CN102370674A - 一种桑寄生提取物及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于植物药物化学领域，提供了一种桑寄生提取物，由桑寄生的干燥茎叶为原料，经提取、纯化制备获得，以篇蓄苷、槲皮素和槲皮苷三个黄酮类化合物来计算，在所述的提取物中，所述的黄酮类化合物的重量百分比大于50％。本发明还提供了上述的桑寄生提取物的制备方法，本发明还提供了一种上述的桑寄生提取物在制备预防或治疗高尿酸血症或痛风的药物或保健食品中的应用。动物试验结果表明，桑寄生总黄酮对高尿酸血症模型动物血中尿酸有显著的降低作用，安全性高，可用于制备预防或治疗高尿酸血症和痛风的药物或保健食品。
Description
技术领域：
本发明涉及生物化学领域，尤其涉及桑寄生黄酮类化合物，特别是一种桑寄生提取物及其制备方法与应用。
背景技术：
痛风是由长期嘌呤代谢障碍、血尿酸增高引起的代谢性疾病；高尿酸血症是痛风的重要生化基础，同时也是许多疾病的危险因素，如高尿酸血症不仅能够诱发痛风性关节炎，尿石症、尿酸性肾病，而且血尿酸水平升高与脂质代谢异常、肥胖等疾病密切相关。
过去本病在亚洲或东方人中比较少见，在欧美较为多见，但自20世纪90年代以后，日本、台湾等地区经济迅速发展，痛风及高尿酸血症逐渐成为常见病，我国在20世纪80年代后患病情况也呈逐年上升趋势，高尿酸血症/痛风已成为威胁人类健康的重要疾病。
西医对高尿酸血症和痛风的治疗主要有阻止嘌呤合成的药物(如别嘌呤醇)及促尿酸***(丙磺舒、苯溴马龙)，毒副作用大，不适合长期使用。中药/天然药物治疗痛风疗效确切，毒副作用小，近年来引起了人们广泛关注。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种桑寄生提取物，所述的这种桑寄生提取物要解决现有技术中的治疗高尿酸血症和痛风的药物毒副作用大，不适合长期使用的技术问题。
本发明的这种桑寄生提取物，由桑寄生的干燥茎叶为原料，经提取、纯化制备获得，以篇蓄苷、槲皮素和槲皮苷三个黄酮类化合物来计算，在所述的提取物中，所述的黄酮类化合物的重量百分比大于50％。
本发明还提供了上述桑寄生提取物的制备方法，包括一个桑寄生的干燥茎叶回流提取的步骤，还包括一个浓缩、过滤回流提取液的步骤，还包括一个将滤液采用树脂吸附、洗脱的步骤，还包括一个采用乙醇洗脱、浓缩的步骤，还包括一个干燥桑寄生提取物浓缩液的步骤，得到黄酮的总含量大于50％的提取物。
进一步的，在回流提取的步骤中，采用水或者0％～80％浓度的乙醇溶液提取。
进一步的，在采用树脂吸附、洗脱的步骤中，采用大孔树脂柱层析或聚酰胺柱层析。
本发明还提供了上述的桑寄生提取物的另外一种制备方法，包括一个桑寄生的干燥茎叶回流提取的步骤，还包括一个浓缩、过滤回流提取液的步骤，还包括一个将滤液脱脂、萃取的步骤，还包括一个将萃取液浓缩的步骤，还包括一个干燥桑寄生提取物浓缩液的步骤，得到黄酮的总含量大于50％的提取物。
进一步的，在回流提取的步骤中，采用水或者0％～80％浓度的乙醇溶液提取。
进一步的，在一个将滤液脱脂、萃取的步骤中，采用石油醚脱脂，采用乙酸乙酯萃取。
本发明还提供了一种上述的桑寄生提取物在制备预防或治疗高尿酸血症的药物或保健食品中的应用。
本发明还提供了一种上述的桑寄生提取物在制备预防或治疗痛风的药物或保健食品中的应用。
桑寄生总黄酮是从桑寄生科(Loranthaceae)植物桑寄生Taxilluschinensis(DC.)Danser的干燥带叶茎枝中提取、分离得到的有效部位，其主要成分为篇蓄苷、槲皮素与槲皮苷化合物，药理试验证明该有效部位具有明显降低高尿酸血症模型动物血中尿酸作用，安全性高，能用于制备预防或治疗高尿酸血症和/或痛风的药物或保健食品。
篇蓄苷、槲皮素与槲皮苷化合物的结构如下：
篇蓄苷
槲皮苷
槲皮素 Quercetin
本发明和已有技术相比，其效果是积极和明显的。动物试验结果表明，桑寄生总黄酮对高尿酸血症模型动物血中尿酸有显著的降低作用，安全性高，可用于制备预防或治疗高尿酸血症和痛风的药物或保健食品。
附图说明：
图1显示了在小鼠高尿酸血症模型中，采用低剂量总黄酮、高剂量总黄酮、别嘌呤醇治疗后，各组小鼠的尿酸水平。与模型组相比，具有显著性差异*p＜0.05和非常显著性差异**p＜0.01。
以下通过具体实施例详细说明本发明技术方案，并不以此限定本发明的实施范围。
具体实施方式：
实施例1
10公斤桑寄生药材，装入回流提取罐，以80L纯水回流提取1.5小时；过滤，滤渣再用40L纯水回流提取1小时，过滤，合并两次提取液，浓缩至10L，过滤，滤液吸附于D101树脂，用5倍柱体积的10％乙醇洗脱去除杂质，再用5倍柱体积的50％乙醇洗脱，洗脱液浓缩，干燥得桑寄生总黄酮350g，黄酮的总含量达58％(以篇蓄苷、槲皮素与槲皮苷计)。
实施例2
10公斤桑寄生药材，装入回流提取罐，80L的40％乙醇回流提取1.5小时；过滤，滤渣再用40L的40％乙醇回流提取1小时，过滤，合并两次提取液，浓缩回收乙醇，加水稀释至10L后，过滤，滤液上聚酰胺吸附树脂，用5倍柱体积的10％乙醇洗脱去除杂质，再用5倍柱体积的60％乙醇洗脱，洗脱液浓缩，干燥得桑寄生总黄酮310g，黄酮的总含量达63％(以篇蓄苷、槲皮素与槲皮苷计)。
实施例3
10公斤桑寄生药材，装入回流提取罐，以80L的80％乙醇回流提取1.5小时；过滤，滤渣再用40L的80％乙醇回流提取1小时，过滤，合并两次提取液，浓缩回收乙醇，浓缩液加入3倍量水稀释后，加入1/2量沸程为60～90℃的石油醚脱脂3次，水层用1/2量乙酸乙酯萃取三次，萃取液合并、浓缩，干燥得桑寄生总黄酮380g，黄酮的总含量可达55％(以篇蓄苷、槲皮素与槲皮苷计)。
实施例4
实验模型：小鼠高尿酸血症模型。
实验方法：取雄性昆明种小鼠50只，体重24±2g，随机分为5组，分别为空白组、模型组、阳性药物组、药物高剂量组、药物低剂量组。给药剂量分别为：低剂量20mg/kg，高剂量80mg/kg，阳性药物别嘌呤醇5mg/kg。阳性药物组、药物高剂量组、药物低剂量组分别给药10天，每天1次。末次给药1小时后，除空白组外，其余各组动物腹腔注射氧嗪酸钾盐300mg/kg造成小鼠高尿酸血症。注射1h后，各组动物摘眼球取血，取血清测定血尿酸值，进行组间差异性比较。(上述实验用桑寄生总黄酮采用实施例2获得的产品)
实验步骤：
1.昆明小鼠，适应性培养1周(期间完成分组、标记及称重)；
2.阳对组及各药物组分别给药10天，每天1次；正常对照组给予溶剂。
3.末次给药1小时后，除空白组外，其余各组动物腹腔注射氧嗪酸钾盐300mg/kg造成小鼠高尿酸血症。
4.注射后1h，小鼠摘眼球取血，约1ml。室温静置1h以上，4度2500r/min低温离心15分钟后取上清，以200ul每管分装冻存于-20摄氏度冰箱。
5.血清尿酸浓度测定。
5.1取血清作为测定样本；
5.2测定设空白管、标准管和样本管，按照表格分两步加液；
R1和R2为尿酸试剂盒中的两种试剂，R1为抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶和4-氨基安替比林的磷酸盐缓冲液；R2为尿酸酶和N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺的磷酸盐缓冲液。(尿酸试剂盒购自上海科华东菱诊断用品有限公司，批号：20091212)。
5.3混匀各管，37℃水浴5分钟后，冷却至室温，在分光光度计550nm波长处比色，以试剂空白管校零，读取样本管与标准管的吸光值。
5.4根据吸光值，计算样本的尿酸浓度，尿酸(mg/L)＝样本管吸光值/标准管吸光值×100(标准液含量)
实验结果：总黄酮的低剂量组、高剂量组、阳性对照组的尿酸水平明显降低，与模型组相比，具有显著性差异*p＜0.05和非常显著性差异**p＜0.01，结果如图1所示。
Claims (9)
1.一种桑寄生提取物，其特征在于：由桑寄生的干燥茎叶为原料，经提取、纯化制备获得，以篇蓄苷、槲皮素和槲皮苷三个黄酮类化合物来计算，在所述的提取物中，所述的黄酮类化合物的重量百分比大于50％。
2.权利要求1所述的桑寄生提取物的制备方法，其特征在于：包括一个桑寄生的干燥茎叶回流提取的步骤，还包括一个浓缩、过滤回流提取液的步骤，还包括一个将滤液采用树脂吸附、洗脱的步骤，还包括一个采用乙醇洗脱、浓缩的步骤，还包括一个干燥桑寄生提取物浓缩液的步骤，得到黄酮的总含量大于50％的提取物。
3.如权利要求2所述的桑寄生提取物制备方法，其特征在于：在回流提取的步骤中，采用水或者0％～80％浓度的乙醇溶液提取。
4.如权利要求2所述的桑寄生提取物制备方法，其特征在于：在采用树脂吸附、洗脱的步骤中，采用大孔树脂柱层析或聚酰胺柱层析。
5.权利要求1所述的桑寄生提取物制备方法，其特征在于：包括一个桑寄生的干燥茎叶回流提取的步骤，还包括一个浓缩、过滤回流提取液的步骤，还包括一个将滤液脱脂、萃取的步骤，还包括一个将萃取液浓缩的步骤，还包括一个干燥桑寄生提取物浓缩液的步骤，得到黄酮的总含量大于50％的提取物。
6.如权利要求5所述的桑寄生提取物制备方法，其特征在于：在回流提取的步骤中，采用水或者0％～80％浓度的乙醇溶液提取。
7.如权利要求5所述的桑寄生提取物制备方法，其特征在于：在所述的将滤液脱脂、萃取的步骤中，采用石油醚脱脂，采用乙酸乙酯萃取。
8.权利要求1所述的桑寄生提取物在制备预防或治疗高尿酸血症的药物或保健食品中的应用。
9.权利要求1所述的桑寄生提取物在制备预防或治疗痛风的药物或保健食品中的应用。
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Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107467669A (zh) * | 2017-09-05 | 2017-12-15 | 山东健康源生物工程有限公司 | 一种氨糖钙保健品及其制备方法 |
| CN108379312A (zh) * | 2018-05-25 | 2018-08-10 | 云南中医学院 | 红花寄生在制备痛风防治药物或保健品中的应用 |
| CN112322422A (zh) * | 2020-11-25 | 2021-02-05 | 梧州学院 | 一种桑寄生米酒及其酿造方法 |
| CN112471509A (zh) * | 2020-11-25 | 2021-03-12 | 梧州学院 | 一种高槲皮素含量桑寄生糖浆剂及其制备方法 |
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Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 吕琳等: "桑寄生中槲皮素、槲皮苷的鉴定与含量测定", 《中成药》 * |
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