AR047440A1 - PRODUCTION OF A MONOCLONAL ANTIBODY IN A HETEROCARION FUNGI OR A FUNGAL GUEST CELL - Google Patents

Abstract

Se refiere a métodos para producir un anticuerpo monoclonal en un hongo heterocarion o en una célula huésped fungal. Además, se refiere también a una construccion de ácido nucleico, a una primera secuencia de ácido nucleico que codifica para una cadena liviana de un anticuerpo, y a una tercera secuencia de ácido nucleico que codifica para un péptido de senalizacion heterologo para la primera secuencia de ácido nucleico, una construccion de ácido nucleico que comprende una primera secuencia de ácido nucleico que codifica para una cadena pesada de un anticuerpo y una tercera secuencia de ácido nucleico que codifica para un péptido de senalizacion heterologo de la primera secuencia de ácido nucleico, una construccion de ácido nucleico que comprende una primera secuencia de ácido nucleico que codifica para una cadena liviana de un anticuerpo y una segunda secuencia de ácido nucleico que codifica para una dominio de union a celulosa, y una construccion de ácido nucleico que incluye una primera secuencia de ácido nucleico que codifica para una cadena pesada de un anticuerpo y una segunda secuencia de ácido nucleico que codifica para un dominio de union a celulosa. Reivindicacion 1: Un método para producir un anticuerpo monoclonal que comprende: a) proveer un hongo heterocarion que incluye un primer nucleo y un segundo nucleo, donde dicho primer nucleo incluye una primera construccion de ácido nucleico que incluye una primera secuencia de ácido nucleico que codifica para cadena liviana de un anticuerpo, y donde dicho segundo nucleo incluye una segunda construccion de ácido nucleico que incluye una primera secuencia de ácido nucleico que codifica para una cadena pesada de un anticuerpo, y donde por lo menos una de dichas construcciones de ácido nucleico comprende además una segunda secuencia de ácido nucleico que codifica para un polipéptido o para una parte funcional del mismo secretada normalmente por un hongo; b) cultivar el hongo heterocarion bajo condiciones apropiadas para la expresion de las cadenas livianas y pesadas del anticuerpo.It refers to methods for producing a monoclonal antibody in a heterocarion fungus or in a fungal host cell. In addition, it also refers to a nucleic acid construct, a first nucleic acid sequence encoding a light chain of an antibody, and a third nucleic acid sequence encoding a heterologous signaling peptide for the first acid sequence nucleic, a nucleic acid construct comprising a first nucleic acid sequence encoding an antibody heavy chain and a third nucleic acid sequence encoding a heterologous signaling peptide of the first nucleic acid sequence, a nucleic acid construct nucleic acid comprising a first nucleic acid sequence encoding a light chain of an antibody and a second nucleic acid sequence encoding a cellulose binding domain, and a nucleic acid construct that includes a first nucleic acid sequence which codes for a heavy chain of an antibody and a second s nucleic acid frequency encoding a cellulose binding domain. Claim 1: A method of producing a monoclonal antibody comprising: a) providing a heterocarion fungus that includes a first nucleus and a second nucleus, wherein said first nucleus includes a first nucleic acid construct that includes a first nucleic acid sequence encoding for light chain of an antibody, and wherein said second nucleus includes a second nucleic acid construct that includes a first nucleic acid sequence encoding a heavy chain of an antibody, and wherein at least one of said nucleic acid constructs comprises furthermore a second nucleic acid sequence encoding a polypeptide or a functional part thereof normally secreted by a fungus; b) cultivate the heterocarion fungus under appropriate conditions for the expression of the light and heavy chains of the antibody.