KR20170018174A - Method for preparing Bio Carbonation Jeju Magma Seawater and Cosmetic composition using the same - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 생물학적인 공정을 통한 바이오 탄산 제주 용암해수 제조방법 및 이를 이용한 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 제주 용암해수에 제주도 누룩에서 분리된 효모균을 1차 호기적 배양 및 2차 혐기적 배양하여 탄산가스를 생성시키는 것을 포함하는 바이오 탄산 제주 용암해수의 제조방법 및 그 바이오 탄산 제주 용암해수를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.More particularly, the present invention relates to a method for producing bio-carbonate lava seawater by a biological process and a cosmetic composition using the bio-carbonate liquor. More specifically, yeasts isolated from Jeju island leukocyte are first aerobically cultured and secondly anaerobically cultivated in Jeju Lava Seawater The present invention relates to a method for producing liquefied seawater of bio-carbonate liquor containing carbon dioxide, and a cosmetic composition containing the liqueur seawater of bio-carbonate liquor as an active ingredient.
제주도는 화산활동으로 인한 현무암층이 넓게 분포되어 있으며, 경사가 완만한 동서 사면으로는 용암지대가 넓게 발달 되어 있다. 특히 동부지역은 투수성이 우수한 지층이 두껍고 넓게 분포되어 있어 해수가 유입될 수 있는 천연의 조건을 지니고 있다. 바다의 압력에 의해 현무암층으로 여과되면서 유입된 해수는 고지대에서 바다 쪽으로 흘러 내려오는 지하담수와 만나 담, 염수 경계면을 형성하게 된다(김창숙 2012). 이 담, 염수 혼합대 하부에 존재하는 해수가 용암해수이다. 제주용암해수란 제주도에서만 볼 수 있는 특별한 수자원으로 해수가 현무암층과 사니질층을 통해 자연 여과되어 오랜 기간 동안 저장된 물이다. The basaltic rocks of Jeju Island are widely distributed by volcanic activity, and lava zones are widely developed on the eastern slopes where gentle slopes are gentle. Particularly in the eastern part, the layer with excellent permeability is thick and widely distributed and has a natural condition in which seawater can be introduced. The seawater, which is filtered by the pressure of the sea by the basaltic layer, meets with the underground fresh water flowing from the highlands to the sea and forms the brine interface (Kim Chang Sook 2012). The seawater existing in the lower part of the fence and brine is the lava sea water. Jeju Lava Seawater is a special water source that can be seen only in Jeju Island. It is water that has been stored for a long period of time because the seawater is naturally filtered through the basalt layer and the sandy layer.
용암해수에는 일반 해수 및 심층수보다 필수 미네랄(나트륨, 마그네슘, 칼슘, 칼륨 등)이 풍부하며 일반적인 미네랄 성분들(철, 몰리브덴, 아연, 망간)은 심층부와 삼다수보다 더 많은 양을 함유하고 있다. 특히 제주 용암해수는 바나듐을 함유하고 있어 인체의 생리활성에 긍정적인 효과를 기대할 수 있다. 바나듐은 부신의 catecholamine 대사에 관계하여 지방질 대사에 영향을 주고 콜레스테롤의 합성을 막아 동맥 경화를 예방하고 뼈와 연골, 치아의 형성에 필요하며 세포의 대사에 필수적인 원소이다. 특히 인슐린의 분비를 안정시키는 작용을 해 당뇨 치료에 이용되고 있으며 고지혈증 개선 효과가 있어 성인병 예방효과가 높다. 또한 제주용암해수에는 해양심층수에는 없는 게르마늄과 셀레늄을 함유하고 있어 혈액순환 촉진, 면역력 증강, 항암작용, 지방의 산화작용 억제, 항산화능, 항암, 불임, 노화 및 콜레스테롤 수치 개선 효과를 기대할 수 있다.Lava seawater is rich in essential minerals (sodium, magnesium, calcium, potassium, etc.) than general seawater and deep seawater, and common minerals (iron, molybdenum, zinc, manganese) contain more than deep seawater and debris. In particular, Jeju lava seawater contains vanadium, which can be expected to have a positive effect on the physiological activity of the human body. Vanadium is an essential element in the metabolism of catecholamine in the adrenal glands, which affects lipid metabolism, inhibits the synthesis of cholesterol, prevents arteriosclerosis, is necessary for the formation of bones, cartilage, and teeth. In particular, it acts to stabilize the secretion of insulin and is used in the treatment of diabetes. In addition, Jeju Lava Seawater contains germanium and selenium which are not found in deep ocean water, so it can be expected to promote blood circulation, enhance immunity, anticancer effect, inhibit oxidation of fat, antioxidant ability, anticancer, infertility, aging and cholesterol level.
용암해수에 함유된 미네랄 성분들을 대상으로 여러 종류의 화장원료로서의 가능성이 개시되었다. 관련 특허 문헌으로는 용암해수 미네랄을 이용한 피부 외용제 조성물(특허공개번호 10-2014-0077072), 용암해수를 함유한 화장품 조성물(특허등록번호 10-14500510000), 용암해수으로부터 분리된 탈염미네랄수를 함유하는 화장료(특허공개번호 10-2008-0052719), 탈염 용암해수를 이용한 피부 외용제 조성물(특허공개번호 10-2013-0063178), 탈염 용암해수의 발효물의 제조 방법과 그 방법에 의하여 얻어진 발효물 및 그 발효물을 이용한 화장료 조성물(특허공개번호 10-2013-0046082)이 있다. 특히 탈염 용암해수의 발효물의 제조 방법과 그 방법에 의하여 얻어진 발효물 및 그 발효물을 이용한 화장료 조성물의 경우 당만을 첨가해 유산균 혹은 효모를 일반 호기성 배양 한 후, 동결 건조하여 발효된 미네랄을 제조하는 방법에 대해 소개하였으나 상기 문헌 어디에서도 바이오 탄산화 공정을 통해 가공된 제주 용암 해수에 대해서는 개시된 바 없다. The possibility of various kinds of cosmetic raw materials for mineral components contained in lava sea water has been disclosed. The related patent documents include a composition for external application of skin using lava sea water minerals (Patent Publication No. 10-2014-0077072), a cosmetic composition containing lava sea water (Patent Registration No. 10-14500510000), a desalted mineral water separated from lava seawater (Patent Publication No. 10-2008-0052719), a composition for external application for skin using desalted lava sea water (Patent Publication No. 10-2013-0063178), a method for producing a fermented product of desalted lava sea water and a fermented product obtained by the method And a cosmetic composition using a fermented product (Patent Publication No. 10-2013-0046082). In particular, in the case of a method for producing a fermented product of desalted seawater, a fermented product obtained by the method and a cosmetic composition using the fermented product, the lactic acid bacteria or the yeast are cultured aerobically by adding only sugar, followed by lyophilization to produce fermented minerals However, the above-mentioned literature does not disclose Jeju lava seawater processed through bio-carbonation process.
이산화탄소는 경피 점막에 흡수되면 피부나 피하조직, 그리고 근육의 혈행을 촉진시켜 신진대사를 원활하게 한다. 이는 이산화탄소가 강력한 혈관확장작용을 가지고 있어 혈류량을 증가시켜 주기 때문이다. 경피 흡수된 이산화탄소는 혈관확장작용뿐만 아니라 Bohr효과에 의해 피부조직으로의 산소 운반량을 증가시켜 세포의 신진대사를 활성화시켜 피부의 탄력성이 증가되고 피부톤이 맑아지며 피부조직의 미세혈액순환을 증가시켜 자연스럽게 지방의 대사와 분해를 촉진시킨다.Carbon dioxide is absorbed into the transdermal mucosa to promote blood circulation in the skin, subcutaneous tissue, and muscles, thus facilitating metabolism. This is because carbon dioxide has a strong vasodilating action which increases blood flow. The transdermally absorbed carbon dioxide increases not only the vasodilating action but also the oxygen transport to the skin tissue by the Bohr effect, thereby activating the cellular metabolism, thereby increasing the elasticity of the skin, cleansing the skin tone and increasing the micro blood circulation of the skin tissue. Promotes fat metabolism and degradation.
이에, 본 발명자들은 제주 용암해수를 이용하여 보다 효과적인 화장료 조성물을 만들기 위해 예의 연구 노력한 결과, 바이오 탄산화 공정을 거친 제주 용암해수를 유효성분으로 하는 화장료 조성물이 피부 보호 및 개선효과가 더 뛰어남을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.The inventors of the present invention have made extensive efforts to make a more effective cosmetic composition using Jeju lava seawater. As a result, it has been confirmed that a cosmetic composition comprising Jeju lava seawater, which has undergone a bio-carbonation process, , Thereby completing the present invention.
따라서, 본 발명의 주된 목적은 생물학적인 공정을 통한 바이오 탄산 제주 용암해수의 제조방법을 제공하는 데 있다.Accordingly, it is a main object of the present invention to provide a method for manufacturing livestock bio-carbonate lava water through a biological process.
본 발명의 다른 목적은 상기 바이오 탄산 제주 용암해수를 유효성분으로 함유하는 피부 보호 및 개선용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.It is another object of the present invention to provide a cosmetic composition for protecting and improving skin containing the biocharged liquorice water as an active ingredient.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 다음 단계들을 포함하는 바이오 탄산수의 제조방법을 제공한다:According to one aspect of the present invention, the present invention provides a method of producing biocharged water comprising the steps of:
(a) 물에 바이오 탄산화 공정이 가능한 미생물을 접종한 후 호기적 조건에서 1차 배양하는 단계;(a) a step of inoculating a microorganism capable of bio-carbonating in water and then primary culturing under aerobic conditions;
(b) 상기 배양물을 혐기적인 조건에서 2차 배양하여 이산화탄소의 생성을 유도하는 단계; 및,(b) secondary culturing the culture under anaerobic conditions to induce production of carbon dioxide; And
(c) 상기 배양물을 여과하여 미생물을 제거하고 바이오 탄산수를 얻는 단계.(c) filtering the culture to remove microorganisms and obtaining bio-acid water.
본 발명에 있어서, 바이오 탄산화 공정이란 미생물의 발효과정을 통해 탄산가수, 즉 이산화탄소를 생성시키는 공정을 의미하며, 바이오 탄산수란 물에 이산화탄소를 물리적으로 투여하거나 화학적으로 생성시키지 않고 생물학적 공정인 미생물 발효과정을 통해 물에 탄산가스를 생성시킴으로써 만들어지는 탄산가스를 포함하는 물을 의미한다. 상기 바이오 탄산수에는 이산화탄소외에 미생물 발효과정 중에 분비되는 다양한 대사산물이 포함되어 있을 수 있다.In the present invention, the term "bio-carbonating" refers to a process for producing carbonic acid hydrogens, that is, carbon dioxide through fermentation of microorganisms. Bio-carbonated water refers to a process for fermenting microorganisms, which is a biological process, without physically administering carbon dioxide Quot; means water containing carbon dioxide gas which is produced by generating carbon dioxide gas in water through the gas. In addition to carbon dioxide, the bio-carbonated water may contain various metabolites that are secreted during the microbial fermentation process.
본 발명에 있어서, 호기적 조건이란 산소를 공급하면서 미생물을 배양하는 것을 의미하고, 혐기적 조건이란 산소의 공급을 차단하면서 미생물을 배양하는 것을 의미한다. 본 발명의 실시 예에 따르면, 종래 호기적 배양만을 거친 용암해수에 비해, 본발명의 1차 호기적 배양 및 2차 혐기적 배양을 거친 바이오 탄산 용암해수가 더 많은 이산화탄소를 용해시킬 수 있었다.In the present invention, an aerobic condition means culturing a microorganism while supplying oxygen, and an anaerobic condition means culturing a microorganism while blocking the supply of oxygen. According to the embodiment of the present invention, bio-carbonate lava sea water, which was subjected to the first aerobic culture and the second anaerobic culture of the present invention, could dissolve more carbon dioxide than lava sea water which was only aerobic cultured in the past.
본 발명에 있어서, 상기 (a) 단계의 물은 미생물을 배양시킬 수 있고 이산화탄소를 저장할 수 있는 어떤 물도 될 수 있으나, 바람직하게는 탈염 용암해수, 더욱 바람직하게는 제주도에서 채취된 제주 용암해수인 것을 특징으로 한다. 용암해수에는 일반 해수 및 심층수보다 필수 미네랄(나트륨, 마그네슘, 칼슘, 칼륨 등)이 풍부하며 일반적인 미네랄 성분들(철, 몰리브덴, 아연, 망간)은 심층부와 삼다수보다 더 많은 양을 함유하고 있다. 특히 제주 용암해수는 바나듐을 함유하고 있어 인체의 생리활성에 긍정적인 효과를 기대할 수 있다.In the present invention, the water in step (a) may be any water capable of culturing microorganisms and storing carbon dioxide, but desalinated lava waters, more preferably Jeju lava seawater collected from Jeju Island . Lava seawater is rich in essential minerals (sodium, magnesium, calcium, potassium, etc.) than general seawater and deep seawater, and common minerals (iron, molybdenum, zinc, manganese) contain more than deep seawater and debris. In particular, Jeju lava seawater contains vanadium, which can be expected to have a positive effect on the physiological activity of the human body.
본 발명에 있어서, 상기 (a) 단계의 바이오 탄산화 공정이 가능한 미생물은 알코올발효를 통해 이산화탄소를 생성시킬 수 있는 어떤 효모균도 될 수 있으나, 바람직하게는 제주도 누룩에서 분리한 효모균(Saccharomyces cereviciae)인 것을 특징으로 하는 바이오 탄산수의 제조방법을 제공한다. 상기 효모균은 도 1에서 보여지듯이 알코올 발효 과정 중에 부산물로 이산화탄소를 생성시킬 수 있으며, 예컨대 맥주발효용으로 사용되는 효모균주가 유용하게 사용될 수 있다.In the present invention, the microorganism capable of performing the bio-carbonation process in the step (a) may be any yeast capable of producing carbon dioxide through alcohol fermentation. Preferably, the microorganism is Saccharomyces cerevisiae isolated from the yeast of Jeju island The present invention also provides a method for producing biocharged water. As shown in FIG. 1, the yeast can produce carbon dioxide as a by-product during the alcohol fermentation process. For example, yeast strains used for beer fermentation can be usefully used.
본 발명에 있어서, 상기 제주도 누룩에서 분리한 효모균(Saccharomyces cereviciae)은 기탁번호 KCCM 11709P의 사카로미세스 세레비시아에 CXHB-2인 것을 특징으로 하는 바이오 탄산수의 제조방법을 제공한다. 본 발명에 따른 효모균(사카로미세스 세레비시아에 CXHB-2)은 제주도 누룩에서 분리한 제주도 특화 균주로 화장품 원료로 사용하는데 있어 안전성이 보장된 GRAS(Generally Recognized as Safe)균주이다. 한국 미생물 보존 센터(Korea culture Center of Microorganisms)에 기탁번호 KCCM 11709P로 기탁되어 있다. 본 발명에 따른 상기 기탁된 효모균은 탄산화 공정을 보다 효율적으로 유도하여 제주 용암해수의 기능성을 향상시켜 피부 보호 및 개선 효과에 도움을 줄 수 있다.In the present invention, Saccharomyces cerevisiae isolated from Jeju Island Nuruk is CXHB-2 in saccharomyces cerevisiae of deposit number KCCM 11709P. The yeast strain (Saccharomyces cerevisiae CXHB-2) according to the present invention is a Jeju-island-specific strain isolated from the koji of Jeju Island, and is a GRAS (Generally Recognized as Safe) strain that is safe for use as a cosmetic raw material. Which has been deposited with the Korean Culture Center of Microorganisms under accession number KCCM 11709P. The deposited yeast bacteria according to the present invention can induce the carbonation process more efficiently and improve the function of Jeju lava seawater to help protect and improve the skin.
본 발명에 있어서, 상기 (a) 단계의 호기적 1차 배양은 탄소원 및 질소원이 첨가된 배지에서 배양하고, 상기 (b) 단계의 혐기적 2차 배양은 질소원 없이 탄소원만을 첨가된 배지에서 배양하는 것을 특징으로 하는 바이오 탄산수의 제조방법을 제공한다. 상기 1차 배양에서 질소원은 미생물의 성장(growth)을 위해 첨가되며, 2차 배양에서 질소원을 빼는 이유는 이미 1차 배양에서 미생물이 최대한 성장하였으며 질소원을 넣으면 2차 배양시 바이오 탄산수에 취가 발생하기 때문이다.In the present invention, the aerobic primary culture of step (a) is cultivated in a medium supplemented with a carbon source and a nitrogen source, and the anaerobic secondary culture of step (b) is cultivated in a medium supplemented with only carbon sources without a nitrogen source And a method for producing biocharged water. In the primary culture, the nitrogen source is added for the growth of the microorganisms. The reason for subtracting the nitrogen source from the secondary culture is that the microorganism has already grown in the primary culture to the maximum. When the nitrogen source is added, .
본 발명에 있어서, 바람직하게는 상기 탄소원은 스크로오즈 혹은 글루코오즈의 당이고, 질소원은 효모추출물인 것을 특징으로 하는 바이오 탄산수의 제조방법을 제공한다.In the present invention, preferably, the carbon source is a sugar of sucrose or glucose, and the nitrogen source is a yeast extract.
본 발명에 있어서, 바람직하게는 상기 (a) 단계의 호기적 1차 배양은 30~35℃에서 20~30시간 동안 배양하고, 상기 (b) 단계의 혐기적 2차 배양은 22~28℃에서 20~30시간동안 배양하는 것을 특징으로 하는 바이오 탄산수의 제조방법을 제공한다. 상기 호기적 1차 배양에서는 미생물을 최대한 성장시키기 위해 온도를 높이며, 상기 혐기적 2차 배양에서는 미생물의 성장을 자제하고 바이오 탄산가스의 생성 및 흡수만을 유발하기 위해 온도를 비교적 낮춘다. Preferably, the aerobic primary culture of step (a) is cultivated at 30 to 35 ° C for 20 to 30 hours, and the anaerobic secondary culture of step (b) is cultivated at 22 to 28 ° C And culturing the cells for 20 to 30 hours. In the aerobic primary culture, the temperature is raised to maximize the growth of microorganisms. In the anaerobic secondary culture, the temperature is relatively lowered to inhibit the growth of microorganisms and to cause only bio-carbonic acid production and absorption.
본 발명에 있어서, 바람직하게는 상기 (a) 단계의 호기적 1차 배양은 미생물의 성장대수기에 도달하였을 때 종료하고, 상기 (b) 단계의 혐기적 2차 배양을 시작하는 것을 특징으로 하는 바이오 탄산수의 제조방법을 제공한다. 상기 미생물의 성장대수기에 도달하였을 때는 예컨대 DO 수준(용존산소량)이 0%가 되었을 때를 확인하면 된다.In the present invention, preferably, the aerobic primary cultivation of the step (a) is terminated when the growth period of the microorganism has reached, and the anaerobic secondary culture of the step (b) is started A method for producing bio-carbonated water is provided. When the growth period of the microorganism has reached, for example, it can be confirmed when the DO level (dissolved oxygen amount) becomes 0%.
본 발명에 있어서, 바람직하게는 상기 (b) 단계 후에 5~10℃에서 20~30시간 동안 보관하여 이산화탄소가 제주용암수에 녹아들도록 하는 것을 특징으로 하는 바이오 탄산수의 제조방법을 제공한다.In the present invention, preferably, after the step (b), the carbon dioxide is stored at 5 to 10 ° C for 20 to 30 hours so that the carbon dioxide is dissolved in the Jeju lava water.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 본 발명의 방법에 의하여 제조된 바이오 탄산수를 포함하는 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명자들은 생물학적인 바이오 탄산화 공정을 통해 제조된 바이오 탄산수를 화장료 조성물의 원료로 사용될 수 있다는 것을 처음으로 발명하였다.According to another aspect of the present invention, there is provided a cosmetic composition comprising bio-nitric acid water produced by the method of the present invention. The inventors of the present invention first invented that bio-carbonated water produced through a biological bio-carbonation process can be used as a raw material for a cosmetic composition.
본 발명에 있어서, 바람직하게는 피부 보습 부여 효과, 피부 표피 분화 유도 효과, 및 피부 장벽 강화 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 피부 개선용 화장료 조성물을 제공한다.In the present invention, there is preferably provided a cosmetic composition for skin improvement, which has a skin moisturizing effect, a skin epidermal differentiation inducing effect, and a skin barrier strengthening effect.
본 발명의 바람직한 실시예에 따라 제조된 바이오 탄산 용암 해수는 기본적으로 용암해수가 갖고 있는 세포 재생 활성, 항산화 활성, 함염증 활성 등의 생리 활성 외에 효모배양물과 바이오 탄산에 의한 피부 보습 부여 효과, 피부 표피 분화 유도 효과 및 피부 장벽 강화 효과를 갖는 기능으로 기능성 화장품에 첨가되어 사용될 수 있다. The bio-carbonate lava sea water produced according to the preferred embodiment of the present invention basically has physiological activities such as cell regeneration activity, antioxidant activity and anti-inflammatory activity possessed by lava seawater, and also has a skin moisturizing effect by yeast culture and bio- A function to induce differentiation of skin epidermis and a skin barrier strengthening effect, and may be added to functional cosmetics.
본 발명에 있어서, 피부의 수분 보유능력에 가장 큰 역할을 하고 있는 세포외 기질 성분인 히알루론산의 감소는 각질층의 수분이 저하되어 피부가 본래의 기능을 잃고 거칠어지게 됨을 의미한다. 바이오 탄산 용암해수는 히알루론산의 합성을 담당하는 HAS3 유전자의 발현을 현저히 증가시켰으며, 피부 표면에서 보습을 담당하는 천연보습 인자(Natural Moisturizing Factor, NMF)의 전구 단백질인 필라그린 유전자의 발현을 증가시키는 효과를 유의적으로 보였다. 또한 필라그린은 표피에 있는 주요 단백질로서, 필라그린의 증가는 정상적인 피부 장벽을 형성하여 피부 수분 증발을 막는 것을 의미한다. 따라서 손상된 피부 장벽이 건조한 피부의 주요 발생 원인으로 작용한다는 연구 결과를 바탕으로, 필라그린 발현을 증가시키는 바이오 탄산 용암해수는 피부 장벽 기능을 증진하는 성분이라고 여길 수 있다.In the present invention, the decrease in hyaluronic acid, which is an extracellular matrix component, which plays a major role in the water retention ability of the skin, means that the skin of the horny layer is decreased in moisture and loses its original function and becomes rough. Bio-carbonate lava seawater significantly increased the expression of HAS3 gene, which is responsible for the synthesis of hyaluronic acid, and increased the expression of fila green gene, a precursor protein of natural moisturizing factor (NMF) The effect was significant. In addition, pilar green is the main protein in the epidermis, which means that the increase in pilar green forms a normal skin barrier to prevent skin moisture evaporation. Based on the results that damaged skin barrier acts as a major cause of dry skin, bio-carbonate lava seawater, which increases the expression of pilar green, may be considered to enhance skin barrier function.
본 발명에 있어서, 상기 바이오 탄산수는 화장료 조성물의 전체 중량 100 중량% 기준 0.1 중량% 내지 50.0 중량%로 포함될 수 있다. 상기 바이오 탄산수의 함량이 0.1 중량% 미만이면 상기 바이오 탄산수에 의한 효능, 효과가 미약하고, 50 중량%를 초과하면 피부 안전성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.In the present invention, the biocharged water may be contained in an amount of 0.1 to 50.0% by weight based on 100% by weight of the total weight of the cosmetic composition. If the content of the bio-carbonated water is less than 0.1% by weight, the effect and effect of the bio-hydro-carbonated water are weak, and if it exceeds 50% by weight, there is a problem of skin safety or shape.
본 발명에 있어서, 상기 화장료 조성물은 화장수(스킨로션), 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크 로션, 모이스쳐 로션, 영양 로션, 마사지 크림, 영양 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양 에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클렌저 제형의 제형으로 구성된 군에서 선택된 제형을 갖는 것을 특징으로 한다.In the present invention, the cosmetic composition according to the present invention may be used as a skin lotion, a skin softener, a skin toner, an astringent, a lotion, a milk lotion, a moisturizing lotion, a nutrition lotion, a massage cream, A nutritional essence, a pack, a soap, a cleansing foam, a cleansing lotion, a cleansing cream, a body lotion and a body cleanser formulation.
본 발명에 따른 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화 될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 거품(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.The composition according to the invention may be formulated containing a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. These are all formulations suitable for topical application, for example as a solution, a gel, a solid, a paste anhydrous product, an emulsion obtained by dispersing an oil phase in water, a suspension, a microemulsion, a microcapsule, a microgranule or an ionic form (liposome) In the form of ionic fibrin dispersions, or in the form of creams, skins, lotions, powders, ointments, sprays or conical sticks. It can also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant.
이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 또한 본 발명에 의한 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다. 또한, 본 발명의 조성물은 피부 개선 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다.These compositions may be prepared according to conventional methods in the art. In addition, the composition according to the present invention may further comprise at least one selected from the group consisting of fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickening agents, gelling agents, softening agents, antioxidants, suspending agents, stabilizing agents, Such as fillers, emulsifiers, emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, moisturizers, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or any other ingredient commonly used in cosmetics May contain adjuvants commonly used in the field of cosmetics or dermatology. Such adjuvants are introduced in amounts commonly used in the cosmetics or dermatological fields. In addition, the composition of the present invention may contain a skin absorption promoting substance to increase the skin improving effect.
본 발명에 따른 바이오 탄산 제주 용암해수를 함유하는 화장료 조성물은 피부 보습 부여 효과, 피부 표피 분화 유도 효과 및 피부 장벽 강화 효과를 갖는 피부 개선용 화장료 조성물로 유용하게 이용할 수 있다. 본 발명에 따른 바이오 탄산 용암 해수는 기본적으로 용암해수가 갖고 있는 세포 재생 활성, 항산화 활성, 함염증 활성 등의 생리 활성 외에 효모배양물과 바이오 탄산에 의한 피부 보습 부여 효과, 피부 표피 분화 유도 효과 및 피부 장벽 강화 효과를 갖는 기능으로 기능성 화장품에 첨가되어 사용될 수 있다.The cosmetic composition containing the livelong water of the present invention can be effectively used as a cosmetic composition for skin improvement having skin moisturizing effect, skin epidermal differentiation inducing effect and skin barrier strengthening effect. The bio-carbonate lava water according to the present invention basically has physiological activities such as cell regeneration activity, antioxidative activity and anti-inflammatory activity possessed by lava seawater, and also has a skin moisturizing effect by the yeast culture and bio-carbonate, It can be added to functional cosmetics as a function having skin barrier strengthening effect.
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 혐기 조건에서의 효모 당 대사를 나타내는 그림이다.
도 2는 기존의 발효 공정 (도 2a)과 본 발명의 실시예에 따른 바이오 탄산화 공정(도 2b)을 비교한 그림이다. 1) PDA: Potato dextrose agar, Difco, 2) PDB: Potato dextrose broth, Difco
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 바이오 탄산화 공정과 호기 발효에서 생성되는 탄산의 양을 비교한 그래프이다.
도 4a는 본 발명의 실시예에 따른 바이오 탄산수의 히아루론산 생성 효소 발현율을 비교한 그래프이다.
도 4b는 본 발명의 실시예에 따른 바이오 탄산수의 필라그린 발현율을 비교한 그래프이다.
도 5는 본 발명의 실시예에 따른 바이오 탄산수의 세포 증식 및 이동을 비교한 그림이다.FIG. 1 is a graph showing the metabolism of yeast in anaerobic conditions according to an embodiment of the present invention. FIG.
FIG. 2 is a graph comparing a conventional fermentation process (FIG. 2A) and a bio-carbonation process (FIG. 2B) according to an embodiment of the present invention. 1) PDA: Potato dextrose agar, Difco, 2) PDB: Potato dextrose broth, Difco
FIG. 3 is a graph comparing the amount of carbonic acid generated in the bio-carbonation process and the aerobic fermentation according to the embodiment of the present invention.
4A is a graph comparing the expression rates of hyaluronic acid-producing enzymes of biohydrophilic water according to an embodiment of the present invention.
FIG. 4B is a graph comparing the expression rates of bio-carbonated water with pillar green according to an embodiment of the present invention.
5 is a graph comparing cell proliferation and migration of biohydrophilic water according to an embodiment of the present invention.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These embodiments are only for illustrating the present invention, and thus the scope of the present invention is not construed as being limited by these embodiments.
[실시예 1] 본 발명에 따른 효모균의 분리[Example 1] Separation of yeasts according to the present invention
제주도 민속오일시장에서 구입한 누룩들을 샘플링하여 제주도 유래 효모균주를 선발하였다. 누룩을 Chloramphenicol이 첨가된 PDB(Potato dextrose broth, Difco)에 도말하여 25~30℃에서 24~48시간 동안 배양하였다. 버기스 매뉴얼(Bergy's manual)에 따라 통상적으로 분류되는 효모로 분류되는 군집들을 분리하였다. 분리된 균주들을 대상으로 이산화탄소 생성능이 우수한 균주를 선발하였다. 이산화탄소 생성능이 우수한 균주는 Hrbert Durham(1952)의 방법을 참고하여 동일 시간 대비 가장 많은 양의 이산화탄소를 생산한 효모를 최종 선별하였다. 상기 최종 선발 균주를 YPD broth에서 30℃, 24시간 배양 후, 원심분리하여 세포를 모아 게놈 DNA 추출키트[genomic DNA extraction kit(General Biosystem, Korea)]를 사용하여 분리하였으며 분리된 게놈 DNA는 18S rDNA 시퀀싱을 위한 견본으로 사용하였다. 18S rDNA의 PCR 증폭은 포워드 프라이머(forword primer); NS1(5’- GTAGTCATATGCTTGTCTC-3')와 리버스 프라이머(reverse primer); ITS2 (5'-GCTGCGTTCTTCATCGATGC-3')을 사용하였으며, 95℃에서 1분간 변성, 55℃에서 45초간 어닐링, 72℃에서 5분간 익스텐션 조건으로 PCR 기계(pTC-150 minicycler, MJ Research Co., USA)을 사용하여 30 회 실시하였다. 최종 PCR 프로덕트를 1% 아그로스겔에 전기영동한 후 DNA 단편을 회수하여 시퀀싱 분석을 의뢰를 통해 염기서열을 결정하였다. 염기서열은 BLASTN 프로그램으로 젠뱅크에 등록되어 있는 유전자 염기서열과 비교를 통해 선발균주를 동정하였다. 선발균주의 동정결과 Saccharomyces cerevisiae YJM1078균주와 99% homology가 있는 것으로 분석되어 최종 효모 선발균주를 S. cerevisiae CXHB-2 KCCM 11709P로 명명하고 본 발명에 사용하였다.The yeast purchased from the Jeju Island Folk Oil Market was sampled and the yeast strains derived from Jeju Island were selected. Yeast was plated on PDB supplemented with chloramphenicol (Potato dextrose broth, Difco) and cultured at 25-30 ° C for 24-48 hours. The clusters classified as yeast, which are conventionally classified according to the Bergy's manual, were isolated. The isolated strains were selected for their ability to produce carbon dioxide. The yeast that produced the greatest amount of carbon dioxide compared to the same time was finally selected based on the method of Hrbert Durham (1952). The final selection strain was cultured in YPD broth at 30 ° C for 24 hours, and centrifuged to collect the cells. The cells were separated using a genomic DNA extraction kit (General Biosystem, Korea) And used as a sample for sequencing. PCR amplification of 18S rDNA was performed using a forward primer; NS1 (5'-GTAGTCATATGCTTGTCTC-3 ') and reverse primer; PCR machine (pTC-150 minicycler, MJ Research Co., USA) was used for PCR amplification at 95 ° C for 1 minute, annealing at 55 ° C for 45 seconds, and extension at 72 ° C for 5 minutes using ITS2 (5'- GCTGCGTTCTTCATCGATGC-3 ' ) For 30 times. The final PCR product was electrophoresed on a 1% agarose gel, and the DNA fragments were recovered and subjected to sequencing analysis to determine the base sequence. The nucleotide sequence was identified by comparison with the genomic sequence registered in GenBank with the BLASTN program. As a result of the identification of the selected strain, Saccharomyces cerevisiae YJM1078 strain and 99% homology were determined, and the final yeast strain was named S. cerevisiae CXHB-2 KCCM 11709P and used in the present invention.
[실시예 2] 바이오 탄산 제주 용암 해수의 제조예 [Example 2] Production example of lysozyme water from Jeju bio-carbonate
제주 용암해수산업단지에서 생산된 탈염제주용암수 1kg에 당(수크로오즈 혹은 글루코오즈) 10~20g, 효모추출물 5g, NaCl 5g을 첨가하여 종 배양 및 주 배양을 위한 배지로 사용하였다. 종배양된 효모를 주 배양액에 초기 균수가 1.0~5.0e + 6 cfu/ml이 되도록 접종하고 30~33℃, 200rpm에서 20~24시간 동안 호기적인 조건에서 진탕 배양하였다. 바이오 탄산화를 생성시키기 위해 상기 배양물 1kg에 당(수크로오즈 혹은 글루코오즈)을 7~10g을 추가 첨가하였다. 25℃에서 24시간 혐기적인 조건에서 이산화탄소 생성을 유도하였으며, 5~10℃에 24시간 추가로 보관하여 이산화탄소가 제주용암수에 녹아들도록 하였다. 상기 제조된 바이오 탄산 용암 해수는 0.45um의 막여과로 균체를 제거한 후 탄산농도 측정 및 피부 효능 평가에 사용하였다. 도 1에서와 같이 산소가 고갈된 시점에서의 효모의 대사 체계를 이용하여 제주 용암해수에 이산화탄소가 녹아들 수 있도록 유도하였다. 비교 실험을 위한 대조구로서 일반적인 공정(호기 발효)에 의해 제조된 용암해수는 도 2a의 순서와 같이 진행하였다. 도 2는 기존의 발효 공정 (도 2a)과 본 발명의 실시예에 따른 바이오 탄산화 공정(도 2b)을 비교한 그림이다.10 ~ 20g of sugar (sucrose or glucose), 5g of yeast extract and 5g of NaCl were added to 1kg of desalted Jeju lava water produced in Jeju Lava Sea Fishery Complex and used as a medium for seed culture and main culture. The seed culture was inoculated into the main culture medium at an initial bacterial count of 1.0 to 5.0 e + 6 cfu / ml, and cultured under aerobic conditions at 30 to 33 ° C and 200 rpm for 20 to 24 hours. In order to produce bio-carbonation, 7 to 10 g of sugar (sucrose or glucose) was further added to 1 kg of the culture. Carbon dioxide production was induced under anaerobic condition at 25 ℃ for 24 hours and further stored at 5 ~ 10 ℃ for 24 hours to allow carbon dioxide to dissolve in Jeju lava water. The prepared bio-carbonate lava water was filtered through a 0.45-μm membrane filter, and then used for carbon dioxide concentration measurement and skin efficacy evaluation. As shown in FIG. 1, using the yeast metabolic system at the time of depletion of oxygen, the carbon dioxide was dissolved in the seawater of Jeju lava. The lava water prepared by the general process (aerobic fermentation) as a control for the comparative experiment proceeded as in the order of FIG. 2A. FIG. 2 is a graph comparing a conventional fermentation process (FIG. 2A) and a bio-carbonation process (FIG. 2B) according to an embodiment of the present invention.
[실시예 3] 바이오 탄산 제주 용암 해수의 탄산 측정[Example 3] Measurement of carbonic acid in lava water from Jeju bio-carbonate
수용액내의 이산화탄소의 양이 많을수록 수산화칼슘과 반응하여 탄산 칼슘으로 침전되는 중량이 증가된다. The greater the amount of carbon dioxide in the aqueous solution, the greater the weight of precipitated calcium carbonate by reacting with the calcium hydroxide.
Ca(OH)2+ CO2 --> CaCO3(침전) + H2OCa (OH) 2 + CO 2 -> CaCO 3 (precipitation) + H 2 O
실시예 2에 따라 제조된 용암해수 20ml에 0.18g/ 100ml 농도로 제조된 수산화칼슘 용액 20ml를 혼합하여 방치하면 시료내에 탄산 칼슘이 침전한다. 상기 시료들을 3,000 rpm, 3분간 원심분리하여 상등액을 폐기하고 건조기에서 70℃, 18시간 건조한 후, 데시케이터에 10분간 상온 냉각 후 탄산칼슘의 무게를 측정하였다. 도 3에서와 같이 실시예 2(바이오탄산화공정)는 대조구(호기발효) 대비 침전되는 탄산칼슘의 양이 월등히 많았다. 따라서 본 발명에서 제안한 공정에 의해 가공된 제주용암해수에는 과량의 이산화탄소가 용해되어 있음을 확인할 수 있다. 20 ml of calcium hydroxide solution prepared at a concentration of 0.18 g / 100 ml was mixed with 20 ml of lava water prepared according to Example 2, and calcium carbonate was precipitated in the sample. The samples were centrifuged at 3,000 rpm for 3 minutes to discard the supernatant. The supernatant was discarded, dried at 70 ° C for 18 hours in a desiccator, cooled to room temperature in a desiccator for 10 minutes, and the weight of calcium carbonate was measured. As shown in FIG. 3, in Example 2 (bio-carbonation process), the amount of calcium carbonate precipitated was much higher than that of the control (aerobic fermentation). Therefore, it can be confirmed that excessive carbon dioxide is dissolved in the lava water processed by the process proposed by the present invention.
[실시예 4] 바이오 탄산 제주 용암 해수의 보습 평가 및 피부 표피 분화 유도 효과[Example 4] Moisture evaluation and induction of skin epidermal differentiation in Jeju lava water of bio-carbonate
1) 세포 배양1) Cell culture
세포주와 세포 배양인체 각질형성 세포주(human keratinocyte)인 HaCaT 세포를 10% 우혈청 (fetal bovin serum)을 포함한 DMEM 배지(Dulbecco’s modified Eagle’s Medium, Gibco 1210-0038)에서 배양하였고, 배양은 모두 37℃, 5% CO2 배양기에서 수행하였다.Cell cultures and cell cultures HaCaT cells, human keratinocytes, were cultured in DMEM medium (Dulbecco's modified Eagle's Medium, Gibco 1210-0038) containing 10% fetal bovine serum and cultured at 37 ° C, 5% CO 2 incubator.
2) mRNA 발현 조사 (Real time RT-PCR)2) mRNA Expression Study (Real time RT-PCR)
사람 각질형성세포에서 보습 효과를 확인하기 위해, 사람 각질형성세포를 6 well 세포 배양 접시에 4 x 105의 밀도로 접종한 후 37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 배양하였다. 레티놀, 용암 해수, 바이오 탄산 용암 해수, 호기성 배양물을 첨가하여 24 시간 동안 배양하고 세포를 회수하여 트리졸 (RNA iso, DAKARA, 일본) 1 ㎖을 첨가하여 RNA를 분리하였다. Nanodrop 2000 (Thermo, USA)를 이용해 RNA를 정량한 후, 42 ℃ 에서 55 min, 70 ℃에서 15 min 동안 반응시켜 cDNA를 합성하였다 (Reverse Transcriptase Mix, ELPIS biotech, 한국). RT-PCR은 PCR 기계 (Step One Plus, Applied Biosystems, 미국)를 이용하였고 사이버그린 (SYBR Green supermix, Applied Biosystems, 미국)을 HAS3 (hyaluronic acid synthase3), filaggrin, β-actin 프라이머 및 cDNA와 함께 첨가하여 94℃에서 5분 동안 중합효소 활성화, 95℃ 30초, 54℃ 1분, 72℃ 1분간 40 사이클로 중합반응 하였다. 프라이머와 반응 조건은 하기의 표와 같다.Human keratinocytes were inoculated into 6-well cell culture dishes at a density of 4 × 10 5 cells and cultured in a 5% CO 2 incubator at 37 ° C. for 24 hours. Cells were harvested for 24 hours by adding retinol, lava sea water, bio-carbonate lava sea water, and aerobic culture, and 1 ml of trizol (RNA iso, DAKARA, Japan) was added to separate the RNA. RNA was quantified using Nanodrop 2000 (Thermo, USA), and cDNA was synthesized by reacting at 42 ° C for 55 min and at 70 ° C for 15 min (Reverse Transcriptase Mix, ELPIS biotech, Korea). RT-PCR was performed using HAS3 (hyaluronic acid synthase 3), filaggrin, β-actin primer and cDNA with SYBR Green supermix (Applied Biosystems, USA) using a PCR machine (Step One Plus, Applied Biosystems, USA) Polymerization was carried out at 94 ° C for 5 minutes, followed by polymerization at 95 ° C for 30 seconds, 54 ° C for 1 minute, and 72 ° C for 1 minute. The primer and reaction conditions are shown in the following table.
도 4 a 내지 b에 나타나는 바와 같이, 본 발명에 의한 바이오탄산용암해수는 피부 수분 유지 기능을 수행하는 세포외 기질 성분인 히알루론산의 합성을 담당하는 HAS3 유전자의 발현을 증가시켰으며 레티놀보다 더 높은 효능을 보였다. 또한, 피부 표면에서 보습을 담당하는 천연보습 인자의 전구 단백질인 필라그린 유전자의 발현을 증가시키는 효과를 유의적으로 보였다. 이를 통하여, 본 발명에서는 바이오탄산용암해수는 피부의 유연성과 견고성을 높이고 피부의 수분보유능력을 증진시켜 피부 보습에 탁월한 효과를 나타낼 것으로 생각된다.As shown in FIGS. 4 a and 4 b, bio-carbonate lava water according to the present invention increased the expression of the HAS3 gene responsible for the synthesis of hyaluronic acid, which is an extracellular matrix component that performs skin moisture retention, Showed efficacy. In addition, the effect of increasing the expression of fila green gene, a precursor protein of natural moisturizing factor responsible for moisturizing the skin surface, was shown to be significant. Accordingly, in the present invention, bio-carbonate lava sea water is expected to exhibit an excellent effect on skin moisturization by enhancing the flexibility and firmness of the skin and enhancing the water retention ability of the skin.
[실시예 5] 바이오 탄산 제주 용암 해수의 세포이동 효과[Example 5] Cell migration effect of lysozyme water from Jeju bio-carbonate
Flex kit ENZ-KIT117(Enzo Life Science, USA)를 사용하여 바이오 탄산 제주 용암해수의 피부 세포에 대한 이동 효과를 규명하고자 하였다. 4-stopper strips이 꽂혀있는 96well plate에 사람 각질형성세포를 3 x 104 농도로 100 μl씩 접종한 후 18시간 배양하였다. Stopper tool로 4-stopper strips를 제거한 후 레티놀, 바이오 탄산 용암 해수를 첨가하여 24시간 배양한 후, 무처리군과 시료를 처리한 group에서 4-stopper strips에 의한 원형 공간에 각질형성세포가 어느 정도 찼는지를 현미경으로 촬영하였다. 도 5에서 보는 바와 같이, 바이오 탄산 제주 용암해수 처리군이 무처리군에 비하여 각질형성세포를 더 많이 증식 및 이동시켰다. 이를 통하여, 본 발명에서 바이오탄산용암해수는 각질형성 세포의 분화 및 이동을 촉진시켜 피부장벽을 강화시키는 것을 알 수 있다. To investigate the migration effect of bio-carbonate Jeju lava seawater on skin cells using Flex kit ENZ-KIT117 (Enzo Life Science, USA). Human keratinocytes were inoculated into 96-well plate with 4-stopper strips at a concentration of 3 × 10 4 in 100 μl, and cultured for 18 hours. After 4-stopper strips were removed with a stopper tool, retinol and bio-carbonate lava waters were added and cultured for 24 hours. In the untreated group and the treated group, the number of keratinocytes in the round space by 4-stopper strips It was photographed with a microscope. As shown in FIG. 5, the bio-carbonated livestock seawater treated group produced more proliferation and migration of keratinocytes than the non-treated group. Thus, it can be seen that bio-carbonate lava water enhances the skin barrier by promoting the differentiation and migration of keratinocytes in the present invention.
이상 설명한 바와 같이, 본 발명에 따른 바이오 탄산 제주 용암해수를 함유하는 화장료 조성물은 피부 보습 부여 효과, 피부 표피 분화 유도 효과 및 피부 장벽 강화 효과를 갖는 피부 개선용 화장료 조성물로 유용하게 이용할 수 있다. 본 발명에 따른 바이오 탄산 용암 해수는 기본적으로 용암해수가 갖고 있는 세포 재생 활성, 항산화 활성, 함염증 활성 등의 생리 활성 외에 효모배양물과 바이오 탄산에 의한 피부 보습 부여 효과, 피부 표피 분화 유도 효과 및 피부 장벽 강화 효과를 갖는 기능으로 기능성 화장품에 첨가되어 사용될 수 있다.INDUSTRIAL APPLICABILITY As described above, the cosmetic composition containing the biocharalic acid lava waters of the present invention can be effectively used as a cosmetic composition for skin improvement having skin moisturizing effect, skin epidermal differentiation inducing effect and skin barrier strengthening effect. The bio-carbonate lava water according to the present invention basically has physiological activities such as cell regeneration activity, antioxidative activity and anti-inflammatory activity possessed by lava seawater, and also has a skin moisturizing effect by the yeast culture and bio-carbonate, It can be added to functional cosmetics as a function having skin barrier strengthening effect.
Claims (11)
(a) 물에 바이오 탄산화 공정이 가능한 미생물을 접종한후 호기적 조건에서 1차 배양하는 단계;
(b) 상기 배양물을 혐기적인 조건에서 2차 배양하여 이산화탄소의 생성을 유도하는 단계; 및,
(c) 상기 배양물을 여과하여 미생물을 제거하고 바이오 탄산수를 얻는 단계.
A method for producing biocharged water, comprising the steps of:
(a) a step of inoculating a microorganism capable of bio-carbonating in water and then primary culturing under aerobic conditions;
(b) secondary culturing the culture under anaerobic conditions to induce production of carbon dioxide; And
(c) filtering the culture to remove microorganisms and obtaining bio-acid water.
The method according to claim 1, wherein the water in step (a) is desalinated lava water.
The method according to claim 1, wherein the microorganism capable of performing the bio-carbonation step in step (a) is Saccharomyces cerevisiae isolated from alcohol fermentation yeast or Jeju island yeast.
[4] The method according to claim 3, wherein the yeast Saccharomyces cereviciae isolated from the koji of Jeju Island is CXHB-2 in saccharomyces cerevisiae of deposit number KCCM 11709P.
The method according to claim 1, wherein the aerobic primary cultivation in step (a) is performed in a medium supplemented with a carbon source and a nitrogen source, and the anaerobic secondary culture in step (b) is cultivated in a medium supplemented with only carbon source Wherein the method comprises the steps of:
6. The method of claim 5, wherein the carbon source is sucrose or glucose sugar, and the nitrogen source is yeast extract.
The method according to claim 1, wherein the aerobic primary cultivation of step (a) is performed at 30 to 35 ° C for 20 to 30 hours, and the anaerobic secondary cultivation of step (b) And culturing the cells for 30 hours.
2. The method according to claim 1, wherein the aerobic primary culture of step (a) is terminated upon reaching the growth stage of the microorganism, and the anaerobic secondary culture of step (b) is started. ≪ / RTI >
The method according to claim 1, wherein the step (b) is followed by storing at 5 to 10 ° C for 20 to 30 hours so that carbon dioxide is dissolved in Jeju lava water.
9. A cosmetic composition comprising bio-carbonated water produced by the method according to any one of claims 1 to 9.
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