CN100337649C - 治疗类风湿性关节炎的药物及其制备方法 - Google Patents
治疗类风湿性关节炎的药物及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
一种治疗类风湿性关节炎的药物及其制备方法,其按重量比选用下述组分,桑枝(2-6)、当归(2-6)、防风(1-4)、川牛膝(1-4);其制备方法是,将上述药材分别经洗净、切碎、置于提取罐内,分别加各药物质量8-16倍量的水,煮沸0.8-1.2小时,各药液经200目筛网过筛,取滤液,在减压条件下,各提取液浓缩至相对密度为1.05-1.08(60℃热测)的浓缩液,再经120目筛过筛;将滤后各药材,按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次;再把上述各药材三次提取的浓缩液合并,喷雾干燥,分别得各提取物;将上述各药材提取物经60目筛网过筛,置混合机内混合均匀,进行胶囊充填,即为本发明胶囊剂药品;本发明药适用于类风湿性关节炎的治疗及预防保健。
Description
技术领域
本发明涉及一种治疗类风湿性关节炎的药物,具体地说是以中草药为原料制备的中成药;本发明还涉及该药物的制备方法。
背景技术
现代医学对类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,下简称RA)的发病机理尚不十分清楚,目前普遍认为是一极其复杂的自身免疫过程。中医将本病归属于“痹病”(Arthralgia Syndrome)范畴。中医认为寒冷、潮湿、疲劳、创伤及精神刺激、营养不良等均可成为本病的诱因。营血不足、气血虚弱、肝肾亏损,复受风寒潮湿是本病的主要因素。
目前RA的发病率仍呈上升趋势。RA病有反复发作,进行性病变的特点,致残率很高,对人们的工作、生活影响极大。目前,现代医学对RA尚无有效的根治办法。美国的发生率约为成人的1%。我国患病率约为0.32-0.36%,可发生于青少年、成人及老人,女性多于男性。
由于本病的病因不明,目前临床上,西医主要采取减轻患者的病症状,控制疾病的发展,进行已破环的关节骨的修复,而缺乏根治本病的方案以及预防本病的措施。中医按临床病程分期、分型辩证治疗。中药复方治疗RA具有独特的优势:既能够抗炎镇痛,又具备免疫抑制及免疫调节效应,表现出整体调节、多层次、多环节、多靶点的作用,而且还有缓解和对抗西药毒副作用的功效,易于长期服用。
但存在的问题是由于RA病情反复发作,病程长,不易治愈的特点,西药治疗常用非甾体抗炎药(NSAIDS)、免疫抑制剂、糖皮质激素等进行长期治疗,因此,临床常出现西药严重的不良反应,如胃肠道出血,骨髓抑制,肾功能损害,肺感染等并发症。中医中药的治疗虽然具有疗效好、易于长期服用等优点,但同时也存在中医疗效可重复性差,缺乏标准化,规范化的药理、药化、药效学的研究。更有中药现有治疗RA的处方及中成药产品,多用毒副作用大的一些中药,如附子、制川乌、制草乌、制马钱子、麻黄、细辛、防己、雷公藤、全竭、蜈蚣、土鳖虫、毒蛇等,于人体有害。
发明内容
本发明的目的在于改进现有技术之缺点而提供一种规范化、重复性好、无毒副作用、疗效佳的治疗类风湿性关节炎的药物。
本发明的另一目的是提供该治疗类风湿性关节炎的药物的制备方法。
为实现上述目的,本发明采取下述设计方案:该方案是基于祖国医学对类风湿性关节炎症状的认识及治疗原则,参考现代药理研究成果,从祖国医药学宝库中,筛选出活血祛风、消肿止痛、通利关节的中草药,按中医理论组方,提取精华,使其达消炎、镇痛、通利关节而又无毒副作用的目的;另外,通过标准化的生产制备,使药理、药化、药效规范化。
本发明药物是由下列组分按重量比制成:
桑枝 2-6 当归 2-6
防风 1-4 川牛膝 1-4
将上述各组分制成本发明药物的生产方法是:
1、按上述重量比取桑枝、当归、防风、川牛膝药材,分别经净选,去除杂质,清水淋洗干净,切碎,容置于提取罐内,分别加各药物质量8-16倍量的水,煮沸0.8-1.2小时,各药液经200目筛网过滤,取滤液,在减压条件下,各提取液浓缩至相对密度,为1.05-1.08(60℃热测)的浓缩液,再经120目筛过滤;
2、将滤后各药材,按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次;
3、把上述各药材三次提取的浓缩液合并,进行喷雾干燥,分别制得桑枝提取物、当归提取物、防风提取物、川牛膝提取物;
4、将上述各药材提取物经60目筛网过滤,置混合机内进行混合均匀,进行胶囊充填,即为本发明胶囊剂药品。
本发明选用的桑枝性平,祛风湿,利关节,行水消肿;当归性温,补血活血,祛湿散寒,养血除痹;防风性温,祛风散寒,胜湿止痛,消肿散结;川牛膝性平,活血祛瘀,通利关节。四药提取物含有下述活血抗炎及止痛的活性成分:桑枝黄酮,当归阿魏酸,当归多糖,防风香豆素,防风色原酮,防风多糖,川牛膝杯苋甾酮,川牛膝多糖等。四药合伍,协同共达活血祛风,消肿止痛,通利关节的功能,其适用于类风湿性关节炎的治疗及预防保健,如:关节肿胀;关节呈对称性、持续性的疼痛与压痛;早晨或睡醒之后,关节出现僵硬、活动不灵,需活动或温暖后方能缓解。实验室检查见血沉(ESR)增快;C反应蛋白(CRP)增高;类风湿因子(RF)呈阳性等。
本发明药物使用方法:每日两次,每次2粒胶囊。
为表明本发明药物对类风湿性关节炎病症的治疗效果,本发明药物曾于2003-2004年进行了动物试验。现把动物试验设置方案与结果介绍如下:
1、实验材料
1.1试验药物
本发明药[药品试验代号:生科健络(JEF)]呈褐色细粉,易吸潮。
批号:03001;生产日期:2003.12.03;由香港生物科技研究院有限公司提供。
1.2阳性对照药:
万通筋骨片,国药准字Z20025183号,通化万通药业股份有限公司生产,批号:20031036。
1.3试验动物
NIH小鼠,由广东省实验动物中心提供,动物合格证号:2002A022;
实验环境合格证:粤检证字2001C020号。
1.4试剂及药品
致炎剂:二甲苯,分析纯,广州化学试剂厂生产。
冰醋酸,AR级,广州化学试剂厂生产。
1.5剂量设置
本发明药及阳性对照药的给药剂量如下表1所示。
表1 按体表面积等效系数换算给药剂量(g/kg表示克/千克,下同)
组别 | 成人剂量(g/70kg) | 相当于成人倍数 | 大鼠剂量(g/kg) | 小鼠剂量(g/kg) | |
本发明药 | 低剂量 | 1.0 | 1 | --- | 0.129 |
中剂量 | 3.0 | 3 | --- | 0.387 | |
高剂量 | 9.0 | 9 | --- | 1.161 | |
万通筋骨片 | 3.077 | 3 | --- | 1.190 |
剂量设计依据:
本发明药给70千克成人每日服用的剂量为1克,按体表积换算成小鼠的等效剂量为0.129克/千克。阳性对照药均采用相当于成人服用剂量的3倍作为对照剂量,因此,万通筋骨片成人(70千克)的每日服用剂量为3.077克,按体表面积换算成小鼠的等效剂量为0.397克/千克,3倍剂量为1.190克/千克。
2、实验方法
2.1本发明药急性毒性试验
2.1.1本发明药的一次经口最大耐受量试验
选用体重18-22克健康NIH小鼠40只,雌雄各半,实验前禁食不禁水12小时以上,每只小鼠均一次大剂量给予本发明药混悬液最大浓度和最大体积0.8毫升;给药后连续观察7天,判断毒性反应,注意小鼠在7天观察期内是否出现精神、活动、饮食异常情况及死亡情况。对于死亡的小鼠应立即解剖,肉眼观察重要脏器心、肝、脾、肺、肾等是否有明显病变。
2.1.2本发明药的多次给药的最大耐受量实验
选用体重18-22克健康NIH小鼠40只,雌雄各半,实验前禁食不禁水12小时以上,然后每隔2小时给药一次,给予本发明药混悬液最大浓度进行灌胃0.5毫升/只;全天共给药4次,给药后连续观察7天,判断毒性反应。记录小鼠给予受试样品期间及观察期内是否出现精神,活动,饮食异常情况及死亡情况,对于死亡的小鼠立即进行解剖观察心、肝、脾、肺、肾等。计算受试样品的最大耐受量。
2.2.本发明药对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的作用
选取成年健康NIH小鼠50只,体重25-30克,均为雄性。设置5个剂量组,分别为空白对照组、本发明药低、中、高剂量组和阳性对照组,每组10只小鼠。
实验开始前各组小鼠分别给药3天,其中本发明药低、中、高剂量组分别给药剂量为0.129克/千克、0.387克/千克、1.161克/千克,相当于70千克成人临床拟用剂量的1倍、3倍、9倍;空白对照组给药等体积的生理盐水;阳性对照组给予万通筋骨片1.190克/千克,相当于70千克成人临床服用剂量3.077克的3倍。于末次给药30分钟后开始进行致炎作用。将二甲苯0.05毫升滴于小鼠的右耳,以左耳作为对照。滴加致炎剂后30分钟后将小鼠脱颈椎处死,沿耳廓基线剪下两耳,用直径9毫米的打孔器分别在左右两耳同一部位打下圆耳片,称重,求左、右耳片重量之差与左耳重量的比值作为肿胀度,比较组间差异。
肿胀度=(右耳重-左耳重)/左耳重*100%
抑制率%=(空白组肿胀度-给药组肿胀度)/空白组肿胀度×100%
2.3本发明药的镇痛作用试验(化学剌激法)
取体重20±2克的小鼠50只,雌雄各半,随机分成5组,即空白对照组,本发明药低、中、高剂量组和阳性对照组,每组10只小鼠。实验前连续给药3天,其中本发明药低、中、高剂量组小鼠灌胃剂量为0.129克/千克、0.387克/千克、1.161克/千克,相当于70千克的成年人每日服用本发明药的1、3、9倍;阳性对照组给予万通筋骨片1.190克/千克,相当于70千克成人临床服用剂量的3倍,相当于70千克成人临床服用剂量3.077克的3倍;空白对照组小鼠灌胃给予等体积的生理盐水。于末次给药1小时后,每鼠腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.1毫升/10克体重,记录注射致痛剂后20分钟内各鼠扭体次数,计算药物的镇痛百分率。
药物的镇痛抑制率%=(空白组扭体数-给药组扭体数)÷空白组扭体数×100%
3.实验结果
3.1本发明药急性毒性试验结果
3.1.1本发明药的一次经口最大耐受量试验结果
小鼠灌胃给予本发明药混悬液最大浓度(该样品的最大溶解度为50%,为深褐色匀质溶液)和最大体积0.8毫升后,当天无出现动物死亡;连续观察7天,小鼠毛色、活动、饮食均正常,无死亡发生。给药后的第8天处死动物,解剖肉眼观察心、肝、脾、肺、肾等均无异常发现。由于给药体积及浓度不能再增大,按体表面积折算成70千克的成年人一次性口服本发明药的总量不少于155.2克,相当于70千克的成年人每日服用剂量(1克/日)的155倍。
3.1.2本发明药的多次给药的最大耐受量试验结果
小鼠当天给予受试样品最大浓度(该样品的最大溶解度为50%;为深褐色匀质溶液)共计4次后无一例死亡,连续观察7天见小鼠毛色光滑,活动良好,饮食正常,无死亡发生。给药后的第8天处死动物,解剖肉眼观察心、肝、脾、肺、肾等均无异常发现。提示小鼠给予本发明药混悬液的总量为1克,即本发明药对于小鼠的最大耐受量不少于1克,按体重表面积折算成70千克的成年人服用剂量不少于387.9克,相当于70千克的成年人每日服用剂量(1克/日)的约388倍,由此说明,本发明药在此剂量下,未出现毒性反应。
3.2本发明药的对二甲苯致小鼠耳肿胀的试验结果
二甲苯致小鼠耳肿胀的试验结果见表2所示。
表2 对小鼠二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的作用(
X±SD,n=10)
组别 | 给药剂量(克/千克) | (右耳-左耳)重量(毫克) | 左耳重量(毫克) | 肿胀度 | 抑制率(%) |
空白对照组 | NS | 22.2±4.7 | 28.4±3.5 | 79.9±23.1 |
发明药低剂量组 | 0.129 | 18.9±7.7△ | 26.6±2.2△ | 70.8±28.0△ | 11.4 |
发明药中剂量组 | 0.387 | 1.46±6.6** | 28.5±4.4△ | 52.9±26.0* | 33.8 |
发明药高剂量组 | 1.161 | 11.2±4.9*** | 28.0±3.6△ | 41.0±20.0*** | 48.7 |
阳性对照组 | 1.190 | 13.0±3.5*** | 27.8±2.2△ | 47.1±12.8*** | 41.1 |
与空白对照组相比,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001,△P>0.05
由以上实验结果可得,小鼠经二甲苯滴耳后,引起毛细血管的通透性增加,使炎性物质渗出从而导致耳肿胀,本发明药的抑制率分别为11.4%、33.8%、48.7%。其中本发明药的中、高剂量组的肿胀度与同期空白对照相对,具有显著性差异;阳性对照组的抑制率为41.1%,与同期空白组相比,具有显著性差异;因此,初步认为本发明药具有一定的抗炎作用,但二甲苯致炎症模型仅为抗炎药理作用的初筛,需进一步进行其它抗炎实验综合评价药的作用效果。
3.3本发明药对化学剌激引起小鼠扭体反应的镇痛作用
本发明药对冰醋酸引起小鼠腹腔痛疼的镇痛作用如表3所示。
表3本发明药对化学剌激引起小鼠扭体的镇痛作用(
X±SD,n=10)
组别 | 给药剂量(克/千克) | 扭体次数(N) | 抑制率(%) |
空白对照组 | NS | 46.9±13.9 | - |
发明药低剂量组 | 0.129 | 32.7±12.0* | 30.3 |
发明药中剂量组 | 0.387 | 22.0±6.3*** | 53.1 |
发明药高剂量组 | 1.161 | 20.4±6.8*** | 56.5 |
阳性对照组 | 1.190 | 27.4±6.1*** | 41.6 |
与空白对照组相比,*P<0.05,***P<0.001。
由实验结果可得,本发明药的低、中、高剂量组镇痛抑制率分别为30.3%、53.1%、56.5%;本发明药的三个剂量组均能减少冰醋酸所致小鼠扭体次数,与同期空白对照组相比,均具有显著性差异(*P<0.05,***P<0.01);阳性对照组的镇痛抑制率为41.6%,与同期空白对照组相比具有显著性差异。
3.实验结论
综合上述实验结构提示,本发明药经小鼠一次及一日多次口服给药,其最大耐受量相当于70千克的成年人每日服用剂量(1克/日)的155倍和388倍,均未出现毒性反应;对小鼠二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀试验,本发明药的中、高剂量均具有显著的消炎作用,抑制率分别为33.8%和48.7%;对化学剌激引致小鼠扭体试验,本发明药的三个剂量组均有显著的镇痛作用,抑制率分别为30.3%,53.1%和56.5%。以上试验中,本发明药的三个剂量之间有较好的量效关系。在以上试验中,本发明药高剂量组的给药剂量(1.161克/千克)低于阳性对照药万通筋骨片的给药剂量(1.190克/千克),显示本发明药有较好的药理活性。
具体实施方式
实施例1
本发明按重量比选取下列药物成分:
桑枝2, 当归6,
防风1, 川牛膝4;
将上述各组分制成本发明药物的生产方法是:
1、按上述重量比取桑枝、当归、防风、川牛膝药材,分别经净选,去除杂质,清水淋洗干净,切碎,容置于提取罐内,分别加各药物质量8倍量的水,煮沸0.8小时,各药液经200目筛网过滤,取滤液,在减压条件下,各提取液浓缩至相对密度,为1.05(60℃热测)的浓缩液,再经120目筛过滤;
2、将滤后各药材,按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次;
3、把上述各药材三次提取的浓缩液合并,进行喷雾干燥,分别制得桑枝提取物、当归提取物、防风提取物、川牛膝提取物;
4、将上述各药材提取物经60目筛网过滤,置混合机内进行混合均匀,进行胶囊充填,即为本发明胶囊剂药品。
5、将上述各药材提取物经60目筛网过滤,置混合机内进行混合均匀,进行胶囊充填,即为本发明胶囊剂药品。
实施例2
本发明按重量比选取下列药物成分:
桑枝6, 当归2,
防风4, 川牛膝1;
将上述各组分制成本发明药物的生产方法是:
1、按上述重量比取桑枝、当归、防风、川牛膝药材,分别经净选,去除杂质,清水淋洗干净,切碎,容置于提取罐内,分别加各药物质量16倍量的水,煮沸1.2小时,各药液经200目筛网过滤,取滤液,在减压条件下,各提取液浓缩至相对密度,为1.08(60℃热测)的浓缩液,再经120目筛过滤;
2、将滤后各药材,按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次;
3、把上述各药材三次提取的浓缩液合并,进行喷雾干燥,分别制得桑枝提取物、当归提取物、防风提取物、川牛膝提取物;
4、将上述各药材提取物经60目筛网过滤,置混合机内进行混合均匀,进行胶囊充填,即为本发明胶囊剂药品。
5、将上述各药材提取物经60目筛网过滤,置混合机内进行混合均匀,进行胶囊充填,即为本发明胶囊剂药品。
实施例3
本发明按重量比选取下列药物成分:
桑枝3, 当归4,
防风2, 川牛膝3;
将上述各组分制成本发明药物的生产方法是:
1、按上述重量比取桑枝、当归、防风、川牛膝药材,分别经净选,去除杂质,清水淋洗干净,切碎,容置于提取罐内,分别加各药物质量10倍量的水,煮沸1小时,各药液经200目筛网过滤,取滤液,在减压条件下,各提取液浓缩至相对密度,为1.07(60℃热测)的浓缩液,再经120目筛过滤;
2、将滤后各药材,按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次;
3、把上述各药材三次提取的浓缩液合并,进行喷雾干燥,分别制得桑枝提取物、当归提取物、防风提取物、川牛膝提取物;
4、将上述各药材提取物经60目筛网过滤,置混合机内进行混合均匀,进行胶囊充填,即为本发明胶囊剂药品。
5、将上述各药材提取物经60目筛网过滤,置混合机内进行混合均匀,进行胶囊充填,即为本发明胶囊剂药品。
Claims (2)
1、一种治疗类风湿性关节炎的药物,其特征在于原料药组成及重量比为:
桑枝 2-6, 当归 2-6,
防风 1-4, 川牛膝 1-4。
2、如权利要求1所述的一种治疗类风湿性关节炎的药物的制备方法,其特征在于:
(1)、按重量比选取下列原料药桑枝2-6,当归2-6,
防风1-4,川牛膝1-4;
(2)、将上述原料药分别经净选,去除杂质,清水淋洗干净,切碎,容置于提取罐内,分别加各原料药质量8-16倍量的水,煮沸0.8-1.2小时,各药液经200目筛网过筛,取滤液,在减压条件下,各提取液在60℃下热测,浓缩至相对密度为1.05-1.08的浓缩液,再经120目筛过筛;
(3)、将滤后各原料药,按上述步骤、条件再分别提取浓缩过滤液两次;
(4)、把上述各原料药三次提取的浓缩液合并,进行喷雾干燥,分别制得桑枝提取物、当归提取物、防风提取物、川牛膝提取物;
(5)、将上述各原料药提取物经60目筛网过滤,置混合机内进行混合均匀,进行胶囊充填,即为本发明胶囊剂药品。
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