CN1557362A - 一种治疗冠心病心绞痛的中药制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗冠心病心绞痛的中药制剂及其制备方法，其特征在于该制剂是由三七、红花、川芎提取的有效部位组成，其中三七和川芎的有效部位通过超声法提取和大孔吸附树脂法纯化得到的，红花的有效部位通过酸性水提法与大孔树脂吸附法纯化得到的，将从三种中药中提取纯化的有效部位制成粉针剂、滴丸剂、软胶囊剂，药理实验表明，本发明制剂可以明显改善犬的急性心肌缺血和心肌梗塞症状，可明显扩张冠状动脉，降低冠状动脉阻力，减轻心肌损伤程度，显著降低血清磷酸肌酸激酶(CK)含量。本发明的三种剂型的中药制剂对冠心病、心绞痛的治疗具有起效快、效果明显的特点。

Description

一种治疗冠心病心绞痛的中药制剂及其制备方法

所属技术领域

本发明属于中药制药领域，具体涉及到一种治疗冠心病心绞痛的中药制剂及其制备方法。

背景技术

冠心病心绞痛属于人类重大疾病之一，其死亡率一直是众多重大疾病之首，冠心病心绞痛为内科常见病，多发于中老年患者，随着社会的发展，人民生活水平的提高，其发病年龄趋于年轻化，因此，冠心病的发病率趋向提高之势，防治任务十分沉重，已经引起国内外关注。随着现代科学技术的发展，人们对冠心病的诊断和防治也取得了一些进展，如在检查方面，由原来的常规心电图、负荷心电图检查，更新到动态心电图、超声心动检查术、冠脉造影、电子束CT机的应用、生化检查和心功能测定方法也在不断改进，为早期诊断提供了良好的手段，在防治方面包括CCV的建立、冠状动脉搭桥术的建立等，药物治疗方面，在扩张冠脉的基础上，出现了钙离子拮抗剂、β-受体阻滞剂、溶栓药物的应用，为治疗冠心病心绞痛提供了多种手段。然而临床实践表明，单纯西药治疗只治标不治本，尤其是药物的副作用，使患者难以接受和长期服用。当代人类的回归大自然的愿望日益强烈，普遍希望天然无公害的中药治疗，从而为中医药的发展提供了良好的契机。冠心病心绞痛在中医中称之为胸痹心痛，开发一种高效、低毒、质量稳定、剂型先进的治疗冠心病心绞痛的纯中药制剂是本发明的目的。

冠心病心绞痛病情来势凶猛，对病人身心造成极大的伤害，因此，临床上常常需要一种能够迅速缓解症状、解除病人痛苦、起效迅速、效果明显的药物。本发明来源于《中华人民共和国药典》(2000年版一部)中的舒胸片，舒胸片对冠心病心绞痛有一定的疗效，但因为是片剂，胃内崩解及肠内吸收都需要一定的时间，达到血药浓度(产生药效)时间会更长，因此，对冠心病心绞痛这种急症有着很大的劣势，舒胸片是基于传统的水提醇沉工艺，添加一定的辅料制成，无效成分保留的多，病人服用量大。从大量的文献和专利中，我们可以得知，舒胸片中三七、川芎、红花三味中药中具有药理药效的有效部位分别是三七总皂苷、川芎嗪、红花黄色素，基于此基础，本发明运用现代科技手段(超声法和大孔吸附树脂法)分别对三味中药进行提取纯化，尽量保留有效部位，去处无效或有害的部分，以有效部位分别制成现代中药制剂—粉针剂、软胶囊剂、滴丸剂。

发明内容

本发明目的在于从中药三七、川芎、红花中，运用现代科技手段——超声提取法、大孔吸附树脂法提取纯化三味中药中三七总皂苷、川芎嗪、红花黄色素，并以其为原料制成粉针剂、滴丸剂用于冠心病心绞痛的急救治疗，制成软胶囊用于冠心病心绞痛的长期治疗。

本发明是通过以下技术方案实现的。

一.工艺制法

三七、红花、川芎之间的重量比为1～3∶1～3∶2～6。

取三七饮片粉碎，过10-15目筛，取粉碎过的三七，加5-8倍量(W/V)的乙醇(60％-80％)浸泡0.5-1小时，用超声提取罐进行提取，时间为20-50分钟，超声功率为100-5400W，搅拌速度为50-1500RPM，控制温度为室温-55℃，提取后进行过滤，滤液回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后，取其粉末与一定量树脂混合，上大孔吸附树脂柱，用20-60％乙醇洗脱至完全，回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后备用；取川芎饮片粉碎，过10-15目筛，取粉碎过的川芎，加5-8倍量(W/V)的乙醇(60％-80％)浸泡0.5-1小时，用超声提取罐进行提取，时间为20-50分钟，超声功率为100-5400W，搅拌速度为50-1500RPM，控制温度为室温～55℃，提取后进行过滤，滤液回收乙醇，浓缩干燥粉碎，取其粉末与一定量树脂混合，上大孔吸附树脂柱，用20-60％乙醇洗脱至完全，回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后备用；取红花，加水20-60倍，用酸调PH值为2.0-5.0，蒸煮1-3小时；用此条件提取1-4次，合并滤液，浓缩至药材重量的3-4倍，上大孔吸附树脂柱，用水洗至无色，洗脱液干燥粉碎备用；取提取纯化后的三七粉末、川芎粉末、红花粉末均匀混合，按照粉针剂型要求制成粉针剂；取提取纯化后的三七粉末、川芎粉末、红花粉末与适当的辅料均匀的混合，按照软胶囊剂型要求制成软胶囊剂；取提取纯化后的三七粉末、川芎粉末、红花粉末与适当的辅料均匀的混合，按照滴丸剂型要求制成滴丸剂。

二.检测分析

本发明的三种制剂的有效部位是三七总皂苷(以人参皂苷Rb₁，Rg计)、川芎嗪、红花黄色素，因此，这三种有效部位的含量多少直接决定制剂的药理药效和质量，下面是对三种制剂的有效部位和其他制剂的分析比较。

1.本发明软胶囊与舒胸片的分析比较。

(1)取本发明软胶囊10粒和舒胸片10片，按《中华人民共和国药典》(2000年版一部)中舒胸片的【含量测定】方法对两种制剂的三七总皂苷(以人参皂苷Rb₁，Rg计)进行分析。

(2)本发明软胶囊10粒和舒胸片10片，运用高效液相色谱法测定两种制剂中的川芎嗪的含量。

高效液相色谱法实验条件：用C₁₈柱，甲醇——水(含1％冰醋酸)为流动相，检测波长280nm，外标法定量。

分别取软胶囊10粒和舒胸片10片，用超声提取法(溶剂为无水乙醇)提取3次，滤液加1mol/L的盐酸甲醇溶液适量，调PH值1.2后蒸干，加1mol/L盐酸溶解残渣，过滤，滤液用浓氨水(7.5mol/L)调PH值＝9-10后，再用二氯甲烷提取2次，将二氯甲烷提取液用1mol/L的盐酸甲醇液调PH＝1.2，置恒温水浴蒸干，加甲醇溶解，离心5分钟(4000r/min)，得到待测样品。盐酸川芎嗪对照品由中国生物制品检定所提供。

(3)本发明软胶囊10粒和舒胸片10片，运用分光光度法测定红花黄色素的含量。

分别取软胶囊10粒和舒胸片10片，分别用酸水提取3次，取其水提液，用聚酰胺法除杂志，经sephadexLH-20凝胶柱层析分离纯化，重结晶得化合物。

对照品羟基红花黄色素A，由沈阳药科大学天然药化室提供。

        经过分析后，得到数据如下所示：

	三七总皂苷(以人参皂苷Rb1，Rg计)mg/g	川芎嗪ug/g	红花黄色素mg/g
				舒胸片	1.75	9.46	8.36
软胶囊	11.12	30.78	46.39

2.本发明滴丸与复方丹参滴丸的分析比较。

分别取两种制剂100粒，按照本节中三七总皂苷的测定方法得到数据如下所示：

复方丹参滴丸中三七总皂苷(以人参皂苷Rb₁，Rg计)：8.08mg/g

本发明滴丸中三七总皂苷(以人参皂苷Rb₁，Rg计)：13.75mg/g

3.本发明粉针剂与红花注射液的分析比较。

分别取本发明粉针剂10支和红花注射液10支，按照本节中红花黄色素的测定方法得到数据如下所示：

红花注射液中黄色素的含量：97.45mg/g

本发明粉针剂中黄色素的含量：123.19mg/g.

通过以上实验数据可以分析到，经过一系列的提取纯化后，三七总皂苷、川芎嗪、红花黄色素的单位含量都有一定的提高，充分说明了此发明的提取纯化的工艺具有发明意义。

三.药理实施例

I.本发明的三种制剂：粉针剂、滴丸剂、软胶囊剂，分别对家犬做药理学实验，实验结果表明三种制剂与对照组比较都有极显著差异，可以明显改善犬的急性心肌缺血和心肌梗塞的作用，减轻心肌损伤程度，明显降低血清磷酸肌酸激酶(CK)含量，可明显扩张冠状动脉，降低冠状动脉阻力。下面以软胶囊剂为例，列举实验方案。

1.材料与方法

家犬，体重14～16KG，雌雄不分，随机分为2组(n＝6)，1组为对照组，用冷钾停跳液；2组为软胶囊组，即冷钾停跳液+软胶囊(有效成分150mg/L)。犬经腹腔内戊巴比妥钠(30mg/kg)麻醉后，固定于手术台，气管内插管呼吸机，建立提外循环后，全身降温，阻断升主动脉根部，各组动物灌注相应冷钾停跳液(4℃)，首次剂量15ml/kg，每隔30分钟再给10ml/kg，心包内置冰屑，心脏停跳间维持灌流量80ml/(kg min)，鼻咽温度26℃，心肌温度15℃，主动脉阻断90分钟后复温至15℃，开放主动脉，再灌注30分钟后结束实验。

分别于主动脉阻断前和再灌注30分钟时记录心率，平均动脉压、左心室压、左心室内压最大上升速率和左心室内压最大下降速率，均以再灌注后与缺血前值的百分比来表示，分别于主动脉阻断前、阻断90分钟和再灌注30分钟抽取静脉血标本，检测超氧化物歧化酶(SOD)活力和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)生产，肌酸激酶及同工酶活力，缺血90分钟再灌注30分钟后取每组心肌组织进行超微结构观察。

全部实验资料进行FQ检验，原始数据用均数±标准表示。

2.结果

心功能指标恢复百分数见表1

     表1再灌注30分钟心功能指标恢复百分数(％，n＝6，X±s)

组别	心率	平均动脉压	左心室压	左心室内压最大上升速率	左心室内压最大下降速率
						1组	80.07±14.83	44.17±8.67	60.22±5.01	55.23±2.16	111.06±19.18
2组	83.17±9.34	83.31±7.83	96.27±15.72	89.89±13.59	119.51±38.12

由表中计算得到，平均动脉压、左心室压、左心室内压最大上升速率和左心室

内压最大下降速率恢复百分数2组与1组比较有极显著差异(P＜0.01).超氧化物歧化酶(SOD)活力和脂质过氧化产物丙二醛见表2

表2缺血再灌注静脉血超氧化物歧化酶(SOD)活力和脂质过氧化产物丙二醛含量变化(n＝6，x±s)

组别	缺血前	缺血90分钟	再灌注30分钟
				超氧化物歧化酶活力(U/ml)
1组	145.50±20.32	95.83±13.01	64.17±8.80
				2组	150.67±17.70	148.33±15.69	143.50±17.85
丙二醛含量(ug/L)
				1组	453.00±35.56	814.17±39.47	1572.00±149.75
2组	473.80±26.30	479.50±28.85	507.00±33.99

由表中计算得到，2组与1组比较有极显著差异(P＜0.01).

   表3缺血再灌注静脉血肌酸激酶及同工酶活力变化(U/L，n＝6，x±s)

组别	缺血前	缺血90分钟	再灌注30分钟
				肌酸激酶活力
1组	444.33±27.07	800.17±55.50	1536.01±129.04
				2组	441.17±30.94	476.00±31.03	543.02±31.81
同工酶活力
				1组	37.33±6.38	84.67±7.79	194.83±28.41
2组	39.50±3.56	43.00±4.15	51.33±4.03

由表中计算得到，2组与1组比较有极显著差异(P＜0.01).

心肌超微结构变化，1组：线粒体基底密度降低，明显肿胀，嵴肿胀断裂，有空泡样变。2组：极个别线粒体嵴轻微肿胀，绝大多数完好，双层膜结构存在。

II.以滴丸剂为例，与复方丹参片、舒胸片、复方丹参滴丸进行在体心肌梗死实验.

实验方法：取250～300g雄性大鼠40只，乌拉坦0.65g/kg腹腔浅麻醉后，背位固定，用大半个橡皮球连接到人工呼吸机，进行人工呼吸，大鼠胸部去毛、消毒，沿左锁骨中线切开皮肤约2厘米，在第四或第五肋间钝性分离基层，打开胸腔，剪开心包，轻压右侧胸廓，挤出心脏，在动脉圆锥与左心耳之间冠状静脉处节扎左冠脉后，把心脏放回胸腔，迅速缝合胸腔，停止人工呼吸，分别用四种制剂对10只大鼠进行实验，得到数据计算如下所示：

	显效率	有效率	无效率	总有效率
					复方丹参片	16.8％	54.1％	29.1％	70.9％
舒胸片	18.4％	55.6％	26.0％	74.0％
					复方丹参滴丸	33.3％	56.4％	10.3％	89.7％
本发明滴丸	34.8％	57.9％	7.3％	92.7％

从实验我们可以得知，本发明滴丸组与两组片剂相比较有极显著(P＜0.01)，滴丸组与复方丹参滴丸组有一定的差异，本发明滴丸剂能够明显改善心肌缺血、心绞痛等心脏疾患。

四.制备实施例

实施例1

取三七饮片100克粉碎，过10目筛，取粉碎过的三七，加5倍量(W/V)的乙醇(60％)浸泡0.5小时，用超声提取罐进行提取，时间为20分钟，超声功率为100W，搅拌速度为50RPM，控制温度为室温，提取后进行过滤，滤液回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后，取其粉末与一定量树脂混合，上大孔吸附树脂(D101型)，用20％乙醇洗脱至完全，回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后，称重为12.080克，备用；取川芎饮片200克粉碎，过10目筛，取粉碎过的川芎，加5倍量(W/V)的乙醇(60％)浸泡0.5小时，用超声提取罐进行提取，时间为20分钟，超声功率为100W，搅拌速度为50RPM，控制温度为室温，提取后进行过滤，滤液回收乙醇，浓缩干燥粉碎，取其粉末与一定量树脂混合，上大孔吸附树脂(AB-8型)，用20％乙醇洗脱至完全，回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后，称重为18.081mg，备用；取红花100克，加水20倍，用酸调PH值为2.0，蒸煮1小时；用此条件提取2次，合并滤液，浓缩至药材重量的3倍，上大孔吸附树脂(D101型)，用水洗至无色，洗脱液干燥粉碎，称重为8.102克，备用；取提取纯化后的三七粉末12.080克、川芎粉末18.081毫克、红花粉末8.102克均匀混合，按照粉针剂型要求制成粉针剂1000支；按照上述方法，取提取纯化后的三七粉末、川芎粉末、红花粉末与适当的辅料均匀的混合，按照软胶囊剂型要求制成软胶囊剂1000粒；按照上述方法，取提取纯化后的三七粉末、川芎粉末、红花粉末与适当的辅料均匀的混合，按照滴丸剂型要求制成滴丸剂1000粒。

实施例2

取三七饮片粉碎100克，过15目筛，取粉碎过的三七，加8倍量(W/V)的乙醇(80％)浸泡1小时，用超声提取罐进行提取，时间为50分钟，超声功率为5400W，搅拌速度为1500RPM，控制温度为55℃，提取后进行过滤，滤液回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后，取其粉末与一定量树脂混合，上大孔吸附树脂(D101型)，用60％乙醇洗脱至完全，回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后，称重为12.080克，备用；取川芎饮片200克粉碎，过15目筛，取粉碎过的川芎，加8倍量(W/V)的乙醇(80％)浸泡1小时，用超声提取罐进行提取，时间为50分钟，超声功率为5400W，搅拌速度为1500RPM，控制温度为55℃，提取后进行过滤，滤液回收乙醇，浓缩干燥粉碎，取其粉末与一定量树脂混合，上大孔吸附树脂，用60％乙醇洗脱至完全，回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后，称重为18.081mg，备用；取红花100克，加水60倍，用酸调PH值为5.0，蒸煮3小时；用此条件提取4次，合并滤液，浓缩至药材重量的4倍，上大孔吸附树脂(D101型)，用水洗至无色，洗脱液干燥粉碎，称重为8.102克，备用；取提取纯化后的三七粉末12.080克、川芎粉末18.081毫克、红花粉末8.102克均匀混合，按照粉针剂型要求制成粉针剂1000支；按照上述方法，取提取纯化后的三七粉末、川芎粉末、红花粉末与适当的辅料均匀的混合，按照软胶囊剂型要求制成软胶囊剂1000粒；按照上述方法，取提取纯化后的三七粉末、川芎粉末、红花粉末与适当的辅料均匀的混合，按照滴丸剂型要求制成滴丸剂1000粒。

实施例3

取三七饮片100克粉碎，过12目筛，取粉碎过的三七，加6倍量(W/V)的乙醇(70％)浸泡0.7小时，用超声提取罐进行提取，时间为35分钟，超声功率为1900W，搅拌速度为1000RPM，控制温度为40℃，提取后进行过滤，滤液回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后，取其粉末与一定量树脂混合，上大孔吸附树脂(D101型)，用50％乙醇洗脱至完全，回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后，称重为12.080克，备用；取川芎饮片200克粉碎，过13目筛，取粉碎过的川芎，加6倍量(W/V)的乙醇(75％)浸泡0.8小时，用超声提取罐进行提取，时间为30分钟，超声功率为3000W，搅拌速度为900RPM，控制温度为35℃，提取后进行过滤，滤液回收乙醇，浓缩干燥粉碎，取其粉末与一定量树脂混合，上大孔吸附树脂，用50％乙醇洗脱至完全，回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后，称重为18.081mg，备用；取红花，加水40倍，用酸调PH值为3.0，蒸煮2小时；用此条件提取3次，合并滤液，浓缩至药材重量的4倍，上大孔吸附树脂(D101型)，用水洗至无色，洗脱液干燥粉碎，称重为8.102克，备用。取提取纯化后的三七粉末12.080克、川芎粉末18.081毫克、红花粉末8.102克均匀混合，按照粉针剂型要求制成粉针剂1000支；按照上述方法，取提取纯化后的三七粉末、川芎粉末、红花粉末与适当的辅料均匀的混合，按照软胶囊剂型要求制成软胶囊剂1000粒；按照上述方法，取提取纯化后的三七粉末、川芎粉末、红花粉末与适当的辅料均匀的混合，按照滴丸剂型要求制成滴丸剂1000粒。

Claims (7)

1.一种治疗冠心病心绞痛的中药制剂，其特征在于：该中药制剂是由中药三七、红花、川芎中提取的有效部位组成，制剂剂型包括粉针剂、软胶囊剂和滴丸剂。

2.一种治疗冠心病心绞痛的中药制剂的制备方法，其特征在于：包括中药有效部位的提取、纯化和制剂制备两部分。

3.根据权利要求2，所述中药有效部位提取、纯化，包括以下步骤：

(1)取三七饮片粉碎，过10-15目筛，取粉碎过的三七，加5-8倍量(W/V)的乙醇(60％-80％)浸泡0.5-1小时，用超声提取罐进行提取，过滤，滤液回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后，取其粉末与一定量树脂混合，上大孔吸附树脂柱，用20％-60％乙醇洗脱至完全，回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后备用。

(2)取川芎饮片粉碎，过10-15目筛，取粉碎过的川芎，加5-8倍量(W/V)的乙醇(60％80％)浸泡0.5-1小时，用超声提取罐进行提取，提取后进行过滤，滤液回收乙醇，浓缩干燥粉碎，取其粉末与一定量树脂混合，上大孔吸附树脂柱，用20-60％乙醇洗脱至完全，回收乙醇至尽，浓缩干燥粉碎后备用。

(3)取红花饮片，加水20-60倍，用酸调PH值为2.0-5.0，蒸煮1-3小时，用此条件提取1-4次，合并滤液，浓缩至药材重量的3-4倍，上大孔吸附树脂柱，用水洗至无色，洗脱液减压浓缩干燥粉碎备用；

4.根据权利要求2，所述制剂制备包括以下步骤：

(1)取提取纯化后的三七粉末1-20份、川芎粉末1-20份、红花粉末1-10份均匀混合，按照粉针剂型要求制成粉针剂。

(2)取提取纯化后的三七粉末1-20份、川芎粉末1-20份、红花粉末1-10份与适当的辅料均匀的混合，按照软胶囊剂型要求制成软胶囊剂。

(3)取提取纯化后的三七粉末1-20份、川芎粉末1-20份、红花粉末1-10份与适当的辅料均匀的混合，按照滴丸剂型要求制成滴丸剂。

5.根据权利要求3所述的超声提取罐提取，时间为20-50分钟，超声功率为100-5400W，搅拌速度为50-1500RPM，控制温度为室温～55℃。

6.根据权利要求3所述的大孔吸附树脂为非极性或弱极性型的大孔吸附树脂。

7.根据权利要求3所述的用于调PH值的酸为盐酸、醋酸、硫酸。