CN103435588A - 一种制备蓝莓花青素的新方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种制备蓝莓花青素的新方法,具体是涉及一种酶解和微波相结合的方法。其特点是,包括如下步骤:a、用植物组织破坏提取法粉碎蓝莓果实;b、将粉碎后的蓝莓酶解;c、微波萃取;d、采用大孔吸附树脂对萃取液中的花青素进行吸附、纯化处理,再经过减压浓缩、冷冻干燥,得到蓝莓花青素。采用这种方法处理花青素,操作简单,污染少,萃取时间短,提取率大,产品纯度高,适用于工业化生产蓝莓花青素。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物中有效成分的分离纯化方法,特别是涉及一种制备蓝莓花青素的新方法。
背景技术
蓝莓,学名越橘,杜鹃花科越橘属植物,多年生落叶或常绿灌木。蓝莓果实多为深蓝色,近圆形,是少有的蓝色食物之一。果实营养丰富,含有维生素、蛋白质、花青素及黄酮等多种活性成分,其中花青素含量位居所有水果、蔬菜之首。野生种蓝莓每百克鲜果中花青素含量高达0.33~3.38g,栽培种每百克鲜果中一般为0.1~0.2g。花青素又称花色素,是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素,属黄酮类化合物,多以糖苷的形式存在,也称花色苷。花色素具有抗氧化、抗肿瘤、保护肝脏、增强视力等多种生理功能,在食品、化妆、医药等方面有着巨大的应用前景。
目前对花青素的提取的研究主要有水提或有机溶剂提取法、超临界流体萃取法等。传统的水提或溶剂提取法存在由于温度过高会破坏花青素的结构,影响其生物活性及产率降低等问题;现代的超临界萃取法虽然提取率高,但因设备昂贵,不适合工业化生产。而植物组织破碎提取、酶解-微波提取相结合的方式既可以较温和的将植物组织破碎、分解,较大幅度提高得率,同时还不易破坏成分的立体结构。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是:针对现有技术的不足,提供一种高效、低成本、高得率、高纯度、适合工业化生产的制备蓝莓花青素的方法。
本发明的技术方案按照下列步骤进行:
1.用植物组织破碎提取法粉碎蓝莓果,其中加入蓝莓0.5~2倍重量比的30~50%的乙醇溶液,植物组织破碎提取器转速为1000~3000r/min,提取时间0.5~1.0min;
2.向上述提取液中加入蓝莓重量1~3%的纤维素酶,酶解温度为60~80℃,调节提取液PH值为2~4,酶解时间为50~70min,减压浓缩,得浓缩物;
3.将浓缩物加入40~60%的乙醇,固料比为1:15~20,置于微波中进行萃取,微波条件为:功率100~200W,提取时间为1.5~2min,之后离心除杂,得上清液;
4.将上清液加入到大孔吸附树脂柱,先用2~3倍样品液的蒸馏水洗脱,再用60~80%的乙醇溶液洗脱,洗脱液体积为样品液的15~20倍,收集洗脱液,最后经旋转蒸发,冷冻干燥得到蓝莓花青素粉末。
步骤4中所述的大孔吸附树脂型号为NKA-9、D-101、AB-8等。
与现有技术相比,本发明采用植物组织破碎提取法处理原料,整个过程仅在数秒至数十秒内完成,同时由于免去了加热,从而可有效的避免花青素成分的破坏。酶解-微波提取法提取花青素,对蓝莓花青素成分的损耗低,提取率大,产品的纯度高。本发明方法简单,容易实施,使用效果好。
下面将结合具体实施方式进一步说明本发明,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式:
实施例1:称取蓝莓鲜果100g,用植物组织破碎提取法粉碎蓝莓果,加入蓝莓0.5倍重量比的30%的乙醇溶液,植物组织破碎提取器转速为1500r/min,提取时间1.0min;向上述提取液中加入蓝莓重量1%的纤维素酶,酶解温度为60℃,调节提取液PH值为2,酶解时间为50min,减压浓缩,得浓缩物;向浓缩液中加入40%的乙醇,固料比为1:15,置于功率100W的微波中进行提取,提取时间为1.5min,之后离心除杂,得上清液;将上述上清液加入到AB-8大孔吸附树脂柱,先用2倍样品液的蒸馏水洗脱,再用60%的乙醇溶液洗脱,洗脱液体积为样品液的15倍,收集洗脱液,最后经旋转蒸发,冷冻干燥得到蓝莓花青素粉末254.2mg,经HPLC检测,其纯度为54.3%。
实施例2:称取蓝莓鲜果100g,用植物组织破碎提取法粉碎蓝莓果,加入蓝莓1倍重量比的50%的乙醇溶液,植物组织破碎提取器转速为2000r/min,提取时间0.8min;向上述提取液中加入蓝莓重量2%的纤维素酶,酶解温度为70℃,调节提取液PH值为3.5,酶解时间为60min,减压浓缩,得浓缩物;向浓缩液中加入50%的乙醇,固料比为1:18,置于功率150W的微波中进行提取,提取时间为1.8min,之后离心除杂,得上清液;将上述上清液加入到NKA-9大孔吸附树脂柱,先用3倍样品液的蒸馏水洗脱,再用70%的乙醇溶液洗脱,洗脱液体积为样品液的20倍,收集洗脱液,最后经旋转蒸发,冷冻干燥得到蓝莓花青素粉末256.8mg,经HPLC检测,其纯度为56.9%。
实施例3:称取蓝莓鲜果100g,用植物组织破碎提取法粉碎蓝莓果,加入蓝莓1.5倍重量比的40%的乙醇溶液,植物组织破碎提取器转速为3000r/min,提取时间0.5min;向上述提取液中加入蓝莓重量3%的纤维素酶,酶解温度为80℃,调节提取液PH值为4,酶解时间为70min,减压浓缩,得浓缩物;向浓缩液中加入60%的乙醇,固料比为1:20,置于功率200W的微波中进行提取,提取时间为2.0min,之后离心除杂,得上清液;将上述上清液加入到D-101大孔吸附树脂柱,先用2.5倍样品液的蒸馏水洗脱,再用80%的乙醇溶液洗脱,洗脱液体积为样品液的18倍,收集洗脱液,最后经旋转蒸发,冷冻干燥得到蓝莓花青素粉末255.8mg,经HPLC检测,其纯度为53.5%。
Claims (3)
1.一种制备蓝莓花青素的新方法,包括以下步骤:
a、用植物组织破碎提取法粉碎蓝莓鲜果,其中加入蓝莓0.5~2倍重量比的30~50%的乙醇溶液,植物组织破碎提取器转速为1000~3000r/min,提取时间0.5~1.0min;
b、向上述提取液中加入蓝莓重量1~3%的纤维素酶,酶解温度为60~80℃,调节提取液PH值为2~4,酶解时间为50~70min,减压浓缩,得浓缩物;
c、将浓缩物加入40~60%的乙醇,固料比为1:15~20,置于微波中进行萃取,微波条件为:功率100~200W,提取时间为1.5~2min,之后离心除杂,得上清液;
d、将上清液加入到大孔吸附树脂柱,先用2~3倍样品液的蒸馏水洗脱,再用60~80%的乙醇溶液洗脱,洗脱液体积为样品液的15~20倍,收集洗脱液,最后经旋转蒸发,冷冻干燥得到蓝莓花青素粉末。
2.根据权利要求1所述的制备蓝莓花青素的新方法,其特征是,步骤b中所述的调节PH值的酸为盐酸、硫酸等无机酸。
3.根据权利要求1所述的制备蓝莓花青素的新方法,其特征是,步骤d中所述的大孔吸附树脂型号为NKA-9、D-101、AB-8等。
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