CN1806832B - 一种药物组合物及其制备方法和质量检测方法 - Google Patents

Abstract

本发公开了一种药物组合物，该药物组合物是由桃仁、没药、皂角刺、川楝子、败酱草、蒲公英、枸杞子、赤芍、丹参、白芷、红花、石韦、泽兰、王不留行等药味制成，对于***炎、***增生有着较好的治疗效果。本发明同时还公开了该药物组合物的制备方法和质量控制方法。

Description

一种药物组合物及其制备方法和质量检测方法

技术领域

本发明涉及一种药物组合物，尤其是一种中药组合物，同时还涉及该药物组合物的制备方法和质量控制方法，属中药领域。

背景技术

***增生(BPH)及慢性***炎，属于中医学“癃闭”、“精癃”等范畴，主要临床表现为尿频、排尿困难和尿潴留等下尿路梗阻症状。随着人均寿命的延长，成为常见的男性老年性疾病，发病率随年龄增大而增加，目前尚无特效药物，***摘除手术对解除尿路梗阻是安全有效的方法，但它也是有一定的局限性及危险性，给患者带来痛苦及经济负担。近年来药物的应用越来越受到专家的重视和患者的欢迎。

中医学认为正常人小便通畅有赖于三焦气化，而三焦气化主要依赖肺脾肾三脏来维持，肾又具有主持全身水液代谢，调节体内水液代谢平衡的作用；而肾主水的功能主要是靠肾中精气对水液的蒸腾气化作用，肺的通调，脾的运化，均依赖于肾的气化，故尿的生成和***，更与肾的气化直接相关，所以肾阳的温煦作用和肾中精气的蒸腾气化主宰着整个水液代谢，如肾的气化失常，关门不利，水液代谢障碍，则可致尿少、尿闭、水肿等，气化不利，气不化水则可致尿频。此外肝郁气滞，疏泄受阻，或血瘀等原因均可影响三焦气化，导致癃闭。因此，根据以上分析，辨证论治，探索一种治疗该类疾病的药物非常必要。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗瘀血凝聚、湿热下注所致的慢性***炎及***增生的症状改善等药物中应用的药物组合物及其制质量控制。

本发明目的是通过如下技术方案实现的：

首先是处方，该处方是由如下原料药组成的：

桃仁    80-120重量份   没药    80-120重量份

皂角刺  80-120重量份   川楝子  80-120重量份

败酱草  300-360重量份  蒲公英  300-360重量份

枸杞子  80-120重量份   赤芍    80-120重量份

丹参  80-120重量份  白芷      80-120重量份

红花  80-120重量份  石韦      150-190重量份

泽兰  80-120重量份  王不留行  80-120重量份

确切地讲，该处方的原料药组成为：

桃仁    100重量份  没药      100重量份  皂角刺  100重量份

川楝子  100重量份  败酱草    333重量份  蒲公英  333重量份

枸杞子  100重量份  赤芍      100重量份  丹参    100重量份

白芷    100重量份  红花      100重量份  石韦    167重量份

泽兰    100重量份  王不留行  100重量份

应用以上处方，发明人可以将其制成临床所需而又能实现的各种剂型，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂及口服液体制剂。发明人优选为片剂，同时设计了其制备工艺，包括提取精部分和制剂成型部分。

提取精制部分，基本方法为：取没药、皂角刺、白芷粉碎成细粉，其余十一味加8～16倍量水煎煮2～3次，每次1～3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至80℃时相对密度为1.25～1.30，加入没药、皂角刺、白芷细粉，混匀，减压干燥，干膏粉碎成细粉。

优化参数后的方法为：取没药、皂角刺、白芷粉碎成细粉，其余十一味加12倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至80℃时相对密度为1.25～1.30，加入没药、皂角刺、白芷细粉，混匀，75℃下减压干燥，干膏粉碎成细粉。

制剂成型部分：主要是利用以上步骤得到的干膏粉，加入微晶纤维素和淀粉，调节加入加入量足以使其能均匀制粒，干燥，整粒，压制成片。

为了有效控制本发明产品的质量，发明人还制定了质量控制方法，包括定性鉴别和含量测定两部分。定性鉴别部分主要包括如下三个方面：

1)取本发明组合物制剂5g，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用***振摇提取3次，每次20ml，合并***液，挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取没药对照药材0.2g，加***30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1的石油醚-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

2)取本发明组合物制剂5g，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用***振摇提取3次，每次20ml，合并***液，挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取原儿茶酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以80∶50∶8的甲苯-醋酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

3)取本发明组合物制剂5g，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用***振摇提取3次，每次20ml，弃去***液，水液用醋酸乙酯振摇提取3次，每次20ml，弃去醋酸乙酯液，水层用水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以4∶1∶0.1的氯仿-甲醇-氨水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

含量测定方法主要是指：

供试品溶液的制备  取本发明组合物制剂5g，研细，称取约1g，精密称定，置于50ml量瓶中，加甲醇45ml，超声处理40-80分钟，取出，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，以0.45μm微孔滤膜滤过，即得；

对照品溶液的制备  精密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥24小时的欧前胡素对照品适量，加甲醇制成每1ml含6礸的溶液，即得；

色谱条件与***适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；60∶40的甲醇-水为流动相，检测波长为300nm，流速为1.0ml/min，理论板数按欧前胡素峰计算应不低于3000；

测定法  分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本组合物制剂每单位含白芷以欧前胡素计，不得少于0.05mg。

具体实施方式

本发明药物制剂具有活血化瘀，清热利湿的功能。发明人根据其功能主治，从抑制***增生、抗炎等方面对其药效学进行了验证实验。

受试药物：按本发明最优方案制得的制剂，含1.63g生药/单位量的制剂。

氢化可的松http://www.epharma.com.cn/productshow.asp？id＝1194(Hc)：天津人民制药厂

丙酸***：东北第六制药分厂

盐酸***注射液；角叉菜胶：辽宁省药物研究所

磷酸组胺；5-羟色胺：中国药品生物制品检定所

动物：昆明种小鼠18～22g，雌雄兼用，Wistar大鼠雄性，150～200g；均由中国药科大学新药研究中心动物室提供。

试验1：对小鼠实验性***增生的影响

1.1预防作用：取体重22-26g雄性小鼠50只，均分为正常对照组、NS组、本发明制剂3g/kg组、本发明制剂1g/kg组和Hc0.1g/kg组。除正常对照组外，各组小鼠每天ig药物，同时scTP0.005g/kg。于第21天处死小鼠，剖取***称重，计算***指数(***重mg/体重g)。结果表明本发明制剂3g/kg及1g/kg，对丙睾所致小鼠***增生有良好的预防作用(表1)

表1    对小鼠***增生的预防作用(n＝10)

*与Normal比较P＜0.05；**与Tp+NS比较P＜0.01。

将摘取的***做石蜡包埋切片，镜检可见，Tp加NS组小鼠***明显增生，腺上皮形成多数***，腺上皮细胞肥大呈高柱状使腺腔变窄，胞核亦见增大。本制剂加TP组小鼠***腺上皮***明显减少，腺细胞与正常相似为立方或矮柱状，腺腔也较前组明显宽大，镜检所见与Hc组近似，且大、小剂量组间预防***增生的作用又有程度上的差异。大剂量预防作用较明显。

1.2治疗作用：取体重27-34g，雄性小鼠46只，其中38只scTp0.005g/(kg·d)，8只做正常对照。

21d后随机抓取其中6只与正常对照组小鼠同时处死，剖检并证实***已增生，确认造模成功，随将余下小鼠分4组，每组8只，每天分别igNS，本制剂大、小剂量和Hc0.1g/kg，21d后剖取***称重，计算***指数，结果表明上述剂量的本制剂有治疗***增生的作用(表2)。

表2    对小鼠***增生的治疗作用(n＝8)

*与Normal比较P＜0.05；**与Tp+NS比较P＜0.01。

将摘取的***做组织切片镜检，结果显示本制剂组腺细胞和间质增生均较NS组明显减轻，与Hc组近似。

说明本发明制剂能预防和抑制***增生。

试验2：抗炎作用：

2.1对小鼠二甲苯性耳壳炎症的影响：

小鼠40只，随机分4组，每组10只，分别ig本制剂大、小剂量，等容量NS及scHC0.1g/kg，连续用药7d，于第7天给药30min后处死动物，用直径8mm大孔器取下双耳对称处的耳朵称重，以左右耳片重量差表示肿胀程度，求出肿胀抑制率，结果见表3

表3    对小鼠二甲苯性耳壳炎症的影响(n＝10)

与NS组比较，*P＜0.05；**P＜0.01

2.2对小鼠棉球肉芽增生的影响：小鼠40只，随机均分为4组，***麻醉后无菌条件下将5mg重无菌棉球植入两侧腋下各1个。缝合伤口，并于当天起各组分别ig本制剂大、小剂量，等容量NS及scHc0.1g/kg，连续7d，于第8天处死动物，剥离棉球肉芽称其湿重。在80℃烘箱中烘2h后称干重，结果见表4。

表4    对小鼠棉球肉芽增生慢性炎症影响(n＝10)

2.3对毛血管通透性的影响：大鼠30只随机均分3组，分别ig本制剂3g/kg，NS和scHc0.2g/kg，给药30min后，于腹部不同部位皮内各注射5-HT10ug和Hist50ug(均为0.05ml)随即iv1％Evans蓝1ml/kg，20min后取腹部蓝染皮肤，剪碎用7∶3丙酮-NS5ml浸泡24h，以1000r/min离心5min，取上清液，用741型分光光度计于610nm波长比色，测其吸收度，结果见表5。

表5    对大鼠毛细血管通透性的影响(n＝10)

试验2表明，本发明制剂对多种炎症模型都有良好的抗炎效应。

试验3：急性毒性试验：

小鼠60只，每鼠一次ig最大浓度(100g/dl)最大容量(20ml/kg)本制剂混悬液，即一次ig总量为20g生药/kg，相当于临床用量的88倍。观察7天，未见小鼠有异常变化，或死亡。说明本品毒性甚低。

下面以实施来进一步说明本发明的技术方案。

实施例一

【处方】

桃仁(炒)100g    没药(炒)    100g  皂角刺  100g

川楝子  100g    败酱草      333g  蒲公英  333g

枸杞子  100g    赤芍        100g  丹参    100g

白芷    100g    红花        100g  石韦    167g

泽兰    100g    王不留行(炒)100g

【制法】

以上十四味，没药、皂角刺、白芷粉碎成细粉，其余十一味加12倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩(-0.08Mpa 70±5℃)至相对密度为1.25～1.30(75～80℃)，加入没药、皂角刺、白芷细粉，混匀，减压干燥(-0.08Mpa75±2℃)，干膏粉碎成细粉，加入微晶纤维素70g，补加适量的淀粉使其总量达到580g，以2％羟丙甲纤维素为黏合剂，制粒，60℃干燥，整粒，加入硬脂酸镁1g，压制成1000片，包薄膜衣，即得。

实施例二

【处方】

桃仁    80g     没药    80g   皂角刺  80g  川楝子80g

败酱草  300g    蒲公英  300g  枸杞子  80g  赤芍  80g

丹参    80g     白芷    80g   红花    80g  石韦  150g

泽兰    80g     王不留行80g

【制法】

以上十四味，没药、皂角刺、白芷粉碎成细粉，其余十一味加12倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩(-0.08Mpa 70±5℃)至相对密度为1.25～1.30(75～80℃)，加入没药、皂角刺、白芷细粉，混匀，减压干燥(-0.08Mpa75±2℃)，干膏粉碎成细粉，细粉加1％的羧甲淀粉钠及微晶纤维素适量调整总量至500g，混匀，加30％乙醇作润湿剂，混合均匀，合坨20分钟，制丸条、分粒与搓圆，丸剂打光，低温干燥，分装，即得。

实施例三

【处方】

桃仁(炒)120g    没药(炒)    120g  皂角刺  120g  川楝子120g

败酱草  360g    蒲公英      360g  枸杞子  120g  赤芍  120g

丹参    120g    白芷        120g  红花    120g  石韦  190g

泽兰    120g    王不留行(炒)120g

【制法】

以上十四味，没药、皂角刺、白芷粉碎成细粉，其余十一味加12倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩(-0.08Mpa 70±5℃)至相对密度为1.25～1.30(75～80℃)，加入没药、皂角刺、白芷细粉，混匀，减压干燥(-0.08Mpa 75±2℃)，干膏粉碎成细粉，加入微晶纤维素70g，补加适量的淀粉使其总量达到750g，以2％羟丙甲纤维素为黏合剂，制粒，60℃干燥，整粒，加入硬脂酸镁1.5g，压制成1000片，包薄膜衣，即得。

【鉴别】

a.取10片，除去薄膜衣，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用***振摇提取3次，每次20ml，合并***液，挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取没药对照药材0.2g，加***30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

b.取10片，除去薄膜衣，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用***振摇提取3次，每次20ml，合并***液，挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取原儿茶酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(80∶50∶8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

c.取10片，除去薄膜衣，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用***振摇提取3次，每次20ml，弃去***液，水液用醋酸乙酯振摇提取3次，每次20ml，弃去醋酸乙酯液，水层用水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-氨水(4∶1∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

含量测定：

取片剂10片，除去薄膜衣，研细，称取约1g，精密称定，置于50ml量瓶中，加甲醇45ml，超声处理60分钟，取出，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，以微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。精密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥24小时的欧前胡素对照品适量，加甲醇制成每1ml含6礸的溶液，即得。照高效液相色谱法测定。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(60∶40)为流动相，检测波长为300nm，流速为1.0ml/min，理论板数按欧前胡素峰计算应不低于3000。分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

每片含白芷以欧前胡素(C₁₆H₁₄O₄)计，不得少于0.05mg。

Claims (10)

1.一种用于治疗***炎和***增生的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由下述原料药制成的：

桃仁      80-120重量份    没药      80-120重量份

皂角刺    80-120重量份    川楝子    80-120重量份

败酱草    300-360重量份   蒲公英    300-360重量份

枸杞子    80-120重量份    赤芍      80-120重量份

丹参      80-120重量份    白芷      80-120重量份

红花      80-120重量份    石韦      150-190重量份

泽兰      80-120重量份    王不留行  80-120重量份。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由下列原料制成的：

桃仁  100重量份    没药      100重量份    皂角刺  100重量份

川楝子100重量份    败酱草    333重量份    蒲公英  333重量份

枸杞子100重量份    赤芍      100重量份    丹参    100重量份

白芷  100重量份    红花      100重量份    石韦    167重量份

泽兰  100重量份    王不留行  100重量份。

3.如权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于原料药中的桃仁、没药和王不留行分别为炒桃仁、炒没药和炒王不留行。

4.如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物被制成片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液体制剂。

5.如权利要求4所述用于治疗***炎和***增生的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包含如下步骤：取没药、皂角刺、白芷粉碎成细粉，其余十一味加8～16倍量水煎煮2～3次，每次1～3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至80℃时相对密度为1.25～1.30，加入没药、皂角刺、白芷细粉，混匀，减压干燥，干膏粉碎成细粉。

6.如权利要求5所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包含如下步骤：取没药、皂角刺、白芷粉碎成细粉，其余十一味加12倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至80℃时相对密度为1.25～1.30，加入没药、皂角刺、白芷细粉，混匀，75℃下减压干燥，干膏粉碎成细粉。

7.如权利要求6所述的组合物的制备方法，其特征在于将干膏粉加入微晶纤维素和淀粉，加入量足以使其能均匀制粒，干燥，整粒，压制成片。

8.如权利要求1、2或3所述药物组合物的有效成分检测方法，其特征在于该方法中的鉴别方法包括如下的一种或几种：

1)取药物组合物制剂5g，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用***振摇提取3次，每次20ml，合并***液，挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取没药对照药材0.2g，加***30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1的石油醚醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

2)取药物组合物制剂5g，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用***振摇提取3次，每次20ml，合并***液，挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取原儿茶酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以80∶50∶8的甲苯-醋酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

3)取药物组合物制剂5g，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用***振摇提取3次，每次20ml，弃去***液，水液用醋酸乙酯振摇提取3次，每次20ml，弃去醋酸乙酯液，水层用水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以4∶1∶0.1的氯仿-甲醇-氨水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

9.如权利要求8所述药物组合物的有效成分检测方法，其特征在于还包含如下的含量测定方法：

供试品溶液的制备取药物组合物制剂5g，研细，称取约1g，精密称定，置于50ml量瓶中，加甲醇45ml，超声处理40-80分钟，取出，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，以0.45μm微孔滤膜滤过，即得；

对照品溶液的制备精密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥24小时的欧前胡素对照品适量，加甲醇制成每1ml含6礸的溶液，即得；

色谱条件与***适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；60∶40的甲醇-水为流动相，检测波长为300nm，流速为1.0 ml/min，理论板数按欧前胡素峰计算应不低于3000；

测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本组合物制剂每单位含白芷以欧前胡素计，不得少于0.05mg。

10.如权利要求1、2或3所述的药物组合物在制备治疗***炎、***增生药物中的应用。