CN101062217A - 治疗跌打损伤的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及治疗跌打损伤的药物组合物，具体地，是采用天然药材为原料制备而成的药剂，属于医药领域。制成其活性成分的原料包括下述重量配比的组分：乳香2～4份、没药3～5份、川芎1～4份、红花1～4份、土鳖虫1～3份、血竭1～4份、胆南星1～4份、马钱子1～3份；还包括：当归1～2份、防风1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龙骨1～2份。本发明药物组合物以活血化瘀为主，消肿止痛、通络散结为辅，兼顾祛湿透表，清热宁神之功；针对急性伤筋所致的瘀血阻滞病机，疗效显著，止痛、消肿时间短，关节功能恢复优良，为临床治疗跌打损伤提供了新的选择。

Description

治疗跌打损伤的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及治疗跌打损伤的药物组合物，具体地，是采用天然药材为原料制备而成的药剂，属于医药领域。

背景技术

急性伤筋是指各种暴力突然作用于人体软组织——筋，导致筋结构、形态和位置的异常变化而无骨折、脱位、皮肤破损的外伤病症，局部出现瘀斑或青紫，严重者可致局部功能障碍。急性软组织损伤主要是指人体皮肤、皮下组织、肌肉、关节筋络突然遭受暴力撞击、压迫、牵拉、强力扭转等原因引起的损伤。

在现代工农业生产、交通、运输、体育运动、军事训练或日常生活中，急性筋伤的发病率往往很高，其病机以瘀血阻滞为主，多以局部疼痛、肿胀，甚至功能障碍为主，严重影响患者的工作和生活。目前，国内市场治疗急性筋伤的外用中成药品有膏药外贴，药液外搽，中药湿敷、熏、热熨等，但真正疗效优越，作用迅速，价格公道的中成药制剂品种却十分有限。而化学药品方面，多采用非甾体类抗炎药进行镇痛、解热、抗炎治疗，但却易引起严重的胃肠道反应或中枢神经并发症。还有用皮质类固醇类药物等来治疗急性软组织损伤，但总因较严重的副作用而不为广大医生和患者接受。

发明内容

本发明所解决的技术问题是提供一种治疗跌打损伤的药物组合物，制成其活性成分的原料包括下述重量配比的组分：乳香2～4份、没药3～5份、川芎1～4份、红花1～4份、土鳖虫1～3份、血竭1～4份、胆南星1～4份、马钱子1～3份加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

进一步地，本发明药物组合物，制成其活性成分的原料还包括下述重量配比的组分：、当归1～2份、防风1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龙骨1～2份。

上述所述制剂为外用制剂，可以为酒剂、酊剂、搽剂、软膏剂、喷雾剂、贴膏剂或膏剂等外用制剂。

本发明所解决的另一个技术问题是提供本发明药物组合物的制备方法，它包括如下步骤：

a、称取下述重量配比的原料：乳香2～4份、没药3～5份、川芎1～4份、红花1～4份、土鳖虫1～3份、血竭1～4份、胆南星1～4份、马钱子1～3份、当归1～2份、防风1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龙骨1～2份；

b、取原料用浓度为50～80％的乙醇提取，所得提取液按照常规制药方法，加入可接受的辅料或辅助性成分制备即得。

本发明药物组合物以乳香、没药、川芎、红花、土鳖虫、血竭、胆南星、马钱子为活性成分，用于治疗跌打损伤时即可达到治疗目的。以乳香、没药、川芎、红花、土鳖虫、血竭、胆南星、马钱子、当归、防风、白芷、羌活、升麻、菖蒲、螃蟹、龙骨十六味原料配伍使用时，可以达到最佳用药配伍。本发明组合物中乳香、没药为君药，乳香味辛苦性温，功能活血化瘀，行气散滞，又有较好的消肿止痛作用；没药味苦性平，亦长于活血止痛消肿；本发明药物组合物重用乳香和没药，相须为君。川芎、红花、土鳖虫、血竭为臣药，川芎味辛性温，功能通达气血，活血定痛，亦为伤科常用之品；红花味辛性温，功能活血化瘀，通利经脉；土鳖虫味咸性寒，功能破血逐瘀，续筋接骨，疗伤止痛；血竭味甘咸性平，既能活血化瘀止痛，又可止血生肌；以上四味，均为跌扑损伤常用之品，合以活血化瘀，消肿止痛，又兼止血之用，是为臣药。胆南星味苦性寒，功能清热化痰，用于本发明药物组合物，其义有二，既可清泄瘀血可能所化之热，又有化痰散结以助消肿之功；马钱子味苦性寒，长于散结消肿，通络止痛；胆南星与马钱子共起通络化痰、散结消肿作用，同属寒凉之品，既可制约本发明药物组合物中诸药的温燥，又可清解瘀热，是为臣药而兼佐药之用。当归味甘辛性温，功能补血活血止痛，既可佐助化瘀消肿止痛之力，又有化瘀生新之用，属于佐助之品。羌活味辛苦性温，功能祛风胜湿止痛；白芷味辛性温，功能祛风除湿，消肿止痛；防风味辛甘性微温，功能祛风胜湿，解痉止痛；升麻味辛甘性微寒，功能升散透表，清热解毒，羌活、白芷、防风、升麻四味，共起祛风除湿，消肿透邪之功，既可助君臣诸药消肿止痛，又可防止外伤之后，风湿表邪乘虚客犯之虞，亦属佐药。菖蒲味辛性温，功能化湿宁神，化湿有助于消肿，宁神有助于止痛；螃蟹味辛甘性温，功能补肾、利尿、舒筋，用于肾病，水肿，小便不利，小腿肌肉转筋等，螃蟹用于本发明药物组合物，意在利水舒筋，有助于祛湿消肿，以促进筋肉和柔活利而恢复功能；龙骨味甘涩微寒，功能镇静安神，收敛固涩，既可以安神宁心而除烦，又可以制约升散温燥诸药之太过。菖蒲、螃蟹、龙骨三味，亦为佐药。制备本发明药物组合物采用50～80％的乙醇或高度白酒(约50～80％)浸泡或提取，酒性辛温升散，有活血舒筋之功，又可助诸药布散患部组织，是为使药。

综上，本发明药物组合物以乳香、没药、川芎、红花、土鳖虫、血竭、胆南星、马钱子、当归、防风、白芷、羌活、升麻、菖蒲、螃蟹、龙骨十六味原料配伍使用时，以活血化瘀为主，消肿止痛、通络散结为辅，兼顾祛湿透表，清热宁神之功。针对急性伤筋所致的瘀血阻滞病机，确属合拍之方，疗效显著，止痛、消肿时间短，关节功能恢复优良，适用于各类外伤所致的急性伤筋(症见局部肿胀、出现瘀斑或青紫、疼痛剧烈、功能障碍等)以及急性软组织损伤而见上述主治证侯者，为临床治疗跌打损伤提供了新的选择。

具体实施方式

本发明提供了一种治疗跌打损伤的药物组合物，制成其活性成分的原料包括下述重量配比的组分：乳香2～4份、没药3～5份、川芎1～4份、红花1～4份、土鳖虫1～3份、血竭1～4份、胆南星1～4份、马钱子1～3份。

进一步优选，制成其活性成分的原料包括下述重量配比的组分：乳香2.5份、没药3.2份、川芎1.6份、红花1.6份、土鳖虫1.3份、血竭1.6份、胆南星1.6份、马钱子1.3份。

进一步优选，在上述原料的基础上再添加下述重量配比的组分：当归1～2份、防风1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龙骨1～2份，辅助发挥治疗跌打损伤的作用。

优选，下述重量配比的组分当归1份、防风1.6份、白芷1.6份、羌活1份、升麻1.6份、菖蒲1份、螃蟹1份、龙骨1份。

本发明治疗跌打损伤的药物组合物，它是以乳香、没药、川芎、红花、土鳖虫、血竭、胆南星和马钱子为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的外用制剂。使用上述八味原料配伍治疗跌打损伤时即可达到治疗目的，也可以在这八味原料的基础上根据临床需要，适量加减。如本发明药物添加当归、防风、白芷、羌活、升麻、菖蒲、螃蟹、龙骨。

其中，所述的外用制剂可以为酒剂、酊剂、搽剂、软膏剂、喷雾剂、贴膏剂或膏剂等外用制剂。

本发明还提供了制备本发明药物组合物的方法，它包括如下步骤：

a、称取原料；b、取原料用浓度为50～80％的乙醇提取，所得提取液按照常规制药方法，加入可接受的辅料或辅助性成分制备即得。也可以采用高浓度白酒采用浸提的方式，制备成酒剂。

本发明还提供了本发明药物组合物在制备治疗急性伤筋或急性软组织损伤的药物中的作用。急性伤筋有局部肿胀、出现瘀斑或青紫、疼痛剧烈、功能障碍等症状。

通过以下药效试验证明本发明药物组合物的有益效果。

1、试验药物与试剂：

本发明药物组合物，黄褐色液体，为60％乙醇渗滤液，由申请人制剂研究室制备。4种浓度分别为：0.375g(生药)/ml、0.250g(生药)/ml、0.125g(生药)/ml、0.0625g(生药)/ml。批号为000407-1，000407-2，000407-3，000407-4。

本发明药物组合物原料用量配比均为乳香2.5份、没药3.2份、川芎1.6份、红花1.6份、土鳖虫1.3份、血竭1.6份、胆南星1.6份、马钱子1.3份、当归1份、防风1.6份、白芷1.6份、羌活1份、升麻1.6份、菖蒲1份、螃蟹1份、龙骨1份。根据浓度要求按照上述用量配比称取不同重量的原料。

制备方法为：上述十六味原料，除马钱子外，其余十五味粉碎成粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(《中国药典2005年版》一部附录IO)，用60％乙醇作溶剂，浸渍48小时后，以每kg药材1～3ml/min的流速渗漉，收集漉液946ml；马钱子粉碎成粗粉，每次加10倍量60％乙醇回流三次，每次1小时，合并滤液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05～1.15(70～80℃热测)，用95％乙醇适量调节乙醇浓度为60％，滤过，滤液与上述渗漉液合并，静置，滤过，用60％乙醇调至总量1000ml，分装，即得。

正骨水由广西玉林制药厂生产，批号：99121306。

醋酸氟轻松软膏由天津药业有限公司生产，批号001463。

其余试剂均为国产分析纯等级。

2、实验动物：昆明种小鼠由成都中医药大学实验动物研究中心提供，一级，合格证号川实动管第7号。SD大鼠由四川省中药研究所实验动物研究室或四川省输血研究所提供，合格证号分别为川实动管第132号及川实动管第057号。

3、主要仪器：

WX-9B型微循环仪：徐州光学仪器总厂；CS501型超级恒温器：重庆试验设备厂；JN-A型精密扭力天平：上海第二天平仪器厂；722光栅分光光度计：上海第三分析仪器厂。

4、实验方法：本研究所用实验方法主要根据***药政局发布的“中药新药研究指南(药学、药理学、毒理学)”关章节进行。

5、数据处理：本研究数据均以 X±S(均值±标准差)表示。计量资料用t值法比较组间差异的显著性，计数资料用X²法比较组间差异，或用四川大学PEMS统计软件进行相应的统计学处理。

6、结果：

6.1对角叉菜胶、PGE₁所致大鼠皮肤毛细血管通透性亢进的影响

SD大鼠40只，体重250～300g，雌雄各半，将其脊柱两侧剪毛，每侧各2块，每块约1.5×1.5cm²，每块间隔1.5～2cm，剪毛处给药0.5ml/次，4次/天，每次间隔2h，涂抹去毛处。第二日，取0.25％角叉菜胶皮内注射于剪毛的上侧2点，每点0.05ml，2小时后，再取200μg/mlPGE₁皮内注射于剪毛的下侧2点，每点0.05ml，同时每半小时给药1次。于注射角叉菜胶3.5h后，尾静脉注入0.5％伊文思蓝生理盐水溶液1ml/100g(体重)，30min后大鼠脱颈椎致死，剪下背部去毛处皮肤，翻转后贴于白色搪瓷盘上，根据各盘斑色深浅将其分为10个级别，1个级别记1分，评分后剪碎，放入盛有丙酮生理盐水提取液(7∶3)10ml的有塞玻璃试管内，置阴暗处放置，每日轻轻摇动试管2～3次，3日后，离心取上清液于590nm处比色测定光密度，结果见表1。

表1  对角叉菜胶、PGE₁所致大鼠皮肤毛细血管通透性亢进的影响( X±S；n＝4)

组别	角叉菜胶		PEG1
					蓝斑分值	吸光度(590nm)	蓝斑分值	吸光度(590nm)
	对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(12.5％)本发明药物组合物(25.0％)本发明药物组合物(37.5％)醋酸氟轻松膏	2.38±0.921.88±0.841.38±0.74*1.38±0.52*1.13±0.35*	0.034±0.0110.027±0.0100.029±0.0080.014±0.010*0.020±0.008*	6.38±1.305.88±0.644.50±0.764.38±0.52*3.88±0.64*					0.143±0.0650.117±0.0360.110±0.0390.048±0.022*0.042±0.020*

与对照比^*P＜0.05

由表1结果可见，浓度为37.5％的本发明药物组合物对角叉菜胶及PGE₁所致的毛细血管通透性亢进均有显著的抑制效果，浓度为25％本发明药物组合物有一定作用，但12.5％的药液无明显影响。

6.2对大鼠外伤瘀血模型毛细血管通透性亢进的影响

SD大鼠40只，体重320～365g，雌雄各半，随机分为5组。将大白鼠大腿脱毛，选皮肤无损伤的大鼠在常规情况下饲养24小时，预给药一天，给药组每次每只0.1ml，共3次，涂抹去毛处，第2天用200g的砝码，自50cm高度自由落下，砸伤大白鼠的大腿，给药方式同前，24小时后自尾静脉注射0.5％伊文思蓝生理盐水溶液1ml/100g，20min后断头处死，剥下大腿着色皮肤，评分后剪碎，放入丙酮与生理盐水(7∶3)混合液10ml，置暗处放置，每日轻轻摇动试管2～3次，3日后，3000rpm离心后取上清液于590nm比色测定OD值，结果见表2。

表2  本发明药物组合物对大鼠外伤瘀血模型毛细血管通透性的影响( X±S；n＝8)

组别	蓝斑分值	染料透出量(OD)
			对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(12.5％)本发明药物组合物(25.0％)本发明药物组合物(37.5％)醋酸氟轻松膏(0.025％)	6.25±2.056.13±1.733.13±1.55**2.50±1.4**1.38±0.52**	0.140±0.0600.107±0.0200.097±0.020*0.086±0.030*0.006±0.002**

与60％乙醇比^*P＜0.05，^**P＜0.01

由表2结果可见，浓度分别为37.5％和25％的本发明药物组合物对外伤瘀血型大鼠的毛细血管通透性亢进均有显著的抑制效果，能明显抑制外伤瘀血模型的皮肤炎症，浓度为12.5％的本发明药物组合物则无明显作用。

6.3对蛋清所致大鼠足肿胀的影响

SD大鼠50只，体重100～120g，随机分5组，每鼠右后足每次浸泡于药液或60％的乙醇中1min，每目2次，连续3日，末次药后0.5h，于每鼠右后爪足垫皮下注射新鲜蛋清0.05ml致炎，分别于致炎后0.5、1、2、4、6h用不同浓度的药液或60％乙醇浸泡大鼠右后足，每次每足1min，共4次(6h后不再用药)，并于致炎前及致炎后0.5、1、2、4、6h，分别用排水法测定鼠爪肿胀程度，计算肿胀百分率，结果见表3。

表3  本发明药物组合物对蛋清所致大鼠足肿胀的影响( X±S；n＝10)

组别	肿胀百分率(％)
						0.5h	1h	2h	4h	6h
	对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(12.5％)本发明药物组合物(25.0％)本发明药物组合物(37.5％)正骨水	0.77±0.110.77±0.180.71±0.110.62±0.13*0.67±0.15	0.78±0.080.68±0.180.67±0.10*0.65±0.15*0.59±0.19*	0.75±0.100.59±0.18*0.57±0.05*0.53±0.12*0.42±0.16*	0.57±0.110.39±0.15*0.38±0.09*0.39±0.10*0.33±0.12*						0.37±0.080.26±0.13*0.27±0.10*0.27±0.12*0.24±0.11*

与对照组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

由表3所示，本发明药物组合物对蛋清所致大鼠足肿胀有较为明显的抑制作用。

6.4对甲醛所致小鼠足肿胀的影响

昆明种雄性小鼠50只，体重17～22g，随机分为5组，每鼠每次双足分别用不同浓度的药液或60％乙醇浸泡1min，每日2次，连续3日，第4日于每鼠右后爪足垫皮下注射5％甲醛0.015ml致炎，致炎后每间隔0.5h浸泡小鼠双足，每足1min，连续8次，并于4h后将小鼠断颈处死，在小鼠同一部位剪取左右双足，称取致炎及对照足重量，以左右足重量之差的mg数为足肿胀程度，结果表4。

表4  本发明药物组合物对甲醛所致小鼠足肿胀的影响( X±S；n＝10)

组别	足肿胀度(mg)	抑制率(％)	P值
				对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(6.25％)本发明药物组合物(12.5％)本发明药物组合物(25.0％)正骨水	83.55±18.5977.60±22.9053.85±14.0066.15±15.9452.50±15.29	-7.1235.5720.8337.16	-＞0.05＜0.01＜0.05＜0.01

由表4可见，本发明药物组合物对甲醛所致小鼠足肿胀有显著的抑制作用。

6.5对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响

昆明雄性种小鼠50只，体重18～22g，随机分为5组，每日分别用0.03ml不同浓度的药液或60％乙醇均匀涂小鼠两耳两次，间隔4h，连续3日，第4日每鼠左耳用二甲苯0.02ml均匀涂于耳廓两侧致炎，然后每间隔0.5h分别用0.03ml药液或60％乙醇涂小鼠左、右耳片，连续3次，2h后将小鼠断颈处死，沿耳廓基线剪下左右耳片，称取致炎及对照耳片重量，以左右耳片重量之差的mg数为耳肿胀程度，结果见表5。

表5  本发明药物组合物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响( X±S；n＝10)

组别	足肿胀度(mg)	抑制率(％)	P值
				对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(12.5％)本发明药物组合物(25.0％)本发明药物组合物(37.5％)正骨水	27.15±8.2724.30±7.2620.10±6.1918.80±8.5016.78±7.59	-10.5025.9730.7638.20	-＞0.05＜0.05＜0.05＜0.01

由表5可见，本发明药物组合物对二甲苯所致小鼠耳肿胀有显著抑制作用，且具有良好的量—效关系。

6.6对小鼠热板致痛的影响

将体重18～22g的昆明种雌性小鼠放到55±0.5℃的恒温热板上，测定每鼠的正常痛阈，以舔后足作为痛反应的指标。凡舔后足时间小于5秒或大于30秒或跳跃者弃之不用，将合格小鼠50只，重复测其正常痛阈值，取2次正常痛阈值平均值作为该鼠的基础痛阈，按其基础痛阈均匀分为4组，测基础痛阈后，用不同浓度的药液和60％乙醇浸泡小鼠双足1min，连续3次。第二日，每隔30min浸泡小鼠双足一次，连续4次，末次浸泡后30、60、90min分别测小鼠痛阈。若60秒仍无反应，将小鼠取出，按60秒计算，比较给药后痛反应的差异，结果见表6。

表6  本发明药物组合物对小鼠热板致痛的影响( X±S；n＝10)

组别	给药后痛阈值与给药前痛阈值的差值( X±S)
				30min	60min	90min
	对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(12.5％)本发明药物组合物(25.0％)本发明药物组合物(37.5％)正骨水	-0.12±0.380.08±0.420.46±0.67*0.34±0.681.02±1.24*	-0.04±0.13-0.03±0.290.40±0.4*0.40±0.54*0.70±0.99*				-0.03±0.230.07±0.350.27±0.630.40±0.680.33±0.66

与60％乙醇比较^*P＜0.05

由表6可见，本发明药物组合物可使小鼠对热板致痛舔后足的反应发生时间延迟，提示本发明药物组合物有一定的镇痛作用，并在给药后30min，60min时有显著的镇痛作用。

6.7对热刺激鼠尾致痛的影响

选140±10g体重大白鼠，雌雄不拘。用手固定大鼠后，将其尾浸于47±0.5℃的水浴中，以尾部回缩(甩尾)作为痛反应指标，凡甩尾时间小于6秒或大于10秒者，均弃之不用。选合格大鼠36只，重复测其正常痛阈值，取2次正常痛阈平均值，作为该鼠的基础痛阈值，测基础痛阈后，将大鼠尾放入盛有药液或60％乙醇的试管中浸泡1min，每1h浸泡1次，连续5次，次日晨每0.5h按法浸泡4次，末次浸泡后30min、60min、90min时测大鼠痛阈，比较给药前后的痛阈提高率，结果见表7。

表7  本发明药物组合物对热刺激鼠尾致痛的影响( X±S；n＝9)

组别	痛阈提高率(％)
				30min	60min	90min
	对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(25.0％)本发明药物组合物(37.5％)正骨水	0.01±0.120.21±0.18*0.35±0.23*0.31±0.47*	0.14±0.160.27±0.260.44±0.38*0.38±0.38				0.09±0.180.24±0.220.41±0.37*0.17±0.26

与60％的乙醇比较^*P＜0.05

由表7可见，本发明药物组合物对热刺激致痛引起的大鼠甩尾有抑制作用，能使大鼠疼痛反应的潜伏期明显延长，且具良好的量—效关系，提示本发明药物组合物有一定镇痛作用。

6.8对小鼠耳廓微循环的影响

昆明种雌性小鼠50只，体重19～25g，随机分为5组，腹腔注射戊巴比妥35mg/kg麻醉后，将小鼠侧卧于解剖镜载物台上，耳廓展开，表面滴液体石蜡，在微循环仪上进行监测，测定给药前的管径、血流情况，在耳廓上局部涂沫不同浓度的药液或60％乙醇，每耳0.02ml，共3次，测定末次给药后10min、20min时的小鼠血管管径及血流变化情况，结果见表8和9。

表8  本发明药物组合物对小鼠耳廓微血管管径的影响( X±S；n＝10)

组别	微动脉血管径增长(μm)		微静脉血管径增长(μm)
					给药后10min	给药后20min	给药后10min	给药后20min
	对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(12.5％)本发明药物组合物(25.0％)本发明药物组合物(37.5％)正骨水	1.03±0.131.02±0.151.07±0.191.33±0.21*1.05±0.14	1.03±0.111.03±0.271.12±0.221.32±0.23*1.07±0.16	1.00±0.111.03±0.081.09±0.191.20±0.20*1.06±0.14					1.03±0.141.04±0.061.21±0.23*1.30±0.23*1.11±0.20

与60％的乙醇比较^*P＜0.05

表9  本发明药物组合物对小鼠耳廓微循环血流的影响( X±S；n＝10)

组别	微动脉流速增长率(×100％)		微静脉流速增长率(×100％)
					给药后10min	给药后20min	给药后10min	给药后20min
	对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(12.5％)本发明药物组合物(25.0％)本发明药物组合物(37.5％)正骨水	0.07±0.11-0.05±0.18-0.11±0.19-0.06±0.160.11±0.45	0.03±0.12-0.04±0.19-0.12±0.18-0.01±0.150.13±0.37	-0.04±0.170.05±0.27-0.11±0.220.03±0.210.00±0.20					0.00±0.190.06±0.190.00±0.130.06±0.350.03±0.32

由表8和表9可见，高浓度的本发明药物组合物能使小鼠耳廓血管管径明显扩大，低浓度仅有一定的作用趋势，提示本发明药物组合物具有一定扩张血管的作用，且具有量—效关系，但其对耳廓微血管流速无明显作用。

6.9对小鼠实验性微循环障碍的影响

昆明种雄性小鼠40只，体重19～27g，随机分为4组，腹腔注射戊巴比妥35mg/kg麻醉后，将小鼠侧卧于载物台上，耳廓涂液体石蜡，固定于玻璃板上，在耳廓上局部涂不同浓度的药液或60％的乙醇，每耳0.02ml，10min后，腹腔注射肾上腺素(Ad)1mg/kg，注射肾上腺素的同时，第二次在小鼠耳廓上局部给药。在微循环仪进行监测，测定给药前和注射肾上腺素后5、10、15min时的血管管径和毛细血管开放个数，结果见表10、表11、表12。

表10  本发明药物组合物对小鼠耳廓微动脉血管管径的影响( X±S；n＝10)

组别	注射Ad后微动脉管径的变化率(×100％)
					5min	10min	15min	20min
	对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(12.5％)本发明药物组合物(25.0％)正骨水	-0.44±0.10-0.37±0.13-0.29±0.14*-0.24±0.21*	-0.39±0.08-0.35±0.11-0.25±0.12*-0.23±0.15*	-0.35±0.11-0.32±0.13-0.18±0.12*-0.22±0.12*					-0.32±0.12-0.27±0.11-0.17±0.11*-0.15±0.17*

与60％的乙醇比较^*P＜0.05

表11  本发明药物组合物对小鼠耳廓微静脉血管管径的影响( X±S；n＝10)

组别	注射Ad后微静脉管径的变化率(×100％)
					5min	10min	15min	20min
	对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(12.5％)本发明药物组合物(25.0％)正骨水	-0.32±0.14-0.24±0.14-0.17±0.11*-0.07±0.15**	-0.34±0.14-0.30±0.15-0.20±0.15*-0.09±0.17**	-0.32±0.12-0.32±0.16-0.13±0.14*-0.09±0.16**					-0.30±0.13-0.30±0.17-0.10±0.11**-0.06±0.13**

与60％的乙醇比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

表12  本发明药物组合物对小鼠耳廓毛细血管开放个数的影响( X±S；n＝10)

组别	给药前微毛细血管开放个数	注射Ad后毛细血管开放个数(个)
						5min	10min	15min	20min
		对照(60％的乙醇)本发明药物组合物(12.5％)本发明药物组合物(25.0％)正骨水	5.2±0.795.9±0.745.6±0.706.3±0.82	2.6±0.702.6±1.073.0±0.474.3±1.06*	2.8±0.422.3±0.954.4±0.97*4.7±1.06*					2.9±0.322.7±0.824.9±0.74*5.3±0.82*	3.0±0.472.7±1.165.5±0.53*6.0±0.82*

与60％的乙醇比较^*P＜0.05

由表10、表11及表12可见，高浓度本发明药物组合物对由腹腔注射肾上腺素造成的小鼠实验性耳廓微循环障碍有一定的改善作用，能缩短管径恢复正常所需时间，并且能有效地使毛细血管开放个数恢复正常。提示本发明药物组合物对应用肾上腺素引起的微循环障碍有良好的预防和改善作用。

6.10体外透皮吸收实验

6.10.1样品制备：将昆明种小鼠背部以8％Na₂S脱毛，24h后选皮肤无损伤的小鼠处死，剥下皮肤，仔细分离除去皮下脂肪及***，剪取1cm²左右以502胶水将其固定在样品池下口，角质层面向样品池。将本发明药物组合物56.3％2ml放入样品池中，于接收池中加入20ml生理盐水作接受液，置于37℃恒温水浴中并不断搅拌。于一定的时间(16h、24h、48h)取接受液5ml，并补加5ml生理盐水到接受池中。将取出的接受液蒸干，加浓氨水1ml及水9ml，移至分液漏斗中，加氯仿20ml萃取，分取氯仿层，水层用氯仿萃取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为测试样品。

6.10.2标准液制备：精密称取***标准品1.20mg，甲醇定容至2ml，取200μl溶液置于25ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即4.8μg/ml。

6.10.3测试条件：用十八烷基键合硅胶为填充剂，十二烷基硫酸钠溶液(0.001mol/L，H₃PO₄调pH4.2)-乙腈-水(60∶37∶3)为流动相，检测波长为254nm，理论塔板数按***峰计算不低于9000。

6.10.4结果见表13。

表13  本发明药物组合物体外对***的透皮吸收

样品	出峰时间(min)	峰面积(mAU)	进样量(μL)	接受液含***总量(μg)
					标准液16h24h48h	13.44413.50813.59313.605	52.875061.808675.757767.12146	5202020	-0.3281.1271.637

从表13可见，很高浓度的本发明药物组合物体外***的透皮吸收量也甚微小。

7、讨论：

本发明药物组合物以乳香、没药、川芎、红花、土鳖虫、血竭、胆南星、马钱子、当归、防风、白芷、羌活、升麻、菖蒲、螃蟹、龙骨为原料配伍而成的中药复方制剂，具有活血化瘀、消肿止痛、舒筋散结的功效，主治急性软组织损伤、急性伤筋等症。

炎症反应一般分为早、中、晚三期，即以毛细血管扩张和通透性亢进，渗出水肿为主的早期炎症，以白细胞向炎灶内聚集为主的中期炎症及以组织增生、炎灶屏障形成为主的晚期炎症，上述三期又可称为血管反应期、细胞反应期和组织反应期。就软组织损伤而言，早期炎症在其病理损伤上占主要地位。实验结果表明，本发明药物组合物对早期炎症较为敏感，具有良好的抗炎作用，对角叉菜胶和PGE₁所致大鼠皮肤毛细血管通透性亢进有明显抑制作用，表明其不仅可抑制PGE₁的合成，而且可直接对抗PGE₁的致炎作用；本发明药物组合物还能显著抑制蛋清所致的大鼠足跖肿胀，对二甲苯所致的小鼠耳肿胀、甲醛所致的小鼠足肿胀也显示出良好的对抗作用。本发明药物组合物还能有效的降低大鼠外伤瘀血模型毛细血管的通透性，明显抑制外伤瘀血模型的皮肤炎症，从而达到活血化瘀、消肿、抗炎的目的。

采用热刺激致痛大鼠甩尾和热板所致小鼠疼痛两个实验模型对本发明药物组合物的镇痛效果进行研究，结果表明，本发明药物组合物能显著提高热板所致小鼠疼痛的痛阈值，延迟小鼠舔后足反应发生的时间。对热刺激致痛所引起的大鼠甩尾试验具明显的抑制作用，能使大鼠疼痛反应潜伏期延长，药效发挥快。

研究结果表明，本发明药物组合物不仅对正常小鼠耳廓微血管具扩张作用，而且对肾上腺素引起的微循环障碍有良好的预防和改善作用。与60％乙醇组同一时间比较，高浓度37.5％本发明药物组合物对微动脉、微静脉管径、毛细血管开放个数的恢复均有改善作用，能缩短局部微循环恢复正常所需的时间。

综上，本发明药物组合物抗炎、镇痛、改善微循环作用明显，某些指标优于阳性对照组，且在较多的药理作用中均有良好的剂量—效应关系。

申请人将本发明药物组合物提供给国家体委乒乓球队教练，国家体委摩托技术学校，湖南株州运动创伤研究所，四川省宜宾市第一人民医院副院长，高县人民医院，宜宾市医药检验所及个人无偿使用，病例约900余例，有效率达98％以上，疗效显著。申请人将本发明药物组合物制备而得的酒剂在四川省宜宾市翠屏区人民医院民生分院及宜宾县骨科医院进行试验，接受试验的65例患者，均为年龄在15～65周岁，其中急性57例，发病时间短于一周，经过1～3日治疗后，全部痊愈，痊愈率达100％，慢性8例，发病时间为3～7年的腰肌劳损等经过3～7日治疗，疼痛、功能障碍等症状明显减轻，总有效率达100％，具体统计如下：

一、本发明药物组合物在四川省宜宾市翠屏区人民医院民生分院进行临床试验的报告

1、病例选择：各种中、西医诊断为急、慢性软组织损伤，关节扭伤，韧带拉伤，年龄在10～75周岁的患者。本组32例中男26例(占81.25％)，女6例(占18.75％)；年龄15-65岁；急性软组织损伤27例(占84.38％)，慢性软组织损伤5例(占15.62％)；其中肌肉损伤12例(占37.5％)，韧带损伤15例(占46.9％)例，关节损伤5例(占15.6％)。

2、排除病例：

A、开放性损伤，或合并有心脑血管、肝、肾、造血***等原发性疾病及精神病患者。

B、年龄在10周岁以下或75周岁以上，妊娠及哺乳期妇女，对酒精过敏者。

C、其它不符合纳入标准，未按规定用药，无法判断疗效，或资料不全等影响疗效或安全性判断者。

3、治疗方法：所有病例均单独使用本发明药物组合物酒剂外搽或外敷(视损伤程度每天用药4～10次)，同时停用其它药物。

4、治疗结果

(1)疗效评定标准：

A、急性(或慢性)软组织损伤用药3天(或7天以内)受伤部位疼痛、肿胀完全消失，瘀血完全消散，能自由活动，关节功能等完全恢复为痊愈。

B、急性(或慢性)软组织损伤用药3天(或7天以内)受伤处疼痛、肿胀明显减轻，瘀血明显消散，能较自由活动，关节功能部分恢复为显效。

C、急性(或慢性)软组织损伤用药3天(或7天以内)受伤处疼痛、肿胀稍有减轻，瘀血稍有消散，不能自由活动，关节功能稍有恢复为有效。

D、急性(或慢性)软组织损伤用药3天(或7天以内)受伤处症状没有改善或者加重为无效。

(2)治疗结果：本组32例，急性软组织损伤27例经1-3日治疗后全部痊愈。慢性软组织损伤5例经3-7日治疗后3例痊愈，2例显效。痊愈率93.8％，显效率6.2％，总有效率100％。

二、本发明药物组合物在四川省宜宾县骨科医院进行临床试验的报告

1、病例选择：各种中、西医诊断为急、慢性软组织损伤，关节扭伤，韧带拉伤，年龄在10～75周岁的患者。本组33例中男22例(占67％)，女11例(占33％)；年龄15-65岁；急性软组织损伤30例(占91％)，发病时间在10分钟至1周之间，慢性软组织损伤3例(占9％)发病时间在3年至7年之间。其中肌肉、肌腱损伤12例(占37％)，韧带损伤7例(占21％)例，关节损伤5例(占15％)，其它共9例(占27％)。

2、排除病例：

A、开放性损伤，或合并有心脑血管、肝、肾、造血***等原发性疾病及精神病患者。

B、年龄在10周岁以下或75周岁以上，妊娠及哺乳期妇女，对酒精过敏者。

C、其它不符合纳入标准，未按规定用药，无法判断疗效，或资料不全等影响疗效或安全性判断者。

3、治疗方法：所有病例均单独使用本发明药物组合物酒剂外搽或外敷(视损伤程度每天用药4-10次)，同时停用其它药物。

4、治疗结果

(1)疗效评定标准：

A、急性(或慢性)软组织损伤用药3天(或7天以内)受伤部位疼痛、肿胀完全消失，瘀血完全消散，能自由活动，关节功能等完全恢复为痊愈。

B、急性(或慢性)软组织损伤用药3天(或7天以内)受伤处疼痛、肿胀明显减轻，瘀血明显消散，能较自由活动，关节功能部分恢复为显效。

C、急性(或慢性)软组织损伤用药3天(或7天以内)受伤处疼痛、肿胀稍有减轻，瘀血稍有消散，不能自由活动，关节功能稍有恢复为有效。

D、急性(或慢性)软组织损伤用药3天(或7天以内)受伤处症状没有改善或者加重为无效。另对一些损伤程度较严重患者可适当延长使用。

(2)治疗结果：本组33例，急性软组织损伤30例经1-3日治疗后全部痊愈。慢性软组织损伤3例经3-7日治疗后1例痊愈，2例显效。痊愈率94％，显效率6％，总有效率100％。

Claims (10)

1、治疗跌打损伤的药物组合物，其特征在于，制成其活性成分的原料包括下述重量配比的组分：乳香2～4份、没药3～5份、川芎1～4份、红花1～4份、土鳖虫1～3份、血竭1～4份、胆南星1～4份、马钱子1～3份。

2、根据权利要求1所述的治疗跌打损伤的药物组合物，其特征在于，制成其活性成分的原料包括下述重量配比的组分：乳香2.5份、没药3.2份、川芎1.6份、红花1.6份、土鳖虫1.3份、血竭1.6份、胆南星1.6份、马钱子1.3份。

3、根据权利要求1或2所述的治疗跌打损伤的药物组合物，其特征在于，制成其活性成分的原料还包括下述重量配比的组分：当归1～2份、防风1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龙骨1～2份。

4、根据权利要求1或2所述的治疗跌打损伤的药物组合物，其特征在于，制成其活性成分的原料还包括下述重量配比的组分：当归1份、防风1.6份、白芷1.6份、羌活1份、升麻1.6份、菖蒲1份、螃蟹1份、龙骨1份。

5、根据权利要求3所述的治疗跌打损伤的药物组合物，其特征在于，它是以乳香、没药、川芎、红花、土鳖虫、血竭、胆南星、马钱子、当归、防风、白芷、羌活、升麻、菖蒲、螃蟹、龙骨为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的外用制剂。

6、根据权利要求5所述的治疗跌打损伤的药物组合物，其特征在于，所述的外用制剂为酒剂、酊剂、搽剂、软膏剂、喷雾剂、贴膏剂或膏剂。

7、制备权利要求1所述的药物组合物的方法，它包括如下步骤：

a、称取下述重量配比的原料：乳香2～4份、没药3～5份、川芎1～4份、红花1～4份、土鳖虫1～3份、血竭1～4份、胆南星1～4份、马钱子1～3份；

b、取原料用浓度为50～80％的乙醇提取，所得提取液按照常规制药方法，加入可接受的辅料或辅助性成分制备即得。

8、制备权利要求3所述的药物组合物的方法，它包括如下步骤：

a、称取下述重量配比的原料：乳香2～4份、没药3～5份、川芎1～4份、红花1～4份、土鳖虫1～3份、血竭1～4份、胆南星1～4份、马钱子1～3份、当归1～2份、防风1～4份、白芷1～4份、羌活1～2份、升麻1～4份、菖蒲1～2份、螃蟹1～2份、龙骨1～2份；

b、取原料用浓度为50～80％的乙醇提取，所得提取液按照常规制药方法，加入可接受的辅料或辅助性成分制备即得。

9、权利要求1所述的药物组合物在制备治疗急性伤筋或急性软组织损伤的药物中的作用。

10、权利要求3所述的药物组合物在制备治疗急性伤筋或急性软组织损伤的药物中的作用。