CN114651907A - 一种育肥猪的菌酶协同发酵饲料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本申请涉及育肥猪饲料的技术领域，具体公开了一种育肥猪的菌酶协同发酵饲料及其制备方法。饲料包括以下重量份的制备原料：玉米35‑55份，麸皮4‑8份，预混料2‑4份，洋葱发酵浆20‑30份；所述洋葱发酵浆是以洋葱为发酵原料得到，以洋葱的重量为基准，包括以下原料：洋葱，水1.5‑5.5g/g，微生物菌剂0.05‑0.15mg/g，纤维素酶1‑25.5μg/g，果胶酶0.8‑15.5μg/g，蒜氨酸酶0.5‑3.5μg/g。本申请的饲料具有显著提高育肥猪生长特性并改善其健康状况的优点。
Description
技术领域
本申请涉及育肥猪饲料的技术领域，更具体地说，它涉及一种育肥猪的菌酶协同发酵饲料及其制备方法。
背景技术
育肥猪的脂肪沉积能力强，消化机能旺盛，抵抗和适应外界恶劣环境的能力较强。育肥猪的传统饲养饲料是以豆粕等优质蛋白质饲料为主并配合大量添加抗生素、化学合成药物和重金属等饲料添加剂制备得到的；该传统饲料能够提高饲料品质，以达到抗菌促生长的效果。
但是抗生素、化学合成药物的长期使用会带来明显耐药性，重金属的添加也会给环境带来污染并影响人体健康。因此，目前会采用以发酵饲料替代抗生素、化学合成药物和重金属等添加剂的辅助添加方式。在该方面的研究中，有以发酵花生秧粉作为添加剂以提高育肥猪生长性能、降低腹泻和死亡率；但是该方案中花生秧的处理过程繁琐，将带来一定的原料预处理成本。也有以益生菌小麦发酵饲料直接饲喂育肥猪，以提高其免疫性能和生长特性。
上述饲料对育肥猪的生长促进有一定的局限性，另外，育肥猪的免疫力的提高也有限，以上述饲料喂养育肥猪时，育肥猪仍然出现较高比例的腹泻和死亡。
发明内容
为了进一步提高饲料对育肥猪的生长特性和健康的提高、促进作用，本申请提供一种育肥猪的菌酶协同发酵饲料及其制备方法。
第一方面，本申请提供一种育肥猪的菌酶协同发酵饲料，采用如下的技术方案：一种育肥猪的菌酶协同发酵饲料，包括以下重量份的制备原料：玉米35-55份，麸皮4-8份，预混料2-4份，洋葱发酵浆20-30份；
所述洋葱发酵浆是以洋葱为发酵原料得到，以洋葱的重量为基准，包括以下原料：洋葱，水1.5-5.5g/g，微生物菌剂0.05-0.15mg/g，纤维素酶1-25.5μg/g，果胶酶0.8-15.5μg/g，蒜氨酸酶0.5-3.5μg/g。
通过采用上述技术方案，洋葱内含有的营养成分十分丰富，不仅富含钾、维生素C、叶酸、锌、硒、硫化物(二烯丙基硫化物)，及纤维质等营养素，更有两种特殊的营养物质——槲皮素和***素A具有一定的杀菌效果；此外其内还含有一定的能够生成刺激肠胃的组分：二硫化合物和硫代磺酸脂；其中的二硫化合物和硫代磺酸脂的生成方式为：成熟的洋葱中含有蒜氨酸，当洋葱被切开后，液泡中的蒜氨酸酶释放，将半胱氨酸亚砜转化为硫代亚磺酸盐，即蒜素类化合物；蒜素类化合物通过一系列反应生成二硫化合物和硫代磺酸脂(即大蒜素)，该类物质是洋葱出现刺鼻味道、辛辣味道的主要来源，也是杀菌的主要成分。
因此，将洋葱用于育肥猪饲料时，一方面其杀菌效果能够保证一定肠胃环境健康，但是另一方面，其杀菌物质也在一定程度上影响育肥猪的肠胃健康。因此，本申请在选用的是洋葱发酵浆作为饲料原料，并在洋葱发酵浆的制备原料中添加有蒜氨酸酶，该方案的优势在于：(1)、将洋葱本身细胞组织内的大分子通过发酵变为更容易被育肥猪肠胃吸收利用的小分子物质，便于育肥猪的吸收，从而提高洋葱利用率，保证了较低的料肉比；(2)、该发酵过程，其实也是使得益生菌逐渐适应洋葱环境的过程：通过在原料中加入蒜氨酸酶，从而进一步使得洋葱中的蒜素类化合物能够尽可能完全转化为二硫化合物和硫代磺酸脂，从而生成更多的杀菌物质，而在高浓度杀菌类物质的环境中，其中的微生物菌剂能够逐渐适应杀菌环境，等到将该洋葱发酵浆用于饲料并进入育肥猪后，洋葱发酵浆中的益生菌(即初始加入的微生物菌剂)将能够迅速占据优势生长的地位，从而进一步达到抑制肠胃有害菌的目的。仅仅针对“抑制肠胃有害菌”的效果，一方面得益于洋葱本身的杀菌性，另一方面得益于微生物菌剂中的益生菌的优势竞争，使得益生菌和有害菌进行养分、空间等竞争中占据有利地位，进而抑制有害菌的生长繁殖；基于上述两方面的协同效果，最终表现为在饲喂该饲料后，育肥猪的腹泻率和死亡率显著降低，此外其生长性(日增重)得以提高。在进行洋葱发酵时，其采用的菌酶结合的发酵技术，其中的蒜氨酸酶(也是蒜碱酶)能够在洋葱细胞破壁后使得洋葱生成大量的杀菌物质；这里注意蒜氨酸酶的用量应该适宜，蒜氨酸酶的用量过多，将导致洋葱中具有杀菌效果的组分过多，一方面会抑制微生物菌剂中的益生菌的生长繁殖，从而影响发酵效果，还会在育肥猪食用该饲料后，对育肥猪肠胃内本身含有的益生菌具有抑制作用。蒜氨酸酶的用量过少时，洋葱中具有杀菌效果的组分过少，将该饲料用于育肥猪后，微生物菌剂中的益生菌难以快速占据优势菌种的地位，从而难以表现出对育肥猪的肠胃环境调节的作用，因此该饲料对于育肥猪的生长性健康和状况的改善效果显著降低。因此，这里需要通过控制蒜氨酸酶的用量并结合洋葱的发酵程度、微生物菌剂中的益生菌的生长繁殖效果同时影响最终饲料的饲喂效果，最终达到降低育肥猪腹泻率和死亡率、提高日增重的目的。
可选的，以洋葱的重量为基准，洋葱发酵粉的制备原料还包括香蕉粉0.12-0.27g/g和槐树花提取物0.13-0.34g/g。
通过采用上述技术方案，由于洋葱本身的杀菌性，因此为了保证微生物能够大量存活，筛选得到杨树花粉和洋葱相互协作，促进微生物的存活，从而最终提高育肥猪的免疫力，降低其腹泻率和死亡率，提高生长性能。
其中香蕉中含有蛋白质、脂肪、多糖(低聚糖)、粗纤维、钙、磷、铁、胡萝卜素、硫胺素、烟酸、维生素C、维生素E及丰富的微量元素钾；香蕉能够促进微生物增殖，可能是基于其内含有的较多的多糖，尤其是低聚糖。槐树花提取物中含有黄酮、黄酮醇衍生物、有机酸、糖类和生物碱等。洋葱中本身又含有较多的低聚糖等物质。
在该方案中，香蕉粉和洋葱中的多糖能够具有促进微生物增殖的作用，而香蕉粉和槐树花提取物相互作用后能够使得制备得到的饲料具有降低育肥猪死亡率和腹泻率的效果。其可能原因在于：槐树花提取物和香蕉粉能够改善发酵过程中的发酵环境，从而促使微生物菌剂中的益生菌能够更好适应发酵环境，因此在将该饲料饲喂育肥猪后，微生物菌剂中的益生菌能够更快占据优势菌种地位，从而改善育肥猪的肠胃微生物环境，进而降低育肥猪死亡率和腹泻率。
可选的，以洋葱的重量为基准，洋葱发酵粉的制备原料还包括碱性成纤细胞生长因子0.01-0.06μg/g和血小板衍生生长因子0.009-0.015μg/g。
由于洋葱本身的杀菌性，因此为了保证微生物能够大量存活，筛选得到这两种物质协同作用，促进微生物菌剂的存活，从而最终促进育肥猪的免疫力，降低其腹泻率和死亡率，提高生长性能。此外在该方案中，碱性成纤细胞生长因子的用量建议为0.01-0.06μg/g洋葱，血小板衍生生长因子的用量为0.009-0.015μg/g洋葱：碱性成纤细胞生长因子用量过多将对育肥猪的腹泻率和死亡率带来负面影响；其可能原因是，由于碱性成纤细胞生长因子和血小板衍生生长因子的用量过多，将对微生物菌剂的生长繁殖带来负面调控结果，因此将该饲料用于育肥猪时，其中的微生物菌剂中的益生菌难以在育肥猪的肠道中占据优势菌种的地位，导致其有害菌生长繁殖旺盛，从而最终引起育肥猪腹泻率和死亡率提高。
可选的，所述洋葱发酵浆由包括以下步骤的方法制备得到：
1)、将洋葱破碎后加入水、纤维素酶和果胶酶，酶解处理后备用；
2)、将酶解处理后的洋葱和蒜氨酸酶、微生物菌剂混合，密封发酵后得到发酵液；
3)、将发酵液固液分离后留固相，得到洋葱发酵浆。
通过采用上述技术方案，首先洋葱破碎的步骤有利于洋葱细胞的液泡中的蒜氨酸酶的释放，从而可以通过酶反应得到更多的杀菌物质：二硫化合物和硫代磺酸酯。酶解的过程一方面有利于洋葱细胞壁破壁，释放白内物质，有利于发酵的进行；另一方面也有利于细胞液泡的暴露，从而有利于蒜氨酸酶的释放，进而通过酶反应得到更多的二硫化合物和硫代磺酸酯。而发酵结束后的固液分离过程，一方面能够将发酵废渣去除；另外还可以随着液相的部分去除，将部分具有杀菌和刺激味道的二硫化合物和硫代磺酸酯等物质去除：该类物质的去除能够减少进入育肥猪肠胃内的刺激性物质，从而减弱洋葱发酵浆对育肥猪肠胃内原始益生菌的负面影响。而此时，已经能够适应洋葱所带来的杀菌环境的微生物菌剂中的益生菌在进入育肥猪肠胃后，能够占据优势菌种的地位，从而抑制肠胃内有害菌的生长，进而实现降低育肥猪腹泻率和死亡率的效果，并提高育肥猪的日增重。
可选的，步骤1)中，酶解温度为35-45℃；步骤1)中，酶解时间为15-25min。
可选的，步骤2)中，发酵前还包括加入香蕉粉和槐树花提取物的步骤。
可选的，步骤2)中，以洋葱的重量为基准，发酵前还包括加入0.01-0.06μg/g碱性成纤细胞生长因子和0.009-0.015μg/g血小板衍生生长因子的步骤。
可选的，步骤2)中发酵时间为12-24h。
在上述的制备方法中，发酵温度为25-37℃。
可选的，所述洋葱发酵浆的含水率为30wt％-50wt％。
本申请固液分离可以选用离心分离、板框过滤、微滤和纳滤中的任意一种或者多种的组合方式实现。
可选的，步骤3)中，将发酵液固液分离留固相后，还包括加热浓缩的步骤，随后得到洋葱发酵浆。
通过采用上述技术方案，加热浓缩的步骤一方面是进一步去除发酵液中的水分；与此同时，由于大蒜素能够通过加热去除，因此该操作还能够将洋葱发酵浆中部分的大蒜素去除；但是在去除大蒜素时，洋葱发酵浆中还存在生物碱、多糖以及槲皮素和***素A等物质，这类杀菌抑菌的物质将随着饲料进入育肥猪的肠胃内，发挥其抑制有害菌生长繁殖的作用。而通过该操作制备得到的洋葱发酵浆，将该洋葱发酵浆用于饲料制备，得到的饲料能够进一步提高育肥猪的免疫力，从而表现为育肥猪的腹泻率和死亡率降低。
可选的，加热浓缩的温度为55-95℃；得到的洋葱发酵浆中含水率为15wt％-25wt％。
通过采用上述技术方案，加热浓缩的步骤一方面能够降低洋葱发酵浆的含水量，另一方面还可以将步骤1)和2)中产生的二硫化合物和硫代磺酸酯通过加热挥发出去，从而降低洋葱发酵浆的刺激性气味，提高育肥猪对饲料的采食兴趣。而在该过程中，洋葱中的槲皮素和***素A等其他具有杀菌或抑菌作用的组分还依然存在于饲料中，该类物质能够通过育肥猪的进食过程进入育肥猪的肠胃中，发挥其抑制肠胃有害菌生长繁殖的效果。
可选的，制备所述饲料的原料还包括香蕉粉5-15份和芦荟浆5-15份。
通过采用上述技术方案，这两种物质除了具有降低育肥猪死亡率和腹泻率的效果外，还能通过芦荟浆掩盖洋葱的不良气味，保证育肥猪食欲的同时进一步减弱洋葱发酵浆的肠胃刺激性。
可选的，所述微生物菌剂是酵母菌、枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌以1：(0.5-1.5)：(1-2)的重量比混合后得到的混合物。
可选的，乳酸杆菌选自保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌、类植物乳杆菌、戊糖乳杆菌、短乳杆菌和发酵乳杆菌中的一种或多种。
可选的，酵母菌选自酿酒酵母菌、啤酒酵母菌和葡萄酒酵母菌中的一种或多种。
第二方面，本申请提供一种上述育肥猪的菌酶协同发酵饲料的制备方法，采用如下的技术方案：
一种上述育肥猪的菌酶协同发酵饲料的制备方法，包括以下步骤：将玉米、麸皮、预混料和洋葱发酵浆混合后，干燥得到。
综上所述，本申请具有以下有益效果：
1、本申请通过在传统育肥猪饲料中添加洋葱发酵浆，该洋葱发酵浆是经特殊的菌酶体系发酵得到的，其具有显著提高育肥猪生长特性并改善其健康状况的效果。
2、本申请在制备洋葱发酵浆时，以特殊用量的碱性成纤细胞生长因子和血小板衍生生长因子共同添加，以显著提高育肥猪饲料的促进生长并改善健康状况的效果。
3、本申请在制备洋葱发酵浆时，还添加有香蕉粉和槐树花提取物，以进一步提高育肥猪饲料的促进生长并改善健康状况的效果。
4、本申请制备饲料的原料中通过添加香蕉粉和芦荟浆，以进一步提高育肥猪饲料的促进生长并改善健康状况的效果，并改善饲料的气味，增加育肥猪的进食兴趣。
具体实施方式
以下结合实施例对本申请作进一步详细说明。
本申请中的涉及的原料，若未特殊说明，均是普通市售获得。其中，酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、葡萄酒酵母菌、保加利亚乳杆菌、葡萄酒酵母菌以及戊糖乳杆菌均是普通市售获得即可。碱性成纤细胞生长因子购自北京同立海源生物的重组碱性成纤细胞生长因子，货号GMP-TL401；血小板衍生生长因子是品牌为HZbscience的血小板衍生生长因子A(PDGFA)重组蛋白，货号为ZY528Mu021；***是购自上海榕柏生物有限公司(NC-BIO)的货号为L4I00701的重组***；表皮细胞生长因子为重组人表皮细胞生长因子，市售获得，其CAS号为62253-63-8。香蕉粉是自香蕉中提取得到的提取物；该粉状物是过100目筛网筛选后得到的筛余物。槐树花提取物是以槐树花为原料进行花内物质的提取，一般采用水提法进行提取，其多数为棕黄色，粉末状；其粒径为80-120目。预混料可以通过配制得到，也可以通过普通市售获得。
洋葱发酵浆的制备例
洋葱发酵浆制备例1
洋葱发酵浆是以洋葱为主要原料并经发酵得到。以洋葱的重量为基准，洋葱发酵浆的制备原料为：洋葱为300kg，水450kg(即1.5g/g洋葱)，微生物菌剂15g(即0.05mg/g洋葱)，纤维素酶300mg(即1μg/g洋葱)，果胶酶240mg(即0.8μg/g洋葱)，蒜氨酸酶150mg(即0.5μg/g洋葱)；其中的微生物菌剂是将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌以1:0.5:1的重量比混合后得到的混合物。上述菌株均购自北纳生物，分别是编号为BNCC340897的BY4741酿酒酵母菌，编号为BNCC109047的枯草芽孢杆菌，编号为BNCC336469的植物乳杆菌。
洋葱发酵浆的制备方法为：
1)、将洋葱破碎后加入水、纤维素酶和果胶酶，在35℃的温度下酶解处理25min后备用；
2)、将酶解处理后的洋葱和蒜氨酸酶、微生物菌剂混合，密封条件下在25℃条件下发酵24h后得到发酵液；
3)、将发酵液以离心分离后留固相，得到洋葱发酵浆，洋葱发酵浆的含水量为30wt％。
洋葱发酵浆制备例2
洋葱发酵浆是以洋葱为主要原料并经发酵得到。以洋葱的重量为基准，洋葱发酵浆的制备原料为：洋葱为300kg，水1650kg(即5.5g/g洋葱)，微生物菌剂45g(即0.15mg/g洋葱)，纤维素酶7.65g(即25.5μg/g洋葱)，果胶酶4.65g(即15.5μg/g洋葱)，蒜氨酸酶1.05g(即3.5μg/g洋葱)；其中的微生物菌剂是将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、保加利亚乳杆菌以1:1.5:2的重量比混合后得到的混合物。上述菌株均购自北纳生物，酿酒酵母和枯草芽孢杆菌同制备例1，保加利亚乳杆菌是编号为BNCC187941的德氏乳杆菌保加利亚亚种。
洋葱发酵浆的制备方法为：
1)、将洋葱破碎后加入水、纤维素酶和果胶酶，在45℃的温度下酶解处理15min后备用；
2)、将酶解处理后的洋葱和蒜氨酸酶、微生物菌剂混合，密封条件下在37℃条件下发酵12h后得到发酵液；
3)、将发酵液以板框过滤后留固相，得到洋葱发酵浆，洋葱发酵浆的含水量为50wt％。
洋葱发酵浆制备例3
洋葱发酵浆是以洋葱为主要原料并经发酵得到。以洋葱的重量为基准，洋葱发酵浆的制备原料为：洋葱为300kg，水1050kg(即3.5g/g洋葱)，微生物菌剂30g(即0.1mg/g洋葱)，纤维素酶3.6g(即12μg/g洋葱)，果胶酶2.55g(即8.5μg/g洋葱)，蒜氨酸酶0.75g(即2.5μg/g洋葱)；其中的微生物菌剂是将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、戊糖乳杆菌以1:1:1.5的重量比混合后得到的混合物。上述菌株均购自北纳生物，酿酒酵母和枯草芽孢杆菌同制备例1，戊糖乳杆菌的编号为BNCC337069。
洋葱发酵浆的制备方法为：
1)、将洋葱破碎后加入水、纤维素酶和果胶酶，在40℃的温度下酶解处理23min后备用；
2)、将酶解处理后的洋葱和蒜氨酸酶、微生物菌剂混合，密封条件下在35℃条件下发酵18h后得到发酵液；
3)、将发酵液以离心分离后留固相，得到洋葱发酵浆，洋葱发酵浆的含水量为35wt％。
洋葱发酵浆制备例4
本制备例和洋葱发酵浆制备例3的区别在于，制备洋葱发酵浆时，步骤3)中，将发酵液固液分离留固相后，还包括加热浓缩的步骤，随后得到洋葱发酵浆。
即步骤3)的具体操作为：将发酵液以离心分离后留固相，在65℃的温度下加热浓缩，得到洋葱发酵浆，洋葱发酵浆的含水量为20wt％。
其中，洋葱发酵浆的制备原料同制备例3，其余制备步骤同制备例3。
洋葱发酵浆制备例5
本制备例和洋葱发酵浆制备例4的区别在于，制备洋葱发酵浆的原料中还包括重组碱性成纤细胞生长因子9μg(即0.03μg/g洋葱)和血小板衍生生长因子A(PDGFA)重组蛋白3.6μg(即0.012μg/g洋葱)，其他制备原料同制备例4。
洋葱发酵浆的制备方法为：
1)、同制备例4；
2)、将酶解处理后的洋葱和蒜氨酸酶、微生物菌剂混合，随后加入上述用量的重组碱性成纤细胞生长因子和血小板衍生生长因子A(PDGFA)重组蛋白，然后在密封环境、35℃条件下发酵18h后得到发酵液；
3)、同制备例4。
洋葱发酵浆制备例6
本制备例和洋葱发酵浆制备例4的区别在于，制备洋葱发酵浆的原料中还包括重组碱性成纤细胞生长因子12.6μg(即0.042μg/g洋葱)，其他制备原料同制备例4。
洋葱发酵浆的制备方法为：
1)、同制备例4；
2)、将酶解处理后的洋葱和蒜氨酸酶、微生物菌剂混合，随后加入上述用量的重组碱性成纤细胞生长因子，然后在密封环境、35℃条件下发酵18h后得到发酵液；
3)、同制备例4。
洋葱发酵浆制备例7
本制备例和洋葱发酵浆制备例4的区别在于，制备洋葱发酵浆的原料中还包括血小板衍生生长因子A(PDGFA)重组蛋白12.6μg(即0.042μg/g洋葱)，其他制备原料同制备例4。
洋葱发酵浆的制备方法为：
1)、同制备例4；
2)、将酶解处理后的洋葱和蒜氨酸酶、微生物菌剂混合，随后加入上述用量的血小板衍生生长因子A(PDGFA)重组蛋白，然后在密封环境、35℃条件下发酵18h后得到发酵液；
3)、同制备例4。
洋葱发酵浆制备例8
本制备例和洋葱发酵浆制备例6的区别在于，制备洋葱发酵浆的原料中将重组碱性成纤细胞生长因子替换为12.6μg(即0.042μg/g洋葱)的重组***，其他制备原料同制备例6。
洋葱发酵浆的制备方法的步骤2)中将重组碱性成纤细胞生长因子替换为重组***，其他步骤同制备例6。
洋葱发酵浆制备例9
本制备例和洋葱发酵浆制备例6的区别在于，制备洋葱发酵浆的原料中将重组碱性成纤细胞生长因子替换为12.6μg(即0.042μg/g洋葱)的重组人表皮细胞生长因子，其他制备原料同制备例6。
洋葱发酵浆的制备方法的步骤2)中将重组碱性成纤细胞生长因子替换为重组人表皮细胞生长因子，其他步骤同制备例6。
洋葱发酵浆制备例10
本制备例和洋葱发酵浆制备例5的区别在于，制备洋葱发酵浆的原料中还包括香蕉粉60g(即0.2g/g洋葱)和槐树花提取物75g(即0.25g/g洋葱)，其他制备原料同制备例5。槐树花提取物购自西安瑞尔丽生物工程有限公司，货号REL-829655689。香蕉粉购自西安金萃坊植物技术开发有限公司，过100目筛网筛选后得到的筛余物。
洋葱发酵浆的制备方法为：
1)、同制备例5；
2)、将酶解处理后的洋葱和蒜氨酸酶、微生物菌剂混合，随后加入上述用量的香蕉粉、槐树花提取物、碱性成纤细胞生长因子和血小板衍生生长因子，然后在密封环境、35℃条件下发酵18h后得到发酵液；
3)、同制备例5。
洋葱发酵浆制备例11
本制备例和洋葱发酵浆制备例5的区别在于，制备洋葱发酵浆的原料中还包括香蕉粉135g，其他制备原料同制备例5。香蕉粉来源同洋葱发酵浆制备例10。
洋葱发酵浆的制备方法为：
1)、同制备例5；
2)、将酶解处理后的洋葱和蒜氨酸酶、微生物菌剂混合，随后加入上述用量的香蕉粉、碱性成纤细胞生长因子和血小板衍生生长因子，然后在密封环境、35℃条件下发酵18h后得到发酵液；
3)、同制备例5。
洋葱发酵浆制备例12
本制备例和洋葱发酵浆制备例5的区别在于，制备洋葱发酵浆的原料中还包括槐树花提取物135g，其他制备原料同制备例5。槐树花提取物的来源同洋葱制备例10。
洋葱发酵浆的制备方法为：
1)、同制备例5；
2)、将酶解处理后的洋葱和蒜氨酸酶、微生物菌剂混合，随后加入上述用量的香蕉粉、槐树花提取物、碱性成纤细胞生长因子和血小板衍生生长因子，然后在密封环境、35℃条件下发酵18h后得到发酵液；
3)、同制备例5。
洋葱发酵浆制备例13
本制备例和洋葱发酵浆制备例10的区别在于，制备洋葱发酵浆的原料中没有添加蒜氨酸酶，其他制备原料同制备例10。
洋葱发酵浆的制备方法为：
1)、同制备例10；
2)、将酶解处理后的洋葱和微生物菌剂混合，随后加入上述用量的香蕉粉、槐树花提取物、碱性成纤细胞生长因子和血小板衍生生长因子，然后在密封环境、35℃条件下发酵18h后得到发酵液；
3)、同制备例10。
以上制备例仅仅提供的是洋葱发酵浆的一种可实施的制备方式，在将洋葱发酵浆用于饲料制备时，若制备得到的洋葱发酵浆的量难以满足以下实施例的饲料制备时，可以采用同样的方法多次制备，以满足饲料的制备用量。
实施例
实施例1
一种育肥猪的菌酶协同发酵饲料，其制备原料为：玉米35kg，麸皮4kg，预混料2kg，洋葱发酵浆20kg。其中，预混料是通过市售获得，可以购自河南碧云天饲料有限公司；洋葱发酵浆由洋葱发酵浆制备例1制备得到。
上述饲料的制备方法为：将上述比例的玉米、麸皮、预混料和洋葱发酵浆混合后，烘干得到。
实施例2
一种育肥猪的菌酶协同发酵饲料，其制备原料为：玉米55kg，麸皮8kg，预混料4kg，洋葱发酵浆30kg。其中，预混料来源同实施例1；洋葱发酵浆由洋葱发酵浆制备例2制备得到。
上述饲料的制备方法同实施例1。
实施例3
一种育肥猪的菌酶协同发酵饲料，其制备原料为：玉米45kg，麸皮6kg，预混料3kg，洋葱发酵浆25kg。其中，预混料来源同实施例1；洋葱发酵浆由洋葱发酵浆制备例3制备得到。
上述饲料的制备方法同实施例1。
实施例4-12
实施例4-12和实施例3的区别在于，选用的洋葱发酵浆由不同的洋葱发酵浆制备例制备得到，具体见表1，其他同实施例3。
表1不同实施例中洋葱发酵浆的选择
实施例13
本实施例和实施例10的区别在于，制备饲料的原料还包括10kg的香蕉粉和12kg的芦荟浆，其他同实施例10。
其中，香蕉粉的来源同洋葱发酵浆制备例10，芦荟浆是选用新鲜芦荟经粉碎至浆状后获得。
上述饲料的制备方法为：将上述比例的玉米、麸皮、预混料、洋葱发酵浆、香蕉粉和芦荟浆混合后得到。
实施例14
本实施例和实施例10的区别在于，制备饲料的原料还包括22kg的香蕉粉，其他同实施例10。
上述饲料的制备方法为：将上述比例的玉米、麸皮、预混料、洋葱发酵浆和香蕉粉混合后得到。
实施例15
本实施例和实施例5的区别在于，制备饲料的原料还包括22kg的芦荟浆，其他同实施例5。
上述饲料的制备方法为：将上述比例的玉米、麸皮、预混料、洋葱发酵浆和芦荟浆混合后得到。
对比例
对比例1
本对比例和实施例13的区别在于，制备饲料时选用的洋葱发酵浆由洋葱发酵浆制备例13制备得到，其他同实施例13。
对比例2
本对比例和实施例13的区别在于，制备饲料时，以等重量的洋葱浆替换洋葱发酵浆，其他同实施例13。其中，洋葱浆的制备方法为：将新鲜洋葱破碎后进一步粉碎为浆状即可。
对比例3
本对比例和实施例13的区别在于，制备饲料时，以等重量的洋葱浆替换洋葱发酵浆，其他原料及其用量同实施例13。
洋葱浆的制备原料为：洋葱300kg，水450kg(即1.5g/g洋葱)，纤维素酶300mg(即1μg/g洋葱)，果胶酶240mg(即0.8μg/g洋葱)。
洋葱浆的制备方法为：
1)、将洋葱破碎后加入水、纤维素酶和果胶酶，在45℃的温度下酶解处理15min后备用；
2)、将酶解液以离心分离后留固相，在65℃的温度下加热浓缩，得到洋葱发酵浆，洋葱发酵浆的含水量为20wt％。
对比例4
一种育肥猪的饲料，和实施例13的区别在于，制备原料中不含有洋葱发酵浆，制备原料具体为：玉米35kg，麸皮4kg，预混料2kg。
上述饲料的制备方法为：将上述比例的玉米、麸皮和预混料混合后即得。
将实施例1-15和对比例1-4制备得到的饲料，进行育肥猪的饲喂实验。选择475头日龄、健康状况和性别比例相同的体重在28kg左右的育肥猪，平均分为19组(试验组18组，对照组1组)，每组5头，每组5个重复，分别饲喂不同的饲料。其中，试验组1-15组分别饲喂的是实施例1-15制备得到的饲料，试验组16-18分别饲喂的是对比例1-3制备得到的饲料，对照组饲喂的是对比例4制备得到的饲料，连续饲喂1个月(30天)，观察和记录试验组和对照组育肥猪的生长性能和健康状况，具体结果见表2和表3。
表2各试验组和对照组的育肥猪的生长性能
表3各试验组和对照组的育肥猪的健康状况
从表2和表3的数据结果看出，和实施例3的饲料饲喂结果相比，实施例4中在制备洋葱发酵浆时，若是在步骤3)中进行加热步骤，并将制备得到的洋葱发酵浆用于制备饲料，并将该饲料饲喂育肥猪，则育肥猪的平均日增重将有所提高，其料肉比也显著降低。其原因可能在于，通过加热操作能够将一部分大蒜素去除，进而提高育肥猪的采食量，育肥猪的生长状况更佳；此外，大蒜素的减少也能够降低饲料对肠胃中原始益生菌的伤害，降低育肥猪的腹泻率。
将实施例4-7的饲料饲喂育肥猪的结果比较看出，在制备洋葱发酵浆时，其发酵液中同时含有碱性成纤细胞生长因子和血小板衍生生长因子时，得到的饲料才能够显著提高育肥猪的日增重，并显著降低料肉比，此外，育肥猪的腹泻情况也得到显著改善，即提高了育肥猪的免疫能力。在该发酵过程中，通过添加碱性成纤细胞生长因子和血小板衍生生长因子，这两种物质需要共同添加，能够显著提高微生物菌剂中各益生菌的生长代谢以及适应发酵环境的能力；将含有该微生物菌剂的洋葱发酵浆用于饲料饲喂育肥猪后，该洋葱发酵浆中的益生菌能够在育肥猪肠胃内占据优势菌种的地位，从而在和育肥猪肠胃内原始有害菌的竞争中优势生长，达到抑制有害菌生长繁殖的目的，从而改善肠道的微生物环境，提高育肥猪的免疫力，进而降低育肥猪的腹泻率，并提高其生长特性。
而实施例5-6、8-9的数据结果表明，单独选用一种生长因子(如碱性成纤细胞生长因子或***或人表皮细胞生长因子)，都不能实现显著提高日增重并降低料肉比的目的。
实施例5、实施例10-12说明，需要将香蕉粉和槐树花提取物共同添加至发酵体系中，才能具有有效提高育肥猪日增重并降低料肉比的效果。在该过程中，香蕉粉和槐树花提取物中的有效成分(香蕉中的特殊多糖，尤其是低聚糖；槐树花提取物中的黄酮醇衍生物、有机酸、糖类和生物碱等)相互作用，对微生物菌剂中的益生菌有促进其生长代谢的效果，提高其生长繁殖能力，进而将该饲料用于育肥猪后，提高育肥猪的生长特性。
此外，不仅在洋葱发酵中能够通过香蕉粉的加入提高微生物菌剂的生长繁殖特性；在实施例13-15中，直接在饲料中额外添加香蕉粉，在微生物菌剂进入育肥猪肠胃后，也能够进一步提高微生物菌剂中益生菌的生长繁殖，进而保证其优势菌种的地位，保证了育肥猪的高日增重、低料肉比和低腹泻率；但是在该添加方案中，香蕉粉要和芦荟浆配合添加。
在制备饲料时需要考虑的是，其洋葱发酵浆的制备中，需要以蒜氨酸酶的添加辅助该发酵过程(比较实施例13和对比例1)。其可能原因在于，通过蒜氨酸酶的添加能够显著提高发酵体系内大蒜素的含量，该具有杀菌效果的组分的增加，能够在该发酵过程中使得能够适应该环境的微生物大量生长繁殖；该过程即是筛选优势生长微生物的过程，也是微生物逐渐适应该杀菌环境的过程。而通过这样的方式得到的益生菌其生长繁殖能力更加优异。在将该饲料用于育肥猪后，饲料中的其他杀菌抑菌组分都会随着饲料进入育肥猪的肠胃，从而有效抑制肠胃中有害微生物的生长；同时，微生物菌剂中的益生菌已经适应该杀菌环境，因此可以在育肥猪肠胃中迅速占据优势菌种的地位，从而进一步抑制有害菌的生长繁殖。
此外，以对比例2中未经发酵的洋葱浆或者以对比例3中仅仅酶解但是并未发酵的洋葱浆制备饲料时，其对育肥猪的生长性、健康状况的改善效果也是不佳的。
本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。
Claims (9)
1.一种育肥猪的菌酶协同发酵饲料，其特征在于，包括以下重量份的制备原料：玉米35-55份，麸皮4-8份，预混料2-4份，洋葱发酵浆20-30份；
所述洋葱发酵浆是以洋葱为发酵原料得到，以洋葱的重量为基准，包括以下原料：洋葱，水1.5-5.5g/g，微生物菌剂0.05-0.15mg/g，纤维素酶1-25.5μg/g，果胶酶0.8-15.5μg/g，蒜氨酸酶0.5-3.5μg/g。
2.根据权利要求1所述的饲料，其特征在于，以洋葱的重量为基准，洋葱发酵粉的制备原料还包括香蕉粉0.12-0.27g/g和槐树花提取物0.13-0.34g/g。
3.根据权利要求1所述的饲料，其特征在于，以洋葱的重量为基准，洋葱发酵粉的制备原料还包括碱性成纤细胞生长因子0.01-0.06μg/g和血小板衍生生长因子0.009-0.015μg/g。
4.根据权利要求1所述的饲料，其特征在于，所述洋葱发酵浆由包括以下步骤的方法制备得到：
1）、将洋葱破碎后加入水、纤维素酶和果胶酶，酶解处理后备用；
2）、将酶解处理后的洋葱和蒜酶、微生物菌剂混合，密封发酵后得到发酵液；
3）、将发酵液固液分离后留固相，得到洋葱发酵浆。
5.根据权利要求4所述的饲料，其特征在于，步骤2）中，以洋葱的重量为基准，发酵前还包括加入0.01-0.06μg/g碱性成纤细胞生长因子和0.009-0.015μg/g血小板衍生生长因子的步骤。
6.根据权利要求1所述的饲料，其特征在于，步骤3）中，将发酵液固液分离留固相后，还包括加热浓缩的步骤，随后得到洋葱发酵浆。
7.根据权利要求1所述的饲料，其特征在于，制备所述饲料的原料还包括香蕉粉5-15份和芦荟浆5-15份。
8.根据权利要求1所述的饲料，其特征在于，所述微生物菌剂是酵母菌、枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌以1：（0.5-1.5）：（1-2）的重量比混合后得到的混合物。
9.一种权利要求1-6、8任意一项所述育肥猪的菌酶协同发酵饲料的制备方法，包括以下步骤：将玉米、麸皮、预混料和洋葱发酵浆混合后，干燥得到。
Priority Applications (1)
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