CN1799584B - 一种中药组合物及其制备方法和质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于治疗小儿外感风热的中药组合物，其原料药包括了青蒿、板蓝根、菊花、苦杏仁、桔梗、连翘、薄荷、甘草等药味，同时还公开了该药物组合物的制备方法和质量控制方法。该药物组合物对于小儿外感风热，内郁化火，发烧头痛，咳嗽，咽喉肿痛等病症有较好的治疗效果。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药组合物及其制备方法和质量控制方法，属中药制药领域。
背景技术
发热是儿科最常见的临床症状之一，可出现于多种疾病中，如不及时治疗，极易引起高热惊厥等多种并发症，给儿童的身心带来一定影响。WHO建议，当小儿肛温高于38 5℃时，应采用安全的解热药治疗，对发热患者除对病因进行治疗外，选用安全有效的解热药也是不可忽视的问题。解热药是儿科急诊的常用药物。生长发育是小儿不同于成年人最根本的生理特点，在这个时期内选用的药物在疗效方面应确切明显，在使用方面应有可靠的安全性，毒副作用少，在剂型方面应是儿童乐于服用，便于准确掌握剂量的儿童专属剂型，如滴剂、糖浆剂、口服液、混悬剂、冲剂等。上市药物中儿科临床应用广泛，安全、有效的解热药有对乙酰氨基酚、布洛芬、阿司匹林等，主要通过抑制***素合成酶，减少中枢***素的合成，使发热患者体温调节中枢被提高的调定点下调，增加散热而使发热体温降至正常，但不能使体温降至正常以下。上述的有效药物大多为西药，因此发明一种有效、安全、毒副作用少的治疗儿科发热疾病的中药配方，成为现阶段非常有意义的课题。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于治疗小儿外感风热，内郁化火，发烧头痛，咳嗽，咽喉肿痛的中药组合物及其制备方法；本发明的目的还在于提供该中药组合物的质量控制方法。
本发明目的是通过如下技术方案实现的。
原料药的组成为：
青蒿 400-600重量份 板蓝根 500-700重量份 菊花 500-700重量份
苦杏仁 500-700重量份 桔梗 500-700重量份 连翘 500-700重量份
薄荷 200-400重量份 甘草 100-300重量份
进一步优选后，确实其最优配比为：
青蒿 500重量份 板蓝根 600重量份 菊花 600重量份
苦杏仁 600重量份 桔梗 600重量份 连翘 600重量份
薄荷 300重量份 甘草 200重量份
针对以上配方，发明人制定了提取精制工艺，以将其制成现代剂型。该提取工艺可以如下三种中的任一种，都能达到发明目的。
第一种：取青蒿、连翘、菊花、薄荷加水蒸馏，收集蒸馏液500ml，放冷，收集挥发油，加4倍量倍他环糊精及10倍量水，胶体磨研磨30分钟，制成挥发油包合物，干燥(55～60℃)，粉碎成细粉，备用。药渣与其余板蓝根等四味加水煎煮二次，苦杏仁在水沸后加入，滤过，合并水煎液与蒸馏后的水液，浓缩至相对密度为1.15(25℃)，放冷，加入适量乙醇至含醇量达70％，密闭，放置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10(60℃)的清膏，喷雾干燥，将喷干粉与包合物细粉混合，就制得了本发明提取物的药粉。
第二种：取青蒿、连翘、菊花、薄荷加水蒸馏，收集蒸馏液500ml，放冷，收集挥发油，加4倍量倍他环糊精及10倍量水，胶体磨研磨30分钟，制成挥发油包合物，干燥(55～60℃)，粉碎成细粉，备用。药渣与其余板蓝根等四味加70％乙醇回流提取二次，苦杏仁在水沸后加入，滤过，合并滤液，滤液减压回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10(60℃)的清膏，喷雾干燥，将喷干粉与包合物细粉混合，制得本发明提取物的药粉。
第三种：处方八味药材，加70％乙醇回流提取二次，苦杏仁在水沸后加入，滤过，合并滤液，滤液减压回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10(60℃)的清膏，喷雾干燥，得到的喷干粉即为所需药粉。
在以上工艺的基础上，应用制得的药粉，只要加入药剂学的常规辅料，使用常规工艺，就可以制成所需的剂型，包括包括颗粒剂、胶囊剂和片剂。
为了有效控制本发明产品质量，保证疗效，发明人还针对处方制定了质量控制方法，其中包括定性鉴别方法和含量测定方法。定性鉴别包括：
a.取本发明组合物制剂5g，研细，加水20ml使溶解，以氯仿振摇提取二次，每次25ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取东莨菪内酯对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液、对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸(10∶8∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
b.取本发明组合物制剂5g，研细，加水40ml使溶解，离心(2000r/min)10分钟。取出，取上清液，通过已处理好的D101大孔树脂柱(柱长12cm，内径1.5cm)，用水60ml洗脱，弃去。再用40％乙醇70ml洗脱，弃去。继用70％乙醇50ml洗脱。收集70％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(7∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
c.取本发明组合物制剂5g，研细，加甲醇50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，加浓盐酸2ml，氯仿25ml，置沸水浴中回流水解1小时，放冷，分取氯仿层，水液以氯仿25ml振摇提取，合并氯仿液，水浴蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-甲醇-冰醋酸(7∶0.5∶0.2)为展开剂，展开，展距20cm，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。
d.取本发明组合物制剂5g，研细，加70％硫酸乙醇-水(1∶3)混和液50ml，加热回流3小时，放冷，以氯仿振摇提取3次，每次25ml，合并氯仿液，加水50ml洗涤，弃去洗涤液，氯仿液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取桔梗对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液5μl、对照药材溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿枣颐眩？∶1)为展开剂，展开，展距20cm，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定方法包括如下步骤：
a.色谱条件与***适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-3％冰醋酸(7∶93)；检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000。
b.对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量，置棕色瓶中，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液，摇匀，即得。
c.供试品溶液的制备 取本分明组合物制剂5g，研细，取2.0g，精密称定，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟(250W 100Hz)，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，以0.45um的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
d.测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本组合物制剂每单位量含菊花以绿原酸(C16H18O9)计，不得少于2.1mg。
上述单位量是指含相当20g原药材的成品药剂量。
具体实施方式
本发明药物组合物具有解表清热，化痰止咳，解毒利咽的功能。发明人根据其功能主治，从清热、消炎等方面对其药效学进行了研究。
受试药物：按照三种不同方法制备的TRN颗粒1-3号，含4g生药/g的颗粒。
小儿退热片：哈尔滨制药六厂生产，市售。
仪器：MC-3B电子数字式体温计，欧姆龙(大连)有限公司。PB303-N电子天平，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司。KQ-100DE医用数控超声波清洗器，昆山超声仪器有限公司。
动物：昆明种小鼠15～20g，25～35g，雌雄兼用，SD大鼠雌雄各半，200～250g；白色家兔雌雄各半，1.9～2.0kg，均由中国药科大学新药研究中心动物室提供。
试验1：对细菌内毒素所致家兔发热模型的影响
取健康家兔，每日测定体温1～2次，连续3天以上，使家兔适应体温操作，选择体温38.5～40之间，波动在0.3℃以内者，随机分为5组，每组6只，阳性对照组给予小儿退热片0.025g/kg，空白对照组家兔，给予凉开水、其余三组每兔给予TRN1-3号颗粒4g生药/kg。给药后1.5小时，每兔均从耳缘静脉注射内毒素标准品50EU/kg，于内毒素攻击后0.5小时，1小时、2小时、3小时、4小时、5小时各测体温1次，以给药前家兔体温平均值为基数，计算各测定时间点家兔体温变化，以各时间点体温变化作t检验。结果见下表。
与空白基质比较，＊＊p＜0.01，＊p＜0.05。
试验结果显示TRN颗粒可对抗内毒素0.5h所致家兔体温升高，作用持续至5小时，与空白基质组比较，有显著性差异.说明TRN颗粒可明显抑制内毒素所致家兔感染性发热。
试验2：对注射脱脂牛奶所致大鼠发热模型的影响：
取SD大鼠，雌雄各半，每日测定体温1～2次，连续3天以上，使大鼠适应体温操作，选择体温36～38之间，波动在0.4℃以内者，测定给药前体温，随后肌肉注射脱脂牛奶1ml/kg，4h后测定体温1次，选择体温升高1.0℃以上者，随机分为5组，每组6只，阳性对照组给予小儿退热片0.055g/kg，空白组给予凉白开水，其余三组给予TRN1-3号颗粒6g生药/kg，于与给药后0.5小时，1小时，2小时各测体温一次，以给药前大鼠体温为基数，计算各测定点体温变化。结果见下表。
试验结果显示TRN颗粒可抑制注射牛奶所致体温升高，与空白对照组比较，有显著差异，说明TRN颗粒也抑制注射牛奶所致非感染性发热。
试验3：对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响：
雄性昆明种小鼠随机分为5组，每组8只，阳性对照组给予小儿退热片0.116g/kg，空白对照组小鼠给予凉白开水，其余3组给予TRN1-3号颗粒10g生药/kg。给药半小时后，小鼠右耳两侧均匀涂以二甲苯30ul，2小时后处死小鼠，打下左右耳片称重，计算肿胀率(左右耳重量差/右耳重量)*100％。结果见下表。
| 组别 | 剂量(g/kg) | 肿胀百分率％ | 抑制率％ |
| 空白对照组 | 50.1±21.2 | ||
| 小儿退热片 | 0.116 | 22.3±10.1<sup>＊＊</sup> | 56.0 |
| TRN1号 | 10 | 21.4±13.2<sup>＊＊</sup> | 60.2 |
| 2号 | 10 | 21.9±10.2<sup>＊＊</sup> | 58.2 |
| 3号 | 10 | 22.0±12.2<sup>＊＊</sup> | 56.1 |
试验结果显示TNR颗粒可抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(p＜0.01)，表明TNR颗粒有明显抗炎作用。
由药效学实验可见，本发明药物组合物具有一定的清热、抗炎作用。以下再通过实施例来进一步说明本发明的技术方案。
实施例一
【处方】青蒿500g 板蓝根600g 菊花600g
苦杏仁600g 桔梗600g 连翘600g
薄荷300g 甘草200g
【制法】以上八味，取青蒿、连翘、菊花、薄荷加水蒸馏，收集蒸馏液500ml，放冷，收集挥发油，加4倍量倍他环糊精及10倍量水，胶体磨研磨30分钟，制成挥发油包合物，干燥(55～60℃)，粉碎成细粉，备用。药渣与其余板蓝根等四味加水煎煮二次，苦杏仁在水沸后加入，滤过，合并水煎液与蒸馏后的水液，浓缩至相对密度为1.15(25℃)，放冷，加入适量乙醇至含醇量达70％，密闭，放置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10(60℃)的清膏，喷雾干燥，喷干粉、包和物细粉中加入适量乳糖至1000g，混匀，干轧制粒，制成200袋，即得。
实施例二
【处方】青蒿500g 板蓝根600g 菊花600g
苦杏仁600g 桔梗600g 连翘600g
薄荷300g 甘草200g
【制法】以上八味，取青蒿、连翘、菊花、薄荷加水蒸馏，收集蒸馏液500ml，放冷，收集挥发油，加4倍量倍他环糊精及10倍量水，胶体磨研磨30分钟，制成挥发油包合物，干燥(55～60℃)，粉碎成细粉，备用。药渣与其余板蓝根等四味加70％乙醇回流提取二次，苦杏仁在水沸后加入，滤过，合并滤液，滤液减压回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.10(60℃)的清膏，喷雾干燥，喷干粉、包合物细粉中加入羧甲淀粉钠40g，微晶纤维素80g，混和均匀，用80％乙醇制粒，60℃干燥，整粒，加入1g硬脂酸镁，并加羧甲淀粉钠适量，至450g，混匀，压片，压成1000片，即得。
实施例三
上述本发明组合物制成的颗粒剂的质量控制方法：
鉴别：
a.取颗粒5g，研细，加水20ml使溶解，以氯仿振摇提取二次，每次25ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取东莨菪内酯对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液、对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸(10∶8∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
b.取颗粒5g，研细，加水40ml使溶解，离心(2000r/min)10分钟。取出，取上清液，通过已处理好的D101大孔树脂柱(柱长12cm，内径1.5cm)，用水60ml洗脱，弃去。再用40％乙醇70ml洗脱，弃去。继用70％乙醇50ml洗脱。收集70％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(7∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
c.取颗粒5g，研细，加甲醇50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，加浓盐酸2ml，氯仿25ml，置沸水浴中回流水解1小时，放冷，分取氯仿层，水液以氯仿25ml振摇提取，合并氯仿液，水浴蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-甲醇-冰醋酸(7∶0.5∶0.2)为展开剂，展开，展距20cm，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。
d.取颗粒5g，研细，加70％硫酸乙醇-水(1∶3)混和液50ml，加热回流3小时，放冷，以氯仿振摇提取3次，每次25ml，合并氯仿液，加水50ml洗涤，弃去洗涤液，氯仿液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取桔梗对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液5μl、对照药材溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿枣颐眩？∶1)为展开剂，展开，展距20cm，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定：
色谱条件与***适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-3％冰醋酸(7∶93)；检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量，置棕色瓶中，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液，摇匀，即得(10℃以下保存)。
供试品溶液的制备 取本品颗粒5g，研细，取2.0g，精密称定，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟(250W 100Hz)，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，以0.45um的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每袋含菊花以绿原酸(C16H18O9)计，不得少于2.1mg。每袋为5g，相当于原药材20g。
Claims (5)
1.一种用于治疗小儿外感风热的中药组合物，其特征在于该药物组合物是由下述原料药制成的：
青蒿 400-600重量份 板蓝根 500-700重量份 菊花 500-700重量份
苦杏仁500-700重量份 桔梗 500-700重量份 连翘 500-700重量份
薄荷 200-400重量份 甘草 100-300重量份。
2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下列原料制成的：
青蒿 500重量份 板蓝根 600重量份 菊花 600重量份
苦杏仁600重量份 桔梗 600重量份 连翘 600重量份
薄荷 300重量份 甘草 200重量份。
3.如权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于该组合物被制备成颗粒剂、胶囊剂或片剂。
4.权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法包含如下提取精制工艺中的任一种：
1)取青蒿、连翘、菊花、薄荷加水蒸馏，收集蒸馏液至馏出液中无油珠，放冷，收集挥发油，加4倍量倍他环糊精及10倍量水，胶体磨研磨，制成挥发油包合物，干燥，粉碎成细粉，备用；药渣与其余板蓝根等四味加水煎煮二次，苦杏仁在水沸后加入，滤过，合并水煎液与蒸馏后的水液，浓缩至25℃时相对密度为1.15，放冷，加入乙醇至含醇量达70％，密闭，放置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，并浓缩至60℃时相对密度为1.10的清膏，喷雾干燥，将喷干粉与包合物细粉混合，制得药粉；
2)取青蒿、连翘、菊花、薄荷加水蒸馏，收集蒸馏液至馏出液中无油珠，放冷，收集挥发油，加4倍量倍他环糊精及10倍量水，胶体磨研磨30分钟，制成挥发油包合物，干燥，粉碎成细粉，备用；药渣与其余板蓝根等四味加70％乙醇回流提取二次，苦杏仁在醇液沸后加入，滤过，合并滤液，滤液减压回收乙醇，并浓缩至60℃时相对密度为1.10的清膏，喷雾干燥，将喷干粉、包合物细粉混合，制得药粉；
3)将处方药味加70％乙醇回流提取二次，苦杏仁在醇液沸后加入，滤过，合并滤液，滤液减压回收乙醇，并浓缩至60℃时相对密度为1.10的清膏，喷雾干燥，得到喷干粉。
5.如权利要求4所述的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法还包括如下步骤，即将提取精制后得到的药粉，加入药学常规辅料，制成颗粒剂、胶囊剂或片剂。
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