CN106038657A - 一种活血止痛片及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种活血止痛片,制备方法为:取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片llg、土鳖虫111g、煅自然铜67g,采用特定的浓缩和干燥设备,制备得到的活血止痛片中阿魏酸含量高,并发现活血止痛片在制备抑制大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC‑12细胞增殖药物中的应用。
Description
技术领域
本发明涉及中药提取技术领域,具体涉及一种活血止痛片及其制备方法。
背景技术
活血止痛片活血散瘀,消肿止痛。用于跌打损伤,瘀血肿痛。现有技术中的制备方法,工艺粗糙、落后,杂质多,有效成分含量低,导致患者用量过大,不方便服用,严重影响了本品在临床上应用。
发明内容
发明目的:为了解决上述问题,本发明的目的在于提供一种活血止痛片及其制备方法。
技术方案:本发明的目的是通过如下的方案实现的:
一种活血止痛片,制备方法为:取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片11g、土鳖虫111g、煅自然铜67g,加药材10倍重量的水,浸泡0.5h,煎煮1小时,过滤,药渣再加入药材8倍重量的水,煎煮1小时,药液滤出,合并两次煎煮液,浓缩至60℃相对密度为1.05,加乙醇使含醇量的体积百分比达75%,搅拌,静置,过滤,滤液浓缩至65℃时相对密度为1.25,并回收乙醇,得浓缩液,使用微波萃取,得萃取液,继续浓缩,将浓缩液进行干燥,制粒,压片,即得活血止痛片。
所述活血止痛片制备方法中所述微波萃取方法为:将水提醇沉后的浓缩液投入微波萃取装置中进行微波萃取,萃取功率400-600W,萃取2次,每次4-8分钟,每次加入的70%乙醇的量为浓缩液重量的2倍,得萃取液,浓缩,优选条件为:微波萃取功率500W,每次萃取6分钟。
所述活血止痛片,上述制备方法中三次浓缩使用装置,包括罐体,设置在所述罐体上的进料口和设置在所述罐体底部的出料管,在所述罐体内设有搅拌轴,在所述搅拌轴上设有搅拌桨,在所述罐体的顶部设有与所述搅拌轴相连接的搅拌电机,在所述罐体的内壁上设有环形凹槽,所述环形凹槽的底端靠近所述罐体的底壁,在所述环形凹槽内设有环形旋转块,在所述罐体的侧壁内设有驱动电机,在所述驱动电机的主轴上设有驱动齿盘,在所述环形旋转块的外环面上设有与所述驱动齿盘相齿合的齿槽,在所述环形旋转块的内环面上均匀设有至少三条刮筋,所述刮筋的底壁抵压在所述罐体的底壁上端面上,在所述罐体上设有与所述驱动电机相连接的调节器。
所述活血止痛片,上述制备方法中浓缩装置所述环形凹槽的顶壁与底壁均匀设有滚珠,所述环形旋转块的上端面和下端面抵压在所述滚珠上。
所述活血止痛片,上述制备方法中浓缩装置所述环形旋转块与所述环形凹槽的连接面上设有密封金属条,所述滚珠设置在所述密封金属条与环形凹槽的内侧端。
所述活血止痛片,上述制备方法中浓缩装置所述出料管上还设有冷却器,在所述罐体内设有水份测定仪。
所述活血止痛片,上述制备方法中干燥使用装置,包括箱体,设置在所述箱体内的物料架和设置在所述箱体顶部的进风管和出风管,其特征在于:在所述箱体的侧壁内设有与所述进风管相连通的进风通道,在所述箱体的侧壁上设有与所述进风通道相连通的风孔,所述出风管穿过所述箱体的顶壁连通箱体内与箱体外部,在所述箱体的侧壁内还设有调温腔和灭菌腔,在所述调温腔内设有电加热块,所述进风通道穿过所述调节腔和灭菌腔设置,在所述箱体的底壁内设有旋转腔,在所述旋转腔内设有旋转电机,所述旋转电机的主轴与所述物料架相连接,在所述物料架内设有震动凹槽,在所述物料架的顶面设有盛放板,在所述盛放板与所述震动凹槽之间设有震动装置。
所述活血止痛片,上述制备方法中干燥使用装置所述震动装置包括驱动电机,设置在所述驱动电机主轴上的偏心轮,所述偏心轮的轮边抵压在所述盛放板的底面中心,在所述盛放板的底部与所述震动凹槽的底壁之间设有拉簧,所述拉簧以所述偏心轮为中心对称设置。
所述活血止痛片,上述制备方法中干燥使用装置所述箱体内设有温度传感器,在所述箱体的侧壁内设有与所述温度传感器相连接的驱动器,所述驱动器与所述电加热块的控制端相连接,在所述箱体上还设有箱门。
所述活血止痛片在制备抑制大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞增殖药物中的应用。
现有技术中,活血止痛片采用醇提的方法,工艺粗糙、落后,杂质多,导致患者用量过大,不方便服用,本发明制备的活血止痛片中阿魏酸得率增加,含量高。本发明中的浓缩设备结构简单、操作便捷,在加热浓缩时,可以通过驱动电机驱动环形旋转块旋转,从而使刮筋在罐体的底面刮动,从而可有效的防止罐体的底壁结块,一定程度上可提高加热浓缩效率,解决了传统技术中药浓缩设备罐底容易结块从而影响加热效率的技术不足,使用稳定性好,药物的有效成分稳定不被破坏。本干燥设备结构简单、操作简单快捷,其采用箱体侧壁进行送风,并增设了电加热块,可以根据箱内的温度进行调节,从而保证了干燥温度的稳定性,而且设有旋转电机和震动装置,可以在加热的同时对盛放板进行旋转和震动,从而可防止药局部干燥,从而一定程度上可以提高干燥的效率,解决了传统技术的干燥装置干燥效率低的技术不足。并发现活血止痛片在制备抑制大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞增殖药物中的应用。
附图说明
为了使本发明的内容更容易被清楚的理解,下面根据具体实施例并结合附图,对本发明作进一步详细的说明,其中:
图1为本发明浓缩装置的结构示意图。
图2为本发明干燥装置的结构示意图。
具体实施方式
以下通过实施例形式,对本发明的上述内容再作进一步的详细说明,但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例,凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片11g、土鳖虫111g、煅自然铜67g,加药材10倍重量的水,浸泡0.5h,煎煮1小时,过滤,药渣再加入药材8倍重量的水,煎煮1小时,药液滤出,合并两次煎煮液,浓缩至60℃相对密度为1.05,加乙醇使含醇量的体积百分比达75%,搅拌,静置,过滤,滤液浓缩至65℃时相对密度为1.25,并回收乙醇,得浓缩液,使用微波萃取,得萃取液,继续浓缩,将浓缩液进行干燥,制粒,压片,即得活血止痛片。
所述活血止痛片的制备方法,所述微波萃取方法为:将水提醇沉后的浓缩液投入微波萃取装置中进行微波萃取,萃取功率400W,萃取2次,每次8分钟,每次加入的70%乙醇的量为浓缩液重量的2倍,得萃取液,浓缩。
见图1:所述活血止痛片的制备方法,上述三次浓缩装置,包括罐体1,设置在所述罐体1上的进料口2和设置在所述罐体1底部的出料管3,在所述罐体1内设有搅拌轴4,在所述搅拌轴4上设有搅拌桨5,在所述罐体1的顶部设有与所述搅拌轴4相连接的搅拌电机6,在所述罐体1的内壁上设有环形凹槽7,所述环形凹槽7的底端靠近所述罐体1的底壁,在所述环形凹槽7内设有环形旋转块8,在所述罐体1的侧壁内设有驱动电机9,在所述驱动电机9的主轴上设有驱动齿盘10,在所述环形旋转块8的外环面上设有与所述驱动齿盘10相齿合的齿槽11,在所述环形旋转块8的内环面上均匀设有至少三条刮筋12,所述刮筋12的底壁抵压在所述罐体1的底壁上端面上,在所述罐体1上设有与所述驱动电机9相连接的调节器13,调节器为市场上已使用结构,只需要按照其连接要求连接使用即可。在使用时通过控制驱动电机,使驱动电机带动环形旋转块旋转,从而使刮筋在环形旋转块的带动下在罐体的底壁顶面刮动,从而可以桨聚积在罐体底壁顶面的药渣刮松,从而可防止结块。
在所述环形凹槽7的顶壁与底壁均匀设有滚珠14,所述环形旋转块8的上端面和下端面抵压在所述滚珠14上。设有滚珠,可以保证环形旋转块的正常旋转,减少环形旋转块与环形凹槽之间的摩擦,从而提高使用寿命和使用稳定性。
在所述环形旋转块8与所述环形凹槽7的连接面上设有密封金属条15,所述滚珠设置在所述密封金属条与环形凹槽的内侧端。
在所述出料管上还设有冷却器16,在所述罐体内设有水份测定仪17。
见图2:所述活血止痛片的制备方法,上述干燥使用装置,包括箱体1,设置在所述箱体1内的物料架2和设置在所述箱体1顶部的进风管3和出风管4,在所述箱体1的侧壁内设有与所述进风管3相连通的进风通道5,在所述箱体1的侧壁上设有与所述进风通道5相连通的风孔6,进风孔设置在侧壁上,可以保证通风的均匀性,而且可以大大提高与药物的接触面积,所述出风管4穿过所述箱体1的顶壁连通箱体1内与箱体1外部,在所述箱体1的侧壁内还设有调温腔7和灭菌腔8,在所述调温腔7内设有电加热块9,设有电加热块可以根据需要对进风管的温度进行调节,保证干燥温度的稳定性,所述进风通道5穿过所述调节腔7和灭菌腔8设置,在所述箱体1的底壁内设有旋转腔10,在所述旋转腔10内设有旋转电机11,所述旋转电机11的主轴与所述物料架2相连接,在所述物料架2内设有震动凹槽12,在所述物料架2的顶面设有盛放板13,在所述盛放板13与所述震动凹槽12之间设有震动装置14。
所述震动装置14包括驱动电机141,设置在所述驱动电机141主轴上的偏心轮142,所述偏心轮142的轮边抵压在所述盛放板13的底面中心,在所述盛放板13的底部与所述震动凹槽12的底壁之间设有拉簧15,所述拉簧以所述偏心轮为中心对称设置,在使用时通过偏心轮的抵压使盛放板上升,当偏心轮的凹部抵压盛放板时,盛放板在拉簧的作用下复位,在下落过程中使物材脱离盛放板之后再跌落在盛放板上实现物料的震动。
在所述箱体1内设有温度传感器16,在所述箱体的侧壁内设有与所述温度传感器相连接的驱动器17,所述驱动器与所述电加热块的控制端相连接。温度传干器和驱动器为市场上已有的现有技术,其在使用连接时只需要按照对应的连接说明连接即可。
在所述箱体上还设有箱门18。
实施例2
取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片11g、土鳖虫111g、煅自然铜67g,加药材10倍重量的水,浸泡0.5h,煎煮1小时,过滤,药渣再加入药材8倍重量的水,煎煮1小时,药液滤出,合并两次煎煮液,浓缩至60℃相对密度为1.05,加乙醇使含醇量的体积百分比达75%,搅拌,静置,过滤,滤液浓缩至65℃时相对密度为1.25,并回收乙醇,得浓缩液,使用微波萃取,得萃取液,继续浓缩,将浓缩液进行干燥,制粒,压片,即得活血止痛片。
所述活血止痛片的制备方法,所述微波萃取方法为:将水提醇沉后的浓缩液投入微波萃取装置中进行微波萃取,萃取功率600W,萃取2次,每次4分钟,每次加入的70%乙醇的量为浓缩液重量的2倍,得萃取液,浓缩。
浓缩和干燥装置同上。
实施例3
取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片11g、土鳖虫111g、煅自然铜67g,加药材10倍重量的水,浸泡0.5h,煎煮1小时,过滤,药渣再加入药材8倍重量的水,煎煮1小时,药液滤出,合并两次煎煮液,浓缩至60℃相对密度为1.05,加乙醇使含醇量的体积百分比达75%,搅拌,静置,过滤,滤液浓缩至65℃时相对密度为1.25,并回收乙醇,得浓缩液,使用微波萃取,得萃取液,继续浓缩,将浓缩液进行干燥,制粒,压片,即得活血止痛片。
所述活血止痛片的制备方法,所述微波萃取方法为:将水提醇沉后的浓缩液投入微波萃取装置中进行微波萃取,萃取功率500W,萃取2次,每次6分钟,每次加入的70%乙醇的量为浓缩液重量的2倍,得萃取液,浓缩。
浓缩和干燥装置同上。
上述实施例中原料均符合药典标准。
实施例4:本发明活血止痛片中阿魏酸含量测定实验研究资料
1.1实验药物:本发明活血止痛片:按实施例1-3方法制备。对照组采用普通浓缩方法制备活血止痛片提取物。
1.2仪器:高效液相色谱仪***包括高效液相色谱仪(Waters 515);P200高压泵;Waters2487紫外检测器及GJ605型高压六通进样阀;色谱柱为ODS-C18(钻石)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);数据采集及处理采用HS色谱数据工作站V4.0+(杭州英谱科技)
1.3测定条件:照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录ⅤD)测定。采用ODS-C18(钻石)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-1%冰醋酸(20:80),流速为1.0mL/min,检测波长为322nm,进样量为10μL。
1.4实验结果
各实施例制备的活血止痛片中阿魏酸含量测定结果
样品来源 | 阿魏酸含量(%) |
实施例1 | 3.15 |
实施例2 | 3.46 |
实施例3 | 2.87 |
对照组 | 0.59 |
根据上表的试验结果可知,本发明实施例1-3制备的活血止痛片中阿魏酸含量明显高于对照组。
实施例5:本发明活血止痛片抑制大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞增殖的实验研究资料
1实验材料
1.1实验用细胞株
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞,南京医科大学实验室细胞库,DMEM+10%FBS常规培养。
1.2实验药物
研究药物:本发明活血止痛片:按实施例1方法制备。
药液储液:称取100mg活血止痛片,溶于5ml无水乙醇中,0.2μm滤器过滤,500μldoff管分装,-20℃存储,同时0.2μm滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。
1.3实验试剂
DMEM(GIBCO公司Cat.No.12100-061 Lot.No.758137);胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司Lot.No.100419);NaHCO3(上海久亿化学试剂有限公司Cat.No.11810-033Lot.No.1088387);Trypsin(AMRESCO公司批号:2010/04);EDTA(AMRESCO公司批号:2009/10);Penicillin G Sodium Salt(AMRESCO公司批号:2010242);Streptomycin Sulfate(AMRESCO公司批号:2010382);无水乙醇(南京化学试剂有限公司批号:080310182);MTT(Biosharp批号:0793);PBS(实验室自配);
1.4实验器材
莱卡倒置显微镜(德国Leica型号:DM1L);可见-紫外光微孔板检测仪(美国MD公司型号:SPECTRA MAX 190);CO2培养箱(FORMA型号:3111);超净台(苏净集团安泰公司制造型号:SW-CJ-ZFD);纯水仪(美国Spring公司型号:S/N 020579);精密移液器(法国吉尔森公司型号:P2);电子天平(德国赛多利斯有限公司型号:BT323S);全自动高压灭菌锅(日本SANYO公司型号:MLS-3020);台式电热鼓风干燥箱(上海精密实验设备公司型号:DHG9123A);冰箱(西门子公司型号:KG18V21TI);液氮罐(CBS型号:2001);低速离心机(上海安亭科学仪器厂型号:KA-1000);0.2μm滤器(MILLIPORE型号:SLGP033RB);10cm培养皿(NEST公司)、96孔培养板(NEST公司);细胞计数板;离心管、移液管、Tips若干。
2实验方法
1)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞用DMEM+10%FBS于37℃、5%CO2进行常规培养(10cm培养皿),当细胞生长至对数期时,收集细胞,弃去培养液,PBS轻洗3遍,加入3ml0.25%胰蛋白酶-0.04%EDTA,37℃消化2min后,向其中加入5ml完全培养基中和反应,吹打细胞后将其转入离心管中,1000rpm离心5min,调整细胞悬液浓度3×104个/ml。
2)将细胞种入96孔培养板中,每孔加入细胞悬液180μl,培养板放入细胞培养箱中(37℃,5%CO2)常规培养。
3)根据细胞生长情况,一般长至50%-70%,加入活血止痛片溶液,继续培养24h。
4)24h后加入20μl MTT溶液(5mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4h。
5)4h后扣板法倒去上清,用吸水纸轻轻拍干,每孔加入200μl二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。
6)同时设置本底(不加细胞,只加培养液),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜),每组设定6个复孔。
7)结果以药物对细胞的抑制率表示:
细胞增值抑制率(%)=(对照孔OD值-给药孔OD值)/对照孔OD值×100%。实验重复3次。
3统计处理
采用Microsoft Excel 2003软件中的相关分析和Student t检验,数据以mean±S.D.表示。
4实验结果
MTT法实验后统计结果显示,与对照组比较,当剂量达到5mg/ml时,对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞增殖抑制有差异(P<0.05),剂量在10mg/ml时该差异具有显著性(P<0.01),当剂量达到15-20mg/ml时有极显著性差异(P<0.001)。
活血止痛片对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞增殖抑制影响研究
注:与对照组比较,*P<0.01;**P<0.001
5实验结论
活血止痛片可以抑制大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞增殖,减少大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞的细胞生长数目,该作用呈剂量依赖性。
Claims (10)
1.一种活血止痛片,其特征在于制备方法为:取当归22g、三七44g、醋乳香44g、冰片11g、土鳖虫111g、煅自然铜67g,加药材10倍重量的水,浸泡0.5h,煎煮1小时,过滤,药渣再加入药材8倍重量的水,煎煮1小时,药液滤出,合并两次煎煮液,浓缩至60℃相对密度为1.05,加乙醇使含醇量的体积百分比达75%,搅拌,静置,过滤,滤液浓缩至65℃时相对密度为1.25,并回收乙醇,得浓缩液,使用微波萃取,得萃取液,继续浓缩,将浓缩液进行干燥,制粒,压片,即得活血止痛片。
2.根据权利要求1所述活血止痛片,其特征在于上述制备方法中所述微波萃取方法为:将水提醇沉后的浓缩液投入微波萃取装置中进行微波萃取,萃取功率400-600W,萃取2次,每次4-8分钟,每次加入的70%乙醇的量为浓缩液重量的2倍,得萃取液,浓缩,优选条件为:微波萃取功率500W,每次萃取6分钟。
3.根据权利要求1所述活血止痛片,其特征在于上述制备方法中三次浓缩使用装置,包括罐体,设置在所述罐体上的进料口和设置在所述罐体底部的出料管,在所述罐体内设有搅拌轴,在所述搅拌轴上设有搅拌桨,在所述罐体的顶部设有与所述搅拌轴相连接的搅拌电机,在所述罐体的内壁上设有环形凹槽,所述环形凹槽的底端靠近所述罐体的底壁,在所述环形凹槽内设有环形旋转块,在所述罐体的侧壁内设有驱动电机,在所述驱动电机的主轴上设有驱动齿盘,在所述环形旋转块的外环面上设有与所述驱动齿盘相齿合的齿槽,在所述环形旋转块的内环面上均匀设有至少三条刮筋,所述刮筋的底壁抵压在所述罐体的底壁上端面上,在所述罐体上设有与所述驱动电机相连接的调节器。
4.根据权利要求3所述活血止痛片,其特征在于上述制备方法中浓缩装置所述环形凹槽的顶壁与底壁均匀设有滚珠,所述环形旋转块的上端面和下端面抵压在所述滚珠上。
5.根据权利要求3所述活血止痛片,其特征在于上述制备方法中浓缩装置所述环形旋转块与所述环形凹槽的连接面上设有密封金属条,所述滚珠设置在所述密封金属条与环形凹槽的内侧端。
6.根据权利要求3所述活血止痛片,其特征在于上述制备方法中浓缩装置所述出料管上还设有冷却器,在所述罐体内设有水份测定仪。
7.根据权利要求1所述活血止痛片,其特征在于上述制备方法中干燥使用装置,包括箱体,设置在所述箱体内的物料架和设置在所述箱体顶部的进风管和出风管,其特征在于:在所述箱体的侧壁内设有与所述进风管相连通的进风通道,在所述箱体的侧壁上设有与所述进风通道相连通的风孔,所述出风管穿过所述箱体的顶壁连通箱体内与箱体外部,在所述箱体的侧壁内还设有调温腔和灭菌腔,在所述调温腔内设有电加热块,所述进风通道穿过所述调节腔和灭菌腔设置,在所述箱体的底壁内设有旋转腔,在所述旋转腔内设有旋转电机,所述旋转电机的主轴与所述物料架相连接,在所述物料架内设有震动凹槽,在所述物料架的顶面设有盛放板,在所述盛放板与所述震动凹槽之间设有震动装置。
8.根据权利要求1所述活血止痛片,其特征在于上述制备方法中干燥使用装置所述震动装置包括驱动电机,设置在所述驱动电机主轴上的偏心轮,所述偏心轮的轮边抵压在所述盛放板的底面中心,在所述盛放板的底部与所述震动凹槽的底壁之间设有拉簧,所述拉簧以所述偏心轮为中心对称设置。
9.根据权利要求1所述活血止痛片,其特征在于上述制备方法中干燥使用装置所述箱体内设有温度传感器,在所述箱体的侧壁内设有与所述温度传感器相连接的驱动器,所述驱动器与所述电加热块的控制端相连接,在所述箱体上还设有箱门。
10.根据权利要求1所述活血止痛片在制备抑制大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞增殖药物中的应用。
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