SE419346B - PROCEDURE FOR STABILIZING BACTERIOLOGICAL SAMPLES - Google Patents

PROCEDURE FOR STABILIZING BACTERIOLOGICAL SAMPLES

Info

Publication number
SE419346B
SE419346B SE7802147A SE7802147A SE419346B SE 419346 B SE419346 B SE 419346B SE 7802147 A SE7802147 A SE 7802147A SE 7802147 A SE7802147 A SE 7802147A SE 419346 B SE419346 B SE 419346B
Authority
SE
Sweden
Prior art keywords
boric acid
samples
urine
added
sample
Prior art date
Application number
SE7802147A
Other languages
Swedish (sv)
Other versions
SE7802147L (en
Inventor
G O Hentschel
T Carolusson
Original Assignee
Opus Chemical Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Opus Chemical Ab filed Critical Opus Chemical Ab
Priority to SE7802147A priority Critical patent/SE419346B/en
Priority to NO790518A priority patent/NO147054C/en
Priority to CA000321844A priority patent/CA1140051A/en
Priority to FI790541A priority patent/FI63595C/en
Priority to DE2906730A priority patent/DE2906730C2/en
Priority to GB7906062A priority patent/GB2016446B/en
Priority to DK80479A priority patent/DK80479A/en
Publication of SE7802147L publication Critical patent/SE7802147L/en
Publication of SE419346B publication Critical patent/SE419346B/en

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07FACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F5/00Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table
    • C07F5/02Boron compounds
    • C07F5/04Esters of boric acids

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Ceramic Products (AREA)
  • Amplifiers (AREA)
  • Chemical And Physical Treatments For Wood And The Like (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

78021474: torier påvisas. I Försöken användes B. tuberculosis och det visade sig, att tuberkelbakterierna ej Förstördes i mjölk- prover, som blivit konserverade med 1-procentig borsyra, sam- tidigt som denna konservering gjorde det möjligt att transpor- tera proverna under lång tid utan att dessa undergick hâgra icke; önskade förändringar, som interfererade med examina- tionen i laboratoriet. 7 Möjligheten att underlätta det bakteriologiska labora- torieerbetet vid bakterieanalyser av urinprover med hjälp av borsyrakonservering hade ännu ej accepterats vid slutet av 1920-talet. Vikten av att omedelbart bakteriologiskt examinera urinprover vid suspekta urinvâgsinfektioner För att i möjligaste mån undvika överväxt av bakteriestammar har understrukits utomordentligt starkt trots att borsyra kan användas preana- lytiskt utan att störa mätningar av andra parametrar. Möj- ligheten att använda borsyra som 1-procentigt transport- medium För att undvika överväxt vid undersökning av Brusella abortus har visats. _ Borsyra har använts vid Flera olika studier både humana och enimala, av bakterieväxt och hämning därav i olika vehiklar. Trots detta påpekas det i flera vetenskapliga arbeten, att bakteriologiska undersökningar av urin måste utföras omedelbart, om ej Förvaring under kyla (+4°C) är möjlig, och då endast under 48 timmar. Problemet med överväxt vid långsam transport av urinprover till bekteriologiska laboratorier kvarstår alltså. I ett arbete från slutet av 1960-talet påpekas det något överraskande, att studium av borsyra som konserveringsmedel vid urintransporter ej blivit beaktat än mindre undersökt.I detta arbete meddelas att den optimala borsyrakoncentrationen i ett färdigt urin- transportprov skall vara 1,B%, och att den preanalytiska tiden ej bör överstiga Fyra dagar. _ Trots dessa vetenskapliga medicinska arbeten och 780214744 trots att borsyra tidigt var känd som ett funktionellt konserveringsmedel med avseende på bakterieväxt, har denna metod rönt ringa utbredning vara sig nationellt eller inter- nationellt vid bakteriologiska laboratoriearbetet. 78021474: theories are detected. B. Tuberculosis was used in the experiments and it was found that the tubercle bacteria were not destroyed in milk samples which had been preserved with 1% boric acid, at the same time as this preservation made it possible to transport the samples for a long time without undergoing hâgra icke; desired changes, which interfered with the examination in the laboratory. 7 The possibility of facilitating bacteriological laboratory work in bacterial analyzes of urine samples by means of boric acid preservation had not yet been accepted by the end of the 1920s. The importance of immediately bacteriologically examining urine samples in case of suspicious urinary tract infections In order to avoid overgrowth of bacterial strains as much as possible, it has been emphasized extremely strongly despite the fact that boric acid can be used preanalytically without interfering with measurements of other parameters. The possibility of using boric acid as a 1% transport medium To avoid overgrowth when examining Brusella abortus has been shown. Boric acid has been used in several different studies, both human and animal, of bacterial growth and inhibition thereof in various vehicles. Despite this, it is pointed out in several scientific works that bacteriological examinations of urine must be performed immediately, unless Storage under cold (+ 4 ° C) is possible, and then only for 48 hours. The problem of overgrowth during slow transport of urine samples to bacteriological laboratories thus remains. In a work from the end of the 1960s, it is somewhat surprisingly pointed out that the study of boric acid as a preservative in urine transport has not been considered even less investigated. In this work it is announced that the optimal boric acid concentration in a finished urine transport sample should be 1, B%, and that the pre-analytical time should not exceed Four days. Despite these scientific medical works and 780214744 despite the fact that boric acid was early known as a functional preservative with respect to bacterial growth, this method has become widespread either nationally or internationally in bacteriological laboratory work.

Flera orsaker kan emellertid påvisas till denna tröghet att adaptera en till synes säker och relativt sett klart mer ekonomisk transportmetod än kyltransport. Metoden innebär stora praktiska svårigheter, eftersom man måste mäta upp mycket små mängder av ett pulver, eftersom det-ta skall transpor- teras i mycket små transportrör, samt att borsyran har en relativt låg löslighetsgrad i urin. Om pulvret dessutom löses i vatten-För att lättare kunna mätas i exakta volymer, erhålles alltför stor volym av borsyralösning och urin För att bli praktiskt användbart vid transporter. För att på laboratoriet kunna distingera mellan urinprover med borsyra och urinprover utan borsyra, kräves ett extra arbetsmoment, vilket är praktiskt störande, emedan den centraliserade laboratoriediagnostiken kräver så få arbetsmoment som möjligt på grund av det stora antal urinprover, som dagligen inkommer (ca 500 per dag vid ett större laboratorium).However, several reasons can be demonstrated for this inertia to adapt a seemingly safe and relatively clearly more economical transport method than refrigerated transport. The method entails great practical difficulties, since very small amounts of a powder have to be measured, since it must be transported in very small transport tubes, and the boric acid has a relatively low degree of solubility in urine. If the powder is also dissolved in water-To make it easier to measure in exact volumes, too large a volume of boric acid solution and urine is obtained. To be practically useful during transport. In order to be able to distinguish between urine samples with boric acid and urine samples without boric acid in the laboratory, an extra work step is required, which is practically disruptive, because the centralized laboratory diagnostics requires as few work steps as possible due to the large number of urine samples received daily (approx. 500 per day at a larger laboratory).

Borsyrans löslighet i vatten: vid n°c ' 2,66 g/wo g vatten vid 2o°c 4,9 9/100 g vatten vilket innebär, att man i praktiken inte kan arbeta med högre koncentratiuner än 3-prouentiga lösningar för att undvika utkristellisation.vid temperatursvängningar. Av bl.a. kost- nadsskäl eftersträvas så små traneportenheter som möjligt och i allmänhet användes standardiserade transportbehållare med en volym av 10 ml.Solubility of boric acid in water: at n ° c '2.66 g / wo g water at 2o ° c 4.9 9/100 g water, which means that in practice it is not possible to work with higher concentrations than 3-percent solutions to avoid crystallization.in case of temperature fluctuations. By i.a. For cost reasons, the aim is to transport as small a transport unit as possible, and in general standardized transport containers with a volume of 10 ml are used.

Vid användning av 3-procentig borsyralösning måste 13 ml sättas till 9 ml urin För att koncentrationen skall bli 1,B% borsyra, vilket är erforderligt För att erhålla konsarvering. Detta medFör, att mycket vatten tillföras ?eoz1avå4 proverna och att volymen ökas till över det dubbla.When using 3% boric acid solution, 13 ml must be added to 9 ml of urine In order for the concentration to be 1, B% boric acid, which is necessary To obtain preservation. This means that a lot of water is added to the? Eoz1avå4 samples and that the volume is increased to more than double.

Det har visat sig, att man kan uppnå mer effektiv preservation genom tillsats av endast 0,5 - 0,8% borsyra, om denna föreligger som ett organiskt komplex.. I Eftersom koncentrationen av borsyra i dessa komplex är hög, blir en tillsats av 0,4 - 1,4 ml till 9 ml urin fullt tillräcklig._ Man ökar på detta sätt volymen i så begränsad omfattning, att de standardiserade transport- rören kan användas.It has been found that more effective preservation can be achieved by the addition of only 0.5 - 0.8% boric acid, if present as an organic complex. Since the concentration of boric acid in these complexes is high, an addition of 0.4 - 1.4 ml to 9 ml urine fully sufficient._ In this way the volume is increased to such a limited extent that the standardized transport tubes can be used.

Förfarandet enligt uppfinningen kännetecknas av att till provet sättas en sådan mängd av ett borsyrakomplex med formeln H R/Û\e/Ü H eller R/u\=B/Ü\R \Ü/ \Ü \Ü/ \D/ där R betecknar: etylenglykol propandiol-1,2 glycerol fruktcs mannit sorbit eller andra vattenlösliga dioxi- eller polycxiföreningar och som framställts genom upphettning av borsyran och oxi- föreningeng varjämte 1 - 2 mol av vid dess framställning bildat reaktionsvatten har avlägsnats, att halten borsyra i provet blir 0,2 - 1,4 viktprocsnt, företrädesvis 0,4 - 0,8 viktprocent. Övriga kännetecken på uppfinningen Framgår av underkraven. 7802147-4 För att man lättare skall kunna Fastställa, om preservationsmedel tillsatte, kan dessa infärgas med metylenblått eller annat lämpligt Färgämne, som ej stör den bakterilogiska undersökningen.The process according to the invention is characterized in that such an amount of a boric acid complex of the formula HR / Û \ e / Ü H or R / u \ = B / Ü \ R \ Ü / \ Ü \ Ü / \ D / is added to the sample where R represents : ethylene glycol propanediol-1,2-glycerol fructan mannit sorbitol or other water-soluble dioxy or polyxy compounds and which are prepared by heating the boric acid and oxy compound and 1-2 mol of reaction water formed in its preparation have been removed, , 2 - 1.4% by weight, preferably 0.4 - 0.8% by weight. Other features of the invention are apparent from the subclaims. 7802147-4 In order to make it easier to determine whether preservatives have been added, these can be dyed with methylene blue or another suitable dye which does not interfere with the bacteriological examination.

EXEMDEL 1 100 viktdeler etylenglykol 17 viktdelar boreyra BP upphettadas till ÉSOC, varvid vatten avspjälkades, varefter temperaturen höjdes till 11200 under en tid av Fyra minuter.EXAMPLE 1 100 parts by weight of ethylene glycol 17 parts by weight of boric acid BP are heated to ÉSOC, whereby water is split off, after which the temperature is raised to 11200 for a period of four minutes.

Därvid avgick 2 mol vatten Borsyrahalten = l7,7% pH i koncentrerad reaktionsprodukt = 2,5 pH i 10-procentig vattenlöening = 4,4 EXEfiEEL 2 124 viktdelar glycerol DAB 6 d = 1,23 17 viktdelar borsyra BP upphettades till 11Û°C, varigenom reaktionen initierades och 2 mol vatten avspjälkadee. Vattenhalten steg i reaktioneblandningen från 11,3% till 22,3%. Temperaturen höjdes under en uid av tre minuter till 129°c, varefter upphettning avbröts och reaktionsprodukten Fick kallna.2 moles of water were removed. Boric acid content = 17.7% pH in concentrated reaction product = 2.5 pH in 10% aqueous solution = 4.4 EXE EL EEL 2 124 parts by weight of glycerol DAB 6 d = 1.23 17 parts by weight of boric acid BP was heated to 11Û ° C , whereby the reaction was initiated and 2 moles of water were cleaved off. The water content of the reaction mixture rose from 11.3% to 22.3%. The temperature was raised for a period of three minutes to 129 ° C, after which heating was stopped and the reaction product was allowed to cool.

Vattenhalten = 15,5% aorsyrahalten = 12,4% pH i koncentrerad reaktionsprodukt = 1,3 pH i 10-procentig vattenlüsning = 3,9 Metylenblått tillsattes i en koncentration av 5 - 50 ppm- ?so214v-4 EXEMPEL 3 100 viktdelar d-mannit 70 viktdelar vatten 32 viktdelar borsyra upphettades till 8000, varvid reaktionen började. Temperaturen höjdes under sju minuter till ll2°C, varvid 2 mol vatten avgick. 0 Borsyrahalten = l0,8% pH i koncentrerad reaktiensprodukt = 0,85 pH i 10-procentig vattenlösning = 3,5 Produkten fick stelna och pressades till tabletter. .fllššïlißåïlf 4 __...- 100 viktdelar Fruktos 50 viktdelar vatten 36 viktdelar borsyra upphettades till B0°C, varefter temperaturen höjdes under sex minuter till l09°C, varvid 2 mol vatten avgick.Water content = 15.5% aoric acid content = 12.4% pH in concentrated reaction product = 1.3 pH in 10% aqueous solution = 3.9 Methylene blue was added at a concentration of 5 - 50 ppm - soso214v-4 EXAMPLE 3 100 parts by weight of d -mannit 70 parts by weight of water 32 parts by weight of boric acid were heated to 8000, starting the reaction. The temperature was raised for seven minutes to 112 ° C, whereby 2 moles of water evaporated. Boric acid content = 10.8% pH in concentrated reaction product = 0.85 pH in 10% aqueous solution = 3.5 The product was allowed to solidify and compressed into tablets. .fl lššïlißåïlf 4 __...- 100 parts by weight Fructose 50 parts by weight of water 36 parts by weight of boric acid were heated to B0 ° C, after which the temperature was raised for six minutes to 109 ° C, whereby 2 moles of water were evaporated.

Borsyrahalten = l2,l% pH i koncentrerad reaktionsprodukt : 1,1 pH i Hlprocentig vattenlösning = 4,2 Reaktiensprndukten pressades till tabletter.Boric acid content = 1.2% pH in concentrated reaction product: 1.1 pH in 1% aqueous solution = 4.2 The reaction product was compressed into tablets.

EXEMPEL 5 100 viktdelar propandiol-1,2 25 viktdelar borsyra upphettades till 98°C, varefter temperaturen höjdes till 160°E under tio minuter.EXAMPLE 5 100 parts by weight of propanediol-1.2 parts by weight of boric acid were heated to 98 ° C, after which the temperature was raised to 160 ° E for ten minutes.

Borsyrahalt = 20% pH i koncentrerad reaktionsprodukt = 1,7 ll å u U\ pH i 10-procentig vattenlösning Infärgas med metylenblått.Boric acid content = 20% pH in concentrated reaction product = 1.7 ll u u U \ pH in 10% aqueous solution Dye with methylene blue.

W_Hsus1ao21u7-4 Borsyra-glycerol-komplexet, som är framställt enligt exempel 2, har undersökushuruvida individuell känslighet Föreligger mellan olika bakteriearter, vid olika bakterietal och i prov, som samtidigt innehåller flera olika bakterie- stammar genom att undersöka prov dels före och dels efter normalt förekommande transportfiyp_(mindre än ett dygn), dels i prov, som förvarats längre tid före utodlingen. Avsikten var också att individuellt undersöka de olika i produkten ingående komponenterna vad avser antibakteriell effekt samt att försöka bedöma, hur stora avvikelser från instruk- tionen, som kan tolereras, vad avser tillsatt mängd av den bor- eyrahaltiga konserveringsprodukten resp. mängden Urin. ' Två typer av försök har utförts: l) Prov har tagits från patienter med bakteriuri. Dels har prov tagits av laboratoriets personal, üels har prov tagits av avdelningspersonalen och transporterats med normala transporter till laboratoriet. I de fall prov och transporter utförts av laboratoriets personal, har man haft Full kontroll av provtagningsteknik och transporttid. Prov har tagits efter tvättning och tork- ning som s.k. "mid-stream-prov" och utodlats inom en timma. Utodling har gjorts på blodagarplatta, Drigal- skiagar och acidsorbitolagar. Kvantitering har gjorts efter utodlingar från seriespädning av urinprov i kok- salt. Artbestämning har gjorts med sedvanlig rutin- metod efter primär inkubering under 18 timmar vid 37°C. 2) Laboratoríeförsök med experimentellt framställd, hakteriehaltig urin har utförts För att möjliggöra testning av speciella stammar. För försöket har använts åtta bakteriestammar, som är vanliga vid urinvägs- infektion, nämligen: 73021474» Escherichia coli Klebsiella Pssudomonas aeruginosa Dseudomonas mirabilis Enterokocker Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus I Försök, som krävt speciellt känslig teststam, har gonokocker använts.W_Hsus1ao21u7-4 The boric acid-glycerol complex, prepared according to Example 2, has to examine whether individual sensitivity exists between different bacterial species, at different bacterial counts and in samples, which simultaneously contain several different bacterial strains by examining samples both before and after normal. occurring transport fi yp_ (less than one day), partly in samples, stored for a longer period before cultivation. The intention was also to individually examine the various components included in the product with regard to antibacterial effect and to try to assess how large deviations from the instructions can be tolerated, with regard to the added amount of the boron-containing preservative product resp. the amount of urine. 'Two types of trials have been performed: l) Samples have been taken from patients with bacteriuria. On the one hand, samples have been taken by the laboratory staff, and on the other hand, samples have been taken by the department staff and transported by normal transport to the laboratory. In cases where tests and transports were performed by laboratory personnel, they have had full control of sampling technique and transport time. Samples have been taken after washing and drying as so-called "mid-stream sample" and cultured within one hour. Cultivation has been done on blood agar plate, Drigalski agar and acid sorbitol layers. Quantitation has been done after cultures from serial dilution of urine samples in cooking salt. Species determination has been performed using the usual routine method after primary incubation for 18 hours at 37 ° C. 2) Laboratory experiments with experimentally prepared, hacker-containing urine have been performed to enable testing of special strains. Eight bacterial strains, which are common in urinary tract infections, have been used for the experiment, namely: 73021474 »Escherichia coli Klebsiella Pssudomonas aeruginosa Dseudomonas mirabilis Enterococci Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis

Undersökningarna har i huvudsak utförts som jämförelser mellan förvaring av prov i kyla resp. i rumstemperatur med boro-glycerolgtillsats.The investigations have mainly been carried out as comparisons between storage of samples in the cold resp. at room temperature with boro-glycerol additive.

Som referensvärde har använts det odlingsresultat, som ernölls efter utodling inom en timma efter provtagningen) För Försöken har använts dels ren borsyra i pulverform, dels olika koncentrationer av borsyra-komplex enligt exempel 2.As a reference value, the culture result obtained after culturing within one hour after sampling has been used. For the experiments, both pure boric acid in powder form and different concentrations of boric acid complexes according to Example 2 have been used.

Experimentell bakteriuri-urin: Från bakteriekolonier på agarplattor gjordes slamning i fysiologisk koksaltlösning. Kvantitering gjordes med måïsäfitningen att erhålla en bakteriemängd mellan ca lÜU OUO och 10 miljoner/ml urin efter tillsats av slam- ningen i oinfekterad urin. 7802147-4 Resultat Försök utfördes med borsyra i pulverform. Till 9 ml urin sattes 0,1 g borsyra. Använda taststammar Framgår av tabell l. Ûdlad efter +4°c +22°c +4°c +22°c Entsrococci 6,7 6,3 6,3 ' 6,2 6,2 Drot.mir. 6,3 6,3 6,3 6,1 6,1 St. aureus 5,8 5,9 5,7 5,9 5,8 Pseudomonas 6,2 6,1 6,0 6,0 5,9 Klabsialia 6,1 5,6 6,2 6,0 6,7 E. 6611 5,5 5,5" 5,5 5,2 5,1 Tabell 1 QÛ log av antalet bakterier) Den enligt metodbeskrivningen framställda, bakterie- haltiga urinen kvantiterades och delades i två portioner. Den ena placerades vid +4°C,till den andra sattes borsyra och För- varades i rumstemperatur. Kvantitering utfördes efter 24 timmar och efter 48 timmar. Av tabellen framgår det, att inga anmärk- ningsvärda avvikelser sker vare sig urinen förvarats i kyla eller vid rumstemperatur med boreyratillsats.Experimental bacteriuric urine: From bacterial colonies on agar plates, slurry was made in physiological saline. Quantitation was done with the aim of obtaining a bacterial amount between about 10UUU and 10 million / ml urine after addition of the slurry in uninfected urine. 7802147-4 Results Experiments were performed with boric acid in powder form. To 9 ml of urine was added 0.1 g of boric acid. Key strains used Shown in Table 1. Cultivated after + 4 ° c + 22 ° c + 4 ° c + 22 ° c Entsrococci 6.7 6.3 6.3 '6.2 6.2 Drot.mir. 6.3 6.3 6.3 6.1 6.1 St. aureus 5.8 5.9 5.7 5.9 5.8 Pseudomonas 6.2 6.1 6.0 6.0 5.9 Klabsialia 6.1 5.6 6.2 6.0 6.7 E. 6611 5.5 5.5 "5.5 5.2 5.1 Table 1 QÛ log of the number of bacteria) The bacterial urine prepared according to the method description was quantified and divided into two portions. One was placed at + 4 ° C, Boric acid was added to the other and stored at room temperature. Quantitation was carried out after 24 hours and after 48 hours. The table shows that no significant deviations occur whether the urine is stored in the cold or at room temperature with a drilling agent additive.

Patientprov: Prov togs från sex geriatriska patienter i lång- tidsvård. Proven utodlades inom en timma, varefter proven be- handlades analogt enligt ovan. Av tabell 2 Framgår det, att avvikeleerna för såväl kylda som i borsyra förvarade prov är mindre än en 10-potens. 7so2147-4 _ 10 patient odlad efter 1 h 24 n 24 h barsyra as h aa n b@rsy_ +4°c +22°c +4°c ra +z2°c 1. E,co1i i7,5 7,7 7,7 7,6 7,6 2. E.c°1i 7,1 6,9 6,9 7,1 6,6 3. Prat. g 6,9 6,5 7,0 7,0 7,2 4. prat. 7,4 7,4 7,2 7,3 7,1 5. Drot. 6,3 5,9 6,3 5,6 5,4 6. Prot. 6,9 6,8 6,7 5,9 5,7 Tabell 2 För att utröna om glycerol i sig skulle ha hämmande effekt på bakterier, genomfördes Följande Försök: Femton färska bakterieisolat från patienter med bakteriuri tillsattes urin, som kvantiterades och uppdelades i tre portioner För Förvaring vid +4°C, för Förvaring i rumstemperatur med tillsats av borsyra och För förvaring vid +22°C med till- sats av glycerol. Av tabell 3 Framgår testade bakterflestammar och uppmätta Förändringar i 10-log. I intet av fallen har hämning erhållits genom tillsats av glycerol. Förändringar i kylförvarat resp. vid rumstemperatur Förvarat prov med borsyratillsats var i samtliga fall mindre än en 10-potens.Patient samples: Samples were taken from six geriatric patients in long-term care. The samples were cultured within one hour, after which the samples were treated analogously as above. Table 2 shows that the deviation rates for both cooled and boric acid samples stored are less than a 10-power. 7so2147-4 _ 10 patient grown after 1 h 24 n 24 h bar acid as h aa nb @ rsy_ + 4 ° c + 22 ° c + 4 ° c ra + z2 ° c 1. E, co1i i7,5 7,7 7 , 7 7.6 7.6 2. Ec ° 1i 7.1 6.9 6.9 7.1 6.6 3. Prat. g 6.9 6.5 7.0 7.0 7.2 4. prat. 7.4 7.4 7.2 7.3 7.1 5. Drot. 6.3 5.9 6.3 5.6 5.4 6. Prot. 6.9 6.8 6.7 5.9 5.7 Table 2 To find out if glycerol itself would have an inhibitory effect on bacteria, the following experiments were performed: Fifteen fresh bacterial isolates from patients with bacteriuria were added to urine, which was quantified and divided into three servings For Storage at + 4 ° C, For Storage at room temperature with the addition of boric acid and For Storage at + 22 ° C with the addition of glycerol. Table 3 shows tested bacterial strains and measured Changes in 10-log. In none of the cases has inhibition been obtained by the addition of glycerol. Changes in refrigerated storage resp. at room temperature Stored sample with boric acid additive was in all cases less than a 10-potency.

För att utröna om negativ effekt kunde erhållas genom kombinationen av borsyra-komplex enligt exempel 2 och kylförvaring, utfördes Följande försök: Till urin sattes Fem olika bakteriearter. Provet kvantiterades och delades. Übe- handlad urin Förvarades vid -2D°C. En annan portion av' provet tillfördes borsyra-komplex enligt exempel 2 och förvarades dels vid +4°C, dels vid rumstemperatur. ll 7802147-4 Üdlad efter l h 24 h 24 h borsyra 24 h glycerol +a°c +22°c +22°c nmteus 1 5,0 5,05 6,0 >9 Proteus 2 5,7 5,8 5,9 >9 Proteus 3 6,5 6,5 7,1 8,15 Proteus 4 8,05 8,05 8,25 8,20 Proteus 5 8,2 8,0 8,25 8,7 proteus 6 6,05 6,5 6,15 >9 Klebsiella 1 4,75 4,4 4,55 >9 Kleusiella 2 6,7 6,7 6,5 >9 Klebsiella 3 7,3 8,3 7,5 8,2 Klebsialla 4 6,05 5,7 5,45 >9 Klebsiella 5 6,8 6,75 6,9 7,5 Pseudomonas 1 7,5 7,0 7,3 7,8 Pseudomonas 2 7,8 8,0 7,8 8,2 Enterococci 5,35 4,4 5,5 >9 E. coli 7,7 7,7 7,8 8,05 Tabell 3 Bakterie Ympning Borsyra-glycerolkomplex (S952) 18 h 10 h +40: la h +22°c -20°c E. coli 5,7 5,5 5,8 3,5 Prat. mirabilis 6,5 6,0 6,2 2,4 Dseudomonas 6,9 6,1 6,3 3,9 :interna-Joni 6,5 6,0 6,0 4,2 Staph. aureus 6,0 6,0 6,0 5,7 Tabell 4 758021 47-1: 12 Av tabellen Framgår det, att kombinationen kylför- varing och borsyra-glycerol-komplex enligt exempel 2 ej ger avvikande resultat efter Förvaring i 18 timmar. Frysning av urin medför helt otillförlitliga kvantitativa resultat.To find out if a negative effect could be obtained by the combination of boric acid complex according to Example 2 and cold storage, the following experiments were performed: Five different species of bacteria were added to urine. The sample was quantified and divided. Untreated urine Stored at -2D ° C. Another portion of the sample was added to boric acid complexes of Example 2 and stored at + 4 ° C and at room temperature. 7802147-4 Leached after 1 h 24 h 24 h boric acid 24 h glycerol + a ° c + 22 ° c + 22 ° c nmteus 1 5.0 5.05 6.0> 9 Proteus 2 5.7 5.8 5, 9> 9 Proteus 3 6.5 6.5 7.1 8.15 Proteus 4 8.05 8.05 8.25 8.20 Proteus 5 8.2 8.0 8.25 8.7 proteus 6 6.05 6.5 6.15> 9 Klebsiella 1 4.75 4.4 4.55> 9 Kleusiella 2 6.7 6.7 6.5> 9 Klebsiella 3 7.3 8.3 7.5 8.2 Klebsialla 4 6.05 5.7 5.45> 9 Klebsiella 5 6.8 6.75 6.9 7.5 Pseudomonas 1 7.5 7.0 7.3 7.8 Pseudomonas 2 7.8 8.0 7.8 8.2 Enterococci 5.35 4.4 5.5> 9 E. coli 7.7 7.7 7.8 8.05 Table 3 Bacteria Inoculation Boric acid-glycerol complex (S952) 18 h 10 h +40: 1a h + 22 ° c -20 ° c E. coli 5.7 5.5 5.8 3.5 Prat. mirabilis 6.5 6.0 6.2 2.4 Dseudomonas 6.9 6.1 6.3 3.9: interna-Joni 6.5 6.0 6.0 4.2 Staph. aureus 6.0 6.0 6.0 5.7 Table 4 758021 47-1: 12 From the table it appears that the combination of cold storage and boric acid-glycerol complex according to example 2 does not give deviating results after storage for 18 hours. Freezing urine results in completely unreliable quantitative results.

Avvikelserna är större för gram-negativa stavar än För gram- positiva kocker.The deviations are greater for gram-negative rods than for gram-positive cooks.

För att utröna glycerolens effekt på bakterier, gjordes Försök med en speciellt känslig stam: Urin med och utan glyceroltillsats jämfördes. Till 9 ml urin sattes 0,65 ml glyoerol. Gonokooker tillsattes såväl denna urin som urin utan glyceroltillsats. Kvantitering gjor- des efter en, tvâ, fyra och sex timmar. Av tabell 5 framgår den procentuella andel av ursprungligen tillförda gonokocker, som kan återisoleras efter resp. tid. Av tabellen Framgår det, att gonokocker snabbt avdödas i urin och ej kan återfinnas Fyra timmar efter tillsatsen, medan tillsats av glycerol gör, att gonokocker Fortfarande isoleras efter sex timmar. I Testorganism ' timmar Urin med 0,65 ml Urin glycerol/9m1 cnnecucci 1 100% i 60% 2 100% e 60% a 40% <1% e 107; 41% Tabell 5 Experimentet gjordes med tillsatser av olika Färg- ämnen. Löfflers metylenblàtt (0,5 g/1.000 ml) späddes och sattes till urin. Färgen i en koncentration av 0,01 ml/9ml urin var'tydligt iakttagbar för det obeväpnade ögat. För att utröna metylenblåtts effekt på bakterier, gjordes Försök med en 10 gånger 780211174» 13 starkare lösning. Borsyra-glycerol-komplex med och utan matylenblått sattes till prov. Av tabell 6 framgår det, att gtillsatsen av metylenblått ej störde kvantiteringen av de testade bakteriestammarna. i I Ympmedel Efter 24 h med t Utan metylenblått mecy1enb1àtt ! +22°C +2z°c E. coli 5,6 5,5 5,3 Droteus mir. 6,0 5,9 6,0 Pseudomonas aeruginosa 6,0 5,9 5,9 Enterococci 6,2 6,0 5,9 Staph. aureus 6,0 6,0 6,2 Tabell 6 Felmarginaler: För att utröna 1 hur hög grad man kan göra avsteg från metodbeskrivningen beträffande mängd urin resp. mängd borsyra-komplex-tillsats, gjordes Försök med olika koncentrationer.To determine the effect of glycerol on bacteria, experiments were performed with a particularly sensitive strain: Urine with and without glycerol addition was compared. To 9 ml of urine was added 0.65 ml of glyoerol. Gonococci were added to both this urine and urine without glycerol addition. Quantification was done after one, two, four and six hours. Table 5 shows the percentage of originally added gonococci, which can be re-isolated after resp. time. The table shows that gonococci are rapidly killed in urine and cannot be found four hours after the addition, while the addition of glycerol means that gonococci are still isolated after six hours. I Testorganism 'hours Urine with 0.65 ml Urine glycerol / 9m1 cnnecucci 1 100% in 60% 2 100% e 60% a 40% <1% e 107; 41% Table 5 The experiment was performed with additives of different dyes. Spoon methylene blue (0.5 g / 1,000 ml) was diluted and added to urine. The color in a concentration of 0.01 ml / 9 ml urine was clearly observable to the unarmed eye. To find out the effect of methylene blue on bacteria, an experiment was made with a 10 times stronger solution. Boric acid-glycerol complex with and without matylene blue was tested. Table 6 shows that the addition of methylene blue did not interfere with the quantification of the bacterial strains tested. i I Vaccine After 24 hours with t Without methylene blue mecy1enb1àtt! + 22 ° C + 2z ° c E. coli 5.6 5.5 5.3 Droteus mir. 6.0 5.9 6.0 Pseudomonas aeruginosa 6.0 5.9 5.9 Enterococci 6.2 6.0 5.9 Staph. aureus 6.0 6.0 6.2 Table 6 Margins of error: To ascertain 1 the degree to which one can deviate from the method description regarding the amount of urine resp. amount of boric acid complex addition, Experiments were made with different concentrations.

För Försöket användes urin med tillsats av E. coli.For the experiment, urine with the addition of E. coli was used.

Med utgång från tidigare rapporter om lämplig koncentration av borsyra och efter justeringar byggda på erfarenheter gjordes ett borsyra-glycerolkomplex med l2,4% borsyra. Till normal urinprovmängd - 9 ml - sattes nio olika mängder från 0,4 till 0,8 ml (0,65 ml motsvarar 0,É2% borsyra). Prov förvarades vid +22°C i 24 timmar. Kvantitering gjordes dels från drygtfem|nânadar gammal lösning, dels från nyberedd lösning.Based on previous reports on the appropriate concentration of boric acid and after adjustments based on experience, a boric acid-glycerol complex was made with 12.4% boric acid. To the normal amount of urine sample - 9 ml - nine different amounts were added from 0.4 to 0.8 ml (0.65 ml corresponds to 0.2% boric acid). Samples were stored at + 22 ° C for 24 hours. Quantitation was done partly from just over five | nânadar old solution, partly from newly prepared solution.

Förändringarna inom spädningsområdet var mindre än en 10-potens. Borsyra-komplexet var förpackat i en por- tionspáse. Genom val av 0,65 ml per portionspåse på- verkades sannolikt ej resultatet, om man genom slarv under- låter att tömma en tredjedel av innehållet i urinprovet och därmed erhåller en lägre koncentration av borsyra än vad som e'?8~0'21h7-1+ 14 är avsett. Metoden förefaller även tåla en viss koncentra- tionsökning genom att för litet urin hälls i röret. Enligt beräkning tillåter metoden, att man försummar att tillsätta 3 - 4 ml av rekommenderade 9 ml.The changes in the dilution range were less than a 10-power. The boric acid complex was packaged in one portion. By choosing 0.65 ml per portion bag, the result was probably not affected, if one neglects to empty one third of the contents of the urine sample through negligence and thus obtains a lower concentration of boric acid than that e '? 8 ~ 0'21h7 -1+ 14 is intended. The method also seems to withstand a certain increase in concentration by pouring too little urine into the tube. According to calculations, the method allows one to neglect to add 3 - 4 ml of the recommended 9 ml.

Slutförsñkz Slutförsök utfördes på prov taget från patienter med - bakteriuri. All provtagning gjordes med tillsats från portionspåse och transport av prov gjordes med ordinarie rutiner. En del av provet försågs med boro-glycerol-komplex och förvarades i rumstemperatur, den andra delen kyldes och kyltransporterades. Båda provtyperna förvarades under 24 timmar, varefter kvantitering utfördes. Resultaten framgår av tabell 7. 78021117-4 15 Pat. Födelsedatum Kön Bakterie Antal bakterier/ml urin nr Bore-glycerol-komplex +22°C +4°C 1 96 10 16 K E. 6611 6,00 6,06 2 90 04 13 M Klebsiella 7,67 7,48 3 se 03 30 K E. 6611 0,42 0,20 4 94 09 06 K Staph.aureus 6,60 7,00 Proteus 6,23 6,69 _ E. 6011 6,90 7,20 5 07 03 lB K E. coli 6,40 6,76 e 9: 12 25 K E. 6011 3,300 2,00 *) 7 96 10 16 K' E. coli 7,50* 7,65 a 90 10 29 K Enterococci 3,90 ) 3,600 9 91 02 25 M Enterococci 5,17 5,11 Proteus 6,20 6,00 10 92 12 ll Klebeiella 7,59 8,36 11 93 04 13 E. 6611 0,15 0,34 12 01 10 05 Proteus 4,85* 5,96** Enterococci 4,15) 4,11 ) Dift. Stavar 8,00 8,00 13 97 ll 05 K Proteus 6,48 7,70 Enterococci _ 5,90 5,78 mebsiena 7,10 7,00 14 K E. 6611 ? 0,07 0,17 15 87 02 06 M ; Enterococci E 7,47 7,47 g Proteus mir. _ 6,69 6,69 i Proteus 0019.; 7,77 7,77 f stapn. ep. I 7,30 5,60 Tabefl 7. 10 log. av antal bakterier efter preservering av 9 ml urinprov med 0,65 m1 boro-glycerol-komplex motsvarande 0,82% borsyra vid rumstemperatur jämfört med urin preserverad vid +ä°C.Final trial Final trials were performed on samples taken from patients with - bacteriuria. All sampling was done with the addition of a portion bag and transport of samples was done with regular routines. A portion of the sample was provided with boro-glycerol complexes and stored at room temperature, the other portion was cooled and refrigerated. Both samples were stored for 24 hours, after which quantification was performed. The results are shown in Table 7. 78021117-4 15 Pat. Date of birth Sex Bacteria Number of bacteria / ml urine no. Bore-glycerol complex + 22 ° C + 4 ° C 1 96 10 16 K E. 6611 6.00 6.06 2 90 04 13 M Klebsiella 7.67 7.48 3 se 03 30 K E. 6611 0.42 0.20 4 94 09 06 K Staph.aureus 6.60 7.00 Proteus 6.23 6.69 _ E. 6011 6.90 7.20 5 07 03 lB K E. coli 6.40 6.76 e 9: 12 25 K E. 6011 3,300 2.00 *) 7 96 10 16 K 'E. coli 7.50 * 7.65 a 90 10 29 K Enterococci 3.90) 3,600 9 91 02 25 M Enterococci 5.17 5.11 Proteus 6.20 6.00 10 92 12 ll Klebeiella 7.59 8.36 11 93 04 13 E. 6611 0.15 0.34 12 01 10 05 Proteus 4.85 * 5.96 ** Enterococci 4.15) 4.11) Dift. Stavar 8.00 8.00 13 97 ll 05 K Proteus 6.48 7.70 Enterococci _ 5.90 5.78 mebsiena 7.10 7.00 14 K E. 6611? 0.07 0.17 15 87 02 06 M; Enterococci E 7.47 7.47 g Proteus mir. _ 6.69 6.69 in Proteus 0019 .; 7.77 7.77 f step. ep. I 7.30 5.60 Tabefl 7. 10 log. of number of bacteria after preservation of 9 ml urine sample with 0.65 ml of boro-glycerol complex corresponding to 0.82% boric acid at room temperature compared to urine preserved at + ä ° C.

*) Ej märkbar bakteriuri Troligen ej märkbar bakteriuri **) 780214741 ie -f -- Stora problem föreligger vid transport av prov för bakteriologisk odling. Icke önskade förändringar inträffar, om ej utodling sker inom mycket kort tid efter provtagningen.*) Not noticeable bacteriuria Probably not noticeable bacteriuria **) 780214741 ie -f - Major problems exist when transporting samples for bacteriological culture. Unwanted changes occur, unless cultivation takes place within a very short time after sampling.

Förändringarna kan förhindras genom kyltransport. Kylning av prov kan ibland medföra frysning av prov, vilket är deletärt för många bakteriearter. Kylförfarandet är klumpigt _ och oekonomiskt. Användandet av borsyra som preserverande tillsats i urinprov har tidigare påvisats och verifierats med nya försök. Nackdelarna med borsyra i pulverform har initierat försök att erhålla borsyra i lösning. BUrsyra-gly- cerol-komplex har framställts enligt exempel 2 och metylenblått har tillsatte för att visualisera tillsats i provet. Såväl laboratoriemässiga som kliniska provundersökningar har visat, att kompositionen enligt uppfinningen haft avsedd effekt. För- ändringar har ej uppstått i prov under två dygn. Ett stort antal olika bakteriearter, aktuella som etiologi till urinvägs- infektion, har testats. Ingen antibakteriell effekt har påvisats för någon av de ingående komponenterna vid använd koncentration.The changes can be prevented by refrigerated transport. Cooling samples can sometimes cause samples to freeze, which is deleterious for many bacterial species. The cooling process is clumsy and uneconomical. The use of boric acid as a preservative additive in urine samples has previously been demonstrated and verified with new experiments. The disadvantages of boric acid in powder form have initiated attempts to obtain boric acid in solution. Buric acid-glycerol complexes have been prepared according to Example 2 and methylene blue has been added to visualize addition in the sample. Both laboratory and clinical trials have shown that the composition according to the invention had the intended effect. Changes have not occurred in tests for two days. A large number of different bacterial species, relevant as an etiology of urinary tract infection, have been tested. No antibacterial effect has been demonstrated for any of the constituent components at the concentration used.

Uttitrering av säkerhetsmarginalerna för felanvändning av produkten har visat, att man sannolikt kan tolerera en 30-procentig feldosering, såväl uppåt som nedåt, från den rekommenderade koncentrationen.Examination of the safety margins for incorrect use of the product has shown that it is likely that a 30% incorrect dosage, both upwards and downwards, can be tolerated from the recommended concentration.

Genom produktens koncentration är man ej låst till någon speciell rörtyp utan kan flexibelt anpassa sig till de prov- volymer och rörtyper, som användes vid olika laboratorier.Due to the concentration of the product, you are not locked into any particular type of pipe, but can flexibly adapt to the sample volumes and pipe types used in different laboratories.

Det är uppenbart, att detta system är betydligt smidigare än kyltransport och att det eliminerar risker för frysskador på prov. Från transportsynpunkt erbjuder metoden större smidighet och betydligt lägre kostnader. Rätt genomförd kyltransport har praktiskt visat sig vara mycket svår att åstadkomma.It is obvious that this system is much more flexible than refrigerated transport and that it eliminates the risk of freezing damage on samples. From a transport point of view, the method offers greater flexibility and significantly lower costs. Properly carried out refrigerated transport has in practice proved to be very difficult to achieve.

Claims (4)

78021474: 17 P A T E N T K R A V78021474: 17 P A T E N T K R A V 1. Förfarande För stabilisering av prover, som skall underkaetas bakterilogiska laboratorieündersökningar, i synnerhet urinprover, För deras preservering under transport, k ä n n e t e c k n a t d ä r a v, att till provet sättas en sådan mängd avett borsyrakomplex med formeln R//Û\\\B//0 H eller R// B/// \\R H \Ü/ \0 \Û/ \Û/ där R betecknar: Û- 0 etylenglykol propandiol-1,2 glycerol fruktos mannit sorbit eller andra vattenlüsliga dioxi- eller polyoxiföreningar och som framställts genom upphettning av borsyran och oxiföreningen, varjämte 1 - 2 mol av vid dess framställning bildat reaktionsvatten har avlägsnats, att halten borsyra i provet blir 0,2 - 1,4 viktprocent, företrädesvis 0,4 ~ 0,8 vlktprocent.1. Procedure For the stabilization of samples to be subjected to bacteriological laboratory tests, in particular urine samples, For their preservation during transport, characterized in that such an amount of a boric acid complex of the formula R // Û \\\ B / is added to the sample / 0 H or R // B /// \\ RH \ Ü / \ 0 \ Û / \ Û / where R represents: Û- 0 ethylene glycol propanediol-1,2 glycerol fructose mannit sorbitol or other water-soluble dioxy or polyoxy compounds and which has been prepared by heating the boric acid and the oxy compound, and 1-2 mol of reaction water formed during its preparation have been removed, the content of boric acid in the sample being 0.2 to 1.4% by weight, preferably 0.4 to 0.8% by weight. 2. Fürfaranda enligt kravet 1, k ä n n e t e c k n a t d ä r a v, att man tillsätter en blandning av borsybakomplex.Process according to Claim 1, characterized in that a mixture of boric acid complexes is added. 3. Förfarande enligt kravet 1 eller 2, k ä n n e- t e c k n a t d ä r a v, att man använder ett borsyra- komplex, som innehåller en Färgtillsats, 78021117 - lf 18Process according to Claim 1 or 2, characterized in that a boric acid complex is used, which contains a paint additive, 78021117 - lf 18 4. Förfaranda enligt kravet 3, k ä n n e t B c k- n'a t d ä r a v, att man använder matylenblâtt som Färgtillsafs i en mängd av 5 - SD ppm. ANFöRoA PußLn Norge 92 654 (12 Mza/os), 99 607 (co7f 5/02) sforbruunnien 405 998, 511 641, saa 853, 931-759 Andra publikationer: Gmelin Hondbuch der Anorguníschen Chemie vol. 33. del 8. (1976). Borverbíndungen, s. 115-16, 118, 120 Chem. Åbstr. 69 (1968), 80 9434. A process according to claim 3, characterized in that matylene blue is used as the color additive in an amount of 5 - SD ppm. ANFöRoA PußLn Norge 92 654 (12 Mza / os), 99 607 (co7f 5/02) sforbruunnien 405 998, 511 641, saa 853, 931-759 Other publications: Gmelin Hondbuch der Anorguníschen Chemie vol. 33. part 8. (1976). Boron Connections, pp. 115-16, 118, 120 Chem. Åbstr. 69 (1968), 80 943
SE7802147A 1978-02-24 1978-02-24 PROCEDURE FOR STABILIZING BACTERIOLOGICAL SAMPLES SE419346B (en)

Priority Applications (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE7802147A SE419346B (en) 1978-02-24 1978-02-24 PROCEDURE FOR STABILIZING BACTERIOLOGICAL SAMPLES
NO790518A NO147054C (en) 1978-02-24 1979-02-16 PROCEDURE FOR STABILIZING BACTERIOLOGICAL TESTS
CA000321844A CA1140051A (en) 1978-02-24 1979-02-16 Boric acid complexes and their use as functional preservation agents
FI790541A FI63595C (en) 1978-02-24 1979-02-19 FOERFARANDE FOER STABILIZERING AV BACTERIOLOGICAL PROVER I SYNNERHET URINPROVER
DE2906730A DE2906730C2 (en) 1978-02-24 1979-02-21 Preservatives for bacterial samples, process for their preparation and their use
GB7906062A GB2016446B (en) 1978-02-24 1979-02-21 Agent to preserve bacteriological test specimens comprising complex compounds of boric acid
DK80479A DK80479A (en) 1978-02-24 1979-02-23 PRESERVATIVE AND METHOD OF PREPARING IT

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE7802147A SE419346B (en) 1978-02-24 1978-02-24 PROCEDURE FOR STABILIZING BACTERIOLOGICAL SAMPLES

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SE7802147L SE7802147L (en) 1979-08-25
SE419346B true SE419346B (en) 1981-07-27

Family

ID=20334100

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SE7802147A SE419346B (en) 1978-02-24 1978-02-24 PROCEDURE FOR STABILIZING BACTERIOLOGICAL SAMPLES

Country Status (7)

Country Link
CA (1) CA1140051A (en)
DE (1) DE2906730C2 (en)
DK (1) DK80479A (en)
FI (1) FI63595C (en)
GB (1) GB2016446B (en)
NO (1) NO147054C (en)
SE (1) SE419346B (en)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8800502D0 (en) * 1988-01-11 1988-02-10 Cerestar Holding Bv Method of adding borax/boric acid to mixing/reaction-zone
US5505953A (en) 1992-05-06 1996-04-09 Alcon Laboratories, Inc. Use of borate-polyol complexes in ophthalmic compositions
FR2731008B1 (en) * 1995-02-24 1999-05-07 Dev Activites Chimiques Distri AQUEOUS BOREAL SOLUTION, PARTICULARLY FOR THE ADJUVANTATION OF AMYLACEOUS ADHESIVE
WO2008131499A1 (en) * 2007-04-26 2008-11-06 Realco Sa Method for treating banana leafspot disease and treatment composition
US9102700B1 (en) * 2014-08-29 2015-08-11 Vdf Futureceuticals, Inc. Compositions and methods for borocarbohydrate complexes

Also Published As

Publication number Publication date
DE2906730C2 (en) 1982-04-22
NO147054C (en) 1983-01-26
FI63595C (en) 1983-07-11
NO147054B (en) 1982-10-18
CA1140051A (en) 1983-01-25
DK80479A (en) 1979-08-25
GB2016446A (en) 1979-09-26
NO790518L (en) 1979-08-27
DE2906730A1 (en) 1979-09-06
FI790541A (en) 1979-08-25
GB2016446B (en) 1982-12-01
SE7802147L (en) 1979-08-25
FI63595B (en) 1983-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Humphrey et al. Egg age and the growth of Salmonella enteritidis PT4 in egg contents
Dexter et al. Preliminary results in measuring the hardiness of plants
CN108434954B (en) It is a kind of multi-functional except formaldehyde deodorization eliminating smell agent
Prince Effect of pH on the antifungal activity of undecylenic acid and its calcium salt
SE419346B (en) PROCEDURE FOR STABILIZING BACTERIOLOGICAL SAMPLES
CN106497888B (en) Salmonella bacteriophage and bacteriophage bactericidal composition and its application
Miura et al. Occurrence and survival of Salmonella organisms in hatcher chick fluff from commercial hatcheries
Waseem et al. Isolation and identification of major mastitis causing bacteria from clinical cases of bovine mastitis in Kashmir Valley
Bootsma Infections with Saprolegnia in pike culture (Esox luciusL.)
Salle et al. A new method for the evaluation of germicidal substances
Allen et al. Enumeration of Streptococcus faecalis, with particular reference to polluted waters
Roberts et al. The significance of the gastrointestinal parasites of Asian buffalo in Sri Lanka
Rasool et al. Effect of essential oils of Eucalyptus globulus and Lavandula hybrida as teat dips to control subclinical mastitis in Friesian dairy cattle
RU2648160C2 (en) Nutrient medium for the isolation of bacteria yersinia enterocolitica
Jensen et al. Determination of the phenol coefficient of disinfectants by the cover-slip method
Hotis et al. A simple method for detecting mastitis streptococci in milk
CN109652495A (en) The detection method of microbial limit in a kind of wet tissue product
CN108743575A (en) Application of the butyl p-hydroxybenzoate in preparing anti-candida albicans drug
Mavor et al. The relative susceptibility to x-rays of the eggs and sperm of Arbacia.
GERMAN The effect of some antiseptics on tissues in vitro
Olawuyi et al. Antimicrobial activities of honey from different geographical locations on gram negative and positive organisms
SU1265215A1 (en) Method of isolating intestinal iersinia
SoMERvILLE journal Of the Ropal S0ciep Of Ir (S.
CN115530154A (en) New application of isothiazolinone
Welch et al. Effects of Chemical Preservatives on Weights and Lengths of Bluegill Larvae