JPH03117494A - γ―ラクトンを生成する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、カルボキシル基と、水酸υをｈする炭Ａ−ｉ
原ｒとの門に炭素原ｒを４以Ｊ−の偶数個イｉするヒト
［１−１シ脂肪酸から微／を物発酵によりＴ−ヒト

【１
１シアルカン酸を生成し、その後このγ−ヒト［゛１ｔ
シアルカン酸をγ−ラク［・ンに転換づ゛る万ｉ人　（
二　関　づ　る　。 数種のＴ−ラクトンは香味料及び香料の感覚刺激特性を
改良するのに香味料及び香料１業（二広く用いられ゛（
いる。香味料の用途においては、天然原料から天然と考
えられる方法により生成するのがイｊ刊であると考えら
れている。微Ｚｌ物発酵がその方法（”ある。 ヒマシ油又はヒマシ油加水分解物から特定の微生物を用
いてγ−ヒト［−］１シｆカン酸及びその後γ−ノ゛カ
ラクトンを生産する方法は米国特許第４　！ｉ　Ｇ　Ｏ
６！ｉ　６　；−３に記載されている。欧州特許公開第
０２５８９９３号には基質としてのリシノール酸の用い
１ノが記載され、他の微生物が特定されている。 しかし、先行技術において記載されＣいる微佳物は「食
品級１と一般に；忍められているもので１よない。さら
に、先行技術に記載され−Ｃいるほとんどのラフｉ・ン
より高品質のラクトンを生産Ｊる方法に対（る要望があ
る。 ｆｉ　開明Ｇｏ−６６９９１ｊ’３　及（Ｆ　６Ｏ−１
００５０８ｊ３　Ｉ＝Ｓ　１．！、少ｆｉｔのリシノー
ル酸て゛汚染されたとンシ油の品質を、ヒマシ油に、例
えば、サッカ【］ミレス・セレビシ生物を用いて発酊処
即をｂ　％うことにより、改良する方法が開示されでい
る。このように処理をしたヒンジ油は、分散性及び皮膚
感が改良されるため、ぞしＩｆｌりが乳状及びクリーム
状に改良されるために化粧品の用途に、より適している
と占われている。これらの改良は、リシノール酸の除去
及び微量のＴ−デカラクトンの！を成に、Ｌるものであ
る。しかし、前記特許出願公開公報の例をみると、小品
のγ−Ｆカラクトンは生成するがりシノール酸の量は発
酵前よりも後の方が実際には多くなっている。この方法
で、生成する’ｌ’−”ｉ’カラクトンはリシノールＰ
Ａ場を基準にして　１．５％程度、ヒンジ油の量を基準
にして４００ｐｐ閘、発酵１イ］ンＩ　Ｋｆｉ当り０．
０１５９という程度である。このように前記［１本特許
出願公開公報に記載されｋｈ方法よ−に業的規模Ｔ゛の
γ−デカラク１−ンの生産には適するものＣはないこと
が明らかである。 木光明者らはγ−ヒト［１キシアルカン酸を（１成する
のに適した基質を含有する培地で培養した徴（Ｙ物を用
いＴ７−ラクドーンを生成する方法１、、：おいて、食
品級の生成物を生産するのに容認でさるど一般に考えら
れ又、Ｔ−ラクトンを代謝しないか非常にｊ！り（ノか
代謝しない微生物を、カルボ−１−シル基と、水Ｍ基を
有する炭素原子どの間に４以上の偶数個の炭素原ｆを右
りる１′ド［コ４シ脂肪酸を含有する培地で好気的に、
発酵ブイ〜Ｊン１　／（、ｇ当りγ−ヒト【］キシアル
カン脂肪酸が実質的にないγ−ラク１ヘンを少なくとも
ｏ、１ｇ４産するような条件で１分な時間培養し、イの
後ｐＨ７未＋黄’（”γ−ヒドロキシアルカン酸をγ−
ラクトンに転換し、最初のヒト［Ｊ′＋シ脂肪酸が実質
的にないγ−ラクトンを回収する方法を見出した。好ま
しくは微生物はサッカ［Ｊミセス・セレビシＪ゛ｆｅｒ
ｌｅｎｔａｔ　ｉ　）及び］−ルラスボラ・ゲルブルツ
キイ（Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ　ｄｅｌｂｒｕｃｋｉ　
ｉ　）から成る群から選択された秤である。特に有用な
のはサッカ［−１ミセス・ヒレビシ丁−秤である。本方
法は発酵ブイコン１　Ｋｇ当りγ−ヒドロキシフルカン
醒及び／又はγラクトンを少くとｂｌｙ’４成するよう
な条（１十ぐ（ｊなわれるのが好ましい。 本発明方法におい’Ｕ基質として用いる、カルボキシル
基と、ヒト１」キシル基をｆｌ′Ｉｊる炭素との間に炭
素原子を４以」−の偶数個有ηるヒト［Ｊ１゛シ脂肪酸
を培地に実質的に純粋な形態で添加してもよいが混合物
、例えばヒト［１キシ脂肪酸のニスフルの加水分解にＪ
、り得られる混合物、の・一部として用いてもよい。特
に適した混合物番、１そのようなＬステルの酵素的加水
分解により得られたもので・ある。酵素的加水分解は培
地に瓜加する前か後のいずれに行りつ′Ｃｂよい。培地
に添加後にｒ］なう場合は、７Ｌステルと適した酵素の
混合物を培地（二添加伏るど本発明のＪ程中に加水分解
がおき、それによりその場でヒト１コキシ脂肪酸駐質を
生成する。 本発明り法で用いる微生物のいくつかはそれ自体がリパ
ーゼ活性を生じる。その場合は、ヒト目１シ脂肪酸のグ
リセ［−１−ルｌスアルを別の酵木を添加Ｕずに１％ｉ
どして用いる。 ヒト「１１゛シ脂肪酸又はそのエステルは好ましく【、
１大然源から誘導する。天然に見出される適したエステ
ルはヒマシ油に存在するリシノール酸グリｔｌリドのよ
うなヒドロヤシ脂肪酸グリセリド及び）アラツバ樹脂に
見出されるよう４１にド［１−Ｘシ脂肪酸の炭水化物上
スフ−ルＣある。Ａレイン酸から（すられる１０−ヒト
［１ｔシスアアリン酸のような、１Ｅヒト［］ヤシ脂肪
酸の微生物転換し二より得られるしニド［）キシ脂肋醒
り′５１適している。。 このよう１′二、本発明方法の適した出発物質は実ｖ−
１的に純粋な、又はヒマシ油の加水分解混合物中に存在
するリシノール酸である。水素化ヒマシ油の加水分解に
、Ｊ、り得られたジヒド［１リシノール醒す叉適しくい
る３、これらの間合、本発明方法によりγ−ヒト［ＩＶ
シデカン酸そしくＩ浸終的にはＴｉカラクトンを生成す
る１、他の通した出発物質は加水分解したＶラッパ樹脂
から１！１られる３、１２ジヒド［］−１シバルミヂン
酸及び３．１２−ジヒド［１−１ジペンタデ力ンＭ　’
ｒあり、これらはそれぞれＴＡクタシクｌ−ン及びＴ−
ヘブタラク１〜・ンを／１成する。これらのヒドロキシ
脂肪酸はすべてカルボ１−シル基と、水酸基をイｆ１ｊ
る炭素原子との間に１０個の炭素原ｆを含有することで
共通している。 適した微生動杆は系統立った微生物保存機関又（よ商業
的供給先のようなＪ、く知られた供給先から４！Ｉられ
る９、市販のリツ力［１ミセス・セ１）どシＩ−種の例
どしでは、 キッシンジＩＦ−・ラインへ−フＬ・オール・バーバ１
′！ズ・ドライイースト（に１ｔＺｉｎ（］Ｑｒ　Ｒｅ
ｔｎｈｅｒｅａｌｌ　ｐｕｒｐｏｓｅｓ　ｄｒｙ　ｙｅ
ａｓｔ）トンシンジＸ７−・シインヘーフ丁・サー１−
ス（にｉｔｚｉｎｇｅｒ　Ｒｅ１ｎｈｅｆｅ　Ｓａｍｏ
ｓ）１ツシンジ１アー・ラインへ一ノ１−・スタインベ
ルブ（に目ｚｉｎｇｅｒ　Ｒｅ１ｎｈｅｆｅ　Ｓｔｅｉ
ｎｂｅｒｇ）ボール−７シウノー（Ｐａｕｌ　Ａｒａｕ
ｎｃｒ）　、***フコルミパン・インスタン１〜イース
）−（＋ｃｒｍｉｐａｎｉｎｓｔａｎｔ　ｙｅａｓｔ） ノｔ、　ＩＮチン・インスタン１ヘイ−スト（１ｃｒｏ
＋　１ｎｎｓｔａｎｔ　ｙｅａｓｔ） １’　スｌ−−ゾ１］ケーデス（Ｇ１５ｔ−Ｂｒｏｃａ
ｄｅｓ）、デルフｉ−、オランダ シＸｒンベイン・ドライイースｌ〜 ライン「ツイン・ドライゴース１− ソーテルヌ・ドライイースｈ ｌ−ケイヤー（Ｔｏｋａｙｅｒ）・ドライイーストソー
プレッセ・インボーＬ−（Ｓｏｕｐｌｅｓｓｅ　［ｇ＋
ｐｏｒｔ）、オランダ ご−１ルカ（Ｖｉｅｒｋａ）・ワインイースト′シャ゛
ゾリス（Ｃｈａｂｌｉｓ）” ７１Ｊ−ドリツヒ・ザラｉ’　　（Ｆｒ１ｅｄｒｉｃｈ
　５ａｕｅｒ）、*** ルイッヒマン（Ｆ　ＩｅｉｓｃｈＩａｎ口）・アクチブ
・ドライイースト スタンダード・ブランズ・インニ］−ボレーｆツド（５
ｔａｎｄａｒｄＢｒａｎｄｓ　Ｉｎｃ、　）、−’−１
−−１−り州、米国 １フインイースト・プｎ　−’ｒシルン（Ｗｉｒｉｅ　
ｙｅａｓｔＢｒｏｃｒｋｅｎ） ノバアイ−ネダーランド（Ｉ　１ｂｅｒｔｙ　Ｎｅｄｅ
ｒｌａｎｄ）、オランダ ブリ１−１ノース（Ｂｒｅｗｅｒｓ）イーストン１−ン
・う゛ツカー（Ｊａｎ　Ｄｃｋｋｃｒ）　、ウオーメル
ビール（Ｗｏｒｍｅｒｖｅｅｒ　）　、オランダベーカ
ー・スイースト ブラッゲマン（ｅｒｕＨｅｍａｎ）、ベルギー本発明方
法の発酵は、ｐＨ３乃￥１９、好ましくは４．５乃至７
，５、より好ましくは５乃〒　７．２で１１なう。温度
ｔま１０乃至４０″Ｃ１好ましくは１５乃〒３５°Ｃに
保たなりればならない。通気を好ましくは発酵ブイロン
のｐＯｔを飽和の１０％より多く保つように調節する。 適した培地は、通常の栄養素、例えば炭素源、窒素源、
無機塩、成長因子及び微檜元素を含む。 適した炭素源は当技術分野で知られており、糖類及び糖
類由来ポリオール、グリセ［］−シル及び乳酸、クエン
酸、〕ｌハク酸、アメシルピン酸のような右機酸を含む
。適した窒素源にはベプ［−ン、肉１キス、酵母エキス
、］−ン・スブーブ・リカー（ＣＯｒｎ　５ｔｅｅｐ　
１ｉｑｕｏｒ　）及びアミノ酸である。バランスがよく
どれだ培地は好ましくは、少なくども少ハ１の酵母工Ｖ
スを含有し、酵Ｄｉ　、Ｔ、　キースｔよほとんどの場
合、ビタミン類、無機塩、微ｎ；元素等を別に添加する
必要をなく１゜ 特にバノンスが良い培地は少なくとも酵母上−ｔスを０
１％Ｗ／Ｗ及びペプトンを０．２５％Ｗ／Ｗ以上含イ１
４゛る。 ある場合には、例えば硫酸第一鉄と１ノて１ｅ２゛を２
０■／幻以下添加りることがイｊ利て゛ある。好ましく
は、培地に少なくとも１０００細胞／醇接種する。 基質として用いるヒドロキシ脂肪酸は、炭素澱とし【培
養の初めに、又はより後の段階、例えば細胞が最大量に
達したとき、のいずれかに都合よく添加される３、ｒド
目キシ脂肪酸は供給回分式操作にＪ３いで、又ヒト［１
ヤシ脂肪酸エステル及び適した酵素、例えばリバーピを
培地に添加することにより徐々に添加してもよく、酵素
中に徐々にヒト［］Ｖシ脂肪酸を遊離させる。 ヒト［］ヤシ脂肪酸も又、鉱油又は炭化水素又は微生物
がそれ自身でリパーゼ活性を生じない場合は（１＾物父
は動物由来のグリ廿すド油のＪ、うな微生１カにイｊ市
でない適した有機溶媒に溶解して添加し得る。どちらの
場合でも総量がヒト１］キシ脂肪酸の少なくとも０．１
重量％、好ましくは１重量％より多い吊を培地に添加す
る。 通常２４乃↑３６時間以内に、発酵ゾイ二］ン１　Ｋ’
ｉｌ当りγ−ラクトン及びγ−ヒト［！キシアル−カン
酸の総量は０．１’７に達し、一般に１０Ｈ以内に最大
量に達する。多くの場合、非常により短い期間でｋ）大
量は達Ｊる。しか］ノ従来技術の発酵ｊｊ法どは責なり
、本発明の方法においてはγ−ラクトン含■は最人栖に
達した侵、時間とともに減少しないか減少しにくいので
１確な発酵時間は臨界的ではない。 このようにラクトンは発酵ブイヨン中で実質的に安定（
・ある。 所望なら微生物を、ヨー［１ビアン・ジ１）−プル・オ
シ・アプライド・マイク［Ｊバイオ「１ジー・アンド・
バイオテクノ１１ジー（Ｆｕｒ、　Ｊ、　Ａｐｐ、　Ｈ
ｉｃｇ　Ｂｉｏｔｅｅｈ、）第１５６　（１９８２年）
、第１４７乃う（１５２頁及びバイオテクノ［１ジー・
アンド・バイオエンジニアリング（ａｉｏｔｅｃｈ、　
＆　Ｂｉｏｅｎｇ□）第１９巻（１９７７年）、第３８
７頁以下に記載されているような通常の技術を用い（担
体に固定し得る１゜培地中への基質の分散を容易にする
ために適した乳化剤を培地の１％Ｗ／Ｗ以下の晒で添加
し得る。 発酵シイ−」ンの泡立ちは従来の消泡剤を添加するごと
により防止′Ｃきる。。 反応生成物は通常、Ｔ　ヒドロキシアルカン酸及びてれ
に相当するγ−ラクトンの混合物から成る。この混合物
は通常の技術、例えば適した吸収剤又は６機溶媒ぐ抽出
することにより発酵ブイ二）ンから分離できる。ヒドロ
キシ脂肪酸基質が溶液とじＣζ」例溶媒中に添加される
とき、反応生成物（）又その溶媒中に溶解し、溶媒は発
酵ブイヨンから甲に分離される。その後、γ−ヒドロヤ
シアルカン酸は０１１７未満で常法によりＴ−ラクトン
に転換される。代行的には０１１７未満、好ましくｔよ
５未満に低くし、必要なら緩和な加熱に五りラクトン化
を最初に完了させる。ラフ１ヘンも又、抽出及び粕製、
所望なら蒸留により発酵シイ−」ンから分離される。 本発明り払により得られるラクトン類はそのまよ又は適
当な溶媒に溶解して又は粉末生成物に加工して香味料又
は食品に添加される。本発明物質のラフ１−ン類ととも
に用いられる香味料成分は、当技術分野でよく知られて
おり、又、例えばＳアークタンデル（ＡｒＣｔａｎｄＱ
ｒ）ンバ′ノＪ−ム・アンド・フレーバー　・マテリア
ルズ・オシ・ナブ」プル・オリジン（Ｐｅｒｒｕｍｅ　
ａｎｄ　Ｆｌａｖｏｒ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ｏｆＮａ
ｔｕｒａｌ　Ｏｒｉｇｉｎ）　　（］−リヂベス、二」
−シャーシー州、米国、１９６９年）及び■、［、フリ
ア（ｒｕｒｉａ）等著シーアールシー・・フｘ−ｊロリ
ス・ハンドブック・オシ・フレーバー・イングリーディ
エンツ（ＣＩＩＳ　　ｒｅｒｎａｒｏｌｉ’ｓ　　Ｈａ
ｎｄｂｏｏｋ　　ｏｆ　　Ｆｌａｖｏｒ　　Ｉｎｇｒｅ
ｄｉｃｎｔｓ）第２版〈クリーブランド、ＣＲＣブレス
・インコーホレーアラド、１９１５鐸）及びＨ，Ｂ、ヒ
ース（ｔｌｃａｔｈ））Ｎ、ソース・ブック争オブ・フ
レーバーズ（Ｓｏｕｒｃｅ　Ｂｏｏｋ　ｏｒ　ｒｌａｖ
ｏｒｓ）　［ジ・アビ・パブリッシング・カンパニー・
インコーボレーブッド（Ｔｔ＋ｅ＾ｖｉ　Ｐｕｂｌｉｓ
ｈｉｎｇ　Ｃｏｍｐａｎｙ　Ｉｎｃ、）ウェストボート
、−１ネチカツト州、１９８１年］中年配中されている
。 本発明を下記の実施例により例示するが本発明はこれら
に二限定されるものではない、。 実施例１ バッフル付き（ｂａｉｌｅｄ）フラスコに入れた、ペプ
トン２％Ｗ／Ｗ　、酵母１ギス０．５％Ｗ／Ｗ及びヒマ
シ油加水分解物Ｊウルアシッド（Ｎｏｕｒａｅｉｄ）　
Ｃ５８０［アクゾ判（ン！−メルスフォールト、オラン
ダ）販売］３２％Ｗ／Ｗから成り、オートゲレープ処理
した（１２０＠Ｃで２０分間）培地１００１にＩＦラッ
カ］ミセス・セレビシＩ−（キラシンジャー・ラインへ
−フＪ・オール・バーバセズ・ドライイースト）を４　
ｘ　１０４細胞接種した。培地のｐＨは６４５ぐ発酵全
工程中不変にした。培地を１−タリーストレーカー　（
ｒｏｔａｒｙ　５ｔｒａｋｅｒ）　、ｈで２８°Ｃで５
１］間イン４コベートした。 試料を定期的に取り出し本方法の進行を決定した。ＲＩ
ｒＩＵ化、酢酸エチルで抽出及び気−・液りＯマドグラ
“ノイーを用いて層の分離を（ｊなった後、Ｔｒカラク
１−ンの濃度を測定する。約２０時間の誘導明後、γ−
γカラクトンの濃度は発酵の終り：ｔぐずっと増加した
。発酵の終りにブイヨンを希硫酸を用いてｐＨ３に酸性
化【）、を記のように抽出した。有機居を分離し、溶媒
を蒸発させた。残留物を蒸留し、Ｔ−１カラクトンが得
られた。発酵ブイヨンからγ−Ｙカラクトンが２．ｏｅ
ｇ／幻得られ、これはヒマシ油加水分解物中の添加した
リシノー・ル酸を基準にしで、約１３％のモル収率であ
った。 約８７％のリシノール酸がブイヨンから回収されたの″
ｃ発酵収率は代謝されたリシノール酸を基準にして　１
００％である。 実施例２ ザッカ［，１ミセス・セレビシェ一種、ＡＴＣＣ２４９
０３を用いヒマシ油加水分解物）・ウルアシッドＣ３８
０を２．７％Ｗ／Ｗ添加した他は実施例１（一記載した
工程及び物質を用いて発酵を行なった。発酵ブイニ１ン
から３．７５’Ｊ／ＫｇのＴ−デカラフ１−ンが得られ
、これは添加したリシノール酸を基準にして約３０％の
−しル収率であった１、約７０％のリシノール酸が変化
しないで回収されたのぐ代謝され！こりシノール酸の−
〔ル収率は１００％であった。 実施例３ リツ力ロミセス・セレビシェ一種どして）−Ｌルミパン
・インスタントイース［・（ギストーブ［１−ケーデス
、デルフト、オランダ）を用い、３．１％Ｗ／Ｗのヒマ
シ油加水分解物から出発して発酵を行なった。他は実施
例１に記載の■稈及び物質を用いた。発酵ブイヨンから
２　、１　！Ｖ／　Ｋ９のγ−ラク１〜ンが得られた。 実施例４ ヒマシ油加水分解物の代わりに精製リシノール酸を２．
７％Ｗ／Ｗ用いた他は実施例１を繰り返した。 実施例１において得られたのと同じ結果が得られた。 実施例５ ヒマシ油加水分解物の代わりに３．２％Ｗ／Ｗのヒンジ
油及び２３ｐｐｍ／ｗのシグマ・ケミ−・グー１ムベー
ハ−（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｅ　Ｇｍｂｌｌ）　（ダ
イセンボーフェン（Ｄｅ　ｉ　５ｅｎｈｏｆｅｎ）、西
独］のリパーゼ１１７５４の混合物を用いる他は実施例
１を繰り返した。実施例１と同じ結果が得られた。 実施例６ 実施例１′ｃ記載した培地１ノを用い、キラシンジャー
・ラインへ一７トオール・バー・バセズ・ドライイース
トを４　ｘ　１０５　＠胞接秤して１１用の発ＭＰ！＋
アプリ〕】ン（ΔＤＤＩｉｋｏｎ）　　（シータム、オ
ランダ）ｗＭ売］中で発酵を１なった。発酵中、ｐＨは
約６，５て゛あった。温度を２８”Ｃに保ち、通気ｂ１
は０、ＩＶＶｌであり撹拌割合は５００回転／分であっ
た、。 発酵ブイ：１ンの泡立ちを防ぐため、発酵の最初に消泡
１マルジヨント１０［ジメチー］ン（Ｄｉｎｉｅｔｈｃ
ｏｎｅ）　、ビニスターベルｔ”　（Ｂｉｅｓｔｅｒｖ
ｅｌｄ）、’／’ルノ」−ンａ／ｄライン（Ａｌｐｈｅ
ｎ　ａ／ｄ　Ｒｉ、ｉｎ）、オランダ１を１００重ハｌ
　ｐｐｍ添加した。発酵の進行は実施例１に記載された
とおりである。５　Ｅｌ後にγ−’ｙ’カラクトンは最
大量に達した。ブイヨンを１１１１３に酸性化し、ラク
トンを実施例１に記載したように甲離した。γ〜Ｙカラ
クトンの収耐は２．５９であった。 実施例７ 下記の表に記載した微生物種を用い、実施例１に記載の
］−稈及び物質を用いて発酵を行なった。 各微生物種において添加したリシノール酸の半（％ｗ／
ｗ　）及び得られたＴ−Ｆカラクトン（ｓｉ　Ｋｓ　）
は下記の通りであった。 ＠（［動程　　　　　　　　　　　　　　　　　リシノ
ール酸　　γザ、イゴｌｆツカ■ミ１１ス・）１ルメン
タｆ−０１０４４２０４カンジダ・ボイジニイ　Ｑ１１
０３８５　　　　　　　　　　　４カンジダ・シルビー
１　：）ＱＩ　１０３９３　　　　　　　　　　　４カ
ンジダ・シルビー１ラ　Ｑ１１０３９３　　　　　　　
　　　　　１１カンジダ・７ビ］ラ　ＱＩ０２２６７　
　　　　　　　　　４１−ルノスボラ・デルブルツＶ、
イ　０１（１１９００４處この場合は加水５″［されて
いないヒンジ油を基質として添邦１１）だ。 特許出願代理人

Claims (17)

【特許請求の範囲】
1. （１）γ−ヒドロキシアルカン酸を生成するのに適した
   基質を含有する培地で培養した微生物を用いてγ−ラク
   トンを生成する方法において、食品級の生成物を生成す
   るのに容認できると一般に考えられ、又γ−ラクトンを
   代謝しないか、非常に遅くしか代謝しない微生物を、カ
   ルボキシル基と、水酸基を有する炭素原子との間に炭素
   原子を４以上の偶数個有するヒドロキシ脂肪酸を含有す
   る培地で好気的に、発酵ブイヨン１ｋｇ当り少なくとも
   ０．１ｇのγ−ヒドロキシアルカン酸及び／又はγ−ラ
   クトン総量を生産するような条件で十分な時間培養し、
   その後適宜にγ−ヒドロキシアルカン酸をγ−ラクトン
   に転換し、最初のヒドロキシ脂肪酸が実質的にないγ−
   ヒドロキシアルカン酸及び／又はγ−ラクトンを回収す
   ることを特徴とする方法。
2. （２）γ−ヒドロキシアルカン酸を生成するのに適した
   基質を含有する培地で培養した微生物を用いてγ−ラク
   トンを生成する方法において、サッカロミセス・セレビ
   シエー（￥Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ￥￥ｃｅｒｅｖ
   ｉｓｉａｅ￥）、デバロミセス・ハンセニイ（￥Ｄｅｂ
   ａｒｏｍｙｃｅｓｈａｎｓｅｎｉｉ￥）、カンジダ・ボ
   イジニイ（￥ｃａｎｄｉｄａｂｏｉｄｉｎｉｉ￥）、カ
   ンジダ・シルビコラ（￥ｃａｎｄｉｄａｓｉｌｖｉｃｏ
   ｌａ￥）、カンジダ・アピコラ（￥ｃａｎｄｉｄａａｐ
   ｉｃｏｌａ￥）、ザイゴサッカロミセス・フェルメンタ
   チ（￥ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ￥￥ｆｅｒ
   ｍｅｎｔａｔｉ￥）及びトルラスポラ・デルブルッキイ
   （￥Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａｄｅｌｂｒｕｃｋｉｉ￥）
   から成る群から選択された種をカルボキシル基と、水酸
   基を有する炭素原子との間に炭素原子を４以上の偶数個
   有するヒドロキシ脂肪酸を含有する培地で好気的に、発
   酵ブイヨン１ｋｇ当り少なくとも０．１ｇのγ−ヒドロ
   キシアルカン酸及び／又はγ−ラクトン総量を生産する
   ような条件で十分な時間培養し、その後適宜にγ−ヒド
   ロキシアルカン酸をγ−ラクトンに転換し、最初のヒド
   ロキシ脂肪酸が実質的にないγ−ヒドロキシアルカン酸
   及び／又はγ−ラクトンを回収することを特徴とする方
   法。
3. （３）￥サッカロミセス・セレビシエー￥、￥デバロミ
   セス・ハンセニイ￥及び￥カンジダ・ボイジニイ￥から
   成る群から選択された種を微生物として用いる、請求項
   ２に記載の方法。
4. （４）γ−ヒドロキシアルカン酸を生成するのに適した
   基質を含有する培地で培養した微生物を用いてγ−ラク
   トンを生成する方法において、￥サッカロミセス・セレ
   ビシェー￥種を、カルボキシル基と、水酸基を有する炭
   素原子との間に炭素原子を４以上の偶数個有するヒドロ
   キシ脂肪酸を含有する培地で好気的に、発酵ブイヨン１
   ｋｇ当り少くとも０．１ｇのγ−ヒドロキシアルカン酸
   及び／又はγ−ラクトン総量を生産するような条件で十
   分な時間培養し、その後適宜にγ−ヒドロキシアルカン
   酸をγ−ラクトンに転換し、最初のヒドロキシ脂肪酸が
   実質的にないγ−ヒドロキシアルカン酸及び／又はγ−
   ラクトンを回収することを特徴とする方法。
5. （５）ヒドロキシ脂肪酸を、脂肪酸エステルの加水分解
   によって得、加水分解混合物を培地に添加する、請求項
   １乃至４のいずれか１請求項に記載の方法。
6. （６）ヒドロキシ脂肪酸を酵素的加水分解により得る、
   請求項１乃至５のいずれか１請求項に記載の方法。
7. （７）培地にヒドロキシ脂肪酸エステル及び適した加水
   分解酵素を添加することによりその場でヒドロキシ脂肪
   酸を生成する、請求項６に記載の方法。
8. （８）ヒドロキシ脂肪酸エステルがグリセロールエステ
   ルである、請求項１乃至７のいずれか１請求項に記載の
   方法。
9. （９）ヒドロキシ脂肪酸エステルが炭水化物エステルで
   ある、請求項１乃至７のいずれか１請求項に記載の方法
   。
10. （１０）ヒドロキシ脂肪酸がカルボキシル基と、ヒドロ
    キシ基を有する炭素原子との間に１０個の炭素原子を有
    する、請求項１乃至９のいずれか１請求項に記載の方法
    。
11. （１１）ヒドロキシ脂肪酸がリシノール酸又はジヒドロ
    リシノール酸である請求項１０に記載の方法。
12. （１２）ヒドロキシ脂肪酸が３、１２−ジヒドロキシパ
    ルミチン酸又は３、１２−ジヒドロキシペンタデカン酸
    である、請求項１０に記載の方法。
13. （１３）リシノール酸をヒマシ油の加水分解により得る
    、請求項１乃至８のいずれか１請求項に記載の方法。
14. （１４）γ−ヒドロキシアルカン酸を発酵ブイヨン中で
    ラクトン化し、γ−ラクトンを回収する、請求項１乃至
    １３のいずれか１請求項に記載の方法。
15. （１５）請求項１乃至１４のいずれか１請求項に記載の
    方法により得られるγ−ラクトン。
16. （１６）通常の香味成分及び請求項１乃至１４のいずれ
    か１請求項に記載の方法により得られるγ−ラクトンを
    含有する香味料。
17. （１７）請求項１乃至１４のいずれか１請求項に記載の
    方法により得られるγ−ラクトンを含有する食品。