DE10116938C1 - Zellkammer für die Lichtmikroskopie - Google Patents
Zellkammer für die LichtmikroskopieInfo
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Abstract
Die Erfindung betrifft eine Zellkammer für Lichtmikroskope zur Aufnahme und Versorgung von Zellkulturen, mit Mitteln zur Temperierung der Zelle während einer mikroskopischen Beobachtung, bestehend aus einem eine Bohrung aufweisenden Grundkörper (1) und einem oberen und unteren Deckglas (10, 4) zur Bildung eines Zellkammervolumens, mit Zu- und Abführungskanälen (3), dadurch gekennzeichnet, dass der Grundkörper (1) in seinen äußeren Abmessungen die Abmaße einer herkömmlichen Objektträgerplatte (2) aufweist, der Grundkörper (1) im mittleren Bereich erhöht ist, und in der Erhöhung eine mittige Bohrung eingebracht ist, ein u-förmiges auf die Erhöhung aufschiebbares Spannelement (5) vorgesehen ist, womit vom Grundkörper (1) lösbare Teile (4; 6; 8; 11) gegenüber der mittigen Bohrung unter Aufbringung einer Federkraft auf Position gehalten werden.
Description
Die Erfindung betrifft eine Zellkammer für die Lichtmikroskopie zur Aufnahme und Versorgung
von Zellkulturen nach dem Oberbegriff des Anspruchs 1.
Aus der DE 44 17 078 A1 ist eine Vorrichtung zum Mikroskopieren von Testzellen, Gewebe
schnitten oder dergleichen organischem Material bekannt. Die Vorrichtung ist eine im wesentli
chen geschlossene Kultivierungs-Kammer mit einem Aufnahmebereich für das organische Mate
rial. Die Kammer hat wenigstens ein quer zur Beobachtungsrichtung angeordnetes Beobach
tungsfenster für eine optische Beobachtungseinrichtung, wie Mikroskop oder Kamera und we
nigstens eine Einlassöffnung sowie wenigstens eine Auslassöffnung für eine Nährflüssigkeit.
Kennzeichnend für die Vorrichtung ist, dass in der Kammer wenigstens ein physiologischer Sen
sor vorgesehen ist, der zumindest dicht benachbart zu dem Aufnahmebereich angeordnet ist.
Zur Einbringung des Materials muss die Vorrichtung geöffnet und wieder verschlossen werden.
Dazu ist ein Schraubring vorgesehen, der zwei durch einen elastischen Distanzring beabstandete
Gehäuseteile zusammenhält. Der Schraubverschluss beeinträchtigt ggf. eine leichte Zugänglich
keit der Kammer.
Aus der DE 44 17 079 A1 ist ein Objektträger für Mikroskop, Kamera oder dergleichen bekannt.
Der Objektträger weist einen Aufnahmebereich für Testzellen, Gewebeschnitte oder dergleichen
organischem Material auf, und ist mit einem gegenüber dem Aufnahmebereich kleineren Beob
achtungsbereich für das organische Material versehen, wobei der Objektträger zumindest im
Beobachtungsbereich aus einem durchsichtigen Werkstoff besteht. Innerhalb des Aufnahmebe
reiches ist zu dem Beobachtungsbereich wenigstens ein Sensor zur Messung physiologischer
Parameter benachbart angeordnet.
Die DE 197 53 598 C1 beschreibt eine Vorrichtung zum Messen physiologischer Parameter, die
durch zwei Halbleiter-Chips begrenzt wird, die durch eine eine Prüfkammer umgrenzende
Dichtung beabstandet sind. Der Zusammenhalt der Vorrichtung erfolgt durch die Halbleiter-
Chips außenseitig übergreifende Halterungen. Die Messung wird mit Hilfe von auf den Chips
aufgebrachten Sensoren durchgeführt. Die Vorrichtung ist für eine mikroskopische Beobachtung
ungeeignet.
Aus der DE 197 49 218 A1 ist ein Hochtemperatur-Vakuumprobenhalter für Lichtmikroskope
bekannt. Eine Hochtemperatur-Heizvorrichtung ist mit einer Heizplatte versehen, die auf ther
misch isolierenden Keramikfüßen in ein flaches wassergekühltes Gehäuse eingebaut ist. Dieses
Gehäuse besitzt an der Unterseite einen Mikroskopadapter, der anstelle der Objektträgerscheibe
eines Probenmanipulator-Tisches in die entsprechende Vertiefung eingeklemmt werden kann.
Eine Glasplatte an der Oberseite erlaubt die Einkopplung von Licht bzw. die Beobachtung der
Substrate.
In der DE 198 03 551 C1 ist eine Temperierzelle zum Heizen oder Kühlen einer mit einem Mi
kroskop zu untersuchenden Probe beschrieben, die ein Sichtfenster zum Probenraum aufweist,
der durch elektrische Heizelemente und kühlmitteldurchflossene Kühlkanäle auf eine ge
wünschte Temperatur einstellbar ist. Die Temperierzelle ist auf einen Probentisch oder Tischträ
ger eines kommerziellen Mikroskops montierbar. Die Temperierzelle ist hochdruckfest ausgebil
det, wozu das Sichtfenster von der Innenseite des Probenraumes her auf einen durch Konter
muttern gesicherten Fenstersitz aufgeklebt und über eine selbstverstärkende Metalldichtung abge
dichtet ist. Ein Probenwechsel wird über eine separate, abdichtbare Beschickungsöffnung durch
geführt.
Aus der DE 198 15 696 A1 ist eine temperaturgeregelte Überströmapparatur für biologische
Proben bekannt, die aus einem Probenträger und mindestens einem Zu- und einem Ablauf be
steht. Der Zulauf ist schräg auf die Probe gerichtet. Die Ausbildung der Kammer ist nicht weiter
beschrieben.
In der DE 693 23 720 T2 ist allgemein ein System zum Durchführung der Polymerase-
Kettenreaktion (PCR) beschrieben und insbesondere eine Vorrichtung und ein Verfahren zum
Durchführen einer PCR auf einer DNS- oder RNS-Probe, ohne diese aus ihrer ursprünglichen
Zellenstruktur zu entfernen. Die Vorrichtung dient zum Halten eines Fluids an einem Objekträ
ger, wobei die Vorrichtung ein flexibles Deckteil, ein ringförmiges Kompressionsteil und zu
mindest eine Klemmeneinrichtung umfaßt, um das Deckteil und das ringförmige Kompression
steil an dem Objektträger dichtend zu halten. Eine Versorgung des Fluids mit einem Kulturme
dium während der Beobachtung ist nicht vorgesehen oder beabsichtigt.
Aus der DE 35 11 165 C2 ist eine auf einem Mikroskoptisch anbringbare Probenheizanordnung
mit einer zur Aufnahme einer zu untersuchenden Kultur ausgebildeten Kammer bekannt, die eine
mit einer Temperatursteuerenrichtung verbundene Heizeinrichtung aufweist. Diese erste Kam
mer ist von einer zweiten Kammer umschlossen, wobei die erste Kammer gegenüber der zweiten
Kammer gasdicht abgeschlossen und die zweite Kammer beheizbar ist. In der ersten Kammer
befindet sich ein Wassergefäß, um ein Austrocknen der Kultur zu vernindern. Zwar ist die Ver
sorgung der Kultur über ein Zuleitung, insbesondere mit einem von der Kultur benötigtem Gas
gewährleistet, aber eine leichte Zugänglichkeit zur ersten Kammer ist nicht gegeben.
Ferner ist in der Druckschrift Wonka, F.; A. Hofer; J. Hoffmann; F. Gölfert; H. E. Krinke; M.
Thümmler; R. H. W. Funk: Entwicklung einer multifunktionellen Zellkammer für die Vitalmikro
skopie Postervortrag: 32. Jahrestagung der Dtsch. Gesellschaft für Biomedzinische Technik,
Dresden, 08.-12.09.1998, veröffentlicht in: Biomedizinische Technik, Band 43, Ergänzungsband
1, 1998: 422-423 ein Kammersystem zur Aufnahme und Versorgung von Zellkulturen bekannt,
das während der mikroskopischen Beobachtung temperierbar ist. Als Schnittstelle zwischen den
zur Beobachtung dienenden Mikroskopen und den Kammern dient ein Aufnahmerahmen. Der
Grundkörper der Kammern ist eine Platte, die mit dem Objektträger passgerecht in den Aufnah
merahmen montierbar ist.
Außerdem ist in Hofer, A.; Nagel, F.; Wonka, F.; Krinke, H. E.; Gölfert, F.; Funk, R. H. W.:
A new perfusion cell chamber system for determination of heat shock effects by means of video
enhanced microscopy Medical Engineering/Cellular Engineering,
Vol. 37 (1999): 667-669 eine weitere Anordnung von Zellkammern beschrieben. Auf einem
Rahmen in den Abmessungen einer Objektträgerplatte sind zwei Zellkammern ausgebildet, die
durch je eine Abdeckplatte verschlossen werden. Die Abdeckplatten werden mit dem Rahmen
verschraubt.
Wesentlicher Nachteil dieser Ausführungen ist, dass der einen Grundkörper aufnehmende Rah
men nur an speziellen Mikroskoptischen (z. B. Leica) eingesetzt werden kann. Desweiteren sind
teilweise Probleme bezüglich der Dichtigkeit, der Temperierungsdynamik, der Biokompatibilität,
der Robustheit und des Handlings aufgetreten.
Nachteilig bei dem Stand der Technik ist, dass das Einbringen des mit Kulturen behafteten Trä
gerelementes in die Aufnahmevorrichtung mitunter viel Erfahrung in der Handhabung erfordert
und oft sehr zeitaufwendig (Lösen von Schraubverbindungen, exaktes Positionieren einer großen
Anzahl von Teilelementen etc.) ist. Die Geometrie wirkt sich ungünstig auf eine optimale optische
Beobachtbarkeit (Auflösung etc.) aus; einerseits zu großes Nährmediumvolumen in der
Kulturumgebung, verbunden mit schlechter Perfusion der Kultur, die permanent und flächendec
kend sein soll oder andererseits zu kleines Volumen, das zu strömungsbedingten Scherkräften
führt, die eine nicht akzeptable mechanische Belastung der Kulturen darstellen.
Die Aufgabe der Erfindung besteht darin, eine sehr einfach zu bedienende Zellkammer anzuge
ben, die die Erhaltung bzw. eine gezielte Beeinflussung der Vitalität sowohl von tierischen als
auch pflanzlichen Zell- oder Gewebekulturen ermöglicht und gleichzeitig eine gute lichtmikro
skopische Beobachtbarkeit gewährleistet.
Erfindungsgemäß wird die Aufgabe in Verbindung mit den im Oberbegriff des Anspruchs 1 ge
nannten Merkmalen dadurch gelöst, dass die Grundfläche des Kammerkörpers die Abmessungen
eines konventionellen Objektträgers aufweist, dass der die Bohrung aufweisende Mittelbereich
des Kammerkörpers gegenüber den Randbereichen erhöht ausgebildet ist und eine ringförmige
Verengung innerhalb der Bohrung aufweist, an deren Ober- und Unterseite die beiden Deckglä
ser festlegbar sind und dass auf den Mittelbereich des Kammerkörpers von dessen Seite her ein
u-förmiges, federndes Spannelement aufschiebbar ist, mit dem die lösbaren Teile der Zellkam
mer gegen den Mittelbereich anklemmbar sind.
Vorteilhafte Ausgestaltungen ergeben sich aus den in den Unteransprüchen genannten Merkma
len.
Die Besonderheit der Erfindung besteht darin, dass die äußeren Abmessungen der Zellkammer
den äußeren Abmaßen eines handelsüblichen, standardisierten Objektträgers entsprechend aus
gebildet sind. Somit ist die Zellkammer für alle Mikroskoptische geeignet.
Der Zusammenhalt aller demontierbaren Einzelteile wird durch ein u-förmiges Spannelement
gewährleistet, das auf den Kammerkörper aufschiebbar ist, und die Teile dichtend durch Feder
kraft zusammen hält.
Bei einer sogenannten geschlossenen Ausführung der Zellkammer wird ein Deckglas mit dem
Kammerkörper verklebt. Das andere Deckglas liegt auf einem Dichtring auf und wird gegen die
sen durch das Spannelement gedrückt.
Bei einer offenen Ausführung der Zellkammer entfällt das verklebte Deckglas.
Vorteilhaft wird eine O-Ring verwendet, der um etwa 20% verpresst wird. Dies ist bei der Di
mensionierung der umlaufenden Nut im Kammerkörper zu berücksichtigen, so dass eine umlau
fende Auflagefläche für das Deckglas verbleibt.
Der Vorteil der Erfindung besteht in folgendem:
- - Minimierung der geometrischen Abmessungen im optischen Beobachtungsfeld (betrifft Ar beitsabstände zum Objektiv sowie Kondensor);
- - universeller Einsatz am inversen und aufrechten Mikroskop;
- - Einsatz an Trocken- und Immersionssystemen;
- - das Einbringen des mit Kulturen behafteten Trägerelementes in die Aufnahmevorrichtung erfolgt einfach und schnell bei guter flexibler Abdichtung,
- - permanente Versorgung der auf dem Trägerelement befindlichen Kulturen mit Nährmedium;
- - Realisierung günstiger Versorgungs- bzw. Entsorgungsbahnen;
- - Biokompatibilität und Sterilisierbarkeit der verwendeten Materialien;
- - Möglichkeit einer Temperaturbeeinflussung des Nährmediums in unmittelbarer Nähe der Kulturen mit hoher Dynamik und Genauigkeit;
- - Möglichkeit eines flexiblen Einbringens von Sensor- und Manipulationseinrichtungen.
Die Erfindung wird nachfolgend an Hand von Ausführungsbeispielen näher erläutert. In den zu
gehörigen Zeichnungen zeigen:
Fig. 1 eine Darstellung einer erfindungsgemäßen Zellkammer in verschiedenen Ansichten
Fig. 2 eine Schnittdarstellung einer erfindungsgemäßen Zellkammer von vorn
In der Fig. 1 ist eine erfindungsgemäße Zellkammer in verschiedenen Ansichten dargestellt. Die
Zellkammer besteht aus einem Kammerkörper 1, der in seinen äußeren Abmessungen den Ab
maßen einer handelsüblichen, standardisierten Objektträgerplatte 2 entspricht und somit passend
für alle Mikroskoptische ist. Im mittleren Bereich ist der Kammerkörper 1 erhöht. Durch die
Erhöhung verläuft senkrecht im Mittelpunkt eine Bohrung, die das Zellkammervolumen einer
seits seitlich begrenzt und andererseits das optische Beobachtungsfenster das Kammervolumen
darstellt.
In der Fig. 2 ist eine Schnittdarstellung einer erfindungsgemäßen Zellkammer von vorn darge
stellt. In der Bohrung enden Zuführungskanäle 3, die von außen nach innen schräg verlaufen.
Entsprechend der Ansicht ist oberhalb der mittigen Bohrung ein Deckglas vorgesehen, dass sei
nerseits in den Kammerkörper 1 in einer Senkbohrung eingelassen ist. Das Deckglas 10 ist mit
dem Kammerkörper verklebt. In einer Ausnehmung sind weiter oberhalb des Deckglases 10 ein
Heizelement 11 und eine Distanzplatte 8 abnehmbar eingelassen. Am unteren Ende der mittigen
Bohrung verläuft in einer Ausnehmung im Grundkörper eine Nut, in der ein Dichtring 6 einge
lassen ist. Auf dem Dichtring 6 liegt ein Deckglas 4 auf.
Über die Erhöhung am Kammerkörper 1 ist ein u-förmiges Spannelement 5 seitlich aufgescho
ben. Die beiden Schenkel sind in der Darstellung im Bildvordergrund zusammengefasst.
Der Kammerkörper 1 besteht aus oberflächeneloxiertem Aluminium, das Spannelement 5 aus
Federstahlblech (0,4 mm stark) und die Distanzplatte 8 aus Duroplast. Die mittige Bohrung im
Kammerkörper 1 weist einen Durchmesser von 15 mm auf. Das Deckglas 4 weist einen Durch
messer von 22 mm und eine Dicke von 0,17 mm auf.
Als Dichtring 6 ist ein O-Ring (18 mm × 1 mm) vorgesehen., wenn durch den Anpressdruck des
Spannelementes die gewählte Verpressung des O-Ringes (z. B. 20%) garantiert werden kann.
Ansonsten ist auch ein Flachring (22 mm × 16 mm × 0,5 mm) verwendbar. Als Material für den
elastischen Dichtring ist Silikon wegen seiner Biokompatibilität und Sterilisierbarkeit vorteilhaft.
Der Dichtring wird im Kammerkörper so angeordnet, dass das den Dichtring berührende Deck
glas 4 eine Versenkung gegenüber der Oberfläche des Kammerkörpers um mehr als 80% der
Deckglasstärke erfährt. Dadurch wird das Deckglas im Beobachtungsfenster fixiert und kann
nicht verrutschen, während das Spannelement 5 über den Kammerkörper 1 geschoben wird. So
fern erforderlich (Variante "Geschlossene Kammer"), wird das obere Deckglas 10 mit einem
biokompatiblen Kleber entsprechend der dargestellten Position der Fig. 2 in den Kammerkörper
1 geklebt. Sollte auch hier eine flexible Abdichtung notwendig sein, so ist der Kleber durch ela
stische Dichtringe gemäß Dichtung des Deckglases 4 zu ersetzen, wobei zwischen Distanzplatte
8 und Deckglas 10 ein Distanzring (Außendurchmesser 22 mm, Innendurchmesser 15 mm, Stärke
ca. 2 mm) einzubringen ist (nicht dargestellt). Dieser Distanzring dient der starren Übertragung
des Anpressdruckes auf das obere Deckglas 10 und sollte eine gute Wärmeleitfähigkeit besitzen
(z. B. Aluminium). Desweiteren ist hierbei zu beachten, dass die mittige, kreisrunde Öffnung der
Distanzplatte 8 von einem Durchmesser von 21 mm auf einen Durchmesser von 15 mm zu redu
zieren ist.
Die Geometrie der Zuführungskanäle 3 ist so beschaffen, dass sie y-förmig zueinander angeord
net sind. Zwei Kanäle dienen primär der Zuleitung des Nährmediums und haben einen Durch
messer von weniger als 0,5 mm. Ein dritter Kanal dient primär der Ableitung des Nährmediums
und sekundär der Aufnahme von Sensoren bzw. Manipulatoren größerer Dimension. Sein
Durchmesser ist den Dimensionen dieser Sensoren angepasst, sollte aber 0,8 mm nicht über
schreiten. Wie die Schnittdarstellung in Fig. 2 zeigt, verlaufen die Kanäle schräg. Dies schafft
einerseits Freiraum zum Anschluss von Zuführungsschläuchen und führt andererseits die gegen
überliegende Kanalöffnung möglichst nahe an die auf dem Deckglas 4 befindlichen Kulturen, so
dass eine optimale Versorgung mit "frischem" Nährmedium gewährleistet ist und sich eine Per
fusionsverbesserung ergibt. Weiterhin ermöglicht dieser schräge Verlauf der Kanäle eine Mini
mierung des Abstandes zwischen den beiden Deckgläsern 4, 10 und somit eine Verringerung des
Kammervolumens bzw. sogenannter "Toträume", was wiederum zur Verbesserung der Perfusi
onsverhältnisse beiträgt.
Das Heizelement 11 ist vorzugsweise eine folienartige Ausführung mit einer Stärke von etwa
0,2 mm, dessen Leistung an die zu erzielenden Temperatursollwerte des Nährmediums bzw. die
erforderliche Temperaturdynamik angepasst wird. Gegebenfalls kann das Heizelement 11 auch
durch ein Kühlelement ersetzt oder um dieses ergänzt werden. Realisierungen für ein solches
Kühlelement wären Peltierelemente oder Kühlkreisläufe zur Aufnahme von flüssigen oder gas
förmigen Kühlmedien.
Über die Kanäle 3 erfolgt ein permanenter Austausch des Nährmediums, sowie gegebenenfalls
die Aufnahme von Sensoren zur Erfassung diverser physikalischer Größen oder Manipulatoren.
Die mit dem Mikroskop zu beobachtenden Kulturen werden auf einem kreisrunden, ebenfalls
handelsüblichen Deckglas 4 in der jeweils gewünschten Art aufgetragen und im Anschluss in
eine bereits erwähnte Ausnehmung an einer der beiden Öffnungen der mittigen Bohrung einge
bracht. Die Berührungsfläche zwischen diesem Deckglas 4 und dem Kammerkörper 1 muss
Dichtigkeit gegenüber dem im Kammervolumen befindlichen Nährmedium aufweisen. Diese
wird mittels des bereits erwähnten u-förmigen Spannelementes 5 erzielt, das über den Grundkör
per 1 geschoben wird und unter Aufbringung einer Federkraft (Spannkraft) das Deckglas 4 gegen
einen in den Grundkörper 1 eingelassenen, die mittige Bohrung umschließenden, elastischen
Dichtring 6 drückt. Das Spannelement 5 enthält auf einer Seite ebenfalls mittig eine Bohrung,
deren Rand 7 abgesenkt ist. Der Durchmesser dieser Bohrung ist kleiner/gleich dem Innen
durchmesser des elastischen Dichtringes 6. Durch den Rand 7 wird allseitig, zirkulär das Deck
glas 4 gegen den Dichtring 6 gedrückt und die erforderliche Dichtigkeit erzielt. Hierbei sind die
Federkraft des Spannelementes 5 und der im Kammervolumen gewünschte Abpressdruck auf
einander abgestimmt. Diese Abstimmung kann gegebenenfalls durch Distanzplatten 8 erzielt
werden, die zwischen dem Grundkörper und den beiden Federbügeln 9 (Fig. 1) des Spannele
mentes platziert werden. Die durch den Rand 7 entstehende zirkuläre Absenkung ist desweiteren
vorteilhaft, da insbesondere bei Immersionssystemen (quasi Kontaktmikroskopie) das Objektiv
auch noch im Randbereich des optischen Beobachtungsfensters positioniert werden kann, wo
durch Kulturen nicht nur im Zentrum sondern auch in der Peripherie des Beobachtungsfensters
erfasst werden können. Eine Beobachtbarkeit über nahezu die gesamte Fensterfläche ist somit
möglich.
Die Verwendung eines weiteren handelsüblichen Deckglases 10, welches in eine passgerechte
Versenkung an der noch bestehenden zweiten Öffnung der mittigen Bohrung des Kammerkör
pers geklebt wird, führt gemeinsam mit dem die Zellkultur tragenden Deckglas 4 zu einer ge
schlossenen Perfusionskammer. Diese lässt einen Einsatz sowohl an aufrechten als auch inversen
Immersions-Mikroskopen zu.
Die Temperierung des Nährmediums in unmittelbarer Nähe der Kultur erfolgt mittels eines
elektrischen Heizelements 11, welches in Form einer Folie zwischen der Distanzplatte 8 und
dem Kammerkörper 1 angeordnet ist. Funktionell ist zu beachten, dass bei der Beheizung die
Wärmeverluste durch Abgabe an die äußere Umgebung so gering wie möglich sind. Diesbezüg
lich ist für die Distanzplatte 8 ein wärmeisolierender Werkstoff auszuwählen. Der sowohl bio
kompatible als auch sterilisierbare Kammerkörper hingegen muss ein sehr guter Wärmeleiter
sein, da er die Wärme von der Heizfolie (Wärmequelle) möglichst verlustarm auf das Nährmedi
um zu übertragen hat.
Die Erfassung der Temperatur erfolgt mittels eines flexibel positionierbaren Sensors, der über
einen der Zuführungskanäle 3 an einen frei wählbaren Ort gebracht werden kann. Die Tempera
turregelung erfolgt softwarebasiert und lässt die Implementierung bedarfsorientierter Regelalgo
rithmen (PID, Fuzzy etc.) zu.
1
Kammerkörper
2
Objektträgerplatte
3
Zuführungskanal
4
Deckglas
5
Spannelement
6
Dichtring
7
Rand
8
Distanzplatte
9
Federbügel
10
Deckglas
11
Heizelement
Claims (8)
1. Zellkammer für die Lichtmikroskopie zur Aufnahme und Versorgung von Zellkulturen,
mit einem Kammerkörper (1), der zur Bildung eines das Zellkulturmedium aufneh menden Kammervolumens eine durch ein oberes und ein unteres Deckglas (10, 4) ab deckbare Bohrung aufweist
und mit Zu- und Abführkanälen (3) zur Versorgung der Zellkulturen
sowie mit Mitteln zur Temperierung der Zellkammer während der Beobachtung,
dadurch gekennzeichnet,
dass die Grundfläche des Kammerkörpers (1) die Abmessungen eines konventionellen Objektträgers aufweist,
dass der die Bohrung aufweisende Mittelbereich des Kammerkörpers (1) gegenüber den Randbereichen erhöht ausgebildet ist und eine ringförmige Verengung innerhalb der Bohrung aufweist, an deren Ober- und Unterseite die beiden Deckgläser (10, 4) festlegbar sind
und dass auf den Mittelbereich des Kammerkörpers (1) von dessen Seite her ein u- förmiges, federndes Spannelement (5) aufschiebbar ist, mit dem die lösbaren Teile der Zellkammer (4; 6; 8; 10; 11) gegen den Mittelbereich anklemmbar sind.
mit einem Kammerkörper (1), der zur Bildung eines das Zellkulturmedium aufneh menden Kammervolumens eine durch ein oberes und ein unteres Deckglas (10, 4) ab deckbare Bohrung aufweist
und mit Zu- und Abführkanälen (3) zur Versorgung der Zellkulturen
sowie mit Mitteln zur Temperierung der Zellkammer während der Beobachtung,
dadurch gekennzeichnet,
dass die Grundfläche des Kammerkörpers (1) die Abmessungen eines konventionellen Objektträgers aufweist,
dass der die Bohrung aufweisende Mittelbereich des Kammerkörpers (1) gegenüber den Randbereichen erhöht ausgebildet ist und eine ringförmige Verengung innerhalb der Bohrung aufweist, an deren Ober- und Unterseite die beiden Deckgläser (10, 4) festlegbar sind
und dass auf den Mittelbereich des Kammerkörpers (1) von dessen Seite her ein u- förmiges, federndes Spannelement (5) aufschiebbar ist, mit dem die lösbaren Teile der Zellkammer (4; 6; 8; 10; 11) gegen den Mittelbereich anklemmbar sind.
2. Zellkammer nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Spannelement (5) als
eine den Mittelbereich des Kammerkörpers (1) umgreifende, u-förmige Klammer mit
Mittelsteg ausgebildet ist, deren an dem unteren Deckglas (4) zur Anlage kommender
Schenkel eine kreisförmige, der Bohrung angepasste Zentralöffnung aufweist und deren
an der oberen Seite des Kammerkörpers (1) zur Anlage kommender Schenkel zwei seitli
che, vom Mittelsteg abstehende, geradlinige Federbügel (9) aufweist, wobei vorzugsweise
der innere Rand (7) der Zentralöffnung zum unteren Deckglas (4) hin abgekröpft ist und
ausschließlich mit seinem abgekröpften Teil am unteren Deckglas (4) anliegt.
3. Zellkammer nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass die ringförmige Ver
engung eine umlaufende Nut zur Aufnahme eines Dichtringes (6) aufweist, an dem das
untere Deckglas (4) zur Anlage kommt, wobei der Dichtring (6) vorzugsweise einen In
nendurchmesser von 18 mm und eine Dicke von 1 mm aufweist.
4. Zellkammer nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass die Zu- und
Abführkanäle (3) zur Versorgung der Zellkulturen den Mittelbereich von außen nach in
nen zu schräg abfallend durchstoßen.
5. Zellkammer nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass das obere
Deckglas (10) an der Oberseite der ringförmigen Verengung angeklebt ist.
6. Zellkammer nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, dass oberhalb
des oberen Deckglases (10) ein Heizelement (11) und eine von dem Spannelement (5) be
aufschlagte Distanzplatte (8) vorgesehen sind.
7. Zellkammer nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass der Kam
merkörper (1) aus eloxiertem Aluminium, das Spannelement (5) aus Federstahl und die
Distanzplatte (8) aus Duroplast besteht.
8. Zellkammer nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass die beiden
Deckgläser (10, 4) einen Durchmesser von 22 mm und eine Dicke von 0,17 mm aufweisen.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE2001116938 DE10116938C1 (de) | 2001-03-30 | 2001-03-30 | Zellkammer für die Lichtmikroskopie |
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Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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DE2001116938 DE10116938C1 (de) | 2001-03-30 | 2001-03-30 | Zellkammer für die Lichtmikroskopie |
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