CN102091299B - 一种治疗病毒性肝炎药物组合物的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗病毒性肝炎的药物组合物检测方法，该药物组合物的原料药组成为：茵陈、板蓝根、绵马贯众、茯苓、郁金、半枝莲、广藿香等。本发明所提供的中药组合物的检测方法，是通过大量具体创造性试验筛选后得到，鉴别方法中通过对样品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得鉴别专属性很好，而且方法经济适用、结果快速，并且对不同的薄层板都能应用。含量测定方法中通过对样品、供试品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得含量测定方法可以很有效的对产品进行质量控制，并且用该方法测定的产品相比其他方法测定的产品在药效上表现的更为稳定。
Description
本发明为分案申请，原案申请号为200710119920.5，原案申请日为2007 年8月3日，原案名称为一种治疗病毒性肝炎的药物组合物及质量控制方 法。
发明领域
本发明涉及一种药物组合物及制备方法和质量控制方法，特别涉及一种治疗病毒性肝炎的药物组合物及制备方法和质量控制方法。
背景技术
病毒性肝炎是由多种肝炎病毒引起的常见传染病，具有传染性强、传播途径复杂、流行面广泛，发病率较高等特点。临床上主要表现为乏力、食欲减退、恶心、呕吐、肝肿大及肝功能损害，部分病人可有黄疸和发热。有些患者出现荨麻疹、关节痛或上呼吸道症状，严重者甚至会发展为肝硬化甚至肝癌，严重危害人类健康。目前临床上所用治疗病毒性肝炎的药物虽然具有一定的疗效，但不同程度地存在易使机体产生抗药性及成瘾性、副作用明显等缺陷。
发明内容
本发明目的在于提供一种药物组合物；本发明另一目的在于提供一种治疗病毒性肝炎的药物组合物；本发明的第三个目的在于提供该药物组合物的制备方法；本发明的第四个目的在于提供该药物组合物的质量控制方法。
本发明目的是通过如下技术方案1、2实现：
技术方案1：
本发明药物组合物的原料药组成为：
茯苓500-1500重量份、茵陈500-1500重量份、白术500-1500重量份、郁金150-450重量份、当归250-750重量份、琥珀50-150重量份、白芍(炒)500-1500重量份、半枝莲500-1500重量份、砂仁100-300重量份、虎杖250-750重量份、丹参500-1500重量份、泽兰250-750重量份、柴胡150-450重量份、广藿香150-450重量份、佩兰250-750重量份、红花150-450重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选为：
茯苓960重量份、茵陈960重量份、白术960重量份、郁金320重量份、当归480重量份、琥珀96重量份、白芍(炒)960重量份、半枝莲960重量份、砂仁192重量份、虎杖480重量份、丹参960重量份、泽兰480重量份、柴胡320重量份、广藿香320重量份、佩兰480重量份、红花320重量份。
技术方案2：
本发明药物组合物的原料药组成为：
茯苓500-1500重量份、茵陈500-1500重量份、郁金150-450重量份、当归250-750重量份、琥珀50-150重量份、白芍(炒)500-1500重量份、半枝莲500-1500重量份、砂仁100-300重量份、虎杖250-750重量份、丹参500-1500重量份、泽兰250-750重量份、柴胡150-450重量份、广藿香150-450重量份、佩兰250-750重量份、红花150-450重量份、板蓝根500-1500重量份、绵马贯众250-750重量份、白花蛇舌草500-1500重量份、重楼250-750重量份。
本发明药物组合物的原料药组成优选为：
茯苓960重量份、茵陈960重量份、郁金320重量份、当归480重量份、琥珀96重量份、白芍(炒)960重量份、半枝莲960重量份、砂仁192重量份、虎杖480重量份、丹参960重量份、泽兰480重量份、柴胡320重量份、广藿香320重量份、佩兰480重量份、红花320重量份、板蓝根960重量份、绵马贯众480重量份、白花蛇舌草960重量份、重楼480重量份。
取本发明技术方案1、2的药物组合物原料药，加入常规辅料，按照常规工艺，制成临床接受的剂型，包括但不限于合剂、浓缩丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂。
本发明药物组合物技术方案1制备合剂方法为：当归、郁金、广藿香、佩兰、砂仁、泽兰提取挥发油6-10小时，蒸馏后的水溶液另器收集；挥发油用3-5倍重量份的β-环糊精饱和水溶液法包结，干燥，得挥发油β-环糊精包结物，备用；丹参用4-8倍重量份的85％乙醇回流提取1-3次，每次0.5-1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，得丹参提取液，备用；药渣与其余药味加水煎煮1-3次，每次加6-10倍重量份的水煎煮1-2小时，合并煎液，滤过；滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至60～65℃相对密度为1.02～1.04的稠膏Ⅰ，加乙醇使含醇量达60-80％，静置12-36小时，滤过，滤液回收乙醇至适量，与上述丹参提取液合并，并浓缩至60～65℃相对密度为1.10-1.15的稠膏Ⅱ，加入80％的单糖浆900-1200体积份，挥发油β-环糊精包结物粉碎成细粉，加入浸膏内；再加入苯甲酸钠9-10g，搅匀，加水至3000-4500体积份，滤过，灌装，灭菌，即得。
本发明药物组合物技术方案2制备方法为：以上十九味，当归、郁金、广藿香、佩兰、砂仁、泽兰提取挥发油6-10小时，蒸馏后的水溶液另器收集；挥发油用3-5倍重量份的β-环糊精饱和水溶液法包结，干燥，得挥发油β-环糊精包结物，备用；丹参用4-8倍重量份的85％乙醇回流提取1-3次，每次0.5-1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，得丹参提取液，备用；药渣与其余茵陈等十二味加水煎煮1-3次，每次加6-10倍重量份的水煎煮1-2小时，合并煎液，滤过；滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至60～65℃相对密度为1.02～1.04的稠膏Ⅰ，加乙醇使含醇量达60-80％，静置12-36小时，滤过，滤液回收乙醇至适量，与上述丹参提取液合并，浓缩至相对密度为1.10-1.15的稠膏Ⅱ，加入挥发油β-环糊精包结物粉碎成细粉，加入常规辅料，按照常规工艺，制成临床接受的剂型，包括但不限于合剂、浓缩丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。
本发明药物组合物技术方案2制备合剂方法优选为：以上十九味，当归、郁金、广藿香、佩兰、砂仁、泽兰提取挥发油8小时，蒸馏后的水溶液另器收集；挥发油用4倍重量份的β-环糊精饱和水溶液法40℃包结，40℃干燥，得挥发油β-环糊精包结物，备用；丹参用6倍重量份的85％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，得丹参提取液，备用；药渣与其余茵陈等十二味加水煎煮2次，每次加8倍量水煎煮1.5小时，合并煎液，滤过；滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至60～65℃相对密度为1.02～1.04的稠膏Ⅰ，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至适量，与上述丹参提取液合并，并浓缩至60～65℃相对密度为1.10-1.15的稠膏Ⅱ，加入80％的单糖浆960体积份，挥发油β-环糊精包结物粉碎成细粉，加入浸膏内；再加入苯甲酸钠9.6g，加水至3200体积份，滤过，灌装，灭菌，即得。
本发明药物组合物质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种：
鉴别：A、取本药物组合物制剂1/100-3/100日用剂量，加水10-30ml使溶解，用乙酸乙酯萃取1-3次，第一次20-40ml，第二次10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5-1.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取茵陈蒿对照药材0.5-1.5g，加水40-60ml，煎煮0.5-1.5小时，取上清液，浓缩至10-30ml，用乙酸乙酯萃取1-3次，第一次20-40ml，第二次10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5-1.5ml使溶解，作为对照药材溶液；吸取供试品溶液0.5-1.5μl，对照药材溶液4-6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以0.5-2∶0.5-2比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
B、取本药物组合物制剂4/1000-8/1000日用剂量研细，加40-60％乙醇5-25ml，超声处理10-30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5-1.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5-15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30-50∶1-10∶5-15∶0.1-0.3比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-10％香草醛硫酸溶液，100-110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C、取本药物组合物制剂1/100-5/100日用剂量，研细，加***20-40ml，回流提取20-40分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.4-0.6ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材1g，加***5-15ml，超声处理5-15分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4-6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5-15∶0.1-1.0比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
D、取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1-3mg的溶液，作为对照品溶液；取本药物组合物制剂1/100-5/100日用剂量，研细，加***20-40ml，回流提取20-40分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.4-0.6ml使溶解，作为供试品溶液，吸取供试品溶液5-15μl，对照品溶液4-6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以4-8∶1比例的环己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点；
E、取本药物组合物制剂1/100-3/100日用剂量，研细，加甲醇10-30ml，超声处理10-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加1.5-3.5mol/L硫酸溶液5-15ml使溶解，置水浴中加热20-40分钟，立即冷却，用三氯甲烷振摇提取两次，每次5-15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇0.5-1.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-1.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4-8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5-25∶4-6∶0.5-1.5比例的30～60℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨气中熏后，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
含量测定：照高效液相色谱法测定：色谱条件与***适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；5-25∶70-95比例的乙腈-水为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2600；
对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品4-6mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含芍药苷40-60μg的对照品溶液；
供试品溶液制备：取装量差异项下的本药物组合物制剂，研细，取6/10000-1/1000日用剂量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50-70％甲醇15-35ml，密塞，称定重量，功率250W，频率40KHZ超声处理20-40分钟，取出，放冷，再称定重量，用50-70％甲醇补足减少重量，摇匀，取上清液，滤过，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-15μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本药物组合物制剂每日用剂量含白芍以芍药苷C23H28O11计，应不得少于50-70mg。
本发明所述重量份与体积份的关系为克/毫升。
本发明药物组合物不同制剂的日用剂量(每日服用剂量或每日使用剂量)因制剂不同而不同，但不同制剂的日用剂量中含相当生药量相同。本发明质量检测方法以日用剂量为计量单位。按照原药材的量换算，成人每日用剂量相当原药材的量为：280-360g。
本发明药物组合物经实验研究证实：有显著恢复ALT、AST、GGT、BiL等肝功能主要指标的作用具备见效快，无毒副作用，使用安全，获效后不易复发等优势。
本发明组合物相比现有制剂具备很好的药效，本发明药物组合物的辅料工艺经过筛选，发现挥发油与β-环糊精在一定的条件及配比下包合，可以达到较好的疗效；本发明所提供的中药组合物的质量控制方法，是通过大量具体创造性试验筛选后得到，鉴别方法中通过对样品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得鉴别专属性很好，而且方法经济适用、结果快速，并且对不同的薄层板都能应用。含量测定方法中通过对样品、供试品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得含量测定方法可以很有效的对产品进行质量控制，并且用该方法测定的产品相比其他方法测定的产品在药效上表现的更为稳定。
附图说明
说明书附图是挥发油β-环糊精包结实验流程图。
具体实施方式
下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1：药物组对保肝降酶、利胆、退黄、吞噬廓清能力的药效学试验
药物组Ⅰ：取本发明实施例2制备的药物组合物合剂
药物组Ⅱ：取本发明实施例13制备的药物组合物合剂
对照组：市售清热疏肝合剂。
一.保肝降酶作用
1.对急性肝损伤的保护作用
取昆明小鼠84只，体重18-20g，雌雄各半，随机分为7组。第一组：正常对照组，每日灌服等量饮用水；第二组：模型组，每日灌服等量饮用水；第三组：药物组Ⅰ，灌服药物组Ⅰ药液30ml(相当于生药9.32g)/kg体重·日；第四组：药物组Ⅱ，灌服药物组Ⅱ药液30ml(相当于生药9.32g)/kg体重·日；第五组：对照组，灌服0.4g/ml清热疏肝合剂0.3ml/10g(相当于含生药134g/kg)体重·日。第二～五组，在连续给药14天后，用D-半乳糖胺0.8g/kg体重小鼠腹腔注射进行造模。在造模24小时末次给药半小时后，从小鼠眼眶取血，测SGPT、SGOT含量，结果见表1。
表1 本发明药物组对D-半乳糖胺所致小鼠急性肝损伤的保护作用(X±SD)
*与模型组比较：*P＜0.05；**P＜0.01；
实验结果表明，与正常对照组比较，模型组的血清中SGPT、SGOT含量明显升高(P＜0.01)；与模型组比较，本发明药物组Ⅰ、Ⅱ和对照组的SGPT、SGOT含量明显降低(P＜0.01)；而本发明药物组与对照组并无明显差异。
2.对酒精性肝损伤的保护作用
动物分组及给药均同上试验，在给药的同时，第2～6组灌服50％白酒(二锅头，56°)0.5ml/20g造模。连续造模给药30天，于末次给药半小时后取血，测血清SGPT、SGOT含量，结果见表2。
表2 本发明药物组对酒精性肝损伤小鼠的保护作用(X±SD)
*与模型组比较：*P＜0.05；**P＜0.01；
实验结果表明，与正常组比较，模型组的血清中SGPT、SGOT含量明显升高(P＜0.01)。与模型组比较，本发明药物组与对照组均能降低血清中SGPT、SGOT含量(P＜0.01)；而本发明药物组与对照组并无明显差异。
3.对慢性肝损伤的保护作用
取Wistar大鼠72只，体重140～150g，雌雄各半，随机分为6组。第一组：正常对照组，每日灌服等量饮用水；第二组：模型组，每日灌服等量饮用水；第三组：药物组Ⅰ，灌服药物组Ⅰ药液30ml(相当于生药9.32g)/kg体重·日；第四组：药物组Ⅱ，灌服药物组Ⅱ药液30ml(相当于生药9.32g)/kg体重·日；第五组：对照组，灌服0.4g/ml清热疏肝合剂0.3ml/10g(相当于含生药134g/kg)体重·日。第二～五组，在给药的同时，用30％CC14油溶液0.3ml/100皮下注射进行造模，每周两次。连续造模给药3个月后，取血测血清SGOT、SGOT、羟脯氨酸、总蛋白、白蛋白含量，并计算A/G值，结果见表3。
表3 本发明药物组对慢性肝损伤大鼠的保护作用(X±SD)
*与模型组比较；、*P＜0.05；**P＜0.01；
实验结果表明，与正常组比较，模型组的血清中SGPT、SGOT含量明显升高(P＜0.01)，A/G值明显降低，羟脯氨酸含量明显升高；与模型组比较，本发明药物组和对照组的SGPT、SGOT含量明显降低(P＜0.01)；本发明药物组的A/G值明显升高(P＜0.01)及血清中羟脯氨酸含量明显降低(P＜0.01)，而对照组的A/G值明显差异(P＜0.05)；而本发明药物组与对照组并无明显差异。
二.对小鼠网状内皮***对血流中惰性碳粒的吞噬廓清能力的影响
动物、分组及给药同急性肝损伤试验，以上各组连续给药20天，于给药后的第7、10天，第2～5组小鼠腹腔注射环磷酰胺100mg/Kg，造成小鼠免疫功能低下。于末次给药1小时后，小鼠尾静脉注入印度墨汁0.1ml/20g，于注射后1、5分钟，从眼静脉丛取血20μl，溶于2.5ml，0.1％Na2CO3溶液中，摇匀，于680nm波长处比色，测定OD值。计算廓清指数K值。结果见表6。
表6 本发明药物组对巨噬细胞吞噬功能的影响(X±SD)
*与模型组比较；**P＜0.01
实验结果表明，与正常组比较，模型组的K值明显降低(P＜0.01)。与模型组比较，本发明药物组和对照组K值明显增高(P＜0.01)。
实验例2 辅料筛选实验
挥发油β-环糊精包结工艺条件的优选
由于挥发油易于散失，因此如果将挥发油直接加入，放置日久或稍受热，挥发油就会损失，从而降低了含量，影响药物的疗效。为解决这一问题，采用了β-环糊精包结的方法，并采用正交试验法对包结的条件进行了优选。
实验流程见说明书附图。
采用饱和水溶液法包结：称取一定量的β-环糊精，加入适量蒸馏水，在70℃水浴中加热制成5％的β-环糊***溶液，不同温度下(20℃，40℃，60℃)搅拌，转速为2500转/分，加入定量挥发油，充分搅拌一定时间，得包结物，停止搅拌，用少量蒸馏水冲洗搅拌器上的包结物，密闭，置冰箱中12小时，抽滤得β-环糊精湿品，经低温40℃干燥，得干品称重，用微量挥发油提取器，按2005版药典(附录X D)甲法测定，记录数据，计算。
根据初步试验结果，分析影响β-环糊精包结的因素，设定如下试验，结果见表8-10：
表8 因素水平表
表9 试验结果
表10 方差分析表
F0.1(2，2)＝9，F0.05(2，2)＝19
试验结果：直观分析结果知，因素A＞C＞B，最佳条件为A1B2C2；方差分析结果知，因素A影响较显著，而B、C因素影响不显著。应选择A1B1C1，但从表4试验结果，A1B2C2的包结率大于A1B1C1，故确立为A1B2C2，即挥发油∶β-环糊精为1∶4，搅拌时间30分钟，包结温度为40℃。
实验例3 茵陈的鉴别试验
空白样品的制备按本发明药物组药味与用量比例，分别自配不含茵陈、白芍、当归、丹参、虎杖的群药，按制备工艺制成空白制剂。
空白溶液的制备取本药物组合物制剂茵陈的空白样品14/1000日用剂量，加水20ml使溶解，用乙酸乙酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为空白溶液。
样品溶液的制备取同样量的本药物组和物样品，依空白溶液的制备方法制得样品溶液。
对照药材溶液的制备取茵陈蒿对照药材1g，加水50ml，煎煮1小时，取上清液，浓缩至20ml，用乙酸乙酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液。
展开剂的选择分别配制以下展开剂，60-90℃石油醚-乙酸乙酯1∶4，60-90℃石油醚-乙酸乙酯1∶1，60-90℃石油醚-乙酸乙酯4∶1
将以上三种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，分别以1∶4，1∶1，4∶1比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下观察，在以1∶1比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂时供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，有明显的相同颜色的荧光斑点，并且空白溶液在相应的位置上无荧光斑点显示。
实验例4 白芍的鉴别试验
空白溶液的制备 取本药物组合物空白制剂4/1000-8/1000日用剂量研细，加40-60％乙醇5-25ml，超声处理10-30分钟，滤过，滤液作为空白溶液。
样品溶液的制备 取同样量的本药物组和物样品，依空白溶液的制备方法制得样品溶液。
对照药材溶液的制备 另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
展开剂的选择 配制30∶10∶5∶0.3比例的，40∶5∶10∶0.2比例的，50∶1∶15∶0.1比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂
照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别在上述展开剂中展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；其中，在40∶5∶10∶0.2比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸展开剂中最明显。
实验例5 当归鉴别
空白溶液的制备 取本药物组合物空白制剂3/100日用剂量研细，加***30ml，回流提取30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为空白溶液。
样品溶液的制备 取同样量的本药物组和物样品，依空白溶液的制备方法制得样品溶液。
对照药材溶液的制备 取当归对照药材1g，加***10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液。
展开剂的选择 分别配制5∶1比例的，19∶1比例的，150∶1比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂。
照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别在上述展开剂条件下展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；其中，在19∶1比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂时斑点最明显。
实验例6 丹参的鉴别试验
空白溶液的制备 取本药物组合物空白制剂3/100日用剂量研细，加***30ml，回流提取30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为空白溶液。
样品溶液的制备 取同样量的本药物组和物样品，依空白溶液的制备方法制得样品溶液。
对照药材溶液的制备 取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。
展开剂的选择 分别配制4∶1比例的，6∶1比例的，8∶1比例的环己烷-乙酸乙酯为展开剂。
照薄层色谱法试验，吸取空白溶液和样品溶液各10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别在上述展开剂条件下展开展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点。其中，在6∶1比例的环己烷-乙酸乙酯为展开剂时斑点最明显。
实验例7 虎杖鉴别
虎杖主要成分为蒽衍生物，本实验以虎杖中水解后的大黄素为检识指标，建立了制剂中虎杖的TLC检识方法。
空白溶液的制备 取本药物组合物空白制剂14/1000日用剂量研细，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液10ml使溶解，置水浴中加热30分钟，立即冷却，用三氯甲烷振摇提取两次，每次10ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为空白溶液。
样品溶液的制备 取同样量的本药物组和物样品，依空白溶液的制备方法制得样品溶液。
对照药材溶液的制备 取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
展开剂的选择 分别配制5∶6∶0.5比例的，15∶5∶1比例的，25∶4∶1.5比例的30～60℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液。
照薄层色谱法试验，吸取空白溶液和样品溶液、对照品溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别在上述展开剂条件下展开，取出，晾干；置氨气中熏后，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；其中，以15∶5∶1比例的30～60℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂展开时斑点最明显。
实验例8 含量测定
1.仪器与药品
美国惠普HP1050型高效液相色谱仪，四元泵，DAD检测器，化学工作站；H66025型超声清洗器(无锡市超声电子设备厂)；乙腈为色谱纯，移动相所用水为双蒸水。
2.色谱条件的优化
色谱柱为YWGC18，10μm，4.6×250mm，大连化物所，柱效以芍药甙计其理论塔板数不低于2600；流动相为乙腈-水(15∶85)；流速为1ml/min；检测波长为230nm，柱温为室温，对流动相中乙腈与水的比例进行了研究，优化了色谱条件。
分别配制以下比例的流动相：乙腈-水(15∶75)、乙腈-水(15∶80)、乙腈-水(15∶85)、乙腈-水(15∶90)、乙腈-水(15∶95)
分别按以上色谱条件进样对照品、样品，结果见下表11：
表11 色谱条件的优化
结果可知，在流动相为乙腈-水(15∶75)、乙腈-水(15∶80)时样品中的其它色谱与芍药苷色谱峰不能完全分离，而用乙腈-水(15∶90)、乙腈-水(15∶95)为流动相时，芍药苷色谱峰出现托尾现象。优选流动相为乙腈-水(15∶85)
3.样品提取溶剂及提取条件优化
芍药甙的常用提取溶剂为水、甲醇、乙醇及稀醇，本实验采用甲醇水溶液为样品提取溶剂可以避免用水作为提取溶剂而致杂质过多的现象产生。对甲醇水溶液浓度，加溶剂倍数及超声波处理时间做了对比研究，优化了样品的提取条件。
提取条件优化 取样品粉末(批号060529)，研细(过50目筛)，精密称取0.25g五份，No.1～No.5精密加入60％甲醇25ml，称重，密塞，按下表分别超声处理(功率250W，频率40KHZ)，提取完毕，取出，称重，补足失去的溶剂量，取上清液以0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液，按上述色谱条件，进样20μl测定，并对测定结果进行统计，结果见表12。
表12 提取时间考察(芍药甙含量mg/g)
结果可知：各组间无明显差异。但以超声10分钟及20分钟的含量略低。30分钟，40分钟含量基本一致。
依以上方法，在提取时间为30min的条件下，考察提取液的浓度，结果见下表13
表13 提取液浓度考察(芍药甙含量mg/g)
结果可知：各组间无明显差异，以60％甲醇液提取，芍药甙得率较高。
依以上方法，在提取时间为30min，提取液为60％甲醇的条件下，考察加溶剂倍数，结果见表14。
表14 加溶剂倍数的考察(芍药甙含量mg/g)
结果可知：各组间无明显差异，加100倍量溶剂条件下芍药甙得率较高。
结论：确定提取条件为60％甲醇，25ml，超声30分钟。
4.稳定性试验
取供试品溶液(060529)，分别于配制后0、2、4、6、10、16、24小时，依法测定，结果表明，在24小时内基本稳定，结果见表15。
表15 稳定性试验
5.精密度试验
精密吸取芍药甙对照品溶液(C＝0.204mg/ml)10μl，按前述色谱条件重复进样5次，测得峰面积，求得RSD为1.13％，结果见表16。
表16 精密度试验结果
6.线性关系考察
精密吸取芍药甙对照品溶液(2.10mg→10ml)2.5、5、7.5、10、12.5、15、20μl，按上述色谱条件进样测定，测定峰面积，结果见表9。以峰面积对对照品的量进行线性回归(包括原点)，求得回归方程为Y＝-39.6975+1574.5933X，r＝0.9999，表明芍药甙在0.525～4.200μg范围内呈线性关系，检测结果见表17。
表17 芍药甙标准曲线测定结果
7.重现性试验
取同一批样品(批号060529)研细，精密称取0.25g，共五份，按正文方法进行测定，求得相对标准偏差。结果见表18。
表18 重现性试验结果
8.空白试验
按处方中药味比例自配不含白芍的群药，按正文方法制成空白溶液。结果空白溶液在与芍药甙相同保留时间处未显示明显色谱峰，认为无干扰。
9.回收率试验
采用加样回收法，精密称取已知含量的同一批号样品(批号060529)(含量为6.9mg/g)0.15g共五份，按下表分别加入芍药甙对照品溶液(浓度0.234mg/ml)5ml，再精密加入20ml60％甲醇，密塞，按样品提取及测定条件提取及测定，以下式计算回收率，结果见表19。
表19 回收率试验结果
10.样品测定结果
按正文收载方法对十批样品进行测定，结果见表20。
表20 样品测定结果
批号 芍药甙含量(mg/g)
050524 6.20
050529 6.90
050618 5.84
060301 5.98
060306 5.17
060312 5.41
060910 5.22
060914 5.31
070312 5.30
070316 5.33
根据以上数据，将含量限度暂定为，本品每克含白芍按芍药甙(C23H28O11)计，应不少于5.0mg。
实验例9.本发明含量测定方法在气滞胃痛颗粒中芍药苷的含量测定中的适用性试验
气滞胃痛颗粒主要由柴胡、延胡索、枳壳、香附、白芍、炙甘草六味中药组成。芍药苷为控制本品质量的指标成分，试采用该方法测定气滞胃痛颗粒中芍药苷的含量。
(1)重现性试验
取同一批样品(批号060312)研细，精密称取0.25g，共五份，按正文方法进行测定，求得相对标准偏差。结果见表21。
表21 重现性试验结果
(2)回收率试验
采用加样回收法，精密称取已知含量的同一批号样品(批号060312)(含量为1.5mg/g)0.85g共五份，按下表分别加入芍药甙对照品溶液(浓度0.234mg/ml)5ml，再精密加入20ml60％甲醇，密塞，按样品提取及测定条件提取及测定，以下式计算回收率，结果见表22。
表22 回收率试验结果
根据以上结果说明，该含量测定方法用于测定气滞胃痛颗粒中芍药苷的含量重现性差、回收率低。说明虽然多种中成药中含有芍药苷，但其测定方法往往不同。
下述实施例均能够实现上述实验例所述的效果
实施例1
茯苓960g、茵陈960g、白术960g、郁金320g、当归480g、琥珀50-150g、白芍(炒)960g、半枝莲960g、砂仁192g、虎杖480g、丹参960g、泽兰480g、柴胡320g、广藿香320g、佩兰480g、红花320g
本药物组合物加入常规辅料，通过常规工艺制成胶囊剂。
实施例2
茯苓520g、茵陈1480g、白术520g、郁金430g、当归270g、琥珀130g、白芍(炒)520g、半枝莲1480g、砂仁120g、虎杖730g、丹参520g、泽兰730g、柴胡170g、广藿香430g、佩兰270g、红花430g
当归、郁金、广藿香、佩兰、砂仁、泽兰提取挥发油8小时，蒸馏后的水溶液另器收集；挥发油用4倍重量份的β-环糊精饱和水溶液法40℃包结，40℃干燥，得挥发油β-环糊精包结物，备用；丹参用6倍重量份的85％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，得丹参提取液，备用；药渣与其余药味加水煎煮2次，每次加8倍量水煎煮1.5小时，合并煎液，滤过；滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至60～65℃相对密度为1.02～1.04的稠膏Ⅰ，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至适量，与上述丹参提取液合并，并浓缩至60～65℃相对密度为1.10-1.15的稠膏Ⅱ，加入80％的单糖浆960体积份，挥发油β-环糊精包结物粉碎成细粉，加入浸膏内；再加入苯甲酸钠9.6g，搅匀，加水至3000体积份，滤过，灌装，灭菌，即得合剂30日用剂量。
实施例3
茯苓1480g、茵陈520g、白术1480g、郁金170g、当归730g、琥珀70g、白芍(炒)1480g、半枝莲520g、砂仁280g、虎杖270g、丹参1480g、泽兰270g、柴胡430g、广藿香170g、佩兰730g、红花170g
当归、郁金、广藿香、佩兰、砂仁、泽兰提取挥发油8小时，蒸馏后的水溶液另器收集；挥发油用4倍重量份的β-环糊精饱和水溶液法40℃包结，40℃干燥，得挥发油β-环糊精包结物，备用；丹参用6倍重量份的85％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，得丹参提取液，备用；药渣与其余药味加水煎煮2次，每次加8倍量水煎煮1.5小时，合并煎液，滤过；滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至60～65℃相对密度为1.02～1.04的稠膏Ⅰ，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至适量，与上述丹参提取液合并，并浓缩至60～65℃相对密度为1.25-1.30的稠膏Ⅱ，0.08Mpa、65℃条件下减压干燥，加入挥发油β-环糊精包结物，粉碎成细粉；70％乙醇制软材，挤出制粒，即得32日用剂量。
实施例4
茯苓960g、茵陈960g、郁金320g、当归480g、琥珀96g、白芍(炒)960g、半枝莲960g、砂仁192g、虎杖480g、丹参960g、泽兰480g、柴胡320g、广藿香320g、佩兰480g、红花320g、板蓝根960g、绵马贯众480g、白花蛇舌草960g、重楼480g
本药物组合物加入常规辅料，通过常规工艺制成合剂。
实施例5
茯苓520g、茵陈1480g、郁金170g、当归730g、琥珀70g、白芍(炒)1480g、半枝莲520g、砂仁280g、虎杖270g、丹参1480g、泽兰270g、柴胡430g、广藿香170g、佩兰730g、红花170g、板蓝根1480g、绵马贯众270g、白花蛇舌草1480g、重楼270g
本药物组合物加入常规辅料，通过常规工艺制成片剂。
实施例6
茯苓1480g、茵陈520g、郁金430g、当归270g、琥珀130g、白芍(炒)520g、半枝莲1480g、砂仁120g、虎杖730g、丹参520g、泽兰730g、柴胡170g、广藿香430g、佩兰270g、红花430g、板蓝根520g、绵马贯众730g、白花蛇舌草520g、重楼730g
当归、郁金、广藿香、佩兰、砂仁、泽兰提取挥发油8小时，蒸馏后的水溶液另器收集；挥发油用4倍重量份的β-环糊精饱和水溶液法40℃包结，40℃干燥，得挥发油β-环糊精包结物，备用；丹参用6倍重量份的85％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，得丹参提取液，备用；药渣与其余茵陈等十二味加水煎煮2次，每次加8倍量水煎煮1.5小时，合并煎液，滤过；滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至60～65℃相对密度为1.02～1.04的稠膏Ⅰ，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至适量，与上述丹参提取液合并，并浓缩至60～65℃相对密度为1.10-1.15的稠膏Ⅱ，加入80％的单糖浆1000体积份，挥发油β-环糊精包结物粉碎成细粉，加入浸膏内；再加入苯甲酸钠9.6g，搅匀，加水至3600体积份，滤过，灌装，灭菌，即得合剂。
实施例7 本发明制剂的质量控制方法
鉴别：A、取实施例3制备的本药物组合物颗粒剂0.014倍日用剂量的内容物，加水20ml使溶解，用乙酸乙酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取茵陈蒿对照药材1g，加水50ml，煎煮1小时，取上清液，浓缩至20ml，用乙酸乙酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；吸取供试品溶液1μl，对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以1∶1比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
B、取实施例3制备的本药物组合物颗粒剂0.0057倍日用剂量的内容物，研细，加50％乙醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以40∶5∶10∶0.2比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C、取实施例3制备的本药物组合物颗粒剂0.029倍日用剂量的内容物，研细，加***30ml，回流提取30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材1g，加***10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9.5∶0.5比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
D、取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取鉴别C项下的供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6∶1比例的环己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点。
实施例8 本发明制剂的质量控制方法
含量测定：照高效液相色谱法测定：色谱条件与***适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；15∶85比例的乙腈-水为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2600；
对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品5mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含芍药苷50μg的对照品溶液；
供试品溶液制备：取装量差异项下的实施例2制备的本药物组合物合剂0.00072倍日用剂量的内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加60％甲醇25ml，密塞，称定重量，功率250W，频率40KHZ超声处理30分钟，取出，放冷，再称定重量，用60％甲醇补足减少重量，摇匀，取上清液，滤过，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本药物组合物合剂每日用剂量含白芍以芍药苷C23H28O11计，应不得少于60mg。
实施例9
鉴别：A、取实施例2制备的本药物组合物合剂0.014倍日用剂量的内容物，加水20ml使溶解，用乙酸乙酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取茵陈蒿对照药材1g，加水50ml，煎煮1小时，取上清液，浓缩至20ml，用乙酸乙酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；吸取供试品溶液1μl，对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以1∶1比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
B、取实施例2制备的本药物组合物合剂0.0057倍日用剂量的内容物，研细，加50％乙醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以40∶5∶10∶0.2比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C、取实施例2制备的本药物组合物合剂0.029倍日用剂量的内容物，研细，加***30ml，回流提取30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材1g，加***10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9.5∶0.5比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
含量测定：照高效液相色谱法测定：色谱条件与***适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；15∶85比例的乙腈-水为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2600；
对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品5mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含芍药苷50μg的对照品溶液；
供试品溶液制备：取装量差异项下的实施例12制备的本药物组合物合剂0.00072倍日用剂量内容物，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加60％甲醇25ml，密塞，称定重量，功率250W，频率40KHZ超声处理30分钟，取出，放冷，再称定重量，用60％甲醇补足减少重量，摇匀，取上清液，滤过，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本药物组合物胶囊剂每日用剂量含白芍以芍药苷C23H28O11计，应不得少于60mg。
实施例10
茵陈960g、板蓝根960g、绵马贯众480g、茯苓960g、郁金320g、当归480g、红花320g、琥珀96g、白芍(炒)960g、白花蛇舌草960g、半枝莲960g、广藿香320g、佩兰480g、砂仁192g、虎杖480g、丹参960g、泽兰480g、柴胡320g、重楼480g
以上十九味，当归、郁金、广藿香、佩兰、砂仁、泽兰提取挥发油8小时，蒸馏后的水溶液另器收集；挥发油用4倍重量份的β-环糊精饱和水溶液法40℃包结，40℃干燥，得挥发油β-环糊精包结物，备用；丹参用6倍重量份的85％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，得丹参提取液，备用；药渣与其余茵陈等十二味加水煎煮2次，每次加8倍量水煎煮1.5小时，合并煎液，滤过；滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至60～65℃相对密度为1.02～1.04的稠膏Ⅰ，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至适量，与上述丹参提取液合并，并浓缩至60～65℃相对密度为1.10-1.15的稠膏Ⅱ，加入80％的单糖浆960体积份，挥发油β-环糊精包结物粉碎成细粉；再加入苯甲酸钠9.6g，加水至3200体积份，滤过，灌装，灭菌，即得合剂。
实施例11 本发明制剂的质量控制方法
含量测定：照高效液相色谱法测定：色谱条件与***适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；15∶85比例的乙腈-水为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2600；
对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品5mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含芍药苷50μg的对照品溶液；
供试品溶液制备：取装量差异项下的实施例1制备的本药物组合物胶囊剂，研细，取0.00072倍的日用剂量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加60％甲醇25ml，密塞，称定重量，功率250W，频率40KHZ超声处理30分钟，取出，放冷，再称定重量，用60％甲醇补足减少重量，摇匀，取上清液，滤过，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本药物组合物胶囊剂每日用剂量含白芍以芍药苷C23H28O11计，应不得少于60mg。
实施例12 本发明制剂的质量控制方法
鉴别：
A、取实施例6制备的本药物组合物合剂0.0057倍的日用剂量内容物研细，加50％乙醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以40∶5∶10∶0.2比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
B、取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，取实施例6制备的本药物组合物合剂0.029倍的日用剂量内容物，研细，加***30ml，回流提取30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6∶1比例的环己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点；
C、取实施例6制备的本药物组合物合剂0.014倍的日用剂量内容物，研细，加甲醇20ml，超声处20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液10ml使溶解，置水浴中加热30分钟，立即冷却，用三氯甲烷振摇提取两次，每次10ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶5∶1比例的30～60℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨气中熏后，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
含量测定：照高效液相色谱法测定：色谱条件与***适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；15∶85比例的乙腈-水为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2600；
对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品5mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含芍药苷50μg的对照品溶液；
供试品溶液制备：取装量差异项下的实施例6制备的本药物组合物合剂0.00072倍的日用剂量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加60％甲醇25ml，密塞，称定重量，功率250W，频率40KHZ超声处理30分钟，取出，放冷，再称定重量，用60％甲醇补足减少重量，摇匀，取上清液，滤过，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本药物组合物合剂每日用剂量含白芍以芍药苷C23H28O11计，应不得少于60mg。
实施例13
茵陈 960g 板蓝根 960g 绵马贯众 480g
茯苓 960g 郁金 320g 当归 480g
红花 320g 琥珀 96g 白芍(炒) 960g
白花蛇舌草960g 半枝莲 960g 广藿香 320g
佩兰 480g 砂仁 192g 虎杖 480g
丹参 960g 泽兰 480g 柴胡 320g
重楼 480g
制法：以上十九味，当归、郁金、广藿香、佩兰、砂仁、泽兰提取挥发油8小时，蒸馏后的水溶液另器收集，挥发油用40g的β-环糊精饱和水溶液法40℃包结，40℃干燥，得挥发油β-环糊精包结物，备用；丹参用85％乙醇6700ml回流提取二次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，得丹参提取液，备用；药渣与其余茵陈等十二味加水煎煮二次，每次加8倍量水煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至相对密度为1.02～1.04(60～65℃)，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至适量，与上述丹参提取液合并，并浓缩至相对密度为1.10-1.15(60～65℃)的稠膏，加入挥发油β-环糊精包结物粉碎成细粉，及适量辅料，加水，灌装，灭菌，即得。
【鉴别】
(1)取本品5g，加水20ml使溶解，用乙酸乙酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取茵陈蒿对照药材1g，加水50ml，煎煮1小时，取上清液，浓缩至20ml，用乙酸乙酯同法制成对照药材溶液；吸取供试品溶液1μl，对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯(1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下观察；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(2)取本品2g研细，加50％乙醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本品10g，研细，加***30ml，回流提取30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材1g，加***10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯(9.5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(4)取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取[鉴别](3)项下的供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(6∶1)为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点。
(5)取本品5g，研细，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液10ml使溶解，置水浴中加热30分钟，立即冷却，用三氯甲烷振摇提取两次，每次10ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨气中熏后，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定：照高效液相色谱法测定
色谱条件与***适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(15∶85)为流动相，检测波长为230nm；理论板数按芍药苷峰计算应不低于2600；
对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品5mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含芍药苷50μg)；
供试品溶液制备 取装量差异项下的本品，研细，取0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加60％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40KHZ)30分钟，取出，放冷，再称定重量，用60％甲醇补足减少重量；摇匀，取上清液，滤过，即得；
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每1ml含白芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于0.6mg。
Claims (5)
1.一种治疗病毒性肝炎药物组合物的检测方法，其特征在于该方法中的含量测定方法为：
色谱条件与***适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；5-25∶70-95比例的乙腈-水为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2600；
对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品4-6mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含芍药苷40-60μg的对照品溶液；
供试品溶液制备：取装量差异项下的该药物组合物制剂，研细，取6/10000-1/1000日用剂量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50-70％甲醇15-35ml，密塞，称定重量，功率250W，频率40KHZ超声处理20-40分钟，取出，放冷，再称定重量，用50-70％甲醇补足减少重量，摇匀，取上清液，滤过，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-15μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本药物组合物制剂每日用剂量含白芍以芍药苷C23H28O11计，应不得少于50-70mg；
所述药物组合物的原料药组成为：
茯苓500-1500重量份、茵陈500-1500重量份、郁金150-450重量份、当归250-750重量份、琥珀50-150重量份、炒白芍500-1500重量份、半枝莲500-1500重量份、砂仁100-300重量份、虎杖250-750重量份、丹参500-1500重量份、泽兰250-750重量份、柴胡150-450重量份、广藿香150-450重量份、佩兰250-750重量份、红花150-450重量份、板蓝根500-1500重量份、绵马贯众250-750重量份、白花蛇舌草500-1500重量份、重楼250-750重量份；
所述日用剂量按照原药材的量换算，相当原药材的量为：280-360g。
2.如权利要求1所述的药物组合物的检测方法，其特征在于该方法中的含量测定为：
色谱条件与***适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；15∶85比例的乙腈-水为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2600；
对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品5mg，置100ml量瓶中，加甲 醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含芍药苷50μg的对照品溶液；
供试品溶液制备：取装量差异项下的本药物组合物制剂，研细，取7/10000日用剂量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加60％甲醇25ml，密塞，称定重量，功率250W，频率40KHZ超声处理30分钟，取出，放冷，再称定重量，用60％甲醇补足减少重量，摇匀，取上清液，滤过，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本药物组合物制剂每日用剂量含白芍以芍药苷C23H28O11计，应不得少于60mg；
所述药物组合物的原料药组成为：
茯苓500-1500重量份、茵陈500-1500重量份、郁金150-450重量份、当归250-750重量份、琥珀50-150重量份、炒白芍500-1500重量份、半枝莲500-1500重量份、砂仁100-300重量份、虎杖250-750重量份、丹参500-1500重量份、泽兰250-750重量份、柴胡150-450重量份、广藿香150-450重量份、佩兰250-750重量份、红花150-450重量份、板蓝根500-1500重量份、绵马贯众250-750重量份、白花蛇舌草500-1500重量份、重楼250-750重量份。
3.如权利要求1或2所述的药物组合物的检测方法，其特征在于该方法还包括如下鉴别方法的一种或几种：
鉴别：A、取本药物组合物制剂1/100-3/100日用剂量，加水10-30ml使溶解，用乙酸乙酯萃取1-3次，第一次20-40ml，第二次10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5-1.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取茵陈蒿对照药材0.5-1.5g，加水40-60ml，煎煮0.5-1.5小时，取上清液，浓缩至10-30ml，用乙酸乙酯萃取1-3次，第一次20-40ml，第二次10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5-1.5ml使溶解，作为对照药材溶液；吸取供试品溶液0.5-1.5μl，对照药材溶液4-6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以0.5-2：0.5-2比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
B、取本药物组合物制剂4/1000-8/1000日用剂量研细，加40-60％乙醇5-25ml，超声处理10-30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品， 加乙醇制成每1ml含0.5-1.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5-15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30-50∶1-10∶5-15∶0.1-0.3比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1-10％香草醛硫酸溶液，100-110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C、取本药物组合物制剂1/100-5/100日用剂量，研细，加***20-40ml，回流提取20-40分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.4-0.6ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材1g，加***5-15ml，超声处理5-15分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4-6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5-15∶0.1-1.0比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
D、取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1-3mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取鉴别C项下的供试品溶液5-15μl，对照品溶液4-6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以4-8∶1比例的环己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点；
E、取本药物组合物制剂1/100-3/100日用剂量，研细，加甲醇10-30ml，超声处理10-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加1.5-3.5mol/L硫酸溶液5-15ml使溶解，置水浴中加热20-40分钟，立即冷却，用三氯甲烷振摇提取两次，每次5-15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇0.5-1.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-1.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4-8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5-25∶4-6∶0.5-1.5比例的30～60℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨气中熏后，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4.如权利要求3所述的药物组合物的检测，其特征在于该方法包括如下鉴别方法的一种或几种：
A、取本药物组合物制剂14/1000日用剂量，加水20ml使溶解，用乙酸乙酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取茵陈蒿对照药材1g，加水50ml，煎煮1小时，取上清液，浓缩至20ml，用乙酸乙酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；吸取供试品溶液1μl，对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以1∶1比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
B、取本药物组合物制剂6/1000日用剂量研细，加50％乙醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以40∶5∶10∶0.2比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
C、取本药物组合物制剂3/100日用剂量，研细，加***30ml，回流提取30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材1g，加***10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9.5∶0.5比例的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
D、取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取鉴别C项下的供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6∶1比例的环己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点；
E、取本药物组合物制剂14/1000日用剂量，研细，加甲醇20ml，超声处理 20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2.5mol/L硫酸溶液10ml使溶解，置水浴中加热30分钟，立即冷却，用三氯甲烷振摇提取两次，每次10ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15∶5∶1比例的30～60℃石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨气中熏后，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
5.如权利要求1所述的药物组合物的检测方法，其特征在于所述药物组合物的制备方法为：以上十九味，当归、郁金、广藿香、佩兰、砂仁、泽兰提取挥发油6-10小时，蒸馏后的水溶液另器收集；挥发油用3-5倍重量份的β-环糊精饱和水溶液法包结，干燥，得挥发油β-环糊精包结物，备用；丹参用4-8倍重量份的85％乙醇回流提取1-3次，每次0.5-1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，得丹参提取液，备用；药渣与其余茵陈等十二味加水煎煮1-3次，每次加6-10倍重量份的水煎煮1-2小时，合并煎液，滤过；滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至60～65℃相对密度为1.02～1.04的稠膏I，加乙醇使含醇量达60-80％，静置12-36小时，滤过，滤液回收乙醇至适量，与上述丹参提取液合并，浓缩至相对密度为1.10-1.15的稠膏II，加入挥发油β-环糊精包结物粉碎成细粉，加入常规辅料，按照常规工艺，制成临床接受的剂型，包括但不限于浓缩丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。
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2007
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Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| 关幼波等.中医对乙型肝炎的治疗.《云南中医中药杂志》.1995,第16卷(第4期),35-38. * |
| 叶卯祥等.肝炎1号片的薄层鉴定.《时珍国医国药》.2003,第14卷(第12期),750. * |
| 徐学义等.李昌源肝病诊治经验.《江西中医药》.1994,第25卷(第2期),8-10. * |
| 易毛等.薄层扫描法测定复方鳖甲软肝片中芍药苷的含量.《中国药学杂志》.2001,第36卷(第3期),196-198. * |
| 李海滨等.HPLC法测定护肝宁颗粒中芍药苷含量.《辽宁中医杂志》.2006,第33卷(第4期),472. * |
| 杨晔.保肝利胆丸的薄层鉴别法.《甘肃中医》.2005,第18卷(第4期),34-35. * |
| 赵志军.肝炎净注射质量标准的研究.《中国现代应用药学杂志》.2004,第21卷(第2期),144-145. * |
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