CN109566414A - 一种金丝楠木离体再生的方法及其应用 - Google Patents

一种金丝楠木离体再生的方法及其应用 Download PDF

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吴丽芳
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Abstract

本发明公开了一种金丝楠木离体再生的方法，包括以下步骤：以金丝楠木种子实生苗的茎段为外植体；将茎段经高锰酸钾溶液消毒；将消毒后的茎段的形态学下端浸于生根促进液中进行不定根诱导处理；将经不定根诱导处理后的金丝楠木茎段定植；将定植后的茎段盖上塑料盖，置于温室中进行成苗培养，最终获得完整的再生植株。本发明还公开所述金丝楠木离体再生的方法在金丝楠木繁育中的应用。本发明具有取材少，取材方便，繁殖系数高且繁殖不受季节限制等优势，对于金丝楠木种苗的繁育及后期优良株系的规模化繁殖具有重要意义。

Description

一种金丝楠木离体再生的方法及其应用
技术领域
本发明属于金丝楠木繁殖技术领域，具体涉及一种金丝楠木离体再生的方法及其应用。
背景技术
金丝楠木(Phoebe sheareri)为樟科桢楠属大乔木，是我国特有的珍贵木材，是楠木中品质最高的门类，资源珍稀且生长极为缓慢，被誉为“国木”，也是我国二级重点保护珍稀濒危物种。金丝楠木主要产于中国四川、湖北西部、云南、贵州及长江以南省区，其中以四川的金丝楠木材质最佳。金丝楠木生性喜温暖湿润环境，耐热抗寒，其材质具有防潮、耐腐蚀、不变形、温和幽香、冬暖夏凉、光照下会发出丝丝金光等特点，是一种集材用、药用、生物柴油生产及香料生产于一体的多功能优良经济树种，具有广阔的市场前景。其木材有香气，纹理直而结构细密，坚硬耐腐，不易变形和开裂，为建筑、高级家具等优良木材；且金丝楠木中的结晶体明显多于普通楠木，木材表面在阳光下金光闪闪，金丝浮现，并伴有淡雅幽香，在历史上曾专用于皇家宫殿、少数寺庙的建筑和家具。此外，金丝楠木药香味独特且树干含有一种淡棕色可燃性油质液体，易燃且气味清香。
目前，在生产上，金丝楠木主要采用播种繁育，但由于存在结实率低，且种子采集困难、种子育苗过程繁琐、种子萌发率低等问题，很难满足金丝楠木种苗的市场需求。此外，通过利用无性繁殖手段等对金丝楠木进行繁育的研究尚未有报道。因此，针对目前金丝楠木繁育所存在的诸多问题，急需开发一种金丝楠木离体再生的方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于：解决目前金丝楠木繁育所存在的诸多问题以及如何利用无性繁殖手段等对金丝楠木进行繁育。
本发明采用以下技术方案解决上述技术问题：
一种金丝楠木离体再生的方法，包括以下步骤：
(1)以金丝楠木种子实生苗的茎段为外植体；
(2)将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，用高锰酸钾溶液消毒，吸干表面残留液体后备用；
(3)将步骤(2)中消毒后的茎段的形态学下端浸于生根促进液中进行不定根诱导处理，处理时间为10-60s；
(4)将步骤(3)中经不定根诱导处理后的金丝楠木茎段的形态学下端定植于装有4-6cm厚的混合基质的营养盘中，以互不重叠为准；
(5)将步骤(4)中定植后的茎段盖上塑料盖，置于温室中进行成苗培养。
优选的，所述步骤(1)中所述的茎段选自1-3年生金丝楠木种子实生苗。
优选的，所述茎段长1.5-3.0cm、至少带有1-2个腋芽和1-2个叶片。
优选的，所述步骤(2)中高锰酸钾溶液的质量浓度为0.01-0.05％。
优选的，所述高锰酸钾溶液的使用方法为：将经流水冲洗后的茎段置于质量浓度0.01-0.05％的高锰酸钾溶液中消毒1-5min。
优选的，所述步骤(3)中所述的生根促进液采用：300-1000mg/L吲哚丁酸、100-500mg/L萘乙酸、0.01-0.5mg/L VB12和1/16-1/2MS。
优选的，所述步骤(4)中所述的混合基质为营养土、蛭石、黄土按照质量比2∶1∶1的混合基质。
优选的，所述步骤(4)中定植***的茎段长度为0.3-1.0cm。
优选的，所述步骤(5)中所述的温室温度为22-25℃、相对湿度为85-90％。
优选的，本发明还公开了所述的一种金丝楠木离体再生的方法在金丝楠木繁育中的应用。
本发明技术有益效果：本发明所提供的一种金丝楠木离体再生的方法，选择1-3年生金丝楠木种子实生苗的1.5-3.0cm长、携带腋芽的茎段为外植体，具有取材少，取材方便和材料丰富等特点；然后将该茎段经表面消毒、不定根诱导、定植及成苗管理等步骤，最终获得完整的再生植株。和传统的播种繁育相比，本发明所述的离体再生的方法具有操作简单、繁殖系数高且不受季节限制等优势，极大简化了育苗过程，缩短了繁育周期，提高了繁殖效率，能够满足金丝楠木种苗的市场需求。
本发明严格优化并控制生根促进液的种类和浓度，使其成为金丝楠木植株不定根诱导的最佳浓度；本发明将选取的茎段进行消毒、定植及成苗管理步骤中的消毒剂、混合基质等的种类和浓度选择也严格与金丝楠木植株生长过程中所需的必要元素相配合，同时避免有害元素的引入；而且本发明还对定植***的茎段长度和成苗管理所需的温室的温度和湿度均按照最适合金丝楠木植株生长的条件设定。本发明所涉及的方法对后期金丝楠木种苗繁育及后期的金丝楠木优良株系的规模化繁殖具有重要意义。
附图说明
图1为本发明实施例所述的金丝楠木茎段切段图；
图2为本发明实施例所述的金丝楠木茎段定植图；
图3为本发明实施例所述的金丝楠木茎段不定根形成初期图；
图4为本发明实施例所述的金丝楠木根伸长图；
图5为本发明实施例所述的金丝楠木成苗图。
具体实施方式
为便于本领域技术人员理解本发明技术方案，现结合说明书附图对本发明技术方案做进一步的说明。
实施例1
一种金丝楠木离体再生的方法，具体操作如下：
(1)以金丝楠木1-3年生实生苗的幼嫩未木质化茎段为外植体，剪切成长1.5cm、至少带有1-2个腋芽和1-2个叶片的茎段，备用；
(2)将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，用0.01％高锰酸钾溶液消毒5min后，吸干表面残留液体后备用；
(3)将步骤(2)中消毒后的茎段的形态学下端浸于含有300mg/L吲哚丁酸、100mg/L萘乙酸0.01mg/L VB12和1/16MS的生根促进液中进行不定根诱导处理，处理时间为60s；
(4)将步骤(3)中经不定根诱导处理后的金丝楠木茎段的形态学下端定植于装有4-6cm厚的混合基质的营养盘中，以互不重叠为准，且***的茎段长度为0.3cm；所述的混合基质为营养土、蛭石、黄土按照质量比2∶1∶1的混合基质；
(5)将步骤(4)中定植后的茎段盖上塑料盖，于温度为22-25℃，相对湿度为85-90％的温室中进行成苗培养。
按本实施例1的方法培养2个半月后，金丝楠木茎段的形态学下端切口处出现不定根凸起；培养4个月后，茎段的基部产生长度为2-3cm左右的不定根；不定根的诱导率高达65.6％，平均每个外植体产生1-3条不定根。
实施例2
一种金丝楠木离体再生的方法，具体操作如下：
(1)以金丝楠木1-3年生实生苗的半木质化茎段为外植体，剪切成长2.0cm、至少带有1-2个腋芽和1-2个叶片的茎段，参见图1，备用；
(2)将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，用0.02％高锰酸钾溶液消毒2min后，吸干表面残留液体后备用；
(3)将步骤(2)中消毒后的茎段的形态学下端浸于含有700mg/L吲哚丁酸、300mg/L萘乙酸0.1mg/LVB12和1/4MS的生根促进液中进行不定根诱导处理，处理时间为30s；
(4)将步骤(3)中经不定根诱导处理后的金丝楠木茎段的形态学下端定植于装有4-6cm厚的混合基质的营养盘中，以互不重叠为准，且***的茎段长度为0.5cm，参见图2；所述的混合基质为营养土、蛭石、黄土按照质量比2∶1∶1的混合基质；
(5)将步骤(4)中定植后的茎段盖上塑料盖，于温度为22-25℃，相对湿度为85-90％的温室中进行成苗培养。
按照本实施例2所述的方法培养2个月后，金丝楠木茎段的形态学下端切口处出现不定根凸起，参见图3；培养4个月后，茎段的基部产生长度为2-4cm左右的不定根；不定根的诱导率高达80.1％，平均每个外植体产生1-5条不定根，参见图4；继续培养2个月后，获得健壮的金丝楠木完整植株，参见图5。
实施例3
一种金丝楠木离体再生的方法，具体操作如下：
(1)以金丝楠木1-3年生实生苗的木质化茎段为外植体，剪切成长3.0cm、至少带有1-2个腋芽和1-2个叶片的茎段，备用；
(2)将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，用0.05％高锰酸钾溶液消毒1min后，吸干表面残留液体后备用；
(3)将步骤(2)中消毒后的茎段的形态学下端浸于含有1000mg/L吲哚丁酸、500mg/L萘乙酸0.2mg/LVB12和1/2MS的生根促进液中进行不定根诱导处理，处理时间为10s；
(4)将步骤(3)中经不定根诱导处理后的金丝楠木茎段的形态学下端定植于4-6cm厚的混合基质的营养盘中，以互不重叠为准，且***的茎段长度为1.0cm；所述的混合基质为营养土、蛭石、黄土按照质量比2∶1∶1的混合基质；
(5)将步骤(4)中定植后的茎段盖上塑料盖，于温度为22-25℃，相对湿度为85-90％的温室中进行成苗培养。
按照本实施例3所述的方法培养2个月后，金丝楠木茎段的形态学下端切口处出现不定根凸起；培养4个月后，茎段的基部产生长度为1-3cm左右的不定根并伴有少量愈伤组织形成；不定根的诱导率高达79.3％，且平均每个外植体产生2-6条不定根；继续培养2个月后，获得健壮的金丝楠木完整植株。
上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本发明内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种金丝楠木离体再生的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)以金丝楠木种子实生苗的茎段为外植体；
(2)将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，用高锰酸钾溶液消毒，吸干表面残留液体后备用；
(3)将步骤(2)中消毒后的茎段的形态学下端浸于生根促进液中进行不定根诱导处理，处理时间为10-60s；
(4)将步骤(3)中经不定根诱导处理后的金丝楠木茎段的形态学下端定植于装有4-6cm厚的混合基质的营养盘中，以互不重叠为准；
(5)将步骤(4)中定植后的茎段盖上塑料盖，置于温室中进行成苗培养。
2.根据权利要求1所述的一种金丝楠木离体再生的方法，其特征在于，所述步骤(1)中所述的茎段选自1-3年生金丝楠木种子实生苗。
3.根据权利要求2所述的一种金丝楠木离体再生的方法，其特征在于，所述茎段长1.5-3.0cm、至少带有1-2个腋芽和1-2个叶片。
4.根据权利要求1所述的一种金丝楠木离体再生的方法，其特征在于，所述步骤(2)中高锰酸钾溶液的质量浓度为0.01-0.05％。
5.根据权利要求4所述的一种金丝楠木离体再生的方法，其特征在于，所述高锰酸钾溶液的使用方法为：将经流水冲洗后的茎段置于质量浓度0.01-0.05％的高锰酸钾溶液中消毒1-5min。
6.根据权利要求1所述的一种金丝楠木离体再生的方法，其特征在于，所述步骤(3)中所述的生根促进液采用：300-1000mg/L吲哚丁酸、100-500mg/L萘乙酸、0.01-0.5mg/L VB12和1/16-1/2MS。
7.根据权利要求1所述的一种金丝楠木离体再生的方法，其特征在于，所述步骤(4)中所述的混合基质为营养土、蛭石、黄土按照质量比2∶1∶1的混合基质。
8.根据权利要求1所述的一种金丝楠木离体再生的方法，其特征在于，所述步骤(4)中定植***的茎段长度为0.3-1.0cm。
9.根据权利要求1所述的一种金丝楠木离体再生的方法，其特征在于，所述步骤(5)中所述的温室温度为22-25℃、相对湿度为85-90％。
10.如权利要求1-9任意一项所述的一种金丝楠木离体再生的方法在金丝楠木繁育中的应用。
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