JP6404587B2 - 免疫測定方法及びその装置並びに免疫測定用キット - Google Patents
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Description
本発明は、検体に含まれる測定対象物質を抗原抗体反応にて測定する免疫測定方法及びその装置並びに免疫測定用キットに関する。
従来この種の免疫測定方法としては、例えば特許文献１，２に記載のものが既に知られている。
特許文献１には、被検試料中の抗原性物質を不溶性担体粒子に吸着させ、該抗原性物質に特異的に反応する抗体もしくは抗体複合体を反応させて、不溶性担体粒子を選択的に凝集させる凝集イムノアッセイ法であって、抗体もしくは抗体複合体が、ネイティブな状態で液相中に存在する抗原性物質には実質的に反応せず、不溶性担体粒子に固相化された抗原性物質には特異的に反応するものが開示されている。
特許文献２には、検体に対して免疫学的に反応可能な第一の物質で形成された捕捉部位に向けて被検試料を膜担体に直接的に適用してクロマト展開させて該捕捉部位を通過せしめた後、検体に対して免疫学的に反応可能な第二の物質を含有する展開溶媒を被検試料のクロマト展開方向とは逆方向に該捕捉部位に向けて膜担体にてクロマト展開させ、被検試料が２回にわたり捕捉部位を通過するようにしたイムノクロマトグラフィー測定法が開示されている。
特許文献１には、被検試料中の抗原性物質を不溶性担体粒子に吸着させ、該抗原性物質に特異的に反応する抗体もしくは抗体複合体を反応させて、不溶性担体粒子を選択的に凝集させる凝集イムノアッセイ法であって、抗体もしくは抗体複合体が、ネイティブな状態で液相中に存在する抗原性物質には実質的に反応せず、不溶性担体粒子に固相化された抗原性物質には特異的に反応するものが開示されている。
特許文献２には、検体に対して免疫学的に反応可能な第一の物質で形成された捕捉部位に向けて被検試料を膜担体に直接的に適用してクロマト展開させて該捕捉部位を通過せしめた後、検体に対して免疫学的に反応可能な第二の物質を含有する展開溶媒を被検試料のクロマト展開方向とは逆方向に該捕捉部位に向けて膜担体にてクロマト展開させ、被検試料が２回にわたり捕捉部位を通過するようにしたイムノクロマトグラフィー測定法が開示されている。
本発明が解決しようとする技術的課題は、検体を移動する方式に比べて、検体に含まれる抗原抗体反応可能な測定対象物質を感度よく測定することにある。
請求項１に係る発明は、毛細管現象により液体が移動可能な膜状体の一部に測定対象物質が含まれる検体及び予め決められた量の測定対象物質が含まれる対比用検体を予め保持した後、前記膜状体に展開液を添加すると共に当該展開液には前記測定対象物質と特異的に抗原抗体反応する不溶性の標識担体を含有させ、前記膜状体に保持された検体及び対比用検体に含まれる測定対象物質と前記展開液と共に移動する標識担体との間で抗原抗体反応させ、しかる後に、前記検体及び前記対比用検体の抗原抗体反応に伴う標識担体の集積量を測定する各工程を含み、前記測定対象物質がヘモグロビンＡ１ｃであり、前記不溶性の標識担体は、ヘモグロビンＡ１ｃと反応する第１の蛍光ラテックスと、ヘモグロビンと反応する第２の蛍光ラテックスとを有し、前記第１の蛍光ラテックス及び前記第２の蛍光ラテックスに対応する波長の光が少なくとも含まれる光を照射することで、ヘモグロビンＡ１ｃ又はヘモグロビンの集積量を測定可能とすることを特徴とする免疫測定方法である。
請求項２に係る発明は、毛細管現象により液体が移動可能な素材にて構成された膜状体を有し、当該膜状体に測定対象物質が含まれる検体を保持する検体保持部及び予め決められた量の測定対象物質が含まれる対比用検体を保持する対比用検体保持部が少なくとも設けられる反応プレートと、前記膜状体に保持された検体及び対比用検体に対し展開液を供給する展開液供給手段と、前記膜状体に保持された検体及び対比用検体に対し前記測定対象物質と特異的に抗原抗体反応する不溶性の標識担体を前記展開液と共に供給する標識担体供給手段と、前記検体保持部及び前記対比用検体保持部に対応して設けられ、前記検体及び前記対比用検体の抗原抗体反応に伴う標識担体の集積量を測定する測定器具と、を備え、前記測定対象物質がヘモグロビンＡ１ｃであり、前記不溶性の標識担体は、ヘモグロビンＡ１ｃと反応する第１の蛍光ラテックスと、ヘモグロビンと反応する第２の蛍光ラテックスとを有し、前記測定器具は、前記第１の蛍光ラテックス及び前記第２の蛍光ラテックスに対応する波長の光が少なくとも含まれる光を照射することで、ヘモグロビンＡ１ｃ又はヘモグロビンの集積量を測定可能とするものであることを特徴とする免疫測定装置である。
請求項３に係る発明は、免疫測定時に使用される反応プレートを含む免疫測定用キットであって、前記反応プレートは、毛細管現象により液体が移動可能な素材にて構成された膜状体と、この膜状体の一部に設けられ、測定対象物質が含まれる検体を保持する検体保持部と、前記膜状体の一部に設けられ、予め決められた量の測定対象物質が含まれる対比用検体を保持する対比用検体保持部と、前記膜状体の一部に設けられ、前記膜状体に保持された検体及び対比用検体に対し展開液を供給する展開液供給部と、前記膜状体の一部に設けられ、前記膜状体に保持された検体及び対比用検体に対し前記測定対象物質と特異的に抗原抗体反応する不溶性の標識担体を前記展開液と共に供給する標識担体供給部と、前記膜状体の一部に設けられ、前記検体保持部及び前記対比用検体保持部を通過した余剰の展開液を吸収する展開液吸収部と、を備え、前記測定対象物質がヘモグロビンＡ１ｃであり、前記不溶性の標識担体は、ヘモグロビンＡ１ｃと反応する第１の蛍光ラテックスと、ヘモグロビンと反応する第２の蛍光ラテックスとを有し、前記第１の蛍光ラテックス及び前記第２の蛍光ラテックスに対応する波長の光が少なくとも含まれる光を照射することで、ヘモグロビンＡ１ｃ又はヘモグロビンの集積量を測定可能とすることを特徴とする免疫測定用キットである。
請求項４に係る発明は、請求項３に係る免疫測定用キットにおいて、前記標識担体供給部は前記膜状体上に予め前記標識担体を固相し、添加された後の展開液中に前記標識担体を混合して供給することを特徴とする免疫測定用キットである。
請求項５に係る発明は、請求項３に係る免疫測定用キットにおいて、前記検体保持部及び対比用検体保持部は、前記展開液供給部と前記展開液吸収部との間に順次並んで配置されていることを特徴とする免疫測定用キットである。
請求項６に係る発明は、請求項３に係る免疫測定用キットにおいて、前記対比用検体保持部は、検体の測定対象物質の許容範囲内に選定された対比用検体を保持する第１の対比用検体保持部と、検体の測定対象物質の許容範囲外に選定された対比用検体を保持する第２の対比用検体保持部とを有することを特徴とする免疫測定用キットである。
請求項７に係る発明は、請求項６に係る免疫測定用キットにおいて、前記第１の対比用検体保持部と前記第２の対比用検体保持部とは、前記膜状体の前記展開液の移動方向に対し前記検体保持部を挟んで配置されていることを特徴とする免疫測定用キットである。
請求項８に係る発明は、請求項３乃至７のいずれかに係る免疫測定用キットにおいて、更に、前記反応プレートにて測定する検体を採取する検体採取器具を含むことを特徴とする免疫測定用キットである。
請求項４に係る発明は、請求項３に係る免疫測定用キットにおいて、前記標識担体供給部は前記膜状体上に予め前記標識担体を固相し、添加された後の展開液中に前記標識担体を混合して供給することを特徴とする免疫測定用キットである。
請求項５に係る発明は、請求項３に係る免疫測定用キットにおいて、前記検体保持部及び対比用検体保持部は、前記展開液供給部と前記展開液吸収部との間に順次並んで配置されていることを特徴とする免疫測定用キットである。
請求項６に係る発明は、請求項３に係る免疫測定用キットにおいて、前記対比用検体保持部は、検体の測定対象物質の許容範囲内に選定された対比用検体を保持する第１の対比用検体保持部と、検体の測定対象物質の許容範囲外に選定された対比用検体を保持する第２の対比用検体保持部とを有することを特徴とする免疫測定用キットである。
請求項７に係る発明は、請求項６に係る免疫測定用キットにおいて、前記第１の対比用検体保持部と前記第２の対比用検体保持部とは、前記膜状体の前記展開液の移動方向に対し前記検体保持部を挟んで配置されていることを特徴とする免疫測定用キットである。
請求項８に係る発明は、請求項３乃至７のいずれかに係る免疫測定用キットにおいて、更に、前記反応プレートにて測定する検体を採取する検体採取器具を含むことを特徴とする免疫測定用キットである。
請求項１に係る発明によれば、検体を移動する方式に比べて、検体に含まれる抗原抗体反応可能な測定対象物質を感度よく測定することができるほか、検体に含まれる抗原抗体反応可能な測定対象物質としてのヘモグロビンＡ１ｃを蛍光標識にて感度よく測定することができる。
請求項２に係る発明によれば、検体を移動する方式に比べて、検体に含まれる抗原抗体反応可能な測定対象物質を感度よく測定することができるほか、検体に含まれる抗原抗体反応可能な測定対象物質としてのヘモグロビンＡ１ｃを蛍光標識にて感度よく測定することが可能な免疫測定装置を提供することができる。
請求項３に係る発明によれば、検体を移動する方式に比べて、検体に含まれる抗原抗体反応可能な測定対象物質を感度よく測定することができるほか、検体に含まれる抗原抗体反応可能な測定対象物質としてのヘモグロビンＡ１ｃを蛍光標識にて感度よく測定することが可能な免疫測定用キットを提供することができる。
請求項４に係る発明によれば、本構成を有さない態様に比べて、検体及び対比用検体に対し標識担体を定量供給することができる。
請求項５に係る発明によれば、本構成を有さない態様に比べて、検体保持部、対比用検体保持部に対し展開液と共に標識担体を一方向に向けて効率的に移動させることができる。
請求項６に係る発明によれば、本構成を有さない態様に比べて、検体の測定対象物質の測定精度をより高いものに補正することが可能である。
請求項７に係る発明によれば、本構成を有さない態様に比べて、検体の測定対象物質の測定精度をより高いものに補正することが可能であることに加え、反応プレート上での検体の測定対象物質の測定結果を異常状態の対比用検体、正常状態の対比用検体と対比し易くすることができる。
請求項８に係る発明によれば、検体の採取を可能とし、かつ、採取した検体の測定対象成分の測定を可能とする免疫測定用キットを提供することができる。
請求項２に係る発明によれば、検体を移動する方式に比べて、検体に含まれる抗原抗体反応可能な測定対象物質を感度よく測定することができるほか、検体に含まれる抗原抗体反応可能な測定対象物質としてのヘモグロビンＡ１ｃを蛍光標識にて感度よく測定することが可能な免疫測定装置を提供することができる。
請求項３に係る発明によれば、検体を移動する方式に比べて、検体に含まれる抗原抗体反応可能な測定対象物質を感度よく測定することができるほか、検体に含まれる抗原抗体反応可能な測定対象物質としてのヘモグロビンＡ１ｃを蛍光標識にて感度よく測定することが可能な免疫測定用キットを提供することができる。
請求項４に係る発明によれば、本構成を有さない態様に比べて、検体及び対比用検体に対し標識担体を定量供給することができる。
請求項５に係る発明によれば、本構成を有さない態様に比べて、検体保持部、対比用検体保持部に対し展開液と共に標識担体を一方向に向けて効率的に移動させることができる。
請求項６に係る発明によれば、本構成を有さない態様に比べて、検体の測定対象物質の測定精度をより高いものに補正することが可能である。
請求項７に係る発明によれば、本構成を有さない態様に比べて、検体の測定対象物質の測定精度をより高いものに補正することが可能であることに加え、反応プレート上での検体の測定対象物質の測定結果を異常状態の対比用検体、正常状態の対比用検体と対比し易くすることができる。
請求項８に係る発明によれば、検体の採取を可能とし、かつ、採取した検体の測定対象成分の測定を可能とする免疫測定用キットを提供することができる。
◎実施の形態の概要
図１は本発明が適用された免疫測定方法及びその装置の実施の形態の概要を示す。
同図において、本実施の形態に係る免疫測定方法は、毛細管現象により液体が移動可能な膜状体２の一部に測定対象物質Ｔが含まれる検体Ｓ及び予め決められた量の測定対象物質Ｔが含まれる対比用検体Ｓ’を予め保持した後、膜状体２に展開液Ｗを添加すると共に当該展開液Ｗには測定対象物質Ｔと特異的に抗原抗体反応する不溶性の標識担体Ｍを含有させ、膜状体２に保持された検体Ｓ及び対比用検体Ｓ’に含まれる測定対象物質Ｔと展開液Ｗと共に移動する標識担体Ｍとの間で抗原抗体反応させ、しかる後に、検体Ｓ及び対比用検体Ｓ’の抗原抗体反応に伴う標識担体Ｍの集積量を測定するようにしたものである。
図１は本発明が適用された免疫測定方法及びその装置の実施の形態の概要を示す。
同図において、本実施の形態に係る免疫測定方法は、毛細管現象により液体が移動可能な膜状体２の一部に測定対象物質Ｔが含まれる検体Ｓ及び予め決められた量の測定対象物質Ｔが含まれる対比用検体Ｓ’を予め保持した後、膜状体２に展開液Ｗを添加すると共に当該展開液Ｗには測定対象物質Ｔと特異的に抗原抗体反応する不溶性の標識担体Ｍを含有させ、膜状体２に保持された検体Ｓ及び対比用検体Ｓ’に含まれる測定対象物質Ｔと展開液Ｗと共に移動する標識担体Ｍとの間で抗原抗体反応させ、しかる後に、検体Ｓ及び対比用検体Ｓ’の抗原抗体反応に伴う標識担体Ｍの集積量を測定するようにしたものである。
このような技術的手段において、膜状体２は、毛細管現象により液体が移動可能である素材で構成されていればよく、検体Ｓを保持する検体保持部３と、対比用検体Ｓ’を保持する対比用検体保持部４（本例では４ａ，４ｂ）と、展開液Ｗの添加部とを有していることを要する。
ここで、展開液Ｗは毛細管現象により膜状体２を移動するため、膜状体２の一部に展開液Ｗを添加するようにすればよい。
また、標識担体Ｍは予め展開液Ｗ中に混合されていてもよいし、膜状体２に添加された展開液Ｗに膜状体２上で混合されるようにしてもよい。
更に、測定法としては、抗原抗体反応に伴う標識担体Ｍの集積量を測定可能にする方法であれば適宜選定して差し支えない。
本例の免疫測定方法では、検体Ｓに含まれる測定対象物質Ｔは膜状体２の一部に固相化され、展開液Ｗと共に移動してきた標識担体Ｍが固相化された検体Ｓ又は対比用検体Ｓ’の測定対象物質Ｔの量に応じて抗原抗体反応するという原理が利用されている。
ここで、展開液Ｗは毛細管現象により膜状体２を移動するため、膜状体２の一部に展開液Ｗを添加するようにすればよい。
また、標識担体Ｍは予め展開液Ｗ中に混合されていてもよいし、膜状体２に添加された展開液Ｗに膜状体２上で混合されるようにしてもよい。
更に、測定法としては、抗原抗体反応に伴う標識担体Ｍの集積量を測定可能にする方法であれば適宜選定して差し支えない。
本例の免疫測定方法では、検体Ｓに含まれる測定対象物質Ｔは膜状体２の一部に固相化され、展開液Ｗと共に移動してきた標識担体Ｍが固相化された検体Ｓ又は対比用検体Ｓ’の測定対象物質Ｔの量に応じて抗原抗体反応するという原理が利用されている。
次に、本実施の形態に係る免疫測定方法の代表的態様又は好ましい態様について説明する。
本例では、測定対象物質Ｔの代表例としてはグリコヘモグロビン（ヘモグロビンＡ１ｃ）が挙げられるが、これに限定されるものではなく、免疫測定法で測定可能なものであれば、インフルエンザウィルス等のウィルスを始め適宜選定して差し支えない。
また、標識担体Ｍの代表例としては蛍光ラテックスが挙げられるが、これに限られるものではなく、発色ラテックス等も使用可能である。
更に、測定対象物質ＴとしてヘモグロビンＡ１ｃの好ましい測定方法としては、不溶性の標識担体Ｍは、ＨｂＡ１ｃ（以下必要に応じてＨｂＡ１ｃと略記する）と反応する第１の蛍光ラテックスと、ヘモグロビン（以下必要に応じてＨｂと略記する）と反応する第２の蛍光ラテックスとを有し、第１の蛍光ラテックス及び第２の蛍光ラテックスに対応する波長の光が少なくとも含まれる光を照射することで、ＨｂＡ１ｃ又はＨｂの集積量を測定可能とするものが挙げられる。
本態様では、照射光は第１の蛍光ラテックス及び第２のラテックスに対応する波長の光が含まれるものであればよく、個別の光源を用いてもよいが、装置構成の簡略化という観点からすれば所定の波長域の光が含まれるＬＥＤが好ましい。
本例では、測定対象物質Ｔの代表例としてはグリコヘモグロビン（ヘモグロビンＡ１ｃ）が挙げられるが、これに限定されるものではなく、免疫測定法で測定可能なものであれば、インフルエンザウィルス等のウィルスを始め適宜選定して差し支えない。
また、標識担体Ｍの代表例としては蛍光ラテックスが挙げられるが、これに限られるものではなく、発色ラテックス等も使用可能である。
更に、測定対象物質ＴとしてヘモグロビンＡ１ｃの好ましい測定方法としては、不溶性の標識担体Ｍは、ＨｂＡ１ｃ（以下必要に応じてＨｂＡ１ｃと略記する）と反応する第１の蛍光ラテックスと、ヘモグロビン（以下必要に応じてＨｂと略記する）と反応する第２の蛍光ラテックスとを有し、第１の蛍光ラテックス及び第２の蛍光ラテックスに対応する波長の光が少なくとも含まれる光を照射することで、ＨｂＡ１ｃ又はＨｂの集積量を測定可能とするものが挙げられる。
本態様では、照射光は第１の蛍光ラテックス及び第２のラテックスに対応する波長の光が含まれるものであればよく、個別の光源を用いてもよいが、装置構成の簡略化という観点からすれば所定の波長域の光が含まれるＬＥＤが好ましい。
また、このような免疫測定方法を具現化した免疫測定装置としては、図１に示すように、毛細管現象により液体が移動可能な素材にて構成された膜状体２を有し、当該膜状体２に測定対象物質Ｔが含まれる検体Ｓを保持する検体保持部３及び予め決められた量の測定対象物質Ｔが含まれる対比用検体Ｓ’を保持する対比用検体保持部４（本例では４ａ，４ｂ）が少なくとも設けられる反応プレート１と、膜状体２に保持された検体Ｓ及び対比用検体Ｓ’に対し展開液Ｗを供給する展開液供給手段１０と、膜状体２に保持された検体Ｓ及び対比用検体Ｓ’に対し測定対象物質Ｔと特異的に抗原抗体反応する不溶性の標識担体Ｍを展開液Ｗと共に供給する標識担体供給手段１１と、検体保持部３及び対比用検体保持部４（４ａ，４ｂ）に対応して設けられ、検体Ｓ及び対比用検体Ｓ’の抗原抗体反応に伴う標識担体Ｍの集積量を測定する測定器具１２と、を備えたものが挙げられる。
このような技術的手段において、反応プレート１は所定の膜状体２を有し、この膜状体２には検体保持部３と対比用検体保持部４（本例では４ａ，４ｂ）とを少なくとも設けるものであればよい。
また、展開液供給手段１０としては、膜状体２に毛細管現象で移動する展開液Ｗを供給する機能要素であれば展開液容器など適宜選定して差し支えない。
更に、標識担体供給手段１１は、展開液Ｗ中に標識担体Ｍを予め混合し、展開液供給手段１０と兼用して設けるようにしてもよいし、あるいは、展開液供給手段１０とは別に設けて膜状体２に別途供給する態様や、あるいは、展開液Ｗが通過する膜状体２の一部に標識担体Ｍを固相し、供給した展開液Ｗに標識担体Ｍを混合する態様など適宜選定して差し支えない。
また、測定器具１２は、標識担体Ｍの種類に応じて抗原抗体反応に伴う標識担体Ｍの集積量を測定可能なものであれば適宜選定して差し支えない。
また、展開液供給手段１０としては、膜状体２に毛細管現象で移動する展開液Ｗを供給する機能要素であれば展開液容器など適宜選定して差し支えない。
更に、標識担体供給手段１１は、展開液Ｗ中に標識担体Ｍを予め混合し、展開液供給手段１０と兼用して設けるようにしてもよいし、あるいは、展開液供給手段１０とは別に設けて膜状体２に別途供給する態様や、あるいは、展開液Ｗが通過する膜状体２の一部に標識担体Ｍを固相し、供給した展開液Ｗに標識担体Ｍを混合する態様など適宜選定して差し支えない。
また、測定器具１２は、標識担体Ｍの種類に応じて抗原抗体反応に伴う標識担体Ｍの集積量を測定可能なものであれば適宜選定して差し支えない。
この種の免疫測定装置としては、医者などのユーザの利便性を考慮し、免疫測定用キットを用意することが好ましい。
この種の免疫測定用キットとしては、免疫測定時に使用される反応プレート１を含み、反応プレート１が、毛細管現象により液体が移動可能な素材にて構成された膜状体２と、この膜状体２の一部に設けられ、測定対象物質Ｔが含まれる検体Ｓを保持する検体保持部３と、膜状体２の一部に設けられ、予め決められた量の測定対象物質Ｔが含まれる対比用検体Ｓ’を保持する対比用検体保持部４（４ａ，４ｂ）と、膜状体２の一部に設けられ、膜状体２に保持された検体Ｓ及び対比用検体Ｓ’に対し展開液Ｗを供給する展開液供給部５と、膜状体２の一部に設けられ、膜状体２に保持された検体Ｓ及び対比用検体Ｓ’に対し測定対象物質Ｔと特異的に抗原抗体反応する不溶性の標識担体Ｍを展開液Ｗと共に供給する標識担体供給部６と、膜状体２の一部に設けられ、検体保持部３及び対比用検体保持部４（４ａ，４ｂ）を通過した余剰の展開液Ｗを吸収する展開液吸収部７と、を備えたものが挙げられる。
このような免疫測定用キットの反応プレート１としては、膜状体２に検体保持部３、対比用検体保持部４を設けるほか、この膜状体２には展開液供給部５にて展開液Ｗを供給可能とし、更に、標識担体供給部６にて標識担体Ｍを供給可能とし、更に、余剰の展開液Ｗを処理する上で展開液吸収部７を設けることが代表的である。ここで、展開液供給部５、標識担体供給部６は別の部位に設けてもよいが、展開液Ｗと標識担体Ｍとが予め混合されている態様では同じ部位に設けるようにすればよい。
この種の免疫測定用キットとしては、免疫測定時に使用される反応プレート１を含み、反応プレート１が、毛細管現象により液体が移動可能な素材にて構成された膜状体２と、この膜状体２の一部に設けられ、測定対象物質Ｔが含まれる検体Ｓを保持する検体保持部３と、膜状体２の一部に設けられ、予め決められた量の測定対象物質Ｔが含まれる対比用検体Ｓ’を保持する対比用検体保持部４（４ａ，４ｂ）と、膜状体２の一部に設けられ、膜状体２に保持された検体Ｓ及び対比用検体Ｓ’に対し展開液Ｗを供給する展開液供給部５と、膜状体２の一部に設けられ、膜状体２に保持された検体Ｓ及び対比用検体Ｓ’に対し測定対象物質Ｔと特異的に抗原抗体反応する不溶性の標識担体Ｍを展開液Ｗと共に供給する標識担体供給部６と、膜状体２の一部に設けられ、検体保持部３及び対比用検体保持部４（４ａ，４ｂ）を通過した余剰の展開液Ｗを吸収する展開液吸収部７と、を備えたものが挙げられる。
このような免疫測定用キットの反応プレート１としては、膜状体２に検体保持部３、対比用検体保持部４を設けるほか、この膜状体２には展開液供給部５にて展開液Ｗを供給可能とし、更に、標識担体供給部６にて標識担体Ｍを供給可能とし、更に、余剰の展開液Ｗを処理する上で展開液吸収部７を設けることが代表的である。ここで、展開液供給部５、標識担体供給部６は別の部位に設けてもよいが、展開液Ｗと標識担体Ｍとが予め混合されている態様では同じ部位に設けるようにすればよい。
次に、免疫測定用キットの代表的態様又は好ましい態様について説明する。
先ず、標識担体供給部６の代表的態様としては、膜状体２上に予め標識担体Ｍを固相し、添加された後の展開液Ｗ中に標識担体Ｍを混合して供給する方式がある。
また、検体保持部３、対比用検体保持部４の好ましい態様としては、展開液供給部５と展開液吸収部７との間に順次並んで配置されている態様が挙げられる。本態様では、展開液Ｗと共に標識担体Ｍを膜状体２の一方側から供給するようにすればよく、このように供給された展開液Ｗと共に標識担体Ｍは毛細管現象により膜状体２の他方側に向けて順次移動していく。
更に、対比用検体保持部４の好ましい態様としては、検体Ｓの測定対象物質Ｔの許容範囲内に選定された対比用検体Ｓ’を保持する第１の対比用検体保持部４ａと、検体Ｓの測定対象物質Ｔの許容範囲外に選定された対比用検体Ｓ’を保持する第２の対比用検体保持部４ｂとを有する態様が挙げられる。
本態様では、第１の対比用検体と第２の対比用検体とに対して夫々抗原抗体反応を把握することで、検体Ｓの保持量のばらつきを補正し、検体Ｓの測定対象物質Ｔを測定することが可能である。
更にまた、免疫測定用キットの代表的態様としては、反応プレート１だけを有する態様でもよいが、更に、反応プレート１にて測定する検体Ｓを採取する検体採取器具（図示せず）を含めるようにしたものが挙げられる。
本態様は、反応プレート１と、検体採取器具とを組み合わせたものであり、例えば検体採取器具として、ユーザの検体Ｓとしての血液を採取し、かつ、採取した検体Ｓとしての血液を希釈可能とするようにすれば、ユーザは免疫測定用キットを購入することで、ユーザが検体Ｓを採取し、かつ、その場で反応プレート１を使用し、検体中の測定対象物質Ｔを検査することが可能である。
先ず、標識担体供給部６の代表的態様としては、膜状体２上に予め標識担体Ｍを固相し、添加された後の展開液Ｗ中に標識担体Ｍを混合して供給する方式がある。
また、検体保持部３、対比用検体保持部４の好ましい態様としては、展開液供給部５と展開液吸収部７との間に順次並んで配置されている態様が挙げられる。本態様では、展開液Ｗと共に標識担体Ｍを膜状体２の一方側から供給するようにすればよく、このように供給された展開液Ｗと共に標識担体Ｍは毛細管現象により膜状体２の他方側に向けて順次移動していく。
更に、対比用検体保持部４の好ましい態様としては、検体Ｓの測定対象物質Ｔの許容範囲内に選定された対比用検体Ｓ’を保持する第１の対比用検体保持部４ａと、検体Ｓの測定対象物質Ｔの許容範囲外に選定された対比用検体Ｓ’を保持する第２の対比用検体保持部４ｂとを有する態様が挙げられる。
本態様では、第１の対比用検体と第２の対比用検体とに対して夫々抗原抗体反応を把握することで、検体Ｓの保持量のばらつきを補正し、検体Ｓの測定対象物質Ｔを測定することが可能である。
更にまた、免疫測定用キットの代表的態様としては、反応プレート１だけを有する態様でもよいが、更に、反応プレート１にて測定する検体Ｓを採取する検体採取器具（図示せず）を含めるようにしたものが挙げられる。
本態様は、反応プレート１と、検体採取器具とを組み合わせたものであり、例えば検体採取器具として、ユーザの検体Ｓとしての血液を採取し、かつ、採取した検体Ｓとしての血液を希釈可能とするようにすれば、ユーザは免疫測定用キットを購入することで、ユーザが検体Ｓを採取し、かつ、その場で反応プレート１を使用し、検体中の測定対象物質Ｔを検査することが可能である。
以下、添付図面に示す実施の形態に基づいてこの発明を詳細に説明する。
◎実施の形態１
図２及び図３は実施の形態１に係る免疫測定装置の全体構成を示す。
−免疫測定装置の全体構成−
同図において、免疫測定装置２０は、採血された血液中に含まれるＨｂＡ１ｃ（ヘモグロビンＡ１ｃに相当）について抗原抗体反応させる反応プレート２１と、この反応プレート２１の反応結果からＨｂＡ１ｃ（％）を測定する測定器具２２と、を備えている。
ここで、ＨｂＡ１ｃは、血液の赤血球中の蛋白質であるＨｂ（ヘモグロビンに相当）に糖分がどの程度結合しているかを調べる検査で、過去１〜２ヶ月の平均的な血糖値の高さを知ることができる指標である。一般に、血糖値そのものは時々刻々と変化し、一回の検査ではばらつきが生じてしまうのに対し、ＨｂＡ１ｃ値は直前の食事の影響などを受けずに、平均的な血糖値の高さを把握する上で有効な指標である。
◎実施の形態１
図２及び図３は実施の形態１に係る免疫測定装置の全体構成を示す。
−免疫測定装置の全体構成−
同図において、免疫測定装置２０は、採血された血液中に含まれるＨｂＡ１ｃ（ヘモグロビンＡ１ｃに相当）について抗原抗体反応させる反応プレート２１と、この反応プレート２１の反応結果からＨｂＡ１ｃ（％）を測定する測定器具２２と、を備えている。
ここで、ＨｂＡ１ｃは、血液の赤血球中の蛋白質であるＨｂ（ヘモグロビンに相当）に糖分がどの程度結合しているかを調べる検査で、過去１〜２ヶ月の平均的な血糖値の高さを知ることができる指標である。一般に、血糖値そのものは時々刻々と変化し、一回の検査ではばらつきが生じてしまうのに対し、ＨｂＡ１ｃ値は直前の食事の影響などを受けずに、平均的な血糖値の高さを把握する上で有効な指標である。
−反応プレート−
本実施の形態において、反応プレート２１は、図２乃至図４（ａ）（ｂ）に示すように、一方向に沿って延びる長尺な樹脂製のプレート本体３０を有し、このプレート本体３０の両端を略半円状の円弧部３０ａに形成すると共に、プレート本体３０の一端側には当該プレート本体３０が把持可能な把持部３１として表面に複数の溝部３１ａが一体的に配列された態様のものを形成し、この把持部３１に隣接したプレート本体３０には把持部３１及び周囲の壁部で囲まれる浅い凹部３２を形成したものである。
そして、プレート本体３０の凹部３２内には把持部３１側から順に、展開液Ｗが供給可能な展開液パッド３３、検体としての血液中に含まれる測定対象物質であるＨｂＡ１ｃ及びＨｂと夫々特異的に抗原抗体反応する標識担体Ｍが予め固相されるコンジュゲートパッド３４、展開液Ｗ及び標識担体Ｍが毛細管現象にて浸透しながら長手方向に沿って移動する膜状体に相当するメンブレン３５、及び、余剰の展開液Ｗを吸収する吸収パッド３６が設けられている。
本実施の形態において、反応プレート２１は、図２乃至図４（ａ）（ｂ）に示すように、一方向に沿って延びる長尺な樹脂製のプレート本体３０を有し、このプレート本体３０の両端を略半円状の円弧部３０ａに形成すると共に、プレート本体３０の一端側には当該プレート本体３０が把持可能な把持部３１として表面に複数の溝部３１ａが一体的に配列された態様のものを形成し、この把持部３１に隣接したプレート本体３０には把持部３１及び周囲の壁部で囲まれる浅い凹部３２を形成したものである。
そして、プレート本体３０の凹部３２内には把持部３１側から順に、展開液Ｗが供給可能な展開液パッド３３、検体としての血液中に含まれる測定対象物質であるＨｂＡ１ｃ及びＨｂと夫々特異的に抗原抗体反応する標識担体Ｍが予め固相されるコンジュゲートパッド３４、展開液Ｗ及び標識担体Ｍが毛細管現象にて浸透しながら長手方向に沿って移動する膜状体に相当するメンブレン３５、及び、余剰の展開液Ｗを吸収する吸収パッド３６が設けられている。
＜展開液パッド＞
展開液パッド３３は反応プレート２１の凹部３２に図示外の接着シート等を用いて固定されている。そして、展開液パッド３３としては、多孔質のポリエチレンやポリプロピレン等の多孔質合成樹脂製のシート又はフィルムや、濾紙のようなセルロース製の紙や、綿布のような織布若しくは不織布を用いることができる。
ここで、展開液Ｗとしては、イムノクロマト測定法で使用可能なものであれば適宜選定して差し支えなく、例えば水系溶媒として水、生理食塩水、緩衝液などが使用される。そして、緩衝液としては、トリス緩衝液、リン酸緩衝液、ＨＥＰＥＳ（２−ヒドロキシピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸）緩衝液などが挙げられる。更に、展開液Ｗには、必要に応じてｐＨ調整剤（例えば塩酸などの酸性剤又は水酸化ナトリウム等のアルカリ性剤）、界面活性剤、防腐剤、無機塩等の各種添加剤を含有させることも可能である。
＜吸収パッド＞
吸収パッド３６としては、余剰の展開液Ｗを吸収して保持可能な素材であれはよく、濾紙、綿布、あるいは、多孔質合成樹脂製の不織布を用いることができる。そして、吸収パッド３６は反応プレート２１の凹部３２に図示外の接着シート等を用いて固定されており、その一端がメンブレン３５の一端を覆うように配置されている。
展開液パッド３３は反応プレート２１の凹部３２に図示外の接着シート等を用いて固定されている。そして、展開液パッド３３としては、多孔質のポリエチレンやポリプロピレン等の多孔質合成樹脂製のシート又はフィルムや、濾紙のようなセルロース製の紙や、綿布のような織布若しくは不織布を用いることができる。
ここで、展開液Ｗとしては、イムノクロマト測定法で使用可能なものであれば適宜選定して差し支えなく、例えば水系溶媒として水、生理食塩水、緩衝液などが使用される。そして、緩衝液としては、トリス緩衝液、リン酸緩衝液、ＨＥＰＥＳ（２−ヒドロキシピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸）緩衝液などが挙げられる。更に、展開液Ｗには、必要に応じてｐＨ調整剤（例えば塩酸などの酸性剤又は水酸化ナトリウム等のアルカリ性剤）、界面活性剤、防腐剤、無機塩等の各種添加剤を含有させることも可能である。
＜吸収パッド＞
吸収パッド３６としては、余剰の展開液Ｗを吸収して保持可能な素材であれはよく、濾紙、綿布、あるいは、多孔質合成樹脂製の不織布を用いることができる。そして、吸収パッド３６は反応プレート２１の凹部３２に図示外の接着シート等を用いて固定されており、その一端がメンブレン３５の一端を覆うように配置されている。
＜コンジュゲートパッド＞
コンジュゲートパッド３４は展開液パッド３３と略同様な素材で構成されており、反応プレート２１の凹部３２に図示外の接着シート等を用いて固定されている。そして、コンジュゲートパッド３４の一端が展開液パッド３３に接触して覆われており、他端がメンブレン３５の一端を覆うように接触配置されている。
そして、このコンジュゲートパッド３４には、図４（ａ）（ｂ）に示すように、ＨｂＡ１ｃ及びＨｂと夫々特異的に抗原抗体反応する標識担体Ｍが予め固相されている。本例の標識担体Ｍとしては、Ｈｂと特異的に抗原抗体反応するＡｎｔｉ−Ｈｂ感作の緑成分で蛍光する第１の蛍光ラテックスＭ１と、ＨｂＡ１ｃと特異的に抗原抗体反応するＡｎｔｉ−ＨｂＡ１ｃ感作の赤成分で蛍光する第２の蛍光ラテックスＭ２とが用いられている。
各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２はコンジュゲートパッド３４に半固相体３４１を介して固相されており、展開液パッド３３に添加された展開液Ｗが毛細管現象によりコンジュゲートパッド３４に移動してきた際に、半固相体３４１から外れて展開液Ｗと共にメンブレン３５に向かって順次移動するものである。
コンジュゲートパッド３４は展開液パッド３３と略同様な素材で構成されており、反応プレート２１の凹部３２に図示外の接着シート等を用いて固定されている。そして、コンジュゲートパッド３４の一端が展開液パッド３３に接触して覆われており、他端がメンブレン３５の一端を覆うように接触配置されている。
そして、このコンジュゲートパッド３４には、図４（ａ）（ｂ）に示すように、ＨｂＡ１ｃ及びＨｂと夫々特異的に抗原抗体反応する標識担体Ｍが予め固相されている。本例の標識担体Ｍとしては、Ｈｂと特異的に抗原抗体反応するＡｎｔｉ−Ｈｂ感作の緑成分で蛍光する第１の蛍光ラテックスＭ１と、ＨｂＡ１ｃと特異的に抗原抗体反応するＡｎｔｉ−ＨｂＡ１ｃ感作の赤成分で蛍光する第２の蛍光ラテックスＭ２とが用いられている。
各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２はコンジュゲートパッド３４に半固相体３４１を介して固相されており、展開液パッド３３に添加された展開液Ｗが毛細管現象によりコンジュゲートパッド３４に移動してきた際に、半固相体３４１から外れて展開液Ｗと共にメンブレン３５に向かって順次移動するものである。
＜メンブレン＞
メンブレン３５としては、展開液Ｗが各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２と共に毛細管現象にて順次長手方向に移動するものであれば、セルロース製膜、ナイロン製膜、ガラス製繊維膜など適宜選定して用いることが可能である。
本例では、メンブレン３５の略中央には、検体Ｓとしての血液を予め決められた割合で希釈して保持する検体保持部４０が設けられ、メンブレン３５のうち検体保持部４０よりも展開液Ｗの移動方向上流側には、検体Ｓの測定対象物質の許容範囲内（つまり正常範囲内）に選定された対比用検体Ｃ１としての血液を予め決められた割合で希釈して保持した第１の対比用検体保持部としての第１コントロール部４１が設けられる一方、メンブレン３５のうち検体保持部４０よりも展開液Ｗの移動方向下流側には、検体Ｓの測定対象物質の許容範囲外（つまり異常範囲）に選定された対比用検体Ｃ２としての血液を予め決められた割合で希釈して保持した第２の対比用検体保持部としての第２コントロール部４２が設けられている。
ここで、検体保持部４０は、検体Ｓとしての血液を予め決められた割合（例えば１０００倍）で希釈したものを所定量（例えば１〜２μｌ）塗布し、所定の温度（例えば３７℃）に恒温された図示外の恒温ブロックにて塗布された検体Ｓとしての血液を乾燥させることでメンブレン３５上に熱変性させた状態で保持するものである（図１１（ａ）参照）。なお、符号４０１は検体Ｓとしての血液中の測定対象物質（Ｈｂ，ＨｂＡ１ｃ）を強固に固相する固相体を示す。
また、第１のコントロール部４１は、正常範囲にある対比用検体Ｃ１としての血液を予め決められた割合（例えば１０００倍）で希釈したものを予め所定量（例えば１〜２μｌ）塗布し、予め所定の温度（例えば３７℃）に加温することで血液Ｃ１を乾燥させ、メンブレン３５上に熱変性させた状態で保持したものである。
一方、第２のコントロール部４２は、異常範囲にある対比用検体Ｃ２としての血液を予め決められた割合（例えば１０００倍）で希釈したものを予め所定量（例えば１〜２μｌ）塗布し、予め所定の温度（例えば３７℃）に加温することで血液Ｃ２を乾燥させ、メンブレン３５上に熱変性させた状態で保持したものである。
メンブレン３５としては、展開液Ｗが各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２と共に毛細管現象にて順次長手方向に移動するものであれば、セルロース製膜、ナイロン製膜、ガラス製繊維膜など適宜選定して用いることが可能である。
本例では、メンブレン３５の略中央には、検体Ｓとしての血液を予め決められた割合で希釈して保持する検体保持部４０が設けられ、メンブレン３５のうち検体保持部４０よりも展開液Ｗの移動方向上流側には、検体Ｓの測定対象物質の許容範囲内（つまり正常範囲内）に選定された対比用検体Ｃ１としての血液を予め決められた割合で希釈して保持した第１の対比用検体保持部としての第１コントロール部４１が設けられる一方、メンブレン３５のうち検体保持部４０よりも展開液Ｗの移動方向下流側には、検体Ｓの測定対象物質の許容範囲外（つまり異常範囲）に選定された対比用検体Ｃ２としての血液を予め決められた割合で希釈して保持した第２の対比用検体保持部としての第２コントロール部４２が設けられている。
ここで、検体保持部４０は、検体Ｓとしての血液を予め決められた割合（例えば１０００倍）で希釈したものを所定量（例えば１〜２μｌ）塗布し、所定の温度（例えば３７℃）に恒温された図示外の恒温ブロックにて塗布された検体Ｓとしての血液を乾燥させることでメンブレン３５上に熱変性させた状態で保持するものである（図１１（ａ）参照）。なお、符号４０１は検体Ｓとしての血液中の測定対象物質（Ｈｂ，ＨｂＡ１ｃ）を強固に固相する固相体を示す。
また、第１のコントロール部４１は、正常範囲にある対比用検体Ｃ１としての血液を予め決められた割合（例えば１０００倍）で希釈したものを予め所定量（例えば１〜２μｌ）塗布し、予め所定の温度（例えば３７℃）に加温することで血液Ｃ１を乾燥させ、メンブレン３５上に熱変性させた状態で保持したものである。
一方、第２のコントロール部４２は、異常範囲にある対比用検体Ｃ２としての血液を予め決められた割合（例えば１０００倍）で希釈したものを予め所定量（例えば１〜２μｌ）塗布し、予め所定の温度（例えば３７℃）に加温することで血液Ｃ２を乾燥させ、メンブレン３５上に熱変性させた状態で保持したものである。
−免疫測定用キット−
本実施の形態では、免疫測定用キット２５は、図２，図３及び図５に示すように、一若しくは複数枚の反応プレート２１と、検体Ｓとしての血液を採取する採血器具５０とを組み合わせた消耗品のセットとしてユーザに提供されるようになっている。
このため、ユーザは、免疫測定装置２０の使用に当たり、寿命の長い測定器具２２を予め購入しておけば、必要に応じて免疫測定用キット２５をその都度購入するようにすればよい。
−採血器具−
本例では、採血器具５０は、図５（ａ）（ｂ）に示すように、検体Ｓとしての血液を採取する採血器本体５１と、この採血器本体５１で採取した血液を希釈水にて希釈する希釈容器５７とを有し、例えばポリプロピレン等の合成樹脂にて構成されている。
＜採血器本体＞
本例では、採血器本体５１は、図５（ｃ）（ｄ）に示すように、円筒状の摘まみ部５２を有し、この摘まみ部５２の一端側には鍔状のフランジ部５３を形成すると共に、摘まみ部５２の直径部を一辺とする三角形状の突出板５４を形成し、この突出板５４の先端部に矩形状の採血受片５５を設け、この採血受片５５に血液が保持可能な切込溝５６を形成したものである。ここで、切込溝５６は採取すべき採血量に応じて切り込み形成されるものであって、例えば採血量１μｌを必要とする場合に幅寸法、深さ寸法が０．５ｍｍ、長さ寸法が４ｍｍに設定されている。
本実施の形態では、免疫測定用キット２５は、図２，図３及び図５に示すように、一若しくは複数枚の反応プレート２１と、検体Ｓとしての血液を採取する採血器具５０とを組み合わせた消耗品のセットとしてユーザに提供されるようになっている。
このため、ユーザは、免疫測定装置２０の使用に当たり、寿命の長い測定器具２２を予め購入しておけば、必要に応じて免疫測定用キット２５をその都度購入するようにすればよい。
−採血器具−
本例では、採血器具５０は、図５（ａ）（ｂ）に示すように、検体Ｓとしての血液を採取する採血器本体５１と、この採血器本体５１で採取した血液を希釈水にて希釈する希釈容器５７とを有し、例えばポリプロピレン等の合成樹脂にて構成されている。
＜採血器本体＞
本例では、採血器本体５１は、図５（ｃ）（ｄ）に示すように、円筒状の摘まみ部５２を有し、この摘まみ部５２の一端側には鍔状のフランジ部５３を形成すると共に、摘まみ部５２の直径部を一辺とする三角形状の突出板５４を形成し、この突出板５４の先端部に矩形状の採血受片５５を設け、この採血受片５５に血液が保持可能な切込溝５６を形成したものである。ここで、切込溝５６は採取すべき採血量に応じて切り込み形成されるものであって、例えば採血量１μｌを必要とする場合に幅寸法、深さ寸法が０．５ｍｍ、長さ寸法が４ｍｍに設定されている。
＜希釈容器＞
また、希釈容器５７は、一端が開口した円筒状の容器胴体５７ａを有し、この容器胴体５７ａの他端側に中空円錐状の容器突部５７ｂを形成すると共に、この容器突部５７ｂの先端に注入孔５７ｃを形成する一方、容器胴体５７ａの一端側には鍔状のフランジ部５７ｄを形成したものである。なお、容器突部５７ｂの先端には注入孔５７ｃを開閉するためのキャップ５８が着脱可能に装着されている。
本例では、採血器本体５１は希釈容器５７の容器胴体５７ａ内に嵌め込まれ、採血器本体５１のフランジ部５３が容器胴体５７ａのフランジ部５７ｄに支えられるようになっている。
また、希釈容器５７は、一端が開口した円筒状の容器胴体５７ａを有し、この容器胴体５７ａの他端側に中空円錐状の容器突部５７ｂを形成すると共に、この容器突部５７ｂの先端に注入孔５７ｃを形成する一方、容器胴体５７ａの一端側には鍔状のフランジ部５７ｄを形成したものである。なお、容器突部５７ｂの先端には注入孔５７ｃを開閉するためのキャップ５８が着脱可能に装着されている。
本例では、採血器本体５１は希釈容器５７の容器胴体５７ａ内に嵌め込まれ、採血器本体５１のフランジ部５３が容器胴体５７ａのフランジ部５７ｄに支えられるようになっている。
＜採血器具の使用方法＞
（１）採血時処理
採血器具５０の採血器本体５１を希釈容器５７から外し、採血器本体５１の採血受片５５に検体Ｓとしての血液を接触させるようにすれば、毛細管現象により、切込溝５６に所定量（本例では１ｍｌ）の血液が採取される。
（２）血液の希釈処理
キャップ５８をした状態の希釈容器５７に所定量（例えば１ｃｃ）の希釈水を注入した後、希釈容器５７に採血器本体５１を嵌め込む。この状態において、採血器本体５１の切込溝５６に保持されている血液は希釈水に浸かり、採取された血液は希釈水によって予め決められた割合に希釈される。
（３）反応プレートへの添加処理
血液の希釈処理が終了すると、希釈容器５７のキャップ５８を取り外した後、反応プレート２１の検体保持部４０の上方に採血器具５０の注入孔５７ｃを配置し、この状態で、希釈容器５７を外側から変形させ、図５（ｂ）に示すように、希釈容器５７内の希釈された検体Ｓとしての血液を注入孔５７ｃから落下させ、反応プレート２１の検体保持部４０に検体Ｓとしての血液を添加するようにすればよい。
なお、血液添加後に、検体保持部４０に検体Ｓとしての血液を保持させるには前述したように所定の乾燥処理を施すようにすればよい。
（１）採血時処理
採血器具５０の採血器本体５１を希釈容器５７から外し、採血器本体５１の採血受片５５に検体Ｓとしての血液を接触させるようにすれば、毛細管現象により、切込溝５６に所定量（本例では１ｍｌ）の血液が採取される。
（２）血液の希釈処理
キャップ５８をした状態の希釈容器５７に所定量（例えば１ｃｃ）の希釈水を注入した後、希釈容器５７に採血器本体５１を嵌め込む。この状態において、採血器本体５１の切込溝５６に保持されている血液は希釈水に浸かり、採取された血液は希釈水によって予め決められた割合に希釈される。
（３）反応プレートへの添加処理
血液の希釈処理が終了すると、希釈容器５７のキャップ５８を取り外した後、反応プレート２１の検体保持部４０の上方に採血器具５０の注入孔５７ｃを配置し、この状態で、希釈容器５７を外側から変形させ、図５（ｂ）に示すように、希釈容器５７内の希釈された検体Ｓとしての血液を注入孔５７ｃから落下させ、反応プレート２１の検体保持部４０に検体Ｓとしての血液を添加するようにすればよい。
なお、血液添加後に、検体保持部４０に検体Ｓとしての血液を保持させるには前述したように所定の乾燥処理を施すようにすればよい。
−測定器具−
測定器具２２は、図２、図３、図６（ａ）（ｂ）及び図７に示すように、略筺形状の器具筐体６０を有し、この器具筐体６０の上面を緩やかな傾斜部６１として形成し、この傾斜部６１の上側には表示器（ディスプレイ）６２を設置すると共に、傾斜部６１の下側には各種の操作ボタン６３を設置したものである。尚、符号６４は傾斜部６１の中央付近に設けられた測定器具２２のネームプレートである。
また、器具筐体６０のうち傾斜部６１の低い側に位置する側壁には反応プレート２１の挿入口６５が開設されている。
そして、器具筐体６０内には、挿入口６５から挿入された反応プレート２１が予め決められた位置に至るまで案内される案内受部６６が設けられ、案内受部６６の奥側には反応プレート２１が正規の位置にセットされたか否かを検出する位置検出器（図示せず）が設けられている。
また、案内受部６６のうち反応プレート２１のメンブレン３５の検体保持部４０及び第１、第２のコントロール部４１，４２が露呈する箇所には測定開口６７が開設されている。
更に、本実施の形態では、器具筐体６０内には測定開口６７に面して当該測定開口６７を上側から覆う断面略台形状の支持カバー６８が設けられ、この支持カバー６８の一方の斜め側壁には測定開口６７に向かって測定用の光を照射するＬＥＤ７０が設置されており、また、支持カバー６８の測定開口６７に対向する対向壁にはカメラ等の撮像器具８０が設置されている。
ここで、ＬＥＤ７０は多波長の光成分を含む光を照射するものであることから、第１の蛍光ラテックスＭ１（緑蛍光）を蛍光させる光成分（緑成分）と、第２の蛍光ラテックスＭ２（赤蛍光）を蛍光させる光成分（赤成分）とに色分解することで、夫々対応した第１の蛍光ラテックスＭ１又は第２の蛍光ラテックスＭ２の集積量を求めることができるようになっている。尚、本例では，光源としてＬＥＤ７０を使用しているが、予め決められた単波長の光を照射する光源を個々的に使用してもよい。
また、撮像器具８０は第１の蛍光ラテックスＭ１又は第２の蛍光ラテックスＭ２の集積量を把握することが可能であれば適宜選定して差し支えなく、例えば各蛍光ラテックスＭ１又はＭ２の光学情報を明度情報に置換して処理するようにすればよい。
測定器具２２は、図２、図３、図６（ａ）（ｂ）及び図７に示すように、略筺形状の器具筐体６０を有し、この器具筐体６０の上面を緩やかな傾斜部６１として形成し、この傾斜部６１の上側には表示器（ディスプレイ）６２を設置すると共に、傾斜部６１の下側には各種の操作ボタン６３を設置したものである。尚、符号６４は傾斜部６１の中央付近に設けられた測定器具２２のネームプレートである。
また、器具筐体６０のうち傾斜部６１の低い側に位置する側壁には反応プレート２１の挿入口６５が開設されている。
そして、器具筐体６０内には、挿入口６５から挿入された反応プレート２１が予め決められた位置に至るまで案内される案内受部６６が設けられ、案内受部６６の奥側には反応プレート２１が正規の位置にセットされたか否かを検出する位置検出器（図示せず）が設けられている。
また、案内受部６６のうち反応プレート２１のメンブレン３５の検体保持部４０及び第１、第２のコントロール部４１，４２が露呈する箇所には測定開口６７が開設されている。
更に、本実施の形態では、器具筐体６０内には測定開口６７に面して当該測定開口６７を上側から覆う断面略台形状の支持カバー６８が設けられ、この支持カバー６８の一方の斜め側壁には測定開口６７に向かって測定用の光を照射するＬＥＤ７０が設置されており、また、支持カバー６８の測定開口６７に対向する対向壁にはカメラ等の撮像器具８０が設置されている。
ここで、ＬＥＤ７０は多波長の光成分を含む光を照射するものであることから、第１の蛍光ラテックスＭ１（緑蛍光）を蛍光させる光成分（緑成分）と、第２の蛍光ラテックスＭ２（赤蛍光）を蛍光させる光成分（赤成分）とに色分解することで、夫々対応した第１の蛍光ラテックスＭ１又は第２の蛍光ラテックスＭ２の集積量を求めることができるようになっている。尚、本例では，光源としてＬＥＤ７０を使用しているが、予め決められた単波長の光を照射する光源を個々的に使用してもよい。
また、撮像器具８０は第１の蛍光ラテックスＭ１又は第２の蛍光ラテックスＭ２の集積量を把握することが可能であれば適宜選定して差し支えなく、例えば各蛍光ラテックスＭ１又はＭ２の光学情報を明度情報に置換して処理するようにすればよい。
−制御装置−
測定器具２２の器具筐体６０内には制御装置１００が内蔵されている。この制御装置１００はＣＰＵ、ＲＡＭ、ＲＯＭ及び入出力ポートを含むマイクロコンピュータシステムからなり、例えばＲＯＭ内にＨｂＡ１ｃ測定制御プログラム（例えば図８，図９参照）が予めインストールされ、操作ボタン６３や図示外の位置検出器からの入力信号を受けてＣＰＵにて前述したＨｂＡ１ｃ測定制御プログラムを実行し、ＬＥＤ７０、撮像器具８０及び表示器６２に所定の制御信号を送出するようにしたものである。
測定器具２２の器具筐体６０内には制御装置１００が内蔵されている。この制御装置１００はＣＰＵ、ＲＡＭ、ＲＯＭ及び入出力ポートを含むマイクロコンピュータシステムからなり、例えばＲＯＭ内にＨｂＡ１ｃ測定制御プログラム（例えば図８，図９参照）が予めインストールされ、操作ボタン６３や図示外の位置検出器からの入力信号を受けてＣＰＵにて前述したＨｂＡ１ｃ測定制御プログラムを実行し、ＬＥＤ７０、撮像器具８０及び表示器６２に所定の制御信号を送出するようにしたものである。
−反応プレートによる反応過程（図１０，図１１）−
先ず、反応プレート２１による反応過程について説明する。
ユーザは、前述したように、採血器具５０を用いて検体Ｓとしての血液を採取すると共に、希釈液にて所定の割合に希釈する。
この後、ユーザは反応プレート２１のメンブレン３５の検体保持部４０に検体Ｓとしての血液を添加し、図示外の恒温ブロックにて血液を乾燥させるようにする。
すると、図１１（ａ）に示すように、血液中の測定対象物質（Ｈｂ，ＨｂＡ１ｃ）は熱変性した状態で固相体４０１を介して検体保持部４０に保持される。
＜展開液の供給＞
この状態において、ユーザは、図１０（ａ）に示すように、反応プレート２１の展開液パッド３３に展開液Ｗを供給する。このとき、展開液Ｗの供給方法としては、スポイトや自動供給器具を用いるようにすればよい。
すると、展開液Ｗは毛細管現象によって展開液パッド３３からコンジュゲートパッド３４へと移動していく。
＜各蛍光ラテックスの展開液への混入＞
コンジュゲートパッド３４では、図１０（ｂ）に示すように、各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２は半固相体３４１を介して固相されているが、展開液Ｗが移動してくると、展開液Ｗの移動に伴って各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２が展開液Ｗ中に混入し、展開液Ｗと共に毛細管現象によりメンブレン３５へと移動していく。
先ず、反応プレート２１による反応過程について説明する。
ユーザは、前述したように、採血器具５０を用いて検体Ｓとしての血液を採取すると共に、希釈液にて所定の割合に希釈する。
この後、ユーザは反応プレート２１のメンブレン３５の検体保持部４０に検体Ｓとしての血液を添加し、図示外の恒温ブロックにて血液を乾燥させるようにする。
すると、図１１（ａ）に示すように、血液中の測定対象物質（Ｈｂ，ＨｂＡ１ｃ）は熱変性した状態で固相体４０１を介して検体保持部４０に保持される。
＜展開液の供給＞
この状態において、ユーザは、図１０（ａ）に示すように、反応プレート２１の展開液パッド３３に展開液Ｗを供給する。このとき、展開液Ｗの供給方法としては、スポイトや自動供給器具を用いるようにすればよい。
すると、展開液Ｗは毛細管現象によって展開液パッド３３からコンジュゲートパッド３４へと移動していく。
＜各蛍光ラテックスの展開液への混入＞
コンジュゲートパッド３４では、図１０（ｂ）に示すように、各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２は半固相体３４１を介して固相されているが、展開液Ｗが移動してくると、展開液Ｗの移動に伴って各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２が展開液Ｗ中に混入し、展開液Ｗと共に毛細管現象によりメンブレン３５へと移動していく。
＜各蛍光ラテックスによる抗原抗体反応＞
この後、メンブレン３５に各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２の混入した展開液Ｗが移動していくと、図１０（ｂ）に示すように、先ず、第１のコントロール部４１にて各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２による抗原抗体反応が生ずる。
更に、第１のコントロール部４１を通過した展開液Ｗには依然として多くの各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２が混入しており、図１０（ｃ）に示すように、このような展開液Ｗが検体保持部４０に至ると、検体保持部４０にて各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２による抗原抗体反応が生ずる。
更にまた、検体保持部４０を通過した展開液Ｗには依然として多くの各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２が混入しており、図１０（ｃ）に示すように、このような展開液Ｗが第２のコントロール部４２に至ると、第２のコントロール部４２にて各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２による抗原抗体反応が生ずる。
このように、第１のコントロール部４１、検体保持部４０及び第２のコントロール部４２では、いずれも同様な抗原抗体反応が生じており、図１１（ｂ）（ｃ）に示すように、検体Ｓ（又は対比用検体Ｃ１，Ｃ２）に含まれる抗原であるＨｂ又はＨｂＡ１ｃに対し、夫々第１の蛍光ラテックスＭ１、第２の蛍光ラテックスＭ２が対応する抗原量に応じて結合する。
ここで、第１のコントロール部４１では、対比用検体Ｃ１（正常範囲内の検体Ｓに相当）における抗原抗体反応の結果が得られ、検体保持部４０では、検体Ｓにおける抗原抗体反応の結果が得られ、第２のコントロール部４２では、対比用検体Ｃ２（正常範囲外の検体に相当）における抗原抗体反応の結果が得られる。
この後、メンブレン３５に各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２の混入した展開液Ｗが移動していくと、図１０（ｂ）に示すように、先ず、第１のコントロール部４１にて各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２による抗原抗体反応が生ずる。
更に、第１のコントロール部４１を通過した展開液Ｗには依然として多くの各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２が混入しており、図１０（ｃ）に示すように、このような展開液Ｗが検体保持部４０に至ると、検体保持部４０にて各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２による抗原抗体反応が生ずる。
更にまた、検体保持部４０を通過した展開液Ｗには依然として多くの各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２が混入しており、図１０（ｃ）に示すように、このような展開液Ｗが第２のコントロール部４２に至ると、第２のコントロール部４２にて各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２による抗原抗体反応が生ずる。
このように、第１のコントロール部４１、検体保持部４０及び第２のコントロール部４２では、いずれも同様な抗原抗体反応が生じており、図１１（ｂ）（ｃ）に示すように、検体Ｓ（又は対比用検体Ｃ１，Ｃ２）に含まれる抗原であるＨｂ又はＨｂＡ１ｃに対し、夫々第１の蛍光ラテックスＭ１、第２の蛍光ラテックスＭ２が対応する抗原量に応じて結合する。
ここで、第１のコントロール部４１では、対比用検体Ｃ１（正常範囲内の検体Ｓに相当）における抗原抗体反応の結果が得られ、検体保持部４０では、検体Ｓにおける抗原抗体反応の結果が得られ、第２のコントロール部４２では、対比用検体Ｃ２（正常範囲外の検体に相当）における抗原抗体反応の結果が得られる。
−測定器具による測定処理−
反応プレート２１による抗原抗体反応が終了すると、その反応結果を測定器具２２にて測定する必要がある。
先ず、ユーザは、図２及び図３に示すように、測定器具２２の挿入口６５から反応プレート２１を挿入し、案内受部６６に沿ってセットする。
この状態おいて、制御装置１００は、図８に示すように、反応プレート２１が正規位置にセットされたか否かを判別し、反応プレート２１が正規位置にセットされていれば、操作ボタン６３がオンされたか否かを判別する。
そして、制御装置１００は、操作ボタン６３がオンされると、ＬＥＤ７０を点灯し、撮像器具８０にて検体ポイント（検体保持部４０）、対比ポイント（第１のコントロール部４１、第２のコントロール部４２）におけるＨｂＡ１ｃの抗原抗体反応の結果を撮像する。
この後、制御装置１００は、撮像器具８０による撮像結果に基づいてＨｂＡ１ｃを算出し、表示器６２に測定結果を表示する。
反応プレート２１による抗原抗体反応が終了すると、その反応結果を測定器具２２にて測定する必要がある。
先ず、ユーザは、図２及び図３に示すように、測定器具２２の挿入口６５から反応プレート２１を挿入し、案内受部６６に沿ってセットする。
この状態おいて、制御装置１００は、図８に示すように、反応プレート２１が正規位置にセットされたか否かを判別し、反応プレート２１が正規位置にセットされていれば、操作ボタン６３がオンされたか否かを判別する。
そして、制御装置１００は、操作ボタン６３がオンされると、ＬＥＤ７０を点灯し、撮像器具８０にて検体ポイント（検体保持部４０）、対比ポイント（第１のコントロール部４１、第２のコントロール部４２）におけるＨｂＡ１ｃの抗原抗体反応の結果を撮像する。
この後、制御装置１００は、撮像器具８０による撮像結果に基づいてＨｂＡ１ｃを算出し、表示器６２に測定結果を表示する。
＜ＨｂＡ１ｃ算出処理＞
ここで、ＨｂＡ１ｃの算出処理について図９、図１２及び図１３に基づいて詳述する。
制御装置１００は、先ず、図９に示すように、撮像結果を所定の蛍光成分（緑成分・赤成分）毎に色分解する。
そして、制御装置１００は、対比用検体Ｃ１，Ｃ２及び検体Ｓの緑成分（Ｈｂ凝集体）をピクセル化して平均値を演算する。同様に、対比用検体Ｃ１，Ｃ２及び検体Ｓの赤成分（ＨｂＡ１ｃ凝集体）をピクセル化して平均値を演算する。
つまり、図１２に示すように、ＬＥＤ７０を照射することで撮像器具８０にて撮影すると、例えば緑蛍光Ｌｘ（Ｌｘ：ラテックスの略）による第１の蛍光ラテックスＭ１の集積量はＨｂに結合してＨｂ凝集体になり、これの凝集の程度が（ＧＮ（Ｃ１）、ＧＮ（Ｓ）、ＧＮ（Ｃ２））という明度情報として得られ、これを数値化（Ａ（Ｃ１）、Ａ（Ｓ）、Ａ（Ｃ２））するようにしたものである。また、赤蛍光Ｌｘによる第２の蛍光ラテックスＭ２の集積量はＨｂＡ１ｃに結合してＨｂＡ１ｃ凝集体になり、これの凝集の程度が（ＲＤ（Ｃ１）、ＲＤ（Ｓ）、ＲＤ（Ｃ２））という明度情報として得られ、これを数値化（Ｂ（Ｃ１）、Ｂ（Ｓ）、Ｂ（Ｃ２））するようにしたものである（図１３（ａ）〜（ｄ）参照）。
このとき、緑蛍光ＬｘによるＧＮに対する数値化（Ａ（Ｃ１）、Ａ（Ｓ）、Ａ（Ｃ２））は三者であまり変化がないが、赤蛍光ＬｘによるＲＤに対する数値化（Ｂ（Ｃ１）、Ｂ（Ｓ）、Ｂ（Ｃ２））はＢ（Ｃ１）＜Ｂ（Ｃ２）の傾向があり、Ｂ（Ｓ）がＢ（Ｃ１）又はＢ（Ｃ２）のどちら寄りかが把握される。
ここで、ＨｂＡ１ｃの算出処理について図９、図１２及び図１３に基づいて詳述する。
制御装置１００は、先ず、図９に示すように、撮像結果を所定の蛍光成分（緑成分・赤成分）毎に色分解する。
そして、制御装置１００は、対比用検体Ｃ１，Ｃ２及び検体Ｓの緑成分（Ｈｂ凝集体）をピクセル化して平均値を演算する。同様に、対比用検体Ｃ１，Ｃ２及び検体Ｓの赤成分（ＨｂＡ１ｃ凝集体）をピクセル化して平均値を演算する。
つまり、図１２に示すように、ＬＥＤ７０を照射することで撮像器具８０にて撮影すると、例えば緑蛍光Ｌｘ（Ｌｘ：ラテックスの略）による第１の蛍光ラテックスＭ１の集積量はＨｂに結合してＨｂ凝集体になり、これの凝集の程度が（ＧＮ（Ｃ１）、ＧＮ（Ｓ）、ＧＮ（Ｃ２））という明度情報として得られ、これを数値化（Ａ（Ｃ１）、Ａ（Ｓ）、Ａ（Ｃ２））するようにしたものである。また、赤蛍光Ｌｘによる第２の蛍光ラテックスＭ２の集積量はＨｂＡ１ｃに結合してＨｂＡ１ｃ凝集体になり、これの凝集の程度が（ＲＤ（Ｃ１）、ＲＤ（Ｓ）、ＲＤ（Ｃ２））という明度情報として得られ、これを数値化（Ｂ（Ｃ１）、Ｂ（Ｓ）、Ｂ（Ｃ２））するようにしたものである（図１３（ａ）〜（ｄ）参照）。
このとき、緑蛍光ＬｘによるＧＮに対する数値化（Ａ（Ｃ１）、Ａ（Ｓ）、Ａ（Ｃ２））は三者であまり変化がないが、赤蛍光ＬｘによるＲＤに対する数値化（Ｂ（Ｃ１）、Ｂ（Ｓ）、Ｂ（Ｃ２））はＢ（Ｃ１）＜Ｂ（Ｃ２）の傾向があり、Ｂ（Ｓ）がＢ（Ｃ１）又はＢ（Ｃ２）のどちら寄りかが把握される。
次いで、制御装置１００は、図９に示すように、対比用検体Ｃ１，Ｃ２及び検体Ｓについて、Ｄ＝赤成分（ＲＤ）／緑成分（ＧＮ）を演算し、Ｄ（Ｃ１）、Ｄ（Ｓ）、Ｄ（Ｃ２）を演算する（図１３（ｅ）参照）。
ここで、ＨｂＡ１ｃが既知であるＤ（Ｃ１）又はＤ（Ｃ２）につき、予め実験などで求められていた検量線データ（Ｌ）と比較し、その差分ΔＵが許容範囲α内か否かを判別する。なお、検量線データ（Ｌ）の作成例については後述する実施例にて示す。
そして、差分ΔＵが許容範囲α内であるときは、得られたＤ（Ｓ）をそのまま決定し、また、差分ΔＵが許容範囲αを超えた条件では、０でない補正量ΔＤを決定し、得られたＤ（Ｓ）につき補正量ΔＤを考慮して最終的なＤ（Ｓ）を決定する（図１３（ｆ）（ｇ）参照）。
本実施の形態では、第１のコントロール部４１（正常範囲内の対比用検体）、第２のコントロール部４２（正常範囲外の対比用検体）の演算結果につき、検量線データ（Ｌ）と比較しているため、各コントロール部４１，４２の演算結果で正常状態、異常状態の状況を把握することができ、検体保持部４０の演算結果をより正確に補正することが可能であるが、より簡易の演算結果で足りる場合には、いずれか一方のコントロール部４１又は４２の演算結果を利用すればよく、更に簡易の演算結果で足りる場合には、各コントロール部４１又は４２を設けないようにすることも可能である。
ここで、ＨｂＡ１ｃが既知であるＤ（Ｃ１）又はＤ（Ｃ２）につき、予め実験などで求められていた検量線データ（Ｌ）と比較し、その差分ΔＵが許容範囲α内か否かを判別する。なお、検量線データ（Ｌ）の作成例については後述する実施例にて示す。
そして、差分ΔＵが許容範囲α内であるときは、得られたＤ（Ｓ）をそのまま決定し、また、差分ΔＵが許容範囲αを超えた条件では、０でない補正量ΔＤを決定し、得られたＤ（Ｓ）につき補正量ΔＤを考慮して最終的なＤ（Ｓ）を決定する（図１３（ｆ）（ｇ）参照）。
本実施の形態では、第１のコントロール部４１（正常範囲内の対比用検体）、第２のコントロール部４２（正常範囲外の対比用検体）の演算結果につき、検量線データ（Ｌ）と比較しているため、各コントロール部４１，４２の演算結果で正常状態、異常状態の状況を把握することができ、検体保持部４０の演算結果をより正確に補正することが可能であるが、より簡易の演算結果で足りる場合には、いずれか一方のコントロール部４１又は４２の演算結果を利用すればよく、更に簡易の演算結果で足りる場合には、各コントロール部４１又は４２を設けないようにすることも可能である。
◎変形の形態
本実施の形態では、反応プレート２１に第１の蛍光ラテックスＭ１及び第２の蛍光ラテックスＭ２を展開液Ｗに対して混入可能な状態で予め固相した態様が採用されていたが、これに限られるものではなく、例えば図１４（ａ）（ｂ）に示すように、展開液Ｗ中に第１の蛍光ラテックスＭ１及び第２の蛍光ラテックスＭ２を予め混入しておくか、あるいは、展開液Ｗを供給する際に各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２を混入させるようにして差し支えない。
本態様では、コンジュゲートパッド３４が不要になり、展開液パッド３３に各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２が混入された展開液Ｗを添加するようにすればよい。
本実施の形態では、反応プレート２１に第１の蛍光ラテックスＭ１及び第２の蛍光ラテックスＭ２を展開液Ｗに対して混入可能な状態で予め固相した態様が採用されていたが、これに限られるものではなく、例えば図１４（ａ）（ｂ）に示すように、展開液Ｗ中に第１の蛍光ラテックスＭ１及び第２の蛍光ラテックスＭ２を予め混入しておくか、あるいは、展開液Ｗを供給する際に各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２を混入させるようにして差し支えない。
本態様では、コンジュゲートパッド３４が不要になり、展開液パッド３３に各蛍光ラテックスＭ１，Ｍ２が混入された展開液Ｗを添加するようにすればよい。
◎比較の形態１
本実施の形態では、検体Ｓは反応プレート２１の検体保持部４０に固相される態様であるが、これの性能を評価する上で、検体Ｓを移動する態様を比較の形態１として検討してみると、以下のようである。
図１５（ａ）（ｂ）は比較の形態１で用いられる反応プレート１２１である。
同図において、反応プレート１２１は、一方向に沿って延びる長尺な樹脂製のプレート本体１３０を有し、プレート本体１３０の一端側には当該プレート本体１３０が把持可能な把持部１３１を形成し、この把持部１３１に隣接したプレート本体１３０には浅い凹部１３２を形成したものである。
本例では、プレート本体１３０の凹部１３２内には把持部１３１側から順に、検体Ｓが供給可能な検体供給パッド１３３、検体Ｓとしての血液中に含まれる測定対象物質であるＨｂ及びＨｂＡ１ｃと夫々特異的に抗原抗体反応する標識担体Ｍ（具体的にはＭ１，Ｍ２）が予め固相されるコンジュゲートパッド１３４、検体Ｓ及び標識担体Ｍが毛細管現象にて浸透しながら長手方向に沿って移動する膜状体に相当するメンブレン１３５、及び、余剰の検体Ｓを吸収する吸収パッド１３６が設けられている。なお、本例では、メンブレン１３５の一部にコンジュゲートパッド１３４を割り付けている。
そして、本例では、メンブレン１３５上には検体Ｓ中の測定対象物質（Ｈｂ，ＨｂＡ１ｃ）及び標識担体Ｍ（Ｍ１，Ｍ２）が結合した凝集体を捕捉する第１のキャプチャ１４１と、標識担体Ｍ（Ｍ１，Ｍ２）だけに結合する第２のキャプチャ１４２とを設けたものである。
このような比較の形態１に係る反応プレート１２１を用いる場合には、検体Ｓ中の測定対象物質がコンジュゲートパッド１３４の標識担体Ｍ（Ｍ１，Ｍ２）と結合すると想定されるが、コンジュゲートパッド１３４を通過した検体Ｓ及び標識担体Ｍが第１のキャプチャ１４１で捕捉され、更に、余剰の標識担体Ｍが第２のキャプチャ１４２に捕捉される。
従って、コンジュゲートパッド１３４、あるいは、第１のキャプチャ１４１では、検体Ｓの測定対象物質と標識担体Ｍとが結合することになり、これを測定することで測定対象物質の測定は可能かも知れないが、検体Ｓ中の測定対象物質がコンジュゲートパッド１３４及び第１のキャプチャ１４１に二分した形で捕捉されるばかりか、検体Ｓの移動に伴って測定対象物質が捕捉されずに吸収パッド１３６に吸収される懸念もある。
よって、比較の形態１の反応プレート１２１は、実施の形態１に係る態様に比べて、検体Ｓの測定対象物質の測定精度が低いことが理解される。
本実施の形態では、検体Ｓは反応プレート２１の検体保持部４０に固相される態様であるが、これの性能を評価する上で、検体Ｓを移動する態様を比較の形態１として検討してみると、以下のようである。
図１５（ａ）（ｂ）は比較の形態１で用いられる反応プレート１２１である。
同図において、反応プレート１２１は、一方向に沿って延びる長尺な樹脂製のプレート本体１３０を有し、プレート本体１３０の一端側には当該プレート本体１３０が把持可能な把持部１３１を形成し、この把持部１３１に隣接したプレート本体１３０には浅い凹部１３２を形成したものである。
本例では、プレート本体１３０の凹部１３２内には把持部１３１側から順に、検体Ｓが供給可能な検体供給パッド１３３、検体Ｓとしての血液中に含まれる測定対象物質であるＨｂ及びＨｂＡ１ｃと夫々特異的に抗原抗体反応する標識担体Ｍ（具体的にはＭ１，Ｍ２）が予め固相されるコンジュゲートパッド１３４、検体Ｓ及び標識担体Ｍが毛細管現象にて浸透しながら長手方向に沿って移動する膜状体に相当するメンブレン１３５、及び、余剰の検体Ｓを吸収する吸収パッド１３６が設けられている。なお、本例では、メンブレン１３５の一部にコンジュゲートパッド１３４を割り付けている。
そして、本例では、メンブレン１３５上には検体Ｓ中の測定対象物質（Ｈｂ，ＨｂＡ１ｃ）及び標識担体Ｍ（Ｍ１，Ｍ２）が結合した凝集体を捕捉する第１のキャプチャ１４１と、標識担体Ｍ（Ｍ１，Ｍ２）だけに結合する第２のキャプチャ１４２とを設けたものである。
このような比較の形態１に係る反応プレート１２１を用いる場合には、検体Ｓ中の測定対象物質がコンジュゲートパッド１３４の標識担体Ｍ（Ｍ１，Ｍ２）と結合すると想定されるが、コンジュゲートパッド１３４を通過した検体Ｓ及び標識担体Ｍが第１のキャプチャ１４１で捕捉され、更に、余剰の標識担体Ｍが第２のキャプチャ１４２に捕捉される。
従って、コンジュゲートパッド１３４、あるいは、第１のキャプチャ１４１では、検体Ｓの測定対象物質と標識担体Ｍとが結合することになり、これを測定することで測定対象物質の測定は可能かも知れないが、検体Ｓ中の測定対象物質がコンジュゲートパッド１３４及び第１のキャプチャ１４１に二分した形で捕捉されるばかりか、検体Ｓの移動に伴って測定対象物質が捕捉されずに吸収パッド１３６に吸収される懸念もある。
よって、比較の形態１の反応プレート１２１は、実施の形態１に係る態様に比べて、検体Ｓの測定対象物質の測定精度が低いことが理解される。
本実施例は、実施の形態１に係る免疫測定装置で用いられる検量線データの作成例を示す。
今、検量線データ（Ｌ）を作成するに当たり、ＨｂＡ１ｃ（％）が既知である試料（本例ではＨｂＡ１ｃ（％）が「１．３」、「４．５」、「８．１」、「１１．７」、「１５．０」）を用意し、各試料につき撮像器具８０にて撮影し、夫々の緑蛍光Ｌｘによる緑成分と赤蛍光Ｌｘによる赤成分とをピクセル化して平均値を演算する（図１６（ａ）参照）。
この後、緑蛍光Ｌｘによる緑成分と赤蛍光Ｌｘによる赤成分との比率Ｄを演算すると、図１６（ｂ）の結果が得られる。
このような処理により、検量線データ（Ｌ）を作成することが可能であり、例えば実施の形態１で示したような形で検量線データ（Ｌ）を利用することが可能である。
今、検量線データ（Ｌ）を作成するに当たり、ＨｂＡ１ｃ（％）が既知である試料（本例ではＨｂＡ１ｃ（％）が「１．３」、「４．５」、「８．１」、「１１．７」、「１５．０」）を用意し、各試料につき撮像器具８０にて撮影し、夫々の緑蛍光Ｌｘによる緑成分と赤蛍光Ｌｘによる赤成分とをピクセル化して平均値を演算する（図１６（ａ）参照）。
この後、緑蛍光Ｌｘによる緑成分と赤蛍光Ｌｘによる赤成分との比率Ｄを演算すると、図１６（ｂ）の結果が得られる。
このような処理により、検量線データ（Ｌ）を作成することが可能であり、例えば実施の形態１で示したような形で検量線データ（Ｌ）を利用することが可能である。
１…反応プレート，２…膜状体，３…検体保持部，４（４ａ，４ｂ）…対比用検体保持部，５…展開液供給部，６…標識担体供給部，７…展開液吸収部，１０…展開液供給手段，１１…標識担体供給手段，１２…測定器具，Ｍ…標識担体，Ｓ…検体，Ｓ’…対比用検体，Ｔ…測定対象物質，Ｗ…展開液
Claims (8)
- 毛細管現象により液体が移動可能な膜状体の一部に測定対象物質が含まれる検体及び予め決められた量の測定対象物質が含まれる対比用検体を予め保持した後、
前記膜状体に展開液を添加すると共に当該展開液には前記測定対象物質と特異的に抗原抗体反応する不溶性の標識担体を含有させ、
前記膜状体に保持された検体及び対比用検体に含まれる測定対象物質と前記展開液と共に移動する標識担体との間で抗原抗体反応させ、
しかる後に、前記検体及び前記対比用検体の抗原抗体反応に伴う標識担体の集積量を測定する各工程を含み、
前記測定対象物質がヘモグロビンＡ１ｃであり、
前記不溶性の標識担体は、ヘモグロビンＡ１ｃと反応する第１の蛍光ラテックスと、ヘモグロビンと反応する第２の蛍光ラテックスとを有し、
前記第１の蛍光ラテックス及び前記第２の蛍光ラテックスに対応する波長の光が少なくとも含まれる光を照射することで、ヘモグロビンＡ１ｃ又はヘモグロビンの集積量を測定可能とすることを特徴とする免疫測定方法。 - 毛細管現象により液体が移動可能な素材にて構成された膜状体を有し、当該膜状体に測定対象物質が含まれる検体を保持する検体保持部及び予め決められた量の測定対象物質が含まれる対比用検体を保持する対比用検体保持部が少なくとも設けられる反応プレートと、
前記膜状体に保持された検体及び対比用検体に対し展開液を供給する展開液供給手段と、
前記膜状体に保持された検体及び対比用検体に対し前記測定対象物質と特異的に抗原抗体反応する不溶性の標識担体を前記展開液と共に供給する標識担体供給手段と、
前記検体保持部及び前記対比用検体保持部に対応して設けられ、前記検体及び前記対比用検体の抗原抗体反応に伴う標識担体の集積量を測定する測定器具と、を備え、
前記測定対象物質がヘモグロビンＡ１ｃであり、
前記不溶性の標識担体は、ヘモグロビンＡ１ｃと反応する第１の蛍光ラテックスと、ヘモグロビンと反応する第２の蛍光ラテックスとを有し、
前記測定器具は、前記第１の蛍光ラテックス及び前記第２の蛍光ラテックスに対応する波長の光が少なくとも含まれる光を照射することで、ヘモグロビンＡ１ｃ又はヘモグロビンの集積量を測定可能とするものであることを特徴とする免疫測定装置。 - 免疫測定時に使用される反応プレートを含む免疫測定用キットであって、
前記反応プレートは、
毛細管現象により液体が移動可能な素材にて構成された膜状体と、
この膜状体の一部に設けられ、測定対象物質が含まれる検体を保持する検体保持部と、
前記膜状体の一部に設けられ、予め決められた量の測定対象物質が含まれる対比用検体を保持する対比用検体保持部と、
前記膜状体の一部に設けられ、前記膜状体に保持された検体及び対比用検体に対し展開液を供給する展開液供給部と、
前記膜状体の一部に設けられ、前記膜状体に保持された検体及び対比用検体に対し前記測定対象物質と特異的に抗原抗体反応する不溶性の標識担体を前記展開液と共に供給する標識担体供給部と、
前記膜状体の一部に設けられ、前記検体保持部及び前記対比用検体保持部を通過した余剰の展開液を吸収する展開液吸収部と、を備え、
前記測定対象物質がヘモグロビンＡ１ｃであり、
前記不溶性の標識担体は、ヘモグロビンＡ１ｃと反応する第１の蛍光ラテックスと、ヘモグロビンと反応する第２の蛍光ラテックスとを有し、
前記第１の蛍光ラテックス及び前記第２の蛍光ラテックスに対応する波長の光が少なくとも含まれる光を照射することで、ヘモグロビンＡ１ｃ又はヘモグロビンの集積量を測定可能とすることを特徴とする免疫測定用キット。 - 請求項３に記載の免疫測定用キットにおいて、
前記標識担体供給部は前記膜状体上に予め前記標識担体を固相し、添加された後の展開液中に前記標識担体を混合して供給することを特徴とする免疫測定用キット。 - 請求項３に記載の免疫測定用キットにおいて、
前記検体保持部及び対比用検体保持部は、前記展開液供給部と前記展開液吸収部との間に順次並んで配置されていることを特徴とする免疫測定用キット。 - 請求項３に記載の免疫測定用キットにおいて、
前記対比用検体保持部は、前記測定対象物質が許容範囲内に選定された対比用検体を保持する第１の対比用検体保持部と、前記測定対象物質が許容範囲外に選定された対比用検体を保持する第２の対比用検体保持部とを有することを特徴とする免疫測定用キット。 - 請求項６に記載の免疫測定用キットにおいて、
前記第１の対比用検体保持部と前記第２の対比用検体保持部とは、前記膜状体の前記展開液の移動方向に対し前記検体保持部を挟んで配置されていることを特徴とする免疫測定用キット。 - 請求項３乃至７のいずれかに記載の免疫測定用キットにおいて、
更に、前記反応プレートにて測定する検体を採取する検体採取器具を含むことを特徴とする免疫測定用キット。
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