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B e s c h re i b u n g zu der Patentanmeldung betreffend Hypolipämisch
wirksame Adenosin-Derivate Bs ist bekannt, daß die am 6-Amino-Stickstoff substituierten
Adenosin-Derivate nicht nur eine gewisse Kreislaufwirkonnen kung zeigen sondern
hypolipämische Eigenschaften besitzen. In der deutschen Offenlegungsschrift 1 670
077 ist eine Reihe derartiger substituierter Adenosin-Derivate beschrieben, bei
denen die 6-Amino Gruppe dieser Adenosin-Derivate einfach oder zweifach substituiert-
ist. Außer einem Phenylalkylrest, dessen Phenylgruppe gegebenenfalls noch zusätzlich
in bestimmter Weise substituiert sein kann, kann die Aminogruppe noch mit einem
Alkylrest substituiert sein. Auch aus den deutschen Offenlegungsschriften 1 795
695 und 2 052 596 sind weitere am 6-Amino-Stickstoff einfach oder zweifach substituierte
Adenosin-Derivate bekannt geworden, welche jeweils als einen der Substituenten eine
Phenylalkyl- oder Arylalkylgruppe aufweisen,
Von den zahlreichen
bekannten N-(6)-substituierten Adenosinen ~rden besonders das Phenylisopropyladenosin-Derivat
und das tert.Butyladenosin-Derivat untersucht. Anscheinend zeigen diese am 6-Amino-Stickstofl
monosubstituierten Adenosin-Derivate.
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eine besonders starke hypolipämische Wirkung, weil bei diesen Verbindungen
der Substituent der 6-Amino-Gruppe über ein tertiäres oder quaternäres Kohlenstoffatom
mit dem Stickstoffatom der Aminogruppe verbunden ist. Durch diese Verzweigung an
dem Kohlenstoff, das mit der Araino-Gruppe verbunden ist, wird offensichtlich die
hypolipämische Wirkung aktiviert und der Metabolismus dieser Adenosin-Derivate vermindert,
obwohl durch die Substitution an der 6-Amino-Gruppe dieser Adenosin-Derivate der
Angriff der Adenosinaesaminase an sich bereits verhindert ist.
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is wurde nun festgestellt, daß neue N-(6)-monosubstituierte Adenosin-Derivate
der folgenden allgemeinen Formel
in der R1 und R2 gleich oder verschieden sein kann, wobei im Falle R1 gleich R2
diese Substituenten jeweils Cyclopropyl-, Phenyl- oder Benzylgruppen bedeuten, während
im Falle R1 ungleich R2 der Substituent R1 eine Methylgruppe und der Substituent
R2 eine Cyclopropylmethyl-, Cyclohexylmethyl-, - Cyclooctylmethyl-, Cyclohexen-3-yl-1-methyl-,
6-Methylcyclohexen-3-yl-1-methyl-,
Norbornen-5-yl-(2)-methyl-, 4'-Dimethylaminobenzyl-,
2-Chlor-4'-dimethylaminobenzyl- oder eine Diphenylmethylgruppe ist, besonders hypolipämisch
wirksam sind und wegen ihrer guten Verträglichkeit sich als Arzneimittel zur Behandlung
eines erhöhten Cholesterin- und Neutralfettgehalts im Blut eignen. Die erfindungsgemäßen
neuen Adenosin-Derivate werden im allgemeinen in Form ihrer Additionssalze mit therapeutisch
und pharmakologisch verträglichen Säuren verwendet.
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Die neuen Verbindungen können durch die an sich bekarnfte Umsetzung
der 6-Chlor-Derivate mit den entsprechenden Aminen hergestellt werden.
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Gegenstand der erfindung ist daher auch das neue Verfahren zur Herstellung
dieser Verbindungen, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man das 6-Chlor-9-ß-D-ribofuranosyl-9H-purin
mit einem primären Amin der allgemeinen Formel II,
in der R1 und R2 die oben genannte Bedeutung haben, reagieren läßt. Vorzugsweise
werden hierbei die Reaktionskomponenten in Dimethylformamid gelöst und nach Zusatz
einer Base, wie Triäthyl amin, bei Temperaturen zwischen 20 und 120°C zur Umsetzung
gebrachto In manchen Fällen ist es notwendig, die Reaktion unter Druck im Autoklaven
durchzufUhren, um die Reaktion zu beschleunigen. Nach Abziehen des Dimethylformamids
lassen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen durch Umfällen aus organischen Lösungsmitteln,
vorzugsweise Methanol, gegebenenfalls durch vorheriges Reinigen an Kieselgelsäulen
in chromatographisch reiner Form gewinnen.
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Die neuen Verbindungen können im Gemisch mit Arzneimittelträgern
therapeutisch angewendet werden. Als Trägersubstanzen eignen sich solche Stoffe,
die mit den neuen Verbindungen nicht in Reaktion treten, wie beispielsweise Lactose,
Stärke, Saccharose, Sorbit oder Talk. Es kommen alle üblichen oralen Applikationsformen
in Frage, beispielsweise Tabletten, Kapseln, Dragees oder Suspensionen.
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Die pharmakologisch verträglichen Salze lassen sich durch Neutralisation
der freien Basen mit entsprechenden Säuren beispielsweise Salzsäure, Schwefelsäure,
Phosphorsäure oder organischen Säuren, wie Essigsäure oder Eernsteinsäure herstellen.
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In den nachfolgenden Beispielen sind die neuen Adenosin-DerivaX und
deren erfindungsgeraäße Herstellung näher beschrieben.
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Beispiel 1 N (6 )-/T- ( Cyclopropyl) isopropyl2-adenosin 10 g 6-Chlor-9-(ß-D-ribofuranosyl)-purin,
5,3 g 1-Cyclopropylisopropylamin-hydrochlorid, 13 ml Triäthylamin und 150 ml Dimethylformamid
werden unter Stickstoff im Autoklaven 7 h auf 1100C gehalten. Nach Abfiltrieren
des Niederschlags wird im Vakuum zur Trockne eingeengt, der Rückstand in Chloroform
aufgenommen, mit Wasser gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet.
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Die eingedampfte Lösung wird in Chloroform/Methanol/Wasser (70/25/5
v/v/v) an Kieselgel 60 chromatographiert. Nach zweimaligem Umkristallisieren aus
Methanol erhält man 2,8 g (23 % d. Th.) N(6)-(1-Cyclopropyl-isopropyl)-adenosin
vom Fp.
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88-900C.
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Beispiel 2 N(6)-[1-(4-Dimethylaminophenyl)-isopropyl]-adenosin 10
g 6-Chlor-9-(ß-D-ribofuranosyl)-purin, 9 g 1-(4-Dimethylaminophenyl)-isopropylamin-hydrochlorid,
15 ml Triäthylamin und 200 ml Dimethylformamid werden unter Stickstoff im Autoklaven
10 h auf 120°C gehalten. Nach dem Einengen im Vakuum wird in Chloroform aufgenommen,
mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat.
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getrocknet und in Chloroform/Methanol (88/12 v/v) an Kieselgel 60
chromatographiert. Nach zweimaligem Umkristallisieren aus Methanol erhält man 1,8
g (12 % d. Th.) N(6)-[1-(4-Dimethylaminophenyl)-isopropyJl-adenosin vom Fp0 114-116°C.
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RF: 0,6; CHCl3/CH30Ii/H20 (59/33/8) Beispiel 3 N(6)-[1-(2-Chlor-4-dimethylaminophenyl)-isopropyl]-adenosin
10 g 6-Chlor-9-(ß-D-ribofuranosyl)-purin, 10 g 1-(2-Chlor-4-dimethylaminophenyl)-isopropylamin-hydrochlorid,
15 ml Triäthylamin und 150 ml Dimethylforinamid werden 30 Tage bei Raumtemperatur
belassen. Nach Abfiltrieren des Niederschlags wird die Lösung im Vakuum eingedampft,
der Rückstand in Chloroform aufgenommen, mit Wasser gewaschen und über Natriumsulfat
getrocknet.
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Nach dem Eindampfen zur Trockne und zweimaligem Umkristallisieren
aus Methanol erhält man-5,5 g (34 % d. Th.) N(6)-F1-(2-Chlor-4-dimethylaminophenyl)-isopropyl]-adenosin
vom Fp. 169-170°C.
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RF: 0,75; CHCl3/CH3OH/H2O (70/25/5)
Beispiel 4 N(6)-[1,1'-(Diphenyl)-isopropyl]-adenosin
9 g 6-Chlor-9-(ß-D-ribofuranosyl)-purin, 8 g 1,1'-Diphenylisopropylamin-hydrochlorid,
11 ml Triäthylamin und 150 ml Dimethylformamid werden unter Stickstoff im Autoklaven
2 h tei 12000 gehalten. Nach Abfiltrieren des Niederschlags wird eingeengt, mit
Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand
wird in Chloroform/Methanol (88/12 v/v) an Kieselgel chromatographiert. Nach dem
Einengen wird die Hauptfraktion mit Ather gewaschen. Ausbeute: 6,6 g (45,5 % d.
Th.) N(6)-[1,1'-(Diphenyl)-isopropyl]-adenosin vom Fp. 127-130°C.
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RF: 0,75; CHCl3/CH3OH/H20 (70/25/5) Beispiel 5 N(6)-[1-(5-Norbornen)-isopropyl]-adenosin
10 g 6-Chlor-9-(ß-D-ribofuranosyl)-purin, 7,5 g 1(5-Norbornen-) isopropylamin-hydrochlorid,
10 ml Triäthylamin und 150 ml Dimethylformamid werden unter Stickstoff 3 h im Autoklaven
auf 10000 gehalten, eingeengt, der Rückstand in Chloroform aufgenommen und mit Wasser
gewaschen. Nach Trocknen über Natriumsulfat wird die Lösung eingedampft und der
Rückstand mit Äther gewaschen. Nach dem Trocknen erhält man 6,0 g (43 % d. Th.)
N(6)-[1(5-Norbornen)-isopropyl]-adenosin vom Fp. 105-1100C.
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RF: 0,45; CHCl3/CH3OH (90/10) Beispiel 6 N(6)-(Dicyclopropyl-methyl)-adenosin
8 g 6-Chlor-9-(ß-D-ribofuranosyl)-purin und 6 g Dicyclopropylmethylamin-hydrochlorid
werden mit 15 ml Triäthylamin und 150 ml Dimethylformamid in Stickstoffatmosphäre
45 Min. auf Rückfluß
gehalten und anschließend im Vakuum eingedampft.
Der Rückstand wird in Chloroform aufgenommen, mit Wasser gewaschen und über Natriumsulfat
getrocknet. Die eingedampfte Lösung wird in Chlo-.
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roform/Methanol (88/12 v/v) an Kieselgel 60 chromatographiert.
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Man erhält 5,7 g (56 % d.Th.) N(6)-(Dicyclopropylmethyl)-adenosin
vom Fp. 102-104°C.
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RF: 0,4; CHCl3/CH30H (88/12) In analoger Weise wurden aus 6-Chlor-9-ß-D-ribofuranosyl-9H-purin
und dem entsprechenden Amin-Hydrochlorid noch die folgenden erfindungsgemäßen Verbindungen
erhalten: 7) N(6)-[1(Cyclohexyl)-isopropyl]-adenosin vom Schmp. 120-1230C (39 %
a. Th.) RF: 0,8; CHCl3/CH3OH/H2O (70/25/5) 8) N(6)-[1-(Cyclooctyl)-isopropyl]-adenosin
vom Schmp. 105-1100C (44 , d.Th.) R: p,4; CHCl3/CH3OH (90/10) 9) N(6)-[1-(Cyclohexen-(3)-yl)-isopropyl]-adenosin
vom Schmp. 120-1250C (30 ,§ d. Th.) RF: 0,8; CHCl3/CH3OH/H2O (59/33/8) 10) N(6)-[1-(2'-Methylcyclohexen-(4)-yl)isopropyl]-adenosin
vom Schmp. 93-96°C (34 % d. Th.) RF: 0,8; CHCl3/CH3OH/H2O (59/33/8) 11) N(6)-(Diphenylmethyl)adenosin
vom Schmp. 120-122°C (40% d. Th.) R: 0,85; CHCl3/CH30H/H20 (70/25/5) 12) N(6)-[1,3-(Diphenyl)-isopropyl]-adenosin
vom Schmp. 95-980C (39 io d. Th.) RF: 0,8; CHCl3/CH3OH/H2O (70/25/5)
In
der nachfolgenden Tabelle sind die pharmakologischen Ergebnisse von neun erfindungsgemäßen
Adenosin-Derivaten angegeben, deren antilipolytische Wirkung in vitro und ihre hypolipämische
Wirkung in vivo geprüft wurde folgende Methodik angewendet: 1. Lipolyse in vitro:
Die erfindungsgemäßen Verbindungen wurden bei der in der nachfolgenden Tabelle angegebenen
Konzentration mit isolierten Fettzellen inkubiert und die Wirkung auf die Noradrenalinstimulierte
Freisetzung von unveresterten Fettsäuren bestimmt.
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2. Hypolipämische Wirkung in vivo: Männliche Ratten mit einer Triton-induzierten
Hyperlipidämie erhielten die erfindungsgemäßen Verbindungen intraperitoneal appliziert.
Nach 18 Stunden ,-urde Blut per Herzpunktion Õewannen und Serum-Gesamtcholesterin
bestimmt.
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Tabelle
TABELLE
| Verb Substituenten Lipolyse in Triton-Hyper- |
| dung gem. 1 2 vitro lipämie |
| Beispiel R R % Hemmung i0 Hemmung |
| Inkubatkonz. Dosis, mR/kff i.P. |
| 10 6M 1 10 |
| 1 CH,-< 25.0 - 66.3 |
| 2 CH3 CH2x CH 76.8 24.3 43.3 |
| CH3 |
| 3 14.2 35.6 |
| 3 -CH3CH2c' |
| CK 75.4 32. |
| 4 -CH3 / 75.4 - 32.6 |
| 5 -CH3 -CH2 4 42.3 15.0 |
| 6 - 48.4 56.9 73.3 |
| 7 -CH3 -CH2 zu 30.4 - 5.6 |
| 8 -CH3 CH2JWö 40.4 -11.5 -0.5 |
| CH3 |
| 9 -CH3 -CH2- 5 58.0 -10.7 -0.6 |
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