CN104045733B - 一种以金福菇为原料提取分离金福菇多糖tlh-3的方法 - Google Patents
一种以金福菇为原料提取分离金福菇多糖tlh-3的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104045733B CN104045733B CN201410318373.3A CN201410318373A CN104045733B CN 104045733 B CN104045733 B CN 104045733B CN 201410318373 A CN201410318373 A CN 201410318373A CN 104045733 B CN104045733 B CN 104045733B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lobayense heim
- tlh
- polysaccharide
- ultrafiltration
- obtains
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 44
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 43
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 40
- 239000002994 raw material Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 241000121219 Tricholoma Species 0.000 title abstract description 8
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 40
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 30
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 14
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 14
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 11
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 11
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 8
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 6
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 abstract description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 3
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 abstract description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 abstract 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 5
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- 241000302587 Macrocybe gigantea Species 0.000 description 1
- 241000183036 Tricholoma magnivelare Species 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000004134 energy conservation Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
本发明公开了一种以金福菇为原料提取分离金福菇多糖TLH-3的方法，本方法以金福菇为原料，利用闪式提取技术，快速、高效的提取金福菇多糖TLH-3，然后利用季铵盐沉淀法和超滤技术进行多糖纯化。本发明方法步骤简便、易于操作，TLH-3的提取率为5％以上，最终产品纯度高达90％以上，整个工艺完成时间小于5小时，大大提高了生产效率，降低了能耗，属于典型的绿色环保工艺。
Description
一、技术领域
本发明涉及一种食用菌的加工方法，具体地说是一种以金福菇为原料提取分离金福菇多糖TLH-3的方法。
二、背景技术
金福菇(TricholomalobayenseHeim)又称为巨大口蘑、大白口蘑、洛巴伊口蘑，日本称白色松茸，是一种珍贵的天然保健食品和高品位的食用菌，其多糖和蛋白聚糖具有免疫调节和抗肿瘤的活性。
闪式提取技术是通过破碎组织来提取所需成分的一种新型高效的提取技术，与常规提取方法相比，该方法具有低温、快速、高效的优点。季铵盐沉淀法是多糖纯化的方法之一，季铵盐可与酸性糖形成不溶性沉淀，常用于酸性多糖的分离。该方法操作简便，处理量大，无需其它有机试剂。膜技术是一项新兴的用于澄清、分离、除菌和浓缩等方面的绿色和节能技术，具有操作简单、节能、无污染、可在常温下连续操作等优点，广泛用于化工、食品、生物、制药等领域。
金福菇主要含有三个多糖组分，中性糖TLH-1、酸性糖TLH-2和TLH-3，其中TLH-3的分子量为4.22×103Da，其抗氧化活性和抗坏血酸相当，可作为天然无毒抗氧化剂，应用于食品、医药和化妆品等领域。
多糖的分离纯化大多采用传统的水提醇沉法，需要二次提取，提取时间长，除蛋白的过程繁琐且时间较长，能耗大。CN102603908A公开了一种天然抗氧化剂金福菇多糖的制备方法，该方法利用水提醇沉法提取金福菇多糖，将金福菇多糖加热浸提2-4小时，醇沉过夜，该工艺提取时间长，高温提取对多糖结构造成破坏；柱层析法分离纯化得到TLH-3，该方法首先采用经过DEAE-SephoraseF.F凝胶柱纯化，然后用Superdex200层析柱分离得到TLH-3，整个过程需要2-3天，该工艺耗时长，效率差，步骤繁琐，金福菇多糖TLH-3的得率低，成本高，不能进行工业化生产。
三、发明内容
本发明旨在提供一种以金福菇为原料提取分离金福菇多糖TLH-3的方法，所要解决的技术问题是降低提取温度并提高提取效率，提高金福菇多糖TLH-3的得率和纯度。
本发明采用闪式提取技术提取金福菇多糖TLH-3，并将季铵盐沉淀法与超滤技术联用，制备工艺简单易行，效率高，整个操作过程温度不超过40℃，金福菇多糖TLH-3的得率和纯度较高，适宜于工业化生产。
本发明以金福菇为原料提取分离金福菇多糖TLH-3的方法，操作步骤如下：
(1)将金福菇放入闪式提取器中，加入20-40质量倍的水，常温下提取30-45s，提取电压为100-130V；
(2)将步骤(1)得到的提取液用离心分离或减压抽滤的方式去除颗粒性杂质，收集上清液；
(3)将步骤(2)得到的上清液加入质量浓度1-10％的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)溶液中，静置1.0-1.5h，离心并收集沉淀物，将所得沉淀物用质量浓度10％的NaCl溶液溶解，得到酸性亚组分溶液；
(4)将步骤(3)得到的酸性亚组分溶液在25-35℃下通过1000-1500道尔顿的超滤膜脱盐，超滤驱动压力为0.10-0.18MPa；然后在25-35℃下用1-10万道尔顿的超滤膜进行超滤，超滤驱动压力0.10-0.18MPa，滤出液于-50℃冷冻干燥后得到金福菇多糖TLH-3。
本发明使用的金福菇可以是金福菇干粉也可以是新鲜的金福菇。本发明所用试剂和原料均市售可得。
纯品鉴定：将本发明得到的金福菇多糖TLH-3样品用高压液相色谱仪检测纯度，色谱条件：分析柱TSK-GELG4000PWX(TosohCorporation，Tokyo，Japan)；柱温35℃；流动相：蒸馏水；流速：1mL/min；检测器为蒸发光散射检测器；上样量为10μL。色谱图见图1。
本发明得到的金福菇多糖TLH-3与CN102603908A公开的一种天然抗氧化剂金福菇多糖的制备方法中的TL-3从理化性质和活性上分析为同一个多糖。
本发明以金福菇为原料，利用闪式提取技术，快速、高效的提取金福菇多糖TLH-3，然后利用季铵盐沉淀法和超滤技术进行多糖纯化。本发明方法步骤简便、易于操作，金福菇多糖TLH-3的提取率为5％以上，产品纯度高达90％以上，整个工艺完成时间小于5小时，大大提高了生产效率，降低了能耗，属于典型的绿色环保工艺。本发明整个工艺过程不超过40℃，金福菇多糖TLH-3的得率高，药理效果强，适宜于工业化生产，所得产品市场前景十分看好，经济效益广阔。
四、附图说明
图1为本发明提取得到的金福菇多糖TLH-3的高压液相色谱图。
五、具体实施方式
实施例1：
本实施例中以金福菇为原料提取分离金福菇多糖TLH-3的方法如下：
(1)将金福菇放入闪式提取器中，加入20质量倍的水，常温下提取30s，提取电压为100V；
(2)将步骤(1)得到的提取液离心分离，收集上清液；离心分离的参数为：离心转速为3800r/min，离心时间为22min；
(3)将步骤(2)得到的上清液加入质量浓度3％的CTAB溶液中，静置1.0h，离心并收集沉淀物，将所得沉淀物用质量浓度10％的NaCl溶液溶解，得到酸性亚组分溶液；
(4)将步骤(3)得到的酸性亚组分溶液在25℃下用1000道尔顿的超滤膜进行超滤脱盐，超滤驱动压力0.10MPa；然后在25℃下用1万道尔顿的超滤膜进行超滤，超滤驱动压力0.10MPa，滤出液于-50℃冷冻干燥后得到金福菇多糖TLH-3。
本实施例得到的金福菇多糖TLH-3的提取率为5.3％，纯度达到92％。
实施例2：
本实施例中以金福菇为原料提取分离金福菇多糖TLH-3的方法如下：
(1)将金福菇放入闪式提取器中，加入30质量倍的水，常温下提取35s，提取电压为110V；
(2)将步骤(1)得到的提取液离心分离，收集上清液；离心分离的参数为：离心转速为4000r/min，离心时间为20min；
(3)将步骤(2)得到的上清液加入质量浓度5％的CTAB溶液中，静置1.2h，离心并收集沉淀物，将所得沉淀物用质量浓度10％的NaCl溶液溶解，得到酸性亚组分溶液；
(4)将步骤(3)得到的酸性亚组分溶液在30℃下用1200道尔顿的超滤膜进行超滤脱盐，超滤驱动压力0.13MPa；然后在30℃下用3万道尔顿的超滤膜进行超滤，超滤驱动压力0.13MPa，滤出液于-50℃冷冻干燥后得到金福菇多糖TLH-3。
本实施例得到的金福菇多糖TLH-3的提取率为5.5％，纯度达到91％。
实施例3：
本实施例中以金福菇为原料提取分离金福菇多糖TLH-3的方法如下：
(1)将金福菇放入闪式提取器中，加入35质量倍的水，常温下提取40s，提取电压为120V；
(2)将步骤(1)得到的提取液离心分离，收集上清液；离心分离的参数为：离心转速为4200r/min，离心时间为18min；
(3)将步骤(2)得到的上清液加入质量浓度7％的CTAB溶液中，静置1.3h，离心并收集沉淀物，将所得沉淀物用质量浓度10％的NaCl溶液溶解，得到酸性亚组分溶液；
(4)将步骤(3)得到的酸性亚组分溶液在23℃下用1300道尔顿的超滤膜进行超滤脱盐，超滤驱动压力0.15MPa；然后在33℃下用5万道尔顿的超滤膜进行超滤，超滤驱动压力0.15MPa，滤出液于-50℃冷冻干燥后得到金福菇多糖TLH-3。
本实施例得到的金福菇多糖TLH-3的提取率为5.7％，纯度达到94％。
实施例4：
本实施例中以金福菇为原料提取分离金福菇多糖TLH-3的方法如下：
(1)将金福菇放入闪式提取器中，加入40质量倍的水，常温下提取45s，提取电压为130V；
(2)将步骤(1)得到的提取液用三层滤纸进行减压抽滤，收集上清液；
(3)将步骤(2)得到的滤液加入质量浓度10％的CTAB溶液中，静置1.5h，离心并收集沉淀物，将所得沉淀物用质量浓度10％的NaCl溶液溶解，得到酸性亚组分溶液；
(4)将步骤(3)得到的酸性亚组分溶液在35℃下用1500道尔顿的超滤膜进行超滤脱盐，超滤驱动压力0.18MPa；然后在35℃下用10万道尔顿的超滤膜进行超滤，超滤驱动压力0.18MPa，滤出液于-50℃冷冻干燥后得到金福菇多糖TLH-3。
本实施例得到的金福菇多糖TLH-3的提取率为5.2％，纯度达到96％。
Claims (1)
1.一种以金福菇为原料提取分离金福菇多糖TLH-3的方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）将金福菇放入闪式提取器中，加入20-40质量倍的水，常温下提取30-45s；
（2）将步骤（1）得到的提取液用离心分离或减压抽滤的方式去除颗粒性杂质，收集上清液；
（3）将步骤（2）得到的上清液加入质量浓度1-10%的十六烷基三甲基溴化铵溶液中，静置1.0-1.5h，离心并收集沉淀物，将所得沉淀物用质量浓度10%的NaCl溶液溶解，得到酸性亚组分溶液；
（4）将步骤（3）得到的酸性亚组分溶液在25-35℃下通过两次超滤膜超滤，滤出液冷冻干燥后得到金福菇多糖TLH-3；第一次超滤的超滤膜为1000-1500道尔顿，超滤驱动压力为0.10-0.18MPa；第二次超滤的超滤膜为1-10万道尔顿，超滤驱动压力为0.10-0.18MPa。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410318373.3A CN104045733B (zh) | 2014-07-04 | 2014-07-04 | 一种以金福菇为原料提取分离金福菇多糖tlh-3的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410318373.3A CN104045733B (zh) | 2014-07-04 | 2014-07-04 | 一种以金福菇为原料提取分离金福菇多糖tlh-3的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104045733A CN104045733A (zh) | 2014-09-17 |
| CN104045733B true CN104045733B (zh) | 2016-02-17 |
Family
ID=51499170
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410318373.3A Expired - Fee Related CN104045733B (zh) | 2014-07-04 | 2014-07-04 | 一种以金福菇为原料提取分离金福菇多糖tlh-3的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104045733B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106668816A (zh) * | 2017-01-20 | 2017-05-17 | 江苏美爱斯化妆品股份有限公司 | 一种天然防脱育发液及其制备方法 |
| CN112694538A (zh) * | 2019-10-23 | 2021-04-23 | 上海承曜生物科技有限公司 | 一种具有美白保湿活性的东方美人茶多糖 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102040749A (zh) * | 2009-10-16 | 2011-05-04 | 上海医药工业研究院 | 紫芝菌丝体多糖精制物、其制备方法和用途 |
| CN102603908A (zh) * | 2012-01-18 | 2012-07-25 | 安徽大学 | 一种天然抗氧化剂金福菇多糖的制备方法 |
| CN102977220A (zh) * | 2012-11-20 | 2013-03-20 | 安徽大学 | 一种植物与微生物多糖的纯物理制备方法 |
-
2014
- 2014-07-04 CN CN201410318373.3A patent/CN104045733B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102040749A (zh) * | 2009-10-16 | 2011-05-04 | 上海医药工业研究院 | 紫芝菌丝体多糖精制物、其制备方法和用途 |
| CN102603908A (zh) * | 2012-01-18 | 2012-07-25 | 安徽大学 | 一种天然抗氧化剂金福菇多糖的制备方法 |
| CN102977220A (zh) * | 2012-11-20 | 2013-03-20 | 安徽大学 | 一种植物与微生物多糖的纯物理制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104045733A (zh) | 2014-09-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103265520B (zh) | 一种用酿酒后葡萄籽制备低聚原花青素和单宁色素的方法 | |
| CN101735648B (zh) | 双水相萃取体系分离纯化甜菜红色素的方法 | |
| CN104558088A (zh) | 一种从罗汉果中提取罗汉果苷v的方法 | |
| CN104292327A (zh) | 从螺旋藻中提取藻胆蛋白的方法 | |
| CN103819577B (zh) | 一种螺旋藻多糖的制备方法 | |
| CN102942550B (zh) | 一种从黑豆皮中提取花青素的方法 | |
| WO2015103974A1 (zh) | 麦角硫因的提取及纯化方法 | |
| CN202124582U (zh) | 一种从猫豆中提取左旋多巴的膜处理*** | |
| CN104059163B (zh) | 青海柴达木枸杞多糖提取分离制备新方法 | |
| CN102604424A (zh) | 一种紫甘薯花色苷的提取方法 | |
| CN105294636A (zh) | 一种制备低聚原花青素的方法 | |
| CN104672286A (zh) | 从蓝莓叶中富集纯化α-熊果苷的方法 | |
| CN103058834A (zh) | 一种从天然橡胶制胶废水中提取白坚木皮醇的方法 | |
| CN103102408B (zh) | 一种从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法 | |
| CN104031158A (zh) | 一种从海带中提取硫酸酯多糖的工艺 | |
| CN104231097A (zh) | 枸杞多糖的制备方法 | |
| CN102660137A (zh) | 一种高效制备红枣天然色素的方法 | |
| CN103054021A (zh) | 一种从白刺果皮中提取复合物的方法 | |
| CN104045733B (zh) | 一种以金福菇为原料提取分离金福菇多糖tlh-3的方法 | |
| CN101624418B (zh) | 那西肽粉的制备方法 | |
| CN102627679A (zh) | 一种从广金钱草中制备夏佛塔苷的方法 | |
| CN104479040A (zh) | 一种竹荪多糖的提取工艺 | |
| CN104844721A (zh) | 一种茶树菇多糖的提取分离方法 | |
| CN102618514B (zh) | 超滤提取辣根过氧化物酶的方法 | |
| CN102321125A (zh) | 一种从五倍子中提取单宁酸的工艺 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20160217 Termination date: 20180704 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |