JPS603319B2 - アミノ糖誘導体 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、新規なアミノ糖誘導体、その製造法、それを
活性化合物として含有する薬剤組成物、ならびにそのア
ミノ糖誘導体でグリコシドヒドラーゼを抑制することに
より人間および動物の炭水化物の代謝を抑制する方法、
たとえば糖尿病、肥満症および過脂肪血症の処置法に関
する。

更に詳しくは、本発明は下記式（式中、ｎ，＝２、山＝
１を示す） で表わされるアミノ糖誘導体に関する。

以下において、参考のためその関連化合物についても一
緒に説明する。放線菌目の多数の微生物はグリコシドヒ
ドラーゼの抑制因子を形成すること、そして培養条件に
＊依存して、主にアミラーゼに対してまたは主にサッカ
ラーゼに対して抑制作用をもつ抑制因子が得られること
は知られている（これに関して米国特許明細書３８７６
７６６、３８５５０６６および総７６５４６を参照）。
式 （式中ｎ，およびｎ２は０〜８の数であることができる
が、ｎ，十ｎ２の合計は常にｎ＝１〜８の値をもち、た
だしｎ，十ｗ＝１または２のとき、〜は常に０である）
の新規なアミノ糖誘導体が発見された。

ｎ，十−の合計の値に依存して、これらのアミノ糖誘導
体は主にアミラーゼ抑制作用またはサツカラーゼ抑制作
用をもつ。

したがって、アミラーゼを抑制するのに調節された方法
で使用できるアミノ糖謎導体は、ｎ，十ｎ２＝４〜８、
ことにｎ・十ｎ２＝４および５であるものである。サッ
カラーゼを抑制するのに調節された方法で使用できるア
ミ／糖誘導体は、ｎ，十ｎ２＝１〜３、好ましくはｎ，
十ｎ２＝２〜３、とくに好ましくはｎ，＝２であるもの
であＺる。さらに驚くべきことには、ｎ，十ｎ２＝２〜
３、ことにｎ，＝２であるアミノ糖誘導体は、生体内で
、でんぷんの分解の強い抑制を示すことがわかった。

本発明によるアミノ糖誘導体は、放線菌目、ことにアク
チノプラナセア科（Ａｃｔｊｎｏｐｌａｎａｃｅａｅ）
の菌株をそれ自体知られた方法で培養し、次いで再びそ
れ自体知られた方法で個々の化合物を分離および単離す
ることによって製造される。

ｎ，十山の合計の値が１〜４であるアミノ糖該導体は、
これより分子量が大きいアミノ糖誘導体を化学的にまた
は酵素的に加水分解することによって、さらに得ること
ができる。

本発明によるアミノ糖議導体の製造に使用できる放線菌
目の菌株の述べることができる例は、アクチ ノプ ラ
ネ ス属の公知菌種ＳＥ５０（ＣＢＳ９６１．７０）
（ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．１２６６）、ＳＢ１８（ＣＢＳ９
５７．７０）（ＦＥＲＭ一ＰＮｏ．１２５７）およびＳ
Ｅ８２（Ｃ斑６１５．７１）（ＰＥＲＭ−ＰＮｏ．１２
６８）ならびにこれらの菌株の突然変異体または変種で
ある。

得られるアミノ糖誘導体の収率に関すると、菌株ＳＥ５
０／１３（ＣＢＳ６１４．７１）（ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．
１９７６）およびＳＥ５０／１１０（Ｃ聡６７４．７８
）（ＦＥＲＭ‐ＰＮｏ．２６１０）はとくに適当である
ことがわかった。両者の菌株の記載は親の菌株ＳＥ５０
（ＣＢＳ９６１．７０）のそれに実質的に相当し、この
親の菌株からこれらの菌株は変異議発素を使用しないで
自然選択によって得られる。

固体または液体の、ことに液体の水性栄養培地は、それ
自体知られている炭素および窒素の出発物質、塩類およ
び消泡剤をふつうの濃度で含有し、微生物の培養に使用
される。

使用する炭素についての出発物質は、主に炭水化物、こ
とにでんぷん、マルトース、グルコースおよび物質の複
雑な混合物、たとえば商業的に入手できる麦芽エキスで
ある。

使用できる窒素についての出発物質は、それ自体知られ
た複雑な混合物、たとえばカゼイン加水分解物ｔイース
ト抽出物、ベプトン、魚肉、トウモロコシ浸溝液、肉抽
出物およびこれらの出発物質の混合物であり、そして個
々のアミノ酸および／またはアンモニウム塩も窒素源と
して使用できる。

微生物は通気した振とう培地中で、またはふつうの容器
の渚地中で好気的に培養される。

主生成物として形成した最終生成物の種類は、炭素につ
いて使用する出発物質の種類および濃度と発酵に使用す
る特定の菌株との組み合わせによって影響を受ける。

したがって、たとえば、２重量％より多いでんぷんを含
有する栄養溶液中では、形成する化合物は、なかでも、
ｎ，十Ｑ＝４〜８のものである。

菌株ＳＥ５０／１３（Ｃ斑６１４．７１）はｎ，十ｎ２
＝４〜８であるアミノ槍誘導体の製造にとくに適する。
しかしながら、栄養溶液が十分なグルコース（約３．５
重量％）を含有するとき、０．１〜３重量％のでんぷん
はｎ・十−＝４〜８であるアミノ糖誘導体の主演合物を
得るのにすでに十分である。

このようにして得られたこれらのアミノ糖誘導体のすべ
ては、化学または酵素的加水分解により低級の類似体を
製造するための出発化合物として使用できる。ｎ・十Ｗ
＝１〜４であるアミノ糖議導体は、培養をでんぷんを含
まない溶液中で実施するときに主要量で得られる。

この場合、マルトースを栄養溶液に加えると、とくに有
利な効果が得られる。したがって、たとえば、マルトー
スを加え、菌株ＳＥ５０（ＣＢＳ９６１．７０）を使用
すると、主としてｎ，十ｎ２＝２〜８であるアミノ糖誘
導体の混合物が得られる。ｎ，＝１であるアミノ糖は、
とくに炭素についての出発物質としてグルコースのみを
使用することによって生成する。しかしながら、この場
合過剰量のグルコースが存在するとき、発酵期間を長く
すると、これより高分子量のアミノ糖誘導体も生成する
ことを、考慮しなければならない。グルコースを含有し
ない栄養溶液を使用し、マルトースを炭素の唯一の出発
物質として加えると、得られる主生成物はｎ，十−＝２
であるアミノ糖である。技術的に有利な態様において、
純粋なマルトースの代わりにこれより安価な製品、たと
えば自然の市販されている麦芽エキスであるマルトジン
（Ｍａｌｔｚｉｎ）を使用できる。菌株ＳＥ５０／１１
０（ＣＢＳ６７４．７３）は、主としてｎ，十ｎ２＝１
〜３であるアミノ糖議導体を含有するアミノ糖誘導体の
製造にとくに適することがわかった。

この菌株は、低分子量のアミノ糖誘導体を菌株ＳＥ５０
／１３（ＣＢＳ６１４．７１）を用いて得られる収率の
約２倍の収率で与える。

一般、微生物は１５〜４５００、好ましくは２４〜３〆
○の培養温度で培養する。

したがって、菌株ＳＥ５０（ＣＢＳ９６１．７０）また
はＳＥ５０／１３（Ｃ斑６１４．７１）を使用するとき
、ｎ，十〜＝４〜８であるアミノ糖謎導体はより高い温
度、たとえば２がｏで得られ、これに対しより低い温度
、たとえば２４こ０において、たとえば菌株ＳＥ５０（
ＣＢ９６１．７０）およびＳＥ５０／１１０（Ｃ茂６７
４．７３）はｎ，十ｎ２＝１〜３であるアミノ糖誘導体
を主要量で生成する。培養期間は一般に１〜８日間、好
ましくは２〜６日間である。

培養期間を長くし、ことに過剰量の炭水化物を栄養塔地
に使用すると、ｎ，十〜がより大きい値であるアミノ糖
誘導体の生成に好都合となる。培地のｐＨ値は一般に５
．０〜８．５好まし〈は６．０〜７．０である。

発酵の終点は、一般に酵素抑制試験による抑制活性舎量
の測定ならびに薄層クロマトグラフィ−による発酵媒体
の組成を測定することによって、検出する。

前述のように比較的高分子量のアミノ糖誘導体を化学的
に加水分解して低分子量の誘導体を製造する場合、使用
する方法は、一般に、比較的高分子量のァミノ糖誘導体
を１〜州の鉱酸水溶液で５０〜１００００、ことに９０
〜１００ｑ０において１０〜１８び分間処理することか
らなる。

酵素による加水分解も可能であり、この加水分解は、一
般に、酵素（ヒドラーゼ）、ことに抑制されえない３−
アミラ−ゼまたはＱ−アミラーゼまたは微生物源のアミ
ログルコシダーゼ、たとえばＢｓ血ｔｍｓから得られる
Ｑ−アミラーゼを用いる培養により、あるいは比較的高
分子量のァミノ糖誘導体を１〜１０％、好まし〈は２〜
５％の量で「好ましくは唯一の炭素源として含有する栄
養溶液中で生長できる微生物、たとえば偽ｐｅｒｇｉｌ
ｌ船ｎｉｇｅｒ（ＡＴＣＩＩ．３９４）を培養すること
によって、実施する。本発明による個々のアミノ糖誘導
体の分離および単離は、微生物学的培養肉汁から、ある
いは比較的高分子量のアミノ糖議導体の酵素および／ま
たは微生物学的分解を実施した加水分解生成物または培
養混合物から、出発する。

処理はｎ，十ｎ２の値に依存して異なる方法で行う。

すなわち、ｎ，十仏＝１〜４である純粋なアミノ糖誘導
体の製造に用いる方法は、一般に、特定の培養肉汁また
は加水分解生成物を、必要に応じて菌糸体を前もって分
離したのち、活性木炭で中性の柵において処理し、この
ようにして活性炭に結合したアミノ糖誘導体を、活性木
炭のアルコールまたはアセトン、好ましくは５０〜８０
％強度のアセトンによる処理によって、脱着することか
らなる。脱着はｐＨ１．５〜４、好ましくはｐＨ２〜３
の酸性の−値においてとくに完全におこなわれる。分離
すべき培養肉汁または加水分解生成物が非常に暗い色で
あるとき、前述の活性木炭処理を行う前に、まずそれら
を酸性のｐＨにおいて活性木炭で処理するか、あるいは
ｐＨ２〜６、好ましくはｐＨ２〜３において吸収性樹脂
、たとえば商業的に入手できるＬｅｗａｐｏＩＣａ９２
２１（粒度０．３５肋、母ｙｅｒＡＧ）で処理し、この
ようにして脱色を行うことは、有利であるとわかった。
酸性の範囲において、活性炭は優先的に染料だけを結合
するが、アミノ糖叢導体を結合しない。次いで、前述の
活性炭から得られた脱着生成物からの個々のァミノ糖誘
導体の分離は、一般に、この脱着した生成物をそれ自体
知られている強酸性の陽イオン交換体、たとえば００ｗ
ｅｘ５０Ｗ（Ｍｅｓｓｒｓ．ＤｏｗＣｈｅｍｉｃａｌｓ
）（ｐＨＩ〜８、好ましくはｐＨ２〜４：低いイオン強
さにおいて、く１０のＳ．伽‐１、好ましくは＜２仇Ｓ
．肌山１の導電性に相当する）に通すことによって、実
施する。

このようにして個々のアミノ糖誘導体は腸イオン交換体
に綜合する。アミノ糖誘導体は、とくに有利にアセトン
中の溶液（５０〜８０％のアセトン、ｐＨＩ〜５、好ま
しくはＰＨ２〜４）からこのような腸イオン交換体へ結
合する。次いで、これらの陽イオン交換体からの本発明
による選択的脱着は、一般に、溶離剤として、水性の酸
または塩基、好ましくはアンモニアまたは塩酸を０．０
１〜１当量／その濃度で使用することによって、実施す
る。

次いで、脱着生成物を弱い酸性または塩基性の交換体で
中和したのち、または塩基または酸が揮発性であるとき
塩基または酸を真空除去したのち、凍結乾燥により溶液
を濃縮したのち、または有機溶媒、好ましくはアセトン
で沈殿したのち、特定のァミノ糖誘導体は個々の脱着生
成物から得Ｚられる。

さらに、セルロースに基づく交換体、好ましくはリンー
セルロース（Ｍｅｓｓ岱．Ｓｅｗａ、Ｈｅｉｄｅｌ蛇ｒ
ｇ）のクロマトグラフィーにより、低分子量のアミノ誘
導体を不活性な糖類から分離できＺる。

低いイオン強度、好ましくは２〜１００ミリモル、こと
に５〜１０ミリモルの緩衝剤、好ましくはリン酸塩の緩
衝剤をｐＨ２．５〜８、好ましくはｐＨ５〜６において
ランニング剤（ｒ皿ｎｌ増ａ度ｎｔ）として使用する。
有効な分画に対する予備的条件２は、分画すべき配合物
中の塩含量はできるだけ低いということである。その中
の染料はそれほど問題とならない。個々のアミノ糖誘導
体を純粋な形で製造するため、この予備精製した配合物
を適当な分子ふる２い、たとえばＢｉｏ一ＱＩ Ｐ−２
（Ｍｅｓｓ岱．Ｂｉｏ一Ｒａｄ．Ｍｕｎｊｃｈ）による
クロマトグラフィーに付し、そして溶離液のラクション
を薄層クロマトグラフィーで検査する。

本発明による化合物を純粋な形で含有するフラクション
を合わせ、再度クロ３マトグラフィーに付し、最後に、
濃縮したのち、前述のように凍結乾燥するかまたは有機
溶媒で沈殿させる。アミノ糖誘導体のすべては、「成分
１」 「Ｃ，３日，９０７Ｎ」とグルコースが酸性の全加水分
解により生成することによって特徴づけられる。

下記の構造式は「成分１」について誘導されたものであ
る。本発明のアミノ糖議導体の初めのメンバーは、グル
コース単位をもつ。

この化合物は無色の非晶質物質であり、水、ジメチルホ
ルムアミド、ジメチルスルホキシド、メタノールおよび
熱エタノールによく溶ける。酢酸エチル、メタノールと
水を１０：６：４の比で用いる薄層クロマトグラフィー
によると、この化合物は、Ｆ１５００シリカゲルフィル
ム〔Ｓｃｈｌｅｉｃｈｅｒ ＆ Ｓｃｈｕｌｌ〕でＲｆ
＝０．４６（マルトース＝０．５およびグルコース＝０
．６５）そしてＦ２５４シリカゲルプレート〔Ｍｅｒｃ
ｋ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ〕でＲｆ＝０．４７（マルトー
ス＝０．５４およびグルコース＝０．６６）を示した。
硝酸銀／水酸化ナトリウムの頃霧剤を使用すると、かつ
色のしみが室温においてまたは多少温めたのち得られる
。

この化合物をピリジン（１）、トリメチルクロロシラン
（０．５）およびＮーメチルートリメチルーシリルート
リフルオロアセトアミド（１）の混合物中でＤ−グルコ
ースまたはスクロースを標準として用いてシリル化し、
次いでクロモソーブ（Ｃｈｒｏｍｏｓｏｒｂ）ＷＡＷ上
に３％のＳＥ３０シリコーンェラストマ‐〔Ｐａｃｋａ
ｒｄ〕を満たした１．８凧のガラスカラムのガスクロマ
トグラフィ一に付した。

注入温度と検出器の温度は３００つ○であった。

炉温度を２２０℃し、Ｑ−○ーグルコースおよび８−Ｄ
ーグルコースの標準物質が溶離されてしまうまで、一定
に保った。次いで、この温度をｌｙＣ／分の速度で８０
０午Ｃまで上昇させた。火炎ィオンイｑ隙出器を使用し
、窒素を４０私／分の速度でキャリャーガスとして供給
し、空気を８０Ｍ／分の速度で燃焼ガスとして供給し、
そして水素を２０の‘／分の速度で供Ｖ給した。

この化合物は１６〜１７分の保持時間を示した（Ｑ−Ｄ
−グルコース＝３分、８−Ｄ−グルコース＝４分そして
スクロース＝１２〜１３分）。メタノール性溶液を濃縮
して得られた化合物の非結晶試料を水に溶かし、比旋光
度は〔Ｑ〕。＝１３４．３ｏ であった。
＊＊ ｎ，＝１、ｎ２＝０の後記
式Ｄ化合物について、２２ｍＭＨｚにおけるＣＤ３０Ｄ
中のＮＭＲスペクトルを第１図に示す（横座標＝６跡）
。ＮＭＲスペクトルの顕著な特徴を、下表１に示す。

表 １ ａ（ｐｐｍ） 多 重 項
相対強度１．３ ２重項：Ｊ〒６．５Ｈｚ
３日２．３
い ３重項 ″ＪＩおよびＪ２ ８−１０Ｈｚ
ＩＨ３．１５ ぷ
３重項 ″Ｊ，およひＪ２ ７一９Ｈｚ
ＩＨ３．３−３．９ 信号は個々に評
価できない １２
日４．１３ ＡＢ系；Ｊ＝１２Ｈｚ
２日４．４８ ） ２重
頃：Ｊ＝１２Ｈｚ）および） ）
ＩＨ５．１ ） ２重項 Ｊ三２．
５Ｈｚ）４．９ １重項
１１日重水素で置
換されえブロトン ５．０ ２重項：Ｊ三２−３Ｈｚ（解・ｉ象力に
劣る） ＩＨ５．８ ２事
項：Ｊ＝３−４Ｈｚ（解像力に劣る）
３日この化合物を無水酢酸とピリジンとの１：１
混合物中で反応させると、デカアセチル誘導体（分子量
：９０３）が得られる。

この式０化合物のデカアセチル誘導体のＮＭＲスペクト
ルを第２図に示す。反応を氷酢酸／酢酸無水物の１：１
混合物中で触媒量の日２Ｓ０４の存在下に実施すると、
ウンデァセチル誘導体（分子量：９４５）の形成は、デ
カアセチル譲導体のほかに、質量分析により測定できる
。

デカアセチル議導体の質量スペクトルは、９０３に分子
ピーク（２．５％の相対強度）と８４３にベースピーク
を示す。

上部の質量領域における重要な破片ピークは８４４（５
５％の相対強度）、７８４（３６％のｘ鴇相対強度）、
７８３（３４％の相対強度）、７５９（３４％の相対強
度）、５５６（３６％の相対強度）、４９６（３７％の
相対強度）および４３６（２９％の相対強度）である。
ハカモリ（Ｈａｋａｍｏｒｉ）の方法によるジメチルス
ルホキシド中のＣＨ３１／ＮａＨを用いるメチル化は、
主生成物としてデカメチル譲導体と少量のゥンデカメチ
ル誘導体も与える。

この質量スペクトルは６２３における分子ピーク（６．
１％の相対強度）と５３５におけるベースピークを示す
。

第２の分子ピークは６３７（０．２％の相対強度）に観
測される。スペクトルのデータと化学的性質は、この化
合物に次の構造式を与える。

とくに、ＮＭＲスペクトルは、この化合物ｎＡ が立
体式の０−｛４・６−ビスーデオキシー４一〔ＩＳ−（
１．４．６／５）−４・５・６ートリヒドロキシー３−
ヒドロキシメチルシクロヘキシー２−エン−１ーイルー
アミノ〕−Ｑ−Ｄーグルコピラノシル｝−（１→４）−
Ｄ−グルコピラノースの構造をもつことを示す。

系例（ｎ，十比＝２）における次のメンバーは、一般組
成Ｃ２５比３０，８Ｎをもち、水に溶けやすい非晶質の
生成物である。

薄層クロマトグラフィーによると、この化合物は前述の
系を用いてＦ１５００シリカゲルフィルムでＲｆ＝０．
３５そしてＦ２５４シリカゲルプレートでＲｆ＝０．３
３を示す。水中の比旋光度〔Ｑ〕ｄは１４７．２０であ
る。

ｎ，＝２、ｎ２＝０の後記式ｍ化合物について、２２ｍ
ＭＨｚにおけるＤ２０中のＮＭＲスペクトルを第３図に
示す。また、第４図は該化合物のＣＩ３−ＮＭＲスペク
トルである。＊ 前述のメチル化は１針固のメチル基を
含む化合物と、少量の１４個のメチル基を含む生成物を
与える。

メチル生成物の質量スペクトルは、８２７（１．５％の
相対強度）に分子ピークを示し、実験式Ｃ離日６ぶ０，
８に相当する。

０．１％の相対強さの第２分子ピークは８４１に存在す
る。

最も重要な破片のピークは、次のとおりである。

７３９（２７％の相対強度）、５９２（３．７％の相対
強度）、球５（３０％の相対強度）、３８８（９％の相
対強度）、３８６（１３％の相対強度）、２８４（１３
％の相対強度）、１８７（１２％の相対強度）、１７１
（４０％の相対強度）、１０１（３４％の相対強度）、
８８（２５％の相対強度）および７５ベースピーク。

この化合物に対して化学的およびスペクトルの性質から
次の構造式が得られ、そして本発明によるアミノ糖誘導
体のこの系列のこの第２メンバーは、立体式の０一｛４
・６−ビス−デオキシ−４一〔ＩＳ−（１・４・６／５
）−４・５・６−トリヒドロキシー３−ヒドロキシメチ
ルシクロヘキー２ーエンー１−イルアミノ〕−Ｑ−Ｄー
グリコピラノシル｝−（１→４）−○一Ｑ−Ｄ−グルコ
ピラノシル−（１→４）−Ｄ−グルコピラノースの構造
をもつ。

系列（ｎ，十山＝３）の次の最高級メンバーは２つの異
性体の形で得られ、２つの異性体の１つは主要量で形成
する。

酸性の部分加水分解により、２つの異性体化合物は系列
（ｎ，十比＝１）の第１のメンバーとグルコースとに１
：２のモル比で分割される。

少量で存在する生成物は、立体式 の化合物○−｛４・６ービスーデオキシー４一〔１Ｓ−
（１・４・６／Ｓ）−４・５・６−トリヒドロキシ−３
−ヒドロキシメチルシクロヘキシ−２ーエンー１ーイル
アミノ〕一Ｑ一Ｄ−グルコピラノシル｝−（１−４）一
○一Ｑ一Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−○−Ｑ一
Ｄ−グルコピラノシルー（１→４）一Ｄーグルコピラノ
ースである。

大量に存在する異性体生成物は、立体式 の化合物○−｛４・６−ビスーデオキシー４−〔ＩＳ−
（１・４・６／５＞−４・５・６−トリヒドロキシ−３
ーヒドロキシメチルー４−○一Ｑ−Ｄ−グルコピラノシ
ルー（１→４）ーシクロヘキシ−２ーエン−１−イルア
ミノ〕一Ｑーグルコピラノシル｝−１（１→４）一〇−
Ｑ−Ｄ−グルコピラノシルー（１→４）−Ｄ−グルコピ
ラノースである。

ｎ−ブタノール、エタノールおよび水を５０：３０：２
０で用いるＦ１５００プレ−トのクロマトグラフィーに
より、これらの異性体はＲグルコース＝０．４１〜０．
４６（Ｒｆ）を示す。

またシラン化シリカゲル上、酢酸エチル：メタノール：
水：２５％アンモニア水を１００：６０：４０：２で用
いる薄層クロマトグラフィーにより式Ｖ化合物はＲｆｏ
．５３を示し、式Ｗ化合物のＲｆは０．６４である。式
Ｖに示す構造をもつ異性体の存在は、水素化分解（パラ
ジウム／活性木炭）から得られる生成物を分析すること
によって決定できる。これらの分解生成物には、３ーヒ
ドロキシメチル−４・５・６−トリヒドロキシー４−○
一Ｑ−Ｄ−グルコピラノシル−１−へキサン、０一（４
−アミノー４・６ービスーデオキシ−Ｑ−Ｄーグルコピ
ラノシル）−（１→４）−○−Ｑ−Ｄ−グルコピラノシ
ルー（１→４）一ＤＨグルコピラノースおよびグルコー
スが含まれる。水素化はへキセン基の二重結合を還元し
、ァミノ結合を***させるので、式Ｗの化合物と異性体
関係にあるこの化合物は構造的に式ｍＡまたはｍＢの化
合物に関連することが明らかである。

しかしながら、この化合物はシクロヘキセン環の４位置
にグルコピラノシル基がさらに存在することによって特
徴づけられる。式Ｗに示される構造をもつ異性体の存在
は、バリダトールおよび０一（４−アミノー４・６−ビ
スーデオキシーＱ一Ｄーグルコピラノシル）一（１→４
）−０−Ｑ−Ｄ−グルコピラノシル（１＊→４）−○一
Ｑ一Ｄーグルコピラノシルー（１→４）−Ｄ−グルコピ
ラノースの形成によって確認される。

ほかの研究において、ｎ，十山＝３の異性体をメチル化
し、加水分解し、水素化ホウ素ナトリウムで還元し、ア
セチル化し、既知の方法によりガスクロマトグラフィ一
で分折した。

式Ｗの化合物は１・４・５−トリー〇ーアセチルー２・
３・６ートリー○−メチル−Ｄーグルシトールのみを与
えるが、式Ｖの化合物は１・４・５−トリー０ーアセチ
ルー２・３・６−トリ−○−メチル−Ｄーグルシトール
と１・５ージー○ーアセチルー２・３・４・６ーテトラ
○ーメチル−○ーグルシトールを２：１のモル比で与え
る。式ＷおよびＶをもつ異性体化合物は、溶離剤として
０．０２印塩酸を用いる酸***換樹脂のクロマトグラフ
ィーによって分離できる。

４〜８のグルコース単位を含み分子量が９６９〜１６１
７である系列の高級メンバーは、サッカラーゼを抑制す
る能力に劣る。

これらの高級メンバーを酸加水分解すると，．特定の低
級成分はグルコースおよびマルトースとともに中間体と
して検出できる。

ｎ−ブタノール、エタノールおよび水を５０：３０：２
０で用いるＦ１５００シリカゲルプレートの薄層クロマ
トグラフイーは、Ｒグルコース＝０．３０〜０．３４、
４グルコース単位）：０．２１〜０．２３ ５グルコー
ス単位）：０．１４〜０．１６、６グルコース単位）お
よび０．０９〜０．１１、７グルコース単位）を与える
。

この系列の低級メンバーの場合におけるように、全体酸
性加水分解は「成分１」とグルコースを明確なモル比、
すなわち１：４、１：５、１：６、１：７および１：８
（グルコースの百分率はそれぞれ７４．４％、７９．７
％、８３．３％、８６．５％および８９．１％である）
で与える。

溶媒としてｎ−ブタノール、エタノールおよび水を４５
：３５：２０の比で使用するＦ１５００シリカゲルＺプ
レートによる薄層クロマトグラフィーを行うと、次のＲ
ｆ値が３倍の展開の時に観測される。

前述の接触水素化も、これらの高級メンバー中のグルコ
ース単位の全部ではなくそれらのいくつかがシクロヘキ
セン基の４位置に結合していることを示す。これらの化
合物は、１→４結合をもつ線状のオリゴグルコシドを含
有するので、炭水化物を分解するある種の酵素の基質と
して使用できる。

酵素の範囲は、この化合物により実質的に抑制されない
ものに制限されることは明らかである。バクテリアおよ
び菌に似たＱーアミラーゼは、３以上のグルコース単位
を含み、低分子量の化合物および不活性な糠類破片、た
とえばマルトースおよびマルトトリオースを与える任意
のオリゴグルコシドの分解に使用できる。

この分解法は、ｎ．十ｎ２２３の化合物について使用で
き、Ｑ・１→４結合の確認にさらに使用される。４〜７
のグルコース単位をもつ本発明による化合物もａ−アミ
ラーゼにより部分的に分解されうる。

８ーアミラ−ゼはＱ・１→４結合をもつグルコース連鎖
の非還元性末端からマルトース単位を分割するので、８
ーアミラーゼを用いて得られた分解生成物を注意して分
析すると、シクロヘキセン環の４位置に結合した各オリ
ゴグルコシド構成員について、ことにその連鎖の長さ、
およびピスーデオキシグルコースへ結合した連鎖、すな
わち化合物の還元末端中のグルコースの数について、価
値ある情報が得られる。

しかしながら、４、５、６、７または８個のグルコース
単位を含む化合物は８ーアミラーゼによって完全に分解
されることはない。この化合物の抵抗する部分は、明ら
かに８ーアミラーゼの攻撃に対する不適切な構造的条件
に帰する。８−アミラーゼによる分解の結果は、次のよ
うに要約できる。

出発物質中の 分解生成物中 除去されたマグルコース
単 のグルコース ルトース単位位の数 単位の
数出発物質のいくらかは、必要に応じて回収する。

８−アミロリシスの分解に関すると、８−アミラーゼは
マルトース単位のみを除去でき、かっこの単位オリゴサ
ッカラィドの非還元性末端からのみ除去できることが再
び強調される。

限定に導ぴくいかなる理論も避けるべきである。これら
の高級の化合物の正確な構造は完全には明瞭とならなか
ったが、前述の発見から導びかれる結論は、４、５、６
、７および８個のグルコース単位をもつ化合物は式ｍＡ
をもち、２、３、４、５および６個のグルコース単位を
もつ連鎖を含み、お互いに対する。・１→４結合をもち
、オリゴサツカラィド鎖がシクロヘキセン環の４位置と
Ｑ立体配座Ｚで結合している、低級化合物の誘導体を含
むということである。ジメチルスルホキシド中のョウ化
メチル／水素化ナトリウムによる化合物のメチル化、全
体の加水分解、誘導体の形成および引き続くガスクロマ
トグラフィ一による分析は、２・３・６一トリメチルグ
ルコース譲導体を与えるので、グルコース単位は必然的
にもっぱら線状構造の１〜４に結合している。

メチル化化合物に依存して、異なる量で存在しまたはあ
る種の環境でまったく存在しない第２メチル化生成物は
、２・３・４０６ーテトラメチル誘導体である。

この誘導体の存在およびトリメチル誘導体に対するその
モル比は、シクｏヘキセン環に結合する置換基に依存す
る。炭水加物に富んだ食物および飲物（たとえば、穀粒
でんぷん、ジャガイモでんぷん、果物、果物ジュース「
ビールおよびチョコレート）を摂取したのち、次の反応
式：でんぷんまたはグリコーゲンアミラーゼキマルトー
スマルターゼグルコースサ、ソカラーゼグルコース十フ
ルクトースに従い、グルコシドヒドロラーゼによる炭水
化物の急速な分解の結果として起こる過糖血症が動物お
よび人間に生ずることは知られている。

過糖血症は、とくに糖尿病において顕著であり、長期間
にわたって続く。脂肪症の被検者において、食餌性過糖
皿症はインシュリンのとくに著しい分泌にいよいよ影響
を及ぼし、その結果脂肪の蓄積の増大とＩＪポカトボリ
ズム（ｌｉｐＭａｔｏｂｏｌｊｓｍ）の低下を導びく。
健康な代謝をもつ人において、そして脂肪症の人におい
て、このタイプの過糖血症はインシュリンの分泌の結果
低糖血症となることがしばいまある。低糖血症と胃の中
のびじゆうの両方は胃液の生成を促進し、その結果胃炎
、胃かいようまたは十二指腸かいようの発生の原因とな
り、またはそれらを促進することは知られている。本発
明によるアミノ糖誘導体は食餌性の過糖血症、過インシ
ュリン血症および低糖皿症を実質的に防ぐことがわかっ
た。さらに、炭水化物、ことにスクロースは口腔内の微
生物により分割されること、そしてその結果カリエスの
形成が促進されることが知られている。

本発明によるアミノ糖誘導体は、このタイプのカリエス
の形成を防止または軽減するのに使用できる。

試験管内アミラーゼ試験 アミラーゼ抑制単位（ＩＭＵ）を、アミラーゼ単位を５
０％程度抑制する抑制剤の量として定義する。

アミラーゼ単位（ＡＵ）は、下に示す試験条件下で、で
んぷん中のグルコシド結合の１ム当量を１分間に分割す
る酵素の量である。この分割された結合の山当量はジニ
トロサリシル酸を用いるカリー測定法により生成する砂
糖の還元仏当量として決定され、そしてマルトースを用
いて標準曲線をマルトース当量の仏当量として与える。
試験を実施するため、０〜１０山夕の抑制剤、または０
．０２モルのグリセロリン酸ナトリウム緩衝剤／ｐＨ６
．９の０．００１モルのＣａＣ１２の０．４の【中の０
〜２０ムその試験すべき溶液を０．１の【のアミラーゼ
溶液（２０〜２２ＡＵ／の【）に加え、この混合物を３
５ｑ○の水浴中で約１０〜２０分間平衡化する。次いで
、これを３５℃０に予備加熱した０．５ｍ‘の１％でん
ぷん溶液（Ｍｅｓｓｒｓ．Ｍｅｒｃｋ、Ｄａｒｍｓｔａ
ｄｔからの可溶性でんぷんＮＯ．１２５２）とともに３
５℃で５分間培養し、次いで１の‘のジニトロサリシル
酸試薬（Ｐ．ＢｅｍＫｉｄ、ＣｏｌｏＷｃｋ−Ｋａｐｌ
ａｎ、Ｍｅｔｈ、Ｅｎｚｙｍｏｌ．、１、１４９夕によ
る）を加える。発色させるため、バッチを沸とう水浴中
で５分間加熱し、次いで冷却し「１０泌の蒸留水を加え
る。強ｍ仇の吸収光度を、アミラーゼを使用しないで同
じように調製したブランク値に対して、測定する。評価
のため、抑制剤の０添加後まだ有効であるアミラーゼ活
性をあらかじめ記録したアミラーゼ標準曲線から読み取
り、使用したアミラーゼの抑制率（％）をこの値から計
算する。抑制率を、商：４鰐掌十 十 乾燥物質に関して 十十 抑制しなかった同じ系列のバッチ中のＡＵ、の関
数としてプロットし、５０％の抑制点をこの曲線から読
みとり、ＡＩＵ／の９の抑制剤に変換する。

試験管内サッカラーゼ試験サッカラーゼ抑制剤単位（Ｓ
ＩＵ）を、サッカラーゼ単位を５０％程度に抑制する抑
制剤の量として定義する。

サッカラーゼ単位（ＳＵ）は、下に示す試験条件下で、
１一モルのスクロースをグルコースとフルクトースとに
１分間に分割する酵素の量である。生成するグルコース
のムモルは、サツカラーゼによるスクロースの分割がさ
らに起こらない条件下で、グルコースオキシダーゼ反応
により、定量的に測定する。この試験を実施するため、
０〜２０仏夕の抑制剤、または試験すべき溶液０〜２０
仏そを、０．１＄Ｕの含量に調整したサッカフーゼの溶
液（Ｂ．Ｂｏｒｇｓｔｒｏ ｍおよびＡＤａｈｌｑｕｉ
ｓｔ、Ａｃｔａ Ｃｈｅｍ．Ｓｃａｎｄ．１２、（１９
５８）、１９９７に従う豚の小腸粘膜からの可溶化した
サッカラーゼ。ＰＨ６．０の０．１モルのマレィン酸ナ
トリウム緩衝剤で適切なＳＵ舎量に希釈した。）に加え
、この混合物をｐＨ６．０の０．１モルのマレィン酸ナ
トリウムで０．１のとにする。この混合物を３５℃で１
０分間平衡化し、ｐＨ６．０の０．１モルのマレイン酸
ナトリウム中の０．０５モルのスクロース溶液の０．１
の‘を加える。この混合物を３５ｑ０で２０分間培養し
、１泌のグルコースオキシダーゼ試薬（このグルコース
オキシダーゼ試薬は、次のようにしてつくる。２の９の
グルコースオキシダーゼ（Ｍｅｓｓ岱．Ｂｏｅｈｒｉｎ
ｇｅｒＮｏ．１５４２３）を１００の‘のｐＨ７．０の
０．５６５モルのトリス一日ＣＩ緩衝剤に溶かし、次い
で１の上の洗浄剤溶液（２夕のトリトン×１００十８夕
の９５％分析銘柄のエタノール）、１叫のジアニシジン
溶液（２０奴の日２０中の２６０の夕のｏ−ジアニシジ
ン、２ＨＣＩ）と０．５の‘の０．１％強度のパ−オキ
シダーゼ（Ｍｅｓｓね．Ｂｏｅｈｒｉｎ鱒ｒＮｏ．１５
３０２）の水溶液を加える）を加４えてサッカラーゼ反
応を停止し、この混合物を３５℃でさらに３０分間培養
する。

次いで、１の‘の５０％日２Ｓ０４を加え、この混合物
を５４軌のにおいて対応するブランク値に対して測定す
る。評価のため、使用したサッカラーゼの抑制率（％）
をグルコ−ス標準曲線の５０％抑制点から、計算し、Ｓ
ＩＵ／汐またはＳｍ′のこ換算する。マルターゼ試験 マルターゼ抑制単位（ＭＩＵ）は、マルターゼを５０％
程度に抑制する抑制剤の量と定義する。

マルターゼ単位（ＭＵ）は、下に示す試験条件下で、Ｉ
Ａモルのマルトースを２仏モルのグルコースに１分間に
分割する酵素の量である。生成するグルコースの仏モル
は、マルターゼによるマルト−ズの分割がさらに起こら
ない条件下で、グルコースオキシダーゼ反応により定量
的に決定する。この試験を実施するため、０〜２０〃夕
の抑制剤、または試験すべき溶液０〜２０ムそを０．０
６０〜０．０７仙川の含量に調整した０．０５の【のマ
ルターゼ溶液（Ｂ．節ｒ袋ｔｒｏｍおよびＡ．Ｄａｈｌ
ｑｕｊｓｔ、ＡｃねＣｈｅｍ．Ｓｃａｎｄ．１２、（１
９５８）、１９９７ページに従う豚の小腸粘膜からの可
溶化マルタ−ゼ。０．１モルのＰＨ６．０のマレィン酸
ナトリウム緩衝剤で適切なＭＵ含量に希釈した。

）に加え、この混合物を０．１叫のｐＨ６．０の０．１
モルのマレィン酸ナトリウムで０．１の‘とする。この
混合物を３５ｑｏで１０分間平衡化し、次いで３５００
に予熱したｐＨ６．０の０．１モルのマレイン酸ナトリ
ウム緩衝剤中の０．０５モルのマルトース溶液０．１地
を加える。この混合物を３５℃で２０分間培養し、１の
‘のグルコースオキシダーゼ試薬（このグルコースオキ
シダーゼ試薬の調製法は、サッカラーゼ試薬における場
合と同一である）の添加によりマルターゼ反応を停止し
、この混合物を３５ｑ０でさらに３０分間培養する。次
いで、１の‘の５０％日２Ｓ０４を加え、この混合物を
５４取れにおいて対応するプランク値に対して測定する
。評価のため、マルターゼの抑制率（％）をグルコース
標準曲線の５０％抑制点から計算し、ＭＩＵ′好または
ＭＩＵ′〆に換算する。

本発明による個々のアミノ糖誘導体についての試験管内
酵素抑制の結果を、下表１に要約する。

表 １この表からわかるように、すし、豚のＱーアミラ
ーゼに対する試験管内抑制活性における特異性はこの系
列の分子量が増加するにつれて鋭く増加する。

したがって、５〜７個のグルコース単位をも化合物は１
個または２個の単位をもつ化合物より１００情強い試験
管内の酵素の抑制を示す。サッカＺラーゼの抑制は２個
の単位をもつ誘導体で最も強く著しい。１個のグルコー
ス単位をもつ誘導体による酵素の抑制はわずか半分の強
さであり、これより高級のメンバーはサッカラーゼの抑
制に対してさらに減少した固有の活性を示す。

生体内において、サツカラーゼの抑制に関する活性は、
試験管内に見出される固有の抑制活性に対してほぼ並列
に進行する。

一方、驚くべきことには、生体内ででんぷんを加えた試
験において、１、２または３個のグルコース単位をもつ
化合物について、試験管内のアミラーゼ抑制に比べて１
０〜４び音の増加した活性が見出された。食餌性の過糖
血症および過インシュリン症を生成するため、各場合に
６匹の断食したねずみの群に、｛ａ｝２．５夕のスクロ
ース、｛ｂ｝２．５夕のマルトースまたは‘ｃ｝１夕の
沸騰したでんぶんを水溶液またはけん濁物として経口投
与した。６匹の他のねずみに同量の該炭水化物と、さら
に示した投与量のグルコシドヒドローズ抑制剤を与える
。

さらに、６匹のほかのねずみに対応する量の塩溶液を与
える。

眼遼後方の静脈集綱からの血液中の血液グルコースと血
清インシュリンを短かし、間隔で測定した。

血液グルコースの測定は自動分析器（Ｈｏｆｆｍａｎ：
Ｊ．ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１２以 ５１（１９３７）に
よるＴｅｃｈｅｎｉｃｏｎ■またはグルコーオキシダー
ゼとｏ−ジアニシジン塩酸塩を用いて酵素的に）で実施
し、そして血清インシュリンの測定はＨａｌｅｓおよび
Ｒａｎｄｉｅ：ＢｉｏｃｈｅｍＪ．８８１３７（１９６
３）の方法により実施した。

断食したねずみ中のサッカラーゼの生体内の抑制につい
ての結果を下表ｍに記載する。

表 ｍ 米 ＝スクロースを有する対照と比較した統計的有
意差二＜０．０５米米

二＜０．０１給料 ‐−
−〈〇
，００ １上のデータからわかるように、サツカラーゼ
の抑制に対する生体内活性は試験管内の抑制活性に対し
て並列に進行する。

したがって、サツカラ−ゼの抑制剤単位／の９が減少す
るにつれて、ＥＤ５ｏは増加する。結果を下表Ｗに要約
する。表 町 驚くべきことには、式ＯＢ、ｍＢおよびＶの化合物によ
るでんぷんの分解の生体内抑制は、アミラーゼの抑制に
対して試験管内で見出されるデータを基準にして期待さ
れたものよりも非常に大きいので「期待した試料に対応
しない。

下表Ｖは、でんぷんの投与後断食ねずみについて測定し
た生体内データを与える。Ｐ 船 ○○○ 〉〉〉 ■！ ■！ ■・ 洲 題 栓 布 溝 Ｊ 総 三 りも１ 暖 や ゆ 母 え み さ 岬輩 上のデータからわかるように、試験管内および生体内の
両方におけるサッカラーゼ抑制の程度は分子量の明確な
関数であることが明らかであるが、アミラーゼ抑制は試
験内においてのみ分子量に依存し、これに対し生体内の
でんぷんの分解の抑制は分子量の低下とともに低下せず
、驚ろくべきことには一定にとどまる。

したがって、アミラーゼに対する生体内抑制活性は分子
量とともに低下するが、でんぷんの消化の抑制に対する
ＥＤｓｏ値は本発明によるすべての化合物について本質
的に同一である。

これを下表のに要約する。表 の したがって、驚ろくべきことには、式ＤＢ、ｍＢおよび
Ｖの化合物はスクロースとでんぷんの消化の抑制を同時
に達成でき、とくに正確な、予測できる特徴的な投与量
においてこれをなすことができる。

さらに、これらの化合物はグルコースの吸着に関して有
利な作用をもつ。

これは式ｍＢ（ｎ，＝２）の化合物についての式皿にお
ける次のデータから理解できる。表 血 この系列の高級メンバーの混合物を精製し、そして純粋
な形で使用すると、予期されない、より高い活性と特異
性さえも示す。

このことは表川こ記載するＱーアミラーゼおよびサッカ
ラーゼに対する試験管内抑制データと、下表血に与えた
純粋な化合物に対するデータとを比較することによって
確認できる。表 皿 前記結果は、Ｑ−アミラーゼ抑制剤の役割における４個
のグルコース単位をもつ化合物の高い活性を示す。

５および６個の単位をもつ化合物も、従来知られた配合
物に見出されるよりもかなり高い特異的な抑制活性を示
す。

７および８個のグルコース単位をもつ化合物の場合にみ
ることができるように、分子量増加に伴う抑制活性の低
下が存在するが、これらの化合物はやはりかなりの抑制
活性を示す。

サッカラーゼの試験管内抑制は、分子量に依存してその
逆であるようにみえる。４個のグルコース単位をもつ化
合物の特異的活性は２個のグルコース単位をもつ化合物
のほぼ１０分の１であり、これに比べて８個のグルコー
ス単位をもつ化合物の抑制活性はほんのわずかである。

これらの化合物は希釈せずに、たとえば粉末として、ま
たはゼラチンのケースに入れてまたは製剤組成物の賦形
剤と組み合わせて、投与できる。製剤配合物は比較的大
量のまたは比較的少量の抑制剤、たとえば０．１％〜９
９．５％を製薬上許容できる非議性の不活性賦形剤と組
み合わせて含有でき、そして賦形剤は１種または２種以
上の固体、半固体または液体の希釈剤、充てん剤および
／または非毒性の不活性な製薬上許容される配合助剤を
含有できる。この種の製剤配合物は好ましくは投与単位
、すなわち特定量の抑制剤を含有し、所望の抑制作用を
生ずるものに相当する投与量の数分の１ないし数倍に相
当する物理的に明確な単位の形態である。投与単位は１
、２、３または４倍以上の個々の投与量あるいは１／２
、１／３または１／４の個々の投与量を含有できる。個
々の投与量は、好ましくは、予定の投与計画に従い、１
または２以上の投与単位の投与のさし、所望の抑制作用
を達成するのに十分な量の活性化合物を含有し、そして
毎日の投与の全部、２分の１または３分の１または４分
の１を通常１回、２回、３回または４回毎日投与する。
投与量および投与計画は各特定場合において注意してバ
ランスさせるが、正当な根拠に基づく専門家の判断を適
用しかつ患者の年令、体重および健康状態ならびに病気
の種類とそのひどさを考慮して、投与量は通常約３０〜
約３×１びＡＩＵ′ｋｇおよび約１〜約１×１ぴＳＩＵ
／ｋ９体重／日である。ある場合において、投与量を少
なくして適切な治療効果が得られるが、他の場合にはよ
り多い投与量を必要とするであろう。経口投与は固体お
よび液体の投与単位、たとえば粉末、錠剤、１糖剤、カ
プセル、粒状物、けん濁液、溶液などを用いて行う。

粉末は物質を適当な大きさに粉砕し、これを粉砕した製
薬上の賦形剤と混合する。

食用炭水化物、たとえばでんぷん、ラクトース、スクロ
ースまたはグルコースを通常この目的に使用し、この場
合も使用できるが、非代謝性炭水化物、たとえばセルロ
ース誘導体を使用することが望ましい。甘味料、香味添
加物、保存剤、分散剤および染料もさらに使用できる。
カプセルは、前述の粉末混合物を使用し、すでに形成し
たゼラチンのケースに充てんすることによってつくるこ
とができる。

充てん前に、滑剤、たとえばシリカゲル、タルク、ステ
アリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは
固体のポリエチレングリコールを粉末混合物に加えるこ
とができる。ほう解剤または可溶化剤、たとえば、かん
てん、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムをこの混合
物に加えて、カプセルを取り入れるときの抑制剤の許容
性を改良できる。錠剤は、たとえば粗大または微細な大
きさの粉末をつくり、糟剤とほう解剤を加えることによ
ってつくる。

この混合物から錠剤を成形する。粉末混合物は、適当な
方法で微粉砕した物質を混合し、前述の希釈剤または他
の賦形剤を加えることによってつくる。必要に応じて加
えるほかの物質は、結合剤、たとえばカルボキシメチル
セルロース、アルギネート、ゼラチンまたはポリビニル
ピロリドン、溶解遅延剤、たとえば第４級塩、および／
または吸着剤、たとえばペントナィト、カオリンまたは
リン酸二カルシウムである。粉末混合物は結合剤、たと
えばシロップ、でんぷん糊またはアラビアゴム水溶液、
セルロース物質の溶液または重合体物質の溶液と一緒に
造粒できる。次いで、生成物を荒いふるいに通す。この
別法として、粉末混合物を錠剤形成機に通し、不均一な
形の生じた小片を粒子に粉砕できる。糟剤、たとえばス
テアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鍵油を生じ
た粒子に加えて、これらが錠剤形成ノズルへ粘着しない
ようにすることができる。次いで、このすべることがで
きるようにした混合物を、錠剤にプレスする。また、活
性化合物は自由流動性の不活性競形剤と一緒にし、造粒
工程または小片化工程をを省略して、直接錠剤にするこ
とができる。この生成物に透明または不透明の保護外殻
、たとえばシェラックの被膜、砂糖または重合体物質の
被膜およびワックスのみがいた外殻を形成できる。これ
らの被膜に染料を加えて、異なる投与単位を区別できる
。経口投与すべき配合物形態、たとえば溶液、シロップ
およびェリキシルを投与単位に調製し、特定量の配合物
が特定量の活性化合物を含有するようにすることができ
る。シロップは活性化合物を適当な香味剤を含有する水
溶液に溶かすことによって調製できる。ェリキシルは非
毒性のアルコール賦形剤を用いて得られる。けん濁液は
化合物を非議性の賦形剤中に分散させることによって調
製できる。可溶化剤および乳化剤、たとえばェトキシル
化ィソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレン
ソルビトールェステル、保存剤、および香味を改良する
添加剤、たとえばペパーミント油またはサッカリンなど
も加えることができる。投与法の説明はカプセル上に標
示できる。

さらに、たとえば、活性化合物を重合体物質、ワックス
などで取り囲み、活性化合物を遅延させて解放すること
によって、投与物を保護できる。これらの化合物の毒性
は、非常に低い。

最後の精製を行なわなくても、８５０雌ＩＵ′夕の活性
をもつ実施例８からの粗生成物は副作用を示さず許容さ
れる。これはこの明細書に記載される本発明の化合物の
場合に適用される。これらの化合物は、はつかねずみに
３４００００ＳＩＵ／ｋ９の投与量で経口的に投与した
とき、副作用を示さないで許容された。静脈内注射にお
いて、１０００庇ＩＵ／ｋ９ははつかねずみに副作用を
示さないで許容された。本発明による製剤組成物は、他
の製薬上活性な化合物、ことに他の経口抗脂肪症剤、た
とえば血液の砂糖のレベルを低下させる８ーシトロピッ
クスルホニル尿素譲導体およびビグアニドをも含有でき
る。

前述の製剤組成物のほかに、これらの活性物質を含む食
料も調製できる。

その例は、本発明の抑制剤の少なくとも１種の治療上有
効量を加えた、砂糖、パン、ジャガイモ製品、フルーツ
ジュース、ビール、チョコレートおよび他の砂糖菓子、
および保存製品、たとえばジャムである。 ′使用
する試薬および助剤のいくつかの説明：使用できるイオ
ン交換体、たとえば、市販製品のアンバーライトＩＲＡ
４１に１（陰イオン交換体）；アンバーライトＩＲＣ１
２０（日十型）（強い酸性の腸イオン交換体）；アンバ
ーライト２（ＨＣ０３‐型）（陰イオン交換体）：アン
バーライトＩＲＡ４１のＨ−（強い塩基性の陰イオン交
換体）：アンバーライトＩＲＣ５０Ｈ＋（弱酸性腸イオ
ン交換体）〔ローム・ァンド・ハース社の商標〕および
ドゥゥェックス（Ｄｏｗｅｘ）５０ＷＸ岬十（強２酸性
腸イオン交換体）〔ダウ・ケミカル社の商標〕。

使用できるセルロースに基づく陰イオン交換体は、たと
えば、シユライヘル・アンド・シユル（Ｓｃｈｌｅｉｃ
ｈｅｒａｎｄＳｃｈＵＩＩ社）からのＤＥＡＥセルロ
３ースである。

使用できるポリアクリルアミドゲルは、たとえばビオー
ゲル（Ｂｉｏ−ＧＩ）一Ｐ−２〔ビオーラツド・ラボラ
トリーズ（Ｂｉｏ−ＲａｄＬａｐｒａのｒｉｅｓ）の商
標〕である。

３マルトジン（Ｍａｌｔ
ｚｉｎ）は、デイアマルト（Ｄｉａｍａｌ）ＡＧ（西ド
イツ）から入手できる天然の麦芽抽出物である。レワポ
−ル（Ｌｅ肌ｐ。

ー■）は、バイヱル（Ｂａｙｅｒ）ＡＧ（西ドイツ）か
ら入手できる不特定４吸着樹脂である。クラーセル（Ｃ
Ｉｅｒｃｅｌ）はセカ（ＣＥＣＡ）社（フランス）から
入手できる炉過助剤である。

ＳＥ３０はへウレツト・パツカード（ＨｅｗｌｅｔｔＰ
ａｃｋａｒｄ）社から入手できるシリコーンェラストマ
−である。使用した下の微生物は、次の番号でアメリカ
ン・タイプ・力ルチヤー・コレクション（Ａｍｅｎｃａ
ｎＴｙｐｅＣｕｌｔｍｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）に保管
されている。

菌 株 ＡＴＣＣＮｏ． ＳＥ５０（Ｃ母９６１，７０） ３１
０４２ＳＥ１８（Ｃ斑９５７，７０）
３１０４１ＳＥ８２（Ｃ斑６１５，７１）
３１０４５ＳＥ５０／１３（Ｃ斑６１４．７１
） ３１０４３ＳＥ５０／１１０（Ｃ既
６７４，７３） ３１０４４実施例 １５
．０％のでんぷん、１．０％のイースト抽出物および０
．２％のＫ２ＨＰ０４の組成の栄養溶液の８そを含むガ
ラス発酵器を３日経過した振とうフラスコの函株ＳＥ５
０／１３（Ｃ斑６１４．７１）で接種し、この混合物を
強くかきまぜかつ通気しながら２が０で３日間培養し、
１０５０００ＭＵ／磯を含有する培養液を得る。

２０ｑｏに冷却後、この発酵液の６そを半濃厚ＨＮ０３
でｐＨ２．５に調節し、３０夕のカーボラフィン（Ｃａ
ｒｂｏｒａｆｆｉｎ）活性木炭を加え、この混合物を１
０分間かきまぜる。

次いで、これを１０００仇ｐｍで１５分間遠心し、透明
な淡黄色の上澄み液をＮＨ３で中和したのち５００私に
濃縮する。この５００の‘の濃縮物を２００夕のアンバ
ーライトＩＲＡ４１に１−とともに４５分間かきまぜ、
炉過し、５分の４容積＝４００の【のメタノールを炉液
に加えて、高分子量のでんぷん分解生成物を（まだ存在
する活性木炭の残留物と一緒に）沈殿させる。この混合
物を５００比ｐｍで５分間遠心する。８５０の‘の上澄
み液を４その乾燥アルコールに滴々加え、その間かきま
ぜを強く行う。

白色の綿様沈殿を炉遇し、乾燥アルコールで２回、エー
テルで２回洗い、５０ｑｏで真空乾燥する。収量：１０
×１びＡＩＵ／夕を含有する白色粉末。この調製物を以
下のいくつかの実施例において使用する。薄層プレート
上の酵素の抑制 薄層クロマトグラフィーにより発酵からの最終生成物お
よび配合物の組成を評価するため、１ムの発酵液、また
は１ムタの配合物をすぐに使用できるシリカゲルのフィ
ルム（ＳｃｈｌｅｉｒａｎｄＳｃｈｏｌｌ社、Ｆ１５０
項塾）に施こし、ｎーブタノール／ェタノールノ水＝５
０／３０／２０中で２回展開する。

サッカラーゼ抑制の染色のため、展開しよく乾燥したプ
レートを酵素ゲルで頃露し（２０の‘／２０×２０伽の
プレート）、このゲルを放置して固化する。次いで、こ
のプレートを湿ったチャンバー内で５分間予備培養し、
次いで基質ゲルで飽和するまで頃霧する。この第２層の
ゲルが固化したのち、プレートを湿ったチヤンバーに入
れ、４ぴ０で培養する。抑制染色（淡いスポット、赤か
つ色のバックグラウンド）が６０〜９０分で発現する。
最適 Ｊの色が発現したときこの試験を停止し、その上
に位置するかんてん層をもつプレートを、ブロワーを用
いて温い空気で乾燥する。ゲルの調製 酵素ゲル：１．５夕のアガロース（しｌｎｄ瓜ｔｒｉｅ
′Ｂｉｏｌｏｇｉｑ肥Ｆｒａｎｃａｉｓ）をｐＨ６．
０の０．２モルのマレイン酸ナトリウム緩衝溶液ｌｏ０
似中にけん濁し、次いで沸とうして溶かす。

この透明なアガロース溶液を５０ｑ０に冷却し、２５０
一そのトリトン×−１０礎容液（２夕のトリトン×−１
００十８夕の分析銘柄の２エタノール）と０．５の‘の
ジアニシジン溶液（２０のｏのジアニシジン／１の‘の
アセトン）をかきまぜながら加える。ゲルを使用する直
前、１泌のＧＯＤ／ＰＯＤ試薬（１２．５の９のグルコ
ースオキシダーゼ、純度グレード１、Ｂｏｅｈｒｊｎｇ
ｅて社、２Ｎｏ．１５４２３および２．５雌のパーオキ
シダーゼ、純度グレート□、節ｅｈｒｊｎ鞍ｒ社、ＮＯ
．１５３０２、５泌のマレィン酸塩緩衝溶液に溶かした
もの）と豚の小腸からの４〜５単位のサツカラーゼを加
える。このゲルは噴霧時にノズル中で固化するので、暖
姦３時まで５０ｑｏに保持しなければならない。基質ゲ
ル：０．５夕のアガローズをｌ００の‘のＰＨ６．０の
マレィン酸ナトリウム緩衝溶液中にけん濁させ、沸とう
により溶解させる。次いで、この溶液を５０ｑｏに冷却
し、１００ｒそのトリトン（２夕のト３リトンＸ−１０
０十８夕の分析銘柄のエタノール）を加え、１夕のスク
ローズ（ＳｅｒｖａＮｏ．３５５７９）を加える。スク
ローズが溶けたのち、ゲルはすぐに使用できる。アミラ
ーゼ抑制染色のため、展開し、乾燥した薄層クロマトグ
ラフィープレートをアミラーゼゲル（２０柵／２０×２
０伽プレート）で噴霧し、ゲルを放置して固化させる。

室温で５分間予備培養したのち、ゲル層をもつプレート
を０．５％強度のでんぷん溶液（１夕のでんぷん、Ｍｅ
ｒｃｋＮＯ．１２５２、２００の‘の０．２モルのグリ
セロホスフヱート緩衝溶液／０．０１モルのＣａＣ１２
、ｐＨ６．９中に沸とうにより溶かしたもの）中に入れ
、そのまま溶液をかきまぜながら４０ｏｏに２分間保持
する。次いで、このプレートを蒸留水でよくすすいで、
分解しなかったでんぷんを染色できるようにし、希薄１
２溶液（４凧【の１２原料溶液／５００肌のＱＯ；１２
原料溶液：２．２夕の１２十１００の‘の日２０２に溶
けた４．４夕のＫＩ）中に浸糟する。染色は約１分後最
遜である。このプレートは青色のスポットが急速にあせ
るので、直ちに写真に撮る。アミラーゼゲルの調製 １夕のアガロースを１００ＭのＰＨ６．９の０．２モル
のグリセロリン酸ナトリウム／０．０１モルのＣａＣＩ
の緩衝溶液に、１００ｏｏで溶かし、５０午０に冷却後
、１００ｒそのトリトンＸ−１００（２夕のトリトンＸ
−１００十８夕の分析銘柄のエタノール）を加える。

頃霧直前に、１００山そのアミラーゼ結晶けん濁液（１
０の夕の豚の胃のアミラーゼ／泌の飽和硫酸アンモニウ
ム溶液、恥ｅｈｒｉｎ袋ｒ社、Ｎｏ．１５０１７）を加
える。実施例 ２ ４％のでんぷん、２．４％のグルコース、０．９％のカ
ゼイン加水分解物および０．９％のイースト抽出物から
なり、ＮａＯＨでＰＨ７．６とし、これに０．４％のＣ
ａＣＱを加え、１２１℃で３０分間滅菌した１２０叫の
栄養溶液を含む１その円すし、フラスコを、２％のでん
ぷん、１％のグルコース、０．５％のカゼイン加水分解
物および１％のイースト抽出物からなり、ＮａＯＨで軸
７．２とし、これに０．４％のＣａＣ０３を加え、１２
１℃で３■ご間滅菌した栄養溶液中で生長させた菌株Ｓ
Ｅ８２（Ｃ斑６１５．７１）の予備培養液３の上で接種
し、この混合物を円形の振とう振動機上で２が０におい
て５日間培養すると、１２２０００ＡＩＵ／叫を含有す
る培養溶液が得られる。

処理するため、１２００仇ｐｍの遠心により菌糸体を合
わせた培養溶液から分離し、培養溶液の炉液の３００叫
のｐＨを半濃厚ＨＮ０３で２．５とし、この混合物を分
析級の活性木炭２．５夕とともに１０分間かきまぜる。
１２００仇ｐｍで木炭を分離したのち、３００の‘のメ
タノールを、ＩＯＮのＫＯＨでｐＨ６に中和してあるこ
の溶液に加え、混合物を短時間放置し、１２００仇ｐｍ
で沈殿を除去する。

上澄み液を３そのエタノールに滴々加え、この混合物を
短時間放置したのち、沈殿を１２００比ｐｍで単離し、
沈殿を無水エタノールで２回、エーテルで１回洗い、真
空乾燥すると、７．４５×１ぴＭＵ／夕を含有しかつｎ
，十ｎ３＝４以上のグルコース単位の化合物を９５％よ
り多く含有する生成物２．２３夕の生成物が得られる。
実施例 ３３．５％のグルコース、２％のでんぷん、０
．５％のカゼイン加水分解物、１．３％のイースト抽出
物、０．３％のＣａＣ０３および０．３％のＫ２ＨＰ０
４の組成をも Ｊち、滅菌前風７．靴こ調節し、１２１
００で３０分間滅菌した１２０の‘の栄養溶液を含有す
る１そのコニカルフラスコを、３％の大豆粉末、３％の
グリセリンおよび０．２％のＣａＣ０３からなる栄養溶
液中の菌株ＳＥ５０／１１０の予備培養液６肌【で接種
し、この混合 ′物を円形の振動振とう機上で２４００
において３〜４日間培養すると、１５３０００山Ｕ／の
【と１２２００ＳＩＵ′夕を含有する培養液が得られる
。

１その培養溶液をＨＮ０３でｐＨ２．５に調節し、５夕
の活性木炭とともに１び分間かきまぜ、次いでこの ２
混合物を５００仇ｐｍで３０分間遠心した。

次いで、上澄み液を２５夕のアンバーライトＩＲＡ４１
０（ＯＨ−型）の添加により中和した。中性の上澄み液
を回転蒸発器により１００叫に濃縮し、１００Ｍのメタ
ノ−ルを加え、この混合物を炉遇した。炉液を２その２
乾燥アルコール中にかきまぜながら入れ、分離した沈殿
を炉遇し、アセトンとエーテルで３回洗ったのち、真空
乾燥した。収量：５×ｌびＡＩＵ／夕を含有し、主にｎ
，十−＝少なくとも４グルコース単位である化合物を含
有 ３する１４夕の白色粉末。実施例 ４ ０．５％のでんぷんを使用する以外は実施例３による方
法を反復すると、４日間の発酵後４００００ＡＩＵと１
８４ＳＩＵ／の‘を含有する培養液が得られる。

この培養液は、少なくとも１つのグルコース単位をもつ
本発明による化合物の混合物を含有する。実施例 ５ ３％グルコース、０．６％のカゼイン加水分解物、１．
６％のイースト抽出物、０．３％ＣａＣＱおよび０．３
％のＫ２ＨＰ０４の組成をもち、滅菌前にＫＯＨでＰＨ
７．８とした１２０の‘の栄養溶液を含む１そのコニカ
ルフラスコを、実施例３による菌株ＳＥ５０／１１０（
Ｃ既６７４７３）の予備培養液で接種し、この混合物を
円形振動振とう機上で２４午０において４日間培養する
と、１０８０鷹ＩＵ／そを含有し、主として１個のグル
コ−ス単位をもつ本発明による化合物を含有する培養液
が得られる。

１３００比ｐｍで菌糸体を除去した培養液の炉液５そを
半濃厚ＨＮ０３で対２．５に調節し、５５夕の活性木炭
（、、Ｍｅｒｃｒ）と２００夕のクラーセル（ＣＩａｌ
ｃｅｌ）とともに１８分間かきまぜた。

固体を炉遇したのち、炉液をアンモニアで柵７に中和し
、炉液を１．５のこ濃縮し、５倍量のエタノールを加え
て沈殿を生成させた。生じた綿状沈殿を１２００仇ｐｍ
において連続流ローターにより分離し、黄味上澄み液を
１５０の‘に濃縮し、低速度で遠心して少量の未溶解物
質を分離した。この溶液の５０の‘をアンバーライトＩ
Ｒ−１２０（日十型）のカラム（３０×３０仇舷：３０
の‘の日２０／時）に導入した。不活性サッカラィドと
吸着されなかった抑制作用をもつある量の成分を含有す
る溶鱗が全部で３００の‘集められたのち、約４００の
‘の比０を含むガラスビーカーに前記の交換体を移し、
濃アンモニアを加え、その間かきまぜ、ｐＨｉｌ．５と
した。さらに３び分間かきまぜたのち、交換体を分離し
たのち、溶液をその容積の１／２０１こ濃縮したのちア
ンバーライトＩＲＡ−４１０（ＨＣ０３‐型）を含むカ
ラム（２０×１５仇舷）に通して炉適し、約５００の‘
の漆離液を３０の‘／時の速度で集め、この溶離液を濃
縮し、凍結乾燥すると、１．３夕の粗生成物が得られた
。さらに精製するため、粗配合物をＢｉｏ−ＧＩ Ｐ−
２、１００〜２００メッシュ（Ｂｉｏ−Ｒｅｄ社）で分
画した。

直径５０柵、長さ４５比凧の、流速４０の‘／時の日２
０で運転されるカラムをこの目的に使用し、１０の‘の
ラクションを集めた。アントロン試験により炭水化物に
ついて、そしてサッカラーゼ抑制試験により抑制作用を
もつ成分について、フラクションのすべてを試験した。
サッカラーゼ抑制剤を含有するフラクションを、実施例
１による薄層クロマトグラフィーにより検査して、それ
らの個々の成分の含量を測定した。１グルコース単位を
もつ化合物を含有するフラクションを合わせ、濃縮し、
凍結した。

０．３×１ぴＡＩＵ／夕と３０００庇ＩＵ／夕を有する
物質３５の９が得られた。

実施例 ６ ５％のでんぷん、１％のイースト抽出物およびクション
を集める。

全炭水化物含量（Ｅ脚における消失としてアントロン試
験の形態の）、サッカラーゼ抑制剤およびアミラーゼ抑
制剤をすべてのフラクションについて定量する。さらに
フラクションを薄層クロマトグラフィー（実施例１に従
う酵素抑制染色）により試験する。４〜６グルコース単
位をもつ化合物を含有するフラクションを集め、真空濃
縮して１０地とし、濃縮物を２００の‘の乾燥アルコー
ルに加えて生成物を沈殿させる。

沈殿を遠心分離し、アセトンとエーテルで洗い、真空乾
燥すると、４．０夕の粗抑制剤、０．２夕の４〜６グル
コース単位をもちかつ１７．５×１ぴＡＩＵ／夕および
８５０庇ＩＵ′夕を含有する化合物が得られる。３単位
をもつ化合物を含有するフラクションを同様に処理し、
２００ｍ‘のアセトンを用いて沈殿を行うと、４．６夕
の粗抑制剤、０．１夕のｎ，十山＝８であり、１．４×
１ぴＡＩＵ／夕と２１０００ＳＩＵ／夕を含有する化合
物が得られる。

ｎ，十ｎ２＝２である化合物を含有するフラクションか
ら、０．９夕のｎ，十山＝２単位であり、０．３×１び
Ａｍ／夕および粥００雌ＩＵ′夕を含む化合物が単離さ
れる。実施例 ９おのおのが７．５％のＭａｌｔｚｉｎ
、０．３％のカゼイン加水分解物、０．７％のイースト
抽出物、０．３％のＣａＣ０３および０．３％のＫ２Ｈ
Ｐ０４の栄養溶液８そを含む３つの４・型発酵器を、菌
株ＳＥ５０／１１０（ＣＢＳ６７４．７３）の予備培養
液（実施例３に従って・ 得られたもの）５％で接種し
、２４ｑｏで５日間培養すると、７＄ＩＵ／の‘を含有
し、主としてｎ，十山＝２の化合物を含有する培養液が
得られる。

遠心（３００仇ｐｍ、３０分間）して菌糸体を除去した
のち、６７０００Ｓｍ′〆を含有する濃かつ色の培養液
２０．５そが得られる。ｐＨをＨＮ０３で３．５に調節
したのち、６夕のＬｅｗａｐｏｌ（Ｃａ９２２１、粒度
０．３５肌、Ｂａｙｅｒ社）＝１．２３ｋ９の比ｗａｐ
ｏｌを加えて脱色を行う。２０分間炉過したのち、この
混合物をＳｅｉｂＫ３フィルターで炉遇する。

脱色した培養溶液ＮＨ３で中和する（１８．５そ、６７
０００ＳＩＵ′そ）。次いで、２０夕の活性木炭＝３７
０夕をかきまぜながら加えて活性化合物を吸着し、この
混合物を３び分間かきまぜる。次いで、これをフィルタ
ー助剤ＣＩａｒｃｅｌの層でカバーしたＳｅｉＣＫ３フ
ィルターで炉過する。炉液（１７．５そ、３６００ＳＩ
Ｕ／そ）を廃棄する。木炭残蟹物を２その蒸留水日２０
で３回洗う。木炭から活性化合物を脱着するため、木炭
を各場合８０％強度のアセトン１そとともに３回連続し
て１５６間かきまぜ、ｐＨを濃ＨＣＩで２．５とする。
脱着生成物を合わせる（２．４〆、３７１０００ＳＩＵ
′〆）。２０夕のＤｏ肥ｘＨ＋／〆（Ｓｅｒｖａ社から
のＤｏｗｅｘ５０Ｗ×４、日十）＝４６夕のＤｏｗｅｘ
をこの脱着生成物に加え、混合物を２■｝間かきまぜる
。

次いで、樹脂を炉適し（Ｄｏｗｅｘフラクション１）、
少量の７５％強度のアセトンですすぐ。炉液と洗液（３
夕＝２１５０００ＳＩＵ／そ）を、鮒７となるまで、６
０夕／そのアンバーライトＩＲＡ４２０（ＯＨ‐型）（
Ｓｅｗａ社）とともにかきまぜる。次いで、この混合物
を炉過し、７２夕のＤｏ雌ｘＨ★を炉液（２．８〆、２
１９０００ＳＩＵ′そ）に加え、この混合物を２０分間
かきまぜる。この時間中、アンバーライトＩＲＡ４１の
Ｈ‐を充てんした多孔性ナイロンバッグを混合物中につ
るすことによって、ｐＨを３．０に保つ。次いで、Ｄｏ
ｗｅｘを炉過し（Ｄｏｗｅｘフラクション０）、炉液（
２．６夕、２７０００ＳＩＵ′そ）を廃棄する。Ｄｏｗ
ｅｘフラクション１およびロのおのおのを独立に柵３．
５の７５％アセトンで３回洗い、次いでおのおのを０．
６％ＮＨ３の１００の【で３回（Ｄｏｗｅｘフラクショ
ン１）または１５０の上で３回（比ｗｅｘフラクション
ロ）で脱着する。

アンモニアの量がＤｏｗｅｘ樹脂を中和するのに不十分
である第１の脱着に対して、ｐＨメーターを使用し濃Ｎ
Ｈ３の添加によりｐＨ９に調節する。

Ｄｏｗｅｘフラクション１からの３脱着生成物とＤｏｗ
ｅｘフラクションロからの３脱着生成物を独立に合わせ
、回転蒸発器でほとんど濃縮乾固し、残留物を５０の上
の日２０にとり、柵〆ーターを用いてＨＣＩで−３〜４
とし、５０の‘のメタノールを加える。これらの溶液を
かきまぜながら１．５その無水アセトンに滴々加え、析
出した沈殿を炉遇し、アセトンで３回、エーテルで１回
洗う。生成物を真空乾燥する。収量：フラクション１
６．５夕 ２５００庇ＩＵ／タフラクションロ １２．
８夕 ３６００庇ＩＵ／タフラクション１およびローま
、抑制作用をもつ構成成分として、主にｎ，十＆＝２の
本発明による化合物と少量のｎ．十山＝３の化合物を含
有する。

下表は、連続工程における配合物のサッカラーゼ抑制活
性を与える。０．２％のＫ２ＨＰ０４の組成物をもつ１
２０の‘の栄養溶液をおのおの含む１そのコニカルフラ
スコを、実施例３に従う予備培養液２の‘のおのおので
接種し、２８００で３時間培養すると、アミラーゼを次
の収量で含有する培養液が得られる。

菌 株 ＡＩＵ／の‘ ＳＥ５０（Ｃ茂８６１．７０） ３７
０００ＳＥ５０／１３（Ｃ既６１４，７１）
１０９０００ＳＥ５０／１１０（Ｃ斑６７４，７
３） ５３５００そして、それらは主と
して４以上のグルコース単位の化合物を含有する。

実施例 ７ １．３％のマルトース、３．５％のグルコース、０．５
％のカゼイン加水分解物、１．３％のイースト抽出物、
０．３％のＣａＣ０３および０．３％のＫ２ＨＰ０４の
組成 ′をもつ１２０肌の栄養溶液をおのおの舎む１そ
のコニカルフラスコを、実施例３に従う予備培養液２の
（で接種し、異なる菌種で２４００において円形振動振
とう機上で４日間培養すると、次の収量が得られる。

２菌
株 ＳＩＵー秋 ＡＩＵイのＳＨ５０（ＯＢＳ９６１．
７０）２５ ５８０ＳＨ５ｏ／１３
，４．８ １．４６０（ＯＢＳ６１４．７１）ＳＨ
／１１０ ５７．９ ７５５（ＯＢＳ
６７４．７３）そして、これらは主として４以上のグル
コース単位をもつ化合物の混合物を含有する。

実施例 ８ ３．５％のグルコース、２．５％のマルトジン（Ｍａｌ
ｔｚｉｎ）、０．５％のカゼイン加水分解物、１．３％
のイースト抽出物、０．３％のＣａＣ０３、０．３％の
Ｋ２ＨＰ０４と０．１％の消泡剤の組成をもつ栄養溶液
１００夕を含有する発酵器を、実施例３に従う予備培養
液の５そで接種し、この混合物をかきまぜかつ通気しな
がら２４ｏｏで５日間培養すると、７３０００ＳＩＵ／
そを含有し、そして主としてｎ，十山＝２の本発明に従
う化合物を含有する培養液が得られる。

菌糸体を含む発酵液の９０〆を、ｐＨメーターを用いて
濃ＨＮ０３でｐＨ２．５とし、９０Ｍ（＝１％）の活性
木炭（Ｍｅｒｃｋ）を加え、その間かきまぜ、生成した
染料を吸収させる。

この混合物をＩＵ８分間かきまぜ、菌糸体と木炭を３０
０仇ｐｍの遠心により分離し、最後に、３ｋ９のＣＩａ
ｒｃｅｌを加えた上燈液を圧力炉過器により炉遇する。
６０００＄ＩＵ／そのＳｍ含量の黄かつ色の透明炉液６
１〆が得られる。

この炉液を濃ＮはでｐＨ７とし、活性化合物を吸着する
ため、１３００夕（２％）の活性木炭（Ｍｅｒｃｋ）と
ともに３０分間かきまぜる。この混合物を圧力炉過器で
炉過し、活性木炭の沈降物を１０その蒸留水で３回洗う
。次いで、木炭をプレスしてよく乾燥し、各場合ＰＨ２
．５の５０％アセトンの３×４そ中で１５分間かきまぜ
、木炭から活性化合物を脱着する。木炭を炉適して分離
したのち、アセトン中の脱着生成物を合わせる。合わせ
た脱着生成物を回転蒸発器内で２５０叫に濃縮し、等容
積（２５０の【）のメタノールを加え、この混合物をフ
ルーテッド（ｆ１ｕにｄ〉フィルターで炉過する。炉液
（４８０泌）を５そのアセトンに、はげしくかきまぜな
がら、滴々加える。分離した沈殿を炉過し、アセトンと
エーテルで３回洗う。次いで、３５ｑ○で真空乾燥する
。収量：８５００ＳＩＵ′夕を含有する２３０多〇２５
夕の上記粗生物を１その日２０に溶かし、この溶液を３
００夕のＤｏｗｅｘ■５０Ｗｘ岬（２００〜４００メッ
シュ）とともに３０分間かきまぜる。

樹脂を炉去し、２その０．００１ＮのＨＣＩで３回すす
ぐ。次いで、洗ったＤｏｗｅｘを５００のとの日２０中
にけん濁させ、このけん濁液のｐＨを２５％のＮＨ３の
添加によりｐＨメーターを用いて９．０とする。次いで
、生成物を各場．合５００叫の０．６％Ｎはで２回脱着
し、脱着生成物を合わせ、回転蒸発器で１００叫に濃縮
する。この濃縮物を脱色し、２ 夕のＤＥＡＥセルロー
ス（ＳｃｈｌｅｉｃｈｅｒａｎｄＳｃｈｕＵ、Ｎｏ．２
０３５、０．６メガ当量／夕）とともに５分間かきまぜ
、次いでこの混合物を遠心する。等容積（１００肌）の
エタノールを淡黄色の上燈液へ加え、次いでこの混合物
を２そのアセトンに滴々加え、その間はげしくかきまぜ
る。沈殿を炉過し、ァセトンとエーテルで洗い、３５ｑ
０で真空乾燥する。さらに精製するため、４．０夕の抑
制剤を０．５タづつＢｉｏｇｅＩＰ−２でゲル炉過する
。

この目的に対し、各場合０．５夕の配合物を１０の‘の
日２０に溶かし、直径６肌、長さ９５肌のＢｉｏｇｅＩ
Ｐ−２カラム（２００〜４００メッシュ、Ｂｉｏ−Ｒ
ａｄ社）に導入する。流速８０の‘／時の水中で、展開
を行う。１２肌のフラ収量 容債１）ＳＩＵ／１ 全ＳＩ．Ｕ ＳＩＵ収
率紫１）培養溶液 ２０．５
６７．ｏｏｏ ｌ．３７３．５００ １００
２）Ｌｅｗａｐｏｌで脱色後 １０．５
６７．ｏｏｏ ｌ．３０６．５００ ９５
３）活性木炭で吸着後 １８．５
３．６ｏｏ ６６．６０１０ （４．８廃棄）４
）第１脱着生成物 ０・７ ７４２‐０００
５１９‐４００ ３７８き５）第２
０１９ ３２９‐０００ ２９６‐１００
）８８３５００２‐１・６ヲ６４‐４６）第３ 〃
０．８ ８５．０００
６８．０００） ５．０）７）混合脱
着生成物（４−６） ２．４ ３７１．００
０ ８９０．４００ ６４．８８）第１回のＤ
ｏｗｅｘによる吸着後 ３．０ ２１５．０００
６４５．０００９）ＩＲＡ ＯＨ−で中和後
２．８ ２１０．０００ ６１３．２
００１０）第２回のＤｏｗｅｘによる吸着後 ２．
５ ２７．０００ ６７．５００ （４．９
廃棄）１１）ＤＯｗｅｘフラクション１からＮＨ３
０．２９ ６８２．０。

〇 １９７．７８○ １４．４）で脱着し
た合わせた生成物
）１２）Ｄｏｗｅｘフラクション０からＮＨ
３
）６０．９で脱着した合わせた生成物 ０
．４５１．４１９．０００ ６３８．５５０
４６．５）１３）沈殿フラクション１
６．５夕 ２５．０００イタ １６２．５００
１１．８）沈殿フラクションＤ １２
．３夕 ３６．ｏｏｏ汐 ４４２．８ｏｏ ３．
２．２ろ４４・０実施例 １０実施例１に記載したタイ
プの２００夕の配合物を９４０泌の蒸留水と６０の‘の
濃Ｈ夕０４に溶かし、この溶液を還流下に４時間温める
（内部温度：難〜１００００；油俗温度：１０４午０）
。

１０夕の活性木炭（Ｍａｒｃｋ、２１８母型）を冷却し
た黒かつ色の溶液に加え、この混合物を１時間かきまぜ
る。

次いで、活性木炭を炉過し、水洗し、炉液を約２５０の
【の１帆のＫＯＨでＰＨ７〜８とする。溶液を５０夕の
活性木炭とともによくかきまぜる。木炭を炉遇し、２そ
の水で洗い、炉液を廃棄する。脱着のため「木炭を２そ
の３０％強度のアルコールとともに一夜熟成する。最後
に、木炭を炉過し、アルコール溶液を回転蒸発器で濃縮
する。残留物：６．２タこの粗生成物（６．２夕）を５
００叫の水に溶かし、溶液を３０夕のアンバーライトＩ
Ｒ１２０（日田型）とともに１時間注意してかきまぜる
。交換体を炉遇し、蒸留水で炉液が中性になりグルコー
スがなくなるまで洗う。次いで、交換体を１０００の【
のり○中で１５の‘の２５％程度のＮＨ３とともに一夜
かきまぜ、分離し、廃棄する。炉液を回転蒸発器中で濃
縮する。残留物：３．７夕。さらに精製するため、セル
ロースのクロマトグラフィーを行う。

交換体から脱着された４．５夕の物質を、長さ１の、幅
２．５肌のセルロースを詰めたカラムに導入する。まず
、５：１エタノール／日２０を流れ剤として使用し、次
に３：１エタノール／日２０を使用して、ｎ，＝１の本
発明による化合物を溶鱗する。各４の‘のフラクション
を、２０トロピツクノ分のドリップ速度で取る。個々の
フラクションを薄層クロマトグラフィーにより検査する
。濃縮後、フラクション４７〜８５はグルコース単位が
１である本発明による淡かつ色の化合物１．６夕を与え
る。定量的に、色を生成する不純物はその役割を演じな
い。ｎ，十山＝１の化合物は、強酸性のイオン交換体を
用いて精製工程をバッチ法ではなくカラムにより行うと
、無色の樹脂として得られる。実施例 １１ 実施例１に記載するタイプの調製物２００夕を９４０の
Ｚの蒸留水と６０泌の濃Ｈ２Ｓ０４に溶かし、この溶液
を還流下に１５分間温める（内部温度：聡〜１００℃：
油格温度：１４０００）。

１０夕の活性木炭（Ｎはｒｃｋ、２１８母型）を冷却し
た黒かつ色の溶液に加え、混合物を１時間かきまぜる。

次いで、活性炭を炉過し、水洗し、炉液を約２５０の‘
の１０ＶのＫＯＨでｐＨ７〜８とする。この溶液を５０
夕の活性木炭とともに１時間かきまぜる。活性炭を炉過
し、２その水で洗い、炉液を廃棄する。脱着のため、木
炭を２その３０％強度のアルコ‐‐ルととも一夜熟成す
る。最後に木炭を炉過し、アルコール溶液を回転蒸発器
中で濃縮する。残留物を１５の【の日２０にとり、５０
夕のアンバーライトＩＲ１２０（Ｈ＋型）を満たしたカ
ラムに導入する。

この溶液を３滴／分の速度で吸収させ、樹脂を水（１２
滴／分）ですすぎ、非塩基性構成成分のすべてを除去す
る。次いで、塩基性生成物をカラムから０．５％強度の
ＮＨ３で溶離し（１２商／分）、水溶液を回転蒸発器で
蒸発乾固する。残留物：４．１夕。

この残留物の２夕を少量の水に溶かし、この溶液をＳｅ
ｐｈａｄｅｘＧ−１５を満たしたカラム（高さ：２００
肌；ぐ：３０肌）に導入する。

生成物を水で綾擁する。２の‘のフラクションを２の【
／時の速度でとる。個々のフラクションを薄層クロマト
グラフィーにより検査する。フラクション８５〜９４は
ｎ・十ｎ２＝２であり、５０００のＩＵ／夕の特異活性
をもつ化合物２８０の９を与える。実施例 １２ 軸６．９であり、ＣａＣ１２に関して１ミリモルである
、２ミリモルのグリセロリン酸ナトリウム緩衝液６０叫
中の実施例１記載の配合物を、Ａｓｐｅｒｇｌｌｕｓ種
（ＳＥＲＶＡＮｏ．１３４１８）から得られたＱーアミ
ラーゼ１夕とともに、連続的にかきまぜながら、３７０
で１２畑時間培養し、この混合物を最後に１００００に
５分間加熱し、不溶性物質を４００仇ｐｍで遠心分離し
、３５０＄ＩＵ／夕および２×１ぴ山Ｕ′夕を含有する
１．９夕の生成物が溶液を凍結乾燥したのち得られる。

この生成物を実施例１におけるように薄層クロマトグラ
フィーおよびサッカラーゼ抑制染色により検査すると、
生成物は抑制作用をもつ化合物として主としてｎ・十ｎ
２＝１、２および３の本発明の化合物を含有することが
わかる。実施例 １３ ＰＨ４．８の２０ミリモルの酢酸塩緩衝液３０の‘中の
実施例１記載のタイプの配合物２夕を、さつまし、もか
ら得られた３−アミラーゼ（ＢＯＥＨＲｍＧＥＲ１５４
７１）ｉ．２５の９とともに連続的にかきまぜながら３
５ｑ０で１２餌時間培養し、この混合物を最後に１００
℃で５分間加熱し、不落性物質を４００仇ｐｍで遠心分
離し、１８０＄ＩＵ／夕と３．８×１ぴＡＩＵ／夕を含
有する生成物１．５夕が凍結乾燥後得られる。

この生成物を実施例１記載のように薄層クロマトグラフ
ィーおよびサッカラーゼ抑制染色により検査すると、こ
の生成物はｎ，十ｎ２＝２および３の本発明の化合物を
含有することがわかる。実施例 １４０．１％のＫ２Ｈ
Ｐ０４、０．２％の（ＮＨ４）２Ｓ０４、０．０５％の
ＭｇＳ０４、０．０５％のＫＣ１、０．０１％のＦｅＳ
０４および２％の実施例１記載の配合物の組成の栄養溶
液２５叫を含む２００の上のコニカルフラスコを菌株偽
ｐ．ｎｉｇｅｒＡＴＣＣＩ１３９４のほうしけん濁液で
接種し、こ．の混合物を円形振動振とう機上で２が０に
おいて培養し、山Ｕ力価は６日後２１００００Ａｍ／の
‘から５３０００ＡＩＵ／私に、１０日後２１３００Ａ
ＩＵ／の‘に低下する。

同時に、Ｓｍ／泌含量は７．０から７２ＳＩＵ／の‘に
増加する。前記ほうしけん濁液で１０日間培養した溶液
２０の‘を３００比ｐｍで３０分間遠心して、菌糸体を
分離する。

１５机の上澄み液（７２００頂ＩＵ／夕）を２夕のアン
バーライト瓜Ｃ５０日十および１夕のアンバーライトＩ
ＲＡ４１００Ｈ−とともに３０分間かきまぜることによ
って、塩類を除去する（伝導度２のＳ・物‐１より小）
。この混合物を炉遇し、炉液を０．００１ＮのＨＣＩ中
のＤｏｗｅ力日十で平衡化したカラム（ＣＩ肌×１０伽
）中に５の‘／時の速度で流す。次いで、Ｄｏｗｅｘを
２００の【の０．００１ＮのＨＣＩですすぐ。脱着のた
め、０．６％のＮＨ３溶液をカラムに送入し（１０肌【
／時）、５の‘のフラクションを集める。サツカラーゼ
抑制活性を含有するフラクションを合わせ、回転蒸発器
で２の‘に濃縮し、２の‘のメタノールを加える。この
溶液のｐＨを３〜４に調節し、この溶液を１００の‘の
アセトンに滴下して沈殿を生成させる。沈殿を炉過し、
真空乾燥する。収量：２８０００Ｓｍ／夕を含有し、ｎ
，十−＝２および３の化合物からなるもの２ｍ９。ｎ，
十山＝２の純粋化合物を、Ｂｉｏ−ＧＩ Ｐ−２を含む
力ラムに通ずるゲル炉週により、実施例８記載のように
、この生成物から単機する。ｎ，十ｎ２＝２、６０００
雌ＩＵ／夕の化合物７雌が得られる。実施例 １５ 実施例５に記載するタイプの配合物バッチからｍ３００
仇ｐｍの菌糸体の遠心分離から得られ、１３０００Ｓｍ
／夕の活性をもつ培養炉液２〆を、２．５部のアンバー
ライトＩＲＣ−５０（日十型）および１部のアンバーラ
ィトＩＲＡ−４１Ｃ（ＯＨ‐型）の混合物５００夕とと
もに１時間かきまぜて塩舎量を減少させる（炉液の伝導
度：約１０仇Ｓ・仇‐１）。

イオン交換体を分離し、溶液を濃縮して１００の上より
多少少ない量にし、２０００仇ｐｍで１５分間遠心して
、未溶解の構成成分を除去する。上澄みを１００の‘と
し、ここで伝導度は３．５のＳ・抑‐１であり、さらに
精製するため、Ｐ−セルロース（ＳＥＲＶＡＮｏ，４５
１３０：既知の方法により製造し、５ミリモルのリン酸
アンモニウム緩衝溶液；−５．５中で平衡化する）を含
有するカラム（５５×４０仇舷）に導入する。該リン酸
塩緩衝をランニング剤として使用する。流速は９０凧【
／時であり、１８の‘の溶積のフラクションが集められ
る。この漆縫物のフラクションを炭水化物含量（アント
ロン試験により）とサッカラーゼ抑制成分含量（サッカ
ラーゼ抑制試験により）について測定したのち、アント
ロン試験において炭水化物を実質的に含まず、同時に、
サッカラーゼ抑制試験で特に有効であるとわかった、フ
ラクションを合わせ、１５０の‘に濃縮し、アンバーラ
イトＩＲＡ−４１０（ＨＣＱ‐型）を含有するカラム（
５０×３０仇舷）に通して炉過する。

脱イオン化をよりよくコントロールするため、溶離液を
フラクション（２０分間に１０泌／フラクション）づつ
集め、試験して炭水化物の存在（アントロン試験による
：全体を通じて実際にマイナスである）およびリン酸塩
の存在（アスコルビン酸ノモリブン酸塩試薬：全体を通
じてマイナスである）ならびにサツカラーゼ抑制（酵素
抑制試験）について測定する。抑制作用をもつフラクシ
ョン（３〜３０）をもつフラクシヨンを合わせ、濃縮し
、凍結乾燥し、再溶解し、凍結乾燥して、２８０の９の
粗抑制剤が得られる。さらに精製するため、粗抑制剤を
実施例６記載のようにＢｉｏ−蛇ＩＰ−２で分画する。
凍結乾燥後、０．３×１ぴＡＩＵ／夕と３５００＄ＩＵ
′夕を含有する生成物３０の９を、ｎ，十−＝１の純粋
な化合物を含有するフラクションから単離する。実施例
１６ ５一７のグルコース単位をもつアミノ砂糖譲導体を得る
ために使用した出発物質は、たとえば、実施例１記載の
ような配合物である。

この目的のため、実施例１による配合物３０夕を２５０
の‘の日２０に溶かす。

この溶液の伝導度は１０のＳ・仇‐１であり、Ｐ印ま５
．５である。塩を除去するため、６０夕のアンバーライ
トＩＲＣ５皿十（水溶液からほんのこの跡量のアミノ砂
糖のみを結合する弱酸性賜イオン交換体）と２０夕のア
ンバーライト４１のＨ−を溶液に加え、この混合物を２
０分間かきまぜる。炉液のｐＨ（伝導度０．５仇Ｓ・弧
‐１、ＰＨ３．５）をＩＮＨＣＩでｐＨ３．０とする（
伝導度０．６肌Ｓ・地‐１）。この溶液を４２の【／時
の速度でＤｏＭｘ５０Ｗ（Ｈ＋）（０２．＆ネ、高さ４
０肌、０．００１ＮＨＣＩ中で平衡化）を充てんしたカ
ラムに通し、次いでＤｏｗｅｘを２その０．００１ＮＨ
ＣＩですすぐ。カラムを洗ったのち、生成物を１．２％
の水性アンモニアで溶離し、１０の‘のフラクションを
集める。抑制作用をもつフラクションを合わせ、アンモ
ニアを真空除去し、次いで溶液を３０の‘に真空濃縮す
る。溶液を６００の‘の乾燥ァルコ−ルへ滴々加えて生
成物を沈殿させ、沈殿を炉過し、アルコールとエーテル
で洗ったのち真空乾燥する。収量：２６．５×１ぴＡｍ
′夕を含有する４．４夕。さらに精製するため、各場合
０．５夕を実施例８におけるように予備ＢｉｏｇｅｒＰ
−２カラムに導入し、展開する。

薄層クロマトグラフィー（アミラーゼ抑制染色）によれ
ばｎ，十−＝５〜７の化合物を含有するフラクションを
合わせ、真空濃縮し、生成物を前述のように乾燥アルコ
ールで沈殿させる。粗生成物０．５夕からの収量：３０
×１ぴＡＩＵ／夕と２５０鷹ＩＵ／夕を含有し、ｎ，十
ｎ２：５〜７のアミノ砂糖譲導体０．２夕。実施例 １
７ この実施例は、本発明の化合物を酸性条件下で腸イオン
交換樹脂からいかにして港離できるかを説明する。

直径１．５肌のカラムに０．００１ＮＨＣＩ中の３０夕
（湿った量）のＤｏｗｅｘ■５０Ｗ×４．１（Ｈ＋）２
００〜４００メッシュを充てんする。

次いで、実施例９に従って得られた（表、Ｎｏ．７）５
００の‘の混合脱着生成物（４０００００ＳＩＵ／夕、
ｐＨ２．５、６０％アセトン）を約１時間でカラムに送
入し、次いでＤｂｗｅｘを５００の‘の０．００１Ｎの
ＨＣＩですすぐ。これらの条件下で、活性物質の溶磯は
ほんのこん跡量である。引き続いて、生成物を０．０１
２即日ＣＩで脱着し、力ラム溶雛液の伝導性または屈折
率を記録する。さらに、溶隣液のＳｍ含量を試験する。
活性フラクション７４〜１００を合わせ、アンバーライ
トＩＲＡ４１のＨ−を加えて中和し、次いで５の‘に濃
縮し、５の‘のメタノールと反応させ、生成物をこの混
合物の２００の‘のアセトンへの滴下により沈殿させる
。アセトンとエーテルで洗ってのち、生成物を真空乾燥
する。収率：６５００＄ＩＵ／夕を含有するｎ，十山＝
２の化合物１夕。ｎ・十ｎ２＝３および４グルコース単
位の化合物は、活性一次フラクションから得ることがで
きる。このようにして、アルカリ性脱着と比較して、こ
の酸脱着法は、この系列の個々のアミノ砂糖誘導体を分
画することができる。

前述のようにしてつくられた４〜８グルコース単位を含
む物質をこの方法に付し、中和した溶酸液を単に凍結乾
燥すると、下記の個々の高級フラクションが得られる。

ｎｌ＋山ニ４ニ６７０００Ａｍ／の９ｎ，十山：５＝５
７０００ＡＩＵ／雌 ｎ，十山；６：４２００ＱＡＩＵ／の９ ｎ，十山ニ７ニ２４０００Ａｍ／雌 ｎｌ＋〜＝８＝５０００Ａｍ／の９ 実施例 １８ 前述の８−アミラーゼ分解法を次のようにして実施する
。

１００夕の化合物を１．９の‘の２０ミリモルの酢酸ナ
ト２１′ゥム緩衝液（ｐＨ４．７５）に溶かし、０．１
の‘のさつまし・もから得られた８ーアミラーゼ（Ｂ。

ＥＨＲｍＧＥＲ ＮＯ．１５４７１；５の９′の‘；５
００Ｕ／の９）０．１の‘を加える。混合物を３７０に
４細時間保持し、１００ｑｏに５分間加熱し、次いで４
５０仇ｐｍで遠３心して、沈殿したアルブミンと他の不
純物を除去する。次いで、全混合物をＢｉｏ−戊ＩＰ−
２を含有するカラム（直径２２側：長さ１００伽；６５
℃でサーモスタットによりコントロール）に導入し、流
速２５の上／時の水で溶鱗する。溶鱗液を伝導度計と３
流過セルをもつ高度に感受性の屈折計に通す。２．５の
‘のフラクションが得られる。

フラクションは試験してアミラーゼ抑制活性またはサッ
カラーゼ抑制活性を決定でき、あるいはアントロン試験
により炭水化物含量を決定できる。緩衝液と酵素ょ配合
物からの電解質をブランク容積で溶離し、分解生成物を
分子量の減少に従って溶離する。分子量の多少異なる化
合物の完全な分離を、前述の条件下でクロマトグラフィ
ーを反復することにより実施する。単離すべき生成物を
含有するフラクションを合わせ、凍結乾燥する。実施例
１９ ３グルコース単位をもつ異性体化合物を分離するため、
水に溶けた異性体温合物１０夕をＤｂｗｅｘ■５０Ｗｘ
４（Ｈ＋）を充てんしたカラム中で溶離液が中性になる
まで水洗し、次いで０．２州塩酸で溶磯する。

３の‘のフラクションを集め、薄層クロマトグラフィー
で検査する。

この薄層クロマトグラフィーはシラン化シリカゲルプレ
ート（Ｍ旧ＲＣＫドイツ）で１００：６０：４０：２酢
酸エチル十メタノール十水十２５％のアンモニアを用い
３倍の展開において実施する。式Ｗの化合物は、式Ｖの
化合物よりも大きい距離で出発物質から走行する。式Ｖ
の異性体６夕を含有するフラクション２１５〜２７２お
よび式Ｗの異性体６００の９を含有するフラクション２
柵〜２９７を合わせ、アンバーライトＩＲＡ−４１０（
ＯＨ‐）で中和し、濃縮する。この方法で単離された式
Ｎの異性体の試験管内試験のサツカラーゼ抑制活性は、
１９００＄ＩＵ／夕であり、Ｑーアミラーゼ抑制活性は
１．６×１ぴＡＩＵ／夕であり、そして式Ｖの異性体で
はサッカラーゼ抑制活性が２１００庇ＩＵ／夕であり、
Ｑ−アミラ−ゼ抑制活性は１．４×１びＡＩＵ′夕であ
る。

謂剤例錠剤の乾式謂剤例 下記 式（Ｖ）化合物 １００．０ｋｇ
澱粉 １０８．５ｋ９微
結晶性セルロース ５０．０ｋ９コロ
イダルシリ力 ０．５Ｘ９ステ
アリン酸マグネシウム ０．５ｋ９のブレン
ダーによる粉末混合物（１００万錠分）をローラー圧搾
もしくはスラッジングにより粒状化し、はじめ３．１５
肋の筋で次いで０．８側の節でふるい、この節処理した
粒状物（２５９．５ｋｇ）に１０．０ｋ９の微結晶性セ
ルロース、０．５ｋ９のステアリン酸マグネシウムを混
合し、２７０の９の重さで径９肋の錠剤に打錠した。

錠剤の湿式調剤例 下記 式（Ｖ）化合物 ５０．０ｋｇ澱
粉 ５４．５ｋ９微結
晶性セルロース ３０．０ｋ９のプ
ラネタリー混合機による粉末混合物（１００方錠分）に
３０．０ｋ９の水を加え、１０分間混合する。

必要に応じ、さらに１０〜２０ｋ９の水を加え、更に５
分間混合する。湿った魂をおろし（４．比舷）、流動床
式乾燥機で乾燥する。冷却した粒状物（１．０肋）を節
し、、その粒状物（１３４．５ｋ９）を１８分間、プレ
ンダー中で０．５ｋ９のステアリン酸マグネシウムと混
合する。１３５雌の重さで径７肌の錠剤に打錠した。本
発明化合物は、最も類似した公知化合物に比して、サツ
カラーゼ抑制活性が顕著に優れている。

前記式Ｗで示した化合物は、式（１）において、ｎ２＝
０で且つｎ，：３の化合物である。これに対して、前記
式Ｖで示した本発明化合物は、ｎ２＝１で且つｎ，＝２
の化合物である。従って、式Ｖ本発明化合物と上記式Ｗ
化合物とは、共に３ケのグルコース残基を有する類似化
合物であって、式Ｖ本発明化合物では式Ｗ化合物におけ
る右側の３ケのグルコース残基中の１ケが、分子中左端
にシフトしているほかは良く類似した化合物である。と
ころが、これら化合物のサッカラーゼ抑制活性は下記の
とおりであって、式Ｖ本発明化合物では約１０％も該活
性が増大していることがわかる。化合物 サッカラ
ーゼ抑制活性（ＳＩＵ′夕）式Ｖ（本発明）
２１０００ 式Ｎ（比 較） １９０００

【図面の簡単な説明】

第１図、式０化合物（参考例）の２２０ＭＨｚにおける
ＣＤ３０Ｄ中のＮＭＲスペクトルを示す（横軸＝６脚）
。 第２図は、本発明の化合物のデカァセチル誘導体のＮＭ
Ｒスペクトルである。第３図は、式ｍ化合物（参考例）
の２２山の比におけるＤ２０中のＮＭＲスペクトルであ
る。第４図は、式ｍ化合物（参考例）の２２０ＭＨｚに
おけるＤ２０中の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルである。多
／ｉ幻多ュ辺

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式（I） ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中ｎ＿１＝２、ｎ＿２＝１を示す） で表わされる化合物。 ２ 立体構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ のＯ−｛４・６−ビスデスオキシ−４−〔１Ｓ−（１・
   ４・６／５）−４・５・６−トリヒドロキシ−３−ヒド
   ロキシメチル−４−Ｏ−α−Ｄ−グリコピラノシル−（
   １→４）シクロ−ヘキシ−２−エン−イルアミノ〕−α
   −Ｄ−グリコピラノシル｝−（１→４）−Ｏ−α−Ｄ−
   グルコピラノシル−（１→４）−グルピラノースである
   特許請求の範囲第１項記載の化合物。 ３ 式（I） ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ｎ＿１＝２、ｎ＿２＝１を示す）のアミノ糖誘
   導体を活性成分として含有することを特徴とする糖尿病
   処置剤。 ４ 該活性成分を、固体もしくは液化ガスの希釈剤と混
   合して、または表面活性剤の存在以外は分子量が２００
   より小さい溶媒を除いた液状希釈剤と混合して、含有す
   る特許請求の範囲第３項記載の処置剤。 ５ 該活性成分を滅菌しまたは等張溶液の形で活性成分
   として含有する特許請求の範囲第４項記載の処置剤。 ６ 該活性成分の０．５〜９５重量％を含有する特許請
   求の範囲第４項または第５項記載の処置剤。 ７ 投与単位形態の剤形である特許請求の範囲第４項記
   載の処置剤。 ８ 錠剤、ピル、糖衣剤、カプセル、アンプルまたは坐
   薬の形態の特許請求の範囲第４項記載の処置剤。