formula (I) may be formulated as combinations

stelling (of formulering) zoals delen van een kit of delen van het inventieve mengsel, door de gebruiker zelf worden gemengd in een spuittank en kunnen verdere hulpstoffen worden toegevoegd, indien van toepassing (tankmengsel).composition (or formulation) such as parts of a kit or parts of the inventive mixture, can be mixed by the user himself in a spray tank and further excipients can be added, if applicable (tank mix).

Onder "agrochemisch middel" wordt hier verstaan: elke werkzame stof die in de agro- chemische industrie kan worden gebruikt (met inbegrip van toepassingen in de land- bouw, de tuinbouw, de bloementeelt en voor gebruik in huis en tuin, maar ook pro- ducten die bestemd zijn voor niet-gewasgebonden toepassingen zoals toepassingen ter bestrijding van ongewenste insecten en knaagdieren in het kader van de volksgezond- heid/bestrijding van ongedierte, huishoudelijk gebruik, zoals fungiciden en insecticiden voor huishoudelijk gebruik, en middelen ter bescherming van planten of delen van plan- ten, gewassen, bollen, knollen, vruchten (bijv.b.v. tegen schadelijke organismen, ziek- ten of plagen); voor het onder controle houden, bij voorkeur bevorderen of doen toene- men van de groei van planten; en/of voor het bevorderen van de opbrengst van planten, gewassen of de delen van planten die worden geoogst (b.v. de vruchten, bloemen, za- den enz.). Een "agrochemische samenstelling" zoals hier gebruikt, is een samenstelling voor agro- chemisch gebruik, zoals hier gedefinieerd, die ten minste één werkzame stof van een verbinding van formule (I) bevat, eventueel met één of meer additieven die een optimale dispersie, atomisering, depositie, bevochtiging van de bladeren, distributie, retentie en/of opname van agrochemische middelen bevorderen. Dergelijke additieven zijn bij- voorbeeld verdunningsmiddelen, oplosmiddelen, hulpstoffen, oppervlakte-actieve stof- fen, bevochtigingsmiddelen, spreidingsmiddelen, oliën, stickers, viscositeitsregelaars (zoals verdikkingsmiddelen, penetranten), pH-regelaars (zoals buffers, aanzuringsmid- delen), antizinkmiddelen, antivriesmiddelen, fotobeschermingsmiddelen, antischuim- middelen, biociden en/of driftremmers. Een "drager", zoals hierin gebruikt, is een vaste, halfvaste of vloeibare drager waarin of waarop een werkzame stof op geschikte wijze kan worden opgenomen, geïmmobili- seerd, geïmmobiliseerd, geadsorbeerd, geabsorbeerd, gebonden, ingekapseld, inge- bed, bevestigd of gecomprimeerd. Niet-limiterende voorbeelden van dergelijke dragers zijn nanocapsules, microcapsules, nanosferen, microsferen, nanodeeltjes, microdeel- tjes, liposomen, blaasjes, parels, een gel, zwakke ionische harsdeeltjes, liposomen, cochleaat-afleveringsvehikels kleine korrels, granulaten, nanobuisjes, bucky-balletjes, waterdruppeltjes die deel uitmaken van een water-in-olie-emulsie, oliedruppeltjes die deel uitmaken van een olie-in-water-emulsie, organische materialen zoals kurk, hout of andere materialen van plantaardige oorsprong (bv.bijvoorbeeld in de vorm van zaad- doppen, houtspaanders, pulp, bolletjes, kralen, vellen of enige andere geschikte vorm), papier of karton, anorganische materialen zoals talk, klei, microkristallijne cellulose, sili-The term "agrochemical" means here: any active substance that can be used in the agrochemical industry (including applications in agriculture, horticulture, floriculture and for use in the home and garden, but also pro- products intended for non-crop applications such as applications for the control of unwanted insects and rodents in the context of public health/pest control, domestic use, such as fungicides and insecticides for domestic use, and plant or part protection products of plants, crops, bulbs, tubers, fruits (e.g. against harmful organisms, diseases or pests); for controlling, preferably promoting or increasing the growth of plants; and/or for enhancing the yield of plants, crops or the parts of plants that are harvested (e.g., the fruits, flowers, seeds, etc.) An "agrochemical compound" as used herein kt, is a composition for agrochemical use, as defined herein, containing at least one active substance of a compound of formula (I), optionally with one or more additives ensuring optimum dispersion, atomization, deposition, wetting of the leaves promote distribution, retention and/or uptake of agrochemicals. Such additives are, for example, diluents, solvents, auxiliaries, surfactants, wetting agents, spreading agents, oils, stickers, viscosity regulators (such as thickeners, penetrants), pH regulators (such as buffers, acidifiers), anti-zinc agents, antifreeze agents , photoprotectants, defoamers, biocides and/or drift inhibitors. A "carrier" as used herein is a solid, semi-solid or liquid carrier in or onto which an active agent can be suitably incorporated, immobilized, immobilized, adsorbed, absorbed, bound, encapsulated, embedded, attached or compressed. Non-limiting examples of such carriers are nanocapsules, microcapsules, nanospheres, microspheres, nanoparticles, microparticles, liposomes, vesicles, beads, a gel, weak ionic resin particles, liposomes, cochleate delivery vehicles, small granules, granules, nanotubes, bucky balls , water droplets that are part of a water-in-oil emulsion, oil droplets that are part of an oil-in-water emulsion, organic materials such as cork, wood or other materials of vegetable origin (e.g. in the form of seed - husks, wood chips, pulp, pellets, beads, sheets or any other suitable form), paper or cardboard, inorganic materials such as talc, clay, microcrystalline cellulose, silica

ca, aluminiumoxide, silicaten en zeolieten, of zelfs microbiële cellen (zoals gistcellen) of geschikte fracties of fragmenten daarvan.ca, alumina, silicates and zeolites, or even microbial cells (such as yeast cells) or suitable fractions or fragments thereof.

De termen "effectieve hoeveelheid", "effectieve dosis" en "effectieve hoeveelheid", zoals hier gebruikt, betekenen de hoeveelheid die nodig is om het gewenste resultaat of de gewenste resultaten te bereiken.The terms "effective amount", "effective dose" and "effective amount" as used herein mean the amount necessary to achieve the desired result or results.

Meer exemplarische informatie over hoeveelheden, toepassingswijzen en te gebruiken geschikte verhoudingen wordt hieronder gegeven.More exemplary information on amounts, modes of application and appropriate ratios to be used is given below.

De vakman is zich terdege bewust van het feit dat een dergelijke hoeveelheid kan vari- eren in een breed bereik en afhankelijk is van diverse factoren zoals de behandelde cultuurplant en de klimatologische en bodemomstandigheden.Those skilled in the art are well aware of the fact that such an amount may vary in a wide range and depends on various factors such as the cultivated plant treated and the climatic and soil conditions.

De hier gebruikte termen "bepalen", "meten", "beoordelen", "controleren" en "analyse- ren" zijn onderling verwisselbaar en omvatten zowel kwantitatieve als kwalitatieve bepa- lingen.The terms "determine", "measure", "assess", "monitor" and "analyze" as used herein are interchangeable and include both quantitative and qualitative determinations.

Het is duidelijk dat de agrochemische samenstelling stabiel is, zowel tijdens opslag als tijdens gebruik, wat betekent dat de integriteit van de agrochemische samenstelling be- houden blijft onder opslag- en/of gebruiksomstandigheden van de agrochemische sa- menstelling, die verhoogde temperaturen, vries-dooicycli, veranderingen in pH of in io- nensterkte, UV-straling, aanwezigheid van schadelijke chemicaliën en dergelijke kun- nen omvatten.It is clear that the agrochemical composition is stable both during storage and use, which means that the integrity of the agrochemical composition is maintained under storage and/or use conditions of the agrochemical composition, which include elevated temperatures, freezing may include thaw cycles, changes in pH or in ionic strength, UV radiation, presence of harmful chemicals, and the like.

Meer bij voorkeur blijven de verbindingen van formule (I) zoals hier be- schreven stabiel in de agrochemische samenstelling, wat betekent dat de integriteit en de activiteit van de verbindingen behouden blijven onder opslag- en/of gebruiksomstan- digheden van de agrochemische samenstelling, die verhoogde temperaturen, vries- dooicycli, veranderingen in pH of in ionensterkte, UV-straling, de aanwezigheid van schadelijke chemicaliën en dergelijke kunnen omvatten.More preferably, the compounds of formula (I) as described herein remain stable in the agrochemical composition, meaning that the integrity and activity of the compounds are maintained under storage and/or use conditions of the agrochemical composition, which elevated temperatures, freeze-thaw cycles, changes in pH or in ionic strength, UV radiation, the presence of harmful chemicals, and the like.

Bij voorkeur blijven de verbin- dingen van formule (|) stabiel in de agrochemische samenstelling wanneer de agro- chemische samenstelling wordt opgeslagen bij omgevingstemperatuur gedurende een periode van twee jaar of wanneer de agrochemische samenstelling wordt opgeslagen bij 54°C gedurende een periode van twee weken.Preferably, the compounds of formula (|) remain stable in the agrochemical composition when the agrochemical composition is stored at ambient temperature for a period of two years or when the agrochemical composition is stored at 54°C for a period of two weeks .

Bij voorkeur behoudt de agrochemi- sche samenstelling van de onderhavige uitvinding ten minste ongeveer 70% activiteit, bij voorkeur ten minste ongeveer 70% tot 80% activiteit, bij voorkeur ongeveer 80% totPreferably, the agrochemical composition of the present invention retains at least about 70% activity, preferably at least about 70% to 80% activity, preferably about 80% to

90% activiteit of meer. Voorbeelden van geschikte draagstoffen zijn onder meer al- ginaten, gommen, zetmeel, B-cyclodextrinen, cellulosen, polyureum, polyurethaan, po- lyester of klei. De agrochemische samenstelling kan in om het even welke formulering voorkomen; de voorkeur gaat uit naar poeders, bevochtigbare poeders, bevochtigbare granulaten, in water dispergeerbare granulaten, emulsies, emulgeerbare concentraten, stof, suspen- sies, suspensieconcentraten, suspoemulsies, capsulesuspensies, waterige dispersies, oliedispersies, aërosolen, pasta's, schuim, slurries of vloeibaar gemaakte concentraten. In weer een andere belichaming voorziet de uitvinding in het gebruik van de agrochemi- sche samenstellingen van de uitvinding voor het verhogen van de abiotische stresstole- rantie bij planten.90% activity or more. Examples of suitable carriers include alginates, gums, starch, β-cyclodextrins, celluloses, polyurea, polyurethane, polyester or clay. The agrochemical compound can appear in any formulation; preferred are powders, wettable powders, wettable granules, water dispersible granules, emulsions, emulsifiable concentrates, dusts, suspensions, suspension concentrates, suspoemulsions, capsule suspensions, aqueous dispersions, oil dispersions, aerosols, pastes, foams, slurries or liquefied concentrates. In yet another embodiment, the invention provides the use of the agrochemical compositions of the invention to increase abiotic stress tolerance in plants.

De agrochemische samenstelling volgens de uitvinding kan eenmaal op een gewas worden toegepast, maar kan ook twee of meer keren na elkaar worden toegepast met een interval tussen elke twee toepassingen. De agrochemische samenstelling volgens de uitvinding kan alleen of in combinatie met andere materialen, bij voorkeur andere agrochemische samenstellingen, op het gewas worden aangebracht; als alternatief kan de agrochemische samenstelling volgens de uitvinding afzonderlijk op het gewas wor- den aangebracht met andere materialen, bij voorkeur andere agrochemische samen- stellingen, die op verschillende tijdstippen op hetzelfde gewas worden aangebracht.The agrochemical composition according to the invention can be applied once to a crop, but can also be applied two or more times in succession with an interval between each two applications. The agrochemical composition according to the invention can be applied to the crop alone or in combination with other materials, preferably other agrochemical compositions; alternatively, the agrochemical composition according to the invention can be applied separately to the crop with other materials, preferably other agrochemical compositions, applied to the same crop at different times.

In weer een andere belichaming voorziet de uitvinding in een methode voor de vervaar- diging van ("of de productie van" hetgeen gelijkwaardig is aan verwoording) een agro- chemische samenstelling volgens de uitvinding, bestaande uit de formulering van een molecuul van formule (1) zoals hiervóór gedefinieerd, samen met ten minste één gebrui- kelijke agrochemische hulpstof. Geschikte fabricagemethoden zijn bekend in de kunst en omvatten, maar zijn niet beperkt tot, mengen met hoge of lage afschuifsnelheid, nat of droog malen, druipgieten, inkapselen, emulgeren, coaten, encrusteren, pilling, extru- siegranulatie, wervelbedgranulatie, co-extrusie, sproeidrogen, sproeikoelen, verneve- ling, additie- of condensatiepolymerisatie, interfaciale polymerisatie, polymerisatie in situ, coacervatie, sproei-inkapseling, afkoeling van gesmolten dispersies, verdamping van oplosmiddelen, fasescheiding, solventextractie, sol-gelpolymerisatie, bekleding met een vloeistofbed, bekleding met een pan, smelten, passieve of actieve absorptie of ad- sorptie.In yet another embodiment, the invention provides a method for the manufacture of ("or the production of" which is equivalent to wording) an agrochemical composition of the invention comprising the formulation of a molecule of formula (1 ) as defined above, together with at least one common agrochemical adjuvant. Suitable manufacturing methods are known in the art and include, but are not limited to, high or low shear mixing, wet or dry milling, drip casting, encapsulation, emulsification, coating, encrusting, pilling, extrusion granulation, fluidized bed granulation, coextrusion, spray drying, spray cooling, atomization, addition or condensation polymerization, interfacial polymerization, in situ polymerization, coacervation, spray encapsulation, cooling of molten dispersions, evaporation of solvents, phase separation, solvent extraction, sol-gel polymerization, fluid bed coating, coating with a pan, melting, passive or active absorption or adsorption.

De gebruikelijke agrochemische hulpstoffen zijn algemeen bekend en omvatten bij voorkeur, maar zijn niet beperkt tot, waterige en/of organische oplosmiddelen, pH- regelaars (zoals buffers, zuurteregelaars), oppervlakteactieve stoffen, bevochtigings- middelen, spreidingsmiddelen, adhesiebevorderaars (zoals tackifiers, stickers), draag- stoffen, vulstoffen, viscositeitsregelaars (zoals verdikkingsmiddelen), emulgatoren, dis- pergeermiddelen, sequestreermiddelen, antizinkmiddelen, coalescentiemiddelen, reolo- gieversterkers, antischuimmiddelen, fotobeschermers, antivriesmiddelen, biostimulan- ten (met inbegrip van bacteriële en/of schimmelinoculanten of micro-organismen), bio- ciden (bij voorkeur geselecteerd uit herbiciden, bactericiden, fytotoxische stoffen, fungi- ciden, pesticiden en mengsels daarvan), plantengroeiregulatoren, beschermstoffen, penetranten, antiklontermiddelen, minerale en/of plantaardige oliën en/of wassen, kleurstoffen en driftwerende middelen of een geschikte combinatie daarvan. De gebrui- kelijke agrochemische hulpstoffen zijn bij voorkeur geen waterige of organische oplos- middelen.The common agrochemical adjuvants are well known and preferably include, but are not limited to, aqueous and/or organic solvents, pH adjusters (such as buffers, acidity regulators), surfactants, wetting agents, spreading agents, adhesion promoters (such as tackifiers, stickers ), carriers, fillers, viscosity regulators (such as thickeners), emulsifiers, dispersants, sequestering agents, anti-zinc agents, coalescing agents, rheology enhancers, anti-foaming agents, photoprotectants, anti-freezing agents, biostimulants (including bacterial and/or fungal inoculants or micro organisms), biocides (preferably selected from herbicides, bactericides, phytotoxic substances, fungicides, pesticides and mixtures thereof), plant growth regulators, safeners, penetrants, anti-caking agents, mineral and/or vegetable oils and/or waxes, dyes and anti-drift agents or a suitable combination ation thereof. The usual agrochemical auxiliaries are preferably not aqueous or organic solvents.

Het insecticide kan bestaan uit een organofosfaat, een carbamaat, een pyrethroïde, een acaricide, een alkylftalaat, boorzuur, een boraat, een fluoride, zwavel, een haloaroma- tisch gesubstitueerd ureum, een koolwaterstofester, een insecticide op biologische ba- sis of een combinatie daarvan. Het herbicide, dat wordt gebruikt om ongewenste plan- ten te verwijderen, kan een chloorfenoxyverbinding, een nitrofenolverbinding, een nitro- cresolverbinding, een dipyridylverbinding, een acetamide, een alifatische acide, een anilide, een benzamide, een benzoëzuur, een benzoëzuurderivaat, anijszuur, een anijs- zuurderivaat, een benzonitril, benzothiadiazinon-dioxide, een thiocarbamaat, een car- bamaat, een carbanilaat, een chloropyridilaat of een combinatie daarvan bevatten, carbanilaat, chlooropyridinyl, een cyclohexenon derivaat, een dinitroaminobenzeen derivaat, een fluorodinitrotoluidine verbinding, isoxazolidinon, nicotinezuur acide, isopropylamine, een isopropylaminederivaat, oxadiazolinon, een fosfaat, een ftalaat, een picolinezuurverbin- ding, een triazine, een triazool, een uracil, een ureumderivaat, endothall, natriumchlo- raat, of een combinatie daarvan. Het fungicide kan bestaan uit een gesubstitueerd ben- zeen, een thiocarbamaat, een ethyleen-bis-dithiocarbamaat, een thiofthalidamide, een koperverbinding, een organische kwikverbinding, een organotinverbinding, een cadmi- umverbinding, anilazine, benomyl, cyclohexamide, dodine, etridiazool, iprodion, met- laxyl, thiamimefon, triforine, of een combinatie daarvan. De schimmelinoculant kan be- staan uit een schimmelinoculant van de familie Glomeraceae, een schimmelinoculant van de familie Claroidoglomeraceae, een schimmelinoculant van de familie Acaulospo-The insecticide may be an organophosphate, a carbamate, a pyrethroid, an acaricide, an alkyl phthalate, boric acid, a borate, a fluoride, sulfur, a haloaromatic substituted urea, a hydrocarbon ester, a bio-based insecticide, or a combination of them. The herbicide used to remove unwanted plants may include a chlorophenoxy compound, a nitrophenol compound, a nitrocresol compound, a dipyridyl compound, an acetamide, an aliphatic acid, an anilide, a benzamide, a benzoic acid, a benzoic acid derivative, anisic acid, an anisic acid derivative, a benzonitrile, benzothiadiazinon dioxide, a thiocarbamate, a carbamate, a carbanilate, a chloropyridilate or a combination thereof, carbanilate, chloropyridinyl, a cyclohexenone derivative, a dinitroaminobenzene derivative, a fluorodinitrotoluidine compound, isoxazolidinone, nicotinic acid acide, isopropylamine, an isopropylamine derivative, oxadiazolinone, a phosphate, a phthalate, a picolinic acid compound, a triazine, a triazole, a uracil, a urea derivative, endohall, sodium chlorate, or a combination thereof. The fungicide may be a substituted benzene, a thiocarbamate, an ethylene bis-dithiocarbamate, a thiophthalidamide, a copper compound, an organic mercury compound, an organotin compound, a cadmium compound, anilazine, benomyl, cyclohexamide, dodine, etridiazole, iprodione , metlaxyl, thamimefon, triforine, or a combination thereof. The fungal inoculant may be a fungal inoculant of the family Glomeraceae, a fungal inoculant of the family Claroidoglomeraceae, a fungal inoculant of the family Acaulospo-

raceae, een schimmelinoculant van de familie Sacculospraceae een schimmelinoculant van de familie Entrophosporaceae, een schimmelinoculant van de familie Pacidsprora- ceae, een schimmelinoculant van de familie Diversisporaceae, een schimmelinoculant van de familie Paraglomeraceae, een schimmelinoculant van de familie Archaeospora- ceae een schimmelinoculant van de familie Geosiphonaceae, een schimmelinoculant van de familie Ambisporacea, een schimmelinoculant van de familie Scutellosproaceae, een schimmelinoculant van de familie Dentiscultataceae, een schimmelinoculant van de familie Racocetraceae een schimmelinoculant van het fylum Basidiomycota, een schimmelinoculant van het fylum Ascomycota, een schimmelinoculant van het fylum Zygomycota, een schimmelinoculant van het genus G/omus of een combinatie daarvan. De bacteriële inoculant kan een bacteriële inoculant van het geslacht Rhizobium omvat- ten, een bacteriële inoculant van het geslacht Bradyrhizobium, een bacteriële inoculant van het geslacht Mesorhizobium, een bacteriële inoculant van het geslacht Azorhizobi- um, een bacteriële inoculant van het geslacht Allorhizobium bacteriële inoculant van het genus Burkholderia, bacteriële inoculant van het genus Sinorhizobium, bacteriële inocu- lant van het genus K/uyvera, bacteriële inoculant van het genus Azotobacter, bacteriële inoculant van het genus Pseudomonas bacteriële inoculant van het genus Azosprillium, bacteriële inoculant van het genus Bacillus, bacteriële inoculant van het genus Strepto- myces, bacteriële inoculant van het genus Paenibacillus, bacteriële inoculant van het genus Paracoccus, bacteriële inoculant van het genus Enterobacter bacteriële inoculant van het genus A/caligenes, bacteriële inoculant van het genus Mycobacterium, bacteri- ele inoculant van het genus Trichoderma, bacteriële inoculant van het genus G/ioc/adi- um, bacteriële inoculant van het genus K/ebsiella, of een combinatie daarvan.raceae, a fungal inoculant of the family Sacculospraceae a fungal inoculant of the family Entrophosporaceae, a fungal inoculant of the family Pacidsproraceae, a fungal inoculant of the family Diversisporaceae, a fungal inoculant of the family Paraglomeraceae, a fungal inoculant of the family Archaeosporaceae a fungal inoculant of the family Geosiphonaceae, a fungal inoculant of the family Ambisporacea, a fungal inoculant of the family Scutellosproaceae, a fungal inoculant of the family Dentiscultataceae, a fungal inoculant of the family Racocetraceae a fungal inoculant of the phylum Basidiomycota, a fungal inoculant of the phylum Ascomycota, a fungal inoculant of the phylum Zygomycota , a fungal inoculant of the genus G/omus or a combination thereof. The bacterial inoculant may include a bacterial inoculant of the genus Rhizobium, a bacterial inoculant of the genus Bradyrhizobium, a bacterial inoculant of the genus Mesorhizobium, a bacterial inoculant of the genus Azorhizobium, a bacterial inoculant of the genus Allorhizobium bacterial inoculant of the genus Burkholderia, bacterial inoculant of the genus Sinorhizobium, bacterial inoculant of the genus Kuyvera, bacterial inoculant of the genus Azotobacter, bacterial inoculant of the genus Pseudomonas bacterial inoculant of the genus Azosprillium, bacterial inoculant of the genus Bacillus, bacterial inoculant of the genus Streptomyces, bacterial inoculant of the genus Paenibacillus, bacterial inoculant of the genus Paracoccus, bacterial inoculant of the genus Enterobacter bacterial inoculant of the genus A/caligenes, bacterial inoculant of the genus Mycobacterium, bacterial inoculant of the genus Trichoderma, bacterial inoculant of the genus G/ioc/adium, bacterial inoculant of the genus K/ebsiella, or a combination thereof.

Het mengsel kan bovendien ten minste één micro-organisme bevatten, gekozen uit de list bestaande uit Bacillus subtilis stam 713, Bacillus amyloliquefaciens MBI 600, Bacil- lus pumillus QST2808, Pseudomonas fluorescens, Bradyrhizobium japonicum, Tricho- derma vireus, Pseudomonas putida, Trichoderma harzianum Rifai-stam T22, Penicillium bilaii, Mesorhizobium, Azospirillum, Azotobacter vinelandii en Clostridium pasteurianum, Glomus-soorten.The mixture may additionally contain at least one microorganism selected from the list consisting of Bacillus subtilis strain 713, Bacillus amyloliquefaciens MBI 600, Bacillus pumillus QST2808, Pseudomonas fluorescens, Bradyrhizobium japonicum, Trichoderma vireus, Pseudomonas putida, Trichoderma harzianum Rifai strain T22, Penicillium bilaii, Mesorhizobium, Azospirillum, Azotobacter vinelandii and Clostridium pasteurianum, Glomus species.

De heterocyclische verbindingen van de algemene formule (I) die volgens de onderha- vige uitvinding worden gebruikt, kunnen in combinatie met deze hulpstoffen worden ge- bruikt. De gebruikte hulpstoffen hangen af van de specifieke toepassingsvorm en de werkzame stof en omvatten bij voorkeur oplosmiddelen, vaste dragers, dispergeermid- delen of emulgeermiddelen, zoals oplosbaarheidsbevorderende stoffen, beschermende colloïden, oppervlakteactieve stoffen en adhesiemiddelen. Verder kunnen organische en anorganische verdikkingsmiddelen, bactericiden, antivriesmiddelen, antischuimmid- delen, eventueel kleurstoffen en tackifiers of bindmiddelen worden gebruikt in combina- tie met de nitrificatieremmers en in het meststofmengsel. Geschikte hulpstoffen worden besproken in WO 2013/121384 op biz. 25 t/m 26. Andere mogelijke voorkeursingrediënten zijn oliën, bevochtigers, hulpstoffen, biostimu- lanten, herbiciden, bactericiden, andere fungiciden en/of pesticiden. Deze worden bij- voorbeeld besproken in WO 2013/121384 op biz. 28/29. Volgens één belichaming van de uitvinding zijn de hulpstoffen geen oplosmiddelen.The heterocyclic compounds of general formula (I) used according to the present invention can be used in combination with these excipients. The excipients used depend on the specific application form and the active substance and preferably include solvents, solid carriers, dispersants or emulsifiers, such as solubilizers, protective colloids, surfactants and adhesives. Furthermore, organic and inorganic thickeners, bactericides, antifreezes, antifoams, optionally colorants and tackifiers or binders can be used in combination with the nitrification inhibitors and in the fertilizer mixture. Suitable excipients are discussed in WO 2013/121384 at p. 25 through 26. Other possible preferred ingredients are oils, wetting agents, adjuvants, biostimulants, herbicides, bactericides, other fungicides and/or pesticides. These are discussed, for example, in WO 2013/121384 at p. 28/29. In one embodiment of the invention, the excipients are not solvents.

De meststofmengsels zijn bij voorkeur in vaste vorm, waaronder poeders, prils en gra- nules. Voorts is het mogelijk de nitrificatieremmer in de vorm van een formulering, op- lossing of dispersie afzonderlijk of gelijktijdig met een meststof toe te dienen.The fertilizer mixtures are preferably in solid form, including powders, prills and granules. Furthermore, it is possible to apply the nitrification inhibitor in the form of a formulation, solution or dispersion separately or simultaneously with a fertilizer.

Bovendien kan de nitrificatieremmer van de onderhavige uitvinding worden gebruikt voor het verminderen van de stikstofverliezen in organische meststoffen en ook op oogstafval en weiland of tijdens de opslag van vloeibare mest en het volgen van de ammoniumbelasting in dierenstallen.In addition, the nitrification inhibitor of the present invention can be used to reduce the nitrogen losses in organic fertilizers and also on crop waste and pasture or during liquid manure storage and monitoring of ammonium load in livestock houses.

Voor de respectieve toepassingen kan worden verwezen naar US 6.139.596 en WO 2013/121384 alsook naar WO 2015/086823 en WO 2016/207210. De onderhavige uitvinding heeft ook betrekking op een methode voor de bemesting van land- of tuinbouwgronden, waarbij een meststofmengsel dat verbindingen A en B bevat A. een anorganische en/of organische en/of organominerale meststof en B. 10 tot 10000 gewichtsprocenten, berekend op de meststof, van een heterocycli- sche verbinding met algemene formule (I) als hierboven omschreven, of de verbindingen A en B afzonderlijk, maar binnen een periode van O tot 5 uur, bij voorkeur O tot 1 uur, en bij voorkeur ongeveer op hetzelfde tijdstip, wordt op de bodem aangebracht.For the respective applications, reference may be made to US 6,139,596 and WO 2013/121384 as well as to WO 2015/086823 and WO 2016/207210. The present invention also relates to a method for fertilizing agricultural or horticultural soils, wherein a fertilizer mixture containing compounds A and B contains A. an inorganic and/or organic and/or organomineral fertilizer and B. 10 to 10000 weight percent, calculated on the fertilizer, of a heterocyclic compound of general formula (I) as defined above, or the compounds A and B individually, but within a period of 0 to 5 hours, preferably 0 to 1 hour, and preferably at about the same time time, is applied to the bottom.

Parallel aan de verbetering van de stikstofbenutting in de ammonium- of ureumhouden- de minerale en organische en organominerale meststoffen, heeft het gebruik van de nitrificatieremmers, volgens de huidige uitvinding, en van samenstellingen die deze be- vatten, tot gevolg dat de opbrengst en de productie van biomassa van gewasgewassen, in sommige gevallen aanzienlijk, toeneemt.Parallel to the improvement of the nitrogen utilization in the ammonium or urea-containing mineral and organic and organomineral fertilizers, the use of the nitrification inhibitors, according to the present invention, and of compositions containing them, has the consequence that the yield and the crop biomass production, in some cases significantly, increases.

Evenzo kan de nitrificatieremmer volgens de uitvinding worden toegevoegd aan organi- sche meststoffen, zoals vloeibare mest, bijvoorbeeld tijdens de feitelijke opslag van dergelijke meststoffen, om te voorkomen dat stikstofvoedingsstoffen verloren gaan door een vertraagde omzetting van de afzonderlijke stikstofvormen in gasvormige, dus vluch- tige, stikstofverbindingen, en tegelijkertijd bij te dragen aan een verlaging van de am- moniakbelasting in dierenstallen. Bovendien kunnen de nitrificatieremmer of samenstel- lingen die de nitrificatieremmer bevatten, worden gebruikt op landbouwstengels en wei- degronden om gasvormig stikstofverlies te verminderen en nitraatuitspoeling te voor- komen.Likewise, the nitrification inhibitor according to the invention can be added to organic fertilizers, such as liquid fertilizers, for example during the actual storage of such fertilizers, to prevent nitrogen nutrients from being lost through a delayed conversion of the individual nitrogen forms into gaseous, i.e. volatile , nitrogen compounds, and at the same time contribute to a reduction of the ammonia load in animal houses. In addition, the nitrification inhibitor or compositions containing the nitrification inhibitor can be used on agricultural stems and pastures to reduce gaseous nitrogen loss and prevent nitrate leaching.

In het algemeen kan de N-heterocyclische verbinding van de algemene formule (1) of (Il) of (Ill) of (IV) worden gebruikt voor het verminderen van de stikstof- of koolstofverliezen in anorganische en/of organische en/of organinerale meststoffen of stikstof- of koolstof- houdende verbindingen of materialen en ook op oogstafval en weidegrond of tijdens de opslag van vloeibare mest en voor het verminderen van de ammoniakbelasting in die- renstallen.In general, the N-heterocyclic compound of the general formula (1) or (II) or (III) or (IV) can be used for reducing nitrogen or carbon losses in inorganic and/or organic and/or organineral fertilizers or nitrogen- or carbon-containing compounds or materials and also on harvest waste and pasture land or during the storage of liquid manure and for reducing the ammonia load in livestock houses.

Stikstofverliezen zijn vaak te wijten aan N20- en/of NO-emissies of NO3-uitspoeling. Stikstofverliezen kunnen optreden in stikstofnoudende verbindingen of materialen, zoals wortels, planten, meststoffen, dieren, enz. Stikstofverliezen treden meestal op bij stik- stofhoudende minerale meststoffen of organische stikstofhoudende stoffen. De term "stikstofverliezen" omvat alle vormen van stikstof of stikstofverbindingen die verloren gaan via emissies of uitspoeling, zoals hierboven aangegeven. Een voorbeeld zijn broeikasgasemissies die kunnen worden verminderd door het gebruik van de N- heterocyclische verbinding van de onderhavige uitvinding.Nitrogen losses are often due to N2O and/or NO emissions or NO3 leaching. Nitrogen losses can occur in nitrogen-containing compounds or materials, such as roots, plants, fertilizers, animals, etc. Nitrogen losses usually occur in nitrogen-containing mineral fertilizers or organic nitrogen-containing substances. The term "nitrogen losses" includes all forms of nitrogen or nitrogen compounds that are lost through emissions or leaching, as indicated above. An example is greenhouse gas emissions that can be reduced by using the N-heterocyclic compound of the present invention.

Hetzelfde geldt voor koolstofverliezen die kunnen optreden in koolstofhoudende verbin- dingen of materialen. Koolstofhoudende verbindingen of materialen zijn bijvoorbeeld carbonaathoudende minerale meststoffen en koolstofnhoudend organisch materiaal, zo- als wortels, planten, dieren, organische meststoffen, enz. Koolstofverliezen treden vaak op in de vorm van CO2-emissies, die deel uitmaken van de broeikasgasemissies. Daarom kunnen de N-heterocyclische verbindingen van de onderhavige uitvinding wor- den gebruikt voor het voorkomen of verminderen van broeikasgasemissies van stikstof- of koolstofhoudende verbindingen of materialen. Deze materialen bevatten vaak stikstof en/of koolstof in covalent of ionisch gebonden vorm, b.v. in de vorm van ammonium, eiwit, nitraat, carbonaat, koolhydraten, cellulose, of andere organische koolstofhouden-The same applies to carbon losses that can occur in carbon-containing compounds or materials. Carbon-containing compounds or materials are, for example, carbonate mineral fertilizers and carbon-containing organic material, such as roots, plants, animals, organic fertilizers, etc. Carbon losses often occur in the form of CO2 emissions, which are part of greenhouse gas emissions. Therefore, the N-heterocyclic compounds of the present invention can be used to prevent or reduce greenhouse gas emissions from nitrogen- or carbon-containing compounds or materials. These materials often contain nitrogen and/or carbon in covalently or ionically bonded form, e.g. in the form of ammonium, protein, nitrate, carbonate, carbohydrates, cellulose, or other organic carbonaceous

de verbindingen. De termen "koolstof" en "stikstof" kunnen dus verwijzen naar de ele- mentaire vorm of naar verbindingen of materialen die koolstof- en/of stikstofatomen be- vatten.the connections. Thus, the terms "carbon" and "nitrogen" may refer to the elemental form or to compounds or materials containing carbon and/or nitrogen atoms.

Stikstof- en/of koolstofhoudende verbindingen of materialen kunnen aanwezig zijn in meststoffen, in de bodem, of in het milieu. Het meest in het oog springende effect van de N-heterocyclische verbindingen van de onderhavige uitvinding is de vermindering van broeikasgasemissies uit de bodem die stikstofnhoudende verbindingen of materialen bevat.Nitrogen and/or carbon-containing compounds or materials may be present in fertilizers, in the soil, or in the environment. The most prominent effect of the N-heterocyclic compounds of the present invention is the reduction of greenhouse gas emissions from soil containing nitrogen-containing compounds or materials.

Het meest efficiënt is de vermindering van broeikasgasemissies uit bemeste grond. De- ze broeikasgasemissies worden vaak veroorzaakt door processen na de nitrificatie.The most efficient is the reduction of greenhouse gas emissions from fertilized soil. These greenhouse gas emissions are often caused by post-nitrification processes.

De volgens de uitvinding te behandelen of in de grond te wortelen planten worden bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit landbouw-, bosbouw-, sier- en tuinbouw- gewassen, elk in hun natuurlijke of genetisch gemodificeerde vorm. Bij voorkeur worden niet-transgene landbouwplanten behandeld.The plants to be treated or rooted in the soil according to the invention are preferably selected from the group consisting of agricultural, forestry, ornamental and horticultural crops, each in its natural or genetically modified form. Preferably, non-transgenic agricultural plants are treated.

Landbouwgewassen die de voorkeur genieten zijn veldgewassen die worden gekozen uit de groep bestaande uit aardappelen, suikerbieten, tarwe, gerst, rogge, haver, sor- ghum, rijst, maïs, katoen, koolzaad, raapzaad, canola, sojabonen, erwten, veldbonen, zonnebloemen, suikerriet komkommers, tomaten, uien, prei, sla, pompoenen; nog meer bij voorkeur wordt de plant gekozen uit de groep bestaande uit tarwe, gerst, haver, rog- ge, sojabonen, maïs, koolzaad, katoen, suikerriet, rijst en sorghum.Preferred agricultural crops are field crops selected from the group consisting of potatoes, sugar beets, wheat, barley, rye, oats, sorghum, rice, corn, cotton, canola, rapeseed, canola, soybeans, peas, field beans, sunflowers , sugar cane cucumbers, tomatoes, onions, leeks, lettuce, pumpkins; even more preferably, the plant is selected from the group consisting of wheat, barley, oats, rye, soybeans, maize, rapeseed, cotton, sugar cane, rice and sorghum.

In een voorkeursbelichaming van de uitvinding wordt het te behandelen gewas gekozen uit de groep bestaande uit tomaat, aardappel, tarwe, gerst, haver, rogge, sojaboon, ma- is, koolzaad, canola, zonnebloem, katoen, suikerriet, suikerbiet, rijst, sorghum, weide- gras en weideland.In a preferred embodiment of the invention, the crop to be treated is selected from the group consisting of tomato, potato, wheat, barley, oats, rye, soybean, corn, rapeseed, canola, sunflower, cotton, sugar cane, sugar beet, rice, sorghum , meadow grass and meadow land.

In een andere voorkeursbelichaming van de uitvinding wordt het te behandelen gewas gekozen uit de groep bestaande uit tomaat, aardappel, tarwe, gerst, haver, rogge, soja- boon, maïs, koolzaad, canola, zonnebloem, katoen, suikerriet, suikerbiet, rijst en sor- ghum.In another preferred embodiment of the invention, the crop to be treated is selected from the group consisting of tomato, potato, wheat, barley, oats, rye, soybean, corn, rapeseed, canola, sunflower, cotton, sugar cane, sugar beet, rice and sorghum.

In een bijzonder voorkeursgeval van de uitvinding worden de te behandelen planten gekozen uit de groep bestaande uit tomaat, tarwe, gerst, haver, rogge, maïs, koolzaad, canola, suikerriet en rijst.In a particularly preferred case of the invention, the plants to be treated are selected from the group consisting of tomato, wheat, barley, oats, rye, maize, rapeseed, canola, sugar cane and rice.

In één belichaming is de plant die volgens de methode van de uitvinding moet worden behandeld, een landbouwplant. "Landbouwgewassen" zijn planten waarvan een deel (bijv. zaden) of het geheel op commerciële schaal wordt geoogst of geteeld of die als belangrijke bron dienen voor veevoer, voedingsmiddelen, vezels (bijv. katoen, linnen), brandstoffen (bijv. hout, bio-ethanol, biodiesel, biomassa) of andere chemische verbin- dingen. Landbouwgewassen die de voorkeur genieten zijn bijvoorbeeld granen, zoals tarwe, rogge, gerst, triticale, haver, sorghum of rijst, bieten, zoals suikerbieten of voe- derbieten; vruchten, zoals pruimen, steenvruchten of zacht fruit, zoals appelen, peren, pruimen, perziken, amandelen, kersen, aardbeien, frambozen, bramen of kruisbessen; peulvruchten, zoals linzen, erwten, luzerne of sojabonen; oliehoudende gewassen, zo- als koolzaad, raapzaad, canola, lijnzaad, mosterd, olijven, zonnebloemen, kokosnoot, cacaobonen, ricinusolie, oliepalmen, grondnoten of sojabonen; cucurbitaceae, zoals pompoenen, komkommers of meloenen; vezelgewassen, zoals katoen, vlas, hennep of jute; citrusvruchten, zoals sinaasappelen, citroenen, grapefruits (pompelmoezen) of mandarijnen; groenten, zoals spinazie, sla, asperges, kool, wortelen, uien, tomaten, aardappelen, komkommers of paprika's; laurahoudende planten, zoals avocado's, ka- neel of kamfer; energie- en grondstofplanten, zoals maïs, soja, koolzaad, canola, sui- kerriet of oliepalm; tabak; noten; koffie; thee; bananen; wijnstokken (tafeldruiven en druivensapdruiven); hop; turf; natuurrubberplanten.In one embodiment, the plant to be treated according to the method of the invention is an agricultural plant. "Agricultural crops" are plants, part or all of which (e.g., seeds) are harvested or grown on a commercial scale or serve as a major source of animal feed, foodstuffs, fibers (e.g., cotton, linen), fuels (e.g., wood, bio -ethanol, biodiesel, biomass) or other chemical compounds. Preferred agricultural crops are, for example, cereals, such as wheat, rye, barley, triticale, oats, sorghum or rice; beets, such as sugar beets or fodder beets; fruits, such as plums, stone fruits, or soft fruits, such as apples, pears, plums, peaches, almonds, cherries, strawberries, raspberries, blackberries, or gooseberries; legumes, such as lentils, peas, alfalfa, or soybeans; oilseed crops, such as rapeseed, rapeseed, canola, linseed, mustard, olives, sunflowers, coconut, cocoa beans, castor oil, oil palm, groundnuts or soybeans; cucurbits, such as pumpkins, cucumbers or melons; fiber crops, such as cotton, flax, hemp or jute; citrus fruits, such as oranges, lemons, grapefruits (grapefruit), or tangerines; vegetables, such as spinach, lettuce, asparagus, cabbage, carrots, onions, tomatoes, potatoes, cucumbers or peppers; laura-containing plants, such as avocados, cinnamon or camphor; energy and resource plants, such as corn, soybean, rapeseed, canola, sugar cane or oil palm; tobacco; nuts; coffee; tea; bananas; vines (table grapes and grape juice grapes); hop; peat; natural rubber plants.

Weidegras en grasland bestaan uit grassen of grasmengsels bestaande uit bijvoorbeeld blauwgras (Poa spp.), bentgras (Agrostis spp.), raaigras (Lolium spp.), zwenkgras (Fes- tuca spp, hybriden en cultivars), Zoysiagras (Zoysia spp.), Bermudagras (Cynodon spp.), St. Augustinegras, Bahigras (Paspalum), Duizendbladgras (Eremachloa), Tapijt- gras (Axonopus), Buffalogras en Gramagras. Weiden kunnen ook bestaan uit mengsels van bovengenoemde grassen, bijvoorbeeld raaigras, en Trifolium-soorten, bijvoorbeeld Trifolium pratensis en Trifolium repens, Medicago-soorten zoals Medicago sativa, Lo- tus-soorten zoals Lotus corniculatus, en Melilotus-soorten, bijvoorbeeld Melilotus albus. In één geval is de plant die volgens de methode van de uitvinding moet worden behan- deld, een tuinbouwplant. Onder "tuinbouwgewassen" worden planten verstaan die al- gemeen worden gebruikt in de tuinbouw - bijvoorbeeld de teelt van sierplanten, kruiden, groenten en/of fruit. Voorbeelden van siergewassen zijn graszoden, geraniums, pelar- gonia's, petunia's, begonia's en fuchsia's. Voorbeelden voor groenten zijn aardappelen, tomaten, paprika's, cucurbitaceae, komkommers, meloenen, watermeloenen, knoflook, uien, wortelen, kool, bonen, erwten en sla en meer bij voorkeur van tomaten, uien, erw-Meadow grass and grassland consist of grasses or grass mixtures consisting of, for example, blue grass (Poa spp.), bent grass (Agrostis spp.), rye grass (Lolium spp.), fescue (Festuca spp, hybrids and cultivars), Zoysia grass (Zoysia spp.) , Bermuda grass (Cynodon spp.), St. Augustine grass, Bahig grass (Paspalum), Yarrow grass (Eremachloa), Carpet grass (Axonopus), Buffalo grass and Grama grass. Pastures may also consist of mixtures of the above grasses, e.g. ryegrass, and Trifolium species, e.g. Trifolium pratensis and Trifolium repens, Medicago species such as Medicago sativa, Lotus species such as Lotus corniculatus, and Melilotus species, e.g. Melilotus albus. In one case, the plant to be treated according to the method of the invention is a horticultural plant. By "horticultural crops" is meant plants that are commonly used in horticulture - for example, the cultivation of ornamental plants, herbs, vegetables and/or fruit. Examples of ornamental crops are sod, geraniums, pelargonias, petunias, begonias and fuchsias. Examples for vegetables are potatoes, tomatoes, peppers, cucurbits, cucumbers, melons, watermelons, garlic, onions, carrots, cabbage, beans, peas and lettuce and more preferably tomatoes, onions, pea-

ten en sla. Voorbeelden voor fruit zijn appels, peren, kersen, aardbeien, citrusvruchten, perziken, abrikozen en bosbessen. In de tuinbouw vervangt een substraat vaak (een deel van) de grond.at and slay. Examples for fruits are apples, pears, cherries, strawberries, citrus fruits, peaches, apricots and blueberries. In horticulture, a substrate often replaces (part of) the soil.

In één geval is de plant die volgens de methode van de uitvinding moet worden behan- deld, een sierplant. "Sierplanten" zijn planten die gewoonlijk in de tuin worden gebruikt, b.v. in parken, tuinen en op balkons. Voorbeelden zijn graszoden, geraniums, pelargo- nia's, petunia's, begonia's en fuchsia's. In één geval is de plant die volgens de methode van de uitvinding moet worden behan- deld, een bosbouwgewas. Met de term "bosbouwgewas" worden bomen bedoeld, meer in het bijzonder bomen die in herbebossing of industriële aanplantingen worden ge- bruikt. Industriële aanplantingen dienen in het algemeen voor de commerciële productie van bosproducten, zoals hout, pulp, papier, rubberbomen, kerstbomen, of jonge bomen voor tuindoeleinden. Voorbeelden van bosbouwgewassen zijn naaldbomen, zoals den- nen, in het bijzonder Pinus spec, sparren en sparren, eucalyptus, tropische bomen, zo- als teak, rubberboom, oliepalm, wilg (Salix), in het bijzonder Salix spec, populier (cot- tonwood), in het bijzonder Populus spec, beuk, in het bijzonder Fagus spec, berk, olie- palm, en eik. De volgende definities zijn van toepassing: De term "planten" moet worden opgevat als planten van economisch belang en/of door de mens gekweekte planten. Zij worden bij voorkeur gekozen uit landbouw-, bosbouw-, sier- en tuinbouwgewassen, elk in hun natuurlijke of genetisch gemodificeerde vorm. De hier gebruikte term "plant" omvat alle delen van een plant, zoals ontkiemende zaden, opkomende zaailingen, kruidachtige vegetatie, alsmede gevestigde houtige gewassen, met inbegrip van alle onder de grond liggende delen (zoals de wortels) en boven de grond liggende delen. De term "bodem" moet worden opgevat als een natuurlijk lichaam dat bestaat uit leven- de (bijvoorbeeld micro-organismen (zoals bacteriën en schimmels), dieren en planten) en niet-levende materie (bijvoorbeeld mineralen en organische materie (bijvoorbeeld organische verbindingen in verschillende ontbindingsgraden), vloeistof en gassen) die zich op het landoppervlak bevindt, en gekenmerkt wordt door bodemhorizonten die van het oorspronkelijke materiaal te onderscheiden zijn als gevolg van diverse fysische, chemische, biologische en antropogene processen.In one case, the plant to be treated according to the method of the invention is an ornamental plant. "Ornamental plants" are plants commonly used in the garden, e.g. in parks, gardens and on balconies. Examples are sod, geraniums, pelargonias, petunias, begonias and fuchsias. In one case, the plant to be treated according to the method of the invention is a forestry crop. The term "forest crop" refers to trees, more specifically trees used in reforestation or industrial plantations. Industrial plantations are generally used for the commercial production of forest products, such as wood, pulp, paper, rubber trees, Christmas trees, or young trees for gardening purposes. Examples of forestry crops are coniferous trees, such as pines, especially Pinus spec, spruce and spruce, eucalyptus, tropical trees, such as teak, rubber tree, oil palm, willow (Salix), especially Salix spec, poplar (cot- tonwood), especially Populus spec, beech, especially Fagus spec, birch, oil palm, and oak. The following definitions apply: The term "plants" should be understood as plants of economic importance and/or plants cultivated by man. They are preferably selected from agricultural, forestry, ornamental and horticultural crops, each in their natural or genetically modified form. The term "plant" as used herein includes all parts of a plant, such as germinating seeds, emerging seedlings, herbaceous vegetation, as well as established woody plants, including all parts below ground (such as roots) and above ground. The term "soil" should be understood as a natural body consisting of living (for example, micro-organisms (such as bacteria and fungi), animals and plants) and non-living matter (for example, minerals and organic matter (for example, organic compounds in different degrees of decomposition), liquid and gases) located on the land surface and characterized by soil horizons that are distinct from the original material as a result of various physical, chemical, biological and anthropogenic processes.

Onder "nitrificatieremmer" wordt verstaan: een chemische stof die het nitrificatieproces, dat gewoonlijk in (bemeste) grond plaatsvindt, vertraagt of vertraagt. Nitrificatieremmers vertragen de natuurlijke omzetting van ammonium in nitraat en zijn gericht tegen micro- organismen en bij voorkeur ammonia-oxiderende bacteriën (AOB) en/of ammonia- oxiderende archaea (AOA), bij voorkeur door de activiteit van bacteriën, bijvoorbeeld AOB en AOA, zoals Nitrosomonas spp. , Nitrosospira spp. en/of Archaea, te remmen. De nitrificatieremmer wordt meestal gecombineerd met een meststof, bij voorkeur een (ammonium)stikstofhoudende meststof, bijvoorbeeld een vaste of vloeibare anorgani- sche, organische en/of organo minerale meststof, of mest."Nitrification Inhibitor" means: a chemical that retards or slows down the nitrification process that normally takes place in (fertilized) soil. Nitrification inhibitors slow down the natural conversion of ammonium to nitrate and are directed against micro-organisms and preferably ammonia-oxidizing bacteria (AOB) and/or ammonia-oxidizing archaea (AOA), preferably through the activity of bacteria, e.g. AOB and AOA, such as Nitrosomonas spp. , Nitrosospira spp. and/or Archaea. The nitrification inhibitor is usually combined with a fertilizer, preferably a (ammonium) nitrogen-containing fertilizer, for example a solid or liquid inorganic, organic and/or organo-mineral fertilizer, or manure.

Onder "nitrificatie" moet worden verstaan de biologische oxidatie van ammoniak (NH3) of ammonium (NH4+) met zuurstof tot nitriet (NO2-), gevolgd door de oxidatie van deze nitrieten tot nitraat (NO3-) door micro-organismen. Naast nitraat (NO3-) wordt door nitri- ficatie ook distikstofoxide geproduceerd. Nitrificatie is een belangrijke stap in de stik- stofcyclus in de bodem."Nitrification" should be understood as the biological oxidation of ammonia (NH3) or ammonium (NH4+) with oxygen to nitrite (NO2-), followed by the oxidation of these nitrites to nitrate (NO3-) by micro-organisms. In addition to nitrate (NO3-), nitrification also produces nitrous oxide. Nitrification is an important step in the nitrogen cycle in the soil.

De term "denitrificatie" moet worden opgevat als de microbiologische omzetting van nitraat (NO3-) en nitriet (NO2-) in gasvormige vormen van stikstof, in het algemeen N2 of N20. Dit ademhalingsproces vermindert geoxideerde vormen van stikstof in reactie op de oxidatie van een elektronendonor zoals organisch materiaal. De stikstofelektro- nenacceptoren die de voorkeur genieten, in volgorde van meest naar minst thermody- namisch gunstig, zijn: nitraat (NO3-), nitriet (NO2-), stikstofmonoxide (NO) en distik- stofmonoxide (N20). Binnen de algemene stikstofcyclus rondt denitrificatie de cyclus af door N2 terug te voeren naar de atmosfeer. Dit proces wordt voornamelijk uitgevoerd door heterotrofe bacteriën (zoals Paracoccus denitrificans en diverse pseudomonaden), hoewel er ook autotrofe denitrificeerders zijn geïdentificeerd (b.v. Thiobacillus denitrifi- cans). Denitrificeerders zijn in alle belangrijke fylogenetische groepen vertegenwoor- digd. Bij zuurstoftekort kunnen veel bacteriesoorten overschakelen van zuurstof naar nitraten ter ondersteuning van de ademhaling in een proces dat denitrificatie wordt ge- noemd en waarbij de in water oplosbare nitraten worden omgezet in gasvormige pro- ducten, waaronder distikstofoxide, die in de atmosfeer worden uitgestoten.The term "denitrification" should be understood as the microbiological conversion of nitrate (NO3-) and nitrite (NO2-) into gaseous forms of nitrogen, generally N2 or N2O. This respiration process reduces oxidized forms of nitrogen in response to the oxidation of an electron donor such as organic matter. The preferred nitrogen electron acceptors, in order from most to least thermodynamically favourable, are: nitrate (NO3-), nitrite (NO2-), nitric oxide (NO), and nitrous oxide (N2O). Within the general nitrogen cycle, denitrification completes the cycle by returning N2 to the atmosphere. This process is mainly carried out by heterotrophic bacteria (such as Paracoccus denitrificans and various pseudomonads), although autotrophic denitrifiers have also been identified (e.g., Thiobacillus denitrificans). Denitrifiers are represented in all major phylogenetic groups. When deprived of oxygen, many bacterial species can switch from oxygen to nitrates to aid respiration in a process called denitrification, which converts the water-soluble nitrates to gaseous products, including nitrous oxide, that are emitted into the atmosphere.

Lachgas", gewoonlijk "happy gas" of "lachgas" genoemd, is een chemische verbinding met de chemische formule N20. Bij kamertemperatuur is het een kleurloos, niet- ontvlambaar gas. Lachgas wordt op natuurlijke wijze in de bodem geproduceerd door de microbiële processen nitrificatie en denitrificatie. Deze natuurlijke emissies van distikstofoxide kunnen worden verhoogd door een verscheidenheid van landbouwprak- tijken en -activiteiten, waaronder bijvoorbeeld a) de directe toevoeging van stikstof aan de bodem door het gebruik van minerale en organische meststoffen, b) de teelt van stikstoffixerende gewassen, c) de teelt van bodems met een hoog organisch gehalte.Nitrous oxide", commonly referred to as "happy gas" or "laughing gas", is a chemical compound with the chemical formula N20. At room temperature, it is a colorless, non-flammable gas. Nitrous oxide is produced naturally in the soil by the microbial processes nitrification and denitrification These natural emissions of nitrous oxide can be increased by a variety of agricultural practices and activities, including, for example, a) the direct addition of nitrogen to the soil through the use of mineral and organic fertilizers, b) the cultivation of nitrogen-fixing crops , c) the cultivation of soils with a high organic content.

De term "meststoffen" moet worden opgevat als (chemische) verbindingen die worden toegepast om de groei van planten en vruchten te bevorderen. Meststoffen worden ge- woonlijk toegediend via de bodem (voor opname door de wortels van de plant) of via bladvoeding (voor opname door de bladeren). De term "meststoffen" kan in twee grote categorieën worden onderverdeeld: a) organische meststoffen (samengesteld uit rot- tend plantaardig/dierlijk materiaal) en b) anorganische meststoffen (samengesteld uit chemicaliën en mineralen). Organische meststoffen zijn onder meer drijfmest, wormen- giet, turf, zeewier, rioolwater en guano. Gefabriceerde organische meststoffen zijn on- der meer compost, bloedmeel, beendermeel en zeewierextracten. Andere voorbeelden zijn enzymatisch verteerde eiwitten, vismeel en verenmeel. De ontbindende gewasres- ten van voorgaande jaren en mest zijn een andere bron van vruchtbaarheid. Daarnaast worden in de natuur voorkomende mineralen, zoals fosfaat uit mijnsteen, kaliumsulfaat en kalksteen, ook tot de anorganische meststoffen gerekend. Anorganische meststoffen worden gewoonlijk vervaardigd door middel van chemische processen (zoals het Ha- ber-Bosch-proces), waarbij ook gebruik wordt gemaakt van in de natuur voorkomende afzettingen, terwijl deze chemisch worden gewijzigd (b.v. geconcentreerd tripelsuperfos- faat). In de natuur voorkomende anorganische meststoffen zijn onder meer Chileens natriumnitraat, mijnsteenfosfaat en kalksteen. Als derde categorie kunnen organinerale meststoffen worden genoemd, een combinatie van anorganische en organische mest- stoffen.The term "fertilizers" should be understood as (chemical) compounds that are applied to promote the growth of plants and fruits. Fertilizers are usually applied via the soil (for absorption by the roots of the plant) or via foliar feeding (for absorption by the leaves). The term "fertilizers" can be divided into two broad categories: a) organic fertilizers (composed of decaying plant/animal matter) and b) inorganic fertilizers (composed of chemicals and minerals). Organic fertilizers include slurry, worm castings, peat, seaweed, sewage and guano. Manufactured organic fertilizers include compost, blood meal, bone meal and seaweed extracts. Other examples are enzymatically digested proteins, fish meal and feather meal. The decomposing crop residues of previous years and manure are another source of fertility. In addition, minerals occurring in nature, such as phosphate from minestone, potassium sulphate and limestone, are also considered to be inorganic fertilizers. Inorganic fertilizers are usually produced by chemical processes (such as the Haber-Bosch process) that also utilize naturally occurring deposits while chemically altering them (e.g., concentrated triple superphosphate). Naturally occurring inorganic fertilizers include Chilean sodium nitrate, minestone phosphate and limestone. Organineral fertilizers can be mentioned as a third category, a combination of inorganic and organic fertilizers.

Onder "meststof die ueum bevat" (ureummeststof) worden verstaan synthetische meststoffen die ureum bevatten, met uitzondering van in de natuur voorkomende mest- stoffen die ureum bevatten (bijvoorbeeld mest als voorbeeld van een in de natuur voor- komende meststof die ureum bevat). Voorbeelden van meststoffen die ureum bevatten zijn ureum-ammoniumnitraat (UAN), isobutylideendiureum (IBDU), crotonylideendiure- um (CDU) en ureumformaldehyde (UF). Ureum wordt meestal in de vorm van korrels of prills geproduceerd. Ureummeststof kan worden geproduceerd door het vloeibare ure- um uit een prillentoren te laten vallen en het product te drogen. Ureum kan ook worden verkregen in vloeibare vorm, die kan worden gebruikt voor bladbemesting, b.v. op aard-"Urea-containing fertilizer" (urea fertilizer) means synthetic fertilizers containing urea, excluding naturally occurring fertilizers containing urea (for example, manure as an example of a naturally occurring fertilizer containing urea). Examples of fertilizers containing urea are urea ammonium nitrate (UAN), isobutylidene diurea (IBDU), crotonylidene diurea (CDU) and urea formaldehyde (UF). Urea is usually produced in the form of granules or prills. Urea fertilizer can be produced by dropping the liquid urea from a prilling tower and drying the product. Urea can also be obtained in liquid form, which can be used for foliar fertilization, e.g. on earth-

appelen, tarwe, groenten en sojabonen, en voor vloeibare toepassing op het veld. Ge- woonlijk wordt het gemengd met ammoniumnitraat om UAN te vormen met 28% N.apples, wheat, vegetables and soybeans, and for liquid field application. Usually it is mixed with ammonium nitrate to form UAN with 28% N.

De term "locus" (habitat van de plant) moet worden opgevat als elk type omgeving, bo- dem, gebied of materiaal waar de plant groeit of moet groeien. Volgens de uitvinding wordt in het bijzonder de voorkeur gegeven aan grond.The term "locus" (habitat of the plant) should be understood as any type of environment, soil, area or material where the plant grows or is intended to grow. According to the invention, particular preference is given to soil.

De uitvinding wordt verder geïllustreerd door de volgende voorbeelden.The invention is further illustrated by the following examples.

VoorbeeldenExamples

1. Heterocyclische verbindingen van algemene formule (I) Verschillende heterocyclische verbindingen van algemene formule (I) werden verkregen van ENAMINE Ltd, UkrOrgSynthesis Ltd., of Vitas-M Laboratory, Ltd. De respectieve verbindingen zijn vermeld in tabel 1 hieronder.1. Heterocyclic Compounds of General Formula (I) Various heterocyclic compounds of general formula (I) were obtained from ENAMINE Ltd., UkrOrgSynthesis Ltd., or Vitas-M Laboratory, Ltd. The respective compounds are listed in Table 1 below.

2. Materiaal en methoden2. Material and Methods

2. 1Nitrietmetingen Nitriet (NO2-) werd gemeten met behulp van het Griess-reagens (Productnummer: G4410, Griess reagens (gemodificeerd), Sigma-Aldrich). Gelijke volumes van het mon- ster of een verdund monster en het Griess-reagens werden gemengd in een transpa- rante multi-well-plaat met vlakke bodem en gedurende 10 minuten in het donker bij ka- mertemperatuur geïncubeerd. Absorbantiewaarden bij 540 nm werden spectrofotome- trisch gemeten (EnVision, Perkin Elmer®) en gebruikt om de [NO2-] te berekenen met behulp van een standaardcurve.2. 1Nitrite Measurements Nitrite (NO2-) was measured using the Griess reagent (Product number: G4410, Griess reagent (modified), Sigma-Aldrich). Equal volumes of the sample or a diluted sample and the Griess reagent were mixed in a transparent flat bottom multi-well plate and incubated in the dark at room temperature for 10 minutes. Absorbance values at 540 nm were measured spectrophotometrically (EnVision, Perkin Elmer®) and used to calculate the [NO 2 -] using a standard curve.

2. 2Ammoniummetingen Ammonium (NH4+) werd gemeten via een gemodificeerd Berthelot's reagens protocol.2. 2Ammonium measurements Ammonium (NH4+) was measured using a modified Berthelot's reagent protocol.

8 pl cultuurmonster, 35 ul reagens A (0,5 g NaOH met 8 ml NaCIO (2,5%) in 92 ml Mil- IQ) en 33 ul reagens B (1 g salicylzuur, 0,5 g NaOH en 1,0237 g natriumnitroprussi- dedihydraat in 100 ml MilliQ) werden achtereenvolgens toegevoegd aan 160 pl MilliQ in 96-well platen met vlakke bodem (cat. nr. 353072, Falcon® 96 Well Clear Microplate, Corning). Absorbantiewaarden bij 635 nm werden spectrofotometrisch gemeten (EnVi- sion, Perkin Elmer®) na een incubatie van 30 min en gebruikt om [NH4+] te berekenen met behulp van een standaardcurve.8 µl culture sample, 35 µl reagent A (0.5 g NaOH with 8 ml NaClIO (2.5%) in 92 ml Mil-IQ) and 33 µl reagent B (1 g salicylic acid, 0.5 g NaOH and 1.0237 g sodium nitroprusside dihydrate in 100 ml MilliQ) were sequentially added to 160 µl MilliQ in 96-well flat bottom plates (cat. no. 353072, Falcon® 96 Well Clear Microplate, Corning). Absorbance values at 635 nm were measured spectrophotometrically (EnVision, Perkin Elmer®) after a 30 min incubation and used to calculate [NH4+] using a standard curve.

2. 3Cultuurbehoud2. 3Culture conservation

2.3.1Nitrosomonas europaea Nitrosomonas europaea groeimedium werd bereid door aseptisch samenvoegen van 900 mL stamoplossing 1 (27,75 MM (NH4)2s04, 3,35 MM KH2PO4, 0,83 uM MgS04, 0,22 uM CaCl2, 11 uM FeSO4, 18.33 uM EDTA en 0,56 uM CuSO4) met 100 mL stockoplossing 2 (400 mM KH2PO4 en 40 mM NaH2PO4, pH 8.0 (NaOH)) en 8 mL stockoplossing 3 (5% watervrij Na2CO3) oplossing. Alle drie de stamoplossingen wer- den vooraf geautoclaveerd. Nitrosomonas europaea (ATCC 25978) cellen werden ge- kweekt in steriele erlenmeyers verzegeld met tape (Micropore TM Surgical Tape 1530-1, 3M") bij 28°C en geschud (+ 150 rpm) in het donker. Culturen in de late log-fase ([NO2-] = 10 - 20 MM) werden gesubcultiveerd door centrifugering (4000 rpm, 15 min, 5°C) en volledige mediumverversing door het supernatant weg te gooien en de bacteri- ele celpellets opnieuw te resuspensie in vers bereid Nitrosomonas europaea- groeimedium.2.3.1 Nitrosomonas europaea Nitrosomonas europaea growth medium was prepared by aseptically combining 900 mL stock solution 1 (27.75 MM (NH4)2 SO4, 3.35 MM KH2PO4, 0.83 µM MgSO4, 0.22 µM CaCl2, 11 µM FeSO4, 18.33 uM EDTA and 0.56 uM CuSO4) with 100 mL stock solution 2 (400 mM KH2PO4 and 40 mM NaH2PO4, pH 8.0 (NaOH)) and 8 mL stock solution 3 (5% anhydrous Na2CO3) solution. All three stock solutions were pre-autoclaved. Nitrosomonas europaea (ATCC 25978) cells were grown in sterile conical flasks sealed with tape (Micropore™ Surgical Tape 1530-1, 3M") at 28°C and shaken (+150 rpm) in the dark. Cultures in late log- phase ([NO2-] = 10 - 20 MM) were subcultured by centrifugation (4000 rpm, 15 min, 5°C) and complete medium change by discarding the supernatant and resuspending the bacterial cell pellets in freshly prepared Nitrosomonas europaea - growing medium.

2.3.2Nitrosospira multiformis Nitrosospira multiformis (NCIMB 11849) cellen werden gekweekt in erlenmeyers gevuld met geautoclaveerd 181-medium voor AOB (NCIMB Ltd) dat 1,78 mM (NH4)2s04, 1,47 mM KH2PO4, 272 HM CaCl2 x 2 Ho, 162 uM MgSO4 x 7 H20, 1 ml stockoplossing 1 (1.8 MM FeSO4 x 7 Ho en 1,49 mM NaEDTA) en 1 ml stockoplossing 2 (0,5% fenol- rood, pH-indicator) (pH 7,5-8). De pH werd op peil gehouden door regelmatig steriel 5% Na2CO3 toe te voegen. De kweekflessen werden afgesloten met tape (Micropore TM Surgical Tape 1530-1, 3MTM) en in het donker geïncubeerd bij 30°C onder schudden (+ 150 rpm). Laat-log fase culturen ([NO2-] = + 3 MM) werden gekweekt door centrifugatie (4000 rpm, 15 min, 5°C) en volledige medium verversing door het weggooien van het superatant en resuspensie van de bacteriële cel pellets in pH-aangepast 181-medium.2.3.2 Nitrosospira multiformis Nitrosospira multiformis (NCIMB 11849) cells were cultured in Erlenmeyer flasks filled with autoclaved 181 medium for AOB (NCIMB Ltd) containing 1.78 mM (NH4)2 SO4, 1.47 mM KH2PO4, 272 HM CaCl2 x 2 Ho, 162 uM MgSO4 x 7 H2O, 1 ml stock solution 1 (1.8 MM FeSO4 x 7 Ho and 1.49 mM NaEDTA) and 1 ml stock solution 2 (0.5% phenol red, pH indicator) (pH 7.5-8 ). The pH was maintained by regularly adding sterile 5% Na2CO3. The culture flasks were sealed with tape (Micropore™ Surgical Tape 1530-1, 3M™) and incubated in the dark at 30°C with shaking (+150 rpm). Late-log phase cultures ([NO2-] = + 3 MM) were grown by centrifugation (4000 rpm, 15 min, 5°C) and complete medium change by discarding the supernatant and resuspending the bacterial cell pellets in pH- custom 181 medium.

2.4Nitrificatieremmingstests2.4Nitrification Inhibition Tests

2.4.1Nitrosomonas europaea Om een nitrificatieremmingstest met N. europaea met hoge doorvoer te kunnen uitvoe- ren, werden culturen in de late log-fase twee dagen voor de test ondergekweekt. Vlak voor de bepaling werden de culturen na centrifugatie (4000 rpm, 15 min, 5°C) in centri- fugebuizen van 50 ml (cat. nr. 430829, CentriStar"" Conical Centrifuge Tubes, Cor-2.4.1 Nitrosomonas europaea To perform a high throughput nitrification inhibition test with N. europaea, late log phase cultures were subcultured two days before the test. Just prior to assay, the cultures were centrifuged (4000 rpm, 15 min, 5°C) in 50 ml centrifuge tubes (cat. no. 430829, CentriStar" Conical Centrifuge Tubes, Cor-

ning®) 5 keer overgeconcentreerd met vers groeimedium. Per batch werden alle cultu- ren samengevoegd in één steriele Schott-fles en vervolgens gedoseerd in 384-well- platen (Cat. nr. 781086, CELLSTAR®-plaat, Greiner Bio-One; 50 ul/well) met behulp van een dispenser (Multidrop "MV Combi Reagent Dispenser, Thermo Scientific TM) die eerst werd gespoeld met groeimedium. Specifiek voor de high-throughput screening voor nieuwe nitrificatieremmers werd 0,5 ul 99,99% DMSO (negatieve controle - eind- concentratie 1%) toegevoegd aan de buitenste twee kolommen aan de linkerkant van de plaat en 0,5 ul 10 MM DMP (3,4-dimethylpyrazool, positieve controle - eindconcen- tratie 100 uM) werd handmatig toegevoegd aan de buitenste twee kolommen aan de rechterkant. Ten slotte werd 0,5 ul kandidaat-nitrificatieremmers (stockoplossingen van 5 mM in 99,99% DMSO - eindconcentratie 50 uM) aan de centrale wells toegevoegd met behulp van een pennentang op een Tecan-robot (Freedom EVO®, Tecan). Tussen de toevoegingen door werden de pennen achtereenvolgens gewassen met 99,5% DMSO, Milli@-water en 100% ethanol en aan de lucht gedroogd. Alle platen werden afzonderlijk in Parafilm gewikkeld. Stapels van 4 platen werden op een 96-well-plaat gezet, gevuld met 100 pi MilliQ per well, afgedekt met aluminiumfolie en geschud bij 150 omwentelingen per minuut bij 28°C. 24 uur later werd de NO2-productie beoor- deeld. Daartoe werden de monsters eerst 200 maal verdund door 1,5 ul monster te pi- petteren in 300 ul vers groeimedium in tussenplaten (cat. nr. 353077, Falcon® 96-well Clear Round Bottom Microplate, Corning®), om vervolgens 15 ul van de verdunde monsters te mengen met 15 ul Griess-reagens in de putjes van een transparante 384- well-plaat met vlakke bodem (Cat. No. X7001, Low Profile Microplate, Molecular Devi- ces), dat spectrofotometrisch werd gemeten bij 540 nm (EnVision, Perkin Elmer®).ning®) 5 times overconcentrated with fresh growth medium. All cultures were pooled per batch in one sterile Schott flask and then dosed into 384-well plates (Cat. No. 781086, CELLSTAR® plate, Greiner Bio-One; 50 ul/well) using a dispenser (Multidrop "MV Combi Reagent Dispenser, Thermo Scientific TM) which was first rinsed with growth medium. Specifically for the high-throughput screening for new nitrification inhibitors, 0.5 µl of 99.99% DMSO (negative control - final concentration 1%) was added to the outer two columns on the left side of the plate and 0.5 µl of 10 MM DMP (3,4-dimethylpyrazole, positive control - final concentration 100 µM) was manually added to the outer two columns on the right. Add 0.5 µl of candidate nitrification inhibitors (5 mM stock solutions in 99.99% DMSO - final concentration 50 µM) to the central wells using pincers on a Tecan robot (Freedom EVO®, Tecan) In between additions the pens were successively washed with 99.5% DMSO, Milli® water and 100% ethanol and air dried. All plates were individually wrapped in Parafilm. Stacks of 4 plates were placed on a 96-well plate, filled with 100 µl MilliQ per well, covered with aluminum foil and shaken at 150 rpm at 28°C. 24 hours later, NO2 production was assessed. To this end, the samples were first diluted 200-fold by pipetting 1.5 µl of sample into 300 µl of fresh growth medium in intermediate plates (cat. no. 353077, Falcon® 96-well Clear Round Bottom Microplate, Corning®), and then 15 µl of the diluted samples with 15 µl of Griess Reagent in the wells of a transparent flat bottom 384-well plate (Cat. No. X7001, Low Profile Microplate, Molecular Devices), which was measured spectrophotometrically at 540 nm (EnVision, Perkin Elmer®).

24.2Nitrosospira multiformis Culturen van 500 ml, gekweekt in erlenmeyers van 1 liter die binnen 3 tot 4 dagen de laatlogfase ([NO2-] = 3 mM) bereikten en = 500 UM stijging van [NO2-] gedurende de laatste 24 uur vertoonden, werden gebruikt voor een high-throughput nitrificatierem- mingstest. De culturen werden eerst 5 keer overgeconcentreerd in vers 181-medium door centrifugatie (4000 rpm, 15 min, 5°C) in centrifugebuizen van 50 ml (cat. nr.24.2 Nitrosospira multiformis 500 ml cultures grown in 1 L Erlenmeyer flasks that reached late log phase ([NO2-] = 3 mM within 3 to 4 days and showed = 500 UM rise in [NO2-] over the last 24 hours were used for a high throughput nitrification inhibition test. The cultures were first overconcentrated 5 times in fresh 181 medium by centrifugation (4000 rpm, 15 min, 5°C) in 50 ml centrifuge tubes (cat. no.

430829, CentriStar"" Conical Centrifuge Tubes, Corning®). Per batch werden alle cul- turen samengevoegd in één steriele Schott-fles en vervolgens gedoseerd in 384-well- platen (cat. nr. 781086, CELLSTAR®-plaat, Greiner Bio-One; 50 ul per putje) met be- hulp van een dispenser (Multidrop TM Combi Reagent Dispenser, Thermo Scientific M)430829, CentriStar"" Conical Centrifuge Tubes, Corning®). All cultures were pooled per batch in one sterile Schott bottle and then dosed into 384-well plates (cat. no. 781086, CELLSTAR® plate, Greiner Bio-One; 50 µl per well) using a dispenser (Multidrop TM Combi Reagent Dispenser, Thermo Scientific M)

die eerst werd gespoeld met 181-medium. 0,5 ul 99,99% DMSO (negatieve controle - eindconcentratie 1%) werd toegevoegd aan de buitenste twee kolommen aan de linker- kant van de plaat en 0,5 ul 10 MM DMP (3,4-dimethylpyrazool, positieve controle - eindconcentratie 100 uM) werd handmatig toegevoegd aan de buitenste twee kolom- men aan de rechterkant. Ten slotte werd 0,5 ul kandidaat-nitrificatieremmers (stockop- lossingen van 5 mM in 99,99% DMSO - eindconcentratie 50 uM) aan de centrale wells toegevoegd met behulp van een pennentang op een Tecan-robot (Freedom EVO®, Te- can). Tussen de toevoegingen door werden de pennen achtereenvolgens gewassen met 99,5% DMSO, Milli@-water en 100% ethanol en aan de lucht gedroogd. Alle platen werden afzonderlijk in Parafilm gewikkeld. Stapels van 4 platen werden op een 96-well- plaat gezet, gevuld met 100 pi MilliQ per well, afgedekt met aluminiumfolie en geschud (+ 150 rpm) bij 30 °C. 24 uur later werd de NO2-productie beoordeeld. Daartoe werden de monsters eerst 100-maal verdund door 3 ul monster te pipetteren in 300 ul vers groeimedium in tussenplaten (cat. nr. 353077, Falcon® 96-well Clear Round Bottom Microplate, Corning®) om vervolgens 15 ul van de verdunde monsters te mengen met 15 ul Griess-reagens in de putjes van een transparante 384-well-plaat met vlakke bo- dem (Cat. No. X7001, Low Profile Microplate, Molecular Devices) dat spectrofotome- trisch werd gemeten bij 540 nm (EnVision, Perkin Elmer®).which was first rinsed with 181 medium. 0.5 µl 99.99% DMSO (negative control - final concentration 1%) was added to the outer two columns on the left side of the plate and 0.5 µl 10 MM DMP (3,4-dimethylpyrazole, positive control - final concentration 100 µM) was manually added to the outer two columns on the right. Finally, 0.5 µl of candidate nitrification inhibitors (stock solutions of 5 mM in 99.99% DMSO - final concentration 50 µM) were added to the central wells using pincers on a Tecan robot (Freedom EVO®, Te- can). Between additions, the pens were washed sequentially with 99.5% DMSO, Milli® water, and 100% ethanol and air dried. All plates were individually wrapped in Parafilm. Stacks of 4 plates were placed on a 96-well plate, filled with 100 µl MilliQ per well, covered with aluminum foil and shaken (+ 150 rpm) at 30°C. 24 hours later NO2 production was assessed. To this end, the samples were first diluted 100-fold by pipetting 3 µl of sample into 300 µl of fresh growth medium in intermediate plates (cat. no. 353077, Falcon® 96-well Clear Round Bottom Microplate, Corning®) and then 15 µl of the diluted samples with 15 µl of Griess Reagent in the wells of a transparent flat bottom 384-well plate (Cat. No. X7001, Low Profile Microplate, Molecular Devices) measured spectrophotometrically at 540 nm (EnVision, Perkin Elmer®).

2.4.3 Kwantificering van de remming van de nitrificatie Om de doeltreffendheid van de verbindingen (in termen van remming van de nitrificatie) te beoordelen en een vergelijking tussen platen en partijen culturen mogelijk te maken, berekenden wij de relatieve nitrificatie. Meer in detail werden alle nitrietresultaten ge- normaliseerd ten opzichte van zowel een negatieve controle, die geen verbinding bevat- te, als een positieve controle, die de benchmark (100 uM DMP) bevatte, met gebruik- making van vergelijking 1. Deze normalisatie werd uitgevoerd per multi-well plaat en elke plaat bevatte 32 positieve en 32 negatieve controles. Relative nitrification = OCTO (Vergelijking 1 ) Dit betekent dat verbindingen die volledige nitrificatie (geen nitrificatieremming) mogelijk maakten, een relatieve nitrificatie van 1 (of 100%) te zien geven. Een verbinding die dezelfde nitrificatieremming vertoont als de positieve controle, vertoont een nitrificatie- remming van 0.2.4.3 Quantification of nitrification inhibition To assess the effectiveness of the compounds (in terms of nitrification inhibition) and to allow a comparison between plates and batches of cultures, we calculated relative nitrification. In more detail, all nitrite results were normalized against both a negative control containing no compound and a positive control containing the benchmark (100 µM DMP) using Equation 1. This normalization was performed per multi-well plate and each plate contained 32 positive and 32 negative controls. Relative nitrification = OCTO (Equation 1 ) This means that compounds that allowed complete nitrification (no nitrification inhibition) show a relative nitrification of 1 (or 100%). A compound that shows the same nitrification inhibition as the positive control shows nitrification inhibition of 0.

Celgroeiremmingstests De bestudeerde structuren hebben (althans in de geteste assays) geen toxi- sche/aspecifieke effecten. Er is geen effect op AOA-systemen (ABIL, van Avecom, en Nitrososphaera viennensis) en geen effect op microtox.Cell Growth Inhibition Tests The structures studied (at least in the tested assays) have no toxic/unspecific effects. There is no effect on AOA systems (ABIL, van Avecom, and Nitrososphaera viennensis) and no effect on microtox.

2.6 Nitrosomonas europaea ammoniak- vs hydroxylamine-oxidatietests Om te bepalen of verbindingen specifiek NH3- of NH2OH-oxidatie remden, werden N. europaea-cellen voorzien van NH3 of hydroxylamine (NH2OH) als N-bron. Twee dagen oude, laat-log fase culturen met een NO2- concentratie tussen 10 en 20 MM werden 3 keer gewassen in vers groeimedium (zonder N) en tenslotte 4 keer overgeconcentreerd via centrifugatie (4000 rpm, 15 min, 4°C). Transparante, vlakke bodem 96-well platen (Cat. Nr. 353072, Falcon® 96 Well Clear Flat Bottom Microplate, Corning®) werden ge- vuld met 150 pl cultuur per well met behulp van een dispenser (Multidrop TM Combi Re- agent Dispenser, Thermo Scientific TM). De verbindingen (eindconcentratie 50 uM) wer- den in drievoud toegevoegd aan de multi-well-plaat met behulp van een Tecan-robot (Freedom EVO®, Tecan). Thioureum (positieve controle voor remming van NH3- oxidatie - eindconcentratie 100 HM) en fenylhydrazinehydrochloride (positieve controle voor remming van NH2OH-oxidatie - eindconcentratie 1 mM) werden toegevoegd aan de buitenste twee kolommen. Elke plaat werd in tweevoud gemaakt om hetzij 500 uM (NH4)2s04 (eindconcentratie [NH4+] = 1 mM) of 1 mM NH2OH toe te voegen. Alle platen werden afzonderlijk in Parafilm gewikkeld. Stapels van 4 platen werden bovenop een 96-well plaat gevuld met 100 ul MilliQ per well, bedekt met aluminiumfolie en geschud (+ 150 rpm) bij 28 ° C. Om aflezing van secundaire effecten op de NO2-productie te voorkomen, werd NO2- pas 30 min later gemeten. Daartoe werden de monsters eerst 2 maal verdund door 15 ul te pipetteren in 15 ul vers groeimedium in 96-well-tussenplaten (cat. ref. PCR-96-FS-C, 96-well PCR Microplate, Axygen®) om vervolgens 15 ul van de verdunde monsters te mengen met 15 ul Griess-reagens in de wells van een transpa- rante 384-well-plaat met vlakke bodem (Cat. Nr. X7001, Low Profile Microplate, Molecu- lar Devices) dat spectrofotometrisch werd gemeten bij 540 nm (EnVision, Perkin El- mer®).2.6 Nitrosomonas europaea ammonia vs hydroxylamine oxidation tests To determine whether compounds specifically inhibited NH3 or NH2OH oxidation, N. europaea cells were supplied with NH3 or hydroxylamine (NH2OH) as an N source. Two-day-old, late-log phase cultures with a NO 2 concentration between 10 and 20 MM were washed 3 times in fresh growth medium (without N) and finally overconcentrated 4 times via centrifugation (4000 rpm, 15 min, 4°C). Transparent, flat bottom 96-well plates (Cat. No. 353072, Falcon® 96 Well Clear Flat Bottom Microplate, Corning®) were filled with 150 µl of culture per well using a dispenser (Multidrop TM Combi Reagent Dispenser , Thermo Scientific™). The compounds (final concentration 50 µM) were added in triplicate to the multi-well plate using a Tecan robot (Freedom EVO®, Tecan). Thiourea (positive control for inhibition of NH3 oxidation - final concentration 100 HM) and phenylhydrazine hydrochloride (positive control for inhibition of NH2OH oxidation - final concentration 1 mM) were added to the outer two columns. Each plate was made in duplicate to add either 500 µM (NH4 )2 SO4 (final concentration [NH4+ ] = 1 mM) or 1 mM NH2 OH. All plates were individually wrapped in Parafilm. Stacks of 4 plates were placed on top of a 96-well plate filled with 100 μl of MilliQ per well, covered with aluminum foil and shaken (+150 rpm) at 28 °C. To avoid reading secondary effects on NO2 production, NO2- measured only 30 min later. To this end, the samples were first diluted 2-fold by pipetting 15 μl into 15 μl fresh growth medium in 96-well intermediate plates (cat. ref. PCR-96-FS-C, 96-well PCR Microplate, Axygen®) and then 15 μl of the diluted samples with 15 µl of Griess Reagent in the wells of a transparent flat bottom 384-well plate (Cat. No. X7001, Low Profile Microplate, Molecular Devices) measured spectrophotometrically at 540 nm (EnVision, Perkin Elmer®).

2.7Inde bodem verrichte analyses Toplaagmonsters (0 tot 10 cm) van de bodem werden genomen op verschillende perce- len in België (Merelbeke en Moorslede). Vegetatie werd verwijderd en monsters werden genomen van verschillende percelen. Alle bodemmonsters werden gemengd en ge- zeefd (maaswijdte 2,8 mm) om grote brokstukken te filteren en de bodem te homogeni- seren. De grond werd bewaard bij 5°C in plastic containers bedekt met Saran-folie om veranderingen in de samenstelling van de microbiële gemeenschap te voorkomen en om het oorspronkelijke bodemvochtgehalte te behouden.2.7 Soil analyzes Top layer samples (0 to 10 cm) of the soil were taken on different plots in Belgium (Merelbeke and Moorslede). Vegetation was removed and samples were taken from several plots. All soil samples were mixed and sieved (mesh size 2.8 mm) to filter large debris and to homogenize the soil. The soil was stored at 5°C in plastic containers covered with Saran film to prevent changes in the composition of the microbial community and to maintain the original soil moisture content.

Het vochtgehalte van de bodem werd bepaald door 20 g grond gedurende = 48 uur in een oven bij 60 °C te drogen en het gewicht vóór en na het drogen te meten. Op basis van het bodemvochtgehalte (+ 20%) werden samengestelde oplossingen bereid, zodat toevoeging van 200 pl verbinding en 200 ul NH4Cl-oplossing zou resulteren in een eindconcentratie van de verbinding van 50 uM en een eindconcentratie van NH4+ van 10 mM. Per behandeling werden 5 kleine potjes gevuld met 20 g grond. Vervolgens werd de grond eerst behandeld met de respectieve verbindingsoplossing en vervolgens met de NH4ClI-oplossing. Per bakje werden positieve (50 uM DMP) en negatieve con- troles (DMSO) opgenomen. De potten werden gedurende 7 dagen bij 21°C (6.00 totThe moisture content of the soil was determined by drying 20 g of soil in an oven at 60 °C for = 48 hours and measuring the weight before and after drying. Based on soil moisture content (+20%), compounded solutions were prepared such that addition of 200 µl compound and 200 µl NH4Cl solution would result in a final compound concentration of 50 µM and a final concentration of NH4+ of 10 mM. Per treatment 5 small pots were filled with 20 g of soil. Subsequently, the soil was treated first with the respective compound solution and then with the NH4ClI solution. Positive (50 µM DMP) and negative controls (DMSO) were included per well. The jars were heated for 7 days at 21°C (6.00 tot

22.00 uur licht) geïncubeerd. Om de 2 à 3 dagen werd gedemineraliseerd water aan de grond toegevoegd tot een bodemgewicht van 20 g. Uiteindelijk werd elk monster van 20 g grond opgelost in 100 ml 1M KCI en gedurende 1 uur geschud, gevolgd door filtratie door Whatmann®-papier. Het filtraat werd gebruikt om de pH-, NH4+- en NO3- concen- traties te meten.10 p.m. light) were incubated. Demineralized water was added to the soil every 2–3 days to a soil weight of 20 g. Finally, each sample of 20 g of soil was dissolved in 100 ml of 1M KCl and shaken for 1 hour, followed by filtration through Whatmann® paper. The filtrate was used to measure the pH, NH4+ and NO3 concentrations.

3. Resultaten3. Results

3.1 De in tabel 1 hieronder weergegeven resultaten zijn gebaseerd op het gebruik van de nitrificerende bacteriën Nitrosomonas europaea en Nitrosospira multiformis. De (ge- teste) heterocyclische verbindingen van algemene formule (|) remmen de nitrificatie in ten minste één van de onderzochte systemen. De remmende activiteit van deze klasse moleculen werd bevestigd voor een aantal structuren met variërende subgroepen. Er werden verschillende doses gebruikt. Uit tabel 1 blijkt dat alle geteste stoffen de nitrifi- catie in de geteste systemen duidelijk remmen, en dat sommige remmers al bij zeer lage doses een sterke remming vertonen. Als referentie werd 3,4-dimethylpyrazool gebruikt in vergelijkend voorbeeld C1. De 1C50-waarden geven de geschatte concentratie aan die 50% remming van de nitrificatie veroorzaakt. De waarden werden voorspeld door het passen van een logistische curve op 8-punts dosis-responsgegevens of op basis van de laagste geteste dosis die een remming van meer dan 50% geeft.3.1 The results shown in Table 1 below are based on the use of the nitrifying bacteria Nitrosomonas europaea and Nitrosospira multiformis. The (tested) heterocyclic compounds of general formula (|) inhibit nitrification in at least one of the tested systems. The inhibitory activity of this class of molecules has been confirmed for a number of structures with varying subgroups. Different doses were used. Table 1 shows that all tested substances clearly inhibit nitrification in the tested systems, and that some inhibitors show strong inhibition even at very low doses. As a reference, 3,4-dimethylpyrazole was used in Comparative Example C1. The 1C50 values indicate the approximate concentration that causes 50% inhibition of nitrification. Values were predicted by fitting a logistic curve to 8-point dose-response data or based on the lowest dose tested giving greater than 50% inhibition.

IC50 is de concentratie waarbij 50% remming optreedt. Lagere waarden wijzen dus op een sterkere remming van de nitrificatie.IC50 is the concentration at which 50% inhibition occurs. Lower values therefore indicate a stronger inhibition of nitrification.

Uit tabel 1 blijkt dat alle geteste moleculen in staat waren de nitrificatie te remmen. De aanwezigheid van de 3-(aminomethyl)-1,3,4-thiadizool-2-thione substructuur of 1-(ami - nomethyl)-1,2,4-triazool-5-thione substructuur is dus noodzakelijk en lijkt voldoende te zijn om de nitrificatieremming te bewerkstelligen. Verschillende zijgroepen op de ami- nomethylgroep, gebonden via het stikstofatoom, hebben nauwelijks invloed op de nitrifi- catieremming. Toevoeging van moleculaire structuren aan het thiadiazool is eveneens mogelijk, maar bijzonder complexe substructuren hebben de neiging het nitrificatierem- mend vermogen te verzwakken. Door vervanging van de zwavel in het thiadiazool door stikstof, wat resulteert in 1-(aminomethyl)-1,2,4-triazool-5-thion, wordt de nitrificatie- remming doorgaans enigszins verzwakt. Niettemin remmen alle geteste moleculen van de twee substructuren de nitrificatie in zekere mate bij ten minste één van de twee ge- teste nitrificerende bacteriën.Table 1 shows that all molecules tested were able to inhibit nitrification. Thus, the presence of the 3-(aminomethyl)-1,3,4-thiadizole-2-thione substructure or 1-(aminomethyl)-1,2,4-triazole-5-thione substructure is necessary and appears to be sufficient to achieve nitrification inhibition. Different side groups on the aminomethyl group, bonded via the nitrogen atom, hardly influence the nitrification inhibition. Addition of molecular structures to the thiadiazole is also possible, but highly complex substructures tend to weaken the nitrification inhibition potential. By replacing the sulfur in the thiadiazole with nitrogen, resulting in 1-(aminomethyl)-1,2,4-triazole-5-thione, the nitrification inhibition is generally slightly attenuated. Nevertheless, all tested molecules of the two substructures inhibit nitrification to some extent in at least one of the two tested nitrifying bacteria.

Niet alle in tabel 1 vermelde moleculen zijn getest. Alle geteste moleculen zijn sterke nitrificatieremmers die specifiek inwerken op nitrifice- rende bacteriën. NA betekent niet geanalyseerd.Not all molecules listed in Table 1 have been tested. All tested molecules are strong nitrification inhibitors that act specifically on nitrifying bacteria. NA means not analyzed.

De voorbeelden C40-C54 in tabel 1 passen moleculen die lijken op die welke zijn be- schreven in WO 2005/007636, maar verschillen van de voorbeelden 1-33 doordat zij een stikstof op positie 2, naast de zwavel, in de thiadiazoolheterocyclische ring hebben, en van de voorbeelden 1-39, die een thion hebben dat geen thiol of thioetheter kan vormen vanwege de bezetting van de stikstof op positie 3 (overeenkomend met positie 4 in de voorbeelden 40-54, die vrij is van substituenten). In tegenstelling tot de voor- beelden 1-30, 34 en 35, die leiden tot een volledige of bijna volledige remming van de nitrificatie in een van de geteste nitrificerende culturen, geeft geen van de voorbeelden C40-C54 een significante remming in een van de nitrificerende culturen (waarden onder 100% zijn te wijten aan variatie, maar verschillen niet significant van de controle).Examples C40-C54 in Table 1 fit molecules similar to those described in WO 2005/007636, but differ from Examples 1-33 in that they have a nitrogen in position 2, next to the sulfur, in the thiadiazole heterocyclic ring , and of Examples 1-39, which have a thione that cannot form a thiol or thioether because of the occupation of the nitrogen in position 3 (corresponding to position 4 in Examples 40-54, which is free of substituents). In contrast to Examples 1-30, 34 and 35, which lead to complete or near complete inhibition of nitrification in any of the nitrifying cultures tested, none of Examples C40-C54 show significant inhibition in any of the nitrifying cultures (values below 100% are due to variation, but not significantly different from control).

Voo Structureel Structuur Nitrosomo- Nitrosospira Getes rbee element nas euro- multiformis te paea con- cen- IC50 tratie (voor (HM) speld door het pas- sen Nitri- | van IC50 fica- | een ( tie | logis- laag- (%) | tisch ste bij de e ge- ge- | curve teste teste | of de dosis con- | laag- (HM) cen- ste die tratie | ge- meer ( teste dan O= | dosis 50% maxi | (HM) rem male | die ming acti- | een geeft viteit) | inhi- ) bitie van meer dan 50% ople- vert) NA CH, C1 ) { 20 100 1 O0 1 su 6 N 16 <3.5 | 100 Se N n° 8 LJ a uvVoo Structural Structure Nitrosomo- Nitrosospira Getes rbee element nas euro- multiformis te paea concen- IC50 tration (predicted (HM) pinned by fitting Nitri- | van IC50 fica- | a ( tie | logis- low- (% ) | tic most at the e ge- | curve teste teste | or the dose con- | low- (HM) cen- te die tration | more ( teste than O= | dose 50% maxi | (HM) rem male | giving ming acti- | giving a vity) | inhibition of more than 50%) NA CH, C1 ) { 20 100 1 O0 1 su 6 N 16 <3.5 | 100 Se N n° 8 LJ a uv

“ij ON > a An SAS, 2 | N 19 <6 100 Ds Se x“ij ON > a An SAS, 2 | N 19 <6 100 Ds Se x

N 3 OU 16 <6 | 100 SA, aN 3 OU 16 <6 | 100 SA, a

0. Go = 500 es 4 ON 17 100 zn RE. Se “5 a0. Go = 500 es 4 ON 17 100 zn RE. Se “5 a

AT “ 18 <6 | 100 ex “0 Says es # pv Rene PE TS ie x CA, 17 <6 100 Ex x ; y Ho Pau. 7 Dg? À se 19 <6 | 100 SantAT “ 18 <6 | 100 ex “0 Says es # pv Rene PE TS ie x CA, 17 <6 100 Ex x ; y Ho Pau. 7 dg? À se 19 <6 | 100 St

ENAND

We y COCO. 6 3 19 100We y COCO. 6 3 19 100

AN -AN -

A X 18 | 1 | < | 100 ë N° AdA X 18 | 1 | < | 100th N° Ad

NA La Nm À NA | 22 | NA | 50 wy 8 as u (A a 11 CONS F et, NA | 12 | NA | 50 Qu oP Se ied a Rn, 12 (1170 NA | 33 | NA | 50NA La Nm À NA | 22 | NA | 50 wy 8 as u (A a 11 CONS F et, NA | 12 | NA | 50 Qu oP Se ied a Rn, 12 (1170 NA | 33 | NA | 50

DE CSNTHE CSN

PE € A Ho 13 (} NA | 10 | NA | 50 — X Le 3 N=PE € A Ho 13 (} NA | 10 | NA | 50 — X Le 3 N=

STASTA

SN 14 J NA | 18 | NA | 50SN 14 Y NA | 18 | NA | 50

ETON < Ù 87 6 ab | EN L À 10 | NA | 27 | NA | 50 Ss VE >ETON < Ù 87 6 ab | EN L À 10 | NA | 27 | NA | 50 SS VE >

N 16 CN NA | 16 | NA | 50 a“ 5 yes / a Mass 7 À 17 AN 5 10 <2 | 100 On Sr + A os ee ON 1 N Bm 5° %N 16 CN NA | 16 | NA | 50 a“ 5 yes / a Mass 7 À 17 AN 5 10 <2 | 100 On Sr + A os ee ON 1 N Bm 5° %

N J ‘ ON, 18 {> 11 <2 | 100N J ON, 18 {> 11 <2 | 100

ETET

HN ea et,HN ea et,

FEN * #FEN * #

ge N 19 OP 11 <2 100 is NT 1) Bn 7 N LÀ Ni, TN <20 <08 | 100ge N 19 OP 11 <2 100 is NT 1) Bn 7 N LÀ Ni, TN <20 <08 | 100

À ie 21 X 12 <2 100 9 A, En a ER Sy > 22 LN, 15 <2 | 100 Si 4 seÀ ie 21 X 12 <2 100 9 A, En a ER Sy > 22 LN, 15 <2 | 100 Si 4 sec

SN s ) 23 ITN 20 <2 100 ne” Af La (a 24 ! | NA 1 NA 50 N ss jsSN s ) 23 ITN 20 <2 100 ne” Af La (a 24 ! | NA 1 NA 50 N ss js

SN AH, 8} 25 ê NA NA | 50 7SN AH, 8} 25 ê NA NA | 50 7

Aa FENFEN FF

AN 8) 26 f ON, NA 1 NA 50 0} of F 57 75, y A, An 27 TN NA NA 50 odAN 8) 26 f ON, NA 1 NA 50 0} or F 57 75, y A, An 27 TN NA NA 50 od

AT ©AT©

MAMA

EN 28 - oM NA 4 NA 50 = oe s & À 7 es, 2 xs ig” 28 à. A. A es > < 29 = N Sar N "Ss 5 58 100 100 100 x, “aEN 28 - oM NA 4 NA 50 = oe s & À 7 es, 2 xs ig” 28 à. A. A es > < 29 = N Sar N "Ss 5 58 100 100 100 x, “a

“ee Las CN 63 |>100 | 27 |<100 | 100 ( ) ‚NT Oes“ee Las CN 63 |>100 | 27 |<100 | 100 ( ) ‚NT Oes

N en 31 LN} od Le ne ET ‘ & Se 32 Om, ZN, > SS Fe ë X 3 N Na vr bu ES > X Le. { / ; aN en 31 LN} od Le ne ET ‘ & Se 32 Om, ZN, > SS Fe ë X 3 N Na vr bu ES > X Le. { / ; a

TRES 6 a Bin p A = \n 33 AnTRES 6 a Bin p A = \n 33 An

N / * “, A &r Ps eg =H B us À 34 ON, ' 34 7 <33 | 100 Sat = > EiN / * “, A &r Ps eg =H B us À 34 ON, ' 34 7 < 33 | 100 Sat = > Egg

À - s æÆ Sg Ns, 35 | TO NN 38 <100 21 <100 100 3 N | S 7 € À > > | \ = &, \ A N. + AR ° TS 36 od Og = N , DR, NN © pan {3 KimeÀ - s æÆ Sg Ns, 35 | TO NN 38 <100 21 <100 100 3 N | S 7 € À > > | \ = &, \ A N. + AR ° TS 36 od Og = N , DR, NN © pan {3 Kime

ÀA

SN = + 7 B 37 N 7SN = + 7 B 37 N 7

ET & x NET & x N

NN ee >NN ee >

N NN N

KI oo A , | ST NgKI oo A , | ST Ng

EN FA TE N € & # 38 Sue és m f % > êtesEN FA TE N € &# 38 Sue és m f % > êtes

M ; Ha TES a ES & + <= NoM; Ha TES a ES & + <= No

SU & ; ; , veSU &;; , ve

© A© A

TTT C40 À 0 | 83 100 50TTT C40 À 0 | 83 100 50

ÇÇ

Ÿ BAD 24 / C41 | Cr 85 100 50 © 2 C42 Ï | 88 100 50 ss ed ©. SN / —É SN G44 IN 100 50 [7 TOS 8” nu / }Ÿ BATH 24 / C41 | Cr 85 100 50 © 2 C42 Ï | 88 100 50 ss ed ©. SN / —É SN G44 IN 100 50 [7 TOS 8” nu / }

À 45 Tx | 91 100 50 C a en, gen 2À 45 Tx | 91 100 50 C a en, gene 2

ESES

N } C46 IN 93 100 50 TT ge me” AlN } C46 IN 93 100 50 TT ge me” Al

N + C47 re, ge a” 94 100 50N + C47 re, ge a” 94 100 50

GT Pace alteGT Pace Alte

T oO Cu — NT oO Cu — N

PN ON C48 à 100 > X Ï 2 I ; , | 5 ss racernate / N-— G U SePN ON C48 à 100 > X Ï 2 I ; , | 5 ss racernate / N-— G U Se

LNLN

X C50 nn AA | 100 100 90 a TS es] /X C50 nn AA | 100 100 90 a TS es] /

S a _f vs | FR C51 ST grs | 400 100 50 % N 4S a _f vs | FR C51 ST grs | 400 100 50% N 4

ONON

\ iv, C52 | ASS ng 100 100 50 | )\iv, C52| ASSng 100 100 50 | )

LA C53 >> 100 100 50LA C53 >> 100 100 50

SESE

NÀ C54 U x | 100 94 50 OO neg”NA C54 U x | 100 94 50 OO neg'

OT \_ó In een afzonderlijk experiment werd de werkzaamheid van voorbeeld 2 uit tabel 1 ver- geleken met het eerder beschreven 1,3,4-thiadiazool-2-thion in verschillende doserin- gen. In tegenstelling tot voorbeeld 2 heeft 1,3,4-thiadiazool-2-thion geen bezetting van de stikstof op positie 3, waardoor thiol/thion tautomerisme mogelijk is. Uit tabel 2 blijkt dat voorbeeld 2 doeltreffender is in vergelijking met 1,3,4-thiadiazool-2-thion. Tabel 2 Nitrificatie (%) bij de geteste concentratie ( 0 = maximale activiteit) 3 6 11 19 | 33 | 57 | 100 Structuur Naam UM | WM | UM | HM | HM | uM | uMOT In a separate experiment, the efficacy of Example 2 from Table 1 was compared to the previously described 1,3,4-thiadiazole-2-thione at various doses. Unlike Example 2, 1,3,4-thiadiazole-2-thione has no occupancy of the nitrogen at position 3, allowing thiol/thione tautomerism. Table 2 shows that Example 2 is more effective compared to 1,3,4-thiadiazole-2-thione. Table 2 Nitrification (%) at the tested concentration ( 0 = maximum activity) 3 6 11 19 | 33 | 57 | 100 Structure Name UM | WM | UM | HM | HM | uM | uM

1,3,4- N N thiadiazool- 2 ee Ny . A 2tnion |100|100 | 82 | 45 | 13 vs Voorbeeld 10 = > SA, Voorbeeld | 94 | 58 | 32 | SN 2 #5 31,3,4- N N thiadiazole-2ee Ny . A 2tnion |100|100 | 82 | 45| 13 vs Example 10 = > SA, Example | 94| 58 | 32 | SN 2 #5 3

3.2Ammonia vs. hydroxylamine oxidatie assay Om inzicht te krijgen in de beoogde metabolische route en om onderscheid te maken tussen verbindingen die specifiek de NH3-oxidatie beïnvloeden of die een andere route beïnvloeden, werden de nieuwe nitrificatieremmers getest in de "ammonia vs hy- droxylamine oxidatie assay" waarin de NO2-productie uit NH3 werd vergeleken met de NO2-productie uit NH2OH. Aangezien NH3 wordt omgezet in NH2OH voordat NO2- wordt geproduceerd, geeft een vergelijking van de nitrificatieremming van de nieuwe verbindingen ten opzichte van NH3 (zie "1." in het onderstaande schema) en NH2OH (zie "2." in het onderstaande schema) aan welk deel van de route wordt geremd. Geen nitrificatieremmer: ammonia oxidation hydroxylamine oxidation LNH NH; 0H N96;3.2Ammonia vs. hydroxylamine oxidation assay To gain insight into the intended metabolic pathway and to distinguish between compounds that specifically affect NH3 oxidation or that affect another pathway, the new nitrification inhibitors were tested in the "ammonia vs hydroxylamine oxidation assay" in which the NO2 production from NH3 was compared with the NO2 production from NH2OH. Since NH3 is converted to NH2OH before NO2- is produced, a comparison of the nitrification inhibition of the new compounds relative to NH3 (see "1." in the diagram below) and NH2OH (see "2." in the diagram below) gives which part of the route is being braked. No nitrification inhibitor: ammonia oxidation hydroxylamine oxidation LNH NH; 0H N96;

2. NH,0H > NO, Niet-specifieke of algemene metabolische remmer:2. NH,0H > NO, Non-specific or general metabolic inhibitor:

1. NH, >X1. NH, >X

2. NH,OH>X Ammoniak oxidatie specifieke remmer:2. NH,OH>X Ammonia Oxidation Specific Inhibitor:

1. NH, >X1. NH, >X

2. NH,0H > NO; Ammoniakoxidatie is een essentiële stap voor het metabolisme van nitrificerende bacte- rien. Daarom zal remming van ammoniakoxidatie door een nitrificatieremmer indirect alle andere enzymatische stappen beïnvloeden en ook de tweede stap beïnvloeden, Zij het minder sterk dan de eerste stap. Zelfs in een 30 minuten durende test verminderde DMP, waarvan bekend is dat het gericht is tegen ammoniakoxidatie, ook de oxidatie van NH2OH, maar in mindere mate dan het effect op ammoniakoxidatie (tabel 2). Ook de nieuwe nitrificatieremmers hebben een verschillend effect op de nitrificatie van de twee producten (tabel 2): Alle geteste nitrificatieremmers vertonen nog steeds een rela- tief hoge nitrificatie als NH2OH als stikstofbron wordt verstrekt, waaruit blijkt dat de om- zetting van NH2OH naar NO2- niet rechtstreeks wordt geremd. Als NH3 wordt toege- diend, vertonen de nitrificatieremmers een sterker negatief effect op de nitrietproductie, wat erop wijst dat de omzetting van ammoniak in hydroxylamine rechtstreeks wordt ge- remd. De nitrificatieremmers beïnvloeden dus de eerste stap van de nitrificatie. Dit be- vestigt verder dat de klasse van nieuwe nitrificatieremmers specifiek de nitrificatie remt. In tabel 3 staan de resultaten van de oxidatieproef met ammoniak en hydroxylamine, met de OD540 (maat voor nitriet) na 30 minuten met ammoniak of hydroxylamine als stikstofbron. Alle nieuwe nitrificatieremmers maken nitrietproductie uit hydroxylamine mogelijk die dicht in de buurt komt van de nitrietproductie zonder remmer (DMSO). De nitrificatie wordt echter geremd als ammoniak als stikstofbron wordt gebruikt. Tabel 3 Voor- Structuur Nitrificatie uit NH3/[Nitrificatie uit NH2OH beeld (% vergeleken met/(% vergeleken met DMSO) DMSO) co A E2. NH, 0H > NO; Ammonia oxidation is an essential step for the metabolism of nitrifying bacteria. Therefore, inhibition of ammonia oxidation by a nitrification inhibitor will indirectly affect all other enzymatic steps and also affect the second step, albeit less strongly than the first step. Even in a 30-minute test, DMP, which is known to target ammonia oxidation, also reduced the oxidation of NH2OH, but to a lesser extent than its effect on ammonia oxidation (Table 2). The new nitrification inhibitors also have a different effect on the nitrification of the two products (Table 2): All tested nitrification inhibitors still show a relatively high nitrification when NH2OH is provided as nitrogen source, which shows that the conversion of NH2OH to NO2 - is not braked directly. When NH3 is applied, the nitrification inhibitors show a stronger negative effect on nitrite production, indicating that the conversion of ammonia to hydroxylamine is directly inhibited. The nitrification inhibitors therefore influence the first step of the nitrification. This further confirms that the class of novel nitrification inhibitors specifically inhibit nitrification. Table 3 shows the results of the oxidation test with ammonia and hydroxylamine, with the OD540 (measure for nitrite) after 30 minutes with ammonia or hydroxylamine as nitrogen source. All of the new nitrification inhibitors enable nitrite production from hydroxylamine that is close to inhibitor-free nitrite production (DMSO). However, nitrification is inhibited when ammonia is used as nitrogen source. Table 3 Pre-Structure Nitrification from NH3/[Nitrification from NH2OH image (% compared to/(% compared to DMSO) DMSO) co A E

1 LN 54 831LN 54 83

TN SnTN sn

N 2 © y 62 ® N=ÁN 2 © y 62 ® N=Á

UYOU

OO 3 f 34 81 ‘ Ss N fOO 3 f 34 81 Ss N f

IT seIT se

N 4 3 79 A N°N 4 3 79 A N°

CI 1e 1 SaCI 1st 1 Sa

À B, De GC mM Ÿ 48 81 ohÀ B, De GC mM Ÿ 48 81 oh

3 DN NS 7 Ln 543 DN NS 7 Ln 54

ON a.ON a.

À = ON 47 85 N,Δ = ON 47 85 N,

SO Ee A, An s 7 () 49 79SO Ee A, Ans 7() 49 79

HNHN SS

N ) 38 85 sg N +N ) 38 85 sg N +

NS 11 eeen 47 85NS 11 eeen 47 85

SNSN

ON Ss +0 12 OA, 46 79 sy <>ON Ss +0 12 OA, 46 79 sy <>

>o>o

A 13 x 63 84 Ne ON 9 siA 13 x 63 84 Ne ON 9 si

F € 14 © . 48 82F € 14 © . 48 82

EN SyAND Sy

AD Ns 15 NN OO 63 88AD Ns 15 NN OO 63 88

N # 3 A. 16 ee 3 ls 52 87 HyN # 3 A. 16 ee 3 ls 52 87 Hy

3.3Test uitgevoerd in landbouwgrond De werkzaamheid van de 15 moleculen in tabel 3 werd in de bodem getest. Ammonium werd toegevoegd aan grond met een hoge nitrificatieactiviteit en behandeld met de nitri- ficatieremmers volgens de onderhavige uitvinding. Na een week behandeling bleek een subset van de geteste moleculen het ammoniumverbruik effectief te verminderen. Ver- schillende moleculen hadden hetzelfde effect als DMP. De resultaten bevestigen dat nitrificatieremmers de ammoniumoxidatie door bodemgemeenschappen remmen en tonen hun potentieel aan als nieuwe nitrificatieremmers.3.3Test performed in agricultural soil The efficacy of the 15 molecules in Table 3 was tested in soil. Ammonium was added to soil with high nitrification activity and treated with the nitrification inhibitors of the present invention. After one week of treatment, a subset of the tested molecules was found to effectively reduce ammonium consumption. Several molecules had the same effect as DMP. The results confirm that nitrification inhibitors inhibit ammonium oxidation by soil communities and demonstrate their potential as novel nitrification inhibitors.

De nitrificatieremmers werden toegepast in een nitrificatieremmingstest met landbouw- grond. In de praktijk werd ammonium met of zonder de nieuwe nitrificatieremmers toe- gevoegd aan grond van een akker in Merelbeke. Het ammoniumgehalte werd gemeten bij de start van het experiment en op het einde van het experiment, na een week incu- batie. Een nitrificatieremmingspercentage werd berekend door de vermindering in am-The nitrification inhibitors were used in an agricultural soil nitrification inhibition test. In practice, ammonium with or without the new nitrification inhibitors was added to the soil of a field in Merelbeke. The ammonium content was measured at the start of the experiment and at the end of the experiment, after one week of incubation. A nitrification inhibition percentage was calculated by dividing the reduction in am-

moniumgehalte met de nitrificatieremmer te vergelijken met de vermindering in ammo- nium zonder de nitrificatieremmer. Voorbeeld 10 in tabel 3 is het eerder beschreven 1,3,4-thiadiazool-2-thion. Wij bevestigen zijn activiteit als nitrificatieremmer, die echter minder sterk is dan die van de geteste moleculen volgens de huidige uitvinding die vol- doen aan de algemene formule (I). Alle andere verbindingen in de voorbeelden remden de nitrificatie aanzienlijk. Dit valideert dat de nieuwe nitrificatieremmers de ammoniak- oxidatie door bodemgemeenschappen effectief remmen.monium content with the nitrification inhibitor compared to the reduction in ammonium without the nitrification inhibitor. Example 10 in Table 3 is the previously described 1,3,4-thiadiazole-2-thione. We confirm its activity as a nitrification inhibitor, which is, however, less potent than that of the tested molecules of the present invention satisfying the general formula (I). All other compounds in the examples significantly inhibited nitrification. This validates that the new nitrification inhibitors effectively inhibit ammonia oxidation by soil communities.

Tabel 4 Voorbeeld % remming van nitrificatie in de bodem Ne? Gs ; 52 va Ve PN, N 7 À N 6 IN Js 50 y À Su N el 3 43 Qi A a ResTable 4 Example % inhibition of nitrification in soil Ne? Gs ; 52 va Ve PN, N 7 À N 6 IN Js 50 y À Su N el 3 43 Qi A a Res

OÙ ve gi ma 0 à 43 gotOÙ ve gi ma 0 à 43 got

SN 2% 9 N Y 39 ; „Nh,SN 2% 9 N Y 39 ; "Nah,

AMAM

SS gmSS gm

EY, dg A bt, Ï N 37 gd Sr 35 enEY, dg A bt, Ï N 37 gd Sr 35 en

F re" 07 34 ed, eN, ie st T3 Sn A x 3F re" 07 34 ed, eN, ie st T3 Sn A x 3

N X FE 24 Om deze resultaten te bevestigen werd een voorbeeld eveneens getest in een andere bodem, afkomstig van een veld in Moorslede, wederom met een incubatietijd van 7 da- gen (tabel 5).N X FE 24 To confirm these results, an example was also tested in another soil, originating from a field in Moorslede, again with an incubation period of 7 days (Table 5).

Tabel 5 Voorbeeld | Structuur % remming van nitrificatie in de bodem (Moorslede) 1 PA TN 30Table 5 Example | Structure % inhibition of nitrification in the soil (Moorslede) 1 PA TN 30

TO ea SA ve.TO ea SA ve.

ON 5-3 Er bestaan verschillende voorbeelden van nitrificatieremmers die een negatief effect hebben op de groei van planten, waaronder DMP, vooral bij zeer hoge concentraties. Om een mogelijk negatief effect van de nitrificatieremmers volgens de onderhavige uit- vinding te testen, hebben wij een groeiproef uitgevoerd met Arabidopsis thaliana, ge- kweekt op verticaal staande vierkante Petridish-platen op een halfsterk Murashige- Skoog-medium, verhard met 0,8% agar, en aangevuld met voorbeeld 21 uit tabel 1 of het eerder beschreven 1,3,4-thiadiazool-2-thion in verschillende doses. De wortellengte werd gemeten om een eventuele groeivertraging te evalueren en werd uitgedrukt ten opzichte van de wortellengte van planten die zonder nitrificatieremmer werden ge- kweekt (tabel 6). Tabel 6 Groei ten opzichte van de controle zonder verbinding (%) 12,5 25 50 100 Structuur Naam 5 UMON 5-3 There are several examples of nitrification inhibitors that have a negative effect on plant growth, including DMP, especially at very high concentrations. To test a possible negative effect of the nitrification inhibitors of the present invention, we performed a growth trial with Arabidopsis thaliana grown on vertical square Petridish plates on a semi-strength Murashige-Skoog medium hardened with 0.8 % agar, and supplemented with Example 21 from Table 1 or the previously described 1,3,4-thiadiazole-2-thione at various doses. The root length was measured to evaluate any growth retardation and was expressed relative to the root length of plants grown without a nitrification inhibitor (Table 6). Table 6 Growth relative to control without compound (%) 12.5 25 50 100 Structure Name 5 UM

UM UM UM UM 1,3,4- N N thiadiazool-2- % À thion 110 | 110 | 95 | 26 5" Voorbeeld C10UM UM UM UM 1,3,4- N N thiadiazole-2- % À thion 110 | 110| 95| 26 5" Example C10

DeThe

LN à Voorbeeld 21 | 109 111 110 | 92 24 dd "N sXLN à Example 21 | 109 111 110 | 92 24 dd "N sX

Claims (15)

ConclusiesConclusions 1. Het gebruik van een heterocyclische verbinding van de algemene formule (I) NRIR2 + de * () XS of NRA, waarbij R4 c1-4alky IS, R1C3-12-koolwaterstofresidu dat 1 tot 3 heteroatomen kan bevatten, geko- zen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel, R2C1-6-koolwaterstofresidu dat één heteroatoom kan bevatten, gekozen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel, of waarin R1 en R2 samen met het stikstofatoom dat hen verbindt, een verza- digde of onverzadigde heterocyclische radicaal met vijf of zes leden vormen die naar keuze nog een of twee heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof en zwavel, en welke heterocyclische radicaal deel kan uitmaken van een C4-20-koolwaterstofresidu dat naar keuze naast het stikstofatoom dat R1 en R2 verbindt, nog een tot vier hete- roatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuur- stof, zwavel en fluor, waarin R1 en R2 elk via een koolstofatoom verbonden zijn met het stikstof- atoom in NR1R2 en waarin in R1 en R2 heteroatomen van hetzelfde che- mische element niet naast elkaar liggen, R3H ‚ C1-4-alkyl, S-C1-4-alkyl, NR5R6 waarbij R5 en R6 onafhankelijk van elkaar H, c1-6-aiky1, fenyl, fluorofenyl zijn, als nitrificatieremmer.The use of a heterocyclic compound of the general formula (I) NRIR2 + de *()XS or NRA, where R4 is c1-4alky, R1C3-12 hydrocarbon residue which may contain from 1 to 3 heteroatoms selected from the group nitrogen, oxygen and sulfur, R2 Cl-6 hydrocarbon residue which may contain one heteroatom selected from the group nitrogen, oxygen and sulfur, or wherein R1 and R2 together with the nitrogen atom connecting them form a saturated or unsaturated heterocyclic radical with form five or six members which may optionally contain one or two additional heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulphur, and which heterocyclic radical may form part of a C4-20 hydrocarbon residue optionally adjacent to the nitrogen atom representing R1 and R2 may contain one to four additional heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen, sulfur and fluorine, wherein R1 and R2 are each linked through a carbon atom to the nitrogen atom in NR1R2 and where rin in R1 and R2 heteroatoms of the same chemical element are not adjacent, R3H, C1-4-alkyl, S-C1-4-alkyl, NR5R6 where R5 and R6 are independently H, C1-6-alkyl, phenyl , fluorophenyl, as a nitrification inhibitor. 2. Het gebruik zoals geclaimd in claim 1, waarin R3 H, c1-3-aiky, S-C1-3-alkyl, bij voorkeur H, methyl, ethyl, S-CH3 of S-C2H5 is, of waarin R3 NR5R6 is waarbij RS H of methyl is en R6 c1-4-alky, fenyl of fluorfenyl, en/of waarin R4 C1-3-alkyl is, bij voorkeur methyl of ethyl.2. The use as claimed in claim 1, wherein R3 is H, c1-3-alkyl, S-C1-3-alkyl, preferably H, methyl, ethyl, S-CH3 or S-C2H5, or wherein R3 is NR5R6 wherein R5 is H or methyl and R6 is C1-4 alkyl, phenyl or fluorophenyl, and/or wherein R4 is C1-3 alkyl, preferably methyl or ethyl. 3. Het gebruik zoals geclaimd in een van de claims 1 of 2, waarin R1 een C4- 10-koolwaterstofresidu is dat een of twee heteroatomen kan bevatten, ge- kozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof en zwavel, bij voorkeur een C4-18-koolwaterstofresidu dat N bevat en optioneel nog een heteroa- toom, gekozen uit de groep bestaande uit stikstof en zwavel.3. The use as claimed in either of claims 1 or 2, wherein R1 is a C4-10 hydrocarbon residue which may contain one or two heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulphur, preferably a C4 -18-hydrocarbon residue containing N and optionally an additional heteroatom selected from the group consisting of nitrogen and sulfur. 4. Het gebruik zoals geclaimd in een van de claims 1 tot en met 3, waarin R2 C1-6-alky1 Of C3-6-cycloalkyl is dat een heteroatoom kan bevatten dat wordt gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof en zwavel, en bij voor- keur c1-4alky is dat een heteroatoom kan bevatten dat wordt gekozen uit S.4. The use as claimed in any one of claims 1 to 3, wherein R2 is C1-6 alkyl or C3-6 cycloalkyl which may contain a heteroatom selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulphur, and is preferably C 1-4 alkyl which may contain a heteroatom selected from S. 5. Het gebruik zoals geclaimd in een van de claims 1 of 2, waarin R1 en R2 samen met het stikstofatoom dat hen verbindt een 5- of bij voorkeur 6- voudig verzadigd of onverzadigd heterocyclisch radicaal vormen, dat naar keuze ook een extra heteroatoom kan bevatten, gekozen uit de groep be- staande uit stikstof en zuurstof, en dat deel kan uitmaken van een C4-20- koolwaterstofresidu dat, naast het stikstofatoom dat R1 en R2 verbindt, ook 1 tot 4 heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel, bij voorkeur waarin R1 en R2 samen met het stikstofatoom dat hen verbindt, het verzadigde of onverzadigde structuurelement vormen an — N 0 —N N dat deel kan uitmaken van een C4-20-koolwaterstofresidu dat naast het stikstofatoom dat R1 en R2 verbindt, 1 tot 4 heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof en zwavel, waarbij het verzadigde of onverzadigde structuurelement bij voorkeur één of twee bin- dingen bevat met andere koolstofatomen in de meta- of para-positie ten op- zichte van de stikstof van de NR1R2-groep, en meer bij voorkeur geen an- dere substituenten bevat.5. The use as claimed in either of claims 1 or 2, wherein R1 and R2 together with the nitrogen atom connecting them form a 5- or preferably 6-fold saturated or unsaturated heterocyclic radical, which may optionally also contain an additional heteroatom selected from the group consisting of nitrogen and oxygen, and which may be part of a C4-20 hydrocarbon residue which, in addition to the nitrogen atom connecting R1 and R2, may also contain from 1 to 4 heteroatoms selected from the group nitrogen , oxygen and sulphur, preferably in which R1 and R2, together with the nitrogen atom connecting them, form the saturated or unsaturated structural element an — N 0 — N N which may form part of a C4-20 hydrocarbon residue which, in addition to the nitrogen atom connecting R1 and R2 bonds, may contain 1 to 4 heteroatoms, selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur, wherein the saturated or unsaturated structural element preferably contains one or two bonds with another carbon atom n in the meta or para position relative to the nitrogen of the NR1R2 group, and more preferably contains no other substituents. 6. Het gebruik van een heterocyclische verbinding van de algemene formule (|) zoals gedefinieerd in een van de claims 1 tot en met 5 als additief of be-6. The use of a heterocyclic compound of the general formula (|) as defined in any one of claims 1 to 5 as an additive or kledingsmateriaal voor anorganische en/of organische en/of organominera- le meststoffen, bij voorkeur anorganische meststoffen, meer bij voorkeur ammonium- en/of ureumhoudende stikstofnoudende meststoffen.clothing material for inorganic and/or organic and/or organomineral fertilizers, preferably inorganic fertilizers, more preferably ammonium and/or urea-containing nitrogenous fertilizers. 7. Het gebruik zoals geclaimd in claim 6, waarbij de heterocyclische verbin- ding van de algemene formule (I) wordt geleverd in de vorm van een formu- lering, oplossing of dispersie, afzonderlijk of gelijktijdig met een meststof, of wordt opgenomen in de meststof of wordt toegepast op de meststof.7. The use as claimed in claim 6, wherein the heterocyclic compound of general formula (I) is supplied in the form of a formulation, solution or dispersion, alone or simultaneously with a fertilizer, or incorporated into the fertilizer or is applied to the fertilizer. 8. Het gebruik van een heterocyclische verbinding van de algemene formule (I) zoals omschreven in een van de claims 1 tot en met 5 voor het vermin- deren van de stikstof- of koolstofverliezen in anorganische en/of organische en/of organinerale meststoffen of stikstof- of koolstofhoudende verbindin- gen of materialen en ook op oogstafval en weideland of tijdens de opslag van vloeibare mest en voor het verminderen van de ammoniakbelasting in dierenstallen.8. The use of a heterocyclic compound of general formula (I) as defined in any one of claims 1 to 5 for reducing nitrogen or carbon losses in inorganic and/or organic and/or organineral fertilizers or nitrogen or carbon-containing compounds or materials and also on harvest waste and pasture land or during the storage of liquid manure and for reducing the ammonia load in animal stables. 9. Het gebruik zoals geclaimd in een van de claims 1 tot en met 8, waarbij de heterocyclische verbinding van de algemene formule (I) wordt gebruikt in combinatie met ten minste één aanvullend agrochemisch agens, bij voor- keur gekozen uit de groep bestaande uit - ten minste één andere nitrificatieremmer, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit 2-(3,4-dimethyl-pyrazol-1-yl)-barnsteenzuur (DMPSA), 3,4-dimethylpyrazool (DMP), 3,4-dimethylpyrazoolfosfaat (DMPP) dicyaandiamide (DCD), 1H-1,2,4-triazool, 3-methylpyrazool (3-MP), 2-chloor-6-(trichloormethyl)-pyridine, 5-ethoxy-3- trichloormethyl-1,2,4-thiadiazol, 2-amino-4-chloor-6-methyl- pyrimidine, 2-mercapto-benzothia zole, 2-sulfanilamidothiazool, thioureum, natriumazide, kaliumazide, 1-hydroxypyra zole, 2- methylpyrazool-1-carboxamide, 4-amino-1,2,4-triazool, 3-mercapto- 1,2,4-triazo le, 2,4-diamino-6-trichloormethyl-5-triazine, koolstofbisul- fide, ammoniumthiosulfaat, natriumtrithiocarbonaat, 2,3-dihydro-2,2- dimethyl-7-benzofuranolmethylcarbamaat en N-(2,6-dimethylfenyl)- N-(methoxyacetyl)-alaninemethylester,The use as claimed in any one of claims 1 to 8, wherein the heterocyclic compound of general formula (I) is used in combination with at least one additional agrochemical agent, preferably selected from the group consisting of - at least one other nitrification inhibitor, preferably selected from the group consisting of 2-(3,4-dimethyl-pyrazol-1-yl)-succinic acid (DMPSA), 3,4-dimethylpyrazole (DMP), 3,4-dimethylpyrazole phosphate (DMPP) dicyandiamide (DCD), 1H-1,2,4-triazole, 3-methylpyrazole (3-MP), 2-chloro-6-(trichloromethyl)-pyridine, 5-ethoxy-3-trichloromethyl-1,2 ,4-thiadiazole, 2-amino-4-chloro-6-methylpyrimidine, 2-mercapto-benzothiazole, 2-sulfanilamidothiazole, thiourea, sodium azide, potassium azide, 1-hydroxypyrazole, 2-methylpyrazole-1-carboxamide, 4 -amino-1,2,4-triazole, 3-mercapto-1,2,4-triazole, 2,4-diamino-6-trichloromethyl-5-triazine, carbon bisulfide, ammonium thiosulfate, sodium trithiocarbonate, 2,3- dihydro-2,2-dimethyl-7-benzofu ranol methyl carbamate and N-(2,6-dimethylphenyl)-N-(methoxyacetyl)-alanine methyl ester, - en/of ten minste één ureaseremmer, bij voorkeur gekozen uit N- butylthiofosforzuurtriamide (NBTPT) en/of N-n- propylthiofosforzuurtriamide (NPTPT), - ten minste één gebruikelijke agrochemische hulpstof, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit waterige en/of organische op- losmiddelen, pH-regelaars, oppervlakteactieve stoffen, bevochti- gingsmiddelen, spreidingsmiddelen, adhesiebevorderaars, draag- stoffen, vulstoffen, viscositeitsverbeteraars, emulgatoren, disper- geermiddelen, sequestreermiddelen antizinkmiddelen, coalescen- temiddelen, reologiemodificatoren, antischuimmiddelen, fotobe- schermingsmiddelen, antivriesmiddelen, biostimulanten, pesticiden, biociden, plantengroeiregulatoren, beschermstoffen, penetrerende - middelen, antiklontermiddelen, minerale en/of plantaardige oliën en/of wassen, kleurstoffen en driftwerende middelen, en mengsels daarvan.- and/or at least one urease inhibitor, preferably selected from N-butylthiophosphoric acid triamide (NBTPT) and/or N-n-propylthiophosphoric acid triamide (NPPTT), - at least one common agrochemical adjuvant, preferably selected from the group consisting of aqueous and/or organic solvents, pH adjusters, surfactants, wetting agents, spreading agents, adhesion promoters, carriers, fillers, viscosity improvers, emulsifiers, dispersants, sequestering agents anti-zinc agents, coalescent agents, rheology modifiers, anti-foaming agents, photoprotectants, anti-freezing agents, biostimulants, pesticides, biocides, plant growth regulators, safeners, penetrants, anti-caking agents, mineral and/or vegetable oils and/or waxes, dyes and anti-fouling agents, and mixtures thereof. 10. Een mengsel dat ten minste één heterocyclische verbinding met als alge- mene formule (I) bevat NRIR2 A Vee " () met de volgende definities: XS of NRA, waarbij R4 c1-4alky IS, R1C3-12-koolwaterstofresidu dat 1 tot 3 heteroatomen kan bevatten, geko- zen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel, R2C1-6-koolwaterstofresidu dat één heteroatoom kan bevatten, gekozen uit de groep stikstof, zuurstof en zwavel, of waarin R1 en R2 samen met het stikstofatoom dat hen verbindt, een verza- digde of onverzadigde heterocyclische radicaal met vijf of zes leden vormen die naar keuze nog een of twee heteroatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof en zwavel, en welke heterocyclische radicaal deel kan uitmaken van een C4-20-koolwaterstofresidu dat naar keuze naast het stikstofatoom dat R1 en R2 verbindt, nog een tot vier hete- roatomen kan bevatten, gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuur-10. A mixture containing at least one heterocyclic compound of general formula (I) NRIR2 A Vee " () with the following definitions: XS or NRA, where R4 is C1-4alky, R1C3-12 hydrocarbon residue containing 1 to may contain 3 heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulphur, R2Cl-6 hydrocarbon residue that may contain one heteroatom selected from the group nitrogen, oxygen and sulphur, or wherein R1 and R2 together with the nitrogen atom connecting them , a five- or six-membered saturated or unsaturated heterocyclic radical which may optionally contain an additional one or two heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulphur, and which heterocyclic radical may be part of a C4-20 -hydrocarbon residue which, in addition to the nitrogen atom connecting R1 and R2, may optionally contain one to four heteroatoms selected from the group consisting of nitrogen, acid- stof, zwavel en fluor,dust, sulfur and fluorine, waarin R1 en R2 elk via een koolstofatoom verbonden zijn met het stikstof- atoom in NR1R2 en waarin in R1 en R2 heteroatomen van hetzelfde che- mische element niet naast elkaar liggen,where R1 and R2 are each linked through a carbon atom to the nitrogen atom in NR1R2 and R1 and R2 do not contain heteroatoms of the same chemical element, R3H ‚ C1-4-alkyl, S-C1-4-alkyl, NR5R6 waarbij R5 en R6 onafhankelijk van elkaar H, c1-6-aiky1, fenyl, fluorofenyl zijn,R3H, C1-4-alkyl, S-C1-4-alkyl, NR5R6 where R5 and R6 are independently H, C1-6-alkyl, phenyl, fluorophenyl, en ten minste één aanvullend agrochemisch agens, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uitand at least one additional agrochemical agent, preferably selected from the group consisting of - ten minste één andere nitrificatieremmer, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit 2-(3,4-dimethyl-pyrazol-1-yl)-barnsteenzuur- at least one other nitrification inhibitor, preferably selected from the group consisting of 2-(3,4-dimethyl-pyrazol-1-yl)-succinic acid (DMPSA), 3,4-dimethylpyrazool (DMP), 3,4-dimethylpyrazoolfosfaat (DMPP) dicyaandiamide (DCD), 1H-1,2,4-triazool, 3-methylpyrazool (3-MP), 2-chloor-6-(trichloormethyl)-pyridine, 5-ethoxy-3- trichloormethyl-1,2,4-thiadiazol, 2-amino-4-chloor-6-methyl- pyrimidine, 2-mercapto-benzothiazool, 2-sulfanilamidothiazool, thiou-(DMPSA), 3,4-dimethylpyrazole (DMP), 3,4-dimethylpyrazole phosphate (DMPP) dicyandiamide (DCD), 1H-1,2,4-triazole, 3-methylpyrazole (3-MP), 2-chloro-6 -(trichloromethyl)-pyridine, 5-ethoxy-3-trichloromethyl-1,2,4-thiadiazole, 2-amino-4-chloro-6-methyl-pyrimidine, 2-mercapto-benzothiazole, 2-sulfanilamidothiazole, thiou- reum, natriumazide, kaliumazide, 1-hydroxypyrazool, 2- methylpyrazool-1-carboxamide, 4-amino-1,2,4-triazool, 3-mercapto- 1,2,4-triazool, 2.,4-diamino-6-trichloormethyl-5-triazine, koolstofbisul- fide, ammoniumthiosulfaat, natriumtrithiocarbonaat, 2,3-dihydro-2,2- dimethyl-7-benzofuranolmethylcarbamaat en N-(2,6-dimethylfenyl)-rheum, sodium azide, potassium azide, 1-hydroxypyrazole, 2-methylpyrazole-1-carboxamide, 4-amino-1,2,4-triazole, 3-mercapto-1,2,4-triazole, 2,4-diamino-6 -trichloromethyl-5-triazine, carbon bisulfide, ammonium thiosulfate, sodium trithiocarbonate, 2,3-dihydro-2,2-dimethyl-7-benzofuranol methylcarbamate and N-(2,6-dimethylphenyl)- N-(methoxyacetyl)-alanine-methylester,N-(methoxyacetyl)-alanine methyl ester, - ten minste één ureaseremmer, bij voorkeur gekozen uit N- butylthiofosforzuurtriamide (NBTPT) en/of N-n- propylthiofosforzuurtriamide (NPTPT),- at least one urease inhibitor, preferably selected from N-butylthiophosphoric acid triamide (NBTPT) and/or N-n-propylthiophosphoric acid triamide (NPPTT), - ten minste één gebruikelijke agrochemische hulpstof, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit waterige en/of organische op- losmiddelen, pH-regelaars, oppervlakteactieve stoffen, bevochti- gingsmiddelen, spreidingsmiddelen, adhesiebevorderaars, dragers, vulstoffen, viscositeitsregelaars, emulgatoren, dispergeermiddelen, sequestreermiddelen antizinkmiddelen, coalescentiemiddelen, reolo-- at least one usual agrochemical adjuvant, preferably selected from the group consisting of aqueous and/or organic solvents, pH regulators, surfactants, wetting agents, spreading agents, adhesion promoters, carriers, fillers, viscosity regulators, emulsifiers, dispersants, sequestering agents, anti-zinc agents, coalescing agents, rheolo- giemodificatoren, antischuimmiddelen, fotobeschermingsmiddelen, antivriesmiddelen, biostimulanten, pesticiden, biociden, plantengroei- regulatoren, beschermstoffen, penetrerende middelen, antiklonter- middelen, minerale en/of plantaardige oliën en/of wassen, kleurstof- fen en driftwerende middelen, en mengsels daarvan.mold modifiers, defoamers, photoprotectants, antifreezes, biostimulants, pesticides, biocides, plant growth regulators, protectants, penetrants, anti-caking agents, mineral and/or vegetable oils and/or waxes, dyes and antifouling agents, and mixtures thereof. 11. Een meststofmengsel, bestaande uit A. een anorganische en/of organische en/of organominerale meststof en B. 10 tot 10000 gewichtsprocenten, op basis van de meststof, van een heterocyclische verbinding van de algemene formu- le (1) als omschreven in een van de claims 1 tot en met 5.11. A fertilizer mixture, consisting of A. an inorganic and/or organic and/or organomineral fertilizer and B. 10 to 10000 % by weight, based on the fertilizer, of a heterocyclic compound of the general formula (1) as defined in any of claims 1 through 5. 12. Het meststofmengsel zoals beweerd in claim 11, waarbij het meststof- mengsel in vaste vorm is en de heterocyclische verbinding van de algeme- ne formule (1) wordt aangebracht op het oppervlak van de, bij voorkeur an- organische, meststof.12. The fertilizer mixture as claimed in claim 11, wherein the fertilizer mixture is in solid form and the heterocyclic compound of general formula (1) is applied to the surface of the, preferably inorganic, fertilizer. 13. Het meststofmengsel zoals bedoeld in een van de vorderingen 11 of 12, waarin het meststofmengsel ten minste één aanvullend agrochemisch agens bevat, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit - ten minste één andere nitrificatieremmer, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit 2-(3,4-dimethyl-pyrazol-1-yl)-barnsteenzuur (DMPSA), 3,4-dimethylpyrazool (DMP), 3,4-dimethylpyrazoolfosfaat (DMPP) dicyaandiamide (DCD), 1H-1,2,4-triazool, 3-methylpyrazool (3-MP), 2-chloor-6-(trichloormethyl)-pyridine, 5-ethoxy-3- trichloormethyl-1,2,4-thiadiazol, 2-amino-4-chloor-6-methyl- pyrimidine, 2-mercapto-benzothiazool, 2-sulfanilamidothiazool, thiou- reum, natriumazide, kaliumazide, 1-hydroxypyrazool, 2- methylpyrazool-1-carboxamide, 4-amino-1,2,4-triazool, 3-mercapto- 1,2,4-triazool, 2.,4-diamino-6-trichloormethyl-5-triazine, koolstofbisul- fide, ammoniumthiosulfaat, natriumtrithiocarbonaat, 2,3-dihydro-2,2- dimethyl-7-benzofuranolmethylcarbamaat en N-(2,6-dimethylfenyl)- N-(methoxyacetyl)-alanine-methylester,13. The fertilizer mixture as referred to in one of claims 11 or 12, wherein the fertilizer mixture contains at least one additional agrochemical agent, preferably selected from the group consisting of - at least one other nitrification inhibitor, preferably selected from the group consisting of 2 -(3,4-dimethyl-pyrazol-1-yl)-succinic acid (DMPSA), 3,4-dimethylpyrazole (DMP), 3,4-dimethylpyrazole phosphate (DMPP) dicyandiamide (DCD), 1H-1,2,4- triazole, 3-methylpyrazole (3-MP), 2-chloro-6-(trichloromethyl)-pyridine, 5-ethoxy-3-trichloromethyl-1,2,4-thiadiazole, 2-amino-4-chloro-6-methyl - pyrimidine, 2-mercapto-benzothiazole, 2-sulfanilamidothiazole, thiourea, sodium azide, potassium azide, 1-hydroxypyrazole, 2-methylpyrazole-1-carboxamide, 4-amino-1,2,4-triazole, 3-mercapto-1 ,2,4-triazole, 2,4-diamino-6-trichloromethyl-5-triazine, carbon bisulfide, ammonium thiosulfate, sodium trithiocarbonate, 2,3-dihydro-2,2-dimethyl-7-benzofuranol methylcarbamate and N-(2 ,6-dimethylphenyl)-N-(methoxyacet yl)-alanine methyl ester, - ten minste één ureaseremmer, bij voorkeur gekozen uit N- butylthiofosforzuurtriamide (NBTPT) en/of N-n- propylthiofosforzuurtriamide (NPTPT), - ten minste één gebruikelijke agrochemische hulpstof, bij voorkeur gekozen uit de groep bestaande uit waterige en/of organische op- losmiddelen, pH-regelaars, oppervlakteactieve stoffen, bevochti- gingsmiddelen, spreidingsmiddelen, adhesiebevorderaars, dragers, vulstoffen, viscositeitsregelaars, emulgatoren, dispergeermiddelen, sequestreermiddelen antizinkmiddelen, coalescentiemiddelen, reolo- giemodificatoren, antischuimmiddelen, fotobeschermingsmiddelen, antivriesmiddelen, biostimulanten, pesticiden, biociden, plantengroei- regulatoren, beschermstoffen, penetrerende middelen, antiklonter- middelen, minerale en/of plantaardige oliën en/of wassen, kleurstof- fen en driftwerende middelen, en mengsels daarvan.- at least one urease inhibitor, preferably selected from N-butylthiophosphoric acid triamide (NBTPT) and/or N-n-propylthiophosphoric acid triamide (NPPTT), - at least one common agrochemical adjuvant, preferably selected from the group consisting of aqueous and/or organic solvents , pH adjusters, surfactants, wetting agents, spreading agents, adhesion promoters, carriers, fillers, viscosity regulators, emulsifiers, dispersants, sequestering agents anti-zinc agents, coalescing agents, rheology modifiers, anti-foaming agents, photoprotectants, antifreezes, biostimulants, pesticides, biocides, plant growth regulators , safeners, penetrants, anti-caking agents, mineral and/or vegetable oils and/or waxes, dyes and antifouling agents, and mixtures thereof. 14. Een werkwijze voor de productie van het meststofmengsel zoals beweerd in een van de vorderingen 11 tot en met 13 door het inbrengen van de hetero- cyclische verbinding van de algemene formule (I) in de anorganische mest- stof, en/of het aanbrengen van de heterocyclische verbinding van de alge- mene formule (I) op het oppervlak van de anorganische meststof.14. A process for the production of the fertilizer mixture as claimed in any one of claims 11 to 13 by introducing the heterocyclic compound of general formula (I) into the inorganic fertilizer, and/or applying of the heterocyclic compound of general formula (I) on the surface of the inorganic fertilizer. 15. Een methode voor de bemesting van land- of tuinbouwgronden, waarbij een meststofmengsel dat verbindingen A en B bevat A. een anorganische en/of organische en/of organominerale meststof en B. 10 tot 10000 gewichtsprocenten, op basis van de meststof, van een heterocyclische verbinding van de algemene formu- le (1) als omschreven in een van de claims 1 tot en met 5, of de verbindingen A en B afzonderlijk, maar binnen een periode van O tot 5 uur, bij voorkeur O tot 1 uur, bij voorkeur ongeveer gelijktijdig, op de bo- dems worden aangebracht.15. A method of fertilizing agricultural or horticultural soils, in which a fertilizer mixture containing compounds A and B contains A. an inorganic and/or organic and/or organomineral fertilizer and B. 10 to 10000 % by weight, based on the fertilizer, of a heterocyclic compound of the general formula (1) as defined in any one of claims 1 to 5, or compounds A and B individually, but within a period of 0 to 5 hours, preferably 0 to 1 hour, preferably about the same time, are applied to the bottoms.