CN103435588A

CN103435588A - 一种制备蓝莓花青素的新方法

Info

Publication number: CN103435588A
Application number: CN2013104127651A
Authority: CN
Inventors: 苏刘花
Original assignee: Nanjing Zelang Agricultural Development Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Agricultural Development Co Ltd
Priority date: 2013-09-12
Filing date: 2013-09-12
Publication date: 2013-12-11

Abstract

本发明涉及一种制备蓝莓花青素的新方法，具体是涉及一种酶解和微波相结合的方法。其特点是，包括如下步骤：a、用植物组织破坏提取法粉碎蓝莓果实；b、将粉碎后的蓝莓酶解；c、微波萃取；d、采用大孔吸附树脂对萃取液中的花青素进行吸附、纯化处理，再经过减压浓缩、冷冻干燥，得到蓝莓花青素。采用这种方法处理花青素，操作简单，污染少，萃取时间短，提取率大，产品纯度高，适用于工业化生产蓝莓花青素。

Description

一种制备蓝莓花青素的新方法

技术领域

本发明涉及一种植物中有效成分的分离纯化方法，特别是涉及一种制备蓝莓花青素的新方法。

背景技术

蓝莓，学名越橘，杜鹃花科越橘属植物，多年生落叶或常绿灌木。蓝莓果实多为深蓝色，近圆形，是少有的蓝色食物之一。果实营养丰富，含有维生素、蛋白质、花青素及黄酮等多种活性成分，其中花青素含量位居所有水果、蔬菜之首。野生种蓝莓每百克鲜果中花青素含量高达0.33~3.38g，栽培种每百克鲜果中一般为0.1~0.2g。花青素又称花色素，是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，属黄酮类化合物，多以糖苷的形式存在，也称花色苷。花色素具有抗氧化、抗肿瘤、保护肝脏、增强视力等多种生理功能，在食品、化妆、医药等方面有着巨大的应用前景。

目前对花青素的提取的研究主要有水提或有机溶剂提取法、超临界流体萃取法等。传统的水提或溶剂提取法存在由于温度过高会破坏花青素的结构，影响其生物活性及产率降低等问题；现代的超临界萃取法虽然提取率高，但因设备昂贵，不适合工业化生产。而植物组织破碎提取、酶解-微波提取相结合的方式既可以较温和的将植物组织破碎、分解，较大幅度提高得率，同时还不易破坏成分的立体结构。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对现有技术的不足，提供一种高效、低成本、高得率、高纯度、适合工业化生产的制备蓝莓花青素的方法。

本发明的技术方案按照下列步骤进行：

1.用植物组织破碎提取法粉碎蓝莓果，其中加入蓝莓0.5~2倍重量比的30~50%的乙醇溶液，植物组织破碎提取器转速为1000~3000r/min，提取时间0.5~1.0min；

2.向上述提取液中加入蓝莓重量1~3%的纤维素酶，酶解温度为60~80℃，调节提取液PH值为2~4，酶解时间为50~70min，减压浓缩，得浓缩物；

3.将浓缩物加入40~60%的乙醇，固料比为1:15~20，置于微波中进行萃取，微波条件为：功率100~200W，提取时间为1.5~2min，之后离心除杂，得上清液；

4.将上清液加入到大孔吸附树脂柱，先用2~3倍样品液的蒸馏水洗脱，再用60~80%的乙醇溶液洗脱，洗脱液体积为样品液的15~20倍，收集洗脱液，最后经旋转蒸发，冷冻干燥得到蓝莓花青素粉末。

步骤4中所述的大孔吸附树脂型号为NKA-9、D-101、AB-8等。

与现有技术相比，本发明采用植物组织破碎提取法处理原料，整个过程仅在数秒至数十秒内完成，同时由于免去了加热，从而可有效的避免花青素成分的破坏。酶解-微波提取法提取花青素，对蓝莓花青素成分的损耗低，提取率大，产品的纯度高。本发明方法简单，容易实施，使用效果好。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：称取蓝莓鲜果100g，用植物组织破碎提取法粉碎蓝莓果，加入蓝莓0.5倍重量比的30%的乙醇溶液，植物组织破碎提取器转速为1500r/min，提取时间1.0min；向上述提取液中加入蓝莓重量1%的纤维素酶，酶解温度为60℃，调节提取液PH值为2，酶解时间为50min，减压浓缩，得浓缩物；向浓缩液中加入40%的乙醇，固料比为1:15，置于功率100W的微波中进行提取，提取时间为1.5min，之后离心除杂，得上清液；将上述上清液加入到AB-8大孔吸附树脂柱，先用2倍样品液的蒸馏水洗脱，再用60%的乙醇溶液洗脱，洗脱液体积为样品液的15倍，收集洗脱液，最后经旋转蒸发，冷冻干燥得到蓝莓花青素粉末254.2mg，经HPLC检测，其纯度为54.3%。

实施例2：称取蓝莓鲜果100g，用植物组织破碎提取法粉碎蓝莓果，加入蓝莓1倍重量比的50%的乙醇溶液，植物组织破碎提取器转速为2000r/min，提取时间0.8min；向上述提取液中加入蓝莓重量2%的纤维素酶，酶解温度为70℃，调节提取液PH值为3.5，酶解时间为60min，减压浓缩，得浓缩物；向浓缩液中加入50%的乙醇，固料比为1:18，置于功率150W的微波中进行提取，提取时间为1.8min，之后离心除杂，得上清液；将上述上清液加入到NKA-9大孔吸附树脂柱，先用3倍样品液的蒸馏水洗脱，再用70%的乙醇溶液洗脱，洗脱液体积为样品液的20倍，收集洗脱液，最后经旋转蒸发，冷冻干燥得到蓝莓花青素粉末256.8mg，经HPLC检测，其纯度为56.9%。

实施例3：称取蓝莓鲜果100g，用植物组织破碎提取法粉碎蓝莓果，加入蓝莓1.5倍重量比的40%的乙醇溶液，植物组织破碎提取器转速为3000r/min，提取时间0.5min；向上述提取液中加入蓝莓重量3%的纤维素酶，酶解温度为80℃，调节提取液PH值为4，酶解时间为70min，减压浓缩，得浓缩物；向浓缩液中加入60%的乙醇，固料比为1:20，置于功率200W的微波中进行提取，提取时间为2.0min，之后离心除杂，得上清液；将上述上清液加入到D-101大孔吸附树脂柱，先用2.5倍样品液的蒸馏水洗脱，再用80%的乙醇溶液洗脱，洗脱液体积为样品液的18倍，收集洗脱液，最后经旋转蒸发，冷冻干燥得到蓝莓花青素粉末255.8mg，经HPLC检测，其纯度为53.5%。

Claims

1.一种制备蓝莓花青素的新方法，包括以下步骤：

a、用植物组织破碎提取法粉碎蓝莓鲜果，其中加入蓝莓0.5~2倍重量比的30~50%的乙醇溶液，植物组织破碎提取器转速为1000~3000r/min，提取时间0.5~1.0min；

b、向上述提取液中加入蓝莓重量1~3%的纤维素酶，酶解温度为60~80℃，调节提取液PH值为2~4，酶解时间为50~70min，减压浓缩，得浓缩物；

c、将浓缩物加入40~60%的乙醇，固料比为1:15~20，置于微波中进行萃取，微波条件为：功率100~200W，提取时间为1.5~2min，之后离心除杂，得上清液；

d、将上清液加入到大孔吸附树脂柱，先用2~3倍样品液的蒸馏水洗脱，再用60~80%的乙醇溶液洗脱，洗脱液体积为样品液的15~20倍，收集洗脱液，最后经旋转蒸发，冷冻干燥得到蓝莓花青素粉末。

2.根据权利要求1所述的制备蓝莓花青素的新方法，其特征是，步骤b中所述的调节PH值的酸为盐酸、硫酸等无机酸。

3.根据权利要求1所述的制备蓝莓花青素的新方法，其特征是，步骤d中所述的大孔吸附树脂型号为NKA-9、D-101、AB-8等。