JP5253696B2

JP5253696B2 - 抗腫瘍作用を有するインドリル−３−グリオキシル酸誘導体

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Publication number: JP5253696B2
Application number: JP2000541995A
Authority: JP
Inventors: ニッケルベルント; ツェレニイイストファン; シュミットユルゲン; エミッヒペーター; ライヒェルトディートマー; ギュンターエックハルト; ブルーネケイ
Original assignee: Asta Medica GmbH
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Priority date: 1998-04-02
Filing date: 1999-03-22
Publication date: 2013-07-31
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Description

インドール−３−グリオキシルアミドは薬力学的作用のある化合物として、および製薬化学における合成成分として多種多様に使用されている。

オランダ特許出願(Neth. Appl.)第６５０２４８１号には、抗炎症作用および解熱作用プロフィールを有し、かつ鎮痛作用を有する化合物が記載されている。

英国特許出願（ＧＢ−ＰＳ）第１０２８８１２号には、インドリル−３−グリオキシル酸の誘導体およびそのアミドが鎮痛作用、抗痙攣作用、β−アドレナリン作用のある化合物として言及されている。

G. Domschke et al. (Ber. 94. 2353(1961)）は、３−インドリル−グリオキシルアミドを記載しているが、これは薬理学的に特徴付けされていない。

E. Waltonは、J. Med. Chem. ll, 1252(1968)においてグリセロホスフェート−デヒドロゲナーゼおよび乳酸デヒドロゲナーゼに対して阻害作用を有するインドリル−３−グリオキシル酸−誘導体を報告している。

欧州特許ＥＰ６７５１１０号ではｓＰＬＡ２−阻害剤としての輪郭を与えられ、かつ敗血症性ショックの治療の際に、膵臓炎において、アレルギー性鼻炎およびリウマチ性関節炎の治療の際に適用される１Ｈ−インドール−３−グリオキシル酸アミドが記載されている。

本発明の目標は、抗腫瘍作用を有し、ひいては入手可能な医薬の展望を豊かにする、Ｎ−置換インドール−３−グリオキシルアミドを提供することである。前記の化合物はすでにＤＥ−ＯＳ１９６３６１５０Ａ１号から抗喘息作用、抗アレルギー作用および免疫抑制作用／免疫変調作用を有する薬剤として公知である。

従って本発明の対象は、抗腫瘍薬を製造するための一般式１：

［式中、基Ｒ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＺは以下のものを表す：
Ｒ＝水素、（Ｃ_１〜Ｃ_６）−アルキル、その際、アルキル基はフェニル環により１置換または多置換されていてもよく、かつこのフェニル環は自体、ハロゲン、（Ｃ_１〜Ｃ_６）−アルキル、（Ｃ_３〜Ｃ_７）−シクロアルキルにより、カルボキシル基、Ｃ_１〜Ｃ_６−アルカノールでエステル化されているカルボキシル基、トリフルオロメチル基、ヒドロキシル基、メトキシ基、エトキシ基、ベンジルオキシ基により、ならびにフェニル部分で（Ｃ_１〜Ｃ_６）−アルキル基、ハロゲン原子もしくはトリフルオロメチル基で置換されているベンジル基により１置換または多置換されていてもよく、
Ｒはさらにベンジルオキシカルボニル基（Ｚ基）およびｔ−ブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ基）、さらにアセチル基を表し、
Ｒ_１は、フェニル環であってよく、該フェニル環は、（Ｃ_１〜Ｃ_６）−アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）−アルコキシ、シアノ、ハロゲン、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ベンジルオキシ、ニトロ、アミノ、（Ｃ_１〜Ｃ_６）−アルキルアミノ、（Ｃ_１〜Ｃ_６）−アルコキシカルボニルアミノ、およびカルボキシル基で、もしくはＣ_１〜Ｃ_６−アルカノールでエステル化されているカルボキシル基により１置換または多置換されていてもよく、または式２のピリジン骨格およびそのＮ−オキシド：

を表し、かつそのＮ−オキシドを表し、その際、ピリジン骨格は選択的に環の２位、３位および４位の炭素原子に結合しており、かつ置換基Ｒ₅およびＲ₆で置換されていてもよく、基Ｒ₅およびＲ₆は同じか、または異なっていてもよく、かつ（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルを表し、ならびに（Ｃ₃〜Ｃ₇）−シクロアルキル、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルコキシ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲンおよびトリフルオロメチルを表し、かつさらにエトキシカルボニルアミノ基を表し、ならびに基カルボキシアルキルオキシを表し、その際、アルキル基は１〜４の炭素原子を介して結合してもよく、
Ｒ₁はさらに２−もしくは４−ピリミジニル−ヘテロ環であってもよく、その際、２−ピリミジニル環はメチル基により１置換または多置換されていてもよく、さらに（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル、ハロゲン、ニトロ基、アミノ基および（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル−アミノ基で置換されている２−、３−、および４−および８−キノリル骨格を表し、２−、３−および４−キノリルメチル基を表し、その際、キノリル基およびキノリルメチル基のピリジルメチル基の環の炭素は（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルコキシ、ニトロ、アミノおよび（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルコキシカルボニルアミノで置換されていてもよく、
Ｒ₁はさらにＲ＝水素、メチル基もしくはベンジル基ならびにベンジルオキシカルボニル基（Ｚ基）、ｔ−ブトキシカルボニル基（ＢＯＣ基）およびアセチル基を表している場合、以下の基を表す：
−ＣＨ₂ＣＯＯＨ；−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＯＯＨ；−（ＣＨ₃）₂−ＣＨ−（ＣＨ₂）₂−ＣＨ−ＣＯＯ−；Ｈ₃Ｃ−Ｈ₂Ｃ−ＣＨ（ＣＨ₃）−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−；ＨＯ−Ｈ₂Ｃ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−；フェニル−ＣＨ₂−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−；（４−イミダゾリル）−ＣＨ₂−ＣＨ−（ＣＯＯＨ）−；ＨＮ＝Ｃ（ＮＨ₂）−ＮＨ−（ＣＨ₂）₃−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−；Ｈ₂Ｎ−（ＣＨ₂）₄−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−；Ｈ₂Ｎ−ＣＯ−ＣＨ₂−ＣＨ−（ＣＯＯＨ）−；ＨＯＯＣ−（ＣＨ₂）₂−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−；
Ｒ₁はさらにＲが水素、Ｚ基、ＢＯＣ基、アセチル基またはベンジル基を表す場合、天然もしくは合成アミノ酸の酸基であってもよく、例えばα−グリシル基、α−サルコシル基、α−アラニル基、α−ロイシル基、α−イソ−ロイシル基、α−セリル基、α−フェニルアラニル基、α−ヒスチジル基、α−プロリル基、α−アルギニル基、α−リシル基、α−アスパラギル基およびα−グルタミル基を表し、その際、それぞれのアミノ酸のアミノ基は保護されずに存在していても、保護されていてもよく、アミノ官能基の保護基としてはカルボベンゾキシ基（Ｚ基）およびｔ−ブトキシカルボニル基（ＢＯＣ基）ならびにアセチル基が該当し、Ｒ₁に関して請求されているアスパラギル基およびグルタミル基の場合には結合していない第二のカルボキシル基は遊離のカルボキシル基として、またはＣ₁〜Ｃ₆−アルカノールとのエステルの形で、例えばメチルエステル、エチルエステルとして、もしくはｔ−ブチルエステルとして存在しており、さらにＲ₁は、アリルアミノカルボニル−２−メチル−プロポ−１−イル−基を表していてもよく、ＲおよびＲ₁はさらに、Ｒ₁がアミノアルキレン基を表している限り、これらが結合している窒素原子と一緒になって式３：

のピペラジン環またはホモピペラジン環を形成してもよく、その際Ｒ₇はアルキル基を表し、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルコキシ、ハロゲン、ニトロ基、アミノ官能基で１置換または多置換されていてもよく、かつ（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルアミノ基で置換されていてもよいフェニル環を表し、Ｒ₇はさらにベンゾヒドリル基およびビス−ｐ−フルオロベンジルヒドリル基を表し、
Ｒ₂は水素および（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル基を表し、その際、アルキル基はハロゲンおよびフェニルにより１置換または多置換されており、これは自体ハロゲン、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル、（Ｃ₃〜Ｃ₇）−シクロアルキル、カルボキシル基、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルカノールでエステル化されているカルボキシル基、トリフルオロメチル基、ヒドロキシル基、メトキシ基、エトキシ基またはベンジルオキシ基により１置換または多置換されていてもよく、Ｒ₂に該当する（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル基はさらに２−キノリル基および２−、３−および４−ピリジル骨格により置換されていてもよく、これらは両方ともそれぞれハロゲン、（Ｃ₁〜Ｃ₄）−アルキル基または（Ｃ₁〜Ｃ₄）−アルコキシ基により１置換または多置換されていてもよく、Ｒ₂は、さらにアロイル基を表し、その際、この基の元になっているアリール部分はフェニル環であり、これはハロゲン、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル、（Ｃ₃−Ｃ₇）−シクロアルキル、カルボキシル基、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルカノールでエステル化されているカルボキシル基、トリフルオロメチル基、ヒドロキシル基、メトキシ基、エトキシ基またはベンジルオキシ基により１置換または多置換されていてもよく、
Ｒ₃およびＲ₄は、同じか、または異なっていてもよく、かつ水素、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル、（Ｃ₃〜Ｃ₇）−シクロアルキル、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルカノイル、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルコキシ、ハロゲンおよびベンジルオキシ基を表し、さらにＲ₃およびＲ₄は、ニトロ基、アミノ基、（Ｃ₁〜Ｃ₄）−モノアルキル置換もしくはジアルキル置換されているアミノ基、および（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルコキシ−カルボニルアミノ官能基または（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルコキシカルボニルアミノ−（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル官能基を表し、
ＺはＯまたはＳを表す］のＮ−置換インドール−３−グリオキシルアミドの使用、式１により記載される作用物質を含有する抗腫瘍薬および腫瘍性疾患の治療のためのその使用を包含する。

アルキル基、アルカノール基、アルコキシ基またはアルキルアミノ基という名称は、基Ｒ、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇に関して規則的に「直鎖状」および「分枝鎖状」のアルキル基と理解し、その際「直鎖状のアルキル基」は例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルのような基を表してもよく、かつ「分枝鎖状のアルキル基」は例えばイソプロピルまたはｔ−ブチルのような基を表す。「シクロアルキル」とは、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチルのような基と理解する。「ハロゲン」という名称は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を表す。「アルコキシ基」という名称は例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、イソプロポキシ、イソブトキシまたはペントキシのような基を表す。

化合物は酸付加塩として、例えば鉱酸、例えば塩酸、硫酸、リン酸の塩、有機酸、例えば酢酸、乳酸、マロン酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、グルクロン酸、クエン酸、エンボン酸、メタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、コハク酸および２−ヒドロキシエタンスルホン酸の塩として使用することもできる。式１の化合物もその塩も生物学的に活性である。式１の化合物は遊離の形で、または生理学的に認容性の酸との塩として投与することができる。適用は経口、非経口、静脈内、経皮または吸入により行うことができる。

さらに本発明は、少なくとも１種の式１の化合物または生理学的に認容性の無機酸もしくは有機酸との塩および場合により製薬に使用可能な担体および／または希釈剤もしくは補助剤を含有する医薬組成物に関する。

適用形として例えば錠剤、糖衣錠、カプセル、輸液またはアンプルのための溶液、坐剤、硬膏剤、吸入により使用可能な粉末製剤、懸濁液、クリームおよび軟膏が適切である。

本発明による化合物を製造するための方法を以下の反応図式１および２ならびに一般的な規定により記載する。全ての化合物は、前記の通りに、または類似させて製造することができる。

Ｚ＝Ｏ、Ｒ₁＝アリール、アラルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアラルキルならびにＲ₂＝アルキル、アラルキルおよびヘテロアラルキルを有する一般式１の化合物は以下の図式１により得られる：

第一段階
非置換であるか、またはＣ−２もしくはフェニル骨格で１置換もしくは多置換されていてもよいインドール誘導体を、プロトン性、両性の非プロトン性または非極性有機溶剤、例えばイソプロパノール、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ジオキサン、トルエンまたは塩化メチレン中に溶解させ、かつ三首フラスコ中でＮ₂雰囲気下に準備したモル濃度もしくは過剰量で使用される、適切な溶剤中の塩基、例えば水素化ナトリウム、粉末化された水酸化カリウム、カリウム−ｔ−ブチレート、ジメチルアミノピリジンまたはナトリウムアミドの懸濁液に滴下する。次いで例えば所望のアルキル−、アラルキル−もしくはヘテロアラルキルハロゲン化物を場合により触媒、例えば銅の添加下で添加し、かつしばらくの間、例えば３０分〜１２時間、後反応させ、かつ温度を０℃〜１２０℃、有利には３０℃〜８０℃、特に５０℃〜６５℃の範囲に保持する。反応終了後に反応混合物を水中に添加し、該溶液を例えばジエチルエーテル、ジクロロメタン、クロロホルム、メチル−ｔ−ブチルエーテルまたはテトラヒドロフランで抽出し、かつその都度得られた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させる。有機相を真空下で濃縮し、残留した残留物をこすって結晶化させるか、または油状の残留物を再結晶、蒸留により、またはシリカゲルもしくは酸化アルミニウムを用いたカラムクロマトグラフィーもしくはフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。溶離剤として例えば８：２（体積／体積）の比率のジクロロメタンとジエチルエーテルとからなる混合物または９：１（体積／体積）の比率のジクロロメタンとエタノールとからなる混合物を使用する。

第二段階
前記の第一段階の規定により得られたＮ−置換インドールを窒素雰囲気下で非プロトン性または非極性の有機溶剤、例えばジエチルエーテル、メチル−ｔ−ブチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、キシレン、塩化メチレンまたはクロロホルム中に溶解させ、かつ窒素雰囲気下で製造した、非プロトン性または非極性溶剤、例えばジエチルエーテル、メチル−ｔ−ブチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、キシレン、塩化メチレン中の１モル濃度〜６０パーセント過剰量の塩化オキサリルの溶液に添加し、その際、温度を−５℃〜２０℃に保持する。次いで核反応溶液を１０℃〜１３０℃、有利には２０℃〜８０℃、特に３０℃〜５０℃で３０分〜５時間加熱し、かつ引き続き溶剤を蒸発させる。こうして形成された「インドリル−３−グリオキシル酸クロリド」の残留した残留物を非プロトン性溶剤、例えばテトラヒドロフラン、ジオキサン、ジエチルエーテル、トルエンまたはその他の両性非極性溶剤、例えばジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドまたはジメチルスルホキシド中に溶解させ、温度１０℃〜−１５℃、有利には−５℃〜０℃に冷却し、かつ酸補足剤(Saeurefaenger)の存在下に希釈剤中の第一級アミンもしくは第二級アミンの溶液に添加する。希釈剤としてインドリル−３−グリオキシル酸クロリドの溶解のために使用される上記の溶剤が考慮される。酸補足剤としてトリエチルアミン、ピリジン、ジメチルアミノピリジン、塩基性イオン交換体、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、粉末化した水酸化カリウムならびに反応のために使用した過剰量の第一級アミンもしくは第二級アミンを使用する。反応は温度０℃〜１２０℃、有利には２０℃〜８０℃、特に４０℃〜６０℃で行われる。１〜３時間の反応時間および２４時間の室温での放置の後、酸補足剤の塩酸塩を濾過し、濾液を真空下で濃縮し、かつ残留物を有機溶剤から再結晶させるか、またはカラムクロマトグラフィーによりシリカゲルもしくは酸化アルミニウムを用いて精製する。溶離剤として例えばジクロロメタンとエタノールとからなる混合物（９５：５、体積／体積）を使用する。

実施例
合成図式１に基づいた第一段階および第二段階に関する前記の一般的な規定により以下の化合物を合成し、これらはそれぞれの化学的名称の記載により以下の概要から明らかになる。Ａ〜Ｊの第１ａ〜ｊ表により一般式１からおよび置換基Ｒ₁〜Ｒ₄およびＺは前記化合物の構造およびその融点が明らかである：
例１
Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］グリオキシルアミド（Ｄ２４２４１）
第一段階
１−（４−フルオロベンジル）−インドール
ジメチルスルホキシド１００ｍｌ中の水素化ナトリウム２．６４ｇの混合物（０．１１モル、鉱油懸濁液）へ、ジメチルスルホキシド５０ｍｌ中のインドール１１．７２ｇ（０．１モル）の溶液を添加する。６０℃に１．５時間加熱し、その後、冷却し、かつ４−フルオロベンジルクロリド１５．９ｇ（０．１１モル）を滴加する。該溶液を６０℃に加熱し、一夜放置し、かつ次いで撹拌下に水４００ｍｌに注ぐ。合計１５０ｍｌの塩化メチレンを用いて数回抽出し、有機相を無水の硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、かつ濾液を真空下で濃縮する。残留物を高真空下で蒸留する：２１．０ｇ（理論値の９６％）、沸点（０．５ｍｍ）：１４０℃。

第二段階
Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］グリオキシルアミド（Ｄ２４２４１）
エーテル２５ｍｌ中の塩化オキサリル２．２５ｍｌの溶液に、０℃およびＮ₂下でエーテル２５ｍｌ中の１−（４−フルオロベンジル）−インドール４．７５ｇ（２１．１ミリモル）の溶液を滴加する。２時間、還流に加熱し、かつ引き続き溶剤を留去する。次いで残留物にテトラヒドロフラン５０ｍｌを添加し、該溶液を−５℃に冷却し、かつＴＨＦ２００ｍｌ中の４−アミノピリジン４．６６ｇ（４９．５ミリモル）の溶液を滴加する。還流に３時間加熱し、かつ室温で一夜放置する。４−アミノピリジン塩酸塩を吸引濾過し、沈殿物をＴＨＦで洗浄し、濾液を真空下で濃縮し、かつ残留物を酢酸エステルから再結晶させる。

収率：７．０９ｇ（理論値の９０％）
融点：２２５〜２２６℃
元素分析：
計算値：Ｃ７０．７７、Ｈ４．３２、Ｎ１１．２５
測定値：Ｃ７１．０９、Ｈ４．３６、Ｎ１１．２６。

例２Ｄ２４２４２Ｎ−（ピリジン−４−イル）−（１−メチル−インドール−３−イル）グリオキシルアミド、
例３Ｄ２４８３４Ｎ−（ピリジン−３−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例４Ｄ２４８３５Ｎ−（ピリジン−３−イル）−（１−ベンジルインドール−３−イル）−グリオキシルアミド、
例５Ｄ２４８３６Ｎ−（ピリジン−３−イル）−［１−（２−クロロベンジル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例６Ｄ２４８４０Ｎ−（４−フルオロフェニル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例７Ｄ２４８４１Ｎ−（４−ニトロフェニル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例８Ｄ２４８４２Ｎ−（２−クロロピリジン−３−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例９Ｄ２４８４３Ｎ−（ピリジン−４−イル）−（１−ベンジルインドール−３−イル）−グリオキシルアミド、
例１０Ｄ２４８４８Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（３−ピリジルメチル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例１１Ｄ２４８４９Ｎ−（４−フルオロフェニル）−［１−（２−ピリジルメチル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例１２Ｄ２４８５０Ｎ−（４−フルオロフェニル）−［１−（３−ピリジルメチル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例１３Ｄ２４８５１Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−クロロベンジル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例１４Ｄ２４８５２Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（２−クロロベンジル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例１５Ｄ２４８５３Ｎ−（ピリジン−２−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例１６Ｄ２４８４７Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（２−ピリジルメチル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例１７Ｄ２４８５８（４−フェニル−ピペラジン−１−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例１８Ｄ２４８５４Ｎ−（ピリジン−２−イル）−（１−ベンジル−インドール−３−イル）−グリオキシルアミド、
例１９Ｄ２５４２１Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−６−エトキシカルボニルアミノ−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例２０Ｄ２５４２２Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−５−エトキシカルボニルアミノ−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例２１Ｄ２５４２３Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−６−シクロペンチルオキシカルボニルアミノ−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例２２Ｄ２５４２０４−（ピリジン−４−イル）−ピペラジン−１−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例２３Ｄ２４８６６Ｎ−（３，４，５−トリメトキシベンジル）−Ｎ−（アリルアミノカルボニル−２−メチル−プロポ−１−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例２４Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−５−メトキシ−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド、
例２５Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−５−エトキシカルボニルアミノ−メチル−インドール−３−イル］−グリオキシルアミド。

第１表から明らかになる合成図式１により製造される一般式１の化合物のための出発段階
合成最終段階
Ｄ２４２４１、Ｄ２４２４２、Ｄ２４８３４、Ｄ２４８３５、Ｄ２４８３６、Ｄ２４８４０、Ｄ２４８４１、Ｄ２４８４２、Ｄ２４８４３、Ｄ２４８４８、Ｄ２４８４９、Ｄ２４８５０、Ｄ２４８５１、Ｄ２４８５２、Ｄ２４８５３、Ｄ２４８４７、Ｄ２４８５８、Ｄ２４８５４、Ｄ２５４２０、Ｄ２５４２２、Ｄ２５４２１、Ｄ２５４２３に関して前駆物質は全て市販されている。

さらにＺ＝Ｏ、Ｒ₁＝アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキルおよびアリルアミンカルボニル−２−メチル−プロポ−１−イル−基ならびにＲ₂＝アルキル、アラルキルおよびヘテロアラルキル基を有する一般式１の化合物もまた図式２の合成経路により得られる。

この図式２によれば化合物Ｄ２４２４１、Ｄ２４８４１、Ｄ２４８４０およびＤ２４８３４（反応図式２の第二段階、第１表もまた参照のこと）ならびにこれらのそれぞれの前駆物質Ｄ２４８２５、Ｄ２４８３１、Ｄ２４８３２およびＤ２４８３３（反応図式２の第一段階、Ｋの第２表もまた参照のこと）が得られる。

Ｎ−（ピリジン−４−イル） −［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］グリオキシルアミド（Ｄ２４２４１）
第一段階
Ｎ−（ピリジン−４−イル）−（インドール−３−イル）−グリオキシルアミド
無水エーテル１００ｍｌ中の塩化オキサリル９ｍｌの溶液に０℃でエーテル１００ｍｌ中のインドール１０ｇ（８５．３ミリモル）の溶液を滴加する。該混合物を３時間還流下に保持する。次いで−５℃でテトラヒドロフラン５００ｍｌ中の４−アミノピリジン１２ｇ（１２７．９ミリモル）の懸濁液を滴加し、反応混合物を攪拌下に３時間、還流温度に加熱し、かつ室温で一夜放置する。濾過し、沈殿物を水で処理し、かつ乾燥した化合物を溶離剤である塩化メチレン／エタノール１０：１、ｖ／ｖ）の適用下にシリカゲルカラムにより精製する（シリカゲル６０、Merck AG社、Darmstadt）。

収率：９．８ｇ（理論値の４３．３％）
融点：２５０℃以上。

第二段階：
Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−［４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］グリオキシルアミド（Ｄ２４２４１）
第一段階により得られたＮ−（ピリジン−４−イル）−（インドール−３−イル）グリオキシルアミドを「ベンジル化規定（第５頁）」により４−フルオロベンジルクロリドと反応させ、かつ得られた化合物Ｄ２４２４１を単離する。

収率：理論値の４１％
融点：２２４〜２２５℃
元素分析：計算値：Ｃ７０．７７、Ｈ４．３２、Ｎ１１．２５
測定値：Ｃ７０．９８、Ｈ４．４０、Ｎ１１．４９。

図式２に記載の一般式１の化合物を製造するための一般的な規定
第一段階：
窒素雰囲気下で準備した、非プロトンもしくは非極性溶剤、例えばジエチルエーテル、メチル−ｔ−ブチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサンまたはジクロロメタン中の１モル濃度〜６０％過剰量の塩化オキサリルの溶液に−５℃〜＋５℃の温度で、溶剤、例えば塩化オキサリルのための上記の溶剤中に溶解させた、非置換またはＣ２位もしくはフェニル環中で置換されていてもよいインドール誘導体を滴加する。次いで反応溶液を１〜５時間、１０℃〜１２０℃、有利には２０℃〜８０℃、特に３０℃〜６０℃の温度に加熱し、かつ引き続き溶剤を留去した。残留している（インドール−３−イル）グリオキシル酸クロリドの残留物を非プロトン性溶剤、例えばテトラヒドロフラン、ジオキサン、ジエチルエーテル、トルエンもしくは両性の非プロトン性溶剤、例えばジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドまたはジメチルスルホキシド中に溶解するか、もしくは懸濁させ、−１０℃〜＋１０℃、有利には−５℃〜０℃の温度に冷却し、かつ酸補足剤の存在下に希釈剤中の第一級もしくは第二級アミンの溶液を添加する。希釈剤として「インドリル−３−グリオキシル酸クロリド」の溶解のために使用する溶剤が該当する。酸補足剤としてトリエチルアミン、ピリジン、ジメチルアミノピリジン、塩基性イオン交換体、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、粉末化した水酸化カリウムならびに反応のために使用される過剰量の第一級もしくは第二級アミンを使用する。反応は０℃〜１２０℃、有利には２０〜８０℃、特に４０℃〜６０℃の温度で実施する。１〜４時間の反応時間および室温で２４時間の放置の後で、濾過し、沈殿物を水で処理し、吸引濾過し、かつ真空下で乾燥させる。所望の化合物を有機溶剤中での再結晶により、またはシリカゲルもしくは酸化アルミニウムを用いたカラムクロマトグラフィーにより精製する。溶離剤として例えばジクロロメタンとエタノール（１０：１、ｖ／ｖ）とからなる混合物を使用する。

第二段階
上記の第一段階の規定により得られた「インドール−３−イル−グリオキシルアミド」をプロトン性、両性の非プロトン性または非極性有機溶剤、例えばイソプロパノール、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ジオキサン、トルエンまたは塩化メチレン中に溶解し、かつ三首フラスコ中でＮ₂雰囲気下に準備した、適切な溶剤中でモル濃度もしくは過剰量で使用される塩基、例えば水素化ナトリウム、粉末化水酸化カリウム、カリウム−ｔ−ブチレート、ジメチルアミノピリジンまたはナトリウムアミドの懸濁液に滴加する。次いで所望のアルキル−、アラルキル−もしくはヘテロアラルキルハロゲン化物を希釈せずに、または例えば「インドール−３−イル−グリオキシルアミド」を溶解するために使用される希釈剤中で、場合により触媒、例えば銅の添加下に添加し、かつしばらくの間、例えば３０分〜１２時間反応させ、かつ温度を０℃〜１２０℃、有利には３０℃〜８０℃、特に５０〜７０℃の範囲内に保持する。反応の終了後、反応混合物を水中に添加し、該溶液を例えばジエチルエーテル、ジクロロメタン、クロロホルム、メチル−ｔ−ブチルエーテル、テトラヒドロフランもしくはｎ−ブタノールで抽出し、かつその都度得られる有機相を無水の硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相を真空下で濃縮し、残留した残留物をこすって結晶化させるか、もしくは油状の残留物を蒸留により、またはシリカゲルもしくは酸化アルミニウムを用いてカラムクロマトグラフィーもしくはフラッシュクロマトグラフィーにより精製する。溶離剤として例えば８：２の比率（ｖｏｌ／ｖｏｌ）の塩化メチレンとジエチルエーテルとからなる混合物、または９：１の比率（ｖ／ｖ）の塩化メチレンとエタノールとからなる混合物を使用する。

合成図式２の基になっている段階１および２のためのこの一般的な規定により、化合物Ｄ２４２４１、Ｄ２４８４１、Ｄ２４８４０およびＤ２４８３４を合成し、これはまたすでに反応図式１の合成過程により製造され、かつ第１表から明らかである。前記の化合物に関する前駆物質はＫの第２表から明らかである。

化合物は用量に依存した良好な抗腫瘍作用を以下の薬理学的モデルを示す：
インドール、特にＤ−２４８５１およびＤ−２４２４１に、まずＸＴＴ−増殖試験／細胞毒性試験を行った（第３表および第３ａ表）。この試験系で腫瘍細胞の増殖挙動に対する該物質の影響を試験した。その際、該物質の細胞毒性ポテンシャルを把握した。試験方法はScudiero et al. 1988, Cancer Res. 48, 4827に記載されている。

調査の際に以下の腫瘍細胞系統を使用した：
ＫＢ−細胞系統、口腔の表皮性腫瘍、
Ｌ１２１０−細胞系統、マウスのリンパ性白血病、
ＬＮＣＡＰ−細胞系統、前立腺癌および
ＳＫ−ＯＶ−３細胞系統、卵巣癌。

全ての４種類の腫瘍細胞系統において数多くの異なったインドールが有効であった。Ｄ−２４８５１およびＤ−２４２４１は最も強い作用を示し、その際、Ｄ−２４８５１はＤ−２４２４１よりも有効である（第３表および第４表）。

ヌードマウスおよびＬ１２１０（マウス）における中空繊維アッセイにおけるＤ−２４８５１およびＤ−２４２４１を用いたその他の比較試験において、両方の化合物で顕著な投与量に依存した抗腫瘍作用が観察された（第３表および第５表）。中空繊維アッセイでは両方の化合物はほぼ同程度の強度であり、他方、Ｌ１２１０ではＤ−２４８５１は経口および腹腔内投与により明らかにＤ−２４２４１よりもさらに有効であった。市販の抗腫瘍物質と比較してＤ−２４８５１は多くの場合、白血球モデルにおいて公知の比較物質よりも明らかにより有効であった（第５表）。

市販されている抗腫瘍物質と比較してＤ−２４８５１のもう１つの大きな利点は、該化合物のわずかな毒性である（第３表および第５表）。１０００ｍｇ／ｋｇｐ．ｏ．および＞１０００ｍｇ／ｋｇｉ．ｐ．のＬＤ５０値により該化合物は大きな治療範囲を有する。さらにＤ−２４８５１の投与後にＤＮＡ−断片化は観察されなかった。造血試験においても調査した血液パラメータはＤ−２４８５１の腹腔内投与後に変化しなかった。

もう１つの別の化学療法モデルである、ラットにおける白血球腫瘍では複数回のＤ−２４８５１の経口投与後に腫瘍成長の停止およびそれどころかいくつかの動物の場合には腫瘍の退行さえも観察された。

ヌードマウスを用いたＫＢ−試験では同様に両方のインドールＤ−２４８５１およびＤ−２４２４１を投与後に抗腫瘍作用が観察される（第３表、第３ａ表および第４表）。

腫瘍細胞系統Ｌ１２１０、マウスのリンパ性白血病を用いた試験ではＤ２４８５１を１００ｍｇ／ｋｇおよび１４７ｍｇ／ｋｇでの複数回の体壁内もしくは経口投与により明らかに投与量に依存した生存時間の延長を示した（図１ａおよび図１ｂ）。

試験的に検出された良好な治療範囲に基づいて作用物質を市販の腫瘍薬剤よりも高く配量することができる。

以下の記載により本発明の範囲を制限することなく、毎日経口により約２０ｍｇから５００ｍｇまでの投与量が可能であるといえる。静脈内投与の場合、注射液として、または輸液として２５０ｍｇ／日または患者の体重および個別的な適合性に応じてそれ以上を投与することができる。

その他の動物実験の結果：
Ｄｕｎｎｉｎｇ腫瘍において７×１００ｍｇ／ｋｇおよび７×１４７ｍｇ／ｋｇｐ．ｏ．のＤ−２４８５１の投与により腫瘍成長の停止、いくつかの動物ではそれどころか腫瘍の退行が観察された。

結晶形の試験は本来の形と比較して違いはなかった。

Ｄ−２４８５１はＤＮＡ断片化をもたらさなかった。

造血試験では試験した血液パラメータのいずれもＤ−２４８５１の腹腔内投与により変化しなかった。

本発明による化合物を用いた場合のマウスの生存率を表すグラフ図本発明による化合物を用いた場合のマウスの生存率を表すグラフ図

Claims

腫瘍性疾患を治療するための医薬の製造における式１ａ：

［式中、基Ｒ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４は以下のものを表す：
Ｒは水素を表すか、（Ｃ_１〜Ｃ_６）−アルキルを表し、その際、前記アルキル基はフェニルにより１置換または多置換されていてもよく、その際、前記フェニルは、メトキシ基、エトキシ基により１置換または多置換されていてもよく、ならびにフェニル部分で（Ｃ_１〜Ｃ_６）−アルキル基により１置換または多置換されている１のベンジル基により置換されていてもよく、
Ｒ_１は、（Ｃ_１〜Ｃ_６）−アルキルおよびハロゲンにより置換されていてもよいピリジン骨格を表し、
Ｒ_２は（Ｃ_１〜Ｃ_６）−アルキルを表し、その際、前記アルキル基はフェニル環により１置換または多置換されており、かつ前記フェニル環はハロゲンにより１置換または多置換されていてもよく、かつ
Ｒ_３およびＲ_４は、無関係に水素、（Ｃ_１〜Ｃ_３）−アルコキシカルボニルアミノおよび（Ｃ_１〜Ｃ_３）−アルコキシカルボニルアミノ−（Ｃ_１〜Ｃ_３）−アルキルから選択される］のＮ−置換インドール−３−グリオキシルアミド、またはその生理学的に認容性の酸付加塩の使用。
式中で、
Ｒは水素を表し、
Ｒ_１は４−ピリジルを表し、
Ｒ_２はベンジル、４−クロロベンジル、４−フルオロベンジルおよび４−ブロモベンジルから選択され、かつ
Ｒ_３およびＲ_４は水素を表す、請求項１記載の使用。
Ｎ−置換インドール−３−グリオキシルアミドが、
Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］グリオキシルアミド、
Ｎ−（ピリジン−４−イル）−（１−ベンジルインドール−３−イル）−グリオキシルアミド、
Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−クロロベンジル）−インドール−３−イル］グリオキシルアミド、および
Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］グリオキシルアミドＨＣｌ
から選択される、請求項１記載の使用。
腫瘍性疾患が、白血病、前立腺癌、卵巣癌、表皮性腫瘍、およびダニング腫瘍から選択されることを特徴とする、請求項１から３までのいずれか１項記載の使用。
Ｎ−置換インドール−３−グリオキシルアミドが、Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］グリオキシルアミド、またはその生理学的に認容性の酸付加塩である、請求項１記載の使用。
生理学的に認容性の酸付加塩が、塩酸塩である、請求項１記載の使用。
Ｎ−置換インドール−３−グリオキシルアミドが、Ｎ−（ピリジン−４−イル）−（１−ベンジルインドール−３−イル）−グリオキシルアミドである、請求項１記載の使用。
Ｎ−置換インドール−３−グリオキシルアミドが、Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−クロロベンジル）−インドール−３−イル］グリオキシルアミドである、請求項１記載の使用。
活性作用物質として請求項１から３までのいずれか１項記載の１もしくは複数のＮ−置換インドール−３−グリオキシルアミドまたはその生理学的に認容性の酸付加塩、および製薬に使用可能な担体および／または希釈剤もしくは補助剤を含有することを特徴とする、腫瘍性疾患を治療するための抗腫瘍組成物。
製薬に使用可能な担体および／または希釈剤もしくは補助剤が、錠剤、糖衣錠、カプセル、輸液またはアンプルのための溶液、坐剤、硬膏剤、吸入により使用可能な粉末製剤、懸濁液、クリームまたは軟膏の形である、請求項９記載の抗腫瘍組成物。
腫瘍性疾患が、白血病、前立腺癌、卵巣癌、表皮性腫瘍、およびダニング腫瘍から選択されることを特徴とする、請求項９記載の抗腫瘍組成物。
Ｎ−置換インドール−３−グリオキシルアミドが、Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−インドール−３−イル］グリオキシルアミドもしくはその塩酸塩であることを特徴とする、請求項９記載の抗腫瘍組成物。
Ｎ−置換インドール−３−グリオキシルアミドが、Ｎ−（ピリジン−４−イル）−（１−ベンジルインドール−３−イル）−グリオキシルアミドであることを特徴とする、請求項９記載の抗腫瘍組成物。
Ｎ−置換インドール−３−グリオキシルアミドが、Ｎ−（ピリジン−４−イル）−［１−（４−クロロベンジル）−インドール−３−イル］グリオキシルアミドであることを特徴とする、請求項９記載の抗腫瘍組成物。