TWI651099B - 以微脂體包覆之藥劑及其用途 - Google Patents

Abstract

本揭示內容提供了一種用以治療罹患或疑似罹患固態腫瘤之個體的方法。本發明方法包含對個體投予一有效量之以微脂體包覆的藥劑，再對該固態腫瘤施予一調幅射頻放射。

Description

以微脂體包覆之藥劑及其用途

本揭示內容是關於治療腫瘤的領域。更具體來說，本揭示內容是關於微脂體及調幅射頻放射(amplitude-modulated (AM) radiofrequency radiation)於治療腫瘤的用途。

腫瘤是一種常見的致死性疾病，每年約有1,400萬名病患被診斷出罹患腫瘤；世界衛生組織(World Health Organization (WHO))於2014年的世界癌症報導進一步指出，腫瘤每年約造成820萬人死亡。迄今，相關領域已研發出各種用以治療腫瘤的方法，例如外科手術、化療、放射治療、抗血管新生治療及免疫治療。然而，該些治療仍無法提供足夠的治療效益。

微脂體是一種具有至少一脂質雙層結構的球形囊泡。微脂體可作為包覆及傳送營養物質或藥劑的載體，據以將營養物質或藥劑傳遞至特定位置。一般來說，脂質雙層可與其他雙層結構(例如細胞膜)融合，進而將包覆於微脂體結構中的營養物質或藥劑釋放於標的位置。至2012為止，已有13種微脂體傳遞系統型藥物經核准許可，且另外有5種微脂體藥物已進入治療感染性疾病及/或腫瘤等臨床試驗階段。

近年來，相關領域已研發數種用以增加微脂體於治療腫瘤之功效的策略，例如(1)藉由將腫瘤特定分子鍵結於微脂體表面，以增加微脂體對腫瘤細胞的標的專一性；舉例來說，可將上皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor (EGFR))鍵結於微脂體表面，據以使微脂體可專一標的至會過量表現EGFR的腫瘤細胞；(2)藉由將抗-血管新生相關因子(例如內皮生長因子(endothelial growth factor (VEGF))、細胞附著分子(cell adhesion molecule (CAM))、基質金屬蛋白酶(matrix metalloprotease (MMP)或整合素(integrin))之抗體鍵結於微脂體表面，以增加微脂體對腫瘤微環境的標的專一性；該些微脂體可有效標的至參與血管新生、腫瘤生長或腫瘤轉移的內皮細胞或纖維細胞上；(3)增加藥物於腫瘤區域的釋放；舉例來說，利用可對內部或外部刺激(例如pH值、溫度、酵素、光線、超音波及磁力)產生反應的刺激敏感性微脂體；(4)增加微脂體的穩定性；已知經聚乙二醇(polyethylene glycol (PEG))修飾的脂質會干擾吞噬細胞辨識微脂體；此外，嵌入膽固醇(cholesterol)、生育酚(tocopherol)或其他細胞膜活性抗氧化劑亦可增加微脂體的穩定性。然而，該些策略皆有其限制，例如價錢昂貴、功效不足及/或費時。

有鑑於此，相關領域亟需一種經改良的方法，可藉由增加微脂體藥物的作用功效來改善其對罹患或疑似罹患腫瘤之個體的治療功效。

發明內容旨在提供本揭示內容的簡化摘要，以使閱讀者對本揭示內容具備基本的理解。此發明內容並非本揭示內容的完整概述，且其用意並非在指出本發明實施例的重要/關鍵元件或界定本發明的範圍。

本揭示內容旨在提供一種用以改善微脂體於治療腫瘤之功效的方法。據此，本揭示內容的第一態樣是關於一種用以治療罹患或疑似罹患固態腫瘤之個體的方法。該方法包含： (1)對該個體投予一有效量之以微脂體包覆的治療藥劑；以及 (2)對該固態腫瘤投予一AM射頻放射，以增強該固體腫瘤對該以微脂體包覆之治療藥劑的吸收。

依據某些實施方式，該包覆於微脂體中的治療藥劑是選自由抗腫瘤藥劑(anti-tumor agent)、抗發炎藥劑(anti-inflammatory agent)、抗血管新生藥劑(anti-angiogenic agent)、免疫調節劑(immunomodulatory agent)及放射性核種(radionuclide)所組成的群組。

依據一實施方式，該治療藥劑為抗腫瘤藥劑，其係選自由博萊黴素(bleomycin)、泛艾黴素(epirubicin)、雌莫司汀(estramustine)、依妥普賽(etoposide)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)、艾黴素(doxorubicin)、絲裂黴素C (mitomycin C)、順鉑(cisplatin)、紫杉醇(paclitaxel)、喜樹鹼(camptothecin)、長春新鹼(vincristine)、長春花鹼(vinblastine)、胺甲葉酸(methotrexate)、雙羥恩(mitoxantrone)、沙利竇邁(thalidomide)及鯊胺(squalamine)所組成的群組。在一實施例中，該治療藥劑是博萊黴素、艾黴素、絲裂黴素C、順鉑或紫杉醇。較佳地，治療藥劑於微脂體中的濃度約為每毫升5-800微克。

就結構來看，本發明微脂體的直徑約介於50奈米到5,000奈米之間。

一般來說，可利用口服、腸內、鼻腔、局部、經黏膜、肌肉內、靜脈內、動脈內、皮下、腹腔內或腫瘤內之路徑將本發明以微脂體包覆之治療藥劑投予至個體體內。

依據本揭示內容的實施方式，AM射頻放射的射頻約為1-50百萬赫(MHz)，且AM射頻放射的功率約為0.5-300瓦(watt)。

依據某些實施方式，固態腫瘤是黑色素瘤、食道癌、胃癌、腦瘤、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、膀胱癌、乳癌、胰臟癌、大腸癌、直腸癌、大腸直腸癌、腎臟癌、肝癌、卵巢癌、***癌、甲狀腺癌、睪丸癌、子宮頸癌或頭頸部鱗狀細胞癌。

可接受本發明方法治療的個體為一哺乳動物，舉例來說，人類、猴子、黑猩猩、小鼠、大鼠、馬、兔子、豬、綿羊、山羊、貓及狗。較佳地，個體為人類。

在參閱下文實施方式後，本發明所屬技術領域中具有通常知識者當可輕易瞭解本發明之基本精神及其他發明目的，以及本發明所採用之技術手段與實施態樣。

為了使本揭示內容的敘述更加詳盡與完備，下文針對了本發明的實施態樣與具體實施例提出了說明性的描述；但這並非實施或運用本發明具體實施例的唯一形式。實施方式中涵蓋了多個具體實施例的特徵以及用以建構與操作這些具體實施例的方法步驟與其順序。然而，亦可利用其他具體實施例來達成相同或均等的功能與步驟順序。

雖然用以界定本發明較廣範圍的數值範圍與參數皆是約略的數值，此處已盡可能精確地呈現具體實施例中的相關數值。然而，任何數值本質上不可避免地含有因個別測試方法所致的標準偏差。在此處，「約」通常係指實際數值在一特定數值或範圍的正負10%、5%、1%或0.5%之內。或者是，「約」一詞代表實際數值落在平均值的可接受標準誤差之內，視本發明所屬技術領域中具有通常知識者的考量而定。除了實驗例之外，或除非另有明確的說明，當可理解此處所用的所有範圍、數量、數值與百分比（例如用以描述材料用量、時間長短、溫度、操作條件、數量比例及其他相似者）均經過「約」的修飾。因此，除非另有相反的說明，本說明書與附隨申請專利範圍所揭示的數值參數皆為約略的數值，且可視需求而更動。至少應將這些數值參數理解為所指出的有效位數與套用一般進位法所得到的數值。在此處，將數值範圍表示成由一端點至另一段點或介於二端點之間；除非另有說明，此處所述的數值範圍皆包含端點。

除非本說明書另有定義，此處所用的科學與技術詞彙之含義與本發明所屬技術領域中具有通常知識者所理解與慣用的意義相同。此外，在不和上下文衝突的情形下，本說明書所用的單數名詞涵蓋該名詞的複數型；而所用的複數名詞時亦涵蓋該名詞的單數型。

「微脂體」(liposome)一詞在本揭示內容是指一種人工及/或天然製備的囊泡，其係由至少一脂質雙層結構所組成。一微脂體可以是單層囊泡(即由單一脂質雙層所組成的囊泡)或多層囊泡(即由數層脂質雙層所組成的囊泡)。

在本揭示內容中，「治療藥劑」(therapeutic agent)一詞是指一種化物、分子或治療，其可誘發任何宿主、動物、脊椎動物或無脊椎動物(舉例來說，包含魚類、哺乳動物、兩棲動物、爬行動物、鳥類及人類)產生一種生物反應。例示性之治療藥劑包含，但不限於，抗腫瘤藥劑、抗發炎藥劑、抗血管新生藥劑、免疫調節劑及放射性核種。

在本揭示內容中，「抗腫瘤藥劑」(anti-tumor agent)一詞是指一種分子，其可抑制腫瘤組織的增生或殺死腫瘤組織的細胞。更具體來說，抗腫瘤藥劑可以(1)減少腫瘤細胞的增生，(2)抑制或預防腫瘤細胞的轉移，(3)抑制腫瘤細胞以非貼附性生長(anchorage-independent growth)的方式形成細胞聚落(colony)，(4)造成腫瘤細胞壞死，及/或(5)造成腫瘤細胞凋亡。

在本揭示內容中，「抗發炎藥劑」(anti-inflammatory agent)一詞是指一種分子，其可抵抗、預防及/或減少由感染、疾病、自體抗體及/或外傷所引發的組織發炎反應。

在本揭示內容中，「抗血管新生藥劑」(anti-angiogenic agent)與「血管新生抑制劑」(angiogenesis inhibitor)為可互換的詞彙。更具體來說，本揭示內容所述之「抗血管新生藥劑」(anti-angiogenic agent)一詞是指一種分子，其可(1)抑制內皮細胞的增生或移動，(2)造成增生的內皮細胞死亡，及/或(3)抑制組織中新血管的形成。

「免疫調節劑」(immunomodulatory agent)一詞在本揭示內容是指一種分子，其可調節宿主免疫系統中一或多種成分(例如免疫細胞、次細胞因子、可調控免疫成分的基因、細胞激素及趨化激素等分子)。免疫調節劑可以是一種免疫抑制劑(immunosuppressive agent)或是一種免抑增強劑(immunostimulatory agent)。

在本揭示內容中，「放射性核種」(radionuclide)一詞是指一種具有不穩定核的原子，其會藉由放射性衰變而釋放出γ射線及/或次原子顆粒。例示性的放射性核種包含，但不限於，⁹⁰ Y、¹¹¹ In、⁶⁷ Cu、⁷⁷ Lu、¹⁷⁷ Lu及⁹⁹ Tc。

「射頻」(radiofrequency (RF))一詞在本揭示內容是指一種範圍約介於3 KHz到300 GHz之間的電磁波。

「固態腫瘤」(solid tumor)一詞在本揭示內容是一種異常增生的組織，其通常不具胞囊或液體區域。固態腫瘤可以是良性腫瘤(非癌症)或惡性腫瘤(癌症)。可依據細胞類型來命名各式固態腫瘤。例示性的固態腫瘤包含肉瘤(sarcomas)、惡性腫瘤(carcinomas)及淋巴瘤(lymphomas)。

「有效量」(effective amount) 在此處係指一藥物的用量足以產生欲求的療效反應。有效量亦指一種化合物或組合物，其治療利益效果超越其毒性或有害影響。具體的有效量取決於多種因素，如欲治療的特定狀況、患者的生理條件(如，患者體重、年齡或性別)、接受治療的哺乳動物或動物的類型、治療持續時間、目前療法(如果有的話)的本質以及所用的具體配方和化合物或其衍生物的結構。舉例來說，可將有效量表示成藥物的總重量(譬如以克、毫克或微克為單位)或表示成藥物重量與體重之比例(其單位為毫克/公斤(mg/kg))。或者是，可將有效量表示成活性成分(例如，本揭示內容之以微脂體包覆的治療藥劑)的濃度，例如莫耳濃度、重量濃度、體積濃度、重量莫耳濃度、莫耳分率、重量分率及混合比值。具體來說，「治療有效量」(therapeutically effective amount)一詞若與本揭示內容之以微脂體包覆的治療藥劑共同使用時，是指以微脂體包覆之治療藥劑的劑量，其係足以減少或減緩與個體腫瘤相關的病徵。習知技藝者可依據動物模式的劑量來計算藥物(如本揭示內容之麩醯胺酸)的人體等效劑量(human equivalent dose, HED)。舉例來說，習知技藝者可依據美國食品藥物管理局(US Food and Drug Administration, FDA)所公告之「估算成人健康志願者在初始臨床治療測式之最大安全起始劑量」(Estimating the Maximum Safe Starting Dose in Initial Clinical Trials for Therapeutics in Adult Healthy Volunteers)來估算人體使用之最高安全劑量。

「個體」(subject)一詞是指包含人類的動物，其可接受本發明方法的治療。除非特定指出，否則「個體」(subject)一詞同時意指不同年齡的男性及女性，例如孩童或成人。

本揭示內容旨在提供一種方法，用以改善一治療位置(例如腫瘤位置)對以微脂體包覆之治療藥劑的吸收。據此，本揭示內容的第一態樣是關於一種用以治療一罹患或疑似罹患固態腫瘤之個體的方法。本發明方法包含： (1)對該個體投予一有效量之以微脂體包覆的治療藥劑；以及 (2)對該固態腫瘤投予一AM射頻放射，藉以增加該固體腫瘤對該以微脂體包覆之治療藥劑的吸收。

在步驟(1)中，是先藉由一適當路徑將以微脂體包覆的治療藥劑投予至個體體內。依據本揭示內容之實施方式，該以微脂體包覆的治療藥劑包含一微脂體，以及一包覆於該微脂體中的治療藥劑。

微脂體可以是天然及/或合成脂質。舉例來說，天然脂質包含脂質A (Lipid A，例如去毒性脂質A (Detoxified Lipid A))、膽固醇、神經鞘脂(sphingolipid，例如神經鞘鞍醇(sphingosine)及諸如d-紅-神經鞘鞍醇(d-erythro-sphingosine)、鞘磷脂(sphingomyelin)、神經醯胺(ceramide)、腦糖苷(cerebroside)、腦髓硫脂(brain sulfatides)等衍生物)、神經節苷脂(ganglioside)、神經鞘鞍醇衍生物(例如葡萄糖神經醯胺(glucosylceramide))、植物鞘氨醇(phytosphingosine)及其衍生物(例如d-核糖-植物鞘氨醇-1-磷酸酯(d-ribo-phytosphingosine-1-phosphate)、N-醯基植物鞘氨醇C2 (N-acyl phytosphingosine C2)、N-醯基植物鞘氨醇C8及N-醯基植物鞘氨醇C18)、膽鹼(choline，例如卵磷脂(phosphatidylcholine)及血小板活化因子)、乙醇胺(ethanolamine，例如磷脂醯乙醇胺(phosphatidylethanolamine))、甘油(例如磷脂-dl-甘油(phosphatidyl-dl-glycerol))、肌醇(inositol，例如磷脂醯肌醇(phosphatidylinositol))、絲胺酸(例如磷脂醯絲胺酸(鈉鹽)(phosphatidylserine (sodium salt))、心磷脂(cardiolipin)、磷脂酸(phosphatidic acid)、卵衍生物(egg derivatives)、溶(單醯基)衍生物(lyso (mono acyl) derivatives，例如脫脂酸燐脂(lysophosphatides))、氫化磷脂質、脂質組織萃取物(例如腦、心臟、肝臟、卵、大豆及大腸桿菌)，以及源自磷脂質的脂肪酸成分(例如卵磷脂及磷脂醯乙醇胺)。例示性的合成脂質包含，但不限於，磷脂醯膽鹼(phosphaditylcholine)、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯絲胺酸、磷脂醯肌醇、磷脂酸、磷脂醯甘油(phosphatidylglycerol)、心磷脂、二醯基甘油酯(diacylglyceride)、膽固醇、聚乙二醇(包含PEG-350、PEG-400、PEG-450、PEG-500、PEG-550、PEG-750、PEG-800、PEG-1000、PEG-2000、PEG-3000及PEG-5000)脂質、用以鍵結之功能性脂質、具有多樣性頭部的磷脂質、用以製備pH敏感性微脂體的脂質、金屬螯合脂質、抗原性磷脂質、脫氧脂質(doxyl lipid)、螢光脂質、溶磷脂質(lyso phospholipid)、烷基磷膽鹼(alkyl phosphocholine)、氧化脂質、生物素化(biotinylated)、醚脂質(ether lipid，包含二醚脂質、烷基磷膽鹼及O-烷基二醯基磷醯膽鹼(O-alkyl diacylphosphatidylcholinium))、縮醛磷脂(plasmologen lipid)、二植烷醯磷脂質(diphytanoyl phospholipid)、聚合性脂質、溴化磷脂質、氯化磷脂質、氘化磷脂質、脫氧脂質、螢光脂質、包含生物活性甘油之脂質(例如血小板活化因子及二級訊息傳遞脂質)，以及脂質代謝的中間產物。依據挑選的脂質特性，製備的微脂體可以是為陽離子型、陰離子型及/或電中性。依據本揭示內容一實施方式，本發明微脂體是由二硬脂醯磷脂醯膽鹼(distearoylphosphatidylcholine (DSPC))、膽固醇(CH)或聚乙二醇2000-二硬脂醯磷脂醯乙醇胺(PEG-2000-DSPE)所製備。

此外，可將一功能性分子包覆於上述微脂體之內部及/或鍵結於上述微脂體之表面。舉例來說，可將一與腫瘤相關之配體或受體，或是一腫瘤特定抗體鍵結於微脂體表面，以增加本發明微脂體的專一性(對腫瘤細胞或腫瘤支持細胞(例如內皮細胞及纖維細胞))。此外及/或亦或是，可將補體C3b鍵結於微脂體表面，藉由抑制吞噬補體受體的辨識來延長本發明微脂體於活體體內的半衰期

至於治療藥劑，其可以是抗腫瘤藥劑、抗發炎藥劑、抗血管新生藥劑、免疫調節劑或放射性核種。依據一較佳實施方式，該治療藥劑是抗腫瘤藥劑；非限制之抗腫瘤藥劑包含，但不限於，博萊黴素、泛艾黴素、雌莫司汀、依妥普賽、5-氟尿嘧啶、艾黴素、絲裂黴素C、順鉑、紫杉醇、喜樹鹼、長春新鹼、長春花鹼、胺甲葉酸、雙羥恩、沙利竇邁及鯊胺。較佳地，治療藥劑是博萊黴素。

或者是，治療藥劑可以是抗發炎藥劑。抗發炎藥劑可以是類固醇類抗發炎藥物(steroidal anti-inflammatory drug (SAID))或是非類固醇類抗發炎藥物(non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID))。例示性之抗發炎藥劑包含，但不限於，阿司匹靈(aspirin)、布洛芬(ibuprofen)、那普洛辛(naproxen)、阿氯芬酸(alclofenac)、阿氯米松雙丙酸酯(alclometasone dipropionate)、阿孕奈德(algestone acetonide)、α澱粉酶(alpha amylase)、安西法爾(amcinafal)、安西非特(amcinafide)、氨芬酸鈉(amfenac sodium)、鹽酸氨普立糖(amiprilose hydrochloride)、阿那白滯素(anakinra)、阿尼祿酸(anirolac)、阿尼 紮芬(anitrazafen)、阿紮丙宗(apazone)、巴柳氮二鈉 (balsalazide disodium)、節達 酸(bendazac)、苯噁洛芬(benoxaprofen)、鹽酸節達明(benzydamine hydrochloride)、 鳳梨蛋白酶(bromelains)、溴呱莫(broperamole)、布***(budesonide)、卡布洛芬 (carprofen)、環洛芬(cicloprofen)、辛噴他宗(cintazone)、克利洛芬(cliprofen)、 丙酸氯倍他索(clobetasol propionate)、丁氯倍他松(clobetasone butyrate)、 氯p比酸(clopirac)、氯硫卡松丙酸鹽(cloticasone propionate)、醋酸三氟米松 (cormethasone acetate)、可托多松(cortodoxone)、癸酸鹽(decanoate)、地夫可特(deflazacort)、 庚酸睾酮(delatestryl)、能普-睾酮(depo-testosterone)、***(desonide)、 去輕米松(desoximetasone)、二丙酸***(dexamethasone dipropionate)、 雙氯芬酸鉀(diclofenac potassium)、雙氯芬酸鈉 (diclofenac sodium)、雙醋二氟拉松(diflorasonediacetate)、二氟米酮鈉 (diflumidone sodium)、二氟尼柳 (diflunisal)、二氟潑尼醋(difluprednate)、雙酞嘆酮(diftalone)、二甲基亞碸(dimethyl sulfoxide)、輕西奈德(drocinonide)、甲地松(endrysone)、恩莫單抗(enlimomab)、依諾利康鈉 (enolicam sodium)、依匹挫(epirizole)、依託度酸(etodolac)、依託芬那醋(etofenamate)、聯苯乙酸(felbinac)、非那莫(fenamole)、芬布芬(fenbufen)、芬氯酸(fenclofenac)、苯克洛 酸(fenclorac)、芬度柳(fendosal)、苯吡噁二酮(fenpipalone)、芬替酸(fentiazac)、 夫拉紮酮(flazalone)、氟紮可特(fluazacort)、氟芬那酸(flufenamic acid)、氟咪挫 (flumizole)、醋酸氟尼縮松(flunisolide acetate)、氟尼辛(flunixin)、氟尼辛葡甲胺(flunixin meglumine)、氟考丁醋(fluocortin butyl)、氟米龍醋酸醋(fluorometholone acetate)、苯氟喹酮(fluquazone)、氟比洛芬(flurbiprofen)、氟瑞托芬(fluretofen)、丙 酸氟替卡松(fluticasone propionate)、咲喃洛芬(furaprofen)、咲羅布芬(furobufen)、 哈西奈德(halcinonide)、丙酸齒倍他索(halobetasol propionate)、醋酸齒潑尼 松(halopredone acetate)、異 丁芬酸(ibufenac)、布洛芬(ibuprofen)、布洛芬錯 (ibuprofen aluminum)、皮考布洛芬(ibuprofen piconol)、伊洛達普(ilonidap)、吲噪美 辛(indomethacin)、吲噪美辛鈉 (indomethacin sodium)、吲噪布洛芬(indoprofen)、吲四挫(intrazole)、醋異氟龍(isoflupredone acetate)、氧卓乙酸 (isoxepac)、伊索昔康(isoxicam)、酮基布洛芬(ketoprofen)、鹽酸洛非咪挫(lofemizole hydrochloride)、氯諾昔康(lomoxicam)、氯替潑諾碳酸乙醋(loteprednol etabonate)、 甲氯滅酸鈉 (meclofenamate sodium)、甲氯芬那酸(meclofenamic acid)、甲氯松二丁 醋(meclorisone dibutyrate)、甲芬那酸(mefenamic acid)、美沙拉嗪(mesalamine)、美西拉宗(meseclazone)、甲二氛睾酬(mesterolone)、美雄酬(methandrostenolone)、 美替諾龍(methenolone)、美替諾龍醋酸醋(methenolone acetate)、磺庚甲潑尼龍 (methylprednisolone suleptanate)、嗎尼氟醋(momiflumate)、萘丁美酮(nabumetone)、諾龍(nandrolone)、萘普生(naproxen)、萘普生鈉 (naproxen sodium)、甲氧萘丙醇 (naproxol)、尼馬宗(nimazone)、奧沙拉嗪鈉(olsalazinesodium)、肝蛋白(orgotein)、奧帕諾辛(orpanoxin)、氧甲氫龍(oxandrolane)、奧沙普秦(oxaprozin)、羥基保 泰松(oxyphenbutazone)、輕甲稀龍(oxymetholone)、鹽酸瑞尼托林(paranyline hydrochloride)、戊聚糖多硫酸鈉 (pentosan polysulfate sodium)、甘油保泰松鈉 (phenbutazone sodium glycerate)、吡非尼酮(pirfenidone)、吡羅昔康(piroxicam)、 肉桂酸吡羅昔康(piroxicam cinnamate)、吡羅昔康乙醇胺(piroxicam olamine)、比諾布洛芬(pirprofen)、潑那紮特(prednazate)、普立非酮(prifelone)、普羅度酸 (prodolic acid)、普羅喹宗(proquazone)、普羅沙挫(proxazole)、枸橡酸普羅沙挫 (proxazolecitrate)、利美索龍(rimexolone)、氯馬紮利(romazarit)、水楊酸膽鹼硫酸 儀(salcolex)、沙那西定(salnacedin)、雙水楊醋(salsalate)、血根氯鞍(sanguinarium chloride)、司克拉宗(seclazone)、絲美辛(sermetacin)、康力龍(stanozolol)、舒多昔 康(sudoxicam)、舒林酸(sulindac)、舒洛芬(suprofen)、他美辛(talmetacin)、氟煙酞醋 (talniflumate)、他洛柳醋(talosalate)、特丁非隆(tebufelone)、替尼達普(tenidap)、替尼達普鈉 (tenidap sodium)、替諾昔康(tenoxicam)、氧喹苯胺(tesicam)、辛叉異喹 酮(tesimide)、睾酮、睾酮混合物(testosterone blends)、四氫甲吲胺(tetrydamine)、硫平酸(tiopinac)、替可的松匹伐醋(tixocortol pivalate)、托美丁(tolmetin)、托美 丁鈉 (tolmetin sodium)、三氯氟松(triclonide)、三氟氨醋(triflumidate)、齊多美辛(zidometacin)及苯醯吡酸鈉 (zomepirac sodium)。

具選擇性地，治療藥劑可以是抗血管新生藥劑，其係選自由內皮抑素(endostatin)、血管抑素(angiostatin)、血小板反應素-1 (thrombospondin-1 (TSP-1))、鈣網伴護蛋白(calreticulin (CRT))、腫瘤抑素(tumstatin)、血管抑制劑(vasoinhibins)、血管抑制素(vasculostatin)、制動素(arrestin)、血管生成抑制素(canstatin)、內皮糖蛋白(endoglin)、抑制素(restin)、乳腺絲氨酸蛋白酶抑製劑(maspin)、色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor (PEDF))、內皮蛋白(endorepellin)、血小板因子4 TNP-470 (platelet factor 4 TNP-470)、唑來磷酸(Zoledronic acid)及抗體(例如貝伐單抗(Bevacizumab)、拉尼珠單抗(Ranibizumab)、紓癌特(Sunitinib)及呱加他尼(Pegaptanib))。

至於免疫調節劑，其可以是抗生素(例如氯林絲菌素(clindamycin)、胺基苷類(aminoglycosides)、紅黴素(erythromycin)及β-內醯胺抗生素(β-lactam antibiotics))、他汀類藥物(statin，例如阿托伐他汀(atorvastatin)、西立伐他汀(cerivastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、洛維汀(lovastatin)、美伐他汀(mevastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)、普伐他汀(pravastatin)、羅蘇伐他汀(rosuvastatin)及辛伐他汀(simvastatin))、干擾素(例如IFN-α、IFN-β及IFN-γ)、格拉默醋酸(glatiramer acetate)、胺甲葉酸(methotrexate)、BG12、芬戈莫德(fingolimod)、米托蒽醌(mixoxantrone)、拉奎莫德(laquinimod)、特立氟胺(teriflunomide)、阿托伐他汀、沙利度胺(thalidomide)、來那度胺(lenalidomide)、派莫里胺(pomalidomide)、阿普斯特(apremilast)、類固醇或其組合。

或者是，包覆於本發明微脂體中的治療藥劑可以是放射性核種，其係選自由⁹⁰ Y、¹¹¹ In、⁶⁷ Cu、⁷⁷ Lu、¹⁷⁷ Lu及⁹⁹ Tc所組成的群組。

當可想見，本發明微脂體可包含一種以上的治療藥劑，藉以增加腫瘤的治療功效。舉例來說，為治療由肝炎病毒所引發的腫瘤(例如由B型肝炎病毒所引發的肝癌，以及由C型肝炎病毒所引發的肝癌)，其通常與肝臟的發炎反應相關及/或會造成肝臟的發炎反應，本發明微脂體除了抗腫瘤藥劑之外，可更包含抗發炎藥劑；據此，抗腫瘤藥劑可抑制腫瘤細胞的生長及/或造成腫瘤細胞的死亡(例如壞死或凋亡)，而抗發炎藥劑則會減少發炎因子的表現量，進而減緩腫瘤微環境內及/或周圍的發炎狀況。或者是，本發明微脂體除了抗腫瘤藥劑之外，可更包含抗血管新生藥劑；據此，抗腫瘤藥劑可抑制腫瘤細胞的生長及/或造成腫瘤細胞的死亡(例如壞死或凋亡)，而抗血管新生藥劑則會阻斷支持腫瘤細胞生長的血管新生反應。本發明所屬技術領域具有通常知識者可依據應用需求來挑選及結合不同數量及/或種類的治療藥劑，據以製備本發明微脂體。當可想見，當本發明微脂體包含一種以上的治療藥劑時，可依據欲達成之治療功效來調整該些藥劑的比例。

可藉由任何已知方法來製備本發明微脂體，例如薄膜水合法(thin-membrane hydration method)、超音波震盪法(ultrasonification method)、乙醇注射法(ethanol injection method)、***注射法(ether injection method)、逆相蒸發法(reverse-phase evaporation method)、表面活性劑法(surfactant method)、冷凍/解凍法(freezing/thawing method)及薄膜水合-超音波法(thin-membrane hydration-ultrasonic method)。

依據某些實施方式，包覆於微脂體中之治療藥劑的濃度約為每毫升5-800微克；意即，濃度可以是每毫升5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750或800微克。依據一較佳實施例，治療藥劑的濃度約為每毫升25-150微克。

可利用已知方法來調整微脂體的顆粒直徑；舉例來說，擠壓法(extrusion method)、高壓細胞均質法(French press method)及均質法(homogenization method)。依據本揭示內容之實施方式，包覆治療藥劑之微脂體的直徑約介於50奈米到5,000奈米之間；舉例來說，80、90、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1,000、1,500、2,000、2,500、3,000、3,500、4,000、4,500或5,000奈米。較佳地，包覆治療藥劑之微脂體的直徑約為80奈米到5,000奈米。

可將本發明以微脂體包覆的治療藥劑與一適當的載體共同配製為液體溶液、軟膏、凝膠、糊劑、洗劑、海綿、噴劑或軟明膠膠囊的投予劑型。可將本發明以微脂體包覆的治療藥劑配製為糊劑或凝膠的投予劑型，其係置於一軟明膠膠囊中。在一較佳實施方式中，是將本發明以微脂體包覆的治療藥劑配置為液體溶液的投予劑型。

具選擇性的，在有必要的情況下，包含本發明以微脂體包覆之治療藥劑的液體溶液可更包含一或多種藥學添加物，其可以是緩衝液、穩定劑、等張劑、pH調節劑、助溶劑、增稠劑、分散劑及防腐劑等物質。

例示性之緩衝液包含，但不限於，硼酸、磷酸、乙酸、碳酸、檸檬酸及其等效物質。磷酸、乙酸、碳酸及檸檬酸的等效物質是指溶解後，能於水中產生磷酸根離子、乙酸根離子、碳酸根離子及檸檬酸根離子的化合物。

例示性的穩定劑包含，但不限於，生育酚、丁羥甲氧苯(butylhydroxyanisole)、丁羥甲苯(butylhydroxytoluene)、乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA))及半胱胺酸。

例示性的等張劑包含，但不限於，D-甘露醇(D-mannitol)、D-葡萄糖醇(D-sorbitol)、D-木糖醇(D-xylitol)、甘油、葡萄糖、葡萄糖醇、甘露醇、麥芽糖、蔗糖、丙二醇及電解質(例如氯化鈉及氯化鉀)。

舉例來說，pH調節劑可以是氫氯酸、檸檬酸、磷酸、乙酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀、硼酸、硼砂、碳酸鈉及碳酸氫鈉等。較佳地，包含本發明以微脂體包覆之治療藥劑的液體溶液的pH值為7到9；更佳地，pH值為7到7.4。

例示性之助溶劑包含，但不限於，聚山梨醇酯80 (polysorbate 80)、聚氧乙烯硬化蓖麻油60 (polyoxyethylene hardened castor oil 60)、聚乙烯二醇4000 (macrogol 4000)、聚乙二醇及丙二醇。

增稠劑的例子包含，但不限於，纖維素形式的巨分子(例如羥丙甲基纖維素(hydroxypropylmethylcellulose)及羥丙基纖維素hydroxypropylcellulose))、海藻酸鈉(sodium alginate)、聚乙烯醇(polyvinyl alcohol)、羧乙烯聚合物(carboxyvinylpolymer)及聚乙烯氫吡咯酮(polyvinyl pyrrolidone)。

可作為抵抗真菌及細菌之治療藥劑的防腐劑包含，但不限於，氯化卞二甲烴銨(benzalkonium chloride)、氯化苯釷(benzethonium chloride)、洛赫西定(chlorhexidine)、對羥基苯甲酸酯(paraben，例如對羥基苯甲酸甲酯(methyl paraben)及對羥基苯甲酸乙酯(ethyl paraben))，以及硫柳汞(thimerosal)。

一般來說，可藉由口服、腸內、鼻腔、局部、經黏膜、肌肉內、靜脈內、動脈內、皮下、腹腔內或腫瘤內之路徑將本發明以微脂體包覆的治療藥劑投予至個體體內。

如本發明所屬技術領域具有通常知識者所知，調幅(amplitude modulation (AM))及調頻(frequency modulation (FM))為射頻常用的二種調變模式。在AM傳送中，載波具有固定的頻率及變異的振幅(強度)；相較之下，以FM傳送的載波則具有固定的振幅及變異的頻率。本揭示內容的發明人意外地發現AM射頻放射可改善器官及/或組織(例如固態腫瘤)對以微脂體包覆之治療藥劑的吸收。因此，在步驟(2)中，是對固態腫瘤投予AM射頻放射，藉以增加步驟(1)投予之以微脂體包覆的治療藥劑的治療功效。

依據本揭示內容之實施方式，相較於高溫處理(即37°C或42°C處理)及傳統的射頻放射(即thermotron RF-8)，AM射頻放射可以更具功效地增加腫瘤細胞對本發明以微脂體包覆之治療藥劑的吸收。

依據本揭示內容某些實施方式，該AM射頻放射的射頻在本發明方法中扮演著重要的角色，其中對腫瘤位置投予AM射頻放射可增加腫瘤位置對以微脂體包覆之治療藥劑的吸收。依據該些實施方式，可用以增加本發明以微脂體包覆之治療藥劑之吸收的AM射頻放射射頻約為1-50百萬赫；例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45或50百萬赫。較佳地，AM射頻放射的射頻約為5-45百萬赫。更佳地，射頻約為8-20百萬赫。

至於AM射頻放射的功率，則可依據接受治療之個體的不同而有所調整。基本上，AM射頻放射的功率約為0.5-300瓦；舉例來說，0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299或300瓦。較佳地，AM射頻放射的功率約為0.5-150瓦。

依據某些實施方式，是於活體外投予AM射頻放射，藉以增加腫瘤細胞對本發明以微脂體包覆之治療藥劑的吸收，其中AM射頻放射的功率約為5-20瓦。依據其他實施方式，是於活體內投予AM射頻放射，以增加哺乳動物(包含人類、猴子、黑猩猩、小鼠、大鼠、馬、兔子、豬、綿羊、山羊、貓及狗等)對本發明以微脂體包覆之治療藥劑的吞噬及/或吸收。在一特定實施例中，接受照射的個體為小鼠，其中照射劑量為0.5瓦/平方公分，電極板面積為3.14平方公分，故AM射頻放射的功率約為1.5瓦。當可想見，本發明所屬技術領域具有通常知識者可利用相同照射劑量(0.5瓦/平方公分)，並依據動物體表面積及應用需求來換算照射人類等其他哺乳動物時的電極板直徑，藉以達到相等之治療功效；舉例來說，可選用直徑為6-20公分之電極板來進行照射，使AM射頻放射的功率介於14.1-157瓦之間；較佳地， AM射頻放射的功率是介於25-150瓦之間。

在本揭示內容中，較佳具有粉紅雜訊(pink noise，亦稱為1/f雜訊或閃爍雜訊)調變，唯粉紅雜訊譜並非在所有試驗中皆為必要條件。調變射頻放射具有以下優點： (1)非粉紅雜訊區域的能量吸收會高於粉紅雜訊區域的能量吸收；多數健康的生理效應具有粉紅雜訊訊息交換機制，而惡性組織則無，因此粉色雜訊調變可選擇性地對惡性組織造成損傷；以及 (2)調變可增加細胞外液之電場梯度及區域中的振幅(電場)；該特性可產生交互訊息(凋亡誘導)，並將***的細胞「黏附」(glues)於固定位置(轉移阻斷)。

依據使用需求的不同，可在投予本發明以微脂體包覆的治療藥劑之前、期間或之後，對固態腫瘤投予AM射頻放射。

依據本揭示內容某些實施方式，在投予AM射頻放射期間，固態腫瘤的溫度是維持於42°C以下。在一實施例中，在進行本發明方法之步驟(2)時，是將固態腫瘤的溫度維持於37-37.5°C之間。在一實施例中，在進行本發明方法之步驟(2)時，是將固態腫瘤的溫度維持於41.5-42°C之間。

依據本揭示內容某些實施方式，該個體為一哺乳動物，例如人類、猴子、黑猩猩、小鼠、大鼠、馬、兔子、豬、綿羊、山羊、貓及狗。較佳地，個體為人類。

依據本揭示內容實施方式，可接受本發明方法治療的固態腫瘤是黑色素瘤、食道癌、胃癌、腦瘤、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、膀胱癌、乳癌、胰臟癌、大腸癌、直腸癌、大腸直腸癌、腎臟癌、肝癌、卵巢癌、***癌、甲狀腺癌、睪丸癌、子宮頸癌或頭頸部鱗狀細胞癌。

當可想見，本發明方法可單獨投予或與其他能對腫瘤產生治療效益之傳統治療(例如外科手術、化療、放射治療、抗血管新生治療及免疫治療)合併投予至罹患或疑似罹患固態腫瘤的個體體內。依據治療目的的不同，可於投予傳統治療之前、期間或之後，對個體投予本發明方法。

下文提出多個實驗例來說明本發明的某些態樣，以利本發明所屬技術領域中具有通常知識者實作本發明，且不應將這些實驗例視為對本發明範圍的限制。據信習知技藝者在閱讀了此處提出的說明後，可在不需過度解讀的情形下，完整利用並實踐本發明。此處所引用的所有公開文獻，其全文皆視為本說明書的一部分。實施例

材料及方法

細胞培養

由美國菌種保存中心(American Type Culture Collection (ATCC))購買HepG2細胞(ATCC® HB-8065™)，之後將該細胞培養於包含10%經熱去活化之胎牛血清的DMEM細胞培養液(Eagle's Minimum Essential Medium)中。由生物資源保存及研究中心(台灣，新竹)購買CT26細胞，其係一種源自BALB/c小鼠的小鼠結腸癌細胞株；每年解凍新一批的細胞株進行相關實驗。將CT26細胞培養於包含10 %胎牛血清、每毫升100奈克之鏈黴素及每毫升100單位之青黴素(Invitrogen)的DMEM細胞培養液中。將所有細胞培養於包含5%二氧化碳及潮溼環境的37°C細胞培養箱中。

製備以微脂體包覆之艾黴素 (lipo-dox)

由TTY Biopharm (台灣，台北)購買本研究Lipo-Dox™ (20毫克/10毫升)。

以藥物處理細胞

為了解特定處理對lipo-dox吸收的影響，將HepG2細胞隨機分成5組：(1)未處理細胞組，作為實驗對照組；(2) 37°C處理組，其中是對細胞投予每毫升20-25微克之lipo-dox後，於37°C培養30分鐘；(3) 42°C處理組，其中是對細胞投予每毫升20-25微克之lipo-dox後，於42°C培養30分鐘；(4) mEHT處理組，其中是對細胞投予每毫升20-25微克之lipo-dox後，照射調變電-高溫處理(modulatedelectro-hyperthermia (mEHT)) 30分鐘；以及(5) RF-8處理組，其中是對細胞投予每毫升20-25微克之lipo-dox後，照射thermotron RF-8 (Thermotron RF-8; Yamamoto Vinita Co., Osaka, Japan) 30分鐘。表1總結相關處理條件。 表1 細胞處理條件 * KVA：千伏-安培。 **相較於未處理之組別。

在分析特定處理對聚葡萄醣、CT-B或運鐵蛋白之吸收的影響時，以相似的處理流程，將HepG2細胞分成4組，包含：(1)未處理細胞組，作為實驗對照組；(2) 37°C處理組，其中是對細胞投予測試藥物(每毫升1毫克之聚葡萄醣、每毫升2微克之CT-B或每毫升5微克之運鐵蛋白)後，於37°C培養30分鐘；(3) 42°C處理組，其中是對細胞投予測試藥物(每毫升1毫克之聚葡萄醣、每毫升2微克之CT-B或每毫升5微克之運鐵蛋白)後，於42°C培養30分鐘；(4) mEHT處理組，其中是對細胞投予測試藥物(每毫升1毫克之聚葡萄醣、每毫升2微克之CT-B或每毫升5微克之運鐵蛋白)後，照射調變電-高溫處理(mEHT) 30分鐘。

在投予渥曼青黴素(wortmannin，一種巨胞飲作用(macropinocytosis)抑制劑)處理時，是對HepG2細胞投予磷酸鹽緩衝食鹽水(PBS)或渥曼青黴素，於37°C作用15分鐘。在投予聚葡萄醣後，以37°C、42°C或mEHT處理細胞1小時。

共軛焦顯微鏡

在偵測巨胞飲作用之吸收反應時，是將與聚葡萄醣(每毫升1毫克)及Lipo-Dox (每毫升20-25微克)共同培養的HepG2細胞隨機分成4組：(1) 未處理細胞組，作為實驗對照組；(2) 37°C處理組，其中是將細胞培養於37°C環境中30分鐘；(3) 42°C處理組，其中是將細胞培養於42°C環境中30分鐘；(4) mEHT處理組，其中是以mEHT照射細胞30分鐘。之後，以3.7%三聚甲醛固定細胞，並加入每毫升1微克之Heochst 33342於室溫作用5分鐘。以1倍PBS洗滌後，將細胞再次懸浮於封蓋緩衝液中。將細胞滴於玻片後，以共軛焦雷射掃瞄顯微鏡(FV1000; Olympus)進行分析。

流式細胞儀分析

利用PBS洗滌經處理之細胞2次。以流式細胞儀進行分析。藉由Accuri C6流式細胞儀(BD Biosciences, Le Pont de Claix, France)決定陽性細胞百分比。

動物實驗

由台灣台北之國家科學實驗動物中心購買BALB/c小鼠，並於6到8週時進行相關實驗。於第0天時，將5 × 10⁵ CT26腫瘤細胞皮下注射至BALB/c小鼠的右股骨區域。於注射後第14天，對小鼠進行局部高溫處理。以二步驟之高溫處理來分析在腫瘤組織中，高溫處理對Lipo-Dox吸收的影響。在進行第一步驟之高溫處理時，是將每公斤3毫克之Lipo-Dox靜脈注射至小鼠體內，接著立即置於41°C之水浴高溫處理45分鐘。在進行第一步驟之高溫處理後，將小鼠放置回飼養籠中，靜置2小時。為進行第二步驟之高溫處理，將小鼠分成2組：(1)水浴(WB)處理組，其中是以水浴將腫瘤加熱至42°C；以及(2) mEHT處理組。將BALB/c小鼠右股骨區域的腫瘤移植物置於加熱電路之平行電容器中。以每公斤100毫克之克他明(Ketamine)及每公斤10毫克之賽拉嗪(Xylazine)麻醉小鼠後，對mEHT處理組投予平均功率為1.5瓦的單劑mEHT照射(投予劑量固定為0.5瓦/平方公分，處理小鼠的電極板直徑為兩公分，面積為3.14平方公分)，照射時間為30分鐘。藉由光學感測器(Luxtron FOT Lab Kit, LumaSense Technologies, Inc., California, USA)確保各小鼠治療側的腫瘤內溫度維持於42°C左右。 使電極下方之皮下溫度維持於38°C-40°C左右。

定量分析腫瘤內艾黴素的累積量

投予第二步驟之42°C高溫處理30分鐘，15分鐘後，收集腫瘤組織。利用螢光光譜來定量分析腫瘤組織中艾黴素的濃度。簡單來說，取出腫瘤組織後，置於酸化異丙醇及0.025%氚核X-100 (triton X-100)中均質化腫瘤組織，並於4°C作用24小時。測量上清液中艾黴素的螢光值(激發波長=472奈米，發散波長=590奈米)。

實施例 1 AM 射頻放射可增加細胞對以微脂體包覆之藥物的吸收

本實施例將探討AM射頻放射對以微脂體包覆之藥物(即lipo-dox)之吞噬或吸收的影響。依據材料及方法部分所述，先對HepG2細胞投予lipo-dox後，照射AM射頻放射。分別以流式細胞儀及共軛焦顯微鏡進行分析，第1A-1B圖分別闡述該些分析結果。

相較於對照組，所有的治療組別(即以37°C、42°C或mEHT處理之組別)皆可增加組織對lipo-dox的吸收。值得注意的是，以mEHT處理之細胞的螢光訊號會高於經37°C或42°C處理之細胞的螢光訊號(結果未顯示)。在進行mEHT處理時，將細胞溫度維持於37°C或42°C左右，且於二種溫度皆可觀察到mEHT增加吸收的功效。至於在增加未以微脂體包覆之艾黴素的吸收部分，各處理組別間皆無明顯的差異。該些結果指出，相較於37°C或42°C處理，mEHT具有增加「以微脂體包覆」之藥物吸收的功效。第1A圖的共軛焦照片進一步確認該結果。

第1B圖闡述了在接受特定處理(即，未處理、37°C處理、42°C處理、 mEHT處理或RF8處理)之細胞中lipo-dox的相對留滯時間。分析結果指出，相較於對照組，37°C、42°C、mEHT及RF8處理會分別將lipo-dox的留滯時間增加約5.09倍、6.57倍、17.46倍及7.54倍。

該些結果證實相較於其他處理(包含37°C、42°C及RF8處理)，mEHT可更有效率地增加細胞對以微脂體包覆之藥物(例如lipo-dox)的吸收。

實施例 2 mEHT 增加吸收功效的機制

已知細胞可藉由不同路徑來吸收不同顆粒大小的分子；舉例來說，細胞可利用巨胞飲作用、以網格蛋白媒介之胞吞作用(Clathrin-mediated endocytosis)及以胞膜窖媒介之胞吞作用(Caveolae-mediated endocytosis)來分別吸收直徑為0.5-55微米、50奈米及100奈米的顆粒。

本實施例是先對HepG2細胞投予聚葡萄醣(約0.5-5微米)、CT-B (約100奈米)或運鐵蛋白(約50奈米)後，再利用流式細胞儀分析結果，據以了解實施例1觀察之mEHT之增加吸收功效的相關機制。第2A-2C圖分別闡述該些結果。

如第2A圖所示，相較於對照組(即未處理之細胞)，所有的處理(即37°C、42°C及mEHT處理)皆可增加細胞對聚葡萄醣的吸收，其中以mEHT處理之細胞可發散出最大量的螢光訊號。相較之下，投予渥曼青黴素會抑制聚葡萄醣的吸收。

第2B及2C圖之結果則與第1B圖之結果相似，其中相較於對照組(即未處理之細胞)，所有的處理(即37°C、42°C及mEHT處理)皆可增加細胞對CT-B (第2B圖)或運鐵蛋白(第2C圖)的吸收。

整體來看，該些結果指出，mEHT可藉由巨胞飲作用、以網格蛋白媒介之胞吞作用或以胞膜窖媒介之胞吞作用來增加細胞對直徑介於50奈米到5,000奈米間之顆粒的吸收。

實施例 3 mEHT 增加活體對 lipo-dox 的吸收

本實施例將利用動物模式來評估mEHT對藥物吸收的功效。第3圖的結果指出，相較於以水浴(WB)處理之小鼠及對照組小鼠，以mEHT處理之小鼠腫瘤內具有較高量的艾黴素。

總結上述，本揭示內容提供一種可有效改善腫瘤細胞對以微脂體包覆之藥物吸收的方法，其係藉由對腫瘤投予一AM射頻放射來達到該增加吸收的功效。因此，本揭示內容對罹患固態腫瘤之個體提供了一種安全且有效的治療策略。

雖然上文實施方式中揭露了本發明的具體實施例，然其並非用以限定本發明，本發明所屬技術領域中具有通常知識者，在不悖離本發明之原理與精神的情形下，當可對其進行各種更動與修飾，因此本發明之保護範圍當以附隨申請專利範圍所界定者為準。

無

為讓本發明的上述與其他目的、特徵、優點與實施例能更明顯易懂，所附圖式之說明如下： 第1A-1B圖為流式細胞儀及共軛焦顯微鏡的分析結果，其分別闡述了經特定處理之細胞內艾黴素的含量(第1A圖)及留滯時間(第1B圖)。 第2A-2C圖之柱狀圖分別闡述了經特定處理之細胞內聚葡萄醣(dextran，第2A圖)、CT-B (第2B圖)及運鐵蛋白(transferrin，第2C圖)的含量。 第3圖之柱狀圖闡述了經特定處理之小鼠腫瘤內艾黴素的含量。

根據慣常的作業方式，圖中各種特徵與元件並未依比例繪製，其繪製方式是為了以最佳的方式呈現與本發明相關的具體特徵與元件。此外，在不同圖式間，以相同或相似的元件符號來指稱相似的元件/部件。

Claims (7)

1. 一種以微脂體包覆之治療藥劑的用途，其係用以製備一可與一調幅射頻放射共同使用的藥物，據以治療一固態腫瘤，其中該調幅射頻放射的射頻約為1-50百萬赫，其中該調幅射頻放射的功率約為0.5-20瓦。
2. 如請求項1所述之用途，其中該調幅射頻放射的射頻約為5-45百萬赫。
3. 如請求項2所述之用途，其中該調幅射頻放射的射頻約為8-20百萬赫。
4. 如請求項1所述之用途，其中該以微脂體包覆的治療藥劑是選自由抗腫瘤藥劑、抗發炎藥劑、抗血管新生藥劑、免疫調節劑及放射性核種所組成的群組。
5. 如請求項4所述之用途，其中該治療藥劑是該抗癌藥劑，其係選自由博萊黴素、泛艾黴素、雌莫司汀、依妥普賽、5-氟尿嘧啶、艾黴素、絲裂黴素C、順鉑、紫杉醇、喜樹鹼、長春新鹼、長春花鹼、胺甲葉酸、雙羥恩、沙利竇邁及鯊胺所組成的群組。
6. 如請求項4所述之用途，其中該以微脂體包覆之治療藥劑的濃度約為每毫升5-800微克。
7. 如請求項1所述之用途，其中該微脂體的直徑約為50-5,000奈米。