RU2790669C1 - New leuconostoc mesenteroides dextran producer strain - Google Patents

Abstract

FIELD: microbiology; biotechnology.

SUBSTANCE: group of inventions relates to microbiology and biotechnology and concerns Leuconostoc mesenteroides VKPM V-14022 dextran polysaccharide producing strain, its use for dextran production and method of dextran production.

EFFECT: invention enables increasing the performance of a new dextran-producing strain.

3 cl, 1 dwg, 1 tbl, 5 ex

Description

Изобретение относится к области микробиологии и биотехнологии и касается штамма-продуцента декстрана.The invention relates to the field of microbiology and biotechnology and concerns a strain-producer of dextran.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИBACKGROUND OF THE INVENTION

Декстран представляет собой внеклеточный бактериальный полисахарид, для которого было найдено промышленное применение в различных областях. Dextran is an extracellular bacterial polysaccharide that has found commercial use in various fields.

Декстран - это разветвлённый полимер глюкозы, главная цепь которого состоит из молекул, связанных связью α-1,6, а боковые ветви присоединены связями α-1,3.Dextran is a branched polymer of glucose, the main chain of which consists of molecules linked by an α-1,6 bond, and the side branches are attached by α-1,3 bonds.

Декстран синтезируется из сахарозы уксуснокислыми бактериями, в частности Leuconostoc mesenteroides и Streptococcus mutans.Dextran is synthesized from sucrose by acetic acid bacteria, in particular Leuconostoc mesenteroides and Streptococcus mutans .

Декстран представляет собой бактериальный полисахарид, который используется в качестве лекарственного средства, особенно в качестве расширителя объема плазмы крови. Декстран нашел промышленное применение в пищевой, фармацевтической и химической промышленности в качестве вспомогательного вещества, эмульгатора, химического носителя и стабилизатора (AK Goulas, et al., Synthesis of isomaltooligosaccharides and oligodextrans by the combined use of dextransucrase and dextranas \\ Enzyme and Microbial Technology, V. 35, Issue 4. - 2004. - P. 327-338).Dextran is a bacterial polysaccharide that is used as a drug, especially as a plasma expander. Dextran has found industrial use in the food, pharmaceutical, and chemical industries as an excipient, emulsifier, chemical carrier, and stabilizer (AK Goulas, et al., Synthesis of isomaltooligosaccharides and oligodextrans by the combined use of dextransucrase and dextranas \\ Enzyme and Microbial Technology, V. 35, Issue 4. - 2004. - P. 327-338).

Декстран является биосовместимым, нетоксичным и неиммуногенным биологическим веществом, поэтому представляет собой интерес для использования в наноразмерных системах доставки лекарственных средств (Huang G, Huang H. Application of dextran as nanoscale drug carriers. Nanomedicine (Lond). - 2018 Dec. - 13(24):3149-3158).Dextran is a biocompatible, non-toxic and non-immunogenic biological substance, therefore it is of interest for use in nanoscale drug delivery systems (Huang G, Huang H. Application of dextran as nanoscale drug carriers. Nanomedicine (Lond). - 2018 Dec. - 13(24 ):3149-3158).

Было обнаружено, что декстран оказывает иммуностимулирующее действие за счет введения фосфатных групп. Выяснилось, что экспрессия CD86 на клетках CD8α-CD11c- и CD8α-CD11c+ усиливалась фосфорилированным декстраном. Уровни экспрессии мРНК гамма-интерферона и интерлейкина-10 на мышиных спленоцитах также повышались при стимуляции (Sato T, et al., Dextran from Leuconostoc mesenteroides augments immunostimulatory effects by the introduction of phosphate groups. J Food Prot.- 2004 Aug.- 67(8):1719-24).Dextran has been found to have an immunostimulatory effect through the introduction of phosphate groups. It turned out that CD86 expression on CD8α-CD11c- and CD8α-CD11c+ cells was enhanced by phosphorylated dextran. Interferon-gamma and interleukin-10 mRNA expression levels on mouse splenocytes also increased upon stimulation (Sato T, et al., Dextran from Leuconostoc mesenteroides augments immunostimulatory effects by the introduction of phosphate groups. J Food Prot.- 2004 Aug.- 67( 8):1719-24).

Известен штамм Vickersia anguisorpha продуцент декстрана, депонированный под номером NCIMB 42196 также описан способ получения декстрана путем культивирования Vickersia anguisorpha и очистки декстрана из культуральной жидкости (CN106460021, 22.02.2017).A known strain of Vickersia anguisorpha is a dextran producer deposited under the number NCIMB 42196. A method for obtaining dextran by cultivating Vickersia anguisorpha and purifying dextran from the culture liquid is also described (CN106460021, 22.02.2017).

Наиболее близким аналогом изобретения является штамм Leuconostoc mesenteroides BD1710, который способен синтезировать примерно 32 г/л декстрана. (Han J, et al., Dextran synthesized by Leuconostoc mesenteroides BD1710 in tomato juice supplemented with sucrose. Carbohydr Polym.- 2014 Nov 4.- 112:556-62).The closest analogue of the invention is a strainLeuconostoc mesenteroides BD1710, which is able to synthesize approximately 32 g/l of dextran. (Han J, et al., Dextran synthesized by Leuconostoc mesenteroides BD1710 in tomato juice supplemented with sucrose. Carbohydr Polym.- 2014 Nov 4.- 112:556-62).

Описан высокопродуктивный штамм Leuconostoc mesenteroides DRP105, выделенный из сока китайской квашеной капусты. Исследователи выявили, что штамм Leuconostoc mesenteroides DRP105 содержит ген декстрансукразы (dsr), участвующий в производстве декстрана (Du R, et al., Functional Identification of the Dextransucrase Gene of Leuconostoc mesenteroides DRP105. Int J Mol Sci.- 2020 Sep 9.- 21(18):6596).A highly productive Leuconostoc mesenteroides DRP105 strain isolated from Chinese sauerkraut juice is described. The researchers found that the Leuconostoc mesenteroides DRP105 strain contains the dextransucrase (dsr) gene involved in the production of dextran (Du R, et al., Functional Identification of the Dextransucrase Gene of Leuconostoc mesenteroides DRP105. Int J Mol Sci.- 2020 Sep 9.-21 (18):6596).

Также известен штамм L. mesenteroides CMG713, выделенный из винограда Vitis vinifera L. - продуцент высокомолекулярного декстрана, который можно гидролизовать до различных фракций с различной молекулярной массой, что позволяет его широко использовать в соответствии с потребностями различных отраслей промышленности (Sarwat F et al., Production & characterization of a unique dextran from an indigenous Leuconostoc mesenteroides CMG713. Int J Biol Sci.- 2008.- 4(6):379-86).Also known strainL. mesenteroides CMG713 isolated from grapesVitis vinifera L. - producer of high molecular weight dextran, which can be hydrolyzed to various fractions with different molecular weight, which allows it to be widely used in accordance with the needs of various industries (Sarwat F et al., Production & characterization of a unique dextran from an indigenous Leuconostoc mesenteroides CMG713. Int J Biol Sci.- 2008.- 4(6):379-86).

Цель настоящего изобретения - получение нового штамма микроорганизма, превосходящего по уровню накопления декстрана известные ранее штаммы.The purpose of the present invention is to obtain a new strain of a microorganism that is superior in terms of dextran accumulation to previously known strains.

Техническим результатом заявленного изобретения является увеличение продуктивности нового штамма-продуцента декстрана, сокращение времени культивирования, снижение количества примеси в субстанции, высокая биохимическая активность и повышенная устойчивость нового штамма к неблагоприятным факторам, в том числе, при хранении и культивировании.The technical result of the claimed invention is to increase the productivity of the new dextran-producing strain, reduce the cultivation time, reduce the amount of impurities in the substance, high biochemical activity and increased resistance of the new strain to adverse factors, including during storage and cultivation.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯSUMMARY OF THE INVENTION

Для повышения секреции декстрана родительский штамм, который был выбран из коллекционных образцов АО «Биохимик», подвергался процессу индуцированного мутагенеза путем воздействия на него ультрафиолета при низких температурах. To increase the secretion of dextran, the parental strain, which was selected from the collection samples of JSC "Biochemist", was subjected to the process of induced mutagenesis by exposure to ultraviolet light at low temperatures.

Полученный новый высокопродуктивный штамм, который получил внутреннее наименование ВХ-98, был идентифицирован по макро- и микроморфологическим признакам, а родовая принадлежность была подтверждена секвенированием гена 16S рДНК.The resulting new highly productive strain, which received the internal name VX-98, was identified by macro- and micromorphological features, and the genus was confirmed by sequencing the 16S rDNA gene.

По результатам анализа секвенсов вариабельных участков генов, кодирующих 16S рРНК, тестируемый штамм ВХ-98 оказался наиболее близок к виду Leuconostoc mesenteroides. According to the results of the analysis of the sequences of the variable regions of the genes encoding 16S rRNA, the tested strain VX-98 was the closest to the species Leuconostoc mesenteroides.

Продуктивность нового штамма определялась гравиметрическим методом путем двойного осаждения нативного декстрана из ферментационной массы 96 % раствором этилового спирта.The productivity of the new strain was determined gravimetrically by double precipitation of native dextran from the fermentation mass with 96% ethanol solution.

Полученный новый штамм Leuconostoc mesenteroides депонирован в Национальный Биоресурсный Центр Всероссийская коллекция промышленных микроорганизмов НИЦ «Курчатовский институт» под номером ВКПМ В-14022.The resulting new strain of Leuconostoc mesenteroides was deposited with the National Bioresource Center All-Russian Collection of Industrial Microorganisms of the National Research Center "Kurchatov Institute" under the number VKPM V-14022.

Таким образом, одним из вариантов настоящего изобретения является штамм продуцент декстрана Leuconostoc mesenteroides ВКПМ В-14022. Другим вариантом настоящего изобретения является применение штамма Leuconostoc mesenteroides ВКПМ В-14022 для получения декстрана. Еще одним из вариантов настоящего изобретения является способ получения полисахарида декстрана, который заключается в том, что осуществляют культивирование штамма Leuconostoc mesenteroides ВКПМ В-14022 и выделение декстрана из ферментационной среды (Фиг.1).Thus, one of the variants of the present invention is the dextran producer strain Leuconostoc mesenteroides VKPM B-14022. Another variant of the present invention is the use of a strain of Leuconostoc mesenteroides VKPM B-14022 for the production of dextran. Another option of the present invention is a method for producing dextran polysaccharide, which consists in culturing a strain of Leuconostoc mesenteroides VKPM B-14022 and isolating dextran from a fermentation medium (Figure 1).

ТЕРМИНЫ и ОПРЕДЕЛЕНИЯTerms and Definitions

Ниже приведены термины, которые могут использоваться при описании настоящего изобретения. Если не указано иное, все технические и специальные термины, использованные в описании, имеют общепринятое в данной области техники значение.The following are terms that may be used in describing the present invention. Unless otherwise indicated, all technical and technical terms used in the description have the meaning generally accepted in the art.

Термин «биомасса» в контексте настоящего изобретения относится к совокупной массе клеток Leuconostoc mesenteroides ВКПМ В-14022, отделенных в процессе центрифугирования от супернатанта культуральной жидкости, полученной в результате культивирования, в том числе, в качалочных колбах или биореакторах (например, при культивировании батарейным способом).The term "biomass" in the context of the present invention refers to the total mass of Leuconostoc mesenteroides VKPM B-14022 cells separated during centrifugation from the supernatant of the culture liquid obtained as a result of cultivation, including in shake flasks or bioreactors (for example, when culturing with a battery method ).

Термин «культуральная жидкость» в контексте настоящего изобретения означает газожидкостную питательную (или ферментационную) среду, в которую в процессе глубинного культивирования микроорганизмы выделяют продукты метаболизма (в т.ч. вторичные метаболиты). The term "culture liquid" in the context of the present invention means a gas-liquid nutrient (or fermentation) medium into which, during submerged cultivation, microorganisms excrete metabolic products (including secondary metabolites).

Термин «биореактор» в контексте настоящего изобретения относится к сосуду или устройству, в котором осуществляются процесс глубинного культивирования микроорганизмов для наработки целевого продукта.The term "bioreactor" in the context of the present invention refers to a vessel or device in which the process of submerged cultivation of microorganisms is carried out to produce the target product.

Термин «продуктивность штамма» в контексте настоящего изобретения относится к количеству полученного декстрана, рассчитанному на единицу объема культуральной жидкости, при глубинном культивировании штамма Leuconostoc mesenteroides ВКПМ В-14022 в условиях биореактора, выраженному в граммах декстрана на литр культуральной жидкости.The term "strain productivity" in the context of the present invention refers to the amount of dextran obtained, calculated per unit volume of culture fluid, during deep cultivation of the strain Leuconostoc mesenteroides VKPM B-14022 under bioreactor conditions, expressed in grams of dextran per liter of culture fluid.

При использовании в описании термина «примерно», «приблизительно», «около» следует считать, что он характеризует плюс минус десять процентов от указанной величины.When used in the description of the term "about", "approximately", "about" it should be considered that it characterizes plus or minus ten percent of the specified value.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙBRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано посредством Фиг. 1. The present invention is further illustrated by FIG. 1.

На Фиг. 1 изображены основные этапы получения декстрана из культуры штамма Leuconostoc mesenteroides ВКПМ В-14022On FIG. 1 shows the main stages of obtaining dextran from a culture of the strain Leuconostoc mesenteroides VKPM B-14022

РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯDISCLOSURE OF THE INVENTION

Согласно настоящему изобретению предложен новый штамм продуцент декстрана - штамм Leuconostoc mesenteroides депонирован в Национальный Биоресурсный Центр Всероссийская коллекция промышленных микроорганизмов НИЦ «Курчатовский институт» под номером ВКПМ В-14022.According to the present invention, a new dextran-producing strain, the Leuconostoc mesenteroides strain, was deposited with the National Bioresource Center All-Russian Collection of Industrial Microorganisms of the National Research Center "Kurchatov Institute" under the number VKPM V-14022.

Культурально-морфологические признаки: При поверхностном культивировании на агаризованной среде колонии на 3 сутки культивирования - слизистые, гладкие округлые, выпуклые, прозрачные, диаметром 4-6 мм. Cultural and morphological characteristics : During surface cultivation on an agar medium, colonies on the 3rd day of cultivation are mucous, smooth, rounded, convex, transparent, with a diameter of 4-6 mm.

Для хранения и приготовления посевного материала используется среда следующего состава, г/л: сахароза - 100,0-160,0; агар-агар - 10,0-30,0; соль Мора (Fe(NH₄)₂(SO₄)₂) - 0,005-0,020; пептон - 0,1-0,5; ПАБК (пара-аминобензойная кислота) - 0,01-0,07; NH₄C1 - 0,1-1,0; NaC1 - 0,01-0,20; MgSO₄⋅7H₂O - 0,1-0,7; КН₃РО₄ - 1,0-8,0; Na₂HPO₄ - 1,0-5,0; CaCl₂ - 0,01-0,05; дрожжевой экстракт - 0,01-0,10; pH среды - 5,5 - 7,2; Т - 23-30°С, аэробные условия.For storage and preparation of inoculum, the medium of the following composition is used, g/l: sucrose - 100.0-160.0; agar-agar - 10.0-30.0; Mohr's salt (Fe(NH ₄ ) ₂ (SO ₄ ) ₂ ) - 0.005-0.020; peptone - 0.1-0.5; PABA (para-aminobenzoic acid) - 0.01-0.07; NH ₄ C1 - 0.1-1.0; NaC1 - 0.01-0.20; MgSO ₄ ⋅ 7H ₂ O - 0.1-0.7; KN ₃ RO ₄ - 1.0-8.0; Na ₂ HPO ₄ - 1.0-5.0; CaCl ₂ - 0.01-0.05; yeast extract - 0.01-0.10; medium pH - 5.5 - 7.2; T - 23-30°C, aerobic conditions.

ПРИМЕРЫEXAMPLES

Изобретение поясняется следующими иллюстративными примерами, которые не ограничивают заявленный объем охраны.The invention is illustrated by the following illustrative examples, which do not limit the claimed scope of protection.

Пример 1. Получение нового высокопродуктивного штамма-продуцента декстрана. Example 1. Obtaining a new highly productive strain-producer of dextran.

Путем многоступенчатой селекции с применением мутагенных факторов и направленных методов отбора модификантов родительского штамма-продуцента декстрана был получен новый высокопродуктивный штамм ВХ-98 - продуцент декстрана. By means of multi-stage selection with the use of mutagenic factors and directed methods of selection of modifiers of the parent strain-producer of dextran, a new highly productive strain VKh-98, a producer of dextran, was obtained.

Для этого проводили воздействие УФ с длиной волны 250,0 нм (лампа Mineralight) водной суспензии клеток родительского штамма, размещенного на расстоянии 55 см от лампы, в течение 20 минут при температуре 0°C. Полученному штамму был присвоен внутренний номер ВХ-98.To do this, exposure to UV with a wavelength of 250.0 nm (Mineralight lamp) was carried out with an aqueous suspension of cells of the parent strain, placed at a distance of 55 cm from the lamp, for 20 minutes at a temperature of 0°C. The resulting strain was assigned the internal number BX-98.

Пример 2. Идентификация штамма ВХ-98 до вида с помощью анализа 16s РНК. Example 2 Identification of strain BX-98 to species by 16s RNA analysis.

Выделение ДНК штамма ВХ-98 для ПЦР проводили по стандартной методике (PCR Protocols. A Guide to methods and applications. Innis M, Gelfand D., Sninsky J.p.14-15).Isolation of DNA strain BX-98 for PCR was carried out according to the standard method (PCR Protocols. A Guide to methods and applications. Innis M, Gelfand D., Sninsky J.p.14-15).

Для секвенирования использовались консервативные праймеры для наработки 16S rDNA:For sequencing, conservative primers were used to generate 16S rDNA:

8f - AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG8f - AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG

926r - CCG TCA ATT CCT TTR AGT TT926r - CCG TCA ATT CCT TTR AGT TT

Секвенирование проводили на автоматическом секвенаторе АЕ3000 с режимами реакции:Sequencing was performed on an AE3000 automatic sequencer with reaction modes:

1. 95°С - 3мин.1. 95°C - 3 min.

2. 35 циклов2. 35 cycles

95°С - 30 сек.95°C - 30 sec.

57°С - 30 сек.57°C - 30 sec.

72°С - 1 мин. 30 сек. 72°C - 1 min. 30 sec.

3. 72°С - 5мин3. 72°C - 5min

Для анализа секвенированных последовательностей использовали специализированные филогенетические компьютерные программы. Для стабильности воспроизведения результатов проводили не менее трех повторов ПЦР-реакций.For the analysis of sequenced sequences, specialized phylogenetic computer programs were used. For the stability of reproducing the results, at least three repetitions of PCR reactions were performed.

Далее проводили электрофорез ПЦР исследуемых образцов в 1,0% агарозном геле, при напряженности электрического поля 5 В/см.Next, PCR electrophoresis of the studied samples was carried out in 1.0% agarose gel, at an electric field strength of 5 V/cm.

Первичный скрининг по базе данных GenBank показал, что исследуемый штамм принадлежит к следующим систематическим группам: Bacteria; Firmicutes; Bacilli; Lactobacillaceae; Leuconostoc.Primary screening in the GenBank database showed that the studied strain belongs to the following systematic groups: Bacteria; Firmicutes; bacilli; Lactobacillaceae; Leuconostoc .

Последовательности были выровнены с соответствующими последовательностями ближайших видов бактерий, доступными из базы данных GenBank.The sequences were aligned with the corresponding sequences of the closest bacterial species available from the GenBank database.

Обработку секвенированных последовательностей проводили при помощи биоинформатического программного обеспечения, находящегося в открытом доступе - программы Blast (Basic Local Alignment Search Tool), предназначенной в т.ч. для определения степени филогенетической близости живых организмов.Processing of the sequenced sequences was carried out using bioinformatics software that is in the public domain - the Blast program (Basic Local Alignment Search Tool), designed incl. to determine the degree of phylogenetic proximity of living organisms.

По результатам анализа секвенсов вариабельных участков генов, кодирующих 16S рРНК, тестируемый штамм ВХ-98 оказался наиболее близок к виду Leuconostoc mesenteroides. According to the results of the analysis of the sequences of the variable regions of the genes encoding 16S rRNA, the tested strain VX-98 was the closest to the species Leuconostoc mesenteroides.

Пример 3. Методика культивирования. Example 3. Method of cultivation.

Проводили подготовку посевного материала путем посева культуры Leuconostoc mesenteroides ВКПМ В-14022 на чашках Петри. Для этого агаризованную среду засевали исходной посевной культурой, и выдерживали в термостате от 3 до 7 суток, при температуре 23-30°С. The seed material was prepared by seeding the Leuconostoc mesenteroides VKPM B-14022 culture on Petri dishes. To do this, the agar medium was seeded with the original seed culture, and kept in a thermostat for 3 to 7 days, at a temperature of 23-30°C.

Далее проводили наработку культуры в колбах в жидкой среде при 20-30°С в течение 24-60 часов в термостатируемом орбитальном шейкере при 200-300 об/мин. Next, the culture was processed in flasks in a liquid medium at 20–30°C for 24–60 hours in a thermostatically controlled orbital shaker at 200–300 rpm.

Далее проводили наработку посевной культуры в ферментере объемом 15/100 л, для этого проводили засев ферментера путем внесения посевной культуры в количестве 5-15% от объема среды в ферментере, при непрерывной подаче стерильного воздуха во время процесса культивирования при перемешивании в течении 60-150 часов.Next, the seed culture was worked up in a fermenter with a volume of 15/100 l, for this, the fermenter was seeded by introducing the seed culture in an amount of 5-15% of the volume of the medium in the fermenter, with a continuous supply of sterile air during the cultivation process with stirring for 60-150 hours.

Контроль содержания декстрана проводили гравиметрическим методом после двойного осаждения 96% раствором этанола. The dextran content was controlled gravimetrically after double precipitation with 96% ethanol solution.

При максимальном накоплении декстрана на 3-6 сутки процесс культивирования прекращали.With the maximum accumulation of dextran for 3-6 days, the cultivation process was stopped.

Пример 4. Определение содержания декстрана в культуральной жидкости. Example 4. Determination of the content of dextran in the culture liquid.

Содержание декстрана определяли гравиметрическим методом путем осаждения нативного декстрана из ферментационной массы 96 % раствором этилового спирта и высушивании осадка в сушильном шкафу при температуре (100-130°С) до постоянной массы.The content of dextran was determined gravimetrically by precipitating native dextran from the fermentation mass with 96% ethanol solution and drying the precipitate in an oven at a temperature (100–130°C) to constant weight.

Полученные данные представлены в таблице 1.The data obtained are presented in table 1.

Таблица 1. Выход целевого продукта при глубинном культивированииTable 1. Yield of the target product during submerged cultivation ШтаммStrain Продуктивность штаммов (г/л культуральной жидкости ±0,5 г/л)Productivity of strains (g/l culture liquid ±0.5 g/l) в ферментере объемом 15 литров in a 15 liter fermenter в ферментере объемом 100 литров in a 100 liter fermenter Leuconostoc mesenteroides ВКПМ В-14022Leuconostoc mesenteroides VKPM V-14022 67,7
70,3
69,267.7
70.3
69.2 77,8
79,9
80,677.8
79.9
80.6

Согласно литературным данным продуктивность известного штамма Leuconostoc mesenteroides BD1710 составляла не более 32,15 г/л (Han J, et al., Dextran synthesized by Leuconostoc mesenteroides BD1710 in tomato juice supplemented with sucrose. Carbohydr Polym.- 2014 Nov 4.- 112:556-62). А продуктивность штамма Leuconostoc mesenteroides DRP105 не превышала 25 г/л (Du R, et al., Functional Identification of the Dextransucrase Gene of Leuconostoc mesenteroides DRP105. Int J Mol Sci.- 2020 Sep 9.- 21(18):6596).According to the literature data, the productivity of the known strainLeuconostoc mesenteroides BD1710was no more than 32.15 g/l (Han J, et al., Dextran synthesized by Leuconostoc mesenteroides BD1710 in tomato juice supplemented with sucrose. Carbohydr Polym.- 2014 Nov 4.- 112:556-62). And the productivity of the strainLeuconostoc mesenteroides DRP105did not exceed 25 g/l (Du R, et al., Functional Identification of the Dextransucrase Gene ofLeuconostoc mesenteroides DRP105. Int J Mol Sci.- 2020 Sep 9.-21(18):6596).

Результаты исследований позволяют сделать вывод о том, что штамм микроорганизма по настоящему изобретению обладает высоким биотехнологическим потенциалом, значительно увеличенной продуктивностью, и может применяться для промышленного производства полисахарида декстрана.The research results allow us to conclude that the strain of the microorganism according to the present invention has a high biotechnological potential, significantly increased productivity, and can be used for the industrial production of dextran polysaccharide.

Пример 5. Методика выделения декстрана. Example 5 . Method for isolating dextran.

После завершения культивирования микроорганизма Leuconostoc mesenteroides ВКПМ В-14022 биомассу отделяли путем центрифугирования. Очищенную от биомассы культуральную жидкость переносили на стадию дальнейшей очистки. Далее проводили осаждение нативного декстрана из ферментационной массы 96 % раствором этилового спирта и высушивали осадок в сушильном шкафу при температуре (100-130) °С до постоянной массы.After completion of the cultivation of the microorganism Leuconostoc mesenteroides VKPM B-14022, the biomass was separated by centrifugation. The culture liquid purified from biomass was transferred to the stage of further purification. Next, the native dextran was precipitated from the fermentation mass with a 96% ethanol solution and the precipitate was dried in an oven at a temperature of (100-130) °C to a constant weight.

Claims (3)

1. Штамм Leuconostoc mesenteroides ВКПМ В-14022 продуцент декстрана.1. Strain Leuconostoc mesenteroides VKPM B-14022 dextran producer. 2. Применение штамма по п.1 для получения полисахарида декстрана.2. Use of the strain according to claim 1 for the production of dextran polysaccharide. 3. Способ получения декстрана, включающий культивирование штамма по п.1 и выделение декстрана из ферментационной среды.3. A method for producing dextran, including cultivating the strain according to claim 1 and isolating dextran from the fermentation medium.

Images