CN111551712A - 一种新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条、试剂盒及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条、试剂盒及其制备方法，新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条，包括基础板，基础板上沿长度方向设有依次相接的样品垫、金胶垫、硝酸纤维素膜层和吸水纸层，从样品垫到吸水纸层的方向上，硝酸纤维素膜层上依次设有两条检测线和一条质控线，两条检测线分别为包被鼠抗人IgM抗体的检测线和包被鼠抗人IgG抗体的检测线，一条质控线为包被兔抗鸡IgY抗体的质控线。金标垫上的金标抗体由分别被胶体金标记好的鸡IgY单克隆抗体和新型冠状病毒N蛋白组成。上述试纸条可以直接应用于新型冠状病毒的检测，实行对人体或者哺乳动物血清、血浆或全血中新型冠状病毒IgM和IgG抗体的体外定性检测。
Description
技术领域
本发明涉及一种新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条、试剂盒及其制备方法，属于医疗检测技术领域。
背景技术
2019新型冠状病毒，也被称为2019-nCoV，是刚刚被世界卫生组织命名的新型病毒，属于目前已知的可以感染人类的第7个冠状病毒。根据中科院的最新研究文章“Evolution of the novel coronavirus from the ongoing Wuhan outbreak andmodeling of its spike protein for risk of human transmission”，证实2019-nCoV与2003年“非典”SARS冠状病毒和“中东呼吸综合征”MERS冠状病毒一样，同属于β属冠状病毒。通过基因序列比对，2019-nCoV与SARS-CoV的同源性达85％以上，与MERS-CoV有40％的相似性。
对于新型冠状病毒的检测，《新型冠状病毒(2019-nCoV)感染的肺炎诊疗快速建议指南(标准版)》推荐对于疑似患者进行CT(电子计算机断层扫描)检查，并结合核酸检测进一步确诊。但在之前的临床中发现CT不论是在早期诊断、鉴别诊断、排除诊断，还是最终确诊方面都具有一定的局限性。目前的诊断方法以核酸检测(荧光PCR法)为主，但在临床使用过程中发现，该方法的阳性检测率也不过只有30％-50％，存在着很多已感染的患者多次采用核酸检测都显示阴性的情况。因新型冠状病毒的传染性极大，采用核酸检测的方法检测需要生物安全3级的实验室，对其设备、操作人员的技术及操作流程有着严格的规范及要求。目前的临床数据表明，核酸检测法存在着灵敏度特异性不够、检测结果不稳定等问题。
胶体金免疫层析技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，其技术原理为以微孔滤膜(如硝酸纤维素膜)为固相载体，并利用微孔滤膜的毛细管作用，使添加于膜条一端的液体样品向另一端渗移，犹如层析一般。移动过程中，无关物越过该区域而被分离，然后通过标记物(胶体金)的聚集显色来判定检测结果。胶体金免疫技术具有操作简便、检测快速、稳定性强、特异敏感、便于携带且价格便宜、可进行双重或多重标记、结果判断直观等优点，目前已发展成为一项重要的免疫标记技术，并越来越受到相关研究领域的重视应用。
发明内容
本申请是利用胶体金免疫层析方法的快速、简便、稳定等优点，制备了可同时快速检测IgM/IgG二合一的快检的试纸条及试剂盒，可对新型冠状病毒IgM抗体和IgG抗体同时进行检测，从而达到降低假阴性结果出现的概率，有效提高检测灵敏度的目的，实现对广大群众的早筛普筛。
为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下：
一种新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条，包括基础板，基础板上沿长度方向设有依次相接的样品垫、金胶垫、硝酸纤维素膜层和吸水纸层，从样品垫到吸水纸层的方向上，硝酸纤维素膜层上依次设有两条检测线和一条质控线，两条检测线分别为包被鼠抗人IgM抗体的检测线和包被鼠抗人IgG抗体的检测线，一条质控线为包被兔抗鸡IgY抗体的质控线。
人体在首次感染病毒后，机体的免疫***会对病毒进行免疫防御，产生特异性的抗体。在感染病毒3-7天后会产生IgM抗体，抗体进入细胞后进一步成熟，并产生大量的IgG抗体。因此，用IgM来反应机体是不是处于急性感染状态，可以作为早期诊断的主要指标。与核酸检测方法相比，抗体检测样本为血清或血浆，受样本采样的影响较小，有利于早期诊断和排除可疑病例，同时检测快速、方便、适合大规模筛查。
金标垫上的金标抗体由分别被胶体金标记好的鸡IgY单克隆抗体和新型冠状病毒N蛋白组成。
上述试纸条包括两条检测线：M线(包被鼠抗人IgM抗体的检测线)和G线(包被鼠抗人IgG抗体的检测线)，一条质控线C(包被兔抗鸡IgY抗体的质控线)。其中，M线固定有单克隆抗人IgM抗体，可用于检测新型冠状病毒IgM抗体；G线固定有单克隆抗人IgG抗体，可用于检测新型冠状病毒IgG抗体；C线固定有质控抗体，可用于作为质控。将样品滴加到样品垫上，因微孔滤膜的毛细管作用，样本会沿着检测卡向前移动。若样本中含有IgM抗体，该抗体会与胶体金标记的新型冠状病毒抗原结合，形成的免疫复合物会被膜上固定的抗人IgM抗体捕获，进而M线显色，表明新型冠状病毒IgM抗体阳性；若样本中含有IgG抗体，该抗体会与胶体金标记的新型冠状病毒抗原结合，形成的免疫复合物会被膜上固定的抗人IgG抗体捕获，进而G线显色，表明新型冠状病毒IgG抗体阳性。若C线未显色，说明当次检测无效，需重新采取检测卡进行检测。检测线上的荧光强度反应了样本中被捕获的新型冠状病毒含量，经过时间分辨荧光免疫分析仪的检测计算，可达到定性或相对定量的要求。
为了兼顾lgM抗体和lgG抗体的检测准确性，被胶体金标记的鸡IgY单克隆抗体和被胶体金标记的新型冠状病毒N蛋白的质量比为1:(1±0.1)。
为了兼顾检测的准确性和检测效率，优选，样品垫的长度为10～12mm，金胶垫的长度为9～11mm，硝酸纤维素膜层的长度为24～26mm，吸水纸层的长度为14～16mm。
为了兼顾检测的准确性和检测效率，优选，检测线与金胶垫之间间隔为4～20mm，两条检测线之间的间隔为1～6mm，质控线与其相邻的检测之间的间隔为1～6mm。
上述新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条的制备方法，包括如下步骤：
(1)制备胶体金溶液；
(2)制备胶体金标记鸡IgY单克隆抗体；
(3)制备胶体金标记新型冠状病毒N蛋白；
(4)层析膜硝酸纤维素膜层的处理：
检测IgM抗体捕获区：将鼠抗人IgM抗体以1.0±0.02mg/ml的浓度进行划线，划量为0.6±0.2μl/cm，划完后置于18-25℃干燥12±1小时，得包被鼠抗人IgM抗体的检测线；
检测IgG抗体捕获区：将鼠抗人IgG抗体以1.0±0.02mg/ml的浓度进行划线，划量为0.6±0.2μl/cm，划完后置于18-25℃干燥12±1小时，得被鼠抗人IgG抗体的检测线；
质控区C：将兔抗鸡IgY抗体按1.0±0.02mg/ml的浓度进行划线，划量为0.6±0.2μl/cm，划完后置于18-25℃干燥12小时，得包被兔抗鸡IgY抗体的质控线；
(5)喷金：把标记好的鸡IgY单克隆抗体和新型冠状病毒N蛋白按照1:1的比例进行混合，按照喷量为3±0.5ul/cm进行金标抗体的喷球，喷好后置于18-25℃干燥10-12小时，得金胶垫；
(6)将样品垫、金胶垫、硝酸纤维素膜层和吸水纸层按顺序贴在塑料垫上，用切割机将其切成粗细均匀的窄条，最后用试纸条专用外壳组装，得新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条。
上述步骤(1)中，胶体金溶液的制备为：将质量浓度为0.03～0.04％的HAuCl4·3H2O溶液，加热至沸，并保持沸腾25-30分钟，然后加入质量浓度为2％柠檬酸三钠溶液混合煮沸，直到颜色变为橙红，室温冷却，即得胶体金溶液，其中，柠檬酸三钠溶液的质量用量为HAuCl4·3H2O溶液的2.5～3.0％。柠檬酸三钠的加入量与胶体金粒径的大小成反比。
上述步骤(2)中，胶体金标记鸡IgY单克隆抗体的制备为：用碳酸钾溶液将胶体金溶液的pH调节至8.0，然后把鸡IgY单克隆抗体加入胶体金溶液中，鸡IgY单克隆抗体与胶体金溶液的质量比为1：(10±1)，充分混匀，置于25±2℃水浴反应30±2分钟后，再加入相对胶体金溶液的质量用量为5±0.2％的BSA(牛血清白蛋白)，封闭30±2分钟后，离心取沉淀，用BSA恢复其终浓度为1±0.1％，4±0.2℃保存备用。
上述步骤(3)中，胶体金标记新型冠状病毒N蛋白的制备为：用碳酸钾溶液将胶体金溶液的pH调节至7.0，然后把新型冠状病毒N蛋白按加入胶体金溶液中，新型冠状病毒N蛋白与胶体金溶液的质量比为1：(10±1)，胶体金溶液中，充分混匀，置于25±2℃水浴反应30±2分钟后，再加入相对胶体金溶液的质量用量为5±0.2％的BSA(牛血清白蛋白)，封闭30±2分钟后，离心取沉淀，用BSA恢复其终浓度为1±0.1％，4±0.2℃保存备用。
一种新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试剂盒，包括盒体，盒体内设有铝箔袋，铝箔袋内装设有上述新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条、稀释液保存管、滴管、干燥剂和说明书。
为了提高试剂盒内的稳定性，盒体内设有隔层，隔层上设有一条以上的***槽，每条***槽内插有一包铝箔袋。
稀释存管中的稀释液包括：磷酸氢二纳(Na2HPO4)5～6.6‰，磷酸二氢钠(NaH2PO4)0.5～0.7‰，氯化钠(NaCl)8～10‰，吐温20 0.5～1.5‰和余量的无离子水。
本发明未提及的技术均参照现有技术。
本发明新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条可以直接应用于新型冠状病毒的检测，实行对人体或者哺乳动物血清、血浆或全血中新型冠状病毒IgM和IgG抗体的体外定性检测，检测结果可视化，真正实现“样本进结果出”的检测模式，可有效防止广大人民群众在大型医院密集检查而导致的交叉感染，帮助政府和***门防控筛查潜在新型冠状病毒感染患者；本发明的试剂盒不仅具有分析法的简单、方便、稳定、快速、可携带等优点，而且还具有较高的检测灵敏度和较强的抗干扰能力；可用于公共区域人群的早筛普筛。
附图说明
图1为本发明新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条结构示意图；
图2为本发明新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条的检测结果图；
图3为实施例中灵敏度测试结果图；
图4为实施例中6个阴性样本检测结果图；
图5为实施例中6个阳性样本检测结果图；
图中，1为基础板，2为样品垫，3为金胶垫，4为硝酸纤维素膜，41为包被鼠抗人IgM抗体的检测线，42为包被鼠抗人IgG抗体的检测线，43为包被兔抗鸡IgY抗体的质控线，5为吸水纸层。
具体实施方式
为了更好地理解本发明，下面结合实施例进一步阐明本发明的内容，但本发明的内容不仅仅局限于下面的实施例。
如图1所示，一种新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条，包括基础板，基础板上沿长度方向设有依次相接的样品垫、金胶垫、硝酸纤维素膜层和吸水纸层，样品垫长为11mm，金胶垫长为10mm，硝酸纤维素膜长为25mm，吸水纸层长为15mm，从样品垫到吸水纸层的方向上，硝酸纤维素膜层上依次设有两条检测线和一条质控线，两条检测线分别为包被鼠抗人IgM抗体的检测线(检测线M)和包被鼠抗人IgG抗体的检测线(检测线G)，一条质控线为包被兔抗鸡IgY抗体的质控线(质控线C)，检测线与金胶垫之间间隔为4mm，两检测线间、及检测线与质控线之间间隔均为1mm；金标垫上的金标抗体由被胶体金标记的鸡IgY单克隆抗体和被胶体金标记的新型冠状病毒N蛋白组成。
如图2所示，将样品滴加到样品垫上，因微孔滤膜的毛细管作用，样本会沿着检测卡向前移动。如a组中显示，若样本中不含IgM抗体和IgG抗体，则检测线M和检测线G均不显色，为阴性；如b组中显示，若样本中含有IgM抗体，该抗体会与胶体金标记的新型冠状病毒抗原结合，形成的免疫复合物会被膜上固定的抗人IgM抗体捕获，进而M线显色，表明新型冠状病毒IgM抗体阳性；如c组中显示，若样本中含有IgG抗体，该抗体会与胶体金标记的新型冠状病毒抗原结合，形成的免疫复合物会被膜上固定的抗人IgG抗体捕获，进而G线显色，表明新型冠状病毒IgG抗体阳性；如d组中显示，若样本中同时含IgM抗体和IgG抗体，则检测线M和检测线G均显色，IgM抗体和IgG抗体均阳性。如e组中显示，若质控线C线未显色，说明当次检测无效，需重新采取检测卡进行检测。检测线上的荧光强度反应了样本中被捕获的新型冠状病毒含量，经过时间分辨荧光免疫分析仪的检测计算，可达到定性或相对定量的要求。
一种新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试剂盒，包括盒体，盒体内设有铝箔袋，铝箔袋内装设有上述新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条、稀释液保存管、滴管、干燥剂和说明书。
上述新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试剂盒的制备方法，包括如下步骤：
(1)胶体金溶液的制备：
取5ml 2％HAuCl4·3H2O溶液，加入到250ml水中，加热至沸，并保持沸腾30分钟，再加入7ml质量浓度为2％的柠檬酸三钠，混合煮沸10分钟左右，直到颜色变为橙红，室温冷却备用。
(2)胶体金标记鸡IgY单克隆抗体的制备：
先用3％的碳酸钾对胶体金溶液进行pH的调节至8.0，然后把鸡IgY单克隆抗体(购买于上海信帆生物科技有限公司，货号为XFC1616)按1：10的比例加入10mL的胶体金溶液中，充分混匀，置于25℃水浴反应30分钟后再加入相对胶体金溶液的质量用量为5％BSA，封闭30分钟后，离心取沉淀，用BSA恢复其终浓度为1％，4℃保存备用。
(3)胶体金标记新型冠状病毒N蛋白的制备
先用3％的碳酸钾对胶体金进行PH的调节至7.0，然后把新型冠状病毒N蛋白(菌株由广东一实验动物研究机构提供，镍柱纯化)按质量比为1：10的比例加入10mL的胶体金溶液中，充分混匀，置于25℃水浴反应30分钟后再加入5％BSA，封闭30分钟后，离心取沉淀，用BSA恢复其终浓度为1％，4℃保存备用。
(4)层析膜的处理
检测IgM抗体捕获区：将鼠抗人IgM抗体(购买于北京百奥莱博科技有限公司，货号为F010204-STJ)以1.0±0.02mg/ml进行划线(划量0.6±0.2μl/cm)，划完后置于18-25℃干燥12小时。
检测IgG抗体捕获区：将鼠抗人IgG单克隆抗体(购买于上海研谨生物科技有限公司，货号为ybsm-0297M)以1.0±0.02mg/ml浓度进行划线(划量0.6±0.2μl/cm)，划完后置于18-25℃干燥12小时。
质控区C：将兔抗鸡lgY抗体按1.0±0.02mg/ml的浓度进行划线(划量0.6±0.2μl/cm)，划完后置于18-25℃干燥12小时。
喷金：把标记好的鸡IgY抗体和新型冠状病毒N蛋白按照1:1的比例进行混合，喷量设置为(3+0.5ul/cm)进行金标抗体的喷球，喷好后置于18-25℃干燥10-12小时。
(5)样品垫的处理
将样品垫用牛血清白蛋白和Triton X10混合的缓冲液中浸泡4小时，取出，干燥后备用，牛血清白蛋白和Triton X10的用量比为1g：100ml。
(6)吸水纸的处理
将吸水纸于烘箱中放置6小时以上，密封待用。
(7)检验、组装及包装。
将样品垫、结合垫、层析膜、吸水纸按顺序贴在塑料垫上，用切割机将其切成粗细均匀的窄条，最后用试纸条专用外壳组装，得试纸条。
(8)样本稀释液的配制
取5.8g的磷酸氢二纳(Na2HPO4)，0.592g的磷酸二氢钠(NaH2PO4)，9g的氯化钠(NaCl)，溶于无离子水中，再加入1ml吐温20，充分搅拌溶解，最后定容到1L，取200μl样本稀释液于保存管中。
(9)外包
将装好的试纸条一条、稀释液保存管一只、一次性塑料滴管一只、一份产品说明书，连同干燥剂一起封装于铝箔袋中，并装入不同规格的试剂盒中，当试剂盒中装有多条试纸条时，盒体内设有隔层，隔层上设有一条以上的***槽，每条***槽内插有一包铝箔袋。
灵敏度测试：
1.分别将IgG抗体(购买于上海研谨生物科技有限公司，货号为ybsm-0297M)稀释4个梯度：0、1ng/μl、10ng/μl、100ng/μl，依次摆放在试管架上，静置10分钟，得四个不同浓度的样本；
2.稀释液保存管(内含200μl样本稀释液)做好标记，每管滴加样本1滴，约20微升，摇匀；
3.每个试剂条滴加样本稀释液1管，约5滴。
4.试剂条静置10分钟后观测条带。
5.对检测结果进行拍照留存，检测结果如图3所示，由图3可看出10ng/μl和100ng/μl的样本均呈明显的阳性，也即本申请试纸条的最低检出浓度不高于10ng/μl。
检测实例：
1.取6个血液阴性样本(源于核酸检测呈阴性的患者，隔离一个月后仍为阴性、且无感染症状)和6个阳性样本(源于核酸检测呈阳性的患者)依次摆放在试管架上，静置10分钟；
2.分别将样本按照序号做好标记1-6；
3.稀释液保存管(内含200μl样本稀释液)做好标记，每管滴加血液样本1滴，约20微升，摇匀；
4.每个试剂条滴加样本稀释液1管，约5滴。
5.试剂条静置10分钟后观测条带。
6.对检测结果进行拍照留存，如图4所示，6个阴性样本结果均呈阴性，如图5所示，6个阳性样本结果均呈阳性。
Claims (10)
1.一种新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条，包括基础板，基础板上沿长度方向设有依次相接的样品垫、金胶垫、硝酸纤维素膜层和吸水纸层，其特征在于：从样品垫到吸水纸层的方向上，硝酸纤维素膜层上依次设有两条检测线和一条质控线，两条检测线分别为包被鼠抗人IgM抗体的检测线和包被鼠抗人IgG抗体的检测线，一条质控线为包被兔抗鸡IgY抗体的质控线。
2.如权利要求1所述的新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条，其特征在于：金标垫上的金标抗体由被胶体金标记的鸡IgY单克隆抗体和被胶体金标记的新型冠状病毒N蛋白组成。
3.如权利要求2所述的新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条，其特征在于：被胶体金标记的鸡IgY单克隆抗体和被胶体金标记的新型冠状病毒N蛋白的质量比为1:(1±0.1)。
4.权利要求1-3任意一项所述的新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)制备胶体金溶液；
(2)制备胶体金标记鸡IgY单克隆抗体；
(3)制备胶体金标记新型冠状病毒N蛋白；
(4)层析膜硝酸纤维素膜层的处理：
检测IgM抗体捕获区：将鼠抗人IgM抗体以1.0±0.02mg/ml的浓度进行划线，划量为0.6±0.2μl/cm，划完后置于18-25℃干燥12±1小时，得包被鼠抗人IgM抗体的检测线；
检测IgG抗体捕获区：将鼠抗人IgG抗体以1.0±0.02mg/ml的浓度进行划线，划量为0.6±0.2μl/cm，划完后置于18-25℃干燥12±1小时，得被鼠抗人IgG抗体的检测线；
质控区C：将兔抗鸡IgY抗体按1.0±0.02mg/ml的浓度进行划线，划量为0.6±0.2μl/cm，划完后置于18-25℃干燥12小时，得包被兔抗鸡IgY抗体的质控线；
(5)喷金：把胶体金标记鸡IgY单克隆抗体和胶体金标记新型冠状病毒N蛋白按照1:(1±0.1)的比例进行混合，按照喷量为3±0.5ul/cm进行金标抗体的喷球，喷好后置于18-25℃干燥10-12小时，得金胶垫；
(6)将样品垫、金胶垫、硝酸纤维素膜层和吸水纸层按顺序贴在塑料垫上，用切割机将其切成粗细均匀的窄条，装上外壳，得新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，胶体金溶液的制备为：将质量浓度为0.03～0.04％的HAuCl4·3H2O溶液，加热至沸，并保持沸腾25-30分钟，然后加入质量浓度为2％柠檬酸三钠溶液混合煮沸，直到颜色变为橙红，室温冷却，即得胶体金溶液，其中，柠檬酸三钠溶液的质量用量为HAuCl4·3H2O溶液的2.5～3.0％。
6.如权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，胶体金标记鸡IgY单克隆抗体的制备为：用碳酸钾溶液将胶体金溶液的pH调节至8.0，然后把鸡IgY单克隆抗体加入胶体金溶液中，鸡IgY单克隆抗体与胶体金溶液的质量比为1：(10±1)，充分混匀，置于25±2℃水浴反应30±2分钟后，再加入相对胶体金溶液的质量用量为5±0.2％的BSA，封闭30±2分钟后，离心取沉淀，用BSA恢复其终浓度为1±0.1％，4±0.2℃保存备用。
7.如权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，胶体金标记新型冠状病毒N蛋白的制备为：用碳酸钾溶液将胶体金溶液的pH调节至7.0，然后把新型冠状病毒N蛋白按加入胶体金溶液中，新型冠状病毒N蛋白与胶体金溶液的质量比为1：(10±1)，胶体金溶液中，充分混匀，置于25±2℃水浴反应30±2分钟后，再加入相对胶体金溶液的质量用量为5±0.2％的BSA，封闭30±2分钟后，离心取沉淀，用BSA恢复其终浓度为1±0.1％，4±0.2℃保存备用。
8.一种新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试剂盒，其特征在于：包括盒体，盒体内设有铝箔袋，铝箔袋内装设有权利要求1-3任意一项所述的新型冠状病毒IgM/IgG二合一快速检测的试纸条、稀释液保存管、滴管、干燥剂和说明书。
9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于：盒体内设有隔层，隔层上设有一条以上的***槽，每条***槽内插有一包铝箔袋。
10.如权利要求8或9所述的试剂盒，其特征在于：稀释存管中的稀释液包括：磷酸氢二纳(Na2HPO4)5～6.6‰，磷酸二氢钠(NaH2PO4)0.5～0.7‰，氯化钠(NaCl)8～10‰，吐温200.5～1.5‰和余量的无离子水。
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Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111551712A (zh) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111443196A (zh) * | 2020-02-27 | 2020-07-24 | 深圳市绿诗源生物技术有限公司 | 一种新冠病毒抗体检测卡和制作方法 |
| CN111781353A (zh) * | 2020-08-20 | 2020-10-16 | 广东唯实生物技术有限公司 | 检测SARS-CoV-2抗体的胶体金试纸条及其制备方法和应用 |
| CN112114139A (zh) * | 2020-09-11 | 2020-12-22 | 博奥赛斯（天津）生物科技有限公司 | 一种新型冠状病毒IgM-IgA-IgG抗体胶体金检测试剂盒 |
| CN112305218A (zh) * | 2020-08-18 | 2021-02-02 | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 | 一种新型冠状病毒抗体胶体金免疫侧向层析检测方法及其应用 |
| CN112485422A (zh) * | 2020-11-09 | 2021-03-12 | 桂林电子科技大学 | 基于新型冠状病毒抗原的乳胶微球免疫层析试纸条及其制备方法 |
| CN113588941A (zh) * | 2021-07-18 | 2021-11-02 | 杭州迈尔德生物科技有限公司 | 一种基于间接胶体金法的新型冠状病毒中和抗体的检测方法及试剂盒 |
| CN114062671A (zh) * | 2021-09-22 | 2022-02-18 | 中国科学院大学 | 一种新型冠状病毒抗体检测试纸、制备方法和应用 |
| CN114113587A (zh) * | 2020-08-26 | 2022-03-01 | 华中科技大学 | 一种新型冠状病毒抗体胶体金免疫层析检测卡及应用 |
| CN116165382A (zh) * | 2023-02-27 | 2023-05-26 | 深圳市第三人民医院(深圳市肝病研究所) | 一种新冠病毒np抗体双抗夹心法建立的胶体金试纸条 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108445210A (zh) * | 2018-02-09 | 2018-08-24 | 深圳市梓健生物科技有限公司 | 联合检测人寨卡病毒IgG和IgM抗体的试剂盒及其制备方法 |
| CN110007096A (zh) * | 2019-05-06 | 2019-07-12 | 江苏硕世生物科技股份有限公司 | 一种登革病毒IgG/IgM抗体检测试纸条、试剂盒及其制备方法 |
| CN111089962A (zh) * | 2020-03-25 | 2020-05-01 | 中山生物工程有限公司 | 联合检测新型冠状病毒IgM/IgG抗体的胶体金试剂盒及制备方法 |
| CN213398575U (zh) * | 2020-05-07 | 2021-06-08 | 江苏苏博生物医学科技南京有限公司 | 新型冠状病毒IgM/IgG快速检测的试纸条和试剂盒 |
-
2020
- 2020-05-07 CN CN202010376037.XA patent/CN111551712A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108445210A (zh) * | 2018-02-09 | 2018-08-24 | 深圳市梓健生物科技有限公司 | 联合检测人寨卡病毒IgG和IgM抗体的试剂盒及其制备方法 |
| CN110007096A (zh) * | 2019-05-06 | 2019-07-12 | 江苏硕世生物科技股份有限公司 | 一种登革病毒IgG/IgM抗体检测试纸条、试剂盒及其制备方法 |
| CN111089962A (zh) * | 2020-03-25 | 2020-05-01 | 中山生物工程有限公司 | 联合检测新型冠状病毒IgM/IgG抗体的胶体金试剂盒及制备方法 |
| CN213398575U (zh) * | 2020-05-07 | 2021-06-08 | 江苏苏博生物医学科技南京有限公司 | 新型冠状病毒IgM/IgG快速检测的试纸条和试剂盒 |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111443196A (zh) * | 2020-02-27 | 2020-07-24 | 深圳市绿诗源生物技术有限公司 | 一种新冠病毒抗体检测卡和制作方法 |
| CN112305218A (zh) * | 2020-08-18 | 2021-02-02 | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 | 一种新型冠状病毒抗体胶体金免疫侧向层析检测方法及其应用 |
| CN111781353A (zh) * | 2020-08-20 | 2020-10-16 | 广东唯实生物技术有限公司 | 检测SARS-CoV-2抗体的胶体金试纸条及其制备方法和应用 |
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| CN112114139A (zh) * | 2020-09-11 | 2020-12-22 | 博奥赛斯（天津）生物科技有限公司 | 一种新型冠状病毒IgM-IgA-IgG抗体胶体金检测试剂盒 |
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