RU2069699C1 - Method for diagnosis of chronic gastritis associated with hericobacter pylori - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine, microbiology, gastroenterology. SUBSTANCE: stomach mucous secret sample is taken in patient with sterile catheter from total surface of antral and pylorus region, placed it in sterile tube and mixed with Nessler reagent. Positive result is recorded by practically momentary mixture staining with yellow color and/or deposit precipitation. Positive reaction proves association of chronic gastritis in patient with Helicobacter pylori. EFFECT: enhanced precision and accelerated diagnosis. 1 tbl

Description

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в гастроэнтерологии. The invention relates to medical microbiology and can be used in gastroenterology.

Известны способы диагностики хронического гастрита ассоциированного с Helicobacter pylori: бактериологический, дыхательный, гистологический, иммунологический, ферментативно-селективный. Known methods for the diagnosis of chronic gastritis associated with Helicobacter pylori: bacteriological, respiratory, histological, immunological, enzyme-selective.

Из известных способов наиболее близким к изобретению по совокупности признаков является ферментативно-селективный или ClO-тест [1]
Указанный способ диагностики хронического гастрита основан на выявлении Helicobacter pylori и выполняется следующим образом: осуществляют забор биоматериала кусочка слизистой оболочки желудка биоптата, смешивают с растворами индикатора фенол-рот и мочевины и инкубируют в термостате при 37^oС. Под воздействием продукта жизнедеятельности Helicobacter pylori - уреазы происходит расщепление мочевины, в результате чего образующийся аммиак защелачивает среду и индикатор окрашивает раствор в красный цвет. Продолжительность получения результатов реакции зависит от количества бактерий и биоптате и при невысокой степени обсемененности биоптата продолжительность анализа составляет 24 ч, которые необходимы для накопления в среде порогового количества уреазы [2]
Кроме того, вследствие очаговости расселения Н. pylori на слизистой оболочке антрального отдела желудка, биоптат может не содержать искомый микрооргангизм, находящийся на соседних участках, что приводит к ложноотрицательным результатам.Of the known methods, the closest to the invention in terms of features is an enzymatically selective or ClO test [1]
The indicated method for the diagnosis of chronic gastritis is based on the detection of Helicobacter pylori and is performed as follows: biomaterial is taken from a piece of the gastric mucosa of the biopsy specimen, mixed with solutions of the phenol-mouth and urea indicator and incubated in a thermostat at 37 ^o С. Under the influence of the vital product Helicobacter pylori - urease urea is decomposed, as a result of which the ammonia formed alkalizes the medium and the indicator turns the solution red. The duration of the reaction results depends on the number of bacteria and biopsy specimen, and with a low degree of contamination of the biopsy specimen, the analysis time is 24 hours, which are necessary for the accumulation of a threshold amount of urease in the medium [2]
In addition, due to the focal distribution of H. pylori on the mucous membrane of the antrum, the biopsy specimen may not contain the desired microorganism located in neighboring areas, which leads to false negative results.

Таким образом, известный способ диагностики достаточно длителен и в части случаев сопровождается ложноотрицательными реакциями. Thus, the known diagnostic method is quite lengthy and, in some cases, is accompanied by false negative reactions.

Цель изобретения ускорение диагностики и повышение точности способа. The purpose of the invention is the acceleration of diagnosis and improving the accuracy of the method.

Цель достигается тем, что у больного берут слизистый секрет желудка, смешивают его с реактивом Несслера и по окрашиванию смеси в желтый цвет и/или выпаданию из нее осадка определяют наличие хеликобактерий. The goal is achieved by taking the gastric mucous secretion from the patient, mixing it with Nessler's reagent, and by staining the mixture in yellow and / or precipitation from it, the presence of Helicobacter is determined.

Общими для предлагаемого объекта изобретения и прототипа существенными признаками являются: забор биоматериала желудка, смешивание биоматериала с индикатором и постановка диагноза по появлению окрашивания смеси. The essential features common to the proposed object of the invention and prototype are: the intake of biomaterial of the stomach, mixing of the biomaterial with an indicator and diagnosis of the appearance of staining of the mixture.

Отличительными признаками предлагаемого способа являются использование в качестве биоматериала слизистого секрета желудка, смешивание его с реактивом Несслера и постановка диагноза по окрашиванию смеси в желтый цвет и/или выпадению осадка. Distinctive features of the proposed method are the use of gastric mucous secretion as biomaterial, mixing it with Nessler's reagent and making a diagnosis of staining the mixture in yellow and / or precipitation.

Поскольку взятие биоматериала в виде слизистого секрета желудка осуществляется со всей поверхности антрального и пилорического отделов, исключается возможность получения ложноотрицательного результата. Since taking biomaterial in the form of gastric mucous secretion is carried out from the entire surface of the antrum and pyloric departments, the possibility of obtaining a false-negative result is excluded.

Продолжительность анализа по способу-прототипу зависит от количества хеликобактерий и составляет от 30 мин до 24 ч, что связано с необходимостью инкубирования микроорганизма для накопления в среде порогового количества уреазы, способного изменить цвет среды. В предлагаемом способе нет необходимости в инкубировании, так как использование реактива Несслера позволяет определить даже небольшие количества аммиака в среде (0,25 мкг) - [3] поэтому положительный результат фиксируется практически мгновенно. The duration of the analysis according to the prototype method depends on the number of helicobacteria and ranges from 30 minutes to 24 hours, which is associated with the need to incubate the microorganism to accumulate in the medium a threshold amount of urease that can change the color of the medium. In the proposed method, there is no need for incubation, since the use of the Nessler reagent makes it possible to determine even small amounts of ammonia in the medium (0.25 μg) - [3] therefore, a positive result is recorded almost instantly.

Приведенная совокупность существенных признаков в литературе не описана. Не обнаружено также сведений о применении реактива Несслера для выявления микроорганизмов при диагностике заболеваний. The given set of essential features is not described in the literature. No information was also found on the use of Nessler's reagent for the detection of microorganisms in the diagnosis of diseases.

Проведенный анализ позволяет сделать вывод о соответствии предлагаемого способа критериям "новизна" и "изобретательский уровень". The analysis allows us to conclude that the proposed method meets the criteria of "novelty" and "inventive step".

Способ иллюстрируется следующими примерами. The method is illustrated by the following examples.

Пример 1. Больная Г. 8 лет, поступила в клинику с жалобами на боли в эпистральной области, возникающие сразу после приема пищи, слабость, утомляемость. Из анамнеза известно, что такие боли отмечаются почти ежедневно в течение двух лет. Девочка неоднократно получала курсы традиционной терапии: витамин U, холензим, гастрофарм, фестал, алмагель без значительного улучшения состояния. Проведено обследование обычными методами: общие анализы крови и мочи, осмотр. Проведена фиброгастроскопия со взятием слизистого секрета желудка стерильным катетером при помощи электроотсоса в количестве 0,3 мл. Полученный секрет смешивают в стерильной пробирке с 1 каплей (из офтальмологической пипетки) реактива Несслера. В результате получено окрашивание смеси в желтый цвет (положительный результат). Эндоскопически: явления антропилорического гипертрофического гастрита. Окончательный диагноз: хронический гастрит, ассоциированный с Н.pylori, фаза обострения. Example 1. Patient G., 8 years old, was admitted to the hospital with complaints of pain in the epistral region that occurs immediately after eating, weakness, fatigue. From the anamnesis it is known that such pains are noted almost daily for two years. The girl repeatedly received courses of traditional therapy: vitamin U, cholenzyme, gastrofarm, festival, almagel without significant improvement. The examination was carried out by conventional methods: general blood and urine tests, examination. Fibrogastroscopy was performed with the gastric mucosa taken with a sterile catheter using an electric suction in the amount of 0.3 ml. The obtained secret is mixed in a sterile tube with 1 drop (from an ophthalmic pipette) of Nessler's reagent. As a result, the mixture was stained yellow (positive result). Endoscopically: the phenomena of anthropiloric hypertrophic gastritis. Final diagnosis: chronic gastritis associated with H. pylori, exacerbation phase.

Пример 2. Больной Х, 14 лет, обратилась с жалобами на боли в эпигастральной области, возникающие натощак, до приема пищи; иногда боли появлялись ночью; запоры до двух дней, утомляемость, слабость. Из анамнеза известно, что такие боли имеют место весной и осенью в течение 3 лет. При обращении к врачу назначалось лечение: диетотерапия, спазмолитики, витаминотерапия, альмагель, калмагин, фестал. Example 2. Patient X, 14 years old, complained of pain in the epigastric region that occurs on an empty stomach, before eating; sometimes pains appeared at night; constipation up to two days, fatigue, weakness. From the anamnesis it is known that such pains occur in spring and autumn for 3 years. When contacting a doctor, treatment was prescribed: diet therapy, antispasmodics, vitamin therapy, almagel, calmagin, festal.

Улучшение состояния отмечалось незначительное и кратковременное. Проведено обследование обычными методами: общий анализ крови, общий анализ мочи, осмотр. Проведена фиброгастроскопия со взятием слизистого секрета желудка стерильным катетером при помощи электроотсоса в количестве 0,4 мл. Полученный секрет смешивают в стерильной пробирке с 1 каплей (из офтальмологической пипетки) реактива Несслера. В результате получен желто-коричневый осадок из смеси (резко положительный результат). Эндоскопически: явления эррозивного антропилорического гастрита. Окончательный диагноз: хронический гастрит, ассоциированный с Н. pylori, фаза обострения. Improvement was noted insignificant and short-term. An examination was carried out using conventional methods: a general blood test, a general urinalysis, and an examination. Fibrogastroscopy was performed with the gastric mucosa taken with a sterile catheter using an electric suction device in an amount of 0.4 ml. The obtained secret is mixed in a sterile tube with 1 drop (from an ophthalmic pipette) of Nessler's reagent. As a result, a yellow-brown precipitate was obtained from the mixture (sharply positive result). Endoscopically: the phenomenon of erosive anthropiloric gastritis. Final diagnosis: chronic gastritis associated with H. pylori, exacerbation phase.

При постановке окончательного диагноза назначена антибактериальная терапия (де- нол, трихопол, оксациллин в возрастных дозировках) и диетотерапия в течение месяца. Контрольная фиброгастроскопия, проведенная после окончания курса лечения, показала исчезновение признаков гастрита: визуально - нормализация состояния слизистой оболочки желудка; при исследовании секрета желудка по предлагаемому способу отмечена отрицательная реакция, что соответствует состоянию здорового человека. When making the final diagnosis, antibiotic therapy (denol, trichopolum, oxacillin in age dosages) and diet therapy for a month were prescribed. Control fibrogastroscopy performed after the end of the course of treatment showed the disappearance of signs of gastritis: visual - normalization of the state of the gastric mucosa; when studying the secret of the stomach by the proposed method, a negative reaction was noted, which corresponds to the state of a healthy person.

Сравнительные данные по точности и продолжительности способа приведены в табл. 1 и 2. Таким образом, как видно из таблиц и приведенных примеров, предлагаемый способ диагностики хронического гастрита позволяет по сравнению с прототипом повысить точность и скорость диагностики. Способ атравматичен и прост в исполнении. Comparative data on the accuracy and duration of the method are given in table. 1 and 2. Thus, as can be seen from the tables and examples, the proposed method for the diagnosis of chronic gastritis allows, in comparison with the prototype, to increase the accuracy and speed of diagnosis. The method is atraumatic and simple to perform.

Использованные источники информации
1. Marshall B. Warren J. et al. Rapid urease test in the management of Campylobacter pyloridis associated gastritis "Amer.J.Gastroent." 1987, Vol. 82, N 3, p.200-210.Used sources of information
1. Marshall B. Warren J. et al. Rapid urease test in the management of Campylobacter pyloridis associated gastritis "Amer.J. Gastroent." 1987, Vol. 82, N 3, p.200-210.

2. П. Я. Григорьев, В.З.Агрба, В.А.Исаков, А.В.Степанов Некоторые особенности эндоскопической диагностики язвенной болезни и хронического гастрита, ассоциированных с Campylobacter pyloridis Тер.архив, 1989, т.61, N 11, с.65-69. 2. P. Ya. Grigoryev, V.Z.Agrba, V.A. Isakov, A.V. Stepanov Some features of the endoscopic diagnosis of peptic ulcer and chronic gastritis associated with Campylobacter pyloridis Ter.archive, 1989, v. 61, N 11, p. 65-69.

3. В.Д.Пономарев "Аналитическая химия", М. Высшая школа, 1982, часть 1, с.205-206. 3. VD Ponomarev "Analytical chemistry", M. Higher School, 1982, part 1, p.205-206.

Claims (1)

Способ диагностики хронического гастрита, ассоциированного с Hericobacter pylori, включающий взятые биоматериалы желудка, смешивание его с индикатором с последующей оценкой характера окраски смеси, отличающийся тем, что в качестве биоматериала используют слизистый секрет желудка, в котором определяют с помощью индикатора наличие аммиака и по окрашиванию смеси в желтый цвет и/или выпадению из нее осадка диагностируют хронический гастрит ассоциированный с Hericobacter pylori. A method for the diagnosis of chronic gastritis associated with Hericobacter pylori, including taken biomaterials of the stomach, mixing it with an indicator, followed by an assessment of the color pattern of the mixture, characterized in that the mucous secretion of the stomach is used as the biomaterial, in which the presence of ammonia is determined by the indicator and by staining the mixture yellow and / or precipitation from it are diagnosed with chronic gastritis associated with Hericobacter pylori.

Images